Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型結晶塩
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのＩＩ型結晶性マレエート塩を開示する。ＩＩ型結晶性塩は約７７．６９℃の融点を有するチャンネル水和物である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は疾患の治療において有用な新しい化合物、そしてより詳細には、酸化窒素シンターゼの誘導性アイソフォームからの酸化窒素の不適切な発現が関与する状態の治療のための、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの新しい塩、そして更に詳細には結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの新しい結晶状態（ＩＩ型）、および、その医薬組成物を包含する。
【０００２】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは参照により本明細書に組み込まれる、同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載され特許請求されている。
【背景技術】
【０００３】
酸化窒素（ＮＯ）は酵素酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）の数種のアイソフォームの何れか１つにより生産される生物活性フリーラジカルガスである。後にＮＯとして同定されたものの生理学的活性は１９８０年代初頭に最初に発見され、このとき、アセチルコリンにより誘発される血管の弛緩は血管内皮の存在に依存していることがわかった。内皮から誘導され、次にこのような血管弛緩を媒介する内皮誘導弛緩因子（ＥＤＲＦ）と称されるようになった因子は、現在ではＮＯＳの１つのアイソフォームにより血管内皮内で生じたＮＯであることが知られている。血管弛緩剤としてのＮＯの活性は１００年以上もの間、知られている。更にＮＯは知られたニトロ血管弛緩剤、例えば亜硝酸アミルおよびニトログリセリンから誘導された活性物質種である。酸化窒素はまた可溶性のグアニレートサイクラーゼ（ｃＧＭＰ）の内因性刺激剤であり、即ち、ｃＧＭＰの生産を刺激する。ＮＯＳがＮ−モノメチルアルギニン（Ｌ−ＮＭＭＡ）により抑制されるとｃＧＭＰの生成は完全に防止される。内皮依存性弛緩に加えて、ＮＯは食細胞の細胞毒性および中枢神経系における細胞から細胞への連絡を含む生物学的作用の多くに関与していることがわかっている。
【０００４】
ＮＯとしてのＥＤＲＦの発見は、酵素ＮＯシンターゼによりアミノ酸Ｌ−アルギニンからＮＯが合成される生化学的経路の発見と一致していた。以下に示す少なくとも３種のＮＯシンターゼが存在する。
（ｉ）受容体または物理的刺激に応答してＮＯを放出する脳に存在する構成性Ｃａ＋＋／カルモジュリン依存性酵素；
（ｉｉ）内毒素およびサイトカインによる血管平滑筋、マクロファージ、内皮細胞および多くの他の細胞の活性化の後に誘導されるＣａ＋＋非依存性酵素（１３０ｋＤタンパク質）；および、
（ｉｉｉ）受容体または物理的刺激に応答してＮＯを放出する内皮細胞に存在する構成性Ｃａ＋＋／カルモジュリン依存性酵素。
【０００５】
発現された後、誘導性酸化窒素シンターゼ（以降「ｉＮＯＳ」と称する）は長期間に渡り持続的にＮＯを発生する。臨床試験によれば、ＮＯの生産およびｉＮＯＳの発現は種々の慢性炎症性疾患、例えば慢性関節リューマチおよび骨関節炎（例えばＭｃＩｎｎｅｓ Ｉ．Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８４：１５１９（１９９６）参照）、炎症性腸疾患（例えばＬｕｎｄｂｅｒｇ Ｊ．Ｏ．Ｎ．ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１６７３（１９９４）参照）および喘息（例えばＨａｍｉｄ，Ｑ．ｅｔ．ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ ３４２：１５１０（１９９３）参照）において増大し、そしてｉＮＯＳはこれらの慢性炎症性疾患における主要な病原性因子とされている。
【０００６】
即ちｉＮＯＳによる過剰なＮＯ生産の抑制は抗炎症性であると考えられる。しかしながら、ｅＮＯＳおよびｎＮＯＳからのＮＯの生産は正常な生理機能にかかわっているため、炎症の治療に使用されるいずれのＮＯＳ阻害剤も、ｅＮＯＳ生成ＮＯによる血圧の正常な生理学的調節およびｎＮＯＳ生成ＮＯによる非アドレナリン作用性、非コリン作用性の神経伝達が影響を受けない状態であり続けるように、ｉＮＯＳに対して選択的であることが望ましい。
【０００７】
全ての医薬品の化合物および組成物において、薬剤化合物の化学的および物理的安定性は薬剤物質の商業的開発において重要である。このような安定性には、周囲条件において特に水分に対して、そして、保存条件下における安定性が包含される。保存の種々の条件における向上した安定性は、市販品の寿命の間の種々の可能な保存条件を予測するために必要である。安定な薬剤は特殊な保存条件の使用ならびに頻繁な在庫交換を回避する。均一な粒径および表面積を有する薬剤物質を得るためには、薬剤のミリングを必要とする場合が多い製造工程の間も薬剤化合物は安定でなければならない。不安定な物質は多形の変化を起こす場合が多い。従って、安定性の特性を向上させる薬剤物質のいずれかの修飾は安定性がより低い物質よりも重要な利益をもたらす。
【０００８】
例えば同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載され特許請求されているＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのような数種のｉＮＯＳ阻害剤が報告されている。しかしながらその化合物は不定形の固体である。従って、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのようなｉＮＯＳ阻害剤の結晶固体形態を提供することが望ましい。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの新しい結晶塩、医薬組成物、新しい塩化合物の製造方法、医薬組成物の製造方法、および、酸化窒素シンターゼの構成性アイソフォームよりも酸化窒素シンターゼの誘導性アイソフォームを優先的に抑制またはモジュレートする化合物の塩を投与することによって、酸化窒素の合成を抑制またはモジュレートすることを必要とする対象においてこのような抑制またはモジュレートのための新しいＩＩ型結晶塩化合物および組成物を用いる方法に関する。本発明の塩化合物は有用な酸化窒素シンターゼ抑制活性を有し、そして酸化窒素の合成または過剰合成が寄与的部分を形成する疾患または状態の治療または予防において有用であることが期待される。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
化学量論的には、新しい塩の単位格子はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの１分子およびマレイン酸の１分子である。
【００１１】
新しい結晶性ＩＩ型塩は以下の物理的測定値、即ち、元素分析（例えば燃焼分析による）、融点および融解熱（示差走査熱量分析および熱重量分析）、屈折率（偏光顕微鏡）、Ｘ線粉末回折パターンおよび水分吸着（例えばＤＶＳ水分バランス）の一部または全てにより特性化される。
【００１２】
本発明の新しい塩は関節炎のような特定の状態において生じる軟骨の変性が関与する疾患を治療するために使用できる。従って、Ｌ−アルギニンからのＮＯ生産を抑制することが好都合となる状態は、関節の状態、例えば慢性関節リューマチ、骨関節炎、通風性関節炎、若年性関節炎、敗血症性関節炎、脊椎関節炎、急性関節リューマチ、腸疾患に基づく関節炎（enteropathic arthritis）、神経障害性関節炎および化膿性関節炎を包含する。更にまた、軟骨細胞吸引のＮＯ誘導低下は関節炎、特に骨関節炎におけるマトリックスの損失および二次的な軟骨の石灰化をモジュレートする。
【００１３】
本発明の塩が有用であるその他の状態は、慢性または炎症性の腸疾患、心臓血管虚血、糖尿病、鬱血性心不全、心筋炎、アテローム性動脈硬化症、偏頭痛、緑内障、大動脈瘤、逆流性食道炎、下痢、過敏性腸症候群、嚢胞性線維症、気腫、喘息、気管支拡張症、痛覚過敏、脳虚血、血栓性卒中、全虚血（global ischemia）（心停止に二次的なもの）、多発性硬化症およびＮＯにより媒介される他の中枢神経系の障害、例えばパーキンソン病およびアルツハイマー病を包含する。ＮＯ抑制が有用である別の神経変性障害は低酸素症、低血糖症、癲癇のような疾患における、そして、外傷（例えば脊髄および頭部の傷害）における神経変性および／または神経壊死、高圧酸素痙攣および毒性、痴呆症、例えば前老年性痴呆症、および、ＡＩＤＳ関連痴呆症、シドナム舞踏病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、コルサコフ病、脳血管障害に関わる精神遅滞、睡眠障害、統合失調症、うつ病、月経前症候群（ＰＭＳ）に関連するうつ病または他の症状、不安症および敗血症性ショックを包含する。
【００１４】
本発明の塩はまた、身体原性の（侵害受容または神経病性の）急性および慢性の両方のものを含む疼痛のようなものの治療において酸化窒素の抑制が役割を果たす場合にも使用してよい。本発明の化合物は一般的なＮＳＡＩＤまたはオピオイド鎮痛剤が伝統的に投与されている何れかの状況において使用できる。
【００１５】
更にまた、本発明の塩によるＮＯ生産の抑制により治療できる別の障害には長期間オピエート鎮痛剤を必要とする患者におけるオピエート耐性、および、ベンゾジアゼピン使用患者におけるベンゾジアゼピン耐性および他の中毒挙動、例えばニコチンおよび摂食障害が包含される。本発明の化合物はまた抗菌剤としても使用してよい。
【００１６】
Ｌ−アルギニンからのＮＯ生産を抑制するために本発明の塩を使用してよい別の状態は、種々の因子により誘導される敗血症性および／または毒性のショックに関連する全身低血圧を包含し；ＴＮＦ、ＩＬ−１およびＩＬ−２のようなサイトカインを用いた治療において；および移植療法における短期間の免疫抑制に対するアジュバントとして使用してよい。
【００１７】
本発明の塩はまた眼の状態（例えば高眼圧症、網膜炎、ブドウ膜炎）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、糸球体腎炎、再狭窄、ウィルス感染の炎症性続発症、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、酸素誘導肺傷害、癌患者等におけるＩＬ２治療、悪液質、移植療法等における免疫抑制、胃腸運動性の障害、日焼け、湿疹、乾癬、歯肉炎、膵臓炎、感染症が原因の胃腸管の損傷、嚢胞性線維症、臓器移植療法における短期の免疫抑制のアジュバントのような機能不全免疫系の治療、分娩誘発、腺腫様ポリープ、腫瘍成育の制御、化学療法、化学予防および気管支炎においても有用である。
【００１８】
本発明はまた、治療有効量の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型を薬学的に許容される担体、希釈剤またはベヒクルと共に含有する医薬組成物であって、疼痛、喘息および他の気道の障害、癌、関節炎、網膜症および緑内障を含む眼の障害、炎症関連障害、例えば過敏性腸症候群、および酸化窒素の過剰な生産が役割を果たしている他の障害の治療のための医薬組成物に関する。
【００１９】
ヒトの治療に有用であるほか、この型は愛玩動物、外来種動物および家畜、例えば哺乳類、げっ歯類等の獣医科の治療にも有用である。より好ましい動物はウマ、イヌおよびネコを包含する。
【００２０】
定義
「治療する」、「治療している」および「治療」という用語は本明細書においては、予防療法、待期療法または回復療法を包含する。
「有効量」という用語は治療を行える用量を意味する。有効量は単回用量で、またはある期間に渡り分割用量において投与してよい。
「ＡＣＥ」という用語はアセトンを意味する。
「ＡＣＮ」という用語はアセトニトリルを意味する。
【００２１】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインに適用する場合「不定形」という用語は、本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子が無秩序の配列において存在し、識別可能な結晶格子または単位格子を形成しない固体状態を意味する。Ｘ線粉末回折に付す場合は、不定形のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは如何なる特徴的な結晶ピークも示さない。
【００２２】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインに適用する場合「結晶型」という用語は、本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子が配列して（ｉ）識別可能な単位格子を含み、そして（ｉｉ）Ｘ線照射に付した場合に回折ピークを生じるような、識別可能な結晶格子を形成する固体状態の形態を指す。
【００２３】
「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型」、「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインＩ型」および「Ｉ型」という用語は全て、本明細書においてより詳細に記載する、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩Ｉ型を意味する。
【００２４】
「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型」、「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインＩＩ型」および「ＩＩ型」という用語は全て、本明細書においてより詳細に記載する、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型を意味する。
【００２５】
「結晶化」という用語は本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン出発原料の製造に関わる適用可能な状況に応じた結晶化および／または再結晶化を指す。
「ＤＭＦ」という用語はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味する。
「Ｄ／Ｗ／Ａ」」という用語はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、水およびアセトニトリルの３元溶媒系を指す。
【００２６】
「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン薬剤物質」という用語は本明細書においては、その用語を使用する文脈により明確化されるＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン自体であり、未製剤のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインまたは医薬組成物の成分として存在するＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインを指す。
【００２７】
「ＤＳＣ」という用語は示差走査熱量測定を意味する。
「ＨＰＬＣ」という用語は高速液体クロマトグラフィーを意味する。
「ＩＲ」という用語は赤外線を意味する。
「ＮＭＲ」という用語は核磁気共鳴を意味し、核磁気共鳴スペクトル分析に適用してよい。
「ｍｌ」という用語はミリリットルを意味する。
「ｍｇ」という用語はミリグラムを意味する。
「μｇ」という用語はマイクログラムを意味する。
「μｌ」という用語はマイクロリットルを意味する。
「核形成」という用語は本明細書においては溶液中の結晶の形成を意味する。
【００２８】
「純度」という用語は本明細書においては特段の記載が無い限り、従来のＨＰＬＣ試験によるＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの化学純度を意味する。
「ＰＸＲＤ」という用語は粉末Ｘ線回折を意味する。
「ｒｐｍ」という用語は分当たり回転数を意味する。
「結晶種添加」という用語は、本明細書においては、核形成を開始または促進する目的のための溶液中への結晶の添加を意味する。
「ＴＧＡ」という用語は熱重量分析を意味する。
「Ｔｍ」という用語は融点を意味する。
「遊離の両性イオン」という用語は実質電荷がゼロ値となるように正電荷および負電荷の両方を担持した分子を指す。
【００２９】
薬学的使用
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は、対象において特に炎症を治療するため、または、他の酸化窒素シンターゼ媒介障害の治療のため、例えば疼痛および頭痛の治療における鎮痛剤として、または、発熱の治療のための解熱剤として有用である。例えば、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は関節炎、例えば慢性関節リューマチ、脊髄関節症、痛風性関節炎、骨関節炎、全身性エリテマトーデス、若年性関節炎、急性関節リューマチ、腸疾患に基づく関節炎、神経障害性関節炎、乾癬性関節炎および化膿性関節炎の治療に有用であるが、これらに限定されない。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型がＬ−アルギニンからのＮＯ生産の抑制において好都合である状態は関節炎の状態を包含する。
【００３０】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は更に、喘息、気管支炎、月経痛（例えば月経困難）、早産、腱炎、滑液包炎、皮膚関連状態、例えば乾癬、湿疹、熱傷、日焼け、皮膚炎、膵臓炎、肝炎、および、術後炎症に起因するもの、例えば眼科手術に起因するもの、例えば白内障手術および屈折矯正手術に起因するものの治療において有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた炎症性腸疾患、クローン病、胃炎、過敏性腸症候群および潰瘍性結腸炎のような胃腸状態の治療にも有用である。
【００３１】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は癌、例えば結腸直腸癌および乳癌、肺癌、前立腺癌、膀胱癌、子宮癌および皮膚がんの予防または治療のために有用である。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は血管疾患、偏頭痛、結節性動脈周囲炎、甲状腺炎、再生不良性貧血、ホジキン病、硬皮症（sclerodoma）、リューマチ熱、Ｉ型糖尿病、神経筋接合部疾患、例えば重症筋無力症、白質症、例えば多発性硬化症、サルコイドーシス、ネフローゼ症候群、ベーチェット症候群、多発性筋炎、歯肉炎、腎炎、過敏症、傷害後の浮腫、心筋虚血等のような疾患における炎症および組織損傷の治療に有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた眼科疾患、例えば緑内障、網膜炎、網膜症、ブドウ膜炎、眼光恐怖症および眼部組織への急性損傷に関連する炎症および疼痛の治療においても有用である。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型の用途のうち特に興味深いものは、特に、緑内障の症状が酸化窒素媒介神経損傷の場合のように酸化窒素の生成により誘発されたものである緑内障の治療である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた肺の炎症、例えばウィルス感染に伴うもの、および嚢胞性線維症の治療においても有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた特定の中枢神経系の障害、例えば皮質痴呆、例えばアルツハイマー病、および卒中、虚血および外傷に起因する中枢神経系の損傷の治療のためにも有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は抗炎症剤、例えば関節炎の治療用のもの等としても有用であり、有害な副作用が顕著に低減されているという別の利点も伴う。
【００３２】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまたアレルギー性鼻炎、呼吸窮迫症候群、内毒素ショック症候群およびアテローム性動脈硬化症の治療においても有用である。
【００３３】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた疼痛、例えば術後疼痛、歯痛、筋肉痛、および癌に起因する疼痛の治療においても有用であるが、これらに限定されない。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はアルツハイマー病のような痴呆症の予防のために有用である。
【００３４】
ヒトの治療のほかに、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は愛玩動物、外来種動物および家畜、例えば哺乳類、げっ歯類等の獣医科の治療にも有用である。より好ましい動物はウマ、イヌおよびネコを包含する。
【００３５】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた、他の従来の抗炎症療法の部分的または完全な代替法である共療法（co-therapies）において、例えばステロイド、ＮＳＡＩＤ、ＣＯＸ−２選択的阻害剤、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、ＬＴＢ4拮抗剤およびＬＴＡ4ヒドロラーゼ阻害剤と共に使用してよい。
【００３６】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型がＮＯ生産の抑制において好都合である他の状態は、心臓血管虚血、糖尿病（Ｉ型またはＩＩ型）、鬱血性心不全、心筋炎、アテローム性動脈硬化症、偏頭痛、緑内障、大動脈瘤、逆流性食道炎、下痢、過敏性腸症候群、嚢胞性線維症、気腫、喘息、気管支拡張症、痛覚過敏（異痛）、脳虚血（局所的虚血、血栓性卒中および全虚血（例えば心停止に二次的なもの）の双方）、多発性硬化症およびＮＯにより媒介される他の中枢神経系の障害、例えばパーキンソン病を包含する。ＮＯ抑制が有用である別の神経変性障害は低酸素症、低血糖症、癲癇のような疾患における、そして、中枢神経系（ＣＮＳ）外傷（例えば脊髄および頭部の傷害）の場合における、神経変性および／または神経壊死、高圧酸素痙攣および毒性、痴呆症、例えば前老年性痴呆症、および、ＡＩＤＳ関連痴呆症、シドナム舞踏病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、コルサコフ病、脳血管障害に関わる精神遅滞、睡眠障害、統合失調症、うつ病、月経前症候群（ＰＭＳ）に関連するうつ病または他の症状、不安症および敗血症性ショックを包含する。
【００３７】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた身体原性の（侵害受容または神経病性の）急性および慢性の両方のものを含む疼痛の治療において有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた一般的なＮＳＡＩＤまたはオピオイド鎮痛剤が伝統的に投与されている神経病性の疼痛を含む何れかの状況において使用できる。
【００３８】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型により好都合に治療される更に別の障害または状態は、長期間オピエート鎮痛剤を必要とする患者におけるオピエート耐性、および、ベンゾジアゼピン使用患者におけるベンゾジアゼピン耐性および他の中毒挙動、例えばニコチン中毒、アルコール中毒および摂食障害が包含される。
【００３９】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまたオピエート、アルコールまたはタバコ中毒からの禁断症状の治療または予防のような、薬物禁断症状の治療または予防に有用である。
【００４０】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた抗菌剤または抗ウィルス剤と治療上組み合わせた場合に組織の損傷を予防するために有用である。
【００４１】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまたＬ−アルギニンからのＮＯ生産の抑制において、例えば種々の因子により誘導される敗血症性および／または毒性出血性ショックに関連する全身低血圧に有用であり；ＴＮＦ、ＩＬ−１およびＩＬ−２のようなサイトカインを用いた治療に有用であり；そして、移植療法において短期間の免疫抑制剤に対するアジュバントとして有用である。
【００４２】
本発明は更に新生物の治療および予防のための本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型の使用に関する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型および方法により治療可能または予防可能である新生物は脳の癌、骨の癌、白血病、リンパ腫、上皮細胞誘導新生物（上皮癌腫）、例えば基底細胞癌、腺癌、胃腸の癌、例えば口唇の癌、口腔の癌、食道癌、小腸の癌および胃癌、結腸癌、肝臓癌、膀胱癌、膵臓癌、卵巣癌、子宮癌、肺癌、乳癌および皮膚がん、例えば扁平上皮癌および基底細胞癌、前立腺癌、腎細胞癌およびその他の全身に渡る上皮細胞に関わる既知の癌を包含する。好ましくは、治療すべき新生物は胃腸の癌、肝臓癌、膀胱癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、子宮癌、肺癌、乳癌および皮膚癌、例えば扁平上皮および基底細胞の癌から選択される。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型および本発明の方法はまた放射線療法により起こる線維症を治療するために使用できる。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型および方法は家族性大腸腺腫症（ＦＡＰ）の対象を含む腺腫様ポリープを有する対象の治療に使用できる。更に、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型および方法はＦＡＰの危険性のある患者におけるポリープ形成を予防するために使用できる。
【００４３】
別の抗新生物剤との本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型の複合治療は相乗作用をもたらすか、または、治療効果のために必要とされる副作用誘発薬剤の治療用量を低減するかもしくは副作用誘発薬剤により誘発される毒性の副作用の症状を直接低減することにより化学療法に伴う毒性の副作用を軽減する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は更に副作用を低減するかまたは薬効を増強するための放射線療法の補助として有用である。
【００４４】
本発明においては、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型と治療上組み合わせることができる別の薬剤は酵素シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）を阻害できる何れかの治療薬を包含する。好ましくは、このようなＣＯＸ−２阻害剤は酵素シクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）と比較してＣＯＸ−２を選択的に阻害する。このようなＣＯＸ−２阻害剤は「ＣＯＸ−２選択的阻害剤」として知られている。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型と治療上組み合わせて使用するＣＯＸ−２選択的阻害剤は、セレコキシブ、バルデコキシブ、デラコキシブ、エトリコキシブ、ロフェコキシブ、ＡＢＴ−９６３（２−（３，４−ジフルロフェニル）−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブトキシ）−５−［４−（メチルスルホニル）フェニル−３（２Ｈ）−ピリダジノン；ＰＣＴ出願ＷＯ００／２４７１９記載）、またはメロキシカムを包含する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまたＣＯＸ−２選択的阻害剤のプロドラッグ、例えばパレコキシブと治療上組み合わせて好都合に使用できる。
【００４５】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型と組み合わせて使用する別の化学療法剤は、例えば以下の非包括的および非限定的なリストから選択できる。
【００４６】
アルファ−ジフルオロメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）、５−ＦＵ−フィブリノーゲン、アカンチホリック酸（ａｃａｎｔｈｉｆｏｌｉｃ ａｃｉｄ）、アミノチアジアゾール、ブレキナールナトリウム（ｂｒｅｑｕｉｎａｒ ｓｏｄｉｕｍ）、カルモフール、Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ ＣＧＰ−３０６９４、シクロペンチルシトシン、シタラビンホスフェートステアレート、シタラビンコンジュゲート、Ｌｉｌｌｙ ＤＡＴＨＦ、Ｍｅｒｒｅｌ Ｄｏｗ ＤＤＦＣ、デザグアニン、ジデオキシシチジン、ジデオキシグアノシン、ジドックス、Ｙｏｓｈｉｔｏｍｉ ＤＭＤＣ、ドキシフルリジン、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＥＨＮＡ、Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．ＥＸ−０１５、ファザラビン、フロクスウリジン、フルダラビンホスフェート、５−フルオロウラシル、Ｎ−（２’−フラニジル）−５−フルオロウラシル、Ｄａｉｉｃｈｉ Ｓｅｉｙａｋｕ ＦＯ−１５２、イソプロピルピロリジン、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−１８８０１１、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−２６４６１８、メトベンザプリン、メトトレキセート、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＭＺＰＥＳ、ノルスペルミジン、ＮＣＩ ＮＳＣ−１２７７１６、ＮＣＩ ＮＳＣ−２６４８８０、ＮＣＩ ＮＳＣ−３９６６１、ＮＣＩ ＮＳＣ−６１２６７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＰＡＬＡ、ペントスタチン、ピリトレキシム、プリカマイシン、Ａｓａｈｉ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ＰＬ−ＡＣ、Ｔａｋｅｄａ ＴＡＣ−７８８、チオグアニン、チアゾフリン、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＴＩＦ、トリメトレキセート、チロシンキナーゼ阻害剤、チロシン蛋白質キナーゼ阻害剤、Ｔａｉｈｏ ＵＦＴ、ウリシチン、Ｓｈｉｏｎｏｇｉ ２４５−Ｓ、アルド−ホスファミド類縁体、アルトレタミン、アナキシロン（ａｎａｘｉｒｏｎｅ）、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ ＢＢＲ−２２０７、ベストラブシル、ブドチタン、Ｗａｋｕｎａｇａ ＣＡ−１０２、カルボプラチン、カルムスチン、Ｃｈｉｎｏｉｎ−１３９、Ｃｈｉｎｏｉｎ−１５３、クロラムブシル、シスプラシン、シクロホスファミド、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ ＣＬ−２８６５５８、Ｓａｎｏｆｉ ＣＹ−２３３、シプラテート、Ｄｅｇｕｓｓａ Ｄ−１９−３８４、Ｓｕｍｉｍｏｔｏ ＤＡＣＨＰ（Ｍｙｒ）２、ジフェニルスピロムスチン、細胞増殖抑制ジ白金（ｄｉｐｌａｔｉｎｕｍ ｃｙｔｏｓｔａｔｉｃ）、Ｅｒｂａジスタマイシン誘導体、Ｃｈｕｇａｉ ＤＷＡ−２１１４Ｒ、ＩＴＩ Ｅ０９、エルムスチン、ＥｒｂａｍｏｎｔＦＣＥ−２４５１７、エストラムスチンホスフェートナトリウム、フォテムスチン、Ｕｎｉｍｅｄ Ｇ−６−Ｍ、Ｃｈｉｎｏｉｎ ＧＹＫＩ−１７２３０、ヘプスル−ファム（ｈｅｐｓｕｌ−ｆａｍ）、イフォスファミド、イプロプラチン、ロムスチン、マホスファミド、ミトラクトール、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫ−１２１、ＮＣＩ ＮＳＣ−２６４３９５、ＮＣＩ ＮＳＣ−３４２２１５、オキサリプラチン、Ｕｐｊｏｈｎ ＰＣＮＵ、プレドニムスチン、Ｐｒｏｔｅｒ ＰＴＴ−１１９、ラニムスチン、セムスチン、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＳＫ＆Ｆ−１０１７７２、Ｙａｋｕｌｔ Ｈｏｎｓｈａ ＳＮ−２２、スピロムス−チン、Ｔａｎａｂｅ Ｓｅｉｙａｋｕ ＴＡ−０７７、タウロムスチン、テモゾロミド、テロキシロン、テトラプラチン、トリメラモール、Ｔａｉｈｏ ４１８１−Ａ、アクラルビシン、アクチノマイシンＤ、アクチノプラノン、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＡＤＲ−４５６、アエロプリシニン誘導体、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＡＮ−２０１−ＩＩ、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＡＮ−３、Ｎｉｐｐｏｎ Ｓｏｄａアニソマイシン、アントラサイクリン、アジノマイシン−Ａ、ビスカベリン、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＬ−６８５９、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２５０６７、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２５５５１、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２６６０５、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２７５５７、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２８４３８、ブレオマイシンスルフェート、ブリオスタチン−１、Ｔａｉｈｏ Ｃ−１０２７、カリケマイシン、クロモキシマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−１０２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−７９、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−８８Ａ、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ８９−Ａ１、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ９２−Ｂ、ジトリサルビシンＢ、Ｓｈｉｏｎｏｇｉ ＤＯＢ−４１、ドキソルビシン、ドキソルビシン−フィブリノーゲン、エルサミシン−Ａ、エピルビシン、エルブスタチン、エソルビシン、エスペラミシン−Ａ１、エスペラミシン−Ａ１ｂ、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＦＣＥ−２１９５４、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＫ−９７３、フォストリエシン、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＲ−９００４８２、グリドバクチン、グレガチン−Ａ、グリンカマイシン、ヘルビマイシン、イダルビシン、イルジンス（ｉｌｌｕｄｉｎｓ）、カズサマイシン、ケサリロジンス、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＭ−５５３９、Ｋｉｒｉｎ Ｂｒｅｗｅｒｙ ＫＲＮ−８６０２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−５４３２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−５５９４、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−６１４９、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ ＬＬ−Ｄ４９１９４、Ｍｅｉｊｉ Ｓｅｉｋａ ＭＥ２３０３、メノガリル、マイトマイシン、ミトザントロン、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｍ−ＴＡＧ、ネオエナクチン、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫ−３１３、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫＴ−０１、ＳＲＩ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＮＳＣ−３５７７０４、オキサリシン、オキサウノマイシン、ペプロマイシン、ピラチン、ピラルビシン、ポロスラマイシン、ピリンダマイシンＡ、Ｔｏｂｉｓｈｉ ＲＡ−Ｉ、ラパマイシン、リゾキシン、ロドルビシン、シバノミシン、シエノマイシン（ｓｉｗｅｎｍｙｃｉｎ）、Ｓｕｍｉｔｏｍｏ ＳＭ−５８８７、Ｓｎｏｗ Ｂｒａｎｄ ＳＮ−７０６、Ｓｎｏｗ Ｂｒａｎｄ ＳＮ−０７、ソランギシン−Ａ、スパルソマイシン、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−２１０２０、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−７３１３Ｂ、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−９８１６Ｂ、ステフィマイシンＢ、Ｔａｉｈｏ ４１８１−２、タリソマイシン、Ｔａｋｅｄａ ＴＡＮ−８６８Ａ、テルペンテシン、スラジン、トリクロザリンＡ、Ｕｐｊｏｈｎ Ｕ−７３９７５、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−１００２８Ａ、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＷＦ−３４０５、Ｙｏｓｈｉｔｏｍｉ Ｙ−２５０２４ゾルビシン、アルファ−カロテン、アルファ−ジフルオロメチル−アルギニン、アシトレチン、Ｂｉｏｔｅｃ ＡＤ−５、Ｋｙｏｒｉｎ ＡＨＣ−５２、アルストニン、アモナフィド、アンフェチニル、アムサクリン、Ａｎｇｉｏｓｔａｔ、アンキノマイシン、アンチネオプラストンＡ１０、アンチネオプラストンＡ２、アンチネオプラストンＡ３、アンチネオプラストンＡ５、アンチネオプラストンＡＳ２−１、Ｈｅｎｋｅｌ ＡＰＤ、アフィジコリングリシネート、アスパラギナーゼ、Ａｖａｒｏｌ、バッカリン、バトラシリン、ベンフルロン、ベンゾトリプト、Ｉｐｓｅｎ−Ｂｅａｕｆｏｕｒ ＢＩＭ−２３０１５、ビサントレン、Ｂｒｉｓｔｏ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−４０４８１、Ｖｅｓｔａｒ ボロン−１０、ブロモホスファミド、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＢＷ−５０２、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＢＷ−７７３、カラセミド、カルメチゾール塩酸塩、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＣＤＡＦ，クロルスルファキノキサロン、Ｃｈｅｍｅｘ ＣＨＸ−２０５３、Ｃｈｅｍｅｘ ＣＨＸ−１００、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９２１、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９３７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９４１、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９５８、クランフェヌール（ｃｌａｎｆｅｎｕｒ）、クラビリデノン、ＩＣＮ化合物１２５９、ＩＣＮ化合物４７１１、Ｃｏｎｔｒａｃａｎ、Ｙａｋｕｌｔ Ｈｏｎｓｈａ ＣＰＴ−１１、クリスナトール、クラダーム（ｃｕｒａｄｅｒｍ）、サイトカラシンＢ、シタラビン、シトシチン、Ｍｅｒｚ Ｄ−６０９、ＤＡＢＩＳマレエート、ダカルバジン、ダテリプチニウム（ｄａｔｅｌｌｉｐｔｉｎｉｕｍ）、ジデムニン−Ｂ、ジヘマトポルフィリンエーテル、ジヒドロレンペロン、ジナリン、ジスタマイシン、Ｔｏｙｏ Ｐｈａｒｍａｒ ＤＭ−３４１、Ｔｏｙｏ Ｐｈａｒｍａｒ ＤＭ−７５、Ｄａｉｉｃｈ Ｓｅｉｙａｋｕ ＤＮ−９６９３、エリプラビン、エリプチニウムアセテート、Ｔｓｕｍｕｒａ ＥＰＭＴＣ、エルゴタミン、エトポシド、エトレチネート、フェンレチニド、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＲ−５７７０４、硝酸ガリウム、ゲンクワダフニン（ｇｅｎｋｗａｄａｐｈｎｉｎ）、Ｃｈｕｇａｉ ＧＬＡ−４３、Ｇｌａｘｏ ＧＲ−６３１７８、グリフォランＮＭＦ−５Ｎ、ヘキサデシルホスホコリン、Ｇｒｅｅｎ Ｃｒｏｓｓ ＨＯ−２２１、ホモハリングトニン、ヒドロキシ尿素、ＢＴＧ ＩＣＲＦ−１８７、イルモフォシン、イソグルタミン、イソトレチノイン、Ｏｔｓｕｋａ ＪＩ−３６、Ｒａｍｏｔ Ｋ−４７７、Ｏｔｓｕｋａ Ｋ−７６ＣＯＯＮａ、Ｋｕｒｅｈａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｋ−ＡＭ、ＭＥＣＴ Ｃｏｒｐ ＫＩ−８１１０、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ Ｌ−６２３、ロイコレグリン、ロニダミン、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ ＬＵ−２３−１１２、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−１８６６４１、ＮＣＩ（ＵＳ）ＭＡＰ、マリシン、Ｍｅｒｒｅｌ Ｄｏｗ ＭＤＬ−２７０４８、Ｍｅｄｃｏ ＭＥＤＲ−３４０、メルバロン、メロシアニン誘導体、メチルアニリノアクリジン、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ＭＧＩ−１３６、ミナクチビン、ミトナフィド、ミトキドン、モピダモール、モトレチニド、Ｚｅｎｙａｋｕ Ｋｏｇｙｏ ＭＳＴ−１６、Ｎ−（レチノイル）アミノ酸、Ｎｉｓｓｉｎ Ｆｌｏｕｒ Ｍｉｌｌｉｇ Ｎ−０２１、Ｎ−アシル化−デヒドロアラニン、ナファザトロム、Ｔａｉｓｈｏ ＮＣＵ−１９０、ノコダゾール誘導体、Ｎｏｒｍｏｓａｎｇ、ＮＣＩ ＮＳＣ−１４５８１３、ＮＣＩ ＮＳＣ−３６１４５６、ＮＣＩ ＮＳＣ−６０４７８２、ＮＣＩ ＮＳＣ−９５５８０、オクトレオチド、Ｏｎｏ ＯＮＯ−１１２、オキザノシン、Ａｋｚｏ Ｏｒｇ−１０１７２、パンクレアチスタチン、パゼリプチン、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１１１７０７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１１５９３４、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１３１１４１、Ｐｉｅｒｒｅ Ｆａｂｒｅ ＰＥ−１００１、ＩＣＲＴペプチドＤ、ピロキサントロン、ポリヘマトポルフィリン、ポリプレイック酸（ｐｏｌｙｐｒｅｉｃ ａｃｉｄ）、Ｅｆａｍｏｌポルフィリン、プロビマン、プロカルバジン、プログルミド、ＩｎｖｉｔｒｏｎプロテアーゼネキシンＩ、Ｔｏｂｉｓｈｉ ＲＡ−７００、ラゾキサン、Ｓａｐｐｏｒｏ Ｂｒｅｗｅｒｉｅｓ ＲＢＳ、レストリクチン−Ｐ、レテリプチン、レチノイン酸、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ ＲＰ−４９５３２、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ ＲＰ−５６９７６、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＳＫ＆Ｆ−１０４８６４、Ｓｕｍｉｔｏｍｏ ＳＭ−１０８、Ｋｕｒａｒａｙ ＳＭＡＮＣＳ、ＳｅａＰｈａｒｍ ＳＰ−１００９４、スパトール、スピロシクロプロパン誘導体、スピロゲルマニウム、Ｕｎｉｍｅｄ、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−５５４、ストリポルジノン、Ｓｔｙｐｏｌｄｉｏｎｅ、Ｓｕｎｔｏｒｙ ＳＵＮ ０２３７、Ｓｕｎｔｏｒｙ ＳＵＮ ２０７１、スーパオキシドジスムターゼ、Ｔｏｙａｍａ Ｔ−５０６、Ｔｏｙａｍａ Ｔ−６８０、タキソール、Ｔｅｉｊｉｎ ＴＥＩ−０３０３、テニポシド、タリブラスチン、Ｅａｓｔｍａｎ Ｋｏｄａｋ ＴＪＢ−２９、トコトリエノール、Ｔｏｐｏｓｔｉｎ、Ｔｅｉｊｉｎ ＴＴ−８２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−０１、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−１０２８、ウクライン、Ｅａｓｔｏｍａ Ｋｏｄａｋ ＵＳＢ−００６、硫酸ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンストラミド、ビノレルビン、ビン
トリプトール、ビンゾリジン、ウィザノリド、Ｙａｍａｎｏｕｃｈｉ ＹＭ−５３４、ウログアニリン、コンブレタスタチン、ドラスタチン、イダルビシン、エピルビシン、エストラムスチン、シクロホスファミド、９−アミノ−２−（Ｓ）−カンプトテシン、トポテカン、イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）、エクセメスタン、デカペプチル（トリプトレリン）またはオメガ−３−脂肪酸。
【００４７】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型との組み合わせ療法に使用してよい放射線保護剤の例はＡＤ−５、アドクノン、アミホスチン類縁体、デトックス、ジメスナ、１−１０２、ＭＭ−１５９、Ｎ−アシル化−デヒドロアラニン、ＴＧＦ−Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、チプロチモド、アミホスチン、ＷＲ−１５１３２７、ＦＵＴ−１８７、ケトプロフェン経皮用、ナブメトン、スーパーオキシドジスムターゼ（Ｃｈｉｒｏｎ）およびスーパーオキシドジスムターゼＥｎｚｏｎを包含する。
【００４８】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた血管形成関連の障害または状態、例えば腫瘍生育、転移、黄斑変性およびアテローム性動脈硬化症の治療または予防においても有用である。
【００４９】
別の実施形態においては、眼科の障害または状態、例えば緑内障の治療または予防のための治療組み合わせが提供される。例えば本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は緑内障に罹患している患者の眼圧を低減する薬剤との治療組み合わせ中に有利に使用される。このような眼圧低下剤にはラタノプロスト、トラボプロスト、ビマトプロストまたはウノプロストールが包含される。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型＋眼圧低下剤の治療組み合わせは、各々がその作用を異なる機序に作用させることにより達成すると考えられているため、有用である。
【００５０】
本発明の別の組み合わせにおいて、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は抗高脂血剤またはコレステロール低下剤、例えばベンゾチエピンまたはベンゾチアゼピン抗高脂血剤との治療組み合わせ中に使用できる。本発明の治療組み合わせにおいて有用なベンゾチエピン抗高脂血剤の例は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許５,９９４,３９１に記載されている。ベンゾチアゼピン抗高脂血剤の一部はＷＯ９３／１６０５５に記載されている。あるいは、本発明の化合物との組み合わせにおいて有用な抗高脂血剤またはコレステロール低下剤はＨＭＧ Ｃｏ−Ａ還元酵素阻害剤であることができる。本発明の治療組み合わせにおいて有用なＨＭＧ ＣＯ−Ａ還元剤阻害剤の例は、個々に、ベンフルオレクス、フルバスタチン、ロバスタチン、プロバスタチン、シンバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ベルバスタチン、ＺＤ−９７２０（ＰＣＴ出願ＷＯ９７／０６８０２記載）、ＺＤ−４５２２（カルシウム塩はＣＡＳ Ｎｏ．１４７０９８−２０−２；ナトリウム塩はＣＡＳ Ｎｏ．１４７０９８−１８−８；欧州特許ＥＰ５２１４７１に記載）、ＢＭＳ１８０４３１（ＣＡＳ Ｎｏ．１２９８２９−０３−４）またはＮＫ−１０４（ＣＡＳ Ｎｏ．１４１７５０−６３−２）を包含する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型＋抗高脂血剤またはコレステロール低下剤の治療組み合わせは例えば血管内のアテローム性動脈硬化性の病変の形成の危険性を低減する場合に有用である。例えばアテローム性動脈硬化性の病変は血管の炎症部位から生じる場合が多い。抗高脂血剤またはコレステロール低下剤は血中の脂質濃度を低下させることによりアテローム性動脈硬化性の病変の形成の危険性を低減する。単一の作用機序に本発明を限定しないが、本発明の組み合わせのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型の１つの態様は、協調して作用し、例えば血中脂質濃度の低下と同調した血管の炎症の低減によって、アテローム性動脈硬化性の病変の進歩した制御をもたらすと考えられる。
【００５１】
本発明の別の実施形態においては、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は中枢神経の状態または障害、例えば偏頭痛の治療のための他の化合物または治療法と組み合わせて使用できる。例えば、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はカフェイン、５−ＨＴ−１Ｂ／１Ｄアゴニスト（例えばトリプタン、例えばスマトリプタン、ナラトリプタン、ゾルミトリプタン、リザトリプタン、アルモトリプタンまたはフロバトリプタン）、ドーパミンＤ４拮抗剤（例えばソネピプラゾール）、アスピリン、アセトアミノフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ナプロキセンナトリウム、イソメテプテン、ジクロラルフェナゾン、ブタルビタール、麦角アルカロイド（例えばエルゴタミン、ジヒドロエルゴタミン、ブロモクリプチン、エルゴノビン、または、メチルエルゴノビン）、３環系抗欝剤（例えばアミトリプチリンまたはノルトリプチリン）、セロトニン拮抗剤（例えばメチセルギドまたはシプロヘプタジン）、ベータ−アドレナリン拮抗剤（例えばプロプラノロール、チモロール、アテノロール、ナドロールまたはメトプロロール）またはモノアミンオキシダーゼ阻害剤（例えばフェネルジンまたはイソカルボキサジド）との治療組み合わせ中に使用できる。
【００５２】
別の実施形態は本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型とオピオイド化合物の治療組み合わせを提供する。この組み合わせに有用なオピオイド化合物は、例えば、モルヒネ、メタドン、ヒドロモルホン、オキシモルホン、レボルファノール、レバロルファン、コデイン、ジヒドロコデイン、ジヒドロヒドロキシコデイノン、ペンタゾシン、ヒドロコドン、オキシコドン、ナルメフェン、エトルフィン、レボルファノール、フェンタニル、スフェンタニル、ＤＡＭＧＯ、ブトルファノール、ブプレノルフィン、ナロキソン、ナルトレキソン、ＣＴＯＰ、ジプレノルフィン、ベータ−フナルトレキサミン、ナロキソナジン、ナロルフィン、ペンタゾシン、ナルブフィン、ナロキソンベンゾイルヒドラゾン、ブレマゾシン、エチルケトサイクラゾシン、Ｕ５０,４８８、Ｕ６９,５９３、スピラドリン、ノル−ビナルトルフィミン、ナルトリンドール、ＤＰＤＰＥ、［Ｄ−ｌａ2，ｇｌｕ4］デルトルフィン、ＤＳＬＥＴ、メト−エンケファリン、ロイ−エンケファリン、ベータ−エンドルフィン、ダイノルフィンＡ、ダイノルフィンＢおよびαネオエンドルフィンを包含する。オピオイド化合物との本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型の組み合わせの好都合な点は、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型がオピオイド化合物の用量を低減し、これにより、オピオイド中毒のようなオピオイドの副作用の危険性や重症度を低減できる点である。
【００５３】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の製造方法は参照により本明細書に組み込まれる、同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載されている。
【００５４】
慨すればＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の合成は以下の実施例１に記載する通り実施してよい。
【００５５】
実施例１
【化１】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン、２塩酸塩
【００５６】
実施例−１Ａ）Ｎ−Ｂｏｃ−システアミン
【化２】
３Ｌ容の４口ＲＢフラスコを２０分間窒素パージし、次に順次、２−アミノエタンチオール塩酸塩（１１３．６ｇ、１モル）、ジ−ｔ−ブチル−ジカーボネート（２１８．３ｇ、１モル）およびトルエン５００ｍｌを添加した。混合物を氷水バスで冷却し、１０分間窒素パージした。水酸化ナトリウム（２．５Ｎ、８８０ｍｌ、２．２モル）を０℃〜１１℃で約１．５時間内に攪拌混合物に添加した。水酸化ナトリウムの添加が終了した後、冷却バスを除去し、得られた反応混合物を室温に戻し、一夜周囲温度で攪拌した。これにより表題化合物の溶液を得た。
【００５７】
実施例−１Ｂ）
【化３】
実施例−１Ａの生成物溶液を氷水バス中で冷却した。クロロアセトン（１０１．８ｇ、１．１モル）の試料を８℃〜１１℃で約５０分かけて激しく攪拌した反応混合物に添加した。クロロアセトンの添加が終了した後、冷却バスをはずし、得られた反応混合物を一夜室温で攪拌した。トルエン層を分離し、水（２５０ｍｌ）で洗浄し、ハウス真空下、次いで高真空下に８５℃でロータリーエバポレーター上で濃縮し、粗製の表題化合物（２２５．７ｇ、９６．７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ (ＣＤＣｌ3, ４００ＭＨｚ) δ ４．９５ (ｂｓ, １Ｈ), ３．２０ (ｍ, ４Ｈ), ２．５４ (ｔ, ２Ｈ), ２．２０ (ｓ, ３Ｈ), １．３５ (ｓ, ９Ｈ)。
【００５８】
実施例−１Ｃ）［２−［［（４−メチル−２，５−ジオキソ−４−イミダゾリジニル）メチル］チオ］エチル］カルバミン酸、１，１−ジメチルエチルエステル
【化４】
オーバーヘッド攪拌機、熱電対および空フラスコと苛性アルカリトラップに連結したコンデンサーを備えた３Ｌ容の４口ＲＢフラスコに、実施例−１Ｂの生成物（７０ｇ、０．３モル）、無水エタノール（８０ｍｌ）、シアン化ナトリウム（１９．１ｇ、０．３９モル）、炭酸アンモニウム（４３．３ｇ、０．４５モル）および水（７２０ｍｌ）をこの順序で添加した。４つ目の口を蓋で閉鎖した。得られた反応混合物を６時間６７〜６８℃に加熱した。その後ほぼ透明な茶色溶液を室温に冷却した。冷却により固体が形成し始め、そして非均質な混合物を一夜室温で攪拌した。次に反応混合物を−２℃〜２℃で約１時間、ｐＨ２にまで１２％塩酸で酸性化した。冷反応混合物を更に３０分間ｐＨ２で攪拌し、次に濾過した。フラスコを蒸留水（２ｘ２５０ｍｌ）ですすぎ、各すすぎ液を用いて固体ケーキを洗浄した。固体を再度蒸留水（２ｘ２５０ｍｌ）で洗浄し、次に４日間風乾した。乾燥した固体を０．５時間トルエン２００ｍｌで磨砕した。スラリーを濾過した。固体を順次、トルエン（５０ｍｌ）およびトルエン／ヘキサンの１：４比（１００ｍｌ）ですすぎ、次に一夜室温で風乾して表題化合物を８３．１％収率で得た。融点１３４〜１３６℃。
1Ｈ ＮＭＲ(ＤＭＳＯd6, ４００ＭＨｚ) δ １０．６２ (ｓ，１Ｈ), ７．８５ (ｓ, １Ｈ), ６．８３ (ｍ, ０．９Ｈ), ６．４８ (ｂｓ，０．１Ｈ), ３．２９ (ｓ, ２Ｈ), ２．９９ (ｍ, ２Ｈ), ２．７１ (ｓ, ２Ｈ), ２．９５ (ｍ, ２Ｈ), １．３２ (ｓ, ９Ｈ), １．２４ (ｓ, ３Ｈ)；13Ｃ ＮＭＲ(ＤＭＳＯd6, ４００ＭＨｚ）δ １７８．１, １５７．１, １５６．１, ７８．４, ６３．７, ４０．７, ３９．４, ３３．２, ２８．９, ２３．８。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓについての分析：
計算値：Ｃ，４７．５１；Ｈ，６．９８；Ｎ，１３．８５；Ｓ，１０．５７
測定値：Ｃ，４７．７６；Ｈ，６．８８；Ｎ，１３．７７；Ｓ，１０．７５
【００５９】
実施例−１Ｄ）ＲおよびＳ−［２−［［（４−メチル−２，５−ジオキソ−４−イミダゾリジニル）メチル］チオ］エチル］カルバミン酸、１，１−ジメチルエチルエステル
【化５】
実施例−１Ｃの反応生成物をメタノールを溶離剤としてＣｈｉｒａｌｐａｋ(R) ＡＤカラム上でそのＲおよびＳエナンチオマーに分離した。Ｓ異性体が最初に溶出する異性体であり、その後、Ｒエナンチオマーが得られた。両方の異性体を用いてその後の変換を行った。
Ｓエナンチオマー：
２５℃、ＭｅＯＨ中の［α］＝＋４３．０（３６５ｎｍ）。
1ＨＮＭＲ : (４００ｍＨｚ, ＣＤ3ＯＤ）δ１．４９(ｓ, ９Ｈ), ２．０５ (ｓ, ３Ｈ), ２．６５ (ｔ, ２Ｈ), ２．９（ｑ, ２Ｈ, ｄ), ３．２０ (ｍ, ２Ｈ)。ＩＲ：λｃｍ-1＝１７７２，１７０９。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓ（分子量：３０３．３８）についての分析：
計算値：Ｃ，４７．５１；Ｈ，６．９８；Ｎ，１３．８５
測定値：Ｃ，４７．３９；Ｈ，６．６２；Ｎ，１３．８３
Ｍ＋Ｈ＝３０４
Ｒエナンチオマー：
２５℃、ＭｅＯＨ中の［α］＝−４６．３（３６５ｎｍ）。
1ＨＮＭＲ : (４００ｍＨｚ, ＣＤ3ＯＤ) δ １．４８ (ｓ, ９Ｈ), ２．０５ (ｓ, ３Ｈ), ２．６５ (ｔ, ２Ｈ), ２．８５ (ｑ, ２Ｈ, ｄ), ３．１８ (ｍ, ２Ｈ)。ＩＲ：λｃｍ-1＝１７７０，１７１１。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓ（分子量：３０３．３８）についての分析：
計算値：Ｃ，４７．５１；Ｈ，６．９８；Ｎ，１３．８５
測定値：Ｃ，４８．１５；Ｈ，７．０４；Ｎ，１４．３７
Ｍ＋Ｈ＝３０４
【００６０】
実施例−１Ｅ）Ｓ−（２−アミノエチル）−２−メチル−Ｌ−システイン
【化６】
【００６１】
酸加水分解法：
蒸留コンデンサー付の５００ｍｌ容の３口丸底フラスコに実施例−１ＤのＲ異性体生成物（４５．８ｇ、１５０．９ミリモル）を添加し、そして攪拌しながら室温で４８％水性ＨＢｒ（１６０ｍｌ）で少しずつ処理した。ガス発生が停止した後、マントルヒーターを用いてポット温度が１２６℃に達するまで混合物を加熱し、その間、揮発性の臭化ｔ−ブチル（沸点７２〜７４℃）、次いで少量の水性ＨＢｒ（約１５ｍｌ）を留去した。蒸留コンデンサーを還流コンデンサーと交換し、そして混合物を３０時間還流下に加熱した。溶液を濃縮し、残留物を水（２５０ｍｌ）に溶解し、そして、Ｄｏｗｅｘ(R)５０ＷＸ４−２００イオン交換樹脂（８．５ｘ１１ｃｍ）にロードし、水（２Ｌ）、次いで希水酸化アンモニア水溶液（２８〜３０％の水酸化アンモニウム３０ｍｌを水で１０００ｍｌに希釈、３Ｌ）で溶離した。所望の生成物を含有する画分を合わせ、濃縮し、２時間７５〜８０℃で真空下に乾燥し、白色固体として表題化合物Ｓ−（２−アミノエチル）−２−メチル−Ｌ−システイン２２．１ｇ（８２％）を得た。プロトン及びＣ−１３ＮＭＲスペクトルは、表題化合物と一致した。融点１５７℃。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨＺ, Ｄ2Ｏ) δ １．１９ (３Ｈ, ｓ), ２．５３（１Ｈ, ｄ, Ｊ＝１３．６Ｈｚ), ２．５７−２．７２（２Ｈ, ｍ), ２．９２（１Ｈ, ｄ, Ｊ＝１３．６Ｈｚ), ２．９２ (２Ｈ, ｔ, Ｊ＝６．８Ｈｚ)；13Ｃ ＮＭＲ (１００ＭＨｚ, Ｄ２Ｏ)
δ２４．７, ３１．３, ３８．９, ４０．９, ５９．６, １８０．７。
Ｃ6Ｈ14Ｎ2Ｏ2Ｓ＋０．１Ｈ2Ｏについての分析：
計算値：Ｃ，４０．０２；Ｈ，７．９５；Ｎ，１５．５６；Ｓ，１７．８１
測定値：Ｃ，３９．９３；Ｈ，７．９８；Ｎ，１５．３８；Ｓ，１７．７０
【００６２】
塩基加水分解法：
攪拌機を装着したステンレス製のオートクレーブに実施例−１ＤのＲ異性体生成物２４．２ｇ（０．０８モル）を添加した。装置を窒素パージした後、１０％苛性ソーダ１２８ｇ（０．３２モル）を添加して溶液とした。オートクレーブを密封し、３０時間１２０℃に加熱した。室温に冷却した後、オートクレーブを排気して表題化合物のナトリウム塩の水溶液１４２ｍｌ（１５１ｇ）を得た。Ｈ1ＮＭＲ（試料をＨＣｌで酸性化し、Ｄ2Ｏで希釈、４００ＭＨｚ）：Ｈ1ＮＭＲ (試料をＨＣｌで酸性化し、Ｄ2Ｏで希釈, ４００ＭＨｚ)：δ １．４７ (ｓ, ３Ｈ), ２．７５ (ｍ, ２Ｈ), ２．９０ （ｄ, １Ｈ, Ｊ＝１４．８Ｈｚ), ３．０６ (ｔ, ２Ｈ, Ｊ＝６．４Ｈｚ), ３．１４ (ｄ, １Ｈ, Ｊ＝１４．８Ｈｚ)。Ｃ13 ＮＭＲ (試料をＨＣｌで酸性化し、Ｄ2Ｏで希釈, １００ＭＨｚ)：δ １７２．９, ６０．８, ３９．１, ３９．０, ３０．４, ２２．２。ＭＳ(ＭＳ／ＣＩ−ＬＣ) Ｍ＋１ １７９。
【００６３】
ＤＢＵ（２１８μＬ；１．４６ミリモル）およびエチルアセトイミデート塩酸塩（１７１ｍｇ；１．３４ミリモル）を室温（〜２０℃）で２５ｍｌ容の１口丸底フラスコ中エタノール（６ｍｌ）に溶解した。実施例−１Ｅの表題化合物（２００ｍｇ;１．１２ミリモル）をこの溶液に１回で添加した。実施例−１Ｅの表題化合物が消費されるまで（１〜２時間）混合物を攪拌した。混合物をアイスバス中で冷却し、次に６ＭＨＣｌ（８３０μＬ）で処理した。1ＨＮＭＲ分析によれば化学収率は９５モル％以上であった。溶媒を蒸発させ、実施例−１の表題化合物を逆相またはイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。
【００６４】
塩基加水分解反応産物の実施例−１Ｅの表題化合物約２０ｇを含有する溶液２１０ｇｍを５００ｍｌ容の３口丸底フラスコ内に投入した。装置にメカニカルスターラー、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置（２０ｍｌ容、コック付）、コンデンサーおよび温度コントローラーを装着した。混合物から水（１４０ｍｌ）を留去した。１−ブタノール（１５０ｍｌ）をポットに添加し、残余の水（３７ｍｌ）を共沸蒸留した。ポット温度が１１７℃になるまで蒸留により更に１−ブタノール（１３ｍｌ）を除去した。ブタノールスラリーを室温に冷却し、セライトパッドで濾過した。塩を１−ブタノール（２ｘ２０ｍｌ）で洗浄した。ＤＢＵ（２１．８μＬ；１４６ミリモル）およびエチルアセトイミデート塩酸塩（１７．１ｍｇ；１３４ミリモル）を室温で５００ｍＬ容の３口丸底フラスコ中の１−ブタノール（４０ｍｌ）に溶解した。装置にメカニカルスターラー、添加漏斗および温度プローブを装着した。実施例−１Ｅの表題化合物／１−ブタノール溶液を添加漏斗に入れ、ポット温度を２５℃未満に維持しながらエチルアセトイミデート／ＤＢＵの溶液に添加した。出発物質が消費されるまで（２〜３時間）混合物を攪拌した。濃塩酸（９４ｍｌ）および水（１００ｍｌ）の溶液を１Ｌの３口丸底フラスコにいれ、０℃に冷却した。装置にメカニカルスターラー、添加漏斗および温度プローブを装着した。反応混合物を添加漏斗に入れた。反応混合物をＨＣｌ水溶液に添加し、その間、温度を２５℃未満に維持した。酢酸エチル（１００ｍｌ）を溶液に添加し、層を分離させた。水層を再度酢酸エチル（１００ｍｌ）で洗浄した。1ＨＮＭＲ分析によれば化学収率は９５モル％以上であった。実施例−１のこの表題化合物を逆相、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、またはそれらの組み合わせにより精製した。
1ＨＮＭＲ (４００ＭＨｚ, Ｄ2Ｏ) δ １．４９ (３Ｈ, ｓ), ２．０８ (３Ｈ, ｓ), ２．７４ (２Ｈ, ｍ), ２．９１（１Ｈ, ｄ), ３．１７（１Ｈ，ｄ）, ３．３５ (２Ｈ, ｔ)。
【００６５】
実施例２：両性イオンの調製
本発明の１つの実施形態において、過剰な酸はアニオン交換樹脂を用いてＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩から除去してよい。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのモノヒドロクロロ、遊離の両性イオンまたは他の部分的酸誘導体がアニオン交換樹脂を用いて調製できることが更に発見された。アニオン交換法はその単純性のため、１塩酸塩および遊離の両性イオンを調製するために好適である。０．５当量未満の酸および低過剰の塩を有するＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは別の塩の形態の医薬の製造のために特に有用である。
【００６６】
図１は化合物滴定曲線の略図である。親のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子は３つイオン化可能な基を有し、そして、４つのイオン化状態で存在できる。
【００６７】
低ｐＨにおいては、分子は＋２荷電の遊離の酸として存在し、カルボン酸、アミンおよびアミジン部分はプロトン化されている。これは２塩酸塩のイオン化状態である。
【００６８】
ｐＨが上昇するに従い、カルボン酸基は脱プロトン化される最初の基となり、そしてこれにより＋１の分子上の実質電荷がもたらされる。ｐＨの上昇がＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインへの水酸化ナトリウムの添加により生じる場合は、ナトリウムの２塩酸塩が形成される。他の塩基はその相当する塩の形態を形成する。ｐＨの上昇がアニオン交換過程によるクロリドイオンの除去による場合は、生成物は、ナトリウムまたは他の対イオンを有さない１塩酸塩である。
【００６９】
ｐＨが更に上昇するに従い、アミン基は脱プロトン化（約ｐＫａ＝８．４）して分子の中性の両性イオン形態を生じる。正電荷はアミジン上になお残存し、負電荷はカルボキシル基上になお残存する。一方、このような物質が２塩酸塩への水酸化ナトリウムの添加により形成される場合は、得られる生成物は塩化ナトリウム１当量と混合されたモノヒドロクロロナトリウム塩である。アニオン交換樹脂法により製造された物質は遊離の両性イオンである。
【００７０】
更にｐＨが上昇すると、アミジンイオンの脱プロトン化が起こる（ｐＫａ〜１２．５）。このｐＨ範囲の分子は遊離の塩基および酸の塩である。負荷電された分子はアニオン交換樹脂に結合するため、遊離の塩基は好ましくはアニオン交換法では製造しない。
【００７１】
実施例３：遊離の両性イオンの調製
Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ４００（ＯＨ）樹脂６０ｇを４．７％（重量）の水酸化アンモニウム（２８％水酸化アンモニウム５０ｍｌ、脱イオン水２５０ｍｌ）で洗浄し、次いで、脱イオン水で十分洗浄した。最終電導度は６．１μＳであった。
【００７２】
ＨＣｌ／水の溶液１４２ｍｌ中Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約０．９ｇを含む試料を６０℃でロータリーエバポレーターで濃縮して油状物とした。脱イオン水で６０ｍｌに希釈したこの油状物に、攪拌しながら洗浄されたアニオン交換樹脂のアリコート０．５ｇを添加した。樹脂の各アリコートを添加した５分後、溶液のｐＨを測定し、試料をシリンジフィルターを介して採取した。合計で９ｇのアニオン交換樹脂を添加した。最終ｐＨは１０．８であった。樹脂を濾去し、濾液をロータリーエバポレーターで６０℃で濃縮して油状物とし、固体の形成はなかった。出発物質、最終濾液および全ての中間的な試料をＨＰＬＣおよびクロリドに関するイオンクロマトグラフィーにより試験した。
【００７３】
図２はｐＨを調節するためにアニオン交換樹脂を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの擬似滴定曲線を示す。ひし形（実線）はｐＨであり、四角（破線）はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン（初期値のパーセント、イオンクロマトグラフィーによる）である。図３はｐＨを調節するためにアニオン交換樹脂を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの擬似滴定曲線を示す。ひし形（実線）はｐＨであり、三角（破線）はクロリド（イオンクロマトグラフィーによる）である。
【００７４】
これらの曲線は、試料が反応の進行中に採取されたため、そして、樹脂の漸増量を添加する前には真の平衡は達成されていなかったため、真の滴定曲線ではない。しかしなお、図２および図３のグラフは予測された傾向を示していた。樹脂をＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン溶液に添加するに従い、ｐＨは上昇し、ｐＨ２、９および１１近傍の傾きが変化していた。より遅いｐＨ上昇はそれぞれ、カルボン酸、アミンおよびアミジン官能基のｐＫを表す。ｐＨ１０以上ではＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの溶液中の濃度は低下する。この時点でＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは実質の負電荷を獲得しており、樹脂に結合している。クロリドの結果は試料間のある程度の変動を示しているが、全般的にはｐＨ上昇に伴うクロリド含量の低下の傾向を示している。最終クロリド含量は約０．０４モル当量である。試料のＨＰＬＣ試験は分解を示さなかった。
【００７５】
実施例４：酸当量を調節するための過剰のＨＣｌの除去
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約３０５ｍｇ／ｍｌおよび０．２３当量の過剰のＨＣｌを含有する試料３．３ｇに、脱イオン水１６．７ｇを添加した。ｐＨは１．０４であった。この溶液１４ｍｌに、予め洗浄したＡｍｂｅｒｌｉｔｅ４００（ＯＨ）樹脂を添加し、ｐＨ２．５とした。アニオン交換処理により溶液の色は明黄色〜透明に明色化した。樹脂を濾去し、出発物質および濾液の生成物をクロリド滴定およびＨＰＬＣにより分析した。
出発物質および生成物のＨＰＬＣによる定性分析では新しいピークは観察されず、不純物の増加はなかった。滴定によるクロリド分析の結果は、クロリドが２．１８当量から約１．１４当量まで減少したことを示している。ここでは明示しないが、クロリドはＨＣｌ添加により所望の目標値に調整できる。
【００７６】
実施例５：遊離の両性イオンの調製
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約１ｇを含有する試料３．３ｇを２０ｇに希釈した。予備洗浄したＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ４００（ＯＨ）樹脂のアリコートを溶液に添加し、試料を定期的にシリンジフィルターを介して採取した。溶液中の樹脂を濾去し、次に濾液に新しい樹脂を添加し続けることにより、ｐＨ７．１および８．８で中間樹脂の濾過を実施した。これはクロリドの除去の平衡を促進し、生成物の吸着を最小限とするために実施した。１１．２の最終ｐＨが得られた後、樹脂を濾去した。出発物質、中間試料および最終濾液を分析した。
得られた試料をＨＰＬＣで分析した。出発物質と数時間以内のｐＨ１１での生成物のＨＰＬＣ結果の間には差はなかった。しかしながら、約１０日間室温で保存した後の高ｐＨ試料では、ある程度の分解ピークが約２〜３％のピーク面積で観察された。
【００７７】
実施例６：遊離の両性イオンの調製
ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲＡ４００（Ｃｌ）樹脂を３ＭＨＣｌ、水、次いで３ＭＮａＯＨですすいだ。アリコートは樹脂１０ｇ当たり１００ｍｌとした。この操作を３回反復することにより樹脂を清浄化し、ＯＨ型を形成した。水による最終のすすぎは、溶離した水の導電性が２μＳとなるまで行った。次に樹脂を用いてＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の５０ｍｇ／ｍｌ溶液４０ｍｌを滴定した。濃度を両性イオンの当量について表示した。滴定の間にわたりアリコートを採取し、濾過し、ＨＰＬＣで分析した。アリコートの部分試料を温存して第２のＨＰＬＣ分析用とし、滴定の１週間後に実施して試料の安定性を評価した。更に別のアリコートを採取してイオン選択性電極を用いたＣｌ分析に付した。ｐＨもまた滴定の間を通してモニタリングした。
【００７８】
この実施例で観察された結果は実施例３で観察された結果を反映していた。ここで使用したクロリド特異的な電極はＣｌ含量を測定するものであり、データのノイズははるかに小さかった（図４参照）。データはＣｌ９８％の除去においてｐＨ〜１０．８５が達成されることを示している。より多くのＣｌを除去できるが、それにより樹脂への化合物の結合が多大となる（図５参照）。樹脂結合に起因する化合物のこの損失は滴定の終わり頃に樹脂を濾過し、少量の新しい樹脂で交換することにより最小限にできる。この操作によりクロリドの除去の平衡が促進され、結合による化合物の損失に使用される部位を最小限にできる。
【００７９】
図４はＩＲＡ−４００アニオン交換樹脂（Ｒｏｈｍ＆Ｈａａｓ Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ，Ｒｈｏｍ＆Ｈａａｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａより入手可能）を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線を示す。図５はｐＨ上昇に伴う関連する結合データを示す。
【００８０】
ＨＰＬＣ分析はイオン対形成勾配法を用いて実施した。方法はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインを塩基性とした場合に予測される分解生成物の存在を検出することがわかっている。以下の表１からわかるとおり、データは分解は即時的に起っているのではなく、むしろ数日間の期間に渡り起こっていることを示している。
【００８１】
【表１】
【００８２】
ＨＰＬＣ法
ポンプＡ：２０ｍＭＫＨ2ＰＯ4、１０ｍＭペンタンスルホン酸、リン酸でｐＨ＝３に調製ポンプＢ：アセトニトリル
勾配：０分には０％Ｂ、１５分には２６％Ｂ、１５．１分には０％Ｂ
カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ１２０Ａ、５μｍ、２．６ｘ１５０ｍｍ
波長＝２０５ｎｍ
【００８３】
実施例７：過剰なＨＣｌの除去／モノヒドロクロロ［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの製造
これらの実施例において、クロリドの除去の工程はバッチ系において樹脂を攪拌することにより行ったが、これはプラント系においてもＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の溶液をアニオン交換樹脂カラムまたはアニオン交換膜に付して再循環させることにより容易に行える。ｐＨが偶発的に所望範囲を超えて上昇した場合は、適切な量のＨＣｌを添加することにより容易に戻すことができる。この目的のための大規模なアニオン交換工程を設計することは等業者の知るとおりである。
【００８４】
実施例８：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の結晶化
「ＯＨ」型のＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ−４００樹脂で滴定することにより水溶液から両性イオンを得た。溶液のｐＨが約ｐＨ１１にまで上昇するに従い、アニオン交換樹脂は塩酸塩を排除した。焼結ガラス漏斗を通した濾過により両性イオンの溶液から樹脂が除去された。この溶液を液体窒素で凍結し、凍結乾燥してガラス状の不定形の生成物を得た。乾燥ガラス状物の元素分析によれば、典型的に０．３％未満のクロリドが示されていた。
【００８５】
マレエート塩の初期の結晶化は、９０マイクロリットル（μｌ）の最終容量となるようにＨＰＬＣ等級の水で乾燥両性イオン３０ｇを溶解することにより行った。マレイン酸の溶液は、マレイン酸１．０５５グラムを用いて１０ｍｌ容のメスフラスコ中でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）で定容まで希釈することにより作成した。ＤＭＦ中のマレイン酸３００μｌを両性イオンの水溶液に攪拌しながら添加した。これは両性イオンの各当量に対しマレイン酸２当量であった。モレキュラーシーブ上で乾燥したアセトニトリルを溶液が濁るまで攪拌しながら滴加し、次に更に２〜３滴のアセトニトリルを添加した。溶液を週末を通じて攪拌した。得られたスラリーを偏光光学顕微鏡で検査した。正の伸長を示す複屈折の針状の結晶が観察された。固体を５．０μｍのＭｉｌｌｉｐｏｒｅＬＳフィルター上に収集し、４０℃で真空下に乾燥し、結晶性の生成物２８ｍｇを得た。わずか１当量のマレイン酸を用いた場合の相当する溶液はゲル状であった。
【００８６】
実施例９：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
その後の小規模の実験によれば、許容できる大規模化の条件が示された。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン両性イオン１．２１５グラムを水約３ｍｌに溶解した。マレイン酸１．２８３グラムおよびＤＭＦ１２ｍｌを攪拌しながら添加した。透明な溶液が急速に得られた。アセトニトリル１００Ｍｌを添加し、この時点で白濁している溶液に結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶種を添加した。１時間後、更にアセトニトリル１３ｍｌを添加した。スラリーを更に２時間攪拌し、次に結晶を数個のＭｉｌｌｉｐｏｒｅ５μｍＬＳフィルター上に収集した。極めて微小な粒径の濾過のため、比較的緩徐であった。固体をＭｉｌｌｉｐｏｒｅフィルター上でアセトニトリル少量を用いて洗浄した。これらの固体をビーカーに移し、４０℃で一夜真空乾燥した。
【００８７】
合計で５つの別の実施例を結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートに対して提示する。実施例は全て３元溶媒系（ＤＭＦ／水／アセトニトリル）において実施した。１モル過剰のマレイン酸を使用し、そしてＤＭＦ対水の比は約３：１の一定に維持した。結晶種添加の効率もまた一部の実施例において評価した。
【００８８】
実施例１０：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
凍結乾燥したＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン１．０ｇ、溶解したマレイン酸１．０５ｇを含むＤＭＦ１０ｍｌおよび水３．０ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、１２５ｒｐｍで攪拌して透明な溶液とした。アセトニトリル１００ｍｌをすぐに透明な溶液に添加し、その際、アリコートの添加により起こる白濁の大部分が次のアリコートの添加の前に治まるようにした。白濁した溶液の光学顕微鏡観察によれば、白濁は液相の分離（乳化）によるものであり、結晶核形成ではなかった。添加終了時にも溶液は白濁していた。溶液を一夜攪拌した。一夜保持する間に溶液は沈殿したが、スラリーの光学顕微鏡観察によれば固体は不定形であった。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種（３０ｍｇ）をスラリーに添加し、固体から結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートへの相変換を促進し、系を更に２４時間攪拌した。次にスラリーを約−１０℃に冷却し、更に２４時間攪拌することにより濾液中の生成物の損失を低減した。合計７２時間の後、スラリーを微小フリット焼結ガラス漏斗上で濾過し、ケーキをアセトニトリル４ｍｌで洗浄した。濾液はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン濃度約０．５重量％を有していた。固体を１時間風乾し、次に２４時間５０℃で真空オーブン中に入れた。固体は粉末Ｘ線回折およびＤＳＣの両方により結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートであったが、前者は最終固体中かなりの量の不定形の含量を示していた。
【００８９】
実施例１１：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
実施例１１は同じ溶媒組成および両性イオンのロード量で実施したが、アセトニトリルおよび結晶種の添加方法および保持時間は不定形の含量および処理時間を低減するために適正化した。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン５００ｍｇ、マレイン酸５０２ｍｇ、ＤＭＦ５ｍｌおよび水１．５ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、攪拌して透明な溶液とした。アセトニトリル３１ｍｌ（合計添加量の６３％）を実施例１０で使用した方法で間歇的に溶液に添加した。ほぼ全ての白濁が最初のアセトニトリル添加の終了後の攪拌１時間以内に治まった。次に溶液に１５ｍｇのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶を結晶種として添加し、そして、２時間攪拌した後、残余の１８ｍｌ（３７％）のアセトニトリルを添加した。スラリーを２４時間攪拌し、次に約−１０℃に冷却し、更に２４時間攪拌し、その後１５０ｍｌ容の微小フリット焼結ガラス漏斗上に排出した。ケーキをアセトニトリル４ｍｌで洗浄し、３０分間風乾し、次に５０℃で２４時間真空オーブン中に入れた。濾液中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの濃度は０．５５重量％であり、固体はＰＸＲＤによれば結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートであり、ベースラインのハローは一部不定形のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの存在を示していた。しかしながらハローは実施例１０の生成物の場合より顕著ではなかった。
【００９０】
実施例１２：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
実施例１２の目的はアセトニトリルの量を低減することにより工程のスループットを向上できる可能性について調べることである。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン０．９グラム、マレイン酸０．９３グラム、ＤＭＦ９ｍｌおよび水２．７ｍｌを１２５ｍｌ容量のジャケット付反応容器に添加し、透明な溶液が生じるまで攪拌した。アセトニトリル５６ｍｌを他の実施例と同様の方法で溶液に間歇的に添加した。アセトニトリルの添加の終了後に白濁全体が治まった時点でＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種２３ｍｇを添加した。系を１７５ｒｐｍで２４時間攪拌し、次にスラリーを１５０ｍｌの微小フリット焼結ガラス漏斗上に排出した。ケーキをアセトニトリル５ｍｌで洗浄し、４０分間風乾し、次に２４時間５０℃の真空オーブン中に入れた。生成物約６００ｍｇを乾燥後に回収した。濾液中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの濃度は約１．０重量％であった。生成物のＰＸＲＤ分析によれば不定形物質の含量は極めて低値であった。溶液のＮＭＲによれば生成物は０．１モル当量もの捕獲ＤＭＦを有していた。濾過の前およびオーブン乾燥後の光学顕微鏡によるスラリー中の固体の比較によれば、顕著な形態学的相違があった。
【００９１】
実施例１３：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
実施例１３は核形成を誘導するための補助として結晶種添加を排除できるかどうか調べるために実施した。この実験の操作法の残りの部分は実施例１２と同様である。生成物における濾液の濃度および固体状態の属性は結晶種を使用しなくても同等の性能が得られることを示していた。
【００９２】
実施例１４：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
実施例１４は、実験３および４において使用した操作法の収率を、固体の大部分がすでに沈殿した後で冷却し、アセトニトリルを追加添加することにより改善できる可能性を調べるために実施した。操作では、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン１．０ｇ、マレイン酸１．０３ｇ、ＤＭＦ１０ｍｌおよび水３．０ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、攪拌して透明な溶液を形成した。アセトニトリル５６ｍｌを上記実施例と同様にして溶液に間歇的に添加した。アセトニトリル添加終了後、白濁が実質的に全て治まった後にＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種２８ｍｇを添加した。結晶種添加後最初の２時間以内に顕著な沈殿が起こり、スラリーはジャケット上で約−１０℃に冷却した。この温度で２４時間スラリーを攪拌した。
【００９３】
冷却中および保持期間の上澄みの分析によれば、濃度低下は僅かであり、従って、アセトニトリル２５ｍｌを添加することにより、逆溶媒（ａｎｔｉ−ｓｏｌｖｅｎｔ）添加が収率を改善するかどうか調べた。更にアセトニトリルを添加した後、スラリーを２５℃に戻し、更に２４時間攪拌した後に１５０ｍｌの微小フリット焼結ガラス漏斗上で排出した。ケーキはアセトニトリル５ｍｌで洗浄した。
【００９４】
以前に観察されたいずれのケーキとも異なり、本実施例のケーキは粘着性がありフィルター上で２時間風乾した後でさえも極めて湿潤していた。これらの固体を４時間加熱することなく真空オーブン中に入れ、余分な溶媒を除去した。その後２４時間真空オーブン中５０℃で乾燥した。濾液の濃縮によっても逆溶媒を更に添加することの有意な利点は観察されなかった。乾燥直後のこの実施例の固体のＰＸＲＤ分析によれば、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶と混合された不定形の固体が一部存在していた。
【００９５】
実施例１５：ＩＩ型の結晶の操作法
水、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびアセトニトリル（ＡＣＮ）を含む３元溶媒系はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのマレエート塩の結晶化のためのもっとも効果的な溶媒系であることがわかった。
元の３元溶媒系の新しい変形例を発見し、ＩＩ型を発見する工程において開発した。この操作法は、結晶核形成を誘導するための結晶種添加の必要性を排除することにより操作性を改善できるように更に検討した。ＩＩ型を作成する経路の説明は以下の通りである。
【００９６】
第１の操作法において、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２００ミリグラムおよびマレイン酸２０６ミリグラムをＤＭＦ０．８６ｍｌおよび水０．３ｍｌの混合物に溶解した。磁気ビーズを用いて攪拌することにより透明な溶液が得られた後で、ＡＣＮ５ｍｌを攪拌しながら間歇的に添加した。ＡＣＮ〜０．５ｍｌの各アリコートの添加の後、白濁が治まるまで十分な時間を置いた。ＡＣＮ添加終了後に透明な溶液が得られた。Ｉ型結晶種１０ミリグラムを添加して溶液の核形成を誘導した。スラリーを２４時間室温で攪拌した。これを３０ｍｌの微小フリット焼結ガラス漏斗で濾過した。ケーキをＡＣＮ２ｍｌで洗浄し、次に１０分間風乾した。風乾した固体の一部を２８インチＨｇ真空下６０℃で真空オーブン中乾燥した。風乾した固体はオーブン乾燥中に脱水したため、３０分未満の時間内にオーブンから取り出してＩＩ型に水和した。Ｉ型（結晶化誘導のため使用）は単離生成物中に検出されなかったという事実は、これらの結晶化条件下ではＩＩ型はＩ型よりも安定であることを示している。この操作法の収率は重量で約６５％と推定された。一次核形成の誘導時間はグラム未満のスケールでは約３０分であった。
【００９７】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の特性化
偏光顕微鏡観察によれば正の伸長を示す複屈折の針状の結晶が、濾過による採取の前のスラリーにおいて、そして、４０℃で真空乾燥した後の単離生成物において観察された。
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩Ｉ型は９０％ＲＨおよび２５℃において水分吸収量は１重量％未満であり、１２３℃で融解する。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩Ｉ型は２３０ｍｇｍｌ-1超の水溶性を有する。
【００９８】
表２はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩Ｉ型の元素分析ならびに１．５％の水分含量の理論的組成を示す。
【表２】
【００９９】
プロトンＮＭＲはＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン両性イオンおよびマレイン酸の１：１の組み合わせの構造および化学量論的特徴と合致していた。プロトンＮＭＲもまた実施例８における０．２当量（３〜３．５％）のＤＭＦを示し、これは予測元素分析値を大きく変化させず、±０．４であった。
【０１００】
図６はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例９）の粉末Ｘ線パターンである。図７はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例８）の粉末Ｘ線パターンである。実施例８および実施例９は共に結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートを特徴付ける際に有用な特徴的ピークを示している。
【０１０１】
図８はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（１０．０４６ｍｇ、実施例９）の示差走査熱量試験のグラフである。図９はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（６．２１３０ｍｇ、実施例８）の示差走査熱量試験のグラフである。
【０１０２】
図１０はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（４．７６８０ｍｇ、実施例９）の熱重量分析プロットである。図１１はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例８）の熱重量分析プロットである。
【０１０３】
図１２はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの水分吸収試験のプロットである。
【０１０４】
図１３は結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートのラマンスペクトルを示す。慨すれば、ラマンスペクトルは分子または複合体系の振動の特徴である。その起源は分子と光線を含む光の粒子である光子との間の非弾性的な衝突にある。分子と光子の衝突はエネルギーの交換をもたらし、その結果エネルギーが変化し、これにより光子の波長が変化する。即ち、ラマンスペクトルは入射光により照射されるときに対象分子から発せられる極めて狭いスペクトルの線のセットである。各スペクトル線の幅は入射光のスペクトルの幅により大きく影響され、従って厳密に１色の光源、例えばレーザーを使用する。各ラマン線の波長は入射光からの波数シフトにより表示され、これはラマン線と入射光の波長の逆数の間の差である。吸収波長ではなく波数シフトはラマン線では分子内の特定の原子基に特異的である。ラマンスペクトルは分子の振動状態を測定するものであり、これはその分子構造により決定される。
【０１０５】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型の特性化
数種の大型結晶を、３週間に渡って７０／３０ｖ／ｖのＡＣＮ／水の溶媒混合物中５℃におけるＩ型およびＩＩ型の混合物をスラリー化することにより実施した相安定性試験から単離した。単位格子の化学量論的特徴は、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインとマレイン酸の各分子に対して水２1／2分子であることがわかっている。結晶構造は単結晶Ｘ線回折により解明されている。図１４はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型の単位格子を示す。空間群はＰ21（単斜晶系）であり、単位格子パラメーターはａ＝８．７００２、ｂ＝１９．０００９、ｃ＝８．５６２Å、α＝９０、β＝３４．４３９、γ＝９０°であった。構造はチャンネル水和物のものであり、水分子は短ｃ軸に沿って伸びるチャンネル中に位置している。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートについて単結晶構造から計算されたＸ線粉末パターンはＩＩ型について観察されたパターンに匹敵するものであった（図１５および図１６参照）。
【０１０６】
固体のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型は偏光顕微鏡によれば高度な結晶性を示し、結晶のサイズは２０マイクロメートルのオーダーであった。粒子は棒状であった。物理的方法により実施したＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型の元素分析によれば、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートのモル当たり水２．５モルの水和物に関する理論と極めて一致していた（表ＩＩ参照）。カールフィッシャーの水分測定では水分１０．９７％であったのに対し、２．５水和物の理論値は１１．８４％であった。
【０１０７】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型結晶塩の溶解度を５℃および２５℃において７０／３０および９０／１０ｖ／ｖのアセトニトリル／エタノール３Ａ混合物中で測定した。過剰な固体を１９日間適切な温度（振とう機バス中）においてこれらの溶媒中で平衡化させた。上澄みの試料を採取し、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの濃度についてＨＰＬＣで分析した。表４は結果をまとめたものである。溶媒系に存在するアセトニトリルの量が増大するに従って溶解度は顕著に低下したが、温度による作用は２０°の範囲ではほぼ無視できるものであった。
【０１０８】
【表３】
【０１０９】
過剰な（１モル当量）マレイン酸の存在下および非存在下の７０／３０ｖ／ｖアセトニトリル／水中、および、１モル当量過剰マレイン酸存在下の９０／１０ｖ／ｖアセトニトリル／水中における５℃でのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型結晶塩の溶解度を調べるために試験を試みた。３本全ての実験バイアルは、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩約９０ｍｇおよびマレイン酸３０ｍｇを二元溶媒約３００ｍｇに添加することにより調製した。次にこれらのバイアルを５℃の振とう機バスに入れた。４日間の平衡化の後にバイアルを観察したところ、系は、単一の液相中の固体の懸濁液から懸濁固体を含まない２相の液体に変化していた。３バイアルの各々の２層を、水分含量（カールフィッシャー分析による）および化合物濃度に関して分析した。表４に結果をまとめる。アセトニトリルリッチ（上部）の層における化合物の濃度のみがＫＦ分析に基づいて計算された組成を有する溶媒系中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート塩の真の溶解度を表していた。上層の測定濃度を導く厳密な条件は過剰のマレイン酸の分配が２層の間で確立された場合にのみ確立されるということが重要である。下層（水リッチ）は過剰な固体が残存していなかったことから、飽和未満であった可能性が高い。この可能性は、濃度が全ての実験にわたり極めて同様であることがわかった下層に関する溶解度のデータにより裏付けられる。過剰のマレイン酸の存在下の７０／３０アセトニトリル／水のバイアルは１９日後においても２層のままであったのに対し、過剰のマレイン酸の非存在下の７０／３０アセトニトリル／水は５日後には極めて大型の結晶がなお２層のままと思われる溶液中に浮遊していた。この実験を終了し、固体を単離して特性化したところ、ＩＩ型であることがわかった。これらの結晶を用いて結晶学的データを得た。５℃で１９日間平衡化した後、過剰なマレイン酸存在下の９０／１０アセトニトリル／水のバイアルは単一の液相の固体のスラリーに戻っていた。固体を単離し、ＩＩ型であることがわかり、そして溶液相中の濃度を測定したところ、０．６１３重量％のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインであった。過剰なマレイン酸存在下の７０／３０バイアルが２相のままであり、そしてより重要な点として再結晶した固体がなかったという事実は、過剰なマレイン酸（過剰なマレイン酸非存在下の７０／３０バイアルと比較）および高値の水分含量（過剰なマレイン酸存在下の９０／１０バイアルと比較）に起因する高値の溶解度が原因であると思われる。同じく興味深い点は、２相溶媒系からの結晶化が起こった２つのバイアルは単離の時点ではその内部にＩＩ型結晶を有していた点である。この観察結果は水分活性水和状態の相のダイアグラムから期待されるものと合致しており、過剰のマレイン酸は固体形態の安定性に影響しないと推測される。
【０１１０】
【表４】
【０１１１】
溶解度試験の最終セットはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）／水／アセトニトリル（ＡＣＮ）の３元溶媒系において実施した。この系を試験した理由は、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート塩を結晶化することの早期の成功例の大部分がこの溶媒混合物中であったためである。実験は全て１モル当量過剰量のマレイン酸を使用し、選択した溶媒組成は１５／１５／７０、５／５／９０、２０／１０／７０、６．６／３．４／９０、２２．５／７．５／７０、７．５／２．５／９０ｖ／ｖＤＭＦ／水／ＡＣＮとした。実験は２５℃においてこれらの組成の最後の４つについてのみ実施したが、データは５℃における組成に関して収集した。上澄みは４日後および１９日後に分析した。平衡化した固体もまた、大部分の実験では１９日後に単離して特性化した（表５参照）。固体を単離した溶媒形における７０％ＡＣＮを用いた実験の全ては１９日の間にＩ型からＩＩ型への完全な変換がもたらされたのに対し、溶媒系中で９０％ＡＣＮを用いた数実験は平衡化期間の後に固体状態として元のＩ型を保持していた。後者はＤＭＦの添加によりこれらの組成物の水分活性が更に低下したことに起因するものと考えられ、系は、Ｉ型がより安定である状態に向かう傾向を有していた。しかしながら７．５／２．５／９０ＤＭＦ／水／ＡＣＮ系の固体状態のデータはこの傾向を欠いており、入手できる情報が限定されているため説明が困難である。表５は４日および１９日の平衡化の後の、５℃及び２５℃における全ての実験から得たＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの重量％における濃度データを示している。もっとも顕著な傾向は、系のＡＣＮ含量が９０％から７０％に低下した場合に溶解度が大きく上昇する点である。全ての実験にわたり、溶解度についてはある程度の温度依存性もあった。固定されたＡＣＮ含量でデータを分析した場合、溶解度は初期は低下し、その後は、系のＤＭＦ含量が水の消費により上昇するに従って、上昇すると考えられる。この傾向は７０および９０％ＡＣＮの両方について維持されていると考えられる。最も安定な形態への完全な相変換はこれらの実験の全てにおいて起こったかもしれないが、表５で報告した溶解度の値は平衡にはなっていないと考えられ、これは、超飽和から常時緩徐に達成される（ＩＩを形成する変換が起こった全ての実験の場合と同様）。総括すれば、本溶媒系は複雑であるが、特にＩＩ型のための結晶化工程の設計につながる溶媒組成の範囲を与えている。
【０１１２】
【表５】
【０１１３】
【表６】
【０１１４】
図１７に示す通り、示差走査熱量分析（ＤＳＣ）は単一の共融点（水）を７７．６９℃に示した。熱重量分析（ＴＧＡ）によれば、重量損失は４５と８５℃との間では８．８％であった。ＴＧ−ＩＲは重量の損失は全て水分の損失に起因することを示していた（図１８参照）。８．８％の損失はＫＦで測定した水の値より低値であるが、これはこの性質の水和物については合理的に近似している。
【０１１５】
プロトンＮＭＲ分析をＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）に対して実施することにより、この形態が結晶化過程においてＤＭＦを捕獲したかどうかを調べた。データは結晶中に検出可能なＤＭＦが存在しないことを示している。
【０１１６】
図１９に示す通り、ＤＶＳ水分バランスによれば２５℃におけるＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の水分吸収は、水和物は総体湿度（ＲＨ）を０％に低下させることにより比較的容易に脱水されることを示していた。しかしながら、固体は１０％より高いＲＨに曝露されると、等しく容易に再水和する。実験は１０〜７０％ＲＨで〜２．５％（水０．５モル）の水分増加を示していた。７０〜９０％ＲＨでは、増加量は〜４．５％（水１モル）であった。吸着と脱着サイクルを反復することで結晶性のヒステリシスまたは損失は全く示されなかった。この実験の間のＩＩ型の挙動は高度に結晶性のチャンネル水和物／溶媒和物に典型的なものであった。
【０１１７】
医薬組成物
本発明に更に包含されるものは、１つまたはそれ以上の、非毒性の薬学的に許容される担体および／または希釈剤および／またはアジュバント（総称して本明細書においては「担体」物質と称する）、および、所望により、他の活性成分と共に結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型を含む医薬組成物のクラスである。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶性ＩＩ型は何れかの適当な経路で、好ましくはその経路に適合した医薬組成物の形態で、そして、意図する治療のために有効な用量で投与してよい。活性なＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型および組成物は、例えば経口、血管内、腹腔内、皮下、筋肉内または局所に投与してよい。
【０１１８】
経口投与の場合は、医薬組成物は例えば錠剤、カプセル、懸濁液または液体の形態であってよい。医薬組成物は好ましくは活性成分の特定の量を含有する用量単位の形態で製造する。このような用量単位の例は錠剤またはカプセルである。活性成分はまた、例えば食塩水、デキストロースまたは水を適当な担体として使用してよい組成物として注射により投与してよい。
【０１１９】
投与される治療的に活性な化合物の量および本発明の化合物および／または組成物により疾患状態を治療するための用法は多くの要因、例えば対象の年齢、体重、性別および病状、疾患の重症度、投与の経路および頻度、および、使用する特定の化合物により異なり、従って、大きく変動する。医薬組成物は活性成分を約０．１〜２０００ｍｇの範囲、好ましくは約０．５〜５００ｍｇの範囲、最も好ましくは約１〜１００ｍｇ含有してよい。約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは約０．５〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重、そして最も好ましくは約０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の一日当たり用量が適切である。一日当たり用量は一日当たり１〜４回で投与してよい。
【０１２０】
結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型はまた経皮装置により投与できる。好ましくは経皮投与はリザーバおよび多孔性膜の型または固体マトリックス種の何れかであるパッチを用いて行う。いずれの場合においても、活性剤はレシピエントの皮膚または粘膜に接触している活性剤透過性の接着剤内に膜を経由してリザーバーまたはマイクロカプセルから継続的に送達される。活性剤が皮膚を経由して吸収される場合は、活性剤の制御され予め決定された流量がレシピエントに投与される。マイクロカプセルの場合はカプセル化剤はまた膜として機能してもよい。
【０１２１】
本発明のエマルジョンの油相は既知の態様において既知の成分から構築してよい。相は乳化剤のみを含んでもよいが、脂肪または油と、または、脂肪と油の両方と少なくとも１つの乳化剤との混合物を含んでもよい。好ましくは親水性乳化剤は、安定化剤として機能する親油性の乳化剤と共に含有される。油および脂肪の両方を含有することも好ましい。全体として、乳化剤は安定化剤の存在下または非存在下でいわゆる乳化ワックスと称されるものを形成し、そしてワックスは油および脂肪と一緒になっていわゆる乳化軟膏基剤と称されるものを形成し、これがクリーム製剤の油性の分散相を形成する。本発明の製剤において使用するのに適する乳化剤および乳化安定剤はＴｗｅｅｎ６０、Ｓｐａｎ８０、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアレートおよびラウリル硫酸ナトリウム等である。
【０１２２】
医薬エマルジョン製剤中で使用され得る大部分の油中の活性化合物の溶解度は極めて低値であるため、製剤用の適当な油または脂肪の選択は所望の審美的特性を達成することに基づく。即ち、クリームは好ましくは、チューブや他の容器からの漏出を回避するために、適当なコンシステンシーを有する非グリース性（ｎｏｎ−ｇｒｅａｓｙ）、非染色性および洗浄可能な製品である。直鎖または分枝鎖の、１または２塩基性のアルキルエステル、例えば、ジイソアジペート、イソセチルステアレート、ココナツ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、イソプロピルミリステート、デシルオレエート、イソプロピルパルミテート、ブチルステアレート、２−エチルヘキシルパルミテートまたは分枝鎖エステルのブレンド物を使用してよい。これらは所望の性質に応じて単独または組み合わせて使用してよい。或は、高融点の脂質、例えば白色軟質パラフィンおよび／または流動パラフィンまたは他の鉱物油を使用することもできる。
【０１２３】
眼への局所投与に適する製剤は、活性成分が適当な担体、特に活性成分のための水性溶媒に溶解または懸濁されている点眼剤も包含する。活性成分は好ましくはそのような製剤中０．５から２０％、好都合には０．５〜１０％、特に約１．５重量％の濃度で存在する。
【０１２４】
治療目的のためには、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートは通常は望ましい投与経路に適切な、１つまたはそれ以上のアジュバントと組み合わせる。経口投与する場合は、化合物は乳糖、スクロース、澱粉、アルカン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウムおよびカルシウム塩、ゼラチン、アカシアガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、および／または、ポリビニルアルコールと混合し、次に好都合な投与のために錠剤化またはカプセル化してよい。このようなカプセルまたは錠剤はヒドロキシプロピルメチルセルロース中の活性化合物の分散物として提供され得る、放出制御型製剤を含んでよい。非経口投与のための製剤は水性または非水性の等張性の滅菌された注射用の溶液または懸濁液の形態であってよい。これらの溶液および懸濁液は、経口投与のための製剤における使用のために例示される、１つまたはそれ以上の担体または希釈剤を有する滅菌された粉末または顆粒から調製してよい。結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートは水、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、コーン油、綿実油、ピーナツ油、ゴマ油、ベンジルアルコール、塩化ナトリウム、および／または、種々の緩衝液に溶解してよい。他のアジュバントおよび投与様式は薬学分野でよく知られるとおりである。
【０１２５】
以上説明した本発明は多くの態様に変更できることは明らかである。このような変更は本発明の精神および範囲から外れないものであり、当業者に自明な全てのこのような変型および等価物は以下の特許請求の範囲に包含される。
【図面の簡単な説明】
【０１２６】
【図１】全てのイオン化状態を示しているＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線の図である。
【図２】ＩＲＡ−４００（ＯＨ）アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線のグラフ表示である。ひし形はｐＨ、四角（破線）はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン（％初期値、イオンクロマトグラフィーによる）を示す。
【図３】ＩＲＡ−４００（ＯＨ）アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線のグラフ表示である。ひし形はｐＨ、三角（破線）はクロリド（イオンクロマトグラフィーによる）を示す。
【図４】ＩＲＡ−４００アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線を示す。
【図５】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの両性イオンのｐＨを上昇させた場合の関連する結合データを示す。
【図６】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（実施例１２）の粉末Ｘ線パターンである。
【図７】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（実施例１１）の粉末Ｘ線パターンである。
【図８】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（１０．０４６ｍｇ、実施例１２）の示差走査熱量測定試験のグラフである。
【図９】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（６．２１３０ｍｇ、実施例１１）の示差走査熱量測定試験のグラフである。
【図１０】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（４．７６８０ｍｇ、実施例１２）の熱重量分析プロットである。
【図１１】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（実施例１１）の熱重量分析プロットである。
【図１２】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の水分吸着試験のプロットである。
【図１３】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料のラマンスペクトルである。
【図１４】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の単位格子の表示である。
【図１５】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の試料の粉末Ｘ線パターンである。
【図１６】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の試料の模擬の、および、観察された粉末Ｘ線パターンの比較である。
【図１７】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の試料の示差走査熱量分析試験のグラフである。
【図１８】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の試料（３．７５２０ｍｇ）の熱重量分析プロットである。
【図１９】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の水分吸着試験のプロットである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は疾患の治療において有用な新しい化合物、そしてより詳細には、酸化窒素シンターゼの誘導性アイソフォームからの酸化窒素の不適切な発現が関与する状態の治療のための、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの新しい塩、そして更に詳細には結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの新しい結晶状態（ＩＩ型）、および、その医薬組成物を包含する。
【０００２】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは参照により本明細書に組み込まれる、同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載され特許請求されている。
【背景技術】
【０００３】
酸化窒素（ＮＯ）は酵素酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）の数種のアイソフォームの何れか１つにより生産される生物活性フリーラジカルガスである。後にＮＯとして同定されたものの生理学的活性は１９８０年代初頭に最初に発見され、このとき、アセチルコリンにより誘発される血管の弛緩は血管内皮の存在に依存していることがわかった。内皮から誘導され、次にこのような血管弛緩を媒介する内皮誘導弛緩因子（ＥＤＲＦ）と称されるようになった因子は、現在ではＮＯＳの１つのアイソフォームにより血管内皮内で生じたＮＯであることが知られている。血管弛緩剤としてのＮＯの活性は１００年以上もの間、知られている。更にＮＯは知られたニトロ血管弛緩剤、例えば亜硝酸アミルおよびニトログリセリンから誘導された活性物質種である。酸化窒素はまた可溶性のグアニレートサイクラーゼ（ｃＧＭＰ）の内因性刺激剤であり、即ち、ｃＧＭＰの生産を刺激する。ＮＯＳがＮ−モノメチルアルギニン（Ｌ−ＮＭＭＡ）により抑制されるとｃＧＭＰの生成は完全に防止される。内皮依存性弛緩に加えて、ＮＯは食細胞の細胞毒性および中枢神経系における細胞から細胞への連絡を含む生物学的作用の多くに関与していることがわかっている。
【０００４】
ＮＯとしてのＥＤＲＦの発見は、酵素ＮＯシンターゼによりアミノ酸Ｌ−アルギニンからＮＯが合成される生化学的経路の発見と一致していた。以下に示す少なくとも３種のＮＯシンターゼが存在する。
（ｉ）受容体または物理的刺激に応答してＮＯを放出する脳に存在する構成性Ｃａ＋＋／カルモジュリン依存性酵素；
（ｉｉ）内毒素およびサイトカインによる血管平滑筋、マクロファージ、内皮細胞および多くの他の細胞の活性化の後に誘導されるＣａ＋＋非依存性酵素（１３０ｋＤタンパク質）；および、
（ｉｉｉ）受容体または物理的刺激に応答してＮＯを放出する内皮細胞に存在する構成性Ｃａ＋＋／カルモジュリン依存性酵素。
【０００５】
発現された後、誘導性酸化窒素シンターゼ（以降「ｉＮＯＳ」と称する）は長期間に渡り持続的にＮＯを発生する。臨床試験によれば、ＮＯの生産およびｉＮＯＳの発現は種々の慢性炎症性疾患、例えば慢性関節リューマチおよび骨関節炎（例えばＭｃＩｎｎｅｓ Ｉ．Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８４：１５１９（１９９６）参照）、炎症性腸疾患（例えばＬｕｎｄｂｅｒｇ Ｊ．Ｏ．Ｎ．ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１６７３（１９９４）参照）および喘息（例えばＨａｍｉｄ，Ｑ．ｅｔ．ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ ３４２：１５１０（１９９３）参照）において増大し、そしてｉＮＯＳはこれらの慢性炎症性疾患における主要な病原性因子とされている。
【０００６】
即ちｉＮＯＳによる過剰なＮＯ生産の抑制は抗炎症性であると考えられる。しかしながら、ｅＮＯＳおよびｎＮＯＳからのＮＯの生産は正常な生理機能にかかわっているため、炎症の治療に使用されるいずれのＮＯＳ阻害剤も、ｅＮＯＳ生成ＮＯによる血圧の正常な生理学的調節およびｎＮＯＳ生成ＮＯによる非アドレナリン作用性、非コリン作用性の神経伝達が影響を受けない状態であり続けるように、ｉＮＯＳに対して選択的であることが望ましい。
【０００７】
全ての医薬品の化合物および組成物において、薬剤化合物の化学的および物理的安定性は薬剤物質の商業的開発において重要である。このような安定性には、周囲条件において特に水分に対して、そして、保存条件下における安定性が包含される。保存の種々の条件における向上した安定性は、市販品の寿命の間の種々の可能な保存条件を予測するために必要である。安定な薬剤は特殊な保存条件の使用ならびに頻繁な在庫交換を回避する。均一な粒径および表面積を有する薬剤物質を得るためには、薬剤のミリングを必要とする場合が多い製造工程の間も薬剤化合物は安定でなければならない。不安定な物質は多形の変化を起こす場合が多い。従って、安定性の特性を向上させる薬剤物質のいずれかの修飾は安定性がより低い物質よりも重要な利益をもたらす。
【０００８】
例えば同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載され特許請求されているＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのような数種のｉＮＯＳ阻害剤が報告されている。しかしながらその化合物は不定形の固体である。従って、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのようなｉＮＯＳ阻害剤の結晶固体形態を提供することが望ましい。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの新しい結晶塩、医薬組成物、新しい塩化合物の製造方法、医薬組成物の製造方法、および、酸化窒素シンターゼの構成性アイソフォームよりも酸化窒素シンターゼの誘導性アイソフォームを優先的に抑制またはモジュレートする化合物の塩を投与することによって、酸化窒素の合成を抑制またはモジュレートすることを必要とする対象においてこのような抑制またはモジュレートのための新しいＩＩ型結晶塩化合物および組成物を用いる方法に関する。本発明の塩化合物は有用な酸化窒素シンターゼ抑制活性を有し、そして酸化窒素の合成または過剰合成が寄与的部分を形成する疾患または状態の治療または予防において有用であることが期待される。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
化学量論的には、新しい塩の単位格子はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの１分子およびマレイン酸の１分子である。
【００１１】
新しい結晶性ＩＩ型塩は以下の物理的測定値、即ち、元素分析（例えば燃焼分析による）、融点および融解熱（示差走査熱量分析および熱重量分析）、屈折率（偏光顕微鏡）、Ｘ線粉末回折パターンおよび水分吸着（例えばＤＶＳ水分バランス）の一部または全てにより特性化される。
【００１２】
本発明の新しい塩は関節炎のような特定の状態において生じる軟骨の変性が関与する疾患を治療するために使用できる。従って、Ｌ−アルギニンからのＮＯ生産を抑制することが好都合となる状態は、関節の状態、例えば慢性関節リューマチ、骨関節炎、通風性関節炎、若年性関節炎、敗血症性関節炎、脊椎関節炎、急性関節リューマチ、腸疾患に基づく関節炎（enteropathic arthritis）、神経障害性関節炎および化膿性関節炎を包含する。更にまた、軟骨細胞吸引のＮＯ誘導低下は関節炎、特に骨関節炎におけるマトリックスの損失および二次的な軟骨の石灰化をモジュレートする。
【００１３】
本発明の塩が有用であるその他の状態は、慢性または炎症性の腸疾患、心臓血管虚血、糖尿病、鬱血性心不全、心筋炎、アテローム性動脈硬化症、偏頭痛、緑内障、大動脈瘤、逆流性食道炎、下痢、過敏性腸症候群、嚢胞性線維症、気腫、喘息、気管支拡張症、痛覚過敏、脳虚血、血栓性卒中、全虚血（global ischemia）（心停止に二次的なもの）、多発性硬化症およびＮＯにより媒介される他の中枢神経系の障害、例えばパーキンソン病およびアルツハイマー病を包含する。ＮＯ抑制が有用である別の神経変性障害は低酸素症、低血糖症、癲癇のような疾患における、そして、外傷（例えば脊髄および頭部の傷害）における神経変性および／または神経壊死、高圧酸素痙攣および毒性、痴呆症、例えば前老年性痴呆症、および、ＡＩＤＳ関連痴呆症、シドナム舞踏病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、コルサコフ病、脳血管障害に関わる精神遅滞、睡眠障害、統合失調症、うつ病、月経前症候群（ＰＭＳ）に関連するうつ病または他の症状、不安症および敗血症性ショックを包含する。
【００１４】
本発明の塩はまた、身体原性の（侵害受容または神経病性の）急性および慢性の両方のものを含む疼痛のようなものの治療において酸化窒素の抑制が役割を果たす場合にも使用してよい。本発明の化合物は一般的なＮＳＡＩＤまたはオピオイド鎮痛剤が伝統的に投与されている何れかの状況において使用できる。
【００１５】
更にまた、本発明の塩によるＮＯ生産の抑制により治療できる別の障害には長期間オピエート鎮痛剤を必要とする患者におけるオピエート耐性、および、ベンゾジアゼピン使用患者におけるベンゾジアゼピン耐性および他の中毒挙動、例えばニコチンおよび摂食障害が包含される。本発明の化合物はまた抗菌剤としても使用してよい。
【００１６】
Ｌ−アルギニンからのＮＯ生産を抑制するために本発明の塩を使用してよい別の状態は、種々の因子により誘導される敗血症性および／または毒性のショックに関連する全身低血圧を包含し；ＴＮＦ、ＩＬ−１およびＩＬ−２のようなサイトカインを用いた治療において；および移植療法における短期間の免疫抑制に対するアジュバントとして使用してよい。
【００１７】
本発明の塩はまた眼の状態（例えば高眼圧症、網膜炎、ブドウ膜炎）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、糸球体腎炎、再狭窄、ウィルス感染の炎症性続発症、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、酸素誘導肺傷害、癌患者等におけるＩＬ２治療、悪液質、移植療法等における免疫抑制、胃腸運動性の障害、日焼け、湿疹、乾癬、歯肉炎、膵臓炎、感染症が原因の胃腸管の損傷、嚢胞性線維症、臓器移植療法における短期の免疫抑制のアジュバントのような機能不全免疫系の治療、分娩誘発、腺腫様ポリープ、腫瘍成育の制御、化学療法、化学予防および気管支炎においても有用である。
【００１８】
本発明はまた、治療有効量の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型を薬学的に許容される担体、希釈剤またはベヒクルと共に含有する医薬組成物であって、疼痛、喘息および他の気道の障害、癌、関節炎、網膜症および緑内障を含む眼の障害、炎症関連障害、例えば過敏性腸症候群、および酸化窒素の過剰な生産が役割を果たしている他の障害の治療のための医薬組成物に関する。
【００１９】
ヒトの治療に有用であるほか、この型は愛玩動物、外来種動物および家畜、例えば哺乳類、げっ歯類等の獣医科の治療にも有用である。より好ましい動物はウマ、イヌおよびネコを包含する。
【００２０】
定義
「治療する」、「治療している」および「治療」という用語は本明細書においては、予防療法、待期療法または回復療法を包含する。
「有効量」という用語は治療を行える用量を意味する。有効量は単回用量で、またはある期間に渡り分割用量において投与してよい。
「ＡＣＥ」という用語はアセトンを意味する。
「ＡＣＮ」という用語はアセトニトリルを意味する。
【００２１】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインに適用する場合「不定形」という用語は、本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子が無秩序の配列において存在し、識別可能な結晶格子または単位格子を形成しない固体状態を意味する。Ｘ線粉末回折に付す場合は、不定形のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは如何なる特徴的な結晶ピークも示さない。
【００２２】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインに適用する場合「結晶型」という用語は、本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子が配列して（ｉ）識別可能な単位格子を含み、そして（ｉｉ）Ｘ線照射に付した場合に回折ピークを生じるような、識別可能な結晶格子を形成する固体状態の形態を指す。
【００２３】
「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型」、「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインＩ型」および「Ｉ型」という用語は全て、本明細書においてより詳細に記載する、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩Ｉ型を意味する。
【００２４】
「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型」、「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインＩＩ型」および「ＩＩ型」という用語は全て、本明細書においてより詳細に記載する、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型を意味する。
【００２５】
「結晶化」という用語は本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン出発原料の製造に関わる適用可能な状況に応じた結晶化および／または再結晶化を指す。
「ＤＭＦ」という用語はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味する。
「Ｄ／Ｗ／Ａ」」という用語はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、水およびアセトニトリルの３元溶媒系を指す。
【００２６】
「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン薬剤物質」という用語は本明細書においては、その用語を使用する文脈により明確化されるＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン自体であり、未製剤のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインまたは医薬組成物の成分として存在するＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインを指す。
【００２７】
「ＤＳＣ」という用語は示差走査熱量測定を意味する。
「ＨＰＬＣ」という用語は高速液体クロマトグラフィーを意味する。
「ＩＲ」という用語は赤外線を意味する。
「ＮＭＲ」という用語は核磁気共鳴を意味し、核磁気共鳴スペクトル分析に適用してよい。
「ｍｌ」という用語はミリリットルを意味する。
「ｍｇ」という用語はミリグラムを意味する。
「μｇ」という用語はマイクログラムを意味する。
「μｌ」という用語はマイクロリットルを意味する。
「核形成」という用語は本明細書においては溶液中の結晶の形成を意味する。
【００２８】
「純度」という用語は本明細書においては特段の記載が無い限り、従来のＨＰＬＣ試験によるＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの化学純度を意味する。
「ＰＸＲＤ」という用語は粉末Ｘ線回折を意味する。
「ｒｐｍ」という用語は分当たり回転数を意味する。
「結晶種添加」という用語は、本明細書においては、核形成を開始または促進する目的のための溶液中への結晶の添加を意味する。
「ＴＧＡ」という用語は熱重量分析を意味する。
「Ｔｍ」という用語は融点を意味する。
「遊離の両性イオン」という用語は実質電荷がゼロ値となるように正電荷および負電荷の両方を担持した分子を指す。
【００２９】
薬学的使用
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は、対象において特に炎症を治療するため、または、他の酸化窒素シンターゼ媒介障害の治療のため、例えば疼痛および頭痛の治療における鎮痛剤として、または、発熱の治療のための解熱剤として有用である。例えば、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は関節炎、例えば慢性関節リューマチ、脊髄関節症、痛風性関節炎、骨関節炎、全身性エリテマトーデス、若年性関節炎、急性関節リューマチ、腸疾患に基づく関節炎、神経障害性関節炎、乾癬性関節炎および化膿性関節炎の治療に有用であるが、これらに限定されない。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型がＬ−アルギニンからのＮＯ生産の抑制において好都合である状態は関節炎の状態を包含する。
【００３０】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は更に、喘息、気管支炎、月経痛（例えば月経困難）、早産、腱炎、滑液包炎、皮膚関連状態、例えば乾癬、湿疹、熱傷、日焼け、皮膚炎、膵臓炎、肝炎、および、術後炎症に起因するもの、例えば眼科手術に起因するもの、例えば白内障手術および屈折矯正手術に起因するものの治療において有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた炎症性腸疾患、クローン病、胃炎、過敏性腸症候群および潰瘍性結腸炎のような胃腸状態の治療にも有用である。
【００３１】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は癌、例えば結腸直腸癌および乳癌、肺癌、前立腺癌、膀胱癌、子宮癌および皮膚がんの予防または治療のために有用である。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は血管疾患、偏頭痛、結節性動脈周囲炎、甲状腺炎、再生不良性貧血、ホジキン病、硬皮症（sclerodoma）、リューマチ熱、Ｉ型糖尿病、神経筋接合部疾患、例えば重症筋無力症、白質症、例えば多発性硬化症、サルコイドーシス、ネフローゼ症候群、ベーチェット症候群、多発性筋炎、歯肉炎、腎炎、過敏症、傷害後の浮腫、心筋虚血等のような疾患における炎症および組織損傷の治療に有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた眼科疾患、例えば緑内障、網膜炎、網膜症、ブドウ膜炎、眼光恐怖症および眼部組織への急性損傷に関連する炎症および疼痛の治療においても有用である。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型の用途のうち特に興味深いものは、特に、緑内障の症状が酸化窒素媒介神経損傷の場合のように酸化窒素の生成により誘発されたものである緑内障の治療である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた肺の炎症、例えばウィルス感染に伴うもの、および嚢胞性線維症の治療においても有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた特定の中枢神経系の障害、例えば皮質痴呆、例えばアルツハイマー病、および卒中、虚血および外傷に起因する中枢神経系の損傷の治療のためにも有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は抗炎症剤、例えば関節炎の治療用のもの等としても有用であり、有害な副作用が顕著に低減されているという別の利点も伴う。
【００３２】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまたアレルギー性鼻炎、呼吸窮迫症候群、内毒素ショック症候群およびアテローム性動脈硬化症の治療においても有用である。
【００３３】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた疼痛、例えば術後疼痛、歯痛、筋肉痛、および癌に起因する疼痛の治療においても有用であるが、これらに限定されない。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はアルツハイマー病のような痴呆症の予防のために有用である。
【００３４】
ヒトの治療のほかに、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は愛玩動物、外来種動物および家畜、例えば哺乳類、げっ歯類等の獣医科の治療にも有用である。より好ましい動物はウマ、イヌおよびネコを包含する。
【００３５】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた、他の従来の抗炎症療法の部分的または完全な代替法である共療法（co-therapies）において、例えばステロイド、ＮＳＡＩＤ、ＣＯＸ−２選択的阻害剤、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、ＬＴＢ4拮抗剤およびＬＴＡ4ヒドロラーゼ阻害剤と共に使用してよい。
【００３６】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型がＮＯ生産の抑制において好都合である他の状態は、心臓血管虚血、糖尿病（Ｉ型またはＩＩ型）、鬱血性心不全、心筋炎、アテローム性動脈硬化症、偏頭痛、緑内障、大動脈瘤、逆流性食道炎、下痢、過敏性腸症候群、嚢胞性線維症、気腫、喘息、気管支拡張症、痛覚過敏（異痛）、脳虚血（局所的虚血、血栓性卒中および全虚血（例えば心停止に二次的なもの）の双方）、多発性硬化症およびＮＯにより媒介される他の中枢神経系の障害、例えばパーキンソン病を包含する。ＮＯ抑制が有用である別の神経変性障害は低酸素症、低血糖症、癲癇のような疾患における、そして、中枢神経系（ＣＮＳ）外傷（例えば脊髄および頭部の傷害）の場合における、神経変性および／または神経壊死、高圧酸素痙攣および毒性、痴呆症、例えば前老年性痴呆症、および、ＡＩＤＳ関連痴呆症、シドナム舞踏病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、コルサコフ病、脳血管障害に関わる精神遅滞、睡眠障害、統合失調症、うつ病、月経前症候群（ＰＭＳ）に関連するうつ病または他の症状、不安症および敗血症性ショックを包含する。
【００３７】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた身体原性の（侵害受容または神経病性の）急性および慢性の両方のものを含む疼痛の治療において有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた一般的なＮＳＡＩＤまたはオピオイド鎮痛剤が伝統的に投与されている神経病性の疼痛を含む何れかの状況において使用できる。
【００３８】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型により好都合に治療される更に別の障害または状態は、長期間オピエート鎮痛剤を必要とする患者におけるオピエート耐性、および、ベンゾジアゼピン使用患者におけるベンゾジアゼピン耐性および他の中毒挙動、例えばニコチン中毒、アルコール中毒および摂食障害が包含される。
【００３９】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまたオピエート、アルコールまたはタバコ中毒からの禁断症状の治療または予防のような、薬物禁断症状の治療または予防に有用である。
【００４０】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた抗菌剤または抗ウィルス剤と治療上組み合わせた場合に組織の損傷を予防するために有用である。
【００４１】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまたＬ−アルギニンからのＮＯ生産の抑制において、例えば種々の因子により誘導される敗血症性および／または毒性出血性ショックに関連する全身低血圧に有用であり；ＴＮＦ、ＩＬ−１およびＩＬ−２のようなサイトカインを用いた治療に有用であり；そして、移植療法において短期間の免疫抑制剤に対するアジュバントとして有用である。
【００４２】
本発明は更に新生物の治療および予防のための本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型の使用に関する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型および方法により治療可能または予防可能である新生物は脳の癌、骨の癌、白血病、リンパ腫、上皮細胞誘導新生物（上皮癌腫）、例えば基底細胞癌、腺癌、胃腸の癌、例えば口唇の癌、口腔の癌、食道癌、小腸の癌および胃癌、結腸癌、肝臓癌、膀胱癌、膵臓癌、卵巣癌、子宮癌、肺癌、乳癌および皮膚がん、例えば扁平上皮癌および基底細胞癌、前立腺癌、腎細胞癌およびその他の全身に渡る上皮細胞に関わる既知の癌を包含する。好ましくは、治療すべき新生物は胃腸の癌、肝臓癌、膀胱癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、子宮癌、肺癌、乳癌および皮膚癌、例えば扁平上皮および基底細胞の癌から選択される。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型および本発明の方法はまた放射線療法により起こる線維症を治療するために使用できる。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型および方法は家族性大腸腺腫症（ＦＡＰ）の対象を含む腺腫様ポリープを有する対象の治療に使用できる。更に、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型および方法はＦＡＰの危険性のある患者におけるポリープ形成を予防するために使用できる。
【００４３】
別の抗新生物剤との本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型の複合治療は相乗作用をもたらすか、または、治療効果のために必要とされる副作用誘発薬剤の治療用量を低減するかもしくは副作用誘発薬剤により誘発される毒性の副作用の症状を直接低減することにより化学療法に伴う毒性の副作用を軽減する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は更に副作用を低減するかまたは薬効を増強するための放射線療法の補助として有用である。
【００４４】
本発明においては、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型と治療上組み合わせることができる別の薬剤は酵素シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）を阻害できる何れかの治療薬を包含する。好ましくは、このようなＣＯＸ−２阻害剤は酵素シクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）と比較してＣＯＸ−２を選択的に阻害する。このようなＣＯＸ−２阻害剤は「ＣＯＸ−２選択的阻害剤」として知られている。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型と治療上組み合わせて使用するＣＯＸ−２選択的阻害剤は、セレコキシブ、バルデコキシブ、デラコキシブ、エトリコキシブ、ロフェコキシブ、ＡＢＴ−９６３（２−（３，４−ジフルロフェニル）−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブトキシ）−５−［４−（メチルスルホニル）フェニル−３（２Ｈ）−ピリダジノン；ＰＣＴ出願ＷＯ００／２４７１９記載）、またはメロキシカムを包含する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまたＣＯＸ−２選択的阻害剤のプロドラッグ、例えばパレコキシブと治療上組み合わせて好都合に使用できる。
【００４５】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型と組み合わせて使用する別の化学療法剤は、例えば以下の非包括的および非限定的なリストから選択できる。
【００４６】
アルファ−ジフルオロメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）、５−ＦＵ−フィブリノーゲン、アカンチホリック酸（ａｃａｎｔｈｉｆｏｌｉｃ ａｃｉｄ）、アミノチアジアゾール、ブレキナールナトリウム（ｂｒｅｑｕｉｎａｒ ｓｏｄｉｕｍ）、カルモフール、Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ ＣＧＰ−３０６９４、シクロペンチルシトシン、シタラビンホスフェートステアレート、シタラビンコンジュゲート、Ｌｉｌｌｙ ＤＡＴＨＦ、Ｍｅｒｒｅｌ Ｄｏｗ ＤＤＦＣ、デザグアニン、ジデオキシシチジン、ジデオキシグアノシン、ジドックス、Ｙｏｓｈｉｔｏｍｉ ＤＭＤＣ、ドキシフルリジン、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＥＨＮＡ、Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．ＥＸ−０１５、ファザラビン、フロクスウリジン、フルダラビンホスフェート、５−フルオロウラシル、Ｎ−（２’−フラニジル）−５−フルオロウラシル、Ｄａｉｉｃｈｉ Ｓｅｉｙａｋｕ ＦＯ−１５２、イソプロピルピロリジン、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−１８８０１１、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−２６４６１８、メトベンザプリン、メトトレキセート、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＭＺＰＥＳ、ノルスペルミジン、ＮＣＩ ＮＳＣ−１２７７１６、ＮＣＩ ＮＳＣ−２６４８８０、ＮＣＩ ＮＳＣ−３９６６１、ＮＣＩ ＮＳＣ−６１２６７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＰＡＬＡ、ペントスタチン、ピリトレキシム、プリカマイシン、Ａｓａｈｉ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ＰＬ−ＡＣ、Ｔａｋｅｄａ ＴＡＣ−７８８、チオグアニン、チアゾフリン、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＴＩＦ、トリメトレキセート、チロシンキナーゼ阻害剤、チロシン蛋白質キナーゼ阻害剤、Ｔａｉｈｏ ＵＦＴ、ウリシチン、Ｓｈｉｏｎｏｇｉ ２４５−Ｓ、アルド−ホスファミド類縁体、アルトレタミン、アナキシロン（ａｎａｘｉｒｏｎｅ）、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ ＢＢＲ−２２０７、ベストラブシル、ブドチタン、Ｗａｋｕｎａｇａ ＣＡ−１０２、カルボプラチン、カルムスチン、Ｃｈｉｎｏｉｎ−１３９、Ｃｈｉｎｏｉｎ−１５３、クロラムブシル、シスプラシン、シクロホスファミド、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ ＣＬ−２８６５５８、Ｓａｎｏｆｉ ＣＹ−２３３、シプラテート、Ｄｅｇｕｓｓａ Ｄ−１９−３８４、Ｓｕｍｉｍｏｔｏ ＤＡＣＨＰ（Ｍｙｒ）２、ジフェニルスピロムスチン、細胞増殖抑制ジ白金（ｄｉｐｌａｔｉｎｕｍ ｃｙｔｏｓｔａｔｉｃ）、Ｅｒｂａジスタマイシン誘導体、Ｃｈｕｇａｉ ＤＷＡ−２１１４Ｒ、ＩＴＩ Ｅ０９、エルムスチン、ＥｒｂａｍｏｎｔＦＣＥ−２４５１７、エストラムスチンホスフェートナトリウム、フォテムスチン、Ｕｎｉｍｅｄ Ｇ−６−Ｍ、Ｃｈｉｎｏｉｎ ＧＹＫＩ−１７２３０、ヘプスル−ファム（ｈｅｐｓｕｌ−ｆａｍ）、イフォスファミド、イプロプラチン、ロムスチン、マホスファミド、ミトラクトール、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫ−１２１、ＮＣＩ ＮＳＣ−２６４３９５、ＮＣＩ ＮＳＣ−３４２２１５、オキサリプラチン、Ｕｐｊｏｈｎ ＰＣＮＵ、プレドニムスチン、Ｐｒｏｔｅｒ ＰＴＴ−１１９、ラニムスチン、セムスチン、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＳＫ＆Ｆ−１０１７７２、Ｙａｋｕｌｔ Ｈｏｎｓｈａ ＳＮ−２２、スピロムス−チン、Ｔａｎａｂｅ Ｓｅｉｙａｋｕ ＴＡ−０７７、タウロムスチン、テモゾロミド、テロキシロン、テトラプラチン、トリメラモール、Ｔａｉｈｏ ４１８１−Ａ、アクラルビシン、アクチノマイシンＤ、アクチノプラノン、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＡＤＲ−４５６、アエロプリシニン誘導体、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＡＮ−２０１−ＩＩ、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＡＮ−３、Ｎｉｐｐｏｎ Ｓｏｄａアニソマイシン、アントラサイクリン、アジノマイシン−Ａ、ビスカベリン、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＬ−６８５９、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２５０６７、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２５５５１、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２６６０５、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２７５５７、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２８４３８、ブレオマイシンスルフェート、ブリオスタチン−１、Ｔａｉｈｏ Ｃ−１０２７、カリケマイシン、クロモキシマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−１０２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−７９、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−８８Ａ、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ８９−Ａ１、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ９２−Ｂ、ジトリサルビシンＢ、Ｓｈｉｏｎｏｇｉ ＤＯＢ−４１、ドキソルビシン、ドキソルビシン−フィブリノーゲン、エルサミシン−Ａ、エピルビシン、エルブスタチン、エソルビシン、エスペラミシン−Ａ１、エスペラミシン−Ａ１ｂ、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＦＣＥ−２１９５４、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＫ−９７３、フォストリエシン、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＲ−９００４８２、グリドバクチン、グレガチン−Ａ、グリンカマイシン、ヘルビマイシン、イダルビシン、イルジンス（ｉｌｌｕｄｉｎｓ）、カズサマイシン、ケサリロジンス、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＭ−５５３９、Ｋｉｒｉｎ Ｂｒｅｗｅｒｙ ＫＲＮ−８６０２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−５４３２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−５５９４、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−６１４９、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ ＬＬ−Ｄ４９１９４、Ｍｅｉｊｉ Ｓｅｉｋａ ＭＥ２３０３、メノガリル、マイトマイシン、ミトザントロン、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｍ−ＴＡＧ、ネオエナクチン、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫ−３１３、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫＴ−０１、ＳＲＩ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＮＳＣ−３５７７０４、オキサリシン、オキサウノマイシン、ペプロマイシン、ピラチン、ピラルビシン、ポロスラマイシン、ピリンダマイシンＡ、Ｔｏｂｉｓｈｉ ＲＡ−Ｉ、ラパマイシン、リゾキシン、ロドルビシン、シバノミシン、シエノマイシン（ｓｉｗｅｎｍｙｃｉｎ）、Ｓｕｍｉｔｏｍｏ ＳＭ−５８８７、Ｓｎｏｗ Ｂｒａｎｄ ＳＮ−７０６、Ｓｎｏｗ Ｂｒａｎｄ ＳＮ−０７、ソランギシン−Ａ、スパルソマイシン、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−２１０２０、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−７３１３Ｂ、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−９８１６Ｂ、ステフィマイシンＢ、Ｔａｉｈｏ ４１８１−２、タリソマイシン、Ｔａｋｅｄａ ＴＡＮ−８６８Ａ、テルペンテシン、スラジン、トリクロザリンＡ、Ｕｐｊｏｈｎ Ｕ−７３９７５、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−１００２８Ａ、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＷＦ−３４０５、Ｙｏｓｈｉｔｏｍｉ Ｙ−２５０２４ゾルビシン、アルファ−カロテン、アルファ−ジフルオロメチル−アルギニン、アシトレチン、Ｂｉｏｔｅｃ ＡＤ−５、Ｋｙｏｒｉｎ ＡＨＣ−５２、アルストニン、アモナフィド、アンフェチニル、アムサクリン、Ａｎｇｉｏｓｔａｔ、アンキノマイシン、アンチネオプラストンＡ１０、アンチネオプラストンＡ２、アンチネオプラストンＡ３、アンチネオプラストンＡ５、アンチネオプラストンＡＳ２−１、Ｈｅｎｋｅｌ ＡＰＤ、アフィジコリングリシネート、アスパラギナーゼ、Ａｖａｒｏｌ、バッカリン、バトラシリン、ベンフルロン、ベンゾトリプト、Ｉｐｓｅｎ−Ｂｅａｕｆｏｕｒ ＢＩＭ−２３０１５、ビサントレン、Ｂｒｉｓｔｏ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−４０４８１、Ｖｅｓｔａｒ ボロン−１０、ブロモホスファミド、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＢＷ−５０２、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＢＷ−７７３、カラセミド、カルメチゾール塩酸塩、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＣＤＡＦ，クロルスルファキノキサロン、Ｃｈｅｍｅｘ ＣＨＸ−２０５３、Ｃｈｅｍｅｘ ＣＨＸ−１００、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９２１、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９３７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９４１、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９５８、クランフェヌール（ｃｌａｎｆｅｎｕｒ）、クラビリデノン、ＩＣＮ化合物１２５９、ＩＣＮ化合物４７１１、Ｃｏｎｔｒａｃａｎ、Ｙａｋｕｌｔ Ｈｏｎｓｈａ ＣＰＴ−１１、クリスナトール、クラダーム（ｃｕｒａｄｅｒｍ）、サイトカラシンＢ、シタラビン、シトシチン、Ｍｅｒｚ Ｄ−６０９、ＤＡＢＩＳマレエート、ダカルバジン、ダテリプチニウム（ｄａｔｅｌｌｉｐｔｉｎｉｕｍ）、ジデムニン−Ｂ、ジヘマトポルフィリンエーテル、ジヒドロレンペロン、ジナリン、ジスタマイシン、Ｔｏｙｏ Ｐｈａｒｍａｒ ＤＭ−３４１、Ｔｏｙｏ Ｐｈａｒｍａｒ ＤＭ−７５、Ｄａｉｉｃｈ Ｓｅｉｙａｋｕ ＤＮ−９６９３、エリプラビン、エリプチニウムアセテート、Ｔｓｕｍｕｒａ ＥＰＭＴＣ、エルゴタミン、エトポシド、エトレチネート、フェンレチニド、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＲ−５７７０４、硝酸ガリウム、ゲンクワダフニン（ｇｅｎｋｗａｄａｐｈｎｉｎ）、Ｃｈｕｇａｉ ＧＬＡ−４３、Ｇｌａｘｏ ＧＲ−６３１７８、グリフォランＮＭＦ−５Ｎ、ヘキサデシルホスホコリン、Ｇｒｅｅｎ Ｃｒｏｓｓ ＨＯ−２２１、ホモハリングトニン、ヒドロキシ尿素、ＢＴＧ ＩＣＲＦ−１８７、イルモフォシン、イソグルタミン、イソトレチノイン、Ｏｔｓｕｋａ ＪＩ−３６、Ｒａｍｏｔ Ｋ−４７７、Ｏｔｓｕｋａ Ｋ−７６ＣＯＯＮａ、Ｋｕｒｅｈａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｋ−ＡＭ、ＭＥＣＴ Ｃｏｒｐ ＫＩ−８１１０、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ Ｌ−６２３、ロイコレグリン、ロニダミン、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ ＬＵ−２３−１１２、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−１８６６４１、ＮＣＩ（ＵＳ）ＭＡＰ、マリシン、Ｍｅｒｒｅｌ Ｄｏｗ ＭＤＬ−２７０４８、Ｍｅｄｃｏ ＭＥＤＲ−３４０、メルバロン、メロシアニン誘導体、メチルアニリノアクリジン、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ＭＧＩ−１３６、ミナクチビン、ミトナフィド、ミトキドン、モピダモール、モトレチニド、Ｚｅｎｙａｋｕ Ｋｏｇｙｏ ＭＳＴ−１６、Ｎ−（レチノイル）アミノ酸、Ｎｉｓｓｉｎ Ｆｌｏｕｒ Ｍｉｌｌｉｇ Ｎ−０２１、Ｎ−アシル化−デヒドロアラニン、ナファザトロム、Ｔａｉｓｈｏ ＮＣＵ−１９０、ノコダゾール誘導体、Ｎｏｒｍｏｓａｎｇ、ＮＣＩ ＮＳＣ−１４５８１３、ＮＣＩ ＮＳＣ−３６１４５６、ＮＣＩ ＮＳＣ−６０４７８２、ＮＣＩ ＮＳＣ−９５５８０、オクトレオチド、Ｏｎｏ ＯＮＯ−１１２、オキザノシン、Ａｋｚｏ Ｏｒｇ−１０１７２、パンクレアチスタチン、パゼリプチン、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１１１７０７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１１５９３４、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１３１１４１、Ｐｉｅｒｒｅ Ｆａｂｒｅ ＰＥ−１００１、ＩＣＲＴペプチドＤ、ピロキサントロン、ポリヘマトポルフィリン、ポリプレイック酸（ｐｏｌｙｐｒｅｉｃ ａｃｉｄ）、Ｅｆａｍｏｌポルフィリン、プロビマン、プロカルバジン、プログルミド、ＩｎｖｉｔｒｏｎプロテアーゼネキシンＩ、Ｔｏｂｉｓｈｉ ＲＡ−７００、ラゾキサン、Ｓａｐｐｏｒｏ Ｂｒｅｗｅｒｉｅｓ ＲＢＳ、レストリクチン−Ｐ、レテリプチン、レチノイン酸、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ ＲＰ−４９５３２、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ ＲＰ−５６９７６、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＳＫ＆Ｆ−１０４８６４、Ｓｕｍｉｔｏｍｏ ＳＭ−１０８、Ｋｕｒａｒａｙ ＳＭＡＮＣＳ、ＳｅａＰｈａｒｍ ＳＰ−１００９４、スパトール、スピロシクロプロパン誘導体、スピロゲルマニウム、Ｕｎｉｍｅｄ、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−５５４、ストリポルジノン、Ｓｔｙｐｏｌｄｉｏｎｅ、Ｓｕｎｔｏｒｙ ＳＵＮ ０２３７、Ｓｕｎｔｏｒｙ ＳＵＮ ２０７１、スーパオキシドジスムターゼ、Ｔｏｙａｍａ Ｔ−５０６、Ｔｏｙａｍａ Ｔ−６８０、タキソール、Ｔｅｉｊｉｎ ＴＥＩ−０３０３、テニポシド、タリブラスチン、Ｅａｓｔｍａｎ Ｋｏｄａｋ ＴＪＢ−２９、トコトリエノール、Ｔｏｐｏｓｔｉｎ、Ｔｅｉｊｉｎ ＴＴ−８２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−０１、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−１０２８、ウクライン、Ｅａｓｔｏｍａ Ｋｏｄａｋ ＵＳＢ−００６、硫酸ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンストラミド、ビノレルビン、ビン
トリプトール、ビンゾリジン、ウィザノリド、Ｙａｍａｎｏｕｃｈｉ ＹＭ−５３４、ウログアニリン、コンブレタスタチン、ドラスタチン、イダルビシン、エピルビシン、エストラムスチン、シクロホスファミド、９−アミノ−２−（Ｓ）−カンプトテシン、トポテカン、イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）、エクセメスタン、デカペプチル（トリプトレリン）またはオメガ−３−脂肪酸。
【００４７】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型との組み合わせ療法に使用してよい放射線保護剤の例はＡＤ−５、アドクノン、アミホスチン類縁体、デトックス、ジメスナ、１−１０２、ＭＭ−１５９、Ｎ−アシル化−デヒドロアラニン、ＴＧＦ−Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、チプロチモド、アミホスチン、ＷＲ−１５１３２７、ＦＵＴ−１８７、ケトプロフェン経皮用、ナブメトン、スーパーオキシドジスムターゼ（Ｃｈｉｒｏｎ）およびスーパーオキシドジスムターゼＥｎｚｏｎを包含する。
【００４８】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はまた血管形成関連の障害または状態、例えば腫瘍生育、転移、黄斑変性およびアテローム性動脈硬化症の治療または予防においても有用である。
【００４９】
別の実施形態においては、眼科の障害または状態、例えば緑内障の治療または予防のための治療組み合わせが提供される。例えば本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は緑内障に罹患している患者の眼圧を低減する薬剤との治療組み合わせ中に有利に使用される。このような眼圧低下剤にはラタノプロスト、トラボプロスト、ビマトプロストまたはウノプロストールが包含される。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型＋眼圧低下剤の治療組み合わせは、各々がその作用を異なる機序に作用させることにより達成すると考えられているため、有用である。
【００５０】
本発明の別の組み合わせにおいて、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は抗高脂血剤またはコレステロール低下剤、例えばベンゾチエピンまたはベンゾチアゼピン抗高脂血剤との治療組み合わせ中に使用できる。本発明の治療組み合わせにおいて有用なベンゾチエピン抗高脂血剤の例は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許５,９９４,３９１に記載されている。ベンゾチアゼピン抗高脂血剤の一部はＷＯ９３／１６０５５に記載されている。あるいは、本発明の化合物との組み合わせにおいて有用な抗高脂血剤またはコレステロール低下剤はＨＭＧ Ｃｏ−Ａ還元酵素阻害剤であることができる。本発明の治療組み合わせにおいて有用なＨＭＧ ＣＯ−Ａ還元剤阻害剤の例は、個々に、ベンフルオレクス、フルバスタチン、ロバスタチン、プロバスタチン、シンバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ベルバスタチン、ＺＤ−９７２０（ＰＣＴ出願ＷＯ９７／０６８０２記載）、ＺＤ−４５２２（カルシウム塩はＣＡＳ Ｎｏ．１４７０９８−２０−２；ナトリウム塩はＣＡＳ Ｎｏ．１４７０９８−１８−８；欧州特許ＥＰ５２１４７１に記載）、ＢＭＳ１８０４３１（ＣＡＳ Ｎｏ．１２９８２９−０３−４）またはＮＫ−１０４（ＣＡＳ Ｎｏ．１４１７５０−６３−２）を包含する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型＋抗高脂血剤またはコレステロール低下剤の治療組み合わせは例えば血管内のアテローム性動脈硬化性の病変の形成の危険性を低減する場合に有用である。例えばアテローム性動脈硬化性の病変は血管の炎症部位から生じる場合が多い。抗高脂血剤またはコレステロール低下剤は血中の脂質濃度を低下させることによりアテローム性動脈硬化性の病変の形成の危険性を低減する。単一の作用機序に本発明を限定しないが、本発明の組み合わせのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型の１つの態様は、協調して作用し、例えば血中脂質濃度の低下と同調した血管の炎症の低減によって、アテローム性動脈硬化性の病変の進歩した制御をもたらすと考えられる。
【００５１】
本発明の別の実施形態においては、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型は中枢神経の状態または障害、例えば偏頭痛の治療のための他の化合物または治療法と組み合わせて使用できる。例えば、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型はカフェイン、５−ＨＴ−１Ｂ／１Ｄアゴニスト（例えばトリプタン、例えばスマトリプタン、ナラトリプタン、ゾルミトリプタン、リザトリプタン、アルモトリプタンまたはフロバトリプタン）、ドーパミンＤ４拮抗剤（例えばソネピプラゾール）、アスピリン、アセトアミノフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ナプロキセンナトリウム、イソメテプテン、ジクロラルフェナゾン、ブタルビタール、麦角アルカロイド（例えばエルゴタミン、ジヒドロエルゴタミン、ブロモクリプチン、エルゴノビン、または、メチルエルゴノビン）、３環系抗欝剤（例えばアミトリプチリンまたはノルトリプチリン）、セロトニン拮抗剤（例えばメチセルギドまたはシプロヘプタジン）、ベータ−アドレナリン拮抗剤（例えばプロプラノロール、チモロール、アテノロール、ナドロールまたはメトプロロール）またはモノアミンオキシダーゼ阻害剤（例えばフェネルジンまたはイソカルボキサジド）との治療組み合わせ中に使用できる。
【００５２】
別の実施形態は本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型とオピオイド化合物の治療組み合わせを提供する。この組み合わせに有用なオピオイド化合物は、例えば、モルヒネ、メタドン、ヒドロモルホン、オキシモルホン、レボルファノール、レバロルファン、コデイン、ジヒドロコデイン、ジヒドロヒドロキシコデイノン、ペンタゾシン、ヒドロコドン、オキシコドン、ナルメフェン、エトルフィン、レボルファノール、フェンタニル、スフェンタニル、ＤＡＭＧＯ、ブトルファノール、ブプレノルフィン、ナロキソン、ナルトレキソン、ＣＴＯＰ、ジプレノルフィン、ベータ−フナルトレキサミン、ナロキソナジン、ナロルフィン、ペンタゾシン、ナルブフィン、ナロキソンベンゾイルヒドラゾン、ブレマゾシン、エチルケトサイクラゾシン、Ｕ５０,４８８、Ｕ６９,５９３、スピラドリン、ノル−ビナルトルフィミン、ナルトリンドール、ＤＰＤＰＥ、［Ｄ−ｌａ2，ｇｌｕ4］デルトルフィン、ＤＳＬＥＴ、メト−エンケファリン、ロイ−エンケファリン、ベータ−エンドルフィン、ダイノルフィンＡ、ダイノルフィンＢおよびαネオエンドルフィンを包含する。オピオイド化合物との本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型の組み合わせの好都合な点は、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩ＩＩ型がオピオイド化合物の用量を低減し、これにより、オピオイド中毒のようなオピオイドの副作用の危険性や重症度を低減できる点である。
【００５３】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の製造方法は参照により本明細書に組み込まれる、同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載されている。
【００５４】
慨すればＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の合成は以下の実施例１に記載する通り実施してよい。
【００５５】
実施例１
【化１】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン、２塩酸塩
【００５６】
実施例−１Ａ）Ｎ−Ｂｏｃ−システアミン
【化２】
３Ｌ容の４口ＲＢフラスコを２０分間窒素パージし、次に順次、２−アミノエタンチオール塩酸塩（１１３．６ｇ、１モル）、ジ−ｔ−ブチル−ジカーボネート（２１８．３ｇ、１モル）およびトルエン５００ｍｌを添加した。混合物を氷水バスで冷却し、１０分間窒素パージした。水酸化ナトリウム（２．５Ｎ、８８０ｍｌ、２．２モル）を０℃〜１１℃で約１．５時間内に攪拌混合物に添加した。水酸化ナトリウムの添加が終了した後、冷却バスを除去し、得られた反応混合物を室温に戻し、一夜周囲温度で攪拌した。これにより表題化合物の溶液を得た。
【００５７】
実施例−１Ｂ）
【化３】
実施例−１Ａの生成物溶液を氷水バス中で冷却した。クロロアセトン（１０１．８ｇ、１．１モル）の試料を８℃〜１１℃で約５０分かけて激しく攪拌した反応混合物に添加した。クロロアセトンの添加が終了した後、冷却バスをはずし、得られた反応混合物を一夜室温で攪拌した。トルエン層を分離し、水（２５０ｍｌ）で洗浄し、ハウス真空下、次いで高真空下に８５℃でロータリーエバポレーター上で濃縮し、粗製の表題化合物（２２５．７ｇ、９６．７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ (ＣＤＣｌ3, ４００ＭＨｚ) δ ４．９５ (ｂｓ, １Ｈ), ３．２０ (ｍ, ４Ｈ), ２．５４ (ｔ, ２Ｈ), ２．２０ (ｓ, ３Ｈ), １．３５ (ｓ, ９Ｈ)。
【００５８】
実施例−１Ｃ）［２−［［（４−メチル−２，５−ジオキソ−４−イミダゾリジニル）メチル］チオ］エチル］カルバミン酸、１，１−ジメチルエチルエステル
【化４】
オーバーヘッド攪拌機、熱電対および空フラスコと苛性アルカリトラップに連結したコンデンサーを備えた３Ｌ容の４口ＲＢフラスコに、実施例−１Ｂの生成物（７０ｇ、０．３モル）、無水エタノール（８０ｍｌ）、シアン化ナトリウム（１９．１ｇ、０．３９モル）、炭酸アンモニウム（４３．３ｇ、０．４５モル）および水（７２０ｍｌ）をこの順序で添加した。４つ目の口を蓋で閉鎖した。得られた反応混合物を６時間６７〜６８℃に加熱した。その後ほぼ透明な茶色溶液を室温に冷却した。冷却により固体が形成し始め、そして非均質な混合物を一夜室温で攪拌した。次に反応混合物を−２℃〜２℃で約１時間、ｐＨ２にまで１２％塩酸で酸性化した。冷反応混合物を更に３０分間ｐＨ２で攪拌し、次に濾過した。フラスコを蒸留水（２ｘ２５０ｍｌ）ですすぎ、各すすぎ液を用いて固体ケーキを洗浄した。固体を再度蒸留水（２ｘ２５０ｍｌ）で洗浄し、次に４日間風乾した。乾燥した固体を０．５時間トルエン２００ｍｌで磨砕した。スラリーを濾過した。固体を順次、トルエン（５０ｍｌ）およびトルエン／ヘキサンの１：４比（１００ｍｌ）ですすぎ、次に一夜室温で風乾して表題化合物を８３．１％収率で得た。融点１３４〜１３６℃。
1Ｈ ＮＭＲ(ＤＭＳＯd6, ４００ＭＨｚ) δ １０．６２ (ｓ，１Ｈ), ７．８５ (ｓ, １Ｈ), ６．８３ (ｍ, ０．９Ｈ), ６．４８ (ｂｓ，０．１Ｈ), ３．２９ (ｓ, ２Ｈ), ２．９９ (ｍ, ２Ｈ), ２．７１ (ｓ, ２Ｈ), ２．９５ (ｍ, ２Ｈ), １．３２ (ｓ, ９Ｈ), １．２４ (ｓ, ３Ｈ)；13Ｃ ＮＭＲ(ＤＭＳＯd6, ４００ＭＨｚ）δ １７８．１, １５７．１, １５６．１, ７８．４, ６３．７, ４０．７, ３９．４, ３３．２, ２８．９, ２３．８。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓについての分析：
計算値：Ｃ，４７．５１；Ｈ，６．９８；Ｎ，１３．８５；Ｓ，１０．５７
測定値：Ｃ，４７．７６；Ｈ，６．８８；Ｎ，１３．７７；Ｓ，１０．７５
【００５９】
実施例−１Ｄ）ＲおよびＳ−［２−［［（４−メチル−２，５−ジオキソ−４−イミダゾリジニル）メチル］チオ］エチル］カルバミン酸、１，１−ジメチルエチルエステル
【化５】
実施例−１Ｃの反応生成物をメタノールを溶離剤としてＣｈｉｒａｌｐａｋ(R) ＡＤカラム上でそのＲおよびＳエナンチオマーに分離した。Ｓ異性体が最初に溶出する異性体であり、その後、Ｒエナンチオマーが得られた。両方の異性体を用いてその後の変換を行った。
Ｓエナンチオマー：
２５℃、ＭｅＯＨ中の［α］＝＋４３．０（３６５ｎｍ）。
1ＨＮＭＲ : (４００ｍＨｚ, ＣＤ3ＯＤ）δ１．４９(ｓ, ９Ｈ), ２．０５ (ｓ, ３Ｈ), ２．６５ (ｔ, ２Ｈ), ２．９（ｑ, ２Ｈ, ｄ), ３．２０ (ｍ, ２Ｈ)。ＩＲ：λｃｍ-1＝１７７２，１７０９。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓ（分子量：３０３．３８）についての分析：
計算値：Ｃ，４７．５１；Ｈ，６．９８；Ｎ，１３．８５
測定値：Ｃ，４７．３９；Ｈ，６．６２；Ｎ，１３．８３
Ｍ＋Ｈ＝３０４
Ｒエナンチオマー：
２５℃、ＭｅＯＨ中の［α］＝−４６．３（３６５ｎｍ）。
1ＨＮＭＲ : (４００ｍＨｚ, ＣＤ3ＯＤ) δ １．４８ (ｓ, ９Ｈ), ２．０５ (ｓ, ３Ｈ), ２．６５ (ｔ, ２Ｈ), ２．８５ (ｑ, ２Ｈ, ｄ), ３．１８ (ｍ, ２Ｈ)。ＩＲ：λｃｍ-1＝１７７０，１７１１。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓ（分子量：３０３．３８）についての分析：
計算値：Ｃ，４７．５１；Ｈ，６．９８；Ｎ，１３．８５
測定値：Ｃ，４８．１５；Ｈ，７．０４；Ｎ，１４．３７
Ｍ＋Ｈ＝３０４
【００６０】
実施例−１Ｅ）Ｓ−（２−アミノエチル）−２−メチル−Ｌ−システイン
【化６】
【００６１】
酸加水分解法：
蒸留コンデンサー付の５００ｍｌ容の３口丸底フラスコに実施例−１ＤのＲ異性体生成物（４５．８ｇ、１５０．９ミリモル）を添加し、そして攪拌しながら室温で４８％水性ＨＢｒ（１６０ｍｌ）で少しずつ処理した。ガス発生が停止した後、マントルヒーターを用いてポット温度が１２６℃に達するまで混合物を加熱し、その間、揮発性の臭化ｔ−ブチル（沸点７２〜７４℃）、次いで少量の水性ＨＢｒ（約１５ｍｌ）を留去した。蒸留コンデンサーを還流コンデンサーと交換し、そして混合物を３０時間還流下に加熱した。溶液を濃縮し、残留物を水（２５０ｍｌ）に溶解し、そして、Ｄｏｗｅｘ(R)５０ＷＸ４−２００イオン交換樹脂（８．５ｘ１１ｃｍ）にロードし、水（２Ｌ）、次いで希水酸化アンモニア水溶液（２８〜３０％の水酸化アンモニウム３０ｍｌを水で１０００ｍｌに希釈、３Ｌ）で溶離した。所望の生成物を含有する画分を合わせ、濃縮し、２時間７５〜８０℃で真空下に乾燥し、白色固体として表題化合物Ｓ−（２−アミノエチル）−２−メチル−Ｌ−システイン２２．１ｇ（８２％）を得た。プロトン及びＣ−１３ＮＭＲスペクトルは、表題化合物と一致した。融点１５７℃。
1Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨＺ, Ｄ2Ｏ) δ １．１９ (３Ｈ, ｓ), ２．５３（１Ｈ, ｄ, Ｊ＝１３．６Ｈｚ), ２．５７−２．７２（２Ｈ, ｍ), ２．９２（１Ｈ, ｄ, Ｊ＝１３．６Ｈｚ), ２．９２ (２Ｈ, ｔ, Ｊ＝６．８Ｈｚ)；13Ｃ ＮＭＲ (１００ＭＨｚ, Ｄ２Ｏ)
δ２４．７, ３１．３, ３８．９, ４０．９, ５９．６, １８０．７。
Ｃ6Ｈ14Ｎ2Ｏ2Ｓ＋０．１Ｈ2Ｏについての分析：
計算値：Ｃ，４０．０２；Ｈ，７．９５；Ｎ，１５．５６；Ｓ，１７．８１
測定値：Ｃ，３９．９３；Ｈ，７．９８；Ｎ，１５．３８；Ｓ，１７．７０
【００６２】
塩基加水分解法：
攪拌機を装着したステンレス製のオートクレーブに実施例−１ＤのＲ異性体生成物２４．２ｇ（０．０８モル）を添加した。装置を窒素パージした後、１０％苛性ソーダ１２８ｇ（０．３２モル）を添加して溶液とした。オートクレーブを密封し、３０時間１２０℃に加熱した。室温に冷却した後、オートクレーブを排気して表題化合物のナトリウム塩の水溶液１４２ｍｌ（１５１ｇ）を得た。Ｈ1ＮＭＲ（試料をＨＣｌで酸性化し、Ｄ2Ｏで希釈、４００ＭＨｚ）：Ｈ1ＮＭＲ (試料をＨＣｌで酸性化し、Ｄ2Ｏで希釈, ４００ＭＨｚ)：δ １．４７ (ｓ, ３Ｈ), ２．７５ (ｍ, ２Ｈ), ２．９０ （ｄ, １Ｈ, Ｊ＝１４．８Ｈｚ), ３．０６ (ｔ, ２Ｈ, Ｊ＝６．４Ｈｚ), ３．１４ (ｄ, １Ｈ, Ｊ＝１４．８Ｈｚ)。Ｃ13 ＮＭＲ (試料をＨＣｌで酸性化し、Ｄ2Ｏで希釈, １００ＭＨｚ)：δ １７２．９, ６０．８, ３９．１, ３９．０, ３０．４, ２２．２。ＭＳ(ＭＳ／ＣＩ−ＬＣ) Ｍ＋１ １７９。
【００６３】
ＤＢＵ（２１８μＬ；１．４６ミリモル）およびエチルアセトイミデート塩酸塩（１７１ｍｇ；１．３４ミリモル）を室温（〜２０℃）で２５ｍｌ容の１口丸底フラスコ中エタノール（６ｍｌ）に溶解した。実施例−１Ｅの表題化合物（２００ｍｇ;１．１２ミリモル）をこの溶液に１回で添加した。実施例−１Ｅの表題化合物が消費されるまで（１〜２時間）混合物を攪拌した。混合物をアイスバス中で冷却し、次に６ＭＨＣｌ（８３０μＬ）で処理した。1ＨＮＭＲ分析によれば化学収率は９５モル％以上であった。溶媒を蒸発させ、実施例−１の表題化合物を逆相またはイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。
【００６４】
塩基加水分解反応産物の実施例−１Ｅの表題化合物約２０ｇを含有する溶液２１０ｇｍを５００ｍｌ容の３口丸底フラスコ内に投入した。装置にメカニカルスターラー、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置（２０ｍｌ容、コック付）、コンデンサーおよび温度コントローラーを装着した。混合物から水（１４０ｍｌ）を留去した。１−ブタノール（１５０ｍｌ）をポットに添加し、残余の水（３７ｍｌ）を共沸蒸留した。ポット温度が１１７℃になるまで蒸留により更に１−ブタノール（１３ｍｌ）を除去した。ブタノールスラリーを室温に冷却し、セライトパッドで濾過した。塩を１−ブタノール（２ｘ２０ｍｌ）で洗浄した。ＤＢＵ（２１．８μＬ；１４６ミリモル）およびエチルアセトイミデート塩酸塩（１７．１ｍｇ；１３４ミリモル）を室温で５００ｍＬ容の３口丸底フラスコ中の１−ブタノール（４０ｍｌ）に溶解した。装置にメカニカルスターラー、添加漏斗および温度プローブを装着した。実施例−１Ｅの表題化合物／１−ブタノール溶液を添加漏斗に入れ、ポット温度を２５℃未満に維持しながらエチルアセトイミデート／ＤＢＵの溶液に添加した。出発物質が消費されるまで（２〜３時間）混合物を攪拌した。濃塩酸（９４ｍｌ）および水（１００ｍｌ）の溶液を１Ｌの３口丸底フラスコにいれ、０℃に冷却した。装置にメカニカルスターラー、添加漏斗および温度プローブを装着した。反応混合物を添加漏斗に入れた。反応混合物をＨＣｌ水溶液に添加し、その間、温度を２５℃未満に維持した。酢酸エチル（１００ｍｌ）を溶液に添加し、層を分離させた。水層を再度酢酸エチル（１００ｍｌ）で洗浄した。1ＨＮＭＲ分析によれば化学収率は９５モル％以上であった。実施例−１のこの表題化合物を逆相、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、またはそれらの組み合わせにより精製した。
1ＨＮＭＲ (４００ＭＨｚ, Ｄ2Ｏ) δ １．４９ (３Ｈ, ｓ), ２．０８ (３Ｈ, ｓ), ２．７４ (２Ｈ, ｍ), ２．９１（１Ｈ, ｄ), ３．１７（１Ｈ，ｄ）, ３．３５ (２Ｈ, ｔ)。
【００６５】
実施例２：両性イオンの調製
本発明の１つの実施形態において、過剰な酸はアニオン交換樹脂を用いてＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩から除去してよい。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのモノヒドロクロロ、遊離の両性イオンまたは他の部分的酸誘導体がアニオン交換樹脂を用いて調製できることが更に発見された。アニオン交換法はその単純性のため、１塩酸塩および遊離の両性イオンを調製するために好適である。０．５当量未満の酸および低過剰の塩を有するＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは別の塩の形態の医薬の製造のために特に有用である。
【００６６】
図１は化合物滴定曲線の略図である。親のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子は３つイオン化可能な基を有し、そして、４つのイオン化状態で存在できる。
【００６７】
低ｐＨにおいては、分子は＋２荷電の遊離の酸として存在し、カルボン酸、アミンおよびアミジン部分はプロトン化されている。これは２塩酸塩のイオン化状態である。
【００６８】
ｐＨが上昇するに従い、カルボン酸基は脱プロトン化される最初の基となり、そしてこれにより＋１の分子上の実質電荷がもたらされる。ｐＨの上昇がＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインへの水酸化ナトリウムの添加により生じる場合は、ナトリウムの２塩酸塩が形成される。他の塩基はその相当する塩の形態を形成する。ｐＨの上昇がアニオン交換過程によるクロリドイオンの除去による場合は、生成物は、ナトリウムまたは他の対イオンを有さない１塩酸塩である。
【００６９】
ｐＨが更に上昇するに従い、アミン基は脱プロトン化（約ｐＫａ＝８．４）して分子の中性の両性イオン形態を生じる。正電荷はアミジン上になお残存し、負電荷はカルボキシル基上になお残存する。一方、このような物質が２塩酸塩への水酸化ナトリウムの添加により形成される場合は、得られる生成物は塩化ナトリウム１当量と混合されたモノヒドロクロロナトリウム塩である。アニオン交換樹脂法により製造された物質は遊離の両性イオンである。
【００７０】
更にｐＨが上昇すると、アミジンイオンの脱プロトン化が起こる（ｐＫａ〜１２．５）。このｐＨ範囲の分子は遊離の塩基および酸の塩である。負荷電された分子はアニオン交換樹脂に結合するため、遊離の塩基は好ましくはアニオン交換法では製造しない。
【００７１】
実施例３：遊離の両性イオンの調製
Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ４００（ＯＨ）樹脂６０ｇを４．７％（重量）の水酸化アンモニウム（２８％水酸化アンモニウム５０ｍｌ、脱イオン水２５０ｍｌ）で洗浄し、次いで、脱イオン水で十分洗浄した。最終電導度は６．１μＳであった。
【００７２】
ＨＣｌ／水の溶液１４２ｍｌ中Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約０．９ｇを含む試料を６０℃でロータリーエバポレーターで濃縮して油状物とした。脱イオン水で６０ｍｌに希釈したこの油状物に、攪拌しながら洗浄されたアニオン交換樹脂のアリコート０．５ｇを添加した。樹脂の各アリコートを添加した５分後、溶液のｐＨを測定し、試料をシリンジフィルターを介して採取した。合計で９ｇのアニオン交換樹脂を添加した。最終ｐＨは１０．８であった。樹脂を濾去し、濾液をロータリーエバポレーターで６０℃で濃縮して油状物とし、固体の形成はなかった。出発物質、最終濾液および全ての中間的な試料をＨＰＬＣおよびクロリドに関するイオンクロマトグラフィーにより試験した。
【００７３】
図２はｐＨを調節するためにアニオン交換樹脂を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの擬似滴定曲線を示す。ひし形（実線）はｐＨであり、四角（破線）はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン（初期値のパーセント、イオンクロマトグラフィーによる）である。図３はｐＨを調節するためにアニオン交換樹脂を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの擬似滴定曲線を示す。ひし形（実線）はｐＨであり、三角（破線）はクロリド（イオンクロマトグラフィーによる）である。
【００７４】
これらの曲線は、試料が反応の進行中に採取されたため、そして、樹脂の漸増量を添加する前には真の平衡は達成されていなかったため、真の滴定曲線ではない。しかしなお、図２および図３のグラフは予測された傾向を示していた。樹脂をＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン溶液に添加するに従い、ｐＨは上昇し、ｐＨ２、９および１１近傍の傾きが変化していた。より遅いｐＨ上昇はそれぞれ、カルボン酸、アミンおよびアミジン官能基のｐＫを表す。ｐＨ１０以上ではＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの溶液中の濃度は低下する。この時点でＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは実質の負電荷を獲得しており、樹脂に結合している。クロリドの結果は試料間のある程度の変動を示しているが、全般的にはｐＨ上昇に伴うクロリド含量の低下の傾向を示している。最終クロリド含量は約０．０４モル当量である。試料のＨＰＬＣ試験は分解を示さなかった。
【００７５】
実施例４：酸当量を調節するための過剰のＨＣｌの除去
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約３０５ｍｇ／ｍｌおよび０．２３当量の過剰のＨＣｌを含有する試料３．３ｇに、脱イオン水１６．７ｇを添加した。ｐＨは１．０４であった。この溶液１４ｍｌに、予め洗浄したＡｍｂｅｒｌｉｔｅ４００（ＯＨ）樹脂を添加し、ｐＨ２．５とした。アニオン交換処理により溶液の色は明黄色〜透明に明色化した。樹脂を濾去し、出発物質および濾液の生成物をクロリド滴定およびＨＰＬＣにより分析した。
出発物質および生成物のＨＰＬＣによる定性分析では新しいピークは観察されず、不純物の増加はなかった。滴定によるクロリド分析の結果は、クロリドが２．１８当量から約１．１４当量まで減少したことを示している。ここでは明示しないが、クロリドはＨＣｌ添加により所望の目標値に調整できる。
【００７６】
実施例５：遊離の両性イオンの調製
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約１ｇを含有する試料３．３ｇを２０ｇに希釈した。予備洗浄したＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ４００（ＯＨ）樹脂のアリコートを溶液に添加し、試料を定期的にシリンジフィルターを介して採取した。溶液中の樹脂を濾去し、次に濾液に新しい樹脂を添加し続けることにより、ｐＨ７．１および８．８で中間樹脂の濾過を実施した。これはクロリドの除去の平衡を促進し、生成物の吸着を最小限とするために実施した。１１．２の最終ｐＨが得られた後、樹脂を濾去した。出発物質、中間試料および最終濾液を分析した。
得られた試料をＨＰＬＣで分析した。出発物質と数時間以内のｐＨ１１での生成物のＨＰＬＣ結果の間には差はなかった。しかしながら、約１０日間室温で保存した後の高ｐＨ試料では、ある程度の分解ピークが約２〜３％のピーク面積で観察された。
【００７７】
実施例６：遊離の両性イオンの調製
ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲＡ４００（Ｃｌ）樹脂を３ＭＨＣｌ、水、次いで３ＭＮａＯＨですすいだ。アリコートは樹脂１０ｇ当たり１００ｍｌとした。この操作を３回反復することにより樹脂を清浄化し、ＯＨ型を形成した。水による最終のすすぎは、溶離した水の導電性が２μＳとなるまで行った。次に樹脂を用いてＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の５０ｍｇ／ｍｌ溶液４０ｍｌを滴定した。濃度を両性イオンの当量について表示した。滴定の間にわたりアリコートを採取し、濾過し、ＨＰＬＣで分析した。アリコートの部分試料を温存して第２のＨＰＬＣ分析用とし、滴定の１週間後に実施して試料の安定性を評価した。更に別のアリコートを採取してイオン選択性電極を用いたＣｌ分析に付した。ｐＨもまた滴定の間を通してモニタリングした。
【００７８】
この実施例で観察された結果は実施例３で観察された結果を反映していた。ここで使用したクロリド特異的な電極はＣｌ含量を測定するものであり、データのノイズははるかに小さかった（図４参照）。データはＣｌ９８％の除去においてｐＨ〜１０．８５が達成されることを示している。より多くのＣｌを除去できるが、それにより樹脂への化合物の結合が多大となる（図５参照）。樹脂結合に起因する化合物のこの損失は滴定の終わり頃に樹脂を濾過し、少量の新しい樹脂で交換することにより最小限にできる。この操作によりクロリドの除去の平衡が促進され、結合による化合物の損失に使用される部位を最小限にできる。
【００７９】
図４はＩＲＡ−４００アニオン交換樹脂（Ｒｏｈｍ＆Ｈａａｓ Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ，Ｒｈｏｍ＆Ｈａａｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａより入手可能）を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線を示す。図５はｐＨ上昇に伴う関連する結合データを示す。
【００８０】
ＨＰＬＣ分析はイオン対形成勾配法を用いて実施した。方法はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインを塩基性とした場合に予測される分解生成物の存在を検出することがわかっている。以下の表１からわかるとおり、データは分解は即時的に起っているのではなく、むしろ数日間の期間に渡り起こっていることを示している。
【００８１】
【表１】
【００８２】
ＨＰＬＣ法
ポンプＡ：２０ｍＭＫＨ2ＰＯ4、１０ｍＭペンタンスルホン酸、リン酸でｐＨ＝３に調製ポンプＢ：アセトニトリル
勾配：０分には０％Ｂ、１５分には２６％Ｂ、１５．１分には０％Ｂ
カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ１２０Ａ、５μｍ、２．６ｘ１５０ｍｍ
波長＝２０５ｎｍ
【００８３】
実施例７：過剰なＨＣｌの除去／モノヒドロクロロ［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの製造
これらの実施例において、クロリドの除去の工程はバッチ系において樹脂を攪拌することにより行ったが、これはプラント系においてもＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の溶液をアニオン交換樹脂カラムまたはアニオン交換膜に付して再循環させることにより容易に行える。ｐＨが偶発的に所望範囲を超えて上昇した場合は、適切な量のＨＣｌを添加することにより容易に戻すことができる。この目的のための大規模なアニオン交換工程を設計することは等業者の知るとおりである。
【００８４】
実施例８：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の結晶化
「ＯＨ」型のＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ−４００樹脂で滴定することにより水溶液から両性イオンを得た。溶液のｐＨが約ｐＨ１１にまで上昇するに従い、アニオン交換樹脂は塩酸塩を排除した。焼結ガラス漏斗を通した濾過により両性イオンの溶液から樹脂が除去された。この溶液を液体窒素で凍結し、凍結乾燥してガラス状の不定形の生成物を得た。乾燥ガラス状物の元素分析によれば、典型的に０．３％未満のクロリドが示されていた。
【００８５】
マレエート塩の初期の結晶化は、９０マイクロリットル（μｌ）の最終容量となるようにＨＰＬＣ等級の水で乾燥両性イオン３０ｇを溶解することにより行った。マレイン酸の溶液は、マレイン酸１．０５５グラムを用いて１０ｍｌ容のメスフラスコ中でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）で定容まで希釈することにより作成した。ＤＭＦ中のマレイン酸３００μｌを両性イオンの水溶液に攪拌しながら添加した。これは両性イオンの各当量に対しマレイン酸２当量であった。モレキュラーシーブ上で乾燥したアセトニトリルを溶液が濁るまで攪拌しながら滴加し、次に更に２〜３滴のアセトニトリルを添加した。溶液を週末を通じて攪拌した。得られたスラリーを偏光光学顕微鏡で検査した。正の伸長を示す複屈折の針状の結晶が観察された。固体を５．０μｍのＭｉｌｌｉｐｏｒｅＬＳフィルター上に収集し、４０℃で真空下に乾燥し、結晶性の生成物２８ｍｇを得た。わずか１当量のマレイン酸を用いた場合の相当する溶液はゲル状であった。
【００８６】
実施例９：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
その後の小規模の実験によれば、許容できる大規模化の条件が示された。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン両性イオン１．２１５グラムを水約３ｍｌに溶解した。マレイン酸１．２８３グラムおよびＤＭＦ１２ｍｌを攪拌しながら添加した。透明な溶液が急速に得られた。アセトニトリル１００Ｍｌを添加し、この時点で白濁している溶液に結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶種を添加した。１時間後、更にアセトニトリル１３ｍｌを添加した。スラリーを更に２時間攪拌し、次に結晶を数個のＭｉｌｌｉｐｏｒｅ５μｍＬＳフィルター上に収集した。極めて微小な粒径の濾過のため、比較的緩徐であった。固体をＭｉｌｌｉｐｏｒｅフィルター上でアセトニトリル少量を用いて洗浄した。これらの固体をビーカーに移し、４０℃で一夜真空乾燥した。
【００８７】
合計で５つの別の実施例を結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートに対して提示する。実施例は全て３元溶媒系（ＤＭＦ／水／アセトニトリル）において実施した。１モル過剰のマレイン酸を使用し、そしてＤＭＦ対水の比は約３：１の一定に維持した。結晶種添加の効率もまた一部の実施例において評価した。
【００８８】
実施例１０：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
凍結乾燥したＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン１．０ｇ、溶解したマレイン酸１．０５ｇを含むＤＭＦ１０ｍｌおよび水３．０ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、１２５ｒｐｍで攪拌して透明な溶液とした。アセトニトリル１００ｍｌをすぐに透明な溶液に添加し、その際、アリコートの添加により起こる白濁の大部分が次のアリコートの添加の前に治まるようにした。白濁した溶液の光学顕微鏡観察によれば、白濁は液相の分離（乳化）によるものであり、結晶核形成ではなかった。添加終了時にも溶液は白濁していた。溶液を一夜攪拌した。一夜保持する間に溶液は沈殿したが、スラリーの光学顕微鏡観察によれば固体は不定形であった。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種（３０ｍｇ）をスラリーに添加し、固体から結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートへの相変換を促進し、系を更に２４時間攪拌した。次にスラリーを約−１０℃に冷却し、更に２４時間攪拌することにより濾液中の生成物の損失を低減した。合計７２時間の後、スラリーを微小フリット焼結ガラス漏斗上で濾過し、ケーキをアセトニトリル４ｍｌで洗浄した。濾液はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン濃度約０．５重量％を有していた。固体を１時間風乾し、次に２４時間５０℃で真空オーブン中に入れた。固体は粉末Ｘ線回折およびＤＳＣの両方により結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートであったが、前者は最終固体中かなりの量の不定形の含量を示していた。
【００８９】
実施例１１：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
実施例１１は同じ溶媒組成および両性イオンのロード量で実施したが、アセトニトリルおよび結晶種の添加方法および保持時間は不定形の含量および処理時間を低減するために適正化した。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン５００ｍｇ、マレイン酸５０２ｍｇ、ＤＭＦ５ｍｌおよび水１．５ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、攪拌して透明な溶液とした。アセトニトリル３１ｍｌ（合計添加量の６３％）を実施例１０で使用した方法で間歇的に溶液に添加した。ほぼ全ての白濁が最初のアセトニトリル添加の終了後の攪拌１時間以内に治まった。次に溶液に１５ｍｇのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶を結晶種として添加し、そして、２時間攪拌した後、残余の１８ｍｌ（３７％）のアセトニトリルを添加した。スラリーを２４時間攪拌し、次に約−１０℃に冷却し、更に２４時間攪拌し、その後１５０ｍｌ容の微小フリット焼結ガラス漏斗上に排出した。ケーキをアセトニトリル４ｍｌで洗浄し、３０分間風乾し、次に５０℃で２４時間真空オーブン中に入れた。濾液中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの濃度は０．５５重量％であり、固体はＰＸＲＤによれば結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートであり、ベースラインのハローは一部不定形のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの存在を示していた。しかしながらハローは実施例１０の生成物の場合より顕著ではなかった。
【００９０】
実施例１２：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
実施例１２の目的はアセトニトリルの量を低減することにより工程のスループットを向上できる可能性について調べることである。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン０．９グラム、マレイン酸０．９３グラム、ＤＭＦ９ｍｌおよび水２．７ｍｌを１２５ｍｌ容量のジャケット付反応容器に添加し、透明な溶液が生じるまで攪拌した。アセトニトリル５６ｍｌを他の実施例と同様の方法で溶液に間歇的に添加した。アセトニトリルの添加の終了後に白濁全体が治まった時点でＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種２３ｍｇを添加した。系を１７５ｒｐｍで２４時間攪拌し、次にスラリーを１５０ｍｌの微小フリット焼結ガラス漏斗上に排出した。ケーキをアセトニトリル５ｍｌで洗浄し、４０分間風乾し、次に２４時間５０℃の真空オーブン中に入れた。生成物約６００ｍｇを乾燥後に回収した。濾液中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの濃度は約１．０重量％であった。生成物のＰＸＲＤ分析によれば不定形物質の含量は極めて低値であった。溶液のＮＭＲによれば生成物は０．１モル当量もの捕獲ＤＭＦを有していた。濾過の前およびオーブン乾燥後の光学顕微鏡によるスラリー中の固体の比較によれば、顕著な形態学的相違があった。
【００９１】
実施例１３：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
実施例１３は核形成を誘導するための補助として結晶種添加を排除できるかどうか調べるために実施した。この実験の操作法の残りの部分は実施例１２と同様である。生成物における濾液の濃度および固体状態の属性は結晶種を使用しなくても同等の性能が得られることを示していた。
【００９２】
実施例１４：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の別の結晶化
実施例１４は、実験３および４において使用した操作法の収率を、固体の大部分がすでに沈殿した後で冷却し、アセトニトリルを追加添加することにより改善できる可能性を調べるために実施した。操作では、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン１．０ｇ、マレイン酸１．０３ｇ、ＤＭＦ１０ｍｌおよび水３．０ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、攪拌して透明な溶液を形成した。アセトニトリル５６ｍｌを上記実施例と同様にして溶液に間歇的に添加した。アセトニトリル添加終了後、白濁が実質的に全て治まった後にＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種２８ｍｇを添加した。結晶種添加後最初の２時間以内に顕著な沈殿が起こり、スラリーはジャケット上で約−１０℃に冷却した。この温度で２４時間スラリーを攪拌した。
【００９３】
冷却中および保持期間の上澄みの分析によれば、濃度低下は僅かであり、従って、アセトニトリル２５ｍｌを添加することにより、逆溶媒（ａｎｔｉ−ｓｏｌｖｅｎｔ）添加が収率を改善するかどうか調べた。更にアセトニトリルを添加した後、スラリーを２５℃に戻し、更に２４時間攪拌した後に１５０ｍｌの微小フリット焼結ガラス漏斗上で排出した。ケーキはアセトニトリル５ｍｌで洗浄した。
【００９４】
以前に観察されたいずれのケーキとも異なり、本実施例のケーキは粘着性がありフィルター上で２時間風乾した後でさえも極めて湿潤していた。これらの固体を４時間加熱することなく真空オーブン中に入れ、余分な溶媒を除去した。その後２４時間真空オーブン中５０℃で乾燥した。濾液の濃縮によっても逆溶媒を更に添加することの有意な利点は観察されなかった。乾燥直後のこの実施例の固体のＰＸＲＤ分析によれば、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶と混合された不定形の固体が一部存在していた。
【００９５】
実施例１５：ＩＩ型の結晶の操作法
水、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびアセトニトリル（ＡＣＮ）を含む３元溶媒系はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのマレエート塩の結晶化のためのもっとも効果的な溶媒系であることがわかった。
元の３元溶媒系の新しい変形例を発見し、ＩＩ型を発見する工程において開発した。この操作法は、結晶核形成を誘導するための結晶種添加の必要性を排除することにより操作性を改善できるように更に検討した。ＩＩ型を作成する経路の説明は以下の通りである。
【００９６】
第１の操作法において、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２００ミリグラムおよびマレイン酸２０６ミリグラムをＤＭＦ０．８６ｍｌおよび水０．３ｍｌの混合物に溶解した。磁気ビーズを用いて攪拌することにより透明な溶液が得られた後で、ＡＣＮ５ｍｌを攪拌しながら間歇的に添加した。ＡＣＮ〜０．５ｍｌの各アリコートの添加の後、白濁が治まるまで十分な時間を置いた。ＡＣＮ添加終了後に透明な溶液が得られた。Ｉ型結晶種１０ミリグラムを添加して溶液の核形成を誘導した。スラリーを２４時間室温で攪拌した。これを３０ｍｌの微小フリット焼結ガラス漏斗で濾過した。ケーキをＡＣＮ２ｍｌで洗浄し、次に１０分間風乾した。風乾した固体の一部を２８インチＨｇ真空下６０℃で真空オーブン中乾燥した。風乾した固体はオーブン乾燥中に脱水したため、３０分未満の時間内にオーブンから取り出してＩＩ型に水和した。Ｉ型（結晶化誘導のため使用）は単離生成物中に検出されなかったという事実は、これらの結晶化条件下ではＩＩ型はＩ型よりも安定であることを示している。この操作法の収率は重量で約６５％と推定された。一次核形成の誘導時間はグラム未満のスケールでは約３０分であった。
【００９７】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩ型の特性化
偏光顕微鏡観察によれば正の伸長を示す複屈折の針状の結晶が、濾過による採取の前のスラリーにおいて、そして、４０℃で真空乾燥した後の単離生成物において観察された。
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩Ｉ型は９０％ＲＨおよび２５℃において水分吸収量は１重量％未満であり、１２３℃で融解する。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩Ｉ型は２３０ｍｇｍｌ-1超の水溶性を有する。
【００９８】
表２はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩Ｉ型の元素分析ならびに１．５％の水分含量の理論的組成を示す。
【表２】
【００９９】
プロトンＮＭＲはＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン両性イオンおよびマレイン酸の１：１の組み合わせの構造および化学量論的特徴と合致していた。プロトンＮＭＲもまた実施例８における０．２当量（３〜３．５％）のＤＭＦを示し、これは予測元素分析値を大きく変化させず、±０．４であった。
【０１００】
図６はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例９）の粉末Ｘ線パターンである。図７はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例８）の粉末Ｘ線パターンである。実施例８および実施例９は共に結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートを特徴付ける際に有用な特徴的ピークを示している。
【０１０１】
図８はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（１０．０４６ｍｇ、実施例９）の示差走査熱量試験のグラフである。図９はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（６．２１３０ｍｇ、実施例８）の示差走査熱量試験のグラフである。
【０１０２】
図１０はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（４．７６８０ｍｇ、実施例９）の熱重量分析プロットである。図１１はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例８）の熱重量分析プロットである。
【０１０３】
図１２はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの水分吸収試験のプロットである。
【０１０４】
図１３は結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートのラマンスペクトルを示す。慨すれば、ラマンスペクトルは分子または複合体系の振動の特徴である。その起源は分子と光線を含む光の粒子である光子との間の非弾性的な衝突にある。分子と光子の衝突はエネルギーの交換をもたらし、その結果エネルギーが変化し、これにより光子の波長が変化する。即ち、ラマンスペクトルは入射光により照射されるときに対象分子から発せられる極めて狭いスペクトルの線のセットである。各スペクトル線の幅は入射光のスペクトルの幅により大きく影響され、従って厳密に１色の光源、例えばレーザーを使用する。各ラマン線の波長は入射光からの波数シフトにより表示され、これはラマン線と入射光の波長の逆数の間の差である。吸収波長ではなく波数シフトはラマン線では分子内の特定の原子基に特異的である。ラマンスペクトルは分子の振動状態を測定するものであり、これはその分子構造により決定される。
【０１０５】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型の特性化
数種の大型結晶を、３週間に渡って７０／３０ｖ／ｖのＡＣＮ／水の溶媒混合物中５℃におけるＩ型およびＩＩ型の混合物をスラリー化することにより実施した相安定性試験から単離した。単位格子の化学量論的特徴は、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインとマレイン酸の各分子に対して水２1／2分子であることがわかっている。結晶構造は単結晶Ｘ線回折により解明されている。図１４はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型の単位格子を示す。空間群はＰ21（単斜晶系）であり、単位格子パラメーターはａ＝８．７００２、ｂ＝１９．０００９、ｃ＝８．５６２Å、α＝９０、β＝３４．４３９、γ＝９０°であった。構造はチャンネル水和物のものであり、水分子は短ｃ軸に沿って伸びるチャンネル中に位置している。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートについて単結晶構造から計算されたＸ線粉末パターンはＩＩ型について観察されたパターンに匹敵するものであった（図１５および図１６参照）。
【０１０６】
固体のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型は偏光顕微鏡によれば高度な結晶性を示し、結晶のサイズは２０マイクロメートルのオーダーであった。粒子は棒状であった。物理的方法により実施したＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型の元素分析によれば、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートのモル当たり水２．５モルの水和物に関する理論と極めて一致していた（表ＩＩ参照）。カールフィッシャーの水分測定では水分１０．９７％であったのに対し、２．５水和物の理論値は１１．８４％であった。
【０１０７】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型結晶塩の溶解度を５℃および２５℃において７０／３０および９０／１０ｖ／ｖのアセトニトリル／エタノール３Ａ混合物中で測定した。過剰な固体を１９日間適切な温度（振とう機バス中）においてこれらの溶媒中で平衡化させた。上澄みの試料を採取し、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの濃度についてＨＰＬＣで分析した。表４は結果をまとめたものである。溶媒系に存在するアセトニトリルの量が増大するに従って溶解度は顕著に低下したが、温度による作用は２０°の範囲ではほぼ無視できるものであった。
【０１０８】
【表３】
【０１０９】
過剰な（１モル当量）マレイン酸の存在下および非存在下の７０／３０ｖ／ｖアセトニトリル／水中、および、１モル当量過剰マレイン酸存在下の９０／１０ｖ／ｖアセトニトリル／水中における５℃でのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型結晶塩の溶解度を調べるために試験を試みた。３本全ての実験バイアルは、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩約９０ｍｇおよびマレイン酸３０ｍｇを二元溶媒約３００ｍｇに添加することにより調製した。次にこれらのバイアルを５℃の振とう機バスに入れた。４日間の平衡化の後にバイアルを観察したところ、系は、単一の液相中の固体の懸濁液から懸濁固体を含まない２相の液体に変化していた。３バイアルの各々の２層を、水分含量（カールフィッシャー分析による）および化合物濃度に関して分析した。表４に結果をまとめる。アセトニトリルリッチ（上部）の層における化合物の濃度のみがＫＦ分析に基づいて計算された組成を有する溶媒系中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート塩の真の溶解度を表していた。上層の測定濃度を導く厳密な条件は過剰のマレイン酸の分配が２層の間で確立された場合にのみ確立されるということが重要である。下層（水リッチ）は過剰な固体が残存していなかったことから、飽和未満であった可能性が高い。この可能性は、濃度が全ての実験にわたり極めて同様であることがわかった下層に関する溶解度のデータにより裏付けられる。過剰のマレイン酸の存在下の７０／３０アセトニトリル／水のバイアルは１９日後においても２層のままであったのに対し、過剰のマレイン酸の非存在下の７０／３０アセトニトリル／水は５日後には極めて大型の結晶がなお２層のままと思われる溶液中に浮遊していた。この実験を終了し、固体を単離して特性化したところ、ＩＩ型であることがわかった。これらの結晶を用いて結晶学的データを得た。５℃で１９日間平衡化した後、過剰なマレイン酸存在下の９０／１０アセトニトリル／水のバイアルは単一の液相の固体のスラリーに戻っていた。固体を単離し、ＩＩ型であることがわかり、そして溶液相中の濃度を測定したところ、０．６１３重量％のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインであった。過剰なマレイン酸存在下の７０／３０バイアルが２相のままであり、そしてより重要な点として再結晶した固体がなかったという事実は、過剰なマレイン酸（過剰なマレイン酸非存在下の７０／３０バイアルと比較）および高値の水分含量（過剰なマレイン酸存在下の９０／１０バイアルと比較）に起因する高値の溶解度が原因であると思われる。同じく興味深い点は、２相溶媒系からの結晶化が起こった２つのバイアルは単離の時点ではその内部にＩＩ型結晶を有していた点である。この観察結果は水分活性水和状態の相のダイアグラムから期待されるものと合致しており、過剰のマレイン酸は固体形態の安定性に影響しないと推測される。
【０１１０】
【表４】
【０１１１】
溶解度試験の最終セットはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）／水／アセトニトリル（ＡＣＮ）の３元溶媒系において実施した。この系を試験した理由は、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート塩を結晶化することの早期の成功例の大部分がこの溶媒混合物中であったためである。実験は全て１モル当量過剰量のマレイン酸を使用し、選択した溶媒組成は１５／１５／７０、５／５／９０、２０／１０／７０、６．６／３．４／９０、２２．５／７．５／７０、７．５／２．５／９０ｖ／ｖＤＭＦ／水／ＡＣＮとした。実験は２５℃においてこれらの組成の最後の４つについてのみ実施したが、データは５℃における組成に関して収集した。上澄みは４日後および１９日後に分析した。平衡化した固体もまた、大部分の実験では１９日後に単離して特性化した（表５参照）。固体を単離した溶媒形における７０％ＡＣＮを用いた実験の全ては１９日の間にＩ型からＩＩ型への完全な変換がもたらされたのに対し、溶媒系中で９０％ＡＣＮを用いた数実験は平衡化期間の後に固体状態として元のＩ型を保持していた。後者はＤＭＦの添加によりこれらの組成物の水分活性が更に低下したことに起因するものと考えられ、系は、Ｉ型がより安定である状態に向かう傾向を有していた。しかしながら７．５／２．５／９０ＤＭＦ／水／ＡＣＮ系の固体状態のデータはこの傾向を欠いており、入手できる情報が限定されているため説明が困難である。表５は４日および１９日の平衡化の後の、５℃及び２５℃における全ての実験から得たＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの重量％における濃度データを示している。もっとも顕著な傾向は、系のＡＣＮ含量が９０％から７０％に低下した場合に溶解度が大きく上昇する点である。全ての実験にわたり、溶解度についてはある程度の温度依存性もあった。固定されたＡＣＮ含量でデータを分析した場合、溶解度は初期は低下し、その後は、系のＤＭＦ含量が水の消費により上昇するに従って、上昇すると考えられる。この傾向は７０および９０％ＡＣＮの両方について維持されていると考えられる。最も安定な形態への完全な相変換はこれらの実験の全てにおいて起こったかもしれないが、表５で報告した溶解度の値は平衡にはなっていないと考えられ、これは、超飽和から常時緩徐に達成される（ＩＩを形成する変換が起こった全ての実験の場合と同様）。総括すれば、本溶媒系は複雑であるが、特にＩＩ型のための結晶化工程の設計につながる溶媒組成の範囲を与えている。
【０１１２】
【表５】
【０１１３】
【表６】
【０１１４】
図１７に示す通り、示差走査熱量分析（ＤＳＣ）は単一の共融点（水）を７７．６９℃に示した。熱重量分析（ＴＧＡ）によれば、重量損失は４５と８５℃との間では８．８％であった。ＴＧ−ＩＲは重量の損失は全て水分の損失に起因することを示していた（図１８参照）。８．８％の損失はＫＦで測定した水の値より低値であるが、これはこの性質の水和物については合理的に近似している。
【０１１５】
プロトンＮＭＲ分析をＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）に対して実施することにより、この形態が結晶化過程においてＤＭＦを捕獲したかどうかを調べた。データは結晶中に検出可能なＤＭＦが存在しないことを示している。
【０１１６】
図１９に示す通り、ＤＶＳ水分バランスによれば２５℃におけるＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の水分吸収は、水和物は総体湿度（ＲＨ）を０％に低下させることにより比較的容易に脱水されることを示していた。しかしながら、固体は１０％より高いＲＨに曝露されると、等しく容易に再水和する。実験は１０〜７０％ＲＨで〜２．５％（水０．５モル）の水分増加を示していた。７０〜９０％ＲＨでは、増加量は〜４．５％（水１モル）であった。吸着と脱着サイクルを反復することで結晶性のヒステリシスまたは損失は全く示されなかった。この実験の間のＩＩ型の挙動は高度に結晶性のチャンネル水和物／溶媒和物に典型的なものであった。
【０１１７】
医薬組成物
本発明に更に包含されるものは、１つまたはそれ以上の、非毒性の薬学的に許容される担体および／または希釈剤および／またはアジュバント（総称して本明細書においては「担体」物質と称する）、および、所望により、他の活性成分と共に結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型を含む医薬組成物のクラスである。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶性ＩＩ型は何れかの適当な経路で、好ましくはその経路に適合した医薬組成物の形態で、そして、意図する治療のために有効な用量で投与してよい。活性なＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型および組成物は、例えば経口、血管内、腹腔内、皮下、筋肉内または局所に投与してよい。
【０１１８】
経口投与の場合は、医薬組成物は例えば錠剤、カプセル、懸濁液または液体の形態であってよい。医薬組成物は好ましくは活性成分の特定の量を含有する用量単位の形態で製造する。このような用量単位の例は錠剤またはカプセルである。活性成分はまた、例えば食塩水、デキストロースまたは水を適当な担体として使用してよい組成物として注射により投与してよい。
【０１１９】
投与される治療的に活性な化合物の量および本発明の化合物および／または組成物により疾患状態を治療するための用法は多くの要因、例えば対象の年齢、体重、性別および病状、疾患の重症度、投与の経路および頻度、および、使用する特定の化合物により異なり、従って、大きく変動する。医薬組成物は活性成分を約０．１〜２０００ｍｇの範囲、好ましくは約０．５〜５００ｍｇの範囲、最も好ましくは約１〜１００ｍｇ含有してよい。約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは約０．５〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重、そして最も好ましくは約０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の一日当たり用量が適切である。一日当たり用量は一日当たり１〜４回で投与してよい。
【０１２０】
結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型はまた経皮装置により投与できる。好ましくは経皮投与はリザーバおよび多孔性膜の型または固体マトリックス種の何れかであるパッチを用いて行う。いずれの場合においても、活性剤はレシピエントの皮膚または粘膜に接触している活性剤透過性の接着剤内に膜を経由してリザーバーまたはマイクロカプセルから継続的に送達される。活性剤が皮膚を経由して吸収される場合は、活性剤の制御され予め決定された流量がレシピエントに投与される。マイクロカプセルの場合はカプセル化剤はまた膜として機能してもよい。
【０１２１】
本発明のエマルジョンの油相は既知の態様において既知の成分から構築してよい。相は乳化剤のみを含んでもよいが、脂肪または油と、または、脂肪と油の両方と少なくとも１つの乳化剤との混合物を含んでもよい。好ましくは親水性乳化剤は、安定化剤として機能する親油性の乳化剤と共に含有される。油および脂肪の両方を含有することも好ましい。全体として、乳化剤は安定化剤の存在下または非存在下でいわゆる乳化ワックスと称されるものを形成し、そしてワックスは油および脂肪と一緒になっていわゆる乳化軟膏基剤と称されるものを形成し、これがクリーム製剤の油性の分散相を形成する。本発明の製剤において使用するのに適する乳化剤および乳化安定剤はＴｗｅｅｎ６０、Ｓｐａｎ８０、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアレートおよびラウリル硫酸ナトリウム等である。
【０１２２】
医薬エマルジョン製剤中で使用され得る大部分の油中の活性化合物の溶解度は極めて低値であるため、製剤用の適当な油または脂肪の選択は所望の審美的特性を達成することに基づく。即ち、クリームは好ましくは、チューブや他の容器からの漏出を回避するために、適当なコンシステンシーを有する非グリース性（ｎｏｎ−ｇｒｅａｓｙ）、非染色性および洗浄可能な製品である。直鎖または分枝鎖の、１または２塩基性のアルキルエステル、例えば、ジイソアジペート、イソセチルステアレート、ココナツ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、イソプロピルミリステート、デシルオレエート、イソプロピルパルミテート、ブチルステアレート、２−エチルヘキシルパルミテートまたは分枝鎖エステルのブレンド物を使用してよい。これらは所望の性質に応じて単独または組み合わせて使用してよい。或は、高融点の脂質、例えば白色軟質パラフィンおよび／または流動パラフィンまたは他の鉱物油を使用することもできる。
【０１２３】
眼への局所投与に適する製剤は、活性成分が適当な担体、特に活性成分のための水性溶媒に溶解または懸濁されている点眼剤も包含する。活性成分は好ましくはそのような製剤中０．５から２０％、好都合には０．５〜１０％、特に約１．５重量％の濃度で存在する。
【０１２４】
治療目的のためには、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートは通常は望ましい投与経路に適切な、１つまたはそれ以上のアジュバントと組み合わせる。経口投与する場合は、化合物は乳糖、スクロース、澱粉、アルカン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウムおよびカルシウム塩、ゼラチン、アカシアガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、および／または、ポリビニルアルコールと混合し、次に好都合な投与のために錠剤化またはカプセル化してよい。このようなカプセルまたは錠剤はヒドロキシプロピルメチルセルロース中の活性化合物の分散物として提供され得る、放出制御型製剤を含んでよい。非経口投与のための製剤は水性または非水性の等張性の滅菌された注射用の溶液または懸濁液の形態であってよい。これらの溶液および懸濁液は、経口投与のための製剤における使用のために例示される、１つまたはそれ以上の担体または希釈剤を有する滅菌された粉末または顆粒から調製してよい。結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートは水、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、コーン油、綿実油、ピーナツ油、ゴマ油、ベンジルアルコール、塩化ナトリウム、および／または、種々の緩衝液に溶解してよい。他のアジュバントおよび投与様式は薬学分野でよく知られるとおりである。
【０１２５】
以上説明した本発明は多くの態様に変更できることは明らかである。このような変更は本発明の精神および範囲から外れないものであり、当業者に自明な全てのこのような変型および等価物は以下の特許請求の範囲に包含される。
【図面の簡単な説明】
【０１２６】
【図１】全てのイオン化状態を示しているＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線の図である。
【図２】ＩＲＡ−４００（ＯＨ）アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線のグラフ表示である。ひし形はｐＨ、四角（破線）はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン（％初期値、イオンクロマトグラフィーによる）を示す。
【図３】ＩＲＡ−４００（ＯＨ）アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線のグラフ表示である。ひし形はｐＨ、三角（破線）はクロリド（イオンクロマトグラフィーによる）を示す。
【図４】ＩＲＡ−４００アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線を示す。
【図５】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの両性イオンのｐＨを上昇させた場合の関連する結合データを示す。
【図６】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（実施例１２）の粉末Ｘ線パターンである。
【図７】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（実施例１１）の粉末Ｘ線パターンである。
【図８】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（１０．０４６ｍｇ、実施例１２）の示差走査熱量測定試験のグラフである。
【図９】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（６．２１３０ｍｇ、実施例１１）の示差走査熱量測定試験のグラフである。
【図１０】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（４．７６８０ｍｇ、実施例１２）の熱重量分析プロットである。
【図１１】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料（実施例１１）の熱重量分析プロットである。
【図１２】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の水分吸着試験のプロットである。
【図１３】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（Ｉ型）の試料のラマンスペクトルである。
【図１４】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の単位格子の表示である。
【図１５】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の試料の粉末Ｘ線パターンである。
【図１６】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の試料の模擬の、および、観察された粉末Ｘ線パターンの比較である。
【図１７】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の試料の示差走査熱量分析試験のグラフである。
【図１８】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の試料（３．７５２０ｍｇ）の熱重量分析プロットである。
【図１９】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート（ＩＩ型）の水分吸着試験のプロットである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
約７７．６９℃の融点；実質的に図１５に示すＸ線粉末パターン；実質的に図１６に示すＸ線粉末パターン；図１４に示す単位格子；および実質的に表７に示す元素分析値の少なくとも１つを特徴とする、結晶形態のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート。
【請求項２】
薬学的に許容される担体と共に請求項１記載の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型を含む医薬組成物。
【請求項３】
請求項１の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型の有効量を病理学的に高い生成量が部分を構成する状態の治療が必要な対象に投与することを含む、該対象における該状態の治療方法。
【請求項４】
請求項１の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型の有効量を対象に投与することを含む、対象における酸化窒素生産を低減する方法。
【請求項１】
約７７．６９℃の融点；実質的に図１５に示すＸ線粉末パターン；実質的に図１６に示すＸ線粉末パターン；図１４に示す単位格子；および実質的に表７に示す元素分析値の少なくとも１つを特徴とする、結晶形態のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート。
【請求項２】
薬学的に許容される担体と共に請求項１記載の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型を含む医薬組成物。
【請求項３】
請求項１の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型の有効量を病理学的に高い生成量が部分を構成する状態の治療が必要な対象に投与することを含む、該対象における該状態の治療方法。
【請求項４】
請求項１の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートＩＩ型の有効量を対象に投与することを含む、対象における酸化窒素生産を低減する方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【公表番号】特表２００６−５１９８３９（Ｐ２００６−５１９８３９Ａ）
【公表日】平成１８年８月３１日（２００６．８．３１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５０６３２８（Ｐ２００６−５０６３２８）
【出願日】平成１６年３月４日（２００４．３．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００４／０００６９７
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０８０９５４
【国際公開日】平成１６年９月２３日（２００４．９．２３）
【出願人】（５０２４２７３２３）ファルマシア・コーポレーション (67)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年８月３１日（２００６．８．３１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年３月４日（２００４．３．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００４／０００６９７
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０８０９５４
【国際公開日】平成１６年９月２３日（２００４．９．２３）
【出願人】（５０２４２７３２３）ファルマシア・コーポレーション (67)
【Ｆターム（参考）】
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