シクロオキシゲナーゼ阻害剤及びそれを含有する飲食品
【課題】副作用がなく、呈味性に優れたシクロオキシゲナーゼ阻害剤及びそれを含有する飲食品を提供する。
【解決手段】マンゴスチンの果皮から含水有機溶剤又は有機溶剤で抽出して得られる抽出物、α−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンを有効成分とするシクロオキシゲナーゼ阻害剤及びそれを含有する飲食品とする。
【解決手段】マンゴスチンの果皮から含水有機溶剤又は有機溶剤で抽出して得られる抽出物、α−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンを有効成分とするシクロオキシゲナーゼ阻害剤及びそれを含有する飲食品とする。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マンゴスチン由来のシクロオキシゲナーゼ阻害剤及びそれを含有するシクロオキシゲナーゼ阻害作用を有する飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
アスピリン、インドメタシンに代表される多くのシクロオキシゲナーゼ阻害剤は、プロスタグランジン類の生合成を抑制する作用を有するため、プロスタグランジンが関与する疾病に有効であるが、現在使用されているシクロオキシゲナーゼ阻害剤の多くは、消化性潰瘍、めまい等の副作用があり、また、治療に必要とする使用量と副作用が発現する使用量との間に大きな差がないため、より安全性の高いシクロオキシゲナーゼ阻害剤の開発が望まれている。
【０００３】
さらに、従来のシクロオキシゲナ−ゼ阻害剤は、これを飲食品に添加すると呈味、風味に影響を及ぼして商品価値を著しく損なう恐れがあった。
【０００４】
一方、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果実は、一般的な利用法として果肉は食用として用いられており、果皮については原産国のタイで民間薬として下痢止めや創傷の治療に用いられている。
【０００５】
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果皮の他の利用法としては、特開平６−９８７３８号公報及び特開平７−１４７９５１号公報に食品用保存剤、特開平５−１７３６５号公報に５α−レダクターゼ阻害剤、特開平７−２５０６５８号公報に抗菌剤、特開平８−２０８５０１号公報に抗ヘリコバクター・ピロリ薬、特開平９−８７１５５号公報に紫外線吸収剤、特開平１０−１２０５８６号公報にセリンプロテアーゼ阻害剤が記載されている。
【０００６】
さらに、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）果皮の水溶性抽出物については、特開平４−２４４００４号公報に肥満細胞からのヒスタミン遊離抑制作用による美白・抗炎症作用、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）果皮の極性溶媒抽出物及びα−マンゴスチン、γ−マンゴスチンについては、特開平１０−７２３５７号公報にヒスタミン及びセロトニンに対する拮抗作用による抗アレルギー作用が記載されている。
【０００７】
しかしながら、従来技術には、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）のシクロオキシゲナーゼ阻害作用に関するものはない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、副作用がなく安全で、呈味性、安定性に優れ、シクロオキシゲナーゼ阻害作用の強いシクロオキシゲナーゼ阻害剤を提供すること及びそれを有効成分として含有する呈味に優れたシクロオキシゲナーゼ阻害用の飲食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意研究を行い、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果皮から各種溶媒で抽出し、さらにその抽出物に含まれる数種の成分を単離し、それらの抽出物及び成分についてシクロオキシゲナーゼ阻害剤としての効果を確認した結果、次式
【００１０】
【化１】
で表されるα−マンゴスチン及び次式
【００１１】
【化２】
で表されるγ−マンゴスチンに優れたシクロオキシゲナーゼ阻害作用を有することを見出し、本発明を完成させた。
【００１２】
すなわち本発明は、α−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンを有効成分とするシクロオキシゲナーゼ阻害剤である。
【００１３】
また、本発明は、上記シクロオキシゲナ−ゼ阻害剤を含有する呈味、風味に優れたシクロオキシゲナ−ゼ阻害用の飲食品である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明の有効成分であるマンゴスチンの果皮から含水有機溶剤又は有機溶剤で抽出して得られる抽出物は、オトギリソウ科植物のマンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果実（生又は乾燥済み）から得られ果皮を使用する。マンゴスチンの果皮はそのまま使用してもよいが、乾燥して破砕することにより粉末として使用した方が抽出効率がよくなり好適である。また、マンゴスチンの果皮を含水有機溶剤又は有機溶剤で抽出する前に、ｎ−ヘキサン、石油エーテル等の非極性溶剤で脱脂してもよい。
【００１５】
抽出溶媒としては、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、アセトン、酢酸エチル、ジエチルエーテル、クロロホルム、グリセリン、エチルグリコール、プロピルグリコール等の有機溶剤、好ましくは極性溶剤、特にエタノールのようなアルコール類、あるいは有機溶剤に水を混ぜたものを使用する。水との混合比率は、特に制限はないが、水の割合が好ましくは７０％ｖ／ｖ以下、さらに好ましくは６０％ｖ／ｖ以下である。抽出温度については、抽出効率を考慮すれば室温から溶媒の還流温度が好適である。抽出時間は、抽出溶媒の種類、果皮の破砕状態及び抽出温度により変化するが、０．５時間〜２４時間が好適である。
【００１６】
上記抽出溶媒で抽出して得られる抽出物は、必要によりエバポレータ等により抽出溶媒を濃縮したり、あるいは除去してもよい。
【００１７】
本発明の有効成分であるα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンは、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果実等から公知の方法によって抽出・精製して製造することができるが、合成したものを使用することもできる。
【００１８】
このようにして得られた本発明のシクロオキシゲナ−ゼ阻害剤は、プロスタグランジンが病原性物質として関与している疾病の治療、予防に有効であり、例えば、痛み、発熱、炎症、インフルエンザ又は他のウイルス感染に関連する症状、細菌感染による風邪、咽頭炎、咽頭の痛み、気管支炎、扁桃炎、歯周炎、歯槽骨炎、歯痛、歯肉炎、痛風、関節炎、腎炎、肝炎、気管支炎、月経困難症、頭痛、潰瘍性大腸炎、捻挫及び挫傷、筋肉痛、神経痛、滑膜炎、やけど、並びに外科的及び歯科的処置後の炎症の治療、予防に使用できる。
【００１９】
また、本発明のシクロオキシゲナ−ゼ阻害剤は、シクロオキシゲナーゼが関与する腫瘍細胞の増殖・転移を阻害することができ、大腸癌等の癌治療や癌予防に用いることもできる。
【００２０】
さらに、本発明のシクロオキシゲナ−ゼ阻害剤は、収縮性プロスタグランジンの合成を妨げることによってプロスタグランジン誘発平滑筋収縮を阻害する能力により、月経困難症、早期分娩、骨の欠損の治療（変形性関節症の治療）、瀕尿、切迫性尿失禁治療、心筋梗塞、脳溢血の予防・治療に用いることができる。
【００２１】
さらにまた、本発明のシクロオキシゲナ−ゼ阻害剤は、睡眠誘発性プロスタグランジンの合成を妨げることによってプロスタグランジンによる睡眠を抑制する作用により、眠気防止にも有効である。
【００２２】
本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤は、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果皮の含水有機溶剤又は有機溶剤抽出物並びにα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンを、単独であるいは他の医薬もしくは任意の製剤用担体、希釈剤等と混合し、任意の剤形にして医薬として利用できる。例えば、剤形として錠剤、顆粒剤、細粒剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、経口用液体製剤、注射剤等を例示することができる。
【００２３】
また、本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害用飲食品は、本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤であるマンゴスチン抽出物並びにα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンの１種以上を各種の食品に配合して製造することができる。例えば、シクロオキシゲナーゼ阻害用飲食品としては、清涼飲料、菓子、冷菓、乳製品、酒類、肉類等を挙げることができる。
【００２４】
本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤の有効成分であるマンゴスチン抽出物並びにα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンの有効量については、投与方法及び必要な治療によって変化し一概には規定することは困難であるが、マンゴスチン抽出物は動物体重１ｋｇ当たり乾燥重量で０．５ｍｇ〜５００ｍｇ、ヒト（成人７０ｋｇ）に対しては１日当たりの全投与量が好ましくは５ｍｇ〜５ｇ、さらに好ましくは５ｍｇ〜１ｇであり、α−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンについては動物体重１ｋｇ当たり０．１ｍｇ〜１００ｍｇ、ヒト（成人７０ｋｇ）に対しては１日当たりの全投与量が好ましくは１ｍｇ〜１０００ｍｇ、さらに好ましくは５ｍｇ〜５００ｍｇである。
【００２５】
本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害用飲食品における有効成分としてのマンゴスチン抽出物並びにα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンの含有量としては、飲食品としての１日の通常摂取量で上記の有効量を満たすように含有量を規定することができる。
【００２６】
以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲は以下の例にのみ限定されるものではない。
【実施例】
【００２７】
まず、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果皮からシクロオキシゲナーゼ阻害作用を有する抽出物並びにα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンを調製する実施例を示し、次にそれらのプロスタグランジン生合成阻害作用、シクロオキシゲナーゼ阻害作用を確認する試験の方法及び結果について示し、さらに本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤及びシクロオキシゲナーゼ阻害用飲食品の例を示す。
【００２８】
〔実施例１〕マンゴスチンメタノール抽出物
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の未乾燥果皮１ｋｇを１０Ｌのメタノールに浸漬し、２４時間室温下抽出した。ろ過後、ろ液をエバポレータで減圧乾燥させて８０ｇの本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤を得た。
【００２９】
〔実施例２〕マンゴスチン４０％エタノール水溶液抽出物
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の乾燥果皮粉末５００ｇを５Ｌの４０％エタノールに浸漬し、２４時間室温下抽出した。ろ過後、ろ液をエバポレータで減圧乾燥させて１０４ｇの本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤を得た。
【００３０】
〔実施例３〕マンゴスチン７０％エタノール水溶液抽出物
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の乾燥果皮粉末４８０ｇを５Ｌの７０％エタノールで４時間（６０℃）攪拌抽出した。ろ過後、ろ液をエバポレータで減圧乾燥させて１２８ｇの本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤を得た。
【００３１】
〔実施例４〕マンゴスチンエタノール抽出物
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の乾燥果皮粉末１．１ｋｇを１１Ｌのエタノールで４時間（６０℃）攪拌抽出した。ろ過後、ろ液をエバポレータで減圧乾燥させて１２８ｇの本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤を得た。
【００３２】
〔実施例５〕α−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンの調製
実施例１の抽出物８０ｇを３５０ｍｌの酢酸エチルに溶解後、２００ｍｌの水で２回洗浄した。酢酸エチル画分をエバポレータで溶媒を溜去させ２０ｇの乾燥物を得た。この乾燥物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。溶出はヘキサン−酢酸エチル系で漸次、極性をあげるグラジエント溶出を行い、３つの画分を得た。最初に得られた画分（５ｇ）を再度、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル、１０：９０→３０：７０→５０：５０）で精製し、黄色結晶状のα−マンゴスチン２ｇを得た。２つめの画分（２ｇ）を再度シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル、３０：７０→５０：５０、続いて酢酸エチルのみ、最後に酢酸エチル−メタノール、５０：５０）で精製し、黄色非結晶状のγ−マンゴスチン５００ｍｇを得た。
【００３３】
〔試験例１〕プロスタグランジン生合成阻害試験
６穴プレートに１５％ウマ血清及び２．５％牛胎児血清を含んだＦ−１０ Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｍｉｘｔｕｒｅ（Ｈａｍ）培地とＣ６ラットグリオーマ細胞を１．０×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるように加えた。３７℃、５％ＣＯ２インキュベータ中で３日間培養した。その後、被験物質を加えて３７℃で１０分間培養し、さらに１００μＭのＣａイオノフォア Ａ２３１８７を１００μＭ加えて１０分間培養した。あらかじめ氷冷しておいた反応停止液（１００μＭ インドメタシン−５０ｍＭ ＥＤＴＡ）を加え、培養上清を回収した。培養上清に１Ｎ 塩酸を加えてｐＨ４とし、酢酸エチルを加えて分配し、生成したプロスタグランジンＥ２を酢酸エチル層に移行させた。酢酸エチル層を回収し、減圧乾固させた後、０．５ｍｌの１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−塩酸緩衝液（ｐＨ７．６）に溶解させた。この溶液に［３Ｈ］プロスタグランジンＥ２溶液と抗プロスタグランジンＥ２抗体を加えて、４℃で２４時間反応させた。その後、チャーコール液を加えて遠心し、上清の放射活性を液体シンチレーションカウンターで計測し、培地中に遊離したプロスタグランジンＥ２量を定量した。被験物質を含まないコントロールのプロスタグランジンＥ２生成量に対する被験物質によるプロスタグランジンＥ２生成量の低下をプロスタグランジンＥ２生成阻害率で表した。その結果を表１に示す。
【００３４】
【表１】
【００３５】
〔試験例２〕シクロオキシゲナーゼ活性阻害試験
シクロオキシゲナーゼとしてヒツジ精嚢腺ミクロソームを使用する。シクロオキシゲナーゼ反応は、最終濃度２７０μｇ／ｍｌのヒツジ精嚢腺ミクロソーム、５ｍＭトリプトファン、１ｍＭフェノール、０．２３ｍＭハイドロキノン、１μＭヘマチン、２０μＭアラキドン酸を含む０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）に、メタノールに溶解させた被験物質を添加し、３７℃で１０分間反応させる。反応液を煮沸して反応を停止させ、上清中のプロスタグランジンＥ２量をＥＩＡにて定量した。被験物質を含まないコントロールのプロスタグランジンＥ２生成量に対する被験物質によるプロスタグランジンＥ２生成量の低下をシクロオキシゲナーゼ阻害率で表した。その結果を表２に示す。
【００３６】
【表２】
【００３７】
これら試験例１，２の結果より、本発明のマンゴスチン抽出物、α−マンゴスチン及びγ―マンゴスチンがプロスタグランジン生合成阻害作用を持つこと、さらに本発明のマンゴスチン抽出物、α−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンがシクロオキシゲナーゼ阻害作用を持つことから、本発明品は哺乳動物のプロスタグランジンが病原性物質として関与している疾病の治療及び予防に有用である。
【００３８】
〔実施例６〕散剤
乳糖 ２５部
馬鈴薯でんぷん １０部
実施例１の抽出物 ５部
【００３９】
〔実施例７〕錠剤
Ｄ−マンニトール １０部
乳糖 １０部
結晶セルロース ２部
ヒドロキシプロピルセルロース １部
α−マンゴスチン ０．５部
【００４０】
〔実施例８〕シロップ剤
単シロップ １０部
カルボキシメチルセルロース １部
γ−マンゴスチン ０．３部
【００４１】
〔実施例９〕注射剤
クロロブタノール ０．５部
塩化ナトリウム ０．９部
注射用水 １００部
実施例２の抽出物 １部
【００４２】
〔実施例１０〕キャンディー
グラニュー糖 ４５部
水飴（Ｄ．Ｅ．４２） ５０部
水 ２０部
γ−マンゴスチン ０．５部
レモン香料 １部
【００４３】
〔実施例１１〕チョコレート
カカオビター ２０部
カカオバター １７部
砂糖 ４３部
全脂粉乳 ２０部
実施例２の抽出物 １部
バニラ香料 ０．１部
【００４４】
〔実施例１２〕チューインガム
ガムベース ２０部
砂糖 ５６部
水飴 １３部
ブドウ糖 １０部
軟化剤 １部
実施例３の抽出物 ０．５部
ミント香料 ０．５部
【００４５】
〔実施例１３〕錠菓
砂糖 ７５部
ブドウ糖 １９部
ショ糖脂肪酸エステル ０．２部
実施例４の抽出物 ０．５部
水 ４部
【００４６】
本発明のα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンを有効成分とするシクロオキシゲナーゼ阻害剤は、天然物から調製することができるので副作用がなく安全であり、優れたシクロオキシゲナーゼ阻害作用及びプロスタグランジン生合成阻害作用を有するため、これらに起因する疾病の予防、治療に有効である。
【００４７】
また、本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤は、呈味性に優れているので、これらを飲食品に含有させることで呈味性の優れたシクロオキシゲナーゼ阻害用の飲食品を提供できる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マンゴスチン由来のシクロオキシゲナーゼ阻害剤及びそれを含有するシクロオキシゲナーゼ阻害作用を有する飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
アスピリン、インドメタシンに代表される多くのシクロオキシゲナーゼ阻害剤は、プロスタグランジン類の生合成を抑制する作用を有するため、プロスタグランジンが関与する疾病に有効であるが、現在使用されているシクロオキシゲナーゼ阻害剤の多くは、消化性潰瘍、めまい等の副作用があり、また、治療に必要とする使用量と副作用が発現する使用量との間に大きな差がないため、より安全性の高いシクロオキシゲナーゼ阻害剤の開発が望まれている。
【０００３】
さらに、従来のシクロオキシゲナ−ゼ阻害剤は、これを飲食品に添加すると呈味、風味に影響を及ぼして商品価値を著しく損なう恐れがあった。
【０００４】
一方、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果実は、一般的な利用法として果肉は食用として用いられており、果皮については原産国のタイで民間薬として下痢止めや創傷の治療に用いられている。
【０００５】
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果皮の他の利用法としては、特開平６−９８７３８号公報及び特開平７−１４７９５１号公報に食品用保存剤、特開平５−１７３６５号公報に５α−レダクターゼ阻害剤、特開平７−２５０６５８号公報に抗菌剤、特開平８−２０８５０１号公報に抗ヘリコバクター・ピロリ薬、特開平９−８７１５５号公報に紫外線吸収剤、特開平１０−１２０５８６号公報にセリンプロテアーゼ阻害剤が記載されている。
【０００６】
さらに、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）果皮の水溶性抽出物については、特開平４−２４４００４号公報に肥満細胞からのヒスタミン遊離抑制作用による美白・抗炎症作用、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）果皮の極性溶媒抽出物及びα−マンゴスチン、γ−マンゴスチンについては、特開平１０−７２３５７号公報にヒスタミン及びセロトニンに対する拮抗作用による抗アレルギー作用が記載されている。
【０００７】
しかしながら、従来技術には、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）のシクロオキシゲナーゼ阻害作用に関するものはない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、副作用がなく安全で、呈味性、安定性に優れ、シクロオキシゲナーゼ阻害作用の強いシクロオキシゲナーゼ阻害剤を提供すること及びそれを有効成分として含有する呈味に優れたシクロオキシゲナーゼ阻害用の飲食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意研究を行い、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果皮から各種溶媒で抽出し、さらにその抽出物に含まれる数種の成分を単離し、それらの抽出物及び成分についてシクロオキシゲナーゼ阻害剤としての効果を確認した結果、次式
【００１０】
【化１】
で表されるα−マンゴスチン及び次式
【００１１】
【化２】
で表されるγ−マンゴスチンに優れたシクロオキシゲナーゼ阻害作用を有することを見出し、本発明を完成させた。
【００１２】
すなわち本発明は、α−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンを有効成分とするシクロオキシゲナーゼ阻害剤である。
【００１３】
また、本発明は、上記シクロオキシゲナ−ゼ阻害剤を含有する呈味、風味に優れたシクロオキシゲナ−ゼ阻害用の飲食品である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明の有効成分であるマンゴスチンの果皮から含水有機溶剤又は有機溶剤で抽出して得られる抽出物は、オトギリソウ科植物のマンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果実（生又は乾燥済み）から得られ果皮を使用する。マンゴスチンの果皮はそのまま使用してもよいが、乾燥して破砕することにより粉末として使用した方が抽出効率がよくなり好適である。また、マンゴスチンの果皮を含水有機溶剤又は有機溶剤で抽出する前に、ｎ−ヘキサン、石油エーテル等の非極性溶剤で脱脂してもよい。
【００１５】
抽出溶媒としては、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、アセトン、酢酸エチル、ジエチルエーテル、クロロホルム、グリセリン、エチルグリコール、プロピルグリコール等の有機溶剤、好ましくは極性溶剤、特にエタノールのようなアルコール類、あるいは有機溶剤に水を混ぜたものを使用する。水との混合比率は、特に制限はないが、水の割合が好ましくは７０％ｖ／ｖ以下、さらに好ましくは６０％ｖ／ｖ以下である。抽出温度については、抽出効率を考慮すれば室温から溶媒の還流温度が好適である。抽出時間は、抽出溶媒の種類、果皮の破砕状態及び抽出温度により変化するが、０．５時間〜２４時間が好適である。
【００１６】
上記抽出溶媒で抽出して得られる抽出物は、必要によりエバポレータ等により抽出溶媒を濃縮したり、あるいは除去してもよい。
【００１７】
本発明の有効成分であるα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンは、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果実等から公知の方法によって抽出・精製して製造することができるが、合成したものを使用することもできる。
【００１８】
このようにして得られた本発明のシクロオキシゲナ−ゼ阻害剤は、プロスタグランジンが病原性物質として関与している疾病の治療、予防に有効であり、例えば、痛み、発熱、炎症、インフルエンザ又は他のウイルス感染に関連する症状、細菌感染による風邪、咽頭炎、咽頭の痛み、気管支炎、扁桃炎、歯周炎、歯槽骨炎、歯痛、歯肉炎、痛風、関節炎、腎炎、肝炎、気管支炎、月経困難症、頭痛、潰瘍性大腸炎、捻挫及び挫傷、筋肉痛、神経痛、滑膜炎、やけど、並びに外科的及び歯科的処置後の炎症の治療、予防に使用できる。
【００１９】
また、本発明のシクロオキシゲナ−ゼ阻害剤は、シクロオキシゲナーゼが関与する腫瘍細胞の増殖・転移を阻害することができ、大腸癌等の癌治療や癌予防に用いることもできる。
【００２０】
さらに、本発明のシクロオキシゲナ−ゼ阻害剤は、収縮性プロスタグランジンの合成を妨げることによってプロスタグランジン誘発平滑筋収縮を阻害する能力により、月経困難症、早期分娩、骨の欠損の治療（変形性関節症の治療）、瀕尿、切迫性尿失禁治療、心筋梗塞、脳溢血の予防・治療に用いることができる。
【００２１】
さらにまた、本発明のシクロオキシゲナ−ゼ阻害剤は、睡眠誘発性プロスタグランジンの合成を妨げることによってプロスタグランジンによる睡眠を抑制する作用により、眠気防止にも有効である。
【００２２】
本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤は、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果皮の含水有機溶剤又は有機溶剤抽出物並びにα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンを、単独であるいは他の医薬もしくは任意の製剤用担体、希釈剤等と混合し、任意の剤形にして医薬として利用できる。例えば、剤形として錠剤、顆粒剤、細粒剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、経口用液体製剤、注射剤等を例示することができる。
【００２３】
また、本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害用飲食品は、本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤であるマンゴスチン抽出物並びにα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンの１種以上を各種の食品に配合して製造することができる。例えば、シクロオキシゲナーゼ阻害用飲食品としては、清涼飲料、菓子、冷菓、乳製品、酒類、肉類等を挙げることができる。
【００２４】
本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤の有効成分であるマンゴスチン抽出物並びにα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンの有効量については、投与方法及び必要な治療によって変化し一概には規定することは困難であるが、マンゴスチン抽出物は動物体重１ｋｇ当たり乾燥重量で０．５ｍｇ〜５００ｍｇ、ヒト（成人７０ｋｇ）に対しては１日当たりの全投与量が好ましくは５ｍｇ〜５ｇ、さらに好ましくは５ｍｇ〜１ｇであり、α−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンについては動物体重１ｋｇ当たり０．１ｍｇ〜１００ｍｇ、ヒト（成人７０ｋｇ）に対しては１日当たりの全投与量が好ましくは１ｍｇ〜１０００ｍｇ、さらに好ましくは５ｍｇ〜５００ｍｇである。
【００２５】
本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害用飲食品における有効成分としてのマンゴスチン抽出物並びにα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンの含有量としては、飲食品としての１日の通常摂取量で上記の有効量を満たすように含有量を規定することができる。
【００２６】
以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲は以下の例にのみ限定されるものではない。
【実施例】
【００２７】
まず、マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の果皮からシクロオキシゲナーゼ阻害作用を有する抽出物並びにα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンを調製する実施例を示し、次にそれらのプロスタグランジン生合成阻害作用、シクロオキシゲナーゼ阻害作用を確認する試験の方法及び結果について示し、さらに本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤及びシクロオキシゲナーゼ阻害用飲食品の例を示す。
【００２８】
〔実施例１〕マンゴスチンメタノール抽出物
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の未乾燥果皮１ｋｇを１０Ｌのメタノールに浸漬し、２４時間室温下抽出した。ろ過後、ろ液をエバポレータで減圧乾燥させて８０ｇの本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤を得た。
【００２９】
〔実施例２〕マンゴスチン４０％エタノール水溶液抽出物
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の乾燥果皮粉末５００ｇを５Ｌの４０％エタノールに浸漬し、２４時間室温下抽出した。ろ過後、ろ液をエバポレータで減圧乾燥させて１０４ｇの本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤を得た。
【００３０】
〔実施例３〕マンゴスチン７０％エタノール水溶液抽出物
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の乾燥果皮粉末４８０ｇを５Ｌの７０％エタノールで４時間（６０℃）攪拌抽出した。ろ過後、ろ液をエバポレータで減圧乾燥させて１２８ｇの本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤を得た。
【００３１】
〔実施例４〕マンゴスチンエタノール抽出物
マンゴスチン（Ｇａｒｃｉｎｉａ ｍａｎｇｏｓｔａｎａ Ｌ．）の乾燥果皮粉末１．１ｋｇを１１Ｌのエタノールで４時間（６０℃）攪拌抽出した。ろ過後、ろ液をエバポレータで減圧乾燥させて１２８ｇの本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤を得た。
【００３２】
〔実施例５〕α−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンの調製
実施例１の抽出物８０ｇを３５０ｍｌの酢酸エチルに溶解後、２００ｍｌの水で２回洗浄した。酢酸エチル画分をエバポレータで溶媒を溜去させ２０ｇの乾燥物を得た。この乾燥物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。溶出はヘキサン−酢酸エチル系で漸次、極性をあげるグラジエント溶出を行い、３つの画分を得た。最初に得られた画分（５ｇ）を再度、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル、１０：９０→３０：７０→５０：５０）で精製し、黄色結晶状のα−マンゴスチン２ｇを得た。２つめの画分（２ｇ）を再度シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル、３０：７０→５０：５０、続いて酢酸エチルのみ、最後に酢酸エチル−メタノール、５０：５０）で精製し、黄色非結晶状のγ−マンゴスチン５００ｍｇを得た。
【００３３】
〔試験例１〕プロスタグランジン生合成阻害試験
６穴プレートに１５％ウマ血清及び２．５％牛胎児血清を含んだＦ−１０ Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｍｉｘｔｕｒｅ（Ｈａｍ）培地とＣ６ラットグリオーマ細胞を１．０×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌになるように加えた。３７℃、５％ＣＯ２インキュベータ中で３日間培養した。その後、被験物質を加えて３７℃で１０分間培養し、さらに１００μＭのＣａイオノフォア Ａ２３１８７を１００μＭ加えて１０分間培養した。あらかじめ氷冷しておいた反応停止液（１００μＭ インドメタシン−５０ｍＭ ＥＤＴＡ）を加え、培養上清を回収した。培養上清に１Ｎ 塩酸を加えてｐＨ４とし、酢酸エチルを加えて分配し、生成したプロスタグランジンＥ２を酢酸エチル層に移行させた。酢酸エチル層を回収し、減圧乾固させた後、０．５ｍｌの１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−塩酸緩衝液（ｐＨ７．６）に溶解させた。この溶液に［３Ｈ］プロスタグランジンＥ２溶液と抗プロスタグランジンＥ２抗体を加えて、４℃で２４時間反応させた。その後、チャーコール液を加えて遠心し、上清の放射活性を液体シンチレーションカウンターで計測し、培地中に遊離したプロスタグランジンＥ２量を定量した。被験物質を含まないコントロールのプロスタグランジンＥ２生成量に対する被験物質によるプロスタグランジンＥ２生成量の低下をプロスタグランジンＥ２生成阻害率で表した。その結果を表１に示す。
【００３４】
【表１】
【００３５】
〔試験例２〕シクロオキシゲナーゼ活性阻害試験
シクロオキシゲナーゼとしてヒツジ精嚢腺ミクロソームを使用する。シクロオキシゲナーゼ反応は、最終濃度２７０μｇ／ｍｌのヒツジ精嚢腺ミクロソーム、５ｍＭトリプトファン、１ｍＭフェノール、０．２３ｍＭハイドロキノン、１μＭヘマチン、２０μＭアラキドン酸を含む０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）に、メタノールに溶解させた被験物質を添加し、３７℃で１０分間反応させる。反応液を煮沸して反応を停止させ、上清中のプロスタグランジンＥ２量をＥＩＡにて定量した。被験物質を含まないコントロールのプロスタグランジンＥ２生成量に対する被験物質によるプロスタグランジンＥ２生成量の低下をシクロオキシゲナーゼ阻害率で表した。その結果を表２に示す。
【００３６】
【表２】
【００３７】
これら試験例１，２の結果より、本発明のマンゴスチン抽出物、α−マンゴスチン及びγ―マンゴスチンがプロスタグランジン生合成阻害作用を持つこと、さらに本発明のマンゴスチン抽出物、α−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンがシクロオキシゲナーゼ阻害作用を持つことから、本発明品は哺乳動物のプロスタグランジンが病原性物質として関与している疾病の治療及び予防に有用である。
【００３８】
〔実施例６〕散剤
乳糖 ２５部
馬鈴薯でんぷん １０部
実施例１の抽出物 ５部
【００３９】
〔実施例７〕錠剤
Ｄ−マンニトール １０部
乳糖 １０部
結晶セルロース ２部
ヒドロキシプロピルセルロース １部
α−マンゴスチン ０．５部
【００４０】
〔実施例８〕シロップ剤
単シロップ １０部
カルボキシメチルセルロース １部
γ−マンゴスチン ０．３部
【００４１】
〔実施例９〕注射剤
クロロブタノール ０．５部
塩化ナトリウム ０．９部
注射用水 １００部
実施例２の抽出物 １部
【００４２】
〔実施例１０〕キャンディー
グラニュー糖 ４５部
水飴（Ｄ．Ｅ．４２） ５０部
水 ２０部
γ−マンゴスチン ０．５部
レモン香料 １部
【００４３】
〔実施例１１〕チョコレート
カカオビター ２０部
カカオバター １７部
砂糖 ４３部
全脂粉乳 ２０部
実施例２の抽出物 １部
バニラ香料 ０．１部
【００４４】
〔実施例１２〕チューインガム
ガムベース ２０部
砂糖 ５６部
水飴 １３部
ブドウ糖 １０部
軟化剤 １部
実施例３の抽出物 ０．５部
ミント香料 ０．５部
【００４５】
〔実施例１３〕錠菓
砂糖 ７５部
ブドウ糖 １９部
ショ糖脂肪酸エステル ０．２部
実施例４の抽出物 ０．５部
水 ４部
【００４６】
本発明のα−マンゴスチン及びγ−マンゴスチンを有効成分とするシクロオキシゲナーゼ阻害剤は、天然物から調製することができるので副作用がなく安全であり、優れたシクロオキシゲナーゼ阻害作用及びプロスタグランジン生合成阻害作用を有するため、これらに起因する疾病の予防、治療に有効である。
【００４７】
また、本発明のシクロオキシゲナーゼ阻害剤は、呈味性に優れているので、これらを飲食品に含有させることで呈味性の優れたシクロオキシゲナーゼ阻害用の飲食品を提供できる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
で表されるα−マンゴスチンを有効成分とすることを特徴とするシクロオキシゲナーゼ阻害剤。
【請求項２】
式：
【化２】
で表されるγ−マンゴスチンを有効成分とすることを特徴とするシクロオキシゲナーゼ阻害剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のシクロオキシゲナーゼ阻害剤を含有することを特徴とするシクロオキシゲナーゼ阻害用飲食品。
【請求項１】
式：
【化１】
で表されるα−マンゴスチンを有効成分とすることを特徴とするシクロオキシゲナーゼ阻害剤。
【請求項２】
式：
【化２】
で表されるγ−マンゴスチンを有効成分とすることを特徴とするシクロオキシゲナーゼ阻害剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のシクロオキシゲナーゼ阻害剤を含有することを特徴とするシクロオキシゲナーゼ阻害用飲食品。
【公開番号】特開２０１１−１２０７９（Ｐ２０１１−１２０７９Ａ）
【公開日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−２２７０６９（Ｐ２０１０−２２７０６９）
【出願日】平成２２年１０月６日（２０１０．１０．６）
【分割の表示】特願２０００−２３５０２３（Ｐ２０００−２３５０２３）の分割
【原出願日】平成１２年８月２日（２０００．８．２）
【出願人】（３０７０１３８５７）株式会社ロッテ (101)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１０月６日（２０１０．１０．６）
【分割の表示】特願２０００−２３５０２３（Ｐ２０００−２３５０２３）の分割
【原出願日】平成１２年８月２日（２０００．８．２）
【出願人】（３０７０１３８５７）株式会社ロッテ (101)
【Ｆターム（参考）】
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