ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む抗炎症組成物
【課題】ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミン（Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌａｍｉｎｅ）を有効成分として含む抗炎症組成物を提供する。
【解決方法】本発明は、多価不飽和リゾホスファチジルコリン類であるドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが細胞内で脂質多糖類由来ＮＯ生成を抑制して、生体内でザイモサンＡ誘導腹膜炎を阻害することによって抗炎症効能が優れ、細胞毒性がほとんどないので、炎症性疾患予防及び治療用製薬組成物、または健康食品の有効成分として有用に使用することができる。
【解決方法】本発明は、多価不飽和リゾホスファチジルコリン類であるドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが細胞内で脂質多糖類由来ＮＯ生成を抑制して、生体内でザイモサンＡ誘導腹膜炎を阻害することによって抗炎症効能が優れ、細胞毒性がほとんどないので、炎症性疾患予防及び治療用製薬組成物、または健康食品の有効成分として有用に使用することができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミン（Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌａｍｉｎｅ）の抗炎症効能を用いた抗炎症用製薬組成物、抗炎症用健康機能食品、及び抗炎症用化粧料組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
炎症反応は、組織（細胞）の損傷や外部感染原（バクテリア、かび、ウイルスまたは多様な種類のアレルギー誘発物質）に感染した時、局所血管と体液中の各種炎症媒介因子及び兔疫細胞が係わって酵素活性化、炎症媒介物質分泌、体液浸潤、細胞移動及び組織破壊など一連の複合的な生理的反応と紅班、むくみ、発熱及び痛症など外的症状を現わす。正常の場合、炎症反応は、外部感染原を除去して損傷された組織を再生して生命体機能回復作用をするが、抗原が除去されなかったり内部物質が原因になったりして、炎症反応が過度または持続的に起きると、むしろ粘膜損傷を促進し、その結果、一部では癌発生などの疾患を誘発する（非特許文献１）。
【０００３】
炎症の発生原因としては、生体に多様な生化学的な現象が関与している。特に、一酸化窒素（ＮＯ）を発生させる酵素である一酸化窒素合成酵素（ＮＯＳ）及びプロスタグランジン（ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ）の生合成と係わる酵素は、炎症反応を媒介するにおいて重要な役割をしていることが知られている。したがって、Ｌ−アルギニンからＮＯを生成させる酵素であるＮＯＳ、またはアラキドン酸からプロスタグランジン類を合成するのに係わる酵素であるシクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）は、炎症を遮断するにおいて主な目標になっている。
【０００４】
最近の研究結果によると、ＮＯＳは、何種類かが存在し、脳に存在する脳一酸化窒素合成酵素（ｂＮＯＳ）、神経系に存在する神経一酸化窒素合成酵素（ｎＮＯＳ）及び血管系に存在する内皮一酸化窒素合成酵素（ｅＮＯＳ）などは、体内にいつも一定の水準で発現されていて、これらによって少量生成されるＮＯは、神経伝達や血管拡張を誘導するなど、正常な身体の恒常性維持に重要な役割をするのに比べて、各種サイトカインや外部刺激物質によって誘導されるｉＮＯＳ（ｉｎｄｕｃｅｄ ＮＯＳ）によって急激に過量発生されるＮＯは、細胞毒性や各種炎症反応を起こすことが知られていて、慢性炎症は、ｉＮＯＳ活性の増加と関連あるという研究がある（非特許文献２）。また、ＣＯＸも２種類のイソ型が存在し、ＣＯＸ−１は、細胞内にいつも存在して細胞保護作用に必要なプロスタグランジン（ＰＧｓ）を合成する作用を示すのに対して、ＣＯＸ−２は、炎症反応時に細胞内で急激に増加して炎症反応を起こすに際して重要な役割を遂行することが知られている。ＮＯ及びＰＧｓの程度を向上させるｉＮＯＳ及びＣＯＸ−２を含む転写炎症因子は、多様な硬化、パーキンソン病、アルツハイマー病及び結腸癌を含む慢性疾患の病因に関連する（非特許文献３）。
【０００５】
リポポリサッカライド（ＬＰＳ）は、外部に分泌するバクテリアトキシンで、細胞の炎症反応を刺激して、一酸化窒素（ＮＯ）、サイトカイン、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−）、プロスタグランジンＥ２及び炎症反応を促進するエイコサノイド調節物質を含む様々の炎症調節物質を分泌する（非特許文献４）。一酸化窒素合成酵素は、二つのグループに分類されているが、ｃＮＯＳは、様々な細胞（例えば、神経細胞及び内皮細胞）で一定に存在してカルシウムに依存的なカルモジュリンによって、転写水準が優先的に調節される。一方血管平滑筋細胞、大食細胞、肝細胞及び星状細胞は、炎症サイトカインとリポポリサッカライドなどに反応して誘導される。一酸化窒素合成酵素の活性化は、多様な炎症疾患の疾病で重要な役割をする、多量の一酸化窒素形成を促進する。ゆえに、一酸化窒素合成酵素によって誘導される一酸化窒素生成は、炎症の程度を示し、炎症進行を評価することができる指標になる。特異な細胞遺伝子などの発現は、ＣＯＸ−２及び誘導性一酸化窒素合成酵素だけではなく、インターロイキン−１、インターロイキン−２、インターロイキン−６及び腫瘍壊死因子のような様々な炎症転写因子が含まれる（非特許文献５）。
【０００６】
最近脂質誘導媒介体が、様々な炎症反応（喘息、リュウマチ関節炎または腸炎など）に関与することが知られている（非特許文献６〜１１）。
【０００７】
今まで炎症性媒介物質に対する研究が活発に行なわれてきたが、炎症反応に脂質媒介体が関与することは、最近理論的に定立されるようになった。例えば、酵素ＰＬＡ２によってホスファチジルコリンから遊離されたアラキドン酸は、プロスタグランジン（ＰＧ）、ロイコトリエン（ＬＴ）及びリポキシン（ＬＸ）に転換される。ここで、プロスタグランジンとロイコトリエンは、強力な炎症性媒介体である一方（非特許文献１２〜１４）、リポキシンは、むしろ強い抗炎症性媒介体として知られるようになった（非特許文献１５，１６）。すなわち、炎症過程でアラキドン酸から生成されたエイコサノイドは、プロスタグランジンとロイコトリエンに転換される。ここで、５−リポキシゲナーゼは、ロイコトリエンとリポキシンの形成に重要である一方、１２／１５−リポキシゲナーゼは、リポキシンの形成に重要である（非特許文献１５，１６）。また、ドコサヘキサエン酸の場合、１２／１５−リポキシゲナーゼによって酸化時に結果的にプロテクチンＤという脂質で代謝され、この物質は、リポキシンのように優秀な抗炎症作用を示す脂質媒介体として把握された（非特許文献１７）。
【０００８】
一方、ＰＬＡ２加水分解過程で生成される飽和脂質リゾホスファチジルコリン（ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ，ｌｙｓｏＰＣ）が炎症反応で炎症性または抗炎症性であることが明らかにされている（非特許文献８，１１、１８〜２０）。また、炎症性リゾホスファチジルコリンの作用は、一酸化窒素（ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ，ＮＯ）または活性酸素種（ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）の生成であることが報告された（非特許文献２１〜２５）。
【０００９】
しかし、多価不飽和脂質を含む多価不飽和リゾホスファチジルコリン（ｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ ｌｙｓｏＰＣ）類が生体内嫌気反応に及ぼす影響に対しては、具体的に報告されたことがない。不飽和脂質を含む多価不飽和リゾホスファチジルコリンは、動物体内に相当量存在することが報告されたが、例えば、１−リノレオイルリゾホスファチジルコリン（ｌｉｎｏｌｅｏｙｌ ｌｙｓｏＰＣ）と１−アラキドノイルリゾホスファチジルコリン（ａｒａｃｈｉｄｏｎｏｙｌ ｌｙｓｏＰＣ）が、血漿（非特許文献２６〜２８）から発見された。特に、１−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、鮫の肝の主要脂質に属する（非特許文献２９）。さらに、心臓抽出物には、リゾホスファチジルコリン酸化物が存在する。したがって、不飽和脂質を含むリゾホスファチジルコリンは、リポキシゲナーゼによって代謝されると考えられたが、最近の研究でそれを立証した（非特許文献３０〜３２）。すなわち、リノレオイル、アラキドノイル及びドコサヘキサエノイルからなる群を含むリゾホスファチジルコリンは、網状赤血球１５−ＬＯＸ、または白血球１２／１５−ＬＯＸ酵素によって酸化がよくおきることが報告された（非特許文献３０〜３２）。このように、リゾホスファチジルコリン類は、生体内で生物活性を有すると考えられるにもかかわらず、リゾホスファチジルコリン類の生理活性に対して報告されたことがない。
【００１０】
それで、本発明者等は、不飽和脂質含有リゾホスファチジルコリン類の生理活性に対して研究した結果、不飽和脂質含有リゾホスファチジルコリン類が細胞内及び生体内（Ｉｎ ｖｉｖｏ）で抗炎症効能があり、特に、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、他のリゾホスファチジルコリン類に比べて顕著にＮＯ生成を抑制して、細胞毒性がほとんどなく、生体内でザイモサンＡ誘導腹膜炎を少ない濃度でも優秀に阻害して、前記抗炎症効果が、アラキドノイルリゾホスファチジルコリン（Ａｒａｃｈｉｄｏｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）を含む他のリゾホスファチジルコリン類に比べて優れていることを確認することにより、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンを抗炎症用組成物の有効成分で使用することができることを明らかにして本発明を完成した。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｊｏｎａｔｈａｎ Ｃｏｈｅｎ，Ｎａｔｕｒｅ，２００２年，第４２０，８８５−８９１頁
【非特許文献２】Ｊｏｎ Ｏ．Ｌｕｎｄｂｅｒｇ，等，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，２００８年
【非特許文献３】Ｂｅｎｇｔ Ｓａｍｕｅｌｓｓｏｎ，等，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ，２００７年，第５９巻，２０７−２２４頁
【非特許文献４】Ｃｈｅｎ ＹＣ，等，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００１年，第６１巻，１４１７−１４２７頁
【非特許文献５】Ｃｓａｂａ Ｓｚａｂｏ，等，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，２００７年，第６巻，６６２−６８０頁
【非特許文献６】Ｄａｌｅａｕ Ｐ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ，１９９９年，第３１巻；１３９１−１４０１頁
【非特許文献７】Ｆｕｃｈｓ Ｂ，等，Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ，２００５年，第３８巻９２５−９３３頁
【非特許文献８】Ｍｕｒａｌｉｋｒｉｓｈｎａ Ａｄｉｂｈａｔｌａ，Ｒ．，等，Ｆｒｅｅ ａｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ，２００６年，第４０巻，３７６−８７頁
【非特許文献９】Ｔｒｉｇｇｉａｎｉ Ｍ，等，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ．，２００６年第１７６１（１１）巻，１２８９−３００頁
【非特許文献１０】Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ，Ｔ．，等，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００７年，第１４巻，３２０９−３２２０頁
【非特許文献１１】Ｓｈｉ Ｙ，等，Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２００７年，第１９１巻，５４−６２頁
【非特許文献１２】Ｓｅｒｈａｎ ＣＮ，等，Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００５年，第６巻，１１９１−７頁
【非特許文献１３】Ｆａｒｏｏｑｕｉ ＡＡ，等，Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，２００７年，第１０１（３）巻，５７７−９９頁
【非特許文献１４】Ｆｕｎｋ，Ｃ．Ｄ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００１年，第２９４巻，１８７１〜５頁
【非特許文献１５】Ｓｃｈｗａｂ ＪＭ，等，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００６年，第６（４）巻，４１４−２０頁
【非特許文献１６】Ｋｕｈｎ Ｈ，等，Ｐｒｏｇ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓ．，２００６年Ｊｕｌ，第４５（４）巻，３３４−５６頁，Ｅｐｕｂ ２００６Ｍ
【非特許文献１７】Ｓｅｒｈａｎ ＣＮ ＆ Ｃｈｉａｎｇ Ｎ．Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００８年，第１巻，Ｓ２００−２１５頁
【非特許文献１８】Ｄａｌｅａｕ Ｐ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ，１９９９年，第３１巻，１３９１−１４０１頁
【非特許文献１９】Ｆｕｃｈｓ Ｂ，等，Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ，２００５年，第３８巻，９２５−９３３頁
【非特許文献２０】Ｆｕｅｎｔｅｓ Ｌ，等，Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ，２００２年，第９１巻，６８１−６８８頁
【非特許文献２１】Ｃｏｌｌｅｓ，Ｓ．Ｍ．等，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０００年，第４１巻， １１８８−１１９８頁
【非特許文献２２】Ｍａｔｓｕｂａｒａ，Ｍ．，等，Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２００５年，第１７８巻，５７−６６頁
【非特許文献２３】Ｔａｋｅｓｈｉｔａ Ｓ，等，Ｊ．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ，２０００年，第７巻，２３８−２４６頁
【非特許文献２４】Ｓｉｌｌｉｍａｎ ＣＣ，等，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ．Ｂｉｏｌ，２００３年，第７３巻，５１１−５２４頁
【非特許文献２５】Ｃｈｅｏｎ Ｈｏ Ｐａｒｋ，等，ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ ｅｘｈｉｂｉｔｓ ａ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ，ａｃｃｏｍｐａｎｉｅｄ ｂｙ ＲＯＳ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ｉｎ ＲＡＷ ２６４．７ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，Ｌｉｐｉｄｓ，ｉｎ ｐｒｅｓｓ，２００９年
【非特許文献２６】Ｏｋｉｔａ，Ｍ．等，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ．，１９９７年，第７１巻，３１−３４頁
【非特許文献２７】Ｃｒｏｓｅｔ，Ｍ．等，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．２０００年，第３４５巻，６１−６７頁
【非特許文献２８】Ａｄａｃｈｉ，Ｊ．等，Ｋｏｂｅ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．，２００６年，第５２巻，１２７−１４０頁
【非特許文献２９】Ｃｈｅｎ，Ｓ．，等，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ．Ｃｈｅｍ．，２００７年，第５５巻，９６７０−９６７７頁
【非特許文献３０】Ｈｕａｎｇ，Ｌ．Ｓ．等，Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，２００６年，第４５５巻，１１９−１２６頁
【非特許文献３１】Ｈｕａｎｇ，Ｌ．Ｓ．等，Ｌｉｐｉｄｓ，２００７年，第４２巻，９８１−９９０頁
【非特許文献３２】Ｈｕａｎｇ，Ｌ．Ｓ．等，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ．Ｃｈｅｍ．，２００８年，第５６巻，１２２４−１２３２頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明の目的は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む抗炎症用組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
前記目的を達成するために、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、炎症性疾患の予防及び治療用製薬組成物を提供する。
【００１４】
また、本発明は、薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを炎症性疾患にかかった個体に投与する工程を含む、炎症性疾患治療方法を提供する。
【００１５】
また、本発明は、薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを個体に投与する工程を含む、炎症性疾患予防方法を提供する。
【００１６】
また、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、炎症性疾患の予防及び改善用健康食品を提供する。
【００１７】
また、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、抗炎症用皮膚または鼻腔用外用剤を提供する。
【００１８】
同時に、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、抗炎症用化粧料組成物を提供する。
【００１９】
以下、本発明で使用する用語を定義する。
【００２０】
本発明で使用する用語「炎症」は、身体局所に起きた傷害に対する生体組織の防御反応である。すなわち、各種の有害な刺激に応答して刺激による傷害を除去し、本来の状態に回復しようとする生体防御反応が炎症反応である。炎症の刺激には、感染あるいは化学的、物理的刺激などがある。炎症反応に係わる生体構成因子は、自由ラジカル、タンパク質、糖質、脂質などの低分子や高分子の化学物質と、血漿、血球、血管及び結合組織などがある。炎症の過程は、普通２つに分けられ、急性と慢性炎症に分けることができる。急性炎症は、数日以内の短期的な反応であり、血漿成分や血球などが微少循環系を通じて異物除去に関連する。慢性炎症は、持続時間が長くて、組織の増殖などが見られる。
【００２１】
本発明で使用する用語「予防」は、本発明の組成物の投与により炎症性疾患の発病を遅延させるすべての行為を意味する。
【００２２】
本発明で使用する用語「治療」及び「改善」は、本発明の組成物の投与により前記疾患の症状が好転または良い方向に変更されるすべての行為を意味する。
【００２３】
本発明で使用する用語「投与」は、任意の適切な方法で個体に所定の本発明の組成物を提供することを意味する。
【００２４】
本発明で使用する用語「個体」は、本発明の組成物を投与して症状が好転し得る人間、猿、犬、山羊、豚または鼠などすべての動物を意味する。
【００２５】
本発明で使用する用語「薬学的に有効な量」は、医学的治療に適用可能な合理的な量または危険の比率で疾患を治療するに十分な量を意味して、これは個体の炎症性疾患の種類、重症度、薬物の活性、薬物に対する敏感度、投与時間、投与経路及び排出割合、治療期間、同時に使用される薬物を含む要素及びその他医学分野でよく知られた要素によって決定することができる。
【００２６】
以下、本発明を詳しく説明する。
【００２７】
本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、炎症性疾患の予防及び治療用製薬組成物を提供する。
【００２８】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン（ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ）及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（２−Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）からなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましいが、これに限定されない。
【００２９】
前記ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、下記の化学式１で表わされることが好ましいが、これに限定されない。
【００３０】
【化１】
【００３１】
前記炎症性疾患は、喘息、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎及び退行性疾患からなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましく、喘息、腹膜炎、腸炎及びリュウマチ関節炎からなる群から選択されるいずれか一つであることがさらに好ましく、腹膜炎であることが最も好ましいが、これに限定されない。
【００３２】
本発明では、リゾホスファチジルコリン類の細胞内での抗炎症効能を調べるため、脂質多糖類由来ＮＯ生成に及ぼす影響を分析した結果、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが、少ない濃度でも明確にＮＯ生成阻害効果を示し、他のリゾホスファチジルコリン類と比較して顕著な阻害効果を示した（図１参照）。
【００３３】
本発明では、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの生体内での抗炎症効能を調べるため、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの静脈注射が、ザイモサンＡによって誘導されたマウス腹腔内炎症反応に対する阻害効果を分析した結果、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが少ない濃度でも優秀な阻害効果を示し、これは、アラキドノイルリゾホスファチジルコリンを含む他のリゾホスファチジルコリン類と比較して顕著な阻害効果を示した（図２ないし図４参照）。
【００３４】
本発明では、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの抗炎症効能が自体効能であることを調べるため、代謝産物であるドコサヘキサエン酸及び１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（１７（Ｓ）−ヒドロペルオキシ−４，７，１０，１３，１５，１９−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン）のザイモサンＡ誘導腹腔内炎症反応に対する阻害効果を分析した結果、静脈注射でドコサヘキサエン酸は、効果がほとんどないことを示し、１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンは、多少弱い抗炎症効果を示した。一方、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン自体が力強い抗炎症効果を示すことを確認した。これは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが、中間産物として１７‐ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンを媒介して抗炎症代謝産物に変換し得ることを提示するものであることが分かる（図５参照）。
【００３５】
本発明では、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの生体内での抗炎症効能を調べるため、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの腹腔注射がザイモサンＡによって誘導されたマウス腹腔内炎症反応に対する阻害効果を分析した結、図６に見られるように腹腔に投与されたドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、１５μｇ／ｋｇ以上で有意性ある阻害効果を示し、このような効果は、１５０μｇ／ｋｇ量の範囲に至るまで濃度依存的に阻害することを確認した（図６参照）。すなわち、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、腹腔内注射でも少ない用量でザイモサンＡによって誘導された血漿流入を効果的に阻害する効果を示すので、優秀な抗炎症効果があることが分かった。
【００３６】
これは、本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが、症抑剤と関連していると報告された既存のドコサヘキサエノンサンに比べて、顕著に高い炎症阻害効能があることを示すものである。
【００３７】
したがって、本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、細胞内で脂質多糖類（ＬＰＳ）由来酸化窒素（ＮＯ）生成を抑制し、生体内でザイモサンＡ誘導腹膜炎を抑制し、優れた抗炎症効能を有しており、細胞毒性がほとんどないので、炎症性疾患予防及び治療用組成物の有効成分として有用に使用できることが分かった。
【００３８】
本発明では、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンの生体内での抗炎症能を調べるため、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンの静脈注射がザイモサンＡによって誘導されたマウス腹腔内炎症反応に対する阻害効果を分析した結果、図７に見られるように、腹腔に投与されたドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンは、５０μｇ／ｋｇ以上で有意性ある阻害効果を示した。このような効果は、１５０μｇ／ｋｇ量の範囲に至るまで濃度依存的に阻害することを確認した（図７参照）。すなわち、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンは、静脈内注射で少ない用量でザイモサンＡによって誘導された血漿流入を効果的に阻害する効果を示すので、優れた抗炎症効果を有することが分かった。
【００３９】
本発明の化合物を含む組成物は、通常の方法による適切な担体、賦形剤または希釈剤を追加的に含むことができる。
【００４０】
本発明の組成物に含まれ得る担体、賦形剤及び希釈剤としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、澱粉、アカシアゴム、アルジネート、ゼラチン、リン酸カルシウム、カルシウムシリケート、セルロース、メチルセルロース、微晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、メチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、ステアリン酸マグネシウム及び鉱物油を挙げることができる。
【００４１】
本発明の化合物を含む組成物は、それぞれ通常の方法によって散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアゾールなどの経口型剤形、外用剤、座薬または滅菌注射溶液の形態に剤形化して使用することができる。
【００４２】
より詳細には、製剤化する場合には普通使用する充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩解剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を使用して調剤することができる。経口投与のための固形製剤には、錠剤、丸薬、散剤、顆粒剤、カプセル剤などが含まれ、このような固形製剤は、前記抽出物に少なくとも一つ以上の賦形剤、例えば、澱粉、炭酸カルシウム、スクロース、ラクトース、ゼラチンなどを混ぜて調剤することができる。また、単純な賦形剤以外にステアリン酸マグネシウム、タルクのような滑剤も使用することができる。経口のための液状製剤では、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などが該当し、よく使用される単純希釈剤である水、リキッドパラフィン以外に様々な賦形剤、例えば湿潤剤、甘味料、芳香剤、保存剤などを含むことができる。非経口投与のための製剤には、滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤及び座薬が含まれる。非水性溶剤、懸濁剤では、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物性油、エチルオレイン酸のような注射可能なエステルなどを使用することができる。座薬の基剤では、ハードファット（ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マクロゴ−ル、ツイーン６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロール、ゼラチンなどを使用することができる。
【００４３】
本発明の化合物の好ましい投与量は、患者の状態及び体重、疾病の程度、薬物形態、投与経路及び期間によって異なるが、当業者によって適切に選択され得る。しかし、好ましい効果を得るため、本発明の化合物の投与量は、０．００５〜０．０５ｍｇ／ｋｇで、好ましくは０．０１５〜０．１５ｍｇ／ｋｇの量を一日１回ないし数回に分けて投与することができる。本発明の化合物は、全体組成物総重量に対して０．００１〜２０重量％の含量で配合することができる。
【００４４】
また、本発明の化合物の薬学的投与形態は、これらの薬学的に許容可能な塩の形態でも使用することができ、単独でまたは他の薬学的活性化合物と結合のみならず適当な集合体で使用することができる。
【００４５】
本発明の薬学組成物は、鼠、マウス、家畜、人間などの哺乳動物に多様な経路に投与することができる。様々な投与方式が予想可能で、例えば、経口、直腸、静脈、腹腔、筋肉、皮下、子宮内硬膜または脳血管内注射によって投与することができる。
【００４６】
本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを炎症にかかった個体に投与する工程を含む、前記個体の炎症抑制方法を提供する。
【００４７】
前記炎症性は、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎及び肝炎からなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましく、腹膜炎、腸炎及び関節炎からなる群から選択されるいずれか一つであることがさらに好ましく、腹膜炎であることが最も好ましいが、これに限定されない。
【００４８】
前記投与は、同一または類似の機能を示す有効成分を１種以上含むことができる。投与のためには、追加で薬剤学的に許容可能な担体を１種以上含むことができる。薬剤学的に許容可能な担体は、食塩水、滅菌水、リンゲル液、緩衝食塩水、デキストロース溶液、マルトデキストリン溶液、グリセロール、エチルアルコール及びこれら成分の中から１成分以上を混合して使用することができ、必要によって抗酸化剤、緩衝液、静菌剤など他の通常の添加剤を添加することができる。また、希釈剤、分散剤、界面活性剤、結合剤及び滑剤を付加的に添加して水溶液、懸濁液、乳濁液などのような注射用剤形、散剤、錠剤、カプセル剤、丸薬、顆粒または注射液剤に製剤化できる。さらに、当分野の適正な方法、またはＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ ＰＡ，１８ｔｈ，１９９０）に開示されている方法を使用して各疾患によって、または成分によって好ましく製剤化することができる。
【００４９】
前記投与は、投与方法によって非経口投与（例えば静脈内、皮下、腹腔内または局所に適用）したり経口投与したりすることができ、投与量は患者の体重、年齢、性別、健康状態、食餌、投与時間、投与方法、排泄率及び疾患の重症度等によってその範囲が多様である。本発明の化合物の一日投与量は、０．００５〜０．５ｍｇ／ｋｇで、好ましくは０．０１５〜０．１５ｍｇ／ｋｇの量を一日に１回ないし数回に分けて投与することができる。
【００５０】
また、本発明は、薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを炎症性疾患にかかった個体に投与する工程を含む炎症性疾患治療方法を提供する。
【００５１】
また、本発明は、薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを個体に投与する工程を含む炎症性疾患予防方法を提供する。
【００５２】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましいが、これに限定されない。
【００５３】
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、細胞内で低い濃度で炎症を抑制して、細胞毒性がほとんどなく、生体内で少ない濃度で炎症を阻害するので、炎症性疾患予防及び治療に使用できることが分かる。
【００５４】
前記炎症性疾患は、喘息、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎及び退行性疾患からなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましく、喘息、腹膜炎、腸炎及びリュウマチ関節炎からなる群から選択されるいずれか一つであることがさらに好ましく、腹膜炎であることが最も好ましいが、これに限定されない。
【００５５】
前記投与は、同一または類似の機能を示す有効成分を１種以上含むことができる。投与のためには、追加で薬剤学的で許容可能な担体を１種以上含むことができる。薬剤学的に許容可能な担体は、食塩水、滅菌水、リンゲル液、緩衝食塩水、デキストロース溶液、マルトデキストリン溶液、グリセロール、エチルアルコール及びこれら成分の中で１成分以上を混合して使用することができ、必要によって、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤など他の通常の添加剤を添加することができる。また、希釈剤、分散剤、界面活性剤、結合剤及び滑剤を付加的に添加して、水溶液、懸濁液、乳濁液などのような注射用剤形、散剤、錠剤、カプセル剤、丸薬、顆粒または注射液剤に製剤化できる。さらに当分野の適正な方法、またはＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ ＰＡ，１８ｔｈ，１９９０年）に開示されている方法を使用して、各疾患にしたがってまたは成分によって好ましく製剤化することができる。
【００５６】
前記投与は、投与方法によって非経口投与（例えば、静脈内、皮下、腹腔内または局所に適用）したり経口投与したりすることができ、投与量は、患者の体重、年齢、性別、健康状態、食餌、投与時間、投与方法、排泄率及び疾患の重症度等によってその範囲が多様である。本発明の化合物の一日投与量は、０．００５〜０．５ｍｇ／ｋｇで、好ましくは０．０１５〜０．１５ｍｇ／ｋｇの量を一日に１回ないし数回に分けて投与することができる。
【００５７】
また、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む炎症性疾患の予防及び改善用健康食品を提供する。
【００５８】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましいが、これに限定されない。
【００５９】
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが細胞内で脂質多糖類由来ＮＯ生成を抑制して、生体内でザイモサンＡ誘導腹膜炎を阻害することにより、抗炎症効能が優れ細胞毒性がほとんどないので、炎症性疾患予防及び改善用健康食品の有効成分として有用に使用することができることが分かる。
【００６０】
前記ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを添加することができる食品としては、例えば、各種食品類、乳製品、飲料、ガム、お茶、ビタミン単一剤、健康補助食品類などがあり、粉末、顆粒、錠剤、カプセルまたは飲料の形態で使用することができる。
【００６１】
ここで、食品または飲料の中で前記ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンの量は、全体食品または飲料重量の０．０００１ないし１５重量部で加えることができる。
【００６２】
本発明の健康飲料組成物は、必須成分として前記ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを含む以外に、他の成分には特別な制限がなく、通常の飲料のように様々な香味剤または天然炭水化物などを追加成分として含むことができる。上述した天然炭水化物の例としては、モノサッカライド、例えば、ブドウ糖、果糖など、ジサッカライド、例えばマルトース、スクロースなど、及びポリサッカライド、例えばデキストリン、シクロデキストリンなどの通常的な糖、及びキシリトール、ソルビトール、エリスリトールなどの糖アルコールである。上述したもの以外の香味剤として天然香味剤（タウマチン、ステビア抽出物（例えば、レバウジオシドＡ、グリシルヒジン等）及び合成香味剤（サッカリン、アスパルテームなど）を有利に使用することができる。
【００６３】
前記の外に本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、様々な栄養剤、ビタミン、鉱物（電解質）、合成風味剤及び天然風味剤などの風味剤、着色剤及び充填剤（チーズ、チョコレートなど）、ペクチン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に使用される炭酸化剤などを含むことができる。その他に、本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、天然果物ジュース及び果物ジュース飲料及び野菜飲料の製造のための果肉を含むことができる。このような成分は、独立的にまたは組み合わせて使用することができる。このような添加剤の割合は、本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミン１００重量部当り０．１ないし２０重量部の範囲で選択することが一般的であるが、これに限定されない。
【００６４】
また、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む抗炎症用皮膚または鼻腔用外用剤を提供する。
【００６５】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましいが、これに限定されない。
【００６６】
本発明の化合物を皮膚外用剤に使用する場合、追加で脂肪物質、有機溶媒、溶解剤、濃縮剤及びゲル化剤、軟化剤、抗酸化剤、懸濁化剤、安定化剤、発泡剤、芳香剤、界面活性剤、水、イオン型またはノニオン型乳化剤、充填剤、金属イオン封鎖剤及びキレート化剤、保存剤、ビタミン、遮断剤、湿潤化剤、必須オイル、染料、顔料、親水性または親油性活性剤、脂質小嚢または皮膚用外用剤に通常使用される任意の異なる成分で、皮膚科学分野で通常使用される補助剤を含むことができる。また、前記成分は、皮膚科学分野で一般的に使用される量で導入することができる。
【００６７】
同時に、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む抗炎症用化粧料組成物を提供する。
【００６８】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましいが、これに限定されない。
【００６９】
本発明の化粧料は、水溶性ビタミン、油溶性ビタミン、高分子ペプチド、高分子多糖、スフィンゴ脂質及び海草エキスからなる群から選択された組成物を含むが、これに限定されない。
【００７０】
前記水溶性ビタミンとしては、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、好ましくは、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ピリドキシン、塩酸ピリドキシン、ビタミンＢ１２、パントテン酸、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、葉酸、ビタミンＣ、ビタミンＨなどを挙げることができ、それらの塩（チアミン塩酸塩、アスコルビン酸ナトリウム塩など）や誘導体（アスコルビン酸−２−リン酸ナトリウム塩、アスコルビン酸−２−リン酸マグネシウム塩など）を含むが、これに限定されない。
【００７１】
前記油溶性ビタミンとしては、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、好ましくは、ビタミンＡ、カロチン、ビタミンＤ２、ビタミンＤ３、ビタミンＥ（ｄ１−α−トコフェロール、ｄ−α−トコフェロール）及び、そらの誘導体（パルミチン酸アスコルビン、ステアリン酸アスコルビン、ジパルミチン酸アスコルビン、酢酸−ｄｌ−α−トコフェロール、ニコチン酸ｄｌ−α−トコフェロールビタミンＥ、ＤＬ−パントテニルアルコール、Ｄ−パントテニルアルコール、パントテニルエチルエーテルなど）を含むが、これに限定されない。
【００７２】
前記高分子ペプチドとしては、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、コラーゲン、加水分解コラーゲン、ゼラチン、エラスチン、加水分解エラスチンまたはケラチンが好ましいが、これに限定されない。
【００７３】
前記高分子多糖としては、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、ヒドロキシエチルセルロース、キサンタンガム、ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸またはその塩（ナトリウム塩など）が好ましいが、これに限定されない。
【００７４】
前記スフィンゴ脂質としては、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、セラミド、フィトスフィンゴシン、スフィンゴ糖脂質が好ましいが、これに限定されない。
【００７５】
前記海草エキスでは、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、褐藻エキス、紅藻エキスまたは緑藻エキスが好ましく、これらの海草エキスから精製されたカラギーナン、アルギン酸、アルギン酸ナトリウムまたはアルギン酸カリウムが好ましいが、これに限定されない。
【００７６】
本発明の化粧料には、前記必須成分と共に必要によって通常化粧料に配合される他の成分を配合することができる。前記他の成分としては、乳脂成分、保湿剤、エモリエント剤、界面活性剤、有機及び無機顔料、有機粉体、紫外線吸収剤、防腐剤、殺菌剤、酸化防止剤、植物抽出物、ｐＨ調整剤、アルコール、色素、香料、血行促進剤、冷感剤、制汗剤または精製水が好ましいが、これに限定されない。
【００７７】
前記油脂成分としては、エステル系油脂、炭化水素系油脂、シリコン系油脂、フッ素系油脂、動物油脂または植物油脂が好ましいが、これに限定されない。
【００７８】
エステル系油脂としては、トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル、２−エチルヘキサン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ブチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸エチル、パルミチン酸オクチル、イソステアリン酸イソセチル、ステアリン酸ブチル、リノール酸エチル、リノール酸イソプロピル、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソセチル、ミリスチン酸イソステアリル、パルミチン酸イソステアリル、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソセチル、セバシン酸ジエチル、アジピン酸ジイソプロピル、ネオペンタン酸イソアルキル、トリ（カプリル.カプリン酸）グリセリル、トリ２−エチルヘキサン酸トリメチロ−ルプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロ−ルプロパン、テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリトール、カプリル酸セチル、ラウリン酸デシル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸デシル、ミリスチン酸ミリスチル、ミリスチン酸セチル、ステアリン酸ステアリル、オレイン酸デシル、リシノレイン酸セチル、ラウリン酸イソステアリル、ミリスチン酸イソトリデシル、パルミチン酸イソセチル、ステアリン酸オクチル、ステアリン酸イソセチル、オレイン酸イソデシル、オレイン酸オクチルドデシル、リノール酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソプロピル、２−エチルヘキサン酸セトステアリル、２−エチルヘキサン酸ステアリル、イソステアリン酸ヘキシル、ジオクタン酸エチレングリコール、ジオレイン酸エチレングリコール、ジカプリン酸プロピレングリコール、ジ（カプリル.カプリン酸）プロピレングリコール、ジカプリル酸プロピレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジオクタン酸ネオペンチルグリコール、トリカプリル酸グリセリル、トリウンデシル酸グリセリル、トリイソパルミチン酸グリセリル、トリイソステアリン酸グリセリル、ネオペンタン酸オクチルドデシル、オクタン酸イソステアリル、イソノナン酸オクチル、ネオデカン酸ヘキシルデシル、ネオデカン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソセチル、イソステアリン酸イソステアリル、イソステアリン酸オクチルデシル、ポリグリセリンオレイン酸エステル、ポリグリセリンイソステアリン酸エステル、クエン酸トリイソセチル、クエン酸トリイソアルキル、クエン酸トリイソオクチル、乳酸ラウリル、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、乳酸オクチルデシル、クエン酸トリエチル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸アセチルトリブチル、クエン酸トリオクチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ヒドロキシステアリン酸２−エチルヘキシル、コハク酸ジ２−エチルヘキシル、アジピン酸ジイソブチル、セバシン酸ジイソプロピル、セバシン酸ジオクチル、ステアリン酸コレステリル、イソステアリン酸コレステリル、ヒドロキシステアリン酸コレステリル、オレイン酸コレステリル、オレイン酸ジヒドロコレステリル、イソステアリン酸フィトステリル、オレイン酸フィトステリル、１２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸イソセチル、１２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸ステアリルまたは １２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸イソステアリルなどのエステル系が好ましいが、これに限定されない。
【００７９】
前記炭化水素系油脂としては、スクアレン、流動パラフィン、α−オレフインオリゴマー、イソパラフィン、セレシン、パラフィン、流動イソパラフィン、ポリブテン、マイクロクリスタリンワックスまたはワセリンなどの炭化水素系油脂が好ましいが、これに限定されない。
【００８０】
前記シリコン系油脂としては、ポリメチルシリコン、メチルフェニルシリコン、メチルシクロポリシロキサン、オクタメチルポリシロキサン、デカメチルポリシロキサン、ドデカメチルシクロシロキサン、ジメチルシロキサン・メチルセチルオキシシロキサン共重合体、ジメチルシロキサン・メチルステアロキシシロキサン共重合体、アルキル変性シリコン油またはアミノ変性シリコン油が好ましいが、これに限定されない。
【００８１】
前記フッ素系油脂としては、パーフルオロポリエーテルが好ましいが、これに限定されない。
【００８２】
前記動物または植物油脂としては、アボカド油、アルモンド油、オリーブ油、ゴマ油、米ぬか油、サフラワー油、大豆油、トウモロコシ油、ナタネ油、杏仁油、パーム核油、パーム油、ヒマシ油、ヒマワリ油、ブドウ種子油、綿実油、ヤシ油、ククイナッツ油、小麦胚芽油、米胚芽油、シアバター、月見草オイル、マカデミアナッツ油、メドホーム油、卵黄油、牛脂、馬油、ミンク油、オレンジラフィー油、ホホバ油、キャンデリラワックス、カルナバワックス、液状ラノリンまたは硬化ヒマシ油等の動物または植物油脂が好ましいが、これに限定されない。
【００８３】
前記保湿剤としては水溶性低分子保湿剤、脂溶性低分子保湿剤、水溶性高分子または脂溶性高分子が好ましいが、これに限定されない。水溶性低分子保湿剤としては、セリン、グルタミン、ソルビトール、マンニトール、ピロリドン−カルボン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、エチレングリコール、ポリエチレングリコールＢ（重合度ｎ＝２以上）、ポリプロピレングリコール（重合度ｎ＝２以上）、ポリグリセリンＢ（重合度ｎ＝２以上）、乳酸または乳酸塩が好ましいが、これに限定されない。
【００８４】
脂溶性低分子保湿剤としては、コレステロールまたはコレステロールエステルが好ましいが、これに限定されない。
【００８５】
水溶性高分子としては、カルボキシビニルポリマー、ポリアスパラギン酸塩、トラガカント、キサンタンガム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、水溶性キチン、キトサンまたはデキストリンが好ましいが、これに限定されない。
【００８６】
脂溶性高分子としては、ポリビニルピロリドン・エイコセン共重合体、ポリビニルピロリドン・ヘキサデセン共重合体、ニトロセルロース、デキストリン脂肪酸エステルまたは高分子シリコンが好ましいが、これに限定されない。
【００８７】
エモリエント剤しては、長鎖アシルグルタミン酸コレステリルエステル、ヒドロキシステアリン酸コレステリル、１２−ヒドロキシステアリン酸、ステアリン酸、ロジン酸またはラノリン脂肪酸コレステリルエステルが好ましいが、これに限定されない。
【００８８】
前記界面活性剤としては、ノニオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤または両性界面活性剤が好ましいが、これに限定されない。
【００８９】
ノニオン性界面活性剤としては、自己乳化型モノステアリン酸グリセリン、プロピレングリコール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ＰＯＥ（ポリオキシエチレン）ソルビタン脂肪酸エステル、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル、ＰＯＥアルキルエーテル、ＰＯＥ脂肪酸エステル、ＰＯＥ硬化ヒマシ油、ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ・ＰＯＰ（ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレン）共重合体、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル、ポリエーテル変性シリコン、ラウリン酸アルカノールアミド、アルキルアミンオキシドまたは水素添加大豆リン脂質が好ましいが、これに限定されない。
【００９０】
アニオン性界面活性剤としては、脂肪酸石鹸、α−アシルスルホン酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルアリルスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩、ＰＯＥアルキルエーテル硫酸塩、アルキルアミド硫酸酸塩、アルキルリン酸塩、ＰＯＥアルキルリン酸塩、アルキルアミドリン酸塩、アルキロイルアルキルタウリン塩、Ｎ−アシルアミノ酸塩、ＰＯＥアルキルエーテルカルボン酸塩、アルキルスルホコハク酸塩、アルキルスルホ酢酸ナトリウム、アシル化加水分解コラーゲンペプチド塩またはパーフルオロアルキルリン酸エステルが好ましいが、これに限定されない。
【００９１】
カチオン性界面活性剤としては、塩化アルキルトリメチルアンモニム、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、臭化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化セトステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ジステアリルジメチルアンモニウム、塩化ステアリルジメチルベンジルアムモニウム、臭化ベヘニルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸ジエチルアミノエチルアミド、ステアリン酸ジメチルアミノプロピルアミドまたはラノリン誘導体第４級アンモニウム塩が好ましいが、これに限定されない。
【００９２】
両性界面活性剤としては、カルボキシベタイン型、アミドベタイン型、スルホベタイン型、ヒドロキシスルホベタイン型、アミドスルホベタイン型、ホスホベタイン型、アミノカルボン酸塩型、イミダゾリン誘導体型またはアミドアミン型などの両性界面活性剤が好ましいが、これに限定されない。
【００９３】
前記有機及び無機顔料としては、ケイ酸、無水ケイ酸、ケイ酸マグネシウム、タルク、セリサイト、マイカ、カオリン、ベンガラ、クレー、ベントナイト、チタン被膜雲母、オキシ塩化ビスマス、酸化ジルコニウム、酸化マグネシウム、酸化亜鉛、酸化チタン、酸化アルミニウム、硫酸カルシウム、硫酸バリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、酸化鉄、群青、酸化クロム、水酸化クロム、カラミン及びこれらの複合体等の無機顔料；ポリアミド、ポリエステル、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリウレタン、ビニル樹脂、尿素樹脂、フェノール樹脂、フッ素樹脂、ケイ素樹脂、アクリル樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂、ポリカーボネート樹脂、ジビニルベンゼン・スチレン共重合体、シルクパウダー、セルロース、ＣＩピグメントイエロー、ＣＩピグメントオレンジ等の有機顔料；及びこれらの無機顔料と有機顔料の複合顔料が好ましいが、これに限定されない。
【００９４】
前記有機粉体としては、ステアリン酸カルシウム等の金属石鹸；セチルリン酸亜鉛ナトリウム、ラウリルリン酸亜鉛、ラウリルリン酸カルシウム等のアルキルリン酸多価金属塩；Ｎ−ラウロイル−β−アラニンカルシウム、Ｎ−ラウロイル−β−アラニン亜鉛、Ｎ−ラウロイルグリシンカルシウムなどのアシルアミノ酸多価金属塩；Ｎ−ラウロイル−タウリンカルシウム、Ｎ−パルミトイル−タウリンカルシウム等のアミドスルホン酸多価金属塩；Ｎε−ラウロイル−Ｌ−リジン、Ｎε−パルミトイルリジン、Ｎα−パルミトイルオルニチン、Ｎα−ラウロイルアルギニン、Ｎα−硬化牛脂脂肪酸アシルアルギニン等のＮ−アシル塩基性アミノ酸；Ｎ−ラウロイルグリシルグリシン等のＮ−アシルポリペプチド；α−アミノカプリル酸、α−アミノラウリン酸等のα−アミノ脂肪酸；またはポリエチレン、ポリプロピレン、ナイロン、ポリメチルメタクリレート、ポリスチレン、ジビニルベンゼン・スチレン共重合体、四フッ化エチルレンが好ましいが、これに限定されない。
【００９５】
前記紫外線吸収剤としては、パラアミノ安息香酸、パラアミノ安息香酸エチル、パラアミノ安息香酸アミル、パラアミノ安息香酸オクチル、サリチル酸エチレングリコール、サリチル酸フェニル、サリチル酸オクチル、サリチル酸ベンジル、サリチル酸ブチルフェニル、サリチル酸ホモメンチル、ケイ皮酸ベンジル、パラメトキシケイ皮酸−２−エトキシエチル、パラメトキシケイ皮酸オクチル、ジパラメトキシケイ皮酸モノ−２−エチルヘキサングリセリル、パラメトキシケイ皮酸イソプロピル、ジイソプロピル・ジイソプロピルケイ皮酸エステル混合物、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、ヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ヒドロキシメトキシベンゾフェノンスルホン酸及びその塩、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノンジスルホン酸ナトリウム、ジヒドロキシベンゾフェノン、テトラヒドロキシベンゾフェノン、４−ｔｅｒｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン、２，４，６−トリアニリノ−ｐ−（カルボ−２’−エチルヘキシル−１’−オキシ）−１，３，５−トリアジンまたは２−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニル）ベンゾトリアゾールが好ましいが、これに限定されない。
【００９６】
前記殺菌剤としては、ヒノキチオール、トリクロサン、トリクロロヒドロキシジフェニルエーテル、クロルヘキシジングルコン酸塩、フェノキシエタノール、レゾルシン、イソプロピルメチルフェノール、アズレン、サリチル酸、ジンクピリチオン、塩化ベンザルコニウム、感光素３０１号、モノニトログアヤコールナトリウムまたはウンデシレン酸が好ましいが、これに限定されない。
【００９７】
前記酸化防止剤としては、ブチルヒドロキシアニソール、没食子酸プロピルまたはエリソルビン酸が好ましいが、これに限定されない。
【００９８】
前記ｐＨ調製剤としては、クエン酸、クエン酸ナトリウム、リンゴ酸、リンゴ酸ナトリウム、フマル酸、フマル酸ナトリウム、コハク酸、コハク酸ナトリウム、水酸化ナトリウムまたはリン酸一水素ナトリウムが好ましいが、これに限定されない。
【００９９】
前記アルコールとしては、セチルアルコール等の高級アルコールが好ましいが、これに限定されない。
【０１００】
また、他に加えても良い配合成分は、これに限定されるものではなく、また、前記いずれの成分も本発明の目的及び効果を損なわない範囲内で配合可能であるが、全重量に対して、０．０１〜５重量％で配合することが好ましく、０．０１〜３重量％で配合することがさらに好ましいが、これに限定されない。
【０１０１】
本発明の化粧料は、溶液、乳化物または粘性型混合物の形状をとることができるが、これに限定されない。本発明の化粧料組成物に含まれる成分は、有効成分として本発明の化合物以外に化粧料組成物に通常的に使用される成分を含むことができ、安定化剤、溶解化剤、ビタミン、顔料及び香料のような通常的な補助剤及び担体を含むことができるが、これに限定されない。
【０１０２】
本発明の化粧料組成物は、当業界で通常的に製造されるいかなる剤形でも製造することができ、乳液、クリーム、化粧水、パック、ファンデーション、ローション、美容液または毛髪化粧料に製造することができるが、これに限定されない。具体的に、本発明の化粧料組成物は、スキンローション、スキンソフナー、スキントナー、アストリンゼン、ローション、ミルクローション、モイスチャーローション、栄養ローション、マッサージクリーム、栄養クリーム、モイスチャークリーム、ハンドクリーム、ファンデーション、エッセンス、栄養エッセンス、パック、石鹸、クレンジングフォーム、クレンジングローション、クレンジングクリーム、ボディローションまたはボディクレンザーの剤形を含むが、これに限定されない。
【０１０３】
本発明の剤形がペースト、クリームまたはゲルの場合には、担体成分として動物繊維、植物繊維、ワックス、パラフィン、澱粉、トラカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト、シリカ、タルクまたは酸化亜鉛を使用することができるが、これに限定されない。
【０１０４】
本発明の剤形がパウダーまたはスプレーの場合には、担体成分としてラクトース、タルク、シリカ、アルミニウムヒドロキシド、カルシウムシリケートまたはポリアミドパウダーを使用することができる。特に、スプレーの場合には、追加的にクロロフルオロヒドロカーボン、プロパン／ブタンまたはジメチルエーテルのような推進体を含むことができるが、これに限定されない。
【０１０５】
本発明の剤形が溶液または乳濁液の場合には、担体成分として溶媒、溶媒化剤または乳濁化剤が使用され、水、エチルアルコール、イソプロパノール、エチルカーボネート、エチルアセタート、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレングリコール、１，３−ブチルグリコールオイル、グリセロール脂肪族エステル、ポリエチレングリコールまたはソルビタンの脂肪酸エステルを使用されることができるが、これに限定されない。
【０１０６】
本発明の剤形が懸濁液の場合には、担体成分として水、エチルアルコールまたはプロピレングリコールのような液状希釈剤、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールエステル及びポリオキシエチレンソルビタンエステルのような懸濁剤、微少結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、アガーまたはトラガカントを使用することができるが、これに限定されない。
【０１０７】
本発明の剤形が界面活性剤含有クレンジングの場合には、担体成分として脂肪族アルコールスルファート、脂肪族アルコールエーテルスルファート、スルホコハク酸モノエステル、イソシアナート、イミダゾリニウム誘導体、メチルタウレート、サルコシネート、脂肪酸アミドエーテルスルファート、アルキルアミドベタイン、脂肪族アルコール、脂肪酸グリセリド、脂肪酸ジエタノールアミド、植物性油、リノリン誘導体またはエトキシル化グリセロール脂肪酸エステルを使用することができるが、これに限定されない。
【発明の効果】
【０１０８】
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ＮＯ生成を抑制しかつ細胞毒性がほとんどなく、生体内で少ない濃度で腹膜炎を阻害することにより、炎症性疾患予防及び治療のための抗炎症用組成物として有用に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１０９】
【図１】多価不飽和リソポリファチジルコリン類の細胞内抗炎症効果を確認するために、ＲＡＷ２６４．７細胞を多様な濃度の多価不飽和リソポリファチジルコリン（リノレオイルリゾホスファチジルコリン、アラキドノイルリゾホスファチジルコリン及びドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン）とともに反応させた後、ＬＰＳによって誘導された炎症反応で細胞生存率（Ａ）とＮＯ生成程度（Ｂ）を測定した結果を示すグラフである（◆：リノレオイルリゾホスファチジルコリン；■：アラキドノイルリゾホスファチジルコリン；及び▲：ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン）。前記各実験は、３回反覆し、実験結果は、平均値±標準偏差で表示した（ＬＰＳ処理群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１）。
【図２】ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの濃度による生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンを尾静脈に前投与した後、３０分後にザイモサンＡを投与して腹腔内炎症を誘発させて、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入程度を測定した結果を示すグラフである。各実験群は、１０匹で構成され、実験結果は、平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【図３】リノレオイルリゾホスファチジルコリン及びアラキドノイルリゾホスファチジルコリンの濃度による生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにリゾホスファチジルコリン（Ａ）及びアラキドノイルリゾホスファチジルコリン（Ｂ）をそれぞれ尾静脈に前投与した後、ザイモサンＡを投与して腹腔内炎症を誘発させて、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入程度を測定した結果を示すグラフである。各実験群は、１０匹で構成され、実験結果は、平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【図４】ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの投与時間別生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンを投与した後、多様な時間間隔でザイモサンＡを投与して腹腔内炎症を誘発させて、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入程度を測定した結果を示すグラフである。各実験群は１０匹で構成され、実験結果は平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【図５】ドコサヘキサエン酸及びドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン過酸化物の生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（１）、ドコサヘキサエン酸（２）、及び１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（３）をそれぞれ前投与した後、ザイモサンＡを投与して腹腔内炎症を誘発させて、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入程度を測定した結果を示すグラフである。各実験群は１０匹で構成され、実験結果は平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【図６】ドコサヘキサエノイルリソホスファチジルコリンまたは１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（リゾホスファチジルコリンの酸化物）の用量による生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（■）または１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（□）を１５〜１５０μｇ／ｋｇで腹腔投与２時間後に、ザイモサンＡを投与して腹腔内炎症を誘発させた後、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入程度を測定した結果を示すグラフである。各実験群は５〜１０匹で構成され、実験結果は平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【図７】ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンの用量による生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにリゾホスファチジルエタノールアミンを１５〜１５０μｇ／ｋｇで静脈投与３０分後にザイモサンＡを投与して、腹腔内炎症を誘発させた後、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入（ｐｌａｓｍａ ｌｅａｋａｇｅ）程度を測定した結果を示すグラフである。各実験君は、５〜１０匹で構成され、実験結果は、平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【発明を実施するための形態】
【０１１０】
以下、本発明の実施例及び製造例によって詳しく説明する。
【０１１１】
但し、下記実施例及び製造例は、本発明を例示するだけのものであって、本発明の内容が下記実施例及び製造例に限定されるものではない。
＜実施例１＞ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの細胞内抗炎症効果の調査
大食細胞は、炎症反応と生体防御において重要な役割をすることが知られている。大食細胞を脂質多糖類（ＬＰＳ）で活性化させると、誘導性酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）の誘導を通じて多量の酸化窒素（ＮＯ）を生成するようになる。
【０１１２】
それで、本発明者等は、ＲＡＷ２６４．７細胞内でＬＰＳによって誘導される炎症媒介体ＮＯの生成に対する不飽和脂肪酸含有リゾホスファチジルコリン（ｌｙｓｏＰＣ）類の影響を観察した。具体的に、ＲＡＷ２６４．７細胞（５×１０４／ｗｅｌｌ）をそれぞれの多価不飽和リゾホスファチジルコリンであるリノレオイルリゾホスファチジルコリン、アラキドノイルリゾホスファチジルコリン及びドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン［ジアシルホスファチジルコリン（Ａｖａｎｔｉ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ，Ａｌａｂａｓｔｅｒ，ＡＬ，米国）とホスホリパーゼ（ＰＬＡ２）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，米国）を一緒に処理して製造（非特許文献２７−３１）］（０〜６０μＭ）と３７℃で２時間事前培養した後、ＬＰＳ（１μｇ／ｍｌ）を入れて同一条件下で２０時間培養した。前記培養した細胞余液にグリース試薬（Ｇｒｉｅｓｓ ｒｅａｇｅｎｔ）［２．５％Ｈ３ＰＯ４中、１％スルファニルアミド，０．１％Ｎ−（１−ナフチル）エチレンジアミドジヒドロクロライド］を入れて常温で１５分間反応させた後に５４０ｎｍで吸光度を測定して、前記過程で生成されたＮＯの量を測定した（Ｇｒｅｅｎ ＬＣ，等，Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８２年１０月，第１２６（１）巻：１３１−８頁）。
【０１１３】
その結果、図１Ｂに見られるようにアラキドノイルリゾホスファチジルコリンは、６０μＭでＬＰＳ誘導ＮＯ形成を一部阻害する傾向を示したが、２０％以上の阻害度を示さなかった。一方、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの場合、１２μＭ以上の低濃度でも明らかな阻害効果を示した。ここで、５０％保護用量（ＥＣ５０）値は、１８．２±２．１μＭで算出された。一方、リノレオイルリゾホスファチジルコリンは、６０μＭに至るまで有意的な阻害効果を示さなかった（図１Ｂ）。
＜実施例２＞ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの細胞毒性の調査
本発明者等は、三種類の多価不飽和リゾホスファチジルコリンの細胞毒性をＭＴＴ分析法を用いて測定した。具体的に、ＲＡＷ２６４．７細胞をペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００Ｕ／ｍｌ）と熱によって非活性されたＦＢＳ（１０％ｖ／ｖ）含有ＤＭＥＭ培地で３７℃、５％ＣＯ２条件下で培養した。細胞（６ないし１３パッセージ（ｐａｓｓａｇｅ））を回収した後、９６ウェルプレート（５×１０４／ｗｅｌｌ）に分取培養した。各多価不飽和リゾホスファチジルコリン（０〜６０μＭ）を入れた後、２時間静置した後、ＬＰＳ（１μｇ／ｍｌ）存在下に前記条件で２０時間培養した。細胞死率は、ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２イル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロミド）法に基づいて５７０ｎｍでの吸光度を６９０ｎｍでの吸光度と比較して評価した（Ｌｉｎ ＷＷ．等，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９８年，第１２５巻，１６０１−１６０９頁；Ｍｏｓｍａｎｎ，Ｔ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９８３年，第６５巻，５５−６３頁）。
【０１１４】
その結果、図１Ａに見られるようにアラキドノイルリゾホスファチジルコリンは、濃度による細胞毒性が多少有意的に示された一方、リノレオイルリゾホスファチジルコリンまたはドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの場合、有意的な細胞毒性が示されなかった（図１Ａ）。
【０１１５】
したがって、アラキドノイルリゾホスファチジルコリンのＮＯ生成阻害効果は、細胞毒性による結果でも推論することができるが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンによるＮＯ生成阻害効果は、細胞毒性とは無関係な濃度で成り立ったものと見られる。これは、ＮＯ生成に対するドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの選択的阻害効果と認められる。
＜実験例３＞ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの静脈注射を通じた生体内抗炎症効果の調査
＜３−１＞リゾホスファチジルコリン類のザイモサンＡ誘導血漿流入阻害効果の調査
５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）は、アラキドン酸から炎症媒介体であるロイコトリエンの生成に重要な役割をすることにより、５−ＬＯＸの阻害を通じて炎症反応の減少をもたらすことができることが報告されたことがある。また、ザイモサン誘導腹膜炎は、５−ＬＯＸによって生成されるロイコトリエンによって媒介されることが知られている（ＲａｏＴＳ，等，Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ．，１９９４年６月，第２６９（３）巻，９１７−２５頁；Ｄｏｈｅｒｔｙ Ｎ Ｓ，等，Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ．，１９８５年１１月，第３０（５）巻，７６９−８９頁）。
【０１１６】
それで、本発明者等は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンのザイモサン誘導腹膜炎に対する阻害効果を調べるために、マウスにザイモサンＡ（ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐ，Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，米国）を投与して腹腔内炎症を誘発させた後、各リゾホスファチジルコリン類を投与して抗炎症効果を評価した。具体的に、ＳＰＦ条件下で飼育されたマウス（６週齢、雄）を搬入１２時間後、薬学大学内動物保存室で１２時間明暗サイクル条件下に維持した後、腹腔内炎症反応実験を実施した。まず、各マウス５〜１０匹で構成された各群マウスの尾静脈に、試験群に各リゾホスファチジルコリン類１０〜５００μｇ／ｋｇ用量で注射して、対照群に生理食塩水を５０〜１００μｌ用量で注射した。続いて、３０分後に、０．５％エバンスブルー染色溶液（０．２ｍｌ）で尾静脈注射した後、腹腔内に生理食塩水に溶かしたザイモサンＡ（１ｍｇ／ｍｌ）溶液１００μｌを投与した。前記投与３０分後に軽微な痲酔［エーテルまたはフルオラン（ｆｌｕｏｒａｎｅ）］下に頚部切断した後、腹腔内に氷冷ＰＢＳを４ｍｌ投与した後、腹腔液をプラスチック注射器で回収して遠心分離した（３，０００ｒｐｍ，１０分）。前記遠心分離して得た上澄み液を分光光度計を使用して６２０ｎｍでエバンスブルーの滲出（ｅｘｕｄａｔｉｏｎ）程度を測定することで、抗炎症効果を評価した（Ａｒｉｔａ Ｍ，等，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．，２００５年５月２４日，第１０２（２１）巻，７６７１−６頁；Ｔａｋｅｎａｋａ Ｍ，等，Ｂｉｏｌ Ｐｈａｒｍ Ｂｕｌｌ．，２００５年７月，第２８（７）巻，１２９１−３頁）。
【０１１７】
その結果、図２に見られるようにドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、１５μｇ／ｋｇで有意性ある阻害効果を示した。このような効果は、５００μｇ／ｋｇ量の範囲に至るまで濃度依存的にザイモサン誘導血漿流入を減少させた（図２）。一方、アラキドノイルリゾホスファチジルコリンを静脈注射した３０分後にザイモサン（５μｌ／３０分）を腹腔内に投入時、アラキドノイルリゾホスファチジルコリンは、５０μｇ／ｋｇで血漿流入を有意的に低下させた。このような阻害現象は、１５０μｇ／ｋｇで明らかだったが、５００μｇ／ｋｇに増加させた時にさらに増加する傾向を示すことができなかった。一方、リノレオイルリゾホスファチジルコリンは、濃度５００μｇ／ｋｇに至るまで何の阻害効果も示さなかった（図３）。
【０１１８】
したがって、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、他のリゾホスファチジルコリン類に比べて、ザイモサンＡによって誘導された血漿流入を阻害する効果がずっと優れていることが分かった。
＜３−２＞リゾホスファチジルコリン類のザイモサンＡ誘導血漿流入阻害効果の経時別調査
本発明者等は、各リゾホスファチジルコリンの抗炎症効果（ザイモサンＡ誘導血漿流入の阻害）を経時別に測定した。具体的に、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（５０μｇ／ｋｇ）をマウスの尾静脈に投与時、１５分から１２０分に至るまで経時別に投与時間を異ならせて投与（ザイモサンＡ投与１０分前、３０分前、６０分前及び１２０分前にそれぞれ投与）した後、ザイモサンＡ（１００ｍｇ／ｋｇ）を腹腔投与した後、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入を測定した。
【０１１９】
その結果、図４にみられるように、１０分前投与でドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの阻害効果は、明確ではなかったが、３０分または６０分前投与では、顕著な阻害効果を示した。一方、１２０分前投与で、阻害効果が若干増加した（図４）。
＜３−３＞ドコサヘキサエン酸またはその過酸化物のザイモサンＡ誘導血漿流入阻害効果の調査
前記実施例＜２−１＞で長期間間隔（１２０分前投与）過程で他の機序が追加的に関与するものと思慮される。ゆえに、長期間間隔では少なくとも二つのザイモサンＡ誘導血漿流入の短時間効果機序と長期間効果機序が一緒に関与するものと思慮される。
５−リポキシゲナーゼの直接的な抑制によるものと推定されるザイモサンＡ誘導血漿流入に対するドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの短時間抑制効果は、ロイコトリエンＣ誘導血漿流入が、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンによって妨害されたためであると思慮される。
【０１２０】
それで、本発明者等は、前記長期効果が代謝を通じた代謝物の効果なのかどうかを調べるため、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサエン酸及び１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（１７（Ｓ）−ヒドロペルオキシ−４，７，１０，１３，１５，１９−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン）をそれぞれ使用して、腹腔液内での血漿流入程度を観察した。ドコサヘキサエン酸及び１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンのドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンとの関係は、下記のようである：
【０１２１】
【化２】
【０１２２】
具体的に、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（５０μｇ／ｋｇ）、ドコサヘキサエン酸（５０μｇ／ｋｇ）及び１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（１７（Ｓ）−ヒドロペルオキシ−４，７，１０，１３，１５，１９−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン）［ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（２０μＭ）を含んだホウ砂緩衝液（ｂｏｒａｘ ｂｕｆｆｅｒ）（５０ｍＭ，ｐＨ９．０）に大豆リポキシゲナーゼ（大豆ＬＯＸ−１）（２００ユニット／ｍｌ）を入れて、２５℃で３０分間反応させた後に、Ｃ１８カラム（２×１ｃｍ）を通過させてメタノールで溶出させることで製造（Ｈｕａｎｇ ＬＳ，等，Ｊ Ａｇｒｉｃ Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．，２００８年，９月１０日，第５６（１７）巻，７８０８−１４頁）］の一定量（５０μｇ／ｋｇ）をザイモサンＡ投与（１００ｍｇ／ｋｇ）の投与３０分前にそれぞれ投与した後、３０分後に腹腔液内での血漿流入を測定した。
【０１２３】
その結果、図５にみられるように、ドコサヘキサエン酸は、血漿流入で有意な阻害効果を示さず、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン過酸化物は、一部阻害効果を示したが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの阻害効果に比べて多少低かった（図５）。
【０１２４】
したがって、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの血漿流入の阻害効果は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの酸化によるものであることが分かる。
＜実験例４＞ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの腹腔注射を通じた生体内抗炎症効果の調査
本発明者等は、各試験群マウスの腹腔内にドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンまたは１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの酸化物）を１５〜１５０μｇ／ｋｇ用量で注射して、対照群に生理食塩水を５０〜１００μｌ用量で投与した。続いて、２時間後に、０．５％エバンスブルー染色溶液（０．２ｍｌ）で尾静脈注射した後、腹腔内に生理食塩水に溶解したザイモサンＡ（１ｍｇ／ｍｌ）溶液１００μｌを投与した。前記投与３０分後に軽微な痲酔［エーテルまたはフルオラン（ｆｌｕｏｒａｎｅ）］下に頚部切断した後、腹腔内に氷冷ＰＢＳを４ｍｌ投与した後、腹腔液をプラスチック注射器で回収して遠心分離した（３，０００ｒｐｍ，１０分）。前記のようにエバンスブルーの滲出程度を測定することで、抗炎症効果を評価した。
【０１２５】
その結果、図６にみられるように、腹腔に投与されたドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、１５μｇ／ｋｇ以上で有意性ある阻害効果を示した。このような効果は、１５０μｇ／ｋｇ量の範囲に至るまで濃度依存的にザイモサン誘導血漿流入を減少させた（図６）。一方、１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンも濃度にしたがって血漿流入を低下させた。このような阻害現象は、１５μｇ／ｋｇでも明確であり、１５０μｇ／ｋｇに至るまで濃度による増加傾向を示した。結論的に、１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンより多少効果があった。これは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが１７−ＨＰＤＨＡ誘導体を通じて生物活性代謝産物に変換したものと思慮される。
【０１２６】
したがって、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンや１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンは、腹腔内注射でも少ない用量でザイモサンＡによって誘導された血漿流入を効果的に阻害する効果を示すので、抗炎症効果が優れていることが分かった。
＜実験例５＞ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンの静脈注射を通じた生体内抗炎症効果の調査
本発明者等は、各試験群マウスの静脈にドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンを１５〜１５０μｇ／ｋｇ用量で注射して、対照群で生理食塩水を５０〜１００ｕｌ用量で投与した。続いて、０．５％エバンスブルー染色溶液（０．２ｍｌ）で尾静脈注射した後、静脈内に生理食塩水に溶解したザイモサンＡ（１ｍｇ／ｍｌ）溶液１００ｕｌを投与した。前記投与後に前記のようにエバンスブルーの滲出（ｅｘｕｄａｔｉｏｎ）程度を測定することで、抗炎症効果を評価した。
【０１２７】
その結果、図７に見られるように、腹腔に投与されたドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンは、５０μｇ／ｋｇ以上で有意性ある阻害効果を示した。このような効果は、１５０μｇ／ｋｇ量の範囲に至るまで濃度依存的にザイモサン誘導血漿流入を減少させた（図７）。
【０１２８】
下記には、本発明の組成物のための製造例を例示する。
＜製造例１＞製薬製剤の製造
＜１−１＞散剤の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン ２０ｍｇ
乳糖 ２０ｍｇ
前記の成分を混合した後、気密包に充填して散剤を製造した。
＜１−２＞錠剤の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン １０ｍｇ
とうもろこし澱粉 １００ｍｇ
乳糖 １００ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ２ｍｇ
前記の成分を混合した後、通常の錠剤の製造方法にしたがって打錠して錠剤を製造した。
＜１−３＞カプセル剤の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン １０ｍｇ
結晶性セルロース ３ｍｇ
ラクトース １４．８ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．２ｍｇ
前記の成分を混合した後、通常のカプセル剤の製造方法にしたがってゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を製造した。
＜１−４＞液剤の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン ２０ｍｇ
異性化糖 １０ｇ
マンニトール ５ｇ
精製水 適量
通常の液剤の製造方法によって精製水にそれぞれの成分を加えて溶解させてレモン香を適量加えた後、前記の成分を混合した後、精製水を加えて全体を１００ｍｌに調節した後、茶色瓶に充填して滅菌させて液剤を製造する。
＜１−６＞注射剤の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン １０ｍｇ／ｍｌ
薄い塩酸ＢＰ ｐＨ７．６になるまで
注射用塩化ナトリウムＢＰ 最大１ｍｌ
適当な容積の注射用塩化ナトリウムＢＰの中にドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンを溶解させて、生成された溶液のｐＨを薄い塩酸ＢＰを使用してｐＨ７．６に調節して、注射用塩化ナトリウムＢＰを使用して容積を調節して充分に混合した。無菌フィルターを通過させた溶液を透明ガラス製の５ｍｌタイプＩアンプル中に充填して、上部ガラスを溶解させることで封入して、ＵＶ殺菌条件下で注射液剤を製造した。
＜製造例２＞食品の製造
本発明の抽出物またはその分画物を含む食品を次のように製造した。
＜２−１＞小麦粉食品の製造
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン０．００５〜０．５重量部を小麦粉に添加して、その混合物を使用してパン、ケーキ、クッキー、クラッカー及び麺類を製造して健康促進用食品を製造した。
＜２−２＞乳製品の製造
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン０．０１〜０．１重量部を牛乳に添加して、前記牛乳を使用してバター及びアイスクリームのような多様な乳製品を製造した。
＜２−３＞禅食の製造
玄米、麦、もち米、鳩麦を公知の方法でα化させて乾燥させたものを倍前した後、粉砕機で粒度６０メッシュの粉末に製造した。
【０１２９】
黒豆、黒ごま、えごまも公知の方法で蒸して乾燥させたものを倍前した後、粉砕機で粒度６０メッシュの粉末に製造した。
【０１３０】
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンを真空濃縮機で減圧濃縮して、噴霧、熱風乾燥器で乾燥して得た乾燥物を粉砕機で粒度６０メッシュに粉砕して乾燥粉末を得た。
【０１３１】
前記で製造した穀物類、種実類及びドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの乾燥粉末を次の割合で配合して製造した。
【０１３２】
穀物類（玄米３０重量部、鳩麦１５重量部、麦２０重量部）、
種実類（えごま７重量部、黒豆８重量部、黒ごま７重量部）、
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（０．１重量部）、
霊芝（０．５重量部）、
地黄（０．５重量部）
＜２−４＞健康補助食品の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン ０．５ｍｇ
ビタミン混合物 適量
ビタミンＡアセテート ７０μｇ
ビタミンＥ １．０ｍｇ
ビタミンＢ１ ０．１３ｍｇ
ビタミンＢ２ ０．１５ｍｇ
ビタミンＢ６ ０．５ｍｇ
ビタミンＢ１２ ０．２μｇ
ビタミンＣ １０ｍｇ
ビオチン １０μｇ
ニコチン酸アミド １．７ｍｇ
葉酸 ５０μｇ
パントテン酸カルシウム ０．５ｍｇ
無機質混合物 適量
硫酸第１鉄 １．７５ｍｇ
酸化亜鉛 ０．８２ｍｇ
炭酸マグネシウム ２５．３ｍｇ
第１リン酸カリウム １５ｍｇ
第２リン酸カルシウム ５５ｍｇ
クエン酸カリウム ９０ｍｇ
炭酸カルシウム １００ｍｇ
塩化マグネシウム ２４．８ｍｇ
前記のビタミン及びミネラル混合物の組成比は、比較的健康食品に相応しい成分を好ましい実施例として混合組成したが、その配合比を任意に変形実施しても構わず、通常の健康食品製造方法によって前記の成分を混合した後、顆粒を製造して、通常の方法によって健康食品組成物製造に使用することができる。
＜製造例３＞健康飲料の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン １ｍｇ
クエン酸 １００ｍｇ
オリゴ糖 １００ｍｇ
梅濃縮液 ２ｍｇ
タウリン １００ｍｇ
精製水を加えて全体 ５００ｍｌ
通常の健康飲料製造方法によって前記の成分を混合した後、約１時間８５℃で撹拌加熱した後、できた溶液をろ過して滅菌された１ｌ容器に取得して密封滅菌した後、冷蔵保管した後、本発明の健康飲料組成物製造に使用する。
【０１３３】
前記組成比は、比較的に嗜好飲料に相応しい成分を好ましい実施例として混合組成したが、需要階層、需要国家、使用用途など地域的、民族的嗜好によってその配合比を任意に変形実施してもかまわない。
＜製造例４＞化粧品の製造
＜４−１＞乳化剤形の化粧品製造
表１に記載した組成で乳化剤形の化粧品を製造した。製造方法は下記のとおりである。
【０１３４】
１）１〜９の原料を混合した混合物を６５〜７０℃に加熱した。
【０１３５】
２）１０の原料を前記工程１）の混合物に投入した。
【０１３６】
３）１１〜１３の原料の混合物を６５〜７０℃に加熱して完全に溶解させた。
【０１３７】
４）前記工程３）を経て、前記２）の混合物を徐々に添加して８，０００ｒｐｍで２〜３分間乳化させた。
【０１３８】
５）１４の原料を少量の水に溶解させた後、前記工程４）の混合物に添加して２分間さらに乳化させた。
【０１３９】
６）１５〜１７の原料をそれぞれ計量した後、前記工程５）の混合物に入れて３０秒間さらに乳化させた。
【０１４０】
７）前記工程６）の混合物を乳化後、脱気過程を経て２５〜３５℃に冷却させることで、乳化剤形の化粧品を製造した。
【０１４１】
【表１】
【０１４２】
＜４−２＞可溶化剤形の化粧品製造
表２に記載した組成で可溶化剤形の化粧品を製造した。製造方法は、下記のとおりである。
【０１４３】
１）２〜６の原料を１の原料（精製水）に入れてミキサーを使用して溶解させた。
【０１４４】
２）８〜１１の原料を７の原料（アルコール）に入れて完全に溶解させた。
【０１４５】
３）前記工程２）の混合物を前記工程１）の混合物に徐々に添加しながら可溶化させた。
【０１４６】
【表２】
【産業上の利用可能性】
【０１４７】
上述したように、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、炎症性疾患治療剤開発、炎症性疾患改善用健康食品開発、及び抗炎症用化粧品開発などに利用することができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミン（Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌａｍｉｎｅ）の抗炎症効能を用いた抗炎症用製薬組成物、抗炎症用健康機能食品、及び抗炎症用化粧料組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
炎症反応は、組織（細胞）の損傷や外部感染原（バクテリア、かび、ウイルスまたは多様な種類のアレルギー誘発物質）に感染した時、局所血管と体液中の各種炎症媒介因子及び兔疫細胞が係わって酵素活性化、炎症媒介物質分泌、体液浸潤、細胞移動及び組織破壊など一連の複合的な生理的反応と紅班、むくみ、発熱及び痛症など外的症状を現わす。正常の場合、炎症反応は、外部感染原を除去して損傷された組織を再生して生命体機能回復作用をするが、抗原が除去されなかったり内部物質が原因になったりして、炎症反応が過度または持続的に起きると、むしろ粘膜損傷を促進し、その結果、一部では癌発生などの疾患を誘発する（非特許文献１）。
【０００３】
炎症の発生原因としては、生体に多様な生化学的な現象が関与している。特に、一酸化窒素（ＮＯ）を発生させる酵素である一酸化窒素合成酵素（ＮＯＳ）及びプロスタグランジン（ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ）の生合成と係わる酵素は、炎症反応を媒介するにおいて重要な役割をしていることが知られている。したがって、Ｌ−アルギニンからＮＯを生成させる酵素であるＮＯＳ、またはアラキドン酸からプロスタグランジン類を合成するのに係わる酵素であるシクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）は、炎症を遮断するにおいて主な目標になっている。
【０００４】
最近の研究結果によると、ＮＯＳは、何種類かが存在し、脳に存在する脳一酸化窒素合成酵素（ｂＮＯＳ）、神経系に存在する神経一酸化窒素合成酵素（ｎＮＯＳ）及び血管系に存在する内皮一酸化窒素合成酵素（ｅＮＯＳ）などは、体内にいつも一定の水準で発現されていて、これらによって少量生成されるＮＯは、神経伝達や血管拡張を誘導するなど、正常な身体の恒常性維持に重要な役割をするのに比べて、各種サイトカインや外部刺激物質によって誘導されるｉＮＯＳ（ｉｎｄｕｃｅｄ ＮＯＳ）によって急激に過量発生されるＮＯは、細胞毒性や各種炎症反応を起こすことが知られていて、慢性炎症は、ｉＮＯＳ活性の増加と関連あるという研究がある（非特許文献２）。また、ＣＯＸも２種類のイソ型が存在し、ＣＯＸ−１は、細胞内にいつも存在して細胞保護作用に必要なプロスタグランジン（ＰＧｓ）を合成する作用を示すのに対して、ＣＯＸ−２は、炎症反応時に細胞内で急激に増加して炎症反応を起こすに際して重要な役割を遂行することが知られている。ＮＯ及びＰＧｓの程度を向上させるｉＮＯＳ及びＣＯＸ−２を含む転写炎症因子は、多様な硬化、パーキンソン病、アルツハイマー病及び結腸癌を含む慢性疾患の病因に関連する（非特許文献３）。
【０００５】
リポポリサッカライド（ＬＰＳ）は、外部に分泌するバクテリアトキシンで、細胞の炎症反応を刺激して、一酸化窒素（ＮＯ）、サイトカイン、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−）、プロスタグランジンＥ２及び炎症反応を促進するエイコサノイド調節物質を含む様々の炎症調節物質を分泌する（非特許文献４）。一酸化窒素合成酵素は、二つのグループに分類されているが、ｃＮＯＳは、様々な細胞（例えば、神経細胞及び内皮細胞）で一定に存在してカルシウムに依存的なカルモジュリンによって、転写水準が優先的に調節される。一方血管平滑筋細胞、大食細胞、肝細胞及び星状細胞は、炎症サイトカインとリポポリサッカライドなどに反応して誘導される。一酸化窒素合成酵素の活性化は、多様な炎症疾患の疾病で重要な役割をする、多量の一酸化窒素形成を促進する。ゆえに、一酸化窒素合成酵素によって誘導される一酸化窒素生成は、炎症の程度を示し、炎症進行を評価することができる指標になる。特異な細胞遺伝子などの発現は、ＣＯＸ−２及び誘導性一酸化窒素合成酵素だけではなく、インターロイキン−１、インターロイキン−２、インターロイキン−６及び腫瘍壊死因子のような様々な炎症転写因子が含まれる（非特許文献５）。
【０００６】
最近脂質誘導媒介体が、様々な炎症反応（喘息、リュウマチ関節炎または腸炎など）に関与することが知られている（非特許文献６〜１１）。
【０００７】
今まで炎症性媒介物質に対する研究が活発に行なわれてきたが、炎症反応に脂質媒介体が関与することは、最近理論的に定立されるようになった。例えば、酵素ＰＬＡ２によってホスファチジルコリンから遊離されたアラキドン酸は、プロスタグランジン（ＰＧ）、ロイコトリエン（ＬＴ）及びリポキシン（ＬＸ）に転換される。ここで、プロスタグランジンとロイコトリエンは、強力な炎症性媒介体である一方（非特許文献１２〜１４）、リポキシンは、むしろ強い抗炎症性媒介体として知られるようになった（非特許文献１５，１６）。すなわち、炎症過程でアラキドン酸から生成されたエイコサノイドは、プロスタグランジンとロイコトリエンに転換される。ここで、５−リポキシゲナーゼは、ロイコトリエンとリポキシンの形成に重要である一方、１２／１５−リポキシゲナーゼは、リポキシンの形成に重要である（非特許文献１５，１６）。また、ドコサヘキサエン酸の場合、１２／１５−リポキシゲナーゼによって酸化時に結果的にプロテクチンＤという脂質で代謝され、この物質は、リポキシンのように優秀な抗炎症作用を示す脂質媒介体として把握された（非特許文献１７）。
【０００８】
一方、ＰＬＡ２加水分解過程で生成される飽和脂質リゾホスファチジルコリン（ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ，ｌｙｓｏＰＣ）が炎症反応で炎症性または抗炎症性であることが明らかにされている（非特許文献８，１１、１８〜２０）。また、炎症性リゾホスファチジルコリンの作用は、一酸化窒素（ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ，ＮＯ）または活性酸素種（ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）の生成であることが報告された（非特許文献２１〜２５）。
【０００９】
しかし、多価不飽和脂質を含む多価不飽和リゾホスファチジルコリン（ｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ ｌｙｓｏＰＣ）類が生体内嫌気反応に及ぼす影響に対しては、具体的に報告されたことがない。不飽和脂質を含む多価不飽和リゾホスファチジルコリンは、動物体内に相当量存在することが報告されたが、例えば、１−リノレオイルリゾホスファチジルコリン（ｌｉｎｏｌｅｏｙｌ ｌｙｓｏＰＣ）と１−アラキドノイルリゾホスファチジルコリン（ａｒａｃｈｉｄｏｎｏｙｌ ｌｙｓｏＰＣ）が、血漿（非特許文献２６〜２８）から発見された。特に、１−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、鮫の肝の主要脂質に属する（非特許文献２９）。さらに、心臓抽出物には、リゾホスファチジルコリン酸化物が存在する。したがって、不飽和脂質を含むリゾホスファチジルコリンは、リポキシゲナーゼによって代謝されると考えられたが、最近の研究でそれを立証した（非特許文献３０〜３２）。すなわち、リノレオイル、アラキドノイル及びドコサヘキサエノイルからなる群を含むリゾホスファチジルコリンは、網状赤血球１５−ＬＯＸ、または白血球１２／１５−ＬＯＸ酵素によって酸化がよくおきることが報告された（非特許文献３０〜３２）。このように、リゾホスファチジルコリン類は、生体内で生物活性を有すると考えられるにもかかわらず、リゾホスファチジルコリン類の生理活性に対して報告されたことがない。
【００１０】
それで、本発明者等は、不飽和脂質含有リゾホスファチジルコリン類の生理活性に対して研究した結果、不飽和脂質含有リゾホスファチジルコリン類が細胞内及び生体内（Ｉｎ ｖｉｖｏ）で抗炎症効能があり、特に、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、他のリゾホスファチジルコリン類に比べて顕著にＮＯ生成を抑制して、細胞毒性がほとんどなく、生体内でザイモサンＡ誘導腹膜炎を少ない濃度でも優秀に阻害して、前記抗炎症効果が、アラキドノイルリゾホスファチジルコリン（Ａｒａｃｈｉｄｏｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）を含む他のリゾホスファチジルコリン類に比べて優れていることを確認することにより、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンを抗炎症用組成物の有効成分で使用することができることを明らかにして本発明を完成した。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｊｏｎａｔｈａｎ Ｃｏｈｅｎ，Ｎａｔｕｒｅ，２００２年，第４２０，８８５−８９１頁
【非特許文献２】Ｊｏｎ Ｏ．Ｌｕｎｄｂｅｒｇ，等，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，２００８年
【非特許文献３】Ｂｅｎｇｔ Ｓａｍｕｅｌｓｓｏｎ，等，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ，２００７年，第５９巻，２０７−２２４頁
【非特許文献４】Ｃｈｅｎ ＹＣ，等，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００１年，第６１巻，１４１７−１４２７頁
【非特許文献５】Ｃｓａｂａ Ｓｚａｂｏ，等，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，２００７年，第６巻，６６２−６８０頁
【非特許文献６】Ｄａｌｅａｕ Ｐ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ，１９９９年，第３１巻；１３９１−１４０１頁
【非特許文献７】Ｆｕｃｈｓ Ｂ，等，Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ，２００５年，第３８巻９２５−９３３頁
【非特許文献８】Ｍｕｒａｌｉｋｒｉｓｈｎａ Ａｄｉｂｈａｔｌａ，Ｒ．，等，Ｆｒｅｅ ａｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ，２００６年，第４０巻，３７６−８７頁
【非特許文献９】Ｔｒｉｇｇｉａｎｉ Ｍ，等，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ．，２００６年第１７６１（１１）巻，１２８９−３００頁
【非特許文献１０】Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ，Ｔ．，等，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００７年，第１４巻，３２０９−３２２０頁
【非特許文献１１】Ｓｈｉ Ｙ，等，Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２００７年，第１９１巻，５４−６２頁
【非特許文献１２】Ｓｅｒｈａｎ ＣＮ，等，Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００５年，第６巻，１１９１−７頁
【非特許文献１３】Ｆａｒｏｏｑｕｉ ＡＡ，等，Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，２００７年，第１０１（３）巻，５７７−９９頁
【非特許文献１４】Ｆｕｎｋ，Ｃ．Ｄ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００１年，第２９４巻，１８７１〜５頁
【非特許文献１５】Ｓｃｈｗａｂ ＪＭ，等，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００６年，第６（４）巻，４１４−２０頁
【非特許文献１６】Ｋｕｈｎ Ｈ，等，Ｐｒｏｇ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓ．，２００６年Ｊｕｌ，第４５（４）巻，３３４−５６頁，Ｅｐｕｂ ２００６Ｍ
【非特許文献１７】Ｓｅｒｈａｎ ＣＮ ＆ Ｃｈｉａｎｇ Ｎ．Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，２００８年，第１巻，Ｓ２００−２１５頁
【非特許文献１８】Ｄａｌｅａｕ Ｐ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ，１９９９年，第３１巻，１３９１−１４０１頁
【非特許文献１９】Ｆｕｃｈｓ Ｂ，等，Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ，２００５年，第３８巻，９２５−９３３頁
【非特許文献２０】Ｆｕｅｎｔｅｓ Ｌ，等，Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ，２００２年，第９１巻，６８１−６８８頁
【非特許文献２１】Ｃｏｌｌｅｓ，Ｓ．Ｍ．等，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０００年，第４１巻， １１８８−１１９８頁
【非特許文献２２】Ｍａｔｓｕｂａｒａ，Ｍ．，等，Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２００５年，第１７８巻，５７−６６頁
【非特許文献２３】Ｔａｋｅｓｈｉｔａ Ｓ，等，Ｊ．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ，２０００年，第７巻，２３８−２４６頁
【非特許文献２４】Ｓｉｌｌｉｍａｎ ＣＣ，等，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ．Ｂｉｏｌ，２００３年，第７３巻，５１１−５２４頁
【非特許文献２５】Ｃｈｅｏｎ Ｈｏ Ｐａｒｋ，等，ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ ｅｘｈｉｂｉｔｓ ａ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ，ａｃｃｏｍｐａｎｉｅｄ ｂｙ ＲＯＳ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ｉｎ ＲＡＷ ２６４．７ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ，Ｌｉｐｉｄｓ，ｉｎ ｐｒｅｓｓ，２００９年
【非特許文献２６】Ｏｋｉｔａ，Ｍ．等，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ．，１９９７年，第７１巻，３１−３４頁
【非特許文献２７】Ｃｒｏｓｅｔ，Ｍ．等，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．２０００年，第３４５巻，６１−６７頁
【非特許文献２８】Ａｄａｃｈｉ，Ｊ．等，Ｋｏｂｅ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．，２００６年，第５２巻，１２７−１４０頁
【非特許文献２９】Ｃｈｅｎ，Ｓ．，等，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ．Ｃｈｅｍ．，２００７年，第５５巻，９６７０−９６７７頁
【非特許文献３０】Ｈｕａｎｇ，Ｌ．Ｓ．等，Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，２００６年，第４５５巻，１１９−１２６頁
【非特許文献３１】Ｈｕａｎｇ，Ｌ．Ｓ．等，Ｌｉｐｉｄｓ，２００７年，第４２巻，９８１−９９０頁
【非特許文献３２】Ｈｕａｎｇ，Ｌ．Ｓ．等，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ．Ｃｈｅｍ．，２００８年，第５６巻，１２２４−１２３２頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明の目的は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む抗炎症用組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
前記目的を達成するために、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、炎症性疾患の予防及び治療用製薬組成物を提供する。
【００１４】
また、本発明は、薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを炎症性疾患にかかった個体に投与する工程を含む、炎症性疾患治療方法を提供する。
【００１５】
また、本発明は、薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを個体に投与する工程を含む、炎症性疾患予防方法を提供する。
【００１６】
また、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、炎症性疾患の予防及び改善用健康食品を提供する。
【００１７】
また、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、抗炎症用皮膚または鼻腔用外用剤を提供する。
【００１８】
同時に、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、抗炎症用化粧料組成物を提供する。
【００１９】
以下、本発明で使用する用語を定義する。
【００２０】
本発明で使用する用語「炎症」は、身体局所に起きた傷害に対する生体組織の防御反応である。すなわち、各種の有害な刺激に応答して刺激による傷害を除去し、本来の状態に回復しようとする生体防御反応が炎症反応である。炎症の刺激には、感染あるいは化学的、物理的刺激などがある。炎症反応に係わる生体構成因子は、自由ラジカル、タンパク質、糖質、脂質などの低分子や高分子の化学物質と、血漿、血球、血管及び結合組織などがある。炎症の過程は、普通２つに分けられ、急性と慢性炎症に分けることができる。急性炎症は、数日以内の短期的な反応であり、血漿成分や血球などが微少循環系を通じて異物除去に関連する。慢性炎症は、持続時間が長くて、組織の増殖などが見られる。
【００２１】
本発明で使用する用語「予防」は、本発明の組成物の投与により炎症性疾患の発病を遅延させるすべての行為を意味する。
【００２２】
本発明で使用する用語「治療」及び「改善」は、本発明の組成物の投与により前記疾患の症状が好転または良い方向に変更されるすべての行為を意味する。
【００２３】
本発明で使用する用語「投与」は、任意の適切な方法で個体に所定の本発明の組成物を提供することを意味する。
【００２４】
本発明で使用する用語「個体」は、本発明の組成物を投与して症状が好転し得る人間、猿、犬、山羊、豚または鼠などすべての動物を意味する。
【００２５】
本発明で使用する用語「薬学的に有効な量」は、医学的治療に適用可能な合理的な量または危険の比率で疾患を治療するに十分な量を意味して、これは個体の炎症性疾患の種類、重症度、薬物の活性、薬物に対する敏感度、投与時間、投与経路及び排出割合、治療期間、同時に使用される薬物を含む要素及びその他医学分野でよく知られた要素によって決定することができる。
【００２６】
以下、本発明を詳しく説明する。
【００２７】
本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、炎症性疾患の予防及び治療用製薬組成物を提供する。
【００２８】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン（ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ）及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（２−Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）からなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましいが、これに限定されない。
【００２９】
前記ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、下記の化学式１で表わされることが好ましいが、これに限定されない。
【００３０】
【化１】
【００３１】
前記炎症性疾患は、喘息、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎及び退行性疾患からなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましく、喘息、腹膜炎、腸炎及びリュウマチ関節炎からなる群から選択されるいずれか一つであることがさらに好ましく、腹膜炎であることが最も好ましいが、これに限定されない。
【００３２】
本発明では、リゾホスファチジルコリン類の細胞内での抗炎症効能を調べるため、脂質多糖類由来ＮＯ生成に及ぼす影響を分析した結果、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが、少ない濃度でも明確にＮＯ生成阻害効果を示し、他のリゾホスファチジルコリン類と比較して顕著な阻害効果を示した（図１参照）。
【００３３】
本発明では、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの生体内での抗炎症効能を調べるため、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの静脈注射が、ザイモサンＡによって誘導されたマウス腹腔内炎症反応に対する阻害効果を分析した結果、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが少ない濃度でも優秀な阻害効果を示し、これは、アラキドノイルリゾホスファチジルコリンを含む他のリゾホスファチジルコリン類と比較して顕著な阻害効果を示した（図２ないし図４参照）。
【００３４】
本発明では、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの抗炎症効能が自体効能であることを調べるため、代謝産物であるドコサヘキサエン酸及び１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（１７（Ｓ）−ヒドロペルオキシ−４，７，１０，１３，１５，１９−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン）のザイモサンＡ誘導腹腔内炎症反応に対する阻害効果を分析した結果、静脈注射でドコサヘキサエン酸は、効果がほとんどないことを示し、１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンは、多少弱い抗炎症効果を示した。一方、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン自体が力強い抗炎症効果を示すことを確認した。これは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが、中間産物として１７‐ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンを媒介して抗炎症代謝産物に変換し得ることを提示するものであることが分かる（図５参照）。
【００３５】
本発明では、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの生体内での抗炎症効能を調べるため、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの腹腔注射がザイモサンＡによって誘導されたマウス腹腔内炎症反応に対する阻害効果を分析した結、図６に見られるように腹腔に投与されたドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、１５μｇ／ｋｇ以上で有意性ある阻害効果を示し、このような効果は、１５０μｇ／ｋｇ量の範囲に至るまで濃度依存的に阻害することを確認した（図６参照）。すなわち、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、腹腔内注射でも少ない用量でザイモサンＡによって誘導された血漿流入を効果的に阻害する効果を示すので、優秀な抗炎症効果があることが分かった。
【００３６】
これは、本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが、症抑剤と関連していると報告された既存のドコサヘキサエノンサンに比べて、顕著に高い炎症阻害効能があることを示すものである。
【００３７】
したがって、本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、細胞内で脂質多糖類（ＬＰＳ）由来酸化窒素（ＮＯ）生成を抑制し、生体内でザイモサンＡ誘導腹膜炎を抑制し、優れた抗炎症効能を有しており、細胞毒性がほとんどないので、炎症性疾患予防及び治療用組成物の有効成分として有用に使用できることが分かった。
【００３８】
本発明では、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンの生体内での抗炎症能を調べるため、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンの静脈注射がザイモサンＡによって誘導されたマウス腹腔内炎症反応に対する阻害効果を分析した結果、図７に見られるように、腹腔に投与されたドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンは、５０μｇ／ｋｇ以上で有意性ある阻害効果を示した。このような効果は、１５０μｇ／ｋｇ量の範囲に至るまで濃度依存的に阻害することを確認した（図７参照）。すなわち、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンは、静脈内注射で少ない用量でザイモサンＡによって誘導された血漿流入を効果的に阻害する効果を示すので、優れた抗炎症効果を有することが分かった。
【００３９】
本発明の化合物を含む組成物は、通常の方法による適切な担体、賦形剤または希釈剤を追加的に含むことができる。
【００４０】
本発明の組成物に含まれ得る担体、賦形剤及び希釈剤としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、澱粉、アカシアゴム、アルジネート、ゼラチン、リン酸カルシウム、カルシウムシリケート、セルロース、メチルセルロース、微晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、メチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、ステアリン酸マグネシウム及び鉱物油を挙げることができる。
【００４１】
本発明の化合物を含む組成物は、それぞれ通常の方法によって散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアゾールなどの経口型剤形、外用剤、座薬または滅菌注射溶液の形態に剤形化して使用することができる。
【００４２】
より詳細には、製剤化する場合には普通使用する充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩解剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を使用して調剤することができる。経口投与のための固形製剤には、錠剤、丸薬、散剤、顆粒剤、カプセル剤などが含まれ、このような固形製剤は、前記抽出物に少なくとも一つ以上の賦形剤、例えば、澱粉、炭酸カルシウム、スクロース、ラクトース、ゼラチンなどを混ぜて調剤することができる。また、単純な賦形剤以外にステアリン酸マグネシウム、タルクのような滑剤も使用することができる。経口のための液状製剤では、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などが該当し、よく使用される単純希釈剤である水、リキッドパラフィン以外に様々な賦形剤、例えば湿潤剤、甘味料、芳香剤、保存剤などを含むことができる。非経口投与のための製剤には、滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤及び座薬が含まれる。非水性溶剤、懸濁剤では、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物性油、エチルオレイン酸のような注射可能なエステルなどを使用することができる。座薬の基剤では、ハードファット（ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マクロゴ−ル、ツイーン６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロール、ゼラチンなどを使用することができる。
【００４３】
本発明の化合物の好ましい投与量は、患者の状態及び体重、疾病の程度、薬物形態、投与経路及び期間によって異なるが、当業者によって適切に選択され得る。しかし、好ましい効果を得るため、本発明の化合物の投与量は、０．００５〜０．０５ｍｇ／ｋｇで、好ましくは０．０１５〜０．１５ｍｇ／ｋｇの量を一日１回ないし数回に分けて投与することができる。本発明の化合物は、全体組成物総重量に対して０．００１〜２０重量％の含量で配合することができる。
【００４４】
また、本発明の化合物の薬学的投与形態は、これらの薬学的に許容可能な塩の形態でも使用することができ、単独でまたは他の薬学的活性化合物と結合のみならず適当な集合体で使用することができる。
【００４５】
本発明の薬学組成物は、鼠、マウス、家畜、人間などの哺乳動物に多様な経路に投与することができる。様々な投与方式が予想可能で、例えば、経口、直腸、静脈、腹腔、筋肉、皮下、子宮内硬膜または脳血管内注射によって投与することができる。
【００４６】
本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを炎症にかかった個体に投与する工程を含む、前記個体の炎症抑制方法を提供する。
【００４７】
前記炎症性は、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎及び肝炎からなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましく、腹膜炎、腸炎及び関節炎からなる群から選択されるいずれか一つであることがさらに好ましく、腹膜炎であることが最も好ましいが、これに限定されない。
【００４８】
前記投与は、同一または類似の機能を示す有効成分を１種以上含むことができる。投与のためには、追加で薬剤学的に許容可能な担体を１種以上含むことができる。薬剤学的に許容可能な担体は、食塩水、滅菌水、リンゲル液、緩衝食塩水、デキストロース溶液、マルトデキストリン溶液、グリセロール、エチルアルコール及びこれら成分の中から１成分以上を混合して使用することができ、必要によって抗酸化剤、緩衝液、静菌剤など他の通常の添加剤を添加することができる。また、希釈剤、分散剤、界面活性剤、結合剤及び滑剤を付加的に添加して水溶液、懸濁液、乳濁液などのような注射用剤形、散剤、錠剤、カプセル剤、丸薬、顆粒または注射液剤に製剤化できる。さらに、当分野の適正な方法、またはＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ ＰＡ，１８ｔｈ，１９９０）に開示されている方法を使用して各疾患によって、または成分によって好ましく製剤化することができる。
【００４９】
前記投与は、投与方法によって非経口投与（例えば静脈内、皮下、腹腔内または局所に適用）したり経口投与したりすることができ、投与量は患者の体重、年齢、性別、健康状態、食餌、投与時間、投与方法、排泄率及び疾患の重症度等によってその範囲が多様である。本発明の化合物の一日投与量は、０．００５〜０．５ｍｇ／ｋｇで、好ましくは０．０１５〜０．１５ｍｇ／ｋｇの量を一日に１回ないし数回に分けて投与することができる。
【００５０】
また、本発明は、薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを炎症性疾患にかかった個体に投与する工程を含む炎症性疾患治療方法を提供する。
【００５１】
また、本発明は、薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを個体に投与する工程を含む炎症性疾患予防方法を提供する。
【００５２】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましいが、これに限定されない。
【００５３】
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、細胞内で低い濃度で炎症を抑制して、細胞毒性がほとんどなく、生体内で少ない濃度で炎症を阻害するので、炎症性疾患予防及び治療に使用できることが分かる。
【００５４】
前記炎症性疾患は、喘息、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎及び退行性疾患からなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましく、喘息、腹膜炎、腸炎及びリュウマチ関節炎からなる群から選択されるいずれか一つであることがさらに好ましく、腹膜炎であることが最も好ましいが、これに限定されない。
【００５５】
前記投与は、同一または類似の機能を示す有効成分を１種以上含むことができる。投与のためには、追加で薬剤学的で許容可能な担体を１種以上含むことができる。薬剤学的に許容可能な担体は、食塩水、滅菌水、リンゲル液、緩衝食塩水、デキストロース溶液、マルトデキストリン溶液、グリセロール、エチルアルコール及びこれら成分の中で１成分以上を混合して使用することができ、必要によって、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤など他の通常の添加剤を添加することができる。また、希釈剤、分散剤、界面活性剤、結合剤及び滑剤を付加的に添加して、水溶液、懸濁液、乳濁液などのような注射用剤形、散剤、錠剤、カプセル剤、丸薬、顆粒または注射液剤に製剤化できる。さらに当分野の適正な方法、またはＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ ＰＡ，１８ｔｈ，１９９０年）に開示されている方法を使用して、各疾患にしたがってまたは成分によって好ましく製剤化することができる。
【００５６】
前記投与は、投与方法によって非経口投与（例えば、静脈内、皮下、腹腔内または局所に適用）したり経口投与したりすることができ、投与量は、患者の体重、年齢、性別、健康状態、食餌、投与時間、投与方法、排泄率及び疾患の重症度等によってその範囲が多様である。本発明の化合物の一日投与量は、０．００５〜０．５ｍｇ／ｋｇで、好ましくは０．０１５〜０．１５ｍｇ／ｋｇの量を一日に１回ないし数回に分けて投与することができる。
【００５７】
また、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む炎症性疾患の予防及び改善用健康食品を提供する。
【００５８】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましいが、これに限定されない。
【００５９】
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが細胞内で脂質多糖類由来ＮＯ生成を抑制して、生体内でザイモサンＡ誘導腹膜炎を阻害することにより、抗炎症効能が優れ細胞毒性がほとんどないので、炎症性疾患予防及び改善用健康食品の有効成分として有用に使用することができることが分かる。
【００６０】
前記ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを添加することができる食品としては、例えば、各種食品類、乳製品、飲料、ガム、お茶、ビタミン単一剤、健康補助食品類などがあり、粉末、顆粒、錠剤、カプセルまたは飲料の形態で使用することができる。
【００６１】
ここで、食品または飲料の中で前記ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンの量は、全体食品または飲料重量の０．０００１ないし１５重量部で加えることができる。
【００６２】
本発明の健康飲料組成物は、必須成分として前記ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを含む以外に、他の成分には特別な制限がなく、通常の飲料のように様々な香味剤または天然炭水化物などを追加成分として含むことができる。上述した天然炭水化物の例としては、モノサッカライド、例えば、ブドウ糖、果糖など、ジサッカライド、例えばマルトース、スクロースなど、及びポリサッカライド、例えばデキストリン、シクロデキストリンなどの通常的な糖、及びキシリトール、ソルビトール、エリスリトールなどの糖アルコールである。上述したもの以外の香味剤として天然香味剤（タウマチン、ステビア抽出物（例えば、レバウジオシドＡ、グリシルヒジン等）及び合成香味剤（サッカリン、アスパルテームなど）を有利に使用することができる。
【００６３】
前記の外に本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、様々な栄養剤、ビタミン、鉱物（電解質）、合成風味剤及び天然風味剤などの風味剤、着色剤及び充填剤（チーズ、チョコレートなど）、ペクチン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に使用される炭酸化剤などを含むことができる。その他に、本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、天然果物ジュース及び果物ジュース飲料及び野菜飲料の製造のための果肉を含むことができる。このような成分は、独立的にまたは組み合わせて使用することができる。このような添加剤の割合は、本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミン１００重量部当り０．１ないし２０重量部の範囲で選択することが一般的であるが、これに限定されない。
【００６４】
また、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む抗炎症用皮膚または鼻腔用外用剤を提供する。
【００６５】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましいが、これに限定されない。
【００６６】
本発明の化合物を皮膚外用剤に使用する場合、追加で脂肪物質、有機溶媒、溶解剤、濃縮剤及びゲル化剤、軟化剤、抗酸化剤、懸濁化剤、安定化剤、発泡剤、芳香剤、界面活性剤、水、イオン型またはノニオン型乳化剤、充填剤、金属イオン封鎖剤及びキレート化剤、保存剤、ビタミン、遮断剤、湿潤化剤、必須オイル、染料、顔料、親水性または親油性活性剤、脂質小嚢または皮膚用外用剤に通常使用される任意の異なる成分で、皮膚科学分野で通常使用される補助剤を含むことができる。また、前記成分は、皮膚科学分野で一般的に使用される量で導入することができる。
【００６７】
同時に、本発明は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む抗炎症用化粧料組成物を提供する。
【００６８】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることが好ましいが、これに限定されない。
【００６９】
本発明の化粧料は、水溶性ビタミン、油溶性ビタミン、高分子ペプチド、高分子多糖、スフィンゴ脂質及び海草エキスからなる群から選択された組成物を含むが、これに限定されない。
【００７０】
前記水溶性ビタミンとしては、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、好ましくは、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ピリドキシン、塩酸ピリドキシン、ビタミンＢ１２、パントテン酸、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、葉酸、ビタミンＣ、ビタミンＨなどを挙げることができ、それらの塩（チアミン塩酸塩、アスコルビン酸ナトリウム塩など）や誘導体（アスコルビン酸−２−リン酸ナトリウム塩、アスコルビン酸−２−リン酸マグネシウム塩など）を含むが、これに限定されない。
【００７１】
前記油溶性ビタミンとしては、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、好ましくは、ビタミンＡ、カロチン、ビタミンＤ２、ビタミンＤ３、ビタミンＥ（ｄ１−α−トコフェロール、ｄ−α−トコフェロール）及び、そらの誘導体（パルミチン酸アスコルビン、ステアリン酸アスコルビン、ジパルミチン酸アスコルビン、酢酸−ｄｌ−α−トコフェロール、ニコチン酸ｄｌ−α−トコフェロールビタミンＥ、ＤＬ−パントテニルアルコール、Ｄ−パントテニルアルコール、パントテニルエチルエーテルなど）を含むが、これに限定されない。
【００７２】
前記高分子ペプチドとしては、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、コラーゲン、加水分解コラーゲン、ゼラチン、エラスチン、加水分解エラスチンまたはケラチンが好ましいが、これに限定されない。
【００７３】
前記高分子多糖としては、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、ヒドロキシエチルセルロース、キサンタンガム、ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸またはその塩（ナトリウム塩など）が好ましいが、これに限定されない。
【００７４】
前記スフィンゴ脂質としては、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、セラミド、フィトスフィンゴシン、スフィンゴ糖脂質が好ましいが、これに限定されない。
【００７５】
前記海草エキスでは、化粧品に配合可能なものならどんなものでも可能であるが、褐藻エキス、紅藻エキスまたは緑藻エキスが好ましく、これらの海草エキスから精製されたカラギーナン、アルギン酸、アルギン酸ナトリウムまたはアルギン酸カリウムが好ましいが、これに限定されない。
【００７６】
本発明の化粧料には、前記必須成分と共に必要によって通常化粧料に配合される他の成分を配合することができる。前記他の成分としては、乳脂成分、保湿剤、エモリエント剤、界面活性剤、有機及び無機顔料、有機粉体、紫外線吸収剤、防腐剤、殺菌剤、酸化防止剤、植物抽出物、ｐＨ調整剤、アルコール、色素、香料、血行促進剤、冷感剤、制汗剤または精製水が好ましいが、これに限定されない。
【００７７】
前記油脂成分としては、エステル系油脂、炭化水素系油脂、シリコン系油脂、フッ素系油脂、動物油脂または植物油脂が好ましいが、これに限定されない。
【００７８】
エステル系油脂としては、トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル、２−エチルヘキサン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ブチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸エチル、パルミチン酸オクチル、イソステアリン酸イソセチル、ステアリン酸ブチル、リノール酸エチル、リノール酸イソプロピル、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソセチル、ミリスチン酸イソステアリル、パルミチン酸イソステアリル、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソセチル、セバシン酸ジエチル、アジピン酸ジイソプロピル、ネオペンタン酸イソアルキル、トリ（カプリル.カプリン酸）グリセリル、トリ２−エチルヘキサン酸トリメチロ−ルプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロ−ルプロパン、テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリトール、カプリル酸セチル、ラウリン酸デシル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸デシル、ミリスチン酸ミリスチル、ミリスチン酸セチル、ステアリン酸ステアリル、オレイン酸デシル、リシノレイン酸セチル、ラウリン酸イソステアリル、ミリスチン酸イソトリデシル、パルミチン酸イソセチル、ステアリン酸オクチル、ステアリン酸イソセチル、オレイン酸イソデシル、オレイン酸オクチルドデシル、リノール酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソプロピル、２−エチルヘキサン酸セトステアリル、２−エチルヘキサン酸ステアリル、イソステアリン酸ヘキシル、ジオクタン酸エチレングリコール、ジオレイン酸エチレングリコール、ジカプリン酸プロピレングリコール、ジ（カプリル.カプリン酸）プロピレングリコール、ジカプリル酸プロピレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジオクタン酸ネオペンチルグリコール、トリカプリル酸グリセリル、トリウンデシル酸グリセリル、トリイソパルミチン酸グリセリル、トリイソステアリン酸グリセリル、ネオペンタン酸オクチルドデシル、オクタン酸イソステアリル、イソノナン酸オクチル、ネオデカン酸ヘキシルデシル、ネオデカン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソセチル、イソステアリン酸イソステアリル、イソステアリン酸オクチルデシル、ポリグリセリンオレイン酸エステル、ポリグリセリンイソステアリン酸エステル、クエン酸トリイソセチル、クエン酸トリイソアルキル、クエン酸トリイソオクチル、乳酸ラウリル、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、乳酸オクチルデシル、クエン酸トリエチル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸アセチルトリブチル、クエン酸トリオクチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ヒドロキシステアリン酸２−エチルヘキシル、コハク酸ジ２−エチルヘキシル、アジピン酸ジイソブチル、セバシン酸ジイソプロピル、セバシン酸ジオクチル、ステアリン酸コレステリル、イソステアリン酸コレステリル、ヒドロキシステアリン酸コレステリル、オレイン酸コレステリル、オレイン酸ジヒドロコレステリル、イソステアリン酸フィトステリル、オレイン酸フィトステリル、１２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸イソセチル、１２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸ステアリルまたは １２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸イソステアリルなどのエステル系が好ましいが、これに限定されない。
【００７９】
前記炭化水素系油脂としては、スクアレン、流動パラフィン、α−オレフインオリゴマー、イソパラフィン、セレシン、パラフィン、流動イソパラフィン、ポリブテン、マイクロクリスタリンワックスまたはワセリンなどの炭化水素系油脂が好ましいが、これに限定されない。
【００８０】
前記シリコン系油脂としては、ポリメチルシリコン、メチルフェニルシリコン、メチルシクロポリシロキサン、オクタメチルポリシロキサン、デカメチルポリシロキサン、ドデカメチルシクロシロキサン、ジメチルシロキサン・メチルセチルオキシシロキサン共重合体、ジメチルシロキサン・メチルステアロキシシロキサン共重合体、アルキル変性シリコン油またはアミノ変性シリコン油が好ましいが、これに限定されない。
【００８１】
前記フッ素系油脂としては、パーフルオロポリエーテルが好ましいが、これに限定されない。
【００８２】
前記動物または植物油脂としては、アボカド油、アルモンド油、オリーブ油、ゴマ油、米ぬか油、サフラワー油、大豆油、トウモロコシ油、ナタネ油、杏仁油、パーム核油、パーム油、ヒマシ油、ヒマワリ油、ブドウ種子油、綿実油、ヤシ油、ククイナッツ油、小麦胚芽油、米胚芽油、シアバター、月見草オイル、マカデミアナッツ油、メドホーム油、卵黄油、牛脂、馬油、ミンク油、オレンジラフィー油、ホホバ油、キャンデリラワックス、カルナバワックス、液状ラノリンまたは硬化ヒマシ油等の動物または植物油脂が好ましいが、これに限定されない。
【００８３】
前記保湿剤としては水溶性低分子保湿剤、脂溶性低分子保湿剤、水溶性高分子または脂溶性高分子が好ましいが、これに限定されない。水溶性低分子保湿剤としては、セリン、グルタミン、ソルビトール、マンニトール、ピロリドン−カルボン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、エチレングリコール、ポリエチレングリコールＢ（重合度ｎ＝２以上）、ポリプロピレングリコール（重合度ｎ＝２以上）、ポリグリセリンＢ（重合度ｎ＝２以上）、乳酸または乳酸塩が好ましいが、これに限定されない。
【００８４】
脂溶性低分子保湿剤としては、コレステロールまたはコレステロールエステルが好ましいが、これに限定されない。
【００８５】
水溶性高分子としては、カルボキシビニルポリマー、ポリアスパラギン酸塩、トラガカント、キサンタンガム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、水溶性キチン、キトサンまたはデキストリンが好ましいが、これに限定されない。
【００８６】
脂溶性高分子としては、ポリビニルピロリドン・エイコセン共重合体、ポリビニルピロリドン・ヘキサデセン共重合体、ニトロセルロース、デキストリン脂肪酸エステルまたは高分子シリコンが好ましいが、これに限定されない。
【００８７】
エモリエント剤しては、長鎖アシルグルタミン酸コレステリルエステル、ヒドロキシステアリン酸コレステリル、１２−ヒドロキシステアリン酸、ステアリン酸、ロジン酸またはラノリン脂肪酸コレステリルエステルが好ましいが、これに限定されない。
【００８８】
前記界面活性剤としては、ノニオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤または両性界面活性剤が好ましいが、これに限定されない。
【００８９】
ノニオン性界面活性剤としては、自己乳化型モノステアリン酸グリセリン、プロピレングリコール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ＰＯＥ（ポリオキシエチレン）ソルビタン脂肪酸エステル、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル、ＰＯＥアルキルエーテル、ＰＯＥ脂肪酸エステル、ＰＯＥ硬化ヒマシ油、ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ・ＰＯＰ（ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレン）共重合体、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル、ポリエーテル変性シリコン、ラウリン酸アルカノールアミド、アルキルアミンオキシドまたは水素添加大豆リン脂質が好ましいが、これに限定されない。
【００９０】
アニオン性界面活性剤としては、脂肪酸石鹸、α−アシルスルホン酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルアリルスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩、ＰＯＥアルキルエーテル硫酸塩、アルキルアミド硫酸酸塩、アルキルリン酸塩、ＰＯＥアルキルリン酸塩、アルキルアミドリン酸塩、アルキロイルアルキルタウリン塩、Ｎ−アシルアミノ酸塩、ＰＯＥアルキルエーテルカルボン酸塩、アルキルスルホコハク酸塩、アルキルスルホ酢酸ナトリウム、アシル化加水分解コラーゲンペプチド塩またはパーフルオロアルキルリン酸エステルが好ましいが、これに限定されない。
【００９１】
カチオン性界面活性剤としては、塩化アルキルトリメチルアンモニム、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、臭化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化セトステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ジステアリルジメチルアンモニウム、塩化ステアリルジメチルベンジルアムモニウム、臭化ベヘニルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸ジエチルアミノエチルアミド、ステアリン酸ジメチルアミノプロピルアミドまたはラノリン誘導体第４級アンモニウム塩が好ましいが、これに限定されない。
【００９２】
両性界面活性剤としては、カルボキシベタイン型、アミドベタイン型、スルホベタイン型、ヒドロキシスルホベタイン型、アミドスルホベタイン型、ホスホベタイン型、アミノカルボン酸塩型、イミダゾリン誘導体型またはアミドアミン型などの両性界面活性剤が好ましいが、これに限定されない。
【００９３】
前記有機及び無機顔料としては、ケイ酸、無水ケイ酸、ケイ酸マグネシウム、タルク、セリサイト、マイカ、カオリン、ベンガラ、クレー、ベントナイト、チタン被膜雲母、オキシ塩化ビスマス、酸化ジルコニウム、酸化マグネシウム、酸化亜鉛、酸化チタン、酸化アルミニウム、硫酸カルシウム、硫酸バリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、酸化鉄、群青、酸化クロム、水酸化クロム、カラミン及びこれらの複合体等の無機顔料；ポリアミド、ポリエステル、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリウレタン、ビニル樹脂、尿素樹脂、フェノール樹脂、フッ素樹脂、ケイ素樹脂、アクリル樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂、ポリカーボネート樹脂、ジビニルベンゼン・スチレン共重合体、シルクパウダー、セルロース、ＣＩピグメントイエロー、ＣＩピグメントオレンジ等の有機顔料；及びこれらの無機顔料と有機顔料の複合顔料が好ましいが、これに限定されない。
【００９４】
前記有機粉体としては、ステアリン酸カルシウム等の金属石鹸；セチルリン酸亜鉛ナトリウム、ラウリルリン酸亜鉛、ラウリルリン酸カルシウム等のアルキルリン酸多価金属塩；Ｎ−ラウロイル−β−アラニンカルシウム、Ｎ−ラウロイル−β−アラニン亜鉛、Ｎ−ラウロイルグリシンカルシウムなどのアシルアミノ酸多価金属塩；Ｎ−ラウロイル−タウリンカルシウム、Ｎ−パルミトイル−タウリンカルシウム等のアミドスルホン酸多価金属塩；Ｎε−ラウロイル−Ｌ−リジン、Ｎε−パルミトイルリジン、Ｎα−パルミトイルオルニチン、Ｎα−ラウロイルアルギニン、Ｎα−硬化牛脂脂肪酸アシルアルギニン等のＮ−アシル塩基性アミノ酸；Ｎ−ラウロイルグリシルグリシン等のＮ−アシルポリペプチド；α−アミノカプリル酸、α−アミノラウリン酸等のα−アミノ脂肪酸；またはポリエチレン、ポリプロピレン、ナイロン、ポリメチルメタクリレート、ポリスチレン、ジビニルベンゼン・スチレン共重合体、四フッ化エチルレンが好ましいが、これに限定されない。
【００９５】
前記紫外線吸収剤としては、パラアミノ安息香酸、パラアミノ安息香酸エチル、パラアミノ安息香酸アミル、パラアミノ安息香酸オクチル、サリチル酸エチレングリコール、サリチル酸フェニル、サリチル酸オクチル、サリチル酸ベンジル、サリチル酸ブチルフェニル、サリチル酸ホモメンチル、ケイ皮酸ベンジル、パラメトキシケイ皮酸−２−エトキシエチル、パラメトキシケイ皮酸オクチル、ジパラメトキシケイ皮酸モノ−２−エチルヘキサングリセリル、パラメトキシケイ皮酸イソプロピル、ジイソプロピル・ジイソプロピルケイ皮酸エステル混合物、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、ヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ヒドロキシメトキシベンゾフェノンスルホン酸及びその塩、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノンジスルホン酸ナトリウム、ジヒドロキシベンゾフェノン、テトラヒドロキシベンゾフェノン、４−ｔｅｒｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン、２，４，６−トリアニリノ−ｐ−（カルボ−２’−エチルヘキシル−１’−オキシ）−１，３，５−トリアジンまたは２−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニル）ベンゾトリアゾールが好ましいが、これに限定されない。
【００９６】
前記殺菌剤としては、ヒノキチオール、トリクロサン、トリクロロヒドロキシジフェニルエーテル、クロルヘキシジングルコン酸塩、フェノキシエタノール、レゾルシン、イソプロピルメチルフェノール、アズレン、サリチル酸、ジンクピリチオン、塩化ベンザルコニウム、感光素３０１号、モノニトログアヤコールナトリウムまたはウンデシレン酸が好ましいが、これに限定されない。
【００９７】
前記酸化防止剤としては、ブチルヒドロキシアニソール、没食子酸プロピルまたはエリソルビン酸が好ましいが、これに限定されない。
【００９８】
前記ｐＨ調製剤としては、クエン酸、クエン酸ナトリウム、リンゴ酸、リンゴ酸ナトリウム、フマル酸、フマル酸ナトリウム、コハク酸、コハク酸ナトリウム、水酸化ナトリウムまたはリン酸一水素ナトリウムが好ましいが、これに限定されない。
【００９９】
前記アルコールとしては、セチルアルコール等の高級アルコールが好ましいが、これに限定されない。
【０１００】
また、他に加えても良い配合成分は、これに限定されるものではなく、また、前記いずれの成分も本発明の目的及び効果を損なわない範囲内で配合可能であるが、全重量に対して、０．０１〜５重量％で配合することが好ましく、０．０１〜３重量％で配合することがさらに好ましいが、これに限定されない。
【０１０１】
本発明の化粧料は、溶液、乳化物または粘性型混合物の形状をとることができるが、これに限定されない。本発明の化粧料組成物に含まれる成分は、有効成分として本発明の化合物以外に化粧料組成物に通常的に使用される成分を含むことができ、安定化剤、溶解化剤、ビタミン、顔料及び香料のような通常的な補助剤及び担体を含むことができるが、これに限定されない。
【０１０２】
本発明の化粧料組成物は、当業界で通常的に製造されるいかなる剤形でも製造することができ、乳液、クリーム、化粧水、パック、ファンデーション、ローション、美容液または毛髪化粧料に製造することができるが、これに限定されない。具体的に、本発明の化粧料組成物は、スキンローション、スキンソフナー、スキントナー、アストリンゼン、ローション、ミルクローション、モイスチャーローション、栄養ローション、マッサージクリーム、栄養クリーム、モイスチャークリーム、ハンドクリーム、ファンデーション、エッセンス、栄養エッセンス、パック、石鹸、クレンジングフォーム、クレンジングローション、クレンジングクリーム、ボディローションまたはボディクレンザーの剤形を含むが、これに限定されない。
【０１０３】
本発明の剤形がペースト、クリームまたはゲルの場合には、担体成分として動物繊維、植物繊維、ワックス、パラフィン、澱粉、トラカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト、シリカ、タルクまたは酸化亜鉛を使用することができるが、これに限定されない。
【０１０４】
本発明の剤形がパウダーまたはスプレーの場合には、担体成分としてラクトース、タルク、シリカ、アルミニウムヒドロキシド、カルシウムシリケートまたはポリアミドパウダーを使用することができる。特に、スプレーの場合には、追加的にクロロフルオロヒドロカーボン、プロパン／ブタンまたはジメチルエーテルのような推進体を含むことができるが、これに限定されない。
【０１０５】
本発明の剤形が溶液または乳濁液の場合には、担体成分として溶媒、溶媒化剤または乳濁化剤が使用され、水、エチルアルコール、イソプロパノール、エチルカーボネート、エチルアセタート、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレングリコール、１，３−ブチルグリコールオイル、グリセロール脂肪族エステル、ポリエチレングリコールまたはソルビタンの脂肪酸エステルを使用されることができるが、これに限定されない。
【０１０６】
本発明の剤形が懸濁液の場合には、担体成分として水、エチルアルコールまたはプロピレングリコールのような液状希釈剤、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールエステル及びポリオキシエチレンソルビタンエステルのような懸濁剤、微少結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、アガーまたはトラガカントを使用することができるが、これに限定されない。
【０１０７】
本発明の剤形が界面活性剤含有クレンジングの場合には、担体成分として脂肪族アルコールスルファート、脂肪族アルコールエーテルスルファート、スルホコハク酸モノエステル、イソシアナート、イミダゾリニウム誘導体、メチルタウレート、サルコシネート、脂肪酸アミドエーテルスルファート、アルキルアミドベタイン、脂肪族アルコール、脂肪酸グリセリド、脂肪酸ジエタノールアミド、植物性油、リノリン誘導体またはエトキシル化グリセロール脂肪酸エステルを使用することができるが、これに限定されない。
【発明の効果】
【０１０８】
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、ＮＯ生成を抑制しかつ細胞毒性がほとんどなく、生体内で少ない濃度で腹膜炎を阻害することにより、炎症性疾患予防及び治療のための抗炎症用組成物として有用に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１０９】
【図１】多価不飽和リソポリファチジルコリン類の細胞内抗炎症効果を確認するために、ＲＡＷ２６４．７細胞を多様な濃度の多価不飽和リソポリファチジルコリン（リノレオイルリゾホスファチジルコリン、アラキドノイルリゾホスファチジルコリン及びドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン）とともに反応させた後、ＬＰＳによって誘導された炎症反応で細胞生存率（Ａ）とＮＯ生成程度（Ｂ）を測定した結果を示すグラフである（◆：リノレオイルリゾホスファチジルコリン；■：アラキドノイルリゾホスファチジルコリン；及び▲：ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン）。前記各実験は、３回反覆し、実験結果は、平均値±標準偏差で表示した（ＬＰＳ処理群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１）。
【図２】ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの濃度による生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンを尾静脈に前投与した後、３０分後にザイモサンＡを投与して腹腔内炎症を誘発させて、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入程度を測定した結果を示すグラフである。各実験群は、１０匹で構成され、実験結果は、平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【図３】リノレオイルリゾホスファチジルコリン及びアラキドノイルリゾホスファチジルコリンの濃度による生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにリゾホスファチジルコリン（Ａ）及びアラキドノイルリゾホスファチジルコリン（Ｂ）をそれぞれ尾静脈に前投与した後、ザイモサンＡを投与して腹腔内炎症を誘発させて、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入程度を測定した結果を示すグラフである。各実験群は、１０匹で構成され、実験結果は、平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【図４】ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの投与時間別生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンを投与した後、多様な時間間隔でザイモサンＡを投与して腹腔内炎症を誘発させて、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入程度を測定した結果を示すグラフである。各実験群は１０匹で構成され、実験結果は平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【図５】ドコサヘキサエン酸及びドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン過酸化物の生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（１）、ドコサヘキサエン酸（２）、及び１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（３）をそれぞれ前投与した後、ザイモサンＡを投与して腹腔内炎症を誘発させて、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入程度を測定した結果を示すグラフである。各実験群は１０匹で構成され、実験結果は平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【図６】ドコサヘキサエノイルリソホスファチジルコリンまたは１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（リゾホスファチジルコリンの酸化物）の用量による生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（■）または１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（□）を１５〜１５０μｇ／ｋｇで腹腔投与２時間後に、ザイモサンＡを投与して腹腔内炎症を誘発させた後、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入程度を測定した結果を示すグラフである。各実験群は５〜１０匹で構成され、実験結果は平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【図７】ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンの用量による生体内抗炎症効果を確認するために、マウスにリゾホスファチジルエタノールアミンを１５〜１５０μｇ／ｋｇで静脈投与３０分後にザイモサンＡを投与して、腹腔内炎症を誘発させた後、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入（ｐｌａｓｍａ ｌｅａｋａｇｅ）程度を測定した結果を示すグラフである。各実験君は、５〜１０匹で構成され、実験結果は、平均値±標準偏差で表示した（ザイモサンＡのみ処理された陽性対照群に対する＊Ｐ＜０．０５；＊＊Ｐ＜０．０１；＊＊＊Ｐ＜０．００１；生理食塩水を投与した陰性対照群に対する＃＃＃Ｐ＜０．００１）。
【発明を実施するための形態】
【０１１０】
以下、本発明の実施例及び製造例によって詳しく説明する。
【０１１１】
但し、下記実施例及び製造例は、本発明を例示するだけのものであって、本発明の内容が下記実施例及び製造例に限定されるものではない。
＜実施例１＞ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの細胞内抗炎症効果の調査
大食細胞は、炎症反応と生体防御において重要な役割をすることが知られている。大食細胞を脂質多糖類（ＬＰＳ）で活性化させると、誘導性酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）の誘導を通じて多量の酸化窒素（ＮＯ）を生成するようになる。
【０１１２】
それで、本発明者等は、ＲＡＷ２６４．７細胞内でＬＰＳによって誘導される炎症媒介体ＮＯの生成に対する不飽和脂肪酸含有リゾホスファチジルコリン（ｌｙｓｏＰＣ）類の影響を観察した。具体的に、ＲＡＷ２６４．７細胞（５×１０４／ｗｅｌｌ）をそれぞれの多価不飽和リゾホスファチジルコリンであるリノレオイルリゾホスファチジルコリン、アラキドノイルリゾホスファチジルコリン及びドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン［ジアシルホスファチジルコリン（Ａｖａｎｔｉ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ，Ａｌａｂａｓｔｅｒ，ＡＬ，米国）とホスホリパーゼ（ＰＬＡ２）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，米国）を一緒に処理して製造（非特許文献２７−３１）］（０〜６０μＭ）と３７℃で２時間事前培養した後、ＬＰＳ（１μｇ／ｍｌ）を入れて同一条件下で２０時間培養した。前記培養した細胞余液にグリース試薬（Ｇｒｉｅｓｓ ｒｅａｇｅｎｔ）［２．５％Ｈ３ＰＯ４中、１％スルファニルアミド，０．１％Ｎ−（１−ナフチル）エチレンジアミドジヒドロクロライド］を入れて常温で１５分間反応させた後に５４０ｎｍで吸光度を測定して、前記過程で生成されたＮＯの量を測定した（Ｇｒｅｅｎ ＬＣ，等，Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８２年１０月，第１２６（１）巻：１３１−８頁）。
【０１１３】
その結果、図１Ｂに見られるようにアラキドノイルリゾホスファチジルコリンは、６０μＭでＬＰＳ誘導ＮＯ形成を一部阻害する傾向を示したが、２０％以上の阻害度を示さなかった。一方、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの場合、１２μＭ以上の低濃度でも明らかな阻害効果を示した。ここで、５０％保護用量（ＥＣ５０）値は、１８．２±２．１μＭで算出された。一方、リノレオイルリゾホスファチジルコリンは、６０μＭに至るまで有意的な阻害効果を示さなかった（図１Ｂ）。
＜実施例２＞ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの細胞毒性の調査
本発明者等は、三種類の多価不飽和リゾホスファチジルコリンの細胞毒性をＭＴＴ分析法を用いて測定した。具体的に、ＲＡＷ２６４．７細胞をペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００Ｕ／ｍｌ）と熱によって非活性されたＦＢＳ（１０％ｖ／ｖ）含有ＤＭＥＭ培地で３７℃、５％ＣＯ２条件下で培養した。細胞（６ないし１３パッセージ（ｐａｓｓａｇｅ））を回収した後、９６ウェルプレート（５×１０４／ｗｅｌｌ）に分取培養した。各多価不飽和リゾホスファチジルコリン（０〜６０μＭ）を入れた後、２時間静置した後、ＬＰＳ（１μｇ／ｍｌ）存在下に前記条件で２０時間培養した。細胞死率は、ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２イル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロミド）法に基づいて５７０ｎｍでの吸光度を６９０ｎｍでの吸光度と比較して評価した（Ｌｉｎ ＷＷ．等，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９８年，第１２５巻，１６０１−１６０９頁；Ｍｏｓｍａｎｎ，Ｔ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９８３年，第６５巻，５５−６３頁）。
【０１１４】
その結果、図１Ａに見られるようにアラキドノイルリゾホスファチジルコリンは、濃度による細胞毒性が多少有意的に示された一方、リノレオイルリゾホスファチジルコリンまたはドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの場合、有意的な細胞毒性が示されなかった（図１Ａ）。
【０１１５】
したがって、アラキドノイルリゾホスファチジルコリンのＮＯ生成阻害効果は、細胞毒性による結果でも推論することができるが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンによるＮＯ生成阻害効果は、細胞毒性とは無関係な濃度で成り立ったものと見られる。これは、ＮＯ生成に対するドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの選択的阻害効果と認められる。
＜実験例３＞ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの静脈注射を通じた生体内抗炎症効果の調査
＜３−１＞リゾホスファチジルコリン類のザイモサンＡ誘導血漿流入阻害効果の調査
５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）は、アラキドン酸から炎症媒介体であるロイコトリエンの生成に重要な役割をすることにより、５−ＬＯＸの阻害を通じて炎症反応の減少をもたらすことができることが報告されたことがある。また、ザイモサン誘導腹膜炎は、５−ＬＯＸによって生成されるロイコトリエンによって媒介されることが知られている（ＲａｏＴＳ，等，Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ．，１９９４年６月，第２６９（３）巻，９１７−２５頁；Ｄｏｈｅｒｔｙ Ｎ Ｓ，等，Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ．，１９８５年１１月，第３０（５）巻，７６９−８９頁）。
【０１１６】
それで、本発明者等は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンのザイモサン誘導腹膜炎に対する阻害効果を調べるために、マウスにザイモサンＡ（ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐ，Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，米国）を投与して腹腔内炎症を誘発させた後、各リゾホスファチジルコリン類を投与して抗炎症効果を評価した。具体的に、ＳＰＦ条件下で飼育されたマウス（６週齢、雄）を搬入１２時間後、薬学大学内動物保存室で１２時間明暗サイクル条件下に維持した後、腹腔内炎症反応実験を実施した。まず、各マウス５〜１０匹で構成された各群マウスの尾静脈に、試験群に各リゾホスファチジルコリン類１０〜５００μｇ／ｋｇ用量で注射して、対照群に生理食塩水を５０〜１００μｌ用量で注射した。続いて、３０分後に、０．５％エバンスブルー染色溶液（０．２ｍｌ）で尾静脈注射した後、腹腔内に生理食塩水に溶かしたザイモサンＡ（１ｍｇ／ｍｌ）溶液１００μｌを投与した。前記投与３０分後に軽微な痲酔［エーテルまたはフルオラン（ｆｌｕｏｒａｎｅ）］下に頚部切断した後、腹腔内に氷冷ＰＢＳを４ｍｌ投与した後、腹腔液をプラスチック注射器で回収して遠心分離した（３，０００ｒｐｍ，１０分）。前記遠心分離して得た上澄み液を分光光度計を使用して６２０ｎｍでエバンスブルーの滲出（ｅｘｕｄａｔｉｏｎ）程度を測定することで、抗炎症効果を評価した（Ａｒｉｔａ Ｍ，等，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．，２００５年５月２４日，第１０２（２１）巻，７６７１−６頁；Ｔａｋｅｎａｋａ Ｍ，等，Ｂｉｏｌ Ｐｈａｒｍ Ｂｕｌｌ．，２００５年７月，第２８（７）巻，１２９１−３頁）。
【０１１７】
その結果、図２に見られるようにドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、１５μｇ／ｋｇで有意性ある阻害効果を示した。このような効果は、５００μｇ／ｋｇ量の範囲に至るまで濃度依存的にザイモサン誘導血漿流入を減少させた（図２）。一方、アラキドノイルリゾホスファチジルコリンを静脈注射した３０分後にザイモサン（５μｌ／３０分）を腹腔内に投入時、アラキドノイルリゾホスファチジルコリンは、５０μｇ／ｋｇで血漿流入を有意的に低下させた。このような阻害現象は、１５０μｇ／ｋｇで明らかだったが、５００μｇ／ｋｇに増加させた時にさらに増加する傾向を示すことができなかった。一方、リノレオイルリゾホスファチジルコリンは、濃度５００μｇ／ｋｇに至るまで何の阻害効果も示さなかった（図３）。
【０１１８】
したがって、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、他のリゾホスファチジルコリン類に比べて、ザイモサンＡによって誘導された血漿流入を阻害する効果がずっと優れていることが分かった。
＜３−２＞リゾホスファチジルコリン類のザイモサンＡ誘導血漿流入阻害効果の経時別調査
本発明者等は、各リゾホスファチジルコリンの抗炎症効果（ザイモサンＡ誘導血漿流入の阻害）を経時別に測定した。具体的に、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（５０μｇ／ｋｇ）をマウスの尾静脈に投与時、１５分から１２０分に至るまで経時別に投与時間を異ならせて投与（ザイモサンＡ投与１０分前、３０分前、６０分前及び１２０分前にそれぞれ投与）した後、ザイモサンＡ（１００ｍｇ／ｋｇ）を腹腔投与した後、エバンスブルーを投与した後、腹腔液内での血漿流入を測定した。
【０１１９】
その結果、図４にみられるように、１０分前投与でドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの阻害効果は、明確ではなかったが、３０分または６０分前投与では、顕著な阻害効果を示した。一方、１２０分前投与で、阻害効果が若干増加した（図４）。
＜３−３＞ドコサヘキサエン酸またはその過酸化物のザイモサンＡ誘導血漿流入阻害効果の調査
前記実施例＜２−１＞で長期間間隔（１２０分前投与）過程で他の機序が追加的に関与するものと思慮される。ゆえに、長期間間隔では少なくとも二つのザイモサンＡ誘導血漿流入の短時間効果機序と長期間効果機序が一緒に関与するものと思慮される。
５−リポキシゲナーゼの直接的な抑制によるものと推定されるザイモサンＡ誘導血漿流入に対するドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの短時間抑制効果は、ロイコトリエンＣ誘導血漿流入が、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンによって妨害されたためであると思慮される。
【０１２０】
それで、本発明者等は、前記長期効果が代謝を通じた代謝物の効果なのかどうかを調べるため、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサエン酸及び１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（１７（Ｓ）−ヒドロペルオキシ−４，７，１０，１３，１５，１９−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン）をそれぞれ使用して、腹腔液内での血漿流入程度を観察した。ドコサヘキサエン酸及び１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンのドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンとの関係は、下記のようである：
【０１２１】
【化２】
【０１２２】
具体的に、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（５０μｇ／ｋｇ）、ドコサヘキサエン酸（５０μｇ／ｋｇ）及び１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（１７（Ｓ）−ヒドロペルオキシ−４，７，１０，１３，１５，１９−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン）［ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（２０μＭ）を含んだホウ砂緩衝液（ｂｏｒａｘ ｂｕｆｆｅｒ）（５０ｍＭ，ｐＨ９．０）に大豆リポキシゲナーゼ（大豆ＬＯＸ−１）（２００ユニット／ｍｌ）を入れて、２５℃で３０分間反応させた後に、Ｃ１８カラム（２×１ｃｍ）を通過させてメタノールで溶出させることで製造（Ｈｕａｎｇ ＬＳ，等，Ｊ Ａｇｒｉｃ Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．，２００８年，９月１０日，第５６（１７）巻，７８０８−１４頁）］の一定量（５０μｇ／ｋｇ）をザイモサンＡ投与（１００ｍｇ／ｋｇ）の投与３０分前にそれぞれ投与した後、３０分後に腹腔液内での血漿流入を測定した。
【０１２３】
その結果、図５にみられるように、ドコサヘキサエン酸は、血漿流入で有意な阻害効果を示さず、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン過酸化物は、一部阻害効果を示したが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの阻害効果に比べて多少低かった（図５）。
【０１２４】
したがって、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの血漿流入の阻害効果は、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの酸化によるものであることが分かる。
＜実験例４＞ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの腹腔注射を通じた生体内抗炎症効果の調査
本発明者等は、各試験群マウスの腹腔内にドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンまたは１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリン（ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの酸化物）を１５〜１５０μｇ／ｋｇ用量で注射して、対照群に生理食塩水を５０〜１００μｌ用量で投与した。続いて、２時間後に、０．５％エバンスブルー染色溶液（０．２ｍｌ）で尾静脈注射した後、腹腔内に生理食塩水に溶解したザイモサンＡ（１ｍｇ／ｍｌ）溶液１００μｌを投与した。前記投与３０分後に軽微な痲酔［エーテルまたはフルオラン（ｆｌｕｏｒａｎｅ）］下に頚部切断した後、腹腔内に氷冷ＰＢＳを４ｍｌ投与した後、腹腔液をプラスチック注射器で回収して遠心分離した（３，０００ｒｐｍ，１０分）。前記のようにエバンスブルーの滲出程度を測定することで、抗炎症効果を評価した。
【０１２５】
その結果、図６にみられるように、腹腔に投与されたドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンは、１５μｇ／ｋｇ以上で有意性ある阻害効果を示した。このような効果は、１５０μｇ／ｋｇ量の範囲に至るまで濃度依存的にザイモサン誘導血漿流入を減少させた（図６）。一方、１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンも濃度にしたがって血漿流入を低下させた。このような阻害現象は、１５μｇ／ｋｇでも明確であり、１５０μｇ／ｋｇに至るまで濃度による増加傾向を示した。結論的に、１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンより多少効果があった。これは、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンが１７−ＨＰＤＨＡ誘導体を通じて生物活性代謝産物に変換したものと思慮される。
【０１２６】
したがって、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンや１７−ＨＰＤＨＡリゾホスファチジルコリンは、腹腔内注射でも少ない用量でザイモサンＡによって誘導された血漿流入を効果的に阻害する効果を示すので、抗炎症効果が優れていることが分かった。
＜実験例５＞ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンの静脈注射を通じた生体内抗炎症効果の調査
本発明者等は、各試験群マウスの静脈にドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンを１５〜１５０μｇ／ｋｇ用量で注射して、対照群で生理食塩水を５０〜１００ｕｌ用量で投与した。続いて、０．５％エバンスブルー染色溶液（０．２ｍｌ）で尾静脈注射した後、静脈内に生理食塩水に溶解したザイモサンＡ（１ｍｇ／ｍｌ）溶液１００ｕｌを投与した。前記投与後に前記のようにエバンスブルーの滲出（ｅｘｕｄａｔｉｏｎ）程度を測定することで、抗炎症効果を評価した。
【０１２７】
その結果、図７に見られるように、腹腔に投与されたドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミンは、５０μｇ／ｋｇ以上で有意性ある阻害効果を示した。このような効果は、１５０μｇ／ｋｇ量の範囲に至るまで濃度依存的にザイモサン誘導血漿流入を減少させた（図７）。
【０１２８】
下記には、本発明の組成物のための製造例を例示する。
＜製造例１＞製薬製剤の製造
＜１−１＞散剤の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン ２０ｍｇ
乳糖 ２０ｍｇ
前記の成分を混合した後、気密包に充填して散剤を製造した。
＜１−２＞錠剤の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン １０ｍｇ
とうもろこし澱粉 １００ｍｇ
乳糖 １００ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ２ｍｇ
前記の成分を混合した後、通常の錠剤の製造方法にしたがって打錠して錠剤を製造した。
＜１−３＞カプセル剤の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン １０ｍｇ
結晶性セルロース ３ｍｇ
ラクトース １４．８ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．２ｍｇ
前記の成分を混合した後、通常のカプセル剤の製造方法にしたがってゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を製造した。
＜１−４＞液剤の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン ２０ｍｇ
異性化糖 １０ｇ
マンニトール ５ｇ
精製水 適量
通常の液剤の製造方法によって精製水にそれぞれの成分を加えて溶解させてレモン香を適量加えた後、前記の成分を混合した後、精製水を加えて全体を１００ｍｌに調節した後、茶色瓶に充填して滅菌させて液剤を製造する。
＜１−６＞注射剤の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン １０ｍｇ／ｍｌ
薄い塩酸ＢＰ ｐＨ７．６になるまで
注射用塩化ナトリウムＢＰ 最大１ｍｌ
適当な容積の注射用塩化ナトリウムＢＰの中にドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンを溶解させて、生成された溶液のｐＨを薄い塩酸ＢＰを使用してｐＨ７．６に調節して、注射用塩化ナトリウムＢＰを使用して容積を調節して充分に混合した。無菌フィルターを通過させた溶液を透明ガラス製の５ｍｌタイプＩアンプル中に充填して、上部ガラスを溶解させることで封入して、ＵＶ殺菌条件下で注射液剤を製造した。
＜製造例２＞食品の製造
本発明の抽出物またはその分画物を含む食品を次のように製造した。
＜２−１＞小麦粉食品の製造
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン０．００５〜０．５重量部を小麦粉に添加して、その混合物を使用してパン、ケーキ、クッキー、クラッカー及び麺類を製造して健康促進用食品を製造した。
＜２−２＞乳製品の製造
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン０．０１〜０．１重量部を牛乳に添加して、前記牛乳を使用してバター及びアイスクリームのような多様な乳製品を製造した。
＜２−３＞禅食の製造
玄米、麦、もち米、鳩麦を公知の方法でα化させて乾燥させたものを倍前した後、粉砕機で粒度６０メッシュの粉末に製造した。
【０１２９】
黒豆、黒ごま、えごまも公知の方法で蒸して乾燥させたものを倍前した後、粉砕機で粒度６０メッシュの粉末に製造した。
【０１３０】
本発明のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンを真空濃縮機で減圧濃縮して、噴霧、熱風乾燥器で乾燥して得た乾燥物を粉砕機で粒度６０メッシュに粉砕して乾燥粉末を得た。
【０１３１】
前記で製造した穀物類、種実類及びドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンの乾燥粉末を次の割合で配合して製造した。
【０１３２】
穀物類（玄米３０重量部、鳩麦１５重量部、麦２０重量部）、
種実類（えごま７重量部、黒豆８重量部、黒ごま７重量部）、
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（０．１重量部）、
霊芝（０．５重量部）、
地黄（０．５重量部）
＜２−４＞健康補助食品の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン ０．５ｍｇ
ビタミン混合物 適量
ビタミンＡアセテート ７０μｇ
ビタミンＥ １．０ｍｇ
ビタミンＢ１ ０．１３ｍｇ
ビタミンＢ２ ０．１５ｍｇ
ビタミンＢ６ ０．５ｍｇ
ビタミンＢ１２ ０．２μｇ
ビタミンＣ １０ｍｇ
ビオチン １０μｇ
ニコチン酸アミド １．７ｍｇ
葉酸 ５０μｇ
パントテン酸カルシウム ０．５ｍｇ
無機質混合物 適量
硫酸第１鉄 １．７５ｍｇ
酸化亜鉛 ０．８２ｍｇ
炭酸マグネシウム ２５．３ｍｇ
第１リン酸カリウム １５ｍｇ
第２リン酸カルシウム ５５ｍｇ
クエン酸カリウム ９０ｍｇ
炭酸カルシウム １００ｍｇ
塩化マグネシウム ２４．８ｍｇ
前記のビタミン及びミネラル混合物の組成比は、比較的健康食品に相応しい成分を好ましい実施例として混合組成したが、その配合比を任意に変形実施しても構わず、通常の健康食品製造方法によって前記の成分を混合した後、顆粒を製造して、通常の方法によって健康食品組成物製造に使用することができる。
＜製造例３＞健康飲料の製造
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン １ｍｇ
クエン酸 １００ｍｇ
オリゴ糖 １００ｍｇ
梅濃縮液 ２ｍｇ
タウリン １００ｍｇ
精製水を加えて全体 ５００ｍｌ
通常の健康飲料製造方法によって前記の成分を混合した後、約１時間８５℃で撹拌加熱した後、できた溶液をろ過して滅菌された１ｌ容器に取得して密封滅菌した後、冷蔵保管した後、本発明の健康飲料組成物製造に使用する。
【０１３３】
前記組成比は、比較的に嗜好飲料に相応しい成分を好ましい実施例として混合組成したが、需要階層、需要国家、使用用途など地域的、民族的嗜好によってその配合比を任意に変形実施してもかまわない。
＜製造例４＞化粧品の製造
＜４−１＞乳化剤形の化粧品製造
表１に記載した組成で乳化剤形の化粧品を製造した。製造方法は下記のとおりである。
【０１３４】
１）１〜９の原料を混合した混合物を６５〜７０℃に加熱した。
【０１３５】
２）１０の原料を前記工程１）の混合物に投入した。
【０１３６】
３）１１〜１３の原料の混合物を６５〜７０℃に加熱して完全に溶解させた。
【０１３７】
４）前記工程３）を経て、前記２）の混合物を徐々に添加して８，０００ｒｐｍで２〜３分間乳化させた。
【０１３８】
５）１４の原料を少量の水に溶解させた後、前記工程４）の混合物に添加して２分間さらに乳化させた。
【０１３９】
６）１５〜１７の原料をそれぞれ計量した後、前記工程５）の混合物に入れて３０秒間さらに乳化させた。
【０１４０】
７）前記工程６）の混合物を乳化後、脱気過程を経て２５〜３５℃に冷却させることで、乳化剤形の化粧品を製造した。
【０１４１】
【表１】
【０１４２】
＜４−２＞可溶化剤形の化粧品製造
表２に記載した組成で可溶化剤形の化粧品を製造した。製造方法は、下記のとおりである。
【０１４３】
１）２〜６の原料を１の原料（精製水）に入れてミキサーを使用して溶解させた。
【０１４４】
２）８〜１１の原料を７の原料（アルコール）に入れて完全に溶解させた。
【０１４５】
３）前記工程２）の混合物を前記工程１）の混合物に徐々に添加しながら可溶化させた。
【０１４６】
【表２】
【産業上の利用可能性】
【０１４７】
上述したように、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンは、炎症性疾患治療剤開発、炎症性疾患改善用健康食品開発、及び抗炎症用化粧品開発などに利用することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミン（Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌａｍｉｎｅ）を有効成分として含む炎症性疾患の予防及び治療用組成物。
【請求項２】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン（ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ）及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（２−Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）からなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項１記載の炎症性疾患予防及び治療用組成物。
【請求項３】
前記炎症性疾患が、喘息、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎及び退行性疾患からなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項１記載の炎症性疾患予防及び治療用組成物。
【請求項４】
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを炎症にかかった個体に投与する工程を含む、前記個体の炎症抑制方法。
【請求項５】
薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを炎症性疾患にかかった個体に投与する工程を含む、炎症性疾患治療方法。
【請求項６】
薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを個体に投与する工程を含む、炎症性疾患予防方法。
【請求項７】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項４ないし請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記炎症性疾患が、喘息、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎及び退行性疾患からなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項５または請求項６記載の方法。
【請求項９】
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、炎症性疾患の予防及び改善用健康食品。
【請求項１０】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項９記載の炎症性疾患予防及び改善用健康食品。
【請求項１１】
前記炎症性疾患が、喘息、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎及び退行性疾患からなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項９記載の炎症性疾患予防及び改善用健康食品。
【請求項１２】
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、抗炎症用皮膚外用剤。
【請求項１３】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項１２記載の抗炎症用皮膚外用剤。
【請求項１４】
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、抗炎症用化粧料組成物。
【請求項１５】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項１４記載の抗炎症用化粧料組成物。
【請求項１】
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミン（Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌａｍｉｎｅ）を有効成分として含む炎症性疾患の予防及び治療用組成物。
【請求項２】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン（ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ）及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン（２−Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｙｌ ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）からなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項１記載の炎症性疾患予防及び治療用組成物。
【請求項３】
前記炎症性疾患が、喘息、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎及び退行性疾患からなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項１記載の炎症性疾患予防及び治療用組成物。
【請求項４】
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを炎症にかかった個体に投与する工程を含む、前記個体の炎症抑制方法。
【請求項５】
薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを炎症性疾患にかかった個体に投与する工程を含む、炎症性疾患治療方法。
【請求項６】
薬学的に有効な量のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを個体に投与する工程を含む、炎症性疾患予防方法。
【請求項７】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項４ないし請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記炎症性疾患が、喘息、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎及び退行性疾患からなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項５または請求項６記載の方法。
【請求項９】
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、炎症性疾患の予防及び改善用健康食品。
【請求項１０】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項９記載の炎症性疾患予防及び改善用健康食品。
【請求項１１】
前記炎症性疾患が、喘息、腹膜炎、胃炎、腸炎、関節炎、腎臓炎、肝炎及び退行性疾患からなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項９記載の炎症性疾患予防及び改善用健康食品。
【請求項１２】
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、抗炎症用皮膚外用剤。
【請求項１３】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項１２記載の抗炎症用皮膚外用剤。
【請求項１４】
ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンを有効成分として含む、抗炎症用化粧料組成物。
【請求項１５】
前記のドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルアミンが、ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリン、ドコサヘキサノイルリゾホスファチジルエタノールアミン及び２−ドコサヘキサエノイルリゾホスファチジルコリンからなる群から選択されるいずれか一つであることを特徴とする、請求項１４記載の抗炎症用化粧料組成物。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公開番号】特開２０１０−２６０８４３（Ｐ２０１０−２６０８４３Ａ）
【公開日】平成２２年１１月１８日（２０１０．１１．１８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２３４９７９（Ｐ２００９−２３４９７９）
【出願日】平成２１年１０月９日（２００９．１０．９）
【出願人】（５０９２８２６０８）ジ インダストリー アンド アカデミック コーオペレイション イン チュンナム ナショナル ユニバーシティー (1)
【氏名又は名称原語表記】ＴＨＥ ＩＮＤＵＳＴＲＹ ＆ ＡＣＡＤＥＭＩＣ ＣＯＯＰＥＲＡＴＩＯＮ ＩＮ ＣＨＵＮＧＮＡＭ ＮＡＴＩＯＮＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
【住所又は居所原語表記】７９ ＤＡＥＨＡＮＧＮＯ， ＹＵＳＥＯＮＧ−ＧＵ ＤＡＥＪＥＯＮ ３０５−７６４， ＲＥＰＵＢＬＩＣ ＯＦ ＫＯＲＥＡ
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１１月１８日（２０１０．１１．１８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１０月９日（２００９．１０．９）
【出願人】（５０９２８２６０８）ジ インダストリー アンド アカデミック コーオペレイション イン チュンナム ナショナル ユニバーシティー (1)
【氏名又は名称原語表記】ＴＨＥ ＩＮＤＵＳＴＲＹ ＆ ＡＣＡＤＥＭＩＣ ＣＯＯＰＥＲＡＴＩＯＮ ＩＮ ＣＨＵＮＧＮＡＭ ＮＡＴＩＯＮＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
【住所又は居所原語表記】７９ ＤＡＥＨＡＮＧＮＯ， ＹＵＳＥＯＮＧ−ＧＵ ＤＡＥＪＥＯＮ ３０５−７６４， ＲＥＰＵＢＬＩＣ ＯＦ ＫＯＲＥＡ
【Ｆターム（参考）】
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