ユッカ抽出物、キラヤ抽出物及び乳酸菌の複合組成物を含有する飲食品及びその製造法
【課題】乳酸菌の血中コレステロール低下作用を増強し、乳酸菌と併用することにより血中トリグリセリドを低下させる全く安全な新しい組成物を含有する飲食品の提供。
【解決手段】 ユッカ及びキラヤ抽出物と乳酸菌あるいはビフィズス菌を含む乳酸菌を併用し、飲食品に含有させる。
【効果】当該飲食品は血中コレステロール及び血中トリグリセリドを効率的に低下させることができる。
【解決手段】 ユッカ及びキラヤ抽出物と乳酸菌あるいはビフィズス菌を含む乳酸菌を併用し、飲食品に含有させる。
【効果】当該飲食品は血中コレステロール及び血中トリグリセリドを効率的に低下させることができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物を混合・配合した複合組成物（以下、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と称する。）と乳酸菌を混合・配合した複合組成物（以下、ユッカ、キラヤ及び乳酸菌の複合組成物と称する。）を含有する飲食品及びその製造法に関する。
【背景技術】
【０００２】
良く知られている通り、乳酸菌とは、乳糖やブドウ糖などの糖を利用して増殖し、その過程で多量の乳酸を産生する菌（ホモ型乳酸発酵菌）または乳酸、アルコール及び炭酸ガスなどを産生する菌（ヘテロ型乳酸発酵菌）であり、更には乳酸と酢酸などを産生するビフィズス菌も含まれる。
【０００３】
乳酸菌は、発酵乳用乳酸菌と腸管系乳酸菌に分類される。発酵乳用乳酸菌は、乳酸桿菌属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ．ｊｕｇｕｒｔｉなど）、乳酸球菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ．Ｌａｃｔｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ．Ｃｒｅｍｏｒｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｅａｃｅｔｉｌａｃｔｉｓなど）とロイコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓなど）に分類される。
【０００４】
腸管系乳酸菌は、乳酸桿菌属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｒｉｓｐａｔｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ｓｕｂｓｐ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓなど）、乳酸球菌属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍなど）とビフィズス属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆａｎｔｉｓ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓなど）に分類される。
【０００５】
乳酸菌には、バチルス・コアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、ラクトバチルス・スポロゲネス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｏｒｏｇｅｎｅｓ）のような有胞子性乳酸菌も含まれる。
【０００６】
ヨーグルトは、ブルガリア菌、サーモフィラス菌、アシドフィラス菌、ビフィズス菌の１種または２種以上によって製造される。
【０００７】
便通・便秘・下痢の改善、消化・吸収の向上、腸内腐敗の防止、腸内細菌フローラの正常化、腸内の清浄、免疫機能の亢進などが、乳酸菌の一般的機能として知られている。
【０００８】
乳酸菌による血中コレステロール低下作用及び食品中コレステロール低減方法も知られている。例えば、ラクトコッカスに属する乳酸菌を用いた飲食品（特許文献１参照）、凍結乾燥乳酸菌を用いた組成物（特許文献２参照）、胆汁酸脱抱合作用を示さない新規なラクトバチルス乳酸菌を用いる方法（特許文献３参照）、乳酸菌による発酵豆乳（特許文献４参照）、カビ培養物、酵母、乳酸菌培養物を配合した組成物及び食品（特許文献５参照）、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）属の乳酸菌の産生する抱合胆汁酸脱抱合酵素を用いる方法（特許文献６参照）、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の乳清蛋白質培養物とストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）の乳清蛋白質培養物の混合物を用いた食品（特許文献７参照）、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシス・ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ）を用いた食品中コレステロール低減方法（特許文献８参照）、乳酸菌による発酵豆乳（特許文献９参照）、ラクトバチルス・プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・ヒルガルディ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｉｌｇａｒｄｉｉ）、ラクトバチルス・パラアリメンタリウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｒａｌｉｍｅｎｔａｒｉｕｓ）を用いた食品（特許文献１０参照）及びラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ）を用いた飲食物（特許文献１１参照）、有胞子性乳酸菌による方法（非特許文献１参照）などである。
【０００９】
【特許文献１】特開平５−６５２２９
【特許文献２】特開平６−５６６８０
【特許文献３】特開平７−２５０６７０
【特許文献４】特開平１０−２２９８４１
【特許文献５】特開平１０−２９８０８３
【特許文献６】特開２０００−１６６５４８
【特許文献７】特開２０００−１９７４６９
【特許文献８】特開２００２−６５２０３
【特許文献９】特開２００３−８１８５５
【特許文献１０】特開２００３−２３５５０１
【特許文献１１】特開２００３−３０６４３６
【非特許文献１】Ｊ．Ｃ．Ｍｏｈａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｄｉａｎ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．９５，ｐｐ．４３１−４３２，１９９０
【００１０】
また、乳酸菌の血中コレステロール低下作用、血中トリグリセリド低下作用について多くの基礎研究、臨床試験が実施されてきた。特に、１９９０年以後に実施され学術論文として報告された１１報のヒト臨床試験の結果を中心としたレビューが発表された（非特許文献２参照）。
【００１１】
【非特許文献２】肖 金忠、医学のあゆみ、２０７巻、８３５−８４０、２００３
【００１２】
これらの１１報の学術論文に関する総合的判断では、乳酸菌が血中コレステロールを低下させる成績と低下させない成績のいずれもあり、どちらとも断言することはできないと云うのが結論であった。いずれにせよ、乳酸菌による血中コレステロール低下作用は不十分であり、満足できるものではないことは明らかである。
【００１３】
また、これらの１１報の全てで血中トリグリセリドを低下させた成績は得られなかった。即ち、乳酸菌は血中トリグリセリド低下に関して無効であると結論することができると考えられる。
【００１４】
ユッカ抽出物は、ユリ科のユッカ・シディゲラ（Ｙｕｃｃａ ｓｃｈｉｄｉｇｅｒａ）の根茎より水または含水アルコールで抽出して得られた抽出物である。キラヤ抽出物は、バラ科のキラヤ・サポナリア（Ｑｕｉｌｌａｊａ ｓａｐｏｎａｌｉａ）の樹皮より水または含水アルコールで抽出して得られた抽出物である。
【００１５】
ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物は、天然物由来の食品添加物として、日本、米国などで承認を得ており、特に飲料、化粧品などの乳化剤、起泡剤などとして汎用されている。
【００１６】
ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物は、固有の香り、味、色があり、そのままでも食品素材として使用できるが、好ましくは、更に精製した製品、場合によっては高度に精製した製品が望まれる。
【００１７】
ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物に関して、それぞれ単独の抽出物が、いずれも血中コレステロール低下作用を有することが報告されている（非特許文献３参照）。
【００１８】
ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物は、ヒト血中総コレステロール低下作用、ヒト血中ＬＤＬコレステロール低下作用及び消化管機能改善作用に対してユッカ抽出物とキラヤ抽出物は相乗的に有効性を発揮し、ユッカ抽出物単独、キラヤ抽出物単独の場合よりも格段に優れた有効性を示すこと、及び、ユッカ抽出物とキラヤ抽出物の配合割合を９６：４〜６５：３５等といろいろと変化させた例、更には、優れたヒト血中コレステロール低下作用を有する混合割合の代表例は、キラヤ抽出物が６０％でユッカ抽出物が４０％の混合物であることなどが既に開示されている（特許文献１２及び非特許文献４参照）。
【００１９】
特許文献１２及び非特許文献４によれば、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の血中トリグリセリド低下作用は認められなかった。
【００２０】
また、ユッカ及びキラヤ抽出物の組成物を含有する飲食品の形体としては、溶液状の飲料形体及び固形状の食品形体が知られている。（特許文献１２及び１３参照）。
【００２１】
【非特許文献３】Ｊ．Ｍｉｌｇａｔｅ ａｎｄ Ｄ．Ｃ．Ｋ．Ｒｏｂｅｒｔｓ，Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．１５， Ｎｏ．８，ｐｐ．１２２３−１２４９，１９９５
【非特許文献４】Ｓ．Ｗ．Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ，Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．２６，Ｎｏ．１２，ｐｐ．１０４２−１０４６，２００３
【特許文献１２】ＰＣＴ／ＫＲ０１／００２９９
【特許文献１３】特願２００３−３９４７３８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２２】
乳酸菌を使用した血中コレステロール低下能を有する機能性飲食品で、これまでに知られている飲食品の血中コレステロール低下作用は強いものではなく、甚だ不充分なものであった。そのため、乳酸菌の血中コレステロール低下作用を増強し、しかも全く安全で飲食品として用いることができる新しい組成物の開発が強く求められていた。
【００２３】
また、ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物の複合組成物においても、その価格は安価なものではないため、より少ない摂食量でも充分な血中コレステロール低下作用を持たせることが求められていた。そのため、ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物の複合組成物の血中コレステロール低下作用を増強し、しかも全く安全で飲食品として用いることができる新しい組成物の開発が強く求められていた。
【００２４】
これまでの多くのヒト臨床試験の結果では、乳酸菌が血中トリグリセリド低下作用を有することは認められていない。従って、乳酸菌と併用することによって血中トリグリセリド低下作用を発揮させることができ、しかも全く安全で飲食品として用いることができる新しい組成物の開発が強く求められていた。
【００２５】
これまでのヒト臨床試験の結果では、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物が血中トリグリセリド低下作用を有することは認められていない。従って、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と併用することによって血中トリグリセリド低下作用を発揮させることができ、しかも全く安全で飲食品として用いることができる新しい組成物の開発が強く求められていた。
【００２６】
そこで本発明が解決しようとする課題は、ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を混合・配合することにより、それぞれの血中コレステロール低下作用を増強し、より効率的に血中コレステロールを低下させること、更には、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物も乳酸菌も単独では血中トリグリセリド低下効果を有さないが、ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を混合・配合することにより血中トリグリセリド低下効果を有するようにすること、しかも全く安全な新しい複合組成物を含有する飲食品及び飲食品素材を提供することにある。
【００２７】
本発明の課題の飲食品は、ユッカ、キラヤ及び乳酸菌の複合組成物を構成要素とするが、この構成要素以外に混合・配合する飲食品素材を限定するものではない。即ち、一般的な食品素材を広く混合・配合することができる。このようにして得られた飲食品は、ユッカ、キラヤ及び乳酸菌の複合組成物を構成要素として含有している。即ち、ユッカ、キラヤ及び乳酸菌の複合組成物は飲食品素材の一つであり、従って本発明の課題は飲食品及び飲食品素材を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００２８】
本発明者らは、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の血中コレステロール低下作用を増強することができる飲食品素材及び血中トリグリセリド低下作用を発揮させることができる飲食品素材について鋭意検討を進めた結果、乳酸菌がそのような作用を有することを見出し本発明を完成した。
【００２９】
即ち、課題を解決する手段は、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を併用することである。そのことによって、血中コレステロールをより効率的に低下させることができること及びユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物または乳酸菌のそれぞれ単独では血中トリグリセリドを低下させないが、これらを併用することによって血中トリグリセリドを低下させることができる。更には、ユッカ抽出物、キラヤ抽出物及び乳酸菌のいずれも全く安全な飲食品素材であり、これらを含有する飲食品は理想的な飲食品として期待できる。
【発明の効果】
【００３０】
本発明のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を混合・配合した複合組成物を含有する飲食品または飲食品素材は、従来のユッカ及びキラヤ抽出物を含有する飲食品または飲食品素材、乳酸菌を含有する飲食品または飲食品素材に比して、次の効果を有する。
【００３１】
（１）ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌は、併用することによって、それぞれ単独に使用した場合よりも、血中コレステロールをより効率的に低下させ、且つ、ユッカ抽出物、キラヤ抽出物及び乳酸菌のいずれも全く安全な飲食品素材であり、これらを含有する製品は理想的な飲食品または飲食品素材とすることができる。
【００３２】
このユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌の相乗的血中コレステロール低下作用は、試験例２及び表２によって証せられる。
【００３３】
即ち、試験例２及び表２に示したように血中コレステロール低下に対して、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物単独及びビフォドバクテリウム・ロンガム単独での有効性は認めなかった。しかるに、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を併用して投与した場合は、血中コレステロールに有意な著しい低下を認めた。
【００３４】
（２）ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物または乳酸菌のそれぞれ単独では血中トリグリセリドを低下させないが、これらを併用することによって血中トリグリセリドを低下させる飲食品または飲食品素材とすることができる。
【００３５】
このユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌の相乗的血中トリグリセリド低下作用は、試験例２及び表２によって証せられる。
【００３６】
即ち、試験例２及び表２に示したように血中トリグリセリド低下に対して、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物単独及びビフォドバクテリウム・ロンガム単独での有効性は認めなかった。しかるに、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を併用して投与した場合は、血中トリグリセリドに有意な著しい低下を認めた。
【００３７】
ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を併用することによって血中コレステロール低下作用を増強できること、及び血中グリセリドを著しく低下させることができることは、これまで全く報告のない新規なことであり大きな進歩である。
【００３８】
血中コレステロール低下作用の増強は、高脂血症の予防、治療、心筋梗塞と脳梗塞、脳卒中の原因である動脈硬化を予防、治療することにつながり非常に有用なことである。
【００３９】
血中トリグリセリド低下作用も高脂血症の予防、治療につながるだけでなく、抗肥満にもつながり非常に有用なことである。
【００４０】
血中コレステロール及び血中トリグリセリドに対する相乗的低下作用の作用機序は不明であるが、その新規性、進歩性、有用性は明らかである。
【００４１】
（３）良く知られているように乳酸菌は、便通・便秘・下痢の改善、消化・吸収の向上、腸内腐敗の防止、腸内細菌フローラの正常化、腸内の清浄などの機能を有している。一方、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物も、腹部膨満感（ガス膨張）、げっぷ、便秘、下痢などの消化器症状に対して優れた改善効果を有している。ユッカ抽出物、キラヤ抽出物はいずれも植物から抽出・精製されたサポニン類を主成分とする天然物であり、乳酸菌は微生物である。これらの全く異なる成分は作用機作も異なるため、それらを配合することにより、より広い範囲の消化器症状異常に対して優れた改善効果を期待できる。
【００４２】
（４）分泌された胆汁で再吸収されずに大腸に達した胆汁酸は、大腸内細菌によって発癌性物質として知られている二次胆汁酸に変換され大腸癌発生の危険を増大させる。ユッカ及びキラヤ抽出物は、コレステロール及び脂肪の吸収阻害物質であり、その主な作用メカニズムの一つは、胆汁酸とのミセル形成による再吸収阻害である。ミセル化された胆汁酸は、大腸内細菌の作用を受け難い状態ではあるが、より多くの胆汁酸が大腸内へ移行されてくるので、より確実に胆汁酸の二次胆汁酸への変換を抑制する手段を講じることは、食品としての安全性を完全なものとする上で望ましいことである。乳酸菌は、菌体内に胆汁酸を蓄積し菌体外に放出しない機能を持っている。菌体内胆汁酸は、大腸内細菌によって二次胆汁酸に変換されないので、結果として、大腸へ移行されて来るより多くの胆汁酸を含めて二次胆汁酸の生成が抑制されることになり、ユッカ及びキラヤ抽出物と乳酸菌との混合・配合は飲食品としてより理想的なものとなる。
【００４３】
（５）ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物は、脂肪の吸収を阻害することによるダイエット効果が期待できる（非特許文献４参照）。乳酸菌自体の整腸作用からもマイルドなダイエット効果が期待できる。更には、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌の相乗的血中トリグリセリド低下作用は、抗肥満効果の増強を示唆しており、従って、ユッカ及びキラヤ抽出物と乳酸菌との混合・配合により、より優れたダイエット効果が期待できる。
【００４４】
（６）試験例１及び表１に示したように、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物は、ビフィドバクテリウム・ロンガムなどのビフィドバクテリウムの増殖を著しく促進する作用を有することが明らかとなった。これは、これまで報告されていない新規なことである。このことは、本発明の骨子であるユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌との併用が非常に合理的なものであることを意味すると同時に、前項（１）、（２）、（３）、（４）及び（５）に述べた、本発明のいろいろな効果を効率的に発現する基盤を作ることを意味している重要なことである。
【発明を実施するための最良の形態・実施例】
【００４５】
本発明は、その構成要素としてユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を配合・混合し、更に各種の飲食品素材を配合して製造した飲食品及び飲食品素材が実施形態の原則である。
【００４６】
ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を構成要素とする飲食品及び飲食品素材は、これまでに報告例がなく新規な飲食品または飲食品素材である。
【００４７】
本発明に使用できる乳酸菌は、発酵用乳酸桿菌（例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ．ｊｕｇｕｒｔｉ）、発酵用乳酸球菌（例えば、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ．ｃｒｅｍｏｒｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｅａｃｅｔｉｌａｃｔｉｓ）、ロイコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、腸管系乳酸桿菌（例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｒｉｓｐａｔｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ｓｕｂｓｐ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、腸管系乳酸球菌（例えば、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、ビフィズス属（例えば、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆａｎｔｉｓ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、有胞子性乳酸菌（例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｏｒｏｇｅｎｅｓ）、植物性乳酸菌（例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ）及びその他のプロバイオティック乳酸菌（例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｕｓ ｒｅｕｔｅｒｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｉｌｇａｒｄｉｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｒａｌｉｍｅｎｔａｒｉｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｅｃｉｕｍ）などである。
【００４８】
これらの乳酸菌の１種または２種以上を混合・配合して用いることができる。
【００４９】
好ましい実施形態の一つは、ビフィズス属（例えば、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆａｎｔｉｓ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）の１種または２種以上を混合・配合して用いることである。
【００５０】
ビフィズス属以外の乳酸菌とビフィズス属の乳酸菌を混合・配合した製品も好ましい実施形態の一つである。
【００５１】
ヨーグルトは、ブルガリア菌、サーモフィラス菌、アシドフィラス菌、ビフィズス菌の１種または２種以上を用いて製造されるが、これらの乳酸菌も本発明に使用できる。
【００５２】
乳酸菌は、例えば、遠心分離及び濾過などによって集菌した湿潤状態で用いることもできるが、好ましい実施方法の一つは、凍結乾燥した菌体または凍結乾燥助剤などを用いて凍結乾燥した菌体を用いることである。
【００５３】
ヨーグルトも本発明の好ましい実施形態の一つである。
【００５４】
ヨーグルトにはいろいろな種類のものがあるが、大きくはプレーンタイプヨーグルト、ハードタイプヨーグルト、ソフトタイプヨーグルト、ドリンクタイプヨーグルト及びフローズンタイプヨーグルトに分けられる。
【００５５】
カスピ海ヨーグルト、ケフィアヨーグルトなどの一般的名称で呼称されるヨーグルトも好ましい実施形態の一つである。
【００５６】
ビフィドバクテリウム・ロンガムなどのビフィズス菌を含有するヨーグルトも好ましい実施形態の一つである。
【００５７】
カルピス、ヤクルト、発酵乳（酸乳）などの乳酸菌飲料も本発明の好ましい実施形態の一つである。
【００５８】
乳酸菌飲料、ヨーグルトなどには、天然果汁、コーヒー、カカオ、ミネラル、炭酸、アルコールなどの嗜好性食品素材を添加することもできる。
【００５９】
乳酸菌飲料、ヨーグルトなどには、健康食品に使用されている一般的な素材を添加・配合することができる。これらの素材の種類、添加量は、本発明による血中コレステロール低下作用、血中トリグリセリド低下作用などを阻害しなければ、特に制限されるものではなく、ビタミン類、アミノ酸類、有機酸類、ペプチド類、タンパク質類、オリゴ糖類、イソフラボン類、カテキン類、脂質類、ミネラル類、酵母エキス類、プロポリス類、クロレラ、スピルリナ、ハーブ類、野菜・果実・その他の天然物抽出物類、卵黄・卵白などの加工品類、補酵素類、酵素類、有用微生物（生菌及び死菌）、微生物由来品などの適量を使用することができる。
【００６０】
これらの乳酸菌飲料、ヨーグルトなどには、食品に添加することができる、着色剤、甘味料、香料、保存料、酸化防止剤、乳化剤、増粘剤、品質改良剤、調味料、酸味料、強化剤などを適宜、配合添加することができる。
【００６１】
ヨーグルト、乳酸菌飲料、乳酸菌による発酵豆乳などの溶液状の飲料とする場合には、乳または豆乳にユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物を添加・混合してから、１種または２種以上の乳酸菌を用いて、ヨーグルト、発酵豆乳を製造しても良いし、または、１種または２種以上の乳酸菌を用いて製造したヨーグルト、発酵豆乳などにユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物を添加・混合しても良い。
【００６２】
ヨーグルトの場合には、例えば、ストレプトコッカス・サーモフィラスとラクトバチルス・ブルガリカスでヨーグルトを製造し、それにビフィズス菌を添加・混合するのも好ましい実施形態の一つである。その場合、ｐＨが約５以上のヨーグルトとしてビフィズス菌を添加・混合するのも好ましい実施形態の一つである。
【００６３】
乳酸菌は、本発明の必須要件であるから、乳酸菌により発酵などの変化を受けたヨーグルト、酸乳などが本発明の対象であり、牛乳、バター、チーズ、ホエイなどの乳酸菌を含まない通常の乳製品は、本発明の対象ではない。
【００６４】
本発明の好ましい実施形態の一つは、錠剤、被覆された錠剤、カプセル、小包、散剤、粉末製品、溶液、懸濁液、乳剤、顆粒剤、シロップ、スティック、三方シールのような通常の形態で調製される。これらの実施形態を固形サプリメントと称する。
【００６５】
本発明で使用できるユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物は、既に開示されている組成物に代表される（特許文献１２及び非特許文献４参照）。
【００６６】
ドリンクなどの液状製品、ヨーグルトなどの半液状製品、固形サプリメントなどの固形状製品などの本発明の製品に使用されるユッカ抽出物とキラヤ抽出物の複合組成物は、固形分ベースで、それぞれの合計で０．０１〜９５重量％を含有させることができるが、０．１〜８０重量％が好ましい例である。
【００６７】
ユッカ抽出物とキラヤ抽出物の複合組成物は、９０：１０〜１０：９０で配合することができるが、８０：２０〜２０：８０が好ましい配合割合である。
【００６８】
エンテロコッカス・フェカリス（ストレプトコッカス・フェカリス）、ラクトバチルス・アシドフィラス、ラクトバチルス・ブルガリカスを使用する場合は、これらの生菌菌体を集め、乾燥した後、澱粉、乳糖、白糖、それらの混合物などの適当な賦形剤と混合した局外規ラクトミンの使用が好ましい形態の一つである。
【００６９】
ビフィドバクテリウムとしては、例えば、森永乳業株式会社製の森永ビフィズス菌末（ＢＢ５３６）や協和発酵株式会社製の耐酸性凍結乾燥ビフィズス菌末（ＦＤビフィズスＡＴＫ）などを用いることができる。
【００７０】
有胞子性乳酸菌（ラクトバチルス・スポロゲネス；バチルス・コアグランス）としては、ラクボン原末が繁用できる。ラクボン原末は、通常、５×１０９〜１２×１０１２個／ｇの菌数を含有する粉末が使用できる。
【００７１】
有胞子性乳酸菌の成育を促進させるため、タカジアスターゼ、ビオチン（ビタミンＨ）あるいは両者を併用して使用することも好まれる実施形態である。
【００７２】
その好ましい配合例としては、有胞子性乳酸菌の５×１０９〜１２×１０１２個に対し、タカジアスターゼＮ１が約３ｇ、ビオチンが約０．４ｍｇを挙げることができる。
【００７３】
本発明の固形サプリメントには、健康食品に使用されている一般的な素材を添加・配合することができる。これらの素材の種類、添加量は、本発明による血中コレステロール低下作用、血中トリグリセリド低下作用などを阻害しなければ、特に制限されるものではなく、ビタミン類、アミノ酸類、有機酸類、ペプチド類、タンパク質類、オリゴ糖類、イソフラボン類、カテキン類、脂質類、ミネラル類、酵母エキス類、プロポリス類、クロレラ、スピルリナ、ハーブ類、野菜・果実・その他の天然物抽出物類、卵黄・卵白などの加工品類、補酵素類、酵素類、有用微生物（生菌及び死菌）、微生物由来品などの適量を使用することができる。
【００７４】
更なる成分として、一般に使用される通常の賦形剤などを添加することができる。
【００７５】
賦形剤などの添加量は、通常０〜９０％であるが、１〜８０％が好ましい添加量である。
【００７６】
これらの固形サプリメントには、医薬品や食品に添加することができる、着色剤、甘味料、香料、保存料、酸化防止剤、乳化剤、増粘剤、品質改良剤、調味料、酸味料、強化剤などを適宜、配合添加することができる。
【００７７】
また、例えば、賦形剤（例えば、澱粉、乳糖、微結晶セルロース、セルロース、リン酸水素カルシウム、砂糖）、分散または結合剤（例えば、炭酸カルシウム、二酸化ケイ素、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、酸化チタン）、乳化剤（例えば、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、レシチン、アルキルスルホネート、アリールスルホネート）、潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、ラウリルスルホン酸ナトリウム、なたね油脂末）、その他の補助剤（例えば、水、パラフィン、ピーナッツオイルやごま油などの植物油、エタノールやグリセリンなどのアルコール、プロピレングリコールやポリエチレングリコールなどのグリコール）などを添加することによって通常の手段で製造することができる。
【００７８】
以上のように説明した固形サプリメント、ヨーグルト、乳酸菌飲料において、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物及び乳酸菌を同時に配合した製品例、報告はこれまでになく本発明の固形サプリメント、ヨーグルト、乳酸菌飲料は新規な製品である。
【００７９】
以下に、実施例及び試験例を挙げて本発明を詳細に説明する。
【実施例１】
【００８０】
ユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（３５０ｇ）と乳糖（３３０ｇ）を良く混合し、この混合物をパウレック社の流動層造粒機（ＳＴＥＲＡ−１型）を用いて、送入空気圧は２ｋｇ／ｃｍ２、水をスプレーして造粒した。スプレーは、流速５ｍｌ／分、圧力０．８〜０．８５ｋｇ／ｃｍ２で１５分間実施した。約８０℃の吸気温度で約８分間乾燥させた後、５０μｍの目開きの篩を通過させ、整粒工程を行ない顆粒状とした。これにビフィズス菌末（６ｇ）、ラクトミン（フェカリス菌）、ラクトミン（アシドフィルス菌）及びステアリン酸マグネシウム（４ｇ）を混合し、畑鉄工所製打錠機（ＡＰ２２ＳＳ−Ｕ）を使用して、常法通り、１錠（２１０ｍｇ）の錠剤を打錠した。
【実施例２】
【００８１】
ユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（６００ｇ）と乳糖（４００ｇ）を良く混合し、実施例１と同様にして顆粒を製造した。この顆粒にビフィドバクテリウム・ロンガム菌散（２４ｇ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム菌散（２４ｇ）、ラクトバチルス・アシドフィルス菌散（２４ｇ）、コーンスターチ（１２２ｇ）とステアリン酸マグネシウム（６ｇ）を混合し、畑鉄工所製打錠機（ＡＰ２２ＳＳ−Ｕ）を使用して、常法通り、１錠（３００ｍｇ）の錠剤を打錠した。
【実施例３】
【００８２】
ユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（３００ｇ）、カテキンエキス末（３００ｇ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム菌散（２４ｇ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム菌散（２４ｇ）、ラクトバチルス・アシドフィルス菌散（２４ｇ）、乳糖（１８８ｇ）、デキストリン（１００ｇ）、セルロース（１８０ｇ）、グリセリン脂肪酸エステル（３６ｇ）、二酸化ケイ素（２４ｇ）を混合し、畑鉄工所製打錠機（ＡＰ２２ＳＳ−Ｕ）を使用して、常法通り、１錠（３００ｍｇ）の錠剤を打錠した。
【実施例４】
【００８３】
ユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（４００ｇ）、カテキンエキス末（４５０ｇ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム菌散（２４ｇ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム菌散（２４ｇ）、ラクトバチルス・アシドフィルス菌散（２４ｇ）、フェヌグワーク胚乳粉末（９６ｇ）、乳糖（１０７ｇ）、デキストリン（１５０ｇ）、セルロース（１５０ｇ）、グリセリン脂肪酸エステル（７５ｇ）、を混合し、畑鉄下所製打錠機（ＡＰ２２ＳＳ−Ｕ）を使用して、常法通り、１錠（３００ｍｇ）の錠剤を打錠した。
【実施例５】
【００８４】
１日分（１．５ｇ）の組成が、ユッカ抽出物（６０％）とキラヤ抽出物（４０％）から成る複合組成物（７００ｍｇ）、ラクボン（有胞子性乳酸菌）（１０ｍｇ）、ラクトミン（アシドフィルス菌）（１８ｍｇ）、耐酸性凍結乾燥ビフィズス菌末（ＦＤビフィズスＡＴＫ）（１８ｍｇ）、天然オリゴ糖ラフィノース（１７０ｍｇ）、ビオチン（２μｇ）、乳糖（２３４ｍｇ）とバレイショデンプン（３５０ｍｇ）となるように、これらの各成分を加えて均一に混合し散剤を製造した。
【実施例６】
【００８５】
１日分（３ｇ；１包が１．５ｇのスティック状栄養健康食品）の組成が、ユッカ抽出物（７０％）とキラヤ抽出物（３０％）から成る複合組成物（３５０ｍｇ）、ラクボン（有胞子性乳酸菌）（５ｍｇ）、ラクトミン（アシドフィルス菌）（１０ｍｇ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム菌散（１０ｍｇ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム菌散（１０ｍｇ）、ビオチン（１μｇ）、タカジアスターゼＮ１（１０ｍｇ）、フラクトオリゴ糖（１００ｍｇ）、ビタミンＣ（６２．５ｍｇ）、クエン酸（６２．５ｍｇ）、グラニュー糖（４００ｍｇ）、コーンスターチ（２４０ｍｇ）と乳糖（２４０ｍｇ）となるように、これらの各成分を加えて均一に混合した。１袋１．５ｇのスティック状製品とした。
【実施例７】
【００８６】
ラクトミン（アシドフィルス菌）をヨーグルトミックス（生乳に脱脂乳を２％となるように添加し、１００℃で１５分加熱）に接種し、２０℃で２４時間培養した。調製ヨーグルト１５０ｇに対し、ユッカ抽出物（３０％）とキラヤ抽出物（７０％）から成る複合組成物（７５０ｍｇ）、フラクトオリゴ糖（２００ｍｇ）、ラクボン（有胞子性乳酸菌）（１０ｍｇ）、耐酸性凍結乾燥ビフィズス菌末（ＦＤビフィズスＡＴＫ）（１０ｍｇ）、ビオチン（１μｇ）を添加・混合して、紙コップに充填し冷却して製品とした。
【実施例８】
【００８７】
脱脂乳を８０〜８５℃で２０〜３０分間殺菌した後、ホモゲナイズした。これにラクトミン（アシドフィルス菌）を接種して、３７〜４０℃で２０時間発酵させた。生じたカードを砕きながら、５℃に冷却し、これを発酵乳とした。別に砂糖（２０％）、ユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（０．６％）、ラクボン（有胞子性乳酸菌）（０．０４％）、耐酸性凍結乾燥ビフィズス菌末（ＦＤビフィズスＡＴＫ）（０．０４％）、ラクトミン（アシドフィルス菌）（０．０４％）、ビオチン（２μｇ）、フラクトオリゴ糖（０．６％）、適量の酸味料、香料を添加しホモゲナイズし、５℃に冷却し、糖液とした。このようにして得られた発酵乳と糖液を等量混合して乳酸菌飲料とした。
【実施例９】
【００８８】
象印製「ヨーグルトメーカー」の容器を充分に洗浄し、熱湯消毒した後、牛乳（５００ｍｌ）を加え、別にユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（１ｇ）を５ｍｌの水に溶かし、約９５℃に１５分加熱殺菌した水溶液を添加した。更に、カスピ海ヨーグルトの粉末種菌（食の安全と健康ネットワークで販売）を大さじで３杯添加した。熱湯消毒したスプーンで混合した後、２７℃で１５時間静置して製造した。
【実施例１０】
【００８９】
ヤクルト（６５ｍｌ）を冷蔵庫から出し室温に放置し室温に近づけた。約半分のリンゴをすり下ろして、さらしの布で絞り、リンゴ果汁を調製した。別に、スキムミルク（６０ｇ）に砂糖（２０ｇ）を加えて充分に混合しておいた。リンゴ果汁に水を加えて合わせて５００ｍｌとし、これにスキムミルクと砂糖を混合したもの、及びユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（９００ｍｇ）を軽く混ぜながら加え溶解した。加熱沸騰させ、沸騰後、弱火にして１０分加熱殺菌した。沸騰液を水を張ったボールなどに入れて約３５℃まで急冷し、保温水筒中へ移した。ヤクルト（ラクトバチルス・カゼイ・シロタ株を含む）（６５ｍｌ）を加えて、部屋の暖かなところで約１０時間発酵させて製造した。
【試験例１】
【００９０】
乳酸菌用のＭＲＳ培地（日本ベクトン・ディッキンソン株式会社製）５．２ｇを水９０ｍｌに溶解し、試験管（９ｍｌ）６本に分注し、１２１℃で１５分間滅菌した。１本には水１ｍｌを加えて対象とした。別にユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の１％、３％、６％、１２％、２０％水溶液３ｍｌを調製し、０．２２μｍフィルターで無菌濾過した。このユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の水溶液（１ｍｌ）を他の５本の試験管に加え、０．１％、０．３％、０．６％、１．２％、２％のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物含有培地を調製した。これらの試験管に、別に、注１のようにして培養したビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）の菌液の１００μｌを接種した。各試験管の２００μｌをとり、その１００μｌを用い乳酸菌数（ビフィドバクテリウム・ロンガム）を測定し、その平均値を培養前の乳酸菌数とした（注２参照）。残りの１００μｌを用いてｐＨを測定した。更に、３７℃で一定時間嫌気培養後、その２００μｌをとり１００μｌを用いて乳酸菌数、残りの１００μｌを用いて、経時的にｐＨ、生菌数を測定した。乳酸菌数は、培養液の１００μｌをとり嫌気性希釈液（注３参照）で１０−５〜１０−８に希釈した液の１００μｌをＢＬ寒天（ニッスイ株式会社製）の平板上でコーンラージュを用いて塗布し、３７℃で７２時間嫌気培養後、生育したコロニー数を数えた。１検体当たり３枚のＢＬ寒天平板上の乳酸菌生菌数を数え、それらの平均値を乳酸菌数として算出した。結果を表１に示した。
注１：乳酸菌用のＭＲＳ培地５．２ｇを水１００ｍｌに溶解した溶液１０ｍｌを１２１℃で１５分で滅菌した。スキムミルク（１０％）とグルタミン酸ナトリウム（１％）から成る水溶液中で凍結保存（−８０℃）されているビフィドバクテリウム・ロンガムをＢＬ２寒天培地上で画線嫌気培養して生じたコロニーの１白金耳を接種し３７℃で１８時間嫌気培養した。
注２：この実験での培養前の乳酸菌数は１．８×１０７個／ｍｌ、ｐＨは６．６であった。
注３：嫌気性希釈液：１リッターの水に、リン酸１カリウム（４．５ｇ）、リン酸２ナトリウム（６．０ｇ）、寒天（０．５ｇ）ツイン８０（０．５ｇ）、システイン塩酸塩（０．５ｇ）を溶解し、ｐＨを７．０に調整した。
【００９１】
【００９２】
表１からユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物がビフィドバクテイルム・ロンガムの著しく増殖を促進することは明らかである。また、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物を添加していない時、培養３時間後の生菌数が減少しているが、これはＭＲＳ培地がビフィドバクテリウム・ロンガムにとっては、増殖に適した培地ではないので対数増殖期に移行する前の誘導期において、増殖が活発でない状態での生菌数測定のバラツキによるものと考えられる。ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物を添加した場合は、０．１％〜０．６％添加でも３時間後の生菌数の減少は殆ど見られず、１．２％〜２．０％添加では増殖していることが確認できた。このことも、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物がビフィドバクテリウム菌の増殖にとって適した組成物であることを意味している。ユッカ及びキラヤ抽出物１．２％、２．０％添加では、培養２４時間で生菌数の減少が見られるが、これは、ユッカ及びキラヤ抽出物の増殖促進効果が大きいため増殖速度が速くなり、２４時間後では一部のビフィドバクテリウム・ロンガムが死滅期に入っていることによると考えられる。
【試験例２】
【００９３】
ＣＬ２飼料（日本クレア株式会社製）で飼育した５週齢のＢＡＬＢ／Ｃ無菌マウス３０匹を用い、無菌マウス群とビフィドバクテリウム・ロンガム定着マウス群の２群（各群１５匹）に分けた。ビフィドバクテリウム・ロンガム定着マウス群は、次のようにして作出した。５週間飼育した時点で、注１のようにして調製したビフィドバクテリウム・ロンガムの菌液の０．５ｍｌを１回だけ経口投与した。この投与でビフィドバクテリウム・ロンガムは無菌マウスに定着した。ビフィドバクテリウム・ロンガムの定着の確認は、注２のようにして行なった。更に１週間ＣＬ２飼料で飼育して計６週間飼育した。その後、放射線殺菌したコレステロール飼料（注３参照）で飼育し、同時にユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の投与も開始した。ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の投与は、０．５％および１．０％濃度で飲料水に溶かしてマウスが自由に飲むようにして与えた。対照群（無菌マウス群）は、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の非投与群、０．５％のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物投与群、１．０％のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物投与群の３群（各群５匹）に分けた。ビフィドバクテリウム・ロンガム定着群もユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の非投与群、０．５％のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物投与群、１．０％のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物投与群の３群（各群５匹）に分けた。コレステロール食で４週間飼育し、この間、ＹＱ２は飲料水より自由摂取で与えた。コレステロール食での飼育後、４週目にて血中トリグリセリド、血中総コレステロールを測定した。その結果、ユッカ及びキラヤ抽出物組成物の無添加群の群間比較で、無菌マウス群とビフィドバクテリウム・ロンガム定着群において、血中トリグリセリド及び血中コレステロールは、有意差を認めなかった。即ち、ビフィドバクテリウム・ロンガム単独での有効性は認めなかった。しかるに、ビフィドバクテリウム・ロンガム定着群において、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物を併用して投与した場合は、ユッカ及びキラヤ抽出物組成物の無添加に対して、且つ、無菌マウス群に対して、ｐ＜０．０１で統計的に有意差があった。結果を表２に示した。表２では、初期値からの血中トリグリセリド、血中コレステロールの低下率で表した。
注１：乳酸菌用のＭＲＳ培地５．２ｇを水１００ｍｌに溶解した溶液１０ｍｌを１２１℃で１５分で滅菌した。これにビフィドバクテリウム・ロンガムを摂取し、３７℃で１８時間嫌気培養した。
注２：ビフィドバクテリウム・ロンガム投与後、１週、２週、４週後の糞便中のビフィドバクテリウム・ロンガムの測定を行ない確認した。
注３：マウスのコレステロール飼料の組成は、コーンスターチ（５０．４４８６％）、ミルクカゼイン（２０．０％）、アルファ化コーンスターチ（１．０％）、グラニュー糖（１０．０％）、精製ラード（７．０％）、アビセルセルロース（５．０％）、ミネラル混合（ＡＩＮ−９３Ｇ−ＭＸ；３．５％）、ビタミン混合（ＡＩＮ−９３ＶＸ；１．０％）、Ｌ−シスチン（０．３％）、重酒石酸コリン（０．２５％）、第３ブチルヒドロキノン（０．００１４％）、コレステロール（１．０％）、コール酸ナトリウム（０．５％）
【００９４】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物を混合・配合した複合組成物（以下、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と称する。）と乳酸菌を混合・配合した複合組成物（以下、ユッカ、キラヤ及び乳酸菌の複合組成物と称する。）を含有する飲食品及びその製造法に関する。
【背景技術】
【０００２】
良く知られている通り、乳酸菌とは、乳糖やブドウ糖などの糖を利用して増殖し、その過程で多量の乳酸を産生する菌（ホモ型乳酸発酵菌）または乳酸、アルコール及び炭酸ガスなどを産生する菌（ヘテロ型乳酸発酵菌）であり、更には乳酸と酢酸などを産生するビフィズス菌も含まれる。
【０００３】
乳酸菌は、発酵乳用乳酸菌と腸管系乳酸菌に分類される。発酵乳用乳酸菌は、乳酸桿菌属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ．ｊｕｇｕｒｔｉなど）、乳酸球菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ．Ｌａｃｔｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ．Ｃｒｅｍｏｒｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｅａｃｅｔｉｌａｃｔｉｓなど）とロイコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓなど）に分類される。
【０００４】
腸管系乳酸菌は、乳酸桿菌属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｒｉｓｐａｔｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ｓｕｂｓｐ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓなど）、乳酸球菌属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍなど）とビフィズス属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆａｎｔｉｓ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓなど）に分類される。
【０００５】
乳酸菌には、バチルス・コアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、ラクトバチルス・スポロゲネス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｏｒｏｇｅｎｅｓ）のような有胞子性乳酸菌も含まれる。
【０００６】
ヨーグルトは、ブルガリア菌、サーモフィラス菌、アシドフィラス菌、ビフィズス菌の１種または２種以上によって製造される。
【０００７】
便通・便秘・下痢の改善、消化・吸収の向上、腸内腐敗の防止、腸内細菌フローラの正常化、腸内の清浄、免疫機能の亢進などが、乳酸菌の一般的機能として知られている。
【０００８】
乳酸菌による血中コレステロール低下作用及び食品中コレステロール低減方法も知られている。例えば、ラクトコッカスに属する乳酸菌を用いた飲食品（特許文献１参照）、凍結乾燥乳酸菌を用いた組成物（特許文献２参照）、胆汁酸脱抱合作用を示さない新規なラクトバチルス乳酸菌を用いる方法（特許文献３参照）、乳酸菌による発酵豆乳（特許文献４参照）、カビ培養物、酵母、乳酸菌培養物を配合した組成物及び食品（特許文献５参照）、エンテロコッカス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）属の乳酸菌の産生する抱合胆汁酸脱抱合酵素を用いる方法（特許文献６参照）、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属乳酸菌の乳清蛋白質培養物とストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）の乳清蛋白質培養物の混合物を用いた食品（特許文献７参照）、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシス・ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ）を用いた食品中コレステロール低減方法（特許文献８参照）、乳酸菌による発酵豆乳（特許文献９参照）、ラクトバチルス・プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・ヒルガルディ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｉｌｇａｒｄｉｉ）、ラクトバチルス・パラアリメンタリウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｒａｌｉｍｅｎｔａｒｉｕｓ）を用いた食品（特許文献１０参照）及びラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ）を用いた飲食物（特許文献１１参照）、有胞子性乳酸菌による方法（非特許文献１参照）などである。
【０００９】
【特許文献１】特開平５−６５２２９
【特許文献２】特開平６−５６６８０
【特許文献３】特開平７−２５０６７０
【特許文献４】特開平１０−２２９８４１
【特許文献５】特開平１０−２９８０８３
【特許文献６】特開２０００−１６６５４８
【特許文献７】特開２０００−１９７４６９
【特許文献８】特開２００２−６５２０３
【特許文献９】特開２００３−８１８５５
【特許文献１０】特開２００３−２３５５０１
【特許文献１１】特開２００３−３０６４３６
【非特許文献１】Ｊ．Ｃ．Ｍｏｈａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｄｉａｎ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．９５，ｐｐ．４３１−４３２，１９９０
【００１０】
また、乳酸菌の血中コレステロール低下作用、血中トリグリセリド低下作用について多くの基礎研究、臨床試験が実施されてきた。特に、１９９０年以後に実施され学術論文として報告された１１報のヒト臨床試験の結果を中心としたレビューが発表された（非特許文献２参照）。
【００１１】
【非特許文献２】肖 金忠、医学のあゆみ、２０７巻、８３５−８４０、２００３
【００１２】
これらの１１報の学術論文に関する総合的判断では、乳酸菌が血中コレステロールを低下させる成績と低下させない成績のいずれもあり、どちらとも断言することはできないと云うのが結論であった。いずれにせよ、乳酸菌による血中コレステロール低下作用は不十分であり、満足できるものではないことは明らかである。
【００１３】
また、これらの１１報の全てで血中トリグリセリドを低下させた成績は得られなかった。即ち、乳酸菌は血中トリグリセリド低下に関して無効であると結論することができると考えられる。
【００１４】
ユッカ抽出物は、ユリ科のユッカ・シディゲラ（Ｙｕｃｃａ ｓｃｈｉｄｉｇｅｒａ）の根茎より水または含水アルコールで抽出して得られた抽出物である。キラヤ抽出物は、バラ科のキラヤ・サポナリア（Ｑｕｉｌｌａｊａ ｓａｐｏｎａｌｉａ）の樹皮より水または含水アルコールで抽出して得られた抽出物である。
【００１５】
ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物は、天然物由来の食品添加物として、日本、米国などで承認を得ており、特に飲料、化粧品などの乳化剤、起泡剤などとして汎用されている。
【００１６】
ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物は、固有の香り、味、色があり、そのままでも食品素材として使用できるが、好ましくは、更に精製した製品、場合によっては高度に精製した製品が望まれる。
【００１７】
ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物に関して、それぞれ単独の抽出物が、いずれも血中コレステロール低下作用を有することが報告されている（非特許文献３参照）。
【００１８】
ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物は、ヒト血中総コレステロール低下作用、ヒト血中ＬＤＬコレステロール低下作用及び消化管機能改善作用に対してユッカ抽出物とキラヤ抽出物は相乗的に有効性を発揮し、ユッカ抽出物単独、キラヤ抽出物単独の場合よりも格段に優れた有効性を示すこと、及び、ユッカ抽出物とキラヤ抽出物の配合割合を９６：４〜６５：３５等といろいろと変化させた例、更には、優れたヒト血中コレステロール低下作用を有する混合割合の代表例は、キラヤ抽出物が６０％でユッカ抽出物が４０％の混合物であることなどが既に開示されている（特許文献１２及び非特許文献４参照）。
【００１９】
特許文献１２及び非特許文献４によれば、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の血中トリグリセリド低下作用は認められなかった。
【００２０】
また、ユッカ及びキラヤ抽出物の組成物を含有する飲食品の形体としては、溶液状の飲料形体及び固形状の食品形体が知られている。（特許文献１２及び１３参照）。
【００２１】
【非特許文献３】Ｊ．Ｍｉｌｇａｔｅ ａｎｄ Ｄ．Ｃ．Ｋ．Ｒｏｂｅｒｔｓ，Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．１５， Ｎｏ．８，ｐｐ．１２２３−１２４９，１９９５
【非特許文献４】Ｓ．Ｗ．Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ，Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．２６，Ｎｏ．１２，ｐｐ．１０４２−１０４６，２００３
【特許文献１２】ＰＣＴ／ＫＲ０１／００２９９
【特許文献１３】特願２００３−３９４７３８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２２】
乳酸菌を使用した血中コレステロール低下能を有する機能性飲食品で、これまでに知られている飲食品の血中コレステロール低下作用は強いものではなく、甚だ不充分なものであった。そのため、乳酸菌の血中コレステロール低下作用を増強し、しかも全く安全で飲食品として用いることができる新しい組成物の開発が強く求められていた。
【００２３】
また、ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物の複合組成物においても、その価格は安価なものではないため、より少ない摂食量でも充分な血中コレステロール低下作用を持たせることが求められていた。そのため、ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物の複合組成物の血中コレステロール低下作用を増強し、しかも全く安全で飲食品として用いることができる新しい組成物の開発が強く求められていた。
【００２４】
これまでの多くのヒト臨床試験の結果では、乳酸菌が血中トリグリセリド低下作用を有することは認められていない。従って、乳酸菌と併用することによって血中トリグリセリド低下作用を発揮させることができ、しかも全く安全で飲食品として用いることができる新しい組成物の開発が強く求められていた。
【００２５】
これまでのヒト臨床試験の結果では、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物が血中トリグリセリド低下作用を有することは認められていない。従って、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と併用することによって血中トリグリセリド低下作用を発揮させることができ、しかも全く安全で飲食品として用いることができる新しい組成物の開発が強く求められていた。
【００２６】
そこで本発明が解決しようとする課題は、ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を混合・配合することにより、それぞれの血中コレステロール低下作用を増強し、より効率的に血中コレステロールを低下させること、更には、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物も乳酸菌も単独では血中トリグリセリド低下効果を有さないが、ユッカ抽出物及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を混合・配合することにより血中トリグリセリド低下効果を有するようにすること、しかも全く安全な新しい複合組成物を含有する飲食品及び飲食品素材を提供することにある。
【００２７】
本発明の課題の飲食品は、ユッカ、キラヤ及び乳酸菌の複合組成物を構成要素とするが、この構成要素以外に混合・配合する飲食品素材を限定するものではない。即ち、一般的な食品素材を広く混合・配合することができる。このようにして得られた飲食品は、ユッカ、キラヤ及び乳酸菌の複合組成物を構成要素として含有している。即ち、ユッカ、キラヤ及び乳酸菌の複合組成物は飲食品素材の一つであり、従って本発明の課題は飲食品及び飲食品素材を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００２８】
本発明者らは、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の血中コレステロール低下作用を増強することができる飲食品素材及び血中トリグリセリド低下作用を発揮させることができる飲食品素材について鋭意検討を進めた結果、乳酸菌がそのような作用を有することを見出し本発明を完成した。
【００２９】
即ち、課題を解決する手段は、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を併用することである。そのことによって、血中コレステロールをより効率的に低下させることができること及びユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物または乳酸菌のそれぞれ単独では血中トリグリセリドを低下させないが、これらを併用することによって血中トリグリセリドを低下させることができる。更には、ユッカ抽出物、キラヤ抽出物及び乳酸菌のいずれも全く安全な飲食品素材であり、これらを含有する飲食品は理想的な飲食品として期待できる。
【発明の効果】
【００３０】
本発明のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を混合・配合した複合組成物を含有する飲食品または飲食品素材は、従来のユッカ及びキラヤ抽出物を含有する飲食品または飲食品素材、乳酸菌を含有する飲食品または飲食品素材に比して、次の効果を有する。
【００３１】
（１）ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌は、併用することによって、それぞれ単独に使用した場合よりも、血中コレステロールをより効率的に低下させ、且つ、ユッカ抽出物、キラヤ抽出物及び乳酸菌のいずれも全く安全な飲食品素材であり、これらを含有する製品は理想的な飲食品または飲食品素材とすることができる。
【００３２】
このユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌の相乗的血中コレステロール低下作用は、試験例２及び表２によって証せられる。
【００３３】
即ち、試験例２及び表２に示したように血中コレステロール低下に対して、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物単独及びビフォドバクテリウム・ロンガム単独での有効性は認めなかった。しかるに、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を併用して投与した場合は、血中コレステロールに有意な著しい低下を認めた。
【００３４】
（２）ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物または乳酸菌のそれぞれ単独では血中トリグリセリドを低下させないが、これらを併用することによって血中トリグリセリドを低下させる飲食品または飲食品素材とすることができる。
【００３５】
このユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌の相乗的血中トリグリセリド低下作用は、試験例２及び表２によって証せられる。
【００３６】
即ち、試験例２及び表２に示したように血中トリグリセリド低下に対して、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物単独及びビフォドバクテリウム・ロンガム単独での有効性は認めなかった。しかるに、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を併用して投与した場合は、血中トリグリセリドに有意な著しい低下を認めた。
【００３７】
ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を併用することによって血中コレステロール低下作用を増強できること、及び血中グリセリドを著しく低下させることができることは、これまで全く報告のない新規なことであり大きな進歩である。
【００３８】
血中コレステロール低下作用の増強は、高脂血症の予防、治療、心筋梗塞と脳梗塞、脳卒中の原因である動脈硬化を予防、治療することにつながり非常に有用なことである。
【００３９】
血中トリグリセリド低下作用も高脂血症の予防、治療につながるだけでなく、抗肥満にもつながり非常に有用なことである。
【００４０】
血中コレステロール及び血中トリグリセリドに対する相乗的低下作用の作用機序は不明であるが、その新規性、進歩性、有用性は明らかである。
【００４１】
（３）良く知られているように乳酸菌は、便通・便秘・下痢の改善、消化・吸収の向上、腸内腐敗の防止、腸内細菌フローラの正常化、腸内の清浄などの機能を有している。一方、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物も、腹部膨満感（ガス膨張）、げっぷ、便秘、下痢などの消化器症状に対して優れた改善効果を有している。ユッカ抽出物、キラヤ抽出物はいずれも植物から抽出・精製されたサポニン類を主成分とする天然物であり、乳酸菌は微生物である。これらの全く異なる成分は作用機作も異なるため、それらを配合することにより、より広い範囲の消化器症状異常に対して優れた改善効果を期待できる。
【００４２】
（４）分泌された胆汁で再吸収されずに大腸に達した胆汁酸は、大腸内細菌によって発癌性物質として知られている二次胆汁酸に変換され大腸癌発生の危険を増大させる。ユッカ及びキラヤ抽出物は、コレステロール及び脂肪の吸収阻害物質であり、その主な作用メカニズムの一つは、胆汁酸とのミセル形成による再吸収阻害である。ミセル化された胆汁酸は、大腸内細菌の作用を受け難い状態ではあるが、より多くの胆汁酸が大腸内へ移行されてくるので、より確実に胆汁酸の二次胆汁酸への変換を抑制する手段を講じることは、食品としての安全性を完全なものとする上で望ましいことである。乳酸菌は、菌体内に胆汁酸を蓄積し菌体外に放出しない機能を持っている。菌体内胆汁酸は、大腸内細菌によって二次胆汁酸に変換されないので、結果として、大腸へ移行されて来るより多くの胆汁酸を含めて二次胆汁酸の生成が抑制されることになり、ユッカ及びキラヤ抽出物と乳酸菌との混合・配合は飲食品としてより理想的なものとなる。
【００４３】
（５）ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物は、脂肪の吸収を阻害することによるダイエット効果が期待できる（非特許文献４参照）。乳酸菌自体の整腸作用からもマイルドなダイエット効果が期待できる。更には、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌の相乗的血中トリグリセリド低下作用は、抗肥満効果の増強を示唆しており、従って、ユッカ及びキラヤ抽出物と乳酸菌との混合・配合により、より優れたダイエット効果が期待できる。
【００４４】
（６）試験例１及び表１に示したように、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物は、ビフィドバクテリウム・ロンガムなどのビフィドバクテリウムの増殖を著しく促進する作用を有することが明らかとなった。これは、これまで報告されていない新規なことである。このことは、本発明の骨子であるユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌との併用が非常に合理的なものであることを意味すると同時に、前項（１）、（２）、（３）、（４）及び（５）に述べた、本発明のいろいろな効果を効率的に発現する基盤を作ることを意味している重要なことである。
【発明を実施するための最良の形態・実施例】
【００４５】
本発明は、その構成要素としてユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を配合・混合し、更に各種の飲食品素材を配合して製造した飲食品及び飲食品素材が実施形態の原則である。
【００４６】
ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物と乳酸菌を構成要素とする飲食品及び飲食品素材は、これまでに報告例がなく新規な飲食品または飲食品素材である。
【００４７】
本発明に使用できる乳酸菌は、発酵用乳酸桿菌（例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ ｓｕｂｓｐ．ｊｕｇｕｒｔｉ）、発酵用乳酸球菌（例えば、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ．ｌａｃｔｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ｓｕｂｓｐ．ｃｒｅｍｏｒｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｄｅａｃｅｔｉｌａｃｔｉｓ）、ロイコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、腸管系乳酸桿菌（例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｒｉｓｐａｔｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ ｓｕｂｓｐ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、腸管系乳酸球菌（例えば、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、ビフィズス属（例えば、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆａｎｔｉｓ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、有胞子性乳酸菌（例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｏｒｏｇｅｎｅｓ）、植物性乳酸菌（例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ）及びその他のプロバイオティック乳酸菌（例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｕｓ ｒｅｕｔｅｒｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈａｍｎｏｓｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｈｉｌｇａｒｄｉｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｒａｌｉｍｅｎｔａｒｉｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｅｃｉｕｍ）などである。
【００４８】
これらの乳酸菌の１種または２種以上を混合・配合して用いることができる。
【００４９】
好ましい実施形態の一つは、ビフィズス属（例えば、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆａｎｔｉｓ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）の１種または２種以上を混合・配合して用いることである。
【００５０】
ビフィズス属以外の乳酸菌とビフィズス属の乳酸菌を混合・配合した製品も好ましい実施形態の一つである。
【００５１】
ヨーグルトは、ブルガリア菌、サーモフィラス菌、アシドフィラス菌、ビフィズス菌の１種または２種以上を用いて製造されるが、これらの乳酸菌も本発明に使用できる。
【００５２】
乳酸菌は、例えば、遠心分離及び濾過などによって集菌した湿潤状態で用いることもできるが、好ましい実施方法の一つは、凍結乾燥した菌体または凍結乾燥助剤などを用いて凍結乾燥した菌体を用いることである。
【００５３】
ヨーグルトも本発明の好ましい実施形態の一つである。
【００５４】
ヨーグルトにはいろいろな種類のものがあるが、大きくはプレーンタイプヨーグルト、ハードタイプヨーグルト、ソフトタイプヨーグルト、ドリンクタイプヨーグルト及びフローズンタイプヨーグルトに分けられる。
【００５５】
カスピ海ヨーグルト、ケフィアヨーグルトなどの一般的名称で呼称されるヨーグルトも好ましい実施形態の一つである。
【００５６】
ビフィドバクテリウム・ロンガムなどのビフィズス菌を含有するヨーグルトも好ましい実施形態の一つである。
【００５７】
カルピス、ヤクルト、発酵乳（酸乳）などの乳酸菌飲料も本発明の好ましい実施形態の一つである。
【００５８】
乳酸菌飲料、ヨーグルトなどには、天然果汁、コーヒー、カカオ、ミネラル、炭酸、アルコールなどの嗜好性食品素材を添加することもできる。
【００５９】
乳酸菌飲料、ヨーグルトなどには、健康食品に使用されている一般的な素材を添加・配合することができる。これらの素材の種類、添加量は、本発明による血中コレステロール低下作用、血中トリグリセリド低下作用などを阻害しなければ、特に制限されるものではなく、ビタミン類、アミノ酸類、有機酸類、ペプチド類、タンパク質類、オリゴ糖類、イソフラボン類、カテキン類、脂質類、ミネラル類、酵母エキス類、プロポリス類、クロレラ、スピルリナ、ハーブ類、野菜・果実・その他の天然物抽出物類、卵黄・卵白などの加工品類、補酵素類、酵素類、有用微生物（生菌及び死菌）、微生物由来品などの適量を使用することができる。
【００６０】
これらの乳酸菌飲料、ヨーグルトなどには、食品に添加することができる、着色剤、甘味料、香料、保存料、酸化防止剤、乳化剤、増粘剤、品質改良剤、調味料、酸味料、強化剤などを適宜、配合添加することができる。
【００６１】
ヨーグルト、乳酸菌飲料、乳酸菌による発酵豆乳などの溶液状の飲料とする場合には、乳または豆乳にユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物を添加・混合してから、１種または２種以上の乳酸菌を用いて、ヨーグルト、発酵豆乳を製造しても良いし、または、１種または２種以上の乳酸菌を用いて製造したヨーグルト、発酵豆乳などにユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物を添加・混合しても良い。
【００６２】
ヨーグルトの場合には、例えば、ストレプトコッカス・サーモフィラスとラクトバチルス・ブルガリカスでヨーグルトを製造し、それにビフィズス菌を添加・混合するのも好ましい実施形態の一つである。その場合、ｐＨが約５以上のヨーグルトとしてビフィズス菌を添加・混合するのも好ましい実施形態の一つである。
【００６３】
乳酸菌は、本発明の必須要件であるから、乳酸菌により発酵などの変化を受けたヨーグルト、酸乳などが本発明の対象であり、牛乳、バター、チーズ、ホエイなどの乳酸菌を含まない通常の乳製品は、本発明の対象ではない。
【００６４】
本発明の好ましい実施形態の一つは、錠剤、被覆された錠剤、カプセル、小包、散剤、粉末製品、溶液、懸濁液、乳剤、顆粒剤、シロップ、スティック、三方シールのような通常の形態で調製される。これらの実施形態を固形サプリメントと称する。
【００６５】
本発明で使用できるユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物は、既に開示されている組成物に代表される（特許文献１２及び非特許文献４参照）。
【００６６】
ドリンクなどの液状製品、ヨーグルトなどの半液状製品、固形サプリメントなどの固形状製品などの本発明の製品に使用されるユッカ抽出物とキラヤ抽出物の複合組成物は、固形分ベースで、それぞれの合計で０．０１〜９５重量％を含有させることができるが、０．１〜８０重量％が好ましい例である。
【００６７】
ユッカ抽出物とキラヤ抽出物の複合組成物は、９０：１０〜１０：９０で配合することができるが、８０：２０〜２０：８０が好ましい配合割合である。
【００６８】
エンテロコッカス・フェカリス（ストレプトコッカス・フェカリス）、ラクトバチルス・アシドフィラス、ラクトバチルス・ブルガリカスを使用する場合は、これらの生菌菌体を集め、乾燥した後、澱粉、乳糖、白糖、それらの混合物などの適当な賦形剤と混合した局外規ラクトミンの使用が好ましい形態の一つである。
【００６９】
ビフィドバクテリウムとしては、例えば、森永乳業株式会社製の森永ビフィズス菌末（ＢＢ５３６）や協和発酵株式会社製の耐酸性凍結乾燥ビフィズス菌末（ＦＤビフィズスＡＴＫ）などを用いることができる。
【００７０】
有胞子性乳酸菌（ラクトバチルス・スポロゲネス；バチルス・コアグランス）としては、ラクボン原末が繁用できる。ラクボン原末は、通常、５×１０９〜１２×１０１２個／ｇの菌数を含有する粉末が使用できる。
【００７１】
有胞子性乳酸菌の成育を促進させるため、タカジアスターゼ、ビオチン（ビタミンＨ）あるいは両者を併用して使用することも好まれる実施形態である。
【００７２】
その好ましい配合例としては、有胞子性乳酸菌の５×１０９〜１２×１０１２個に対し、タカジアスターゼＮ１が約３ｇ、ビオチンが約０．４ｍｇを挙げることができる。
【００７３】
本発明の固形サプリメントには、健康食品に使用されている一般的な素材を添加・配合することができる。これらの素材の種類、添加量は、本発明による血中コレステロール低下作用、血中トリグリセリド低下作用などを阻害しなければ、特に制限されるものではなく、ビタミン類、アミノ酸類、有機酸類、ペプチド類、タンパク質類、オリゴ糖類、イソフラボン類、カテキン類、脂質類、ミネラル類、酵母エキス類、プロポリス類、クロレラ、スピルリナ、ハーブ類、野菜・果実・その他の天然物抽出物類、卵黄・卵白などの加工品類、補酵素類、酵素類、有用微生物（生菌及び死菌）、微生物由来品などの適量を使用することができる。
【００７４】
更なる成分として、一般に使用される通常の賦形剤などを添加することができる。
【００７５】
賦形剤などの添加量は、通常０〜９０％であるが、１〜８０％が好ましい添加量である。
【００７６】
これらの固形サプリメントには、医薬品や食品に添加することができる、着色剤、甘味料、香料、保存料、酸化防止剤、乳化剤、増粘剤、品質改良剤、調味料、酸味料、強化剤などを適宜、配合添加することができる。
【００７７】
また、例えば、賦形剤（例えば、澱粉、乳糖、微結晶セルロース、セルロース、リン酸水素カルシウム、砂糖）、分散または結合剤（例えば、炭酸カルシウム、二酸化ケイ素、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、酸化チタン）、乳化剤（例えば、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、レシチン、アルキルスルホネート、アリールスルホネート）、潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、ラウリルスルホン酸ナトリウム、なたね油脂末）、その他の補助剤（例えば、水、パラフィン、ピーナッツオイルやごま油などの植物油、エタノールやグリセリンなどのアルコール、プロピレングリコールやポリエチレングリコールなどのグリコール）などを添加することによって通常の手段で製造することができる。
【００７８】
以上のように説明した固形サプリメント、ヨーグルト、乳酸菌飲料において、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物及び乳酸菌を同時に配合した製品例、報告はこれまでになく本発明の固形サプリメント、ヨーグルト、乳酸菌飲料は新規な製品である。
【００７９】
以下に、実施例及び試験例を挙げて本発明を詳細に説明する。
【実施例１】
【００８０】
ユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（３５０ｇ）と乳糖（３３０ｇ）を良く混合し、この混合物をパウレック社の流動層造粒機（ＳＴＥＲＡ−１型）を用いて、送入空気圧は２ｋｇ／ｃｍ２、水をスプレーして造粒した。スプレーは、流速５ｍｌ／分、圧力０．８〜０．８５ｋｇ／ｃｍ２で１５分間実施した。約８０℃の吸気温度で約８分間乾燥させた後、５０μｍの目開きの篩を通過させ、整粒工程を行ない顆粒状とした。これにビフィズス菌末（６ｇ）、ラクトミン（フェカリス菌）、ラクトミン（アシドフィルス菌）及びステアリン酸マグネシウム（４ｇ）を混合し、畑鉄工所製打錠機（ＡＰ２２ＳＳ−Ｕ）を使用して、常法通り、１錠（２１０ｍｇ）の錠剤を打錠した。
【実施例２】
【００８１】
ユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（６００ｇ）と乳糖（４００ｇ）を良く混合し、実施例１と同様にして顆粒を製造した。この顆粒にビフィドバクテリウム・ロンガム菌散（２４ｇ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム菌散（２４ｇ）、ラクトバチルス・アシドフィルス菌散（２４ｇ）、コーンスターチ（１２２ｇ）とステアリン酸マグネシウム（６ｇ）を混合し、畑鉄工所製打錠機（ＡＰ２２ＳＳ−Ｕ）を使用して、常法通り、１錠（３００ｍｇ）の錠剤を打錠した。
【実施例３】
【００８２】
ユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（３００ｇ）、カテキンエキス末（３００ｇ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム菌散（２４ｇ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム菌散（２４ｇ）、ラクトバチルス・アシドフィルス菌散（２４ｇ）、乳糖（１８８ｇ）、デキストリン（１００ｇ）、セルロース（１８０ｇ）、グリセリン脂肪酸エステル（３６ｇ）、二酸化ケイ素（２４ｇ）を混合し、畑鉄工所製打錠機（ＡＰ２２ＳＳ−Ｕ）を使用して、常法通り、１錠（３００ｍｇ）の錠剤を打錠した。
【実施例４】
【００８３】
ユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（４００ｇ）、カテキンエキス末（４５０ｇ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム菌散（２４ｇ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム菌散（２４ｇ）、ラクトバチルス・アシドフィルス菌散（２４ｇ）、フェヌグワーク胚乳粉末（９６ｇ）、乳糖（１０７ｇ）、デキストリン（１５０ｇ）、セルロース（１５０ｇ）、グリセリン脂肪酸エステル（７５ｇ）、を混合し、畑鉄下所製打錠機（ＡＰ２２ＳＳ−Ｕ）を使用して、常法通り、１錠（３００ｍｇ）の錠剤を打錠した。
【実施例５】
【００８４】
１日分（１．５ｇ）の組成が、ユッカ抽出物（６０％）とキラヤ抽出物（４０％）から成る複合組成物（７００ｍｇ）、ラクボン（有胞子性乳酸菌）（１０ｍｇ）、ラクトミン（アシドフィルス菌）（１８ｍｇ）、耐酸性凍結乾燥ビフィズス菌末（ＦＤビフィズスＡＴＫ）（１８ｍｇ）、天然オリゴ糖ラフィノース（１７０ｍｇ）、ビオチン（２μｇ）、乳糖（２３４ｍｇ）とバレイショデンプン（３５０ｍｇ）となるように、これらの各成分を加えて均一に混合し散剤を製造した。
【実施例６】
【００８５】
１日分（３ｇ；１包が１．５ｇのスティック状栄養健康食品）の組成が、ユッカ抽出物（７０％）とキラヤ抽出物（３０％）から成る複合組成物（３５０ｍｇ）、ラクボン（有胞子性乳酸菌）（５ｍｇ）、ラクトミン（アシドフィルス菌）（１０ｍｇ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム菌散（１０ｍｇ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム菌散（１０ｍｇ）、ビオチン（１μｇ）、タカジアスターゼＮ１（１０ｍｇ）、フラクトオリゴ糖（１００ｍｇ）、ビタミンＣ（６２．５ｍｇ）、クエン酸（６２．５ｍｇ）、グラニュー糖（４００ｍｇ）、コーンスターチ（２４０ｍｇ）と乳糖（２４０ｍｇ）となるように、これらの各成分を加えて均一に混合した。１袋１．５ｇのスティック状製品とした。
【実施例７】
【００８６】
ラクトミン（アシドフィルス菌）をヨーグルトミックス（生乳に脱脂乳を２％となるように添加し、１００℃で１５分加熱）に接種し、２０℃で２４時間培養した。調製ヨーグルト１５０ｇに対し、ユッカ抽出物（３０％）とキラヤ抽出物（７０％）から成る複合組成物（７５０ｍｇ）、フラクトオリゴ糖（２００ｍｇ）、ラクボン（有胞子性乳酸菌）（１０ｍｇ）、耐酸性凍結乾燥ビフィズス菌末（ＦＤビフィズスＡＴＫ）（１０ｍｇ）、ビオチン（１μｇ）を添加・混合して、紙コップに充填し冷却して製品とした。
【実施例８】
【００８７】
脱脂乳を８０〜８５℃で２０〜３０分間殺菌した後、ホモゲナイズした。これにラクトミン（アシドフィルス菌）を接種して、３７〜４０℃で２０時間発酵させた。生じたカードを砕きながら、５℃に冷却し、これを発酵乳とした。別に砂糖（２０％）、ユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（０．６％）、ラクボン（有胞子性乳酸菌）（０．０４％）、耐酸性凍結乾燥ビフィズス菌末（ＦＤビフィズスＡＴＫ）（０．０４％）、ラクトミン（アシドフィルス菌）（０．０４％）、ビオチン（２μｇ）、フラクトオリゴ糖（０．６％）、適量の酸味料、香料を添加しホモゲナイズし、５℃に冷却し、糖液とした。このようにして得られた発酵乳と糖液を等量混合して乳酸菌飲料とした。
【実施例９】
【００８８】
象印製「ヨーグルトメーカー」の容器を充分に洗浄し、熱湯消毒した後、牛乳（５００ｍｌ）を加え、別にユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（１ｇ）を５ｍｌの水に溶かし、約９５℃に１５分加熱殺菌した水溶液を添加した。更に、カスピ海ヨーグルトの粉末種菌（食の安全と健康ネットワークで販売）を大さじで３杯添加した。熱湯消毒したスプーンで混合した後、２７℃で１５時間静置して製造した。
【実施例１０】
【００８９】
ヤクルト（６５ｍｌ）を冷蔵庫から出し室温に放置し室温に近づけた。約半分のリンゴをすり下ろして、さらしの布で絞り、リンゴ果汁を調製した。別に、スキムミルク（６０ｇ）に砂糖（２０ｇ）を加えて充分に混合しておいた。リンゴ果汁に水を加えて合わせて５００ｍｌとし、これにスキムミルクと砂糖を混合したもの、及びユッカ抽出物（４０％）とキラヤ抽出物（６０％）から成る複合組成物（９００ｍｇ）を軽く混ぜながら加え溶解した。加熱沸騰させ、沸騰後、弱火にして１０分加熱殺菌した。沸騰液を水を張ったボールなどに入れて約３５℃まで急冷し、保温水筒中へ移した。ヤクルト（ラクトバチルス・カゼイ・シロタ株を含む）（６５ｍｌ）を加えて、部屋の暖かなところで約１０時間発酵させて製造した。
【試験例１】
【００９０】
乳酸菌用のＭＲＳ培地（日本ベクトン・ディッキンソン株式会社製）５．２ｇを水９０ｍｌに溶解し、試験管（９ｍｌ）６本に分注し、１２１℃で１５分間滅菌した。１本には水１ｍｌを加えて対象とした。別にユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の１％、３％、６％、１２％、２０％水溶液３ｍｌを調製し、０．２２μｍフィルターで無菌濾過した。このユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の水溶液（１ｍｌ）を他の５本の試験管に加え、０．１％、０．３％、０．６％、１．２％、２％のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物含有培地を調製した。これらの試験管に、別に、注１のようにして培養したビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）の菌液の１００μｌを接種した。各試験管の２００μｌをとり、その１００μｌを用い乳酸菌数（ビフィドバクテリウム・ロンガム）を測定し、その平均値を培養前の乳酸菌数とした（注２参照）。残りの１００μｌを用いてｐＨを測定した。更に、３７℃で一定時間嫌気培養後、その２００μｌをとり１００μｌを用いて乳酸菌数、残りの１００μｌを用いて、経時的にｐＨ、生菌数を測定した。乳酸菌数は、培養液の１００μｌをとり嫌気性希釈液（注３参照）で１０−５〜１０−８に希釈した液の１００μｌをＢＬ寒天（ニッスイ株式会社製）の平板上でコーンラージュを用いて塗布し、３７℃で７２時間嫌気培養後、生育したコロニー数を数えた。１検体当たり３枚のＢＬ寒天平板上の乳酸菌生菌数を数え、それらの平均値を乳酸菌数として算出した。結果を表１に示した。
注１：乳酸菌用のＭＲＳ培地５．２ｇを水１００ｍｌに溶解した溶液１０ｍｌを１２１℃で１５分で滅菌した。スキムミルク（１０％）とグルタミン酸ナトリウム（１％）から成る水溶液中で凍結保存（−８０℃）されているビフィドバクテリウム・ロンガムをＢＬ２寒天培地上で画線嫌気培養して生じたコロニーの１白金耳を接種し３７℃で１８時間嫌気培養した。
注２：この実験での培養前の乳酸菌数は１．８×１０７個／ｍｌ、ｐＨは６．６であった。
注３：嫌気性希釈液：１リッターの水に、リン酸１カリウム（４．５ｇ）、リン酸２ナトリウム（６．０ｇ）、寒天（０．５ｇ）ツイン８０（０．５ｇ）、システイン塩酸塩（０．５ｇ）を溶解し、ｐＨを７．０に調整した。
【００９１】
【００９２】
表１からユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物がビフィドバクテイルム・ロンガムの著しく増殖を促進することは明らかである。また、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物を添加していない時、培養３時間後の生菌数が減少しているが、これはＭＲＳ培地がビフィドバクテリウム・ロンガムにとっては、増殖に適した培地ではないので対数増殖期に移行する前の誘導期において、増殖が活発でない状態での生菌数測定のバラツキによるものと考えられる。ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物を添加した場合は、０．１％〜０．６％添加でも３時間後の生菌数の減少は殆ど見られず、１．２％〜２．０％添加では増殖していることが確認できた。このことも、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物がビフィドバクテリウム菌の増殖にとって適した組成物であることを意味している。ユッカ及びキラヤ抽出物１．２％、２．０％添加では、培養２４時間で生菌数の減少が見られるが、これは、ユッカ及びキラヤ抽出物の増殖促進効果が大きいため増殖速度が速くなり、２４時間後では一部のビフィドバクテリウム・ロンガムが死滅期に入っていることによると考えられる。
【試験例２】
【００９３】
ＣＬ２飼料（日本クレア株式会社製）で飼育した５週齢のＢＡＬＢ／Ｃ無菌マウス３０匹を用い、無菌マウス群とビフィドバクテリウム・ロンガム定着マウス群の２群（各群１５匹）に分けた。ビフィドバクテリウム・ロンガム定着マウス群は、次のようにして作出した。５週間飼育した時点で、注１のようにして調製したビフィドバクテリウム・ロンガムの菌液の０．５ｍｌを１回だけ経口投与した。この投与でビフィドバクテリウム・ロンガムは無菌マウスに定着した。ビフィドバクテリウム・ロンガムの定着の確認は、注２のようにして行なった。更に１週間ＣＬ２飼料で飼育して計６週間飼育した。その後、放射線殺菌したコレステロール飼料（注３参照）で飼育し、同時にユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の投与も開始した。ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の投与は、０．５％および１．０％濃度で飲料水に溶かしてマウスが自由に飲むようにして与えた。対照群（無菌マウス群）は、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の非投与群、０．５％のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物投与群、１．０％のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物投与群の３群（各群５匹）に分けた。ビフィドバクテリウム・ロンガム定着群もユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物の非投与群、０．５％のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物投与群、１．０％のユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物投与群の３群（各群５匹）に分けた。コレステロール食で４週間飼育し、この間、ＹＱ２は飲料水より自由摂取で与えた。コレステロール食での飼育後、４週目にて血中トリグリセリド、血中総コレステロールを測定した。その結果、ユッカ及びキラヤ抽出物組成物の無添加群の群間比較で、無菌マウス群とビフィドバクテリウム・ロンガム定着群において、血中トリグリセリド及び血中コレステロールは、有意差を認めなかった。即ち、ビフィドバクテリウム・ロンガム単独での有効性は認めなかった。しかるに、ビフィドバクテリウム・ロンガム定着群において、ユッカ及びキラヤ抽出物の複合組成物を併用して投与した場合は、ユッカ及びキラヤ抽出物組成物の無添加に対して、且つ、無菌マウス群に対して、ｐ＜０．０１で統計的に有意差があった。結果を表２に示した。表２では、初期値からの血中トリグリセリド、血中コレステロールの低下率で表した。
注１：乳酸菌用のＭＲＳ培地５．２ｇを水１００ｍｌに溶解した溶液１０ｍｌを１２１℃で１５分で滅菌した。これにビフィドバクテリウム・ロンガムを摂取し、３７℃で１８時間嫌気培養した。
注２：ビフィドバクテリウム・ロンガム投与後、１週、２週、４週後の糞便中のビフィドバクテリウム・ロンガムの測定を行ない確認した。
注３：マウスのコレステロール飼料の組成は、コーンスターチ（５０．４４８６％）、ミルクカゼイン（２０．０％）、アルファ化コーンスターチ（１．０％）、グラニュー糖（１０．０％）、精製ラード（７．０％）、アビセルセルロース（５．０％）、ミネラル混合（ＡＩＮ−９３Ｇ−ＭＸ；３．５％）、ビタミン混合（ＡＩＮ−９３ＶＸ；１．０％）、Ｌ−シスチン（０．３％）、重酒石酸コリン（０．２５％）、第３ブチルヒドロキノン（０．００１４％）、コレステロール（１．０％）、コール酸ナトリウム（０．５％）
【００９４】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ユッカ抽出物とキラヤ抽出物の複合組成物及び乳酸菌を含有することを特徴とする飲食品
【請求項２】
ユッカ抽出物とキラヤ抽出物の割合が９０：１０〜１０：９０の複合組成物であることを特徴とする請求項１記載の飲食品
【請求項３】
飲食品が固形サプリメントであることを特徴とする請求項１及び２記載の飲食品
【請求項４】
飲食品がヨーグルトであることを特徴とする請求項１及び２記載の飲食品
【請求項５】
飲食品が乳酸菌飲料であることを特徴とする請求項１及び２記載の飲食品
【請求項６】
ビフィズス菌を含む乳酸菌を用いることを特徴とする請求項１、２、３、４及び５記載の飲食品
【請求項７】
血中トリグリセリドを低下させることを特徴とする請求項１、２、３、４、５及び６記載の飲食品
【請求項８】
血中コレステロールを低下させることを特徴とする請求項１、２、３、４、５及び６記載の飲食品
【請求項１】
ユッカ抽出物とキラヤ抽出物の複合組成物及び乳酸菌を含有することを特徴とする飲食品
【請求項２】
ユッカ抽出物とキラヤ抽出物の割合が９０：１０〜１０：９０の複合組成物であることを特徴とする請求項１記載の飲食品
【請求項３】
飲食品が固形サプリメントであることを特徴とする請求項１及び２記載の飲食品
【請求項４】
飲食品がヨーグルトであることを特徴とする請求項１及び２記載の飲食品
【請求項５】
飲食品が乳酸菌飲料であることを特徴とする請求項１及び２記載の飲食品
【請求項６】
ビフィズス菌を含む乳酸菌を用いることを特徴とする請求項１、２、３、４及び５記載の飲食品
【請求項７】
血中トリグリセリドを低下させることを特徴とする請求項１、２、３、４、５及び６記載の飲食品
【請求項８】
血中コレステロールを低下させることを特徴とする請求項１、２、３、４、５及び６記載の飲食品
【公開番号】特開２００７−８２４０３（Ｐ２００７−８２４０３Ａ）
【公開日】平成１９年４月５日（２００７．４．５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−２９５４４１（Ｐ２００４−２９５４４１）
【出願日】平成１６年９月８日（２００４．９．８）
【出願人】（５０３４３１３７８）株式会社日本メディシン (1)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年４月５日（２００７．４．５）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年９月８日（２００４．９．８）
【出願人】（５０３４３１３７８）株式会社日本メディシン (1)
【Ｆターム（参考）】
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