体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の製造方法
【課題】体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物及びその製造方法を提供することを課題とする。
【解決手段】本発明は、体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物及その製造方法を開示し、該紅麹生成成分の組成物の製造は米とヤマイモを原料として使用し、製造方法が更に水及びアンコール類を溶液とすることを通じて紅麹を製造、生成でき、且つ、インビトロ方式、及び、動物実験を経た後、この紅麹生成成分の組成物が確かに体脂肪形成の阻害効果を持っていると証明した。
【解決手段】本発明は、体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物及その製造方法を開示し、該紅麹生成成分の組成物の製造は米とヤマイモを原料として使用し、製造方法が更に水及びアンコール類を溶液とすることを通じて紅麹を製造、生成でき、且つ、インビトロ方式、及び、動物実験を経た後、この紅麹生成成分の組成物が確かに体脂肪形成の阻害効果を持っていると証明した。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の製造方法に関し、特に、該紅麹生成成分の組成物の製造について紅麹米及び紅麹ヤマイモを原料とすることができ、製造方法には更に水の製造方法とアルコール類の製造方法を含むことに関する。
【背景技術】
【０００２】
経済的な隆盛、繁栄と食習慣の変化に伴い、肥満がすでに健康の一番の敵になってきた。肥満から派生する疾患は枚挙にいとまがない。いかにして肥満の発生を緩めるかは、現在注目されている課題となっている。
【０００３】
紅麹は我が国における従来の発酵菌種で、古い書物にすでにその特殊な効能が記載されている。近年、健康至上主義の勢いが増し、邦人も徐々に予防医学の重要性を重視してきたため、天然の食材を合成医薬品に代替するようになってきた。健康食品のブームは紅麹の研究を更に活性化させ、現在すでに報道されているような生理的効果には血中脂質低下、血圧低下、血糖降下、癌予防などを含み、近年紅麹米の製造物が脂肪細胞の分化を抑制し、脂肪の蓄積を減らすことができることが発見されたため、肥満症状の改善に応用できる潜在力がある。
【０００４】
モナコリンＫ（ロバスタチン）は紅麹から生成される血中脂質低下物質である。研究報道によると、この種のスタチン類化合物は、脂肪細胞の分化を調節できる。近年、更に文献においてモナコリンＫのほかに、紅麹米の水層抽出物も３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の分化を抑制できると指摘している。これら紅麹の発酵生成物も体脂肪生成を減らす効果を持つ可能性があり、肥満症状の改善に応用できる潜在力がある。
【０００５】
これに鑑み、体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物及その製造方法を開発できれば、必ず高い応用潜在力がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
このため、上記の問題点に鑑み、本発明者は、長年に渡る累積してきた経験により、想像力と創造力を発揮させ、絶え間ない試験と鋭意検討した結果、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物及その製造方法を完成させるに至った。
【０００７】
本発明の第１の目的は、先行文献において、紅麹の発酵生成物は脂肪細胞の分化を抑制する効果があると指摘していることで、本発明では紅麹米及び紅麹ヤマイモから紅麹生成成分の組成物抽出をそれぞれ行い、且つ体外細胞実験及び動物実験で該紅麹生成成分の組成物の効果を分析する体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物を提供することである。
【０００８】
本発明の第２の目的は、紅麹の発酵生成物が異なる抽出方法と抽出条件のもとで、紅麹生成成分の組成物の成分及び効果が非常に大きく異なるため、本発明では好適な抽出方法と条件を提供して、好適な紅麹生成成分の組成物を得る体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
これにより、本発明が提供する体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法には、紅麹原料に乾燥ステップを施すステップ１と、乾燥後の該紅麹原料を粉末状にするステップ２と、水で粉末状の紅麹原料を特定の温度において特定時間の抽出動作を行うステップ３と、抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ４と、ろ過後の濾液を冷凍乾燥させるステップ５、及び乾燥後の生成物を特定の溶剤で特定濃度となるよう再溶解し、また特定の温度において保存するステップ６とを含む。
【００１０】
本発明が更に提供する別の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法には、紅麹原料に乾燥ステップを施すステップ１と、乾燥後の該紅麹原料を粉末状にするステップ２と、水で粉末状の紅麹原料を特定の温度において特定時間抽出動作を行うステップ３と、抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ４と、ろ過後の非濾液部分を特定濃度のエタノールで再溶解し、且つ特定の温度において特定時間の抽出動作を行うステップ５と、抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ６と、ろ過後の濾液を排気できる空間に置き、エタノールを自然揮発させるステップ７、及びエタノールの揮発を終えてからエタノールで特定の濃度となるよう再溶解し、また特定の温度において保存するステップ８とを含む。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第１の好ましい製造方法である。
【図２】本発明の本発明体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第２の好ましい製造方法である。
【図３】本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第３の好ましい製造方法である
【図４】本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第４の好ましい製造方法である。
【図５Ａ】紅麹米水製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である。
【図５Ｂ】紅麹米エタノール製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である。
【図５Ｃ】紅麹ヤマイモのエタノール製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である
【図５Ｄ】モナコリンＫの３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である。
【図５Ｅ】モナスシンの３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である。
【図５Ｆ】アンカフラビンの３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である。
【図６Ａ】紅麹米の水製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図６Ｂ】紅麹ヤマイモの水製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図６Ｃ】紅麹米のエタノール製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図６Ｄ】紅麹ヤマイモのエタノール製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図６Ｅ】アンカフラビンの３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図６Ｆ】モナスシンの３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図７Ａ】紅麹の発酵生成物を与えて飼育し、高脂肪食Ｗｉｓｔａｒ雄ラットの腎臓周囲脂肪組織の脂肪分解作用に対する影響である。
【図７Ｂ】紅麹の発酵生成物を与えて飼育し、高脂肪食Ｗｉｓｔａｒ雄ラットの副睾丸周囲脂肪組織の脂肪分解作用に対する影響である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
上記の目的と効果を達成するため、本発明者は、それぞれ紅麹米及び紅麹ヤマイモを原料とし、各種製造方法を試し、且つ絶え間ない製造条件の改良と修正を行ったことで、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の製造方法を見出すことに至った。
【００１３】
まず、図１を参照しながら説明する。図１は、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第１好ましい製造方法で、その製造方法には次のステップが含まれる。即ち、紅麹米に乾燥ステップ（ステップ１０１）を施す。乾燥後の該紅麹米を粉末状（ステップ１０２）にする。粉末状の紅麹米を逆浸透水で特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ１０３）を行い、逆浸透水のほかに、普通の水でも代替でき、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ１０４）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の濾液を冷凍乾燥（ステップ１０５）する。及び乾燥後の生成物を特定の溶剤で特定の濃度になるよう再溶解し、また特定の温度において保存（ステップ１０６）し、該特定の溶剤がリン酸緩衝液（ＰＢＳ）で、該特定の濃度が５０μｇ／ｍL〜２００μｇ／ｍＬで、該特定の温度を−２０℃〜７℃とし、これで製造ステップの終了となる。
【００１４】
上記該紅麹米の有効成分には、少なくとも１つの紅麹菌の色素（モナスシン）と1つの紅麹色素（アンカフラビン）を含有する。該モナスシンの重量比は１ｇ当たりの紅麹米の中に１〜３０ｍｇのモナスシンを含有し、該アンカフラビンの重量比は１ｇ当たりの紅麹米の中に０．５〜２５ｍｇのアンカフラビンを含有する。
【００１５】
次に、図２を参照しながら説明する。図２は、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第２の好ましい製造方法で、その製造方法には次のステップが含まれる。即ち、紅麹米に乾燥ステップ（ステップ２０１）を施す。乾燥後の該紅麹米を粉末状（ステップ２０２）にする。粉末状の紅麹米を逆浸透水で特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ２０３）を行い、逆浸透水のほかに、普通の水でも代替でき、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ２０４）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の非濾液部分を特定濃度のエタノールで再溶解し、且つ特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ２０５）を行い、該特定の濃度が５０％〜９５％で、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ２０６）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の濾液をドラフトチャンバーに置き、エタノールを自然揮発（ステップ２０７）させ、排気可能な空間にも置くことができ、エタノールの揮発を終えてからエタノールで特定の濃度となるよう再溶解し、また特定の温度において保存（ステップ２０８）し、該特定の濃度が５０μｇ／ｍL〜２００μｇ／ｍＬで、該特定の温度を−２０℃〜７℃とし、これで製造ステップの終了となる。
【００１６】
上記該紅麹米の有効成分には、少なくとも１つの紅麹菌の色素（モナスシン）と１つの紅麹色素（アンカフラビン）を含有する。該モナスシンの重量比は１ｇ当たりの紅麹米の中に１〜３０ｍｇのモナスシンを含有し、該アンカフラビンの重量比は１ｇ当たりの紅麹米の中に０．５〜２５ｍｇのアンカフラビンを含有する。
【００１７】
次に、図３を参照しながら説明する。図３は、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第３の好ましい製造方法で、その製造方法には次のステップが含まれる。即ち、新鮮なヤマイモをきれいに洗い、また一定の大きさに角切り（ステップ３０１）、該角切りの一定の大きさとは２ｍｍ〜２０ｍｍである。該新鮮なヤマイモの角切りを乾燥化させ、乾燥後のヤマイモを特定の水分含有量（ステップ３０２）にさせ、該特定の水分含有量を１５％以下とする。特定水量を乾燥ヤマイモ内に加え、乾燥ヤマイモと該水量を特定比率にさせ、また特定時間（ステップ３０３）浸け置き、乾燥ヤマイモと水の該特定比率とは１：０．５％〜１：１．５％とし、該浸け置く特定時間を０〜６０分間とする。浸け込んだヤマイモに滅菌ステップを施し、また特定の温度（ステップ３０４）まで冷やし、該滅菌方法には高温滅菌法を用いることができ、該滅菌法の滅菌温度が１２１℃で、滅菌時間を１０〜６０分間とする。紅麹種菌をヤマイモ内（ステップ３０５）に接種する。また種菌接種済みヤマイモを特定の培養温度及び特定の培養湿度で特定の培養時間（ステップ３０６）培養し、該特定の培養温度を２５〜３７℃とし、該特定の培養湿度を５０％〜８０％とし、該特定の培養時間を８〜２０日間とする。前ステップの生成物に特定処理時間の嫌気性処理ステップ（ステップ３０７）を施し、該特定処理時間を０〜３日以内とする。前ステップの生成物に乾燥ステップ（ステップ３０８）を施す。前ステップの生成物を粉末状（ステップ３０９）にする。粉末を逆浸透水で特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ３１０）を行い、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ３１１）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の濾液を冷凍乾燥（ステップ３１２）する。及び乾燥後の生成物を特定の溶剤で特定の濃度になるよう再溶解し、また特定の温度において保存（ステップ３１３）し、該特定の溶剤がリン酸緩衝液（ＰＢＳ）で、該特定の濃度が５０μｇ／ｍL〜２００μｇ／ｍＬで、該特定の温度を−１８℃〜７℃とし、これで製造ステップの終了となる。
【００１８】
次に、図４を参照しながら説明する。図４は、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第４の好ましい製造方法で、その製造方法には次のステップが含まれる。即ち、新鮮なヤマイモをきれいに洗い、また一定の大きさに角切り（ステップ４０１）、該角切りの一定の大きさとは２ｍｍ〜２０ｍｍである。該新鮮なヤマイモの角切りを乾燥化させ、乾燥後のヤマイモを特定の水分含有量（ステップ４０２）にさせ、該特定の水分含有量を１５％以下とする。特定水量を乾燥ヤマイモ内に加え、乾燥ヤマイモと該水量を特定比率にさせ、また特定時間（ステップ４０３）浸け置き、乾燥ヤマイモと水の該特定比率とは１：０．５％〜１：１．５％とし、該浸け置く特定時間を０〜６０分間とする。浸け込んだヤマイモに滅菌ステップを施し、また特定の温度（ステップ４０４）まで冷やし、該滅菌方法には高温滅菌法を用いることができ、該滅菌法の滅菌温度が１２１℃で、滅菌時間を１０〜６０分間とする。紅麹種菌をヤマイモ内（ステップ４０５）に接種する。また種菌接種済みヤマイモを特定の培養温度及び特定の培養湿度で特定の培養時間（ステップ４０６）培養し、該特定の培養温度を２５〜３７℃とし、該特定の培養湿度を５０％〜８０％とし、該特定の培養時間を８〜２０日間とする。前ステップの生成物に特定処理時間の嫌気性処理ステップ（ステップ４０７）を施し、該特定処理時間を０〜３日以内とし、このステップを経由して紅麹ヤマイモの製造を完成する。前ステップの生成物に乾燥ステップ（ステップ４０８）を施す。前ステップの生成物を粉末状（ステップ４０９）にする。粉末を逆浸透水で特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ４１０）を行い、若しくは普通の水を使用でき、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ４１１）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の非濾液部分を特定濃度のエタノールで再溶解し、且つ特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ４１２）を行い、該特定の濃度が５０％〜９５％で、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ４１３）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の濾液をドラフトチャンバーに置き、エタノールを自然揮発（ステップ４１４）させ、或いは排気可能な空間にも置くことができ、エタノールの揮発を終えてからエタノールで特定の濃度となるよう再溶解し、また特定の温度において保存（ステップ４１５）し、該特定の濃度が５０μｇ／ｍL〜２００μｇ／ｍＬで、該特定の温度を−１８℃〜７℃とし、これで製造ステップの終了となる。
【００１９】
紅麹生成成分組成物の体脂肪生成減少と体重降下に対する効果を評価するため、以下にそれぞれインビトロ試験とインビボの評価実験により分析を行った。インビトロ試験は３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞を試験材料とし、紅麹生成成分組成物の前駆脂肪細胞の増殖、分化に対する影響を探究した。インビボの評価実験は、Ｗｉｓｔａｒ雄ラットを試験動物とし、研究中、同時に高脂肪飼料と紅麹発酵生成物の組成物を８週間飼育した後、各種評価指標でその体脂肪生成を緩める効果を判定した。
【００２０】
[インビトロ試験]
１．前駆脂肪細胞の増殖率の測定
図５Ａを参照しながら説明すると、図５Ａに示すように３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞が高用量（２００μｇ／ｍＬ）の紅麹米水製造物で２４時間処理した後、コントロール群と比較したところ、その増殖率が明らかに約２３．５％降下した。各処理用量（５０、１００、２００μｇ／ｍＬ）で４８時間作用させた後、いずれも明らかに増殖抑制効果があり、抑制率がそれぞれ１４．２％、１７．８％及び２２．２％であった。図５Ｂを参照しながら説明すると、図５Ｂに示すように紅麹米のエタノール製造物の処理用量が１００、２００μｇ／ｍＬになった時、３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の増殖を効果的に抑制した。２４時間作用させた時、抑制率がそれぞれ１０．４％及び３８．４％となり、４８時間作用させた時、抑制率がそれぞれ１２．２％及び３１．８％となった。図５Ｃを参照しながら説明すると、図５Ｃに示すように１００、２００μｇ／ｍＬの紅麹ヤマイモのエタノール製造物で２４時間処理させた時、細胞の増殖率がそれぞれ１５．７％及び４５．１％降下した。各処理用量（５０、１００、２００μｇ／ｍＬ）で４８時間作用させた後、いずれも明らかに細胞の増殖を抑制でき、抑制率がそれぞれ１３．８％、２５．４％及び６９．１％となった。図５Ｄを参照しながら説明すると、図５Ｄに示すように１．２５、２．５、５、１０μｍモナコリンＫ（ロバスタチン）で細胞を２４時間処理した結果、各用量でいずれも明らかに細胞の増殖を効果的に抑制したことを示し、抑制率がそれぞれ１３．０％、１８．２％、２３．９％及び２８．６％となった。本実験において、紅麹米の水製造物、紅麹米のエタノール製造物、紅麹ヤマイモのエタノール製造物及びモナコリンＫは、いずれも３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の増殖を抑制できた。
【００２１】
本発明は、更に紅麹の二次代謝産物であるモナスシンとアンカフラビンの脂肪細胞の増殖に対する影響を探究した。図５Ｅを参照しながら説明すると、図５Ｅに示すように各種濃度のモナスシンで２４、４８時間処理した後、顕著な差異がなかった。濃度１ｍｇ／ｍＬの場合、７２時間処理した後、顕著な影響があり、抑制率が８．０％となった。図５Ｆの結果から濃度が１ｍｇ／ｍＬのアンカフラビンで２４〜７２時間処理した後、前駆脂肪細胞の増殖を抑制する顕著な効果を示した。この部分はアンカフラビンとモナスシンが紅麹の体脂肪を減らす効能においてその有効成分の１つであることを実証した。
【００２２】
２．前駆脂肪細胞の分化率の測定（中性脂肪含量の測定）
分化を誘導する過程中において５０、１００、２００μｇ／ｍＬの紅麹米及び紅麹ヤマイモの水製造物を添加し、分化後８日目に細胞を収集して中性脂肪（Ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ, ＴＧ）含量を分析した。合成ＴＧ油滴は、脂肪細胞分化の晩期指標となり、このため細胞中のＴＧ含量が分化効率の判断によく用いられている。図６Ａ及び図６Ｂを参照しながら説明すると、図６Ａ及び図６Ｂに示すように研究の結果で各用量群はいずれも明らかに３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の分化を抑制でき、ＴＧ含量が約５０％降下したことを示した。
【００２３】
図６Ｃ及び図６Ｄを参照しながら説明すると、図６Ｃ及び図６Ｄに示すように５０、７５、１００μｇ／ｍＬの紅麹米のエタノール製造物は、明らかに３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の分化を抑制する効果があり、抑制率がそれぞれ２６％、４９．３％及び５３％となった。５０μｇ／ｍＬの紅麹ヤマイモのエタノール製造物が明らかに細胞分化を抑制でき、抑制率が約５４．９％であった。
【００２４】
次に、図６Ｅを参照しながら説明すると、図６Ｅに示すように紅麹の二次代謝産物であるアンカフラビンが濃度０．１２５ｍｇ／ｍＬ、０．２５ｍｇ／ｍＬの場合、明らかに３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の分化を抑制でき、抑制率がそれぞれ４１．２％、２９．９％であった。図６Ｆを参照しながら説明すると、図６Ｆに示すように紅麹の二次代謝産物であるモナスシンが濃度０．１２５ｍｇ／ｍＬの場合、前駆脂肪細胞についての抑制率が３１．２％であった。
【００２５】
[動物実験]
１．体重及び体脂肪
開始した際の平均体重に顕著な差異がないことを原則とし、ラットをランダムに９群に分け、１群を８匹とした。実験中、同時に高脂肪食及び紅麹生成成分の組成物を投与し、６週間飼育した後、犠牲及び各種分析を行った。この試験において、次の試験群があり、即ち、Ｃが正常飲食群、ＨＦが高脂肪食群、ＬがモナコリンＫ（ロバスタチン）を与えて飼育した群、Ｒが未発酵の米を与えて飼育した群、Ｄが未発酵のヤマイモを与えて飼育した群、ＲＬが低用量紅麹米を与えて飼育した群、ＲＨが高用量紅麹米を与えて飼育した群、ＤＬが低用量紅麹ヤマイモを与えて飼育した群、ＤＨが高用量紅麹ヤマイモを与えて飼育した群とした。
【００２６】
結果は、下記の表１に示すように、高脂肪食群（ＨＦ）の体重が明らかに正常飲食群（Ｃ）より高く、紅麹発酵生成物を与えて飼育した群別（ＲＬ、ＲＨ、ＤＬ、ＤＨ）の体重がいずれも顕著な減少を示した。体重の変化量において低用量（ＲＬ）、高用量紅麹米群（ＲＨ）及び高用量紅麹ヤマイモ群（ＤＨ）はそれぞれ２１．５％、３０．５％及び２０．０％と明らかに減少し、紅麹米及び高用量紅麹ヤマイモがいずれも体重上昇を緩める効果があることを示した。
【００２７】
【表１】
【００２８】
２．脂肪組織のリポリーシス作用の分析
図７Ａ及び図７Ｂを参照しながら説明すると、図７Ａ及び図７Ｂは、それぞれ紅麹の発酵生成物を与えて飼育し、高脂肪食のＷｉｓｔａｒ雄ラットの腎臓及び副睾丸周囲脂肪組織の脂肪分解作用に対する影響である。紅麹米（ＲＬ及びＲＨ）を与えて飼育すると、腎臓及び副睾丸周囲脂肪組織のリポリーシス効率を明らかに向上した。腎臓周圍脂肪組織の部分において、低用量（ＲＬ）と高用量（ＲＨ）群のリポリーシス効率がそれぞれ約１２．３％及び１７．３％向上した。副睾丸周囲脂肪組織の部分において、それぞれ約２９．０％及び３０．０％向上した。高用量紅麹ヤマイモ（ＤＨ）を与えて飼育すると、副睾丸周囲脂肪組織のリポリーシス効率が約２９．０％向上できた。その他、正常飲食群（Ｃ）の腎臓周圍脂肪組織のリポリーシス効率が高脂肪食群（ＨＦ）より低く、これは一般的な正常状態においてリポリーシス作用が体脂肪量と正比例しているからであり、体脂肪が多ければ多いほど、組織代謝の活性化が益々活発化して代謝バランスのメカニズムを満足することにある。
【産業上の利用可能性】
【００２９】
上記の細胞試験及び動物実験を取りまとめ、本発明では紅麹の発酵生成物が高脂肪食によって起きていた体脂肪の蓄積を改善でき、且つリポリーシスの刺激効果を持ち、体脂肪を形成しにくい健康食品として発展できる。
【００３０】
上記実施例は、本発明の技術思想と特徴のみを説明し、その目的は当該技術分野における熟練者が本発明の内容を理解させると共にこれをもって実施することであり、本発明の特許範囲を限定するものができない。本発明で開示した精神を逸脱しない範囲内において種々の改良変更をなし得ることは、本発明の特許範囲に含むものであるのが勿論である。
【符号の説明】
【００３１】
１０１〜１０６ 本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第１の好ましい製造方法のステップ
【技術分野】
【０００１】
本発明は、体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の製造方法に関し、特に、該紅麹生成成分の組成物の製造について紅麹米及び紅麹ヤマイモを原料とすることができ、製造方法には更に水の製造方法とアルコール類の製造方法を含むことに関する。
【背景技術】
【０００２】
経済的な隆盛、繁栄と食習慣の変化に伴い、肥満がすでに健康の一番の敵になってきた。肥満から派生する疾患は枚挙にいとまがない。いかにして肥満の発生を緩めるかは、現在注目されている課題となっている。
【０００３】
紅麹は我が国における従来の発酵菌種で、古い書物にすでにその特殊な効能が記載されている。近年、健康至上主義の勢いが増し、邦人も徐々に予防医学の重要性を重視してきたため、天然の食材を合成医薬品に代替するようになってきた。健康食品のブームは紅麹の研究を更に活性化させ、現在すでに報道されているような生理的効果には血中脂質低下、血圧低下、血糖降下、癌予防などを含み、近年紅麹米の製造物が脂肪細胞の分化を抑制し、脂肪の蓄積を減らすことができることが発見されたため、肥満症状の改善に応用できる潜在力がある。
【０００４】
モナコリンＫ（ロバスタチン）は紅麹から生成される血中脂質低下物質である。研究報道によると、この種のスタチン類化合物は、脂肪細胞の分化を調節できる。近年、更に文献においてモナコリンＫのほかに、紅麹米の水層抽出物も３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の分化を抑制できると指摘している。これら紅麹の発酵生成物も体脂肪生成を減らす効果を持つ可能性があり、肥満症状の改善に応用できる潜在力がある。
【０００５】
これに鑑み、体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物及その製造方法を開発できれば、必ず高い応用潜在力がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
このため、上記の問題点に鑑み、本発明者は、長年に渡る累積してきた経験により、想像力と創造力を発揮させ、絶え間ない試験と鋭意検討した結果、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物及その製造方法を完成させるに至った。
【０００７】
本発明の第１の目的は、先行文献において、紅麹の発酵生成物は脂肪細胞の分化を抑制する効果があると指摘していることで、本発明では紅麹米及び紅麹ヤマイモから紅麹生成成分の組成物抽出をそれぞれ行い、且つ体外細胞実験及び動物実験で該紅麹生成成分の組成物の効果を分析する体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物を提供することである。
【０００８】
本発明の第２の目的は、紅麹の発酵生成物が異なる抽出方法と抽出条件のもとで、紅麹生成成分の組成物の成分及び効果が非常に大きく異なるため、本発明では好適な抽出方法と条件を提供して、好適な紅麹生成成分の組成物を得る体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
これにより、本発明が提供する体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法には、紅麹原料に乾燥ステップを施すステップ１と、乾燥後の該紅麹原料を粉末状にするステップ２と、水で粉末状の紅麹原料を特定の温度において特定時間の抽出動作を行うステップ３と、抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ４と、ろ過後の濾液を冷凍乾燥させるステップ５、及び乾燥後の生成物を特定の溶剤で特定濃度となるよう再溶解し、また特定の温度において保存するステップ６とを含む。
【００１０】
本発明が更に提供する別の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法には、紅麹原料に乾燥ステップを施すステップ１と、乾燥後の該紅麹原料を粉末状にするステップ２と、水で粉末状の紅麹原料を特定の温度において特定時間抽出動作を行うステップ３と、抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ４と、ろ過後の非濾液部分を特定濃度のエタノールで再溶解し、且つ特定の温度において特定時間の抽出動作を行うステップ５と、抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ６と、ろ過後の濾液を排気できる空間に置き、エタノールを自然揮発させるステップ７、及びエタノールの揮発を終えてからエタノールで特定の濃度となるよう再溶解し、また特定の温度において保存するステップ８とを含む。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第１の好ましい製造方法である。
【図２】本発明の本発明体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第２の好ましい製造方法である。
【図３】本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第３の好ましい製造方法である
【図４】本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第４の好ましい製造方法である。
【図５Ａ】紅麹米水製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である。
【図５Ｂ】紅麹米エタノール製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である。
【図５Ｃ】紅麹ヤマイモのエタノール製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である
【図５Ｄ】モナコリンＫの３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である。
【図５Ｅ】モナスシンの３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である。
【図５Ｆ】アンカフラビンの３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞増殖に対する影響である。
【図６Ａ】紅麹米の水製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図６Ｂ】紅麹ヤマイモの水製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図６Ｃ】紅麹米のエタノール製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図６Ｄ】紅麹ヤマイモのエタノール製造物の３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図６Ｅ】アンカフラビンの３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図６Ｆ】モナスシンの３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞分化に対する影響である。
【図７Ａ】紅麹の発酵生成物を与えて飼育し、高脂肪食Ｗｉｓｔａｒ雄ラットの腎臓周囲脂肪組織の脂肪分解作用に対する影響である。
【図７Ｂ】紅麹の発酵生成物を与えて飼育し、高脂肪食Ｗｉｓｔａｒ雄ラットの副睾丸周囲脂肪組織の脂肪分解作用に対する影響である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
上記の目的と効果を達成するため、本発明者は、それぞれ紅麹米及び紅麹ヤマイモを原料とし、各種製造方法を試し、且つ絶え間ない製造条件の改良と修正を行ったことで、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の製造方法を見出すことに至った。
【００１３】
まず、図１を参照しながら説明する。図１は、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第１好ましい製造方法で、その製造方法には次のステップが含まれる。即ち、紅麹米に乾燥ステップ（ステップ１０１）を施す。乾燥後の該紅麹米を粉末状（ステップ１０２）にする。粉末状の紅麹米を逆浸透水で特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ１０３）を行い、逆浸透水のほかに、普通の水でも代替でき、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ１０４）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の濾液を冷凍乾燥（ステップ１０５）する。及び乾燥後の生成物を特定の溶剤で特定の濃度になるよう再溶解し、また特定の温度において保存（ステップ１０６）し、該特定の溶剤がリン酸緩衝液（ＰＢＳ）で、該特定の濃度が５０μｇ／ｍL〜２００μｇ／ｍＬで、該特定の温度を−２０℃〜７℃とし、これで製造ステップの終了となる。
【００１４】
上記該紅麹米の有効成分には、少なくとも１つの紅麹菌の色素（モナスシン）と1つの紅麹色素（アンカフラビン）を含有する。該モナスシンの重量比は１ｇ当たりの紅麹米の中に１〜３０ｍｇのモナスシンを含有し、該アンカフラビンの重量比は１ｇ当たりの紅麹米の中に０．５〜２５ｍｇのアンカフラビンを含有する。
【００１５】
次に、図２を参照しながら説明する。図２は、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第２の好ましい製造方法で、その製造方法には次のステップが含まれる。即ち、紅麹米に乾燥ステップ（ステップ２０１）を施す。乾燥後の該紅麹米を粉末状（ステップ２０２）にする。粉末状の紅麹米を逆浸透水で特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ２０３）を行い、逆浸透水のほかに、普通の水でも代替でき、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ２０４）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の非濾液部分を特定濃度のエタノールで再溶解し、且つ特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ２０５）を行い、該特定の濃度が５０％〜９５％で、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ２０６）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の濾液をドラフトチャンバーに置き、エタノールを自然揮発（ステップ２０７）させ、排気可能な空間にも置くことができ、エタノールの揮発を終えてからエタノールで特定の濃度となるよう再溶解し、また特定の温度において保存（ステップ２０８）し、該特定の濃度が５０μｇ／ｍL〜２００μｇ／ｍＬで、該特定の温度を−２０℃〜７℃とし、これで製造ステップの終了となる。
【００１６】
上記該紅麹米の有効成分には、少なくとも１つの紅麹菌の色素（モナスシン）と１つの紅麹色素（アンカフラビン）を含有する。該モナスシンの重量比は１ｇ当たりの紅麹米の中に１〜３０ｍｇのモナスシンを含有し、該アンカフラビンの重量比は１ｇ当たりの紅麹米の中に０．５〜２５ｍｇのアンカフラビンを含有する。
【００１７】
次に、図３を参照しながら説明する。図３は、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第３の好ましい製造方法で、その製造方法には次のステップが含まれる。即ち、新鮮なヤマイモをきれいに洗い、また一定の大きさに角切り（ステップ３０１）、該角切りの一定の大きさとは２ｍｍ〜２０ｍｍである。該新鮮なヤマイモの角切りを乾燥化させ、乾燥後のヤマイモを特定の水分含有量（ステップ３０２）にさせ、該特定の水分含有量を１５％以下とする。特定水量を乾燥ヤマイモ内に加え、乾燥ヤマイモと該水量を特定比率にさせ、また特定時間（ステップ３０３）浸け置き、乾燥ヤマイモと水の該特定比率とは１：０．５％〜１：１．５％とし、該浸け置く特定時間を０〜６０分間とする。浸け込んだヤマイモに滅菌ステップを施し、また特定の温度（ステップ３０４）まで冷やし、該滅菌方法には高温滅菌法を用いることができ、該滅菌法の滅菌温度が１２１℃で、滅菌時間を１０〜６０分間とする。紅麹種菌をヤマイモ内（ステップ３０５）に接種する。また種菌接種済みヤマイモを特定の培養温度及び特定の培養湿度で特定の培養時間（ステップ３０６）培養し、該特定の培養温度を２５〜３７℃とし、該特定の培養湿度を５０％〜８０％とし、該特定の培養時間を８〜２０日間とする。前ステップの生成物に特定処理時間の嫌気性処理ステップ（ステップ３０７）を施し、該特定処理時間を０〜３日以内とする。前ステップの生成物に乾燥ステップ（ステップ３０８）を施す。前ステップの生成物を粉末状（ステップ３０９）にする。粉末を逆浸透水で特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ３１０）を行い、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ３１１）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の濾液を冷凍乾燥（ステップ３１２）する。及び乾燥後の生成物を特定の溶剤で特定の濃度になるよう再溶解し、また特定の温度において保存（ステップ３１３）し、該特定の溶剤がリン酸緩衝液（ＰＢＳ）で、該特定の濃度が５０μｇ／ｍL〜２００μｇ／ｍＬで、該特定の温度を−１８℃〜７℃とし、これで製造ステップの終了となる。
【００１８】
次に、図４を参照しながら説明する。図４は、本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第４の好ましい製造方法で、その製造方法には次のステップが含まれる。即ち、新鮮なヤマイモをきれいに洗い、また一定の大きさに角切り（ステップ４０１）、該角切りの一定の大きさとは２ｍｍ〜２０ｍｍである。該新鮮なヤマイモの角切りを乾燥化させ、乾燥後のヤマイモを特定の水分含有量（ステップ４０２）にさせ、該特定の水分含有量を１５％以下とする。特定水量を乾燥ヤマイモ内に加え、乾燥ヤマイモと該水量を特定比率にさせ、また特定時間（ステップ４０３）浸け置き、乾燥ヤマイモと水の該特定比率とは１：０．５％〜１：１．５％とし、該浸け置く特定時間を０〜６０分間とする。浸け込んだヤマイモに滅菌ステップを施し、また特定の温度（ステップ４０４）まで冷やし、該滅菌方法には高温滅菌法を用いることができ、該滅菌法の滅菌温度が１２１℃で、滅菌時間を１０〜６０分間とする。紅麹種菌をヤマイモ内（ステップ４０５）に接種する。また種菌接種済みヤマイモを特定の培養温度及び特定の培養湿度で特定の培養時間（ステップ４０６）培養し、該特定の培養温度を２５〜３７℃とし、該特定の培養湿度を５０％〜８０％とし、該特定の培養時間を８〜２０日間とする。前ステップの生成物に特定処理時間の嫌気性処理ステップ（ステップ４０７）を施し、該特定処理時間を０〜３日以内とし、このステップを経由して紅麹ヤマイモの製造を完成する。前ステップの生成物に乾燥ステップ（ステップ４０８）を施す。前ステップの生成物を粉末状（ステップ４０９）にする。粉末を逆浸透水で特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ４１０）を行い、若しくは普通の水を使用でき、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ４１１）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の非濾液部分を特定濃度のエタノールで再溶解し、且つ特定の温度において特定時間の抽出動作（ステップ４１２）を行い、該特定の濃度が５０％〜９５％で、該特定の温度が２５℃〜６５℃で、該特定時間を２４時間以内とする。抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過（ステップ４１３）し、該特定の孔径が０．２２μｍ〜０．４５μｍである。ろ過後の濾液をドラフトチャンバーに置き、エタノールを自然揮発（ステップ４１４）させ、或いは排気可能な空間にも置くことができ、エタノールの揮発を終えてからエタノールで特定の濃度となるよう再溶解し、また特定の温度において保存（ステップ４１５）し、該特定の濃度が５０μｇ／ｍL〜２００μｇ／ｍＬで、該特定の温度を−１８℃〜７℃とし、これで製造ステップの終了となる。
【００１９】
紅麹生成成分組成物の体脂肪生成減少と体重降下に対する効果を評価するため、以下にそれぞれインビトロ試験とインビボの評価実験により分析を行った。インビトロ試験は３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞を試験材料とし、紅麹生成成分組成物の前駆脂肪細胞の増殖、分化に対する影響を探究した。インビボの評価実験は、Ｗｉｓｔａｒ雄ラットを試験動物とし、研究中、同時に高脂肪飼料と紅麹発酵生成物の組成物を８週間飼育した後、各種評価指標でその体脂肪生成を緩める効果を判定した。
【００２０】
[インビトロ試験]
１．前駆脂肪細胞の増殖率の測定
図５Ａを参照しながら説明すると、図５Ａに示すように３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞が高用量（２００μｇ／ｍＬ）の紅麹米水製造物で２４時間処理した後、コントロール群と比較したところ、その増殖率が明らかに約２３．５％降下した。各処理用量（５０、１００、２００μｇ／ｍＬ）で４８時間作用させた後、いずれも明らかに増殖抑制効果があり、抑制率がそれぞれ１４．２％、１７．８％及び２２．２％であった。図５Ｂを参照しながら説明すると、図５Ｂに示すように紅麹米のエタノール製造物の処理用量が１００、２００μｇ／ｍＬになった時、３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の増殖を効果的に抑制した。２４時間作用させた時、抑制率がそれぞれ１０．４％及び３８．４％となり、４８時間作用させた時、抑制率がそれぞれ１２．２％及び３１．８％となった。図５Ｃを参照しながら説明すると、図５Ｃに示すように１００、２００μｇ／ｍＬの紅麹ヤマイモのエタノール製造物で２４時間処理させた時、細胞の増殖率がそれぞれ１５．７％及び４５．１％降下した。各処理用量（５０、１００、２００μｇ／ｍＬ）で４８時間作用させた後、いずれも明らかに細胞の増殖を抑制でき、抑制率がそれぞれ１３．８％、２５．４％及び６９．１％となった。図５Ｄを参照しながら説明すると、図５Ｄに示すように１．２５、２．５、５、１０μｍモナコリンＫ（ロバスタチン）で細胞を２４時間処理した結果、各用量でいずれも明らかに細胞の増殖を効果的に抑制したことを示し、抑制率がそれぞれ１３．０％、１８．２％、２３．９％及び２８．６％となった。本実験において、紅麹米の水製造物、紅麹米のエタノール製造物、紅麹ヤマイモのエタノール製造物及びモナコリンＫは、いずれも３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の増殖を抑制できた。
【００２１】
本発明は、更に紅麹の二次代謝産物であるモナスシンとアンカフラビンの脂肪細胞の増殖に対する影響を探究した。図５Ｅを参照しながら説明すると、図５Ｅに示すように各種濃度のモナスシンで２４、４８時間処理した後、顕著な差異がなかった。濃度１ｍｇ／ｍＬの場合、７２時間処理した後、顕著な影響があり、抑制率が８．０％となった。図５Ｆの結果から濃度が１ｍｇ／ｍＬのアンカフラビンで２４〜７２時間処理した後、前駆脂肪細胞の増殖を抑制する顕著な効果を示した。この部分はアンカフラビンとモナスシンが紅麹の体脂肪を減らす効能においてその有効成分の１つであることを実証した。
【００２２】
２．前駆脂肪細胞の分化率の測定（中性脂肪含量の測定）
分化を誘導する過程中において５０、１００、２００μｇ／ｍＬの紅麹米及び紅麹ヤマイモの水製造物を添加し、分化後８日目に細胞を収集して中性脂肪（Ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ, ＴＧ）含量を分析した。合成ＴＧ油滴は、脂肪細胞分化の晩期指標となり、このため細胞中のＴＧ含量が分化効率の判断によく用いられている。図６Ａ及び図６Ｂを参照しながら説明すると、図６Ａ及び図６Ｂに示すように研究の結果で各用量群はいずれも明らかに３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の分化を抑制でき、ＴＧ含量が約５０％降下したことを示した。
【００２３】
図６Ｃ及び図６Ｄを参照しながら説明すると、図６Ｃ及び図６Ｄに示すように５０、７５、１００μｇ／ｍＬの紅麹米のエタノール製造物は、明らかに３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の分化を抑制する効果があり、抑制率がそれぞれ２６％、４９．３％及び５３％となった。５０μｇ／ｍＬの紅麹ヤマイモのエタノール製造物が明らかに細胞分化を抑制でき、抑制率が約５４．９％であった。
【００２４】
次に、図６Ｅを参照しながら説明すると、図６Ｅに示すように紅麹の二次代謝産物であるアンカフラビンが濃度０．１２５ｍｇ／ｍＬ、０．２５ｍｇ／ｍＬの場合、明らかに３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞の分化を抑制でき、抑制率がそれぞれ４１．２％、２９．９％であった。図６Ｆを参照しながら説明すると、図６Ｆに示すように紅麹の二次代謝産物であるモナスシンが濃度０．１２５ｍｇ／ｍＬの場合、前駆脂肪細胞についての抑制率が３１．２％であった。
【００２５】
[動物実験]
１．体重及び体脂肪
開始した際の平均体重に顕著な差異がないことを原則とし、ラットをランダムに９群に分け、１群を８匹とした。実験中、同時に高脂肪食及び紅麹生成成分の組成物を投与し、６週間飼育した後、犠牲及び各種分析を行った。この試験において、次の試験群があり、即ち、Ｃが正常飲食群、ＨＦが高脂肪食群、ＬがモナコリンＫ（ロバスタチン）を与えて飼育した群、Ｒが未発酵の米を与えて飼育した群、Ｄが未発酵のヤマイモを与えて飼育した群、ＲＬが低用量紅麹米を与えて飼育した群、ＲＨが高用量紅麹米を与えて飼育した群、ＤＬが低用量紅麹ヤマイモを与えて飼育した群、ＤＨが高用量紅麹ヤマイモを与えて飼育した群とした。
【００２６】
結果は、下記の表１に示すように、高脂肪食群（ＨＦ）の体重が明らかに正常飲食群（Ｃ）より高く、紅麹発酵生成物を与えて飼育した群別（ＲＬ、ＲＨ、ＤＬ、ＤＨ）の体重がいずれも顕著な減少を示した。体重の変化量において低用量（ＲＬ）、高用量紅麹米群（ＲＨ）及び高用量紅麹ヤマイモ群（ＤＨ）はそれぞれ２１．５％、３０．５％及び２０．０％と明らかに減少し、紅麹米及び高用量紅麹ヤマイモがいずれも体重上昇を緩める効果があることを示した。
【００２７】
【表１】
【００２８】
２．脂肪組織のリポリーシス作用の分析
図７Ａ及び図７Ｂを参照しながら説明すると、図７Ａ及び図７Ｂは、それぞれ紅麹の発酵生成物を与えて飼育し、高脂肪食のＷｉｓｔａｒ雄ラットの腎臓及び副睾丸周囲脂肪組織の脂肪分解作用に対する影響である。紅麹米（ＲＬ及びＲＨ）を与えて飼育すると、腎臓及び副睾丸周囲脂肪組織のリポリーシス効率を明らかに向上した。腎臓周圍脂肪組織の部分において、低用量（ＲＬ）と高用量（ＲＨ）群のリポリーシス効率がそれぞれ約１２．３％及び１７．３％向上した。副睾丸周囲脂肪組織の部分において、それぞれ約２９．０％及び３０．０％向上した。高用量紅麹ヤマイモ（ＤＨ）を与えて飼育すると、副睾丸周囲脂肪組織のリポリーシス効率が約２９．０％向上できた。その他、正常飲食群（Ｃ）の腎臓周圍脂肪組織のリポリーシス効率が高脂肪食群（ＨＦ）より低く、これは一般的な正常状態においてリポリーシス作用が体脂肪量と正比例しているからであり、体脂肪が多ければ多いほど、組織代謝の活性化が益々活発化して代謝バランスのメカニズムを満足することにある。
【産業上の利用可能性】
【００２９】
上記の細胞試験及び動物実験を取りまとめ、本発明では紅麹の発酵生成物が高脂肪食によって起きていた体脂肪の蓄積を改善でき、且つリポリーシスの刺激効果を持ち、体脂肪を形成しにくい健康食品として発展できる。
【００３０】
上記実施例は、本発明の技術思想と特徴のみを説明し、その目的は当該技術分野における熟練者が本発明の内容を理解させると共にこれをもって実施することであり、本発明の特許範囲を限定するものができない。本発明で開示した精神を逸脱しない範囲内において種々の改良変更をなし得ることは、本発明の特許範囲に含むものであるのが勿論である。
【符号の説明】
【００３１】
１０１〜１０６ 本発明の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物の第１の好ましい製造方法のステップ
【特許請求の範囲】
【請求項１】
体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法であって、
紅麹原料に乾燥ステップを施すステップ１と、
乾燥後の前記紅麹原料を粉末状にするステップ２と、
水で粉末状の紅麹原料を特定の温度において特定時間の抽出動作を行うステップ３と、
抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ４と、
ろ過後の濾液を冷凍乾燥させるステップ５、及び、
乾燥後の生成物を特定の溶剤で特定濃度となるよう再溶解し、また、特定の温度において保存するステップ６と、を含むことを特徴とする、
体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項２】
ステップ１、ステップ２、及び、ステップ３で記載する前記紅麹原料は、紅麹米、及び、紅麹ヤマイモから選んで使用することを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項３】
前記紅麹原料の有効成分には、少なくとも１つの紅麹菌の色素（モナスシン）と１つの紅麹色素（アンカフラビン）を含有することを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項４】
前記紅麹菌の色素（モナスシン）の重量比は、１ｇ当たり紅麹原料の中に１〜３０ｍｇの紅麹菌の色素（モナスシン）を含有することを特徴とする請求項３に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項５】
前記アンカフラビンの重量比は、１ｇ当たり紅麹原料の中に０．５〜２５ｍｇの紅麹色素（アンカフラビン）を含有することを特徴とする請求項３に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項６】
前記紅麹原料の有効成分には、少なくとも１つのモナコリンＫを含有し、重量比が１ｇ当たり紅麹原料の中に２ｍｇ〜１５ｍｇのモナコリンＫを含有することを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項７】
ステップ３で記載する前記特定の温度を２５〜６５℃とし、前記特定時間を２４時間以内とすることを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項８】
ステップ４で記載する前記特定の孔径を０．２２μｍ〜０．４５μｍとすることを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項９】
ステップ６で記載する前記特定の溶剤をリン酸緩衝液（ＰＢＳ）とし、前記特定の濃度を５０μｇ／ｍＬ〜２００μｇ／ｍＬとし、前記特定の温度を−２０℃〜７℃とすることを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１０】
体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法であって、
紅麹米に乾燥ステップを施すステップ１と、
乾燥後の前記紅麹米を粉末状にするステップ２と、
粉末状の紅麹米を逆浸透水で特定の温度において特定時間の抽出動作を行うステップ３と、
抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ４と、
ろ過後の非濾液部分を特定濃度のエタノールで再溶解し、且つ、特定の温度において特定時間の抽出動作を行うステップ５と、
抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ６と、
ろ過後の濾液を排気可能な空間に置き、エタノールを自然揮発させるステップ７、及び、
エタノールの揮発を終えてからエタノールで特定の濃度となるよう再溶解し、また、特定の温度において保存するステップ８と、を含むことを特徴とする、
体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１１】
ステップ１、ステップ２、及びステップ３で記載する前記紅麹原料は、紅麹米、及び、紅麹ヤマイモから選んで使用することを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１２】
前記紅麹原料の有効成分には、少なくとも１つの紅麹菌の色素（モナスシン）と１つの紅麹色素（アンカフラビン）を含有することを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１３】
前記紅麹菌の色素（モナスシン）の重量比は、１ｇ当たり紅麹原料の中に１〜３０ｍｇの紅麹菌の色素（モナスシン）を含有することを特徴とする請求項１２に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１４】
前記アンカフラビンの重量比は、１ｇ当たり紅麹原料の中に０．５〜２５ｍｇの紅麹色素（アンカフラビン）を含有することを特徴とする請求項１２に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１５】
前記紅麹原料の有効成分には、少なくとも１つのモナコリンＫを含有し、重量比が１ｇ当たり紅麹原料の中に２ｍｇ〜１５ｍｇのモナコリンＫを含有することを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１６】
ステップ３で記載する前記特定の温度を２５〜６５℃とし、前記特定時間を２４時間以内とすることを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１７】
ステップ４で記載する前記特定の孔径を０．２２μｍ〜０．４５μｍとすることを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１８】
ステップ５で記載する前記特定の濃度を５０％〜９５％とし、前記特定の温度を２５〜６５℃とし、前記特定時間を２４時間とすることを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１９】
ステップ６で記載する前記特定の孔径を０．２２μｍ〜０．４５μｍとすることを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項２０】
ステップ８で記載する前記特定の濃度を５０μｇ／ｍＬ〜２００μｇ／ｍＬとし、前記特定の温度を−２０℃〜７℃とすることを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１】
体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法であって、
紅麹原料に乾燥ステップを施すステップ１と、
乾燥後の前記紅麹原料を粉末状にするステップ２と、
水で粉末状の紅麹原料を特定の温度において特定時間の抽出動作を行うステップ３と、
抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ４と、
ろ過後の濾液を冷凍乾燥させるステップ５、及び、
乾燥後の生成物を特定の溶剤で特定濃度となるよう再溶解し、また、特定の温度において保存するステップ６と、を含むことを特徴とする、
体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項２】
ステップ１、ステップ２、及び、ステップ３で記載する前記紅麹原料は、紅麹米、及び、紅麹ヤマイモから選んで使用することを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項３】
前記紅麹原料の有効成分には、少なくとも１つの紅麹菌の色素（モナスシン）と１つの紅麹色素（アンカフラビン）を含有することを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項４】
前記紅麹菌の色素（モナスシン）の重量比は、１ｇ当たり紅麹原料の中に１〜３０ｍｇの紅麹菌の色素（モナスシン）を含有することを特徴とする請求項３に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項５】
前記アンカフラビンの重量比は、１ｇ当たり紅麹原料の中に０．５〜２５ｍｇの紅麹色素（アンカフラビン）を含有することを特徴とする請求項３に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項６】
前記紅麹原料の有効成分には、少なくとも１つのモナコリンＫを含有し、重量比が１ｇ当たり紅麹原料の中に２ｍｇ〜１５ｍｇのモナコリンＫを含有することを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項７】
ステップ３で記載する前記特定の温度を２５〜６５℃とし、前記特定時間を２４時間以内とすることを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項８】
ステップ４で記載する前記特定の孔径を０．２２μｍ〜０．４５μｍとすることを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項９】
ステップ６で記載する前記特定の溶剤をリン酸緩衝液（ＰＢＳ）とし、前記特定の濃度を５０μｇ／ｍＬ〜２００μｇ／ｍＬとし、前記特定の温度を−２０℃〜７℃とすることを特徴とする請求項１に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１０】
体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法であって、
紅麹米に乾燥ステップを施すステップ１と、
乾燥後の前記紅麹米を粉末状にするステップ２と、
粉末状の紅麹米を逆浸透水で特定の温度において特定時間の抽出動作を行うステップ３と、
抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ４と、
ろ過後の非濾液部分を特定濃度のエタノールで再溶解し、且つ、特定の温度において特定時間の抽出動作を行うステップ５と、
抽出した生成物を特定の孔径のある濾過膜でろ過するステップ６と、
ろ過後の濾液を排気可能な空間に置き、エタノールを自然揮発させるステップ７、及び、
エタノールの揮発を終えてからエタノールで特定の濃度となるよう再溶解し、また、特定の温度において保存するステップ８と、を含むことを特徴とする、
体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１１】
ステップ１、ステップ２、及びステップ３で記載する前記紅麹原料は、紅麹米、及び、紅麹ヤマイモから選んで使用することを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１２】
前記紅麹原料の有効成分には、少なくとも１つの紅麹菌の色素（モナスシン）と１つの紅麹色素（アンカフラビン）を含有することを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１３】
前記紅麹菌の色素（モナスシン）の重量比は、１ｇ当たり紅麹原料の中に１〜３０ｍｇの紅麹菌の色素（モナスシン）を含有することを特徴とする請求項１２に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１４】
前記アンカフラビンの重量比は、１ｇ当たり紅麹原料の中に０．５〜２５ｍｇの紅麹色素（アンカフラビン）を含有することを特徴とする請求項１２に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１５】
前記紅麹原料の有効成分には、少なくとも１つのモナコリンＫを含有し、重量比が１ｇ当たり紅麹原料の中に２ｍｇ〜１５ｍｇのモナコリンＫを含有することを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１６】
ステップ３で記載する前記特定の温度を２５〜６５℃とし、前記特定時間を２４時間以内とすることを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１７】
ステップ４で記載する前記特定の孔径を０．２２μｍ〜０．４５μｍとすることを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１８】
ステップ５で記載する前記特定の濃度を５０％〜９５％とし、前記特定の温度を２５〜６５℃とし、前記特定時間を２４時間とすることを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項１９】
ステップ６で記載する前記特定の孔径を０．２２μｍ〜０．４５μｍとすることを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【請求項２０】
ステップ８で記載する前記特定の濃度を５０μｇ／ｍＬ〜２００μｇ／ｍＬとし、前記特定の温度を−２０℃〜７℃とすることを特徴とする請求項１０に記載の体脂肪形成を阻害できる紅麹生成成分の組成物製造方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５Ａ】
【図５Ｂ】
【図５Ｃ】
【図５Ｄ】
【図５Ｅ】
【図５Ｆ】
【図６Ａ】
【図６Ｂ】
【図６Ｃ】
【図６Ｄ】
【図６Ｅ】
【図６Ｆ】
【図７Ａ】
【図７Ｂ】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５Ａ】
【図５Ｂ】
【図５Ｃ】
【図５Ｄ】
【図５Ｅ】
【図５Ｆ】
【図６Ａ】
【図６Ｂ】
【図６Ｃ】
【図６Ｄ】
【図６Ｅ】
【図６Ｆ】
【図７Ａ】
【図７Ｂ】
【公開番号】特開２０１０−２６０８４４（Ｐ２０１０−２６０８４４Ａ）
【公開日】平成２２年１１月１８日（２０１０．１１．１８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−６０１７（Ｐ２０１０−６０１７）
【出願日】平成２２年１月１４日（２０１０．１．１４）
【出願人】（５０７４２２８２８）サンウェイ バイオテック シーオー エルティディ (3)
【氏名又は名称原語表記】ＳＵＮＷＡＹ ＢＩＯＴＥＣＨ ＣＯ．，ＬＴＤ
【住所又は居所原語表記】２Ｆ．，Ｎｏ．１，Ａｌｌｅｙ ３０，Ｌａｎｅ ３５８，Ｒｕｅｉｇｕａｎｇ Ｒｄ．，Ｎｅｉｈｕ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｔａｉｐｅｉ Ｃｉｔｙ １１４，Ｔａｉｗａｎ，Ｒ．Ｏ．Ｃ．
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１１月１８日（２０１０．１１．１８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１月１４日（２０１０．１．１４）
【出願人】（５０７４２２８２８）サンウェイ バイオテック シーオー エルティディ (3)
【氏名又は名称原語表記】ＳＵＮＷＡＹ ＢＩＯＴＥＣＨ ＣＯ．，ＬＴＤ
【住所又は居所原語表記】２Ｆ．，Ｎｏ．１，Ａｌｌｅｙ ３０，Ｌａｎｅ ３５８，Ｒｕｅｉｇｕａｎｇ Ｒｄ．，Ｎｅｉｈｕ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｔａｉｐｅｉ Ｃｉｔｙ １１４，Ｔａｉｗａｎ，Ｒ．Ｏ．Ｃ．
【Ｆターム（参考）】
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