喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物およびその製造方法
【課題】本発明は、喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物及びその製造方法に関するものであり、より詳しくは、喫煙により体内に溜まったニコチンを除去でき、且つ喫煙により体内に不足しやすい抗酸化栄養素を供給できるようにした喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物およびその製造方法に関する。
【解決手段】本発明は、甘草２０〜２７％、山査子２〜６％、藁本１〜３％、五加皮２〜４％、何首烏２〜５％、丁香３〜６％、陳皮８〜１０％、蘿蔔子３〜６％、桔梗５〜１０％、アロエ２１〜２６％、牛蒡子１８〜２０％の漢方薬材抽出物と、ビタミンＣ３０〜２００ｍｇおよびβ-カロチン１５００〜２００００ＩＵを混合して構成することを特徴とする。本発明による抗酸化栄養素補充組成物によれば、喫煙により喫煙者および喫煙経験者の体内に溜まったニコチンを除去でき、且つ不足しやすい抗酸化栄養素を補充できる効果がある。
【解決手段】本発明は、甘草２０〜２７％、山査子２〜６％、藁本１〜３％、五加皮２〜４％、何首烏２〜５％、丁香３〜６％、陳皮８〜１０％、蘿蔔子３〜６％、桔梗５〜１０％、アロエ２１〜２６％、牛蒡子１８〜２０％の漢方薬材抽出物と、ビタミンＣ３０〜２００ｍｇおよびβ-カロチン１５００〜２００００ＩＵを混合して構成することを特徴とする。本発明による抗酸化栄養素補充組成物によれば、喫煙により喫煙者および喫煙経験者の体内に溜まったニコチンを除去でき、且つ不足しやすい抗酸化栄養素を補充できる効果がある。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物およびその製造方法に関することであり、より詳しくは、喫煙により体内に溜まったニコチンを素早く除去し、且つ喫煙により体内に不足しやすい抗酸化栄養素を供給できるようにした喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物およびその製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
一般に抗酸化作用とは、人間の代謝過程や酸素の過剰摂取などで発生する過剰酸素、すなわち活性酸素種(reactive oxygen species)が強力な細胞毒性を有しているため、体内の抗酸化物質がこれを除去する作用を意味するものである。
【０００３】
特に、前記活性酸素種は喫煙によって多く発生するが、前記喫煙によって発生した活性酸素種は、細胞の構成物質であるたんぱく質、脂質、核酸などを損傷させ、細胞と組織の損傷による疾病すなわち癌、十二指腸潰瘍、潰瘍性大腸炎など各種疾病を誘発させる。
【０００４】
前記活性酸素種を分解する抗酸化物質は、有害酸素除去酵素(ＳＯＤ：superoxide dismutase)、カタラーゼ(catalase)、グルタシオン・ペロキシターゼ(glutathione peroxidase)などの酵素系と、ビタミンＣ、ビタミンＥ、カロチノイドなどの抗酸化栄養素と、に大きく区分される。
【０００５】
前記活性酸素種が体内に多くなると、多量の抗酸化栄養素が消耗され、特に喫煙者は、体内の抗酸化栄養素の中で、ビタミンＣ、α-カロチン、β-カロチン、クリプトキサンチンなどのカロチノイドが足りなくなると知られている。(Wei W et al.,2001)
【０００６】
前記ビタミンＣの場合、喫煙者は、非喫煙者に比べて平均２７％程度、喫煙経験者に比べて６％程度、少ない量しか体内に保有していないと報告されており(Herbert JR et al., 1994)、β-カロチンなどのカロチノイドの場合は、非喫煙者に比べて２５％以上も少ない量しか体内に保有していないと報告された。(Alberg AJ et al., 2000, Marangon K et al., 1998)
【０００７】
前記のような活性酸素種を除去するために、数多くの抗酸化組成物が報告されている。例えば、『抗酸化組成物』（特許文献１）には、ラクトフェリン銅、ラクトフェリン亜鉛及びラクトフェリンマンガンからなる群より選択されるラクトフェリン化合物の１種又は２種以上を有効成分として含有する抗酸化組成物が開示されている。しかし、喫煙により不足する抗酸化栄養素を補充するための抗酸化組成物は報告されていない。
【特許文献１】特開平１０−２３６９７５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
前記の問題点を解決するために、本発明は、抗酸化活性の優れた漢方薬材と、抗酸化栄養素のビタミンＣとカロチノイドとを一定の比率で混合した組成物を服用することで、喫煙により体内に溜まったニコチンを除去し、且つ体内に不足しやすい抗酸化栄養素を補充することができる組成物およびその製造方法を提供することにその目的がある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
前記の目的を達成するための本発明は、甘草２０〜２７％、山査子２〜６％、藁本１〜３％、五加皮２〜４％、何首烏２〜５％、丁香３〜６％、陳皮８〜１０％、蘿蔔子３〜６％、桔梗５〜１０％、アロエ２１〜２６％、牛蒡子１８〜２０％の漢方薬材抽出物と、ビタミンＣ３０〜２００ｍｇ、β-カロチン１５００〜２００００ＩＵとを混合して構成することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１０】
前記のように、本発明による抗酸化栄養素補充組成物によれば、喫煙により喫煙者および喫煙経験者の体内のニコチンを除去でき、且つ不足しやすい抗酸化栄養素を補充できる効果がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下、本発明を好適な実施例を通して詳細に説明すると次の通りである。
本発明は、漢方薬合編に登載されている処方箋に登場する各漢方薬材のうち、処方頻度数の高い薬材の中から、特に気管支および肺の機能に関連した薬材を選別し、これら漢方薬材文献上の抗酸化効能報告を参考にして、２２種の漢方薬材を下記の表１のように選別した。
【００１２】
【表１】
【００１３】
前記選別された漢方薬材を使用して試料を作り、抗酸化活性とニコチン分解活性を測定するための実験を下記のように行った。
【００１４】
前記試料は、選別された漢方薬材を細切し、これを１０ｇずつ８０％メタノール５００ｍＬで２４時間振蕩抽出してから、濾過紙(Toyo No.1)を用いて濾過し、前記濾過液を回転真空濃縮器(Eyela NE1S, Japan)で濃縮して、各漢方薬材のメタノール抽出濃縮液を製造した。
【００１５】
前記濃縮液は、８０％メタノールに溶かして、最終体積を１０ｍＬにして冷凍保管し、使用前に解凍して、適切な濃度で希釈して使用した。
【００１６】
実験１）抗酸化活性測定
前記選別された漢方薬材の抗酸化活性の測定は、不飽和脂肪酸ラジカルのモデルとして安定した遊離ラジカルのα、α-diphenyl-β-picrylhydrazyl radical(ＤＰＰＨ°)を用いて、一定量の試料溶液との反応によりＤＰＰＨ-ラジカルが減少する程度を分光光度計で測定して、間接的に試料の抗酸化活性を測定する方法(Brand-Williams et al., 1995)を使用し、対照群として試料溶液の代わりに、同量の８０％メタノール溶液を使用した。一方、抗酸化活性を５１７ｎｍでＤＰＰＨの吸光度を５０％まで減少させるために必要な漢方薬材の量をＩＣ50(μｇ/ｍＬ)で表示した。
【００１７】
【表２】
【００１８】
前記のような方法で全部で２２種の選別された漢方薬材の抗酸化活性に対する結果を表２に示した。
【００１９】
表２で、選別された漢方薬材のＩＣ50値が１５０μｇ/ｍＬより少ない漢方薬材は、丁香(３０μｇ/ｍＬ)、牛蒡子(３２μｇ/ｍＬ)、山査子(５１μｇ/ｍＬ)、五加皮(５４μｇ/ｍＬ)、三白草(５４μｇ/ｍＬ)、升麻(６４μｇ/ｍＬ)、甘草(６９μｇ/ｍＬ)、羌活(８６μｇ/ｍＬ)、乾姜(８４μｇ/ｍＬ)、沢瀉(１０４μｇ/ｍＬ)、および陳皮(１２５μｇ/ｍＬ)と示され、この中で丁香(３０μｇ/ｍＬ)と牛蒡子(３２μｇ/ｍＬ)は、非常に高い抗酸化活性で、少量でもＤＰＰＨをよく吸収した。各数値に表示された添え字は、５％有意水準での前記選別された漢方薬材間の有意的な差異を示す。
【００２０】
実験２）ニコチン分解活性測定
前記ニコチン分解活性は、細胞培養を通して測定するが、漢方薬材がニコチン代謝に与える効果を測定するために、予備培養が完了したＰＬＣ/ＰＲＦ５細胞をＰＢＳ(phosphate buffered saline)で洗浄してから、ニコチンストック(stock)溶液１０μｌを含有した培地３ｍｌで２４時間培養し、各漢方薬材を添加して１時間追加培養し、ニコチンから転換されたコチニンの含量を測定する。前記コチニン含量は、Barlowなど(１９８７)が提案したコチニンの定量法(１９８７)による方法を変形して４９０ｎｍで測定した。
【００２１】
前記表２でＮＤＡ(Nicotine degradation activity)は、ＰＬＣ/ＰＲＦ５細胞培養時にニコチンをコチニンに分解して排出することに関与する漢方薬材の抽出物の影響(１時間培養)である。
【００２２】
すなわち、前記ＮＤＡは、漢方薬材抽出物を処理し測定した吸光度に対し、１時間培養後測定した吸光度の比率で測定する。
【００２３】
前記実験２で選別された漢方薬材のニコチン分解に及ぶ効果は、漢方薬材抽出物を添加して、１時間の間ＰＬＣ/ＰＲＦ５細胞を培養した結果、ある漢方薬材(ｐ＜０.０５)はニコチン分解活性に有意的な差異を示した。最高と最低のニコチン分解活性は、それぞれ１.８１と１.０１と示された。
【００２４】
前記ニコチン分解活性の中で、１.２以上の高いニコチン分解活性を示す１４種類の漢方薬材のうち９種類の漢方薬材は、ＩＣ50値が１５０μｇ/ｍＬより低い値で抗酸化活性を示した。
【００２５】
しかし、黄耆、人参、前胡、藁本のような漢方薬材は高いニコチン分解活性値と低い抗酸化活性を示し、羌活、乾姜、藁本、桔梗、蘿蔔子、山豆根、山査子、牛蒡子、升麻、アロエ、陳皮は他の漢方薬材に比べて(Ｒ2＝０.２７)抗酸化活性とニコチン分解活性値との間で高い相関関係(Ｒ2＝０.８６)を示した。このような結果は、漢方薬材の抗酸化活性がニコチン分解機能と密接な関係を有していることを意味する結果であり、これら組成物が喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物の良い材料として活用できることを意味する。
【００２６】
以下、前記実験１、２を通して、抗酸化活性がニコチン分解機能と密接な関係のある漢方薬材を用いて本発明の好適な実施例を開示する。
【００２７】
前記抗酸化活性およびニコチンをコチニンに転換して排出する効果が優れた漢方薬材を、甘草２０〜２７％、山査子２〜６％、藁本１〜３％、五加皮２〜４％、何首烏２〜５％、丁香３〜６％、陳皮８〜１０％、蘿蔔子３〜６％、桔梗５〜１０％、アロエ２１〜２６％、牛蒡子１８〜２０％の一定比率で混合したものに、８０％エタノールを７倍入れて８５℃で４時間以上還流冷却しながら抽出した後、抽出液を真空濃縮し、この抽出物を濃縮する過程で完全濃縮せず固形物濃度１０〜１５ブリックス程度まで濃縮してから少量の賦形剤を添加し、最終濃度を１５〜２０ブリックスにして漢方薬材抽出物を噴霧乾燥した粉末を製造し、これをビタミンＣ１００ｍｇ、β-カロチン３０００ＩＵと一定の比率で混合するが、表３のような比率で混合した。
【００２８】
【表３】
【００２９】
前記実施例の組成物に対する抗酸化活性とニコチン分解活性を測定した結果、表４のようにＩＣ50値が９９〜１１２μｇ/ｍＬ、ＮＤＡ１.２８〜１.３８で、高い抗酸化活性とニコチン分解活性を示した。
【００３０】
【表４】
【００３１】
前記実施例の組成物のうち、抗酸化活性とニコチン分解活性が最も高い組成物を対象に、最も適合した抗酸化栄養素の配合比率を選定して、表５のように抗酸化栄養素補充組成物を形成した。
【００３２】
【表５】
【００３３】
前記抗酸化栄養素補充組成物に対する抗酸化活性とニコチン分解活性を測定した結果、表６のようにＩＣ50値が９１〜１２３μｇ/ｍＬ、ＮＤＡ１.３２〜１.４１で、高い抗酸化活性とニコチン分解活性を示した。
【００３４】
【表６】
【００３５】
前記本発明の実施例で形成された抗酸化栄養素補充組成物の服用による効果を観察するために、８週間の動物実験を通して喫煙時に発生する活性酸素種により肺細胞の脂肪が過酸化することを防止する効果を測定した。
【００３６】
前記動物実験は、五つの実施例処理群と一つの対照群に分けてＩＣＲ系雄の白鼠１０匹ずつを割り当て、一般固形飼料(三養社)を自由に食べさせるようにした。
【００３７】
各処理群には、一日１０本分のタバコの煙を吸入させ、前記抗酸化栄養素補充組成物(体重１００ｇ当り一日１０ｍｇ)を飲用水に溶かして飲用するようにする一方、対照群は一般飲用水を飲用するようにした。
【００３８】
実験を始めてから８週後、それぞれの処理群から肺細胞を摘出し、細胞内に生成した脂質過酸化物の量を測定して、ＭＤＡ当量(free malondialdehyde equivalent)で示した。この時のＭＤＡの量は、試料１ｍＬ当り２ｍＬのＴCＡ(trichloroacetate-HCl)溶液を加えて、沸いている水に１５分間湯煎してから冷やし、これを遠心分離して上層液を取ってから５３５ｎｍで吸光度を測定し、対照群での測定値に対する比率をパーセンテージで計算してＭＤＡ当量として定義した。
【００３９】
【表７】
【００４０】
前記表７は、抗酸化栄養素補充組成物に対する動物の生体内の抗酸化活性をＭＤＡ当量で示したものであって、前記組成物を服用することにより、脂質過酸化作用に対する予防効果および喫煙による損傷から細胞膜を保護することを意味する。
【００４１】
従って、前記実施例１２の組成比率で形成された抗酸化栄養素補充組成物が、抗酸化活性とニコチン分解活性が最も良い実施例である。
【００４２】
以下、本発明の実施例１２の組成比率で形成された抗酸化栄養素補充組成物の製造方法を説明する。
【００４３】
前記実施例１２の漢方薬材の比率に従って混合したものに、８０％エタノールを７倍入れて、８５℃で４時間以上還流冷却しながら抽出した後抽出液を真空濃縮し、この抽出物を濃縮する過程(抽出段階)で完全濃縮せず、固形物濃度１０〜１５ブリックス程度まで濃縮した後、少量の賦形剤を添加し、最終の濃度を１５〜２０ブリックスにして噴霧乾燥した粉末(以下、‘ＮＰＬ-Ｘ’と称する)を製造(粉末製造段階)し、これをビタミンＣ２００ｍｇとβ-カロチン２００００ＩＵと一定の比率で混合(混合段階)し打錠して、抗酸化栄養素補充組成物を形成することができる。
【００４４】
なお、本発明は、前記ＮＰＬ-Ｘ１.０〜５.０％とビタミンＣ３０ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵなどを一定の比率で混合し、これにガムベース、糖類および香料を添加してガム組成物を形成することができ、
前記ＮＰＬ-Ｘ１.０〜５.０％とビタミンＣ１５０ｍｇ、β-カロチン１５０００ＩＵなどを一定の比率で混合し、これに甘味料、酸味料および香料を添加して、飲料組成物を製造することができ、
前記ＮＰＬ-Ｘ１.０〜５.０％とビタミンＣ２００ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵなどを一定の比率で混合し、これに粉末性糖類および香料を添加して、キャンディ組成物を製造することができる。
【００４５】
本発明の組成物は、前記実施例１２の漢方薬材の比率に従って混合したものに、８０％エタノールを７倍入れて、８５℃で４時間以上還流冷却しながら抽出(抽出段階)した後、抽出液を真空濃縮し、最終濃度を５５〜６５ブリックスにした(濃縮液製造段階)濃縮液(以下、‘ＮＰＬ-Ｃ’と称する)１.０〜５.０％とビタミンＣ１５０ｍｇ、β-カロチン１５０００ＩＵを一定の比率で混合し、甘味料、酸味料および香料を添加(飲料製造段階)して抗酸化栄養素補充組成物を飲料として形成することができる。
【００４６】
なお、本発明は、ＮＰＬ-Ｃ１.０〜５.０％とビタミンＣ２００ｍｇ、β-カロチン２００００ＩＵなどを一定の比率で混合し、これを可食性皮膜材に注入して、抗酸化栄養素補充組成物を軟質カプセルとして形成することができ、ＮＰＬ-Ｃ１.０〜５.０％とビタミンＣ３０ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵなどを一定の比率で混合し、これにガムベース、糖類および香料を添加してガム組成物を製造することができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物およびその製造方法に関することであり、より詳しくは、喫煙により体内に溜まったニコチンを素早く除去し、且つ喫煙により体内に不足しやすい抗酸化栄養素を供給できるようにした喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物およびその製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
一般に抗酸化作用とは、人間の代謝過程や酸素の過剰摂取などで発生する過剰酸素、すなわち活性酸素種(reactive oxygen species)が強力な細胞毒性を有しているため、体内の抗酸化物質がこれを除去する作用を意味するものである。
【０００３】
特に、前記活性酸素種は喫煙によって多く発生するが、前記喫煙によって発生した活性酸素種は、細胞の構成物質であるたんぱく質、脂質、核酸などを損傷させ、細胞と組織の損傷による疾病すなわち癌、十二指腸潰瘍、潰瘍性大腸炎など各種疾病を誘発させる。
【０００４】
前記活性酸素種を分解する抗酸化物質は、有害酸素除去酵素(ＳＯＤ：superoxide dismutase)、カタラーゼ(catalase)、グルタシオン・ペロキシターゼ(glutathione peroxidase)などの酵素系と、ビタミンＣ、ビタミンＥ、カロチノイドなどの抗酸化栄養素と、に大きく区分される。
【０００５】
前記活性酸素種が体内に多くなると、多量の抗酸化栄養素が消耗され、特に喫煙者は、体内の抗酸化栄養素の中で、ビタミンＣ、α-カロチン、β-カロチン、クリプトキサンチンなどのカロチノイドが足りなくなると知られている。(Wei W et al.,2001)
【０００６】
前記ビタミンＣの場合、喫煙者は、非喫煙者に比べて平均２７％程度、喫煙経験者に比べて６％程度、少ない量しか体内に保有していないと報告されており(Herbert JR et al., 1994)、β-カロチンなどのカロチノイドの場合は、非喫煙者に比べて２５％以上も少ない量しか体内に保有していないと報告された。(Alberg AJ et al., 2000, Marangon K et al., 1998)
【０００７】
前記のような活性酸素種を除去するために、数多くの抗酸化組成物が報告されている。例えば、『抗酸化組成物』（特許文献１）には、ラクトフェリン銅、ラクトフェリン亜鉛及びラクトフェリンマンガンからなる群より選択されるラクトフェリン化合物の１種又は２種以上を有効成分として含有する抗酸化組成物が開示されている。しかし、喫煙により不足する抗酸化栄養素を補充するための抗酸化組成物は報告されていない。
【特許文献１】特開平１０−２３６９７５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
前記の問題点を解決するために、本発明は、抗酸化活性の優れた漢方薬材と、抗酸化栄養素のビタミンＣとカロチノイドとを一定の比率で混合した組成物を服用することで、喫煙により体内に溜まったニコチンを除去し、且つ体内に不足しやすい抗酸化栄養素を補充することができる組成物およびその製造方法を提供することにその目的がある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
前記の目的を達成するための本発明は、甘草２０〜２７％、山査子２〜６％、藁本１〜３％、五加皮２〜４％、何首烏２〜５％、丁香３〜６％、陳皮８〜１０％、蘿蔔子３〜６％、桔梗５〜１０％、アロエ２１〜２６％、牛蒡子１８〜２０％の漢方薬材抽出物と、ビタミンＣ３０〜２００ｍｇ、β-カロチン１５００〜２００００ＩＵとを混合して構成することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１０】
前記のように、本発明による抗酸化栄養素補充組成物によれば、喫煙により喫煙者および喫煙経験者の体内のニコチンを除去でき、且つ不足しやすい抗酸化栄養素を補充できる効果がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
以下、本発明を好適な実施例を通して詳細に説明すると次の通りである。
本発明は、漢方薬合編に登載されている処方箋に登場する各漢方薬材のうち、処方頻度数の高い薬材の中から、特に気管支および肺の機能に関連した薬材を選別し、これら漢方薬材文献上の抗酸化効能報告を参考にして、２２種の漢方薬材を下記の表１のように選別した。
【００１２】
【表１】
【００１３】
前記選別された漢方薬材を使用して試料を作り、抗酸化活性とニコチン分解活性を測定するための実験を下記のように行った。
【００１４】
前記試料は、選別された漢方薬材を細切し、これを１０ｇずつ８０％メタノール５００ｍＬで２４時間振蕩抽出してから、濾過紙(Toyo No.1)を用いて濾過し、前記濾過液を回転真空濃縮器(Eyela NE1S, Japan)で濃縮して、各漢方薬材のメタノール抽出濃縮液を製造した。
【００１５】
前記濃縮液は、８０％メタノールに溶かして、最終体積を１０ｍＬにして冷凍保管し、使用前に解凍して、適切な濃度で希釈して使用した。
【００１６】
実験１）抗酸化活性測定
前記選別された漢方薬材の抗酸化活性の測定は、不飽和脂肪酸ラジカルのモデルとして安定した遊離ラジカルのα、α-diphenyl-β-picrylhydrazyl radical(ＤＰＰＨ°)を用いて、一定量の試料溶液との反応によりＤＰＰＨ-ラジカルが減少する程度を分光光度計で測定して、間接的に試料の抗酸化活性を測定する方法(Brand-Williams et al., 1995)を使用し、対照群として試料溶液の代わりに、同量の８０％メタノール溶液を使用した。一方、抗酸化活性を５１７ｎｍでＤＰＰＨの吸光度を５０％まで減少させるために必要な漢方薬材の量をＩＣ50(μｇ/ｍＬ)で表示した。
【００１７】
【表２】
【００１８】
前記のような方法で全部で２２種の選別された漢方薬材の抗酸化活性に対する結果を表２に示した。
【００１９】
表２で、選別された漢方薬材のＩＣ50値が１５０μｇ/ｍＬより少ない漢方薬材は、丁香(３０μｇ/ｍＬ)、牛蒡子(３２μｇ/ｍＬ)、山査子(５１μｇ/ｍＬ)、五加皮(５４μｇ/ｍＬ)、三白草(５４μｇ/ｍＬ)、升麻(６４μｇ/ｍＬ)、甘草(６９μｇ/ｍＬ)、羌活(８６μｇ/ｍＬ)、乾姜(８４μｇ/ｍＬ)、沢瀉(１０４μｇ/ｍＬ)、および陳皮(１２５μｇ/ｍＬ)と示され、この中で丁香(３０μｇ/ｍＬ)と牛蒡子(３２μｇ/ｍＬ)は、非常に高い抗酸化活性で、少量でもＤＰＰＨをよく吸収した。各数値に表示された添え字は、５％有意水準での前記選別された漢方薬材間の有意的な差異を示す。
【００２０】
実験２）ニコチン分解活性測定
前記ニコチン分解活性は、細胞培養を通して測定するが、漢方薬材がニコチン代謝に与える効果を測定するために、予備培養が完了したＰＬＣ/ＰＲＦ５細胞をＰＢＳ(phosphate buffered saline)で洗浄してから、ニコチンストック(stock)溶液１０μｌを含有した培地３ｍｌで２４時間培養し、各漢方薬材を添加して１時間追加培養し、ニコチンから転換されたコチニンの含量を測定する。前記コチニン含量は、Barlowなど(１９８７)が提案したコチニンの定量法(１９８７)による方法を変形して４９０ｎｍで測定した。
【００２１】
前記表２でＮＤＡ(Nicotine degradation activity)は、ＰＬＣ/ＰＲＦ５細胞培養時にニコチンをコチニンに分解して排出することに関与する漢方薬材の抽出物の影響(１時間培養)である。
【００２２】
すなわち、前記ＮＤＡは、漢方薬材抽出物を処理し測定した吸光度に対し、１時間培養後測定した吸光度の比率で測定する。
【００２３】
前記実験２で選別された漢方薬材のニコチン分解に及ぶ効果は、漢方薬材抽出物を添加して、１時間の間ＰＬＣ/ＰＲＦ５細胞を培養した結果、ある漢方薬材(ｐ＜０.０５)はニコチン分解活性に有意的な差異を示した。最高と最低のニコチン分解活性は、それぞれ１.８１と１.０１と示された。
【００２４】
前記ニコチン分解活性の中で、１.２以上の高いニコチン分解活性を示す１４種類の漢方薬材のうち９種類の漢方薬材は、ＩＣ50値が１５０μｇ/ｍＬより低い値で抗酸化活性を示した。
【００２５】
しかし、黄耆、人参、前胡、藁本のような漢方薬材は高いニコチン分解活性値と低い抗酸化活性を示し、羌活、乾姜、藁本、桔梗、蘿蔔子、山豆根、山査子、牛蒡子、升麻、アロエ、陳皮は他の漢方薬材に比べて(Ｒ2＝０.２７)抗酸化活性とニコチン分解活性値との間で高い相関関係(Ｒ2＝０.８６)を示した。このような結果は、漢方薬材の抗酸化活性がニコチン分解機能と密接な関係を有していることを意味する結果であり、これら組成物が喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物の良い材料として活用できることを意味する。
【００２６】
以下、前記実験１、２を通して、抗酸化活性がニコチン分解機能と密接な関係のある漢方薬材を用いて本発明の好適な実施例を開示する。
【００２７】
前記抗酸化活性およびニコチンをコチニンに転換して排出する効果が優れた漢方薬材を、甘草２０〜２７％、山査子２〜６％、藁本１〜３％、五加皮２〜４％、何首烏２〜５％、丁香３〜６％、陳皮８〜１０％、蘿蔔子３〜６％、桔梗５〜１０％、アロエ２１〜２６％、牛蒡子１８〜２０％の一定比率で混合したものに、８０％エタノールを７倍入れて８５℃で４時間以上還流冷却しながら抽出した後、抽出液を真空濃縮し、この抽出物を濃縮する過程で完全濃縮せず固形物濃度１０〜１５ブリックス程度まで濃縮してから少量の賦形剤を添加し、最終濃度を１５〜２０ブリックスにして漢方薬材抽出物を噴霧乾燥した粉末を製造し、これをビタミンＣ１００ｍｇ、β-カロチン３０００ＩＵと一定の比率で混合するが、表３のような比率で混合した。
【００２８】
【表３】
【００２９】
前記実施例の組成物に対する抗酸化活性とニコチン分解活性を測定した結果、表４のようにＩＣ50値が９９〜１１２μｇ/ｍＬ、ＮＤＡ１.２８〜１.３８で、高い抗酸化活性とニコチン分解活性を示した。
【００３０】
【表４】
【００３１】
前記実施例の組成物のうち、抗酸化活性とニコチン分解活性が最も高い組成物を対象に、最も適合した抗酸化栄養素の配合比率を選定して、表５のように抗酸化栄養素補充組成物を形成した。
【００３２】
【表５】
【００３３】
前記抗酸化栄養素補充組成物に対する抗酸化活性とニコチン分解活性を測定した結果、表６のようにＩＣ50値が９１〜１２３μｇ/ｍＬ、ＮＤＡ１.３２〜１.４１で、高い抗酸化活性とニコチン分解活性を示した。
【００３４】
【表６】
【００３５】
前記本発明の実施例で形成された抗酸化栄養素補充組成物の服用による効果を観察するために、８週間の動物実験を通して喫煙時に発生する活性酸素種により肺細胞の脂肪が過酸化することを防止する効果を測定した。
【００３６】
前記動物実験は、五つの実施例処理群と一つの対照群に分けてＩＣＲ系雄の白鼠１０匹ずつを割り当て、一般固形飼料(三養社)を自由に食べさせるようにした。
【００３７】
各処理群には、一日１０本分のタバコの煙を吸入させ、前記抗酸化栄養素補充組成物(体重１００ｇ当り一日１０ｍｇ)を飲用水に溶かして飲用するようにする一方、対照群は一般飲用水を飲用するようにした。
【００３８】
実験を始めてから８週後、それぞれの処理群から肺細胞を摘出し、細胞内に生成した脂質過酸化物の量を測定して、ＭＤＡ当量(free malondialdehyde equivalent)で示した。この時のＭＤＡの量は、試料１ｍＬ当り２ｍＬのＴCＡ(trichloroacetate-HCl)溶液を加えて、沸いている水に１５分間湯煎してから冷やし、これを遠心分離して上層液を取ってから５３５ｎｍで吸光度を測定し、対照群での測定値に対する比率をパーセンテージで計算してＭＤＡ当量として定義した。
【００３９】
【表７】
【００４０】
前記表７は、抗酸化栄養素補充組成物に対する動物の生体内の抗酸化活性をＭＤＡ当量で示したものであって、前記組成物を服用することにより、脂質過酸化作用に対する予防効果および喫煙による損傷から細胞膜を保護することを意味する。
【００４１】
従って、前記実施例１２の組成比率で形成された抗酸化栄養素補充組成物が、抗酸化活性とニコチン分解活性が最も良い実施例である。
【００４２】
以下、本発明の実施例１２の組成比率で形成された抗酸化栄養素補充組成物の製造方法を説明する。
【００４３】
前記実施例１２の漢方薬材の比率に従って混合したものに、８０％エタノールを７倍入れて、８５℃で４時間以上還流冷却しながら抽出した後抽出液を真空濃縮し、この抽出物を濃縮する過程(抽出段階)で完全濃縮せず、固形物濃度１０〜１５ブリックス程度まで濃縮した後、少量の賦形剤を添加し、最終の濃度を１５〜２０ブリックスにして噴霧乾燥した粉末(以下、‘ＮＰＬ-Ｘ’と称する)を製造(粉末製造段階)し、これをビタミンＣ２００ｍｇとβ-カロチン２００００ＩＵと一定の比率で混合(混合段階)し打錠して、抗酸化栄養素補充組成物を形成することができる。
【００４４】
なお、本発明は、前記ＮＰＬ-Ｘ１.０〜５.０％とビタミンＣ３０ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵなどを一定の比率で混合し、これにガムベース、糖類および香料を添加してガム組成物を形成することができ、
前記ＮＰＬ-Ｘ１.０〜５.０％とビタミンＣ１５０ｍｇ、β-カロチン１５０００ＩＵなどを一定の比率で混合し、これに甘味料、酸味料および香料を添加して、飲料組成物を製造することができ、
前記ＮＰＬ-Ｘ１.０〜５.０％とビタミンＣ２００ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵなどを一定の比率で混合し、これに粉末性糖類および香料を添加して、キャンディ組成物を製造することができる。
【００４５】
本発明の組成物は、前記実施例１２の漢方薬材の比率に従って混合したものに、８０％エタノールを７倍入れて、８５℃で４時間以上還流冷却しながら抽出(抽出段階)した後、抽出液を真空濃縮し、最終濃度を５５〜６５ブリックスにした(濃縮液製造段階)濃縮液(以下、‘ＮＰＬ-Ｃ’と称する)１.０〜５.０％とビタミンＣ１５０ｍｇ、β-カロチン１５０００ＩＵを一定の比率で混合し、甘味料、酸味料および香料を添加(飲料製造段階)して抗酸化栄養素補充組成物を飲料として形成することができる。
【００４６】
なお、本発明は、ＮＰＬ-Ｃ１.０〜５.０％とビタミンＣ２００ｍｇ、β-カロチン２００００ＩＵなどを一定の比率で混合し、これを可食性皮膜材に注入して、抗酸化栄養素補充組成物を軟質カプセルとして形成することができ、ＮＰＬ-Ｃ１.０〜５.０％とビタミンＣ３０ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵなどを一定の比率で混合し、これにガムベース、糖類および香料を添加してガム組成物を製造することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
漢方薬材の甘草、山査子、藁本、五加皮、何首烏、丁香、陳皮、蘿蔔子、桔梗、アロエ、牛蒡子の抽出物と、ビタミンＣ、カロチノイドとを混合して製造したことを特徴とする喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項２】
前記漢方薬材の混合比率は、それぞれ甘草２０〜２７％、山査子２〜６％、藁本１〜３％、五加皮２〜４％、何首烏２〜５％、丁香３〜６％、陳皮８〜１０％、蘿蔔子３〜６％、桔梗５〜１０％、アロエ２１〜２６％、牛蒡子１８〜２０％であることを特徴とする請求項１に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項３】
前記ビタミンＣは３０〜２００ｍｇ、カロチノイドはβ-カロチンを使用するが、１５００〜２００００ＩＵを含有したことを特徴とする請求項１に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項４】
甘草２０〜２７％、山査子２〜６％、藁本１〜３％、五加皮２〜４％、何首烏２〜５％、丁香３〜６％、陳皮８〜１０％、蘿蔔子３〜６％、桔梗５〜１０％、アロエ２１〜２６％、牛蒡子１８〜２０％を混合したものに対して８０％エタノールを加え、８５℃で４時間以上還流冷却しながら抽出した後、抽出液を真空濃縮する抽出段階と、
前記抽出段階の抽出液を濃縮する過程で完全濃縮せず、固形物濃度１０〜１５ブリックス程度まで濃縮してから、少量の賦形剤を添加して、最終濃度を１５〜２０ブリックスにして、噴霧乾燥して粉末を製造する段階と、
からなることを特徴とする喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物の製造方法。
【請求項５】
前記粉末製造段階は、抽出段階の抽出液を真空濃縮して、最終濃度を５５〜６５ブリックスにした浸液を製造する浸液製造段階からなり、
前記浸液製造段階で製造された浸液１.０〜５.０％と、ビタミンＣ３０〜２００ｍｇ、β-カロチン１５００〜２００００ＩＵおよび甘味料、酸味料、香料を添加する飲料製造段階で形成されることを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物の製造方法。
【請求項６】
前記粉末１.０〜５.０％、前記ビタミンＣ３０ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵを混合し、ガムベース、糖類および香料を添加して、ガムとして製造されたことを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物 。
【請求項７】
前記粉末１.０〜５.０％、前記ビタミンＣ２００ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵを混合し、粉末性糖類および香料を添加して、キャンディとして製造されたことを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物 。
【請求項８】
前記粉末製造段階は、抽出段階の抽出液を真空濃縮して、最終濃度を５５〜６５ブリックスにした浸液を製造する浸液製造段階からなり、製造された浸液１.０〜５.０％とビタミンＣ２００ｍｇおよびβ-カロチン２００００ＩＵを混合し、これを可食性皮膜材に注入して、軟質カプセルとして製造されたことを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項９】
前記粉末製造段階は、抽出段階の抽出液を真空濃縮して、最終濃度を５５〜６５ブリックスにした浸液を製造する浸液製造段階からなり、製造された浸液１.０〜５.０％と、前記ビタミンＣ３０ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵを混合し、ガムベース、糖類および香料を添加して、ガムとして製造されたことを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項１０】
前記粉末製造段階で形成された粉末に、ビタミンＣ３０〜２００ｍｇとβ-カロチン１５００〜２００００ＩＵを混合して、打錠する段階をさらに含むことを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項１１】
請求項４の粉末製造段階で製造された粉末１.０〜５.０％とビタミンＣ１５０ｍｇおよびβ-カロチン１５０００ＩＵを混合し、甘味料、酸味料、香料を添加して飲料として製造したことを特徴とする喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項１】
漢方薬材の甘草、山査子、藁本、五加皮、何首烏、丁香、陳皮、蘿蔔子、桔梗、アロエ、牛蒡子の抽出物と、ビタミンＣ、カロチノイドとを混合して製造したことを特徴とする喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項２】
前記漢方薬材の混合比率は、それぞれ甘草２０〜２７％、山査子２〜６％、藁本１〜３％、五加皮２〜４％、何首烏２〜５％、丁香３〜６％、陳皮８〜１０％、蘿蔔子３〜６％、桔梗５〜１０％、アロエ２１〜２６％、牛蒡子１８〜２０％であることを特徴とする請求項１に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項３】
前記ビタミンＣは３０〜２００ｍｇ、カロチノイドはβ-カロチンを使用するが、１５００〜２００００ＩＵを含有したことを特徴とする請求項１に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項４】
甘草２０〜２７％、山査子２〜６％、藁本１〜３％、五加皮２〜４％、何首烏２〜５％、丁香３〜６％、陳皮８〜１０％、蘿蔔子３〜６％、桔梗５〜１０％、アロエ２１〜２６％、牛蒡子１８〜２０％を混合したものに対して８０％エタノールを加え、８５℃で４時間以上還流冷却しながら抽出した後、抽出液を真空濃縮する抽出段階と、
前記抽出段階の抽出液を濃縮する過程で完全濃縮せず、固形物濃度１０〜１５ブリックス程度まで濃縮してから、少量の賦形剤を添加して、最終濃度を１５〜２０ブリックスにして、噴霧乾燥して粉末を製造する段階と、
からなることを特徴とする喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物の製造方法。
【請求項５】
前記粉末製造段階は、抽出段階の抽出液を真空濃縮して、最終濃度を５５〜６５ブリックスにした浸液を製造する浸液製造段階からなり、
前記浸液製造段階で製造された浸液１.０〜５.０％と、ビタミンＣ３０〜２００ｍｇ、β-カロチン１５００〜２００００ＩＵおよび甘味料、酸味料、香料を添加する飲料製造段階で形成されることを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物の製造方法。
【請求項６】
前記粉末１.０〜５.０％、前記ビタミンＣ３０ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵを混合し、ガムベース、糖類および香料を添加して、ガムとして製造されたことを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物 。
【請求項７】
前記粉末１.０〜５.０％、前記ビタミンＣ２００ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵを混合し、粉末性糖類および香料を添加して、キャンディとして製造されたことを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物 。
【請求項８】
前記粉末製造段階は、抽出段階の抽出液を真空濃縮して、最終濃度を５５〜６５ブリックスにした浸液を製造する浸液製造段階からなり、製造された浸液１.０〜５.０％とビタミンＣ２００ｍｇおよびβ-カロチン２００００ＩＵを混合し、これを可食性皮膜材に注入して、軟質カプセルとして製造されたことを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項９】
前記粉末製造段階は、抽出段階の抽出液を真空濃縮して、最終濃度を５５〜６５ブリックスにした浸液を製造する浸液製造段階からなり、製造された浸液１.０〜５.０％と、前記ビタミンＣ３０ｍｇ、β-カロチン１５００ＩＵを混合し、ガムベース、糖類および香料を添加して、ガムとして製造されたことを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項１０】
前記粉末製造段階で形成された粉末に、ビタミンＣ３０〜２００ｍｇとβ-カロチン１５００〜２００００ＩＵを混合して、打錠する段階をさらに含むことを特徴とする請求項４に記載の喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【請求項１１】
請求項４の粉末製造段階で製造された粉末１.０〜５.０％とビタミンＣ１５０ｍｇおよびβ-カロチン１５０００ＩＵを混合し、甘味料、酸味料、香料を添加して飲料として製造したことを特徴とする喫煙者および喫煙経験者のための抗酸化栄養素補充組成物。
【公開番号】特開２００６−２４９０８８（Ｐ２００６−２４９０８８Ａ）
【公開日】平成１８年９月２１日（２００６．９．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−６５０１３（Ｐ２００６−６５０１３）
【出願日】平成１８年３月１０日（２００６．３．１０）
【出願人】（５０６０８３６７１）
【氏名又は名称原語表記】ＰＡＲＫ， ＳＵＮ ＨＯ
【住所又は居所原語表記】１０２−１９０１， ＳｕｎｇＷｏｎ Ａｐｔ．， １５５２−１９（４５／４）， Ｄａｄａｅ−ｄｏｎｇ， Ｓａｈａ−ｇｕ， Ｂｕｓａｎ， Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ
【出願人】（５０６０８３６８２）
【氏名又は名称原語表記】ＬＥＥ， ＨＯ ＪＡＥ
【住所又は居所原語表記】１０９−１１０２， Ｂｙｕｃｋｓａｎ Ａｐｔ．， Ｊｗａ−ｄｏｎｇ， Ｈａｅｕｎｄａｅ−ｇｕ， Ｂｕｓａｎ， Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年９月２１日（２００６．９．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年３月１０日（２００６．３．１０）
【出願人】（５０６０８３６７１）
【氏名又は名称原語表記】ＰＡＲＫ， ＳＵＮ ＨＯ
【住所又は居所原語表記】１０２−１９０１， ＳｕｎｇＷｏｎ Ａｐｔ．， １５５２−１９（４５／４）， Ｄａｄａｅ−ｄｏｎｇ， Ｓａｈａ−ｇｕ， Ｂｕｓａｎ， Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ
【出願人】（５０６０８３６８２）
【氏名又は名称原語表記】ＬＥＥ， ＨＯ ＪＡＥ
【住所又は居所原語表記】１０９−１１０２， Ｂｙｕｃｋｓａｎ Ａｐｔ．， Ｊｗａ−ｄｏｎｇ， Ｈａｅｕｎｄａｅ−ｇｕ， Ｂｕｓａｎ， Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ
【Ｆターム（参考）】
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