癌治療又は血管形成関連障害の治療に有用な、エフリンB2又はEphB4活性を阻害するポリペプチド組成物及び方法。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
EphB4蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する単離された可溶性ポリペプチドであり、該EphB4ポリペプチドは単量体であり、特異的にエフリンB2ポリペプチドへ結合する。
【請求項２】
上記EphB4蛋白質の球状領域を含有する請求項１の可溶性ポリペプチド。
【請求項３】
図６５により特定されるアミノ酸配列の残基１〜５２２と少なくとも９０％同一の配列を含有する請求項１の可溶性ポリペプチド。
【請求項４】
図６５により特定されるアミノ酸配列の残基１〜４１２と少なくとも９０％同一の配列を含有する請求項１の可溶性ポリペプチド。
【請求項５】
図６５により特定されるアミノ酸配列の残基１〜３１２と少なくとも９０％同一の配列を含有する請求項１の可溶性ポリペプチド。
【請求項６】
図１又は２により特定される配列を含有する請求項１の可溶性ポリペプチド。
【請求項７】
上記可溶性ポリペプチドはエフリンB2及びEphB4間の相互作用を抑制する請求項１の可溶性ポリペプチド。
【請求項８】
上記可溶性ポリペプチドはエフリンB2又はEphB4のクラスター化を抑制する請求項１の可溶性ポリペプチド。
【請求項９】
上記可溶性ポリペプチドは、エフリンB2又はEphB4のリン酸化を抑制する請求項１の可溶性ポリペプチド。
【請求項１０】
上記可溶性ポリペプチドは融合蛋白質である請求項１の可溶性ポリペプチド。
【請求項１１】
上記可溶性ポリペプチドは１以上の改質したアミノ酸残基を含有する請求項１の可溶性ポリペプチド。
【請求項１２】
エフリンB2蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する単離された可溶性ポリペプチドであり、該可溶性エフリンB2ポリペプチドは単量体であり、高親和でEphB4ポリペプチドへ結合するポリペプチド。
【請求項１３】
図６６により特定されるアミノ酸配列の残基１〜２２５を含有する請求項１２の可溶性ポリペプチド。
【請求項１４】
図３により特定される配列を含有する請求項１２の可溶性ポリペプチド。
【請求項１５】
上記可溶性ポリペプチドはエフリンB2及びEphB4間の相互作用を抑制する請求項１２の可溶性ポリペプチド。
【請求項１６】
上記可溶性ポリペプチドは、エフリンB2又はEphB4のクラスター化を抑制する請求項１２の可溶性ポリペプチド。
【請求項１７】
上記可溶性ポリペプチドは、エフリンB2又はEphB4のリン酸化を抑制する請求項１２の可溶性ポリペプチド。
【請求項１８】
上記可溶性ポリペプチドは融合蛋白質である請求項１２の可溶性ポリペプチド。
【請求項１９】
上記可溶性ポリペプチドは１以上の改質したアミノ酸残基を含有する請求項１２の可溶性ポリペプチド。
【請求項２０】
請求項１の可溶性ポリペプチド及び医薬的に適用可能なキャリアを含有する医薬的組成物。
【請求項２１】
請求項１２の可溶性ポリペプチド及び医薬的に適用可能なキャリアを含有する医薬的組成物。
【請求項２２】
請求項１の可溶性ポリペプチド及び医薬的に適用可能なキャリアを含有する化粧品組成物。
【請求項２３】
請求項１２の可溶性ポリペプチド及び医薬的に適用可能なキャリアを含有する化粧品組成物。
【請求項２４】
請求項１の可溶性ポリペプチド及び医薬的に適用可能なキャリアを含有する診断用キット。
【請求項２５】
請求項１２の可溶性ポリペプチド及びキャリアを含有する診断用キット。
【請求項２６】
（ａ）EphB4蛋白質の細胞外領域へ結合し、EphB4の活性を抑制する抗体；及び（ｂ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域へ結合し、エフリンB2の活性を抑制する抗体、の群から選ばれるアンタゴニスト抗体。
【請求項２７】
上記アンタゴニスト抗体はエフリンB2及びEphB4間の相互作用を抑制する請求項２６のアンタゴニスト抗体。
【請求項２８】
上記アンタゴニスト抗体はエフリンB2又はEphB4のクラスター化を抑制する請求項２６のアンタゴニスト抗体。
【請求項２９】
上記アンタゴニスト抗体は、エフリンB2又はEphB4のリン酸化を抑制する請求項２６のアンタゴニスト抗体。
【請求項３０】
上記アンタゴニスト抗体は、モノクローナル抗体である請求項２６のアンタゴニスト抗体。
【請求項３１】
上記アンタゴニスト抗体は、ポリクローナル抗体である請求項２６のアンタゴニスト抗体。
【請求項３２】
請求項２６のアンタゴニスト抗体及び医薬的に適用可能なキャリアを含有する医薬的組成物。
【請求項３３】
請求項２６のアンタゴニスト抗体及び医薬的に適用可能なキャリアを含有する化粧品組成物。
【請求項３４】
請求項２６のアンタゴニスト抗体及びキャリアを含有する診断用キット。
【請求項３５】
細胞を有効量の請求項１の可溶性ポリペプチドと接触させるステップを含む、該細胞中のエフリンB2／EphB4経路を通るシグナルの抑制方法。
【請求項３６】
細胞を有効量の請求項１２の可溶性ポリペプチドと接触させるステップを含む、該細胞中のエフリンB2／EphB4経路を通るシグナルの抑制方法。
【請求項３７】
細胞を有効量の請求項２６の可溶性ポリペプチドと接触させるステップを含む、該細胞中のエフリンB2／EphB4経路を通るシグナルの抑制方法。
【請求項３８】
腫瘍の成長速度を減少させるのに充分な量のポリペプチド薬を投与する腫瘍の成長速度を減少させる方法であり、上記ポリペプチド薬は下記群から選ばれる方法：
（ａ）EphB4蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記EphB4ポリペプチドは単量体であり、特異的にエフリンB2ポリペプチドへ結合する；
（ｂ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記可溶性エフリンB2ポリペプチドは単量体であり、高親和でEphB4ポリペプチドへ結合する；
（ｃ）EphB4蛋白質の細胞外領域へ結合し、EphB4の活性を抑制する抗体；及び
（ｄ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域へ結合し、エフリンB2の活性を抑制する抗体。
【請求項３９】
上記腫瘍は比較用組織の非癌細胞よりも高レベルのEphB4及び／又はエフリンB2を発現する細胞を含有する請求項３８の方法。
【請求項４０】
下記群から選ばれるポリペプチド薬を患者へ投与することを含む癌患者の治療方法：
（ａ）EphB4蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記EphB4ポリペプチドは単量体であり、特異的にエフリンB2ポリペプチドへ結合する；
（ｂ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記可溶性エフリンB2ポリペプチドは単量体であり、高親和でEphB4ポリペプチドへ結合する；
（ｃ）EphB4蛋白質の細胞外領域へ結合し、EphB4の活性を抑制する抗体；及び
（ｄ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域へ結合し、エフリンB2の活性を抑制する抗体。
【請求項４１】
上記癌は比較用組織の非癌細胞よりも高レベルのエフリンB2及び／又はEphB4を発現する癌細胞を含有する請求項４０の方法。
【請求項４２】
上記癌は転移性癌である請求項４０の方法。
【請求項４３】
上記腫瘍は、腸(colon)癌、乳癌、中皮腫、前立腺腫瘍、扁平上皮細胞癌、カポジ肉腫、及び白血病の群から選ばれる請求項４０の方法。
【請求項４４】
上記癌は血管形成依存性癌である請求項４０の方法。
【請求項４５】
上記癌は血管形成独立性癌である請求項４０の方法。
【請求項４６】
上記ポリペプチド薬は、エフリンB2及びEphB4間の相互作用を抑制する請求項４０の方法。
【請求項４７】
上記ポリペプチド薬は、エフリンB2又はEphB4のクラスター化を抑制する請求項４０の方法。
【請求項４８】
上記ポリペプチド薬は、エフリンB2又はEphB4のリン酸化を抑制する請求項４０の方法。
【請求項４９】
上記ポリペプチド薬は、医薬的に適用可能なキャリアと配合される請求項４０の方法。
【請求項５０】
更に、ポリペプチド薬と添加的又は相乗的に癌細胞を抑制する、少なくとも１の追加的抗癌化学療法用試薬の投与ステップを含む、請求項４０の方法。
【請求項５１】
細胞を、血管形成の阻害に充分な量のポリペプチド薬と接触させるステップを含む、血管形成抑制方法であり、上記ポリペプチド薬は下記群から選ばれる方法：
（ａ）EphB4蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記EphB4ポリペプチドは単量体であり、特異的にエフリンB2ポリペプチドへ結合する；
（ｂ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記可溶性エフリンB2ポリペプチドは単量体であり、高親和でEphB4ポリペプチドへ結合する；
（ｃ）EphB4蛋白質の細胞外領域へ結合し、EphB4の活性を抑制する抗体；及び
（ｄ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域へ結合し、エフリンB2の活性を抑制する抗体。
【請求項５２】
上記細胞はEphB4又はエフリンB2を発現する請求項５１の方法。
【請求項５３】
下記群から選ばれるポリペプチド薬を患者へ投与するステップを含む、血管形成関連障害の患者の治療方法：
（ａ）EphB4蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記EphB4ポリペプチドは単量体であり、特異的にエフリンB2ポリペプチドへ結合する；
（ｂ）エフリンＢＳ蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記可溶性エフリンB2ポリペプチドは単量体であり、高親和でEphB4ポリペプチドへ結合する；
（ｃ）EphB4蛋白質の細胞外領域へ結合し、EphB4の活性を抑制する抗体；及び
（ｄ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域へ結合し、エフリンB2の活性を抑制する抗体。
【請求項５４】
上記可溶性ポリペプチドは、医薬的に適用可能なキャリアと配合される請求項５３の方法。
【請求項５５】
上記血管形成関連障害は、血管形成依存性癌、良性腫瘍、炎症性障害、慢性間接リューマチ及び乾癬、眼性血管形成病、オスラーウェバー症候群、心筋性血管形成、プラーク新生血管形成、毛細血管拡張症、血友病性関節、繊維血管腫、外傷性顆粒化、創傷治癒、毛細血管拡張乾癬強皮症、化膿性肉芽腫、冠状側副(cororany collaterals)、虚血肢血管形成、ルベオーシス、関節炎、糖尿病性新生血管形成、骨折、脈管形成、並びに血液新生の群から選ばれる請求項５３の方法。
【請求項５６】
更に、可溶性ポリペプチドと添加的又は相乗的に血管形成を抑制する、少なくとも１の追加的抗血管形成試薬の投与ステップを含む、請求項５３の方法。
【請求項５７】
ポリペプチド薬は下記群から選ばれる、癌治療用医薬品の製造におけるポリペプチド薬の使用：
（ａ）EphB4蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記EphB4ポリペプチドはエフリンB2ポリペプチドへ特異的に結合する単量体である；
（ｂ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記可溶性エフリンB2ポリペプチドは単量体であり、高親和でEphB4ポリペプチドへ結合する；
（ｃ）EphB4蛋白質の細胞外領域へ結合し、EphB4の活性を抑制する抗体；及び
（ｄ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域へ結合し、エフリンB2の活性を抑制する抗体。
【請求項５８】
ポリペプチド薬は下記群から選ばれる、血管形成関連障害治療用医薬品の製造におけるポリペプチド薬の使用：
（ａ）EphB4蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記EphB4ポリペプチドは単量体であり、特異的にエフリンB2ポリペプチドへ結合する；
（ｂ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記可溶性エフリンB2ポリペプチドは単量体であり、高親和でEphB4ポリペプチドへ結合する；
（ｃ）EphB4蛋白質の細胞外領域へ結合し、EphB4の活性を抑制する抗体；及び
（ｄ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域へ結合し、エフリンB2の活性を抑制する抗体。
【請求項５９】
下記ステップを含有する癌患者の治療方法：
（ａ）患者中の、EphB4及び／又はエフリンB2を発現する複数の癌細胞を有する腫瘍を特定するステップ；並びに
（ｂ）下記群から選ばれるポリペプチド薬を患者へ投与するステップ：
（ｉ）EphB4蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記EphB4ポリペプチドは単量体であり、特異的にエフリンB2ポリペプチドへ結合する；
（ｉｉ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記可溶性エフリンB2ポリペプチドは単量体であり、高親和でEphB4ポリペプチドへ結合する；
（ｉｉｉ）EphB4蛋白質の細胞外領域へ結合し、EphB4の活性を抑制する抗体；及び
（ｉｖ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域へ結合し、エフリンB2の活性を抑制する抗体。
【請求項６０】
下記ステップを含有する癌患者の治療方法：
（ａ）患者中の、EphB4及び／又はエフリンB2遺伝子の遺伝子増幅を含む複数の癌細胞を有する腫瘍を特定するステップ；並びに
（ｂ）下記群から選ばれるポリペプチド薬を患者へ投与するステップ：
（ｉ）EphB4蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記EphB4ポリペプチドは単量体であり、特異的にエフリンB2ポリペプチドへ結合する；
（ｉｉ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記可溶性エフリンB2ポリペプチドは単量体であり、高親和でEphB4ポリペプチドへ結合する；
（ｉｉｉ）EphB4蛋白質の細胞外領域へ結合し、EphB4の活性を抑制する抗体；及び
（ｉｖ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域へ結合し、エフリンB2の活性を抑制する抗体。
【請求項６１】
エフリンB2又はEphB4アンタゴニストでの治療が適切である腫瘍を特定する方法であり、腫瘍細胞中に１以上の下記特徴を検出する方法：
（ａ）EphB4蛋白質及び／又はｍＲＮＡの発現；
（ｂ）エフリンB2蛋白質及び／又はｍＲＮＡの発現；
（ｃ）EphB4遺伝子の遺伝子増幅；及び
（ｄ）エフリンB2遺伝子の遺伝子増幅、
但し、１以上の上記特徴（ａ）〜（ｄ）を有する腫瘍細胞は、エフリンB2又はEphB4アンタゴニストでの治療が適切である。
【請求項６２】
上記エフリンB2又はEphB4アンタゴニストは下記群から選ばれる請求項６１の方法：
（ａ）EphB4蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記EphB4ポリペプチドは単量体であり、特異的にエフリンB2ポリペプチドへ結合する；
（ｂ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域のアミノ酸配列を含有する可溶性ポリペプチド、但し、上記可溶性エフリンB2ポリペプチドは単量体であり、高親和でEphB4ポリペプチドへ結合する；
（ｃ）EphB4蛋白質の細胞外領域へ結合し、EphB4の活性を抑制する抗体；及び
（ｄ）エフリンB2蛋白質の細胞外領域へ結合し、エフリンB2の活性を抑制する抗体。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】



【図１８】

【図１９】

【図２０】


【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【図４３】

【図４４】

【図４５】

【図４６】

【図４７】

【図４８】


【図５０】

【図５１】

【図５２】


【図５４】

【図５５】

【図５６】

【図５７】

【図５８】

【図５９】

【図６０】

【図６１】








【図６２】


【図６３】













【図６４】


【図６５】

【図６６】

【公表番号】特表２００６−５２１１１１（Ｐ２００６−５２１１１１Ａ）
【公表日】平成１８年９月２１日（２００６．９．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５０７１６０（Ｐ２００６−５０７１６０）
【出願日】平成１６年３月１２日（２００４．３．１２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／００７７５５
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０８０４２５
【国際公開日】平成１６年９月２３日（２００４．９．２３）
【出願人】（５０５３４０９５１）バスジーン　セラピューティクス，　インコーポレイテッド (5)
【Ｆターム（参考）】