２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体を有効成分とするＴＬＲ９阻害剤
【課題】Ｔｏｌｌ様受容体（Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ；ＴＬＲ）９を阻害し、自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶並びにＧｖＨＤの病態の予防及び治療効果を有する化合物の提供。
【解決手段】下記一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物。
【解決手段】下記一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はＴｏｌｌ様受容体（Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ；ＴＬＲ）９阻害作用を有し、ＴＬＲ９シグナルの活性化に起因する疾患、例えば関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防、治療剤として有用な新規化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
病原体が生体に進入すると、免疫系はそれらの病原体をすみやかに識別し排除する。哺乳類では免疫系は大きく自然免疫と獲得免疫に分けることが出来る。獲得免疫では、遺伝子再構成という方法で無数の個々に異なる抗原特異性を有する受容体がＴ細胞やＢ細胞表面に発現され、あらゆる未知の外来抗原に対処する（非特許文献１）。
【０００３】
一方で、マクロファージや樹状細胞などによって担われる自然免疫系は非特異的な免疫応答で微生物の排除が行われると考えられていたが、Ｔｏｌｌ様受容体（Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ；ＴＬＲ）の発見や樹状細胞を中心とした諸研究の急速な進展により、適応免疫系における抗原認識ほどの親和性や特異性は高くない、特徴的な微生物認識機構が存在していることが明らかになってきた（非特許文献２）。とくにＴＬＲに代表される細胞内にシグナルを伝達する認識受容体は、感染をいち早く前線においてキャッチするという役割のみならず、その後、細胞内にシグナルを伝え、自然免疫系活性化のスイッチをオンにする重要な役割がある。その意味において、これまで知られていた自然免疫系の活性化によって誘導されるＩ型インターフェロン等のサイトカインやケモカイン、そして抗原提示に関与する分子群の遺伝子発現誘導と、その後の適応免疫系の活性化へと連携させて特異的な免疫応答発動へと導くという経路が明らかとなった（非特許文献２）。
【０００４】
ＴＬＲ９は細菌のＣｐＧ ＤＮＡを認識して活性化される。ＣｐＧ ＤＮＡは細菌のゲノムＤＮＡの特徴的な配列で、メチル化されてないＣｐＧ配列がある頻度で繰り返されている。哺乳類のゲノムＤＮＡではＣｐＧ配列の頻度が少なく高頻度にメチル化されているため、免疫賦活作用はない（非特許文献３）
【０００５】
これまでＤＮＡセンサーの一つとして知られていたＴＬＲ９に関しては多くの研究がなされ、その詳細がかなり明らかになってきている。ＴＬＲ９はエンドソームやライソソームにおいて細胞外に存在するＤＮＡを認識する受容体として機能し、Ｉ型インターフェロンや炎症性サイトカインの遺伝子発現を誘導する。この両者ともＭｙＤ８８依存性のシグナル伝達経路を介するが、前者がＩＲＡＫ１／ＩＫＫα−ＩＲＦ−７が関与するのに対し、後者では、ＮＦ−κＢやＩＲＦ−５やＭＡＰキナーゼの経路が関与する。ＭｙＤ８８にはＩＲＦ−７やＩＲＦ−５の他に、ＩＲＦ−１やＩＲＦ−４が会合することが知られているが（非特許文献４、５、６）、ＴＬＲ９下流で関与するＩＲＦ転写因子の種類や役割は細胞の種類によって異なっている。
【０００６】
上記に示したようにＴＬＲ９はＤＮＡをリガンドとして認識するが、正常な状態では自己ＤＮＡはリガンドとして認識されず、自然免疫を活性化しない。これは細胞死により放出された自己ＤＮＡは血清中のヌクレアーゼによりＴＬＲにより認識される前に分解されるからである。またＴＬＲ９の細胞表面ではなく、エンドソームでの細胞内局在も自己ＤＮＡを認識しない機構として考えられている。
【０００７】
しかしながら、自己免疫反応や炎症が起こっている状況下ではこのような防御機構が破綻し、内在性のタンパク質と複合体を形成し、ＴＬＲ９シグナルを活性化することが考えられる（非特許文献７）。
【０００８】
これらのことからＴＬＲ９を阻害することにより、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の病態を改善することが可能であると考えられる。
【０００９】
関節リウマチ（ＲＡ）についてはＴＬＲ９阻害作用を有する核酸配列を用いて、ＴＬＲ９を阻害することによりプリスタン誘導性ラット関節炎モデルにおいて発症と病態が抑制されたことが報告されている（非特許文献８）。また抗マラリア薬であるヒドロキシクロロキンはエンドソームの酸性化抑制によりＴＬＲ７、９の阻害作用を有していることが知られ、日本を除くほとんどの国で関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の治療薬として承認されている（非特許文献９）。
【００１０】
ＳＬＥについてはＴＬＲ９ノックアウトマウスにおいてＳＬＥ様の病体において見られる抗核抗体の減弱が報告されており（非特許文献１０）、ＴＬＲ９阻害作用を有する核酸を用いた実験においても同様の結果が報告されている（非特許文献１１）。さらに同様の結果を有する低分子化合物についても報告されている（ＣＰＧ５２３６４：特許文献１）。
【００１１】
ヒドロキシクロロキンはＴＬＲ９阻害作用としてはそれほど強くなく、さらに強いＴＬＲ９阻害作用を有する薬剤により、より強力な薬効が期待できる。またヒドロキシクロロキンにはクロロキン網膜症などの副作用が知られているが、異なる骨格の化合物により、このような副作用の懸念は払拭できる可能性も考えられる。したがって、強いＴＬＲ９阻害作用を示し、経口投与可能な低分子性の薬剤が、今後の関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の治療において有用であると考えられる。
【００１２】
抗炎症作用を有するテトラヒドロピリドピリミジン誘導体としては、これまでにＴＡＲＣ（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｌｉｇａｎｄ １７）モジュレータ（特許文献２）やＰＤＥ７（Ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ ７）阻害剤（特許文献３）、ｍＴＯＲ（Ｍａｍｍａｌｉａｎ ｔａｒｇｅｔ ｏｆ ｒａｐａｍｙｃｉｎ）阻害剤（特許文献４）、バニロイド受容体アンタゴニスト（特許文献５）、５−ＨＴ（５−ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ）阻害剤（特許文献６）などが報告されている。しかし、これらいずれの文献においても、ＴＬＲ９阻害作用に関連する記載や示唆はない。また、自己免疫性疾患に関する効果については記載も示唆もない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】ＷＯ２００８／１５２４７１号パンフレット
【特許文献２】ＷＯ２００３／１０４２３０号パンフレット
【特許文献３】ＷＯ２００２／０８７５１３号パンフレット
【特許文献４】ＷＯ２０１０／１０３０９４号パンフレット
【特許文献５】ＷＯ２００５／０６６１７１号パンフレット
【特許文献６】ＷＯ２０１０／０５３８２５号パンフレット
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】植松智ら ウイルス、５４：１４５−１５２（２００４）
【非特許文献２】高岡晃教ら ウイルス、５８：３７−４６（２００８）
【非特許文献３】Ｔａｋｅｄａ Ｋ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎｕ．，Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２１：３３５−３７６（２００３）
【非特許文献４】Ｈｏｎｄａ Ｋ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０１：１５４１６−１５４２１（２００４）
【非特許文献５】Ｎｅｇｉｓｈｉ Ｈ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０２：１５９８９−１５９９４（２００５）
【非特許文献６】Ｎｅｇｉｓｈｉ Ｈ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：１５１３６−１５１４１（２００６）
【非特許文献７】Ｋｉｍ，Ｙ．Ｍ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，４５２：２３４−２３８（２００８）
【非特許文献８】Ｈｅｒｍａｎ，Ｓ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．，７０：Ａ３９ ｄｏｉ：１０．１１３６／ａｒｄ．２０１０．１４８９７３．８（２０１１）
【非特許文献９】横川直人、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｔｈｅｒａｐｙ，２８：８５−９１（２０１０）
【非特許文献１０】Ｓｅａｎ Ｒ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，２０２：３２１−３３１（２００５）
【非特許文献１１】Ｐａｗａｒ Ｒ．Ｄ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ １８：１７２１−１７３１（２００７）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明の目的は、低分子性のＴＬＲ９阻害作用を有する新規化合物を提供することにある。さらに詳細には、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶並びに移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防及び／又は治療に有用な医薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
上記実情に鑑み、本発明者らは、鋭意ＴＬＲ９阻害作用を持つ化合物を探索した結果、下記一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体が、ヒトＴＬＲ９を発現させたヒト胎児腎臓細胞由来のＨＥＫ２９３細胞を用いた試験においてＴＬＲ９阻害作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１７】
すなわち本発明は、次の一般式（１）：
【００１８】
【化１】
【００１９】
［式中、
Ｒ１、Ｒ２は、互いに同一又は異なっていてもよく、水素原子又はＣ１−１０アルキル基を示し、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに同一又は異なっていてもよく、水素原子、Ｃ１−１０アルキル基又はモノ−若しくはジ−Ｃ１−１０アルキルアミノ基で置換されていてもよいＣ１−１０アルキル基を示し、
または、Ｒ３とＲ４は、一緒になって、４〜７員飽和ヘテロ環基を形成し、ここで、前記ヘテロ環基は、同一又は異なる１〜３個のＣ１−１０アルキル基で置換されていてもよい１個又は２個の４〜７員飽和ヘテロ環基で置換されてもよく、
Ａは、Ｃ６−１０芳香環基を示す］
で表される化合物若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＴＬＲ９阻害剤に関する。
【００２０】
さらに詳細には、本発明は、
４−（［１，４’−ビピペリジン］−１’−イル）−７−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン、
７−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン、及び
７−ベンジル−Ｎ４−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ２，Ｎ２，Ｎ４−トリメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン
からなる群から選択される少なくとも１つの化合物若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＴＬＲ９阻害剤に関する。
【００２１】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＴＬＲ９シグナルの活性化に起因する疾患の予防及び／又は治療剤に関する。より詳細には、本発明は、前記一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防及び／又は治療剤に関する。
【００２２】
また、本発明は、ＴＬＲ９シグナルの活性化に起因する疾患、例えば、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶並びに移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）等の予防及び／又は治療剤の製造のための、前記一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の使用に関する。
【００２３】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を患者に投与することを特徴とする、ＴＬＲ９シグナルの活性化に起因する疾患、例えば、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶並びに移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）等の予防及び／又は治療方法に関する。
【発明の効果】
【００２４】
本発明のＴＬＲ９阻害剤の有効成分である、一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物は、ＲＡ、ＳＬＥ、ＳＳ、ＭＳ、ＩＢＤ、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶並びに移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）等の予防及び／又は治療剤として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】化合物１の１Ｈ−ＮＭＲのチャートである。
【図２】化合物２の１Ｈ−ＮＭＲのチャートである。
【図３】化合物３の１Ｈ−ＮＭＲのチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
以下、本発明について詳細に説明する。本発明における用語の定義は以下のとおりである。
【００２７】
本明細書中で使用するとき、「アルキル基」とは、直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を意味する。「アルキル基」は、好ましくは「Ｃ１−１０アルキル基」、より好ましくは「Ｃ１−６アルキル基」、さらにより好ましくは「Ｃ１−３アルキル基」である。ここで、「Ｃ１−１０アルキル基」は、直鎖又は分岐鎖の炭素数１〜１０の飽和炭化水素基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基等が挙げられる。「Ｃ１−６アルキル基」は、直鎖又は分岐鎖の炭素数１〜６の飽和炭化水素基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基等が挙げられる。「Ｃ１−３アルキル基」は、直鎖又は分岐鎖の炭素数１〜３の飽和炭化水素基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基等が挙げられる。
【００２８】
本明細書で使用するとき、「アミノアルキル基」とは、アミノ基が置換した直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を意味する。ここで、「アミノアルキル基」における「アルキル基」部分は、上記で定義したものであってもよい。好ましくは、「アミノＣ１−３アルキル基」であり、具体的には、例えば、アミノメチル基、１−アミノエチル基、２−アミノエチル基、１−アミノ−ｎ−プロピル基、２−アミノ−ｎ−プロピル基、３−アミノ−ｎ−プロピル基、１−アミノイソプロピル基、２−アミノイソプロピル基等が挙げられる。
【００２９】
本明細書で使用するとき、「モノ−又はジ−アルキルアミノ基で置換されたアルキル基」とは、１乃至２個のアルキル基で置換されたアミノ基によって置換された直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を意味する。ここで、前記「アルキル基」部分は、上記で定義したものであってもよい。好ましくは、「モノ（Ｃ１−３アルキル）アミノＣ１−３アルキル基」、「ジ（Ｃ１−３アルキル）アミノＣ１−３アルキル基」であり、具体的には、例えば、メチルアミノメチル基、ジメチルアミノメチル基、エチルメチルアミノメチル基、イソプロピルメチルアミノメチル基、メチル−ｎ−プロピルアミノメチル基、ジエチルアミノメチル基、エチルイソプロピルアミノメチル基、エチル−ｎ−プロピルアミノメチル基、イソプロピル−ｎ−プロピルアミノメチル基、ジイソプロピルアミノメチル基、ジ−ｎ−プロピルアミノメチル基、メチルアミノエチル基、ジメチルアミノエチル基、エチルメチルアミノエチル基、イソプロピルメチルアミノエチル基、メチル−ｎ−プロピルアミノエチル基、ジエチルアミノエチル基、エチルイソプロピルアミノエチル基、エチル−ｎ−プロピルアミノエチル基、イソプロピル−ｎ−プロピルアミノエチル基、ジイソプロピルアミノエチル基、ジ−ｎ−プロピルアミノエチル基、メチルアミノイソプロピル基、ジメチルアミノイソプロピル基、エチルメチルアミノイソプロピル基、イソプロピルメチルアミノイソプロピル基、メチル−ｎ−プロピルアミノイソプロピル基、ジエチルアミノイソプロピル基、エチルイソプロピルアミノイソプロピル基、エチル−ｎ−プロピルアミノイソプロピル基、イソプロピル−ｎ−プロピルアミノイソプロピル基、ジイソプロピルアミノイソプロピル基、ジ−ｎ−プロピルアミノイソプロピル基、メチルアミノ−ｎ−プロピル基、ジメチルアミノ−ｎ−プロピル基、エチルメチルアミノ−ｎ−プロピル基、イソプロピルメチルアミノ−ｎ−プロピル基、メチル−ｎ−プロピルアミノ−ｎ−プロピル基、ジエチルアミノ−ｎ−プロピル基、エチルイソプロピルアミノ−ｎ−プロピル基、エチル−ｎ−プロピルアミノ−ｎ−プロピル基、イソプロピル−ｎ−プロピルアミノ−ｎ−プロピル基、ジイソプロピルアミノ−ｎ−プロピル基、ジ−ｎ−プロピルアミノ−ｎ−プロピル基等が挙げられる。
【００３０】
本明細書で使用するとき、「４〜７員飽和ヘテロ環基」とは、隣接する環員間で多重結合を有さず、１個以上のヘテロ原子環員を含有し、残りの環員が炭素原子である４〜７員の飽和環状基を示す。具体的には、例えば、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、アゼピン、モルホリン、チオモルホリン、チオモルホリンＳ−オキシドおよびＳ，Ｓ−ジオキシド、ピペラジン、ならびにＮ−メチルピペラジン基等が挙げられる。
【００３１】
本明細書で使用するとき、「Ｃ６−１０芳香環基」とは、環員がすべて炭素原子である芳香族基を意味する。具体的には、例えば、フェニル基、アズレニル基、ナフチル基等が挙げられる。好ましくは、フェニル基である。
【００３２】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４におけるＣ１−３アルキルアミノＣ１−３アルキル基としては、ジメチルアミノエチル基が好ましい。
【００３３】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４における４−７員飽和ヘテロ環基としては、ピペリジニル基が好ましい。
【００３４】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４における「置換基を有してもよい４−７員飽和ヘテロ環基」中の置換基としては、ピペラジニル基が好ましい。
【００３５】
一般式（１）中、ＡにおけるＣ６−１０芳香環基としては、フェニル基が好ましい。
【００３６】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体の具体例として、下記化合物を挙げることができる。
【００３７】
【表１】
【００３８】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物は、本発明の２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体のみならず、その医薬として許容される塩、それらの各種の水和物や溶媒和物、及び結晶多形を有する物質、及びこれらの物質のプロドラッグとなる物質を包含している。
【００３９】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体として許容される塩としては、具体的には、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等）や有機酸（例えば、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等）との酸付加塩等が挙げられる。
【００４０】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体やその医薬として許容される塩の溶媒和物としては、水和物や各種の溶媒和物（例えば、エタノール等のアルコールとの溶媒和物等）が挙げられる。
【００４１】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体は、公知の方法（Ｃｈｅｍ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｏｍｐ．、４３、１１６７（２００７））を組み合わせ製造することができる。２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体の製造方法を下記反応工程図に示すが、製造法はこれに限定されるものではない。
【００４２】
【化２】
【００４３】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＡは、前記定義と同じものを示し、Ｘは脱離基を示す。］
【００４４】
［工程１］アミン（ＩＩ）を、過剰量のメチルアクリレート（ＩＩＩ）と反応させ、ジエステル（ＩＶ）を製造することができる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、室温〜１２０℃、好ましくは５０℃〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００４５】
［工程２］ジエステル（ＩＶ）を塩基存在下、Ｄｉｅｃｋｍａｎ環化を行い、ピペリジノン誘導体（Ｖ）を製造することができる。本工程で用いる塩基としては、特に制限はないが、例えば、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、コリジン、ルチジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクテン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルペンチルアミン、トリメチルアミンのような有機塩基類、メトキシナトリウム、エトキシナトリウム、メトキシカリウム、エトキシカリウム、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのような無機塩基類等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−３０〜１２０℃、好ましくは室温〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００４６】
［工程３］ピペリジノン誘導体（Ｖ）を塩基存在下、グアニジン誘導体（ＶＩＩ）と反応させ、テトラヒドロピリドピリミジノン誘導体（ＶＩ）を製造することができる。本工程で用いる塩基としては、特に制限はないが、例えば、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、コリジン、ルチジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクテン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルペンチルアミン、トリメチルアミンのような有機塩基類、メトキシナトリウム、エトキシナトリウム、メトキシカリウム、エトキシカリウム、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのような無機塩基類等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−３０〜１２０℃、好ましくは室温〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００４７】
［工程４］テトラヒドロピリドピリミジノン誘導体（ＶＩ）をハロゲン化剤と反応させ、テトラヒドロピリドピリミジン誘導体（ＶＩＩＩ）を製造することができる。本工程で用いられるハロゲン化剤としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、ホスホリルクロリド、チオニルクロリ等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−３０〜１２０℃、好ましくは室温〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００４８】
また、テトラヒドロピリドピリミジノン誘導体（ＶＩ）を塩基存在下、スルホニル化剤と反応させ、テトラヒドロピリドピリミジン誘導体（ＶＩＩＩ）を製造することができる。本工程で用いられるスルホニル化剤としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、トリフルオロメタンスルホン酸無水物、Ｎ，Ｎ−ビストリフルオロメタンスルホニルアニレン、Ｎ−フェニルビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）、トリクロロメタンスルホニルクロリド、メタンスルホニルクロリド等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程で用いる塩基としては、反応を阻害しにものであれば特に制限はないが、例えば、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、コリジン、ルチジン、Ｎ−メチルモルフォリン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクテン（ＤＡＢＣＯ）、キヌクリジン、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルペンチルアミン、トリメチルアミンのような有機塩基類、メトキシナトリウム、エトキシナトリウム、メトキシカリウム、エトキシカリウム、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのような無機塩基類等が挙げられる。また、ピリジンのような有機塩基類を溶媒兼塩基として使用してもよい。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−７８〜５０℃、好ましくは−７８〜３０℃であり、反応時間は、通常、１分間〜３日間、好ましくは１０分〜１２時間である。
【００４９】
［工程５］テトラヒドロピリドピリミジン誘導体（ＶＩＩ）に対し、塩基存在下、アミン（ＸＩ）を反応させることにより、テトラヒドロピリドピリミジン誘導体（Ｉ）を製造することができる。本工程で用いる塩基としては、特に制限はないが、例えば、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、コリジン、ルチジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクテン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルペンチルアミン、トリメチルアミンのような有機塩基類、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのような無機塩基類等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−３０〜１２０℃、好ましくは室温〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００５０】
［工程６］［工程３］で用いられるグアニジン誘導体（ＶＩＩ）は以下の通り製造することができる。アミン誘導体（ＩＸ）を塩基存在下、プラキサジン（Ｘ）と反応させることにより、グアニジン誘導体（ＶＩＩ）を製造することができる。本工程で用いる塩基としては、特に制限はないが、例えば、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、コリジン、ルチジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクテン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルペンチルアミン、トリメチルアミンのような有機塩基類、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのような無機塩基類等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−３０〜１２０℃、好ましくは室温〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００５１】
前記の各反応で得られた中間体及び目的物は、有機合成化学で常用されている精製法、例えば、ろ過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶、各種クロマトグラフィー等に付して必要に応じて単離、精製することができる。また、中間体においては、特に精製することなく次反応に供することもできる。
【００５２】
さらに、各種の異性体は異性体間の物理化学的性質の差を利用した常法を適用して単離できる。例えば、ラセミ混合物は、例えば、酒石酸等の一般的な光学活性酸とのジアステレオマー塩に導き光学分割する方法、又は、光学活性カラムクロマトグラフィーを用いた方法等の一般的ラセミ分割法により、光学的に純粋な異性体に導くことができる。また、ジアステレオマー混合物は、例えば、分別結晶化又は各種クロマトグラフィー等により分割できる。また、光学活性な化合物は適当な光学活性な原料を用いることにより製造することもできる。
【００５３】
本発明のＴＬＲ９阻害剤、又は自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防及び／又は治療剤は、一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体、その塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分として含有するものであって、医薬組成物として使用することができる。その場合、本発明の化合物を単独で用いてもよいが、通常は医薬として許容される担体、及び／又は希釈剤を配合して使用される。
【００５４】
投与経路は、特に限定されないが、治療目的に応じて適宜選択することができる。例えば、経口剤、注射剤、坐剤、吸入剤等のいずれでもよい。これらの投与形態に適した医薬組成物は、公知の製剤方法を利用することによって製造できる。
【００５５】
経口用固形製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される化合物に医薬として許容される賦形剤、更に必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法を利用して、錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。添加剤は、当該分野で一般的に使用されているものでよい。例えば、賦形剤としては、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等が挙げられる。結合剤としては、例えば、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。崩壊剤としては、例えば、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられる。滑沢剤としては、例えば、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられる。矯味剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。
【００５６】
経口用液体製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される化合物に、矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等を加えて常法を利用して内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。矯味剤としては上記に挙げられたものでよく、緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム等が、安定化剤としては、例えば、トラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
【００５７】
注射剤を調製する場合は、一般式（１）で表される化合物にｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法を利用して皮下、筋肉及び静脈内注射剤を製造することができる。ｐＨ調製剤及び緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。安定化剤としては、例えば、ピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ（エデト酸ナトリウム）、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては、例えば、塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、ブドウ糖等が挙げられる。
【００５８】
坐剤を調製する場合は、一般式（１）で表される化合物に公知の坐剤用担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセライド等、更に必要に応じて界面活性剤（例えば、ツイーン（登録商標））等を加えた後、常法を利用して製造することができる。
【００５９】
上記以外に、常法を利用して適宜好ましい製剤とすることもできる。
【００６０】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体の投与量は年齢、体重、症状、投与形態及び投与回数等によって異なるが、通常は成人に対して一般式（１）で表わされる化合物として１日あたり０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは１ｍｇ〜１０００ｍｇ、より好ましくは１ｍｇ〜５００ｍｇを、１回又は数回に分けて経口投与又は非経口投与するのが好ましい。
【実施例】
【００６１】
以下に実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。なお、下記実施例中で用いられている略号は下記の意味を示す。
１Ｈ−ＮＭＲ：プロトン核磁気共鳴
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
【００６２】
実施例１：（７−ベンジル−４−［１，４’］ビピペリジニル−１’−イル−５，６，７，８−テトラヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イル）ジメチルアミンの製造
［工程１］７−ベンジル−２−ジメチルアミノ−５，６，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オンの製造
エタノール（４００ｍＬ）にメチル １−ベンジル−３−オキソピペリジン−４−カルボキシレート塩酸塩（５３．８ｇ，０．２ｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグアニジン（２６．３ｇ，０．３ｍｏｌ）及びナトリウムエトキシド（３４．０ｇ，０．５ｍｏｌ）を加え、加熱還流下２．５時間撹拌した。反応液を室温まで冷却し、減圧下溶媒を留去し、残渣を飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄後、析出物を濾過し、水、メタノール、エーテルで洗浄し７−ベンジル−２−ジメチルアミノ−５，６，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン（３８ｇ，６６％）を得た。
【００６３】
［工程２］７−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル トリフルオロメタンスルホノエートの製造
７−ベンジル−２−ジメチルアミノ−５，６，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン（５．１２ｇ，０．０１８ｍｏｌ）のピリジン溶液（５０ｍＬ）を−２０℃で撹拌し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（４．２３ｇ，０．０１５ｍｏｌ）を滴下し、室温まで昇温し２０分撹拌した。反応液に水を加え、析出物を濾過し、水で洗浄後乾燥させ７−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル トリフルオロメタンスルホノエート（３．００ｇ，５１％）を得た。
【００６４】
［工程３］（７−ベンジル−４−［１，４’］ビピペリジニル−１’−イル−５，６，７，８−テトラヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イル）ジメチルアミンの製造
７−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル トリフルオロメタンスルホノエート（４１６ｍｇ，１ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液（２ｍＬ）に炭酸カリウム（６９１ｍｇ，５ｍｍｏｌ）と［１，４’］ビピペリジニル（５０４ｍｇ，３ｍｍｏｌ）を加え、１００℃で１２時間撹拌した。反応液を室温まで冷却後、水を加え希釈し、ジクロロメタンを用い抽出後、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下溶媒を留去し、再結晶させ（７−ベンジル−４−［１，４’］ビピペリジニル−１’−イル−５，６，７，８−テトラヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イル）ジメチルアミン（３３９ｍｇ，７８％）を得た。
【００６５】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）を図１に示す。
【００６６】
実施例２：７−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミンの製造
実施例１と同様の手順で製造した。
【００６７】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）を図２に示す。
【００６８】
実施例３：７−ベンジル−Ｎ４−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ２，Ｎ２，Ｎ４−トリメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミンの製造
実施例１と同様の手順で製造した。
【００６９】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）を図３に示す。
【００７０】
［試験例１］ＴＬＲ９発現レポーター細胞を用いたＴＬＲ９活性化阻害試験
１）ＴＬＲ９発現レポーター細胞の樹立
ヒトＴＬＲ９発現細胞は、ヒト胎児腎臓細胞株であるＨＥＫ２９３にヒトＴＬＲ９を発現させた細胞をＩｎｖｉｖｏｇｅｎ社より購入した（ｈＴＬＲ９／２９３ｘＬ）。ｈＴＬＲ９／２９３ｘＬは１０％ウシ胎仔血清、ペニシリン、ストレプトマイシンを含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ（ｓｉｇｍａ））を用いて継代培養した。ＮＦκＢ認識配列の４回繰り返しにホタルルシフェラーゼ遺伝子を連結したｐＧＬ４．２８（Ｐｒｏｍｅｇａ）をＦｕｇｅｎｅ６（Ｒｏｃｈｅ）を用いてリポフェクションにより遺伝子導入した。ハイグロマイシン、ブラストサイジン耐性細胞クローンを選択し、ＴＬＲ９発現レポーター細胞とした（ｈＴＬＲ９ ＮＦκＢ−ｌｕｃ／２９３ｘＬ）。
【００７１】
２）ＴＬＲ９活性化阻害試験
ｈＴＬＲ９ ＮＦκＢ−ｌｕｃ／２９３ｘＬを９６ウェルホワイトマイクロタイタープレートに１．０×１０４／８０μＬで播き、ＣＯ２インキュベータ中で３７℃、１晩培養した。ＤＭＥＭにより希釈した被検化合物（１０μＬ）を添加し、終濃度０．０１、０．０３、０．１、０．３、１μＭとした。１時間後にＴＬＲ９リガンドであるＣｐＧ−Ｂ ＤＮＡ（ＯＤＮ２００６）（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を終濃度１μＭとなるように添加した（１０μＬ）。合計１００μＬとして４時間ＣＯ２インキュベータ中でインキュベート後にルシフェラーゼ活性をＴＬＲ９活性として測定した。ルシフェラーゼ活性はＢｒｉｇｈｔ Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を６０μＬ添加し、マルチマイクロプレートリーダーＡＲＶＯ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）により発光量を測定した。被検化合物を添加していない場合のルシフェラーゼ活性を１００％として、各被検化合物の５０％阻害濃度（ＩＣ５０値）を計算した。
【００７２】
３）結果
化合物１は０．０９μＭ、化合物２は０．１３μＭ、化合物３は０．３１μＭのＩＣ５０値を示した。以上より、本発明の化合物は強いＴＬＲ９阻害作用を有していることが確認された。したがって、本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体は、ＴＬＲ９阻害剤として、ＴＬＲ９シグナルの活性化に関連する疾患、例えば、ＲＡ、ＳＬＥ、ＳＳ、ＭＳ、ＩＢＤ、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防剤や治療剤の有効成分として有用であることがわかった。
また、化合物１、２及び３はＡＳＩＮＥＸ社より入手可能であり、本試験においては同社より購入したものをそのまま用いた。
【産業上の利用可能性】
【００７３】
本発明は、一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物が、優れたＴＬＲ９阻害作用を有していることを初めて見出したものであり、自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防及び／又は治療剤を提供するものである。本発明は、自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防及び／又は治療剤を提供し、製薬工業において有用であり、産業上の利用可能性を有している。
【技術分野】
【０００１】
本発明はＴｏｌｌ様受容体（Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ；ＴＬＲ）９阻害作用を有し、ＴＬＲ９シグナルの活性化に起因する疾患、例えば関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防、治療剤として有用な新規化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
病原体が生体に進入すると、免疫系はそれらの病原体をすみやかに識別し排除する。哺乳類では免疫系は大きく自然免疫と獲得免疫に分けることが出来る。獲得免疫では、遺伝子再構成という方法で無数の個々に異なる抗原特異性を有する受容体がＴ細胞やＢ細胞表面に発現され、あらゆる未知の外来抗原に対処する（非特許文献１）。
【０００３】
一方で、マクロファージや樹状細胞などによって担われる自然免疫系は非特異的な免疫応答で微生物の排除が行われると考えられていたが、Ｔｏｌｌ様受容体（Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ；ＴＬＲ）の発見や樹状細胞を中心とした諸研究の急速な進展により、適応免疫系における抗原認識ほどの親和性や特異性は高くない、特徴的な微生物認識機構が存在していることが明らかになってきた（非特許文献２）。とくにＴＬＲに代表される細胞内にシグナルを伝達する認識受容体は、感染をいち早く前線においてキャッチするという役割のみならず、その後、細胞内にシグナルを伝え、自然免疫系活性化のスイッチをオンにする重要な役割がある。その意味において、これまで知られていた自然免疫系の活性化によって誘導されるＩ型インターフェロン等のサイトカインやケモカイン、そして抗原提示に関与する分子群の遺伝子発現誘導と、その後の適応免疫系の活性化へと連携させて特異的な免疫応答発動へと導くという経路が明らかとなった（非特許文献２）。
【０００４】
ＴＬＲ９は細菌のＣｐＧ ＤＮＡを認識して活性化される。ＣｐＧ ＤＮＡは細菌のゲノムＤＮＡの特徴的な配列で、メチル化されてないＣｐＧ配列がある頻度で繰り返されている。哺乳類のゲノムＤＮＡではＣｐＧ配列の頻度が少なく高頻度にメチル化されているため、免疫賦活作用はない（非特許文献３）
【０００５】
これまでＤＮＡセンサーの一つとして知られていたＴＬＲ９に関しては多くの研究がなされ、その詳細がかなり明らかになってきている。ＴＬＲ９はエンドソームやライソソームにおいて細胞外に存在するＤＮＡを認識する受容体として機能し、Ｉ型インターフェロンや炎症性サイトカインの遺伝子発現を誘導する。この両者ともＭｙＤ８８依存性のシグナル伝達経路を介するが、前者がＩＲＡＫ１／ＩＫＫα−ＩＲＦ−７が関与するのに対し、後者では、ＮＦ−κＢやＩＲＦ−５やＭＡＰキナーゼの経路が関与する。ＭｙＤ８８にはＩＲＦ−７やＩＲＦ−５の他に、ＩＲＦ−１やＩＲＦ−４が会合することが知られているが（非特許文献４、５、６）、ＴＬＲ９下流で関与するＩＲＦ転写因子の種類や役割は細胞の種類によって異なっている。
【０００６】
上記に示したようにＴＬＲ９はＤＮＡをリガンドとして認識するが、正常な状態では自己ＤＮＡはリガンドとして認識されず、自然免疫を活性化しない。これは細胞死により放出された自己ＤＮＡは血清中のヌクレアーゼによりＴＬＲにより認識される前に分解されるからである。またＴＬＲ９の細胞表面ではなく、エンドソームでの細胞内局在も自己ＤＮＡを認識しない機構として考えられている。
【０００７】
しかしながら、自己免疫反応や炎症が起こっている状況下ではこのような防御機構が破綻し、内在性のタンパク質と複合体を形成し、ＴＬＲ９シグナルを活性化することが考えられる（非特許文献７）。
【０００８】
これらのことからＴＬＲ９を阻害することにより、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の病態を改善することが可能であると考えられる。
【０００９】
関節リウマチ（ＲＡ）についてはＴＬＲ９阻害作用を有する核酸配列を用いて、ＴＬＲ９を阻害することによりプリスタン誘導性ラット関節炎モデルにおいて発症と病態が抑制されたことが報告されている（非特許文献８）。また抗マラリア薬であるヒドロキシクロロキンはエンドソームの酸性化抑制によりＴＬＲ７、９の阻害作用を有していることが知られ、日本を除くほとんどの国で関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の治療薬として承認されている（非特許文献９）。
【００１０】
ＳＬＥについてはＴＬＲ９ノックアウトマウスにおいてＳＬＥ様の病体において見られる抗核抗体の減弱が報告されており（非特許文献１０）、ＴＬＲ９阻害作用を有する核酸を用いた実験においても同様の結果が報告されている（非特許文献１１）。さらに同様の結果を有する低分子化合物についても報告されている（ＣＰＧ５２３６４：特許文献１）。
【００１１】
ヒドロキシクロロキンはＴＬＲ９阻害作用としてはそれほど強くなく、さらに強いＴＬＲ９阻害作用を有する薬剤により、より強力な薬効が期待できる。またヒドロキシクロロキンにはクロロキン網膜症などの副作用が知られているが、異なる骨格の化合物により、このような副作用の懸念は払拭できる可能性も考えられる。したがって、強いＴＬＲ９阻害作用を示し、経口投与可能な低分子性の薬剤が、今後の関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の治療において有用であると考えられる。
【００１２】
抗炎症作用を有するテトラヒドロピリドピリミジン誘導体としては、これまでにＴＡＲＣ（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｌｉｇａｎｄ １７）モジュレータ（特許文献２）やＰＤＥ７（Ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ ７）阻害剤（特許文献３）、ｍＴＯＲ（Ｍａｍｍａｌｉａｎ ｔａｒｇｅｔ ｏｆ ｒａｐａｍｙｃｉｎ）阻害剤（特許文献４）、バニロイド受容体アンタゴニスト（特許文献５）、５−ＨＴ（５−ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ）阻害剤（特許文献６）などが報告されている。しかし、これらいずれの文献においても、ＴＬＲ９阻害作用に関連する記載や示唆はない。また、自己免疫性疾患に関する効果については記載も示唆もない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】ＷＯ２００８／１５２４７１号パンフレット
【特許文献２】ＷＯ２００３／１０４２３０号パンフレット
【特許文献３】ＷＯ２００２／０８７５１３号パンフレット
【特許文献４】ＷＯ２０１０／１０３０９４号パンフレット
【特許文献５】ＷＯ２００５／０６６１７１号パンフレット
【特許文献６】ＷＯ２０１０／０５３８２５号パンフレット
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】植松智ら ウイルス、５４：１４５−１５２（２００４）
【非特許文献２】高岡晃教ら ウイルス、５８：３７−４６（２００８）
【非特許文献３】Ｔａｋｅｄａ Ｋ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎｕ．，Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２１：３３５−３７６（２００３）
【非特許文献４】Ｈｏｎｄａ Ｋ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０１：１５４１６−１５４２１（２００４）
【非特許文献５】Ｎｅｇｉｓｈｉ Ｈ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０２：１５９８９−１５９９４（２００５）
【非特許文献６】Ｎｅｇｉｓｈｉ Ｈ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：１５１３６−１５１４１（２００６）
【非特許文献７】Ｋｉｍ，Ｙ．Ｍ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，４５２：２３４−２３８（２００８）
【非特許文献８】Ｈｅｒｍａｎ，Ｓ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．，７０：Ａ３９ ｄｏｉ：１０．１１３６／ａｒｄ．２０１０．１４８９７３．８（２０１１）
【非特許文献９】横川直人、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｔｈｅｒａｐｙ，２８：８５−９１（２０１０）
【非特許文献１０】Ｓｅａｎ Ｒ．Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，２０２：３２１−３３１（２００５）
【非特許文献１１】Ｐａｗａｒ Ｒ．Ｄ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ １８：１７２１−１７３１（２００７）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明の目的は、低分子性のＴＬＲ９阻害作用を有する新規化合物を提供することにある。さらに詳細には、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶並びに移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防及び／又は治療に有用な医薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
上記実情に鑑み、本発明者らは、鋭意ＴＬＲ９阻害作用を持つ化合物を探索した結果、下記一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体が、ヒトＴＬＲ９を発現させたヒト胎児腎臓細胞由来のＨＥＫ２９３細胞を用いた試験においてＴＬＲ９阻害作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１７】
すなわち本発明は、次の一般式（１）：
【００１８】
【化１】
【００１９】
［式中、
Ｒ１、Ｒ２は、互いに同一又は異なっていてもよく、水素原子又はＣ１−１０アルキル基を示し、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに同一又は異なっていてもよく、水素原子、Ｃ１−１０アルキル基又はモノ−若しくはジ−Ｃ１−１０アルキルアミノ基で置換されていてもよいＣ１−１０アルキル基を示し、
または、Ｒ３とＲ４は、一緒になって、４〜７員飽和ヘテロ環基を形成し、ここで、前記ヘテロ環基は、同一又は異なる１〜３個のＣ１−１０アルキル基で置換されていてもよい１個又は２個の４〜７員飽和ヘテロ環基で置換されてもよく、
Ａは、Ｃ６−１０芳香環基を示す］
で表される化合物若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＴＬＲ９阻害剤に関する。
【００２０】
さらに詳細には、本発明は、
４−（［１，４’−ビピペリジン］−１’−イル）−７−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン、
７−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン、及び
７−ベンジル−Ｎ４−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ２，Ｎ２，Ｎ４−トリメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン
からなる群から選択される少なくとも１つの化合物若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＴＬＲ９阻害剤に関する。
【００２１】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＴＬＲ９シグナルの活性化に起因する疾患の予防及び／又は治療剤に関する。より詳細には、本発明は、前記一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防及び／又は治療剤に関する。
【００２２】
また、本発明は、ＴＬＲ９シグナルの活性化に起因する疾患、例えば、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶並びに移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）等の予防及び／又は治療剤の製造のための、前記一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の使用に関する。
【００２３】
また、本発明は、前記一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物の有効量を患者に投与することを特徴とする、ＴＬＲ９シグナルの活性化に起因する疾患、例えば、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、シェーグレン症候群（ＳＳ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶並びに移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）等の予防及び／又は治療方法に関する。
【発明の効果】
【００２４】
本発明のＴＬＲ９阻害剤の有効成分である、一般式（１）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物は、ＲＡ、ＳＬＥ、ＳＳ、ＭＳ、ＩＢＤ、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶並びに移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）等の予防及び／又は治療剤として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】化合物１の１Ｈ−ＮＭＲのチャートである。
【図２】化合物２の１Ｈ−ＮＭＲのチャートである。
【図３】化合物３の１Ｈ−ＮＭＲのチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
以下、本発明について詳細に説明する。本発明における用語の定義は以下のとおりである。
【００２７】
本明細書中で使用するとき、「アルキル基」とは、直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を意味する。「アルキル基」は、好ましくは「Ｃ１−１０アルキル基」、より好ましくは「Ｃ１−６アルキル基」、さらにより好ましくは「Ｃ１−３アルキル基」である。ここで、「Ｃ１−１０アルキル基」は、直鎖又は分岐鎖の炭素数１〜１０の飽和炭化水素基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基等が挙げられる。「Ｃ１−６アルキル基」は、直鎖又は分岐鎖の炭素数１〜６の飽和炭化水素基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基等が挙げられる。「Ｃ１−３アルキル基」は、直鎖又は分岐鎖の炭素数１〜３の飽和炭化水素基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基等が挙げられる。
【００２８】
本明細書で使用するとき、「アミノアルキル基」とは、アミノ基が置換した直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を意味する。ここで、「アミノアルキル基」における「アルキル基」部分は、上記で定義したものであってもよい。好ましくは、「アミノＣ１−３アルキル基」であり、具体的には、例えば、アミノメチル基、１−アミノエチル基、２−アミノエチル基、１−アミノ−ｎ−プロピル基、２−アミノ−ｎ−プロピル基、３−アミノ−ｎ−プロピル基、１−アミノイソプロピル基、２−アミノイソプロピル基等が挙げられる。
【００２９】
本明細書で使用するとき、「モノ−又はジ−アルキルアミノ基で置換されたアルキル基」とは、１乃至２個のアルキル基で置換されたアミノ基によって置換された直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を意味する。ここで、前記「アルキル基」部分は、上記で定義したものであってもよい。好ましくは、「モノ（Ｃ１−３アルキル）アミノＣ１−３アルキル基」、「ジ（Ｃ１−３アルキル）アミノＣ１−３アルキル基」であり、具体的には、例えば、メチルアミノメチル基、ジメチルアミノメチル基、エチルメチルアミノメチル基、イソプロピルメチルアミノメチル基、メチル−ｎ−プロピルアミノメチル基、ジエチルアミノメチル基、エチルイソプロピルアミノメチル基、エチル−ｎ−プロピルアミノメチル基、イソプロピル−ｎ−プロピルアミノメチル基、ジイソプロピルアミノメチル基、ジ−ｎ−プロピルアミノメチル基、メチルアミノエチル基、ジメチルアミノエチル基、エチルメチルアミノエチル基、イソプロピルメチルアミノエチル基、メチル−ｎ−プロピルアミノエチル基、ジエチルアミノエチル基、エチルイソプロピルアミノエチル基、エチル−ｎ−プロピルアミノエチル基、イソプロピル−ｎ−プロピルアミノエチル基、ジイソプロピルアミノエチル基、ジ−ｎ−プロピルアミノエチル基、メチルアミノイソプロピル基、ジメチルアミノイソプロピル基、エチルメチルアミノイソプロピル基、イソプロピルメチルアミノイソプロピル基、メチル−ｎ−プロピルアミノイソプロピル基、ジエチルアミノイソプロピル基、エチルイソプロピルアミノイソプロピル基、エチル−ｎ−プロピルアミノイソプロピル基、イソプロピル−ｎ−プロピルアミノイソプロピル基、ジイソプロピルアミノイソプロピル基、ジ−ｎ−プロピルアミノイソプロピル基、メチルアミノ−ｎ−プロピル基、ジメチルアミノ−ｎ−プロピル基、エチルメチルアミノ−ｎ−プロピル基、イソプロピルメチルアミノ−ｎ−プロピル基、メチル−ｎ−プロピルアミノ−ｎ−プロピル基、ジエチルアミノ−ｎ−プロピル基、エチルイソプロピルアミノ−ｎ−プロピル基、エチル−ｎ−プロピルアミノ−ｎ−プロピル基、イソプロピル−ｎ−プロピルアミノ−ｎ−プロピル基、ジイソプロピルアミノ−ｎ−プロピル基、ジ−ｎ−プロピルアミノ−ｎ−プロピル基等が挙げられる。
【００３０】
本明細書で使用するとき、「４〜７員飽和ヘテロ環基」とは、隣接する環員間で多重結合を有さず、１個以上のヘテロ原子環員を含有し、残りの環員が炭素原子である４〜７員の飽和環状基を示す。具体的には、例えば、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、アゼピン、モルホリン、チオモルホリン、チオモルホリンＳ−オキシドおよびＳ，Ｓ−ジオキシド、ピペラジン、ならびにＮ−メチルピペラジン基等が挙げられる。
【００３１】
本明細書で使用するとき、「Ｃ６−１０芳香環基」とは、環員がすべて炭素原子である芳香族基を意味する。具体的には、例えば、フェニル基、アズレニル基、ナフチル基等が挙げられる。好ましくは、フェニル基である。
【００３２】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４におけるＣ１−３アルキルアミノＣ１−３アルキル基としては、ジメチルアミノエチル基が好ましい。
【００３３】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４における４−７員飽和ヘテロ環基としては、ピペリジニル基が好ましい。
【００３４】
一般式（１）中、Ｒ３、Ｒ４における「置換基を有してもよい４−７員飽和ヘテロ環基」中の置換基としては、ピペラジニル基が好ましい。
【００３５】
一般式（１）中、ＡにおけるＣ６−１０芳香環基としては、フェニル基が好ましい。
【００３６】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体の具体例として、下記化合物を挙げることができる。
【００３７】
【表１】
【００３８】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物は、本発明の２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体のみならず、その医薬として許容される塩、それらの各種の水和物や溶媒和物、及び結晶多形を有する物質、及びこれらの物質のプロドラッグとなる物質を包含している。
【００３９】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体として許容される塩としては、具体的には、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等）や有機酸（例えば、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等）との酸付加塩等が挙げられる。
【００４０】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体やその医薬として許容される塩の溶媒和物としては、水和物や各種の溶媒和物（例えば、エタノール等のアルコールとの溶媒和物等）が挙げられる。
【００４１】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体は、公知の方法（Ｃｈｅｍ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｏｍｐ．、４３、１１６７（２００７））を組み合わせ製造することができる。２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体の製造方法を下記反応工程図に示すが、製造法はこれに限定されるものではない。
【００４２】
【化２】
【００４３】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＡは、前記定義と同じものを示し、Ｘは脱離基を示す。］
【００４４】
［工程１］アミン（ＩＩ）を、過剰量のメチルアクリレート（ＩＩＩ）と反応させ、ジエステル（ＩＶ）を製造することができる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、室温〜１２０℃、好ましくは５０℃〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００４５】
［工程２］ジエステル（ＩＶ）を塩基存在下、Ｄｉｅｃｋｍａｎ環化を行い、ピペリジノン誘導体（Ｖ）を製造することができる。本工程で用いる塩基としては、特に制限はないが、例えば、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、コリジン、ルチジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクテン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルペンチルアミン、トリメチルアミンのような有機塩基類、メトキシナトリウム、エトキシナトリウム、メトキシカリウム、エトキシカリウム、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのような無機塩基類等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−３０〜１２０℃、好ましくは室温〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００４６】
［工程３］ピペリジノン誘導体（Ｖ）を塩基存在下、グアニジン誘導体（ＶＩＩ）と反応させ、テトラヒドロピリドピリミジノン誘導体（ＶＩ）を製造することができる。本工程で用いる塩基としては、特に制限はないが、例えば、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、コリジン、ルチジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクテン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルペンチルアミン、トリメチルアミンのような有機塩基類、メトキシナトリウム、エトキシナトリウム、メトキシカリウム、エトキシカリウム、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのような無機塩基類等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−３０〜１２０℃、好ましくは室温〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００４７】
［工程４］テトラヒドロピリドピリミジノン誘導体（ＶＩ）をハロゲン化剤と反応させ、テトラヒドロピリドピリミジン誘導体（ＶＩＩＩ）を製造することができる。本工程で用いられるハロゲン化剤としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、ホスホリルクロリド、チオニルクロリ等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−３０〜１２０℃、好ましくは室温〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００４８】
また、テトラヒドロピリドピリミジノン誘導体（ＶＩ）を塩基存在下、スルホニル化剤と反応させ、テトラヒドロピリドピリミジン誘導体（ＶＩＩＩ）を製造することができる。本工程で用いられるスルホニル化剤としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、トリフルオロメタンスルホン酸無水物、Ｎ，Ｎ−ビストリフルオロメタンスルホニルアニレン、Ｎ−フェニルビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）、トリクロロメタンスルホニルクロリド、メタンスルホニルクロリド等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程で用いる塩基としては、反応を阻害しにものであれば特に制限はないが、例えば、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、コリジン、ルチジン、Ｎ−メチルモルフォリン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクテン（ＤＡＢＣＯ）、キヌクリジン、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルペンチルアミン、トリメチルアミンのような有機塩基類、メトキシナトリウム、エトキシナトリウム、メトキシカリウム、エトキシカリウム、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのような無機塩基類等が挙げられる。また、ピリジンのような有機塩基類を溶媒兼塩基として使用してもよい。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−７８〜５０℃、好ましくは−７８〜３０℃であり、反応時間は、通常、１分間〜３日間、好ましくは１０分〜１２時間である。
【００４９】
［工程５］テトラヒドロピリドピリミジン誘導体（ＶＩＩ）に対し、塩基存在下、アミン（ＸＩ）を反応させることにより、テトラヒドロピリドピリミジン誘導体（Ｉ）を製造することができる。本工程で用いる塩基としては、特に制限はないが、例えば、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、コリジン、ルチジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクテン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルペンチルアミン、トリメチルアミンのような有機塩基類、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのような無機塩基類等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−３０〜１２０℃、好ましくは室温〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００５０】
［工程６］［工程３］で用いられるグアニジン誘導体（ＶＩＩ）は以下の通り製造することができる。アミン誘導体（ＩＸ）を塩基存在下、プラキサジン（Ｘ）と反応させることにより、グアニジン誘導体（ＶＩＩ）を製造することができる。本工程で用いる塩基としては、特に制限はないが、例えば、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、コリジン、ルチジン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクテン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルペンチルアミン、トリメチルアミンのような有機塩基類、水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのような無機塩基類等が挙げられる。本工程で用いる溶媒としては、反応を阻害しないものであれば特に制限はないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなどのアルコール類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルのようなエーテル類；ジメチルスルホキシド、スルホランのようなスルホキシド類；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタンのようなハロゲン化炭化水素類等が挙げられる。本工程における反応温度は、使用する原料、溶媒によって異なるが、通常、−３０〜１２０℃、好ましくは室温〜１００℃であり、反応時間は、通常、１時間〜３日間、好ましくは３時間〜２４時間である。
【００５１】
前記の各反応で得られた中間体及び目的物は、有機合成化学で常用されている精製法、例えば、ろ過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶、各種クロマトグラフィー等に付して必要に応じて単離、精製することができる。また、中間体においては、特に精製することなく次反応に供することもできる。
【００５２】
さらに、各種の異性体は異性体間の物理化学的性質の差を利用した常法を適用して単離できる。例えば、ラセミ混合物は、例えば、酒石酸等の一般的な光学活性酸とのジアステレオマー塩に導き光学分割する方法、又は、光学活性カラムクロマトグラフィーを用いた方法等の一般的ラセミ分割法により、光学的に純粋な異性体に導くことができる。また、ジアステレオマー混合物は、例えば、分別結晶化又は各種クロマトグラフィー等により分割できる。また、光学活性な化合物は適当な光学活性な原料を用いることにより製造することもできる。
【００５３】
本発明のＴＬＲ９阻害剤、又は自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防及び／又は治療剤は、一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体、その塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分として含有するものであって、医薬組成物として使用することができる。その場合、本発明の化合物を単独で用いてもよいが、通常は医薬として許容される担体、及び／又は希釈剤を配合して使用される。
【００５４】
投与経路は、特に限定されないが、治療目的に応じて適宜選択することができる。例えば、経口剤、注射剤、坐剤、吸入剤等のいずれでもよい。これらの投与形態に適した医薬組成物は、公知の製剤方法を利用することによって製造できる。
【００５５】
経口用固形製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される化合物に医薬として許容される賦形剤、更に必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法を利用して、錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。添加剤は、当該分野で一般的に使用されているものでよい。例えば、賦形剤としては、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等が挙げられる。結合剤としては、例えば、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。崩壊剤としては、例えば、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられる。滑沢剤としては、例えば、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられる。矯味剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。
【００５６】
経口用液体製剤を調製する場合は、一般式（１）で表される化合物に、矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等を加えて常法を利用して内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。矯味剤としては上記に挙げられたものでよく、緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム等が、安定化剤としては、例えば、トラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
【００５７】
注射剤を調製する場合は、一般式（１）で表される化合物にｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法を利用して皮下、筋肉及び静脈内注射剤を製造することができる。ｐＨ調製剤及び緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。安定化剤としては、例えば、ピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ（エデト酸ナトリウム）、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては、例えば、塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、ブドウ糖等が挙げられる。
【００５８】
坐剤を調製する場合は、一般式（１）で表される化合物に公知の坐剤用担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセライド等、更に必要に応じて界面活性剤（例えば、ツイーン（登録商標））等を加えた後、常法を利用して製造することができる。
【００５９】
上記以外に、常法を利用して適宜好ましい製剤とすることもできる。
【００６０】
本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体の投与量は年齢、体重、症状、投与形態及び投与回数等によって異なるが、通常は成人に対して一般式（１）で表わされる化合物として１日あたり０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは１ｍｇ〜１０００ｍｇ、より好ましくは１ｍｇ〜５００ｍｇを、１回又は数回に分けて経口投与又は非経口投与するのが好ましい。
【実施例】
【００６１】
以下に実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。なお、下記実施例中で用いられている略号は下記の意味を示す。
１Ｈ−ＮＭＲ：プロトン核磁気共鳴
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
【００６２】
実施例１：（７−ベンジル−４−［１，４’］ビピペリジニル−１’−イル−５，６，７，８−テトラヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イル）ジメチルアミンの製造
［工程１］７−ベンジル−２−ジメチルアミノ−５，６，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オンの製造
エタノール（４００ｍＬ）にメチル １−ベンジル−３−オキソピペリジン−４−カルボキシレート塩酸塩（５３．８ｇ，０．２ｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグアニジン（２６．３ｇ，０．３ｍｏｌ）及びナトリウムエトキシド（３４．０ｇ，０．５ｍｏｌ）を加え、加熱還流下２．５時間撹拌した。反応液を室温まで冷却し、減圧下溶媒を留去し、残渣を飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄後、析出物を濾過し、水、メタノール、エーテルで洗浄し７−ベンジル−２−ジメチルアミノ−５，６，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン（３８ｇ，６６％）を得た。
【００６３】
［工程２］７−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル トリフルオロメタンスルホノエートの製造
７−ベンジル−２−ジメチルアミノ−５，６，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン（５．１２ｇ，０．０１８ｍｏｌ）のピリジン溶液（５０ｍＬ）を−２０℃で撹拌し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（４．２３ｇ，０．０１５ｍｏｌ）を滴下し、室温まで昇温し２０分撹拌した。反応液に水を加え、析出物を濾過し、水で洗浄後乾燥させ７−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル トリフルオロメタンスルホノエート（３．００ｇ，５１％）を得た。
【００６４】
［工程３］（７−ベンジル−４−［１，４’］ビピペリジニル−１’−イル−５，６，７，８−テトラヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イル）ジメチルアミンの製造
７−ベンジル−２−（ジメチルアミノ）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−４−イル トリフルオロメタンスルホノエート（４１６ｍｇ，１ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液（２ｍＬ）に炭酸カリウム（６９１ｍｇ，５ｍｍｏｌ）と［１，４’］ビピペリジニル（５０４ｍｇ，３ｍｍｏｌ）を加え、１００℃で１２時間撹拌した。反応液を室温まで冷却後、水を加え希釈し、ジクロロメタンを用い抽出後、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下溶媒を留去し、再結晶させ（７−ベンジル−４−［１，４’］ビピペリジニル−１’−イル−５，６，７，８−テトラヒドロ−ピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−イル）ジメチルアミン（３３９ｍｇ，７８％）を得た。
【００６５】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）を図１に示す。
【００６６】
実施例２：７−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミンの製造
実施例１と同様の手順で製造した。
【００６７】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）を図２に示す。
【００６８】
実施例３：７−ベンジル−Ｎ４−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ２，Ｎ２，Ｎ４−トリメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミンの製造
実施例１と同様の手順で製造した。
【００６９】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ６−ＤＭＳＯ）を図３に示す。
【００７０】
［試験例１］ＴＬＲ９発現レポーター細胞を用いたＴＬＲ９活性化阻害試験
１）ＴＬＲ９発現レポーター細胞の樹立
ヒトＴＬＲ９発現細胞は、ヒト胎児腎臓細胞株であるＨＥＫ２９３にヒトＴＬＲ９を発現させた細胞をＩｎｖｉｖｏｇｅｎ社より購入した（ｈＴＬＲ９／２９３ｘＬ）。ｈＴＬＲ９／２９３ｘＬは１０％ウシ胎仔血清、ペニシリン、ストレプトマイシンを含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ（ｓｉｇｍａ））を用いて継代培養した。ＮＦκＢ認識配列の４回繰り返しにホタルルシフェラーゼ遺伝子を連結したｐＧＬ４．２８（Ｐｒｏｍｅｇａ）をＦｕｇｅｎｅ６（Ｒｏｃｈｅ）を用いてリポフェクションにより遺伝子導入した。ハイグロマイシン、ブラストサイジン耐性細胞クローンを選択し、ＴＬＲ９発現レポーター細胞とした（ｈＴＬＲ９ ＮＦκＢ−ｌｕｃ／２９３ｘＬ）。
【００７１】
２）ＴＬＲ９活性化阻害試験
ｈＴＬＲ９ ＮＦκＢ−ｌｕｃ／２９３ｘＬを９６ウェルホワイトマイクロタイタープレートに１．０×１０４／８０μＬで播き、ＣＯ２インキュベータ中で３７℃、１晩培養した。ＤＭＥＭにより希釈した被検化合物（１０μＬ）を添加し、終濃度０．０１、０．０３、０．１、０．３、１μＭとした。１時間後にＴＬＲ９リガンドであるＣｐＧ−Ｂ ＤＮＡ（ＯＤＮ２００６）（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を終濃度１μＭとなるように添加した（１０μＬ）。合計１００μＬとして４時間ＣＯ２インキュベータ中でインキュベート後にルシフェラーゼ活性をＴＬＲ９活性として測定した。ルシフェラーゼ活性はＢｒｉｇｈｔ Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を６０μＬ添加し、マルチマイクロプレートリーダーＡＲＶＯ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）により発光量を測定した。被検化合物を添加していない場合のルシフェラーゼ活性を１００％として、各被検化合物の５０％阻害濃度（ＩＣ５０値）を計算した。
【００７２】
３）結果
化合物１は０．０９μＭ、化合物２は０．１３μＭ、化合物３は０．３１μＭのＩＣ５０値を示した。以上より、本発明の化合物は強いＴＬＲ９阻害作用を有していることが確認された。したがって、本発明の一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体は、ＴＬＲ９阻害剤として、ＴＬＲ９シグナルの活性化に関連する疾患、例えば、ＲＡ、ＳＬＥ、ＳＳ、ＭＳ、ＩＢＤ、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群、血管炎などの自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防剤や治療剤の有効成分として有用であることがわかった。
また、化合物１、２及び３はＡＳＩＮＥＸ社より入手可能であり、本試験においては同社より購入したものをそのまま用いた。
【産業上の利用可能性】
【００７３】
本発明は、一般式（１）で表される２−アミノテトラヒドロピリドピリミジン誘導体若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物が、優れたＴＬＲ９阻害作用を有していることを初めて見出したものであり、自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防及び／又は治療剤を提供するものである。本発明は、自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶および移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の予防及び／又は治療剤を提供し、製薬工業において有用であり、産業上の利用可能性を有している。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の一般式（１）：
【化１】
［式中、
Ｒ１、Ｒ２は、互いに同一又は異なっていてもよく、水素原子又はＣ１−１０アルキル基を示し、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに同一又は異なっていてもよく、水素原子、Ｃ１−１０アルキル基又はモノ−若しくはジ−Ｃ１−１０アルキルアミノ基で置換されていてもよいＣ１−１０アルキル基を示し、
または、Ｒ３とＲ４は、一緒になって、４〜７員飽和ヘテロ環基を形成し、ここで、前記ヘテロ環基は、同一又は異なる１〜３個のＣ１−１０アルキル基で置換されていてもよい１個又は２個の４〜７員飽和ヘテロ環基で置換されてもよく、
Ａは、Ｃ６−１０芳香環基を示す］
で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＴＬＲ９阻害剤。
【請求項２】
一般式（１）で表される化合物が、
４−（［１，４’−ビピペリジン］−１’−イル）−７−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン、
７−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン、及び、
７−ベンジル−Ｎ４−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ２，Ｎ２，Ｎ４−トリメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン
からなる群から選択される少なくとも１つの化合物である、請求項１に記載のＴＬＲ９阻害剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする、自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶又は移植片対宿主病の予防及び／又は治療剤。
【請求項４】
自己免疫疾患が、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、多発性硬化症、炎症性腸疾患、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群又は血管炎である、請求項３に記載の予防及び／又は治療剤。
【請求項１】
次の一般式（１）：
【化１】
［式中、
Ｒ１、Ｒ２は、互いに同一又は異なっていてもよく、水素原子又はＣ１−１０アルキル基を示し、
Ｒ３、Ｒ４は、互いに同一又は異なっていてもよく、水素原子、Ｃ１−１０アルキル基又はモノ−若しくはジ−Ｃ１−１０アルキルアミノ基で置換されていてもよいＣ１−１０アルキル基を示し、
または、Ｒ３とＲ４は、一緒になって、４〜７員飽和ヘテロ環基を形成し、ここで、前記ヘテロ環基は、同一又は異なる１〜３個のＣ１−１０アルキル基で置換されていてもよい１個又は２個の４〜７員飽和ヘテロ環基で置換されてもよく、
Ａは、Ｃ６−１０芳香環基を示す］
で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とするＴＬＲ９阻害剤。
【請求項２】
一般式（１）で表される化合物が、
４−（［１，４’−ビピペリジン］−１’−イル）−７−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン、
７−ベンジル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２−アミン、及び、
７−ベンジル−Ｎ４−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ２，Ｎ２，Ｎ４−トリメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，４−ｄ］ピリミジン−２，４−ジアミン
からなる群から選択される少なくとも１つの化合物である、請求項１に記載のＴＬＲ９阻害剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする、自己免疫疾患、炎症、アレルギー、喘息、移植片拒絶又は移植片対宿主病の予防及び／又は治療剤。
【請求項４】
自己免疫疾患が、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、多発性硬化症、炎症性腸疾患、乾癬性関節炎、ベーチェット症候群又は血管炎である、請求項３に記載の予防及び／又は治療剤。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公開番号】特開２０１３−７５８７３（Ｐ２０１３−７５８７３Ａ）
【公開日】平成２５年４月２５日（２０１３．４．２５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−２１７８６２（Ｐ２０１１−２１７８６２）
【出願日】平成２３年９月３０日（２０１１．９．３０）
【出願人】（０００１６３００６）興和株式会社 (618)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２５年４月２５日（２０１３．４．２５）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年９月３０日（２０１１．９．３０）
【出願人】（０００１６３００６）興和株式会社 (618)
【Ｆターム（参考）】
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