シスチン−アミノ酸複合体及びその製造方法
【課題】本発明は、飲食品又は化粧品に添加可能な機能性成分としてシスチンとアミノ酸との複合体を提供すること、中でも、本発明は、シスチンと、アミノ酸とをそれぞれを単独で投与した場合に比べて、それぞれの作用が有意に向上するという相乗効果を奏するシスチン−アミノ酸複合体及びその製造方法、前記シスチン−アミノ酸複合体を混合する食品又は化粧品を提供すること。
【解決手段】シスチンに対してアミノ酸が結合したことを特徴とするシスチン−アミノ酸複合体。前記シスチン−アミノ酸複合体は、シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解する工程と、前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させる工程を経て製造される。
【解決手段】シスチンに対してアミノ酸が結合したことを特徴とするシスチン−アミノ酸複合体。前記シスチン−アミノ酸複合体は、シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解する工程と、前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させる工程を経て製造される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、飲食品又は化粧品用の機能性添加剤及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
アミノ酸は、タンパク質を構成しており、栄養素として重要である。近年では、アミノ酸を含有する補助食品が含まれた健康食品や飲料が多く販売されている。
【０００３】
中でも、体内で合成されない９種類の必須アミノ酸のうち、バリン、ロイシン、イソロイシンの３つは、枝分かれするような分子構造をしており、ＢＣＡＡ（Ｂｒａｎｃｈｅｄ Ｃｈａｉｎ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄの略；分岐鎖アミノ酸）とも呼ばれている。ほとんどのアミノ酸が肝臓で代謝されるのに対して、ＢＣＡＡは筋肉で代謝されエネルギーを産生する唯一のアミノ酸として知られている。ＢＣＡＡは肉・魚・乳製品・卵等の食品に多く含まれているが、運動前や運動中に効率的に摂取する目的で、飲料やサプリメントとしても提供されている。即ち上記の飲料やサプリメントは、運動により急速に消費されるエネルギー源を補い、筋肉の分解・損傷を抑制し、筋肉痛や筋肉疲労を軽減する目的で提供されている。またＢＣＡＡの肝臓におけるアルブミン合成促進作用を利用して、肝臓疾患の治療薬も開発されている（特許文献１，２）。更には筋蛋白質の合成を促進するシグナルとしての機能も有するという報告や、脳に疲労や眠気を伝えるセロトニンが脳に伝わるのを抑える働きがあると言われている。
【０００４】
そこで筋肉疲労軽減や肝臓疾患の治療の観点から、バリン、ロイシン、イソロイシンを配合した飲食品・医薬品の開発が進められており、配合比率の調査検討を重ねて吸収効率を向上させた組成物（特許文献３）や、ＢＣＡＡを含有する素材を加水分解してペプチド化した混合物（特許文献４， ５）、他の機能性素材と組み合わせた組成物（特許文献６）が提供されている。また呈味改善の観点からＢＣＡＡを有するペプチド混合物の開発も進められてきた（特許文献７）。しかしながら、バリン、ロイシン、イソロイシンをシスチン等の含硫アミノ酸あるいは含硫アミノ酸を有するタンパク質加水分解物と結合させて新たな機能を付与した素材は見られず、その開発が期待されていた。
【０００５】
フェニルアラニンは、上記のＢＣＡＡと同様に、体内で合成されない必須アミノ酸であり、アラニンの側鎖の水素原子がフェニル基で置き換えられた構造を有する。フェニルアラニンは、肉類を始めとして魚・貝・卵・乳製品等の食品に多く含まれているが、外傷・関節痛・リウマチ等の慢性的な痛みを軽減すると言われ、天然のＬ−フェニルアラニンから化学合成されたＤＬ−フェニルアラニンが鎮痛剤として提供されており、特に変形性関節症及び多発性硬化症に関連した疼痛を軽減する目的でフェニルアラニン誘導体の開発が進められてきた（特許文献８，９）。また、筋肉自体の疲労や筋肉の疲労に伴う精神的疲労を回復する目的でフェニルアラニンを含有する栄養組成物が開発されている（特許文献１０）。更に、鬱症状に対しても効果があると言われ、ＤＬ−フェニルアラニンが抗鬱の目的で利用される場合もある。一方、フェニルアラニンのメチルエステルをアスパラギン酸と結合させた構造のアスパルテームは、人工甘味料として飲食品の分野で広く用いられ、溶解性の改善等の改良が進められている（特許文献１１，１２）。フェニルアラニン摂取の安全性に関しては、フェニルアラニン−４−モノオキシゲナーゼ遺伝子の完全欠損であるフェニルケトン尿症では、血中にフェニルアラニンが異常に蓄積されることから、フェニルアラニンの摂取を控えることが推奨されている。そこで、その処置の方法（特許文献１３）、フェニルアラニン含量の少ないペプチド混合物の製造法（特許文献１４）、フェニルアラニンを含まない乳児及び幼児用食品が開発されている（特許文献１５）。しかしながら、上記の飲食品の分野のみならず他の分野においても、フェニルアラニンをシスチン等の含硫アミノ酸あるいは含硫アミノ酸を有するタンパク質加水分解物と結合させて新たな機能を付与した素材は見られず、その開発が期待されていた。
【０００６】
シスチンは２分子のシステインがチオール基（−ＳＨ）の酸化により生成するＳ−Ｓ結合（ジスルフィド結合）を介してつながった構造をもつアミノ酸である。ポリペプチド中のシステイン間のジスルフィド結合はタンパク質の２次構造の維持に必要であり、毛髪においては、ケラチン中のシステイン間のジスルフィド結合が巻き髪の度合いを決める。毛髪中には種々の蛋白質が存在するがおもな蛋白質はケラチンと呼ばれ約１８種類のアミノ酸からできている。絹や繊維など他の蛋白質にはほとんど含まれていないシスチンを１４〜１８％も含むことを特徴としている。さらには、毛髪に存在するケラチンは、爪にも存在し、そのアミノ酸組成は毛髪と類似しており、シスチンを多く含有する。ケラチン繊維中のシステイン残基間でジスルフィド結合が形成されてシスチンとなり、ケラチン繊維の強度の向上に寄与する。
【０００７】
そこで毛髪用化粧品の分野ではシスチンの有する特性を付加したシスチン導入ペプチド（特許文献１６）、システイン導入ペプチド（特許文献１７）が開発されており、その技術を用いて毛髪の損傷を防止し損傷した毛髪を回復させるための毛髪保護剤（特許文献１８）や、パーマネントウェーブ時の毛髪の損傷を防止し、毛髪に優れたウェーブを付与でき、処理後の毛髪に艶・潤いなどを付与することができるパーマネントウェーブ用第１剤（特許文献１９）が提供されている。また組織工学並びにバイオテクノロジーの分野で、インプラント等の生体材料への応用を目的として、チオール基の付加等の修飾によるコラーゲンの改質を行い、ジスルフィド結合を介して架橋可能なコラーゲン誘導体（特許文献２０）が開発されている。更にはチオール基を有する有機化合物（特許文献２１）が開発され、縫合糸・生体代用物・接着剤として提供されている。上記の通り毛髪化粧品及び組織工学並びにバイオテクノロジーの分野では含硫アミノ酸あるいは含硫アミノ酸を有するタンパク質加水分解物の有する特性を付加した素材の開発において進展が見られるが、それはペプチド以上の分子量のものに限られており、アミノ酸と複合化させた素材は見られない。更に、ｐＨの変化を伴うシスチンとペプチドとの反応により複合体が形成されることが確かめられている。しかしながら、アミノ酸とシスチンの複合体に関しては確認されておらず、含硫アミノ酸あるいは含硫アミノ酸を有するタンパク質加水分解物の有する特性をアミノ酸に付加した素材の開発が期待されていた。
【特許文献１】特許３６９６２９７号公報
【特許文献２】特許３６８２４５３号公報
【特許文献３】特許３３６８８９７号公報
【特許文献４】特許２９５８８０１号公報
【特許文献５】特許３１８３９４５号公報
【特許文献６】特許２８１４５２９号公報
【特許文献７】特許３２１１８２４号公報
【特許文献８】特開平９−５０３９７１号公報
【特許文献９】特開２００２−８８０９７号公報
【特許文献１０】特開平８−１９８７４８号公報
【特許文献１１】特開２００２−５０４９０５号公報
【特許文献１２】特許公表２００２−５０４９０５号公報
【特許文献１３】特許公表２０００−５０２３２３号公報
【特許文献１４】特開平８−１４０６９３号公報
【特許文献１５】特表平９−５０８８０７号公報
【特許文献１６】特開平１０−２８７６９７号公報
【特許文献１７】特開平１１−１２４３９５号公報
【特許文献１８】特開平１１−２６９０４５号公報
【特許文献１９】特開平１１−２６９０４７号公報
【特許文献２０】特開平６−８０９３５号公報
【特許文献２１】特表平９−５０３４９０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、飲食品又は化粧品に添加可能な機能性成分としてシスチンとアミノ酸との複合体を提供することを目的とする。中でも、本発明は、シスチンと、アミノ酸とをそれぞれを単独で投与した場合に比べて、それぞれの作用が有意に向上するという相乗効果を奏するシスチン−アミノ酸複合体及びその製造方法を提供することを目的とする。また、本発明は、前記シスチン−アミノ酸複合体を混合する食品又は化粧品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記の事情に鑑み鋭意研究を重ねた結果、シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解し、次いで酸性溶液に溶解したアミノ酸溶液と混合・攪拌することにより、ｐＨ１０未満の溶液中で何らかの形で複合体を形成させることができることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち、本発明の要旨は、
（１）シスチンに対してアミノ酸が結合したことを特徴とするシスチン−アミノ酸複合体、
（２）シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解し、
前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させてなる前記（１）に記載のシスチン−アミノ酸複合体、
（３）前記アミノ酸がアスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、メチオニン、リジン、バリン、イソロイシン、ロイシン及びフェニルアラニンからなる群より選ばれる１種以上である、前記（１）又は（２）記載のシスチン−アミノ酸複合体、
（４）シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解する工程と、
前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させる工程からなる
前記（１）〜（３）いずれか記載のシスチン−アミノ酸複合体の製造方法、
（５）前記（１）〜（３）いずれか記載のシスチン−アミノ酸複合体を含有する飲食品又は化粧品に関する。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のシスチン−アミノ酸複合体を飲食品又は化粧品等に添加して摂取することで、アミノ酸の有する種々の作用、中でもバリン・ロイシン・イソロイシン・フェニルアラニンなどのアミノ酸を用いた場合には筋肉疲労軽減作用と、シスチンの有するメラニン色素の出現防止効果による美白作用・解毒作用の両者における改善をそれぞれ単独で添加した場合よりもそれぞれ有意に向上させることができ、その結果として筋肉・髪・爪・皮膚の損傷を回復し、艶・なめらかさ・はりを付与することにおいて、これまで以上に健康・美容の効果を期待できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明のシスチン−アミノ酸複合体は、シスチンに対してアミノ酸が結合していることを特徴とする。
【００１３】
本発明で使用するシスチンとは、含硫アミノ酸であるシステイン２分子がＳ−Ｓ結合（ジスルフィド結合）を介してつながった構造を持ち、天然に多く存在するＬ体を用いるが、特にＬ体とＤ体の混合物あるいはＤ体のみでも複合体を製造することが可能であり、これに制限されない。
【００１４】
本発明で使用するアミノ酸とは、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、メチオニン、リジン、バリン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニンである。
前記アミノ酸は、単独でも混合物でもよいし、天然に多く存在するＬ体を用いるが、特にＬ体とＤ体の混合物あるいはＤ体のみでも複合体を製造することが可能であり、これに制限されない。
なお、本発明でいうアミノ酸にはグリシン、ヒスチジン、チロシン、トリプトファン、システインは含まれない。
【００１５】
本発明のシスチン−アミノ酸複合体は、シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解し、前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させてなることが好ましい。
本発明では、前記のような方法で複合体を形成させることで、従来のような複雑な化学合成を経る必要がなく、また、合成過程で使用する試薬を除去して精製する必要もないので、飲食品・化粧品等の安全性への留意を要する製品にも容易に添加することができ、また、沈殿物として回収することにより、溶液以外の形で使用することのできる汎用性の高い添加物となる。
【００１６】
原料であるシスチンは、ｐＨ１０未満の溶液中において凝集体を形成して沈殿する性質を有するが、シスチンとアミノ酸とが複合体を形成することで、凝集体の沈殿量に変化が生じる。
例えば、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、メチオニン、リジン等のアミノ酸とシスチンとが複合体を形成する場合には、シスチン単独と比べて沈殿物の量が減少する。一方、バリン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン等のアミノ酸とシスチンとが複合体を形成する場合には、シスチン単独と比べて沈殿物の量が増大する。
なお、グリシン、ヒスチジン、チロシン、システイン、トリプトファンの場合には、複合体を形成しないため、沈殿物の量に有意な変化はない。
したがって、本発明では、この沈殿物の量の変化を確認することで複合体の形成を判別することができる。
なお、本発明のシスチン−アミノ酸複合体における詳細な結合様式については明らかではないが、バリン・ロイシン・イソロイシン・フェニルアラニンの場合には前記シスチン重量に対して、アミノ酸の作用を発現する観点から、前記アミノ酸を０．５倍（重量比）以上含有する複合体であることが好ましい。
【００１７】
したがって、本発明は、シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解する工程と、
前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したバリン、ロイシン、イソロイシン及びフェニルアラニンからなる群より選ばれる一種以上の分岐鎖アミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させる工程からなる
前記シスチン−アミノ酸複合体の製造方法に関する。
【００１８】
本発明でシスチンを溶解することに使用するアルカリとは、ｐＨ１０以上の水溶液として用いることができ、例えば、炭酸カリウム・水酸化カリウム・炭酸ナトリウム・水酸化ナトリウムを用いることができるが、飲食品・化粧品の製造の観点からは炭酸カリウム・炭酸ナトリウムを使用することが好ましい。なおｐＨ１０未満では十分に溶解することができず、本発明に用いることは好ましくない。なお、前記アルカリ溶液中のシスチン濃度は特に限定はないが１〜３重量％が好ましい。
【００１９】
また、本発明で前記アミノ酸を溶解することに使用する酸性溶液とは、ｐＨ２以下の水溶液として用いることができ、例えば、クエン酸・酢酸・乳酸・塩酸等を用いることができるが、飲食品又は化粧品を製造する観点からは、クエン酸を使用することが好ましい。なお、ｐＨ２を超えると十分に溶解しない場合があり、本発明に用いることは好ましくない。なお、アミノ酸が難溶性の場合は加熱してもよい。また、前記酸性溶液中のアミノ酸濃度は特に限定はないが２〜５重量％が好ましい。
【００２０】
前記シスチン溶液と前記アミノ酸を含有する酸性溶液とを混合・撹拌する条件としては、混合液のｐＨが１０未満となるようにすればよく、特に限定はない。また混合後は、ｐＨ１０未満に調整した混合液を静置することで、溶液中で複合体を形成させることができる。
複合体の形成の有無は、溶液中の沈殿物の量を、あらかじめ測定しておいたシスチン単独の凝集物の沈殿量と比較することで判断することができる。
【００２１】
前記のようにして得られたシスチン−アミノ酸複合体は、前記混合液をろ過又は遠心分離することで分離することができる。複合体の種類としては、後述の実施例に示すように沈殿し難いものもあり、この場合にはろ過液を乾燥して回収することもできる。また、分離した複合体を固化させたり、粉末状にすることも可能である。
【００２２】
本発明のシスチン−アミノ酸複合体は、前記のように安全性に優れた方法で製造されたものであるため、飲食品又は化粧品に好適に配合することができる。また、このような飲食品又は化粧品を摂取した場合にシスチン又はアミノ酸単独で配合した場合に比べてそれぞれの作用効果が奏されるだけでなく、相乗的に有意になるという相乗効果も奏される。
【実施例】
【００２３】
つぎに実施例を挙げて本発明をより具体的に説明する。ただし、本発明はそれらの実施例のみに限定されるものではない。なお以下の実施例などにおいて、溶液などの濃度を示す％は特にその単位を付記していないかぎり重量％である。
【００２４】
実施例１
シスチン‐アミノ酸複合体は、Ｌ−シスチンをまず９０℃において、ｐＨ１０以上の炭酸カリウム溶液に溶解して２％シスチン溶液を作成する。これを室温（２５℃）に戻し、それにアミノ酸溶液４０ｇを徐々に添加して撹拌する。用いるアミノ酸溶液としては、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニンのいずれか一種を２％以上で含有する酸性溶液を作製し、上記の２％シスチン溶液に添加する。室温（２５℃）において、２％シスチン溶液５ｇに上記のアミノ酸溶液を徐々に混合・攪拌して、ｐＨを下げたところ、白濁を生じた。その後一晩続けて室温で放置して反応させ、反応終了後、１Ｍクエン酸緩衝液５ｇを添加してｐＨを６に調整した。この反応液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）以上で遠心分離して上清を除去した後、残存する上清と沈殿物を０．１Ｍクエン酸緩衝液で洗浄し、縣濁液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去し、乾燥させてシスチン‐アミノ酸複合体の沈殿物を得た。
【００２５】
比較例１
実施例の対照として、室温（２５℃）において、２％シスチン‐２％炭酸カリウム溶液５ｇに対して、１Ｍクエン酸溶液５．０ｇを混合・攪拌して、ｐＨを下げたところ、白濁を生じた。その後６０分間室温で放置して反応させ、反応終了後、１Ｍクエン酸緩衝液５ｇを添加してｐＨを６に調整し、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニンのいずれか一種を２％以上で含有するアミノ酸溶液４０ｇを徐々に混合・攪拌した後一晩続けて室温で放置した。この反応液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去した後、残存する上清と沈殿物を０．１Ｍクエン酸緩衝液で洗浄し、縣濁液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去し、乾燥させてシスチンの沈殿物を得た。
【００２６】
実施例２
バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン以外のアミノ酸に関して、実施例１及び比較例１と同様にしてシスチン‐アミノ酸複合体形成の検証実験を行った。Ｌ−シスチンをまず９０℃において、ｐＨ１０以上の炭酸カリウム溶液に溶解して２％シスチン溶液を作成する。これを室温（２５℃）に戻し、それにアミノ酸溶液４０ｇを徐々に添加して撹拌する。用いるアミノ酸溶液としては、アミノ酸を２％以上で含有する酸性溶液を作製し、上記の２％シスチン溶液に添加する。室温（２５℃）において、２％シスチン溶液５ｇに上記のアミノ酸溶液を徐々に混合・攪拌して、ｐＨを下げた。その後一晩続けて室温で放置して反応させ、反応終了後、１Ｍクエン酸緩衝液５ｇを添加してｐＨを６に調整した。この反応液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）以上で遠心分離して上清を除去した後、残存する上清と沈殿物を０．１Ｍクエン酸緩衝液で洗浄し、縣濁液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去し、乾燥させてシスチンを含有する沈殿物を得た。
【００２７】
比較例２
実施例２の対照として、室温（２５℃）において、２％シスチン‐２％炭酸カリウム溶液５ｇに対して、１Ｍクエン酸溶液５．０ｇを混合・攪拌して、ｐＨを下げたところ、白濁を生じた。その後６０分間室温で放置して反応させ、反応終了後、１Ｍクエン酸緩衝液５ｇを添加してｐＨを６に調整し、アミノ酸を２％以上で含有するアミノ酸溶液４０ｇを徐々に混合・攪拌した後一晩続けて室温で放置した。この反応液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去した後、残存する上清と沈殿物を０．１Ｍクエン酸緩衝液で洗浄し、縣濁液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去し、乾燥させてシスチンの沈殿物を得た。
【００２８】
実施例１と比較例１で得られた沈殿物の重量を比較した結果を表１に示す。実施例１で得られた沈殿物の重量を比較例１で得られたシスチンの沈殿物の重量を基準（１）として、１．５倍以上に増加したものを「増加」とし、０．７倍以下に減少したものを「減少」とし、０．８倍から１．２倍程度の変化のものを「変化なし」と分類した。なおチロシンに関しては上記の実施例と比較例に示した実験条件では溶解が困難であり、重量を評価することができなかったため、表１には結果を載せていない。
【００２９】
表１から明らかなように、シスチン−アミノ酸反応実験において、ｐＨの変化に伴うシスチンの沈殿物の重量は、グリシン、ヒスチジンを除いて、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、メチオニン、リジンのアミノ酸のいずれか一種との反応に関しては減少し、一方、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニンの４つのアミノ酸のいずれか一種との反応に関しては著しく増加した。以上より、グリシン、ヒスチジン、トリプトファンを除くアミノ酸は、シスチンと反応して複合化することが明らかとなった。なお、システインについては、シスチンの構成アミノ酸であり、類似の作用効果を有するアミノ酸であるため除いている。
【００３０】
【表１】
【００３１】
実施例３
下記の処方により各成分を混合して、シスチン０．１ｇとアミノ酸複合体０．９ｇを反応させてなるシスチン‐アミノ酸複合体１．０ｇを含有する飲料を作成した。アミノ酸はバリン：ロイシン：イソロイシン：フェニルアラニン＝１：２：１：０．５の比率で含有されるように調整したものを使用した。
【００３２】
【表２】
【００３３】
実施例４
下記の処方により各成分を混合して、シスチン０．３ｇとアミノ酸複合体２．７ｇを反応させてなるシスチン‐アミノ酸複合体３．０ｇを含有する化粧品を作成した。アミノ酸はバリン：ロイシン：イソロイシン：フェニルアラニン＝１：２：１：０．５の比率で含有されるように調整したものを使用した。
【００３４】
【表３】
【００３５】
試験例１
実施例１で作製した疲労回復・美容飲料を３０人の被試験者に２週間、毎日飲用してもらい、それによる疲労度・肌質の変化について、自覚症状のアンケート調査を行った。被試験者を１０人ずつＡ・Ｂ・Ｃの３グループに分けて、各々２５ｃｃ・５０ｃｃ・１００ｃｃを２週間、毎日飲用してもらった。表４にその結果を表に示す。
【００３６】
【表４】
【００３７】
比較例３
実施例１の飲料のシスチン−アミノ酸複合体の代わりに、シスチン１．０ｇを添加した飲料を作製した。
【００３８】
比較例４
実施例１の飲料のシスチン−アミノ酸複合体の代わりに、アミノ酸１．０ｇを添加した飲料を作製した。アミノ酸はバリン：ロイシン：イソロイシン＝１：２：１の比率で含有されるように調整したものを使用した。
【００３９】
比較例５
実施例１の飲料のシスチン‐アミノ酸複合体の代わりに、ブドウ糖１．０ｇを添加した飲料を作製した。
【００４０】
試験例２
試験例１と同じく、比較例３〜５で作製した飲料を４０人の被試験者に２週間、毎日飲用してもらい、それによる疲労度・肌質の変化について、自覚症状のアンケート調査を行った。被試験者を１０人ずつ４グループに分けて、それぞれ実施例１あるいは比較例３〜５で作製した飲料を１００ｃｃずつ２週間、毎日飲用してもらった。その結果を表５に示す。
【００４１】
【表５】
【００４２】
表５に示すように、実施例１及び比較例３〜５のいずれのグループにおいても美容・疲労回復への効果が見られた。但しプラセボコントロールとした比較例５ではほとんど美容・疲労回復への効果は見られなかった。すなわち、実施例１のシスチン‐アミノ酸複合体では、過半数の美容・疲労回復への効果が見られた。これ対して、比較例３のシスチン単独、比較例４のアミノ酸単独でも、実施例１ほどの美容効果及び疲労回復への効果が見られなかった。
したがって、シスチン‐アミノ酸複合体は、シスチンとバリン・ロイシン・イソロイシン・フェニルアラニンをそれぞれ単独で使用するよりも美容・疲労回復への効果に優れる効果を奏することが証明された。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明のシスチン‐アミノ酸複合体は、前記のようにシスチンの美白作用とアミノ酸の作用、特にバリン・ロイシン・イソロイシン・フェニルアラニンを用いた場合には筋肉疲労の軽減作用を共に備えた美容及び疲労回復において特に優れるものであるため、筋肉・髪・爪・皮膚の損傷を回復し、艶・なめらかさ・はりを付与する目的で、飲食品に有効成分として好適に使用することができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、飲食品又は化粧品用の機能性添加剤及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
アミノ酸は、タンパク質を構成しており、栄養素として重要である。近年では、アミノ酸を含有する補助食品が含まれた健康食品や飲料が多く販売されている。
【０００３】
中でも、体内で合成されない９種類の必須アミノ酸のうち、バリン、ロイシン、イソロイシンの３つは、枝分かれするような分子構造をしており、ＢＣＡＡ（Ｂｒａｎｃｈｅｄ Ｃｈａｉｎ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄの略；分岐鎖アミノ酸）とも呼ばれている。ほとんどのアミノ酸が肝臓で代謝されるのに対して、ＢＣＡＡは筋肉で代謝されエネルギーを産生する唯一のアミノ酸として知られている。ＢＣＡＡは肉・魚・乳製品・卵等の食品に多く含まれているが、運動前や運動中に効率的に摂取する目的で、飲料やサプリメントとしても提供されている。即ち上記の飲料やサプリメントは、運動により急速に消費されるエネルギー源を補い、筋肉の分解・損傷を抑制し、筋肉痛や筋肉疲労を軽減する目的で提供されている。またＢＣＡＡの肝臓におけるアルブミン合成促進作用を利用して、肝臓疾患の治療薬も開発されている（特許文献１，２）。更には筋蛋白質の合成を促進するシグナルとしての機能も有するという報告や、脳に疲労や眠気を伝えるセロトニンが脳に伝わるのを抑える働きがあると言われている。
【０００４】
そこで筋肉疲労軽減や肝臓疾患の治療の観点から、バリン、ロイシン、イソロイシンを配合した飲食品・医薬品の開発が進められており、配合比率の調査検討を重ねて吸収効率を向上させた組成物（特許文献３）や、ＢＣＡＡを含有する素材を加水分解してペプチド化した混合物（特許文献４， ５）、他の機能性素材と組み合わせた組成物（特許文献６）が提供されている。また呈味改善の観点からＢＣＡＡを有するペプチド混合物の開発も進められてきた（特許文献７）。しかしながら、バリン、ロイシン、イソロイシンをシスチン等の含硫アミノ酸あるいは含硫アミノ酸を有するタンパク質加水分解物と結合させて新たな機能を付与した素材は見られず、その開発が期待されていた。
【０００５】
フェニルアラニンは、上記のＢＣＡＡと同様に、体内で合成されない必須アミノ酸であり、アラニンの側鎖の水素原子がフェニル基で置き換えられた構造を有する。フェニルアラニンは、肉類を始めとして魚・貝・卵・乳製品等の食品に多く含まれているが、外傷・関節痛・リウマチ等の慢性的な痛みを軽減すると言われ、天然のＬ−フェニルアラニンから化学合成されたＤＬ−フェニルアラニンが鎮痛剤として提供されており、特に変形性関節症及び多発性硬化症に関連した疼痛を軽減する目的でフェニルアラニン誘導体の開発が進められてきた（特許文献８，９）。また、筋肉自体の疲労や筋肉の疲労に伴う精神的疲労を回復する目的でフェニルアラニンを含有する栄養組成物が開発されている（特許文献１０）。更に、鬱症状に対しても効果があると言われ、ＤＬ−フェニルアラニンが抗鬱の目的で利用される場合もある。一方、フェニルアラニンのメチルエステルをアスパラギン酸と結合させた構造のアスパルテームは、人工甘味料として飲食品の分野で広く用いられ、溶解性の改善等の改良が進められている（特許文献１１，１２）。フェニルアラニン摂取の安全性に関しては、フェニルアラニン−４−モノオキシゲナーゼ遺伝子の完全欠損であるフェニルケトン尿症では、血中にフェニルアラニンが異常に蓄積されることから、フェニルアラニンの摂取を控えることが推奨されている。そこで、その処置の方法（特許文献１３）、フェニルアラニン含量の少ないペプチド混合物の製造法（特許文献１４）、フェニルアラニンを含まない乳児及び幼児用食品が開発されている（特許文献１５）。しかしながら、上記の飲食品の分野のみならず他の分野においても、フェニルアラニンをシスチン等の含硫アミノ酸あるいは含硫アミノ酸を有するタンパク質加水分解物と結合させて新たな機能を付与した素材は見られず、その開発が期待されていた。
【０００６】
シスチンは２分子のシステインがチオール基（−ＳＨ）の酸化により生成するＳ−Ｓ結合（ジスルフィド結合）を介してつながった構造をもつアミノ酸である。ポリペプチド中のシステイン間のジスルフィド結合はタンパク質の２次構造の維持に必要であり、毛髪においては、ケラチン中のシステイン間のジスルフィド結合が巻き髪の度合いを決める。毛髪中には種々の蛋白質が存在するがおもな蛋白質はケラチンと呼ばれ約１８種類のアミノ酸からできている。絹や繊維など他の蛋白質にはほとんど含まれていないシスチンを１４〜１８％も含むことを特徴としている。さらには、毛髪に存在するケラチンは、爪にも存在し、そのアミノ酸組成は毛髪と類似しており、シスチンを多く含有する。ケラチン繊維中のシステイン残基間でジスルフィド結合が形成されてシスチンとなり、ケラチン繊維の強度の向上に寄与する。
【０００７】
そこで毛髪用化粧品の分野ではシスチンの有する特性を付加したシスチン導入ペプチド（特許文献１６）、システイン導入ペプチド（特許文献１７）が開発されており、その技術を用いて毛髪の損傷を防止し損傷した毛髪を回復させるための毛髪保護剤（特許文献１８）や、パーマネントウェーブ時の毛髪の損傷を防止し、毛髪に優れたウェーブを付与でき、処理後の毛髪に艶・潤いなどを付与することができるパーマネントウェーブ用第１剤（特許文献１９）が提供されている。また組織工学並びにバイオテクノロジーの分野で、インプラント等の生体材料への応用を目的として、チオール基の付加等の修飾によるコラーゲンの改質を行い、ジスルフィド結合を介して架橋可能なコラーゲン誘導体（特許文献２０）が開発されている。更にはチオール基を有する有機化合物（特許文献２１）が開発され、縫合糸・生体代用物・接着剤として提供されている。上記の通り毛髪化粧品及び組織工学並びにバイオテクノロジーの分野では含硫アミノ酸あるいは含硫アミノ酸を有するタンパク質加水分解物の有する特性を付加した素材の開発において進展が見られるが、それはペプチド以上の分子量のものに限られており、アミノ酸と複合化させた素材は見られない。更に、ｐＨの変化を伴うシスチンとペプチドとの反応により複合体が形成されることが確かめられている。しかしながら、アミノ酸とシスチンの複合体に関しては確認されておらず、含硫アミノ酸あるいは含硫アミノ酸を有するタンパク質加水分解物の有する特性をアミノ酸に付加した素材の開発が期待されていた。
【特許文献１】特許３６９６２９７号公報
【特許文献２】特許３６８２４５３号公報
【特許文献３】特許３３６８８９７号公報
【特許文献４】特許２９５８８０１号公報
【特許文献５】特許３１８３９４５号公報
【特許文献６】特許２８１４５２９号公報
【特許文献７】特許３２１１８２４号公報
【特許文献８】特開平９−５０３９７１号公報
【特許文献９】特開２００２−８８０９７号公報
【特許文献１０】特開平８−１９８７４８号公報
【特許文献１１】特開２００２−５０４９０５号公報
【特許文献１２】特許公表２００２−５０４９０５号公報
【特許文献１３】特許公表２０００−５０２３２３号公報
【特許文献１４】特開平８−１４０６９３号公報
【特許文献１５】特表平９−５０８８０７号公報
【特許文献１６】特開平１０−２８７６９７号公報
【特許文献１７】特開平１１−１２４３９５号公報
【特許文献１８】特開平１１−２６９０４５号公報
【特許文献１９】特開平１１−２６９０４７号公報
【特許文献２０】特開平６−８０９３５号公報
【特許文献２１】特表平９−５０３４９０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、飲食品又は化粧品に添加可能な機能性成分としてシスチンとアミノ酸との複合体を提供することを目的とする。中でも、本発明は、シスチンと、アミノ酸とをそれぞれを単独で投与した場合に比べて、それぞれの作用が有意に向上するという相乗効果を奏するシスチン−アミノ酸複合体及びその製造方法を提供することを目的とする。また、本発明は、前記シスチン−アミノ酸複合体を混合する食品又は化粧品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記の事情に鑑み鋭意研究を重ねた結果、シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解し、次いで酸性溶液に溶解したアミノ酸溶液と混合・攪拌することにより、ｐＨ１０未満の溶液中で何らかの形で複合体を形成させることができることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち、本発明の要旨は、
（１）シスチンに対してアミノ酸が結合したことを特徴とするシスチン−アミノ酸複合体、
（２）シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解し、
前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させてなる前記（１）に記載のシスチン−アミノ酸複合体、
（３）前記アミノ酸がアスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、メチオニン、リジン、バリン、イソロイシン、ロイシン及びフェニルアラニンからなる群より選ばれる１種以上である、前記（１）又は（２）記載のシスチン−アミノ酸複合体、
（４）シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解する工程と、
前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させる工程からなる
前記（１）〜（３）いずれか記載のシスチン−アミノ酸複合体の製造方法、
（５）前記（１）〜（３）いずれか記載のシスチン−アミノ酸複合体を含有する飲食品又は化粧品に関する。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のシスチン−アミノ酸複合体を飲食品又は化粧品等に添加して摂取することで、アミノ酸の有する種々の作用、中でもバリン・ロイシン・イソロイシン・フェニルアラニンなどのアミノ酸を用いた場合には筋肉疲労軽減作用と、シスチンの有するメラニン色素の出現防止効果による美白作用・解毒作用の両者における改善をそれぞれ単独で添加した場合よりもそれぞれ有意に向上させることができ、その結果として筋肉・髪・爪・皮膚の損傷を回復し、艶・なめらかさ・はりを付与することにおいて、これまで以上に健康・美容の効果を期待できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明のシスチン−アミノ酸複合体は、シスチンに対してアミノ酸が結合していることを特徴とする。
【００１３】
本発明で使用するシスチンとは、含硫アミノ酸であるシステイン２分子がＳ−Ｓ結合（ジスルフィド結合）を介してつながった構造を持ち、天然に多く存在するＬ体を用いるが、特にＬ体とＤ体の混合物あるいはＤ体のみでも複合体を製造することが可能であり、これに制限されない。
【００１４】
本発明で使用するアミノ酸とは、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、メチオニン、リジン、バリン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニンである。
前記アミノ酸は、単独でも混合物でもよいし、天然に多く存在するＬ体を用いるが、特にＬ体とＤ体の混合物あるいはＤ体のみでも複合体を製造することが可能であり、これに制限されない。
なお、本発明でいうアミノ酸にはグリシン、ヒスチジン、チロシン、トリプトファン、システインは含まれない。
【００１５】
本発明のシスチン−アミノ酸複合体は、シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解し、前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させてなることが好ましい。
本発明では、前記のような方法で複合体を形成させることで、従来のような複雑な化学合成を経る必要がなく、また、合成過程で使用する試薬を除去して精製する必要もないので、飲食品・化粧品等の安全性への留意を要する製品にも容易に添加することができ、また、沈殿物として回収することにより、溶液以外の形で使用することのできる汎用性の高い添加物となる。
【００１６】
原料であるシスチンは、ｐＨ１０未満の溶液中において凝集体を形成して沈殿する性質を有するが、シスチンとアミノ酸とが複合体を形成することで、凝集体の沈殿量に変化が生じる。
例えば、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、メチオニン、リジン等のアミノ酸とシスチンとが複合体を形成する場合には、シスチン単独と比べて沈殿物の量が減少する。一方、バリン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン等のアミノ酸とシスチンとが複合体を形成する場合には、シスチン単独と比べて沈殿物の量が増大する。
なお、グリシン、ヒスチジン、チロシン、システイン、トリプトファンの場合には、複合体を形成しないため、沈殿物の量に有意な変化はない。
したがって、本発明では、この沈殿物の量の変化を確認することで複合体の形成を判別することができる。
なお、本発明のシスチン−アミノ酸複合体における詳細な結合様式については明らかではないが、バリン・ロイシン・イソロイシン・フェニルアラニンの場合には前記シスチン重量に対して、アミノ酸の作用を発現する観点から、前記アミノ酸を０．５倍（重量比）以上含有する複合体であることが好ましい。
【００１７】
したがって、本発明は、シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解する工程と、
前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したバリン、ロイシン、イソロイシン及びフェニルアラニンからなる群より選ばれる一種以上の分岐鎖アミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させる工程からなる
前記シスチン−アミノ酸複合体の製造方法に関する。
【００１８】
本発明でシスチンを溶解することに使用するアルカリとは、ｐＨ１０以上の水溶液として用いることができ、例えば、炭酸カリウム・水酸化カリウム・炭酸ナトリウム・水酸化ナトリウムを用いることができるが、飲食品・化粧品の製造の観点からは炭酸カリウム・炭酸ナトリウムを使用することが好ましい。なおｐＨ１０未満では十分に溶解することができず、本発明に用いることは好ましくない。なお、前記アルカリ溶液中のシスチン濃度は特に限定はないが１〜３重量％が好ましい。
【００１９】
また、本発明で前記アミノ酸を溶解することに使用する酸性溶液とは、ｐＨ２以下の水溶液として用いることができ、例えば、クエン酸・酢酸・乳酸・塩酸等を用いることができるが、飲食品又は化粧品を製造する観点からは、クエン酸を使用することが好ましい。なお、ｐＨ２を超えると十分に溶解しない場合があり、本発明に用いることは好ましくない。なお、アミノ酸が難溶性の場合は加熱してもよい。また、前記酸性溶液中のアミノ酸濃度は特に限定はないが２〜５重量％が好ましい。
【００２０】
前記シスチン溶液と前記アミノ酸を含有する酸性溶液とを混合・撹拌する条件としては、混合液のｐＨが１０未満となるようにすればよく、特に限定はない。また混合後は、ｐＨ１０未満に調整した混合液を静置することで、溶液中で複合体を形成させることができる。
複合体の形成の有無は、溶液中の沈殿物の量を、あらかじめ測定しておいたシスチン単独の凝集物の沈殿量と比較することで判断することができる。
【００２１】
前記のようにして得られたシスチン−アミノ酸複合体は、前記混合液をろ過又は遠心分離することで分離することができる。複合体の種類としては、後述の実施例に示すように沈殿し難いものもあり、この場合にはろ過液を乾燥して回収することもできる。また、分離した複合体を固化させたり、粉末状にすることも可能である。
【００２２】
本発明のシスチン−アミノ酸複合体は、前記のように安全性に優れた方法で製造されたものであるため、飲食品又は化粧品に好適に配合することができる。また、このような飲食品又は化粧品を摂取した場合にシスチン又はアミノ酸単独で配合した場合に比べてそれぞれの作用効果が奏されるだけでなく、相乗的に有意になるという相乗効果も奏される。
【実施例】
【００２３】
つぎに実施例を挙げて本発明をより具体的に説明する。ただし、本発明はそれらの実施例のみに限定されるものではない。なお以下の実施例などにおいて、溶液などの濃度を示す％は特にその単位を付記していないかぎり重量％である。
【００２４】
実施例１
シスチン‐アミノ酸複合体は、Ｌ−シスチンをまず９０℃において、ｐＨ１０以上の炭酸カリウム溶液に溶解して２％シスチン溶液を作成する。これを室温（２５℃）に戻し、それにアミノ酸溶液４０ｇを徐々に添加して撹拌する。用いるアミノ酸溶液としては、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニンのいずれか一種を２％以上で含有する酸性溶液を作製し、上記の２％シスチン溶液に添加する。室温（２５℃）において、２％シスチン溶液５ｇに上記のアミノ酸溶液を徐々に混合・攪拌して、ｐＨを下げたところ、白濁を生じた。その後一晩続けて室温で放置して反応させ、反応終了後、１Ｍクエン酸緩衝液５ｇを添加してｐＨを６に調整した。この反応液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）以上で遠心分離して上清を除去した後、残存する上清と沈殿物を０．１Ｍクエン酸緩衝液で洗浄し、縣濁液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去し、乾燥させてシスチン‐アミノ酸複合体の沈殿物を得た。
【００２５】
比較例１
実施例の対照として、室温（２５℃）において、２％シスチン‐２％炭酸カリウム溶液５ｇに対して、１Ｍクエン酸溶液５．０ｇを混合・攪拌して、ｐＨを下げたところ、白濁を生じた。その後６０分間室温で放置して反応させ、反応終了後、１Ｍクエン酸緩衝液５ｇを添加してｐＨを６に調整し、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニンのいずれか一種を２％以上で含有するアミノ酸溶液４０ｇを徐々に混合・攪拌した後一晩続けて室温で放置した。この反応液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去した後、残存する上清と沈殿物を０．１Ｍクエン酸緩衝液で洗浄し、縣濁液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去し、乾燥させてシスチンの沈殿物を得た。
【００２６】
実施例２
バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン以外のアミノ酸に関して、実施例１及び比較例１と同様にしてシスチン‐アミノ酸複合体形成の検証実験を行った。Ｌ−シスチンをまず９０℃において、ｐＨ１０以上の炭酸カリウム溶液に溶解して２％シスチン溶液を作成する。これを室温（２５℃）に戻し、それにアミノ酸溶液４０ｇを徐々に添加して撹拌する。用いるアミノ酸溶液としては、アミノ酸を２％以上で含有する酸性溶液を作製し、上記の２％シスチン溶液に添加する。室温（２５℃）において、２％シスチン溶液５ｇに上記のアミノ酸溶液を徐々に混合・攪拌して、ｐＨを下げた。その後一晩続けて室温で放置して反応させ、反応終了後、１Ｍクエン酸緩衝液５ｇを添加してｐＨを６に調整した。この反応液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）以上で遠心分離して上清を除去した後、残存する上清と沈殿物を０．１Ｍクエン酸緩衝液で洗浄し、縣濁液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去し、乾燥させてシスチンを含有する沈殿物を得た。
【００２７】
比較例２
実施例２の対照として、室温（２５℃）において、２％シスチン‐２％炭酸カリウム溶液５ｇに対して、１Ｍクエン酸溶液５．０ｇを混合・攪拌して、ｐＨを下げたところ、白濁を生じた。その後６０分間室温で放置して反応させ、反応終了後、１Ｍクエン酸緩衝液５ｇを添加してｐＨを６に調整し、アミノ酸を２％以上で含有するアミノ酸溶液４０ｇを徐々に混合・攪拌した後一晩続けて室温で放置した。この反応液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去した後、残存する上清と沈殿物を０．１Ｍクエン酸緩衝液で洗浄し、縣濁液を４９０００×ｇ（２００００ｒｐｍ）で遠心分離して上清を除去し、乾燥させてシスチンの沈殿物を得た。
【００２８】
実施例１と比較例１で得られた沈殿物の重量を比較した結果を表１に示す。実施例１で得られた沈殿物の重量を比較例１で得られたシスチンの沈殿物の重量を基準（１）として、１．５倍以上に増加したものを「増加」とし、０．７倍以下に減少したものを「減少」とし、０．８倍から１．２倍程度の変化のものを「変化なし」と分類した。なおチロシンに関しては上記の実施例と比較例に示した実験条件では溶解が困難であり、重量を評価することができなかったため、表１には結果を載せていない。
【００２９】
表１から明らかなように、シスチン−アミノ酸反応実験において、ｐＨの変化に伴うシスチンの沈殿物の重量は、グリシン、ヒスチジンを除いて、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、メチオニン、リジンのアミノ酸のいずれか一種との反応に関しては減少し、一方、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニンの４つのアミノ酸のいずれか一種との反応に関しては著しく増加した。以上より、グリシン、ヒスチジン、トリプトファンを除くアミノ酸は、シスチンと反応して複合化することが明らかとなった。なお、システインについては、シスチンの構成アミノ酸であり、類似の作用効果を有するアミノ酸であるため除いている。
【００３０】
【表１】
【００３１】
実施例３
下記の処方により各成分を混合して、シスチン０．１ｇとアミノ酸複合体０．９ｇを反応させてなるシスチン‐アミノ酸複合体１．０ｇを含有する飲料を作成した。アミノ酸はバリン：ロイシン：イソロイシン：フェニルアラニン＝１：２：１：０．５の比率で含有されるように調整したものを使用した。
【００３２】
【表２】
【００３３】
実施例４
下記の処方により各成分を混合して、シスチン０．３ｇとアミノ酸複合体２．７ｇを反応させてなるシスチン‐アミノ酸複合体３．０ｇを含有する化粧品を作成した。アミノ酸はバリン：ロイシン：イソロイシン：フェニルアラニン＝１：２：１：０．５の比率で含有されるように調整したものを使用した。
【００３４】
【表３】
【００３５】
試験例１
実施例１で作製した疲労回復・美容飲料を３０人の被試験者に２週間、毎日飲用してもらい、それによる疲労度・肌質の変化について、自覚症状のアンケート調査を行った。被試験者を１０人ずつＡ・Ｂ・Ｃの３グループに分けて、各々２５ｃｃ・５０ｃｃ・１００ｃｃを２週間、毎日飲用してもらった。表４にその結果を表に示す。
【００３６】
【表４】
【００３７】
比較例３
実施例１の飲料のシスチン−アミノ酸複合体の代わりに、シスチン１．０ｇを添加した飲料を作製した。
【００３８】
比較例４
実施例１の飲料のシスチン−アミノ酸複合体の代わりに、アミノ酸１．０ｇを添加した飲料を作製した。アミノ酸はバリン：ロイシン：イソロイシン＝１：２：１の比率で含有されるように調整したものを使用した。
【００３９】
比較例５
実施例１の飲料のシスチン‐アミノ酸複合体の代わりに、ブドウ糖１．０ｇを添加した飲料を作製した。
【００４０】
試験例２
試験例１と同じく、比較例３〜５で作製した飲料を４０人の被試験者に２週間、毎日飲用してもらい、それによる疲労度・肌質の変化について、自覚症状のアンケート調査を行った。被試験者を１０人ずつ４グループに分けて、それぞれ実施例１あるいは比較例３〜５で作製した飲料を１００ｃｃずつ２週間、毎日飲用してもらった。その結果を表５に示す。
【００４１】
【表５】
【００４２】
表５に示すように、実施例１及び比較例３〜５のいずれのグループにおいても美容・疲労回復への効果が見られた。但しプラセボコントロールとした比較例５ではほとんど美容・疲労回復への効果は見られなかった。すなわち、実施例１のシスチン‐アミノ酸複合体では、過半数の美容・疲労回復への効果が見られた。これ対して、比較例３のシスチン単独、比較例４のアミノ酸単独でも、実施例１ほどの美容効果及び疲労回復への効果が見られなかった。
したがって、シスチン‐アミノ酸複合体は、シスチンとバリン・ロイシン・イソロイシン・フェニルアラニンをそれぞれ単独で使用するよりも美容・疲労回復への効果に優れる効果を奏することが証明された。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明のシスチン‐アミノ酸複合体は、前記のようにシスチンの美白作用とアミノ酸の作用、特にバリン・ロイシン・イソロイシン・フェニルアラニンを用いた場合には筋肉疲労の軽減作用を共に備えた美容及び疲労回復において特に優れるものであるため、筋肉・髪・爪・皮膚の損傷を回復し、艶・なめらかさ・はりを付与する目的で、飲食品に有効成分として好適に使用することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
シスチンに対してアミノ酸が結合したことを特徴とするシスチン−アミノ酸複合体。
【請求項２】
シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解し、
前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させてなる請求項１に記載のシスチン−アミノ酸複合体。
【請求項３】
前記アミノ酸がアスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、メチオニン、リジン、バリン、イソロイシン、ロイシン及びフェニルアラニンからなる群より選ばれる１種以上である、請求項１又は２記載のシスチン−アミノ酸複合体。
【請求項４】
シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解する工程と、
前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させる工程からなる
請求項１〜３いずれか記載のシスチン−アミノ酸複合体の製造方法。
【請求項５】
請求項１〜３いずれか記載のシスチン−アミノ酸複合体を含有する飲食品。
【請求項６】
請求項１〜３いずれか記載のシスチン−アミノ酸複合体を含有する化粧品。
【請求項１】
シスチンに対してアミノ酸が結合したことを特徴とするシスチン−アミノ酸複合体。
【請求項２】
シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解し、
前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させてなる請求項１に記載のシスチン−アミノ酸複合体。
【請求項３】
前記アミノ酸がアスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、セリン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、メチオニン、リジン、バリン、イソロイシン、ロイシン及びフェニルアラニンからなる群より選ばれる１種以上である、請求項１又は２記載のシスチン−アミノ酸複合体。
【請求項４】
シスチンをｐＨ１０以上のアルカリ溶液に溶解する工程と、
前記シスチン溶液と酸性溶液に溶解したアミノ酸を含有する溶液とを混合・撹拌することによりｐＨ１０未満の溶液中で複合体を形成させる工程からなる
請求項１〜３いずれか記載のシスチン−アミノ酸複合体の製造方法。
【請求項５】
請求項１〜３いずれか記載のシスチン−アミノ酸複合体を含有する飲食品。
【請求項６】
請求項１〜３いずれか記載のシスチン−アミノ酸複合体を含有する化粧品。
【公開番号】特開２０１０−１５０１９２（Ｐ２０１０−１５０１９２Ａ）
【公開日】平成２２年７月８日（２０１０．７．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−３３０６７７（Ｐ２００８−３３０６７７）
【出願日】平成２０年１２月２５日（２００８．１２．２５）
【出願人】（３９００２０１８９）ユーハ味覚糖株式会社 (242)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年７月８日（２０１０．７．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１２月２５日（２００８．１２．２５）
【出願人】（３９００２０１８９）ユーハ味覚糖株式会社 (242)
【Ｆターム（参考）】
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