ピロロキノリンキノンジナトリウム結晶
【課題】高純度で安定なＰＱＱ（ピロロキノリンキノン）ナトリウム塩の結晶及びその簡便な製造方法を提供すること。
【解決手段】ＰＱＱのトリナトリウム塩を水に懸濁させた後、この懸濁液に水溶性有機溶媒を加えＰＱＱのトリナトリウム塩の溶解度を下げ、ｐＨを２〜５の範囲に調整することにより製造した、結晶格子内に３分子以下の水を含むピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶および、該結晶が壊れたものを湿度２０から１００％の環境に１５分以上置くことで結晶を再生する方法。
【解決手段】ＰＱＱのトリナトリウム塩を水に懸濁させた後、この懸濁液に水溶性有機溶媒を加えＰＱＱのトリナトリウム塩の溶解度を下げ、ｐＨを２〜５の範囲に調整することにより製造した、結晶格子内に３分子以下の水を含むピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶および、該結晶が壊れたものを湿度２０から１００％の環境に１５分以上置くことで結晶を再生する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピロロキノリンキノンのナトリウム塩の新規結晶およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
式（１）で示される酸化型ピロロキノリンキノンは、一般的にＰＱＱと呼ばれ、新しいビタミンの可能性があることが提案されて注目を集めている。
【化１】
ＰＱＱは細菌に限らず、真核生物のカビ、酵母に存在し、補酵素として重要な働きを行っている。また、ＰＱＱについて近年までに細胞の増殖促進作用、抗白内障作用、肝臓疾患予防治療作用、創傷治癒作用、抗アレルギー作用、逆転写酵素阻害作用およびグリオキサラーゼＩ阻害作用−制癌作用、神経線維再生作用など多くの生理活性が明らかにされている。
【０００３】
ＰＱＱは、有機化学的合成法および発酵法などにより製造することが可能である。しかし、これらの方法で得られるＰＱＱは水や不純物の含量が多く、安定で純度の高いＰＱＱの結晶を得る技術が求められていた。これまでに、ＰＱＱのジナトリウム塩を燐酸バッファー中で蒸発濃縮することで、Ｘ線結晶構造解析において単結晶を示すＰＱＱのナトリウム塩結晶が得られていた（非特許文献１）。しかし、この方法は大量製造には向いていなく、工業的、経済的に有利な方法でない。
また、塩析での方法は大量使用するＮａＣｌのような塩が析出した固体中に混入するために、存在する塩を取り除く操作が必要で、その塩のために安定な品質を保証するための分析が困難になる欠点があった。また、結晶格子中に含まれる水分子が多く、品質低下の原因、カビ等の微生物の生育に適している欠点があった。
【０００４】
このような欠点がないＰＱＱの結晶を得る方法として、水溶性有機溶媒を添加することで再結晶をする方法が報告されている（特許文献１）。しかし、この文献には結晶形の情報はなく、さらに、固体を析出させるために冷却設備を必要とし、処理費用が高くなる欠点があった。また、結晶を構造破壊することなく、取り扱うのは難しく、壊れた際には元に戻らないのがふつうである。
従って、安定な結晶、その再生方法も求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特公平７−１１３０２４号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】JACS, 第111巻, 第6822〜6828頁（1989）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の課題は、高純度で安定なＰＱＱナトリウム塩の結晶及びその簡便な製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を行ったその結果、以下の様にＰＱＱナトリウム塩の結晶化の条件を工夫することにより、上記課題を解決しうるＰＱＱのナトリウム塩の新規な結晶を高純度で得ることに成功し、本発明を完成させた。
〔１〕式（１）で表されるピロロキノリンキノンのジナトリウム塩結晶であって、
【化２】
ピロロキノリンキノンジナトリウム塩１分子に対し３分子以下の水を含むことを特徴とするピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶。
〔２〕（ａ）〜（ｄ）の１つ以上を満たす〔１〕記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶。
（ａ）図１および２に示した結晶構造を有する。
（ｂ）本明細書中の図３における座標により定義された結晶構造を有する。
（ｃ）ａ＝7.60、ｂ＝10.09、ｃ＝11.43Å、α＝72.85、β＝88.01°、γ＝82.62°での結晶格子定数を有する。
（ｄ）Ｐ-１（＃２)といったような晶系空間群に属する結晶構造を有する。
〔３〕〔１〕又は〔２〕に記載の結晶又は該結晶が壊れたものを湿度２０から１００％の環境に１５分以上置くことで結晶を再生する方法。
〔４〕〔１〕又は〔２〕記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶を含む機能性食品。
〔５〕〔１〕又は〔２〕記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶を含む医薬。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、高純度で安定なＰＱＱナトリウム塩の結晶の提供及びその簡便な製造方法を提供可能とした。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】実施例１で得られた結晶構造。
【図２】実施例１で得られた結晶構造。
【図３】原子の配置。
【図４】粉末Ｘ線回折。
【図５】ＤＳＣ-ＸＲＤ測定結果。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の結晶１は式（１）に示す酸化型ピロロキノリンキノン（ＰＱＱ）のジナトリウム３水和物の結晶である。
【化３】
本発明の結晶は図１および２に示した結晶構造を有し；および／または
本明細書中の表１における座標により定義された結晶構造を有し；および／または
ａ＝7.60、ｂ＝10.09、ｃ＝11.43Å、α＝72.85、β＝88.01°、γ＝82.62°での結晶格子定数を有し；および／または
P-1(＃2)といったような晶系空間群に属する結晶構造を有する。
この物質は単結晶Ｘ線回折で同定されるが、モノクロメータが装着された一般的な粉末Ｘ線回折装置でその存在を確認することは可能である。
【００１２】
この結晶に含まれる水は３分子であるが、1分子減少しても結晶構造を維持することができる。１分子減少した結晶２は、一般的な粉末Ｘ線回折装置で確認することができ、その結果は９．１°、１０．３°、１３．８°、１７．７°、１８．３°、２４．０°（±０．２°）にピークがある。
従来のエタノール再結晶法で得られたＰＱＱジナトリウム塩の場合、粉末Ｘ線回折装置での測定で多くの回折ピークは現れず、結晶性が低い固体であると考えられた。
本発明の結晶は結晶学的には非特許文献１で報告されたＰＱＱジナトリウム塩と異なり、キノンの酸素、カルボン酸の酸素がナトリウムとイオン結合する距離に存在する。また、芳香環の面間隔も小さく、高密度である。さらに本発明の結晶の特徴としては高湿度状態であれば水和水は３分子になり、結晶格子から水が抜けていても、元に戻り安定な品質を保持できる利点を有している。
【００１３】
本発明のＰＱＱジナトリウム塩結晶の製造方法としては、例えば、原料のＰＱＱのトリナトリウム塩を水に懸濁させる。この際、水１Ｌ当たり１０〜８０ｇのＰＱＱのトリナトリウム塩を加えることが好ましい。次に、この懸濁液に水溶性有機溶媒を１０〜９０（v/v）％、好ましくは２０〜８０（v/v）％の濃度になるように加えＰＱＱのトリナトリウム塩の溶解度を下げる。そして、ｐＨを２〜５の範囲に調整して結晶化させる方法が挙げられる。
【００１４】
または、水溶性有機溶媒にＰＱＱトリナトリウム塩を懸濁（一部溶解してもよい）させた後、水溶性有機溶媒濃度が１０〜９０（v/v）％、好ましくは２０〜８０（v/v）％の濃度になるように水を加えた後、ｐＨを２〜５の範囲となるように調整して結晶化させてもよい。この際、加えた水溶性有機溶媒と水の合計量の１Ｌ当たり０．５〜８００ｇのＰＱＱのトリナトリウム塩を加えることが好ましい。
【００１５】
あるいは、水溶性有機溶媒を１０〜９０（v/v）％、好ましくは２０〜８０（v/v）％含む水性媒体にＰＱＱのトリナトリウム塩を懸濁（一部溶解してもよい）させた後、ｐＨを２〜５の範囲に調整して結晶化させてもよい。この際、水性媒体１Ｌ当たり０．５〜８００ｇのＰＱＱのトリナトリウム塩を加えることが好ましい。
【００１６】
原料に用いるＰＱＱのトリナトリウム塩は、有機化学的合成法(例えば、JACS、第１０３巻、５５９９〜５６００頁（１９８１)）又は発酵法(例えば、特開平１−２１８５９７号公報や特許第２６９２１６７号公報)等により製造することが可能である。原料に用いるＰＱＱのトリナトリウム塩は結晶でもよいし、非晶質でもよい。また、不純物を含んでいてもよい。
【００１７】
使用可能な水溶性有機溶媒の具体的な例をあげると、メタノール、エタノール、n-プロパノール、イソプロパノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、メトキシエタノール、ジエチレングリコール、メトキシジエチレングリコール、グリセリン、メトキシプロパノール、アセトン、メチルエチルケトン、アセトニトリル、乳酸エチル、ヒドロキシイソブチル酸メチル等がある。このうちアルコールがより好ましく、エタノールが特に好ましい。
水溶性有機溶媒は貧溶媒としてＰＱＱトリナトリウム塩の溶解度を下げるために使用するが、その濃度は初期のＰＱＱトリナトリウム塩の量にあわせて上記範囲内で適宜設定すればよい。
【００１８】
一般的な結晶の製造方法においては、固体を溶媒に溶解後、貧溶媒を加えて結晶を析出させるが、本発明では固体が存在する懸濁状態でも結晶化を行うことができる。懸濁状態で操作を行うことが出来ることで、使用する装置の容積の低減ができ、さらに排出する排水が低減できるために好ましい。
【００１９】
ＰＱＱのトリナトリウム塩の水溶液及び／又は懸濁液に、水溶性有機溶媒を加える際の両液体の温度は、液の凍結が発生しない限り特に制限はないが、高温にすればエネルギー効率が落ちることから、−３０℃〜８０℃が好ましい。
水溶性有機溶媒を添加した後、酸を添加してｐＨを２〜５にする際の溶液もしくは懸濁液の温度は、液の凍結が発生しない限り特に制限はないが、高温にすればエネルギー効率が落ち、また低温にすれば結晶化の速度が落ちることから、５℃〜８０℃が好ましい。
【００２０】
ｐＨ調整の方法としては、酸やバッファーの添加等が挙げられる。酸を添加する場合は用いる酸の種類は特に制限されないが、塩酸、臭化水素酸、沃化水素酸、過塩素酸、硝酸、硫酸などの無機酸、蟻酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、トリクロロ酢酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸などの有機酸などが挙げられ、その中でも塩酸が好ましい。
【００２１】
ｐＨの調整中又は調整後、必要に応じて攪拌すればよい。また、静置しても良い。攪拌時間は、例えば、５分〜７日とすることができる。静置時間は、例えば、５分〜１５日とすることができる。
ｐＨが安定し、ｐＨ２〜５の間の値で一定になった状態で、濾過、または遠心分離等により析出した結晶を分離して、結晶を得ることができる。
【００２２】
結晶１は３含水物であるが、含水量が異なっていても本発明の結晶構造を有する限り、問題がない。乾燥条件によっては含水量が変化する。水和量が減ることで結晶構造が壊れることがあるが、本発明の結晶は壊れたのち水と接触することで元の結晶構造に戻すことができる。水との接触は水溶性有機溶媒を含む結晶が溶けにくい水を含む溶液に漬けるか、湿度の高い環境に１５分以上置くことで可能である。湿度の高い環境に接触することが結晶の操作としては容易で好ましい。ここで高い湿度は２０％以上を示しており、より好ましくは７０−１００％の湿度で接触させるのが好ましい。
【００２３】
本発明で得られるＰＱＱジナトリウム結晶は、ヒト用または動物用として、食品、機能性食品、医薬品または医薬部外品として使用することができる。
具体的な形態としては、粉末、皮膚外用剤、注射剤、経口剤、坐剤、カプセル剤、タブレット、チュアブル、錠剤、ドリンク剤等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００２４】
調製の際に使用される添加剤としては、液剤としては水、果糖、ブドウ糖等の糖類、落下生油、大豆油、オリーブ油等の油類、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール等のグリコール類を用いることができる。錠剤、カプセル剤、顆粒剤などの固形剤の賦型剤としては乳糖、ショ糖、マンニット等の糖類、滑沢剤としてはカオリン、タルク、ステアリン酸マグネシウム等、崩壊剤としてデンプン、アルギン酸ナトリウム、結合剤としてポリビニルアルコール、セルロース、ゼラチン等、界面活性剤としては脂肪酸エステル等、可塑剤としてグリセリン等を例示することができるが、これらに限定されるものではない。必要に応じて溶解促進剤、充填剤等を加えてもよい。
【００２５】
機能性食品とは、健康食品、栄養補助食品、栄養機能食品、栄養保健食品等、健康の維持あるいは食事にかわり栄養補給の目的で摂取する食品を意味する。機能性食品として製品化する場合には、食品に用いられる添加剤、例えば甘味料、着色料、保存料、増粘安定剤、酸化防止剤、発色剤、漂白剤、防菌防黴剤、ガムベース、苦味料、酵素、光沢剤、酸味料、調味料、乳化剤、強化剤、製造用剤、香料、香辛料抽出物等を用いることができる。一般的には通常の食品、例えば味噌、醤油、インスタントみそ汁、ラーメン、焼きそば、カレー、コーンスープ、マーボードーフ、マーボーなす、パスタソース、プリン、ケーキ、パン等に加えることも可能である。
【００２６】
本発明のＰＱＱジナトリウム結晶は、単独でも、他の素材と組み合わせても使用できる。組み合わせ可能な素材としては、ビタミンＢ群、ビタミンＣおよびビタミンＥ等のビタミン類、アミノ酸類、アスタキサンチン、α-カロテン、β-カロテン等のカロテノイド類、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸等のω３脂肪酸類、アラキドン酸等のω６脂肪酸類などが例示されるが、これらに限定されるものではない。
【実施例】
【００２７】
実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２８】
実施例では以下の条件で行った。
粉末Ｘ線回折：株式会社マックサイエンス製Ｍ１８ＸＣＥ装置又は株式会社ＲＩＧＡＫＵ製ＲＩＮＴ２５００
Ｘ線：Ｃｕ／管電圧４０ｋＶ／管電流１００ｍＡ
スキャンスピード：４．０００°／ｍｉｎ
サンプリング幅：０．０２０°
水分量測定はカールフィッシャー法で測定した。
【００２９】
参考例１ 原料のＰＱＱトリナトリウム塩の調製
特許第２６９２１６７号公報の実施例１に基づき、ハイホミクロビウム ＤＳＭ１８６９を培養して得られた培養液を遠心分離して、菌体を除去し、ＰＱＱを含有する培養上澄液を得た。当該菌株はＤＳＭ（Deutsche Sammlung von Microorganismen (German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)から入手できる。
Sephadex Ｇ−１０（ファルマシア製）カラムに、この培養上澄液を通過させてＰＱＱを吸着させ、ＮａＣｌ水溶液で溶出させて得られたｐＨ７．５のＰＱＱ水溶液にさらにＮａＣｌを６０ｇ／Ｌ濃度になるように加えて冷却し、ＰＱＱトリナトリウム塩を得た。高速液体クロマトグラフィーのＵＶ吸収による得られたＰＱＱトリナトリウム塩の純度は９９．０％であった。
【００３０】
ＰＱＱナトリウム塩の分析は以下の分析条件で行った。
（ＰＱＱ分析）
ＰＱＱ濃度及び純度を以下に示す条件で測定した。
装置： 島津製作所、高速液体クロマトグラフィー、ＬＣ−２０Ａ
カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ ＯＤＳ−ＴＭＳ（５μｍ）、１５０x４．６ｍｍ Ｉ．Ｄ．
測定温度：４０℃
検出：２６０ｎｍにおける吸光度
溶離液：１００ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＨ／１００ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＮＨ４（３０／７０,ｐＨ５.１)
溶出速度：１．５ｍＬ／ｍin
【００３１】
（Ｎａ分析）
Ｎａ濃度を以下に示す条件で測定した。
ポンプ： 島津製作所、陽イオンクロマトグラフィー ＬＣ−６Ａ
カラムオーブン：島津製作所、ＨＩＣ−６Ａ
測定温度：４０℃
検出器：東ソー株式会社、電気伝導度計ＣＭ−８０００
カラム：昭和電工株式会社、Shodex、ＩＣ Ｙ−５２１
溶離液：４ｍＭ ＨＮＯ３
溶出速度：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
得られるＰＱＱとＮａの各濃度から、ＰＱＱナトリウム塩に含まれるＰＱＱとＮａの物質量比を求めた。本発明のＰＱＱジナトリウム塩は物質量比が２．０±０．２であり、ＰＱＱトリナトリウム塩は物質量比が３．０±０．２である。
【００３２】
実施例１ ＰＱＱジナトリウム塩の結晶
参考例１で調製したＰＱＱトリナトリウム塩１２ｇをイオン交換水５００ｇとエタノールを５００ｍＬの混合溶液に添加した。この時、懸濁状態になった。ｐＨメーターで測定を行いながら、塩酸を滴下し、ｐＨを３．６にした後、室温下で１時間攪拌した。５０℃で保存し、１０日以上置いた。この溶液中の結晶を取り出して、単結晶Ｘ線回折で測定した。
赤色の単結晶 Ｃ１４Ｈ１０Ｎ２Ｎａ２０１１で大きさ 0.100 x 0.100 x 0.100 mm ガラスファイバーに固定し、Rigaku 単結晶Ｘ線構造解析装置（VariMax with RAPID system）を使用し、 CuK・（λ=1.54187Å）４０ kV ３０ mA −180℃（吹付低温装置使用）Ｃｕ−Ｋ線を使用して測定した。結果を図１，２，３に示す。
この単結晶データから９．１°、１０．３°、１３．８°、１７．７°、１８．３°、２４．０°（±０．２°）にピークを粉末Ｘ線回折で示すことが分かった。水分量は１２．６％であった。
【００３３】
実施例２ 前駆体結晶
原料のＰＱＱトリナトリウムは参考例と同様にして得られた含水固体を使用した。ＰＱＱ２０ｇを含む含水ＰＱＱトリナトリウム塩の固体６０ｇをイオン交換水５００ｍｌとエタノール５００ｍｌの混合液に加えた。この時、固体は溶け切っていない。ここに室温下で塩酸を加え、ｐＨを３．５にした。塩酸の添加は約２時間かけてゆっくり滴下して行った。２日間攪拌した。濾過して含水ＰＱＱジナトリウム結晶を収率９９ｍｏｌ％で得た。色は明赤色であった。水分量２６．５％であった。
これを４０℃ＲＨ７５％の環境に一晩以上結晶を置き、水分量を測定した結果１１．５％であった。２θのピークで９．１、１０．３、１３．８、１７．７、１８．３、２４．０±０．２°あった。
水分が過剰存在しても三水和物の組成に戻り、結晶構造も維持していた。
【００３４】
実施例３ 水分量１１．４％
実施例２で得た前駆体結晶を減圧乾燥器に入れダイヤフラム型真空ポンプでできるだけ減圧し５０℃１時間乾燥した。水分量測定の結果、１１．４％であった。色は明赤色であった。２θのピークで９．１、１０．３、１３．８、１７．７、１８．３、２４．０±０．２°であった。粉末Ｘ線回折のデータを図4に示す。
これを４０℃ＲＨ７５％の環境に1晩以上結晶を置き、水分量を測定した結果１１．７％であった。水和量は２．７に相当し、３水和物としての構造を維持している。湿度の高い粉末Ｘ線の結果は同じであり、構造を維持していた。
【００３５】
実施例４ 水分量７％
実施例２で得た前駆体結晶を減圧乾燥器に入れダイヤフラム型真空ポンプでできるだけ減圧し５０℃２２時間乾燥した。水分量測定の結果、７％であった。この固体の色は茶色であった。
粉末Ｘ線の結果、実施例２と異なる結晶の混合物であった。これを４０℃ＲＨ７５％の環境に一晩以上結晶を置き、水分量を測定した結果、１０．８％で２．５水和量に変化した。このときの粉末Ｘ線回折は２θのピークで９．１、１０．３、１３．８、１７．７、１８．３、２４．０±０．２°であった。このときの色は明赤色であった。
水分量７％に減少すると結晶構造が壊れるが、湿度を与えることで元の結晶に変化した。また、色も同様に元の結晶の色になった。
【００３６】
実施例５ 水分量０．７％
実施例２で得た前駆体結晶を減圧乾燥器に入れダイヤフラム型真空ポンプでできるだけ減圧し５０℃７７時間乾燥した。水分量測定の結果、０．７％であった。このときの色は黒紫色であった。粉末Ｘ線の結果、実施例２と異なる結晶であった。これを４０℃ＲＨ７５％の環境に一晩以上結晶を置き、水分量を測定した結果、１２．７％で３水和量に変化した。このときの粉末Ｘ線回折は２θのピークで９．１、１０．３、１３．８、１７．７、１８．３、２４．０±０．２°であった。このときの色は明赤色であった。
水が減少すると結晶構造が壊れたが、湿度を与えることで元の結晶に変化した。また、色も同様に元の結晶の色になった。
本発明の結晶を使用することで安定な構造をとることが可能になる。また、結晶構造の回復を容易に行うことができる。
【００３７】
実施例６ ＤＳＣ-ＸＲＤ測定
装置 リガク製SmartLab（試料水平型多目的Ｘ線回折）示差走査熱量−Ｘ線回折同時測定装置（ＤＳＣ−ＸＲＤ）高速一次元検出器Ｄ／ｔeＸ Ｕｌｔｒａ
条件 Ｘ線源 Ｃｕ−Ｋα（４０ｋＶ−５０ｍＡ）走査軸 ２θ/θ走査速度 ５deg.／ｍｉｎ測定範囲 ３〜６ ０deg.（２／θ）
実施例２の粉末を測定した。窒素中で１８０℃まで温度をあげると元の結晶はすべて消失した。温度を下げても元の構造には戻らなかった。この状態から湿度を徐々に上げ、熱分析とＸＲＤ測定を同時に行った。その結果を図５に示す。
２０％湿度にすると熱の発生がみられ、２時間後にＸＲＤは元の３水和物構造に変化した。
本発明の結晶は湿度２０％でももとに戻ることが可能であった。
【００３８】
比較例１ エタノール再結晶法によるＰＱＱジナトリウム塩の固体析出
参考例１で調製したＰＱＱトリナトリウム塩をイオン交換水にすべて溶解し、ＰＱＱ１０ｇ/Ｌを含む溶液を８００ｇ用意した。塩酸を加えてｐＨを３．５にした後、ここにエタノールを２００ｍＬ添加した。この時、赤色固体が析出した。室温下で５時間攪拌した後、５℃で２４時間静置し、固体を析出させた。連続遠心分離で固体を回収し、５０℃で減圧乾燥を行った。
得られた固体の粉末Ｘ線回折スペクトルを測定した。得られた固体には低角側でピークが見られるほかはほとんどピークが見られず、結晶性が低かった。実施例２と同様の条件でガスクロマトグラフィーによる分析を行ったところ、エタノールが、０．０２％固体内に残留していることが分かった。
【産業上の利用可能性】
【００３９】
本発明のＰＱＱジナトリウム塩結晶は、ヒト用又は動物用として食品、機能性食品、医薬品または医薬部外品等の分野で有用である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピロロキノリンキノンのナトリウム塩の新規結晶およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
式（１）で示される酸化型ピロロキノリンキノンは、一般的にＰＱＱと呼ばれ、新しいビタミンの可能性があることが提案されて注目を集めている。
【化１】
ＰＱＱは細菌に限らず、真核生物のカビ、酵母に存在し、補酵素として重要な働きを行っている。また、ＰＱＱについて近年までに細胞の増殖促進作用、抗白内障作用、肝臓疾患予防治療作用、創傷治癒作用、抗アレルギー作用、逆転写酵素阻害作用およびグリオキサラーゼＩ阻害作用−制癌作用、神経線維再生作用など多くの生理活性が明らかにされている。
【０００３】
ＰＱＱは、有機化学的合成法および発酵法などにより製造することが可能である。しかし、これらの方法で得られるＰＱＱは水や不純物の含量が多く、安定で純度の高いＰＱＱの結晶を得る技術が求められていた。これまでに、ＰＱＱのジナトリウム塩を燐酸バッファー中で蒸発濃縮することで、Ｘ線結晶構造解析において単結晶を示すＰＱＱのナトリウム塩結晶が得られていた（非特許文献１）。しかし、この方法は大量製造には向いていなく、工業的、経済的に有利な方法でない。
また、塩析での方法は大量使用するＮａＣｌのような塩が析出した固体中に混入するために、存在する塩を取り除く操作が必要で、その塩のために安定な品質を保証するための分析が困難になる欠点があった。また、結晶格子中に含まれる水分子が多く、品質低下の原因、カビ等の微生物の生育に適している欠点があった。
【０００４】
このような欠点がないＰＱＱの結晶を得る方法として、水溶性有機溶媒を添加することで再結晶をする方法が報告されている（特許文献１）。しかし、この文献には結晶形の情報はなく、さらに、固体を析出させるために冷却設備を必要とし、処理費用が高くなる欠点があった。また、結晶を構造破壊することなく、取り扱うのは難しく、壊れた際には元に戻らないのがふつうである。
従って、安定な結晶、その再生方法も求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特公平７−１１３０２４号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】JACS, 第111巻, 第6822〜6828頁（1989）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の課題は、高純度で安定なＰＱＱナトリウム塩の結晶及びその簡便な製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を行ったその結果、以下の様にＰＱＱナトリウム塩の結晶化の条件を工夫することにより、上記課題を解決しうるＰＱＱのナトリウム塩の新規な結晶を高純度で得ることに成功し、本発明を完成させた。
〔１〕式（１）で表されるピロロキノリンキノンのジナトリウム塩結晶であって、
【化２】
ピロロキノリンキノンジナトリウム塩１分子に対し３分子以下の水を含むことを特徴とするピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶。
〔２〕（ａ）〜（ｄ）の１つ以上を満たす〔１〕記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶。
（ａ）図１および２に示した結晶構造を有する。
（ｂ）本明細書中の図３における座標により定義された結晶構造を有する。
（ｃ）ａ＝7.60、ｂ＝10.09、ｃ＝11.43Å、α＝72.85、β＝88.01°、γ＝82.62°での結晶格子定数を有する。
（ｄ）Ｐ-１（＃２)といったような晶系空間群に属する結晶構造を有する。
〔３〕〔１〕又は〔２〕に記載の結晶又は該結晶が壊れたものを湿度２０から１００％の環境に１５分以上置くことで結晶を再生する方法。
〔４〕〔１〕又は〔２〕記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶を含む機能性食品。
〔５〕〔１〕又は〔２〕記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶を含む医薬。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、高純度で安定なＰＱＱナトリウム塩の結晶の提供及びその簡便な製造方法を提供可能とした。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】実施例１で得られた結晶構造。
【図２】実施例１で得られた結晶構造。
【図３】原子の配置。
【図４】粉末Ｘ線回折。
【図５】ＤＳＣ-ＸＲＤ測定結果。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の結晶１は式（１）に示す酸化型ピロロキノリンキノン（ＰＱＱ）のジナトリウム３水和物の結晶である。
【化３】
本発明の結晶は図１および２に示した結晶構造を有し；および／または
本明細書中の表１における座標により定義された結晶構造を有し；および／または
ａ＝7.60、ｂ＝10.09、ｃ＝11.43Å、α＝72.85、β＝88.01°、γ＝82.62°での結晶格子定数を有し；および／または
P-1(＃2)といったような晶系空間群に属する結晶構造を有する。
この物質は単結晶Ｘ線回折で同定されるが、モノクロメータが装着された一般的な粉末Ｘ線回折装置でその存在を確認することは可能である。
【００１２】
この結晶に含まれる水は３分子であるが、1分子減少しても結晶構造を維持することができる。１分子減少した結晶２は、一般的な粉末Ｘ線回折装置で確認することができ、その結果は９．１°、１０．３°、１３．８°、１７．７°、１８．３°、２４．０°（±０．２°）にピークがある。
従来のエタノール再結晶法で得られたＰＱＱジナトリウム塩の場合、粉末Ｘ線回折装置での測定で多くの回折ピークは現れず、結晶性が低い固体であると考えられた。
本発明の結晶は結晶学的には非特許文献１で報告されたＰＱＱジナトリウム塩と異なり、キノンの酸素、カルボン酸の酸素がナトリウムとイオン結合する距離に存在する。また、芳香環の面間隔も小さく、高密度である。さらに本発明の結晶の特徴としては高湿度状態であれば水和水は３分子になり、結晶格子から水が抜けていても、元に戻り安定な品質を保持できる利点を有している。
【００１３】
本発明のＰＱＱジナトリウム塩結晶の製造方法としては、例えば、原料のＰＱＱのトリナトリウム塩を水に懸濁させる。この際、水１Ｌ当たり１０〜８０ｇのＰＱＱのトリナトリウム塩を加えることが好ましい。次に、この懸濁液に水溶性有機溶媒を１０〜９０（v/v）％、好ましくは２０〜８０（v/v）％の濃度になるように加えＰＱＱのトリナトリウム塩の溶解度を下げる。そして、ｐＨを２〜５の範囲に調整して結晶化させる方法が挙げられる。
【００１４】
または、水溶性有機溶媒にＰＱＱトリナトリウム塩を懸濁（一部溶解してもよい）させた後、水溶性有機溶媒濃度が１０〜９０（v/v）％、好ましくは２０〜８０（v/v）％の濃度になるように水を加えた後、ｐＨを２〜５の範囲となるように調整して結晶化させてもよい。この際、加えた水溶性有機溶媒と水の合計量の１Ｌ当たり０．５〜８００ｇのＰＱＱのトリナトリウム塩を加えることが好ましい。
【００１５】
あるいは、水溶性有機溶媒を１０〜９０（v/v）％、好ましくは２０〜８０（v/v）％含む水性媒体にＰＱＱのトリナトリウム塩を懸濁（一部溶解してもよい）させた後、ｐＨを２〜５の範囲に調整して結晶化させてもよい。この際、水性媒体１Ｌ当たり０．５〜８００ｇのＰＱＱのトリナトリウム塩を加えることが好ましい。
【００１６】
原料に用いるＰＱＱのトリナトリウム塩は、有機化学的合成法(例えば、JACS、第１０３巻、５５９９〜５６００頁（１９８１)）又は発酵法(例えば、特開平１−２１８５９７号公報や特許第２６９２１６７号公報)等により製造することが可能である。原料に用いるＰＱＱのトリナトリウム塩は結晶でもよいし、非晶質でもよい。また、不純物を含んでいてもよい。
【００１７】
使用可能な水溶性有機溶媒の具体的な例をあげると、メタノール、エタノール、n-プロパノール、イソプロパノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、メトキシエタノール、ジエチレングリコール、メトキシジエチレングリコール、グリセリン、メトキシプロパノール、アセトン、メチルエチルケトン、アセトニトリル、乳酸エチル、ヒドロキシイソブチル酸メチル等がある。このうちアルコールがより好ましく、エタノールが特に好ましい。
水溶性有機溶媒は貧溶媒としてＰＱＱトリナトリウム塩の溶解度を下げるために使用するが、その濃度は初期のＰＱＱトリナトリウム塩の量にあわせて上記範囲内で適宜設定すればよい。
【００１８】
一般的な結晶の製造方法においては、固体を溶媒に溶解後、貧溶媒を加えて結晶を析出させるが、本発明では固体が存在する懸濁状態でも結晶化を行うことができる。懸濁状態で操作を行うことが出来ることで、使用する装置の容積の低減ができ、さらに排出する排水が低減できるために好ましい。
【００１９】
ＰＱＱのトリナトリウム塩の水溶液及び／又は懸濁液に、水溶性有機溶媒を加える際の両液体の温度は、液の凍結が発生しない限り特に制限はないが、高温にすればエネルギー効率が落ちることから、−３０℃〜８０℃が好ましい。
水溶性有機溶媒を添加した後、酸を添加してｐＨを２〜５にする際の溶液もしくは懸濁液の温度は、液の凍結が発生しない限り特に制限はないが、高温にすればエネルギー効率が落ち、また低温にすれば結晶化の速度が落ちることから、５℃〜８０℃が好ましい。
【００２０】
ｐＨ調整の方法としては、酸やバッファーの添加等が挙げられる。酸を添加する場合は用いる酸の種類は特に制限されないが、塩酸、臭化水素酸、沃化水素酸、過塩素酸、硝酸、硫酸などの無機酸、蟻酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、トリクロロ酢酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸などの有機酸などが挙げられ、その中でも塩酸が好ましい。
【００２１】
ｐＨの調整中又は調整後、必要に応じて攪拌すればよい。また、静置しても良い。攪拌時間は、例えば、５分〜７日とすることができる。静置時間は、例えば、５分〜１５日とすることができる。
ｐＨが安定し、ｐＨ２〜５の間の値で一定になった状態で、濾過、または遠心分離等により析出した結晶を分離して、結晶を得ることができる。
【００２２】
結晶１は３含水物であるが、含水量が異なっていても本発明の結晶構造を有する限り、問題がない。乾燥条件によっては含水量が変化する。水和量が減ることで結晶構造が壊れることがあるが、本発明の結晶は壊れたのち水と接触することで元の結晶構造に戻すことができる。水との接触は水溶性有機溶媒を含む結晶が溶けにくい水を含む溶液に漬けるか、湿度の高い環境に１５分以上置くことで可能である。湿度の高い環境に接触することが結晶の操作としては容易で好ましい。ここで高い湿度は２０％以上を示しており、より好ましくは７０−１００％の湿度で接触させるのが好ましい。
【００２３】
本発明で得られるＰＱＱジナトリウム結晶は、ヒト用または動物用として、食品、機能性食品、医薬品または医薬部外品として使用することができる。
具体的な形態としては、粉末、皮膚外用剤、注射剤、経口剤、坐剤、カプセル剤、タブレット、チュアブル、錠剤、ドリンク剤等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００２４】
調製の際に使用される添加剤としては、液剤としては水、果糖、ブドウ糖等の糖類、落下生油、大豆油、オリーブ油等の油類、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール等のグリコール類を用いることができる。錠剤、カプセル剤、顆粒剤などの固形剤の賦型剤としては乳糖、ショ糖、マンニット等の糖類、滑沢剤としてはカオリン、タルク、ステアリン酸マグネシウム等、崩壊剤としてデンプン、アルギン酸ナトリウム、結合剤としてポリビニルアルコール、セルロース、ゼラチン等、界面活性剤としては脂肪酸エステル等、可塑剤としてグリセリン等を例示することができるが、これらに限定されるものではない。必要に応じて溶解促進剤、充填剤等を加えてもよい。
【００２５】
機能性食品とは、健康食品、栄養補助食品、栄養機能食品、栄養保健食品等、健康の維持あるいは食事にかわり栄養補給の目的で摂取する食品を意味する。機能性食品として製品化する場合には、食品に用いられる添加剤、例えば甘味料、着色料、保存料、増粘安定剤、酸化防止剤、発色剤、漂白剤、防菌防黴剤、ガムベース、苦味料、酵素、光沢剤、酸味料、調味料、乳化剤、強化剤、製造用剤、香料、香辛料抽出物等を用いることができる。一般的には通常の食品、例えば味噌、醤油、インスタントみそ汁、ラーメン、焼きそば、カレー、コーンスープ、マーボードーフ、マーボーなす、パスタソース、プリン、ケーキ、パン等に加えることも可能である。
【００２６】
本発明のＰＱＱジナトリウム結晶は、単独でも、他の素材と組み合わせても使用できる。組み合わせ可能な素材としては、ビタミンＢ群、ビタミンＣおよびビタミンＥ等のビタミン類、アミノ酸類、アスタキサンチン、α-カロテン、β-カロテン等のカロテノイド類、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸等のω３脂肪酸類、アラキドン酸等のω６脂肪酸類などが例示されるが、これらに限定されるものではない。
【実施例】
【００２７】
実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２８】
実施例では以下の条件で行った。
粉末Ｘ線回折：株式会社マックサイエンス製Ｍ１８ＸＣＥ装置又は株式会社ＲＩＧＡＫＵ製ＲＩＮＴ２５００
Ｘ線：Ｃｕ／管電圧４０ｋＶ／管電流１００ｍＡ
スキャンスピード：４．０００°／ｍｉｎ
サンプリング幅：０．０２０°
水分量測定はカールフィッシャー法で測定した。
【００２９】
参考例１ 原料のＰＱＱトリナトリウム塩の調製
特許第２６９２１６７号公報の実施例１に基づき、ハイホミクロビウム ＤＳＭ１８６９を培養して得られた培養液を遠心分離して、菌体を除去し、ＰＱＱを含有する培養上澄液を得た。当該菌株はＤＳＭ（Deutsche Sammlung von Microorganismen (German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)から入手できる。
Sephadex Ｇ−１０（ファルマシア製）カラムに、この培養上澄液を通過させてＰＱＱを吸着させ、ＮａＣｌ水溶液で溶出させて得られたｐＨ７．５のＰＱＱ水溶液にさらにＮａＣｌを６０ｇ／Ｌ濃度になるように加えて冷却し、ＰＱＱトリナトリウム塩を得た。高速液体クロマトグラフィーのＵＶ吸収による得られたＰＱＱトリナトリウム塩の純度は９９．０％であった。
【００３０】
ＰＱＱナトリウム塩の分析は以下の分析条件で行った。
（ＰＱＱ分析）
ＰＱＱ濃度及び純度を以下に示す条件で測定した。
装置： 島津製作所、高速液体クロマトグラフィー、ＬＣ−２０Ａ
カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ ＯＤＳ−ＴＭＳ（５μｍ）、１５０x４．６ｍｍ Ｉ．Ｄ．
測定温度：４０℃
検出：２６０ｎｍにおける吸光度
溶離液：１００ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＨ／１００ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＮＨ４（３０／７０,ｐＨ５.１)
溶出速度：１．５ｍＬ／ｍin
【００３１】
（Ｎａ分析）
Ｎａ濃度を以下に示す条件で測定した。
ポンプ： 島津製作所、陽イオンクロマトグラフィー ＬＣ−６Ａ
カラムオーブン：島津製作所、ＨＩＣ−６Ａ
測定温度：４０℃
検出器：東ソー株式会社、電気伝導度計ＣＭ−８０００
カラム：昭和電工株式会社、Shodex、ＩＣ Ｙ−５２１
溶離液：４ｍＭ ＨＮＯ３
溶出速度：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
得られるＰＱＱとＮａの各濃度から、ＰＱＱナトリウム塩に含まれるＰＱＱとＮａの物質量比を求めた。本発明のＰＱＱジナトリウム塩は物質量比が２．０±０．２であり、ＰＱＱトリナトリウム塩は物質量比が３．０±０．２である。
【００３２】
実施例１ ＰＱＱジナトリウム塩の結晶
参考例１で調製したＰＱＱトリナトリウム塩１２ｇをイオン交換水５００ｇとエタノールを５００ｍＬの混合溶液に添加した。この時、懸濁状態になった。ｐＨメーターで測定を行いながら、塩酸を滴下し、ｐＨを３．６にした後、室温下で１時間攪拌した。５０℃で保存し、１０日以上置いた。この溶液中の結晶を取り出して、単結晶Ｘ線回折で測定した。
赤色の単結晶 Ｃ１４Ｈ１０Ｎ２Ｎａ２０１１で大きさ 0.100 x 0.100 x 0.100 mm ガラスファイバーに固定し、Rigaku 単結晶Ｘ線構造解析装置（VariMax with RAPID system）を使用し、 CuK・（λ=1.54187Å）４０ kV ３０ mA −180℃（吹付低温装置使用）Ｃｕ−Ｋ線を使用して測定した。結果を図１，２，３に示す。
この単結晶データから９．１°、１０．３°、１３．８°、１７．７°、１８．３°、２４．０°（±０．２°）にピークを粉末Ｘ線回折で示すことが分かった。水分量は１２．６％であった。
【００３３】
実施例２ 前駆体結晶
原料のＰＱＱトリナトリウムは参考例と同様にして得られた含水固体を使用した。ＰＱＱ２０ｇを含む含水ＰＱＱトリナトリウム塩の固体６０ｇをイオン交換水５００ｍｌとエタノール５００ｍｌの混合液に加えた。この時、固体は溶け切っていない。ここに室温下で塩酸を加え、ｐＨを３．５にした。塩酸の添加は約２時間かけてゆっくり滴下して行った。２日間攪拌した。濾過して含水ＰＱＱジナトリウム結晶を収率９９ｍｏｌ％で得た。色は明赤色であった。水分量２６．５％であった。
これを４０℃ＲＨ７５％の環境に一晩以上結晶を置き、水分量を測定した結果１１．５％であった。２θのピークで９．１、１０．３、１３．８、１７．７、１８．３、２４．０±０．２°あった。
水分が過剰存在しても三水和物の組成に戻り、結晶構造も維持していた。
【００３４】
実施例３ 水分量１１．４％
実施例２で得た前駆体結晶を減圧乾燥器に入れダイヤフラム型真空ポンプでできるだけ減圧し５０℃１時間乾燥した。水分量測定の結果、１１．４％であった。色は明赤色であった。２θのピークで９．１、１０．３、１３．８、１７．７、１８．３、２４．０±０．２°であった。粉末Ｘ線回折のデータを図4に示す。
これを４０℃ＲＨ７５％の環境に1晩以上結晶を置き、水分量を測定した結果１１．７％であった。水和量は２．７に相当し、３水和物としての構造を維持している。湿度の高い粉末Ｘ線の結果は同じであり、構造を維持していた。
【００３５】
実施例４ 水分量７％
実施例２で得た前駆体結晶を減圧乾燥器に入れダイヤフラム型真空ポンプでできるだけ減圧し５０℃２２時間乾燥した。水分量測定の結果、７％であった。この固体の色は茶色であった。
粉末Ｘ線の結果、実施例２と異なる結晶の混合物であった。これを４０℃ＲＨ７５％の環境に一晩以上結晶を置き、水分量を測定した結果、１０．８％で２．５水和量に変化した。このときの粉末Ｘ線回折は２θのピークで９．１、１０．３、１３．８、１７．７、１８．３、２４．０±０．２°であった。このときの色は明赤色であった。
水分量７％に減少すると結晶構造が壊れるが、湿度を与えることで元の結晶に変化した。また、色も同様に元の結晶の色になった。
【００３６】
実施例５ 水分量０．７％
実施例２で得た前駆体結晶を減圧乾燥器に入れダイヤフラム型真空ポンプでできるだけ減圧し５０℃７７時間乾燥した。水分量測定の結果、０．７％であった。このときの色は黒紫色であった。粉末Ｘ線の結果、実施例２と異なる結晶であった。これを４０℃ＲＨ７５％の環境に一晩以上結晶を置き、水分量を測定した結果、１２．７％で３水和量に変化した。このときの粉末Ｘ線回折は２θのピークで９．１、１０．３、１３．８、１７．７、１８．３、２４．０±０．２°であった。このときの色は明赤色であった。
水が減少すると結晶構造が壊れたが、湿度を与えることで元の結晶に変化した。また、色も同様に元の結晶の色になった。
本発明の結晶を使用することで安定な構造をとることが可能になる。また、結晶構造の回復を容易に行うことができる。
【００３７】
実施例６ ＤＳＣ-ＸＲＤ測定
装置 リガク製SmartLab（試料水平型多目的Ｘ線回折）示差走査熱量−Ｘ線回折同時測定装置（ＤＳＣ−ＸＲＤ）高速一次元検出器Ｄ／ｔeＸ Ｕｌｔｒａ
条件 Ｘ線源 Ｃｕ−Ｋα（４０ｋＶ−５０ｍＡ）走査軸 ２θ/θ走査速度 ５deg.／ｍｉｎ測定範囲 ３〜６ ０deg.（２／θ）
実施例２の粉末を測定した。窒素中で１８０℃まで温度をあげると元の結晶はすべて消失した。温度を下げても元の構造には戻らなかった。この状態から湿度を徐々に上げ、熱分析とＸＲＤ測定を同時に行った。その結果を図５に示す。
２０％湿度にすると熱の発生がみられ、２時間後にＸＲＤは元の３水和物構造に変化した。
本発明の結晶は湿度２０％でももとに戻ることが可能であった。
【００３８】
比較例１ エタノール再結晶法によるＰＱＱジナトリウム塩の固体析出
参考例１で調製したＰＱＱトリナトリウム塩をイオン交換水にすべて溶解し、ＰＱＱ１０ｇ/Ｌを含む溶液を８００ｇ用意した。塩酸を加えてｐＨを３．５にした後、ここにエタノールを２００ｍＬ添加した。この時、赤色固体が析出した。室温下で５時間攪拌した後、５℃で２４時間静置し、固体を析出させた。連続遠心分離で固体を回収し、５０℃で減圧乾燥を行った。
得られた固体の粉末Ｘ線回折スペクトルを測定した。得られた固体には低角側でピークが見られるほかはほとんどピークが見られず、結晶性が低かった。実施例２と同様の条件でガスクロマトグラフィーによる分析を行ったところ、エタノールが、０．０２％固体内に残留していることが分かった。
【産業上の利用可能性】
【００３９】
本発明のＰＱＱジナトリウム塩結晶は、ヒト用又は動物用として食品、機能性食品、医薬品または医薬部外品等の分野で有用である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）で表されるピロロキノリンキノンのジナトリウム塩結晶であって、
【化１】
ピロロキノリンキノンジナトリウム塩１分子に対し３分子以下の水を含むことを特徴とするピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶。
【請求項２】
（ａ）〜（ｄ）の１つ以上を満たす請求項１記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶。
（ａ）図１および２に示した結晶構造を有する。
（ｂ）本明細書中の図３における座標により定義された結晶構造を有する。
（ｃ）ａ＝7.60、ｂ＝10.09、ｃ＝11.43Å、α＝72.85、β＝88.01°、γ＝82.62°での結晶格子定数を有する。
（ｄ）Ｐ-１（＃２)といったような晶系空間群に属する結晶構造を有する。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の結晶又は該結晶が壊れたものを湿度２０から１００％の環境に１５分以上置くことで結晶を再生する方法。
【請求項４】
請求項１又は２記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶を含む機能性食品。
【請求項５】
請求項１又は２記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶を含む医薬。
【請求項１】
式（１）で表されるピロロキノリンキノンのジナトリウム塩結晶であって、
【化１】
ピロロキノリンキノンジナトリウム塩１分子に対し３分子以下の水を含むことを特徴とするピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶。
【請求項２】
（ａ）〜（ｄ）の１つ以上を満たす請求項１記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶。
（ａ）図１および２に示した結晶構造を有する。
（ｂ）本明細書中の図３における座標により定義された結晶構造を有する。
（ｃ）ａ＝7.60、ｂ＝10.09、ｃ＝11.43Å、α＝72.85、β＝88.01°、γ＝82.62°での結晶格子定数を有する。
（ｄ）Ｐ-１（＃２)といったような晶系空間群に属する結晶構造を有する。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の結晶又は該結晶が壊れたものを湿度２０から１００％の環境に１５分以上置くことで結晶を再生する方法。
【請求項４】
請求項１又は２記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶を含む機能性食品。
【請求項５】
請求項１又は２記載のピロロキノリンキノンジナトリウム塩結晶を含む医薬。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【公開番号】特開２０１３−１１２６７７（Ｐ２０１３−１１２６７７Ａ）
【公開日】平成２５年６月１０日（２０１３．６．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−２６３４２９（Ｐ２０１１−２６３４２９）
【出願日】平成２３年１２月１日（２０１１．１２．１）
【出願人】（０００００４４６６）三菱瓦斯化学株式会社 (1,281)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２５年６月１０日（２０１３．６．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年１２月１日（２０１１．１２．１）
【出願人】（０００００４４６６）三菱瓦斯化学株式会社 (1,281)
【Ｆターム（参考）】
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