本発明は、遺伝子発現または接着タンパク質もしくはこれらの受容体の分泌を調節して疾患を治すためのプロセス、化合物および組成物を提供し、ここで調節は、正および負の制御すること、特に癌の増殖を阻害することを含み、ここで、接着タンパク質または受容体はフィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含み、方法、プロセス、化合物および組成物は抗血管形成でもあり、癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、腎臓癌または頸癌を含む。

【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞における遺伝子発現に影響を及ぼし、その結果、疾患を治療する方法および組成物を提供し、この方法は、症候群を軽減することを含む。一実施形態において、方法は遺伝子発現の阻害を含む。一実施形態において、方法は遺伝子発現を刺激することを含む。
【０００２】
本発明は、遺伝子発現または接着タンパク質の分泌またはこれらの受容体を調節して疾患を治療する方法、プロセス、化合物および組成物を提供し、ここで、調節は正および負の制御をすることを含み、癌の成長を阻害することを含み、ここで接着タンパク質または受容体は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。
(関連出願の相互参照)
本出願は２００７年８月３０日に出願された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０７７２７３号、２００７年２月１６日に出願された米国特許出願第６０／８９０，３８０号、２００７年７月３日に出願された米国特許第６０／９４７，７０５号、および２００７年３月７日に出願された米国特許出願第１１／６８３，１９８号（２００６年４月２７日に出願された米国特許出願第６０／７９５，４１７号、２００６年９月１日に出願された第６０／８４１，７２７号、２００７年２月１６日に出願された第６０／８９０，３８０号の利益を請求する）、および２００６年４月２７日に出願された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０１６１５８号（次の出願の優先権を請求する：（１）２００５年１１月２８日に出願された米国特許出願第１１／２８９１４２号、および２００５年１１月４日に出願された第１１／２６７，５２３号、（２）２００５年９月７日に出願された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ０５／３１９００号（２００４年１０月８日に出願された米国特許出願第６０／６１７，３７９号、２００４年９月２７日に出願された第６０／６１３，８１１号、および２００４年９月７日に出願された第６０／６０７，８５８号の優先権を主張する）、（３）２００５年５月１７日に出願された米国特許出願第１１／１３１，５５１号、ならびに（４）２００５年４月２７日に出願された米国特許出願第１１／１１７，７６０号）の優先権を主張する。これらの先行出願の内容は、全体として本発明の一部として参照される。
【背景技術】
【０００３】
転移は癌の末期であり、この段階では癌細胞は原発腫瘍細胞部位を離れ、身体の他の部分へ移動する。癌細胞は原発腫瘍から離脱し、周囲の細胞外マトリックスに接着し、血流またはリンパ系を介して身体の他の部分へ移動する。接着タンパク質は癌転移において重要な役割を果たす。
【０００４】
転移が起こると、これを治療できる方法は多数あり、例えば放射線手術、化学療法、放射線療法、生物療法、ホルモン療法、外科手術およびレーザー免疫療法がある。しかし、これらは転移性癌の発生を防止できないことが多い。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は癌細胞の接着を調節し、これらの移動、転移をブロックするか、または癌の成長または抗血管形成を阻害する方法を提供し、ここで、接着タンパク質およびその受容体は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。
【０００６】
本発明は細胞における接着タンパク質を減少させ、癌細胞の移動、転移をブロックするか、または癌の成長もしくは抗血管形成を阻害する方法を提供し、ここで接着タンパク質またはその受容体は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、本発明はフィブロネクチンの分泌を減少させる方法を提供する。一実施形態において、本発明は接着タンパク質の発現を阻害する方法を提供し、ここで接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。本発明は癌細胞膜の特性を変更することにより、癌の成長、移動、転移を阻害する方法を提供し、ここでこの特性は接着タンパク質を含み、ここで癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、腎臓癌および頸癌を含む。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、遺伝子発現を調節して、疾患を治療するか、または症候群を軽減する方法および組成物を提供し、ここで、調節は正および負の制御をすることを含む。一実施形態において、方法は遺伝子発現を阻害することを含む。一実施形態において、方法は遺伝子発現を刺激することを含む。
【０００８】
本発明は、癌の移動、転移、もしく成長を阻害するため、または抗血管形成のための方法および組成物を提供し、この方法は遺伝子発現に影響を及ぼすことを含み、接着タンパク質またはこれらの受容体に影響を及ぼすか、接着タンパク質を減少させるか、または接着タンパク質の発現もしくは分泌を阻害することを含み、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。
【０００９】
本発明は癌の移動、転移、もしくは成長の阻害または抗血管形成のための方法および組成物を提供し、ここで方法は遺伝子発現に影響を及ぼすことを含み、遺伝子発現を刺激することを含む。
【００１０】
本発明は癌細胞膜の特性を変更して、癌細胞の移動、転移のブロックをもたらすか、または癌の成長もしくは抗血管形成の阻害のための方法を提供し、ここで方法は接着タンパク質またはこれらの受容体を減少させることを含み、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。
【００１１】
本発明は、細胞の接着タンパク質を減少させる方法、プロセス、化合物および組成物を提供し、ここで接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、方法は遺伝子発現を阻害することを含む。一実施形態において、本発明はフィブロネクチンの分泌を減少させる方法を提供する。一実施形態において、方法は癌細胞の移動、転移の移動、転移をブロックできるか、または癌の成長もしくは抗血管形成を阻害でき、癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、腎臓癌または頸癌を含む。
【００１２】
本発明は癌細胞膜の特性を変更する方法を提供し、この方法は接着タンパク質の分泌を変更し、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、方法、プロセス、化合物および組成物は、接着タンパク質の発現もしくは分泌のブロック、抑制または阻害を含む。一実施形態において、方法、プロセス、化合物および組成物は接着タンパク質と相互作用する。一実施形態において、方法、プロセス、化合物または組成物は癌細胞の移動、転移をブロックできるか、または癌の成長もしくは抗血管形成を阻害でき、癌は乳癌、白血球、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、腎臓癌および頸癌を含む。
【００１３】
接着タンパク質は癌細胞接着、浸潤または転移に役立ち、ここで癌は卵巣癌を含む。接着タンパク質を減少させると癌の転移が軽減されるであろう。フィブロネクチンは上皮性卵巣癌の生態における主な要素の一つである。フィブロネクチンの減少は癌細胞の転移を阻害する。本発明は疾患を治療するためにフィブロネクチンを含む接着タンパク質の分泌を阻害する方法および組成物を提供し、ここで疾患は癌成長を阻害することを含み、ここで癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、腎臓および頸癌を含む。
【００１４】
本発明は、癌細胞の膜特性を変更することにより癌の成長、移動、転移を阻害する組成物を提供し、ここで特性は、タンパク質の接着を含み、特に、タンパク質の分泌または細胞の接着を含み、特性は接着能を含み、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含み、癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、腎臓癌または頸癌を含み、方法はＸａｎｉｆｏｌｉａＹ０、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、ＡＣＨ−Ｙまたはその塩、エステル、代謝産物を接触させる。一実施形態において、組成物は本出願における式から選択される化合物である。
【００１５】
本発明は癌細胞膜の接着特性を変更する方法を提供し、この方法は接着能を低下させることを含み、この方法はフィブロネクチンの分泌を減少させることを含み、癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、腎臓癌または頸癌を含み、方法は有効量のＸａｎｉｆｏｌｉａ Ｙ０、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、ＡＣＨ−Ｙまたはその塩、エステル、代謝産物を接触させる。一実施形態において、方法は有効量の本出願における式から選択される化合物を接触させる。一実施形態において、方法は癌の成長、移動、転移を阻害する。一実施形態において、化合物は式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）および（１Ｄ）から選択できる。一実施形態において、化合物はトリテルペン骨格、２個のアンゲロイル基および糖部分を含む。一実施形態において、化合物はＸａｎｉｆｏｌｉａ（ｘ）、エスシン（Ｅｓｃｉｎ）またはアエスシン（Ａｅｓｃｉｎ）から選択される。一実施形態において、化合物は化合物Ａ〜ＸおよびＡ１〜Ｘ１から選択される。一実施形態において、化合物は本出願における化合物Ｚ１〜Ｚ７から選択される。
【００１６】
本発明は癌細胞膜の接着特性を変更することにより癌の成長、移動、転移を阻害するための組成物を提供し、ここで癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、腎臓癌または頸癌を含む。
【００１７】
本発明は疾患を治療するために接着タンパク質を減少させるため（ここで疾患は癌成長の阻害、下肢腫脹、慢性静脈不全、末梢浮腫、高脂血症、慢性静脈疾患、静脈瘤疾患、静脈瘤性症候群、静脈鬱滞、去痰剤、末梢血管障害、脳器質けいれん、脳循環障害、脳浮腫、精神病、月経困難症、痔、会陰切開、末梢浮腫形成もしくは術後腫脹の症状の軽減を含む）、脚部痛みの症状を軽減するため、掻痒、下肢体積を治療するため、痛みの症状を軽減するため、血栓症、静脈血栓症、胃潰瘍抗痙攣薬を予防するための方法および組成物であって、これらを必要とする対象に、有効量の本発明の組成物を投与することを含む方法および組成物を提供する。
【００１８】
一実施形態において、方法は接着タンパク質と相互作用することを含み、ここで接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、本発明はフィブロネクチンの分泌を減少させる方法を提供する。
【００１９】
一実施形態において、方法は接着タンパク質の接着能を低下させることを含み、ここでこの接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。
【００２０】
一実施形態において、方法は接着タンパク質の分泌を調節することを含み、ここでこの接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、方法は接着タンパク質の分泌をブロックすることを含み、ここでこの接着タンパク質は、フィブロネクチンを含む。一実施形態において、方法は本出願における式から選択される有効量の化合物を接触させる。
【００２１】
一実施形態において、方法は有効量の、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ Ｙ０、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、ＡＣＨ−Ｙ、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（ｘ）、エスシンもしくはアエスシンまたはこれらの塩、エステル、代謝産物を含む本出願の化合物を接触させる。一実施形態において、化合物は化合物Ａ〜ＸおよびＡ１〜Ｘ１から選択される。一実施形態において、化合物は本出願における化合物Ｚ１〜Ｚ７から選択される。一実施形態において、化合物は式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）および（１Ｄ）から選択できる。
【００２２】
本発明は、接着タンパク質の特性を変更して疾患を治療するため（ここで特性は接着能を含み、ここでこの方法はフィブロネクチンの分泌を減少させることを含み、疾患は癌成長の阻害、下肢腫脹、慢性静脈不全、末梢浮腫、高脂血症、慢性静脈疾患、静脈瘤疾患、静脈瘤性症候群、静脈鬱滞、去痰剤、末梢血管障害、脳器質けいれん、脳循環障害、脳浮腫、精神病、月経困難症、痔、会陰切開、末梢浮腫形成または術後腫脹の症状の軽減を含む）、脚部痛みの症状を軽減するため、掻痒、下肢体積を治療するため、痛みの症状を軽減するため、血栓症、静脈血栓症、胃潰瘍抗痙攣薬を予防するための方法および組成物で、これらを必要とする対象に、有効量の本発明の組成物を投与することを含み、ここで、この接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、方法は本出願における式から選択される化合物と、対象において有効量を接触させる。
【００２３】
式：
【化１】

（（１Ａ）とも称する）
（式中、
Ｒ１は、水素、ヒドロキシル、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−アルキル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリール、およびこれらの誘導体から選択され、
Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−アルキル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリール、およびこれらの誘導体から選択され、
Ｒ４は、ＣＨ_２Ｒ６またはＣＯＲ６を表し、ここでＲ６は、ヒドロキシル、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−アルキル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリール、およびこれらの誘導体からなる群から選択され、
Ｒ３は、ＨまたはＯＨであり、
Ｒ８は、ＨまたはＯＨ、特にＯＨであり、
Ｒ５は、水素または糖部分であり、ここで糖部分は、グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、アルズロン酸、グルクロン酸、ガラクツロン酸、およびこれらの誘導体またはこれらの組み合わせからなる群から選択され、ここでＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５は、独立してＣＨ_３、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯ−アルキル、ＣＯＯ−アリール、ＣＯＯ−ヘテロサイクリック、ＣＯＯ−ヘテロアリール、ＣＨ_２Ｏアリール、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロサイクリック、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロアリール、アルキル基、ヒドロキシル、アセチル基、特にＣＨ_３から選択される基に結合し、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ６の少なくとも２つは、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリール、およびこれらの誘導体からなる群から選択され、またはＲ１、Ｒ２、およびＲ４の少なくとも１つは、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、およびこれらの誘導体からなる群から選択される少なくとも２つの基で置換された糖部分であり、または
Ｒ４は、ＣＨ_２Ｒ６である、Ｒ１およびＲ２は、独立してＯ−アンゲロイル基からなる、またはＲ１、Ｒ２およびＲ６の少なくとも２つは、Ｏ−アンゲロイルである、またはＲ１、Ｒ２もしくはＲ６の少なくとも１つは、２つのＯ−アンゲロイルを有する糖部分であり、
Ｒ５は、次の糖およびアルズロン酸：グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、グルクロン酸、ガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせから選択される糖部分であり、この糖はグルクロン酸、アラビノースおよびガラクトースを含む）、
を有する、単離、精製または合成化合物またはその塩、エステル、代謝産物またはその誘導体。
【００２４】
一実施形態において、Ｒ５はグルコース、ガラクトース、アラビノース、アルズロン酸、グルクロン酸、ガラクツロン酸、および誘導体またはこれらの組み合わせからなる群から選択される糖部分である）。
【００２５】
一実施形態において、方法は化合物を接触させ、ここで、化合物は次のものから選択される：
ａ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ）：
【００２６】
【化２】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｂ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ１）：
【００２７】
【化３】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｃ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ２）：
【００２８】
【化４】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｄ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ８）：
【００２９】
【化５】

または化学名：３−Ｏ−［β−グルコピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｅ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ９）：
【００３０】
【化６】

または化学名：３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、および
ｆ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ１０）：
【００３１】
【化７】

または化学名：３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物。
【００３２】
ｇ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ０）：
【００３３】
【化８】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−（２−メチルプロパノイル）−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｈ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｘ）：
【００３４】
【化９】

または化学名：３−Ｏ−｛［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−［α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）］−β−Ｄ−グルクロノピラノシドブチルエステル｝−２１−Ｏ−アセチル−２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物。
【００３５】
ｉ）構造（Ｙ７）：
【００３６】
【化１０】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル−（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル−２８−Ｏ−２−メチルブタノイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｊ）構造（ＡＣＨ−Ｙ）：
【００３７】
【化１１】

を有する、単離、精製または合成化合物。
【００３８】
一実施形態において、方法は化合物を接触させ、ここで化合物は次のものから選択される：
ｋ）構造：
【００３９】
【化１２】

を有する、単離、精製または合成化合物、
ｌ）構造：
【００４０】
【化１３】

を有する、単離、精製または合成化合物。
【００４１】
一実施形態において、方法は化合物を接触させ、ここで次式：
【００４２】
【化１４】

（式中、Ｒ１、Ｒ２は個々にＯ−アセチルまたはＯ−アンゲロイルから選択され、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７は水素またはヒドロキシルである）、
から選択される構造を有する化合物が単離されるか、精製されるか、または合成される。
【００４３】
一実施形態において、方法はＸａｎｉｆｏｌｉａ Ｙ０、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（ｘ）、エスシンもしくはアエスシンまたはこれらの塩、エステル、代謝産物を含む本出願における化合物を接触させる。一実施形態において、化合物は式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）および（１Ｄ）から選択できる。一実施形態において、化合物はトリテルペン骨格、２個のアンゲロイル基および糖部分を含む。一実施形態において、化合物はＸａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ０、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、およびＹ１０）から選択される。一実施形態において、化合物はＸａｎｉｆｏｌｉａ（ｘ）、エスシンまたはアエスシンから選択される。一実施形態において、化合物は本出願における化合物Ａ〜ＸおよびＡ１〜Ｘ１から選択される。一実施形態において、化合物は本出願における化合物Ｚ１〜Ｚ７から選択される。一実施形態において、方法はトリテルペン（２１、２１位の炭素は不飽和基および炭素３で糖部分を有する）を含む化合物を接触させる。
【００４４】
一実施形態において、接着能を低下させる本出願の化合物はコロニー形成における細菌を阻害し、細胞指向性を調節する。
【００４５】
一実施形態において、ウイルスが宿主細胞と結合するのを阻害するために細胞またはウイルスの接着能を低下させること（ここでウイルスはＨＩＶを含む）。
【００４６】
組成物は天然植物由来または合成から得られる生物活性化合物を含む。植物の大部分はムクロジ（Ｓａｐｉｎｄａｃｅａｅ）科由来であり、ムクロジ科は１４００〜２０００種を有する１４０〜１５０属を有する。プログラムは、本発明者等の精製法およびＭＴＴアッセイをはじめとする生物学的検定法に基づく。２００５年９月７日に出願された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ０５／３１９００号、２００５年１１月２８日に出願された米国特許出願第１１／２８９１４２号、および２００５年５月１７日に出願された米国特許出願第１１／１３１５５１号（その内容は本発明の一部として参照される）を参照のこと。
【００４７】
本発明は、トリテルペノイドサポニンを含む組成物を使用する方法を提供する。一実施形態において、サポニンはトリテルペノイド、トリテルペノイドサポニンまたは他のサポニン、１個以上の糖部分および２個のアンゲロイル基、または次の基：アンゲロイル基、チグロイル基もしくはセネシオイル基から選択される少なくとも２個の側基を有し、ここで側基は、炭素２１および２２でサポゲニン骨格と結合している。一実施形態において、側基に結合した少なくとも２個のアンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリックまたはヘテロアリールを有し、ここでサポニンにおける糖部分は、次の糖およびアルズロン酸：グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、グルクロン酸、ガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせの少なくとも１以上を含み、ここでこの糖は好ましくはグルクロン酸、アラビノースおよびガラクトースを含む。
【００４８】
本発明はさらに、アンゲロイル、チグロイルまたはセネシオイル基から選択される少なくとも２個の基で置換された構造を含む組成物を提供し、ここで側鎖は、トリテルペノイダル、トリテルペノイド、トリテルペノイダルまたは他のサポゲニン骨格に結合している。これらの構造は天然または合成から得ることができる。本発明は生物活性化合物を調製する方法であって：
（ａ）植物の根、仁、葉、樹皮、茎、殻、種子、種子の殻もしくは果実、またはこれらの組み合わせを、有機溶媒、例えばエタノールまたはメタノールで抽出して、有機抽出物を得るステップと、（ｂ）有機抽出物を集めるステップと、（ｃ）有機抽出物を還流させて、第２抽出物を得るステップと、（ｄ）第２抽出物から有機溶媒を除去して第３抽出物を得るステップと、（ｅ）第３抽出物を乾燥し、殺菌して、粗抽出粉末を得るステップと、（ｆ）粗抽出物粉末を分画して画分または成分を得るステップ（分画はシリカゲル、Ｃ１８または他の同等の固相物質を用いたＨＰＬＣおよびＦＰＬＣクロマトグラフィーにより行うことができる）と、（ｇ）ＨＰＬＣまたはＦＰＬＣを用いて、２０７ｎｍ〜５００ｎｍの吸収波長を用いるならば、分画をモニターするステップと、（ｈ）粗抽出物の生物活性成分を同定するステップと、（ｉ）粗抽出物の１以上の生物活性成分をＦＰＬＣで精製して、生物活性成分の１以上の画分を得るステップと、（ｊ）分取カラムおよびＨＰＬＣを用いるクロマトグラフィー技法を用いて生物活性成分を単離するステップ、とを含む方法を提供する。
【００４９】
一実施形態において、本発明は、サポニンまたは他の化合物の生物活性を試験するためのＭＴＴ Ａｓｓａｙ ＴＥＳＴ ＰＬＡＴＦＯＲＭの方法を提供する。
【００５０】
細胞
ヒト癌細胞系はＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから入手した：ＨＴＢ−９（膀胱）、ＨｅＬａ−Ｓ３（頸部）、ＤＵ１４５（前立腺）、Ｈ４６０（肺）、ＭＣＦ−７（乳房）、Ｋ５６２（白血球）、ＨＣＴ１１６（結腸）、ＨｅｐＧ２（肝臓）、Ｕ２ＯＳ（骨）、Ｔ９８Ｇ（脳）、ＳＫ−ＭＥＬ−５（皮膚）およびＯＶＣＡＲ−３（卵巣）。細胞を次の培地中で増殖させた：ＨｅＬａ−Ｓ３、ＤＵ１４５、ＭＣＦ−７、Ｈｅｐ−Ｇ２およびＴ９８ＧをＭＥＮ（Ｅａｒｌｅ塩）中で、ＨＴＢ−９、Ｈ４６０、Ｋ５６２およびＯＶＣＡＲ−３をＲＰＭＩ−１６４０、ＨＣＴ−１１６中で、Ｕ２ＯＳをＭｃＣｏｙ−５Ａ中で増殖させた。これらの培地には１０％ウシ胎仔血清、グルタミンおよび抗生物質を添加し、３７℃で加湿５％ＣＯ_２とともにインキュベーター中でインキュベートした。
【００５１】
ＭＴＴアッセイ
ＭＴＴアッセイと、それに続いてＣａｒｍｉｃｈａｅｌ等（１９８７）により記載された方法に変更を加えた方法。細胞を９６穴プレート中にＨＴＢ−９、ＨｅＬａ、Ｈ４６０、ＨＣＴ１１６、Ｔ９８ＧおよびＯＶＣＡＲ−３については１０，０００／穴、ＤＵ１４５、ＭＣＦ−７、ＨｅｐＧ２およびＵ２ＯＳについては１５，０００／穴、およびＫ５６２については４０，０００／穴の濃度で２４時間播種した後、薬物処理した。細胞を次いで薬物に４８時間暴露した（ＨｅｐＧ２およびＵ２ＯＳについては７２時間、そしてＭＣＦ−７については９６時間）。薬物処理後、ＭＴＴ（０．５ｍｇ／ｍＬ）を培養物に添加し、１時間インキュベートした。ホルマザン（生存細胞によるテトラゾリウムの還元生成物）が生じ、ＤＭＳＯを用いて溶解させ、４９０ｎｍでのＯ．Ｄ．をＥＬＩＳＡリーダにより測定した。薬物処理前のＭＴＴレベルも測定した（Ｔ０）。％細胞成長（％Ｇ）を、％Ｇ＝（ＴＤ−Ｔ０／ＴＣ−Ｔ０）×１００（１）（式中、ＴＣまたはＴＤは対照もしくは薬物処理細胞のＯ．Ｄ．の読みを表す）として計算する。
【００５２】
Ｔ０＞ＴＤである場合、対照の％として表された細胞毒性（ＬＣ）を、％ＬＣ＝（ＴＤ−Ｔ０／Ｔ０）×１００（２）として計算する。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙをインキュベーションした後の、癌細胞（ＥＳ２）からのフィブロネクチン分泌の阻害の時間分析を示す図である。培地中に放出されたフィブロネクチンをウェスタンブロットにより測定した。Ａ：（実験Ｆ１の結果）ＹはＸａｎｉｆｏｌｉａ化合物Ｙである、Ｂ：（実験Ｆ３の結果）、Ｃ：（実験Ｆ４の結果）。
【図２】Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙによるフィブロネクチン分泌の阻害（ウェスタンブロット）を示す図である。Ａ：実験Ｆ５の結果、Ｂ：実験Ｆ７の結果、Ｃ：実験Ｆ８の結果、Ｄ：実験Ｆ１１の結果、Ｅ：実験Ｆ１２の結果、Ｆ：実験Ｆ１３の結果、Ｇ：実験Ｆ１４Ｂの結果、Ｈ：実験１４Ｃの結果。
【図３】Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙによるフィブロネクチン分泌の阻害（ウェスタンブロット）を示す図である。Ａ：実験Ｆ２３の結果、Ｂ：実験Ｆ２４の結果、Ｃ：実験Ｆ２６の結果、Ｄ：実験Ｆ２７の結果、Ｅ：実験Ｆ２９の結果、Ｆ：実験Ｆ２８の結果。
【図４】Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙによるフィブロネクチン分泌の阻害（ウェスタンブロット）を示す図である。Ａ：実験Ｆ３０の結果、Ｂ：実験Ｆ３１の結果、Ｃ：実験Ｆ３２の結果、Ｄ：実験Ｆ３３Ａの結果、Ｅ：実験Ｆ２０の結果。
【図５】Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ処置によるＥＳ２細胞におけるアンジオポイエチン２の合成の増加を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００５４】
マイクロアレイ：マイクロアレイによるＹ処理後のＥＳ２細胞の遺伝子発現の分析
本発明において、遺伝子発現の研究においてマイクロアレイ実験を行った。総数５４，６７６の遺伝子が研究されている。
【００５５】
細胞培養および薬物処理。ＥＳ２細胞をＴ−２５フラスコ中にフラスコあたり４，５００，０００細胞で２４時間播種した。細胞培養物を、ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ（Ｙ）を含む新鮮な培地またはＤＭＳＯ薬物を含まない対照（Ｄ）で２４時間置換した。細胞を次いでＲＮＡ単離のために採取した。三つの実験を行った。
【００５６】
ＲＮＡ抽出、標識、ハイブリダイゼーション、およびデータ分析。Ｑｉａｇｅｎ ＲＮｅａｓｙ Ｋｉｔを用いて腫瘍細胞からＲＮＡを抽出した。ＲＮＡの質および量をＡｇｉｌｅｎｔ ＢｉｏＡｎａｌｙｚｅｒおよびＮａｎｏＤｒｏｐ（登録商標）ＮＤ−１０００分光光度計をそれぞれ用いてチェックした後、さらに操作した。第１および第２のｃＤＮＡストランドを、２０ｎｇの全ＲＮＡからＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘ Ｔ７オリゴ（ｄＴ）プライマープロトコルおよび２サイクル増幅用キットを用いて合成した。増幅されたビオチン標識ｃＲＮＡを産生するために、Ａｍｂｉｏｎから入手したＭｅｇａＳｃｒｉｐｔキットを用いたインビトロ転写によりｃＤＮＡを逆転写した。１５．０μｇの標識ｃＲＮＡをフラグメント化し、ＮａｎｏＤｒｏｐ（登録商標）ＮＤ−１０００分光光度計を用いて濃度について再チェックした。Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘスパイクイン対照およびフラグメント化標識ｃＲＮＡを含むハイブリダイゼーションカクテルをヒトＵ１３３ Ｐｌｕｓ ２．０ ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）オリゴヌクレオチドアレイ上に負荷した。Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘアレイ（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ、Ｉｎｃ．Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ、ＣＡ）は、１，３００，０００を超える独自のオリゴヌクレオチド特性からなり、この特性は３８，５００の十分な裏付けがあるヒト遺伝子を表す。アレイを１６時間４５℃で、６０ｒｐｍで回転しながらハイブリダイズし、次いで洗浄し、ストレプトアビジン、Ｒ−フィコエリトリン複合体ステインでＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘ Ｆｌｕｉｄｉｃｉｓ Ｓｔａｔｉｏｎ４５０上で染色した。ビオチニル化抗ストレプトアビジンを用いてシグナル増幅を行った。オートローダーを有するＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）３０００共焦点レーザースキャナを用いてアレイをスキャンした。画像を分析し、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ ＧＣＯＳソフトウェアバージョン１．４を用いて品質管理メトリクスを記録した。最後に、Ｐｌｉｅｒアルゴリズムに基づくｄＣｈｉｐ ＰＭ−ｏｎｌｙモデルを用いて各遺伝子の発現値を計算した。
【００５７】
データ分析法
対比較を次のようにして行った。処理対対照（Ｙ対Ｄ）、修飾薬対対照（ＹＭ／ＡＣＹ−Ｈ対Ｄ）および処理対修飾薬（Ｙ対ＹＭ／ＡＣＨ−Ｙ）ＣｅｌファイルをＲ統計プログラミングのＢｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒパッケージを用いて分析した。Ｌｉｍｍａ分析によりサンプル間で変化する妥当な数の遺伝子が得られた。
【００５８】
未補正データをＧＣＲＭＡ法（ロバストマルチアレイ分析）により正規化した。これはＢｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒ．ｏｒｇ／）に実装されている。未補正シグナル強度データを正規化し、バックグラウンドを補正し、ある統計モデルに基づいて集約し、ｌｏｇ２スケールの発現値をプローブ対ごとのチップごとに得る。次に、処理対間で遺伝子発現の有意な変化はないという帰無仮説を試験した。これはＬＩＭＭＡにより行い、これもＢｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒに組み込まれている。これは実験的Ｂａｙｅｓ法を用いて遺伝子発現における差異を推定する。比較、即ちハイグレード対ローグレードの比較を行った。未補正ｐ値を誤差発見率（ｆａｌｓｅ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ（ＦＤＲ））制御のためのＢｅｎｊａｍｎｉｎ−Ｈｏｃｈｂｅｒｇ法により調整した。全てのデータセットはｐ値が０．０５未満である有意な数の遺伝子を含んでいた。これは遺伝子が識別的発現されない（擬陽性）確率が１：２０ということである。
【００５９】
全ての発現データをｐ値（０．０５）によりフィルタする。
【００６０】
未補正のｐ値を誤差発見率（ＦＤＲ）制御のためのＢｅｎｊａｍｎｉｎ−Ｈｏｃｈｂｅｒｇ法により調整して、調整されたｐ値を得た。
【００６１】
ウェスタンブロット
本発明の化合物で処理された細胞および処理されていない細胞において特異的タンパク質を検出するための方法として、ウェスタンブロットを本発明において適用する。ここで、細胞は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、腎臓癌および頸癌である。
【００６２】
細胞：標的細胞をＲＰＭＩ１６４０培地中で成長させた。１，５００，０００個の細胞をＴ２５フラスコ中に播種し、２４時間成長させた後、薬物処理した。
【００６３】
薬物処理：２．５ｕｌのＤＭＳＯ（対照として）［Ｄ］、または１０、２０、３０、４０、８０ｕｇ／ｍｌの試験化合物のいずれかを含む新鮮なＲＰＭＩ培地で細胞培養物を置換した。２４時間後、培地のアリコートをフィブロネクチン決定（ウェスタンブロット法）のために採取した。
【００６４】
２４時間での細胞生存性をＭＴＴアッセイにより決定した。ＭＴＴを含むＲＰＭＩ培地（５ｍｌ）で培養物を置換し、１時間インキュベートした。形成されたホルマザンを１０ｍｌのＤＭＳＯ中に溶解させ、５７０ｎｍでのＯＤを測定した（ＭＴＴ単位）。
【００６５】
ウェスタンブロット：使用済み培地をＳＤＳ試料緩衝液と混合し、３分間沸騰させた後、ＳＤＳゲルに載せた。試料を６〜１０％のＳＤＳゲルに塗布し、１００ボルトで２時間電気泳動を行った。タンパク質を電気泳動によりニトロセルロース膜に移した。ニトロセルロースブロットを第１抗体および第２抗体（ＡＰ複合、Ｐｒｏｍｅｇａ Ｓ３７２１）とともにインキュベートした。ＢＣＩＰ／ＮＢＴ発色装置を用いてイムノバンドを発現させた。
【００６６】
ウェスタンバンド強度の決定：ウェスタンブロットのバンド画像を、デジタルカメラを用いて取り込み、バンドの強度を、「Ｉｍａｇｅ Ｊ」ソフトウェアを用いて決定した。
【００６７】
本発明は、接着タンパク質を調節するため、接着タンパク質を減少させるため、またはフィブロネクチンの分泌を減少させるため、慢性静脈不全、末梢浮腫、高脂血症、慢性静脈疾患、静脈瘤疾患、静脈瘤性症候群、静脈鬱滞、去痰剤、末梢血管障害、脳器質けいれん、脳循環障害、脳浮腫、精神病、月経困難症、痔、会陰切開、末梢浮腫形成もしくは術後腫脹を治療するため、痛みの症状を軽減するため、腹痛の症状を軽減するため、脚部痛みの症状を軽減するため、掻痒、下肢体積、血栓症、静脈血栓症を治療するため、リウマチを治療するため、胃潰瘍抗痙攣薬を予防するため、癌細胞の移動、転移をブロックするため、または腫瘍成長を阻害するための、有効量の、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、Ｙ０と称するトリテルペノイドサポニンまたはこれらの誘導体を含む組成物を提供する。一実施形態において、方法は、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ Ｙ０、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（ｘ）、エスシンもしくはアエスシンまたはこれらの塩、エステル、代謝産物を含む本出願における化合物を接触させる。一実施形態において、化合物を式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）および（１Ｄ）から選択できる。一実施形態において、化合物はトリテルペン骨格、２個のアンゲロイル基および糖部分を含む。一実施形態において、化合物は本出願における化合物Ａ〜ＸおよびＡ１〜Ｘ１から選択される。一実施形態において、化合物は本出願における化合物Ｚ１〜Ｚ７から選択される。
【００６８】
本発明は接着タンパク質または細胞上のこれらの受容体を減少させるための方法を提供し、ここで接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、方法は癌細胞の移動、転移をブロックできるか、または癌の成長もしくは抗血管形成を阻害でき、ここで癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、腎臓癌および頸癌を含む。
【００６９】
本発明は、接着タンパク質またはこれらの受容体と相互作用する方法を提供し、ここでこの接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、本発明はフィブロネクチンの分泌を減少させる方法を提供する。さらに、この方法は癌細胞の移動、転移をブロックするか、または哺乳動物の癌を治療し、前記哺乳動物に治療上有効量の、本発明における分子式または化合物を含む組成物を含む医薬組成物を投与することを含む。癌は、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、乳癌、膀胱癌、頸癌、肝臓癌、骨肉腫、脳腫瘍および皮膚癌を含む。化合物はＸａｎｉｆｏｌｉａ Ｙ０、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、またはこれらの塩、エステル、代謝産物を含む。本発明の化合物を天然源から単離できるか、または合成できる。
【００７０】
本出願における実験結果および２００６年９月７日に出願された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ０５／３１９００号、２００５年２月１４日に出願された米国特許出願第１０／９０６，３０３号、２００４年１２月２３日に出願された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ０４／４３４６５号、２００４年１０月８日に出願された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ０４／３３３５９号および２００５年５月１７日に出願された米国特許出願第１１／１３１５５１号、２００７年８月３０日に出願された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０７７２７３号（その内容は本発明の一部として参照される）を参照のこと。
【００７１】
化合物の塩はナトリウム塩、カリウム塩またはカルシウム塩を含む。
【００７２】
静脈不全、特に痔の阻害または脚部腫脹、もしくは末梢浮腫、高脂血症、慢性静脈疾患、静脈瘤疾患、静脈瘤性症候群、静脈鬱滞、去痰剤、末梢血管障害、脳器質けいれん、脳循環障害、脳浮腫、精神病、月経困難症、痔、会陰切開、ハモノイド（ｈａｍｏｎｈｏｉｄｓ）、末梢浮腫形成もしくは術後腫脹の阻害、痛みの症状の軽減、腹痛の症状の軽減、脚部痛みの症状の軽減、掻痒、下肢体積、血栓症、静脈血栓症の治療、胃潰瘍抗痙攣薬の予防のための化合物の塩。
【００７３】
本発明は接着タンパク質またはこれらの受容体を調節するか、癌細胞の接着能を低下させる方法を提供し、ここで調節は正または負の制御することを含む。一実施形態において、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、方法はフィブロネクチンの分泌を減少させる。本発明は癌細胞の移動、転移をブロックするか、または癌細胞成長を阻害する方法を提供し、この方法は有効量の、本発明における分子式を含む組成物または化合物を含む医薬組成物を投与することを含む。癌は、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、乳癌、膀胱癌、頸癌、肝臓癌、骨肉腫、脳腫瘍および皮膚癌を含む。本発明の化合物は天然源から単離できるか、または合成できる。一実施形態において、方法は化合物を接触させ、ここで化合物は次のものから選択される：
【００７４】
【化１５】

３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−（２−メチルプロパノイル）−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
【００７５】
【化１６】

３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル−（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル−２２−Ｏ−（アンゲロイル−２−メチルブタノイル）−３β，１５α、１６α、２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
【００７６】
【化１７】

３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（２−メチルプロパノイル）、２２−Ｏ−（２−メチルプロパノイル）−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
【００７７】
【化１８】

３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−ベンゾイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
【００７８】
【化１９】

３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
【００７９】
【化２０】

３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（２−メチルプロパノイル）−Ｏ−ベンゾイル、２２−Ｏ−（２−メチルプロパノイル）−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
【００８０】
【化２１】

３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（２−メチルプロパノイル）−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−（２−メチルブタノイル）−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
【００８１】
【化２２】

３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−ベンゾイル、２２−Ｏ−ベンゾイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン。
【００８２】
本発明は接着タンパク質を調節、制御または相互作用するための式（１Ｂ）を有する化合物から選択される化合物の使用を提供し、ここで、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。実施形態において、本発明はフィブロネクチン：
【００８３】
【化２３】

（（１Ｂ）とも称する）
またはその塩、エステル、代謝産物の分泌を減少させる方法を提供し、式中、Ｒ１は、水素、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ジベンゾイル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アシル、アリール、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される基を含む、Ｒ２は、水素、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される基を含む、Ｒ４は、ＣＨ_２ＯＲ６またはＣＯＯＲ６（ここで、Ｒ６は水素、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される）を表す、Ｒ３は、ＨまたはＯＨである、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ６の少なくとも１つは、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される基を含む、Ｒ５は、糖部分を含み、ここでこの糖部分は、Ｄ−グルコース、Ｄ−ガラクトース、Ｌ−ラムノース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシロース、アルズロン酸、Ｄ−グルクロン酸、Ｄ−ガラクツロン酸またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせに限定されないが、これらのうちの少なくとも１つを含む。一実施形態において、Ｒ１は糖部分を含み、これはアンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される２個の基で置換されている。
【００８４】
一実施形態において、Ｒ１は糖部分を含み、これはアンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される少なくとも１つの基で置換されている。
【００８５】
一実施形態において、Ｒ２は、糖部分を含み、ここで少なくとも１つの基は、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される。
【００８６】
一実施形態において、Ｒ２は糖部分または側鎖を含み、ここで少なくとも２つの基はアンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される。
【００８７】
一実施形態において、Ｒ４はＣＨ_２ＯＲ６またはＣＯＯＲ６を含み、ここでＲ６は、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される少なくとも１つの基を含む糖部分である。
【００８８】
一実施形態において、Ｒ４はＣＨ_２ＯＲ６またはＣＯＯＲ６を含み、ここでＲ６は、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される少なくとも２つの基を含む糖部分である。
【００８９】
一実施形態において、Ｒ４はＣＨ_２ＯＲ６またはＣＯＯＲ６を含み、ここでＲ６はアンゲロイル、アセチル、チグロイルおよびセネシオイルから選択される少なくとも２つの基を含む糖部分である。
【００９０】
一実施形態において、Ｒ４は式（１Ｂ）のＣＨ_２ＯＲ６またはＣＯＯＲ６を含み、Ｒ１、Ｒ２およびＲ６の少なくとも２つはアンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される基を含む。
【００９１】
一実施形態において、Ｒ４は式（１Ｂ）のＣＨ_２ＯＲ６またはＣＯＯＲ６を含み、Ｒ１、Ｒ２およびＲ６の少なくとも２つはアンゲロイル、ベンゾイル、アルケノイル、またはこれらの誘導体を含む。
【００９２】
一実施形態において、Ｒ４はＣＨ_２ＯＣＯＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＯＯ−アルキル、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＯＯＨ、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリックまたはヘテロアリールまたはこれらの誘導体を含む側鎖である。
【００９３】
さらなる実施形態において、Ｒ５は糖部分を含み、ここでこの糖部分は、これらに限定されないが、グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、またはアルズロン酸：グルクロン酸、ガラクツロン酸、もしくはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせの１以上の糖を含む。
【００９４】
一実施形態において、Ｒ５は糖部分の機能を実行できる糖部分または基を含む。
【００９５】
一実施形態において、Ｒ５はＨを表す。
【００９６】
一実施形態において、Ｒ４はＨ、ＯＨまたはＣＨ_３を表す。
【００９７】
一実施形態において、化合物のＣ２３、Ｃ２４、Ｃ２５、Ｃ２６、Ｃ２９およびＣ３０位は独立してＣＨ_３、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯアルキル、ＣＯＯ−アリール、ＣＯＯ−ヘテロサイクリック、ＣＯＯ−ヘテロアリール、ＣＨ_２Ｏアリール、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロサイクリック、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロアリール、アルキル基、アセチル基またはこれらの誘導体、特にＣＨ_３を含む。
【００９８】
一実施形態において、Ｒ１およびＲ２は独立してアンゲロイル基を含む。
【００９９】
一実施形態において、Ｒ１は２つのアンゲロイル基を含む糖部分または側鎖を含む。
【０１００】
一実施形態において、Ｒ１およびＲ２は独立してベンゾイル基を含む。
【０１０１】
一実施形態において、Ｒ１は２個のベンゾイル基で置換された糖部分である。
【０１０２】
一実施形態において、Ｒ_３はＨまたはＯＨを表す。
【０１０３】
一実施形態において、Ｒ８はＯＨであってよい。
【０１０４】
前記化合物における任意の基の他の基による置換、欠失および／または付加は本出願の教示に基づいて当業者には明らかであろう。さらなる実施形態において、本発明の化合物における基の置換、欠失および／または付加は化合物の生物学的機能に実質的に影響を及ぼさない。組成物は、有効量の前記式もしくはその塩、エステル、代謝産物またはこれらの誘導体から選択される化合物を、接着タンパク質との相互作用を調節するための医薬として含み、ここで、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、本発明はフィブロネクチンの分泌を減少させる方法を提供し、ここで医薬は腫瘍または癌細胞成長を阻害するため、および癌を治療するためであり、ここで、癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、腎臓癌または頸癌を含む。
【０１０５】
本発明は、接着タンパク質を制御するか、または接着タンパク質と相互作用するための式（１Ｄ）の化合物から選択される化合物の使用を提供し、ここでこの接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、本発明はフィブロネクチン：
【０１０６】
【化２４】

（（１Ｄ）とも称する）
（式中、Ｒ１は、水素、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される基を含む、Ｒ２は、水素、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される基を含む、Ｒ４は、ＣＨ_２ＯＲ６またはＣＯＯＲ６を含み、ここでＲ６は、水素、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される基を含む、Ｒ３は、ＨまたはＯＨである、Ｒ５は、糖部分、Ｄ−グルコースまたはＤ−ガラクトースを含む、Ｒ７は、ＣＯＯＨを表す、Ｒ１およびＲ２の少なくとも１つは、アシルである）、
またはこれらの塩、エステル、代謝産物の分泌を減少させる方法を提供する。
【０１０７】
一実施形態において、Ｒ７は、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＯＯＨおよびＣＯＯアルキルから選択される。
【０１０８】
一実施形態において、Ｒ７は、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯアルキル、ＣＯＯアリール、ＣＯＯ−ヘテロサイクリック、ＣＯＯ−ヘテロアリール、ＣＨ_２Ｏアリール、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロサイクリック、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロアリール、アルキル基、アセチル基およびこれらの誘導体から選択される。
【０１０９】
一実施形態において、Ｒ１は糖部分を含む化合物を表し、ここで糖部分は、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される少なくとも２つの化合物で置換されている。
【０１１０】
一実施形態において、Ｒ１は、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される少なくとも１つで置換された糖部分を含む化合物を表す。
【０１１１】
一実施形態において、Ｒ２は糖部分を含む化合物を表し、ここで糖部分はアンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される少なくとも１つで置換されている。
【０１１２】
一実施形態において、Ｒ２は糖部分を含む化合物またはアンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される少なくとも２つで置換された化合物を表す。
【０１１３】
一実施形態において、Ｒ４はＣＨ_２ＯＲ６およびＣＯＯＲ６から選択される基を含み、ここでＲ６は、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される少なくとも１つで置換された糖部分である。
【０１１４】
一実施形態において、Ｒ４はＣＨ_２ＯＲ６およびＣＯＯＲ６から選択される基を含み、ここでＲ６は、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される少なくとも２つで置換された糖部分である。
【０１１５】
一実施形態において、Ｒ４はＣＨ_２ＯＲ６およびＣＯＯＲ６から選択される基を含み、ここでＲ６は、アンゲロイル、アセチル、チグロイルおよびセネシオイルから選択される少なくとも２つで置換された糖部分である。
【０１１６】
一実施形態において、Ｒ４はＣＨ_２ＯＲ６およびＣＯＯＲ６から選択される基を含み、ここでＲ６は、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ジベンゾイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される少なくとも２つで置換された糖部分である。
【０１１７】
一実施形態において、Ｒ４はＣＨ_２ＯＲ６およびＣＯＯＲ６から選択される基を含み、ここでＲ１、Ｒ２およびＲ６の少なくとも２つは、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される基を含む。
【０１１８】
一実施形態において、Ｒ４はＣＨ_２ＯＣＯＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＯＯアルキル、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＯＯＨ、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリールおよびこれらの誘導体から選択される基を含む。
【０１１９】
さらなる実施形態において、Ｒ５は糖部分、グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、アルズロン酸、グルクロン酸もしくはガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせを含む。一実施形態において、Ｒ５は糖部分の機能を実施できる化合物を含む。
【０１２０】
さらなる実施形態において、Ｒ５はＨを含む。さらなる実施形態において、Ｒ４はＨまたはＯＨまたはＣＨ_３を表す。
【０１２１】
一実施形態において、化合物の２４位はＣＨ_３またはＣＨ_２ＯＨである。さらなる実施形態において、化合物の２３、２４、２５、２６、２９、３０位は独立してＣＨ_３、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯアルキル、ＣＯＯアリール、ＣＯＯ−ヘテロサイクリック、ＣＯＯ−ヘテロアリール、ＣＨ_２Ｏアリール、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロサイクリック、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロアリール、アルキル基、アセチル基またはこれらの誘導体を含む。
【０１２２】
一実施形態において、Ｒ５はＬ−グルコース、Ｄ−ガラクトース、Ｌ−ラムノース、および／またはＬ−アラビノースを含む糖部分を含む。
【０１２３】
一実施形態において、Ｒ１およびＲ２は独立してアンゲロイル基を含む、一実施形態において、Ｒ１は糖部分またはラムノースを含み、これらは２個のアンゲロイル基を含む。
【０１２４】
一実施形態において、Ｒ３はＨまたはＯＨを表す、さらなる実施形態において、化合物は天然源から選択できるか、または合成できる。
【０１２５】
糖部分は１以上の糖基を含む分子のセグメントである。前記化合物における任意の基の置換、欠失および／または付加は本出願の教示に基づくと当業者には明らかであろう。さらなる実施形態において、本発明の化合物における基の置換、欠失および／または付加は化合物の生物学的機能に実質的に影響を及ぼさない。
【０１２６】
静脈不全、特に痔の阻害あるいは脚部腫脹、または末梢浮腫、高脂血症、慢性静脈疾患、静脈瘤疾患、静脈瘤性症候群、静脈鬱滞、去痰剤、末梢血管障害、脳器質けいれん、脳循環障害、脳浮腫、精神病、月経困難症、痔、会陰切開、ハモノイド（ｈａｍｏｎｈｏｉｄｓ）、末梢浮腫形成もしくは術後腫脹の阻害、痛みの症状の軽減、腹痛の症状の軽減、脚部痛みの症状の軽減、掻痒、下肢体積、血栓症、の治療、胃潰瘍抗痙攣薬の予防の方法であり、これを必要とする対象に、有効量の、前記化合物のいずれか１つの組成物を投与することを含む方法は、アンゲロイル、チグロイル、セネシオイル、好ましくは２個のアンゲロイル基、および糖部分、グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、アルズロン酸、グルクロン酸もしくはガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせ、好ましくはグルクロン酸、ガラクツロン酸、グルコース、ガラクトースおよびアラビノースから選択されるもののうち任意の２つを含むトリテルペンを含む。方法は接着タンパク質を調節するかまたは接着タンパク質と相互作用し、ここで接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む。一実施形態において、方法はフィブロネクチンの分泌を減少させる。
【０１２７】
本発明は、癌細胞の膜の特性（ここで特性は接着タンパク質を減少させることを含み、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む）を変更することにより、癌細胞の成長、移動、転移を阻害する方法を提供し、この方法はフィブロネクチンの分泌を阻害することを含み、この方法は、これを必要とする対象に、適切な量の、２以上のアンゲロイル基を含むトリテルペノイドサポニン、またはアンゲロイル、チグロイル、セネシオイルのいずれか２個、好ましくは２個のアンゲロイル基、および糖部分、グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、アルズロン酸、グルクロン酸もしくはガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせ、好ましくはグルクロン酸、ガラクツロン酸、グルコース、ガラクトースおよびアラビノースから選択されるものを含むトリテルペンを含む化合物を投与することを含む。本発明は、接着タンパク質を減少させるため（ここで接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む）、癌の成長、移動、転移を阻害するため（ここで癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、腎臓癌または頸癌を含む）の医薬として、前記式から選択される化合物またはそれらの塩、エステル、代謝産物またはこれらの誘導体のいずれかの化合物を有効量含む組成物を提供する。
【０１２８】
本発明は、接着タンパク質を減少させるための、前記化合物またはこれらの誘導体を含む組成物も提供し、ここで、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含み、これはフィブロネクチンの分泌を阻害することを含み、静脈不全、特に痔を治療するため、または脚部腫脹、もしくは末梢浮腫、高脂血症、慢性静脈疾患、静脈瘤疾患、静脈瘤性症候群、静脈鬱滞、去痰剤、末梢血管障害、脳器質けいれん、脳循環障害、脳浮腫、精神病、月経困難症、会陰切開、ヘモノイド（ｈｅｍｏｎｈｏｉｄ）、末梢浮腫形成もしくは術後腫脹を阻害するため、痛みの症状を軽減するため、腹痛の症状を軽減するため、脚部痛みの症状を軽減するため、掻痒、下肢体積、血栓症、静脈血栓症を治療するため、胃潰瘍抗痙攣薬を予防するためのものであり、これを必要とする対象に、有効量の組成物を投与することを含む。
【０１２９】
前記のうちの一実施形態において、次式：
３−Ｏ−｛［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−［α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）］−β−Ｄ−グルクロノピラノシドブチルエステル｝−２１−Ｏ−アセチル−２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エン、
３−Ｏ−［β−グルコピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−（２−メチルプロパノイル）−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル−（１→３）−β−Ｄ−−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル−２８−Ｏ−２−メチルブタノイル−３β，１５α，１６α、２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
を有するトリテルペノイドサポニンのいずれか１つを含む組成物の使用。
【０１３０】
本発明は、接着タンパク質の制御または減少（ここで接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む）、静脈不全、特に痔の阻害または脚部腫脹の阻害、および癌成長の阻害に有効な量で前記化合物を含む組成物を提供する。癌としては、これらに限定されないが、膀胱癌、骨肉腫、皮膚癌および卵巣癌が挙げられる。
【０１３１】
本発明はまた、接着タンパク質の制御または減少（ここで、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ＣＤ４４、ミオシンＶＩ、ビトロネクチンコラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカンおよびＦＡＫを含む）、静脈不全、特に痔の阻害または脚部腫脹の阻害、または成長の阻害のための組成物であって、次の化合物から選択される化合物のいずれかを含む組成物も提供する：
Ａ）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｂ）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｃ）３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−（−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｄ）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン
Ｅ）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｆ）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｇ）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジベンゾイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｈ）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジベンゾイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｉ）３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−（−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジベンゾイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｊ）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジベンゾイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｋ）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジベンゾイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｌ）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジベンゾイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｍ）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジベンゾイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｎ）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジベンゾイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｏ）３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−（−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジベンゾイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エン
Ｐ）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジベンゾイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｑ）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−キシロピラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジベンゾイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−Ｓβ，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｒ）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−キシロピラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジベンゾイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｓ）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｔ）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｕ）３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−（−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｖ）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｗ）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｘ）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン。
【０１３２】
本発明は、接着タンパク質を制御または減少させるための組成物を提供し、ここで、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含む）、ここで、癌細胞の移動、転移をブロック、静脈不全、特に痔の阻害、または脚部腫脹の阻害、癌成長の阻害は、次のものから選択される化合物のいずれかを含む：
Ａ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル，２２−Ｏ−ベンゾイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｂ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３−アンゲロイル、４−ベンゾイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｃ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−（−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル，２２−Ｏ−ベンゾイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｄ１）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−ベンゾイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｅ１）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−Ｆ）（３−アンゲロイル、４−ベンゾイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｆ１）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−ベンゾイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｇ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−ベンゾイル、２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｈ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３−ベンゾイル、４−アンゲロイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｉ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−（−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−ベンゾイル、２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｊ１）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−ベンゾイル、２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｋ１）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３−ベンゾイル、４−アンゲロイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｌ１）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−ベンゾイル、２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｍ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−ベンゾイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｎ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３−アンゲロイル、４−ジベンゾイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｏ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−（−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−ベンゾイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｐ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−ベンゾイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｑ１）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−キシロピラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３−アンゲロイル、４−ジベンゾイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｒ１）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−キシロピラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−アンゲロイル、２２−Ｏ−ベンゾイル−−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｓ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−ベンゾイル、２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｔ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３−ベンゾイル、４−アンゲロイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｕ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−（−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−ベンゾイル、２２−Ｏ−アンゲロイル−−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｖ１）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−ベンゾイル、２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｗ１）３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３−ベンゾイル、４−アンゲロイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン、
Ｘ１）３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−β−Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−ベンゾイル、２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エン。
【０１３３】
静脈不全、特に痔を阻害するため、または脚部腫脹を阻害するために、本発明において前述した特性構造を有するトリテルペノイドサポニンを用いることができる。癌細胞の移動、転移をブロックするため、癌成長を軽減または阻害するために、本発明において前述した特性構造を有するトリテルペノイドサポニンを用いることができる。癌としては、これらに限定されないが、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、乳癌、膀胱癌、頸癌、肝臓癌、骨肉腫、脳腫瘍および皮膚癌が挙げられる。細胞膜構造および接着プロセスに影響を及ぼすために本発明において前述した特有の構造を有するトリテルペノイドサポニンを使用できる。一実施形態において、接着タンパク質を制御するまたは減少させて、癌細胞の移動、転移、癌の成長をブロックする方法を提供する。一実施形態において、方法は癌細胞の接着能を低下させることを含む。一実施形態において、接着タンパク質はＩｇＳＦ ＣＡＭ、セクレチン、インテグリンまたはカドヘリンを含む。一実施形態において、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫを含み、一実施形態において、化合物はトリテルペノイドサポニンまたはサポゲニンであり（ここでトリテルペノイドサポニンは、アンゲロイル基、チグロイル基、もしくはセネシオイル基、またはこれらの組み合わせの少なくとも１個または２個を炭素２１および／または２２、または２８で、サポゲニンに直接結合しているか、または糖部分に結合した状態で含む）、静脈瘤疾患を治療するため、静脈不全、特に痔を阻害するためまたは脚部腫脹を阻害するため、癌成長を軽減または阻害するために使用できる。一実施形態において、化合物は、少なくとも２個のアンゲロイル基、チグロイル基、もしくはセネシオイル基、またはこれらの組み合わせおよび糖部分を含む５環式トリテルペンサポニンである。アンゲロイル基は５個の環の一方の末端の側鎖に結合し、糖部分は５個の環の他方の末端の環の側鎖に結合している。一実施形態において、化合物は少なくとも２個のアンゲロイル基、チグロイル基、もしくはセネシオイル基、またはこれらの組み合わせおよび糖部分を含む。アンゲロイル基および糖部分はそれぞれ化合物の骨格の側鎖に結合している。一実施形態において、アンゲロイルは、アンゲロイル基として機能する官能基により置換することができる。一実施形態において、糖部分または鎖はＣ３または他の位置にあり、これらに限定されないがグルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、アルズロン酸、グルクロン酸、ガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせ、好ましくはＤ−グルコース、Ｄ−ガラクトース、Ｌ−ラムノース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−グルクロン酸もしくはＤ−ガラクツロン酸のアルズロン酸、またはこれらの組み合わせ、またはこれらの誘導体から選択される１以上の糖を含む。さらなる実施形態において、ＣＨ_３またはＣＨ_２ＯＨまたはＣＯＯＨまたはアセチル基はＣ２３〜３０で独立して結合し得る。腫瘍細胞成長を制御または阻害するサポニン化合物の活性は、アンゲロイル基、チグロイル基、セネシオイル基もしくはアセチル基などの官能基、またはこれらの組み合わせを有するその構造に基づくかまたは起因する。
【０１３４】
本発明は：
【０１３５】
【化２５】

（式中、Ｒ１およびＲ２は、アンゲロイル基、チグロイル基、セネシオイル基もしくはアセチル基またはこれらの組み合わせを含み、好ましくはＲ１およびＲ２はアンゲロイル基を含む。一実施形態において、Ｒ１およびＲ２は、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、または２〜５個の炭素を有する酸もしくはこれらの誘導体から選択される化合物を含む）
【０１３６】
【化２６】

（式中、Ｒ１およびＲ２は、アンゲロイル基、チグロイル基、セネシオイル基もしくはアセチル基またはこれらの組み合わせを含み、好ましくは、Ｒ１およびＲ２はアンゲロイル基を含む。
【０１３７】
一実施形態において、Ｒ１およびＲ２は、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、または２〜５個の炭素を有する酸もしくはこれらの誘導体から選択される化合物を含む。
【０１３８】
一実施形態において、化合物は糖部分をさらに含む。
【０１３９】
さらなる実施形態において、糖部分はグルコース、ガラクトースまたはアラビノースまたはこれらの組み合わせを含む。
【０１４０】
一実施形態において、糖部分は少なくとも１つの糖、もしくはグルコース、もしくはガラクトース、もしくはラムノース、もしくはアラビノース、もしくはキシロース、もしくはアルズロン酸、もしくはグルクロン酸、もしくはガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせを含む。
【０１４１】
一実施形態において、Ｒ１またはＲ２は構造の他の位置で結合し得る）
【０１４２】
【化２７】

（式中、Ｒ１、Ｒ２またはＲ３は、アンゲロイル基、チグロイル基、セネシオイル基またはアセチル基またはこれらの組み合わせを含み、好ましくはＲ１、Ｒ２およびＲ３の少なくとも２つはアンゲロイル基を含む。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の少なくとも２つは、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、または２〜５個の炭素を有する酸もしくはこれらの誘導体から選択される化合物を含む。
【０１４３】
一実施形態において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の少なくとも１つは、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、または２〜５個の炭素を有する酸もしくはこれらの誘導体から選択される２つの化合物を含む糖部分を含む。
【０１４４】
一実施形態において、化合物は糖部分を含む。一実施形態において、糖部分は、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の反対側の、構造（ｄ）の一方の末端で結合している。さらなる実施形態において、糖部分はグルコース、ガラクトースもしくはアラビノースまたはこれらの組み合わせを含む。
【０１４５】
さらなる実施形態において、糖部分は、少なくとも１つの糖、もしくはグルコース、もしくはガラクトース、もしくはラムノース、もしくはアラビノース、もしくはキシロース、もしくアルズロン酸、もしくはグルクロン酸、もしくはガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせを含む。
【０１４６】
さらなる実施形態において、糖部分は、これらに限定されないが、グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、アルズロン酸、グルクロン酸、ガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせから選択される１以上の糖を含む。一実施形態において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は構造の他の位置で結合し得る）、
の構造を有する化合物を含む組成物を提供する。
【０１４７】
一実施形態において、化合物はトリテルペノイドサポニンであり、これは少なくとも２個のアンゲロイル基、チグロイル基、セネシオイル基もしくアセチル基またはこれらの組み合わせ、好ましくは少なくとも２個のアンゲロイル基を含む。
【０１４８】
一実施形態において、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、または２〜５個の炭素を有する酸もしくはこれらの誘導体から選択される少なくとも２つの化合物。
【０１４９】
一実施形態において、側鎖結合の少なくとも１つは、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、または２〜５個の炭素を有する酸もしくはこれらの誘導体から選択される２つの化合物を含む糖部分を含む。
【０１５０】
一実施形態において、化合物は糖部分を含む。さらなる実施形態において、糖部分はグルコース、ガラクトースもしくはアラビノースまたはこれらの組み合わせを含む。さらなる実施形態において、糖部分は少なくとも１つの糖、もしくはグルコース、もしくはガラクトース、もしくはラムノース、もしくはアラビノース、もしくはキシロース、もしくはアルズロン酸、もしくはグルクロン酸、もしくはガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせを含む。
【０１５１】
さらなる実施形態において、糖部分はこれらに限定されないが、グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、アルズロン酸、グルクロン酸、ガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせから選択される１以上の糖を含む。
【０１５２】
一実施形態において、トリテルペンは次の構造を含み、接着タンパク質を減少させて、癌細胞の移動、転移、癌の成長をブロックする作用を有する。
【０１５３】
【化２８】

（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の少なくとも２つは、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、または２〜５個の炭素を有する酸もしくはこれらの誘導体から選択される化合物を含む。一実施形態において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の少なくとも１つは、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、アルキル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、または２〜５個の炭素を有する酸もしくはこれらの誘導体から選択される２つの化合物を含む糖部分を含む。実施形態において、Ｒ１、Ｒ２またはＲ３はアンゲロイル基、チグロイル基、セネシオイル基もしくはアセチル基またはこれらの組み合わせを含み、好ましくはＲ１、Ｒ２およびＲ３の少なくとも１つはアンゲロイル基を含む。
【０１５４】
一実施形態において、Ｒ５は糖部分を含む。一実施形態において、糖部分は少なくとも１つの糖、もしくはグルコース、もしくはガラクトース、もしくはラムノース、もしくはアラビノース、もしくはキシロース、もしくはアルズロン酸、もしくはグルクロン酸、もしくはガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせを含む。一実施形態において、糖部分は、これらに限定されないが、グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、アルズロン酸、グルクロン酸、ガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせから選択される１以上の糖を含む。一実施形態において、糖部分はグルコース、ガラクトースもしくはアラビノース、またはこれらの組み合わせ、またはこれらの誘導体を含む。一実施形態において、糖部分はアルズロン酸、ガラクトースおよびアラビノースを含み、ここでアルズロン酸はグルクロン酸またはガラクツロン酸を含む。一実施形態において、糖部分はアルズロン酸、グルコースおよびアラビノースを含み、ここでアルズロン酸はグルクロン酸またはガラクツロン酸を含む。
【０１５５】
一実施形態において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、構造の他の位置で結合することができる）。
【０１５６】
一実施形態において、化合物はトリテルペノイドサポニンであり、これは少なくとも２つのアンゲロイル基、チグロイル基、セネシオイル基もしくはアセチル基またはこれらの組み合わせ、好ましくは少なくとも２つのアンゲロイル基を含む。
【０１５７】
一実施形態において、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、または２〜５個の炭素を有する酸もしくはこれらの誘導体から選択される少なくとも２つの化合物。
【０１５８】
一実施形態において、側鎖結合の少なくとも１つは、アンゲロイル、アセチル、チグロイル、セネシオイル、ベンゾイル、ジベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、または２〜５個の炭素を有する酸もしくはこれらの誘導体から選択される２つの化合物を含む糖部分を含む。
【０１５９】
一実施形態において、化合物は糖部分を含む。さらなる実施形態において、糖部分はグルコース、ガラクトースもしくはアラビノースまたはこれらの組み合わせを含む。
【０１６０】
さらなる実施形態において、糖部分は少なくとも１つの糖、もしくはグルコース、もしくはガラクトース、もしくはラムノース、もしくはアラビノース、もしくはキシロース、もしくはアルズロン酸、もしくはグルクロン酸、もしくはガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせを含む。
【０１６１】
さらなる実施形態において、糖部分は、これらに限定されないが、グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、アルズロン酸、グルクロン酸、ガラクツロン酸、またはこれらの誘導体、またはこれらの組み合わせから選択される１以上の糖を含む。
【０１６２】
接着タンパク質の制御または減少、癌細胞の移動、転移のブロック、腫瘍または癌細胞成長の阻害および癌の治療のための医薬として、前記式から選択される化合物またはその塩、エステル、代謝産物または誘導体を有効量含む組成物であって、ここで、癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、腎臓および頸癌を含む。
【０１６３】
さらなる実施形態において、化合物またはサポゲニンは構造（ｄ）または（ｅ）を含み、抗癌活性またはウイルス阻害活性を有する。
【０１６４】
接着タンパク質を調節または減少させるか、癌細胞の移動、転移をブロックするか、癌を治療するか、またはウイルスを阻害するための組成物は、化合物を含み、ここでこの化合物はトリテルペンであり、これはアンゲロイル基を含む少なくとも２つの側鎖を含み、ここでこの側鎖は隣接する炭素でトランス位である。一実施形態において、側鎖は別の炭素でシス位にある。一実施形態において、側鎖は別の炭素でトランス位にある。一実施形態において、側鎖はアシルを結合する。一実施形態において、側鎖は不飽和基を結合する。
【０１６５】
一実施形態において、側鎖は非隣接炭素シスまたはトランス位にある。一実施形態において、側鎖はアンゲロイル基の機能を実施できる官能基を含む。
【０１６６】
前記化合物は、これを必要とする対象に、有効量の前記化合物を投与することにより、接着タンパク質を調節または減少させるため、癌細胞の移動、転移をブロックするため、腫瘍細胞成長を阻害するため、下肢腫脹、慢性静脈不全、末梢浮腫、高脂血症、慢性静脈疾患、静脈瘤疾患、静脈瘤性症候群、静脈鬱滞、去痰剤、末梢血管障害の症状を軽減するために使用できる。
【０１６７】
本発明は、対象における腫瘍細胞成長の阻害、細胞成長の調節、炎症の軽減のための方法であって、これを必要とする対象に、前記構造のいずれかを含む有効量の化合物を投与することを含む方法を提供する。癌としては、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、乳癌、膀胱癌、頸癌、肝臓癌、骨肉腫、脳腫瘍および皮膚癌が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６８】
本発明は、腫脹を軽減し、慢性静脈不全、末梢浮腫、高脂血症、慢性静脈疾患、静脈瘤疾患、静脈瘤性症候群、静脈鬱滞、去痰剤、末梢血管障害、脳器質けいれん、脳循環障害、脳浮腫、精神病、月経困難症、痔、会陰切開、末梢浮腫形成または術後腫脹の症状を軽減し、脚部痛みの症状を軽減し、掻痒、下肢体積を治療し、痛み、血栓症、静脈血栓症の症状を軽減し、胃潰瘍抗痙攣薬を予防するための方法であって、これを必要とする対象に、有効量の本発明の組成物を投与することを含む方法も提供する。
【０１６９】
本発明は、癌を治療するため、ウイルスを阻害するため、脳の加齢を予防するため、記憶を改善するため、大脳機能を改善するため、夜尿症、頻尿、尿失禁、認知症、アルツハイマー病、自閉症、脳損傷、パーキンソン病または脳機能障害により引き起こされる他の疾患を治療するため、関節炎、リウマチ、血行不良、動脈硬化症、レイノー症候群、狭心症、心疾患、冠状動脈性心疾患、頭痛、目まい、腎疾患、脳血管疾患を治療するため、ＮＦ−Ｋａｐｐａ Ｂ活性化を阻害するため、脳水腫、重症急性呼吸器症候群、呼吸器ウイルス疾患、慢性静脈不全、高血圧、慢性静脈疾患、抗浮腫、抗炎症、ヘモノイド（ｈｅｍｏｎｈｏｉｄｓ）、末梢浮腫形成、静脈瘤疾患、流感、外傷後浮腫および術後腫脹を治療するため、凝血を阻害するため、エタノール吸収を阻害するため、血糖を下げるため、アデノコルチコトロピンおよびコルチコステロンレベルを制御するために本発明において提供される化合物を含む組成物を提供する。本発明は、抗ＭＳ、抗動脈瘤、抗喘息、抗ブラジキニン、抗毛細血管出血、抗頭痛、抗頸腕痛、抗子癇、抗浮腫、抗脳炎、抗咽頭蓋炎、抗滲出、流感治療、骨折治療、抗歯肉炎、抗血腫、抗ヘルペス、抗ヒスタミン、抗ヒドラスリティック（ａｎｔｉｈｙｄｒａｔｈｒｉｔｉｃ）、抗髄膜炎、抗酸化、抗歯周病、抗静脈炎、抗胸膜炎、抗嗄声、抗鼻炎、抗扁桃腺炎、抗潰瘍、抗静脈瘤、抗めまい、癌静止、コルチコステロイド産生、利尿、殺菌、溶血、ヒアルロニダーゼ阻害剤、リンパ生成促進物質、ナトリウム排泄増加、殺虫剤、下垂体刺激剤、チモール分解、血管保護、および静脈強壮治療のための組成物を提供する。
【０１７０】
アルケニルとは、１〜７個の炭素原子および１以上の二重結合を有する不飽和直線状または分岐構造およびこれらの組み合わせを意味する。アルケニル基の非制限的例としては、ビニル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、ｓ−およびｔ−ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ブタジエニル、ペンタジエニル、ならびにヘキサジエニルが挙げられる。
【０１７１】
アリールは、ベンゼン、１〜３個のベンゼン環を含む６〜１４員炭素環式芳香環系などの芳香族化合物由来の有機分子の官能基である。２以上の芳香環が存在するならば、環は縮合して、隣接する環は共通の結合を共有する。例としては、フェニルおよびナフチルが挙げられる。アリール基は、ハロゲン、アルキルまたはアルコキシから独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよい。
【０１７２】
アシルは、カルボキシルの除去により有機酸から得られる官能基である。アシル基は、一般式−ＣＯＲを有すると記載でき、炭素と酸素との間に二重結合が存在する。アシル基の名称は、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリルおよびベンゾイルなど、典型的には語尾が−イルである。
【０１７３】
ベンゾイルはアシルの１つであり（Ｃ_６Ｈ_５ＣＯＲ）、安息香酸からカルボキシルを除去することにより得られる。
【０１７４】
ヘテロサイクリック化合物−１〜４個のヘテロ原子を有する非芳香環であるヘテロ環を含む化合物であり、前記環は単一であるか、または０〜４個のヘテロ原子を含む３〜７員脂環式環、アリールおよびヘテロアリールから選択される第２の環と縮合し、前記ヘテロ環はピロリジニル、ピピラジニル、モルホリニル、テトラヒドロフラニル、イミダゾリニル、チオモルホリニルなどを含む。
【０１７５】
ヘテロシクリル基は任意の環原子から水素原子を除去することによりヘテロアレーンから誘導される。
【０１７６】
アルカノイルは有機官能基ＲＣＯ−（式中、Ｒは水素またはアルキル基を表す）の一般名である。好ましくは、アルカノイルは、アセチル、プロピオノイル、ブチリル、イソブチリル、ペンタノイルおよびヘキサノイルから選択される。）
アルケノイルは、アルケニルが前記定義のとおりであるアルケニルカルボニルである。例は、ペンテノイル（チグロイル）およびヘキセノイル（アンゲロイル）である。
【０１７７】
アルキルは、１〜１８個の炭素原子を有する、鎖状、分岐、環状もしくは二環式構造またはこれらの組み合わせに配列した炭素および水素原子のみを含むラジカルである。例としては、これらに限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓ−およびｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが挙げられる。
【０１７８】
ベンゾイルアルキル置換アルカノイルは、少なくとも１個のベンゾイルおよび少なくとも１個のアルキルで置換された直線状または分岐Ｃ１〜Ｃ６アルカノイルを意味し、ここでベンゾイルは直線状または分岐Ｃ１〜Ｃ６アルキルに結合している。好ましくは、ベンゾイルアルキル置換アルカノイルはベンゾイルメチルイソブタノイルである。
【０１７９】
糖部分は１以上の糖またはこれらの誘導体またはアルズロン酸を含む分子のセグメントである。
【０１８０】
イソブチリルは２−メチルプロパノイルの同義語である。
【０１８１】
ＹおよびＹ３は同じ化合物を表す。
【０１８２】
ＹＭおよび（ＡＣＨ−Ｙ）は同じ化合物を表す。
【０１８３】
本発明は、癌細胞膜の特性を変更して、癌細胞の移動、転移をブロックするか、または癌の成長もしくは抗血管形成を阻害する方法を提供する。
【０１８４】
本発明は、癌細胞膜の特性を変更することにより、癌の成長、移動、転移を阻害する方法を提供し、ここでこの特性は接着タンパク質を含み、癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫癌、腎臓癌または頸癌を含み、この方法はＸａｎｉｆｏｌｉａ Ｙ０、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、またはこれらの塩、エステル、代謝産物を接触させる。
【０１８５】
本発明は、癌細胞膜の接着特性を変更することにより、癌の成長、移動、転移を阻害するための組成物および方法を提供し、ここで癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、腎臓癌または頸癌を含み、この方法はＸａｎｉｆｏｌｉａ Ｙ０、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、またはこれらの塩、エステル、代謝産物を接触させる。一実施形態において、方法は本出願における式から選択される化合物を接触させる。
【０１８６】
本出願は、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−ＹがＤＮＡ阻害薬または微小管標的薬の代替または補足剤であることを示す。単独または異なるメカニズムの（Ｍ期進行またはＤＮＡ合成をブロックする）他の薬物と併用されるならば有用であり得る。本発明は、ＥＳ２細胞成長の阻害に対するＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙおよびパクリタキセルの複合効果を示す（詳細は２００７年３月７日に出願された米国特許出願第１１／６８３１９８号、実験１４）。
【０１８７】
卵巣癌細胞における接着タンパク質のＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙの結合標的およびシグナル化タンパク質を同定する。
【０１８８】
本発明者等の動物実験で、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙが腫瘍を有するマウスの寿命を延長することがわかった。（２００７年３月７日に出願された米国特許出願第１１／６８３１９８号の実験７、８、９参照）。動物は、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙの処理が遅れると、より早く死亡した（腫瘍接種後１、４、または１０日から始めた治療の結果と比較して）。この結果は、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙが接種された癌細胞の移動または転移を阻害することを示す。卵巣癌細胞は高レベルの接着分子を発現する。接着タンパク質は癌細胞および中皮細胞のどちらにおいても存在する。接着が失われると、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙによる調節の結果のためにタンパク質近接性がブロックされる。一実施形態において、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙの膜との相互作用は接着タンパク質の結合部位を変更する。
【０１８９】
本発明者等は腫瘍細胞に対して細胞毒性であることを証明した。一実施形態において、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙは卵巣癌細胞を殺す。本発明は、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙが癌細胞成長を阻害し、腫瘍を有するマウスの寿命を延長することを証明する。本発明者等の研究は、薬物治療が早いほど、腫瘍を有する動物の寿命が長く延長されることも示す。Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙは移動もしくは転移のブロックまたは阻害にも効果がある。Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ処理が遅れると、癌細胞が腹腔における中皮内膜へ転移する可能性が増え、その結果、腫瘍成長が増え、寿命が短くなる。接着分子は細胞移動および転移において重要な役割を果たす。本発明者等の研究において、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙが培養フラスコへの細胞接着を阻害することが示された。本発明者等の実験により、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙファミリーが接着タンパク質の分泌を阻害することがわかった。Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙは接着分子の機能を妨害する。実施形態において、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙは接着分子の機能をブロックする。一実施形態において、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙは接着タンパク質を調節する。これは接着タンパク質をマスクすることである。一実施形態において、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙは膜構造を間接的に変更し、これによりタンパク質構造、または位置が変化し、その結果、接着プロセスが損失する。一実施形態において、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫ、特にフィブロネクチンを含む。
【０１９０】
フィブロネクチンは、インテグリン、コラーゲン、フィブリンおよびヘパリン硫酸を含む膜貫通受容体タンパク質と結合する糖タンパク質の一種である。フィブロネクチンは腫瘍発達および転移に関与する。本出願は、フィブロネクチンの遺伝子発現を調節するため、フィブロネクチンの分泌を阻害するため、フィブロネクチンの受容体を減少させるため、フィブロネクチンの接着能を低下させるため、転移を阻害するため、または癌成長を阻害するための方法および組成物を提供し、ここでこの方法および組成物は前記対象に有効量の本出願において選択される化合物を投与することを含む。
【０１９１】
ビトロネクチンは血漿および細胞外マトリックスにおいて見られる豊富な糖タンパク質である。ビトロネクチンは止血および腫瘍の悪性度に関与する。本出願は、の遺伝子発現を調節するため、ビトロネクチンの受容体を減少させるため、ビトロネクチンの接着能を低下させるため、転移を阻害するため、および癌成長を阻害するための方法および組成物を提供し、ここでこの方法および組成物は本出願において選択される化合物を投与することを含む。
【０１９２】
インテグリンは細胞外マトリックスと相互作用する細胞表面受容体である。これらは細胞形状、移動度を規定し、細胞サイクルを制御する。インテグリンは細胞の他の細胞との接着に関与し、組織の物質部分への細胞の接着においても関与する。接着の役割の他に、インテグリンはシグナル変換にも関与する。本出願はインテグリンの遺伝子発現の調節、特にインテグリンの阻害、インテグリンの接着能の阻害、癌細胞転移の阻害、および癌成長の阻害のための方法および組成物を提供し、この方法および組成物は、本出願において選択される化合物の投与を含む。
【０１９３】
ラミニンはほぼ全ての動物組織における基底膜の構造の骨組みの不可欠な部分である糖タンパク質のファミリーである。これらは細胞に関連する細胞外マトリックス中に分泌され、組み入れられる。ラミニンの遺伝子発現の阻害は、細胞移動および癌細胞の転移を阻害するために細胞の接着能を低下させる。本出願は、ラミニンの遺伝子発現を調節、特にラミニンの阻害、ラミニンの接着能の阻害、癌細胞転移の阻害および癌成長の阻害のための方法および組成物を提供し、この方法および組成物は本出願において選択される化合物の投与を含む。
【０１９４】
ＣＡＭ（細胞接着分子）は、接着プロセスにおいて他の細胞との結合に関与する、細胞表面上に位置するタンパク質である。ＣＡＭの遺伝子発現の阻害は、細胞の接着能を低下させ、細胞移動および癌細胞の転移をさらに阻害する。本出願は、ＣＡＭの遺伝子発現の調節、特にＣＡＭの阻害、ＣＡＭの接着能の阻害、癌細胞転移の阻害および癌成長の阻害のための方法および組成物を提供し、この方法および組成物は本出願において選択される化合物の投与を含む。
【０１９５】
コラーゲンは哺乳動物における結合組織の主要タンパク質である。コラーゲンの遺伝子発現の阻害は、細胞移動および癌細胞の転移を阻害するために細胞の接着能を低下させる。本出願は、ラミニンの遺伝子発現の調節、特にラミニンの阻害、ラミニンの接着能の阻害、癌細胞転移の阻害および癌成長の阻害のための方法および組成物を提供し、この方法および組成物は本出願において選択される化合物の投与を含む。
【０１９６】
テネイシン−Ｃ（Ｔｎ−Ｃ）は細胞上の細胞外マトリックスタンパク質である。これは癌成長、浸潤および血管形成活性の正因子である。本出願はテネイシン−Ｃの阻害および癌成長の阻害のための方法および組成物を提供し、この方法および組成物は本出願において選択される化合物の投与を含む。
【０１９７】
血管形成は、新規血管の成長を含むプロセスである。これは成長および発達における正常なプロセスである。しかし、これは腫瘍が休眠状態から悪性状態へと移行する際の基本的段階でもある。アンジオポイエチンは血管形成を調節するタンパク質成長因子である。同定されたアンジオポイエチンは、アンジオポイエチン１、アンジオポイエチン２、アンジオポイエチン３、アンジオポイエチン４、アンジオポイエチン５、アンジオポイエチン６、アンジオポイエチン７、アンジオポイエチン様１、アンジオポイエチン様２、アンジオポイエチン様３、アンジオポイエチン様４、アンジオポイエチン様５、アンジオポイエチン様６、およびアンジオポイエチン様７を含む。一実施形態において、アンジオポイエチン１は新規血管を促進する正の因子である。実施形態において、アンジオポイエチン２はアンジオポイエチン１の拮抗物質であり、新規血管成長に関して負の因子である。本出願は、アンジオポイエチンを調節するため、および癌成長を阻害するための方法および組成物を提供し、ここで癌は乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、腎臓癌および頸癌を含み、この方法および組成物は前記対象に有効量の本出願において選択される化合物を投与することを含む。本出願における化合物はアンジオポイエチン２を正に制御する。本出願における化合物はアンジオポイエチン１を負に制御する。マイクロアレイ実験の結果から、化合物ＹおよびＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ）がＥＳ２細胞においてアンジオポイエチンファミリーの遺伝子発現を制御することがわかった。これらはアンジオポイエチン２を促進し、アンジオポイエチン１およびアンジオポイエチン様１およびアンジオポイエチン様４を阻害する。
【０１９８】
本出願における化合物は抗血管形成であり、癌細胞転移を阻害し、癌成長を阻害し、ここでこの化合物はＸａｎｉｆｏｌｉａ Ｙ０、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、ＡＣＨ−Ｙまたはこれらの塩、エステル、代謝産物ならびに式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）および（１Ｄ）から選択される化合物を含む。一実施形態において、方法はＸａｎｉｆｏｌｉａ Ｙ０、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（ｘ）、エスシンもしくはアエスシンまたはこれらの塩、エステル、代謝産物を含む本出願における化合物を接触させる。一実施形態において、化合物は式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）および（１Ｄ）から選択できる。一実施形態において、化合物は１個のトリテルペン骨格、２個のアンゲロイル基および糖部分を含む。一実施形態において、化合物は本出願における化合物Ａ〜ＸおよびＡ１〜Ｘ１から選択される。一実施形態において、化合物は本出願における化合物Ｚ１〜Ｚ７から選択される。
【０１９９】
本発明者等のマイクロアレイ実験から得られるデータは、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ Ｙが次の遺伝子（遺伝子記号により表示）の遺伝子発現を調節することを開示する：
遺伝子記号：ＡＢＬ２、ＡＤＡＭＴＳ１、ＡＫＲ１Ｃ３、ＡＭＩＧＯ２、ＡＮＧＰＴ２、ＡＮＫＲＤ１１、ＡＰ２Ｂ１、ＡＰＥＨ、ＡＰＬＰ２、ＡＲＬ１０Ｃ、ＡＲＭＣ４、ＡＲＭＣＸ１、ＡＲＭＣＸ６、ＡＲＮＴＬ２、ＡＲＮＴＬ２、ＡＴＦ３、ＡＴＰ６Ｖ０Ｅ、ＡＴＰ６Ｖ１ Ｂ２、ＡＴＰ６Ｖ１Ｃ１、ＡＴＰ６Ｖ１Ｃ１、ＢＣＬ２Ａ１、ＢＣＬ６、ＢＲＩ３、ＢＴＤ、Ｃ１４ｏｒｆ１０９、Ｃ１４ｏｒｆ７８、Ｃ１７ｏｒｆ３２、Ｃ６ｏｒｆ６５，Ｃ９ｏｒｆ１０、Ｃ９ｏｒｆ１０３、ＣＡＤ、ＣＡＶ１、ＣＡＶ２、ＣＢＬＬ１、ＣＣＬ２０、ＣＤ３３Ｌ３、ＣＥＢＰＢ、ＣＥＰ４、ＣＦＨ／／／ＣＦＨＬ１、ＣＨＲＤＬ１、ＣＩＴＥＤ２、ＣＩＴＥＤ２、ＣＬＤＮ１４、ＣＬＮ８、ＣＬＴＡ、ＣＮＡＰ１、ＣＯＧ６、ＣＯＬ１８Ａ１、ＣＯＬ４Ａ２、ＣＯＬ５Ａ１、ＣＯＬ５Ａ２、ＣＯＬ６Ａ３、ＣＯＰＧ、ＣＰＭ、ＣＰＮＥ３、ＣＰＳＦ１、ＣＳＲＰ２ＢＰ、ＣＳＴＢ、ＣＴＮＳ、ＣＸＣＬ２、ＤＤＢ１、ＤＤＩＴ３、ＤＤＸ２０、ＤＫＦＺＰ５６４Ｉ１１７１、ＤＫＦＺＰ５８６Ｊ０６１９、ＤＵＳＰ１０、ＤＵＳＰ１０、ＤＹＲＫ３、ＥＥＦ２Ｋ、ＥＦＥＭＰ１、ＥＭＰ１、ＥＶＣ、ＥＶＩ２Ａ、ＥＸＴ２、ＦＡＭ６２Ａ、ＦＥＲ１Ｌ３、ＦＬＪ１４４６６、ＦＬＮＡ、ＦＮ１、ＦＮ１、ＧＡＮＡＢ、ＧＤＦ１５、ＧＥＭ、ＧＮＰＤＡ１、ＧＰＡＡ１、ＧＰＣ６、ＧＰＮＭＢ、ＧＰＮＭＢ、ＧＵＳＢ、Ｈ２ＡＦＶ、Ｈ２ＡＦＶ、ＨＤＡＣ９、ＨＤＬＢＰ、ＨＥＣＷ２、ＨＭＧＡ２、ＨＭＯＸ１、ＨＳＤＬ２、ＨＳＰＢＡＰ１、ＨＳＰＣ１９６、ＨＹＯＵ１、ＩＤＳ、ＩＧＦＢＰ３、ＩＫＢＫＡＰ、ＩＮＳＩＧ１、ＩＰＯ４、ＩＲＳ２、ＪＡＧ１、ＫＤＥＬＲ３、ＫＩＡＡ０２５１、ＫＩＡＡ０５８６、ＫＩＡＡ１２１１、ＫＩＡＡ１４６２、ＫＩＡＡ１７０６、ＫＩＡＡ１７５４、ＫＲＴ１８、ＫＲＴ７、ＫＲＴＡＰ４−７、ＬＡＭＰ２、ＬＥＰＲ、ＬＥＰＲＥＬ１、ＬＨＦＰＬ２、ＬＩＦ、ＬＯＣ２８６０４４、ＬＯＣ３３９２２９、ＬＯＣ９０６９３、ＬＲＲＣ８Ｅ、ＭＡＦＧ、ＭＡＧＥＤ２、ＭＣＴＰ１、ＭＧＣ１６２９１、ＭＧＣ１９７６４、ＭＧＣ５６１８、ＭＲＰＳ３０、ＭＲＰＳ３１、ＭＴＥＲＦＤ３、ＭＹＨ９、ＮＡＧＡ、ＮＡＶ２、ＮＣＳＴＮ、ＮＥＫ９、ＮＥＵ１、ＮＦＫＢＩＺ、ＮＭＴ２、ＮＰＣ２、ＮＳＵＮ５Ｃ、ＮＴＮＧ１、ＮＵＰ１８８、ＯＡＣＴ２、ＯＳ９、Ｐ４ＨＡ１、Ｐ８、ＰＡＬＭ２−ＡＫＡＰ２、ＰＡＬＭ２−ＡＫＡＰ２、ＰＡＲＶＡ、ＰＢＸ２、ＰＤＥ４ＤＩＰ、ＰＤＩＡ４、ＰＤＩＡ６、ＰＥＧ１０、ＰＨＦ１９、ＰＩＫ４ＣＡ、ＰＬＥＫＨＭ１、ＰＬＯＤ１、ＰＬＯＤ２、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａ、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａ、ＰＲＫＤＣ、ＰＲＳＳ２３、ＰＲＳＳ２３、ＰＳＥＮ２、ＰＳＭＤ１、ＰＴＰＲＦ、ＰＴＰＲＪ、ＲＡＢ３２、ＲＡＢ９Ａ、ＲＧ９ＭＴＤ１、ＲＧＳ４、ＲＨＯＱ１、ＲＮＤ３、ＲＮＦ２５、ＲＮＰＥＰ／／／ＵＢＥ２Ｖ１／／／Ｋｕａ／／／Ｋｕａ−ＵＥＶ、ＲＮＵ１７Ｄ、ＲＯＢＯ４、ＲＲＡＧＣ、ＲＲＳ１、ＳＥＣ３１Ｌ１、ＳＥＲＰＩＮＢ２、ＳＥＲＰＩＮＢ７、ＳＥＳＮ２、ＳＧＥＦ、ＳＧＳＨ、ＳＫＩＶ２Ｌ、ＳＬＣ２５Ａ２１、ＳＬＣ３５Ａ３、ＳＬＣ３Ａ２、ＳＭＡＲＣＡ１、ＳＮＡＰＣ１、ＳＮＦ１ＬＫ、ＳＰＯＣＤ１、ＳＰＴＡＮ１、ＳＱＳＴＭ１、ＳＴ３ＧＡＬ６、ＳＴＣ２、ＳＴＸ３Ａ、ＴＦＰＩ２、ＴＦＰＩ２、ＴＧＦＢＩ、ＴＧＭ２、ＴＨＲＡＰ１、ＴＬＮ１、ＴＭＥＭ６０、ＴＮＦＡＩＰ３、ＴＲＩＢ３、ＴＲＩＯ、ＴＳＣ２、ＵＡＰ１Ｌ１、ＵＢＡＰ２Ｌ、ＵＰＰ１、ＵＲＢ、ＵＳＰ１１、ＵＳＰ５、ＶＤＲ、ＷＤＲ４、ＹＴＨＤＦ２、ＺＣＣＨＣ９、ＺＤＨＨＣ２０、ＺＦＨＸ１Ｂ、ＺＮＦ１８５、ＺＮＦ２７８、ＺＮＦ６９０、ＺＮＦ６９７。
【０２００】
本発明者等の実験は、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ ＹおよびＡＣＨ−Ｙが次の遺伝子の遺伝子発現を阻害することを開示した：ＦＮ１、ＩＴＧＡＶ、ＬＡＭＡ４、ＬＡＭＢ２、ＬＡＭＣ１、ＬＡＭＢ１、ＬＡＭＢ１、ＬＡＭＡ４、ＬＡＭＡ５、ＬＡＭＣ１、ＬＡＭＡ２、ＬＡＭＢ１、ＬＡＭＡ３、ＳＣＡＭＰ１、ＴＩＣＡＭ２、ＳＣＡＭＰ１、ＴＩＣＡＭ２、ＳＣＡＭＰ１、ＳＣＡＭＰ１、ＣＡＭＫ２Ｂ、ＤＬ１、ＩＣＡＭ３、ＣＥＥＣＡＭＩ、ＩＣＡＭ５、ＳＣＡＭＰ１、ＣＡＭＫ１Ｇ、ＣＡＭＳＡＰ１、ＭＣＡＭ、ＣＡＭＴＡ１、ＣＫＮ１、ＡＬＣＡＭ、ＤＣＡＭＫＬ２、ＣＥＡＣＡＭ３、ＣＡＭＫ２Ｄ、ＣＡＭＫ２Ｂ、ＳＣＡＭＰ５、ＣＡＭＫ４、ＮＣＡＭ１、ＣＡＭＫ２Ｇ、ＭＹＨ９、ＭＹＨ１０、ＭＹＯ１Ｄ、ＭＹＯ５Ａ、ＭＹＬＫ、ＭＹＯ６、ＭＹＯ５Ａ、ＭＹＯ１Ｃ、ＭＹＬＫ、ＭＹＯ６、ＭＹＬＣ２ＰＬ、ＭＹＯ１０、ＭＹＯ６、ＴＰＭ３、ＭＹＯ１Ｃ、ＢＥＣＮ１、ＭＹＯ１Ｅ、ＴＰＭ３、Ｍ−ＲＩＰ、ＭＹＯ１Ｂ、ＭＹＯ１０、ＭＹＯ５Ａ、Ｍ−ＲＩＰ、ＭＹＯ１０、ＭＹＬ６、ＭＹＯＨＤ１、ＢＥＣＮ１、ＴＰＭ４、ＭＹＬＫ、ＭＹＨ１０、ＭＹＯＨＤ１、ＬＯＣ２２１８７５、ＬＯＣ４０２６４３、ＭＹＯ１５Ｂ、ＬＯＣ１２９２８５、ＭＹＨ１１、ＭＹＯ１Ｂ、ＭＹＯ１Ｃ、ＭＹＯ９Ｂ、ＣＤＨ１３、ＣＴＮＮＡＬ１、ＣＤＨ１３、ＣＤＨ１２、ＣＴＮＮＢ１、ＣＤＨ５、ＣＴＮＮＤ１、ＣＤＨ２、ＣＴＮＮＡ１、ＣＤＨ２、ＰＣＤＨＢ１６、ＣＴＮＮＡ１、ＣＥＬＳＲ２、ＰＣＤＨＢ６、ＰＣＤＨＢ７、ＣＴＮＮＤ２、ＰＣＤＨＧＣ３、ＰＣＤＨＧＢ４、ＰＣＤＨＧＡ８、ＰＣＤＨＧＡ１２、ＰＣＤＨＧＣ５、ＰＣＤＨＧＣ４、ＰＣＤＨＧＢ７、ＰＣＤＨＧＢ６、ＰＣＤＨＧＢ５、ＰＣＤＨＧＢ３、ＰＣＤＨＧＢ２、ＰＣＤＨＧＢ１、ＰＣＤＨＧＡ１１、ＰＣＤＨＧＡ１０、ＰＣＤＨＧＡ９、ＰＣＤＨＧＡ７、ＰＣＤＨＧＡ６、ＰＣＤＨＧＡ５、ＰＣＤＨＧＡ４、ＰＣＤＨＧＡ３、ＰＣＤＨＧＡ２、ＰＣＤＨＧＡ１、ＣＴＮＮＤ１、ＣＤＨ２３、ＰＣＤＨＢ１２、ＰＣＤＨＢ１０、ＰＣＤＨ１８、ＣＤＨ２０、ＰＣＤＨ９、ＰＣＤＨＧＡ１２、ＰＣＤＨＧＡ１１、ＰＣＤＨＧＡ１０、ＰＣＤＨＧＡ６、ＰＣＤＨＧＡ５、ＰＣＤＨＧＡ３、ＰＣＤＨ７、ＣＤＨ１８、ＣＤＨ６、ＣＣＢＥ１、ＣＯＬ１０Ａ１、ＣＯＬ１２Ａ１、ＣＯＬ１３Ａ１、ＣＯＬ１８Ａ１、ＣＯＬ１Ａ１、ＣＯＬ２１Ａ１、ＣＯＬ４Ａ１、ＣＯＬ４Ａ２、ＣＯＬ４Ａ５、ＣＯＬ４Ａ６、ＣＯＬ５Ａ１、ＣＯＬ５Ａ２、ＣＯＬ６Ａ１、ＣＯＬ６Ａ２、ＣＯＬ６Ａ３、ＣＯＬ９Ａ１、ＭＭＰ９、Ｐ４ＨＡ１、Ｐ４ＨＡ２、Ｐ４ＨＢ、ＰＣＯＬＣＥ、ＰＣＯＬＣＥ２、ＰＣＯＴＨ、ＰＬＯＤ１、ＰＬＯＤ２、ＰＬＯＤ３、ＣＩＢ１、ＩＬＫ、ＩＴＧＡ２、ＩＴＧＡ３、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ６、ＩＴＧＡＶ、ＩＴＧＢ１、ＩＴＧＢ１ＢＰ１、ＩＴＧＢ２、ＩＴＧＢ５、ＩＴＧＢＬ１、ＴＮＣ、ＥＭＩＬＩＮ１、ＩＣＡＭ１、ＨＳＰＧ２、ＨＰＳＥ、ＨＳ２ＳＴ１、ＳＤＣ２。
【０２０１】
本発明は、癌細胞の移動、転移のブロック、および癌の成長の阻害に関して重要な接着タンパク質を制御する方法を提供する。一実施形態において、方法は癌細胞の接着能を低下させることを含む。一実施形態において、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、グリコシル化細胞表面タンパク質、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭ、エラスチンおよびＦＡＫ、特にフィブロネクチンを含む。
【０２０２】
次の結果は、マイクロアレイ実験から得られる：
Ｙ／Ｄは、薬物を含まない対照（Ｄ）と比較した、化合物Ｙで処理された細胞における遺伝子発現の比（倍）であり、ＹＭ／Ｄは薬物を含まない対照（Ｄ）と比較した、化合物ＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ、糖部分を有さないＹ）で処理された細胞における遺伝子発現の比である。
【０２０３】
【表１】

マイクロアレイ実験の結果から、化合物ＹおよびＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ）はフィブロネクチン発現を阻害することがわかった、化合物Ｙ／Ｙ３の対照に対する発現比は、遺伝子プローブ２１２４６４＿ｓ＿ａｔ、２１６４４２＿ｘ＿ａｔ、２１１７１９ｘ＿ａｔおよび２１０４９５＿ｘ＿ａｔにより検出するとそれぞれ−２．７、−２．６、−２．６、−２．５倍である。これらの結果は、Ｙ／Ｙ３がフィブロネクチン発現を阻害することを示し、ＹＭ／ＡＣＨ−Ｙも若干のフィブロネクチン阻害を示す（阻害比は遺伝子プローブ２１２４６４＿ｓ＿ａｔ、２１６４４２＿ｘ＿ａｔ、２１１７１９＿ｘ＿ａｔおよび２１０４９５＿ｘ＿ａｔによるとそれぞれ−１．１、−１．１、−１．２、−１．１倍）。結果から、ＹＭは活性であるが、Ｙ／Ｙ３よりも有効でないことがわかる。
【０２０４】
【表２】

マイクロアレイ実験の結果は、化合物ＹおよびＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ）がインテグリン（ビトロネクチン受容体）発現を阻害することを示し、ここで化合物Ｙ／Ｙ３の対照に対する阻害比は、異なるプローブにより検出すると−１．８、−１．４倍であり、ＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ）の対照に対する阻害比は−１．３、−１．４倍である。
【０２０５】
【表３】

マイクロアレイ実験の結果は、化合物ＹおよびＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ）がラミニン発現を阻害することを示し、化合物Ｙ／Ｙ３の対照に対する発現比は、異なるプローブにより検出すると、−２．２、−２．０、−１．９、−１．６、−１．６倍であり、ＹＭ／ＡＣＨ−Ｙの対照に対する阻害比は、−２．０、−２．０、１．１、−１．７、−２．０倍である。
【０２０６】
【表４】

マイクロアレイ実験は化合物ＹおよびＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ）が接着分子と関連する遺伝子発現を阻害することを示し、ここで化合物Ｙ／Ｙ３の対照に対する阻害比は、異なるプローブにより検出すると−１．３から−１．９倍であり、ＹＭ／ＡＣＨ−Ｙの対照に対する阻害比は−１．１から−１．７倍である。
【０２０７】
【表５】



マイクロアレイ実験の結果は、化合物ＹおよびＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ）がコラーゲン発現を阻害することを示す。化合物Ｙ／Ｙ３の対照に対する発現比は、−１．３から−３．０倍の範囲であり、ＹＭ／ＡＣＨ−Ｙの対照に対する発現比は、−１．１から−３．６倍の範囲である。
【０２０８】
【表６】

マイクロアレイ実験の結果は、化合物ＹおよびＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ）がＥＳ２細胞におけるインテグリンファミリーに関連する遺伝子発現を阻害することを示す。化合物Ｙ／Ｙ３の対照に対する発現比は−１．５から−１．９倍の範囲であり、ＹＭ／ＡＣＨ−Ｙの対照に対する発現比は−１．１から−２．５倍である。
【０２０９】
【表７】

マイクロアレイ実験の結果は、化合物ＹおよびＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ）がＥＳ２細胞におけるミオシンファミリーに関連する遺伝子発現を阻害することを示した。化合物Ｙ／Ｙ３の対照に対する発現比は−１．５から−２．２倍の範囲であり、ＹＭ／ＡＣＨ−Ｙの対照に対する発現比は−１．２から−２．１倍の範囲である。
【０２１０】
【表８】

マイクロアレイ実験の結果は、化合物ＹおよびＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ）がＥＳ２細胞におけるカドヘリンファミリーの遺伝子発現を阻害することを示した。
【０２１１】
【表９】

マイクロアレイ実験の結果は、化合物ＹがＥＳ２細胞におけるカドヘリンファミリーの遺伝子発現を阻害することを示した。
【０２１２】
【表１０】

マイクロアレイ実験の結果は、化合物ＹがＥＳ２細胞におけるヘパリン硫酸ファミリーの遺伝子発現を阻害することを示した。
【０２１３】
【表１１】

マイクロアレイ実験の結果は、化合物ＹがＥＳ２細胞におけるＣＤ５４の遺伝子発現を刺激することを示した。
【０２１４】
【表１２】

マイクロアレイ実験の結果は、化合物ＹおよびＹＭ（ＡＣＨ−Ｙ）がＥＳ２細胞におけるアンジオポイエチンファミリーの遺伝子発現を調節することを示した。アンジオポイエチン２の増加制御（アンジオポイエチン２に対する正の調節）ならびにアンジオポイエチン１およびアンジオポイエチン様１およびアンジオポイエチン様４の減少制御（アンジオポイエチン１およびアンジオポイエチン様１およびアンジオポイエチン様４に対する負の調節）がある。
【０２１５】
フィブロネクチン分泌研究の概要
ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ処置後のＥＳ２細胞からのフィブロネクチン分泌の減少。
【０２１６】
（Ｆ１およびＦ３の結果）これらの実験において、本発明者等はＥＳ２癌細胞のＹ処理がフィブロネクチン分泌の阻害を引き起こすという基本的現象を確証し、記載した。ウェスタンブロットアッセイを用いて、本発明者等は、薬物処理をしないＥＳ２細胞（ＤＭＳＯ対照）は培地にフィブロネクチンを分泌すること、および時間とともにフィブロネクチンが蓄積されたことを示した。しかし、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙで処理された細胞培養物においては、フィブロネクチンの分泌は観察されないか、またはごくわずかしか観察されなかった。フィブロネクチンの阻害は薬物処理後早くて８時間で観察された。
【０２１７】
フィブロネクチン分泌の阻害は生理的であり、その量の決定は次に基準に基づく：
１．フィブロネクチンは生存細胞から分泌される。薬物処理後生存細胞が８５％を超える細胞のみをこれらの実験において使用する。生存細胞をＭＴＴアッセイにおいて決定した。
２．比較のために、各試料から得られるイムノバンド強度を細胞量に関して正規化する。細胞量をＭＴＴアッセイにより決定し、各細胞試料についてのＭＴＴ単位として帰属させる。
【０２１８】
（Ｆ４の結果）致死未満の薬物濃度（１０ｕｇ／ｍｌのＹ）で、ＭＴＴアッセイにより決定されるように、Ｙ処理後１８時間に９５％を超える細胞が生存していた。ウェスタンブロットは、Ｙ処理後の細胞培地中への細胞によるフィブロネクチン分泌が減少することを示した。
【０２１９】
フィブロネクチンウェスタンバンド（平均６対のブロット）のスキャンにより、Ｙ処理後１８時間でフィブロネクチン分泌が４０％減少することがわかる。
【０２２０】
（Ｆ５の結果）同様に、ＭＴＴアッセイにより測定されるように、Ｙ処理後２４時間で細胞の８５％が生存していた。ウェスタンブロットにより、Ｙ処理試料のフィブロネクチンが減少することがわかる。６対のブロットに基づき、これらをＭＴＴ単位に対して正規化した後、Ｙ処理試料のフィブロネクチンバンド強度の３１％減少が観察された。
【０２２１】
したがって、これらの結果は、細胞によるフィブロネクチン分泌はＹ処理の２４時間後に３１％減少することを示す。
【０２２２】
（Ｆ７の結果）ＥＳ２細胞によるフィブロネクチン分泌に対するパクリタキセルの影響。全ての抗癌剤が細胞からのフィブロネクチン分泌を阻害できるわけではないことを証明するために、本発明者等は、卵巣癌に有効な周知抗ガン剤であるパクリタキセルを用いた。本発明者等の結果は、ＥＳ２細胞においてパクリタキセル処理（１０〜５０ｎｇ／ｍｌ、パクリタキセルのＩＣ_５０は１．５ｎｇ／ｍｌ）でフィブロネクチン分泌は阻害されないことを示した。この研究により、ＥＳ２細胞により分泌されるフィブロネクチンはＹ処理後に３０〜４０％減少することを示し、これは先の結果と一致する。
【０２２３】
（Ｆ８の結果）ＥＳ２細胞に加えて、もう一つ別のヒト卵巣癌細胞（Ｈｅｙ８Ａ）をこの研究において用いた。Ｙ処理Ｈｅｙ８Ａ細胞は、ＤＭＳＯ対照と比較して３１％のフィブロネクチンを分泌し、したがって６９％の阻害を有することが判明した。
【０２２４】
卵巣癌の他に、他のヒト癌細胞を次の実験において試験した。これらの実験は、肺、膀胱、肝臓、脳および皮膚由来の癌細胞からのフィブロネクチンに分泌はＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ処置により阻害されることを示す。
【０２２５】
（Ｆ１１）肺癌細胞（Ｈ４６０）に関して、２０ｕｇ／ｍｌの濃度で、２０〜６０％の範囲のフィブロネクチン分泌の阻害がある。
【０２２６】
（Ｆ１２Ａ）膀胱癌細胞（ＨＴＢ−９）について、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ（１０ｕｇ／ｍｌ）はフィブロネクチン分泌の５０％を阻害する。
【０２２７】
（Ｆ１５）肝臓ＨｅｐＧ２細胞において。１０ｕｇ／ｍｌのｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙはフィブロネクチンの分泌を４２％阻害する。
【０２２８】
（Ｆ１６）脳グリア芽種Ｔ９８Ｇ細胞を１０ｕｇ／ｍｌのｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙとともにインキュベーションすると、フィブロネクチン分泌が２７％阻害され、２０ｕｇ／ｍｌのＹとともにインキュベーションすると、フィブロネクチン分泌が７４％阻害される。
【０２２９】
（Ｆ１７）皮膚ＳＫ−Ｍｅｌ−５細胞について、阻害は、２０ｕｇ／ｍｌのＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙを用いて４０〜５７％である。
【０２３０】
ＥＳ２細胞からのフィブロネクチン分泌に対するｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ類似体および他のサポニンの影響
（Ｆ２３）他のサポニンに関する阻害効果を研究するために、本発明者等は、同じ植物から単離されたトリテルペノイドサポニンである化合物Ｏ５４を試験した。Ｏ５４を用いると、４０ｕｇ／ｍｌ（通常の有効濃度１０ｕｇ／ｍｌの代わりに）もの高用量でも、ＥＳ２細胞におけるフィブロネクチン分泌の阻害活性はない。この結果は、阻害効果に関与するトリテルペノイドサポニンにおいて特異性があることを示す。
【０２３１】
（Ｆ２１）フィブロネクチン阻害活性に有効な官能基を調査するために、本発明者等はｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ３のいくつかの誘導体を試験した。これらの実験において、ＥＳ２細胞をＡＣＨ−Ｙ（糖を含まないＹ３）およびＡＫＯＨ−Ｙ（Ｃ２１、Ｃ２２アンゲロイル基を含まないＹ３）で処理した。
【０２３２】
２０ｕｇ／ｍｌのＡｃｈ−Ｙを用いると、ＥＳ２細胞からのフィブロネクチン分泌が減少する（対照の５３％〜７５％の範囲）。フィブロネクチン分泌の阻害は１０ｕｇ／ｍｌのＡｃｈ−Ｙのみを使用した場合、少なかった（または観察されなかった）。しかし、ＡＫＯＨを用いると８０ｕｇ／ｍｌでも効果は観察されなかった。
【０２３３】
（Ｆ１３）本発明者等は、１個だけのアンゲロイル基がＣ２１で結合したトリテルペノイドサポイニンである、ベータ−エスシンに関して阻害活性についても試験した。
【０２３４】
結果は、１０および２０ｕｇ／ｍｌのベータ−エスシンがそれぞれＥＳ２細胞からのフィブロネクチン分泌を７％および４８％阻害することを示す。しかし、１０ｕｇ／ｍｌのｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙはフィブロネクチン分泌を４９％阻害する。結果は、ベータ−エスシンがフィブロネクチン分泌も阻害するが、ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙの半分の効力を有することを示す。
【０２３５】
（Ｆ１４）（Ｆ２４）本発明者等は、ＥＳ２細胞に対するｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙの様々な類似体の阻害効果を決定した。結果を次表に示す。
【０２３６】
【表１３】

試験した全ての試料（ＡＫＯＨを除く）はＥＳ２細胞からのフィブロネクチン分泌の阻害に効果がある。８０ｕｇ／ｍｌのＡＫＯＨ−Ｙ（他のサポニン（１０ｕｇ／ｍｌ）において使用される濃度の４倍高い濃度）を用いても、ＥＳ２細胞に関するフィブロネクチン分泌に対して影響はない。
【０２３７】
結論として、サポニンは一般に、ＥＳ２細胞からのフィブロネクチン分泌の阻害効果を有する。ＡＫＯＨ−Ｙ（ジアンゲロイル基を有さないＹ３）が活性を示さないという事実は、Ｃ２１、２２位のアシル化が阻害活性について重要であることを示す。
【０２３８】
ＥＳ２細胞に加えて、様々な器官由来の他の癌細胞も調査した。結果を次表に示す。
【０２３９】
【表１４】

（Ｆ２０）ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ処理後の細胞含量およびフィブロネクチン分泌の決定
【０２４０】
結果：この実験は、（１）ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ処理後にフィブロネクチン分泌が４６％減少すること（対照の５４％）および（２）Ｙ処理後にフィブロネクチン細胞含量が７０％減少すること（対照の３０％）、（３）Ｙ処理後に細胞ベータ−アクチン含量に変化はないことを示す。
【０２４１】
Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ処置でのＥＳ２細胞におけるアンジオポイエチン２（Ａｎｇ２）の増加調節。
【０２４２】
方法：ＥＳ２（ヒト卵巣癌細胞）をＲＰＭＩ１６４０培地中で成長させた。４，５００，０００個の細胞をＴ７５フラスコ中に播種し、２４時間成長させた後、薬物処理した。
【０２４３】
薬物処理：細胞培養物を５、１０および１５ｕｇ／ｍｌ（最終濃度）のＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ３［Ｙ３−５、Ｙ３−１０、Ｙ３−１５］、またはＤＭＳＯ対照［Ｄ−１０］で処理した。２４時間後、細胞を１ｍｌのＳＤＳ試料緩衝液（細胞抽出物）中に懸濁させた。試料（８０ｕｌ／レーン）を１０％ＳＤＳゲルに塗布し、電気泳動を１００ボルトで２時間行った。タンパク質を電気泳動によりニトロセルロース膜に移した。ニトロセルロースブロットを５％のＰＢＳ中脱脂粉乳でブロックした。ブロットを次いで第１抗体（ヤギ抗Ａｎｇ２、ＳＩＧＭＡ Ａ０８５１）および第２抗体（ロバ抗ヤギＡＰ複合体、Ｐｒｏｍｅｇａ Ｖ１１５Ａ）とともにインキュベートした。イムノバンドを、ＢＣＩＰ／ＮＢＴ発色システム（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｓ３７７１）を用いて展開した。
【０２４４】
結果：図５に示すように、アンジオポイエチン−２イムノバンド（Ｍ．Ｗ．、６６Ｋ）を１５ｕｇ／ｍｌのＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙで処理された細胞から得られた細胞抽出物において観察した。これらの条件下で、対照および低濃度のｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙにおいて検出可能なアンジオポイエチン−２のイムノバンドは観察されないか、または最小のイムノバンドが観察された。この結果は、ＥＳ２細胞におけるＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙでの処理はアンジオポイエチン−２の細胞濃度を増加させることを示す。これらの結果は、マイクロアレイ研究の結果を裏付ける。
【０２４５】
本発明は、癌細胞における遺伝子発現を調節するための組成物および方法を提供し、ここで調節は正および負の制御をすることを含み、調節される遺伝子は接着タンパク質であり、調節は、接着タンパク質の発現、産生および分泌を含み、接着タンパク質は、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４、ＣＡＭを含む。本発明は、アンジオポイエチンを調節する組成物および方法を提供し、調節はアンジオポイエチン２の正の制御をすることを含み、アンジオポイエチン１の負の制御することを含む。本発明の組成物および方法は、トリテルペンの炭素２１および／または２２位のアシル化基が機能に必要であり、アンゲロイル、アセチル、アルカノイル、アルケノイルおよびアシル基から選択される、トリテルペンを含む。トリテルペンの５位の糖部分はこれらの化合物の活性を向上させるために重要である。
【０２４６】
（実験の詳細）
ハーブ抽出物の実験、ＨＰＬＣによる抽出成分の分析、ＭＴＴアッセイを用いた様々なヒト器官由来の細胞に関するＸａｎｉｆｏｌｉａ Ｙにより影響を受ける細胞成長活性の決定、植物抽出物由来の生物活性成分の精製、ＦＰＬＣを用いた植物抽出物の分画、分取ＨＰＬＣを用いた成分Ｙの単離、化学構造の決定、細胞実験および動物実験の詳細は、国際出願ＰＣＴ／ＵＳ０５／３１９００号、米国特許出願第１１／２８９１４２号、米国特許出願第１０／９０６３０３号、米国特許出願第１１／１３１５５１号および米国特許出願第１１／６８３１９８号（２００７年３月７日出願）、国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０７７２７３（２００７年８月３０日出願）、米国特許出願第６０／８９０３８０号（２００７年２月１６日に出願された）、米国特許出願第６０／９４７，７０５号（２００７年７月３日に出願）（その内容は本発明の一部として参照される）に開示されている。
【０２４７】
マイクロアレイ
実験１
マイクロアレイによるＹ処理後のＥＳ２細胞の遺伝子発現の分析
本発明では、遺伝子発現の研究においてマイクロアレイ実験を行った。合計数５４６７６の遺伝子を研究した。
【０２４８】
細胞培養および薬物処理：ＥＳ２細胞をＴ−２５フラスコ中にフラスコあたり４，５００，０００個の細胞で２４時間播種した。細胞培養物をｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ（Ｙ）またはＤＭＳＯ無薬物対照（Ｄ）を含む新鮮な培地で２４時間置換した。次いで細胞をＲＮＡ単離のために採取した。実験は３回行った。
【０２４９】
ＲＮＡ抽出、標識、ハイブリダイゼーション、およびデータ分析。Ｑｉａｇｅｎ ＲＮｅａｓｙ Ｋｉｔを用いてＲＮＡを腫瘍細胞から抽出した。ＲＮＡの質および量をそれぞれＡｇｉｌｅｎｔ ＢｉｏＡｎａｌｙｚｅｒおよびＮａｎｏＤｒｏｐ（登録商標）ＮＤ−１０００分光光度計によりチェックした後、さらに操作した。第１および第２ｃＤＮＡストランドを２０ｎｇの全ＲＮＡから２サイクル増幅用のＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘ Ｔ７オリゴ（ｄＴ）プライマープロトコルおよびキットを用いて合成した。増幅されたビオチン標識ｃＲＮＡを産生するために、ｃＤＮＡをＡｍｂｉｏｎから入手したＭｅｇａＳｃｒｉｐｔキットを用いてインビトロ転写により逆転写した。１５．０μｇの標識ｃＲＮＡをフラグメント化し、ＮａｎｏＤｒｏｐ（登録商標）ＮＤ−１０００分光光度計を用いて濃度について再チェックした。Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘスパイクイン対照およびフラグメント化標識ｃＲＮＡを含むハイブリダイゼーションカクテルをヒトＵ１３３Ｐｌｕｓ２．０ＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）オリゴヌクレオチドアレイ上に載せた。Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘアレイ（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ、Ｉｎｃ．Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ、ＣＡ）は１，３００，０００を超える独自のオリゴヌクレオチド特性であって、３８，５００より多い十分に実証されたヒト遺伝子を表すものからなる。アレイを１６時間４５℃で、６０ｒｐｍで回転しながらハイブリダイズし、次いで洗浄し、ストレプトアビジン、Ｒ−フィコエリトリン複合染料を用いてＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘ Ｆｌｕｉｄｉｃｉｓ Ｓｔａｔｉｏｎ４５０で染色した。ビオチニル化抗ストレプトアビジンを用いてシグナル増幅を行った。オートローダーを有するＧｅｎｅＣｈｉｐ（登録商標）３０００共焦点レーザースキャナを用いてアレイをスキャンした。画像を分析し、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ ＧＣＯＳソフトウェアバージョン１．４を用いて品質管理メトリクスを記録した。最後に、Ｐｌｉｅｒアルゴリズムに基づくｄＣｈｉｐ ＰＭ−ｏｎｌｙモデルを用いて各遺伝子の発現値を計算した。
【０２５０】
データ分析法
対比較を次のように行った：治療群対対照群（Ｙ対Ｄ）、修飾薬物群対対照群（ＹＭ／ＡＣＹ−Ｈ対Ｄ）および治療群対修飾薬物群（Ｙ対ＹＭ／ＡＣＨ−Ｙ）
ＣｅｌファイルはＲ統計プログラミングのＢｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒパッケージを用いて分析した。Ｌｉｍｍａ分析により試料間で妥当な数の遺伝子が変化した。
【０２５１】
ＣＥＬファイルにおける未加工データをＧＣＲＭＡ法（ローバストマルチアレイ分析）により正規化した。これはＢｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒ．ｏｒｇ／）に実装されている。未加工シグナル強度データを正規化し、バックグラウンドを補正し、ある統計モデルに基づいて集約し、発現値（ｌｏｇ２スケール）をプローブ対ごとのチップごとに得る。次いで、処理対間で遺伝子発現の有意な変化はないという帰無仮説を試験した。これをＬＩＭＭＡにより行い、これもＢｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒに実装されている。これは、経験Ｂａｙｅｓ法を用いて遺伝子発現における差異を評価する。一つの比較、すなわち、ハイグレード対ローグレードを比較した。未加工ｐ値を誤差発見率（ＦＤＲ）制御のためのＢｅｎｊａｍｎｉｎ−Ｈｏｃｈｂｅｒｇ法により調整した。すべてのデータはｐ値が０．０５未満（遺伝子が異なった形で発現されない（擬陽性）確率が１：２０である）である有意な数の遺伝子を含んでいた。
【０２５２】
すべての発現データをｐ値（０．０５）によりフィルタする。
【０２５３】
未補正ｐ値を誤差発見率（ＦＤＲ）制御のためのＢｅｎｊａｍｎｉｎ−Ｈｏｃｈｂｅｒｇ法により調整して、調整されたｐ値を得た。
【０２５４】
結果：表１〜１２を参照のこと
Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙによるフィブロネクチン分泌の阻害（ウェスタンブロット）
実験２（Ｆ１）
方法：
細胞：ＲＰＭＩ１６４０培地を含むＴ−２５フラスコ中でＥＳ２細胞を一夜成長させた後、薬物処理した。薬物処理：細胞培養物を、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ（最終濃度１０ｕｇ／ｍｌ）またはＤＭＳＯ（対照として）を含む新鮮なＲＰＭＩ培地で０時に置換した。１、２、４、８および２４時間で、培地のアリコートをフィブロネクチン決定のために採取した。ヒトフィブロネクチンのみに対して特異的なモノクローナル抗体（ＳＩＧＭＡ）を用いたウェスタンブロットによりフィブロネクチンを決定した。
【０２５５】
結果（図１参照）：
１．ＤＭＳＯ（無薬物対照として）で処理した細胞はフィブロネクチンを培地に分泌し、時間とともにフィブロネクチンが蓄積した。Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙで処理された細胞培養において観察されるフィブロネクチンの分泌は全くないかまたはごくわずかである。
２．対照に関して、フィブロネクチンイムノバンドは、ウシ胎仔血清を含むか、または正常マウス血清（ＮＳ１）を用いたＲＰＭＩ培地においては観察されなかった。
【０２５６】
実験３（Ｆ３）
方法：
細胞：ＥＳ２細胞をＲＰＭＩ１６４０培地中で一夜成長させた後、薬物処理した。
【０２５７】
薬物処理：細胞培養物を、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ（最終濃度１０ｕｇ／ｍｌ）またはＤＭＳＯ（対照として）を含む新鮮なＲＰＭＩ培地で０時に置換した。４時間（Ａ）または８時間（Ｂ）に、薬物を含まない新鮮な培地で培地を置換した。２、４、８および２４時間で、フィブロネクチン決定のために細胞培養物のアリコートを採取した。ヒトフィブロネクチンに対してのみ特異的なモノクローナル抗体（ＳＩＧＭＡ）を用いたウェスタンブロットによりフィブロネクチン（ＦＮ）を決定した。
【０２５８】
結果（これも図２参照）：
（１）薬物除去前（４時間および８時間）の対照とＹ処理細胞を比較すると、Ｙ処理細胞からのＦＮ分泌が減少する。これらの期間で著しい細胞形態の変化はなく、このことは細胞が生きていることを示唆する。
（２）２４時間で薬物を除去した後の対照とＹ処理細胞とを比較すると、Ｙ処理細胞からのＦＮの分泌は５０％を超えて減少すると推定された。
（３）Ｙ処理細胞により２４時間で分泌されるＦＮの量は、８時間（Ｙの除去前）で分泌されるものよりも多く、このことは細胞がＹ処理後も生存していることを示す。
【０２５９】
実験４（Ｆ４）
方法：
細胞：ＥＳ２細胞をＲＰＭＩ１６４０培地中で一夜成長させた後、薬物処理した。
【０２６０】
薬物処理：細胞培養物を、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ（最終濃度１０ｕｇ／ｍｌ）またはＤＭＳＯ（対照として）を含む新鮮なＲＰＭＩ培地と０時間で置換した。２、および１８時間で、培地のアリコートをフィブロネクチン決定（ウェスタンブロット法）のために採取した。１８時間での細胞生存性をＭＴＴアッセイにより測定した。培養物を、ＭＴＴを含むＲＰＭＩ培地と置換し、１時間インキュベートした。形成されたホルマザンをＤＭＳＯ中に溶解させ、５７０ｎｍでのＯＤを測定した。
【０２６１】
結果（これも図２参照）：
・Ｙ処理の１８時間後の９５％を超える細胞はＭＴＴ分析により確認されるように生存していた。
・ウェスタンブロットは、Ｙ処理後に細胞による培地中へのＦＮ分泌が減少することを示す。ＦＮウェスタンバンド（平均５セットのブロット）のスキャンは、Ｙ処理後１８時間でＦＮ分泌が４０％減少することを示す。
【０２６２】
実験５（Ｆ５）：
方法：
細胞および薬物処理：先の実験と同様。７または２４時間後、培地のアリコートをフィブロネクチン決定（ウェスタンブロット法）のために採取した。
【０２６３】
２４時間での細胞生存性をＭＴＴアッセイにより決定した。
【０２６４】
結果：
・Ｙ処理細胞の７および２４時間後の細胞のそれぞれ９３％および８５％はＭＴＴアッセイにより確認されるように生存していた。
・Ｙ処理の最初の７時間でのフィブロネクチン分泌の変化はあまりはっきりしない。しかし、２４時間後、対照と比較して、Ｙ処理試料のフィブロネクチンバンドが減少する。同じ量の生細胞に基づいて、イムノバンドの強度を比較した（ＭＴＴのＯ．Ｄ．単位あたり）。三対のブロットのスキャンによりフィブロネクチンバンドの３１％が減少することが示される。したがって、これらの結果は、細胞によるフィブロネクチン分泌はＹ処理の２４時間後に３１％減少することを示す。
【０２６５】
実験６（Ｆ７）：ＥＳ２細胞によるフィブロネクチン分泌に対するパクリタキセルの影響
方法：
細胞：ＥＳ２細胞をＲＰＭＩ１６４０培地中で一夜成長させた後、薬物処理した。
【０２６６】
薬物処理：細胞培養物を、ＤＭＳＯ（対照として）［Ｄ］、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ（１０ｕｇ／ｍｌ）［Ｙ］、またはパクリタキセル１０もしくは５０ｎｇ／ｍｌ［Ｔ１０、またはＴ５０］を含む新鮮なＲＰＭＩ培地と置換した。
【０２６７】
２４時間後、培地のアリコートをフィブロネクチン決定（ウェスタンブロット法）のために採取した。２４時間での細胞生存性をＭＴＴアッセイにより決定した。
【０２６８】
結果：
処理細胞のＭＴＴ単位（細胞ベース）に基づき、ＤＭＳＯ対照を含むものと比較して、Ｙ、Ｔ１０およびＴ５０細胞のそれぞれ８７％、９４％および９１％成長が処理後２４時間で生存可能であった。
【０２６９】
細胞により培地中へ分泌されるフィブロネクチンの量をウェスタンブロットアッセイにより決定した。ウェスタンバンド強度をバンド単位で割ることにより、細胞あたりで分泌されるフィブロネクチンの量を決定した。
【０２７０】
ＤＭＳＯ対照と比較することにより、１０ｎｇ／ｍｌまたは５０ｎｇ／ｍｌのＴａｘｅｌで処理されたＥＳ２細胞はそれぞれ１０５％または９７％のフィブロネクチンを２４時間の処理中に培地中に分泌する。同時に、Ｙ処理ＥＳ２細胞は対照の６２％を分泌した（３８％減少）。
【０２７１】
実験７（Ｆ８）：Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ法で処理されたＨｅｙ８Ａ細胞：
方法：Ｈｅｙ８Ａ（ヒト卵巣癌細胞）を、ＲＰＭＩ１６４０培地中で９０％コンフルエントまで成長させた後、薬物処理した。薬物処理：細胞培養物を、ＤＭＳＯ（対照として）［Ｄ１］、またはＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ（１０、１５、または２０ｕｇ／ｍｌ）［Ｙ１、Ｙ２およびＹ３］のいずれかを含む新鮮なＲＰＭＩ培地で置換した。培地のアリコートを０時間試料として除去し、この時点でＦＮは検出されなかった。２４時間後、培地のアリコートをフィブロネクチン決定（ウェスタンブロット法）のために採取した。２４時間での細胞生存性をＭＴＴアッセイにより決定した。培養物を、ＭＴＴを用いてＲＰＭＩ培地（５ｍｌ）で置換し、１時間インキュベートした。形成されたホルマザンをＤＭＳＯ中に溶解させ、５７０ｎｍでのＯＤを測定した。
【０２７２】
ウェスタンブロット：使用済み培地（０．６ｍｌ）をＳＤＳ試料緩衝液（０．２ｍｌ）と混合し、３分間沸騰させた後、ＳＤＳゲルに載せた。試料（６０ｕｌ／レーン）を６％ＳＤＳゲルに塗布し、電気泳動を１００ボルトで２時間行った。タンパク質を電気泳動（１００ボルトで３０分）によりニトロセルロース紙に移した。ウェスタンブロットを第１抗体（マウス抗ＦＮ、ヒトＦＮに対して特異的、ＳＩＧＭＡ Ｆ０９１６）および第２抗体（抗マウスＩｇＧ ＡＰ複合体、Ｐｒｏｍｅｇａ Ｓ３７２１）とともにインキュベートした。イムノバンドを、ＢＣＩＰ／ＮＢＴ発色システム（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｓ３７７１）を用いて展開させた。
【０２７３】
結果：
・２４時間の薬物処理後、１５ｕｇ／ｍｌおよび２０ｕｇ／ｍｌを含む細胞は死んでいる（浮遊）ことが判明し、さらに処理しなかった。ＤＭＳＯおよび１０ｕｇ／ｍｌのＹで細胞を処置した。
・ＭＴＴアッセイは、Ｙ処理（１０ｕｇ／ｍｌ）した細胞の成長は対照の８３％であることを示した。
・ウェスタンブロットは、Ｙ処理試料（Ｙ１）のバンド強度がＤＭＳＯ対照（Ｄ１）と比較してかなり減少することを示す。
・ＭＴＴ単位で補正した後の平均バンド強度は：ＤＭＳＯ対照およびＹ処理試料についてそれぞれ１１７９および３６６である。したがって、Ｙ処理Ｈｅｙ８Ａ細胞はＤＭＳＯ対照と比較して３１％フィブロネクチン（ＦＮ）を分泌するか、または６９％阻害する。
【０２７４】
実験８（Ｆ１１）：ヒト肺癌細胞（Ｈ４６０）におけるＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙによるフィブロネクチン分泌の阻害
方法：実験８を参照のこと。
【０２７５】
結果：肺細胞（Ｈ４６０）はＦＮ分泌の阻害においてＹに対して感受性である。ＭＴＴ結果に基づいて、細胞は２０ｕｇ／ｍｌのＹで依然として生存しているが、ＦＮの阻害は６０％を超える。
【０２７６】
実験９（Ｆ１２）：膀胱癌細胞（ＨＴＢ−９）におけるＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙによるフィブロネクチン分泌の阻害
方法：実験８を参照のこと。
【０２７７】
結果：
・ＭＴＴアッセイは、１０ｕｇ／ｍｌのＹで処理した細胞の成長がＤＭＳＯ対照と比較して、７７％〜９１％減少することを示した。
・ウェスタンブロットは、Ｙ処理試料のＦＮバンド強度が減少することを示す。ＭＴＴ単位（細胞量に等しい）で補正後、細胞量あたりＦＮバンド強度が約５０％減少する。
・これらの結果はＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ（１０ｕｇ／ｍｌ）がＦＮ分泌の５０％を阻害することを示す。
【０２７８】
実験１０（Ｆ１３）：Ｙおよびベータ−エスシンで処理したＥＳ２細胞
方法：実験８を参照のこと
結果：
・ＭＴＴアッセイは、Ｙ、Ｅｓ１０およびＥｓ２０を用いた細胞の成長が、ＤＭＳＯ対照と比較してそれぞれ８９％、９０％および８２％であることを示す。
・ウェスタンブロットは、Ｅｓ１０およびＥｓ２０試料のＦＮバンド強度がＤＭＳＯ対照のそれぞれ９３％および５２％であることを示す。Ｙ１０試料のバンド強度は対照の５１％である。
・これらの結果は、１０および２０ｕｇ／ｍｌのベータ−エスシンがＦＮ分泌のそれぞれ７％および４８％を阻害することを示す。しかし、１０ｕｇ／ｍｌのＹはＦＮ分泌の４９％を阻害する。
・結果は、ベータ−エスシンもＦＮ分泌を阻害するが、Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙの半分の効力であることを示す。
【０２７９】
実験１１（Ｆ１４）：様々なＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ法で処理されたＥＳ２細胞
方法：実験８を参照のこと
・２つの実験を行った（ＦＮ１４ＢおよびＦＮ１４Ｃ）。各実験あたり５つのゲルを実施した。
【０２８０】
結果：
ＡＫＯＨ−Ｙ（ジアンゲロイル基を有さないＹ３）を除いて、すべての試料はＥＳ２細胞からのＦＮ分泌をある程度阻害する。他のサポニン（１０ｕｇ／ｍｌ）において用いられるよりも４倍高い濃度である８０ｕｇ／ｍｌのＡＫＯＨ−Ｙは依然としてＥＳ２細胞に関するＦＮ分泌の阻害に対して影響を及ぼさない。
【０２８１】
【表１５】

結論：
サポニンは概してＥＳ２細胞からのフィブロネクチン分泌の阻害に効果があると思われる。しかし、この実験によりＣ２１、２２位のアシル化は阻害活性に重要であることが判明した。
【０２８２】
実験１２（Ｆ２３）：Ｏ５４で処理されたＥＳ２細胞
方法：実験８を参照のこと。
【０２８３】
結果：これらの結果に基づいて、４０ｕｇ／ｍｌでＯ５４処理されたＥＳ２細胞におけるＦＮ分泌の阻害はない。
【０２８４】
実験１３（Ｆ２４）：Ｙ０およびＹ５で処理されたＥＳ２
方法：実験８を参照のこと。
【０２８５】
結果：これらの試料のイムノバンドの強度を比較することにより、この実験の結果は次のことを示す：（１）Ｙ５がＦＮ分泌の阻害に関してＹ３と同じ活性を有する（どちらも１０ｕｇ／ｍｌで６８％阻害する）、
（２）Ｙ０はＦＮ分泌の阻害についてＹ３よりも弱い。（１０ｕｇ／ｍｌで３４％阻害する）、
（３）結論、Ｙ０およびＹ５はどちらもＥＳ２細胞からのＦＮ分泌の活性を阻害する。
【０２８６】
実験１４（Ｆ２５、２６）：Ｙで処理されたＨｅｐＧ２細胞
方法：実験８を参照のこと。
【０２８７】
結果：これらの試料のイムノバンド強度を比較することにより（表参照）、１０ｕｇ／ｍｌの濃度で、Ｘ、ＥＳ、Ｙ０、Ｙ１、Ｙ３、およびＹ５はＨｅｐＧ２細胞からのフィブロネクチン分泌に対して阻害効果を有することが判明した。Ｙ７、Ａｃｈ（１０ｕｇ／ｍｌ）およびＡＫＯＨ（８０ｕｇ／ｍｌ）に関して効果は最小であるか、または全く観察されなかった。
【０２８８】
【表１６】

実験１５（Ｆ２７、２９）：Ｙで処理されたＮＣＩ−Ｈ４６０細胞（肺）
方法：実験８を参照のこと
【０２８９】
【表１７】

実験１６（Ｆ２８、３０）：Ｙで処理されたＨＴＢ−９細胞（膀胱）
方法：実験８を参照のこと
（ＦＮ２８、３０）膀胱
【０２９０】
【表１８】

実験１７（Ｆ３１、３２）：Ｙ２で処理されたＴ９８Ｇ（脳）
方法：実験８を参照のこと
【表１９】

実験１８（Ｆ３３）：Ｙで処理されたＳＫ−ＭＥＬ−５細胞
方法：実験８を参照のこと
【０２９１】
【表２０】

実験１９（Ｆ２０）：Ｙ３処理後の細胞内含量およびＦＮ分泌の決定
方法：
細胞：ＥＳ２（ヒト卵巣癌細胞）をＲＰＭＩ１６４０培地中で成長させた。１，５００，０００個の細胞をＴ２５フラスコ中に播種し、２４時間成長させた後、薬物処理した。
【０２９２】
薬物処理：細胞培養物を２．５ｕｌのＤＭＳＯ（対照として）［Ｄ］、または１０ｕｇ／ｍｌ（最終濃度）のＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ３［Ｙ］のいずれかを含む新鮮なＲＰＭＩ培地中と置換した。
【０２９３】
２４時間後、培地のアリコートをフィブロネクチン決定（ウェスタンブロット法）のために採取した。結合した細胞を１ｍｌのＳＤＳ試料緩衝液（細胞抽出物）中に懸濁させた。
【０２９４】
ウェスタンブロット：使用済み培地（０．６ｍｌ）をＳＤＳ試料緩衝液（０．２ｍｌ）と混合し、細胞抽出物を３分間沸騰させた後、ＳＤＳゲルに載せた。試料（８０ｕｌ／レーン）を６％〜１０％のＳＤＳゲルに塗布し、電気泳動を１００ボルトで２時間行った。タンパク質を電気泳動（１００ボルトで３０分）によりニトロセルロース膜に移した。ニトロセルロースブロットを５％のＰＢＳ中脱脂粉乳でブロックした（１〜２時間）。ブロットを次いで第１抗体（マウス抗ＦＮ、ヒトＦＮに対して特異的、ＳＩＧＭＡ Ｆ０９１６およびマウス抗ベータアクチン、ＳＩＧＭＡ Ａ５３１６）ならびに第２抗体（抗マウスＩｇＧ ＡＰ複合体、Ｐｒｏｍｅｇａ Ｓ３７２１）とともにインキュベートした。イムノバンドをＢＣＩＰ／ＮＢＴ発色システム（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｓ３７７１）を用いて展開させた。ウェスタンバンド強度の決定：ウェスタンブロットのバンド画像を、デジタルカメラ（ゲルあたり３〜５枚の写真を撮影した）を用いて取り込み、バンドの強度を、「Ｉｍａｇｅ Ｊ」ソフトウェアを用いて決定した。
【０２９５】
ＦＮ濃度を細胞ベータ−アクチン濃度で正規化した。培地中およびＹ処理細胞の内部に分泌されたフィブロネクチンを決定し、対照（ＤＭＳＯ処理細胞）と比較した。
【０２９６】
結果：この実験から、（１）Ｙ処理後にＦＮ分泌が４６％減少すること（対照の５４％）および（２）Ｙ処理後にＦＮ細胞含量は７０％減少すること（対照の３０％）、（３）Ｙ処理後に細胞ベータ−アクチン濃度は変化しないことがわかる。
【０２９７】
実験２０：動物実験
・無胸腺Ｎｕ／Ｎｕマウス（２〜３月齢）にＥＳ２（ヒト卵巣癌）細胞を移植した。
・移植（第１日）の５日後に、マウスを２群（ＨおよびＪ）に分けた（各群に２匹）。
・Ｈ群：第１〜５日、および第８〜１０日に、マウスに毎日薬物投与した（Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙを腹腔内経路により、２．５ｍｇ／ｋｇの用量）。
・Ｊ群のマウスは薬物処理を受けなかった。
【０２９８】
結果：
Ｈ群：薬物処理を受けたマウス、腫瘍サイズは１０日で１０ｍｍである。
【０２９９】
Ｊ群：薬物処理を受けなかったマウス、腫瘍サイズは１０日で１８ｍｍである。
【０３００】
腫瘍サイズは１０日の期間で薬物を投与されなかったマウスよりも、薬物を投与されたマウスにおいて４５％小さい。
【０３０１】
実験２１：動物実験
[方法]
・無胸腺Ｎｕ／Ｎｕマウス（５〜６週齢）を３群（Ｏ、ＰおよびＱ）に分けた（各群で５〜６匹）。
【０３０２】
・第０日で、すべてのマウスにＥＳ２（ヒト卵巣癌）細胞を腹腔内移植した。
・Ｏ群：薬物処理を受けなかった動物
・Ｐ群：第４〜８日、第１１〜１５日、第１８〜２２日、第２５〜２９日、第３２〜３６日、第３９〜４３日で、動物に毎日Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙの薬物投与を施した（腹腔内経路により２．５ｍｇ／ｋｇの用量で）。
・Ｑ群：第１０〜１５日、第１８〜２２日、第２５〜２９日、第３２〜３６日、第３９〜４３日で、動物に毎日Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙの薬物投与を施した（腹腔内経路により２．５ｍｇ／ｋｇの用量で）。
【０３０３】
結果：
薬物処理をしていない腫瘍を有するマウスの生存期間の中央値は２４日である。薬物処理を腫瘍接種の４日後に始めた腫瘍を有するマウスの生存期間の中央値は５８日（寿命の延長は１４１％）であり、薬物処理を腫瘍接種の１０日後に始めた腫瘍を有するマウスの生存期間の中央値は３１日（寿命の延長は２９％）である。
【０３０４】
実験２２：Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙによる細胞接着の阻害
方法および結果：ＥＳ２またはＨｅｙ８Ａ細胞を、５ｕｇ／ｍｌのＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙを含む培地を入れたＴ２５フラスコ中に平板培養した。培養物を５時間インキュベートした。接着した細胞をトリプシン化によりフラスコから除去し、量を計測した。薬物を含まない対対照と比較して、８６±４％のＥＳ２細胞および６７±８のＨｅｙ８Ａ細胞がこの条件下でフラスコに結合していることが判明した。５ｕｇ／ｍｌのＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙで、トリパンブルー排除アッセイおよびＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙを含まない培地中に平板培養した場合にこれらがフラスコに再結合する能力により確認されるように、９０％を超える未結合細胞が生存している。しかし、１０ｕｇ／ｍｌのＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙでは、４０％未満の細胞がフラスコに結合し、これらの多くは死んだ細胞である。この実験はＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙが接着プロセスを阻害することを示す。
【０３０５】
実験２３：Ｘａｎｉｆｏｌｉａ−ＹによるＥＳ２細胞におけるアンジオポイエチン−２の合成の増加
方法：ＥＳ２（ヒト卵巣癌細胞）をＲＰＭＩ１６４０培地中で成長させた。４，５００，０００個の細胞をＴ７５フラスコ中に播種し、２４時間成長させた後、薬物処理した。
【０３０６】
薬物処理：細胞培養物を５、１０および１５ｕｇ／ｍｌ（最終濃度）のＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙ３［Ｙ３〜５、Ｙ３〜１０、Ｙ３〜１５］またはＤＭＳＯ対照［Ｄ−１０］で処理した。２４時間後、細胞を１ｍｌのＳＤＳ試料緩衝液（細胞抽出物）中に懸濁させた。試料（８０ｕｌ／レーン）を１０％ＳＤＳゲルに塗布し、電気泳動を１００ボルトで２時間行った。タンパク質を電気泳動によりニトロセルロース膜に移した。ニトロセルロースブロットを５％のＰＢＳ中脱脂粉乳でブロックした。ブロットを次いで第１抗体（ヤギ抗Ａｎｇ２、ＳＩＧＭＡ Ａ０８５１）および第２抗体（ロバ抗ヤギＡＰ複合体、Ｐｒｏｍｅｇａ Ｖ１１５Ａ）とともにインキュベートした。イムノバンドをＢＣＩＰ／ＮＢＴ発色システム（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｓ３７７１）を用いて展開させた。
【０３０７】
結果：このウェスタンブロットで示されるように、アンジオポイエチン−２イムノバンドが１５ｕｇ／ｍｌのＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙで処理された細胞から得られる抽出物において観察された。対照および低濃度のｘａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙにおいてはアンジオポイエチン−２のイムノバンドは観察されないか、または最小のイムノバンドしか観察されなかった。この結果は、ＥＳ２細胞におけるＸａｎｉｆｏｌｉａ−Ｙの処理はアンジオポイエチン−２の細胞含量（または合成）を増加させることを示す。これらの結果はマイクロアレイ研究の結果を裏付ける。
補正クレーム

【特許請求の範囲】
【請求項１】
接着タンパク質またはアンジオポイエチンを調節するための組成物であって、式：
【化１】

（式中、
Ｒ１は、水素、ヒドロキシル、Ｏ−アセチル、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−アルキル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリールおよびＯ−糖部分から選択され、前記糖部分はベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、およびこれらの誘導体から選択される２個の基で置換されており、
Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−アルキル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリール、およびＯ−糖部分から選択され、前記糖部分はベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、およびこれらの誘導体から選択される２個の基で置換されており、
Ｒ４は、ＣＨ_２Ｒ６およびＣＯＲ６から選択され、ここでＲ６は、ヒドロキシル、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−アルキル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリール、およびこれらの誘導体から選択される基を含み、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ６の少なくとも１つは、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリール、およびこれらの誘導体から選択され、
Ｒ３は、ＨまたはＯＨであり、Ｒ８は、ＨまたはＯＨであり、
Ｒ５は水素または糖部分であり、ここで、前記糖部分は、グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、アルズロン酸、グルクロン酸、ガラクツロン酸、およびこれらの誘導体またはこれらの組み合わせからなる群から選択され、前記化合物のＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５は独立して、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯ−アルキル、ＣＯＯ−アリール、ＣＯＯ−ヘテロサイクリック、ＣＯＯ−ヘテロアリール、ＣＨ_２Ｏアリール、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロサイクリック、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロアリール、アルキル、ヒドロキシル、アセチル基、好ましくはＣＨ_３からなる群から選択される基に結合している、
から選択される、単離、精製もしくは合成化合物、またはその塩、またはそのエステルを含む組成物。
【請求項２】
Ｒ１およびＲ２の少なくとも１つが、Ｏ−アセチル、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−ジベンゾイル、およびＯ−ベンゾイルから選択されるか、またはＲ１およびＲ２のうちの少なくとも１つが、アセチル、アンゲロイル、チグロイル、セネシオイル、ジベンゾイル、ベンゾイルから選択される２つの基で置換された糖部分であり、Ｒ５が水素または糖部分であり、ここで前記糖部分がグルコース、ガラクトース、アラビノースおよびこれらの誘導体からなる群から選択され、前記誘導体が、酸、エステルおよび塩である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記接着タンパク質が、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、ポリグリカン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４およびＣＡＭを含み、前記調節が、減少させること、阻害することおよび刺激することを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
接着タンパク質の調節が、前記癌細胞の転移または成長を阻害するために前記フィブロネクチンを減少させることを含み、前記癌が乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫および腎臓癌から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記アンジオポイエチンが、アンジオポイエチン１、アンジオポイエチン２、アンジオポイエチン３、アンジオポイエチン４、アンジオポイエチン５、アンジオポイエチン６およびアンジオポイエチン７を含み、前記アンジオポイエチンがアンジオポイエチン様１、アンジオポイエチン様２、アンジオポイエチン様３、アンジオポイエチン様４、アンジオポイエチン様５、アンジオポイエチン様６およびアンジオポイエチン様７を含み、前記調節が、正および負の制御をすることを含み、アンジオポイエチンの調節が、血管形成を阻害するために前記アンジオポイエチン２を刺激することを含み、アンジオポイエチンの調節が、血管形成を阻害するために前記アンジオポイエチン１を阻害することを含み、アンジオポイエチンの調節が、前記アンジオポイエチン様１を阻害することを含み、アンジオポイエチンの調節が、前記アンジオポイエチン様４を阻害することを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記化合物が次のもの：
ａ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ）：
【化２】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、精製または合成化合物、
ｂ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ１）：
【化３】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｃ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ２）：
【化４】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｄ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ８）：
【化５】

または化学名：３−Ｏ−［β−グルコピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｅ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ９）：
【化６】

または化学名：３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、および
ｆ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ１０）：
【化７】

または化学名：３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｇ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ０）：
【化８】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−（２−メチルプロパノイル）−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｈ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｘ）：
【化９】

または化学名：３−Ｏ−｛［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−［α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）］−β−Ｄ−グルクロノピラノシドブチルエステル｝−２１−Ｏ−アセチル−２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｉ）構造（Ｙ７）：
【化１０】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル−（１→３）−β−Ｄ−−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル−２８−Ｏ−２−メチルブタノイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｊ）構造（ＡＣＨ−Ｙ）：
【化１１】

を有する、単離、精製または合成化合物、
ｋ）構造：
【化１２】

または化学名：３−Ｏ−［β−グルコピラノシル（１→２）］−β−アラビノフラノシル（１→４）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｌ）構造：
【化１３】

を有する、単離、精製または合成化合物、
ｍ）構造：
【化１４】

を有する、単離、精製または合成化合物、
から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
細胞における接着タンパク質またはアンジオポイエチンを調節するための医薬を製造するための化合物の使用であって、式：
【化１５】

（式中、
Ｒ１は、水素、ヒドロキシル、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−アルキル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリールおよびＯ−糖部分から選択され、前記糖部分はベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、およびこれらの誘導体から選択される２個の基で置換されており、
Ｒ２は、水素、ヒドロキシル、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−アルキル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリール、およびＯ−糖部分から選択され、前記糖部分はベンゾイル、アルカノイル、アルケノイル、ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、アリール、アシル、ヘテロサイクリック、ヘテロアリール、およびこれらの誘導体から選択される２個の基で置換されており、
Ｒ４は、ＣＨ_２Ｒ６およびＣＯＲ６から選択され、ここでＲ６はヒドロキシル、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−アルキル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリール、およびこれらの誘導体から選択される基を含み、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ６の少なくとも１つは、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−ジベンゾイル、Ｏ−ベンゾイル、Ｏ−アルカノイル、Ｏ−アルケノイル、Ｏ−ベンゾイルアルキル置換アルカノイル、Ｏ−アリール、Ｏ−アシル、Ｏ−ヘテロサイクリック、Ｏ−ヘテロアリール、およびこれらの誘導体から選択され、
Ｒ３は、ＨまたはＯＨであり、Ｒ８は、ＨまたはＯＨであり、
Ｒ５は、水素または糖部分であり、ここで、前記糖部分は、グルコース、ガラクトース、ラムノース、アラビノース、キシロース、フコース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、リキソース、マンノース、プシコース、リボース、ソルボース、タガトース、タロース、フルクトース、アルズロン酸、グルクロン酸、ガラクツロン酸、およびこれらの誘導体またはこれらの組み合わせからなる群から選択され、前記化合物のＲ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５は独立して、ＣＨ_３、ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯ−アルキル、ＣＯＯ−アリール、ＣＯＯ−ヘテロサイクリック、ＣＯＯ−ヘテロアリール、ＣＨ_２Ｏアリール、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロサイクリック、ＣＨ_２Ｏ−ヘテロアリール、アルキル、ヒドロキシル、アセチル基、好ましくはＣＨ_３からなる群から選択される基に結合している、
から選択される、前記細胞を有効量の、単離、精製または合成化合物、またはその塩、またはそのエステルと接触させることを含む、使用。
【請求項８】
Ｒ１およびＲ２の少なくとも１つが、Ｏ−アセチル、Ｏ−アンゲロイル、Ｏ−チグロイル、Ｏ−セネシオイル、Ｏ−ジベンゾイル、およびＯ−ベンゾイルから選択されるか、またはＲ１およびＲ２のうちの少なくとも１つが、アセチル、アンゲロイル、チグロイル、セネシオイル、ジベンゾイル、ベンゾイルから選択される２つの基で置換された糖部分であり、Ｒ５が水素または糖部分であり、ここで前記糖部分がグルコース、ガラクトース、アラビノースおよびこれらの誘導体からなる群から選択され、前記誘導体が、酸、エステルおよび塩である、請求項７に記載の医薬を製造するための化合物の使用。
【請求項９】
前記接着タンパク質が、フィブロネクチン、インテグリンファミリー、ミオシン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、カドヘリン、ヘパリン、テネイシン、ＣＤ５４およびＣＡＭを含み、前記調節が、減少させること、阻害することおよび刺激することを含む、請求項７に記載の医薬を製造するための化合物の使用。
【請求項１０】
接着タンパク質の調節が、前記癌細胞の転移または成長を阻害するために前記フィブロネクチンを減少させることを含み、前記癌が乳癌、白血球癌、肝臓癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、骨肉腫、脳腫瘍、白血病癌、肺癌、結腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫および腎臓癌から選択される、請求項７に記載の医薬を製造するための化合物の使用。
【請求項１１】
前記アンジオポイエチンが、アンジオポイエチン１、アンジオポイエチン２、アンジオポイエチン３、アンジオポイエチン４、アンジオポイエチン５、アンジオポイエチン６およびアンジオポイエチン７を含み、前記アンジオポイエチンが、アンジオポイエチン様１、アンジオポイエチン様２、アンジオポイエチン様３、アンジオポイエチン様４、アンジオポイエチン様５、アンジオポイエチン様６およびアンジオポイエチン様７を含み、前記調節が、正および負の制御をすることを含み、アンジオポイエチンの調節が、血管形成を阻害するために前記アンジオポイエチン２を刺激することを含み、アンジオポイエチンの調節が、血管形成を阻害するために前記アンジオポイエチン１を阻害することを含み、アンジオポイエチンの調節が、前記アンジオポイエチン様１を阻害することを含み、アンジオポイエチンの調節が、前記アンジオポイエチン様４を阻害することを含む、請求項７に記載の医薬を製造するための化合物の使用。
【請求項１２】
前記化合物が次のもの：
ａ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ）：
【化１６】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、精製または合成化合物、
ｂ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ１）：
【化１７】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−Ｌ−ラムノピラノシル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｃ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ２）：
【化１８】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘプタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｄ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ８）：
【化１９】

または化学名：３−Ｏ−［β−グルコピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｅ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ９）：
【化２０】

または化学名：３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−（３，４−ジアンゲロイル）−α−ラムノピラノシル−２８−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、および
ｆ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ１０）：
【化２１】

または化学名：３−Ｏ−［β−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−アラビノフラノシル（１→３）−β−グルクロノピラノシル−２１，２２−Ｏ−ジアンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｇ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｙ０）：
【化２２】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル、２２−Ｏ−（２−メチルプロパノイル）−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｈ）構造Ｘａｎｉｆｏｌｉａ（Ｘ）：
【化２３】

または化学名：３−Ｏ−｛［β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）］−［α−Ｌ−アラビノフラノシル（１→３）］−β−Ｄ−グルクロノピラノシドブチルエステル｝−２１−Ｏ−アセチル−２２−Ｏ−アンゲロイル−３β，１６α，２１β，２２α，２８−ペンタヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｉ）構造（Ｙ７）：
【化２４】

または化学名：３−Ｏ−［β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→２）］−α−Ｌ−アラビノフラノシル−（１→３）−β−Ｄ−−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル−２８−Ｏ−２−メチルブタノイル−３β，１５α，１６α，２１β，２２α，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｊ）構造（ＡＣＨ−Ｙ）：
【化２５】

を有する、単離、精製または合成化合物、
ｋ）構造：
【化２６】

または化学名：３−Ｏ−［β−グルコピラノシル（１→２）］−β−アラビノフラノシル（１→４）−β−グルクロノピラノシル−２１−Ｏ−アンゲロイル−２２−Ｏ−アセチル−３β，１６α，２１β，２２α，２４β，２８−ヘキサヒドロキシオレアン−１２−エンを有する、単離、精製または合成化合物、
ｌ）構造：
【化２７】

を有する、単離、精製または合成化合物、
ｍ）構造：
【化２８】

を有する、単離、精製または合成化合物、
から選択される、請求項７に記載の医薬を製造するための化合物の使用。
【請求項１３】
請求項１に記載の組成物を投与するプロセスであって、投与が静脈内注射、静脈内点滴、腹腔内注射または経口投与による、投与が、２５０ｍｌの１０％グルコース溶液または２５０ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液中に溶解させた０．０５〜０．２ｍｇ／ｋｇの化合物の静脈内点滴による、または１０〜２０ｍｌの１０％グルコース溶液または０．９％のＮａＣｌ溶液中に溶解させた０．０５〜０．２ｍｇ／ｋｇ／日の化合物の静脈内注射による、または２５０ｍｌの１０％グルコース溶液または２５０ｍｌの０．９％ＮａＣｌ溶液中に溶解させた０．１〜０．２ｍｇ／ｋｇ／日の化合物の静脈内点滴による、または１０〜２０ｍｌの１０％グルコース溶液または０．９％ＮａＣｌ溶液中に溶解させた０．１〜０．２ｍｇ／ｋｇ／日の化合物の静脈内注射による、または１０％グルコース溶液または０．９％ＮａＣｌ溶液中に溶解させた２．５ｍｇ／ｋｇ／日の化合物の腹腔内注射（Ｉ．Ｐ．）による、または哺乳動物の用量が１〜１０ｍｇ／Ｋｇ、１０〜３０ｍｇ／Ｋｇ、３０〜６０ｍｇ／Ｋｇ、または６０〜９０ｍｇ／Ｋｇ化合物である経口投与による、または哺乳動物の用量が０．０１〜０．１ｍｇ／Ｋｇ、０．１〜０．２ｍｇ／Ｋｇ、０．２〜０．４ｍｇ／Ｋｇ、または０．４〜０．６ｍｇ／Ｋｇ化合物である静脈内注射または静脈内点滴による、または哺乳動物の用量が１〜３ｍｇ／Ｋｇ、３〜５ｍｇ／Ｋｇ、４〜６ｍｇ／Ｋｇ、または６〜１０ｍｇ／Ｋｇ化合物である腹腔内注射（Ｉ．Ｐ．）による、プロセス。
【請求項１４】
細胞の遺伝子発現を調節するための医薬を製造するための化合物の使用であって、前記細胞を、請求項１から６から選択される、有効量の、単離、精製または合成化合物、またはその塩、またはそのエステルと接触させることを含み、前記遺伝子が、ＡＢＬ２、ＡＤＡＭＴＳ１、ＡＫＲ１Ｃ３、ＡＭＩＧＯ２、ＡＮＧＰＴ２、ＡＮＫＲＤ１１、ＡＰ２Ｂ１、ＡＰＥＨ、ＡＰＬＰ２、ＡＲＬ１０Ｃ、ＡＲＭＣ４、ＡＲＭＣＸ１、ＡＲＭＣＸ６、ＡＲＮＴＬ２、ＡＲＮＴＬ２、ＡＴＦ３、ＡＴＰ６Ｖ０Ｅ、ＡＴＰ６Ｖ１ Ｂ２、ＡＴＰ６Ｖ１Ｃ１、ＡＴＰ６Ｖ１Ｃ１、ＢＣＬ２Ａ１、ＢＣＬ６、ＢＲＩ３、ＢＴＤ、Ｃ１４ｏｒｆ１０９、Ｃ１４ｏｒｆ７８、Ｃ１７ｏｒｆ３２、Ｃ６ｏｒｆ６５，Ｃ９ｏｒｆ１０、Ｃ９ｏｒｆ１０３、ＣＡＤ、ＣＡＶ１、ＣＡＶ２、ＣＢＬＬ１、ＣＣＬ２０、ＣＤ３３Ｌ３、ＣＥＢＰＢ、ＣＥＰ４、ＣＦＨ／／／ＣＦＨＬ１、ＣＨＲＤＬ１、ＣＩＴＥＤ２、ＣＩＴＥＤ２、ＣＬＤＮ１４、ＣＬＮ８、ＣＬＴＡ、ＣＮＡＰ１、ＣＯＧ６、ＣＯＬ１８Ａ１、ＣＯＬ４Ａ２、ＣＯＬ５Ａ１、ＣＯＬ５Ａ２、ＣＯＬ６Ａ３、ＣＯＰＧ、ＣＰＭ、ＣＰＮＥ３、ＣＰＳＦ１、ＣＳＲＰ２ＢＰ、ＣＳＴＢ、ＣＴＮＳ、ＣＸＣＬ２、ＤＤＢ１、ＤＤＩＴ３、ＤＤＸ２０、ＤＫＦＺＰ５６４Ｉ１１７１、ＤＫＦＺＰ５８６Ｊ０６１９、ＤＵＳＰ１０、ＤＵＳＰ１０、ＤＹＲＫ３、ＥＥＦ２Ｋ、ＥＦＥＭＰ１、ＥＭＰ１、ＥＶＣ、ＥＶＩ２Ａ、ＥＸＴ２、ＦＡＭ６２Ａ、ＦＥＲ１Ｌ３、ＦＬＪ１４４６６、ＦＬＮＡ、ＦＮ１、ＦＮ１、ＧＡＮＡＢ、ＧＤＦ１５、ＧＥＭ、ＧＮＰＤＡ１、ＧＰＡＡ１、ＧＰＣ６、ＧＰＮＭＢ、ＧＰＮＭＢ、ＧＵＳＢ、Ｈ２ＡＦＶ、Ｈ２ＡＦＶ、ＨＤＡＣ９、ＨＤＬＢＰ、ＨＥＣＷ２、ＨＭＧＡ２、ＨＭＯＸ１、ＨＳＤＬ２、ＨＳＰＢＡＰ１、ＨＳＰＣ１９６、ＨＹＯＵ１、ＩＤＳ、ＩＧＦＢＰ３、ＩＫＢＫＡＰ、ＩＮＳＩＧ１、ＩＰＯ４、ＩＲＳ２、ＪＡＧ１、ＫＤＥＬＲ３、ＫＩＡＡ０２５１、ＫＩＡＡ０５８６、ＫＩＡＡ１２１１、ＫＩＡＡ１４６２、ＫＩＡＡ１７０６、ＫＩＡＡ１７５４、ＫＲＴ１８、ＫＲＴ７、ＫＲＴＡＰ４−７、ＬＡＭＰ２、ＬＥＰＲ、ＬＥＰＲＥＬ１、ＬＨＦＰＬ２、ＬＩＦ、ＬＯＣ２８６０４４、ＬＯＣ３３９２２９、ＬＯＣ９０６９３、ＬＲＲＣ８Ｅ、ＭＡＦＧ、ＭＡＧＥＤ２、ＭＣＴＰ１、ＭＧＣ１６２９１、ＭＧＣ１９７６４、ＭＧＣ５６１８、ＭＲＰＳ３０、ＭＲＰＳ３１、ＭＴＥＲＦＤ３、ＭＹＨ９、ＮＡＧＡ、ＮＡＶ２、ＮＣＳＴＮ、ＮＥＫ９、ＮＥＵ１、ＮＦＫＢＩＺ、ＮＭＴ２、ＮＰＣ２、ＮＳＵＮ５Ｃ、ＮＴＮＧ１、ＮＵＰ１８８、ＯＡＣＴ２、ＯＳ９、Ｐ４ＨＡ１、Ｐ８、ＰＡＬＭ２−ＡＫＡＰ２、ＰＡＬＭ２−ＡＫＡＰ２、ＰＡＲＶＡ、ＰＢＸ２、ＰＤＥ４ＤＩＰ、ＰＤＩＡ４、ＰＤＩＡ６、ＰＥＧ１０、ＰＨＦ１９、ＰＩＫ４ＣＡ、ＰＬＥＫＨＭ１、ＰＬＯＤ１、ＰＬＯＤ２、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａ、ＰＰＰ１Ｒ１５Ａ、ＰＲＫＤＣ、ＰＲＳＳ２３、ＰＲＳＳ２３、ＰＳＥＮ２、ＰＳＭＤ１、ＰＴＰＲＦ、ＰＴＰＲＪ、ＲＡＢ３２、ＲＡＢ９Ａ、ＲＧ９ＭＴＤ１、ＲＧＳ４、ＲＨＯＱ１、ＲＮＤ３、ＲＮＦ２５、ＲＮＰＥＰ／／／ＵＢＥ２Ｖ１／／／Ｋｕａ／／／Ｋｕａ−ＵＥＶ、ＲＮＵ１７Ｄ、ＲＯＢＯ４、ＲＲＡＧＣ、ＲＲＳ１、ＳＥＣ３１Ｌ１、ＳＥＲＰＩＮＢ２、ＳＥＲＰＩＮＢ７、ＳＥＳＮ２、ＳＧＥＦ、ＳＧＳＨ、ＳＫＩＶ２Ｌ、ＳＬＣ２５Ａ２１、ＳＬＣ３５Ａ３、ＳＬＣ３Ａ２、ＳＭＡＲＣＡ１、ＳＮＡＰＣ１、ＳＮＦ１ＬＫ、ＳＰＯＣＤ１、ＳＰＴＡＮ１、ＳＱＳＴＭ１、ＳＴ３ＧＡＬ６、ＳＴＣ２、ＳＴＸ３Ａ、ＴＦＰＩ２、ＴＦＰＩ２、ＴＧＦＢＩ、ＴＧＭ２、ＴＨＲＡＰ１、ＴＬＮ１、ＴＭＥＭ６０、ＴＮＦＡＩＰ３、ＴＲＩＢ３、ＴＲＩＯ、ＴＳＣ２、ＵＡＰ１Ｌ１、ＵＢＡＰ２Ｌ、ＵＰＰ１、ＵＲＢ、ＵＳＰ１１、ＵＳＰ５、ＶＤＲ、ＷＤＲ４、ＹＴＨＤＦ２、ＺＣＣＨＣ９、ＺＤＨＨＣ２０、ＺＦＨＸ１Ｂ、ＺＮＦ１８５、ＺＮＦ２７８、ＺＮＦ６９０、ＺＮＦ６９７から選択されるか、または、ＦＮ１、ＩＴＧＡＶ、ＬＡＭＡ４、ＬＡＭＢ２、ＬＡＭＣ１、ＬＡＭＢ１、ＬＡＭＢ１、ＬＡＭＡ４、ＬＡＭＡ５、ＬＡＭＣ１、ＬＡＭＡ２、ＬＡＭＢ１、ＬＡＭＡ３、ＳＣＡＭＰ１、ＴＩＣＡＭ２、ＳＣＡＭＰ１、ＴＩＣＡＭ２、ＳＣＡＭＰ１、ＳＣＡＭＰ１、ＣＡＭＫ２Ｂ、ＤＬ１、ＩＣＡＭ３、ＣＥＥＣＡＭＩ、ＩＣＡＭ５、ＳＣＡＭＰ１、ＣＡＭＫ１Ｇ、ＣＡＭＳＡＰ１、ＭＣＡＭ、ＣＡＭＴＡ１、ＣＫＮ１、ＡＬＣＡＭ、ＤＣＡＭＫＬ２、ＣＥＡＣＡＭ３、ＣＡＭＫ２Ｄ、ＣＡＭＫ２Ｂ、ＳＣＡＭＰ５、ＣＡＭＫ４、ＮＣＡＭ１、ＣＡＭＫ２Ｇ、ＭＹＨ９、ＭＹＨ１０、ＭＹＯ１Ｄ、ＭＹＯ５Ａ、ＭＹＬＫ、ＭＹＯ６、ＭＹＯ５Ａ、ＭＹＯ１Ｃ、ＭＹＬＫ、ＭＹＯ６、ＭＹＬＣ２ＰＬ、ＭＹＯ１０、ＭＹＯ６、ＴＰＭ３、ＭＹＯ１Ｃ、ＢＥＣＮ１、ＭＹＯ１Ｅ、ＴＰＭ３、Ｍ−ＲＩＰ、ＭＹＯ１Ｂ、ＭＹＯ１０、ＭＹＯ５Ａ、Ｍ−ＲＩＰ、ＭＹＯ１０、ＭＹＬ６、ＭＹＯＨＤ１、ＢＥＣＮ１、ＴＰＭ４、ＭＹＬＫ、ＭＹＨ１０、ＭＹＯＨＤ１、ＬＯＣ２２１８７５、ＬＯＣ４０２６４３、ＭＹＯ１５Ｂ、ＬＯＣ１２９２８５、ＭＹＨ１１、ＭＹＯ１Ｂ、ＭＹＯ１Ｃ、ＭＹＯ９Ｂ、ＣＤＨ１３、ＣＴＮＮＡＬ１、ＣＤＨ１３、ＣＤＨ１２、ＣＴＮＮＢ１、ＣＤＨ５、ＣＴＮＮＤ１、ＣＤＨ２、ＣＴＮＮＡ１、ＣＤＨ２、ＰＣＤＨＢ１６、ＣＴＮＮＡ１、ＣＥＬＳＲ２、ＰＣＤＨＢ６、ＰＣＤＨＢ７、ＣＴＮＮＤ２、ＰＣＤＨＧＣ３、ＰＣＤＨＧＢ４、ＰＣＤＨＧＡ８、ＰＣＤＨＧＡ１２、ＰＣＤＨＧＣ５、ＰＣＤＨＧＣ４、ＰＣＤＨＧＢ７、ＰＣＤＨＧＢ６、ＰＣＤＨＧＢ５、ＰＣＤＨＧＢ３、ＰＣＤＨＧＢ２、ＰＣＤＨＧＢ１、ＰＣＤＨＧＡ１１、ＰＣＤＨＧＡ１０、ＰＣＤＨＧＡ９、ＰＣＤＨＧＡ７、ＰＣＤＨＧＡ６、ＰＣＤＨＧＡ５、ＰＣＤＨＧＡ４、ＰＣＤＨＧＡ３、ＰＣＤＨＧＡ２、ＰＣＤＨＧＡ１、ＣＴＮＮＤ１、ＣＤＨ２３、ＰＣＤＨＢ１２、ＰＣＤＨＢ１０、ＰＣＤＨ１８、ＣＤＨ２０、ＰＣＤＨ９、ＰＣＤＨＧＡ１２、ＰＣＤＨＧＡ１１、ＰＣＤＨＧＡ１０、ＰＣＤＨＧＡ６、ＰＣＤＨＧＡ５、ＰＣＤＨＧＡ３、ＰＣＤＨ７、ＣＤＨ１８、ＣＤＨ６、ＣＣＢＥ１、ＣＯＬ１０Ａ１、ＣＯＬ１２Ａ１、ＣＯＬ１３Ａ１、ＣＯＬ１８Ａ１、ＣＯＬ１Ａ１、ＣＯＬ２１Ａ１、ＣＯＬ４Ａ１、ＣＯＬ４Ａ２、ＣＯＬ４Ａ５、ＣＯＬ４Ａ６、ＣＯＬ５Ａ１、ＣＯＬ５Ａ２、ＣＯＬ６Ａ１、ＣＯＬ６Ａ２、ＣＯＬ６Ａ３、ＣＯＬ９Ａ１、ＭＭＰ９、Ｐ４ＨＡ１、Ｐ４ＨＡ２、Ｐ４ＨＢ、ＰＣＯＬＣＥ、ＰＣＯＬＣＥ２、ＰＣＯＴＨ、ＰＬＯＤ１、ＰＬＯＤ２、ＰＬＯＤ３、ＣＩＢ１、ＩＬＫ、ＩＴＧＡ２、ＩＴＧＡ３、ＩＴＧＡ４、ＩＴＧＡ６、ＩＴＧＡＶ、ＩＴＧＢ１、ＩＴＧＢ１ＢＰ１、ＩＴＧＢ２、ＩＴＧＢ５、ＩＴＧＢＬ１、ＴＮＣ、ＥＭＩＬＩＮ１、ＩＣＡＭ１、ＨＳＰＧ２、ＨＰＳＥ、ＨＳ２ＳＴ１、ＳＤＣ２から選択される、使用。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【公表番号】特表２０１０−５１９２１９（Ｐ２０１０−５１９２１９Ａ）
【公表日】平成２２年６月３日（２０１０．６．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５５００９６（Ｐ２００９−５５００９６）
【出願日】平成２０年２月１５日（２００８．２．１５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／００２０８６
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１３３７６６
【国際公開日】平成２０年１１月６日（２００８．１１．６）
【出願人】（５０６０９６８８８）パシフィック　アロー　リミテッド (4)
【Ｆターム（参考）】