本発明は、カーゴ化合物を癌細胞に送達するための方法および材料を開示する。カーゴ化合物の送達は、キュプレドキシンに由来するタンパク質伝達ドメインを使用することによって達成される。カーゴ化合物は、核酸および特にDNA, RNA またはアンチセンスであってもよい。更に本発明は、癌を治療する及び癌を診断するための方法を開示する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
キュプレドキシンのバリアント、誘導体、または構造上の均等物である単離されたペプチドであって、哺乳類組織において前悪性傷害の発生を阻害できる単離されたペプチド。
【請求項２】
請求項1に記載の単離されたペプチドであって、前記キュプレドキシンが、アズリン, シュードアズリン, プラストシアニン, ラスティシアニン, Laz, アウラシアニン, ステラシアニンおよびキュウリ塩基性タンパク質（cucumber basic protein）からなる群から選択される単離されたペプチド。
【請求項３】
請求項2に記載の単離されたペプチドであって、前記キュプレドキシンがアズリンである単離されたペプチド。
【請求項４】
前記キュプレドキシンは緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）, Alcaligenes faecalis, Achromobacter xylosoxidan, Bordetella bronchiseptica, Methylomonas sp., Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhea, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas chlororaphis, Xylella fastidiosaおよびVibrio parahaemolyticusからなる群から選択される生物体に由来する、請求項1に記載の単離されたペプチド。
【請求項５】
緑膿菌に由来する、請求項4に記載の単離されたペプチド。
【請求項６】
配列番号1、3〜19からなる群から選択されるペプチドの一部である、請求項1に記載の単離されたペプチド。
【請求項７】
配列番号1、3〜19からなる群から選択される配列と少なくとも80%のアミノ酸配列同一性を有する、請求項1に記載の単離されたペプチド。
【請求項８】
前記キュプレドキシンの短縮型である、請求項1に記載の単離されたペプチド。
【請求項９】
前記ペプチドは約 10 残基以上で約 100 残基以下である、請求項8に記載の単離されたペプチド。
【請求項１０】
緑膿菌のアズリン残基50〜77, 緑膿菌のアズリン残基50〜67, 緑膿菌のアズリン残基36〜88, および配列番号20〜24からなる群から選択される配列を含む、請求項8に記載の単離されたペプチド。
【請求項１１】
緑膿菌のアズリン残基50〜77, 緑膿菌のアズリン残基50〜67, 緑膿菌のアズリン残基36〜88, および配列番号20〜24からなる群から選択される配列からなる、請求項10に記載の単離されたペプチド。
【請求項１２】
残基50〜77, 残基50〜67および残基36〜88からなる群から選択される緑膿菌アズリンの領域と均等（equivalent）なキュプレドキシンの残基を含む、請求項1に記載の単離されたペプチド。
【請求項１３】
請求項1に記載の少なくとも１つのキュプレドキシンまたはペプチドを薬学的に許容される担体中に含んでいる薬学的組成物。
【請求項１４】
少なくとも２つのキュプレドキシンまたはペプチドを含む、請求項13に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
前記薬学的組成物が静脈内投与のために製剤化される、請求項13に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
前記キュプレドキシンは緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）, Alcaligenes faecalis, Achromobacter xylosoxidan, Bordetella bronchiseptica, Methylomonas sp., Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhea, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas chlororaphis, Xylella fastidiosaおよびVibrio parahaemolyticusからなる群から選択される生物体に由来する、請求項13に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
前記キュプレドキシンが緑膿菌に由来する、請求項16に記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
請求項13に記載の薬学的組成物であって、前記キュプレドキシンが配列番号1、3〜19からなる群から選択される薬学的組成物。
【請求項１９】
哺乳類の患者を治療するための方法であって、前記患者に治療上効果的な量の請求項13に記載の薬学的組成物を投与することを備える方法。
【請求項２０】
前記患者がヒトである、請求項19に記載の方法。
【請求項２１】
前記患者が一般的な集団よりも癌を発生するリスクが高い、請求項19に記載の方法。
【請求項２２】
前記癌がメラノーマ, 乳房癌, 膵臓癌, グリア芽細胞腫, 星細胞腫, 肺癌, 結腸直腸癌, 首および頭部癌（neck and head）, 膀胱癌, 前立腺癌, 皮膚癌, および子宮頚癌から選択される、請求項21に記載の方法。
【請求項２３】
前記患者が少なくとも一つの危険性が高い特性（high risk feature）を有する、請求項21に記載の方法。
【請求項２４】
前記患者が前悪性傷害を有する、請求項19に記載の方法。
【請求項２５】
前記患者は癌または前悪性傷害が治癒している、請求項19に記載の方法。
【請求項２６】
請求項19に記載の方法であって、前記薬学的組成物が静脈内注射, 筋肉内注射, 皮下注射, 吸入, 局所的投与, 経皮性のパッチ, 坐剤, 硝子体注射および経口投与からなる群から選択される様式で投与される方法。
【請求項２７】
投与の様式が静脈内注射である、請求項24に記載の方法。
【請求項２８】
請求項21に記載の方法であって、前記薬学的組成物は少なくとも一つの他の化学予防薬と共投与される方法。
【請求項２９】
請求項26に記載の方法であって、前記薬学的組成物は別の化学予防薬とおよそ同時に投与される方法。
【請求項３０】
請求項13に記載の組成物をバイアル中に含んでいるキット。
【請求項３１】
前記キットが静脈内投与のために設計される、請求項30に記載のキット。
【請求項３２】
癌の発生を研究するための方法であって、哺乳類細胞を請求項 1に記載のキュプレドキシンまたはペプチドと接触させること；及び前悪性および悪性の細胞の発生を測定することを含んでいる方法。
【請求項３３】
前記細胞がヒト細胞である、請求項32に記載の方法。
【請求項３４】
前記細胞が乳腺細胞である、請求項32に記載の方法。
【請求項３５】
前記細胞が誘導されて癌を発生する、請求項32に記載の方法。
【請求項３６】
請求項1に記載のペプチドをコード化する発現ベクター。
【請求項３７】
キュプレドキシンのバリアント、誘導体、または構造上の均等物である単離されたペプチドであって；カーゴ化合物とカップルされ、哺乳類の癌細胞に選択的に進入できる単離されたペプチド。
【請求項３８】
前記キュプレドキシンは緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）, Alcaligenes faecalis, Achromobacter xylosoxidan, Bordetella bronchiseptica, Methylomonas sp., Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhea, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas chlororaphis, Xylella fastidiosaおよびVibrio parahaemolyticusからなる群から選択される生物体に由来する、請求項37に記載の単離されたペプチド。
【請求項３９】
請求項37に記載の単離されたペプチドであって、前記キュプレドキシンがアズリンである単離されたペプチド。
【請求項４０】
請求項39に記載の単離されたペプチドであって、前記アズリンが緑膿菌に由来する単離されたペプチド。
【請求項４１】
配列番号 25を含む、請求項37に記載の単離されたペプチド。
【請求項４２】
配列番号 25からなる、請求項37に記載の単離されたペプチド。
【請求項４３】
前記キュプレドキシンの短縮型である、請求項37に記載の単離されたペプチド。
【請求項４４】
前記ペプチドは約 10 残基以上で約 100 残基以下である、請求項37に記載の単離されたペプチド。
【請求項４５】
緑膿菌のアズリン残基50〜77（配列番号2）, 緑膿菌のアズリン残基50〜67（配列番号25）, 緑膿菌のアズリン残基36〜88（配列番号26）, および配列番号20〜24からなる群から選択される配列を含む、請求項37に記載の単離されたペプチド。
【請求項４６】
前記カーゴ化合物がDNAまたはRNAである、請求項37に記載の組成物。
【請求項４７】
前記カーゴ化合物がアンチセンス分子である、請求項46に記載の組成物。
【請求項４８】
前記カーゴ化合物が哺乳類の癌細胞を遅延させる又は殺傷する、請求項37に記載の組成物。
【請求項４９】
前記カーゴ化合物が細胞毒性薬である、請求項48に記載の組成物。
【請求項５０】
前記カーゴ化合物がタンパク質, リポタンパク質, ポリペプチド, ペプチド, ポリサッカライド, 核酸, 色素, 微小粒子, ナノ粒子, 毒素および薬物からなる群から選択される、請求項37に記載の組成物。
【請求項５１】
前記カーゴ化合物がタンパク質およびポリペプチドからなる群から選択され、前記ペプチドが前記カーゴ化合物に連結されて融合タンパク質を形成する、請求項37に記載の組成物。
【請求項５２】
前記カーゴ化合物が毒素である、請求項37に記載の組成物。
【請求項５３】
前記カーゴ化合物が検出可能な物質である、請求項37に記載の組成物。
【請求項５４】
請求項37に記載の組成物および薬学的に許容される担体を含んでいる薬学的組成物。
【請求項５５】
細胞（a cell）または複数細胞（cells）を請求項37に記載の組成物と接触させることを備える方法。
【請求項５６】
請求項55に記載の方法であって、前記細胞または複数細胞は癌に罹患している患者から由来し、さらに前記細胞または複数細胞を前記患者に再導入することを備える方法。
【請求項５７】
前記細胞が癌細胞である、請求項55に記載の方法。
【請求項５８】
請求項57に記載の方法であって、前記細胞が骨肉腫細胞, 肺の癌腫細胞, 結腸の癌腫細胞, リンパ腫細胞, 白血病細胞, 軟部組織の肉腫細胞, 乳房の癌腫細胞, 肝臓の癌腫細胞, 膀胱の癌腫細胞, メラノーマ細胞, 脳腫瘍細胞および前立腺の癌腫細胞からなる群から選択される癌細胞である方法。
【請求項５９】
癌を伴う患者を治療する方法であって、請求項37に記載の組成物が前記患者に治療上効果的な量で投与される方法。
【請求項６０】
請求項59に記載の方法であって、前記複合体が静脈内、局所、皮下、筋肉内、および腫瘍内からなる群から選択される経路で投与される方法。
【請求項６１】
請求項59に記載の方法であって、前記複合体は、別の癌治療と共に共投与される方法。
【請求項６２】
患者の癌を画像処理するための方法であって、請求項53に記載の組成物が前記患者に投与され、前記カーゴ化合物の位置が検出される方法。
【請求項６３】
請求項62に記載の方法であって、前記カーゴ化合物はＸ線造影剤であり、前記カーゴ化合物の位置がＸ線CTで検出される方法。
【請求項６４】
請求項62に記載の方法であって、前記カーゴ化合物は磁気共鳴映像法の造影剤であり、前記カーゴ化合物の位置がMRIで検出される方法。
【請求項６５】
請求項62に記載の方法であって、前記カーゴ化合物は超音波造影剤であり、前記カーゴ化合物の位置が超音波画像処理で検出される方法。
【請求項６６】
癌を診断するための方法であって、細胞を請求項53に記載の組成物と接触し、前記カーゴ分子の位置が検出される方法。
【請求項６７】
請求項37に記載の組成物を含んでいる試薬を具備するキット。
【請求項６８】
請求項67に記載のキットであって、薬学的に許容されるアジュバントまたは賦形剤を含んでいる試薬をさらに具備するキット。
【請求項６９】
請求項67に記載のキットであって、前記試薬を投与するためのビヒクルをさらに具備するキット。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図１Ｃ】

【図１Ｄ】

【図１Ｅ】

【図１Ｆ】

【図１Ｇ】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図８ａ】

【図８ｂ】

【図８ｃ】

【図９】

【公表番号】特表２０１０−５１８１２３（Ｐ２０１０−５１８１２３Ａ）
【公表日】平成２２年５月２７日（２０１０．５．２７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５４９２７５（Ｐ２００９−５４９２７５）
【出願日】平成２０年２月８日（２００８．２．８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０５３４９３
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０９８２１６
【国際公開日】平成２０年８月１４日（２００８．８．１４）
【出願人】（５００１０６８０２）ザ・ボード・オブ・トラスティーズ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・イリノイ (15)
【Ｆターム（参考）】