試料注入装置及び液体クロマトグラフィー装置
【課題】本発明は、キャリーオーバーの発生を抑制すると共に、理論段数を向上させることが可能な試料注入装置及び液体クロマトグラフィー装置を提供することを目的とする。
【解決手段】試料注入装置は、試料を吐出する先端部がテーパー状である試料用ニードル２１Ａと、試料用ニードル２１Ａから吐出された試料が送出される配管１５を有し、配管１５は、試料用ニードル２１Ａを装着することが可能であると共に、試料用ニードル２１Ａから吐出された試料が注入されるすり鉢状の試料注入部１５ａと、試料注入部１５ａから注入された試料が送出される配管部１５ｂを有する。
【解決手段】試料注入装置は、試料を吐出する先端部がテーパー状である試料用ニードル２１Ａと、試料用ニードル２１Ａから吐出された試料が送出される配管１５を有し、配管１５は、試料用ニードル２１Ａを装着することが可能であると共に、試料用ニードル２１Ａから吐出された試料が注入されるすり鉢状の試料注入部１５ａと、試料注入部１５ａから注入された試料が送出される配管部１５ｂを有する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、試料注入装置及び液体クロマトグラフィー装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
液体クロマトグラフィー装置は、概略すると、移動相（溶出溶媒）を貯蔵する貯槽、移動相を脱気する脱気装置、移動相を貯槽から供給するポンプ、試料を移動相と共にカラムに向う配管に注入する試料注入装置、試料中の成分を分離するための充填剤が充填されているカラム、カラムを略一定の温度に保つ恒温槽及び分離された試料中の成分を検出する検出器等を有する。この内、試料注入装置は、例えば、特許文献１〜３に開示されているように、試料を吸引した試料注入用ニードルを試料注入ポートに装着して、試料を移動相と共に配管に注入する。
【０００３】
ところで、近年、液体クロマトグラフィー装置の検出感度が向上しており、これに伴い、キャリーオーバーと呼ばれる現象が問題になっている。キャリーオーバーとは、時系列的に前に測定した試料が液体クロマトグラフィー装置内に残留し、あたかも現在測定している試料中にその物質が存在するかのような検出結果を示す現象であり、分析結果の信頼性を低下させるものである。キャリーオーバーは、試料を移動相と共に配管に注入する際に、試料注入装置内の金属及び／又は樹脂に試料が付着して残留し、次の試料を注入する際に残留した試料が混入することによって生じる。
【０００４】
一方、液体クロマトグラフィー／質量分析法（ＬＣ／ＭＳ）等では、短時間での測定が可能となることから、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）が用いられているが、理論段数の更なる向上が求められている。
【０００５】
図１３に、従来の試料注入装置の一部を示す。なお、図１３（ａ）は、斜視図であり、図１３（ｂ）は、断面図である。図１３に示す試料注入装置は、試料注入ポート６１及びニードルシール６２がホルダー６３で固定された状態で、オシネジ６４を用いて配管６５と接続されているため、ニードル６６から試料を注入する際に試料が付着しやすく、うずまき流が発生しやすい。その結果、キャリーオーバーが発生しやすく、理論段数が低下しやすい。
【特許文献１】特開平１０−１０１０３号公報
【特許文献２】ＷＯ再表２００４／１０２１８２号公報
【特許文献３】特開２００６−２０１１２１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、上記の従来技術が有する問題に鑑み、キャリーオーバーの発生を抑制すると共に、理論段数を向上させることが可能な試料注入装置及び液体クロマトグラフィー装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
請求項１に記載の発明は、試料注入装置において、試料を吐出する先端部がテーパー状である第一のニードルと、該第一のニードルから吐出された試料が送出される配管を有し、該配管は、該第一のニードルを装着することが可能であると共に、該第一のニードルから吐出された試料が注入されるすり鉢状の試料注入部と、該試料注入部から注入された試料が送出される配管部を有することを特徴とする。
【０００８】
請求項２に記載の発明は、請求項１に記載の試料注入装置において、前記第一のニードルの先端部の傾斜角は、前記試料注入部の傾斜角と略同一であることを特徴とする。
【０００９】
請求項３に記載の発明は、請求項１又は２に記載の試料注入装置において、前記第一のニードルの内径は、前記配管部の内径以上であることを特徴とする。
【００１０】
請求項４に記載の発明は、請求項１乃至３のいずれか一項に記載の試料注入装置において、前記第一のニードルを前記試料注入部に圧着させる圧着部材をさらに有し、前記第一のニードルは、該圧着部材により押圧される被押圧部を有することを特徴とする。
【００１１】
請求項５に記載の発明は、請求項１乃至４のいずれか一項に記載の試料注入装置において、前記試料注入部に装着することが可能である第二のニードルと、前記第一のニードルと接続することが可能であり、前記第一のニードルと接続された状態で前記第一のニードルに試料を吸引する試料吸引手段と、前記第一のニードルが該試料吸引手段に接続されていると共に、該第二のニードルが移動相を供給する移動相供給手段に接続されている状態及び前記第一のニードルが該移動相供給手段に接続されている状態を切り換えることが可能な切り換え弁をさらに有することを特徴とする。
【００１２】
請求項６に記載の発明は、液体クロマトグラフィー装置において、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の試料注入装置を有することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、キャリーオーバーの発生を抑制すると共に、理論段数を向上させることが可能な試料注入装置及び液体クロマトグラフィー装置を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
次に、本発明を実施するための最良の形態を図面と共に説明する。
【００１５】
図１に、本発明の液体クロマトグラフィー装置の一例を示す。液体クロマトグラフィー装置の構成について説明する。図１に示す液体クロマトグラフィー装置は、移動相（溶出溶媒）を貯蔵する貯槽１１と、移動相を脱気する脱気装置１２と、移動相を貯槽１１から供給するポンプ１３と、試料を移動相と共にカラム１６に向かう配管１５に注入する試料注入装置１４と、試料中の成分を分離するための充填剤が充填されているカラム１６と、カラム１６を一定の温度に保つ恒温槽１７と、分離された試料中の成分を検出する検出器１８から構成されている。なお、測定を安定させるために、移動相は、常に貯槽１１からポンプ１３により試料注入装置１４を介してカラム１６に供給されていることが望ましい。
【００１６】
図２に、本発明の試料注入装置の一例を示す。図２に示す試料注入装置は、配管１５、試料用ニードル２１Ａ、移動相用ニードル２１Ｂ、シリンジ２２、洗浄液用ポンプ２３、バルブ２４、試料用容器２５、インジェクションバルブ２６、洗浄液用容器２７、洗浄装置２８及びニードル移動手段（不図示）を有する。
【００１７】
試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６及びバルブ２４を介して、シリンジ２２に接続することが可能である。また、インジェクションバルブ２６を介して、ポンプ１３とも接続することが可能である。
【００１８】
試料用ニードル２１Ａから移動相と共に吐出された試料が送出される配管１５は、図３に示すように、試料が注入されるすり鉢状の試料注入部１５ａと、試料注入部１５ａから注入された試料が送出される配管部１５ｂを有し、試料注入部１５ａは、固定部材３１で固定されている。また、配管１５は、カラム１６に直結されていることが好ましい。なお、配管１５の材料としては、ＰＥＥＫ（ポリエーテルエーテルケトン）、ステンレス、チタン等の金属が挙げられる。
【００１９】
試料用ニードル２１Ａは、先端部がテーパー状であるが、その傾斜角は、１０〜４５°であることが好ましく、１０〜３０°がさらに好ましい。このとき、試料用ニードル２１Ａの先端部の傾斜角と試料注入部１５ａの傾斜角を略同一とすることが好ましい。これにより、試料用ニードル２１Ａと試料注入部１５ａの接合面積を大きくすることができ、試料及び移動相の漏れを抑制することができる。
【００２０】
また、試料用ニードル２１Ａの内径は、０．１〜０．８ｍｍであることが好ましく、０．１〜０．３ｍｍがさらに好ましい。このとき、試料用ニードル２１Ａの内径を配管部１５ｂの内径以上とすることが好ましく、配管部１５ｂの内径と略同一とすることがさらに好ましい。これにより、試料注入部１５ａから試料及び移動相が注入される際に、うずまき流の発生を抑制することができる。なお、配管部１５ｂの内径は、０．０５〜０．３ｍｍであることが好ましく、０．０６５〜０．２５ｍｍがさらに好ましい。
【００２１】
さらに、試料用ニードル２１Ａは、図４に示すように、両側、好ましくは、先端部の近傍の両側に、被押圧部４１を有してもよい。このとき、圧着部材４２を用いて、試料用ニードル２１Ａを挟むように被押圧部４１を押圧することにより、試料用ニードル２１Ａから試料注入部１５ａに試料及び移動相を注入する際に、試料用ニードル２１Ａの変形を抑制することができる。
【００２２】
また、移動相用ニードル２１Ｂは、インジェクションバルブ２６を介して、ポンプ１３と接続することが可能である。なお、移動相用ニードル２１Ｂは、特に限定されないが、試料用ニードル２１Ａと同一のものを用いることが好ましい。
【００２３】
次に、図５から図１０を参照して、本発明の試料注入装置について説明する。なお、図５〜図１０に、本発明の試料注入装置の各構成要素の接続状態を示し、それぞれ待機時、試料採取時、試料用ニードルの予備洗浄時、試料用ニードルの超音波洗浄時、試料分析時（その１）及び試料分析時（その２）の状態を示す。
【００２４】
試料用ニードル２１Ａは、バルブ２４及びインジェクションバルブ２６の切り換えにより、シリンジ２２に接続されると、シリンジ２２を押し引きすることによって、試料用ニードル２１Ａに対して、試料の吸入及び吐出を行うことができる。また、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６の切り換えにより、ポンプ１３に接続されると、ポンプ１３より移動相が試料用ニードル２１Ａに供給される。
【００２５】
また、インジェクションバルブ２６の切り換えにより、移動相用ニードル２１Ｂがポンプ１３に接続されると、ポンプ１３より移動相が移動相用ニードル２１Ｂに供給される。
【００２６】
移動相用ニードル２１Ｂとインジェクションバルブ２６を接続する配管には、液だれを防止するために、三方電磁弁２９が設けられている。三方電磁弁２９は、移動相用ニードル２１Ｂが移動中等の試料注入部１５ａに装着されていない状態でインジェクションバルブ２６が図中Ｂで示す接続状態となった時に閉弁し、移動相用ニードル２１Ｂから移動相が流出することを防止することができる。
【００２７】
また、洗浄液用容器２７は、内部に洗浄液（通常、移動相に用いられている溶媒）が貯蔵されており、洗浄液用ポンプ２３に接続されている。このとき、洗浄液は、洗浄液用ポンプ２３により吸入されてバルブ２４に圧送される。
【００２８】
バルブ２４は、洗浄液用ポンプ２３により圧送された洗浄液を、洗浄装置２８又は試料用ニードル２１Ａに選択的に供給することができる。具体的には、バルブ２４は、３個のポートＰ１〜Ｐ３を有しており、この内の２つのポートを選択的に接続することが可能である。なお、バルブ２４は、各ポートＰ１〜Ｐ３のいずれも接続しないことも可能である。
【００２９】
また、シリンジ２２及びインジェクションバルブ２６は、いずれもバルブ２４のポートＰ３に接続されている。すなわち、常時シリンジ２２とインジェクションバルブ２６が接続されている。
【００３０】
洗浄装置２８は、洗浄部２８ａ及び２８ｂ、超音波振動子２８ｃ、廃液ポート２８ｄ、廃液配管２８ｅを有する。洗浄装置２８は、バルブ２４の切り換えにより、洗浄液用ポンプ２３と接続されると、洗浄液用容器２７から洗浄液が供給される。また、一定量以上の余剰の洗浄液は、廃液ポート２８ｄに流入し、廃液ポート２８ｄと接続された廃液配管２８ｅから廃液として外部に排出される。後述するように、洗浄装置２８に試料用ニードル２１Ａを挿入することにより、試料が付着した試料用ニードル２１Ａが洗浄される。これにより、キャリーオーバーの発生を抑制することができる。また、洗浄装置２８には、超音波振動子２８ｃが設けられており、試料用ニードル２１Ａを超音波洗浄することができる。これにより、試料用ニードル２１Ａの洗浄効果を高めることができ、より確実にキャリーオーバーの発生を抑制することができる。
【００３１】
配管１５は、カラム１６に接続されている。すなわち、配管１５は、インジェクションバルブ２６と接続されておらず、インジェクションバルブ２６から分離独立している。後述するように、試料を吸引した試料用ニードル２１Ａが配管１５の試料注入部１５ａに装着され、試料及び移動相を試料注入部１５ａに吐出することにより、試料は、配管部１５ｂを移動相と共に流れ、カラム１６に送出される。
【００３２】
インジェクションバルブ２６は、６つのポートを有しており、５つのポートに、ポンプ１３、試料用ニードル２１Ａ、移動相用ニードル２１Ｂ、バルブ２４及び洗浄装置２８が接続されている。インジェクションバルブ２６は、図中実線Ａで示す接続状態（以下、接続状態Ａという）と、図中破線Ｂで示す接続状態（以下、接続状態Ｂという）を切り換えることができる。
【００３３】
インジェクションバルブ２６が接続状態Ａの場合、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６を介して、ポンプ１３と接続し、バルブ２４は、インジェクションバルブ２６を介して洗浄装置２８の洗浄部２８ａに接続される。この際、移動相用ニードル２１Ｂは、いずれにも接続されない。また、インジェクションバルブ２６が接続状態Ｂの場合、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６を介して、バルブ２４と接続され、移動相用ニードル２１Ｂは、インジェクションバルブ２６を介して、ポンプ１３に接続される。
【００３４】
次に、本発明の試料注入装置を用いた試料注入方法について説明する。
【００３５】
図５に示すように、試料を採取する前の待機状態において、インジェクションバルブ２６は、接続状態Ａとなっており、バルブ２４は、ポートＰ１〜Ｐ３のいずれも接続しない。さらに、ニードル移動手段（不図示）により、試料用ニードル２１Ａは、配管１５の試料注入部１５ａに装着されている。また、移動相用ニードル２１Ｂは、ニードル移動手段（不図示）により、試料注入部１５ａの近傍に待機しており、非接続状態となっている。さらに、三方電磁弁２９は、移動相用ニードル２１Ｂとインジェクションバルブ２６を接続する配管を閉塞している。したがって、待機時において、ポンプ１３から供給される移動相は、試料用ニードル２１Ａ及び試料注入部１５ａを介して、カラム１６に供給される。
【００３６】
図６に示すように、試料用ニードル２１Ａに試料を採取する際に、試料用ニードル２１Ａは、ニードル移動手段（不図示）により、試料用容器２５内に挿入されると共に、移動相用ニードル２１Ｂが試料注入部１５ａに装着される。また、インジェクションバルブ２６は、接続状態Ｂに切り換えられる。さらに、三方電磁弁２９も開弁され、移動相用ニードル２１Ｂは、インジェクションバルブ２６と連通される。したがって、試料採取時において、ポンプ１３から供給される移動相は、移動相用ニードル２１Ｂ及び試料注入部１５ａを介して、カラム１６に供給される。このため、移動相は、カラム１６に常に供給され、測定を安定させることができる。また、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６及びバルブ２４を介して、シリンジ２２に接続される。このため、シリンジ２２を用いて吸引することにより、試料用容器２５内の試料が試料用ニードル２１Ａに吸引される。この際、試料の吸引量は、吸引した試料がインジェクションバルブ２６に入り込まないように設定されている。これにより、試料がインジェクションバルブ２６内に付着することを防止でき、キャリーオーバーの発生を抑制することができる。なお、試料の吸引量を多くするために、試料用ニードル２１Ａにサンプルループを設けてもよい。
【００３７】
試料採取が終了すると、試料用ニードル２１Ａの外壁に試料が付着するため、試料が付着した試料用ニードル２１Ａを洗浄する。具体的には、試料用ニードル２１Ａの予備洗浄及び超音波洗浄を行う。
【００３８】
図７に示すように、試料用ニードル２１Ａを予備洗浄する際には、インジェクションバルブ２６を接続状態Ｂに維持しつつ、ニードル移動手段（不図示）により、試料用ニードル２１Ａを洗浄装置２８の洗浄部２８ｂに挿入する。また、ポートＰ１及びＰ２が接続されるようにバルブ２４を切り換え、洗浄液用ポンプ２３を介して、洗浄液用容器２７内の洗浄液を洗浄部２８ｂに供給する。したがって、洗浄部２８ｂ内に洗浄液が噴出し、試料用ニードル２１Ａの外壁が予備洗浄される。なお、洗浄部２８ｂから溢れた洗浄液は、廃液ポート２８ｄ及び廃液配管２８ｅを介して排出される。
【００３９】
図８に示すように、試料用ニードル２１Ａを超音波洗浄する際には、インジェクションバルブ２６を接続状態Ｂに維持しつつ、ニードル移動手段（不図示）により、試料用ニードル２１Ａを洗浄装置２８の洗浄部２８ａに挿入する。また、バルブ２４は、再びポートＰ１〜Ｐ３のいずれも接続されない状態に切り換えられる。この状態で、超音波振動子２８ｃを駆動して超音波を発生させることにより、洗浄部２８ａに装填されている洗浄液が超音波振動し、試料用ニードル２１Ａの外壁が超音波洗浄される。
【００４０】
なお、予備洗浄時及び超音波洗浄時においても、移動相は、ポンプ１３からインジェクションバルブ２６、移動相用ニードル２１Ｂ及び試料注入部１５ａを介して、カラム１６に供給される。
【００４１】
超音波洗浄が終了すると、試料用ニードル２１Ａに採取した試料をカラム１６に供給して試料を分析する。
【００４２】
図９に示すように、試料を分析する際に、インジェクションバルブ２６は、接続状態Ｂから接続状態Ａに再び切り換わり、ニードル移動手段（不図示）により、試料用ニードル２１Ａは、試料注入部１５ａに装着される。さらに、移動相用ニードル２１Ｂも、ニードル移動手段（不図示）により、試料注入部１５ａの近傍の待機位置に移動される。移動相用ニードル２１Ｂが移動を開始すると、三方電磁弁２９は、移動相用ニードル２１Ｂとインジェクションバルブ２６を接続する配管を閉塞する。また、試料を分析する際には、試料を吸引した試料用ニードル２１Ａが試料注入部１５ａに装着されると共に、インジェクションバルブ２６により、試料用ニードル２１Ａがポンプ１３に接続される。これにより、試料用ニードル２１Ａ内の試料は、インジェクションバルブ２６を通過することなく、カラム１６に供給される。また、カラム１６に供給された試料は、カラム１６で所定の分離が行われた後、検出器１８に送られて分析される。したがって、インジェクションバルブ２６内に試料が残存することを防止することができ、キャリーオーバーの発生を抑制することができる。また、試料注入装置内のキャリーオーバーの発生が抑制されることにより、理論段数を向上させることができる。
【００４３】
なお、試料分析時に、洗浄装置２８の洗浄部２８ａの洗浄液を交換してもよい。この場合、図１０に示すように、ポートＰ２及びＰ３が接続されるようにバルブ２４を切り換え、洗浄液用容器２７内の洗浄液を洗浄液用ポンプ２３、バルブ２４及びインジェクションバルブ２６を介して、洗浄部２８ａに供給する。これにより、試料用ニードル２１Ａを洗浄して汚染された洗浄液は、廃液ポート２８ｄ及び廃液配管２８ｅを介して排出され、洗浄部２８ａには、汚染されていない洗浄液が供給される。したがって、次回の超音波洗浄時において、試料用ニードル２１Ａの外壁をより確実に洗浄することができる。
【００４４】
なお、本発明の試料注入装置としては、上記の構成に限定されず、図３又は図４に示す配管１５及び試料用ニードル２１Ａを従来の試料注入装置に適用したものも挙げられる。
【００４５】
図１１に、このような試料注入装置の一例を示す。なお、図１１において、図１〜１０と同一の構成については、同一の符号を付して説明を省略する。図１１に示す試料注入装置は、配管１５、試料用ニードル２１Ａ、シリンジ２２、バルブ２４、試料用容器２５、インジェクションバルブ２６、洗浄装置５１及びニードル移動手段（不図示）を有する。
【００４６】
インジェクションバルブ２６は、６つのポートを有しており、各ポートに、ポンプ１３、配管１５、カラム１６、試料用ニードル２１Ａ、バルブ２４及び洗浄装置５１が接続されている。インジェクションバルブ２６は、図中実線Ａで示す接続状態（以下、接続状態Ａという）と、図中破線Ｂで示す接続状態（以下、接続状態Ｂという）を切り換えることができる。
【００４７】
試料を採取する前の待機状態において、インジェクションバルブ２６は、接続状態Ａとなっており、試料用ニードル２１Ａは、配管１５の試料注入部１５ａに装着されている。このとき、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６を介して、ポンプ１３に接続されており、配管１５は、インジェクションバルブ２６を介して、カラム１６と接続されている。したがって、ポンプ１３から供給される移動相は、試料用ニードル２１Ａ、配管１５及びインジェクションバルブ２６を介して、カラム１６に供給される。
【００４８】
一方、試料を採取する際には、インジェクションバルブ２６を接続状態Ｂに切り換えると共に、試料用ニードル２１Ａを試料用容器２５に挿入する。このとき、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６及びバルブ２４を介して、シリンジ２２に接続されている。このため、シリンジ２２を操作することにより、試料用容器２５内の試料が試料用ニードル２１Ａ内に吸引される。また、ポンプ１３は、インジェクションバルブ２６を介して、カラム１６に接続されているため、試料用ニードル２１Ａにより、試料採取時もカラム１６に移動相が供給される。
【００４９】
試料採取が終了すると、試料用ニードル２１Ａの外壁に試料が付着するため、試料が付着した試料用ニードル２１Ａを洗浄する。具体的には、試料用ニードル２１Ａを洗浄装置５１の洗浄部５１ｂ内に挿入した後、洗浄部５１ａ内に挿入して、試料用ニードル２１Ａの外壁を洗浄する。洗浄装置５１の洗浄部５１ａ及び５１ｂは、バルブ２４を所定のタイミングで洗浄液用ポンプ２３に接続することにより、常に新しい洗浄剤が供給される。なお、余剰となった洗浄液は、廃液ポート５１ｃ及び廃液配管５１ｄから排出される。
【００５０】
洗浄が終了すると、試料用ニードル２１Ａに採取した試料をカラム１６に供給して試料を分析する。具体的には、試料用ニードル２１Ａを試料注入部１５ａに装着すると共に、再びインジェクションバルブ２６を接続状態Ａとする。これにより、ポンプ１３から試料用ニードル２１Ａに供給される移動相により、試料は、試料用ニードル２１Ａから試料注入部１５ａに送出された後、移動相の流れに乗って配管部１５ｂ及びインジェクションバルブ２６を介して、カラム１６に供給される。また、カラム１６に供給された試料は、カラム１６で所定の分離が行われた後、検出器１８に送られて分析される。
【実施例】
【００５１】
図１に示す液体クロマトグラフィー装置を用いて、標準試料（レセルピン１０ｎｇ／ｍｌ）を２μｌ注入して、理論段数の評価を行った。なお、実施例１では、図２に示す試料注入装置において、図４に示す構成としたものを用い、比較例１では、図１１に示す試料注入装置において、図１３に示す構成としたものを用いた。
【００５２】
液体クロマトグラフィーの条件を以下に示す。カラム１６としては、平均粒径が３μｍのオクタデシルシリルシリカゲルが充填された長さが５ｃｍ、内径が２ｍｍのカラムを用い、恒温槽１７でカラム１６の温度を４０℃に保った。また、移動相として、０．１重量％の酢酸水溶液／アセトニトリルの混合溶媒（体積比５０：５０）を用い、移動相の流速は、２００μｌ／分であった。なお、洗浄液としては、水を用いた。また、検出器１８としては、エレクトロスプレーイオン化法を用いた質量分析計を使用し、親イオンを６０９（ｍ／ｚ）とし、１９５（ｍ／ｚ）の陽イオンを検出した。
【００５３】
図１２に、理論段数の評価結果を示す。図１２より、比較例１の理論段数は、１４００段であり、実施例１の理論段数は、５６００段であった。このことから、実施例１は、比較例１に対して、理論段数が４２００段高くなっている。さらに、実施例１は、比較例１と比較してピークがシャープに現れていることから、ピークの分離がきれいに行われていることがわかり、実施例１の液体クロマトグラフィー装置の分析精度が比較例１より高いことがわかる。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１】本発明の液体クロマトグラフィー装置の一例を示すブロック図である。
【図２】本発明の試料注入装置の一例を示す斜視図である。
【図３】本発明で用いられる配管の一例を示す図である。
【図４】本発明で用いられるニードルの一例を示す図である。
【図５】本発明の試料注入装置の待機時の状態を示す図である。
【図６】本発明の試料注入装置の試料採取時の状態を示す図である。
【図７】本発明の試料注入装置の試料用ニードルの予備洗浄時の状態を示す図である。
【図８】本発明の試料注入装置の試料用ニードルの超音波洗浄時の状態を示す図である。
【図９】本発明の試料注入装置の試料分析時（その１）の状態を示す図である。
【図１０】本発明の試料注入装置の試料分析時（その２）の状態を示す図である。
【図１１】本発明の試料注入装置の他の例を示す図である。
【図１２】実施例１及び比較例１の評価結果を示す図である。
【図１３】従来の試料注入装置の一部を示す図である。
【符号の説明】
【００５５】
１１ 貯槽
１２ 脱気装置
１３ ポンプ
１４ 試料注入装置
１５ 配管
１５ａ 試料注入部
１５ｂ 配管部
１６ カラム
１７ 恒温槽
１８ 検出器
２１Ａ 試料用ニードル
２１Ｂ 移動相用ニードル
２２ シリンジ
２３ 洗浄液用ポンプ
２４ バルブ
２５ 試料用容器
２６ インジェクションバルブ
２７ 洗浄液用容器
２８ 洗浄装置
２８ａ、２８ｂ 洗浄部
２８ｃ 超音波振動子
２８ｄ 廃液ポート
２８ｅ 廃液配管
２９ 三方電磁弁
３１ 固定部材
４１ 被押圧部
４２ 圧着部材
５１ 洗浄装置
５１ａ、５１ｂ 洗浄部
５１ｃ 廃液ポート
５１ｄ 廃液配管
【技術分野】
【０００１】
本発明は、試料注入装置及び液体クロマトグラフィー装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
液体クロマトグラフィー装置は、概略すると、移動相（溶出溶媒）を貯蔵する貯槽、移動相を脱気する脱気装置、移動相を貯槽から供給するポンプ、試料を移動相と共にカラムに向う配管に注入する試料注入装置、試料中の成分を分離するための充填剤が充填されているカラム、カラムを略一定の温度に保つ恒温槽及び分離された試料中の成分を検出する検出器等を有する。この内、試料注入装置は、例えば、特許文献１〜３に開示されているように、試料を吸引した試料注入用ニードルを試料注入ポートに装着して、試料を移動相と共に配管に注入する。
【０００３】
ところで、近年、液体クロマトグラフィー装置の検出感度が向上しており、これに伴い、キャリーオーバーと呼ばれる現象が問題になっている。キャリーオーバーとは、時系列的に前に測定した試料が液体クロマトグラフィー装置内に残留し、あたかも現在測定している試料中にその物質が存在するかのような検出結果を示す現象であり、分析結果の信頼性を低下させるものである。キャリーオーバーは、試料を移動相と共に配管に注入する際に、試料注入装置内の金属及び／又は樹脂に試料が付着して残留し、次の試料を注入する際に残留した試料が混入することによって生じる。
【０００４】
一方、液体クロマトグラフィー／質量分析法（ＬＣ／ＭＳ）等では、短時間での測定が可能となることから、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）が用いられているが、理論段数の更なる向上が求められている。
【０００５】
図１３に、従来の試料注入装置の一部を示す。なお、図１３（ａ）は、斜視図であり、図１３（ｂ）は、断面図である。図１３に示す試料注入装置は、試料注入ポート６１及びニードルシール６２がホルダー６３で固定された状態で、オシネジ６４を用いて配管６５と接続されているため、ニードル６６から試料を注入する際に試料が付着しやすく、うずまき流が発生しやすい。その結果、キャリーオーバーが発生しやすく、理論段数が低下しやすい。
【特許文献１】特開平１０−１０１０３号公報
【特許文献２】ＷＯ再表２００４／１０２１８２号公報
【特許文献３】特開２００６−２０１１２１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、上記の従来技術が有する問題に鑑み、キャリーオーバーの発生を抑制すると共に、理論段数を向上させることが可能な試料注入装置及び液体クロマトグラフィー装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
請求項１に記載の発明は、試料注入装置において、試料を吐出する先端部がテーパー状である第一のニードルと、該第一のニードルから吐出された試料が送出される配管を有し、該配管は、該第一のニードルを装着することが可能であると共に、該第一のニードルから吐出された試料が注入されるすり鉢状の試料注入部と、該試料注入部から注入された試料が送出される配管部を有することを特徴とする。
【０００８】
請求項２に記載の発明は、請求項１に記載の試料注入装置において、前記第一のニードルの先端部の傾斜角は、前記試料注入部の傾斜角と略同一であることを特徴とする。
【０００９】
請求項３に記載の発明は、請求項１又は２に記載の試料注入装置において、前記第一のニードルの内径は、前記配管部の内径以上であることを特徴とする。
【００１０】
請求項４に記載の発明は、請求項１乃至３のいずれか一項に記載の試料注入装置において、前記第一のニードルを前記試料注入部に圧着させる圧着部材をさらに有し、前記第一のニードルは、該圧着部材により押圧される被押圧部を有することを特徴とする。
【００１１】
請求項５に記載の発明は、請求項１乃至４のいずれか一項に記載の試料注入装置において、前記試料注入部に装着することが可能である第二のニードルと、前記第一のニードルと接続することが可能であり、前記第一のニードルと接続された状態で前記第一のニードルに試料を吸引する試料吸引手段と、前記第一のニードルが該試料吸引手段に接続されていると共に、該第二のニードルが移動相を供給する移動相供給手段に接続されている状態及び前記第一のニードルが該移動相供給手段に接続されている状態を切り換えることが可能な切り換え弁をさらに有することを特徴とする。
【００１２】
請求項６に記載の発明は、液体クロマトグラフィー装置において、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の試料注入装置を有することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、キャリーオーバーの発生を抑制すると共に、理論段数を向上させることが可能な試料注入装置及び液体クロマトグラフィー装置を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
次に、本発明を実施するための最良の形態を図面と共に説明する。
【００１５】
図１に、本発明の液体クロマトグラフィー装置の一例を示す。液体クロマトグラフィー装置の構成について説明する。図１に示す液体クロマトグラフィー装置は、移動相（溶出溶媒）を貯蔵する貯槽１１と、移動相を脱気する脱気装置１２と、移動相を貯槽１１から供給するポンプ１３と、試料を移動相と共にカラム１６に向かう配管１５に注入する試料注入装置１４と、試料中の成分を分離するための充填剤が充填されているカラム１６と、カラム１６を一定の温度に保つ恒温槽１７と、分離された試料中の成分を検出する検出器１８から構成されている。なお、測定を安定させるために、移動相は、常に貯槽１１からポンプ１３により試料注入装置１４を介してカラム１６に供給されていることが望ましい。
【００１６】
図２に、本発明の試料注入装置の一例を示す。図２に示す試料注入装置は、配管１５、試料用ニードル２１Ａ、移動相用ニードル２１Ｂ、シリンジ２２、洗浄液用ポンプ２３、バルブ２４、試料用容器２５、インジェクションバルブ２６、洗浄液用容器２７、洗浄装置２８及びニードル移動手段（不図示）を有する。
【００１７】
試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６及びバルブ２４を介して、シリンジ２２に接続することが可能である。また、インジェクションバルブ２６を介して、ポンプ１３とも接続することが可能である。
【００１８】
試料用ニードル２１Ａから移動相と共に吐出された試料が送出される配管１５は、図３に示すように、試料が注入されるすり鉢状の試料注入部１５ａと、試料注入部１５ａから注入された試料が送出される配管部１５ｂを有し、試料注入部１５ａは、固定部材３１で固定されている。また、配管１５は、カラム１６に直結されていることが好ましい。なお、配管１５の材料としては、ＰＥＥＫ（ポリエーテルエーテルケトン）、ステンレス、チタン等の金属が挙げられる。
【００１９】
試料用ニードル２１Ａは、先端部がテーパー状であるが、その傾斜角は、１０〜４５°であることが好ましく、１０〜３０°がさらに好ましい。このとき、試料用ニードル２１Ａの先端部の傾斜角と試料注入部１５ａの傾斜角を略同一とすることが好ましい。これにより、試料用ニードル２１Ａと試料注入部１５ａの接合面積を大きくすることができ、試料及び移動相の漏れを抑制することができる。
【００２０】
また、試料用ニードル２１Ａの内径は、０．１〜０．８ｍｍであることが好ましく、０．１〜０．３ｍｍがさらに好ましい。このとき、試料用ニードル２１Ａの内径を配管部１５ｂの内径以上とすることが好ましく、配管部１５ｂの内径と略同一とすることがさらに好ましい。これにより、試料注入部１５ａから試料及び移動相が注入される際に、うずまき流の発生を抑制することができる。なお、配管部１５ｂの内径は、０．０５〜０．３ｍｍであることが好ましく、０．０６５〜０．２５ｍｍがさらに好ましい。
【００２１】
さらに、試料用ニードル２１Ａは、図４に示すように、両側、好ましくは、先端部の近傍の両側に、被押圧部４１を有してもよい。このとき、圧着部材４２を用いて、試料用ニードル２１Ａを挟むように被押圧部４１を押圧することにより、試料用ニードル２１Ａから試料注入部１５ａに試料及び移動相を注入する際に、試料用ニードル２１Ａの変形を抑制することができる。
【００２２】
また、移動相用ニードル２１Ｂは、インジェクションバルブ２６を介して、ポンプ１３と接続することが可能である。なお、移動相用ニードル２１Ｂは、特に限定されないが、試料用ニードル２１Ａと同一のものを用いることが好ましい。
【００２３】
次に、図５から図１０を参照して、本発明の試料注入装置について説明する。なお、図５〜図１０に、本発明の試料注入装置の各構成要素の接続状態を示し、それぞれ待機時、試料採取時、試料用ニードルの予備洗浄時、試料用ニードルの超音波洗浄時、試料分析時（その１）及び試料分析時（その２）の状態を示す。
【００２４】
試料用ニードル２１Ａは、バルブ２４及びインジェクションバルブ２６の切り換えにより、シリンジ２２に接続されると、シリンジ２２を押し引きすることによって、試料用ニードル２１Ａに対して、試料の吸入及び吐出を行うことができる。また、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６の切り換えにより、ポンプ１３に接続されると、ポンプ１３より移動相が試料用ニードル２１Ａに供給される。
【００２５】
また、インジェクションバルブ２６の切り換えにより、移動相用ニードル２１Ｂがポンプ１３に接続されると、ポンプ１３より移動相が移動相用ニードル２１Ｂに供給される。
【００２６】
移動相用ニードル２１Ｂとインジェクションバルブ２６を接続する配管には、液だれを防止するために、三方電磁弁２９が設けられている。三方電磁弁２９は、移動相用ニードル２１Ｂが移動中等の試料注入部１５ａに装着されていない状態でインジェクションバルブ２６が図中Ｂで示す接続状態となった時に閉弁し、移動相用ニードル２１Ｂから移動相が流出することを防止することができる。
【００２７】
また、洗浄液用容器２７は、内部に洗浄液（通常、移動相に用いられている溶媒）が貯蔵されており、洗浄液用ポンプ２３に接続されている。このとき、洗浄液は、洗浄液用ポンプ２３により吸入されてバルブ２４に圧送される。
【００２８】
バルブ２４は、洗浄液用ポンプ２３により圧送された洗浄液を、洗浄装置２８又は試料用ニードル２１Ａに選択的に供給することができる。具体的には、バルブ２４は、３個のポートＰ１〜Ｐ３を有しており、この内の２つのポートを選択的に接続することが可能である。なお、バルブ２４は、各ポートＰ１〜Ｐ３のいずれも接続しないことも可能である。
【００２９】
また、シリンジ２２及びインジェクションバルブ２６は、いずれもバルブ２４のポートＰ３に接続されている。すなわち、常時シリンジ２２とインジェクションバルブ２６が接続されている。
【００３０】
洗浄装置２８は、洗浄部２８ａ及び２８ｂ、超音波振動子２８ｃ、廃液ポート２８ｄ、廃液配管２８ｅを有する。洗浄装置２８は、バルブ２４の切り換えにより、洗浄液用ポンプ２３と接続されると、洗浄液用容器２７から洗浄液が供給される。また、一定量以上の余剰の洗浄液は、廃液ポート２８ｄに流入し、廃液ポート２８ｄと接続された廃液配管２８ｅから廃液として外部に排出される。後述するように、洗浄装置２８に試料用ニードル２１Ａを挿入することにより、試料が付着した試料用ニードル２１Ａが洗浄される。これにより、キャリーオーバーの発生を抑制することができる。また、洗浄装置２８には、超音波振動子２８ｃが設けられており、試料用ニードル２１Ａを超音波洗浄することができる。これにより、試料用ニードル２１Ａの洗浄効果を高めることができ、より確実にキャリーオーバーの発生を抑制することができる。
【００３１】
配管１５は、カラム１６に接続されている。すなわち、配管１５は、インジェクションバルブ２６と接続されておらず、インジェクションバルブ２６から分離独立している。後述するように、試料を吸引した試料用ニードル２１Ａが配管１５の試料注入部１５ａに装着され、試料及び移動相を試料注入部１５ａに吐出することにより、試料は、配管部１５ｂを移動相と共に流れ、カラム１６に送出される。
【００３２】
インジェクションバルブ２６は、６つのポートを有しており、５つのポートに、ポンプ１３、試料用ニードル２１Ａ、移動相用ニードル２１Ｂ、バルブ２４及び洗浄装置２８が接続されている。インジェクションバルブ２６は、図中実線Ａで示す接続状態（以下、接続状態Ａという）と、図中破線Ｂで示す接続状態（以下、接続状態Ｂという）を切り換えることができる。
【００３３】
インジェクションバルブ２６が接続状態Ａの場合、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６を介して、ポンプ１３と接続し、バルブ２４は、インジェクションバルブ２６を介して洗浄装置２８の洗浄部２８ａに接続される。この際、移動相用ニードル２１Ｂは、いずれにも接続されない。また、インジェクションバルブ２６が接続状態Ｂの場合、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６を介して、バルブ２４と接続され、移動相用ニードル２１Ｂは、インジェクションバルブ２６を介して、ポンプ１３に接続される。
【００３４】
次に、本発明の試料注入装置を用いた試料注入方法について説明する。
【００３５】
図５に示すように、試料を採取する前の待機状態において、インジェクションバルブ２６は、接続状態Ａとなっており、バルブ２４は、ポートＰ１〜Ｐ３のいずれも接続しない。さらに、ニードル移動手段（不図示）により、試料用ニードル２１Ａは、配管１５の試料注入部１５ａに装着されている。また、移動相用ニードル２１Ｂは、ニードル移動手段（不図示）により、試料注入部１５ａの近傍に待機しており、非接続状態となっている。さらに、三方電磁弁２９は、移動相用ニードル２１Ｂとインジェクションバルブ２６を接続する配管を閉塞している。したがって、待機時において、ポンプ１３から供給される移動相は、試料用ニードル２１Ａ及び試料注入部１５ａを介して、カラム１６に供給される。
【００３６】
図６に示すように、試料用ニードル２１Ａに試料を採取する際に、試料用ニードル２１Ａは、ニードル移動手段（不図示）により、試料用容器２５内に挿入されると共に、移動相用ニードル２１Ｂが試料注入部１５ａに装着される。また、インジェクションバルブ２６は、接続状態Ｂに切り換えられる。さらに、三方電磁弁２９も開弁され、移動相用ニードル２１Ｂは、インジェクションバルブ２６と連通される。したがって、試料採取時において、ポンプ１３から供給される移動相は、移動相用ニードル２１Ｂ及び試料注入部１５ａを介して、カラム１６に供給される。このため、移動相は、カラム１６に常に供給され、測定を安定させることができる。また、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６及びバルブ２４を介して、シリンジ２２に接続される。このため、シリンジ２２を用いて吸引することにより、試料用容器２５内の試料が試料用ニードル２１Ａに吸引される。この際、試料の吸引量は、吸引した試料がインジェクションバルブ２６に入り込まないように設定されている。これにより、試料がインジェクションバルブ２６内に付着することを防止でき、キャリーオーバーの発生を抑制することができる。なお、試料の吸引量を多くするために、試料用ニードル２１Ａにサンプルループを設けてもよい。
【００３７】
試料採取が終了すると、試料用ニードル２１Ａの外壁に試料が付着するため、試料が付着した試料用ニードル２１Ａを洗浄する。具体的には、試料用ニードル２１Ａの予備洗浄及び超音波洗浄を行う。
【００３８】
図７に示すように、試料用ニードル２１Ａを予備洗浄する際には、インジェクションバルブ２６を接続状態Ｂに維持しつつ、ニードル移動手段（不図示）により、試料用ニードル２１Ａを洗浄装置２８の洗浄部２８ｂに挿入する。また、ポートＰ１及びＰ２が接続されるようにバルブ２４を切り換え、洗浄液用ポンプ２３を介して、洗浄液用容器２７内の洗浄液を洗浄部２８ｂに供給する。したがって、洗浄部２８ｂ内に洗浄液が噴出し、試料用ニードル２１Ａの外壁が予備洗浄される。なお、洗浄部２８ｂから溢れた洗浄液は、廃液ポート２８ｄ及び廃液配管２８ｅを介して排出される。
【００３９】
図８に示すように、試料用ニードル２１Ａを超音波洗浄する際には、インジェクションバルブ２６を接続状態Ｂに維持しつつ、ニードル移動手段（不図示）により、試料用ニードル２１Ａを洗浄装置２８の洗浄部２８ａに挿入する。また、バルブ２４は、再びポートＰ１〜Ｐ３のいずれも接続されない状態に切り換えられる。この状態で、超音波振動子２８ｃを駆動して超音波を発生させることにより、洗浄部２８ａに装填されている洗浄液が超音波振動し、試料用ニードル２１Ａの外壁が超音波洗浄される。
【００４０】
なお、予備洗浄時及び超音波洗浄時においても、移動相は、ポンプ１３からインジェクションバルブ２６、移動相用ニードル２１Ｂ及び試料注入部１５ａを介して、カラム１６に供給される。
【００４１】
超音波洗浄が終了すると、試料用ニードル２１Ａに採取した試料をカラム１６に供給して試料を分析する。
【００４２】
図９に示すように、試料を分析する際に、インジェクションバルブ２６は、接続状態Ｂから接続状態Ａに再び切り換わり、ニードル移動手段（不図示）により、試料用ニードル２１Ａは、試料注入部１５ａに装着される。さらに、移動相用ニードル２１Ｂも、ニードル移動手段（不図示）により、試料注入部１５ａの近傍の待機位置に移動される。移動相用ニードル２１Ｂが移動を開始すると、三方電磁弁２９は、移動相用ニードル２１Ｂとインジェクションバルブ２６を接続する配管を閉塞する。また、試料を分析する際には、試料を吸引した試料用ニードル２１Ａが試料注入部１５ａに装着されると共に、インジェクションバルブ２６により、試料用ニードル２１Ａがポンプ１３に接続される。これにより、試料用ニードル２１Ａ内の試料は、インジェクションバルブ２６を通過することなく、カラム１６に供給される。また、カラム１６に供給された試料は、カラム１６で所定の分離が行われた後、検出器１８に送られて分析される。したがって、インジェクションバルブ２６内に試料が残存することを防止することができ、キャリーオーバーの発生を抑制することができる。また、試料注入装置内のキャリーオーバーの発生が抑制されることにより、理論段数を向上させることができる。
【００４３】
なお、試料分析時に、洗浄装置２８の洗浄部２８ａの洗浄液を交換してもよい。この場合、図１０に示すように、ポートＰ２及びＰ３が接続されるようにバルブ２４を切り換え、洗浄液用容器２７内の洗浄液を洗浄液用ポンプ２３、バルブ２４及びインジェクションバルブ２６を介して、洗浄部２８ａに供給する。これにより、試料用ニードル２１Ａを洗浄して汚染された洗浄液は、廃液ポート２８ｄ及び廃液配管２８ｅを介して排出され、洗浄部２８ａには、汚染されていない洗浄液が供給される。したがって、次回の超音波洗浄時において、試料用ニードル２１Ａの外壁をより確実に洗浄することができる。
【００４４】
なお、本発明の試料注入装置としては、上記の構成に限定されず、図３又は図４に示す配管１５及び試料用ニードル２１Ａを従来の試料注入装置に適用したものも挙げられる。
【００４５】
図１１に、このような試料注入装置の一例を示す。なお、図１１において、図１〜１０と同一の構成については、同一の符号を付して説明を省略する。図１１に示す試料注入装置は、配管１５、試料用ニードル２１Ａ、シリンジ２２、バルブ２４、試料用容器２５、インジェクションバルブ２６、洗浄装置５１及びニードル移動手段（不図示）を有する。
【００４６】
インジェクションバルブ２６は、６つのポートを有しており、各ポートに、ポンプ１３、配管１５、カラム１６、試料用ニードル２１Ａ、バルブ２４及び洗浄装置５１が接続されている。インジェクションバルブ２６は、図中実線Ａで示す接続状態（以下、接続状態Ａという）と、図中破線Ｂで示す接続状態（以下、接続状態Ｂという）を切り換えることができる。
【００４７】
試料を採取する前の待機状態において、インジェクションバルブ２６は、接続状態Ａとなっており、試料用ニードル２１Ａは、配管１５の試料注入部１５ａに装着されている。このとき、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６を介して、ポンプ１３に接続されており、配管１５は、インジェクションバルブ２６を介して、カラム１６と接続されている。したがって、ポンプ１３から供給される移動相は、試料用ニードル２１Ａ、配管１５及びインジェクションバルブ２６を介して、カラム１６に供給される。
【００４８】
一方、試料を採取する際には、インジェクションバルブ２６を接続状態Ｂに切り換えると共に、試料用ニードル２１Ａを試料用容器２５に挿入する。このとき、試料用ニードル２１Ａは、インジェクションバルブ２６及びバルブ２４を介して、シリンジ２２に接続されている。このため、シリンジ２２を操作することにより、試料用容器２５内の試料が試料用ニードル２１Ａ内に吸引される。また、ポンプ１３は、インジェクションバルブ２６を介して、カラム１６に接続されているため、試料用ニードル２１Ａにより、試料採取時もカラム１６に移動相が供給される。
【００４９】
試料採取が終了すると、試料用ニードル２１Ａの外壁に試料が付着するため、試料が付着した試料用ニードル２１Ａを洗浄する。具体的には、試料用ニードル２１Ａを洗浄装置５１の洗浄部５１ｂ内に挿入した後、洗浄部５１ａ内に挿入して、試料用ニードル２１Ａの外壁を洗浄する。洗浄装置５１の洗浄部５１ａ及び５１ｂは、バルブ２４を所定のタイミングで洗浄液用ポンプ２３に接続することにより、常に新しい洗浄剤が供給される。なお、余剰となった洗浄液は、廃液ポート５１ｃ及び廃液配管５１ｄから排出される。
【００５０】
洗浄が終了すると、試料用ニードル２１Ａに採取した試料をカラム１６に供給して試料を分析する。具体的には、試料用ニードル２１Ａを試料注入部１５ａに装着すると共に、再びインジェクションバルブ２６を接続状態Ａとする。これにより、ポンプ１３から試料用ニードル２１Ａに供給される移動相により、試料は、試料用ニードル２１Ａから試料注入部１５ａに送出された後、移動相の流れに乗って配管部１５ｂ及びインジェクションバルブ２６を介して、カラム１６に供給される。また、カラム１６に供給された試料は、カラム１６で所定の分離が行われた後、検出器１８に送られて分析される。
【実施例】
【００５１】
図１に示す液体クロマトグラフィー装置を用いて、標準試料（レセルピン１０ｎｇ／ｍｌ）を２μｌ注入して、理論段数の評価を行った。なお、実施例１では、図２に示す試料注入装置において、図４に示す構成としたものを用い、比較例１では、図１１に示す試料注入装置において、図１３に示す構成としたものを用いた。
【００５２】
液体クロマトグラフィーの条件を以下に示す。カラム１６としては、平均粒径が３μｍのオクタデシルシリルシリカゲルが充填された長さが５ｃｍ、内径が２ｍｍのカラムを用い、恒温槽１７でカラム１６の温度を４０℃に保った。また、移動相として、０．１重量％の酢酸水溶液／アセトニトリルの混合溶媒（体積比５０：５０）を用い、移動相の流速は、２００μｌ／分であった。なお、洗浄液としては、水を用いた。また、検出器１８としては、エレクトロスプレーイオン化法を用いた質量分析計を使用し、親イオンを６０９（ｍ／ｚ）とし、１９５（ｍ／ｚ）の陽イオンを検出した。
【００５３】
図１２に、理論段数の評価結果を示す。図１２より、比較例１の理論段数は、１４００段であり、実施例１の理論段数は、５６００段であった。このことから、実施例１は、比較例１に対して、理論段数が４２００段高くなっている。さらに、実施例１は、比較例１と比較してピークがシャープに現れていることから、ピークの分離がきれいに行われていることがわかり、実施例１の液体クロマトグラフィー装置の分析精度が比較例１より高いことがわかる。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１】本発明の液体クロマトグラフィー装置の一例を示すブロック図である。
【図２】本発明の試料注入装置の一例を示す斜視図である。
【図３】本発明で用いられる配管の一例を示す図である。
【図４】本発明で用いられるニードルの一例を示す図である。
【図５】本発明の試料注入装置の待機時の状態を示す図である。
【図６】本発明の試料注入装置の試料採取時の状態を示す図である。
【図７】本発明の試料注入装置の試料用ニードルの予備洗浄時の状態を示す図である。
【図８】本発明の試料注入装置の試料用ニードルの超音波洗浄時の状態を示す図である。
【図９】本発明の試料注入装置の試料分析時（その１）の状態を示す図である。
【図１０】本発明の試料注入装置の試料分析時（その２）の状態を示す図である。
【図１１】本発明の試料注入装置の他の例を示す図である。
【図１２】実施例１及び比較例１の評価結果を示す図である。
【図１３】従来の試料注入装置の一部を示す図である。
【符号の説明】
【００５５】
１１ 貯槽
１２ 脱気装置
１３ ポンプ
１４ 試料注入装置
１５ 配管
１５ａ 試料注入部
１５ｂ 配管部
１６ カラム
１７ 恒温槽
１８ 検出器
２１Ａ 試料用ニードル
２１Ｂ 移動相用ニードル
２２ シリンジ
２３ 洗浄液用ポンプ
２４ バルブ
２５ 試料用容器
２６ インジェクションバルブ
２７ 洗浄液用容器
２８ 洗浄装置
２８ａ、２８ｂ 洗浄部
２８ｃ 超音波振動子
２８ｄ 廃液ポート
２８ｅ 廃液配管
２９ 三方電磁弁
３１ 固定部材
４１ 被押圧部
４２ 圧着部材
５１ 洗浄装置
５１ａ、５１ｂ 洗浄部
５１ｃ 廃液ポート
５１ｄ 廃液配管
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料を吐出する先端部がテーパー状である第一のニードルと、
該第一のニードルから吐出された試料が送出される配管を有し、
該配管は、該第一のニードルを装着することが可能であると共に、該第一のニードルから吐出された試料が注入されるすり鉢状の試料注入部と、該試料注入部から注入された試料が送出される配管部を有することを特徴とする試料注入装置。
【請求項２】
前記第一のニードルの先端部の傾斜角は、前記試料注入部の傾斜角と略同一であることを特徴とする請求項１に記載の試料注入装置。
【請求項３】
前記第一のニードルの内径は、前記配管部の内径以上であることを特徴とする請求項１又は２に記載の試料注入装置。
【請求項４】
前記第一のニードルを前記試料注入部に圧着させる圧着部材をさらに有し、
前記第一のニードルは、該圧着部材により押圧される被押圧部を有することを特徴とする請求項１乃至３のいずれか一項に記載の試料注入装置。
【請求項５】
前記試料注入部に装着することが可能である第二のニードルと、
前記第一のニードルと接続することが可能であり、前記第一のニードルと接続された状態で前記第一のニードルに試料を吸引する試料吸引手段と、
前記第一のニードルが該試料吸引手段に接続されていると共に、該第二のニードルが移動相を供給する移動相供給手段に接続されている状態及び前記第一のニードルが該移動相供給手段に接続されている状態を切り換えることが可能な切り換え弁をさらに有することを特徴とする請求項１乃至４のいずれか一項に記載の試料注入装置。
【請求項６】
請求項１乃至５のいずれか一項に記載の試料注入装置を有することを特徴とする液体クロマトグラフィー装置。
【請求項１】
試料を吐出する先端部がテーパー状である第一のニードルと、
該第一のニードルから吐出された試料が送出される配管を有し、
該配管は、該第一のニードルを装着することが可能であると共に、該第一のニードルから吐出された試料が注入されるすり鉢状の試料注入部と、該試料注入部から注入された試料が送出される配管部を有することを特徴とする試料注入装置。
【請求項２】
前記第一のニードルの先端部の傾斜角は、前記試料注入部の傾斜角と略同一であることを特徴とする請求項１に記載の試料注入装置。
【請求項３】
前記第一のニードルの内径は、前記配管部の内径以上であることを特徴とする請求項１又は２に記載の試料注入装置。
【請求項４】
前記第一のニードルを前記試料注入部に圧着させる圧着部材をさらに有し、
前記第一のニードルは、該圧着部材により押圧される被押圧部を有することを特徴とする請求項１乃至３のいずれか一項に記載の試料注入装置。
【請求項５】
前記試料注入部に装着することが可能である第二のニードルと、
前記第一のニードルと接続することが可能であり、前記第一のニードルと接続された状態で前記第一のニードルに試料を吸引する試料吸引手段と、
前記第一のニードルが該試料吸引手段に接続されていると共に、該第二のニードルが移動相を供給する移動相供給手段に接続されている状態及び前記第一のニードルが該移動相供給手段に接続されている状態を切り換えることが可能な切り換え弁をさらに有することを特徴とする請求項１乃至４のいずれか一項に記載の試料注入装置。
【請求項６】
請求項１乃至５のいずれか一項に記載の試料注入装置を有することを特徴とする液体クロマトグラフィー装置。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【公開番号】特開２００８−１６４４９８（Ｐ２００８−１６４４９８Ａ）
【公開日】平成２０年７月１７日（２００８．７．１７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−３５５９３４（Ｐ２００６−３５５９３４）
【出願日】平成１８年１２月２８日（２００６．１２．２８）
【出願人】（０００００１９５９）株式会社資生堂 (1,748)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年７月１７日（２００８．７．１７）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１２月２８日（２００６．１２．２８）
【出願人】（０００００１９５９）株式会社資生堂 (1,748)
【Ｆターム（参考）】
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