本発明は、改良された特性を持つ抗ＤＲ５抗体、そのような抗体を含む組成物、そのような抗体を作成するための方法および手段、および特に癌の治療におけるそれらの治療的使用に関する。１つの態様において、本発明は、全長抗体１６Ｅ２の重鎖および／または軽鎖（各々、配列番号１１および１３）において少なくとも１つの突然変異を含む抗ＤＲ５抗体、またはその断片に関し、ここに、該抗体または抗体断片は少なくともＤＲ５に対する同一の親和性を示しおよび／または抗体１６Ｅ２と少なくとも同一の生物学的活性および／または効力を呈する。特別な具体例において、該抗体または抗体断片は全長抗体１６Ｅ２と同一のエピトープに本質的に結合する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
全長抗体１６Ｅ２の重鎖および／または軽鎖（各々、配列番号：１１および１３）において少なくとも１つの突然変異を含む抗ＤＲ５抗体、またはその断片であって、ここに、該抗体または抗体断片は該全長抗体１６Ｅ２よりもＤＲ５に対してより大きな親和性を有し、および／または該全長抗体１６Ｅ２よりも大きな生物学的活性および／または効力を呈する、抗体または抗体断片。
【請求項２】
前記抗体が全長抗体１６Ｅ２、またはその断片と本質的に同一のエピトープに結合する請求項１記載の抗ＤＲ５抗体。
【請求項３】
表１ないし７、および９ないし１２いずれかにリストされた少なくとも１つの置換を有する重鎖および／または軽鎖を含む請求項１記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項４】
全長１６Ｅ２抗体重鎖（配列番号：１１）可変ドメインのフレームワークに１以上の突然変異を含む請求項１記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項５】
前記フレームワーク突然変異がＱ６Ｅ、Ｖ１１Ｌ、Ｅ１２Ｖ、Ｒ１３Ｑ、およびＫ１０５Ｑよりなる群から選択される請求項４記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項６】
フレームワーク突然変異Ｑ６Ｅ、Ｖ１１Ｌ、Ｅ１２Ｖ、Ｒ１３Ｑ、およびＫ１０５Ｑの全てを含む請求項５記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項７】
配列番号：１１のアミノ酸配列において、Ｔ２８Ａ、Ｇ３３Ａ、Ｍ３４Ｌ、Ｍ３４Ａ、Ｍ３４Ｉ、Ｍ３４Ｓ，Ｎ５３Ｑ、Ｎ５３Ｙ、およびＬ１０２Ｙよりなる群から選択される少なくとも１つの突然変異を含む請求項１または６記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項８】
配列番号：１１のアミノ酸配列において、突然変異Ｇ９９ＡおよびＲ１００Ａの少なくとも１つを含む請求項１または６記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項９】
配列番号：１１のアミノ酸配列において、（ｉ）Ｎ５３Ｑ、Ｌ１０２Ｙ；（ｉｉ）Ｍ３４Ｌ、Ｎ５３Ｑ、Ｌ１０２Ｙ；（ｉｉｉ）Ｎ５３Ｙ、Ｌ１０２Ｙ；（ｉｖ）Ｍ３４Ｌ、Ｎ５３Ｙ、Ｌ１０２Ｙ；（ｖ）Ｇ３３Ａ、Ｎ５３Ｑ、Ｌ１０２Ｙ；（ｖｉ）Ｍ３４Ｌ、Ｎ５３Ｙ、Ｌ１０２Ｙ；（ｖｉｉ）Ｇ３３Ａ、Ｎ５３Ｑ、Ｌ１０２Ｙ；（ｖｉｉｉ）Ｇ３３Ａ、Ｎ５３Ｙ、Ｌ１０２Ｙ；（ｉｘ）Ｔ２８Ａ、Ｎ５３Ｑ、Ｌ１０２Ｙ；および（ｘ）Ｔ２８Ａ、Ｎ５３Ｙ、Ｌ１０２Ｙよりなる群から選択される突然変異の組を含む請求項６記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項１０】
全長１６Ｅ２抗体の軽鎖（配列番号：１３）において少なくとも１つの突然変異を含む請求項１または６記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項１１】
前記軽鎖がラムダ鎖である請求項１０記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項１２】
前記突然変異がＣＤＲ Ｌ１におけるものである請求項１１記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項１３】
前記突然変異が配列番号：１３のアミノ酸配列におけるＱ２４Ａ、Ｑ２４Ｓ、Ｇ２５Ａ、Ｄ２６Ｅ、Ｓ２７Ａ、Ｌ２８Ａ、Ｒ２９Ａ、Ｓ３０Ａ、Ｙ３１Ａ、Ｙ３１Ｋ、Ｙ３２Ｈ、Ａ３３Ｇ、Ｓ３４Ａ、およびＳ３４Ｙよりなる群から選択される請求項１２記載の抗ＤＲ５抗体またはその断片。
【請求項１４】
配列番号：１３のアミノ酸配列における（ｉ）Ｑ２４Ｓ、Ｄ２６Ｅ、Ｙ３１Ｋ、Ｓ３４Ｙ；および（ｉｉ）Ｄ２６Ｅ、Ｙ３１Ｋよりなる群から選択される突然変異の組を含む請求項１２記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項１５】
前記突然変異がＣＤＲ Ｌ２におけるものである請求項１１記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項１６】
前記突然変異が配列番号：１３のアミノ酸配列におけるＧ５０Ａ、Ｇ５０Ｋ、Ｇ５０Ｓ、Ｋ５１Ｄ、Ｎ５２Ａ、Ｎ５２Ｓ、Ｎ５２Ｌ、Ｎ５２Ｑ、Ｎ５３Ａ、Ｎ５３Ｅ、Ｎ５３Ｑ、Ｎ５３Ｓ、Ｐ５５Ａ、およびＳ５６Ａよりなる群から選択される請求項１５記載の抗ＤＲ５抗体。
【請求項１７】
配列番号：１３のアミノ酸配列における（ｉ）Ｇ５０Ｋ、Ｋ５２Ｓ、Ｎ５３Ｅ；（ｉｉ）Ｇ５０Ｓ、Ｋ５１Ｄ、Ｎ５２Ｓ、Ｎ５３Ｅ；（ｉｉｉ）Ｎ５２Ｓ、Ｎ５３Ｅ；および（ｉｖ）Ｎ５２Ｑ、Ｎ５３Ｓよりなる群から選択される突然変異の組を含む請求項１５記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項１８】
前記突然変異がＣＤＲ Ｌ３におけるものである請求項１１記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項１９】
配列番号：１３においてＮ８９Ａ、Ｎ８９Ｌ、Ｎ８９Ｑ、Ｒ９１Ａ、Ｓ９３Ａ、Ｎ９５ａＡ、Ｎ９５ａＴ、Ｎ９５ａＱ、Ｈ９５ｂＡ、Ｎ９５ｂＹ、Ｖ９６Ａ、Ｖ９７Ａよりなる群から選択される少なくとも１つの突然変異を含む請求項１８記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項２０】
配列番号：１３の配列において（ｉ）Ｎ８９Ｌ、Ｒ９１Ａ、Ｎ９５ａＴ、Ｈ９５ｂＹ；および（ｉｉ）Ｎ９５ａＴ、Ｈ９５ｂＹよりなる群から選択される突然変異の組を含む請求項１８記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項２１】
配列番号：１３のアミノ酸配列において（ｉ）Ｑ２４Ｓ、Ｇ５０Ｋ、Ｋ５１Ｄ、Ｈ９５ｂＹ；（ｉｉ）Ｑ２４Ｓ、Ｋ５１Ａ、Ｄ９２Ｓ、Ｓ９３Ｙ；および（ｉｉｉ）Ｑ２４Ｓ、Ｋ５１Ａ、Ｒ９１Ａよりなる群から選択される軽鎖突然変異の組を含む請求項１記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項２２】
加えて、配列番号：１１のアミノ酸配列において（ｉ）Ｍ３４Ｌ、Ｎ５３Ｑ、Ｌ１０２Ｙ；（ｉｉ）Ｍ３４Ｌ、Ｎ５３Ｙ、Ｌ１０２Ｙ；（ｉｉｉ）Ｇ３３Ａ、Ｎ５３Ｑ、Ｌ１０２Ｙ；（ｉｖ）Ｇ３３Ａ、Ｎ５３Ｙ、Ｌ１０２Ｙ；（ｖ）Ｍ３４Ｌ、Ｎ５３Ｑ、Ｌ１０２Ｙ；（ｖｉ）Ｍ３４Ｌ、Ｎ５３Ｙ、Ｌ１０３Ｙ；（ｖｉｉ）Ｇ３３Ａ、Ｎ５３Ｑ、Ｌ１０２Ｙ；（ｖｉｉｉ）Ｇ３３Ａ、Ｎ５３Ｙ、Ｌ１０２Ｙ；および（ｉｘ）Ｔ２８Ａ、Ｎ５３Ｑ、Ｌ１０２Ｙよりなる群から選択される重鎖突然変異の組を含む請求項２１記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項２３】
加えて、表５にリストされたフレームワーク突然変異の組を含む請求項２２記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項２４】
以下の突然変異：配列番号：１１の配列におけるＧ３３Ａ、Ｎ５３Ｑ、Ｌ１０２Ｙ、および配列番号：１３の配列におけるＱ２４Ｓ、Ｋ５１Ａ、Ｒ９１Ａを含む請求項１記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項２５】
加えて、少なくとも１つのフレームワーク突然変異を含む請求項２４記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項２６】
前記フレームワーク突然変異が配列番号：１１の残基６、１１、１２、１３および１０５の少なくとも１つである請求項２５記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項２７】
Ａｐｏｍａｂ １．１、２．１、３．１、４．１、５．１、６．１、７．１、８．１、９．１、１．２、２．２、３．２、４．２、５．２、６．２、７．２、８．２、９．２、１．３、２．２、３．３、４．３、５．３、６．３、７．３、８．３および９．３よりなる群から選択される請求項２４記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項２８】
Ａｐｏｍａｂ ７．３または８．３である請求項２７記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項２９】
Ａｐｏｍａｂ ７．３である請求項２８記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項３０】
前記抗体はＡｐｏｍａｂ ７．３と同一のエピトープに本質的に結合する請求項１記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項３１】
前記断片がＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖ断片、ダイヤボディー、単一鎖抗体分子、および抗体断片から形成された多特異的抗体よりなる群から選択される請求項１または２９記載の抗ＤＲ５抗体。
【請求項３２】
前記抗体が単一鎖抗体である請求項３１記載の抗ＤＲ５抗体。
【請求項３３】
前記断片がＦｖ断片である請求項３１記載の抗ＤＲ５抗体。
【請求項３４】
前記生物学的活性が抗癌活性である請求項１記載の抗ＤＲ５抗体または抗体断片。
【請求項３５】
前記生物学的活性が癌細胞におけるアポトーシスの活性化または刺激である請求項１記載の抗ＤＲ５抗体または抗体断片。
【請求項３６】
癌が癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫および白血病よりなる群から選択される請求項３４記載の抗ＤＲ５抗体または抗体断片。
【請求項３７】
前記癌が扁平上皮細胞癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、非−ホジキンリンパ腫、芽細胞腫、胃腸癌、腎臓癌、卵巣癌、肝臓癌、胃癌、膀胱癌、ヘパトーム、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、膵臓癌、内膜癌腫、唾液腺癌腫、腎臓癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝臓癌腫、および頭部および頸部癌よりなる群から選択される請求項３６記載の抗ＤＲ５抗体または抗体断片。
【請求項３８】
前記癌がＮＳＣＬＣ、非−ホジキンリンパ腫、結腸直腸癌、または膵臓癌である請求項３７記載の抗ＤＲ５抗体または抗体断片。
【請求項３９】
前記癌が腺癌である請求項３６記載の抗ＤＲ５抗体または抗体断片。
【請求項４０】
前記腺癌が結腸直腸、膵臓、または転移性腺癌である請求項３９記載の抗ＤＲ５抗体または抗体断片。
【請求項４１】
前記能力がイン・ビトロ腫瘍殺傷アッセイにおいて決定される請求項１記載の抗ＤＲ５抗体または抗体断片。
【請求項４２】
キメラ、ヒト化またはヒト抗体である請求項１記載の抗ＤＲ５抗体または抗体断片。
【請求項４３】
抗体−依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を媒介する請求項１記載の抗ＤＲ５抗体または抗体断片。
【請求項４４】
Ａｐｏｍａｂ ７．３またはＡｐｏｍａｂ ８．３を含む請求項１記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片。
【請求項４５】
二量体形態である請求項１記載の抗ＤＲ５抗体またはその断片。
【請求項４６】
抗ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域で架橋された請求項２記載の抗ＤＲ５抗体またはその断片。
【請求項４７】
エピトープタグ配列に融合された請求項１記載の抗ＤＲ５抗体または抗体断片。
【請求項４８】
異種アミノ酸配列に融合された請求項４４記載の抗体を含むキメラ分子。
【請求項４９】
前記異種アミノ酸配列が免疫グロブリン配列を含む請求項４８記載のキメラ分子。
【請求項５０】
前記免疫グロブリン配列が抗ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域である請求項４９記載のキメラ分子。
【請求項５１】
請求項１記載の抗ＤＲ５抗体の重鎖または軽鎖をコードする単離された核酸。
【請求項５２】
Ａｐｏｍａｂ ７．３またはＡｐｏｍａｂ ８．３の重鎖または軽鎖をコードする単離された核酸。
【請求項５３】
請求項５１または５２記載の核酸を含むベクター。
【請求項５４】
請求項５１または５２記載の核酸を含む宿主細胞。
【請求項５５】
前記ＤＮＡが発現される条件下で請求項５４記載の宿主細胞を培養することを含む抗ＤＲ５抗体の生産方法。
【請求項５６】
請求項１、２８または２９記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片、および担体を含む組成物。
【請求項５７】
前記担体が医薬上許容される担体である請求項５６記載の組成物。
【請求項５８】
さらに、追加の抗癌剤を含む請求項５７記載の組成物。
【請求項５９】
前記追加の抗癌剤が抗体である請求項５８記載の組成物。
【請求項６０】
前記抗体がさらなる抗ＤＲ５抗体、リツキサン（リツキシマブ）、および抗ＶＥＧＦ抗体よりなる群から選択される請求項５９記載の組成物。
【請求項６１】
前記追加の抗癌剤が化学療法剤である請求項５８記載の組成物。
【請求項６２】
前記化学療法剤がＣＰＴ−１１（イリノテカン）、ゲムシタビン、カルボプラチン、タキソールおよびパクリタキセルよりなる群から選択される請求項６１記載の組成物。
【請求項６３】
前記追加の抗癌剤が図１のアミノ酸１１４ないし２８１（配列番号：１）を含むＡｐｏ２Ｌリガンドである請求項５８記載の組成物。
【請求項６４】
請求項１、２８または２９記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片に哺乳動物癌細胞を暴露することを含むアポトーシスを誘導する方法。
【請求項６５】
前記抗体がキメラ、ヒト化またはヒト抗体である請求項６４記載の方法。
【請求項６６】
前記哺乳動物癌細胞が、ＤＲ５を活性化する因子に暴露される請求項６４記載の方法。
【請求項６７】
請求項１、２８または２９記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片の有効量を哺乳動物対象に投与することを含む癌の治療方法。
【請求項６８】
前記哺乳動物対象がヒト患者である請求項６７記載の方法。
【請求項６９】
前記癌が扁平上皮細胞癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、非−ホジキンリンパ腫、芽細胞腫、胃腸癌、腎臓癌、卵巣癌、肝臓癌、胃癌、膀胱癌、ヘパトーム、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、膵臓癌、内膜癌腫、唾液腺癌腫、腎臓癌、肝臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝臓癌腫、および頭部および頸部癌よりなる群から選択される請求項６８記載の方法。
【請求項７０】
前記癌がＮＳＣＬＣ、結腸直腸癌、非−ホジキンリンパ腫または膵臓癌である請求項６９記載の方法。
【請求項７１】
前記癌が腺癌である請求項６８記載の方法。
【請求項７２】
前記腺癌が結腸直腸、膵臓、または転移性腺癌である請求項７１記載の方法。
【請求項７３】
加えて、さらなる抗癌剤を投与することを含む請求項６７ないし７２いずれか１記載の方法。
【請求項７４】
容器および該容器に含まれる組成物を含む製品であって、該組成物は請求項１、２８または２９記載の抗ＤＲ５抗体、またはその断片を含む、製品。
【請求項７５】
さらに、イン・ビトロまたはイン・ビボで前記抗ＤＲ５抗体を用いるための指示書を含む請求項７４記載の製品。
【請求項７６】
前記指示書が癌の治療に関する請求項７５記載の製品。

【図１】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図２Ｃ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図４Ｃ】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７Ａ】

【図１７Ｂ】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【公表番号】特表２００８−５３２４８７（Ｐ２００８−５３２４８７Ａ）
【公表日】平成２０年８月２１日（２００８．８．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５５４１８８（Ｐ２００７−５５４１８８）
【出願日】平成１８年１月３１日（２００６．１．３１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００３５７７
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０８３９７１
【国際公開日】平成１８年８月１０日（２００６．８．１０）
【出願人】（５９６１６８３１７）ジェネンテック・インコーポレーテッド (372)
【氏名又は名称原語表記】ＧＥＮＥＮＴＥＣＨ，ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】