Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの結晶性マレエート塩を開示する。結晶塩は９０％ＲＨ、２５℃において１重量％未満の水分吸収量、１２３℃の融点、および２３０ｍｇｍｌ-1超の水溶性を有する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は疾患の治療において有用な新しい化合物、そしてより詳細には、酸化窒素シンターゼの誘導性アイソフォームからの酸化窒素の不適切な発現が関与する状態の治療のためのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの新しい塩およびその医薬組成物を包含する。
【０００２】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは参照により本明細書に組み込まれる同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載され特許請求されている。
【背景技術】
【０００３】
酸化窒素（ＮＯ）は酵素酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）の数種のアイソフォームの何れか１つにより生産される生物活性フリーラジカルガスである。後にＮＯとして同定されたものの生理学的活性は、１９８０年代初頭に最初に発見され、このときアセチルコリンにより誘発される血管の弛緩は血管内皮の存在に依存していることがわかった。内皮から誘導され、次にこのような血管弛緩を媒介する内皮誘導弛緩因子（ＥＤＲＦ）と称されるようになった因子は、現在ではＮＯＳの１つのアイソフォームにより血管内皮内で生じたＮＯであることが知られている。血管弛緩剤としてのＮＯの活性は１００年以上もの間、知られている。更にＮＯは知られたニトロ血管弛緩剤、例えば亜硝酸アミルおよびニトログリセリンから誘導された活性物質種である。酸化窒素はまた可溶性のグアニレートサイクラーゼ（ｃＧＭＰ）の内因性刺激剤であり、即ち、ｃＧＭＰの生産を刺激する。ＮＯＳがＮ−モノメチルアルギニン（Ｌ−ＮＭＭＡ）により抑制されるとｃＧＭＰの生成は完全に防止される。内皮依存性弛緩に加えて、ＮＯは食細胞の細胞毒性および中枢神経系における細胞から細胞への連絡を含む生物学的作用の多くに関与していることがわかっている。
【０００４】
ＮＯとしてのＥＤＲＦの発見は、酵素ＮＯシンターゼによりアミノ酸Ｌ−アルギニンからＮＯが合成される生化学的経路の発見と一致していた。以下に示す少なくとも３種のＮＯシンターゼが存在する。
（ｉ）受容体または物理的刺激に応答してＮＯを放出する脳に存在する構成性Ｃａ＋＋／カルモジュリン依存性酵素；
（ii）内毒素およびサイトカインによる血管平滑筋、マクロファージ、内皮細胞および多くの他の細胞の活性化の後に誘導されるＣａ++非依存性酵素（１３０ｋＤタンパク質）；および、
（iii）受容体または物理的刺激に応答してＮＯを放出する内皮細胞に存在する構成性Ｃ
ａ++／カルモジュリン依存性酵素。
【０００５】
発現された後、誘導性酸化窒素シンターゼ（以降「ｉＮＯＳ」と称する）は長期間に渡り持続的にＮＯを発生する。臨床試験によれば、ＮＯの生産およびｉＮＯＳの発現は種々の慢性炎症性疾患、例えば慢性関節リューマチおよび骨関節炎（例えばＭｃＩｎｎｅｓ Ｉ.Ｂ．ｅｔ ａｌ.，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８４：１５１９（１９９６）参照）、炎症性腸疾患（例えばＬｕｎｄｂｅｒｇ Ｊ．Ｏ．Ｎ．ｅｔ ａｌ.，Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１６７３（１９９４）参照）および喘息（例えばＨａｍｉｄ，Ｑ．ｅｔ．ａｌ.，Ｌａｎｃｅｔ ３４２：１５１０（１９９３）参照）において増大し、そしてｉＮＯＳはこれらの慢性炎症性疾患における主要な病原性因子とされている。
【０００６】
即ちｉＮＯＳによる過剰なＮＯ生産の抑制は抗炎症性であると考えられる。しかしながら、ｅＮＯＳおよびｎＮＯＳからのＮＯの生産は正常な生理機能にかかわっているため、炎症の治療に使用されるいずれのＮＯＳ阻害剤も、ｅＮＯＳ生成ＮＯによる血圧の正常な生理学的調節およびｎＮＯＳ生成ＮＯによる非アドレナリン作用性、非コリン作用性の神経伝達が影響を受けない状態であり続けるように、ｉＮＯＳに対して選択的であることが望ましい。
【０００７】
全ての医薬品の化合物および組成物において、薬剤化合物の化学的および物理的安定性は薬剤物質の商業的開発において重要である。このような安定性には、周囲条件において特に水分に対して、そして、保存条件下における安定性が包含される。保存の種々の条件における向上した安定性は、市販品の寿命の間の種々の可能な保存条件を予測するために必要である。安定な薬剤は特殊な保存条件の使用ならびに頻繁な在庫交換を回避する。均一な粒径および表面積を有する薬剤物質を得るためには、薬剤のミリングを必要とする場合が多い製造工程の間も薬剤化合物は安定でなければならない。不安定な物質は多形の変化を起こす場合が多い。従って、安定性の特性を向上させる薬剤物質のいずれかの修飾は安定性がより低い物質よりも高い重要な利益をもたらす。
【０００８】
例えば同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載され特許請求されているＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのような数種のｉＮＯＳ阻害剤が報告されている。しかしながらその化合物は不定形の固体である。従って、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのようなｉＮＯＳ阻害剤の結晶固体形態を提供することが望ましい。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの新しい結晶塩、医薬組成物、新しい塩化合物の製造方法、医薬組成物の製造方法、および、酸化窒素シンターゼの構成性アイソフォームよりも酸化窒素シンターゼの誘導性アイソフォームを優先的に抑制またはモジュレートする化合物の塩を投与することによって、酸化窒素の合成を抑制またはモジュレートすることを必要とする対象においてこのような抑制またはモジュレートのための新しい塩化合物および組成物を用いる方法に関する。本発明の塩化合物は有用な酸化窒素シンターゼ抑制活性を有し、そして酸化窒素の合成または過剰合成が寄与的部分を形成する疾患または状態の治療または予防において有用であることが期待される。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
化学量論的には、新しい塩の単位格子はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの１分子およびマレイン酸の１分子である。
【００１１】
新しい塩は以下の物理的測定値、即ち、元素分析（例えば燃焼分析による）、融点および融解熱（示差走査熱量分析および熱重量分析）、屈折率（偏光顕微鏡）、Ｘ線粉末回折パターン、水分吸着（例えばＤＶＳ水分バランス）および振動特徴（ラマンスペクトル）の一部または全てにより特性化される。
【００１２】
本発明の新しい塩は関節炎のような特定の状態において生じる軟骨の変性が関与する疾患を治療するために使用できる。従って、Ｌ−アルギニンからのＮＯ生産を抑制することが好都合となる状態は、関節の状態、例えば慢性関節リューマチ、骨関節炎、通風性関節炎、若年性関節炎、敗血症性関節炎、脊椎関節炎、急性関節リューマチ、腸疾患に基づく関節炎（enteropathic arthritis）、神経障害性関節炎および化膿性関節炎を包含する。更にまた、軟骨細胞吸引のＮＯ誘導低下は関節炎、特に骨関節炎におけるマトリックスの損失および二次的な軟骨の石灰化をモジュレートする。
【００１３】
本発明の塩が有用であるその他の状態は、慢性または炎症性の腸疾患、心臓血管虚血、糖尿病、鬱血性心不全、心筋炎、アテローム性動脈硬化症、偏頭痛、緑内障、大動脈瘤、逆流性食道炎、下痢、過敏性腸症候群、嚢胞性線維症、気腫、喘息、気管支拡張症、痛覚過敏、脳虚血、血栓性卒中、全虚血（global ischemia）（心停止に二次的なもの）、多発性硬化症およびＮＯにより媒介される他の中枢神経系の障害、例えばパーキンソン病およびアルツハイマー病を包含する。ＮＯ抑制が有用である別の神経変性障害は低酸素症、低血糖症、癲癇のような疾患における、そして、外傷（例えば脊髄および頭部の傷害）における神経変性および／または神経壊死、高圧酸素痙攣および毒性、痴呆症、例えば前老年性痴呆症、および、ＡＩＤＳ関連痴呆症、シドナム舞踏病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、コルサコフ病、脳血管障害に関わる精神遅滞、睡眠障害、統合失調症、うつ病、月経前症候群（ＰＭＳ）に関連するうつ病または他の症状、不安症および敗血症性ショックを包含する。
【００１４】
本発明の塩はまた、身体原性の（侵害受容または神経病性の）急性および慢性の両方のものを含む疼痛のようなものの治療において酸化窒素の抑制が役割を果たす場合にも使用してよい。本発明の化合物は一般的なＮＳＡＩＤまたはオピオイド鎮痛剤が伝統的に投与されている何れかの状況において使用できる。
【００１５】
更にまた、本発明の塩によるＮＯ生産の抑制により治療できる別の障害には長期間オピエート鎮痛剤を必要とする患者におけるオピエート耐性、および、ベンゾジアゼピン使用患者におけるベンゾジアゼピン耐性および他の中毒挙動、例えばニコチンおよび摂食障害が包含される。本発明の化合物はまた抗菌剤としても使用してよい。
【００１６】
Ｌ−アルギニンからのＮＯ生産を抑制するために本発明の塩を使用してよい別の状態は、種々の因子により誘導される敗血症性および／または毒性のショックに関連する全身低血圧を包含し；ＴＮＦ、ＩＬ−１およびＩＬ−２のようなサイトカインを用いた治療において；および移植療法における短期間の免疫抑制に対するアジュバントとして使用してよい。
【００１７】
本発明の塩はまた眼の状態（例えば高眼圧症、網膜炎、ブドウ膜炎）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、糸球体腎炎、再狭窄、ウィルス感染の炎症性続発症、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、酸素誘導肺傷害、癌患者等におけるＩＬ２治療、悪液質、移植療法等における免疫抑制、胃腸運動性の障害、日焼け、湿疹、乾癬、歯肉炎、膵臓炎、感染症が原因の胃腸管の損傷、嚢胞性線維症、臓器移植療法における短期の免疫抑制のアジュバントのような機能不全免疫系の治療、分娩誘発、腺腫様ポリープ、腫瘍成育の制御、化学療法、化学予防および気管支炎においても有用である。
【００１８】
本発明はまた、治療有効量の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートを薬学的に許容される担体、希釈剤またはベヒクルと共に含有する医薬組成物であって、疼痛、喘息および他の気道の障害、癌、関節炎、網膜症および緑内障を含む眼の障害、炎症関連障害、例えば過敏性腸症候群、および酸化窒素の過剰な生産が役割を果たしている他の障害の治療のための医薬組成物に関する。
【００１９】
ヒトの治療に有用であるほか、この型は愛玩動物、外来種動物および家畜、例えば哺乳類、げっ歯類等の獣医科の治療にも有用である。より好ましい動物はウマ、イヌおよびネコを包含する。
【００２０】
定義
「治療する」、「治療している」および「治療」という用語は本明細書においては、予防療法、待機療法または回復療法を包含する。
【００２１】
「有効量」という用語は治療を行える用量を意味する。有効量は単回用量で、またはある期間にわたり分割用量において投与してよい。
【００２２】
「ＡＣＥ」という用語はアセトンを意味する。
【００２３】
「ＡＣＮ」という用語はアセトニトリルを意味する。
【００２４】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインに適用する場合「不定形」という用語は、本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子が無秩序の配列において存在し、識別可能な結晶格子または単位格子を形成しない固体状態を意味する。Ｘ線粉末回折に付す場合は、不定形のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは如何なる特徴的な結晶ピークも示さない。
【００２５】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインに適用する場合「結晶型」という用語は、本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子が配列して（ｉ）識別可能な単位格子を含み、そして（ｉｉ）Ｘ線照射に付した場合に回折ピークを生じるような、識別可能な結晶格子を形成する固体状態の形態を指す。
【００２６】
「結晶化」という用語は本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン出発原料の製造に関わる適用可能な状況に応じた結晶化および／または再結晶化を指す。
【００２７】
「ＤＭＦ」という用語はＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味する。
【００２８】
「Ｄ／Ｗ／Ａ」」という用語はＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、水およびアセトニトリルの３元溶媒系を指す。
【００２９】
「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン薬剤物質」という用語は本明細書においては、その用語を使用する文脈により明確化されるＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン自体であり、未製剤のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインまたは医薬組成物の成分として存在するＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインを指す。
【００３０】
「ＤＳＣ」という用語は示差走査熱量測定を意味する。
【００３１】
「ＨＰＬＣ」という用語は高速液体クロマトグラフィーを意味する。
【００３２】
「ＩＲ」という用語は赤外線を意味する。
【００３３】
「ＮＭＲ」という用語は核磁気共鳴を意味し、核磁気共鳴スペクトル分析に適用してよい。
【００３４】
「ｍｌ」という用語はミリリットルを意味する。
【００３５】
「ｍｇ」という用語はミリグラムを意味する。
【００３６】
「μｇ」という用語はマイクログラムを意味する。
【００３７】
「μｌ」という用語はマイクロリットルを意味する。
【００３８】
「核形成」という用語は本明細書においては溶液中の結晶の形成を意味する。
【００３９】
「純度」という用語は本明細書においては特段の記載が無い限り、従来のＨＰＬＣ試験によるＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの化学純度を意味する。
【００４０】
「ＰＸＲＤ」という用語は粉末Ｘ線回折を意味する。
【００４１】
「ｒｐｍ」という用語は分当たり回転数を意味する。
【００４２】
「結晶種添加」という用語は、本明細書においては、核形成を開始または促進する目的のための溶液中への結晶の添加を意味する。
【００４３】
「ＴＧＡ」という用語は熱重量分析を意味する。
【００４４】
「Ｔｍ」という用語は融点を意味する。
【００４５】
「両性イオン」という用語は実質電荷がゼロ値となるように正電荷および負電荷の両方を担持した分子を指す。
【００４６】
用途
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は、対象において特に炎症を治療するため、または、他の酸化窒素シンターゼ媒介障害の治療のため、例えば疼痛および頭痛の治療における鎮痛剤として、または、発熱の治療のための解熱剤として有用である。例えば、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は関節炎、例えば慢性関節リューマチ、脊髄関節症、痛風性関節炎、骨関節炎、全身性エリテマトーデス、若年性関節炎、急性関節リューマチ、腸疾患に基づく関節炎、神経障害性関節炎、乾癬性関節炎および化膿性関節炎の治療に有用であるが、これらに限定されない。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩がＬ−アルギニンからのＮＯ生産の抑制において好都合である状態は関節炎の状態を包含する。
【００４７】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は更に、喘息、気管支炎、月経痛（例えば月経困難）、早産、腱炎、滑液包炎、皮膚関連状態、例えば乾癬、湿疹、熱傷、日焼け、皮膚炎、膵臓炎、肝炎、および、術後炎症に起因するもの、例えば眼科手術に起因するもの、例えば白内障手術および屈折矯正手術に起因するものの治療において有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた炎症性腸疾患、クローン病、胃炎、過敏性腸症候群および潰瘍性結腸炎のような胃腸状態の治療にも有用である。
【００４８】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は癌、例えば結腸直腸癌および乳癌、肺癌、前立腺癌、膀胱癌、子宮癌および皮膚癌の予防または治療のために有用である。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は血管疾患、偏頭痛、結節性動脈周囲炎、甲状腺炎、再生不良性貧血、ホジキン病、硬皮症（sclerodoma）、リューマチ熱、Ｉ型糖尿病、神経筋接合部疾患、例えば重症筋無力症、白質症、例えば多発性硬化症、サルコイドーシス、ネフローゼ症候群、ベーチェット症候群、多発性筋炎、歯肉炎、腎炎、過敏症、傷害後の浮腫、心筋虚血等のような疾患における炎症および組織損傷の治療に有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた眼科疾患、例えば緑内障、網膜炎、網膜症、ブドウ膜炎、眼光恐怖症および眼部組織への急性の損傷に関連する炎症および疼痛の治療においても有用である。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の用途のうち特に興味深いものは、特に、緑内障の症状が酸化窒素媒介神経損傷の場合のように酸化窒素の生成により誘発されたものである緑内障の治療である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた肺の炎症、例えばウィルス感染に伴うもの、および嚢胞性線維症の治療においても有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた特定の中枢神経系の障害、例えば皮質痴呆、例えばアルツハイマー病、および卒中、虚血および外傷に起因する中枢神経系の損傷の治療のためにも有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は抗炎症剤、例えば関節炎の治療用のもの等としても有用であり、有害な副作用が顕著に低減されているという別の利点も伴う。
【００４９】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまたアレルギー性鼻炎、呼吸窮迫症候群、内毒素ショック症候群およびアテローム性動脈硬化症の治療においても有用である。
【００５０】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた疼痛、例えば術後疼痛、歯痛、筋肉痛、および癌に起因する疼痛の治療においても有用であるが、これらに限定されない。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はアルツハイマー病のような痴呆症の予防のために有用である。
【００５１】
ヒトの治療のほかに、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は愛玩動物、外来種動物および家畜、例えば哺乳類、げっ歯類等の獣医科の治療にも有用である。より好ましい動物はウマ、イヌおよびネコを包含する。
【００５２】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた、他の従来の抗炎症療法の部分的または完全な代替法である共療法（co-therapies）において、例えばステロイド、ＮＳＡＩＤ、ＣＯＸ−２選択的阻害剤、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、ＬＴＢ4拮抗剤およびＬＴＡ4ヒドロラーゼ阻害剤と共に使用してよい。
【００５３】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩がＮＯ生産の抑制において好都合である他の状態は、心臓血管虚血、糖尿病（Ｉ型またはＩＩ型）、鬱血性心不全、心筋炎、アテローム性動脈硬化症、偏頭痛、緑内障、大動脈瘤、逆流性食道炎、下痢、過敏性腸症候群、嚢胞性線維症、気腫、喘息、気管支拡張症、痛覚過敏（異痛）、脳虚血（局所的虚血、血栓性卒中および全虚血（例えば心停止に二次的なもの）の双方）、多発性硬化症およびＮＯにより媒介される他の中枢神経系の障害、例えばパーキンソン病を包含する。ＮＯ抑制が有用である別の神経変性障害は低酸素症、低血糖症、癲癇のような疾患における、そして、中枢神経系（ＣＮＳ）外傷（例えば脊髄および頭部の傷害）の場合における、神経変性および／または神経壊死、高圧酸素痙攣および毒性、痴呆症、例えば前老年性痴呆症、および、ＡＩＤＳ関連痴呆症、シドナム舞踏病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、コルサコフ病、脳血管障害に関わる精神遅滞、睡眠障害、統合失調症、うつ病、月経前症候群（ＰＭＳ）に関連するうつ病または他の症状、不安症および敗血症性ショックを包含する。
【００５４】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた身体原性の（侵害受容または神経病性の）急性および慢性の両方のものを含む疼痛の治療において有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた一般的なＮＳＡＩＤまたはオピオイド鎮痛剤が伝統的に投与されている神経病性の疼痛を含む何れかの状況において使用できる。
【００５５】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩により好都合に治療される更に別の障害または状態は、長期間オピエート鎮痛剤を必要とする患者におけるオピエート耐性、および、ベンゾジアゼピン使用患者におけるベンゾジアゼピン耐性および他の中毒挙動、例えばニコチン中毒、アルコール中毒および摂食障害が包含される。
【００５６】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまたオピエート、アルコールまたはタバコ中毒からの禁断症状の治療または予防のような、薬物禁断症状の治療または予防に有用である。
【００５７】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた抗菌剤または抗ウィルス剤と治療上組み合わせた場合に組織の損傷を予防するために有用である。
【００５８】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまたＬ−アルギニンからのＮＯ生産の抑制において、例えば種々の因子により誘導される敗血症性および／または毒性出血性ショックに関連する全身低血圧に有用であり；ＴＮＦ、ＩＬ−１およびＩＬ−２のようなサイトカインを用いた治療に有用であり；そして移植療法において短期間の免疫抑制剤に対するアジュバントとして有用である。
【００５９】
本発明は更に新生物の治療および予防のための本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の使用に関する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩および方法により治療可能または予防可能である新生物は脳の癌、骨の癌、白血病、リンパ腫、上皮細胞誘導新生物（上皮癌腫）、例えば基底細胞癌、腺癌、胃腸の癌、例えば口唇の癌、口腔の癌、食道癌、小腸の癌および胃癌、結腸癌、肝臓癌、膀胱癌、膵臓癌、卵巣癌、子宮癌、肺癌、乳癌および皮膚癌、例えば扁平上皮癌および基底細胞癌、前立腺癌、腎細胞癌およびその他の全身にわたる上皮細胞に関わる既知の癌を包含する。好ましくは、治療すべき新生物形成は胃腸の癌、肝臓癌、膀胱癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、子宮癌、肺癌、乳癌および皮膚癌、例えば扁平上皮および基底細胞の癌から選択される。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩および本発明の方法はまた放射線療法により起こる線維症を治療するために使用できる。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩および方法は家族性大腸腺腫症（ＦＡＰ）の対象を含む腺腫様ポリープを有する対象の治療に使用できる。更に、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩および方法はＦＡＰの危険性のある患者におけるポリープ形成を予防するために使用できる。
【００６０】
別の抗新生物剤との本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の複合治療は相乗作用をもたらすかもしくは、治療効果のために必要とされる副作用誘発薬剤の治療用量を低減するか、もしくは、副作用誘発薬剤により誘発される毒性の副作用の症状を直接低減することにより化学療法に伴う毒性の副作用を軽減する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は更に副作用を低減するか、または薬効を増強するための放射線療法の補助として有用である。
【００６１】
本発明においては、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩と治療上組み合わせることができる別の薬剤は酵素シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）を阻害できる何れかの治療薬を包含する。好ましくは、このようなＣＯＸ−２阻害剤は酵素シクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）と比較してＣＯＸ−２を選択的に阻害する。このようなＣＯＸ−２阻害剤は「ＣＯＸ−２選択的阻害剤」として知られている。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩と治療上組み合わせて使用するＣＯＸ−２選択的阻害剤は、セレコキシブ、バルデコキシブ、デラコキシブ、エトリコキシブ、ロフェコキシブ、ＡＢＴ−９６３（２−（３,４−ジフルロフェニル）−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブトキシ）−５−［４−（メチルスルホニル）フェニル−３（２Ｈ）−ピリダジノン；ＰＣＴ出願ＷＯ００／２４７１９記載）、またはメロキシカムを包含する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまたＣＯＸ−２選択的阻害剤のプロドラッグ、例えばパレコキシブと治療上組み合わせて好都合に使用できる。
【００６２】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩と組み合わせて使用する別の化学療法剤は、例えば以下の非包括的および非限定的なリストから選択できる。
【００６３】
アルファ−ジフルオロメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）、５−ＦＵ−フィブリノーゲン、アカンチホリック酸（acanthifolic acid）、アミノチアジアゾール、ブレキナールナトリウム(brequinar sodium)、カルモフール、Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ ＣＧＰ−３０６９４、シクロペンチルシトシン、シタラビンホスフェートステアレート、シタラビンコンジュゲート、Ｌｉｌｌｙ ＤＡＴＨＦ、Ｍｅｒｒｅｌ Ｄｏｗ ＤＤＦＣ、デザグアニン、ジデオキシシチジン、ジデオキシグアノシン、ジドックス、Ｙｏｓｈｉｔｏｍｉ ＤＭＤＣ、ドキシフルリジン、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＥＨＮＡ、Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．ＥＸ−０１５、ファザラビン、フロクスウリジン、フルダラビンホスフェート、５−フルオロウラシル、Ｎ−（２’−フラニジル）−５−フルオロウラシル、Ｄａｉｉｃｈｉ Ｓｅｉｙａｋｕ ＦＯ−１５２、イソプロピルピロリジン、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−１８８０１１、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−２６４６１８、メトベンザプリン、メトトレキセート、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＭＺＰＥＳ、ノルスペルミジン、ＮＣＩ ＮＳＣ−１２７７１６、ＮＣＩ ＮＳＣ−２６４８８０、ＮＣＩ ＮＳＣ−３９６６１、ＮＣＩ ＮＳＣ−６１２６７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＰＡＬＡ、ペントスタチン、ピリトレキシム、プリカマイシン、Ａｓａｈｉ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ＰＬ−ＡＣ、Ｔａｋｅｄａ ＴＡＣ−７８８、チオグアニン、チアゾフリン、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＴＩＦ、トリメトレキセート、チロシンキナーゼ阻害剤、チロシン蛋白質キナーゼ阻害剤、Ｔａｉｈｏ ＵＦＴ、ウリシチン、Ｓｈｉｏｎｏｇｉ ２４５−Ｓ、アルド−ホスファミド類縁体、アルトレタミン、アナキシロン（anaxrone）、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ ＢＢＲ−２２０７、ベストラブシル、ブドチタン、Ｗａｋｕｎａｇａ ＣＡ−１０２、カルボプラチン、カルムスチン、Ｃｈｉｎｏｉｎ−１３９、Ｃｈｉｎｏｉｎ−１５３、クロラムブシル、シスプラシン、シクロホスファミド、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ ＣＬ−２８６５５８、Ｓａｎｏｆｉ ＣＹ−２３３、シプラテート、Ｄｅｇｕｓｓａ Ｄ−１９−３８４、Ｓｕｍｉｍｏｔｏ ＤＡＣＨＰ（Ｍｙｒ）２、ジフェニルスピロムスチン、細胞増殖抑制ジ白金（diplatinum cytostatic）、Ｅｒｂａジスタマイシン誘導体、Ｃｈｕｇａｉ ＤＷＡ−２１１４Ｒ、ＩＴＩ Ｅ０９、エルムスチン、ＥｒｂａｍｏｎｔＦＣＥ−２４５１７、エストラムスチンホスフェートナトリウム、フォテムスチン、Ｕｎｉｍｅｄ Ｇ−６−Ｍ、Ｃｈｉｎｏｉｎ ＧＹＫＩ−１７２３０、ヘプスル−ファム（hepsul-fam）、イフォスファミド、イプロプラチン、ロムスチン、マホスファミド、ミトラクトール、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫ−１２１、ＮＣＩ ＮＳＣ−２６４３９５、ＮＣＩ ＮＳＣ−３４２２１５、オキサリプラチン、Ｕｐｊｏｈｎ ＰＣＮＵ、プレドニムスチン、Ｐｒｏｔｅｒ ＰＴＴ−１１９、ラニムスチン、セムスチン、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＳＫ＆Ｆ−１０１７７２、Ｙａｋｕｌｔ Ｈｏｎｓｈａ ＳＮ−２２、スピロムス−チン、Ｔａｎａｂｅ Ｓｅｉｙａｋｕ ＴＡ−０７７、タウロムスチン、テモゾロミド、テロキシロン、テトラプラチン、トリメラモール、Ｔａｉｈｏ ４１８１−Ａ、アクラルビシン、アクチノマイシンＤ、アクチノプラノン、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＡＤＲ−４５６、アエロプリシニン誘導体、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＡＮ−２０１−ＩＩ、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＡＮ−３、Ｎｉｐｐｏｎ Ｓｏｄａアニソマイシン、アントラサイクリン、アジノマイシン−Ａ、ビスカベリン、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＬ−６８５９、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２５０６７、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２５５５１、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２６６０５、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２７５５７、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２８４３８、ブレオマイシンスルフェート、ブリオスタチン−１、Ｔａｉｈｏ Ｃ−１０２７、カリケマイシン、クロモキシマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−１０２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−７９、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−８８Ａ、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ８９−Ａ１、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ９２−Ｂ、ジトリサルビシンＢ、Ｓｈｉｏｎｏｇｉ ＤＯＢ−４１、ドキソルビシン、ドキソルビシン−フィブリノーゲン、エルサミシン−Ａ、エピルビシン、エルブスタチン、エソルビシン、エスペラミシン−Ａ１、エスペラミシン−Ａ１ｂ、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＦＣＥ−２１９５４、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＫ−９７３、フォストリエシン、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＲ−９００４８２、グリドバクチン、グレガチン−Ａ、グリンカマイシン、ヘルビマイシン、イダルビシン、イルジンス（illudins）、カズサマイシン、ケサリロジンス、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＭ−５５３９、Ｋｉｒｉｎ Ｂｒｅｗｅｒｙ ＫＲＮ−８６０２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−５４３２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−５５９４、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−６１４９、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ ＬＬ−Ｄ４９１９４、Ｍｅｉｊｉ Ｓｅｉｋａ ＭＥ２３０３、メノガリル、マイトマイシン、ミトザントロン、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｍ−ＴＡＧ、ネオエナクチン、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫ−３１３、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫＴ−０１、ＳＲＩ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＮＳＣ−３５７７０４、オキサリシン、オキサウノマイシン、ペプロマイシン、ピラチン、ピラルビシン、ポロスラマイシン、ピリンダマイシンＡ、Ｔｏｂｉｓｈｉ ＲＡ−Ｉ、ラパマイシン、リゾキシン、ロドルビシン、シバノミシン、シエンマイシン（siwenmycin）、Ｓｕｍｉｔｏｍｏ ＳＭ−５８８７、Ｓｎｏｗ Ｂｒａｎｄ ＳＮ−７０６、Ｓｎｏｗ Ｂｒａｎｄ ＳＮ−０７、ソランギシン−Ａ、スパルソマイシン、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−２１０２０、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−７３１３Ｂ、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−９８１６Ｂ、ステフィマイシンＢ、Ｔａｉｈｏ ４１８１−２、タリソマイシン、Ｔａｋｅｄａ ＴＡＮ−８６８Ａ、テルペンテシン、スラジン、トリクロザリンＡ、Ｕｐｊｏｈｎ Ｕ−７３９７５、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−１００２８Ａ、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＷＦ−３４０５、Ｙｏｓｈｉｔｏｍｉ Ｙ−２５０２４ゾルビシン、アルファ−カロテン、アルファ−ジフルオロメチル−アルギニン、アシトレチン、Ｂｉｏｔｅｃ ＡＤ−５、Ｋｙｏｒｉｎ ＡＨＣ−５２、アルストニン、アモナフィド、アンフェチニル、アムサクリン、Ａｎｇｉｏｓｔａｔ、アンキノマイシン、アンチネオプラストンＡ１０、アンチネオプラストンＡ２、アンチネオプラストンＡ３、アンチネオプラストンＡ５、アンチネオプラストンＡＳ２−１、Ｈｅｎｋｅｌ ＡＰＤ、アフィジコリングリシネート、アスパラギナーゼ、Ａｖａｒｏｌ、バッカリン、バトラシリン、ベンフルロン、ベンゾトリプト、Ｉｐｓｅｎ−Ｂｅａｕｆｏｕｒ ＢＩＭ−２３０１５、ビサントレン、Ｂｒｉｓｔｏ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−４０４８１、Ｖｅｓｔａｒ ボロン−１０、ブロモホスファミド、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＢＷ−５０２、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＢＷ−７７３、カラセミド、カルメチゾール塩酸塩、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＣＤＡＦ，クロルスルファキノキサロン、Ｃｈｅｍｅｘ ＣＨＸ−２０５３、Ｃｈｅｍｅｘ ＣＨＸ−１００、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９２１、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９３７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９４１、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９５８、クランフェヌール(clanfenur)、クラビリデノン、ＩＣＮ化合物１２５９、ＩＣＮ化合物４７１１、Ｃｏｎｔｒａｃａｎ、Ｙａｋｕｌｔ Ｈｏｎｓｈａ ＣＰＴ−１１、クリスナトール、クラダーム(curaderm)、サイトカラシンＢ、シタラビン、シトシチン、Ｍｅｒｚ Ｄ−６０９、ＤＡＢＩＳマレエート、ダカルバジン、ダテリプチニウム(dateliptinium)、ジデムニン−Ｂ、ジヘマトポルフィリンエーテル、ジヒドロレンペロン、ジナリン、ジスタマイシン、Ｔｏｙｏ Ｐｈａｒｍａｒ ＤＭ−３４１、Ｔｏｙｏ Ｐｈａｒｍａｒ ＤＭ−７５、Ｄａｉｉｃｈ Ｓｅｉｙａｋｕ ＤＮ−９６９３、エリプラビン、エリプチニウムアセテート、Ｔｓｕｍｕｒａ ＥＰＭＴＣ、エルゴタミン、エトポシド、エトレチネート、フェンレチニド、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＲ−５７７０４、硝酸ガリウム、ゲンクワダフニン(genkwadaphnin)、Ｃｈｕｇａｉ ＧＬＡ−４３、Ｇｌａｘｏ ＧＲ−６３１７８、グリフォランＮＭＦ−５Ｎ、ヘキサデシルホスホコリン、Ｇｒｅｅｎ Ｃｒｏｓｓ ＨＯ−２２１、ホモハリングトニン、ヒドロキシ尿素、ＢＴＧ ＩＣＲＦ−１８７、イルモフォシン、イソグルタミン、イソトレチノイン、Ｏｔｓｕｋａ ＪＩ−３６、Ｒａｍｏｔ Ｋ−４７７、Ｏｔｓｕｋａ Ｋ−７６ＣＯＯＮａ、Ｋｕｒｅｈａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｋ−ＡＭ、ＭＥＣＴ Ｃｏｒｐ ＫＩ−８１１０、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ Ｌ−６２３、ロイコレグリン、ロニダミン、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ ＬＵ−２３−１１２、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−１８６６４１、ＮＣＩ（ＵＳ）ＭＡＰ、マリシン、Ｍｅｒｒｅｌ Ｄｏｗ ＭＤＬ−２７０４８、Ｍｅｄｃｏ ＭＥＤＲ−３４０、メルバロン、メロシアニン誘導体、メチルアニリノアクリジン、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ＭＧＩ−１３６、ミナクチビン、ミトナフィド、ミトキドン、モピダモール、モトレチニド、Ｚｅｎｙａｋｕ Ｋｏｇｙｏ ＭＳＴ−１６、Ｎ−（レチノイル）アミノ酸、Ｎｉｓｓｉｎ Ｆｌｏｕｒ Ｍｉｌｌｉｇ Ｎ−０２１、Ｎ−アシル化−デヒドロアラニン、ナファザトロム、Ｔａｉｓｈｏ ＮＣＵ−１９０、ノコダゾール誘導体、Ｎｏｒｍｏｓａｎｇ、ＮＣＩ ＮＳＣ−１４５８１３、ＮＣＩ ＮＳＣ−３６１４５６、ＮＣＩ ＮＳＣ−６０４７８２、ＮＣＩ ＮＳＣ−９５５８０、オクトオチド、Ｏｎｏ ＯＮＯ−１１２、オキザノシン、Ａｋｚｏ Ｏｒｇ−１０１７２、パンクレアチスタチン、パゼリプチン、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１１１７０７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１１５９３４、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１３１１４１、Ｐｉｅｒｒｅ Ｆａｂｒｅ ＰＥ−１００１、ＩＣＲＴペプチドＤ、ピロキサントロン、ポリヘマトポルフィリン、ポリプレイック酸(polypreic acid)、Ｅｆａｍｏｌポルフィリン、プロビマン、プロカルバジン、プログルミド、ＩｎｖｉｔｒｏｎプロテアーゼネキシンＩ、Ｔｏｂｉｓｈｉ ＲＡ−７００、ラゾキサン、Ｓａｐｐｏｒｏ Ｂｒｅｗｅｒｉｅｓ ＲＢＳ、レストリクチン−Ｐ、レテリプチン、レチノイン酸、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ ＲＰ−４９５３２、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ ＲＰ−５６９７６、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＳＫ＆Ｆ−１０４８６４、Ｓｕｍｉｔｏｍｏ ＳＭ−１０８、Ｋｕｒａｒａｙ ＳＭＡＮＣＳ、ＳｅａＰｈａｒｍ ＳＰ−１００９４、スパトール、スピロシクロプロパン誘導体、スピロゲルマニウム、Ｕｎｉｍｅｄ、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−５５４、ストリポルジノン、Ｓｔｙｐｏｌｄｉｏｎｅ、Ｓｕｎｔｏｒｙ ＳＵＮ ０２３７、Ｓｕｎｔｏｒｙ ＳＵＮ ２０７１、スーパオキシドジスムターゼ、Ｔｏｙａｍａ Ｔ−５０６、Ｔｏｙａｍａ Ｔ−６８０、タキソール、Ｔｅｉｊｉｎ ＴＥＩ−０３０３、テニポシド、タリブラスチン、Ｅａｓｔｍａｎ Ｋｏｄａｋ ＴＪＢ−２９、トコトリエノール、Ｔｏｐｏｓｔｉｎ、Ｔｅｉｊｉｎ ＴＴ−８２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−０１、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−１０２８、ウクライン、Ｅａｓｔｏｍａ Ｋｏｄａｋ ＵＳＢ−００６、硫酸ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンストラミド、ビノレルビン、ビントリプトール、ビンゾリジン、ウィザノリド、Ｙａｍａｎｏｕｃｈｉ ＹＭ−５３４、ウログアニリン、コンブレタスタチン、ドラスタチン、イダルビシン、エピルビシン、エストラム
スチン、シクロホスファミド、９−アミノ−２−（Ｓ）−カンプトテシン、トポテカン、イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）、エクセメスタン、デカペプチル（トリプトレリン）またはオメガ−３−脂肪酸。
【００６４】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩との組み合わせ療法に使用してよい放射線保護剤の例はＡＤ−５、アドクノン、アミホスチン類縁体、デトックス、ジメスナ、１−１０２、ＭＭ−１５９、Ｎ−アシル化−デヒドロアラニン、ＴＧＦ−Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、チプロチモド、アミホスチン、ＷＲ−１５１３２７、ＦＵＴ−１８７、ケトプロフェン経皮用、ナブメトン、スーパーオキシドジスムターゼ（Ｃｈｉｒｏｎ）およびスーパーオキシドジスムターゼＥｎｚｏｎを包含する。
【００６５】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた、血管形成関連の障害または状態、例えば腫瘍生育、転移、黄斑変性およびアテローム性動脈硬化症の治療または予防においても有用である。
【００６６】
別の実施形態においては、眼科の障害または状態、例えば緑内障の治療または予防のための治療組み合わせが提供される。例えば本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は緑内障に罹患している患者の眼圧を低減する薬剤との治療組み合わせ中に有利に使用される。このような眼圧低下剤にはラタノプロスト、トラボプロスト、ビマトプロストまたはウノプロストールが包含されるが、これらに限定されない。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩＋眼圧低下剤の治療組み合わせは、各々がその作用を異なる機序に作用させることにより達成すると考えられているため、有用である。
【００６７】
本発明の別の組み合わせにおいて、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は抗高脂血剤またはコレステロール低下剤、例えばベンゾチエピンまたはベンゾチアゼピン抗高脂血剤との治療組み合わせ中に使用できる。本発明の治療組み合わせにおいて有用なベンゾチエピン抗高脂血剤の例は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許５，９９４，３９１に記載されている。ベンゾチアゼピン抗高脂血剤の一部はＷＯ９３／１６０５５に記載されている。あるいは、本発明の化合物との組み合わせにおいて有用な抗高脂血剤またはコレステロール低下剤はＨＭＧ Ｃｏ−Ａ還元酵素阻害剤であることができる。本発明の治療組み合わせにおいて有用なＨＭＧ ＣＯ−Ａ還元剤阻害剤の例は、個々に、ベンフルオレクス、フルバスタチン、ロバスタチン、プロバスタチン、シンバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ベルバスタチン、ＺＤ−９７２０（ＰＣＴ出願ＷＯ９７／０６８０２記載）、ＺＤ−４５２２（カルシウム塩はＣＡＳ Ｎｏ．１４７０９８−２０−２；ナトリウム塩はＣＡＳ Ｎｏ．１４７０９８−１８−８；欧州特許ＥＰ５２１４７１に記載）、ＢＭＳ１８０４３１（ＣＡＳ Ｎｏ．１２９８２９−０３−４）またはＮＫ−１０４（ＣＡＳ Ｎｏ．１４１７５０−６３−２）を包含する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩＋抗高脂血剤またはコレステロール低下剤の治療組み合わせは例えば血管内のアテローム性動脈硬化性の病変の形成の危険性を低減する場合に有用である。例えばアテローム性動脈硬化性の病変は血管の炎症部位から生じる場合が多い。抗高脂血剤またはコレステロール低下剤は血中の脂質濃度を低下させることによりアテローム性動脈硬化性の病変の形成の危険性を低減する。単一の作用機序に本発明を限定しないが、本発明の組み合わせのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の一つの態様は、協調して作用し、例えば血中脂質濃度の低下と同調した血管の炎症の低減によってアテローム性動脈硬化性の病変の進歩した制御をもたらすと考えられる。
【００６８】
本発明の別の実施形態においては、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は中枢神経の状態または障害、例えば偏頭痛の治療のための他の化合物または治療法と組み合わせて使用できる。例えば、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はカフェイン、５−ＨＴ−１Ｂ／１Ｄアゴニスト（例えばトリプタン、例えばスマトリプタン、ナラトリプタン、ゾルミトリプタン、リザトリプタン、アルモトリプタンまたはフロバトリプタン）、ドーパミンＤ４拮抗剤（例えばソネピプラゾール）、アスピリン、アセトアミノフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ナプロキセンナトリウム、イソメテプテン、ジクロラルフェナゾン、ブタルビタール、麦角アルカロイド（例えばエルゴタミン、ジヒドロエルゴタミン、ブロモクリプチン、エルゴノビン、または、メチルエルゴノビン）、３環系抗欝剤（例えばアミトリプチリンまたはノルトリプチリン）、セロトニン拮抗剤（例えばメチセルギドまたはシプロヘプタジン）、ベータ−アドレナリン拮抗剤（例えばプロプラノロール、チモロール、アテノロール、ナドロールまたはメトプロロール）またはモノアミンオキシダーゼ阻害剤（例えばフェネルジンまたはイソカルボキサジド）との治療組み合わせ中に使用できる。
【００６９】
別の実施形態は本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩とオピオイド化合物の治療組み合わせを提供する。この組み合わせに有用なオピオイド化合物は、例えば、モルヒネ、メタドン、ヒドロモルホン、オキシモルホン、レボルファノール、レバロルファン、コデイン、ジヒドロコデイン、ジヒドロヒドロキシコデイノン、ペンタゾシン、ヒドロコドン、オキシコドン、ナルメフェン、エトルフィン、レボルファノール、フェンタニル、スフェンタニル、ＤＡＭＧＯ、ブトルファノール、ブプレノルフィン、ナロキソン、ナルトレキソン、ＣＴＯＰ、ジプレノルフィン、ベータ−フナルトレキサミン、ナロキソナジン、ナロルフィン、ペンタゾシン、ナルブフィン、ナロキソンベンゾイルヒドラゾン、ブレマゾシン、エチルケトサイクラゾシン、Ｕ５０，４８８、Ｕ６９，５９３、スピラドリン、ノル−ビナルトルフィミン、ナルトリンドール、ＤＰＤＰＥ、［Ｄ−ｌａ2，ｇｌｕ4］デルトルフィン、ＤＳＬＥＴ、メト−エンケファリン、ロイ−エンケファリン、ベータ−エンドルフィン、ダイノルフィンＡ、ダイノルフィンＢおよびαネオエンドルフィンを包含するが、これらに限定されない。オピオイド化合物との本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の組み合わせの好都合な点は、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩がオピオイド化合物の用量を低減し、これにより、オピオイド中毒のようなオピオイドの副作用の危険性や重症度を低減できる点である。
【００７０】
代表的な実施例
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の製造方法は参照により本明細書に組み込まれる、同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載されている。
慨すればＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の合成は以下の実施例１に記載する通り実施してよい。
【００７１】
実施例１
【化１】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン、２塩酸塩
【００７２】
実施例−１Ａ）Ｎ−Ｂｏｃ−システアミン
【化２】
３Ｌ容の４口ＲＢフラスコを２０分間窒素パージし、次に順次、２−アミノエタンチオール塩酸塩（１１３.６ｇ、１モル）、ジ−ｔ−ブチル−ジカーボネート（２１８.３ｇ、１モル）およびトルエン５００ｍｌを添加した。混合物を氷水バスで冷却し、１０分間窒素パージした。水酸化ナトリウム（２.５Ｎ、８８０ｍｌ、２.２モル）を０℃〜１１℃で約１.５時間内に攪拌混合物に添加した。水酸化ナトリウムの添加が終了した後、冷却バスを除去し、得られた反応混合物を室温に戻し、一夜周囲温度で攪拌した。これにより表題化合物の溶液を得た。
【００７３】
実施例−１Ｂ）
【化３】
実施例−１Ａの生成物溶液を氷水バス中で冷却した。クロロアセトン（１０１.８ｇ、１.１モル）の試料を８℃〜１１℃で約５０分かけて激しく攪拌した反応混合物に添加した。クロロアセトンの添加が終了した後、冷却バスをはずし、得られた反応混合物を一夜室温で攪拌した。トルエン層を分離し、水（２５０ｍｌ）で洗浄し、ハウス真空下、次いで高真空下に８５℃でロータリーエバポレーター上で濃縮し、粗製の表題化合物（２２５.７ｇ、９６.７％）を得た。1Ｈ ＮＭＲ (ＣＤＣｌ3, ４００ＭＨｚ)δ ４.９５(ｂｓ, １Ｈ), ３.２０ (ｍ, ４Ｈ), ２.５４ (ｔ, ２Ｈ), ２.２０ (ｓ, ３Ｈ), １.３５ (ｓ, ９Ｈ)。
【００７４】
実施例−１Ｃ）［２−［［（４−メチル−２，５−ジオキソ−４−イミダゾリジニル）メチル］チオ］エチル］カルバミン酸、１，１−ジメチルエチルエステル
【化４】
オーバーヘッド攪拌機、熱電対および空フラスコと苛性アルカリトラップに連結したコンデンサーを備えた３Ｌ容の４口ＲＢフラスコに、実施例−１Ｂの生成物（７０ｇ、０.３モル）、無水エタノール（８０ｍｌ）、シアン化ナトリウム（１９.１ｇ、０.３９モル）、炭酸アンモニウム（４３.３ｇ、０.４５モル）および水（７２０ｍｌ）をこの順序で添加した。４つ目の口を蓋で閉鎖した。得られた反応混合物を６時間６７〜６８℃に加熱した。その後ほぼ透明な茶色溶液を室温に冷却した。冷却により固体が形成し始め、そして非均質な混合物を一夜室温で攪拌した。次に反応混合物を−２℃〜２℃で約１時間、ｐＨ２にまで１２％塩酸で酸性化した。冷反応混合物を更に３０分間ｐＨ２で攪拌し、次に濾過した。フラスコを蒸留水（２ｘ２５０ｍｌ）ですすぎ、各すすぎ液を用いて固体ケーキを洗浄した。固体を再度蒸留水（２ｘ２５０ｍｌ）で洗浄し、次に４日間風乾した。乾燥した固体を０.５時間トルエン２００ｍｌで磨砕した。スラリーを濾過した。固体を順次、トルエン（５０ｍｌ）およびトルエン／ヘキサンの１：４比（１００ｍｌ）ですすぎ、次に一夜室温で風乾して表題化合物を８３.１％収率で得た。融点１３４〜１３６℃。1Ｈ ＮＭＲ (ＤＭＳＯd6，４００ＭＨｚ) δ １０.６２ (ｓ, １Ｈ), ７.８５ (ｓ，１Ｈ)，６.８３（ｍ，０.９Ｈ），６.４８（ｂｓ，０.１Ｈ），３.２９（ｓ，２Ｈ），２.９９（ｍ，２Ｈ），２.７１(ｓ, ２Ｈ), ２.９５ (ｍ, ２Ｈ), １.３２ (ｓ, ９Ｈ), １.２４ (ｓ, ３Ｈ) ; 13Ｃ ＮＭＲ (ＤＭＳＯd6，４００ＭＨｚ) δ １７８.１, １５７.１, １５６.１, ７８.４，６３.７，４０.７，３９.４，３３.２，２８.９，２３.８。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓについての分析：
計算値：Ｃ，４７.５１；Ｈ，６.９８；Ｎ，１３.８５；Ｓ，１０.５７
測定値：Ｃ，４７.７６；Ｈ，６.８８；Ｎ，１３.７７；Ｓ，１０.７５
【００７５】
実施例−１Ｄ）ＲおよびＳ−［２−［［（４−メチル−２，５−ジオキソ−４−イミダゾリジニル）メチル］チオ］エチル］カルバミン酸、１，１−ジメチルエチルエステル
【化５】
実施例−１Ｃの反応生成物をメタノールを溶離剤としてＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＡＤカラム上でそのＲおよびＳエナンチオマーに分離した。Ｓ異性体が最初に溶出する異性体であり、その後、Ｒエナンチオマーが得られた。両方の異性体を用いてその後の変換を行った。
【００７６】
Ｓエナンチオマー：
２５℃、ＭｅＯＨ中の［α］＝＋４３.０（３６５ｎｍ）。1ＨＮＭＲ：（４００ｍＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ １.４９ (ｓ, ９Ｈ), ２.０５ (ｓ，３Ｈ), ２.６５ (ｔ，２Ｈ), ２.９ (ｑ, ２Ｈ, ｄ), ３.２０ (ｍ, ２Ｈ)。ＩＲ：λｃｍ-1 ＝１７７２，１７０９。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓ（分子量：３０３.３８）についての分析：
計算値：Ｃ，４７.５１；Ｈ，６.９８；Ｎ，１３.８５
測定値：Ｃ，４７.３９；Ｈ，６.６２；Ｎ，１３.８３
Ｍ＋Ｈ＝３０４
【００７７】
Ｒエナンチオマー：
２５℃、ＭｅＯＨ中の［α］＝−４６.３（３６５ｎｍ）。1Ｈ ＮＭＲ：(４００ｍＨｚ，ＣＤ3ＯＤ)δ １.４８ (ｓ，９Ｈ), ２.０５ (ｓ，３Ｈ), ２.６５ (ｔ, ２Ｈ), ２.８５ (ｑ, ２Ｈ, ｄ), ３.１８ (ｍ, ２Ｈ)。ＩＲ：λｃｍ-1 ＝１７７０，１７１１。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓ（分子量：３０３.３８）についての分析：
計算値：Ｃ，４７.５１；Ｈ，６.９８；Ｎ，１３.８５
測定値：Ｃ，４８.１５；Ｈ，７.０４；Ｎ，１４.３７
Ｍ＋Ｈ＝３０４
【００７８】
実施例−１Ｅ）Ｓ−（２−アミノエチル）−２−メチル−Ｌ−システイン
【化６】
酸加水分解法：
蒸留コンデンサー付の５００ｍｌ容の３口丸底フラスコに実施例−１ＤのＲ異性体生成物（４５.８ｇ、１５０.９ミリモル）を添加し、そして攪拌しながら室温で４８％水性ＨＢｒ（１６０ｍｌ）で少しずつ処理した。ガス発生が停止した後、マントルヒーターを用いてポット温度が１２６℃に達するまで混合物を加熱し、その間、揮発性の臭化ｔ−ブチル（沸点７２〜７４℃）、次いで少量の水性ＨＢｒ（約１５ｍｌ）を留去した。蒸留コンデンサーを還流コンデンサーと交換し、そして混合物を３０時間還流下に加熱した。溶液を濃縮し、残留物を水（２５０ｍｌ）に溶解し、そして、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）５０ＷＸ４−２００イオン交換樹脂（８.５ｘ１１ｃｍ）にロードし、水（２Ｌ）、次いで希水酸化アンモニア水溶液（２８〜３０％の水酸化アンモニウム３０ｍｌを水で１０００ｍｌに希釈した、３Ｌ）で溶離した。所望の生成物を含有する画分を合わせ、濃縮し、２時間７５〜８０℃で真空下に乾燥し、白色固体として表題化合物Ｓ−（２−アミノエチル）−２−メチル−Ｌ−システイン２２.１ｇ（８２％）を得た。プロトンおよびＣ−１３ＮＭＲスペクトルは表題化合物と一致した。融点１５７℃。1Ｈ ＮＭＲ (４００ＭＨｚ，Ｄ2Ｏ)δ １.１９ (３Ｈ, ｓ)，２.５３ （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３.６Ｈｚ），２.５７−２.７２（２Ｈ，ｍ），２.９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３.６Ｈｚ），２.９２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６.８Ｈｚ）；13Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，Ｄ2Ｏ），δ２４.７，３１.３，３８.９，４０.９，５９.６，１８０.７。
Ｃ6Ｈ14Ｎ2Ｏ2Ｓ＋０.１Ｈ2Ｏについての分析：
計算値：Ｃ，４０.０２；Ｈ，７.９５；Ｎ，１５.５６；Ｓ，１７.８１
測定値：Ｃ，３９.９３；Ｈ，７.９８；Ｎ，１５.３８；Ｓ，１７.７０
【００７９】
塩基加水分解法：
攪拌機を装着したステンレス製のオートクレーブに実施例−１ＤのＲ異性体生成物２４.２ｇ（０.０８モル）を添加した。装置を窒素パージした後、１０％苛性ソーダ１２８ｇ（０.３２モル）を添加して溶液とした。オートクレーブを密封し、３０時間１２０℃に加熱した。室温に冷却した後、オートクレーブを排気して表題化合物のナトリウム塩の水溶液１４２ｍｌ（１５１ｇ）を得た。Ｈ1ＮＭＲ（試料をＨＣｌで酸性化し、Ｄ2Ｏで希釈、４００ＭＨｚ）：δ １.４７ (ｓ, ３Ｈ)，２.７５（ｍ，２Ｈ），２.９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４.８Ｈｚ)，３.０６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６.４Ｈｚ），３.１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４.８Ｈｚ）。Ｃ13ＮＭＲ（試料をＨＣｌで酸性化し、Ｄ2Ｏで希釈、１００ＭＨｚ）：δ１７２.９，６０.８，３９.１，３９.０，３０.４，２２.２。ＭＳ（ＭＳ／ＣＩ−ＬＣ）Ｍ＋１ １７９。
【００８０】
ＤＢＵ（２１８μＬ；１.４６ミリモル）およびエチルアセトイミデート塩酸塩（１７１ｍｇ；１.３４ミリモル）を室温（〜２０℃）で２５ｍｌ容の１口丸底フラスコ中エタノール（６ｍｌ）に溶解した。実施例−１Ｅの表題化合物（２００ｍｇ;１.１２ミリモル）をこの溶液に１回で添加した。実施例−１Ｅの表題化合物が消費されるまで（１〜２時間）混合物を攪拌した。混合物をアイスバス中で冷却し、次に６ＭＨＣｌ（８３０μＬ）で処理した。1Ｈ ＮＭＲ分析によれば化学収率は９５モル％以上であった。溶媒を蒸発させ、実施例−１の表題化合物を逆相またはイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。
【００８１】
塩基加水分解反応産物の実施例−１Ｅの表題化合物約２０ｇを含有する溶液２１０ｇｍを５００ｍｌ容の３口丸底フラスコ内に投入した。装置にメカニカルスターラー、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置（２０ｍｌ容、ストップコック付）、コンデンサーおよび温度コントローラーを装着した。混合物から水（１４０ｍｌ）を留去した。１−ブタノール（１５０ｍｌ）をポットに添加し、残余の水（３７ｍｌ）を共沸蒸留した。ポット温度が１１７℃になるまで蒸留により更に１−ブタノール（１３ｍｌ）を除去した。ブタノールスラリーを室温に冷却し、セライトパッドで濾過した。塩を１−ブタノール（２ｘ２０ｍｌ）で洗浄した。ＤＢＵ（２１.８μＬ；１４６ミリモル）およびエチルアセトイミデート塩酸塩（１７.１ｍｇ；１３４ミリモル）を室温で５００ｍＬ容の３口丸底フラスコ中の１−ブタノール（４０ｍｌ）に溶解した。装置にメカニカルスターラー、添加漏斗および温度プローブを装着した。実施例−１Ｅの表題化合物／１−ブタノール溶液を添加漏斗に入れ、ポット温度を２５℃未満に維持しながらエチルアセトイミデート／ＤＢＵの溶液に添加した。出発物質が消費されるまで（２〜３時間）混合物を攪拌した。濃塩酸（９４ｍｌ）および水（１００ｍｌ）の溶液を１Ｌの３口丸底フラスコにいれ、０℃に冷却した。装置にメカニカルスターラー、添加漏斗および温度プローブを装着した。反応混合物を添加漏斗に入れた。反応混合物をＨＣｌ水溶液に添加し、その間、温度を２５℃未満に維持した。酢酸エチル（１００ｍｌ）を溶液に添加し、層を分離させた。水層を再度酢酸エチル（１００ｍｌ）で洗浄した。1Ｈ ＮＭＲ分析によれば化学収率は９５モル％以上であった。実施例−１のこの表題化合物を逆相、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィーにより精製した。1Ｈ ＮＭＲ (４００ＭＨｚ，Ｄ2Ｏ)δ １.４９ (３Ｈ, ｓ)，２.０８ （３Ｈ，ｓ），２.７４（２Ｈ，ｍ），２.９１（１Ｈ，ｄ），３.１７（１Ｈ，ｄ），３.３５（２Ｈ，ｔ）。
【００８２】
本発明の好ましい実施形態においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの両性イオンをＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート塩の製造の前に得る。以下の説明はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの両性イオンを得る好ましい方法を記載している。
【００８３】
実施例２：両性イオンの調製
両性イオンを得る１つの方法において、ウォーター・ストリップを用いてカチオン交換カラム後の過剰のＨＣｌを除去する。別法として、過剰な酸はアニオン交換樹脂を用いてＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン濃縮物から除去してよい。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのモノヒドロクロロまたは遊離の両性イオンがアニオン交換樹脂を用いて調製できることが更に発見された。アニオン交換法はその単純性のため、塩酸塩および遊離の両性イオンを調製するために好適である。遊離の両性イオンは別の塩形態の医薬の製造のために特に有用である。
【００８４】
図１は化合物滴定曲線の略図である。親のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子は３つイオン化可能な基を有し、そして、４つのイオン化状態で存在できる。
【００８５】
低ｐＨにおいては、分子は＋２荷電の遊離の酸として存在し、カルボン酸、アミンおよびアミジン部分はプロトン化されている。これは２塩酸塩のイオン化状態である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン（２塩酸塩）の最初のロットは約０.３当量の過剰ＨＣｌを含有していた。
【００８６】
ｐＨが上昇するに従い、カルボン酸基は脱プロトン化される最初の基となり、そしてこれにより＋１の分子上の実質電荷がもたらされる。ｐＨの上昇がＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインへの水酸化ナトリウムの添加により生じる場合は、ナトリウムの２塩酸塩が形成される。ｐＨの上昇がアニオン交換過程によるクロリドイオンの除去による場合は、生成物は、ナトリウムを有さない１塩酸塩である。
【００８７】
ｐＨが更に上昇するに従い、アミン基は脱プロトン化（約ｐＫａ＝８.４）して分子の中性の両性イオン形態を生じる。正電荷はアミジン上になお残存し、負電荷はカルボキシル基上になお残存する。このような物質が２塩酸塩への水酸化ナトリウムの添加により形成される場合は、得られる生成物は塩化ナトリウム１当量と混合されたモノヒドロクロロナトリウム塩である。アニオン交換樹脂法により製造された物質は遊離の両性イオンである。
【００８８】
更にｐＨが上昇すると、アミジンイオンの脱プロトン化が起こる（ｐＫａ〜１２.５）。このｐＨ範囲の分子は遊離の塩基および酸の塩である。負荷電された分子はアニオン交換樹脂に結合するため、遊離の塩基は好ましくはアニオン交換法では製造しない。
【００８９】
実施例３：遊離の両性イオンの調製
約１５％（容量）の濃塩酸２３９ｍｌ中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約０.８ｇを含むカチオン交換カラムカットを合わせ、６０℃のロータリーエバポレーター内で濃縮して油状物とした。油状物を脱イオン水で３０ｍｌにまで希釈した。未洗浄のＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲＡ４００（ＯＨ）５ｇをバッチ式で溶液に添加した。１.３４の初期ｐＨから約２.１までｐＨが上昇した。更に樹脂５ｇを添加したところｐＨは急速に９.０超に上昇した。樹脂を濾去し、濾液の最終ｐＨは９.８１となった。樹脂を脱イオン水で洗浄し、洗浄液を個々に収集した。
【００９０】
濾液を６０℃でロータリーエバポレーターにより濃縮し油状物とした。油状物は固化しなかった。ｎ−プロパノール約２０ｍｌを油状物に添加し、ロータリーエバポレーター濃縮を継続した。いくらかの粘稠で泡状の白色固体が一過性に形成したが、これらは油状物に戻った。出発物質、最終油状物、カラム洗浄液および濾液をＨＰＬＣで分析した。
【００９１】
滴定曲線
Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ４００（ＯＨ）樹脂６０ｇを４.７％（重量）の水酸化アンモニウム（２８％水酸化アンモニウム５０ｍｌ、脱イオン水２５０ｍｌ）で洗浄し、次いで、脱イオン水で十分洗浄した。最終電導度は６.１μＳであった。
【００９２】
ＨＣｌ／水の溶液１４２ｍｌ中Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約０.９ｇを含有するカチオン交換カラムカットを６０℃でロータリーエバポレーターで濃縮して油状物とした。脱イオン水で６０ｍｌに希釈したこの油状物に、攪拌しながら洗浄されたアニオン交換樹脂のアリコート０.５ｇを添加した。樹脂の各アリコートを添加した５分後、溶液のｐＨを測定し、試料をシリンジフィルターを介して採取した。合計で９ｇのアニオン交換樹脂を添加した。最終ｐＨは１０.８であった。樹脂を濾去し、濾液をロータリーエバポレーターで６０℃で濃縮して油状物とし、固体の形成はなかった。出発物質、最終濾液および全ての中間的な試料をＨＰＬＣおよびクロリドに関するイオンクロマトグラフィーにより試験した。
【００９３】
実施例４：過剰なＨＣｌの除去
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約３０５ｍｇ／ｍｌおよび０.２３当量の過剰のＨＣｌを含有する試料３.３ｇに、脱イオン水１６.７ｇを添加した。ｐＨは１.０４であった。この溶液１４ｍｌに、予め洗浄したＡｍｂｅｒｌｉｔｅ４００（ＯＨ）樹脂を添加し、ｐＨ２.５とした。アニオン交換処理により溶液の色は明黄色〜透明に明色化した。樹脂を濾去し、出発物質および濾液の生成物をクロリド滴定およびより厳密なＨＰＬＣにより分析した。
【００９４】
実施例５：遊離の両性イオンの調製
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約１ｇを含有する試料３.３ｇを２０ｇに希釈した。予備洗浄したＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ４００（ＯＨ）樹脂のアリコートを溶液に添加し、試料を定期的にシリンジフィルターを介して採取した。溶液中の樹脂を濾去し、次に濾液に新しい樹脂を添加し続けることにより、ｐＨ７.１および８.８で中間樹脂の濾過を実施した。これはクロリドの除去の平衡を促進し、生成物の吸着を最小限とするために実施した。１１.２の最終ｐＨが得られた後、樹脂を濾去した。出発物質、中間試料および最終濾液を分析した。濾過した樹脂を脱イオン水２０ｍｌに再懸濁し、濃塩酸を添加してｐＨを低下させた。試料をｐＨ８.１３および１.６３で採取し、ＨＰＬＣで分析した。
【００９５】
実施例６：遊離の両性イオンの調製
ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲＡ４００（Ｃｌ）樹脂を３ＭＨＣｌ、水、次いで３ＭＮａＯＨですすいだ。アリコートは樹脂１０ｇ当たり１００ｍｌとした。この操作を３回反復することにより樹脂を清浄化し、ＯＨ型を形成した。水による最終のすすぎは溶離した水の導電性が２μＳとなるまで行った。次に樹脂を用いてＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の５０ｍｇ／ｍｌ溶液４０ｍｌを滴定した。濃度を両性イオンの当量について表示した。滴定の間にわたりアリコートを採取し、濾過し、ＨＰＬＣで分析した。アリコートの部分試料を温存して第２のＨＰＬＣ分析用とし、滴定の１週間後に実施して試料の安定性を評価した。更に別のアリコートを採取してイオン選択性電極を用いたＣｌ分析に付した。ｐＨもまた滴定の間を通してモニタリングした。
【００９６】
実施例７：両性イオンの調製
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約２ｇを含有する試料７ｇを脱イオン水で４０ｇに希釈した。予め洗浄したＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ（ＯＨ）樹脂約７.５ｇを添加してｐＨを６.５とした。樹脂を濾去した。週末を通して静置したところ、濾液は微細な沈殿の兆候を示した。溶液を顕微鏡で観察したところ、粒子は見られなかった。次に濾液の試料を窒素下に乾燥し、粘稠な油状物（２.１３ｇ）を得た。
【００９７】
ＨＰＬＣ法
ポンプＡ：２０ｍＭＫＨ2ＰＯ4、１０ｍＭペンタンスルホン酸、リン酸でｐＨ＝３に調整ポンプＢ：アセトニトリル
勾配：０分には０％Ｂ、１５分には２６％Ｂ、１５.１分には０％Ｂ
カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ１２０Ａ、５μｍ、２.６ｘ１５０ｍｍ
波長＝２０５ｎｍ
【００９８】
実施例８：遊離の両性イオンの調製
第１の実験によって水性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩溶液のｐＨは、おそらくはクロリドイオンの除去によりアニオン交換樹脂を用いて調節できることが示された。１.３７および１.８４の相対保持時間（ＲＲＴ）を有する２種の不純物が約１〜２％で新たに形成された。新しい不純物は未洗浄の樹脂から生じたものと考えられた。ＨＰＬＣ結果を以下の表１にまとめた。
【００９９】
【表１】
【０１００】
図２はｐＨを調節するためにアニオン交換樹脂を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの擬似滴定曲線を示す。ひし形（実線）はｐＨであり、四角（破線）はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン（初期値のパーセント、イオンクロマトグラフィーによる）である。図３はｐＨを調節するためにアニオン交換樹脂を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの擬似滴定曲線を示す。ひし形（実線）はｐＨであり、三角（破線）はクロリド（イオンクロマトグラフィーによる）である。
【０１０１】
これらの曲線は、試料が反応の進行中に採取されたため、そして、樹脂の漸増量を添加する前には真の平衡は達成されていなかったため、真の滴定曲線ではない。しかしなお、図２および図３のグラフは予測された傾向を示していた。樹脂をＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン溶液に添加するに従い、ｐＨは上昇し、ｐＨ２、９および１１近傍の傾きが変化していた。より遅いｐＨ上昇はそれぞれ、カルボン酸、アミンおよびアミジン官能基のｐＫを表す。ｐＨ１０以上ではＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの溶液中の濃度は低下する。この時点でＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは実質の負電荷を獲得しており、樹脂に結合している。クロリドの結果は試料間のある程度の変動を示しているが、全般的にはｐＨ上昇に伴うクロリド含量の低下の傾向を示している。最終クロリド含量は約０.０４モル当量である。
【０１０２】
画分のＨＰＬＣの結果は試料の分解を示していなかった。上記実験の反復において、得られた試料をＨＰＬＣで分析した。出発物質と数時間以内のｐＨ１１での生成物のＨＰＬＣ結果の間には差はなかった。しかしながら、約１０日間室温で保存した後の高ｐＨ試料ではいくらかの分解ピークが約２〜３％のピーク面積で観察された。
【０１０３】
実施例９：遊離の両性イオンの調製
この実施例で観察された結果は前の実施例で観察された結果を反映していた。ここで使用したクロリド特異的な電極はＣｌ含量を測定するものであり、データのノイズははるかに小さかった（図４参照）。データはＣｌ ９８％の除去においてｐＨ〜１０.８５が達成されることを示している。より多くのＣｌを除去できるが、それにより樹脂への化合物の結合が多大となる（図５参照）。樹脂結合に起因する化合物のこの損失は滴定の終り頃に樹脂を濾過し、少量の新しい樹脂で交換することにより最小限にできる。この操作によりクロリドの除去の平衡が促進され、結合による化合物の損失に使用される部位を最小限にできる。
【０１０４】
図４はＩＲＡ−４００アニオン交換樹脂（Ｒｏｈｍ＆Ｈａａｓ Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ，Ｒｈｏｍ＆Ｈａａｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａより入手可能）を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線を示す。図５はｐＨ上昇に伴う関連する結合データを示す。
【０１０５】
ＨＰＬＣ分析はイオン対形成勾配法を用いて実施した。方法はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインを塩基性とした場合に予測される分解生成物の存在を検出することがわかっている。以下の表からわかるとおり、データは分解は即時的に起きているのではなく、むしろ数日間の期間にわたり起こっていることを示している。
【０１０６】
【表２】
【０１０７】
実施例１０：過剰なＨＣｌの除去／モノヒドロクロロ［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの製造
過剰なＨＣｌはアニオン交換樹脂を添加してｐＨを２.５とすることにより除去した。処理の間、溶液の色は明黄色から透明に変化した。出発物質および生成物の定性分析では新しいピークや不純物の増加は観察されなかった。滴定によるクロリド分析の結果はクロリドが２.１８当量から約１.１４当量に減少したことを示している。ここでは示さないが、クロリドはＨＣｌの添加により２.０の所望の目標に調節できる。
【０１０８】
これらの実施例において、クロリドの除去の工程はバッチ系において樹脂を攪拌することにより行ったが、これはプラント系においてもＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の溶液をアニオン交換樹脂カラムに付して再循環させることにより容易に行える。ｐＨが偶発的に所望範囲を超えて上昇した場合は、適切な量のＨＣｌを添加することにより容易に戻すことができる。この目的のための大規模なアニオン交換樹脂を設計することは等業者の知るとおりである。
【０１０９】
実施例１１：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶化
「ＯＨ」型のＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ−４００樹脂で滴定することにより水溶液から両性イオンを得た。溶液のｐＨが約ｐＨ１１にまで上昇するに従い、アニオン交換樹脂は塩酸塩を排除した。焼結ガラス漏斗を通した濾過により両性イオンの溶液から樹脂が除去された。この溶液を液体窒素で凍結し、凍結乾燥してガラス状の不定形の生成物を得た。乾燥ガラス状物の元素分析によれば、典型的に０.３％未満のクロリドが示されていた。
【０１１０】
マレエート塩の初期の結晶化は、９０マイクロリットル（μｌ）の最終容量となるようにＨＰＬＣ等級の水で乾燥両性イオン３０ｇを溶解することにより行った。マレイン酸の溶液は、マレイン酸１.０５５グラムを用いて１０ｍｌ容のメスフラスコ中でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）で定容まで希釈することにより作成した。ＤＭＦ中のマレイン酸３００μｌを両性イオンの水溶液に攪拌しながら添加した。これは両性イオンの各当量に対しマレイン酸２当量であった。モレキュラーシーブ上で乾燥したアセトニトリルを溶液が濁るまで攪拌しながら滴加し、次に更に２〜３滴のアセトニトリルを添加した。溶液を週末を通じて攪拌した。得られたスラリーを偏光光学顕微鏡で検査した。正の伸長を示す複屈折の針状の結晶が観察された。固体を５.０μｍのＭｉｌｌｉｐｏｒｅＬＳフィルター上に収集し、４０℃で真空下に乾燥し、結晶性の生成物２８ｍｇを得た。わずか１当量のマレイン酸を用いた場合の相当する溶液はゲル状であった。
【０１１１】
実施例１２：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの別の結晶化
その後の小規模の実験によれば、許容できる大規模化の条件が示された。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン両性イオン１.２１５グラムを水約３ｍｌに溶解した。マレイン酸１.２８３グラムおよびＤＭＦ１２ｍｌを攪拌しながら添加した。透明な溶液が急速に得られた。アセトニトリル１００Ｍｌを添加し、この時点で白濁している溶液に結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶種を添加した。１時間後、更にアセトニトリル１３ｍｌを添加した。スラリーを更に２時間攪拌し、次に結晶を数個のＭｉｌｌｉｐｏｒｅ５μｍＬＳフィルター上に収集した。極めて微小な粒径の濾過のため、比較的緩徐であった。固体をＭｉｌｌｉｐｏｒｅフィルター上でアセトニトリル少量を用いて洗浄した。これらの固体をビーカーに移し、４０℃で一夜真空乾燥した。
【０１１２】
合計で５つの別の実施例を結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートに対して提示する。実施例は全て３元溶媒系（ＤＭＦ／水／アセトニトリル）において実施した。１モル過剰のマレイン酸を使用し、そしてＤＭＦ対水の比は約３：１の一定に維持した。結晶種添加の効率もまた一部の実施例において評価した。不定形の固体は全ての実施例においてある程度観察された。
【０１１３】
実施例１３
凍結乾燥したＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン１.０ｇ、溶解したマレイン酸１.０５ｇを含むＤＭＦ１０ｍｌおよび水３.０ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、１２５ｒｐｍで攪拌して透明な溶液とした。アセトニトリル１００ｍｌをすぐに透明な溶液に添加し、その際、アリコートの添加により起こる白濁の大部分が次のアリコートの添加の前に治まるようにした。白濁した溶液の光学顕微鏡観察によれば、白濁は液相の分離（乳化）によるものであり、結晶核形成ではなかった。添加終了時にも溶液は白濁していた。溶液を一夜攪拌した。一夜保持する間に溶液は沈殿したが、スラリーの光学顕微鏡観察によれば固体は不定形であった。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種（３０ｍｇ）をスラリーに添加し、固体から結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートへの相変換を促進し、系を更に２４時間攪拌した。次にスラリーを約−１０℃に冷却し、更に２４時間攪拌することにより濾液中の生成物の損失を低減した。合計７２時間の後、スラリーを微小フリット焼結ガラス漏斗上で濾過し、ケーキをアセトニトリル４ｍｌで洗浄した。濾液はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン濃度約０.５重量％を有していた。固体を１時間風乾し、次に２４時間５０℃で真空オーブン中に入れた。固体は粉末Ｘ線回折およびＤＳＣの両方により結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートであったが、前者は最終固体中かなりの量の不定形の含量を示していた。
【０１１４】
実施例１４
実施例１４は同じ溶媒組成および両性イオンのロード量で実施したが、アセトニトリルおよび結晶種の添加方法および保持時間は不定形の含量および処理時間を低減するために適正化した。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン５００ｍｇ、マレイン酸５０２ｍｇ、ＤＭＦ５ｍｌおよび水１.５ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、攪拌して透明な溶液とした。アセトニトリル３１ｍｌ（合計添加量の６３％）を実施例１３で使用した方法で間歇的に溶液に添加した。ほぼ全ての白濁が最初のアセトニトリル添加の終了後の攪拌１時間以内に治まった。次に溶液に１５ｍｇのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶を結晶種として添加し、そして、２時間攪拌した後、残余の１８ｍｌ（３７％）のアセトニトリルを添加した。スラリーを２４時間攪拌し、次に約−１０℃に冷却し、更に２４時間攪拌し、その後１５０ｍｌ容の微小フリット焼結ガラス漏斗上に排出した。ケーキをアセトニトリル４ｍｌで洗浄し、３０分間風乾し、次に５０℃で２４時間真空オーブン中に入れた。濾液中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの濃度は０.５５重量％であり、固体はＰＸＲＤによれば結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートであり、ベースラインのハローは一部不定形のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの存在を示していた。しかしながらハローは実施例１３の生成物の場合より顕著ではなかった。
【０１１５】
実施例１５
実施例１５の目的はアセトニトリルの量を低減することにより工程のスループットを向上できる可能性について調べることである。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン０.９グラム、マレイン酸０.９３グラム、ＤＭＦ９ｍｌおよび水２.７ｍｌを１２５ｍｌ容量のジャケット付反応容器に添加し、透明な溶液が生じるまで攪拌した。アセトニトリル５６ｍｌを他の実施例と同様の方法で溶液に間歇的に添加した。アセトニトリルの添加の終了後に白濁全体が治まった時点でＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種２３ｍｇを１回で添加した。系を１７５ｒｐｍで２４時間攪拌し、次にスラリーを１５０ｍｌの微小フリット焼結ガラス漏斗上に排出した。ケーキをアセトニトリル５ｍｌで洗浄し、４０分間風乾し、次に２４時間５０℃の真空オーブン中に入れた。生成物約６００ｍｇを乾燥後に回収した。濾液中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの濃度は約１.０重量％であった。生成物のＰＸＲＤ分析によれば不定形物質の含量は極めて低値であった。溶液のＮＭＲによれば生成物は０.１モル当量もの捕獲ＤＭＦを有していた。濾過の前およびオーブン乾燥後の光学顕微鏡によるスラリー中の固体の比較によれば、顕著な形態学的相違があった。不定形の固体がいくらか存在していた。
【０１１６】
実施例１６
実施例１６は核形成を誘導するための補助として結晶種添加を排除できるかどうか調べるために実施した。この実験の操作法の残りの部分は実施例１５と同様である。生成物における濾液の濃度および固体状態の属性は結晶種を使用しなくても同等の性能が得られることを示していた。
【０１１７】
実施例１７
実施例１７は、実施例１５および１６において使用した操作法の収率を、固体の大部分がすでに沈殿した後で冷却し、アセトニトリルを追加添加すりことにより改善できる可能性を調べるために実施した。操作では、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン１.０ｇ、マレイン酸１.０３ｇ、ＤＭＦ１０ｍｌおよび水３.０ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、攪拌して透明な溶液を形成した。アセトニトリル５６ｍｌを上記実施例と同様にして溶液に間歇的に添加した。アセトニトリル添加終了後、白濁が実質的に全て治まった後にＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種２８ｍｇを添加した。結晶種添加後最初の２時間以内に顕著な沈殿が起こり、スラリーはジャケット上で約−１０℃に冷却した。この温度で２４時間スラリーを攪拌した。
【０１１８】
冷却中および保持期間の上澄みの分析によれば、濃度低下は僅かであり、従って、アセトニトリル２５ｍｌを添加することにより、逆溶媒（anti solvent）添加が収率を改善するかどうか調べた。更にアセトニトリルを添加した後、スラリーを２５℃に戻し、更に２４時間攪拌した後に１５０ｍｌの微小フリット焼結ガラス漏斗上で排出した。ケーキはアセトニトリル５ｍｌで洗浄した。本実施例のケーキはフィルター上で２時間風乾した後でさえも粘稠で極めて湿潤していた。これらの固体を４時間加熱することなく真空オーブン中に入れ、余分な溶媒を除去した。その後２４時間真空オーブン中５０℃で乾燥した。濾液の濃縮によっても逆溶媒を更に添加することの有意な利点は観察されなかった。乾燥直後のこの実施例の固体のＰＸＲＤ分析によれば、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶と混合された不定形の固体が一部存在していた。
【０１１９】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの特性化
偏光顕微鏡観察によれば正の伸長を示す複屈折の針状の結晶が、濾過による採取の前のスラリーにおいて、そして、４０℃で真空乾燥した後の単離生成物において観察された。
【０１２０】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は９０％ＲＨおよび２５℃において水分吸収量は１重量％未満であり、１２３℃で融解する。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は２３０ｍｇｍｌ-1超の水溶性を有する。
【０１２１】
表３はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の元素分析ならびに１.５％の水分含量の理論的組成を示す。
【０１２２】
【表３】
【０１２３】
プロトンＮＭＲはＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン両性イオンおよびマレイン酸の１：１の組み合わせの構造および化学量論的特徴と合致していた。プロトンＮＭＲもまた実施例１１における０.２当量（３〜３.５％）のＤＭＦを示し、これは予測元素分析値を大きく変化させず、±０.４であった。
【０１２４】
図６はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１２）の粉末Ｘ線パターンである。図７はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１１）の粉末Ｘ線パターンである。実施例１１および実施例１２は共に結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートを特徴付ける際に有用な特徴的ピークを示している。
【０１２５】
図８はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（１０.０４６ｍｇ、実施例１２）の示差走査熱量試験のグラフである。図９はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（６.２１３０ｍｇ、実施例１１）の示差走査熱量試験のグラ
フである。
【０１２６】
図１０はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（４.７６８０ｍｇ、実施例１２）の熱重量分析プロットである。図１１はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１１）の熱重量分析プロットである。
【０１２７】
図１２はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの水分吸収試験のプロットである。
【０１２８】
図１３は結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートのラマンスペクトルを示す。慨すれば、ラマンスペクトルは分子または複合体系の振動の特徴である。その起源は分子と光線を含む光の粒子である光子との間の非弾性的な衝突にある。分子と光子の衝突はエネルギーの交換をもたらし、その結果エネルギーが変化し、これにより光子の波長が変化する。即ち、ラマンスペクトルは入射光により照射されるときに対象分子から発せられる極めて狭いスペクトルの線のセットである。各スペクトル線の幅は入射光のスペクトルの幅により大きく影響され、従って厳密に１色の光源、例えばレーザーを使用する。各ラマン線の波長は入射光からの波数シフトにより表示され、これはラマン線と入射光の波長の逆数の間の差である。吸収波長ではなく波数シフトはラマン線では分子内の特定の原子基に特異的である。ラマンスペクトルは分子の振動状態を測定するものであり、これはその分子構造により決定される。
【０１２９】
本発明に更に包含されるものは、１またはそれ以上の非毒性の薬学的に許容される担体および／または希釈剤および／またはアジュバント（総称して本明細書においては「担体」物質と称する）、および、所望により、他の活性成分と共に結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートを含む医薬組成物のクラスである。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶型は何れかの適当な経路で、好ましくはその経路に適合した医薬組成物の形態で、そして、意図する治療のために有効な用量で投与してよい。活性なＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートおよび組成物は、例えば経口、血管内、腹腔内、皮下、筋肉内または局所に投与してよい。
【０１３０】
経口投与の場合は、医薬組成物は例えば錠剤、カプセル、懸濁液または液体の形態であってよい。医薬組成物は好ましくは活性成分の特定の量を含有する用量単位の形態で製造する。このような用量単位の例は錠剤またはカプセルである。活性成分はまた、例えば食塩水、デキストロースまたは水を適当な担体として使用してよい組成物として注射により投与してよい。
【０１３１】
投与される治療的に活性な化合物の量および本発明の化合物および／または組成物により疾患状態を治療するための用法は多くの要因、例えば対象の年齢、体重、性別および病状、疾患の重症度、投与の経路および頻度、および、使用する特定の化合物により異なり、従って、大きく変動する。医薬組成物は活性成分を約０.１〜２０００ｍｇの範囲、好ましくは約０.５〜５００ｍｇの範囲、最も好ましくは約１〜１００ｍｇ含有してよい。約０.０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは約０.５〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重、そして最も好ましくは約０.１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の一日当たり用量が適切である。一日当たり用量は一日当たり１〜４回で投与してよい。
【０１３２】
結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートはまた経皮装置により投与できる。好ましくは経皮投与はリザーバおよび多孔性膜の型または固体マトリックス種の何れかであるパッチを用いて行う。いずれの場合においても、活性剤はレシピエントの皮膚または粘膜に接触している活性剤透過性の接着剤内に膜を経由してリザーバーまたはマイクロカプセルから継続的に送達される。活性剤が皮膚を経由して吸収される場合は、活性剤の制御され予め決定された流量がレシピエントに投与される。マイクロカプセルの場合はカプセル化剤はまた膜として機能してもよい。
【０１３３】
本発明のエマルジョンの油相は既知の態様において既知の成分から構築してよい。相は乳化剤のみを含んでもよいが、脂肪または油と、または、脂肪と油の両方と少なくとも１つの乳化剤との混合物を含んでもよい。好ましくは親水性乳化剤は、安定化剤として機能する親油性の乳化剤と共に含有される。油脂および脂肪の両方を含有することも好ましい。全体として、乳化剤は安定化剤の存在下または非存在下でいわゆる乳化ワックスと称されるものを形成し、そしてワックスは油および脂肪と一緒になっていわゆる乳化軟膏基剤と称されるものを形成し、これがクリーム製剤の油性の分散相を形成する。本発明の製剤において使用するのに適する乳化剤および乳化安定剤はＴｗｅｅｎ６０、Ｓｐａｎ８０、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアレートおよびラウリル硫酸ナトリウム等である。
【０１３４】
医薬エマルジョン製剤中で使用され得る大部分の油中の活性化合物の溶解度は極めて低値であるため、製剤用の適当な油または脂肪の選択は所望の審美的特性を達成することに基づく。即ち、クリームは好ましくは、チューブや他の容器からの漏出を回避するために、適当なコンシステンシーを有する非グリース性（non-greasy）、非染色性および洗浄可能な製品である。直鎖または分枝鎖の、１または２塩基性のアルキルエステル、例えば、ジイソアジペート、イソセチルステアレート、ココナツ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、イソプロピルミリステート、デシルオレエート、イソプロピルパルミテート、ブチルステアレート、２−エチルヘキシルパルミテートまたは分枝鎖エステルのブレンド物を使用してよい。これらは所望の性質に応じて単独または組み合わせて使用してよい。或は、高融点の脂質、例えば白色軟質パラフィンおよび／または流動パラフィンまたは他の鉱物油を使用することもできる。
【０１３５】
眼への局所投与に適する製剤いは、活性成分が適当な担体、特に活性成分のための水性溶媒に溶解または懸濁されている点眼剤も包含する。活性成分は好ましくはそのような製剤中０.５から２０％、好都合には０.５〜１０％、特に約１.５重量％の濃度で存在する。
【０１３６】
治療目的のためには、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートは通常は望ましい投与経路に適切な、１またはそれ以上のアジュバントと組み合わせる。経口投与する場合は、化合物は乳糖、スクロース、澱粉、アルカン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウムおよびカルシウム塩、ゼラチン、アカシアガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、および／または、ポリビニルアルコールと混合し、次に好都合な投与のために錠剤化またはカプセル化してよい。このようなカプセルまたは錠剤はヒドロキシプロピルメチルセルロース中の活性化合物の分散物として提供され得る、放出制御型製剤を含んでよい。非経口投与のための製剤は水性または非水性の等張性の滅菌された注射用の溶液または懸濁液の形態であってよい。これらの溶液および懸濁液は、経口投与のための製剤における使用のために例示される、１つまたはそれ以上の担体または希釈剤を有する滅菌された粉末または顆粒から調製してよい。結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートは水、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、コーン油、綿実油、ピーナツ油、ゴマ油、ベンジルアルコール、塩化ナトリウム、および／または、種々の緩衝液に溶解してよい。他のアジュバントおよび投与様式は薬学分野でよく知られるとおりである。
【図面の簡単な説明】
【０１３７】
【図１】全てのイオン化状態を示しているＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線の図である。
【図２】ＩＲＡ−４００（ＯＨ）アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線のグラフ表示である。ひし形はｐＨ、四角（破線）はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン（％初期値、イオンクロマトグラフィーによる）を示す。
【図３】ＩＲＡ−４００（ＯＨ）アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線のグラフ表示である。ひし形はｐＨ、三角（破線）はクロリド（イオンクロマトグラフィーによる）を示す。
【図４】ＩＲＡ−４００アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線を示す。
【図５】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの両性イオンのｐＨを上昇させた場合の関連する結合データを示す。
【図６】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１２）の粉末Ｘ線パターンである。
【図７】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１１）の粉末Ｘ線パターンである。
【図８】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（１０.０４６ｍｇ、実施例１２）の示差走査熱量測定試験のグラフである。
【図９】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（６.２１３０ｍｇ、実施例１１）の示差走査熱量測定試験のグラフである。
【図１０】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（４.７６８０ｍｇ、実施例１２）の熱重量分析プロットである。
【図１１】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１１）の熱重量分析プロットである。
【図１２】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの水分吸着試験のプロットである。
【図１３】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料のラマンスペクトルである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は疾患の治療において有用な新しい化合物、そしてより詳細には、酸化窒素シンターゼの誘導性アイソフォームからの酸化窒素の不適切な発現が関与する状態の治療のためのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの新しい塩およびその医薬組成物を包含する。
【０００２】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは参照により本明細書に組み込まれる同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載され特許請求されている。
【背景技術】
【０００３】
酸化窒素（ＮＯ）は酵素酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）の数種のアイソフォームの何れか１つにより生産される生物活性フリーラジカルガスである。後にＮＯとして同定されたものの生理学的活性は、１９８０年代初頭に最初に発見され、このときアセチルコリンにより誘発される血管の弛緩は血管内皮の存在に依存していることがわかった。内皮から誘導され、次にこのような血管弛緩を媒介する内皮誘導弛緩因子（ＥＤＲＦ）と称されるようになった因子は、現在ではＮＯＳの１つのアイソフォームにより血管内皮内で生じたＮＯであることが知られている。血管弛緩剤としてのＮＯの活性は１００年以上もの間、知られている。更にＮＯは知られたニトロ血管弛緩剤、例えば亜硝酸アミルおよびニトログリセリンから誘導された活性物質種である。酸化窒素はまた可溶性のグアニレートサイクラーゼ（ｃＧＭＰ）の内因性刺激剤であり、即ち、ｃＧＭＰの生産を刺激する。ＮＯＳがＮ−モノメチルアルギニン（Ｌ−ＮＭＭＡ）により抑制されるとｃＧＭＰの生成は完全に防止される。内皮依存性弛緩に加えて、ＮＯは食細胞の細胞毒性および中枢神経系における細胞から細胞への連絡を含む生物学的作用の多くに関与していることがわかっている。
【０００４】
ＮＯとしてのＥＤＲＦの発見は、酵素ＮＯシンターゼによりアミノ酸Ｌ−アルギニンからＮＯが合成される生化学的経路の発見と一致していた。以下に示す少なくとも３種のＮＯシンターゼが存在する。
（ｉ）受容体または物理的刺激に応答してＮＯを放出する脳に存在する構成性Ｃａ＋＋／カルモジュリン依存性酵素；
（ii）内毒素およびサイトカインによる血管平滑筋、マクロファージ、内皮細胞および多くの他の細胞の活性化の後に誘導されるＣａ++非依存性酵素（１３０ｋＤタンパク質）；および、
（iii）受容体または物理的刺激に応答してＮＯを放出する内皮細胞に存在する構成性Ｃ
ａ++／カルモジュリン依存性酵素。
【０００５】
発現された後、誘導性酸化窒素シンターゼ（以降「ｉＮＯＳ」と称する）は長期間に渡り持続的にＮＯを発生する。臨床試験によれば、ＮＯの生産およびｉＮＯＳの発現は種々の慢性炎症性疾患、例えば慢性関節リューマチおよび骨関節炎（例えばＭｃＩｎｎｅｓ Ｉ.Ｂ．ｅｔ ａｌ.，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８４：１５１９（１９９６）参照）、炎症性腸疾患（例えばＬｕｎｄｂｅｒｇ Ｊ．Ｏ．Ｎ．ｅｔ ａｌ.，Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１６７３（１９９４）参照）および喘息（例えばＨａｍｉｄ，Ｑ．ｅｔ．ａｌ.，Ｌａｎｃｅｔ ３４２：１５１０（１９９３）参照）において増大し、そしてｉＮＯＳはこれらの慢性炎症性疾患における主要な病原性因子とされている。
【０００６】
即ちｉＮＯＳによる過剰なＮＯ生産の抑制は抗炎症性であると考えられる。しかしながら、ｅＮＯＳおよびｎＮＯＳからのＮＯの生産は正常な生理機能にかかわっているため、炎症の治療に使用されるいずれのＮＯＳ阻害剤も、ｅＮＯＳ生成ＮＯによる血圧の正常な生理学的調節およびｎＮＯＳ生成ＮＯによる非アドレナリン作用性、非コリン作用性の神経伝達が影響を受けない状態であり続けるように、ｉＮＯＳに対して選択的であることが望ましい。
【０００７】
全ての医薬品の化合物および組成物において、薬剤化合物の化学的および物理的安定性は薬剤物質の商業的開発において重要である。このような安定性には、周囲条件において特に水分に対して、そして、保存条件下における安定性が包含される。保存の種々の条件における向上した安定性は、市販品の寿命の間の種々の可能な保存条件を予測するために必要である。安定な薬剤は特殊な保存条件の使用ならびに頻繁な在庫交換を回避する。均一な粒径および表面積を有する薬剤物質を得るためには、薬剤のミリングを必要とする場合が多い製造工程の間も薬剤化合物は安定でなければならない。不安定な物質は多形の変化を起こす場合が多い。従って、安定性の特性を向上させる薬剤物質のいずれかの修飾は安定性がより低い物質よりも高い重要な利益をもたらす。
【０００８】
例えば同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載され特許請求されているＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのような数種のｉＮＯＳ阻害剤が報告されている。しかしながらその化合物は不定形の固体である。従って、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのようなｉＮＯＳ阻害剤の結晶固体形態を提供することが望ましい。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの新しい結晶塩、医薬組成物、新しい塩化合物の製造方法、医薬組成物の製造方法、および、酸化窒素シンターゼの構成性アイソフォームよりも酸化窒素シンターゼの誘導性アイソフォームを優先的に抑制またはモジュレートする化合物の塩を投与することによって、酸化窒素の合成を抑制またはモジュレートすることを必要とする対象においてこのような抑制またはモジュレートのための新しい塩化合物および組成物を用いる方法に関する。本発明の塩化合物は有用な酸化窒素シンターゼ抑制活性を有し、そして酸化窒素の合成または過剰合成が寄与的部分を形成する疾患または状態の治療または予防において有用であることが期待される。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
化学量論的には、新しい塩の単位格子はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの１分子およびマレイン酸の１分子である。
【００１１】
新しい塩は以下の物理的測定値、即ち、元素分析（例えば燃焼分析による）、融点および融解熱（示差走査熱量分析および熱重量分析）、屈折率（偏光顕微鏡）、Ｘ線粉末回折パターン、水分吸着（例えばＤＶＳ水分バランス）および振動特徴（ラマンスペクトル）の一部または全てにより特性化される。
【００１２】
本発明の新しい塩は関節炎のような特定の状態において生じる軟骨の変性が関与する疾患を治療するために使用できる。従って、Ｌ−アルギニンからのＮＯ生産を抑制することが好都合となる状態は、関節の状態、例えば慢性関節リューマチ、骨関節炎、通風性関節炎、若年性関節炎、敗血症性関節炎、脊椎関節炎、急性関節リューマチ、腸疾患に基づく関節炎（enteropathic arthritis）、神経障害性関節炎および化膿性関節炎を包含する。更にまた、軟骨細胞吸引のＮＯ誘導低下は関節炎、特に骨関節炎におけるマトリックスの損失および二次的な軟骨の石灰化をモジュレートする。
【００１３】
本発明の塩が有用であるその他の状態は、慢性または炎症性の腸疾患、心臓血管虚血、糖尿病、鬱血性心不全、心筋炎、アテローム性動脈硬化症、偏頭痛、緑内障、大動脈瘤、逆流性食道炎、下痢、過敏性腸症候群、嚢胞性線維症、気腫、喘息、気管支拡張症、痛覚過敏、脳虚血、血栓性卒中、全虚血（global ischemia）（心停止に二次的なもの）、多発性硬化症およびＮＯにより媒介される他の中枢神経系の障害、例えばパーキンソン病およびアルツハイマー病を包含する。ＮＯ抑制が有用である別の神経変性障害は低酸素症、低血糖症、癲癇のような疾患における、そして、外傷（例えば脊髄および頭部の傷害）における神経変性および／または神経壊死、高圧酸素痙攣および毒性、痴呆症、例えば前老年性痴呆症、および、ＡＩＤＳ関連痴呆症、シドナム舞踏病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、コルサコフ病、脳血管障害に関わる精神遅滞、睡眠障害、統合失調症、うつ病、月経前症候群（ＰＭＳ）に関連するうつ病または他の症状、不安症および敗血症性ショックを包含する。
【００１４】
本発明の塩はまた、身体原性の（侵害受容または神経病性の）急性および慢性の両方のものを含む疼痛のようなものの治療において酸化窒素の抑制が役割を果たす場合にも使用してよい。本発明の化合物は一般的なＮＳＡＩＤまたはオピオイド鎮痛剤が伝統的に投与されている何れかの状況において使用できる。
【００１５】
更にまた、本発明の塩によるＮＯ生産の抑制により治療できる別の障害には長期間オピエート鎮痛剤を必要とする患者におけるオピエート耐性、および、ベンゾジアゼピン使用患者におけるベンゾジアゼピン耐性および他の中毒挙動、例えばニコチンおよび摂食障害が包含される。本発明の化合物はまた抗菌剤としても使用してよい。
【００１６】
Ｌ−アルギニンからのＮＯ生産を抑制するために本発明の塩を使用してよい別の状態は、種々の因子により誘導される敗血症性および／または毒性のショックに関連する全身低血圧を包含し；ＴＮＦ、ＩＬ−１およびＩＬ−２のようなサイトカインを用いた治療において；および移植療法における短期間の免疫抑制に対するアジュバントとして使用してよい。
【００１７】
本発明の塩はまた眼の状態（例えば高眼圧症、網膜炎、ブドウ膜炎）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、糸球体腎炎、再狭窄、ウィルス感染の炎症性続発症、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、酸素誘導肺傷害、癌患者等におけるＩＬ２治療、悪液質、移植療法等における免疫抑制、胃腸運動性の障害、日焼け、湿疹、乾癬、歯肉炎、膵臓炎、感染症が原因の胃腸管の損傷、嚢胞性線維症、臓器移植療法における短期の免疫抑制のアジュバントのような機能不全免疫系の治療、分娩誘発、腺腫様ポリープ、腫瘍成育の制御、化学療法、化学予防および気管支炎においても有用である。
【００１８】
本発明はまた、治療有効量の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートを薬学的に許容される担体、希釈剤またはベヒクルと共に含有する医薬組成物であって、疼痛、喘息および他の気道の障害、癌、関節炎、網膜症および緑内障を含む眼の障害、炎症関連障害、例えば過敏性腸症候群、および酸化窒素の過剰な生産が役割を果たしている他の障害の治療のための医薬組成物に関する。
【００１９】
ヒトの治療に有用であるほか、この型は愛玩動物、外来種動物および家畜、例えば哺乳類、げっ歯類等の獣医科の治療にも有用である。より好ましい動物はウマ、イヌおよびネコを包含する。
【００２０】
定義
「治療する」、「治療している」および「治療」という用語は本明細書においては、予防療法、待機療法または回復療法を包含する。
【００２１】
「有効量」という用語は治療を行える用量を意味する。有効量は単回用量で、またはある期間にわたり分割用量において投与してよい。
【００２２】
「ＡＣＥ」という用語はアセトンを意味する。
【００２３】
「ＡＣＮ」という用語はアセトニトリルを意味する。
【００２４】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインに適用する場合「不定形」という用語は、本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子が無秩序の配列において存在し、識別可能な結晶格子または単位格子を形成しない固体状態を意味する。Ｘ線粉末回折に付す場合は、不定形のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは如何なる特徴的な結晶ピークも示さない。
【００２５】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインに適用する場合「結晶型」という用語は、本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子が配列して（ｉ）識別可能な単位格子を含み、そして（ｉｉ）Ｘ線照射に付した場合に回折ピークを生じるような、識別可能な結晶格子を形成する固体状態の形態を指す。
【００２６】
「結晶化」という用語は本明細書においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン出発原料の製造に関わる適用可能な状況に応じた結晶化および／または再結晶化を指す。
【００２７】
「ＤＭＦ」という用語はＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味する。
【００２８】
「Ｄ／Ｗ／Ａ」」という用語はＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、水およびアセトニトリルの３元溶媒系を指す。
【００２９】
「Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン薬剤物質」という用語は本明細書においては、その用語を使用する文脈により明確化されるＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン自体であり、未製剤のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインまたは医薬組成物の成分として存在するＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインを指す。
【００３０】
「ＤＳＣ」という用語は示差走査熱量測定を意味する。
【００３１】
「ＨＰＬＣ」という用語は高速液体クロマトグラフィーを意味する。
【００３２】
「ＩＲ」という用語は赤外線を意味する。
【００３３】
「ＮＭＲ」という用語は核磁気共鳴を意味し、核磁気共鳴スペクトル分析に適用してよい。
【００３４】
「ｍｌ」という用語はミリリットルを意味する。
【００３５】
「ｍｇ」という用語はミリグラムを意味する。
【００３６】
「μｇ」という用語はマイクログラムを意味する。
【００３７】
「μｌ」という用語はマイクロリットルを意味する。
【００３８】
「核形成」という用語は本明細書においては溶液中の結晶の形成を意味する。
【００３９】
「純度」という用語は本明細書においては特段の記載が無い限り、従来のＨＰＬＣ試験によるＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの化学純度を意味する。
【００４０】
「ＰＸＲＤ」という用語は粉末Ｘ線回折を意味する。
【００４１】
「ｒｐｍ」という用語は分当たり回転数を意味する。
【００４２】
「結晶種添加」という用語は、本明細書においては、核形成を開始または促進する目的のための溶液中への結晶の添加を意味する。
【００４３】
「ＴＧＡ」という用語は熱重量分析を意味する。
【００４４】
「Ｔｍ」という用語は融点を意味する。
【００４５】
「両性イオン」という用語は実質電荷がゼロ値となるように正電荷および負電荷の両方を担持した分子を指す。
【００４６】
用途
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は、対象において特に炎症を治療するため、または、他の酸化窒素シンターゼ媒介障害の治療のため、例えば疼痛および頭痛の治療における鎮痛剤として、または、発熱の治療のための解熱剤として有用である。例えば、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は関節炎、例えば慢性関節リューマチ、脊髄関節症、痛風性関節炎、骨関節炎、全身性エリテマトーデス、若年性関節炎、急性関節リューマチ、腸疾患に基づく関節炎、神経障害性関節炎、乾癬性関節炎および化膿性関節炎の治療に有用であるが、これらに限定されない。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩がＬ−アルギニンからのＮＯ生産の抑制において好都合である状態は関節炎の状態を包含する。
【００４７】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は更に、喘息、気管支炎、月経痛（例えば月経困難）、早産、腱炎、滑液包炎、皮膚関連状態、例えば乾癬、湿疹、熱傷、日焼け、皮膚炎、膵臓炎、肝炎、および、術後炎症に起因するもの、例えば眼科手術に起因するもの、例えば白内障手術および屈折矯正手術に起因するものの治療において有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた炎症性腸疾患、クローン病、胃炎、過敏性腸症候群および潰瘍性結腸炎のような胃腸状態の治療にも有用である。
【００４８】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は癌、例えば結腸直腸癌および乳癌、肺癌、前立腺癌、膀胱癌、子宮癌および皮膚癌の予防または治療のために有用である。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は血管疾患、偏頭痛、結節性動脈周囲炎、甲状腺炎、再生不良性貧血、ホジキン病、硬皮症（sclerodoma）、リューマチ熱、Ｉ型糖尿病、神経筋接合部疾患、例えば重症筋無力症、白質症、例えば多発性硬化症、サルコイドーシス、ネフローゼ症候群、ベーチェット症候群、多発性筋炎、歯肉炎、腎炎、過敏症、傷害後の浮腫、心筋虚血等のような疾患における炎症および組織損傷の治療に有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた眼科疾患、例えば緑内障、網膜炎、網膜症、ブドウ膜炎、眼光恐怖症および眼部組織への急性の損傷に関連する炎症および疼痛の治療においても有用である。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の用途のうち特に興味深いものは、特に、緑内障の症状が酸化窒素媒介神経損傷の場合のように酸化窒素の生成により誘発されたものである緑内障の治療である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた肺の炎症、例えばウィルス感染に伴うもの、および嚢胞性線維症の治療においても有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた特定の中枢神経系の障害、例えば皮質痴呆、例えばアルツハイマー病、および卒中、虚血および外傷に起因する中枢神経系の損傷の治療のためにも有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は抗炎症剤、例えば関節炎の治療用のもの等としても有用であり、有害な副作用が顕著に低減されているという別の利点も伴う。
【００４９】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまたアレルギー性鼻炎、呼吸窮迫症候群、内毒素ショック症候群およびアテローム性動脈硬化症の治療においても有用である。
【００５０】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた疼痛、例えば術後疼痛、歯痛、筋肉痛、および癌に起因する疼痛の治療においても有用であるが、これらに限定されない。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はアルツハイマー病のような痴呆症の予防のために有用である。
【００５１】
ヒトの治療のほかに、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は愛玩動物、外来種動物および家畜、例えば哺乳類、げっ歯類等の獣医科の治療にも有用である。より好ましい動物はウマ、イヌおよびネコを包含する。
【００５２】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた、他の従来の抗炎症療法の部分的または完全な代替法である共療法（co-therapies）において、例えばステロイド、ＮＳＡＩＤ、ＣＯＸ−２選択的阻害剤、５−リポキシゲナーゼ阻害剤、ＬＴＢ4拮抗剤およびＬＴＡ4ヒドロラーゼ阻害剤と共に使用してよい。
【００５３】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩がＮＯ生産の抑制において好都合である他の状態は、心臓血管虚血、糖尿病（Ｉ型またはＩＩ型）、鬱血性心不全、心筋炎、アテローム性動脈硬化症、偏頭痛、緑内障、大動脈瘤、逆流性食道炎、下痢、過敏性腸症候群、嚢胞性線維症、気腫、喘息、気管支拡張症、痛覚過敏（異痛）、脳虚血（局所的虚血、血栓性卒中および全虚血（例えば心停止に二次的なもの）の双方）、多発性硬化症およびＮＯにより媒介される他の中枢神経系の障害、例えばパーキンソン病を包含する。ＮＯ抑制が有用である別の神経変性障害は低酸素症、低血糖症、癲癇のような疾患における、そして、中枢神経系（ＣＮＳ）外傷（例えば脊髄および頭部の傷害）の場合における、神経変性および／または神経壊死、高圧酸素痙攣および毒性、痴呆症、例えば前老年性痴呆症、および、ＡＩＤＳ関連痴呆症、シドナム舞踏病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、コルサコフ病、脳血管障害に関わる精神遅滞、睡眠障害、統合失調症、うつ病、月経前症候群（ＰＭＳ）に関連するうつ病または他の症状、不安症および敗血症性ショックを包含する。
【００５４】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた身体原性の（侵害受容または神経病性の）急性および慢性の両方のものを含む疼痛の治療において有用である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた一般的なＮＳＡＩＤまたはオピオイド鎮痛剤が伝統的に投与されている神経病性の疼痛を含む何れかの状況において使用できる。
【００５５】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩により好都合に治療される更に別の障害または状態は、長期間オピエート鎮痛剤を必要とする患者におけるオピエート耐性、および、ベンゾジアゼピン使用患者におけるベンゾジアゼピン耐性および他の中毒挙動、例えばニコチン中毒、アルコール中毒および摂食障害が包含される。
【００５６】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまたオピエート、アルコールまたはタバコ中毒からの禁断症状の治療または予防のような、薬物禁断症状の治療または予防に有用である。
【００５７】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた抗菌剤または抗ウィルス剤と治療上組み合わせた場合に組織の損傷を予防するために有用である。
【００５８】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまたＬ−アルギニンからのＮＯ生産の抑制において、例えば種々の因子により誘導される敗血症性および／または毒性出血性ショックに関連する全身低血圧に有用であり；ＴＮＦ、ＩＬ−１およびＩＬ−２のようなサイトカインを用いた治療に有用であり；そして移植療法において短期間の免疫抑制剤に対するアジュバントとして有用である。
【００５９】
本発明は更に新生物の治療および予防のための本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の使用に関する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩および方法により治療可能または予防可能である新生物は脳の癌、骨の癌、白血病、リンパ腫、上皮細胞誘導新生物（上皮癌腫）、例えば基底細胞癌、腺癌、胃腸の癌、例えば口唇の癌、口腔の癌、食道癌、小腸の癌および胃癌、結腸癌、肝臓癌、膀胱癌、膵臓癌、卵巣癌、子宮癌、肺癌、乳癌および皮膚癌、例えば扁平上皮癌および基底細胞癌、前立腺癌、腎細胞癌およびその他の全身にわたる上皮細胞に関わる既知の癌を包含する。好ましくは、治療すべき新生物形成は胃腸の癌、肝臓癌、膀胱癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、子宮癌、肺癌、乳癌および皮膚癌、例えば扁平上皮および基底細胞の癌から選択される。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩および本発明の方法はまた放射線療法により起こる線維症を治療するために使用できる。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩および方法は家族性大腸腺腫症（ＦＡＰ）の対象を含む腺腫様ポリープを有する対象の治療に使用できる。更に、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩および方法はＦＡＰの危険性のある患者におけるポリープ形成を予防するために使用できる。
【００６０】
別の抗新生物剤との本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の複合治療は相乗作用をもたらすかもしくは、治療効果のために必要とされる副作用誘発薬剤の治療用量を低減するか、もしくは、副作用誘発薬剤により誘発される毒性の副作用の症状を直接低減することにより化学療法に伴う毒性の副作用を軽減する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は更に副作用を低減するか、または薬効を増強するための放射線療法の補助として有用である。
【００６１】
本発明においては、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩と治療上組み合わせることができる別の薬剤は酵素シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）を阻害できる何れかの治療薬を包含する。好ましくは、このようなＣＯＸ−２阻害剤は酵素シクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）と比較してＣＯＸ−２を選択的に阻害する。このようなＣＯＸ−２阻害剤は「ＣＯＸ−２選択的阻害剤」として知られている。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩と治療上組み合わせて使用するＣＯＸ−２選択的阻害剤は、セレコキシブ、バルデコキシブ、デラコキシブ、エトリコキシブ、ロフェコキシブ、ＡＢＴ−９６３（２−（３,４−ジフルロフェニル）−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブトキシ）−５−［４−（メチルスルホニル）フェニル−３（２Ｈ）−ピリダジノン；ＰＣＴ出願ＷＯ００／２４７１９記載）、またはメロキシカムを包含する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまたＣＯＸ−２選択的阻害剤のプロドラッグ、例えばパレコキシブと治療上組み合わせて好都合に使用できる。
【００６２】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩と組み合わせて使用する別の化学療法剤は、例えば以下の非包括的および非限定的なリストから選択できる。
【００６３】
アルファ−ジフルオロメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）、５−ＦＵ−フィブリノーゲン、アカンチホリック酸（acanthifolic acid）、アミノチアジアゾール、ブレキナールナトリウム(brequinar sodium)、カルモフール、Ｃｉｂａ−Ｇｅｉｇｙ ＣＧＰ−３０６９４、シクロペンチルシトシン、シタラビンホスフェートステアレート、シタラビンコンジュゲート、Ｌｉｌｌｙ ＤＡＴＨＦ、Ｍｅｒｒｅｌ Ｄｏｗ ＤＤＦＣ、デザグアニン、ジデオキシシチジン、ジデオキシグアノシン、ジドックス、Ｙｏｓｈｉｔｏｍｉ ＤＭＤＣ、ドキシフルリジン、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＥＨＮＡ、Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．ＥＸ−０１５、ファザラビン、フロクスウリジン、フルダラビンホスフェート、５−フルオロウラシル、Ｎ−（２’−フラニジル）−５−フルオロウラシル、Ｄａｉｉｃｈｉ Ｓｅｉｙａｋｕ ＦＯ−１５２、イソプロピルピロリジン、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−１８８０１１、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−２６４６１８、メトベンザプリン、メトトレキセート、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＭＺＰＥＳ、ノルスペルミジン、ＮＣＩ ＮＳＣ−１２７７１６、ＮＣＩ ＮＳＣ−２６４８８０、ＮＣＩ ＮＳＣ−３９６６１、ＮＣＩ ＮＳＣ−６１２６７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＰＡＬＡ、ペントスタチン、ピリトレキシム、プリカマイシン、Ａｓａｈｉ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ＰＬ−ＡＣ、Ｔａｋｅｄａ ＴＡＣ−７８８、チオグアニン、チアゾフリン、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＴＩＦ、トリメトレキセート、チロシンキナーゼ阻害剤、チロシン蛋白質キナーゼ阻害剤、Ｔａｉｈｏ ＵＦＴ、ウリシチン、Ｓｈｉｏｎｏｇｉ ２４５−Ｓ、アルド−ホスファミド類縁体、アルトレタミン、アナキシロン（anaxrone）、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ ＢＢＲ−２２０７、ベストラブシル、ブドチタン、Ｗａｋｕｎａｇａ ＣＡ−１０２、カルボプラチン、カルムスチン、Ｃｈｉｎｏｉｎ−１３９、Ｃｈｉｎｏｉｎ−１５３、クロラムブシル、シスプラシン、シクロホスファミド、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ ＣＬ−２８６５５８、Ｓａｎｏｆｉ ＣＹ−２３３、シプラテート、Ｄｅｇｕｓｓａ Ｄ−１９−３８４、Ｓｕｍｉｍｏｔｏ ＤＡＣＨＰ（Ｍｙｒ）２、ジフェニルスピロムスチン、細胞増殖抑制ジ白金（diplatinum cytostatic）、Ｅｒｂａジスタマイシン誘導体、Ｃｈｕｇａｉ ＤＷＡ−２１１４Ｒ、ＩＴＩ Ｅ０９、エルムスチン、ＥｒｂａｍｏｎｔＦＣＥ−２４５１７、エストラムスチンホスフェートナトリウム、フォテムスチン、Ｕｎｉｍｅｄ Ｇ−６−Ｍ、Ｃｈｉｎｏｉｎ ＧＹＫＩ−１７２３０、ヘプスル−ファム（hepsul-fam）、イフォスファミド、イプロプラチン、ロムスチン、マホスファミド、ミトラクトール、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫ−１２１、ＮＣＩ ＮＳＣ−２６４３９５、ＮＣＩ ＮＳＣ−３４２２１５、オキサリプラチン、Ｕｐｊｏｈｎ ＰＣＮＵ、プレドニムスチン、Ｐｒｏｔｅｒ ＰＴＴ−１１９、ラニムスチン、セムスチン、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＳＫ＆Ｆ−１０１７７２、Ｙａｋｕｌｔ Ｈｏｎｓｈａ ＳＮ−２２、スピロムス−チン、Ｔａｎａｂｅ Ｓｅｉｙａｋｕ ＴＡ−０７７、タウロムスチン、テモゾロミド、テロキシロン、テトラプラチン、トリメラモール、Ｔａｉｈｏ ４１８１−Ａ、アクラルビシン、アクチノマイシンＤ、アクチノプラノン、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＡＤＲ−４５６、アエロプリシニン誘導体、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＡＮ−２０１−ＩＩ、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＡＮ−３、Ｎｉｐｐｏｎ Ｓｏｄａアニソマイシン、アントラサイクリン、アジノマイシン−Ａ、ビスカベリン、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＬ−６８５９、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２５０６７、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２５５５１、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２６６０５、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２７５５７、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−２８４３８、ブレオマイシンスルフェート、ブリオスタチン−１、Ｔａｉｈｏ Ｃ−１０２７、カリケマイシン、クロモキシマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−１０２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−７９、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ−８８Ａ、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ８９−Ａ１、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＤＣ９２−Ｂ、ジトリサルビシンＢ、Ｓｈｉｏｎｏｇｉ ＤＯＢ−４１、ドキソルビシン、ドキソルビシン−フィブリノーゲン、エルサミシン−Ａ、エピルビシン、エルブスタチン、エソルビシン、エスペラミシン−Ａ１、エスペラミシン−Ａ１ｂ、Ｅｒｂａｍｏｎｔ ＦＣＥ−２１９５４、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＫ−９７３、フォストリエシン、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＲ−９００４８２、グリドバクチン、グレガチン−Ａ、グリンカマイシン、ヘルビマイシン、イダルビシン、イルジンス（illudins）、カズサマイシン、ケサリロジンス、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＭ−５５３９、Ｋｉｒｉｎ Ｂｒｅｗｅｒｙ ＫＲＮ−８６０２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−５４３２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−５５９４、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＫＴ−６１４９、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ ＬＬ−Ｄ４９１９４、Ｍｅｉｊｉ Ｓｅｉｋａ ＭＥ２３０３、メノガリル、マイトマイシン、ミトザントロン、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｍ−ＴＡＧ、ネオエナクチン、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫ−３１３、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ ＮＫＴ−０１、ＳＲＩ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＮＳＣ−３５７７０４、オキサリシン、オキサウノマイシン、ペプロマイシン、ピラチン、ピラルビシン、ポロスラマイシン、ピリンダマイシンＡ、Ｔｏｂｉｓｈｉ ＲＡ−Ｉ、ラパマイシン、リゾキシン、ロドルビシン、シバノミシン、シエンマイシン（siwenmycin）、Ｓｕｍｉｔｏｍｏ ＳＭ−５８８７、Ｓｎｏｗ Ｂｒａｎｄ ＳＮ−７０６、Ｓｎｏｗ Ｂｒａｎｄ ＳＮ−０７、ソランギシン−Ａ、スパルソマイシン、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−２１０２０、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−７３１３Ｂ、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−９８１６Ｂ、ステフィマイシンＢ、Ｔａｉｈｏ ４１８１−２、タリソマイシン、Ｔａｋｅｄａ ＴＡＮ−８６８Ａ、テルペンテシン、スラジン、トリクロザリンＡ、Ｕｐｊｏｈｎ Ｕ−７３９７５、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−１００２８Ａ、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＷＦ−３４０５、Ｙｏｓｈｉｔｏｍｉ Ｙ−２５０２４ゾルビシン、アルファ−カロテン、アルファ−ジフルオロメチル−アルギニン、アシトレチン、Ｂｉｏｔｅｃ ＡＤ−５、Ｋｙｏｒｉｎ ＡＨＣ−５２、アルストニン、アモナフィド、アンフェチニル、アムサクリン、Ａｎｇｉｏｓｔａｔ、アンキノマイシン、アンチネオプラストンＡ１０、アンチネオプラストンＡ２、アンチネオプラストンＡ３、アンチネオプラストンＡ５、アンチネオプラストンＡＳ２−１、Ｈｅｎｋｅｌ ＡＰＤ、アフィジコリングリシネート、アスパラギナーゼ、Ａｖａｒｏｌ、バッカリン、バトラシリン、ベンフルロン、ベンゾトリプト、Ｉｐｓｅｎ−Ｂｅａｕｆｏｕｒ ＢＩＭ−２３０１５、ビサントレン、Ｂｒｉｓｔｏ−Ｍｙｅｒｓ ＢＭＹ−４０４８１、Ｖｅｓｔａｒ ボロン−１０、ブロモホスファミド、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＢＷ−５０２、Ｗｅｌｌｃｏｍｅ ＢＷ−７７３、カラセミド、カルメチゾール塩酸塩、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ ＣＤＡＦ，クロルスルファキノキサロン、Ｃｈｅｍｅｘ ＣＨＸ−２０５３、Ｃｈｅｍｅｘ ＣＨＸ−１００、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９２１、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９３７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９４１、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ ＣＩ−９５８、クランフェヌール(clanfenur)、クラビリデノン、ＩＣＮ化合物１２５９、ＩＣＮ化合物４７１１、Ｃｏｎｔｒａｃａｎ、Ｙａｋｕｌｔ Ｈｏｎｓｈａ ＣＰＴ−１１、クリスナトール、クラダーム(curaderm)、サイトカラシンＢ、シタラビン、シトシチン、Ｍｅｒｚ Ｄ−６０９、ＤＡＢＩＳマレエート、ダカルバジン、ダテリプチニウム(dateliptinium)、ジデムニン−Ｂ、ジヘマトポルフィリンエーテル、ジヒドロレンペロン、ジナリン、ジスタマイシン、Ｔｏｙｏ Ｐｈａｒｍａｒ ＤＭ−３４１、Ｔｏｙｏ Ｐｈａｒｍａｒ ＤＭ−７５、Ｄａｉｉｃｈ Ｓｅｉｙａｋｕ ＤＮ−９６９３、エリプラビン、エリプチニウムアセテート、Ｔｓｕｍｕｒａ ＥＰＭＴＣ、エルゴタミン、エトポシド、エトレチネート、フェンレチニド、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＦＲ−５７７０４、硝酸ガリウム、ゲンクワダフニン(genkwadaphnin)、Ｃｈｕｇａｉ ＧＬＡ−４３、Ｇｌａｘｏ ＧＲ−６３１７８、グリフォランＮＭＦ−５Ｎ、ヘキサデシルホスホコリン、Ｇｒｅｅｎ Ｃｒｏｓｓ ＨＯ−２２１、ホモハリングトニン、ヒドロキシ尿素、ＢＴＧ ＩＣＲＦ−１８７、イルモフォシン、イソグルタミン、イソトレチノイン、Ｏｔｓｕｋａ ＪＩ−３６、Ｒａｍｏｔ Ｋ−４７７、Ｏｔｓｕｋａ Ｋ−７６ＣＯＯＮａ、Ｋｕｒｅｈａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｋ−ＡＭ、ＭＥＣＴ Ｃｏｒｐ ＫＩ−８１１０、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｙａｎａｍｉｄ Ｌ−６２３、ロイコレグリン、ロニダミン、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ ＬＵ−２３−１１２、Ｌｉｌｌｙ ＬＹ−１８６６４１、ＮＣＩ（ＵＳ）ＭＡＰ、マリシン、Ｍｅｒｒｅｌ Ｄｏｗ ＭＤＬ−２７０４８、Ｍｅｄｃｏ ＭＥＤＲ−３４０、メルバロン、メロシアニン誘導体、メチルアニリノアクリジン、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ＭＧＩ−１３６、ミナクチビン、ミトナフィド、ミトキドン、モピダモール、モトレチニド、Ｚｅｎｙａｋｕ Ｋｏｇｙｏ ＭＳＴ−１６、Ｎ−（レチノイル）アミノ酸、Ｎｉｓｓｉｎ Ｆｌｏｕｒ Ｍｉｌｌｉｇ Ｎ−０２１、Ｎ−アシル化−デヒドロアラニン、ナファザトロム、Ｔａｉｓｈｏ ＮＣＵ−１９０、ノコダゾール誘導体、Ｎｏｒｍｏｓａｎｇ、ＮＣＩ ＮＳＣ−１４５８１３、ＮＣＩ ＮＳＣ−３６１４５６、ＮＣＩ ＮＳＣ−６０４７８２、ＮＣＩ ＮＳＣ−９５５８０、オクトオチド、Ｏｎｏ ＯＮＯ−１１２、オキザノシン、Ａｋｚｏ Ｏｒｇ−１０１７２、パンクレアチスタチン、パゼリプチン、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１１１７０７、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１１５９３４、Ｗａｒｎｅｒ−Ｌｕｍｂｅｒｔ ＰＤ−１３１１４１、Ｐｉｅｒｒｅ Ｆａｂｒｅ ＰＥ−１００１、ＩＣＲＴペプチドＤ、ピロキサントロン、ポリヘマトポルフィリン、ポリプレイック酸(polypreic acid)、Ｅｆａｍｏｌポルフィリン、プロビマン、プロカルバジン、プログルミド、ＩｎｖｉｔｒｏｎプロテアーゼネキシンＩ、Ｔｏｂｉｓｈｉ ＲＡ−７００、ラゾキサン、Ｓａｐｐｏｒｏ Ｂｒｅｗｅｒｉｅｓ ＲＢＳ、レストリクチン−Ｐ、レテリプチン、レチノイン酸、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ ＲＰ−４９５３２、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ ＲＰ−５６９７６、ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＳＫ＆Ｆ−１０４８６４、Ｓｕｍｉｔｏｍｏ ＳＭ−１０８、Ｋｕｒａｒａｙ ＳＭＡＮＣＳ、ＳｅａＰｈａｒｍ ＳＰ−１００９４、スパトール、スピロシクロプロパン誘導体、スピロゲルマニウム、Ｕｎｉｍｅｄ、ＳＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳＳ−５５４、ストリポルジノン、Ｓｔｙｐｏｌｄｉｏｎｅ、Ｓｕｎｔｏｒｙ ＳＵＮ ０２３７、Ｓｕｎｔｏｒｙ ＳＵＮ ２０７１、スーパオキシドジスムターゼ、Ｔｏｙａｍａ Ｔ−５０６、Ｔｏｙａｍａ Ｔ−６８０、タキソール、Ｔｅｉｊｉｎ ＴＥＩ−０３０３、テニポシド、タリブラスチン、Ｅａｓｔｍａｎ Ｋｏｄａｋ ＴＪＢ−２９、トコトリエノール、Ｔｏｐｏｓｔｉｎ、Ｔｅｉｊｉｎ ＴＴ−８２、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−０１、Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ ＵＣＮ−１０２８、ウクライン、Ｅａｓｔｏｍａ Ｋｏｄａｋ ＵＳＢ−００６、硫酸ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンストラミド、ビノレルビン、ビントリプトール、ビンゾリジン、ウィザノリド、Ｙａｍａｎｏｕｃｈｉ ＹＭ−５３４、ウログアニリン、コンブレタスタチン、ドラスタチン、イダルビシン、エピルビシン、エストラム
スチン、シクロホスファミド、９−アミノ−２−（Ｓ）−カンプトテシン、トポテカン、イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ）、エクセメスタン、デカペプチル（トリプトレリン）またはオメガ−３−脂肪酸。
【００６４】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩との組み合わせ療法に使用してよい放射線保護剤の例はＡＤ−５、アドクノン、アミホスチン類縁体、デトックス、ジメスナ、１−１０２、ＭＭ−１５９、Ｎ−アシル化−デヒドロアラニン、ＴＧＦ−Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、チプロチモド、アミホスチン、ＷＲ−１５１３２７、ＦＵＴ−１８７、ケトプロフェン経皮用、ナブメトン、スーパーオキシドジスムターゼ（Ｃｈｉｒｏｎ）およびスーパーオキシドジスムターゼＥｎｚｏｎを包含する。
【００６５】
本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はまた、血管形成関連の障害または状態、例えば腫瘍生育、転移、黄斑変性およびアテローム性動脈硬化症の治療または予防においても有用である。
【００６６】
別の実施形態においては、眼科の障害または状態、例えば緑内障の治療または予防のための治療組み合わせが提供される。例えば本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は緑内障に罹患している患者の眼圧を低減する薬剤との治療組み合わせ中に有利に使用される。このような眼圧低下剤にはラタノプロスト、トラボプロスト、ビマトプロストまたはウノプロストールが包含されるが、これらに限定されない。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩＋眼圧低下剤の治療組み合わせは、各々がその作用を異なる機序に作用させることにより達成すると考えられているため、有用である。
【００６７】
本発明の別の組み合わせにおいて、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は抗高脂血剤またはコレステロール低下剤、例えばベンゾチエピンまたはベンゾチアゼピン抗高脂血剤との治療組み合わせ中に使用できる。本発明の治療組み合わせにおいて有用なベンゾチエピン抗高脂血剤の例は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許５，９９４，３９１に記載されている。ベンゾチアゼピン抗高脂血剤の一部はＷＯ９３／１６０５５に記載されている。あるいは、本発明の化合物との組み合わせにおいて有用な抗高脂血剤またはコレステロール低下剤はＨＭＧ Ｃｏ−Ａ還元酵素阻害剤であることができる。本発明の治療組み合わせにおいて有用なＨＭＧ ＣＯ−Ａ還元剤阻害剤の例は、個々に、ベンフルオレクス、フルバスタチン、ロバスタチン、プロバスタチン、シンバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、ベルバスタチン、ＺＤ−９７２０（ＰＣＴ出願ＷＯ９７／０６８０２記載）、ＺＤ−４５２２（カルシウム塩はＣＡＳ Ｎｏ．１４７０９８−２０−２；ナトリウム塩はＣＡＳ Ｎｏ．１４７０９８−１８−８；欧州特許ＥＰ５２１４７１に記載）、ＢＭＳ１８０４３１（ＣＡＳ Ｎｏ．１２９８２９−０３−４）またはＮＫ−１０４（ＣＡＳ Ｎｏ．１４１７５０−６３−２）を包含する。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩＋抗高脂血剤またはコレステロール低下剤の治療組み合わせは例えば血管内のアテローム性動脈硬化性の病変の形成の危険性を低減する場合に有用である。例えばアテローム性動脈硬化性の病変は血管の炎症部位から生じる場合が多い。抗高脂血剤またはコレステロール低下剤は血中の脂質濃度を低下させることによりアテローム性動脈硬化性の病変の形成の危険性を低減する。単一の作用機序に本発明を限定しないが、本発明の組み合わせのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の一つの態様は、協調して作用し、例えば血中脂質濃度の低下と同調した血管の炎症の低減によってアテローム性動脈硬化性の病変の進歩した制御をもたらすと考えられる。
【００６８】
本発明の別の実施形態においては、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は中枢神経の状態または障害、例えば偏頭痛の治療のための他の化合物または治療法と組み合わせて使用できる。例えば、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩はカフェイン、５−ＨＴ−１Ｂ／１Ｄアゴニスト（例えばトリプタン、例えばスマトリプタン、ナラトリプタン、ゾルミトリプタン、リザトリプタン、アルモトリプタンまたはフロバトリプタン）、ドーパミンＤ４拮抗剤（例えばソネピプラゾール）、アスピリン、アセトアミノフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ナプロキセンナトリウム、イソメテプテン、ジクロラルフェナゾン、ブタルビタール、麦角アルカロイド（例えばエルゴタミン、ジヒドロエルゴタミン、ブロモクリプチン、エルゴノビン、または、メチルエルゴノビン）、３環系抗欝剤（例えばアミトリプチリンまたはノルトリプチリン）、セロトニン拮抗剤（例えばメチセルギドまたはシプロヘプタジン）、ベータ−アドレナリン拮抗剤（例えばプロプラノロール、チモロール、アテノロール、ナドロールまたはメトプロロール）またはモノアミンオキシダーゼ阻害剤（例えばフェネルジンまたはイソカルボキサジド）との治療組み合わせ中に使用できる。
【００６９】
別の実施形態は本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩とオピオイド化合物の治療組み合わせを提供する。この組み合わせに有用なオピオイド化合物は、例えば、モルヒネ、メタドン、ヒドロモルホン、オキシモルホン、レボルファノール、レバロルファン、コデイン、ジヒドロコデイン、ジヒドロヒドロキシコデイノン、ペンタゾシン、ヒドロコドン、オキシコドン、ナルメフェン、エトルフィン、レボルファノール、フェンタニル、スフェンタニル、ＤＡＭＧＯ、ブトルファノール、ブプレノルフィン、ナロキソン、ナルトレキソン、ＣＴＯＰ、ジプレノルフィン、ベータ−フナルトレキサミン、ナロキソナジン、ナロルフィン、ペンタゾシン、ナルブフィン、ナロキソンベンゾイルヒドラゾン、ブレマゾシン、エチルケトサイクラゾシン、Ｕ５０，４８８、Ｕ６９，５９３、スピラドリン、ノル−ビナルトルフィミン、ナルトリンドール、ＤＰＤＰＥ、［Ｄ−ｌａ2，ｇｌｕ4］デルトルフィン、ＤＳＬＥＴ、メト−エンケファリン、ロイ−エンケファリン、ベータ−エンドルフィン、ダイノルフィンＡ、ダイノルフィンＢおよびαネオエンドルフィンを包含するが、これらに限定されない。オピオイド化合物との本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の組み合わせの好都合な点は、本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩がオピオイド化合物の用量を低減し、これにより、オピオイド中毒のようなオピオイドの副作用の危険性や重症度を低減できる点である。
【００７０】
代表的な実施例
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の製造方法は参照により本明細書に組み込まれる、同一出願人による米国特許６,４０３,８３０に記載されている。
慨すればＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の合成は以下の実施例１に記載する通り実施してよい。
【００７１】
実施例１
【化１】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン、２塩酸塩
【００７２】
実施例−１Ａ）Ｎ−Ｂｏｃ−システアミン
【化２】
３Ｌ容の４口ＲＢフラスコを２０分間窒素パージし、次に順次、２−アミノエタンチオール塩酸塩（１１３.６ｇ、１モル）、ジ−ｔ−ブチル−ジカーボネート（２１８.３ｇ、１モル）およびトルエン５００ｍｌを添加した。混合物を氷水バスで冷却し、１０分間窒素パージした。水酸化ナトリウム（２.５Ｎ、８８０ｍｌ、２.２モル）を０℃〜１１℃で約１.５時間内に攪拌混合物に添加した。水酸化ナトリウムの添加が終了した後、冷却バスを除去し、得られた反応混合物を室温に戻し、一夜周囲温度で攪拌した。これにより表題化合物の溶液を得た。
【００７３】
実施例−１Ｂ）
【化３】
実施例−１Ａの生成物溶液を氷水バス中で冷却した。クロロアセトン（１０１.８ｇ、１.１モル）の試料を８℃〜１１℃で約５０分かけて激しく攪拌した反応混合物に添加した。クロロアセトンの添加が終了した後、冷却バスをはずし、得られた反応混合物を一夜室温で攪拌した。トルエン層を分離し、水（２５０ｍｌ）で洗浄し、ハウス真空下、次いで高真空下に８５℃でロータリーエバポレーター上で濃縮し、粗製の表題化合物（２２５.７ｇ、９６.７％）を得た。1Ｈ ＮＭＲ (ＣＤＣｌ3, ４００ＭＨｚ)δ ４.９５(ｂｓ, １Ｈ), ３.２０ (ｍ, ４Ｈ), ２.５４ (ｔ, ２Ｈ), ２.２０ (ｓ, ３Ｈ), １.３５ (ｓ, ９Ｈ)。
【００７４】
実施例−１Ｃ）［２−［［（４−メチル−２，５−ジオキソ−４−イミダゾリジニル）メチル］チオ］エチル］カルバミン酸、１，１−ジメチルエチルエステル
【化４】
オーバーヘッド攪拌機、熱電対および空フラスコと苛性アルカリトラップに連結したコンデンサーを備えた３Ｌ容の４口ＲＢフラスコに、実施例−１Ｂの生成物（７０ｇ、０.３モル）、無水エタノール（８０ｍｌ）、シアン化ナトリウム（１９.１ｇ、０.３９モル）、炭酸アンモニウム（４３.３ｇ、０.４５モル）および水（７２０ｍｌ）をこの順序で添加した。４つ目の口を蓋で閉鎖した。得られた反応混合物を６時間６７〜６８℃に加熱した。その後ほぼ透明な茶色溶液を室温に冷却した。冷却により固体が形成し始め、そして非均質な混合物を一夜室温で攪拌した。次に反応混合物を−２℃〜２℃で約１時間、ｐＨ２にまで１２％塩酸で酸性化した。冷反応混合物を更に３０分間ｐＨ２で攪拌し、次に濾過した。フラスコを蒸留水（２ｘ２５０ｍｌ）ですすぎ、各すすぎ液を用いて固体ケーキを洗浄した。固体を再度蒸留水（２ｘ２５０ｍｌ）で洗浄し、次に４日間風乾した。乾燥した固体を０.５時間トルエン２００ｍｌで磨砕した。スラリーを濾過した。固体を順次、トルエン（５０ｍｌ）およびトルエン／ヘキサンの１：４比（１００ｍｌ）ですすぎ、次に一夜室温で風乾して表題化合物を８３.１％収率で得た。融点１３４〜１３６℃。1Ｈ ＮＭＲ (ＤＭＳＯd6，４００ＭＨｚ) δ １０.６２ (ｓ, １Ｈ), ７.８５ (ｓ，１Ｈ)，６.８３（ｍ，０.９Ｈ），６.４８（ｂｓ，０.１Ｈ），３.２９（ｓ，２Ｈ），２.９９（ｍ，２Ｈ），２.７１(ｓ, ２Ｈ), ２.９５ (ｍ, ２Ｈ), １.３２ (ｓ, ９Ｈ), １.２４ (ｓ, ３Ｈ) ; 13Ｃ ＮＭＲ (ＤＭＳＯd6，４００ＭＨｚ) δ １７８.１, １５７.１, １５６.１, ７８.４，６３.７，４０.７，３９.４，３３.２，２８.９，２３.８。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓについての分析：
計算値：Ｃ，４７.５１；Ｈ，６.９８；Ｎ，１３.８５；Ｓ，１０.５７
測定値：Ｃ，４７.７６；Ｈ，６.８８；Ｎ，１３.７７；Ｓ，１０.７５
【００７５】
実施例−１Ｄ）ＲおよびＳ−［２−［［（４−メチル−２，５−ジオキソ−４−イミダゾリジニル）メチル］チオ］エチル］カルバミン酸、１，１−ジメチルエチルエステル
【化５】
実施例−１Ｃの反応生成物をメタノールを溶離剤としてＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＡＤカラム上でそのＲおよびＳエナンチオマーに分離した。Ｓ異性体が最初に溶出する異性体であり、その後、Ｒエナンチオマーが得られた。両方の異性体を用いてその後の変換を行った。
【００７６】
Ｓエナンチオマー：
２５℃、ＭｅＯＨ中の［α］＝＋４３.０（３６５ｎｍ）。1ＨＮＭＲ：（４００ｍＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ １.４９ (ｓ, ９Ｈ), ２.０５ (ｓ，３Ｈ), ２.６５ (ｔ，２Ｈ), ２.９ (ｑ, ２Ｈ, ｄ), ３.２０ (ｍ, ２Ｈ)。ＩＲ：λｃｍ-1 ＝１７７２，１７０９。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓ（分子量：３０３.３８）についての分析：
計算値：Ｃ，４７.５１；Ｈ，６.９８；Ｎ，１３.８５
測定値：Ｃ，４７.３９；Ｈ，６.６２；Ｎ，１３.８３
Ｍ＋Ｈ＝３０４
【００７７】
Ｒエナンチオマー：
２５℃、ＭｅＯＨ中の［α］＝−４６.３（３６５ｎｍ）。1Ｈ ＮＭＲ：(４００ｍＨｚ，ＣＤ3ＯＤ)δ １.４８ (ｓ，９Ｈ), ２.０５ (ｓ，３Ｈ), ２.６５ (ｔ, ２Ｈ), ２.８５ (ｑ, ２Ｈ, ｄ), ３.１８ (ｍ, ２Ｈ)。ＩＲ：λｃｍ-1 ＝１７７０，１７１１。
Ｃ12Ｈ21Ｎ3Ｏ4Ｓ（分子量：３０３.３８）についての分析：
計算値：Ｃ，４７.５１；Ｈ，６.９８；Ｎ，１３.８５
測定値：Ｃ，４８.１５；Ｈ，７.０４；Ｎ，１４.３７
Ｍ＋Ｈ＝３０４
【００７８】
実施例−１Ｅ）Ｓ−（２−アミノエチル）−２−メチル−Ｌ−システイン
【化６】
酸加水分解法：
蒸留コンデンサー付の５００ｍｌ容の３口丸底フラスコに実施例−１ＤのＲ異性体生成物（４５.８ｇ、１５０.９ミリモル）を添加し、そして攪拌しながら室温で４８％水性ＨＢｒ（１６０ｍｌ）で少しずつ処理した。ガス発生が停止した後、マントルヒーターを用いてポット温度が１２６℃に達するまで混合物を加熱し、その間、揮発性の臭化ｔ−ブチル（沸点７２〜７４℃）、次いで少量の水性ＨＢｒ（約１５ｍｌ）を留去した。蒸留コンデンサーを還流コンデンサーと交換し、そして混合物を３０時間還流下に加熱した。溶液を濃縮し、残留物を水（２５０ｍｌ）に溶解し、そして、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）５０ＷＸ４−２００イオン交換樹脂（８.５ｘ１１ｃｍ）にロードし、水（２Ｌ）、次いで希水酸化アンモニア水溶液（２８〜３０％の水酸化アンモニウム３０ｍｌを水で１０００ｍｌに希釈した、３Ｌ）で溶離した。所望の生成物を含有する画分を合わせ、濃縮し、２時間７５〜８０℃で真空下に乾燥し、白色固体として表題化合物Ｓ−（２−アミノエチル）−２−メチル−Ｌ−システイン２２.１ｇ（８２％）を得た。プロトンおよびＣ−１３ＮＭＲスペクトルは表題化合物と一致した。融点１５７℃。1Ｈ ＮＭＲ (４００ＭＨｚ，Ｄ2Ｏ)δ １.１９ (３Ｈ, ｓ)，２.５３ （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３.６Ｈｚ），２.５７−２.７２（２Ｈ，ｍ），２.９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３.６Ｈｚ），２.９２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６.８Ｈｚ）；13Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，Ｄ2Ｏ），δ２４.７，３１.３，３８.９，４０.９，５９.６，１８０.７。
Ｃ6Ｈ14Ｎ2Ｏ2Ｓ＋０.１Ｈ2Ｏについての分析：
計算値：Ｃ，４０.０２；Ｈ，７.９５；Ｎ，１５.５６；Ｓ，１７.８１
測定値：Ｃ，３９.９３；Ｈ，７.９８；Ｎ，１５.３８；Ｓ，１７.７０
【００７９】
塩基加水分解法：
攪拌機を装着したステンレス製のオートクレーブに実施例−１ＤのＲ異性体生成物２４.２ｇ（０.０８モル）を添加した。装置を窒素パージした後、１０％苛性ソーダ１２８ｇ（０.３２モル）を添加して溶液とした。オートクレーブを密封し、３０時間１２０℃に加熱した。室温に冷却した後、オートクレーブを排気して表題化合物のナトリウム塩の水溶液１４２ｍｌ（１５１ｇ）を得た。Ｈ1ＮＭＲ（試料をＨＣｌで酸性化し、Ｄ2Ｏで希釈、４００ＭＨｚ）：δ １.４７ (ｓ, ３Ｈ)，２.７５（ｍ，２Ｈ），２.９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４.８Ｈｚ)，３.０６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６.４Ｈｚ），３.１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４.８Ｈｚ）。Ｃ13ＮＭＲ（試料をＨＣｌで酸性化し、Ｄ2Ｏで希釈、１００ＭＨｚ）：δ１７２.９，６０.８，３９.１，３９.０，３０.４，２２.２。ＭＳ（ＭＳ／ＣＩ−ＬＣ）Ｍ＋１ １７９。
【００８０】
ＤＢＵ（２１８μＬ；１.４６ミリモル）およびエチルアセトイミデート塩酸塩（１７１ｍｇ；１.３４ミリモル）を室温（〜２０℃）で２５ｍｌ容の１口丸底フラスコ中エタノール（６ｍｌ）に溶解した。実施例−１Ｅの表題化合物（２００ｍｇ;１.１２ミリモル）をこの溶液に１回で添加した。実施例−１Ｅの表題化合物が消費されるまで（１〜２時間）混合物を攪拌した。混合物をアイスバス中で冷却し、次に６ＭＨＣｌ（８３０μＬ）で処理した。1Ｈ ＮＭＲ分析によれば化学収率は９５モル％以上であった。溶媒を蒸発させ、実施例−１の表題化合物を逆相またはイオン交換クロマトグラフィーにより精製した。
【００８１】
塩基加水分解反応産物の実施例−１Ｅの表題化合物約２０ｇを含有する溶液２１０ｇｍを５００ｍｌ容の３口丸底フラスコ内に投入した。装置にメカニカルスターラー、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置（２０ｍｌ容、ストップコック付）、コンデンサーおよび温度コントローラーを装着した。混合物から水（１４０ｍｌ）を留去した。１−ブタノール（１５０ｍｌ）をポットに添加し、残余の水（３７ｍｌ）を共沸蒸留した。ポット温度が１１７℃になるまで蒸留により更に１−ブタノール（１３ｍｌ）を除去した。ブタノールスラリーを室温に冷却し、セライトパッドで濾過した。塩を１−ブタノール（２ｘ２０ｍｌ）で洗浄した。ＤＢＵ（２１.８μＬ；１４６ミリモル）およびエチルアセトイミデート塩酸塩（１７.１ｍｇ；１３４ミリモル）を室温で５００ｍＬ容の３口丸底フラスコ中の１−ブタノール（４０ｍｌ）に溶解した。装置にメカニカルスターラー、添加漏斗および温度プローブを装着した。実施例−１Ｅの表題化合物／１−ブタノール溶液を添加漏斗に入れ、ポット温度を２５℃未満に維持しながらエチルアセトイミデート／ＤＢＵの溶液に添加した。出発物質が消費されるまで（２〜３時間）混合物を攪拌した。濃塩酸（９４ｍｌ）および水（１００ｍｌ）の溶液を１Ｌの３口丸底フラスコにいれ、０℃に冷却した。装置にメカニカルスターラー、添加漏斗および温度プローブを装着した。反応混合物を添加漏斗に入れた。反応混合物をＨＣｌ水溶液に添加し、その間、温度を２５℃未満に維持した。酢酸エチル（１００ｍｌ）を溶液に添加し、層を分離させた。水層を再度酢酸エチル（１００ｍｌ）で洗浄した。1Ｈ ＮＭＲ分析によれば化学収率は９５モル％以上であった。実施例−１のこの表題化合物を逆相、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィーにより精製した。1Ｈ ＮＭＲ (４００ＭＨｚ，Ｄ2Ｏ)δ １.４９ (３Ｈ, ｓ)，２.０８ （３Ｈ，ｓ），２.７４（２Ｈ，ｍ），２.９１（１Ｈ，ｄ），３.１７（１Ｈ，ｄ），３.３５（２Ｈ，ｔ）。
【００８２】
本発明の好ましい実施形態においては、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの両性イオンをＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート塩の製造の前に得る。以下の説明はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの両性イオンを得る好ましい方法を記載している。
【００８３】
実施例２：両性イオンの調製
両性イオンを得る１つの方法において、ウォーター・ストリップを用いてカチオン交換カラム後の過剰のＨＣｌを除去する。別法として、過剰な酸はアニオン交換樹脂を用いてＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン濃縮物から除去してよい。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインのモノヒドロクロロまたは遊離の両性イオンがアニオン交換樹脂を用いて調製できることが更に発見された。アニオン交換法はその単純性のため、塩酸塩および遊離の両性イオンを調製するために好適である。遊離の両性イオンは別の塩形態の医薬の製造のために特に有用である。
【００８４】
図１は化合物滴定曲線の略図である。親のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン分子は３つイオン化可能な基を有し、そして、４つのイオン化状態で存在できる。
【００８５】
低ｐＨにおいては、分子は＋２荷電の遊離の酸として存在し、カルボン酸、アミンおよびアミジン部分はプロトン化されている。これは２塩酸塩のイオン化状態である。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン（２塩酸塩）の最初のロットは約０.３当量の過剰ＨＣｌを含有していた。
【００８６】
ｐＨが上昇するに従い、カルボン酸基は脱プロトン化される最初の基となり、そしてこれにより＋１の分子上の実質電荷がもたらされる。ｐＨの上昇がＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインへの水酸化ナトリウムの添加により生じる場合は、ナトリウムの２塩酸塩が形成される。ｐＨの上昇がアニオン交換過程によるクロリドイオンの除去による場合は、生成物は、ナトリウムを有さない１塩酸塩である。
【００８７】
ｐＨが更に上昇するに従い、アミン基は脱プロトン化（約ｐＫａ＝８.４）して分子の中性の両性イオン形態を生じる。正電荷はアミジン上になお残存し、負電荷はカルボキシル基上になお残存する。このような物質が２塩酸塩への水酸化ナトリウムの添加により形成される場合は、得られる生成物は塩化ナトリウム１当量と混合されたモノヒドロクロロナトリウム塩である。アニオン交換樹脂法により製造された物質は遊離の両性イオンである。
【００８８】
更にｐＨが上昇すると、アミジンイオンの脱プロトン化が起こる（ｐＫａ〜１２.５）。このｐＨ範囲の分子は遊離の塩基および酸の塩である。負荷電された分子はアニオン交換樹脂に結合するため、遊離の塩基は好ましくはアニオン交換法では製造しない。
【００８９】
実施例３：遊離の両性イオンの調製
約１５％（容量）の濃塩酸２３９ｍｌ中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約０.８ｇを含むカチオン交換カラムカットを合わせ、６０℃のロータリーエバポレーター内で濃縮して油状物とした。油状物を脱イオン水で３０ｍｌにまで希釈した。未洗浄のＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲＡ４００（ＯＨ）５ｇをバッチ式で溶液に添加した。１.３４の初期ｐＨから約２.１までｐＨが上昇した。更に樹脂５ｇを添加したところｐＨは急速に９.０超に上昇した。樹脂を濾去し、濾液の最終ｐＨは９.８１となった。樹脂を脱イオン水で洗浄し、洗浄液を個々に収集した。
【００９０】
濾液を６０℃でロータリーエバポレーターにより濃縮し油状物とした。油状物は固化しなかった。ｎ−プロパノール約２０ｍｌを油状物に添加し、ロータリーエバポレーター濃縮を継続した。いくらかの粘稠で泡状の白色固体が一過性に形成したが、これらは油状物に戻った。出発物質、最終油状物、カラム洗浄液および濾液をＨＰＬＣで分析した。
【００９１】
滴定曲線
Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ４００（ＯＨ）樹脂６０ｇを４.７％（重量）の水酸化アンモニウム（２８％水酸化アンモニウム５０ｍｌ、脱イオン水２５０ｍｌ）で洗浄し、次いで、脱イオン水で十分洗浄した。最終電導度は６.１μＳであった。
【００９２】
ＨＣｌ／水の溶液１４２ｍｌ中Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約０.９ｇを含有するカチオン交換カラムカットを６０℃でロータリーエバポレーターで濃縮して油状物とした。脱イオン水で６０ｍｌに希釈したこの油状物に、攪拌しながら洗浄されたアニオン交換樹脂のアリコート０.５ｇを添加した。樹脂の各アリコートを添加した５分後、溶液のｐＨを測定し、試料をシリンジフィルターを介して採取した。合計で９ｇのアニオン交換樹脂を添加した。最終ｐＨは１０.８であった。樹脂を濾去し、濾液をロータリーエバポレーターで６０℃で濃縮して油状物とし、固体の形成はなかった。出発物質、最終濾液および全ての中間的な試料をＨＰＬＣおよびクロリドに関するイオンクロマトグラフィーにより試験した。
【００９３】
実施例４：過剰なＨＣｌの除去
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約３０５ｍｇ／ｍｌおよび０.２３当量の過剰のＨＣｌを含有する試料３.３ｇに、脱イオン水１６.７ｇを添加した。ｐＨは１.０４であった。この溶液１４ｍｌに、予め洗浄したＡｍｂｅｒｌｉｔｅ４００（ＯＨ）樹脂を添加し、ｐＨ２.５とした。アニオン交換処理により溶液の色は明黄色〜透明に明色化した。樹脂を濾去し、出発物質および濾液の生成物をクロリド滴定およびより厳密なＨＰＬＣにより分析した。
【００９４】
実施例５：遊離の両性イオンの調製
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約１ｇを含有する試料３.３ｇを２０ｇに希釈した。予備洗浄したＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ４００（ＯＨ）樹脂のアリコートを溶液に添加し、試料を定期的にシリンジフィルターを介して採取した。溶液中の樹脂を濾去し、次に濾液に新しい樹脂を添加し続けることにより、ｐＨ７.１および８.８で中間樹脂の濾過を実施した。これはクロリドの除去の平衡を促進し、生成物の吸着を最小限とするために実施した。１１.２の最終ｐＨが得られた後、樹脂を濾去した。出発物質、中間試料および最終濾液を分析した。濾過した樹脂を脱イオン水２０ｍｌに再懸濁し、濃塩酸を添加してｐＨを低下させた。試料をｐＨ８.１３および１.６３で採取し、ＨＰＬＣで分析した。
【００９５】
実施例６：遊離の両性イオンの調製
ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲＡ４００（Ｃｌ）樹脂を３ＭＨＣｌ、水、次いで３ＭＮａＯＨですすいだ。アリコートは樹脂１０ｇ当たり１００ｍｌとした。この操作を３回反復することにより樹脂を清浄化し、ＯＨ型を形成した。水による最終のすすぎは溶離した水の導電性が２μＳとなるまで行った。次に樹脂を用いてＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の５０ｍｇ／ｍｌ溶液４０ｍｌを滴定した。濃度を両性イオンの当量について表示した。滴定の間にわたりアリコートを採取し、濾過し、ＨＰＬＣで分析した。アリコートの部分試料を温存して第２のＨＰＬＣ分析用とし、滴定の１週間後に実施して試料の安定性を評価した。更に別のアリコートを採取してイオン選択性電極を用いたＣｌ分析に付した。ｐＨもまた滴定の間を通してモニタリングした。
【００９６】
実施例７：両性イオンの調製
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩約２ｇを含有する試料７ｇを脱イオン水で４０ｇに希釈した。予め洗浄したＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ（ＯＨ）樹脂約７.５ｇを添加してｐＨを６.５とした。樹脂を濾去した。週末を通して静置したところ、濾液は微細な沈殿の兆候を示した。溶液を顕微鏡で観察したところ、粒子は見られなかった。次に濾液の試料を窒素下に乾燥し、粘稠な油状物（２.１３ｇ）を得た。
【００９７】
ＨＰＬＣ法
ポンプＡ：２０ｍＭＫＨ2ＰＯ4、１０ｍＭペンタンスルホン酸、リン酸でｐＨ＝３に調整ポンプＢ：アセトニトリル
勾配：０分には０％Ｂ、１５分には２６％Ｂ、１５.１分には０％Ｂ
カラム：ＹＭＣ ＯＤＳ−ＡＱ１２０Ａ、５μｍ、２.６ｘ１５０ｍｍ
波長＝２０５ｎｍ
【００９８】
実施例８：遊離の両性イオンの調製
第１の実験によって水性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩溶液のｐＨは、おそらくはクロリドイオンの除去によりアニオン交換樹脂を用いて調節できることが示された。１.３７および１.８４の相対保持時間（ＲＲＴ）を有する２種の不純物が約１〜２％で新たに形成された。新しい不純物は未洗浄の樹脂から生じたものと考えられた。ＨＰＬＣ結果を以下の表１にまとめた。
【００９９】
【表１】
【０１００】
図２はｐＨを調節するためにアニオン交換樹脂を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの擬似滴定曲線を示す。ひし形（実線）はｐＨであり、四角（破線）はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン（初期値のパーセント、イオンクロマトグラフィーによる）である。図３はｐＨを調節するためにアニオン交換樹脂を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの擬似滴定曲線を示す。ひし形（実線）はｐＨであり、三角（破線）はクロリド（イオンクロマトグラフィーによる）である。
【０１０１】
これらの曲線は、試料が反応の進行中に採取されたため、そして、樹脂の漸増量を添加する前には真の平衡は達成されていなかったため、真の滴定曲線ではない。しかしなお、図２および図３のグラフは予測された傾向を示していた。樹脂をＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン溶液に添加するに従い、ｐＨは上昇し、ｐＨ２、９および１１近傍の傾きが変化していた。より遅いｐＨ上昇はそれぞれ、カルボン酸、アミンおよびアミジン官能基のｐＫを表す。ｐＨ１０以上ではＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの溶液中の濃度は低下する。この時点でＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインは実質の負電荷を獲得しており、樹脂に結合している。クロリドの結果は試料間のある程度の変動を示しているが、全般的にはｐＨ上昇に伴うクロリド含量の低下の傾向を示している。最終クロリド含量は約０.０４モル当量である。
【０１０２】
画分のＨＰＬＣの結果は試料の分解を示していなかった。上記実験の反復において、得られた試料をＨＰＬＣで分析した。出発物質と数時間以内のｐＨ１１での生成物のＨＰＬＣ結果の間には差はなかった。しかしながら、約１０日間室温で保存した後の高ｐＨ試料ではいくらかの分解ピークが約２〜３％のピーク面積で観察された。
【０１０３】
実施例９：遊離の両性イオンの調製
この実施例で観察された結果は前の実施例で観察された結果を反映していた。ここで使用したクロリド特異的な電極はＣｌ含量を測定するものであり、データのノイズははるかに小さかった（図４参照）。データはＣｌ ９８％の除去においてｐＨ〜１０.８５が達成されることを示している。より多くのＣｌを除去できるが、それにより樹脂への化合物の結合が多大となる（図５参照）。樹脂結合に起因する化合物のこの損失は滴定の終り頃に樹脂を濾過し、少量の新しい樹脂で交換することにより最小限にできる。この操作によりクロリドの除去の平衡が促進され、結合による化合物の損失に使用される部位を最小限にできる。
【０１０４】
図４はＩＲＡ−４００アニオン交換樹脂（Ｒｏｈｍ＆Ｈａａｓ Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ，Ｒｈｏｍ＆Ｈａａｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａより入手可能）を用いた水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線を示す。図５はｐＨ上昇に伴う関連する結合データを示す。
【０１０５】
ＨＰＬＣ分析はイオン対形成勾配法を用いて実施した。方法はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインを塩基性とした場合に予測される分解生成物の存在を検出することがわかっている。以下の表からわかるとおり、データは分解は即時的に起きているのではなく、むしろ数日間の期間にわたり起こっていることを示している。
【０１０６】
【表２】
【０１０７】
実施例１０：過剰なＨＣｌの除去／モノヒドロクロロ［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの製造
過剰なＨＣｌはアニオン交換樹脂を添加してｐＨを２.５とすることにより除去した。処理の間、溶液の色は明黄色から透明に変化した。出発物質および生成物の定性分析では新しいピークや不純物の増加は観察されなかった。滴定によるクロリド分析の結果はクロリドが２.１８当量から約１.１４当量に減少したことを示している。ここでは示さないが、クロリドはＨＣｌの添加により２.０の所望の目標に調節できる。
【０１０８】
これらの実施例において、クロリドの除去の工程はバッチ系において樹脂を攪拌することにより行ったが、これはプラント系においてもＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン２塩酸塩の溶液をアニオン交換樹脂カラムに付して再循環させることにより容易に行える。ｐＨが偶発的に所望範囲を超えて上昇した場合は、適切な量のＨＣｌを添加することにより容易に戻すことができる。この目的のための大規模なアニオン交換樹脂を設計することは等業者の知るとおりである。
【０１０９】
実施例１１：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶化
「ＯＨ」型のＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲＡ−４００樹脂で滴定することにより水溶液から両性イオンを得た。溶液のｐＨが約ｐＨ１１にまで上昇するに従い、アニオン交換樹脂は塩酸塩を排除した。焼結ガラス漏斗を通した濾過により両性イオンの溶液から樹脂が除去された。この溶液を液体窒素で凍結し、凍結乾燥してガラス状の不定形の生成物を得た。乾燥ガラス状物の元素分析によれば、典型的に０.３％未満のクロリドが示されていた。
【０１１０】
マレエート塩の初期の結晶化は、９０マイクロリットル（μｌ）の最終容量となるようにＨＰＬＣ等級の水で乾燥両性イオン３０ｇを溶解することにより行った。マレイン酸の溶液は、マレイン酸１.０５５グラムを用いて１０ｍｌ容のメスフラスコ中でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）で定容まで希釈することにより作成した。ＤＭＦ中のマレイン酸３００μｌを両性イオンの水溶液に攪拌しながら添加した。これは両性イオンの各当量に対しマレイン酸２当量であった。モレキュラーシーブ上で乾燥したアセトニトリルを溶液が濁るまで攪拌しながら滴加し、次に更に２〜３滴のアセトニトリルを添加した。溶液を週末を通じて攪拌した。得られたスラリーを偏光光学顕微鏡で検査した。正の伸長を示す複屈折の針状の結晶が観察された。固体を５.０μｍのＭｉｌｌｉｐｏｒｅＬＳフィルター上に収集し、４０℃で真空下に乾燥し、結晶性の生成物２８ｍｇを得た。わずか１当量のマレイン酸を用いた場合の相当する溶液はゲル状であった。
【０１１１】
実施例１２：Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの別の結晶化
その後の小規模の実験によれば、許容できる大規模化の条件が示された。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン両性イオン１.２１５グラムを水約３ｍｌに溶解した。マレイン酸１.２８３グラムおよびＤＭＦ１２ｍｌを攪拌しながら添加した。透明な溶液が急速に得られた。アセトニトリル１００Ｍｌを添加し、この時点で白濁している溶液に結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶種を添加した。１時間後、更にアセトニトリル１３ｍｌを添加した。スラリーを更に２時間攪拌し、次に結晶を数個のＭｉｌｌｉｐｏｒｅ５μｍＬＳフィルター上に収集した。極めて微小な粒径の濾過のため、比較的緩徐であった。固体をＭｉｌｌｉｐｏｒｅフィルター上でアセトニトリル少量を用いて洗浄した。これらの固体をビーカーに移し、４０℃で一夜真空乾燥した。
【０１１２】
合計で５つの別の実施例を結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートに対して提示する。実施例は全て３元溶媒系（ＤＭＦ／水／アセトニトリル）において実施した。１モル過剰のマレイン酸を使用し、そしてＤＭＦ対水の比は約３：１の一定に維持した。結晶種添加の効率もまた一部の実施例において評価した。不定形の固体は全ての実施例においてある程度観察された。
【０１１３】
実施例１３
凍結乾燥したＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン１.０ｇ、溶解したマレイン酸１.０５ｇを含むＤＭＦ１０ｍｌおよび水３.０ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、１２５ｒｐｍで攪拌して透明な溶液とした。アセトニトリル１００ｍｌをすぐに透明な溶液に添加し、その際、アリコートの添加により起こる白濁の大部分が次のアリコートの添加の前に治まるようにした。白濁した溶液の光学顕微鏡観察によれば、白濁は液相の分離（乳化）によるものであり、結晶核形成ではなかった。添加終了時にも溶液は白濁していた。溶液を一夜攪拌した。一夜保持する間に溶液は沈殿したが、スラリーの光学顕微鏡観察によれば固体は不定形であった。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種（３０ｍｇ）をスラリーに添加し、固体から結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートへの相変換を促進し、系を更に２４時間攪拌した。次にスラリーを約−１０℃に冷却し、更に２４時間攪拌することにより濾液中の生成物の損失を低減した。合計７２時間の後、スラリーを微小フリット焼結ガラス漏斗上で濾過し、ケーキをアセトニトリル４ｍｌで洗浄した。濾液はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン濃度約０.５重量％を有していた。固体を１時間風乾し、次に２４時間５０℃で真空オーブン中に入れた。固体は粉末Ｘ線回折およびＤＳＣの両方により結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートであったが、前者は最終固体中かなりの量の不定形の含量を示していた。
【０１１４】
実施例１４
実施例１４は同じ溶媒組成および両性イオンのロード量で実施したが、アセトニトリルおよび結晶種の添加方法および保持時間は不定形の含量および処理時間を低減するために適正化した。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン５００ｍｇ、マレイン酸５０２ｍｇ、ＤＭＦ５ｍｌおよび水１.５ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、攪拌して透明な溶液とした。アセトニトリル３１ｍｌ（合計添加量の６３％）を実施例１３で使用した方法で間歇的に溶液に添加した。ほぼ全ての白濁が最初のアセトニトリル添加の終了後の攪拌１時間以内に治まった。次に溶液に１５ｍｇのＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶を結晶種として添加し、そして、２時間攪拌した後、残余の１８ｍｌ（３７％）のアセトニトリルを添加した。スラリーを２４時間攪拌し、次に約−１０℃に冷却し、更に２４時間攪拌し、その後１５０ｍｌ容の微小フリット焼結ガラス漏斗上に排出した。ケーキをアセトニトリル４ｍｌで洗浄し、３０分間風乾し、次に５０℃で２４時間真空オーブン中に入れた。濾液中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの濃度は０.５５重量％であり、固体はＰＸＲＤによれば結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートであり、ベースラインのハローは一部不定形のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの存在を示していた。しかしながらハローは実施例１３の生成物の場合より顕著ではなかった。
【０１１５】
実施例１５
実施例１５の目的はアセトニトリルの量を低減することにより工程のスループットを向上できる可能性について調べることである。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン０.９グラム、マレイン酸０.９３グラム、ＤＭＦ９ｍｌおよび水２.７ｍｌを１２５ｍｌ容量のジャケット付反応容器に添加し、透明な溶液が生じるまで攪拌した。アセトニトリル５６ｍｌを他の実施例と同様の方法で溶液に間歇的に添加した。アセトニトリルの添加の終了後に白濁全体が治まった時点でＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種２３ｍｇを１回で添加した。系を１７５ｒｐｍで２４時間攪拌し、次にスラリーを１５０ｍｌの微小フリット焼結ガラス漏斗上に排出した。ケーキをアセトニトリル５ｍｌで洗浄し、４０分間風乾し、次に２４時間５０℃の真空オーブン中に入れた。生成物約６００ｍｇを乾燥後に回収した。濾液中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの濃度は約１.０重量％であった。生成物のＰＸＲＤ分析によれば不定形物質の含量は極めて低値であった。溶液のＮＭＲによれば生成物は０.１モル当量もの捕獲ＤＭＦを有していた。濾過の前およびオーブン乾燥後の光学顕微鏡によるスラリー中の固体の比較によれば、顕著な形態学的相違があった。不定形の固体がいくらか存在していた。
【０１１６】
実施例１６
実施例１６は核形成を誘導するための補助として結晶種添加を排除できるかどうか調べるために実施した。この実験の操作法の残りの部分は実施例１５と同様である。生成物における濾液の濃度および固体状態の属性は結晶種を使用しなくても同等の性能が得られることを示していた。
【０１１７】
実施例１７
実施例１７は、実施例１５および１６において使用した操作法の収率を、固体の大部分がすでに沈殿した後で冷却し、アセトニトリルを追加添加すりことにより改善できる可能性を調べるために実施した。操作では、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン１.０ｇ、マレイン酸１.０３ｇ、ＤＭＦ１０ｍｌおよび水３.０ｍｌを１２５ｍｌ容のジャケット付反応容器に添加し、攪拌して透明な溶液を形成した。アセトニトリル５６ｍｌを上記実施例と同様にして溶液に間歇的に添加した。アセトニトリル添加終了後、白濁が実質的に全て治まった後にＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶種２８ｍｇを添加した。結晶種添加後最初の２時間以内に顕著な沈殿が起こり、スラリーはジャケット上で約−１０℃に冷却した。この温度で２４時間スラリーを攪拌した。
【０１１８】
冷却中および保持期間の上澄みの分析によれば、濃度低下は僅かであり、従って、アセトニトリル２５ｍｌを添加することにより、逆溶媒（anti solvent）添加が収率を改善するかどうか調べた。更にアセトニトリルを添加した後、スラリーを２５℃に戻し、更に２４時間攪拌した後に１５０ｍｌの微小フリット焼結ガラス漏斗上で排出した。ケーキはアセトニトリル５ｍｌで洗浄した。本実施例のケーキはフィルター上で２時間風乾した後でさえも粘稠で極めて湿潤していた。これらの固体を４時間加熱することなく真空オーブン中に入れ、余分な溶媒を除去した。その後２４時間真空オーブン中５０℃で乾燥した。濾液の濃縮によっても逆溶媒を更に添加することの有意な利点は観察されなかった。乾燥直後のこの実施例の固体のＰＸＲＤ分析によれば、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶と混合された不定形の固体が一部存在していた。
【０１１９】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの特性化
偏光顕微鏡観察によれば正の伸長を示す複屈折の針状の結晶が、濾過による採取の前のスラリーにおいて、そして、４０℃で真空乾燥した後の単離生成物において観察された。
【０１２０】
Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は９０％ＲＨおよび２５℃において水分吸収量は１重量％未満であり、１２３℃で融解する。Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩は２３０ｍｇｍｌ-1超の水溶性を有する。
【０１２１】
表３はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエート結晶塩の元素分析ならびに１.５％の水分含量の理論的組成を示す。
【０１２２】
【表３】
【０１２３】
プロトンＮＭＲはＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン両性イオンおよびマレイン酸の１：１の組み合わせの構造および化学量論的特徴と合致していた。プロトンＮＭＲもまた実施例１１における０.２当量（３〜３.５％）のＤＭＦを示し、これは予測元素分析値を大きく変化させず、±０.４であった。
【０１２４】
図６はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１２）の粉末Ｘ線パターンである。図７はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１１）の粉末Ｘ線パターンである。実施例１１および実施例１２は共に結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートを特徴付ける際に有用な特徴的ピークを示している。
【０１２５】
図８はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（１０.０４６ｍｇ、実施例１２）の示差走査熱量試験のグラフである。図９はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（６.２１３０ｍｇ、実施例１１）の示差走査熱量試験のグラ
フである。
【０１２６】
図１０はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（４.７６８０ｍｇ、実施例１２）の熱重量分析プロットである。図１１はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１１）の熱重量分析プロットである。
【０１２７】
図１２はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの水分吸収試験のプロットである。
【０１２８】
図１３は結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートのラマンスペクトルを示す。慨すれば、ラマンスペクトルは分子または複合体系の振動の特徴である。その起源は分子と光線を含む光の粒子である光子との間の非弾性的な衝突にある。分子と光子の衝突はエネルギーの交換をもたらし、その結果エネルギーが変化し、これにより光子の波長が変化する。即ち、ラマンスペクトルは入射光により照射されるときに対象分子から発せられる極めて狭いスペクトルの線のセットである。各スペクトル線の幅は入射光のスペクトルの幅により大きく影響され、従って厳密に１色の光源、例えばレーザーを使用する。各ラマン線の波長は入射光からの波数シフトにより表示され、これはラマン線と入射光の波長の逆数の間の差である。吸収波長ではなく波数シフトはラマン線では分子内の特定の原子基に特異的である。ラマンスペクトルは分子の振動状態を測定するものであり、これはその分子構造により決定される。
【０１２９】
本発明に更に包含されるものは、１またはそれ以上の非毒性の薬学的に許容される担体および／または希釈剤および／またはアジュバント（総称して本明細書においては「担体」物質と称する）、および、所望により、他の活性成分と共に結晶性のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートを含む医薬組成物のクラスである。本発明のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶型は何れかの適当な経路で、好ましくはその経路に適合した医薬組成物の形態で、そして、意図する治療のために有効な用量で投与してよい。活性なＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートおよび組成物は、例えば経口、血管内、腹腔内、皮下、筋肉内または局所に投与してよい。
【０１３０】
経口投与の場合は、医薬組成物は例えば錠剤、カプセル、懸濁液または液体の形態であってよい。医薬組成物は好ましくは活性成分の特定の量を含有する用量単位の形態で製造する。このような用量単位の例は錠剤またはカプセルである。活性成分はまた、例えば食塩水、デキストロースまたは水を適当な担体として使用してよい組成物として注射により投与してよい。
【０１３１】
投与される治療的に活性な化合物の量および本発明の化合物および／または組成物により疾患状態を治療するための用法は多くの要因、例えば対象の年齢、体重、性別および病状、疾患の重症度、投与の経路および頻度、および、使用する特定の化合物により異なり、従って、大きく変動する。医薬組成物は活性成分を約０.１〜２０００ｍｇの範囲、好ましくは約０.５〜５００ｍｇの範囲、最も好ましくは約１〜１００ｍｇ含有してよい。約０.０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは約０.５〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重、そして最も好ましくは約０.１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の一日当たり用量が適切である。一日当たり用量は一日当たり１〜４回で投与してよい。
【０１３２】
結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートはまた経皮装置により投与できる。好ましくは経皮投与はリザーバおよび多孔性膜の型または固体マトリックス種の何れかであるパッチを用いて行う。いずれの場合においても、活性剤はレシピエントの皮膚または粘膜に接触している活性剤透過性の接着剤内に膜を経由してリザーバーまたはマイクロカプセルから継続的に送達される。活性剤が皮膚を経由して吸収される場合は、活性剤の制御され予め決定された流量がレシピエントに投与される。マイクロカプセルの場合はカプセル化剤はまた膜として機能してもよい。
【０１３３】
本発明のエマルジョンの油相は既知の態様において既知の成分から構築してよい。相は乳化剤のみを含んでもよいが、脂肪または油と、または、脂肪と油の両方と少なくとも１つの乳化剤との混合物を含んでもよい。好ましくは親水性乳化剤は、安定化剤として機能する親油性の乳化剤と共に含有される。油脂および脂肪の両方を含有することも好ましい。全体として、乳化剤は安定化剤の存在下または非存在下でいわゆる乳化ワックスと称されるものを形成し、そしてワックスは油および脂肪と一緒になっていわゆる乳化軟膏基剤と称されるものを形成し、これがクリーム製剤の油性の分散相を形成する。本発明の製剤において使用するのに適する乳化剤および乳化安定剤はＴｗｅｅｎ６０、Ｓｐａｎ８０、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアレートおよびラウリル硫酸ナトリウム等である。
【０１３４】
医薬エマルジョン製剤中で使用され得る大部分の油中の活性化合物の溶解度は極めて低値であるため、製剤用の適当な油または脂肪の選択は所望の審美的特性を達成することに基づく。即ち、クリームは好ましくは、チューブや他の容器からの漏出を回避するために、適当なコンシステンシーを有する非グリース性（non-greasy）、非染色性および洗浄可能な製品である。直鎖または分枝鎖の、１または２塩基性のアルキルエステル、例えば、ジイソアジペート、イソセチルステアレート、ココナツ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、イソプロピルミリステート、デシルオレエート、イソプロピルパルミテート、ブチルステアレート、２−エチルヘキシルパルミテートまたは分枝鎖エステルのブレンド物を使用してよい。これらは所望の性質に応じて単独または組み合わせて使用してよい。或は、高融点の脂質、例えば白色軟質パラフィンおよび／または流動パラフィンまたは他の鉱物油を使用することもできる。
【０１３５】
眼への局所投与に適する製剤いは、活性成分が適当な担体、特に活性成分のための水性溶媒に溶解または懸濁されている点眼剤も包含する。活性成分は好ましくはそのような製剤中０.５から２０％、好都合には０.５〜１０％、特に約１.５重量％の濃度で存在する。
【０１３６】
治療目的のためには、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートは通常は望ましい投与経路に適切な、１またはそれ以上のアジュバントと組み合わせる。経口投与する場合は、化合物は乳糖、スクロース、澱粉、アルカン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウムおよびカルシウム塩、ゼラチン、アカシアガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、および／または、ポリビニルアルコールと混合し、次に好都合な投与のために錠剤化またはカプセル化してよい。このようなカプセルまたは錠剤はヒドロキシプロピルメチルセルロース中の活性化合物の分散物として提供され得る、放出制御型製剤を含んでよい。非経口投与のための製剤は水性または非水性の等張性の滅菌された注射用の溶液または懸濁液の形態であってよい。これらの溶液および懸濁液は、経口投与のための製剤における使用のために例示される、１つまたはそれ以上の担体または希釈剤を有する滅菌された粉末または顆粒から調製してよい。結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートは水、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、コーン油、綿実油、ピーナツ油、ゴマ油、ベンジルアルコール、塩化ナトリウム、および／または、種々の緩衝液に溶解してよい。他のアジュバントおよび投与様式は薬学分野でよく知られるとおりである。
【図面の簡単な説明】
【０１３７】
【図１】全てのイオン化状態を示しているＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線の図である。
【図２】ＩＲＡ−４００（ＯＨ）アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線のグラフ表示である。ひし形はｐＨ、四角（破線）はＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン（％初期値、イオンクロマトグラフィーによる）を示す。
【図３】ＩＲＡ−４００（ＯＨ）アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線のグラフ表示である。ひし形はｐＨ、三角（破線）はクロリド（イオンクロマトグラフィーによる）を示す。
【図４】ＩＲＡ−４００アニオン交換樹脂を用いた場合の水中のＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの滴定曲線を示す。
【図５】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインの両性イオンのｐＨを上昇させた場合の関連する結合データを示す。
【図６】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１２）の粉末Ｘ線パターンである。
【図７】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１１）の粉末Ｘ線パターンである。
【図８】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（１０.０４６ｍｇ、実施例１２）の示差走査熱量測定試験のグラフである。
【図９】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（６.２１３０ｍｇ、実施例１１）の示差走査熱量測定試験のグラフである。
【図１０】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（４.７６８０ｍｇ、実施例１２）の熱重量分析プロットである。
【図１１】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料（実施例１１）の熱重量分析プロットである。
【図１２】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの水分吸着試験のプロットである。
【図１３】Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの試料のラマンスペクトルである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
９０％ＲＨ、２５℃における水分吸収量１重量％未満；１２３℃の融点；２３０ｍｇ ｍｌ-1超の水溶性；実質的に図６に示すＸ線粉末パターン；実質的に図７に示すＸ線粉末パターン；実質的に図１３に示すラマンスペクトル；および実質的に表３に示す元素分析値の少なくとも１つを特徴とするＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶形態。
【請求項２】
薬学的に許容される担体と共に請求項１記載の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートを含む医薬組成物。
【請求項３】
請求項１の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−L−システインマレエートの有効量を、病理学的に高い生成量が部分を構成する状態の治療が必要な対象に投与することを含む該対象における該状態の治療方法。
【請求項４】
請求項１の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの有効量を対象に投与することを含む対象における酸化窒素生成を低減する方法。
【請求項１】
９０％ＲＨ、２５℃における水分吸収量１重量％未満；１２３℃の融点；２３０ｍｇ ｍｌ-1超の水溶性；実質的に図６に示すＸ線粉末パターン；実質的に図７に示すＸ線粉末パターン；実質的に図１３に示すラマンスペクトル；および実質的に表３に示す元素分析値の少なくとも１つを特徴とするＳ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの結晶形態。
【請求項２】
薬学的に許容される担体と共に請求項１記載の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートを含む医薬組成物。
【請求項３】
請求項１の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−L−システインマレエートの有効量を、病理学的に高い生成量が部分を構成する状態の治療が必要な対象に投与することを含む該対象における該状態の治療方法。
【請求項４】
請求項１の結晶性Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システインマレエートの有効量を対象に投与することを含む対象における酸化窒素生成を低減する方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【公表番号】特表２００６−５１９８３４（Ｐ２００６−５１９８３４Ａ）
【公表日】平成１８年８月３１日（２００６．８．３１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５０６２９８（Ｐ２００６−５０６２９８）
【出願日】平成１６年３月４日（２００４．３．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００４／０００６２７
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０８０９５５
【国際公開日】平成１６年９月２３日（２００４．９．２３）
【出願人】（５０２４２７３２３）ファルマシア・コーポレーション (67)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年８月３１日（２００６．８．３１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年３月４日（２００４．３．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００４／０００６２７
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０８０９５５
【国際公開日】平成１６年９月２３日（２００４．９．２３）
【出願人】（５０２４２７３２３）ファルマシア・コーポレーション (67)
【Ｆターム（参考）】
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