アカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤
【課題】グラム陽性細菌に対して抗菌活性を有する抗菌剤を提供すること。
【解決手段】アカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤、食品用日持向上剤、ならびに前記抗菌剤を含有する医薬品、化粧料および食品。
【解決手段】アカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤、食品用日持向上剤、ならびに前記抗菌剤を含有する医薬品、化粧料および食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤に関する。具体的には、本発明は、アカメガシワ抽出物を含有する医薬品、化粧料、及び食品用の抗菌剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
グラム陽性細菌を原因とする疾患に対して、β−ラクタム系抗菌剤、キノロン系抗菌剤、マクロライド系抗菌剤などの合成抗菌剤が多く用いられている。
しかしながら、これら合成抗菌剤は、生体にとって異物であるため、服用した際にアレルギー症状を発症させることがある。
特に、小児においては、合成抗菌剤を服用した場合、重篤な後遺症を起こすこともあることから、より安全性の高い抗菌剤が求められている。
【０００３】
また、医薬品以外にも化粧料や食品の分野において、製品に混入した微生物、特にグラム陽性細菌が原因となって製品の品質の劣化を引き起こすことが知られている。
化粧料や食品についても、医薬品同様に、生体に摂取されるものであるため、より安全性の高い製品が求められている。
【０００４】
安全性の高い天然素材の抗菌性物質として、例えば、子嚢菌又は担子菌の子実体の水及び／又は有機溶媒抽出物を有効成分とする抗菌剤（特許文献１）、イチゴ果由来化合物類を有効成分として含有する抗菌剤（特許文献２）、甘草または厚朴等の生薬を有効成分とする抗菌剤（特許文献３）、黄ゴン抽出物から分離精製したジメトキシテトラヒドロキシフラボンを主活性成分として含むことを特徴とする天然抗菌剤（特許文献４）、エビネ属に属する植物からの圧搾物及び／または抽出物を含むことを特徴とする抗フケ菌剤（特許文献５）等多数の報告がある。
【０００５】
アカメガシワの樹皮は、従来から、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃酸過多症などに用いられる生薬として知られている。
そして、特許文献６及び７には、アカメガシワ樹皮の抽出物がグラム陰性菌であるヘリコバクター・ピロリに対して抗菌作用を有することが開示されている。
また、特許文献８には、アカメガシワの抽出物がピヒア ポリモルフィア等の酵母のガス発生を抑制することが開示されている。
さらに、特許文献９には、アカメガシワの抽出物が抗酸化剤であることが開示され、特許文献１０には、アカメガシワの抽出物であるマロツシン酸とマロチン酸が抗酸化剤であることが開示されている。特許文献１１には、アカメガシワ樹皮のエキスを有効成分として含有することを特徴とする肝機能改善剤が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００７−００１９６１号公報
【特許文献２】特開２００６−０８９４１０号公報
【特許文献３】特開２００５−１３２８０４号公報
【特許文献４】特開２００４−０５９５６６号公報
【特許文献５】特開平１１−２９４８９号公報
【特許文献６】特開平７−１９６５２２号公報
【特許文献７】特開２００３−３４２１９０号公報
【特許文献８】特開昭５５−１３１３７３号公報
【特許文献９】特開平１０−１７４３５号公報
【特許文献１０】特開２００７−２５４４２７号公報
【特許文献１１】特開平１１−２０９２９７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、従来の抗菌剤は、安全性の点でさらなる向上が求められており、また、抗菌剤は使用し続ける結果、耐性菌が生じてくるという問題点もあるため、安全性が高く、かつ新たな抗菌剤が求められている。
さらに、ＥＢＭ（Ｅｖｉｄｅｎｃｅ Ｂａｓｅｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）といった考え方の元、特定の抗菌スペクトルを持つ抗菌剤も求められている。
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、天然素材由来であり、かつグラム陽性細菌に対して抗菌活性を有する新たな抗菌剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために、鋭意検討を重ねた結果、アカメガシワ抽出物がグラム陽性細菌に対して抗菌作用を有することを見出し、本発明を完成した。
【０００９】
本発明は、以下のとおりである。
［１］
アカメガシワ抽出物を含有するグラム陽性細菌に対する抗菌剤。
［２］
前記グラム陽性細菌がＢａｃｉｌｌｕｓ属細菌又はＳｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ属細菌である、［１］に記載の抗菌剤。
［３］
前記アカメガシワ抽出物が水もしくは有機溶媒またはこれらの混合溶媒による抽出物である、［１］又は［２］に記載の抗菌剤。
［４］
前記アカメガシワ抽出物が酢酸エチル可溶成分である、［１］〜［３］のいずれか一項に記載の抗菌剤。
［５］
［１］〜［４］のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有する医薬品。
［６］
食品の日持向上用である、［１］〜［４］のいずれか一項に記載の抗菌剤。
［７］
アカメガシワ抽出物を含有する食品用日持向上剤。
［８］
［１］〜［４］及び［６］のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有する食品用日持向上剤。
［９］
［７］又は［８］に記載の食品用日持向上剤を含有する食品。
［１０］
［１］〜［４］及び［６］のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有することによる、食品の日持ちを向上させる方法。
［１１］
［１］〜［４］及び［６］のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有することによる、食品中のグラム陽性細菌の増殖を抑制する方法。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、グラム陽性細菌に対して抗菌スペクトラムを有する新たな抗菌剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明を実施するための形態について詳細に説明する。なお、本発明は以下の実施の形態に限定されるものではなく、その要旨の範囲内で種々変形して実施することがで
きる。
【００１２】
本発明の抗菌剤は、アカメガシワ抽出物を含有するものであり、グラム陽性細菌に対する抗菌剤である。
本発明において用いられるアカメガシワ抽出物は、トウダイグサ科の落葉性のアカメガシワ（Ｍａｌｌｏｔｕｓ ｊａｐａｎｉｃｕｓ）の抽出物であれば、特に限定されるものではないが、葉、根、茎、花、皮（樹皮）、果実等の植物体から抽出したものである。
アカメガシワ抽出物としては、生の植物体から直接抽出した抽出物であってもよく、一度乾燥させた植物体から抽出された抽出物や加熱焙煎した植物体から抽出された抽出物であってもよい。
アカメガシワ抽出物としては、樹皮からの抽出物（アカメガシワ樹皮抽出物）または葉からの抽出物（アカメガシワ葉抽出物）であることが好ましい。
【００１３】
本発明においてアカメガシワの抽出物を得る方法としては、特に限定されず、公知の抽出方法により行うことができるが、アカメガシワの樹皮を例に説明すると、例えば、アカメガシワの樹皮を水もしくは有機溶媒またはこれらの混合溶媒に浸漬させて抽出することにより、アカメガシワ抽出物を得ることができる。
有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、アセトン、酢酸エチル、クロロホルム等の溶媒が挙げられる。有機溶媒としては、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、アセトン、酢酸エチル等の極性基を有する極性溶媒が好ましい。これら有機溶媒は、１種で用いてもよく、２種以上を混合溶媒として用いてもよい。
アカメガシワを有機溶媒で抽出する際には、水を加えて二層系での抽出方法により行ってもよく、水と有機溶媒との混合溶媒による抽出方法により行ってもよい。
【００１４】
アカメガシワの抽出方法としては、具体的には、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノール等の低級アルコール溶媒で抽出を行い、固形分をろ過後、ろ液中のアルコール溶媒を濃縮して得られたアカメガシワ抽出物を、前記有機溶媒を用いてさらに抽出を行い、有機溶媒を濃縮してアカメガシワの抽出物を得る方法が挙げられる。
【００１５】
アカメガシワ抽出物としては、水もしくは有機溶媒またはこれらの混合溶媒に可溶な成分が挙げられる。
アカメガシワ抽出物である有機溶媒可溶成分としては、酢酸エチル可溶成分、エタノール可溶成分等が挙げられる。
アカメガシワ抽出物としては、２種以上の溶媒に可溶な成分であってもよい。
【００１６】
本発明のアカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤は、グラム陽性細菌に対する抗菌剤である。
グラム陽性細菌としては、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａｒｖａｅ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｕｓ、Ｂａｓｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ等のＢａｃｉｌｌｕｓ属細菌、Ｓｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ ｈｙｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ等のＳｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ属細菌、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ等のＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属細菌、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ等のＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属細菌、Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｎａｅｒｏｂｉｕｓ、Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ等のＰｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属細菌、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｈｉｓｔｌｙｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｎ ｃｈａｕｖｏｅｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ等のＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ属細菌、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｕｓ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｙｌａｅ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｒｏｓｅｕｓ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｓｅｄｅｎｔａｒｉｕｓ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｃａｎｄｉｄｕｓ等のＭｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ属細菌、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ等のＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属細菌、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｉｖａｎｏｖｉｉ等のＬｉｓｔｅｒｉａ属細菌、Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ ｒｈｕｓｉｏｐａｔｈａｅ、Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ ｔｏｎｓｉｌｌａｒｕｍ等のＥｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ属細菌、Ｒｅｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓａｌｍｏｎｉｎａｒｕｍ等のＲｅｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｅｎａｌｅ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ等のＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｋａｎｓａｓｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ等のＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｉｓｒａｅｌｉｉ、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ等のＡｃｔｉｎｏｍｙｓｅｓ属細菌、Ｄｅｒｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ ｃｏｎｇｏｌｅｎｓｉｓ等のＤｅｒｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ属細菌、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｌｉｓ、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｓｃｉａｎｓ等のＲｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ属細菌等が挙げられる。
【００１７】
本発明において、アカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤は、医薬品又は化粧料として用いることができる。また、食品に添加して食品の日持向上用の抗菌剤として用いることもできる。
【００１８】
本発明において前記抗菌剤を含有する医薬品としては、薬学的に許容可能な賦形剤を添加して、医薬製剤として用いることができる。
医薬製剤としては、粉末、顆粒、錠剤等の公知の剤型に製剤化して用いることができ、液体、ペースト等の液剤として用いることもできる。
本発明の前記抗菌剤は、天然素材を由来とする成分であるため、消毒等に用いる抗菌性スプレー用の液剤、ハンドクリームとすることも好適である。
液剤の溶媒としては、水、エタノールなどの公知の薬学的に許容可能な溶媒が用いられ、他の薬効成分、他の薬学的に許容可能な賦形剤を含有してもよい。
【００１９】
医薬製剤としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、液剤、シロップ剤、チュアブル、トローチ等の経口剤、軟膏剤、ゲル剤、クリーム剤、貼付剤等の外用剤、注射剤、舌下剤、吸入剤、点眼剤、坐剤等の剤形として用いることができる。医薬製剤の剤形として、好ましくは、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、注射剤である。
【００２０】
本発明における医薬品製剤中の前記抗菌剤の含有量としては、医薬製剤の全質量に対して、アカメガシワ抽出物を０．００５〜１．０質量％で含有することが好ましく、０．０１〜０．５質量％で含有することがより好ましく、０．０５〜０．３質量％で含有することがさらに好ましい。
【００２１】
医薬製剤は、第１４改正日本薬局方解説書の製剤総則に記載されている方法等、公知の方法により製造できる。例えば、顆粒剤の場合には、アカメガシワ抽出物に、必要に応じて賦形剤、結合剤、崩壊剤、溶媒等を加えて攪拌造粒、押し出し造粒、転動造粒、流動床造粒、噴霧造粒等を行い製造することができる。また、精製白糖球状顆粒、乳糖・結晶セルロース球状顆粒、白糖・デンプン球状顆粒、粒状結晶セルロース等の芯物質に、水、又は白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等の結合剤溶液を噴霧しながら、アカメガシワ抽出物及びコーンスターチ、結晶セルロース、ヒド
ロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン等の添加剤を含む散布剤をコーティングしてもよい。さらに、必要に応じて整粒、粉砕を行ってもよい。
【００２２】
このようにして製造した顆粒剤に、さらに必要に応じて、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、抗酸化剤、矯味剤、着色剤、香料等を加えて打錠して錠剤とすることもできる。また、原薬であるアカメガシワ抽出物に、必要な賦形剤を加えて直接打錠して錠剤としてもよい。また、アカメガシワ抽出物に、乳糖、白糖、ブドウ糖、デンプン、微結晶セルロース、カンゾウ末、マンニトール、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム等の賦形剤を添加・混合したものや、上記の顆粒剤をカプセルに充填することもできる。
【００２３】
賦形剤の具体例としては、例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、果糖、デンプン、バレイショデンプン、コーンスターチ、コムギデンプン、コメデンプン、結晶セルロース、微結晶セルロース、カンゾウ末、マンニトール、エリスリトール、マルチトール、ソルビトール、トレハロース、無水ケイ酸、ケイ酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、無水リン酸カルシウム、硫酸カルシウム等を挙げることができる。
【００２４】
結合剤の具体例としては、例えば、ゼラチン、デンプン、アラビアゴム、トラガント、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、部分α化デンプン、α化デンプン、ポリビニルアルコール、アルギン酸ナトリウム、プルラン、グリセリン等を挙げる
ことができる。
【００２５】
崩壊剤の具体例としては、例えば、アミノ酸、デンプン、コーンスターチ、炭酸カルシウム、カルメロース、カルメロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、クロスポビドン等を挙げることができる。
【００２６】
滑沢剤の具体例としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、フマル酸ステアリルナトリウム、タルク、マクロゴール等を挙げることができる。
【００２７】
抗酸化剤の具体例としては、例えば、アスコルビン酸ナトリウム、Ｌ−システイン、亜硫酸ナトリウム、トコフェロール、大豆レシチン等を挙げることができる。
【００２８】
矯味剤の具体例としては、例えば、クエン酸、アスコルビン酸、酒石酸、リンゴ酸、アスパルテーム、アセスルファムカリウム、ソーマチン、サッカリンナトリウム、グリチルリチン二カリウム、グルタミン酸ナトリウム、５'−イノシン酸ナトリウム、５'−グアニル酸ナトリウム等を挙げることができる。
【００２９】
着色剤の具体例としては、例えば、酸化チタン、三二酸化鉄、黄色三二酸化鉄、コチニール、カルミン、リボフラビン、食用黄色５号、食用青色２号等を挙げることができる。
【００３０】
香料の具体例としては、例えば、レモン油、オレンジ油、メントール、はっか油、ボルネオール、バニラフレーバー等を挙げることができる。
【００３１】
液剤を製造する際にも、同様に公知の方法を使用すればよい。アカメガシワ抽出物を精製水やエタノール等の溶媒に溶解し、必要に応じて、界面活性剤、消泡剤等を加えてもよい。
【００３２】
界面活性剤の具体例としては、例えば、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレン共重合物、ラウリル硫酸ナトリウム等を挙げることができる。
【００３３】
消泡剤の具体例としては、例えば、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、トリオレイン酸ソルビタン等を挙げることができる。
【００３４】
本発明の抗菌剤を含有する医薬製剤は、アカメガシワ抽出物がグラム陽性細菌に対する抗菌活性を有するため、グラム陽性細菌が関与する疾患である敗血症、炭疽、壊疽、破傷風、胃腸炎、皮膚炎、脳炎、神経炎、結核、腎炎、食中毒等の疾患の治療剤または予防剤として用いることができる。
【００３５】
医薬製剤は、動物、特に哺乳類、より具体的には、ヒトにおいて、上記疾患の治療または予防に有用であり、哺乳類、特にヒトに投与することができる。
アカメガシワ抽出物の投与量は、個々の薬剤の活性、患者の症状、年齢、体重等の種々の条件により変化し得るが、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤またはシロップ剤等による経口投与の場合、０．１〜５０ｍｇ／ｄａｙ、好ましくは１〜２５ｍｇ／ｄａｙであり、坐剤による投与の場合、０．０１〜１０ｍｇ／ｄａｙ、好ましくは０．１〜５ｍｇ／ｄａｙであり、注射剤による投与の場合、０．０１〜１０ｍｇ／ｄａｙ、好ましくは０．１〜５ｍｇ／ｄａｙである。
投与回数は特に限定されないが、１日１〜３回程度が好ましい。
【００３６】
本発明において前記抗菌剤を含有する化粧料としては、化粧料に添加する公知の賦形剤を添加して、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用等の化粧料として用いる
ことができる。
【００３７】
本発明における化粧料中の前記抗菌剤の含有量としては、化粧料の全質量に対して、アカメガシワ抽出物を０．００５〜１．０質量％で含有することが好ましく、０．０１〜０．５質量％で含有することがより好ましく、０．０５〜０．３質量％で含有することがさらに好ましい。
【００３８】
本発明のアカメガシワ抽出物は、食品用日持向上剤抗菌剤として用いることができる。本発明のアカメガシワ抽出物を含有する食品用日持向上剤は、グラム陽性細菌に対する抗菌剤としての作用も有するため、食品に添加することにより、風味への悪影響を及ぼすことなく、また、品質を低下させることなく、食品の日持ちを、大幅に向上させることができる。
また、本発明の前記抗菌剤は、食品用の日持向上剤として用いることができる。
本発明の前記抗菌剤を食品用日持向上剤として、食品に添加することにより、風味への悪影響を及ぼすことなく、また、品質を低下させることなく、食品の日持ちを、大幅に向上させることができる。本発明は、前記抗菌剤を添加して、食品中に前記抗菌剤を含有することによる、食品の日持ちを向上させる方法にも関する。
【００３９】
本発明の前記抗菌剤は、食品中に添加することにより、食品中のグラム陽性細菌の増殖を抑制することもできる。本発明は、前記抗菌剤を添加して、食品中に前記抗菌剤を含有することによる、食品中のグラム陽性細菌の増殖を抑制する方法にも関する。
【００４０】
本発明のアカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤は、食品の日持ちを向上させる場合には、加工食品の加熱過程に対する耐熱性を有する、Ｂａｃｉｌｌｕｓ属細菌、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ属細菌等の耐熱性グラム陽性細菌に対する抗菌剤であることが好ましい。また、食品の原料中に存在して、食品の腐食を促進させる起因菌である、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）等のＢａｃｉｌｌｕｓ属細菌、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）等のＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ属細菌に対する抗菌剤であることがより好ましい。
【００４１】
本発明の食品用日持向上剤は、食品に添加する場合、食品は、例えば、コンビニエンスストアやスーパーマーケット等の店内で陳列されて販売されるため、２５〜３０℃の温度条件下、２〜３日間、品質を安定に保って保存できることが好ましい。
【００４２】
本発明において、食品用日持向上剤として、食品の日持ちを向上させて長期に保存することができるかどうかは、実施例において後述するように、バイオアナライザー（ＢＴＡ）を用いて、微生物が増殖する際に発生する熱を測定することにより、微生物の増殖を検出することによって確認することができる。
【００４３】
本発明の食品用日持向上剤としては、アカメガシワ抽出物を粉末状、顆粒状にして用いることができ、また、抽出に用いた溶媒を濃縮させることなく、又は濃縮途中の状態のものをアカメガシワから抽出した溶液として用いることもできる。
【００４４】
本発明の食品は、アカメガシワ抽出物を含有する食品用日持向上剤を、含有するものである。また、本発明の食品は、アカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤を日持向上剤として含有するものである。
アカメガシワ抽出物を日持向上剤として、食品に含有する場合には、食品の全質量に対して、アカメガシワ抽出物を０．０１〜２．０質量％で添加することが好ましく、０．０５〜１．０質量％で添加することがより好ましく、０．１〜０．７質量％で添加することがさらに好ましい。
アカメガシワ抽出物を０．０１〜２．０質量％で食品用日持向上剤として含有することにより、食品の日持ちを向上させることができると共に、味に変化を与えることない食品を提供することができる。
【００４５】
本発明の前記抗菌剤は、グラム陽性細菌の増殖を抑制することができるので、食品用日持向上剤である場合に加え、食品の殺菌剤、防腐剤、保存剤、保存料、腐敗防止剤としても用いることが好適である。
また、本発明の抗菌剤は、食品の日持を向上させるという性質を有するので、本発明は、アカメガシワ抽出物からなる食品用日持向上剤をも提供する。本発明は、アカメガシワ抽出物からなる食品用の殺菌剤、防腐剤、保存剤、保存料、腐敗防止剤をも提供する。
【００４６】
本発明の食品は、前記食品用日持向上剤を含有する食品であって経口摂取可能な組成物であれば、特に制限されるものではない。
本発明の食品は、アカメガシワ抽出物がグラム陽性細菌に対して抗菌活性を有し、食品の日持ちを向上させることができるので、加工食品であることが好ましく、中でも、加熱調理された加工食品であることがより好ましい。
【００４７】
食品としては、特に限定されるものではないが、食肉加工品、食肉惣菜、水産練製品、漬物、麺類、米飯類、カスタードクリーム、ソフトクリームなどの菓子類等が挙げられる。
【００４８】
食肉惣菜としては、食肉を調理して得られる食品が挙げられ、特に限定されるものではないが、例えば、ハンバーグ、ミートボール、肉団子、メンチカツ、コロッケ、とんかつ、唐揚げ、フライドチキン、ナゲット、照り焼き、焼き鳥、シュウマイ、ギョウザ、肉まん、春巻き、ハム、ソーセージ、ベーコン等が挙げられる。
【００４９】
水産練製品としては、特に限定されるものではないが、例えば、シュウマイ、かまぼこ、笹かまぼこ、揚げかまぼこ、すじ、つみれ、ちくわ、さつま揚げ、はんぺん、ちくわぶ、イカ巻き、魚肉ソーセージ等が挙げられる。
【００５０】
菓子類としては、特に限定されるものではないが、例えば、生クリーム、プリン、ゼリー、ババロア、シュークリーム、カスタードクリーム等が挙げられる。
【００５１】
本発明の食品には、公知の日持向上剤及び保存剤を添加してもよい。日持向上剤及び保存剤としては、例えば、グリシン、アラニン、ベタインなどのアミノ酸、酢酸、乳酸、クエン酸、リンゴ酸などの有機酸及びそれらに塩、リゾチーム、ポリリジン、プロタミン、ソルビン酸等を挙げることができる。
【００５２】
本発明の食品には、他の公知の添加剤を添加してもよく、添加剤としては、甘味料、着色料、増粘安定剤、酸化防止剤、漂白剤、ガムベース、調味料、苦味料、酸味料、強化剤、乳化剤、香料、香辛料、凝固剤、消泡剤等を挙げることができる。
【００５３】
本発明における食品の製造方法としては、特に制限されるものではなく、前記食品を製造する際の公知の方法を使用して製造する方法が挙げられる。
例えば、食品の材料となる食品素材を混合した後に、本発明の食品用日持向上剤を添加し、加熱調理して食品とすることができる。本発明の食品用日持向上剤は、加熱後であっても、食品の日持ちを向上させることができる。
【００５４】
本発明における食品への前記食品用日持向上剤の添加方法としては、特に制限されるものではないが、調理中、又は調理後に、食品に対して、前記食品用日持向上剤を溶解、混和、練り込み、吹き付け、塗り付け、振りかけ、まぶす等することにより添加して行うことができる。
【実施例】
【００５５】
以下、本発明を実施例及び比較例により具体的に説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００５６】
［製造例１］
（アカメガシワ抽出物）
１１０℃で５０分間、加熱焙煎したアカメガシワ樹皮４８７ｇに含水８０容量％エタノール５Ｌを加えて、液温を５０℃に昇温して２時間抽出した。次いで、液温５０℃の含水８０容量％エタノール５Ｌで２時間抽出を行った。さらに、液温５０℃の含水８０容量％エタノール５Ｌで２時間抽出を行い、室温下、一晩浸漬抽出を行った。得られたエタノール抽出液を併せて、減圧下、６０℃で濃縮乾固して、アカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）を７７．５ｇ得た。
【００５７】
［実施例１］
（液体培地を用いた最小発育阻止濃度の測定）
（１）試料
製造例１で得られたアカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ、Ｗａｋｏ）に２０，０００μｇ／ｍＬとなるよう溶解し、試料溶液とした。試料溶液は使用溶媒（ＤＭＳＯ）を用いて２倍段階希釈し、実験に供した。
（２）供試菌株
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ ＮＢＲＣ １２５８３T
・Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ ＮＢＲ
Ｃ １２７３２
・Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ＮＢＲＣ １３２７５
各細菌はＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を用いて３２．５℃で２４時間増菌培養した。バクテリアカウンティングチャンバーで菌数確認をした後、ペプトン食塩緩衝液（日水製薬）を用いて２．０×１０6ＣＦＵ／ｍＬとなるよう調製し、実験に供した。
（３）微量液体希釈法による植物抽出物のＭＩＣ測定
９６穴マイクロプレートを用いた微量液体希釈法によってＭＩＣを測定した。Ｍｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を１７０μＬ加えたウェルに、試料溶液を１０μＬ添加し、終濃度がそれぞれ６２．５、１２５、２５０、５００、および１，０００μｇ／ｍＬとなるよう調製した。そこに菌液を２０μＬ（終濃度２．０×１０5ＣＦＵ／ｍＬ）添加し、３２．５℃で３日間培養した。なお、試料溶液のみを培地に添加、菌液のみを培地に添加、試料溶液の溶媒（ＤＭＳＯ）のみを培地に添加した系についてもそれぞれ同様に培養を行った。
培養後、試料溶液および菌液を添加した系について目視にて微生物の発育が見られない、あるいは６００ｎｍにおける吸光度が試料溶液のみを添加した培地と同等となる最小濃度をＭＩＣとした。
（４）結果
アカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）はＢ． ｃｏａｇｕｌａｎｓに対して１，０００μｇ／ｍＬ、Ｓ． ａｕｒｅｕｓに対して５００μｇ／ｍＬ、およびＰ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａに対して＞１，０００μｇ／ｍＬのＭＩＣを示した。
【００５８】
［製造例２］
（アカメガシワ抽出物）
焙煎していないアカメガシワ葉３０５ｇに含水８０容量％エタノール４Ｌを加え、液温５０℃で２時間抽出し、ろ過した。次いで、含水８０容量％エタノール３Ｌを加え、液温５０℃、２時間で２回抽出、ろ過を行った。得られた抽出液は減圧下６０℃で濃縮乾固し、抽出物４３．２を得た。抽出物に水６００ｍＬを加え、ヘキサン６００ｍＬで３回、次いで、酢酸エチル６００ｍＬで３回、液々分配し、各層を減圧下６０℃で濃縮乾固し、アカメガシワ抽出物（水層）２９．４ｇ、アカメガシワ抽出物（酢酸エチル層）６．６１ｇ、アカメガシワ抽出物（ヘキサン層）７．４０ｇを得た。
【００５９】
［実施例２］
（液体培地を用いた最小発育阻止濃度の測定）
実施例１と同様に行った、試験結果を表１に示す。
【００６０】
【表１】
【００６１】
［実施例３］
（寒天培地を用いた最小発育阻止濃度の測定）
（１）試料
以下の試料をジメチルスルホキシド（Ｗａｋｏ）に２０，０００μｇ／ｍＬとなるよう溶解し、試料溶液とした。試料溶液は使用溶媒（ＤＭＳＯ）を用いて２倍段階希釈し、実験に供した。
・製造例１で得られたアカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）
・ヘチマ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）
ヘチマ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）は、以下の製造方法により製造した。ヘチマ４７５ｇに含水８０容量％エタノール１１Ｌを加え、液温５０℃に加温後、室温下３日間浸漬抽出した。次いで、含水８０容量％エタノール１０Ｌを加え、液温５０℃に加温後、室温下、一晩浸漬抽出した。得られた抽出液は減圧下６０℃で濃縮乾固し、抽出物８．７５ｇを得た。
（２）供試菌株
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １５３０５T
・Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＮＢＲＣ ３９７２
各細菌はＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を用いて３２．５℃で２４時間増菌培養した。バクテリアカウンティングチャンバーで菌数確認をした後、ペプトン食塩緩衝液（日水製薬）を用いて２．０×１０5ＣＦＵ／ｍＬとなるよう調製し、実験に供した。
（３）最小発育阻止濃度の測定
上記（１）で作製した試料溶液１ｍＬとＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）１９ｍＬを混釈し、試料濃度が１，０００μｇ／ｍＬとなるよう平板を作製した。なお、試料溶液の代わりに溶媒（ＤＭＳＯ）のみを添加した培地も同様に作製した。培地の固化後、タイピングアパライザーを用いて供試菌株を各々の植物抽出物混合平板に接種した。３２．５℃で３日間培養後、コロニー形成の有無により抗菌性を確認した。ただし、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉは３２．５℃で２４時間培養した。コロニー形成が認められた場合は抗菌性無し、認められない場合を抗菌性有りと判定した。
（４）結果
アカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）はＢ． ｃｅｒｅｕｓ、Ｂ． ｃｏａｇｕｌａｎｓに対して１，０００μｇ／ｍＬ、およびＥ． ｃｏｌｉに対して＞１，０００μｇ／ｍＬのＭＩＣを示した。一方で、ヘチマ抽出物はいずれの細菌に対しても発育抑制能を示さなかった。
【００６２】
［実施例４］
（食品系での抗菌性）
（１）試料
・製造例１で得られたアカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）
（２）供試菌株
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １５３０５T
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＮＢＲＣ ３１３４
・Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １２７３２
各細菌はＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を用いて３２．５℃で２４時間増菌培養した。ただし、Ｂ． ｃｏａｇｕｌａｎｓは３６℃で２４時間培養した。
（３）ハンバーグの製造方法
以下の処方により、製造例１のアカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）を含有するハンバーグを製造した。
ハンバーグの原料として、以下の処方の原料を用いた。
＜ハンバーグの原料＞
牛豚ひき肉 １７５．５ｇ（ ５８．５質量％）
玉ねぎ（ソテー済） ６０．０ｇ（ ２０．０質量％）
パン粉 ２２．５ｇ（ ７．５質量％）
卵白 ２．１ｇ（ ０．７質量％）
食塩 １．２ｇ（ ０．４質量％）
コショー ０．３ｇ（ ０．１質量％）
ナツメグ ０．３ｇ（ ０．１質量％）
グルタミン酸ナトリウム ０．３ｇ（ ０．１質量％）
水 ３７．８ｇ（ １２．６質量％）
合計 ３００．０ｇ（１００．０質量％）
処方に示す原料を、フードカッター（ＤＬＣ−６ＰＲＯ 株式会社クイジナートサンエイ）を用いて２分間、混合した。混合した原料の合計質量（３００ｇ）に対して、アカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）１．５ｇ（０．５質量％）を添加して、２分間さらに混合した。得られた混合物を、１個あたり２５ｇ、直径４ｃｍのハンバーグ型に成型し、オーブンで２３０℃、１３分間焼成して、ハンバーグを製造した。
（４）バイオサーモアナライザー試験
上記（３）で製造したハンバーグ５ｇを取り、ハンバーグを検査瓶（ＰＳ−３Ｋ、第一硝子社製）に入れ、蓋を閉めた後に、バイオサーモアナライザー（Ｈ−２０１、日本医科器械製作所製）の高温槽内セルに設置した。高温槽内対照セルには、アカメガシワ抽出物を無添加のハンバーグをサンプルとして用いた。バイオサーモアナライザーの設定条件は、高温槽温度３０℃、微小電圧計レンジ５００μＶ、測定間隔１５分として、７２時間測定を行った。測定は、３回行い、ピーク発現時間の平均値を算出した。
また、ハンバーグ１ｇに対して、上記（２）の供試菌株を約５００個となるように添加した。枯草菌を添加したハンバーグを同様にバイオサーモアナライザー試験に供した。
（５）結果
試験結果を表２に示す。表２の結果から、無添加の場合に比べ、アカメガシワ抽出物を添加した場合にピーク時間が遅延することにより、細菌の増殖が抑制されていることが示された。
【００６３】
【表２】
【００６４】
［製造例３］
（アカメガシワ抽出物）
１１０℃で５０分間、加熱焙煎したアカメガシワ樹皮４８６ｇに含水８０容量％エタノール５Ｌを加えて、室温下、一晩浸漬し、液温を５０℃に昇温して２時間抽出した。次いで、液温５０℃の含水８０容量％エタノール５Ｌで２時間抽出を２回行った。得られたエタノール抽出液を、減圧下、６０℃で濃縮乾固して、抽出物を６３．８ｇ得た。抽出物に水８００ｍＬを加え、酢酸エチル８００ｍＬで３回、液々分配を行った。酢酸エチル層及び水層をそれぞれ、濃縮乾固し、アカメガシワ酢酸エチル抽出物（酢酸エチル層）１６．３ｇ、アカメガシワ水抽出物（水層)４６．３ｇを得た。
【００６５】
［実施例５］
（寒天培地を用いた最小発育阻止濃度の測定）
（１）試料
以下の試料をＤＭＳＯ（Ｗａｋｏ）に２０，０００μｇ／ｍＬとなるよう溶解し、試料溶液とした。試料溶液は使用溶媒（ＤＭＳＯ）を用いて２倍段階希釈し、実験に供した。
・アカメガシワ抽出物（酢酸エチル層)
・アカメガシワ抽出物（水層)
（２）供試菌株
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １５３０５T
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ ＮＢＲＣ １２５８３T
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＮＢＲＣ ３１３４
・Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １２７３２
・Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｃａ ｓｕｂｓｐ． ｅｎｔｅｒｉｃａ ＮＢＲＣ ３３１３
各細菌はＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を用いて３２．５℃で２４時間増菌培養した。ただし、Ｂ． ｃｏａｇｕｌａｎｓは３６℃で２４時間培養した。バクテリアカウンティングチャンバーで菌数確認をした後、ペプトン食塩緩衝液（日水製薬）を用いて２．０×１０5ＣＦＵ／ｍｌとなるよう調製し、実験に供した。
（３）最小発育阻止濃度の測定
上記（１）の抽出物を溶解した試料溶液１ｍＬとＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）１９ｍＬを混釈し、試料濃度が１，０００μｇ／ｍＬとなるよう平板を作製した。なお、試料溶液の代わりに溶媒（ＤＭＳＯ）のみを添加した培地も同様に作製した。培地の固化後、タイピングアパライザーを用いて供試菌株を各々の植物抽出物混合平板に接種した。３２．５℃で３日間培養後、コロニー形成の有無により抗菌性を確認した。コロニー形成が認められた場合は抗菌性無し、認められない場合を抗菌性有りと判定した。
（４）結果
試験結果を表３に示す。本発明の抗菌剤は、グラム陽性細菌に対してマイルドな抗菌効果を示すことが明らかになった。
【００６６】
【表３】
【００６７】
［実施例６］
（食品系での抗菌性）
（１）試料
・製造例３で得られたアカメガシワ抽出物（酢酸エチル層）
・プロタミン
（２）供試菌株
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＮＢＲＣ ３１３４
・Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １２７３２
各細菌はＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を用いて３２．５℃で２４時間増菌培養した。ただし、Ｂ． ｃｏａｇｕｌａｎｓは３６℃で２４時間培養した。
（３）ハンバーグの製造方法
アカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）に代えて上記（１）のアカメガシワ抽出物（酢酸エチル層）又はプロタミンを用いる以外は、実施例４と同様にハンバーグを製造した。
（４）バイオサーモアナライザー試験
実施例４と同様にして、上記（１）のアカメガシワ抽出物（酢酸エチル層）又はプロタミンを用いて製造したハンバーグのバイオサーモアナライザー試験を行った。
（５）結果
試験結果を表４に示す。アカメガシワ抽出物を添加した場合には、無添加またはプロタミン添加の場合よりも、ピークの発現時間が遅延し、細菌の増殖が抑制されたことが明らかになった。
【００６８】
【表４】
【産業上の利用可能性】
【００６９】
本発明のアカメガシワ抽出物は、抗菌作用を有する。また、本発明のアカメガシワ抽出物は、食品用日持向上作用を有する。本発明のアカメガシワ抽出物は、医薬品、化粧料、及び食品用の抗菌剤および日持向上剤として産業上の利用可能性を有する。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤に関する。具体的には、本発明は、アカメガシワ抽出物を含有する医薬品、化粧料、及び食品用の抗菌剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
グラム陽性細菌を原因とする疾患に対して、β−ラクタム系抗菌剤、キノロン系抗菌剤、マクロライド系抗菌剤などの合成抗菌剤が多く用いられている。
しかしながら、これら合成抗菌剤は、生体にとって異物であるため、服用した際にアレルギー症状を発症させることがある。
特に、小児においては、合成抗菌剤を服用した場合、重篤な後遺症を起こすこともあることから、より安全性の高い抗菌剤が求められている。
【０００３】
また、医薬品以外にも化粧料や食品の分野において、製品に混入した微生物、特にグラム陽性細菌が原因となって製品の品質の劣化を引き起こすことが知られている。
化粧料や食品についても、医薬品同様に、生体に摂取されるものであるため、より安全性の高い製品が求められている。
【０００４】
安全性の高い天然素材の抗菌性物質として、例えば、子嚢菌又は担子菌の子実体の水及び／又は有機溶媒抽出物を有効成分とする抗菌剤（特許文献１）、イチゴ果由来化合物類を有効成分として含有する抗菌剤（特許文献２）、甘草または厚朴等の生薬を有効成分とする抗菌剤（特許文献３）、黄ゴン抽出物から分離精製したジメトキシテトラヒドロキシフラボンを主活性成分として含むことを特徴とする天然抗菌剤（特許文献４）、エビネ属に属する植物からの圧搾物及び／または抽出物を含むことを特徴とする抗フケ菌剤（特許文献５）等多数の報告がある。
【０００５】
アカメガシワの樹皮は、従来から、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃酸過多症などに用いられる生薬として知られている。
そして、特許文献６及び７には、アカメガシワ樹皮の抽出物がグラム陰性菌であるヘリコバクター・ピロリに対して抗菌作用を有することが開示されている。
また、特許文献８には、アカメガシワの抽出物がピヒア ポリモルフィア等の酵母のガス発生を抑制することが開示されている。
さらに、特許文献９には、アカメガシワの抽出物が抗酸化剤であることが開示され、特許文献１０には、アカメガシワの抽出物であるマロツシン酸とマロチン酸が抗酸化剤であることが開示されている。特許文献１１には、アカメガシワ樹皮のエキスを有効成分として含有することを特徴とする肝機能改善剤が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００７−００１９６１号公報
【特許文献２】特開２００６−０８９４１０号公報
【特許文献３】特開２００５−１３２８０４号公報
【特許文献４】特開２００４−０５９５６６号公報
【特許文献５】特開平１１−２９４８９号公報
【特許文献６】特開平７−１９６５２２号公報
【特許文献７】特開２００３−３４２１９０号公報
【特許文献８】特開昭５５−１３１３７３号公報
【特許文献９】特開平１０−１７４３５号公報
【特許文献１０】特開２００７−２５４４２７号公報
【特許文献１１】特開平１１−２０９２９７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、従来の抗菌剤は、安全性の点でさらなる向上が求められており、また、抗菌剤は使用し続ける結果、耐性菌が生じてくるという問題点もあるため、安全性が高く、かつ新たな抗菌剤が求められている。
さらに、ＥＢＭ（Ｅｖｉｄｅｎｃｅ Ｂａｓｅｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）といった考え方の元、特定の抗菌スペクトルを持つ抗菌剤も求められている。
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、天然素材由来であり、かつグラム陽性細菌に対して抗菌活性を有する新たな抗菌剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために、鋭意検討を重ねた結果、アカメガシワ抽出物がグラム陽性細菌に対して抗菌作用を有することを見出し、本発明を完成した。
【０００９】
本発明は、以下のとおりである。
［１］
アカメガシワ抽出物を含有するグラム陽性細菌に対する抗菌剤。
［２］
前記グラム陽性細菌がＢａｃｉｌｌｕｓ属細菌又はＳｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ属細菌である、［１］に記載の抗菌剤。
［３］
前記アカメガシワ抽出物が水もしくは有機溶媒またはこれらの混合溶媒による抽出物である、［１］又は［２］に記載の抗菌剤。
［４］
前記アカメガシワ抽出物が酢酸エチル可溶成分である、［１］〜［３］のいずれか一項に記載の抗菌剤。
［５］
［１］〜［４］のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有する医薬品。
［６］
食品の日持向上用である、［１］〜［４］のいずれか一項に記載の抗菌剤。
［７］
アカメガシワ抽出物を含有する食品用日持向上剤。
［８］
［１］〜［４］及び［６］のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有する食品用日持向上剤。
［９］
［７］又は［８］に記載の食品用日持向上剤を含有する食品。
［１０］
［１］〜［４］及び［６］のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有することによる、食品の日持ちを向上させる方法。
［１１］
［１］〜［４］及び［６］のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有することによる、食品中のグラム陽性細菌の増殖を抑制する方法。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、グラム陽性細菌に対して抗菌スペクトラムを有する新たな抗菌剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明を実施するための形態について詳細に説明する。なお、本発明は以下の実施の形態に限定されるものではなく、その要旨の範囲内で種々変形して実施することがで
きる。
【００１２】
本発明の抗菌剤は、アカメガシワ抽出物を含有するものであり、グラム陽性細菌に対する抗菌剤である。
本発明において用いられるアカメガシワ抽出物は、トウダイグサ科の落葉性のアカメガシワ（Ｍａｌｌｏｔｕｓ ｊａｐａｎｉｃｕｓ）の抽出物であれば、特に限定されるものではないが、葉、根、茎、花、皮（樹皮）、果実等の植物体から抽出したものである。
アカメガシワ抽出物としては、生の植物体から直接抽出した抽出物であってもよく、一度乾燥させた植物体から抽出された抽出物や加熱焙煎した植物体から抽出された抽出物であってもよい。
アカメガシワ抽出物としては、樹皮からの抽出物（アカメガシワ樹皮抽出物）または葉からの抽出物（アカメガシワ葉抽出物）であることが好ましい。
【００１３】
本発明においてアカメガシワの抽出物を得る方法としては、特に限定されず、公知の抽出方法により行うことができるが、アカメガシワの樹皮を例に説明すると、例えば、アカメガシワの樹皮を水もしくは有機溶媒またはこれらの混合溶媒に浸漬させて抽出することにより、アカメガシワ抽出物を得ることができる。
有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、アセトン、酢酸エチル、クロロホルム等の溶媒が挙げられる。有機溶媒としては、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、アセトン、酢酸エチル等の極性基を有する極性溶媒が好ましい。これら有機溶媒は、１種で用いてもよく、２種以上を混合溶媒として用いてもよい。
アカメガシワを有機溶媒で抽出する際には、水を加えて二層系での抽出方法により行ってもよく、水と有機溶媒との混合溶媒による抽出方法により行ってもよい。
【００１４】
アカメガシワの抽出方法としては、具体的には、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノール等の低級アルコール溶媒で抽出を行い、固形分をろ過後、ろ液中のアルコール溶媒を濃縮して得られたアカメガシワ抽出物を、前記有機溶媒を用いてさらに抽出を行い、有機溶媒を濃縮してアカメガシワの抽出物を得る方法が挙げられる。
【００１５】
アカメガシワ抽出物としては、水もしくは有機溶媒またはこれらの混合溶媒に可溶な成分が挙げられる。
アカメガシワ抽出物である有機溶媒可溶成分としては、酢酸エチル可溶成分、エタノール可溶成分等が挙げられる。
アカメガシワ抽出物としては、２種以上の溶媒に可溶な成分であってもよい。
【００１６】
本発明のアカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤は、グラム陽性細菌に対する抗菌剤である。
グラム陽性細菌としては、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａｒｖａｅ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｕｓ、Ｂａｓｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ等のＢａｃｉｌｌｕｓ属細菌、Ｓｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ ｈｙｉｃｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ等のＳｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ属細菌、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ等のＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属細菌、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ等のＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属細菌、Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｎａｅｒｏｂｉｕｓ、Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ等のＰｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属細菌、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｈｉｓｔｌｙｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｎ ｃｈａｕｖｏｅｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ等のＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ属細菌、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｕｓ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｙｌａｅ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｒｏｓｅｕｓ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｓｅｄｅｎｔａｒｉｕｓ、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｃａｎｄｉｄｕｓ等のＭｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ属細菌、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｃｒｅｍｏｒｉｓ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ等のＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属細菌、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｉｖａｎｏｖｉｉ等のＬｉｓｔｅｒｉａ属細菌、Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ ｒｈｕｓｉｏｐａｔｈａｅ、Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ ｔｏｎｓｉｌｌａｒｕｍ等のＥｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ属細菌、Ｒｅｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓａｌｍｏｎｉｎａｒｕｍ等のＲｅｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｅｎａｌｅ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ等のＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｋａｎｓａｓｉｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ等のＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｉｓｒａｅｌｉｉ、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ等のＡｃｔｉｎｏｍｙｓｅｓ属細菌、Ｄｅｒｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ ｃｏｎｇｏｌｅｎｓｉｓ等のＤｅｒｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ属細菌、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｌｉｓ、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｓｃｉａｎｓ等のＲｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ属細菌等が挙げられる。
【００１７】
本発明において、アカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤は、医薬品又は化粧料として用いることができる。また、食品に添加して食品の日持向上用の抗菌剤として用いることもできる。
【００１８】
本発明において前記抗菌剤を含有する医薬品としては、薬学的に許容可能な賦形剤を添加して、医薬製剤として用いることができる。
医薬製剤としては、粉末、顆粒、錠剤等の公知の剤型に製剤化して用いることができ、液体、ペースト等の液剤として用いることもできる。
本発明の前記抗菌剤は、天然素材を由来とする成分であるため、消毒等に用いる抗菌性スプレー用の液剤、ハンドクリームとすることも好適である。
液剤の溶媒としては、水、エタノールなどの公知の薬学的に許容可能な溶媒が用いられ、他の薬効成分、他の薬学的に許容可能な賦形剤を含有してもよい。
【００１９】
医薬製剤としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、液剤、シロップ剤、チュアブル、トローチ等の経口剤、軟膏剤、ゲル剤、クリーム剤、貼付剤等の外用剤、注射剤、舌下剤、吸入剤、点眼剤、坐剤等の剤形として用いることができる。医薬製剤の剤形として、好ましくは、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、注射剤である。
【００２０】
本発明における医薬品製剤中の前記抗菌剤の含有量としては、医薬製剤の全質量に対して、アカメガシワ抽出物を０．００５〜１．０質量％で含有することが好ましく、０．０１〜０．５質量％で含有することがより好ましく、０．０５〜０．３質量％で含有することがさらに好ましい。
【００２１】
医薬製剤は、第１４改正日本薬局方解説書の製剤総則に記載されている方法等、公知の方法により製造できる。例えば、顆粒剤の場合には、アカメガシワ抽出物に、必要に応じて賦形剤、結合剤、崩壊剤、溶媒等を加えて攪拌造粒、押し出し造粒、転動造粒、流動床造粒、噴霧造粒等を行い製造することができる。また、精製白糖球状顆粒、乳糖・結晶セルロース球状顆粒、白糖・デンプン球状顆粒、粒状結晶セルロース等の芯物質に、水、又は白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等の結合剤溶液を噴霧しながら、アカメガシワ抽出物及びコーンスターチ、結晶セルロース、ヒド
ロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン等の添加剤を含む散布剤をコーティングしてもよい。さらに、必要に応じて整粒、粉砕を行ってもよい。
【００２２】
このようにして製造した顆粒剤に、さらに必要に応じて、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、抗酸化剤、矯味剤、着色剤、香料等を加えて打錠して錠剤とすることもできる。また、原薬であるアカメガシワ抽出物に、必要な賦形剤を加えて直接打錠して錠剤としてもよい。また、アカメガシワ抽出物に、乳糖、白糖、ブドウ糖、デンプン、微結晶セルロース、カンゾウ末、マンニトール、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム等の賦形剤を添加・混合したものや、上記の顆粒剤をカプセルに充填することもできる。
【００２３】
賦形剤の具体例としては、例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、果糖、デンプン、バレイショデンプン、コーンスターチ、コムギデンプン、コメデンプン、結晶セルロース、微結晶セルロース、カンゾウ末、マンニトール、エリスリトール、マルチトール、ソルビトール、トレハロース、無水ケイ酸、ケイ酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、無水リン酸カルシウム、硫酸カルシウム等を挙げることができる。
【００２４】
結合剤の具体例としては、例えば、ゼラチン、デンプン、アラビアゴム、トラガント、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、部分α化デンプン、α化デンプン、ポリビニルアルコール、アルギン酸ナトリウム、プルラン、グリセリン等を挙げる
ことができる。
【００２５】
崩壊剤の具体例としては、例えば、アミノ酸、デンプン、コーンスターチ、炭酸カルシウム、カルメロース、カルメロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、クロスポビドン等を挙げることができる。
【００２６】
滑沢剤の具体例としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、フマル酸ステアリルナトリウム、タルク、マクロゴール等を挙げることができる。
【００２７】
抗酸化剤の具体例としては、例えば、アスコルビン酸ナトリウム、Ｌ−システイン、亜硫酸ナトリウム、トコフェロール、大豆レシチン等を挙げることができる。
【００２８】
矯味剤の具体例としては、例えば、クエン酸、アスコルビン酸、酒石酸、リンゴ酸、アスパルテーム、アセスルファムカリウム、ソーマチン、サッカリンナトリウム、グリチルリチン二カリウム、グルタミン酸ナトリウム、５'−イノシン酸ナトリウム、５'−グアニル酸ナトリウム等を挙げることができる。
【００２９】
着色剤の具体例としては、例えば、酸化チタン、三二酸化鉄、黄色三二酸化鉄、コチニール、カルミン、リボフラビン、食用黄色５号、食用青色２号等を挙げることができる。
【００３０】
香料の具体例としては、例えば、レモン油、オレンジ油、メントール、はっか油、ボルネオール、バニラフレーバー等を挙げることができる。
【００３１】
液剤を製造する際にも、同様に公知の方法を使用すればよい。アカメガシワ抽出物を精製水やエタノール等の溶媒に溶解し、必要に応じて、界面活性剤、消泡剤等を加えてもよい。
【００３２】
界面活性剤の具体例としては、例えば、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレン共重合物、ラウリル硫酸ナトリウム等を挙げることができる。
【００３３】
消泡剤の具体例としては、例えば、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、トリオレイン酸ソルビタン等を挙げることができる。
【００３４】
本発明の抗菌剤を含有する医薬製剤は、アカメガシワ抽出物がグラム陽性細菌に対する抗菌活性を有するため、グラム陽性細菌が関与する疾患である敗血症、炭疽、壊疽、破傷風、胃腸炎、皮膚炎、脳炎、神経炎、結核、腎炎、食中毒等の疾患の治療剤または予防剤として用いることができる。
【００３５】
医薬製剤は、動物、特に哺乳類、より具体的には、ヒトにおいて、上記疾患の治療または予防に有用であり、哺乳類、特にヒトに投与することができる。
アカメガシワ抽出物の投与量は、個々の薬剤の活性、患者の症状、年齢、体重等の種々の条件により変化し得るが、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤またはシロップ剤等による経口投与の場合、０．１〜５０ｍｇ／ｄａｙ、好ましくは１〜２５ｍｇ／ｄａｙであり、坐剤による投与の場合、０．０１〜１０ｍｇ／ｄａｙ、好ましくは０．１〜５ｍｇ／ｄａｙであり、注射剤による投与の場合、０．０１〜１０ｍｇ／ｄａｙ、好ましくは０．１〜５ｍｇ／ｄａｙである。
投与回数は特に限定されないが、１日１〜３回程度が好ましい。
【００３６】
本発明において前記抗菌剤を含有する化粧料としては、化粧料に添加する公知の賦形剤を添加して、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用等の化粧料として用いる
ことができる。
【００３７】
本発明における化粧料中の前記抗菌剤の含有量としては、化粧料の全質量に対して、アカメガシワ抽出物を０．００５〜１．０質量％で含有することが好ましく、０．０１〜０．５質量％で含有することがより好ましく、０．０５〜０．３質量％で含有することがさらに好ましい。
【００３８】
本発明のアカメガシワ抽出物は、食品用日持向上剤抗菌剤として用いることができる。本発明のアカメガシワ抽出物を含有する食品用日持向上剤は、グラム陽性細菌に対する抗菌剤としての作用も有するため、食品に添加することにより、風味への悪影響を及ぼすことなく、また、品質を低下させることなく、食品の日持ちを、大幅に向上させることができる。
また、本発明の前記抗菌剤は、食品用の日持向上剤として用いることができる。
本発明の前記抗菌剤を食品用日持向上剤として、食品に添加することにより、風味への悪影響を及ぼすことなく、また、品質を低下させることなく、食品の日持ちを、大幅に向上させることができる。本発明は、前記抗菌剤を添加して、食品中に前記抗菌剤を含有することによる、食品の日持ちを向上させる方法にも関する。
【００３９】
本発明の前記抗菌剤は、食品中に添加することにより、食品中のグラム陽性細菌の増殖を抑制することもできる。本発明は、前記抗菌剤を添加して、食品中に前記抗菌剤を含有することによる、食品中のグラム陽性細菌の増殖を抑制する方法にも関する。
【００４０】
本発明のアカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤は、食品の日持ちを向上させる場合には、加工食品の加熱過程に対する耐熱性を有する、Ｂａｃｉｌｌｕｓ属細菌、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ属細菌等の耐熱性グラム陽性細菌に対する抗菌剤であることが好ましい。また、食品の原料中に存在して、食品の腐食を促進させる起因菌である、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）等のＢａｃｉｌｌｕｓ属細菌、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）等のＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ属細菌に対する抗菌剤であることがより好ましい。
【００４１】
本発明の食品用日持向上剤は、食品に添加する場合、食品は、例えば、コンビニエンスストアやスーパーマーケット等の店内で陳列されて販売されるため、２５〜３０℃の温度条件下、２〜３日間、品質を安定に保って保存できることが好ましい。
【００４２】
本発明において、食品用日持向上剤として、食品の日持ちを向上させて長期に保存することができるかどうかは、実施例において後述するように、バイオアナライザー（ＢＴＡ）を用いて、微生物が増殖する際に発生する熱を測定することにより、微生物の増殖を検出することによって確認することができる。
【００４３】
本発明の食品用日持向上剤としては、アカメガシワ抽出物を粉末状、顆粒状にして用いることができ、また、抽出に用いた溶媒を濃縮させることなく、又は濃縮途中の状態のものをアカメガシワから抽出した溶液として用いることもできる。
【００４４】
本発明の食品は、アカメガシワ抽出物を含有する食品用日持向上剤を、含有するものである。また、本発明の食品は、アカメガシワ抽出物を含有する抗菌剤を日持向上剤として含有するものである。
アカメガシワ抽出物を日持向上剤として、食品に含有する場合には、食品の全質量に対して、アカメガシワ抽出物を０．０１〜２．０質量％で添加することが好ましく、０．０５〜１．０質量％で添加することがより好ましく、０．１〜０．７質量％で添加することがさらに好ましい。
アカメガシワ抽出物を０．０１〜２．０質量％で食品用日持向上剤として含有することにより、食品の日持ちを向上させることができると共に、味に変化を与えることない食品を提供することができる。
【００４５】
本発明の前記抗菌剤は、グラム陽性細菌の増殖を抑制することができるので、食品用日持向上剤である場合に加え、食品の殺菌剤、防腐剤、保存剤、保存料、腐敗防止剤としても用いることが好適である。
また、本発明の抗菌剤は、食品の日持を向上させるという性質を有するので、本発明は、アカメガシワ抽出物からなる食品用日持向上剤をも提供する。本発明は、アカメガシワ抽出物からなる食品用の殺菌剤、防腐剤、保存剤、保存料、腐敗防止剤をも提供する。
【００４６】
本発明の食品は、前記食品用日持向上剤を含有する食品であって経口摂取可能な組成物であれば、特に制限されるものではない。
本発明の食品は、アカメガシワ抽出物がグラム陽性細菌に対して抗菌活性を有し、食品の日持ちを向上させることができるので、加工食品であることが好ましく、中でも、加熱調理された加工食品であることがより好ましい。
【００４７】
食品としては、特に限定されるものではないが、食肉加工品、食肉惣菜、水産練製品、漬物、麺類、米飯類、カスタードクリーム、ソフトクリームなどの菓子類等が挙げられる。
【００４８】
食肉惣菜としては、食肉を調理して得られる食品が挙げられ、特に限定されるものではないが、例えば、ハンバーグ、ミートボール、肉団子、メンチカツ、コロッケ、とんかつ、唐揚げ、フライドチキン、ナゲット、照り焼き、焼き鳥、シュウマイ、ギョウザ、肉まん、春巻き、ハム、ソーセージ、ベーコン等が挙げられる。
【００４９】
水産練製品としては、特に限定されるものではないが、例えば、シュウマイ、かまぼこ、笹かまぼこ、揚げかまぼこ、すじ、つみれ、ちくわ、さつま揚げ、はんぺん、ちくわぶ、イカ巻き、魚肉ソーセージ等が挙げられる。
【００５０】
菓子類としては、特に限定されるものではないが、例えば、生クリーム、プリン、ゼリー、ババロア、シュークリーム、カスタードクリーム等が挙げられる。
【００５１】
本発明の食品には、公知の日持向上剤及び保存剤を添加してもよい。日持向上剤及び保存剤としては、例えば、グリシン、アラニン、ベタインなどのアミノ酸、酢酸、乳酸、クエン酸、リンゴ酸などの有機酸及びそれらに塩、リゾチーム、ポリリジン、プロタミン、ソルビン酸等を挙げることができる。
【００５２】
本発明の食品には、他の公知の添加剤を添加してもよく、添加剤としては、甘味料、着色料、増粘安定剤、酸化防止剤、漂白剤、ガムベース、調味料、苦味料、酸味料、強化剤、乳化剤、香料、香辛料、凝固剤、消泡剤等を挙げることができる。
【００５３】
本発明における食品の製造方法としては、特に制限されるものではなく、前記食品を製造する際の公知の方法を使用して製造する方法が挙げられる。
例えば、食品の材料となる食品素材を混合した後に、本発明の食品用日持向上剤を添加し、加熱調理して食品とすることができる。本発明の食品用日持向上剤は、加熱後であっても、食品の日持ちを向上させることができる。
【００５４】
本発明における食品への前記食品用日持向上剤の添加方法としては、特に制限されるものではないが、調理中、又は調理後に、食品に対して、前記食品用日持向上剤を溶解、混和、練り込み、吹き付け、塗り付け、振りかけ、まぶす等することにより添加して行うことができる。
【実施例】
【００５５】
以下、本発明を実施例及び比較例により具体的に説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００５６】
［製造例１］
（アカメガシワ抽出物）
１１０℃で５０分間、加熱焙煎したアカメガシワ樹皮４８７ｇに含水８０容量％エタノール５Ｌを加えて、液温を５０℃に昇温して２時間抽出した。次いで、液温５０℃の含水８０容量％エタノール５Ｌで２時間抽出を行った。さらに、液温５０℃の含水８０容量％エタノール５Ｌで２時間抽出を行い、室温下、一晩浸漬抽出を行った。得られたエタノール抽出液を併せて、減圧下、６０℃で濃縮乾固して、アカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）を７７．５ｇ得た。
【００５７】
［実施例１］
（液体培地を用いた最小発育阻止濃度の測定）
（１）試料
製造例１で得られたアカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ、Ｗａｋｏ）に２０，０００μｇ／ｍＬとなるよう溶解し、試料溶液とした。試料溶液は使用溶媒（ＤＭＳＯ）を用いて２倍段階希釈し、実験に供した。
（２）供試菌株
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ ＮＢＲＣ １２５８３T
・Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ ＮＢＲ
Ｃ １２７３２
・Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ＮＢＲＣ １３２７５
各細菌はＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を用いて３２．５℃で２４時間増菌培養した。バクテリアカウンティングチャンバーで菌数確認をした後、ペプトン食塩緩衝液（日水製薬）を用いて２．０×１０6ＣＦＵ／ｍＬとなるよう調製し、実験に供した。
（３）微量液体希釈法による植物抽出物のＭＩＣ測定
９６穴マイクロプレートを用いた微量液体希釈法によってＭＩＣを測定した。Ｍｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を１７０μＬ加えたウェルに、試料溶液を１０μＬ添加し、終濃度がそれぞれ６２．５、１２５、２５０、５００、および１，０００μｇ／ｍＬとなるよう調製した。そこに菌液を２０μＬ（終濃度２．０×１０5ＣＦＵ／ｍＬ）添加し、３２．５℃で３日間培養した。なお、試料溶液のみを培地に添加、菌液のみを培地に添加、試料溶液の溶媒（ＤＭＳＯ）のみを培地に添加した系についてもそれぞれ同様に培養を行った。
培養後、試料溶液および菌液を添加した系について目視にて微生物の発育が見られない、あるいは６００ｎｍにおける吸光度が試料溶液のみを添加した培地と同等となる最小濃度をＭＩＣとした。
（４）結果
アカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）はＢ． ｃｏａｇｕｌａｎｓに対して１，０００μｇ／ｍＬ、Ｓ． ａｕｒｅｕｓに対して５００μｇ／ｍＬ、およびＰ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａに対して＞１，０００μｇ／ｍＬのＭＩＣを示した。
【００５８】
［製造例２］
（アカメガシワ抽出物）
焙煎していないアカメガシワ葉３０５ｇに含水８０容量％エタノール４Ｌを加え、液温５０℃で２時間抽出し、ろ過した。次いで、含水８０容量％エタノール３Ｌを加え、液温５０℃、２時間で２回抽出、ろ過を行った。得られた抽出液は減圧下６０℃で濃縮乾固し、抽出物４３．２を得た。抽出物に水６００ｍＬを加え、ヘキサン６００ｍＬで３回、次いで、酢酸エチル６００ｍＬで３回、液々分配し、各層を減圧下６０℃で濃縮乾固し、アカメガシワ抽出物（水層）２９．４ｇ、アカメガシワ抽出物（酢酸エチル層）６．６１ｇ、アカメガシワ抽出物（ヘキサン層）７．４０ｇを得た。
【００５９】
［実施例２］
（液体培地を用いた最小発育阻止濃度の測定）
実施例１と同様に行った、試験結果を表１に示す。
【００６０】
【表１】
【００６１】
［実施例３］
（寒天培地を用いた最小発育阻止濃度の測定）
（１）試料
以下の試料をジメチルスルホキシド（Ｗａｋｏ）に２０，０００μｇ／ｍＬとなるよう溶解し、試料溶液とした。試料溶液は使用溶媒（ＤＭＳＯ）を用いて２倍段階希釈し、実験に供した。
・製造例１で得られたアカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）
・ヘチマ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）
ヘチマ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）は、以下の製造方法により製造した。ヘチマ４７５ｇに含水８０容量％エタノール１１Ｌを加え、液温５０℃に加温後、室温下３日間浸漬抽出した。次いで、含水８０容量％エタノール１０Ｌを加え、液温５０℃に加温後、室温下、一晩浸漬抽出した。得られた抽出液は減圧下６０℃で濃縮乾固し、抽出物８．７５ｇを得た。
（２）供試菌株
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １５３０５T
・Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＮＢＲＣ ３９７２
各細菌はＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を用いて３２．５℃で２４時間増菌培養した。バクテリアカウンティングチャンバーで菌数確認をした後、ペプトン食塩緩衝液（日水製薬）を用いて２．０×１０5ＣＦＵ／ｍＬとなるよう調製し、実験に供した。
（３）最小発育阻止濃度の測定
上記（１）で作製した試料溶液１ｍＬとＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）１９ｍＬを混釈し、試料濃度が１，０００μｇ／ｍＬとなるよう平板を作製した。なお、試料溶液の代わりに溶媒（ＤＭＳＯ）のみを添加した培地も同様に作製した。培地の固化後、タイピングアパライザーを用いて供試菌株を各々の植物抽出物混合平板に接種した。３２．５℃で３日間培養後、コロニー形成の有無により抗菌性を確認した。ただし、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉは３２．５℃で２４時間培養した。コロニー形成が認められた場合は抗菌性無し、認められない場合を抗菌性有りと判定した。
（４）結果
アカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）はＢ． ｃｅｒｅｕｓ、Ｂ． ｃｏａｇｕｌａｎｓに対して１，０００μｇ／ｍＬ、およびＥ． ｃｏｌｉに対して＞１，０００μｇ／ｍＬのＭＩＣを示した。一方で、ヘチマ抽出物はいずれの細菌に対しても発育抑制能を示さなかった。
【００６２】
［実施例４］
（食品系での抗菌性）
（１）試料
・製造例１で得られたアカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）
（２）供試菌株
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １５３０５T
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＮＢＲＣ ３１３４
・Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １２７３２
各細菌はＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を用いて３２．５℃で２４時間増菌培養した。ただし、Ｂ． ｃｏａｇｕｌａｎｓは３６℃で２４時間培養した。
（３）ハンバーグの製造方法
以下の処方により、製造例１のアカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）を含有するハンバーグを製造した。
ハンバーグの原料として、以下の処方の原料を用いた。
＜ハンバーグの原料＞
牛豚ひき肉 １７５．５ｇ（ ５８．５質量％）
玉ねぎ（ソテー済） ６０．０ｇ（ ２０．０質量％）
パン粉 ２２．５ｇ（ ７．５質量％）
卵白 ２．１ｇ（ ０．７質量％）
食塩 １．２ｇ（ ０．４質量％）
コショー ０．３ｇ（ ０．１質量％）
ナツメグ ０．３ｇ（ ０．１質量％）
グルタミン酸ナトリウム ０．３ｇ（ ０．１質量％）
水 ３７．８ｇ（ １２．６質量％）
合計 ３００．０ｇ（１００．０質量％）
処方に示す原料を、フードカッター（ＤＬＣ−６ＰＲＯ 株式会社クイジナートサンエイ）を用いて２分間、混合した。混合した原料の合計質量（３００ｇ）に対して、アカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）１．５ｇ（０．５質量％）を添加して、２分間さらに混合した。得られた混合物を、１個あたり２５ｇ、直径４ｃｍのハンバーグ型に成型し、オーブンで２３０℃、１３分間焼成して、ハンバーグを製造した。
（４）バイオサーモアナライザー試験
上記（３）で製造したハンバーグ５ｇを取り、ハンバーグを検査瓶（ＰＳ−３Ｋ、第一硝子社製）に入れ、蓋を閉めた後に、バイオサーモアナライザー（Ｈ−２０１、日本医科器械製作所製）の高温槽内セルに設置した。高温槽内対照セルには、アカメガシワ抽出物を無添加のハンバーグをサンプルとして用いた。バイオサーモアナライザーの設定条件は、高温槽温度３０℃、微小電圧計レンジ５００μＶ、測定間隔１５分として、７２時間測定を行った。測定は、３回行い、ピーク発現時間の平均値を算出した。
また、ハンバーグ１ｇに対して、上記（２）の供試菌株を約５００個となるように添加した。枯草菌を添加したハンバーグを同様にバイオサーモアナライザー試験に供した。
（５）結果
試験結果を表２に示す。表２の結果から、無添加の場合に比べ、アカメガシワ抽出物を添加した場合にピーク時間が遅延することにより、細菌の増殖が抑制されていることが示された。
【００６３】
【表２】
【００６４】
［製造例３］
（アカメガシワ抽出物）
１１０℃で５０分間、加熱焙煎したアカメガシワ樹皮４８６ｇに含水８０容量％エタノール５Ｌを加えて、室温下、一晩浸漬し、液温を５０℃に昇温して２時間抽出した。次いで、液温５０℃の含水８０容量％エタノール５Ｌで２時間抽出を２回行った。得られたエタノール抽出液を、減圧下、６０℃で濃縮乾固して、抽出物を６３．８ｇ得た。抽出物に水８００ｍＬを加え、酢酸エチル８００ｍＬで３回、液々分配を行った。酢酸エチル層及び水層をそれぞれ、濃縮乾固し、アカメガシワ酢酸エチル抽出物（酢酸エチル層）１６．３ｇ、アカメガシワ水抽出物（水層)４６．３ｇを得た。
【００６５】
［実施例５］
（寒天培地を用いた最小発育阻止濃度の測定）
（１）試料
以下の試料をＤＭＳＯ（Ｗａｋｏ）に２０，０００μｇ／ｍＬとなるよう溶解し、試料溶液とした。試料溶液は使用溶媒（ＤＭＳＯ）を用いて２倍段階希釈し、実験に供した。
・アカメガシワ抽出物（酢酸エチル層)
・アカメガシワ抽出物（水層)
（２）供試菌株
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １５３０５T
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ ＮＢＲＣ １２５８３T
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＮＢＲＣ ３１３４
・Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １２７３２
・Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｃａ ｓｕｂｓｐ． ｅｎｔｅｒｉｃａ ＮＢＲＣ ３３１３
各細菌はＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を用いて３２．５℃で２４時間増菌培養した。ただし、Ｂ． ｃｏａｇｕｌａｎｓは３６℃で２４時間培養した。バクテリアカウンティングチャンバーで菌数確認をした後、ペプトン食塩緩衝液（日水製薬）を用いて２．０×１０5ＣＦＵ／ｍｌとなるよう調製し、実験に供した。
（３）最小発育阻止濃度の測定
上記（１）の抽出物を溶解した試料溶液１ｍＬとＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）１９ｍＬを混釈し、試料濃度が１，０００μｇ／ｍＬとなるよう平板を作製した。なお、試料溶液の代わりに溶媒（ＤＭＳＯ）のみを添加した培地も同様に作製した。培地の固化後、タイピングアパライザーを用いて供試菌株を各々の植物抽出物混合平板に接種した。３２．５℃で３日間培養後、コロニー形成の有無により抗菌性を確認した。コロニー形成が認められた場合は抗菌性無し、認められない場合を抗菌性有りと判定した。
（４）結果
試験結果を表３に示す。本発明の抗菌剤は、グラム陽性細菌に対してマイルドな抗菌効果を示すことが明らかになった。
【００６６】
【表３】
【００６７】
［実施例６］
（食品系での抗菌性）
（１）試料
・製造例３で得られたアカメガシワ抽出物（酢酸エチル層）
・プロタミン
（２）供試菌株
・Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＮＢＲＣ ３１３４
・Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ ＮＢＲＣ １２７３２
各細菌はＭｕｅｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ Ａｇａｒ（Ｄｉｆｃｏ）を用いて３２．５℃で２４時間増菌培養した。ただし、Ｂ． ｃｏａｇｕｌａｎｓは３６℃で２４時間培養した。
（３）ハンバーグの製造方法
アカメガシワ抽出物（８０％ＥｔＯＨ層）に代えて上記（１）のアカメガシワ抽出物（酢酸エチル層）又はプロタミンを用いる以外は、実施例４と同様にハンバーグを製造した。
（４）バイオサーモアナライザー試験
実施例４と同様にして、上記（１）のアカメガシワ抽出物（酢酸エチル層）又はプロタミンを用いて製造したハンバーグのバイオサーモアナライザー試験を行った。
（５）結果
試験結果を表４に示す。アカメガシワ抽出物を添加した場合には、無添加またはプロタミン添加の場合よりも、ピークの発現時間が遅延し、細菌の増殖が抑制されたことが明らかになった。
【００６８】
【表４】
【産業上の利用可能性】
【００６９】
本発明のアカメガシワ抽出物は、抗菌作用を有する。また、本発明のアカメガシワ抽出物は、食品用日持向上作用を有する。本発明のアカメガシワ抽出物は、医薬品、化粧料、及び食品用の抗菌剤および日持向上剤として産業上の利用可能性を有する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アカメガシワ抽出物を含有するグラム陽性細菌に対する抗菌剤。
【請求項２】
前記グラム陽性細菌がＢａｃｉｌｌｕｓ属細菌又はＳｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ属細菌である、請求項１に記載の抗菌剤。
【請求項３】
前記アカメガシワ抽出物が水もしくは有機溶媒またはこれらの混合溶媒による抽出物である、請求項１又は２に記載の抗菌剤。
【請求項４】
前記アカメガシワ抽出物が酢酸エチル可溶成分である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗菌剤。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有する医薬品。
【請求項６】
食品の日持向上用である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗菌剤。
【請求項７】
アカメガシワ抽出物を含有する食品用日持向上剤。
【請求項８】
請求項１〜４及び６のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有する食品用日持向上剤。
【請求項９】
請求項７又は８に記載の食品用日持向上剤を含有する食品。
【請求項１０】
請求項１〜４及び６のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有することによる、食品の日持ちを向上させる方法。
【請求項１１】
請求項１〜４及び６のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有することによる、食品中のグラム陽性細菌の増殖を抑制する方法。
【請求項１】
アカメガシワ抽出物を含有するグラム陽性細菌に対する抗菌剤。
【請求項２】
前記グラム陽性細菌がＢａｃｉｌｌｕｓ属細菌又はＳｔａｐｈｙｌｌｏｃｏｃｃｕｓ属細菌である、請求項１に記載の抗菌剤。
【請求項３】
前記アカメガシワ抽出物が水もしくは有機溶媒またはこれらの混合溶媒による抽出物である、請求項１又は２に記載の抗菌剤。
【請求項４】
前記アカメガシワ抽出物が酢酸エチル可溶成分である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗菌剤。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有する医薬品。
【請求項６】
食品の日持向上用である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗菌剤。
【請求項７】
アカメガシワ抽出物を含有する食品用日持向上剤。
【請求項８】
請求項１〜４及び６のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有する食品用日持向上剤。
【請求項９】
請求項７又は８に記載の食品用日持向上剤を含有する食品。
【請求項１０】
請求項１〜４及び６のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有することによる、食品の日持ちを向上させる方法。
【請求項１１】
請求項１〜４及び６のいずれか一項に記載の抗菌剤を含有することによる、食品中のグラム陽性細菌の増殖を抑制する方法。
【公開番号】特開２０１０−２０７２０８（Ｐ２０１０−２０７２０８Ａ）
【公開日】平成２２年９月２４日（２０１０．９．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１２６３０７（Ｐ２００９−１２６３０７）
【出願日】平成２１年５月２６日（２００９．５．２６）
【出願人】（５０５０８０５８５）エーザイフード・ケミカル株式会社 (10)
【出願人】（０００１０８８１２）タマ生化学株式会社 (19)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年９月２４日（２０１０．９．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年５月２６日（２００９．５．２６）
【出願人】（５０５０８０５８５）エーザイフード・ケミカル株式会社 (10)
【出願人】（０００１０８８１２）タマ生化学株式会社 (19)
【Ｆターム（参考）】
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