アスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体を含有する組成物
【課題】 本発明はアスコルビン酸誘導体のうち、特定のアスコルビン酸−２−リン酸エステルの安定性を飛躍的に高め、美白効果やしわの予防改善効果に優れた組成物を提供することを課題とする。
【解決手段】
本発明の皮膚外用剤は、特定のアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水を含有する組成物、又は特定のアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製した組成物を含有することを特徴とする。
【解決手段】
本発明の皮膚外用剤は、特定のアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水を含有する組成物、又は特定のアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製した組成物を含有することを特徴とする。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（１）で表されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体を含有し、その化合物の安定性を飛躍的に向上させ、美白効果やしわの予防改善効果などに特に優れた組成物に関する。
【０００２】
【背景技術】
【０００３】
アスコルビン酸およびその種々の誘導体は、美白作用、抗酸化作用、コラーゲン合成促進作用等の効能効果を示す化合物として知られており、医薬品、化粧品等に配合されている。
【０００４】
とくに、アスコルビン酸誘導体のうち、アスコルビン酸の２位の水酸基をリン酸エステル化し、かつ６位の水酸基を高級脂肪酸エステル化した化合物は、生体への親和性が高く、皮膚等の生体組織への移行が速やかであり、医薬品、化粧品等への適用が期待されている。
【０００５】
しかしながら、このアスコルビン酸−２−リン酸エステルの高級脂肪酸エステルおよび／またはその塩は製剤中での安定性が満足ではなかった。
【０００６】
前記アスコルビン酸−２−リン酸エステルの高級脂肪酸エステルの塩を含有する皮膚外用剤において、そのｐＨを７〜９に調整することにより、該エステル塩の剤中での分解を抑制し、安定性、溶解性を改善した皮膚外用剤が知られている（特許文献１参照）。さらに、高級アルコールなどと併用し、乳化することで安定性を向上させることも知られている（特許文献２参照）。
【特許文献１】特開２００３−１７６２１７号公報
【特許文献２】特開２００５−１８７４６５号公報
【０００７】
しかしながら、製剤中に存在するアスコルビン酸−２−リン酸エステルについて、さらなる安定化が求められていた。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
すなわち本発明はアスコルビン酸誘導体のうち、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステルの安定性を飛躍的に高め、美白効果やしわの予防改善効果に優れた組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記実情に鑑みて鋭意検討した結果、上記式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水を含有する組成物を調製し、これとアルカリ土類金属塩又はその水溶液を混合することにより、アスコルビン酸−２−リン酸エステルの分解が飛躍的に抑制でき、生理活性も向上することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち、本発明は下記の通りである。
【００１１】
〔１〕
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製した組成物。
【００１２】
〔２〕
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製した組成物。
【００１３】
〔３〕
式（１）中のＲが、炭素原子数８〜２２の脂肪酸残基であることを特徴とする〔１〕又は〔２〕記載の組成物。
【００１４】
〔４〕
２価以上の金属塩の含有量が、式（１）の化合物１モルに対し、０．５倍モル以上であることを特徴とする〔１〕〜〔３〕のいずれか記載の組成物。
【００１５】
〔５〕
非イオン性界面活性剤のＨＬＢが９〜１７の範囲であることを特徴とする〔１〕〜〔４〕のいずれか記載の組成物。
【００１６】
〔６〕
平均粒子径が３００ｎｍ以下であることを特徴とする〔１〕〜〔５〕のいずれか記載の組成物。
【００１７】
〔７〕
〔１〕〜〔６〕のいずれか１項記載の組成物を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【００１８】
〔８〕
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び２価以上の金属塩を含有する組成物、又は式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び２価以上の金属塩を含有する組成物。
【００１９】
本発明に用いるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体とは、上記式（１）で表される化合物であって、アスコルビン酸−２−リン酸エステルの６位の水酸基の水素原子をアシル基に置換したものである（式１のＲがアシル基である）。アシル基の置換方法としては周知の方法を用いることができ、例えば、アスコルビン酸−２−リン酸塩に酸性触媒下、アシル酸又はアシル酸のエステルを反応させることによって得ることができる。アシル酸としては脂肪族カルボン酸、芳香族カルボン酸などが挙げられる。中でも、炭素原子数８〜２２の脂肪酸が好ましい。すなわち、式（１）中のＲは炭素原子数８〜２２の脂肪酸残基が好ましい。中でも、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、２−ヘキシルデカン酸、イソステアリン酸などが汎用性の面で好ましい。
【００２０】
上記式（１）で表される化合物における、Ｘは水素及び／又はアルカリ金属である。アルカリ金属としては、リチウム、ナトリウム、カリウムなどが挙げられる。該アスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体に置換するアルカリ金属のモル数は、それ自身の安定性の面から1モル以上が好ましく、２モル以上が最も好ましい。
【００２１】
該アスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体としては、例えば、アスコルビン酸−２−リン酸−６−ラウリン酸ナトリウム、アスコルビン酸−２−リン酸−６−ミリスチン酸ナトリウム、アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸ナトリウム、アスコルビン酸−２−リン酸−６−ステアリン酸ナトリウム、アスコルビン酸−２−リン酸−６−イソステアリン酸ナトリウム、アスコルビン酸−２−リン酸−６−（２−ヘキシルデカン酸）ナトリウム、これらの物質のナトリウムをカリウムにしたものなどが挙げられる。
【００２２】
これらの化合物は、１種単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。本発明の組成物において、アスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体は、組成物中、０．０００１〜２０重量％含有することが好ましく、より好ましくは０．０１〜１０重量％含有されるように用いると良い。
【００２３】
本発明に用いる非イオン性界面活性剤は、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビトールテトラ脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシドなどがあげられる。中でも、ＰＯＥ（２５）ラウリルエーテル、ＰＯＥ（２０）オレイルエーテル、モノパルミチン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン、モノステアリン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン、トリステアリン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン、モノイソステアリン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン、モノオレイン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン、ＰＯＥ（４０）硬化ヒマシ油、ＰＯＥ（６０）硬化ヒマシ油、ＰＯＥ（３０）フィトステロール、モノステアリン酸デカグリセリル、ショ糖ステアリン酸モノエステルなどが好ましい。
【００２４】
これらの非イオン性界面活性剤は、１種単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよいが、本発明に用いる非イオン性界面活性剤の混合ＨＬＢ（２種以上の非イオン性界面活性剤を用いた場合にはその混合ＨＬＢを定法によって算出する）が９〜１７の範囲で用いることが好ましい。なお、ＨＬＢとは親水性と親油性のバランスを示すものであり、本発明においてはＧｒｉｆｆｉｎの算出法を用いた。
【００２５】
本発明の皮膚外用剤において、非イオン性界面活性剤は、油性成分の使用量などによっても異なるが、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体に対して５０重量％以上用いるのが好ましく、１００重量％以上用いるのがより好ましく、２００重量％以上用いるのが最も好ましい。
【００２６】
本発明は、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製した組成物を得る方法と、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製した組成物を得る方法があるが、油性成分を用いる後者の方が製剤（乳化粒子）の安定性の面から好ましい。
【００２７】
本発明に用いる油性成分は、炭化水素類、ロウ・エステル類、油脂類、シリコーン油類などがあげられる。これらは化粧品や医薬部外品、医薬品に用いられるものを使用できる。例えば、スクワレン、スクワラン、流動パラフィン、ミネラルオイル、ワセリン等の炭化水素類や、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、イソノナン酸イソノニル、イソノナン酸オクチル、イソノナン酸トリデシル、イソノナン酸イソトリデシル等のエステル類、トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル、トリイソステアリン酸グリセリルなどのトリグリセライド類、メチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン等のシリコーン油類、天然の油性成分である、ホホバ油、カルナウバロウ、キャンデリラロウ、オリーブ油、マカデミアナッツ油、メドウホーム油などがあげられる。また、トコフェロールやレチノールなどの油溶性ビタミンやこれらの誘導体、アスタキサンチン、カロテンなどの油性成分も使用できる。
【００２８】
これらの油性成分は、１種単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。油性成分の使用量は、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体に対して２０重量％以上用いるのが好ましく、１００重量％以上用いるのがより好ましい。
【００２９】
本発明に用いる２価以上の金属塩とは、カルシウムをはじめとするアルカリ土類金属、マグネシウム、亜鉛などの塩酸塩、硫酸塩、炭酸塩、リン酸塩、硝酸塩、有機酸塩などがあげられる。中でも、カルシウム、マグネシウム塩が好ましく、塩化マグネシウムや硫酸マグネシウム、塩化カルシウムがより好ましい。２価以上の金属塩は上記式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体を含有する組成物に直接混合することができるし、水溶液にして混合することもできる。
【００３０】
これらの２価以上の金属塩は、１種単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。本発明の組成物において、式（１）の化合物１モルに対し、０．１モル以上使用することが好ましく、０．５モル以上がより好ましく、１〜５モルが最も好ましい。
【００３１】
本発明の組成物は、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水（及び油性成分）を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製できる。その混合方法はアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体を含有する前記組成物に２価以上の金属塩又はその水溶液を添加する方法や、２価以上の金属塩又はその水溶液にアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体を含有する前記組成物を添加することができるが、組成物の安定性の面から前者が好ましい。
【００３２】
本発明の組成物は、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステルの安定性の面から、ｐＨを７以上にすることが好ましい。また、ｐＨを７．５以上９以下にすることがより好ましい。ｐＨ調整に用いる塩基としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムなどの無機塩基や、トリエタノールアミンやアミノメチルプロパンジオール、アルギニン、リシンなどの有機塩基が挙げられる。
【００３３】
本発明の組成物は、製剤の安定性の面で平均粒子径は３００ｎｍ以下が好ましく、２００ｎｍ以下が最も好ましい。大塚電子株式会社製の光散乱方式の粒子径測定装置などが使用できる。
【００３４】
本発明の組成物又は皮膚外用剤は、化粧品、医薬部外品及び医薬品のいずれにも用いることができ、その剤形としては、例えば、化粧水、クリーム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデーション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤等が挙げられる。
【００３５】
本発明の組成物又は皮膚外用剤には、上記アスコルビン酸−２−リン酸エステルと２価以上の金属塩を含有する組成物をそのまま使用しても良く、本発明の効果を損なわない範囲内で、一般の外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、抗炎症剤、キレート剤等の成分を配合することもできる。
【発明の効果】
【００３６】
本発明の皮膚外用剤によれば、製剤中のアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体の安定性が高く、分解による製剤の黄変や褐変が極めて起こりにくく、美白効果やしわ予防改善効果に優れている。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３７】
以下に実施例及び比較例を挙げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明は下記実施例において制限されるものではない。なお、処方中の各成分の含有量は重量％とする。
【実施例１】
【００３８】
本発明の組成物の物性及び安定性評価
種々の構造の非イオン性界面活性剤、油性成分、２価以上の金属塩で調製した製剤の平均粒子径と変色性およびアスコルビン酸誘導体の残存率について比較検討した結果を表１に示す。用いたアスコルビン酸誘導体はＮａが２〜３モル置換されたものを用いた。表２中のアスコルビン酸誘導体に対するＭｇのモル比については、アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸ナトリウム Ｍｗ：５６０．４６（３Ｎａ体）として算出した。
【００３９】
なお、製剤の製造方法については以下の手順で行った。まず、常温下でＡ部を混合し、４０℃のＢ部を徐々に添加する。次に超音波洗浄器内でＣ部を加え、４０℃で１５分間保持する。３０℃まで冷却後、Ｄ、Ｅ部を加えて目的とする製剤を得た。
【００４０】
平均粒子径の測定は大塚電子株式会社製の光散乱方式の粒子径測定装置（ＦＰＡＲ−１０００）で行い、キュムラント（ｃｕｍｕｌａｎｔ）法により求めた。測定温度は２５±１℃で行った。なお、平均粒子径の測定は製剤の調製後３時間後に行った。
【００４１】
経時観察は５０℃で１ヶ月経過後に評価を行い、指標にはアスコルビン酸などが分解して生じる褐色化の有無（変色の有無）、アスコルビン酸−２−リン酸エステルの残存率を判断した。
【００４２】
また、製剤中のアスコルビン酸−２−リン酸エステルの残存率（％）は、下記測定条件の高速液体クロマトグラフィーによって測定し下記式により算出した。
分析試料は、各製剤０．２ｇをとり、２０重量％のリン酸水溶液１ｍＬを加え、５０容量％のエタノールを加えて５０ｍＬとしたものを用いた。
【００４３】
残存率（％）＝１００×［５０℃静置１ヵ月後の製剤中のアスコルビン酸誘導体濃度（ｇ／Ｌ）／調製直後の剤中のアスコルビン酸誘導体濃度（ｇ／Ｌ）］
＜高速液体クロマトグラフィー測定条件＞
カラム：オクタデシル化シリカゲル（ＯＤＳ） ４．６ｍｍφ×２５０ｍｍ
カラム温度：４０℃
溶離液：２０ｍＭリン酸水素二カリウム（リン酸でｐＨ７．０）／アセトニトリル＝４０／６０
流速：１ｍＬ／分
検出：ＵＶ２６５ｎｍ
上記残存率について、下記の４段階の評価項目で評点付けをした。
◎：残存率９０％以上
○：残存率８０％以上９０％未満
△：残存率７０％以上８０％未満
×：残存率７０％未満
【００４４】
【表１】
【００４５】
【表２】
【００４６】
【表３】
【００４７】
【表４】
【実施例２】
【００４８】
本発明の製剤と、単純にアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムを添加した製剤との製造比較及び製剤の安定性（４０℃で１ヶ月）について評価した。
保存安定性評価項目
◎：乳化粒子の変化がほとんど認められない。
○：顕微鏡で観察すると若干の乳化粒子径の増大が確認できる。
×：相分離が顕著である。
【００４９】
比較例４の製造方法
アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムの調製
アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸ナトリウム２．８ｇを精製水３５０ｍＬに溶解し、硫酸マグネシウム・７水和物１．８５ｇを精製水１５０ｍＬに溶解した水溶液を撹拌しながらゆっくりと添加した後３０分間反応させ、生じた沈殿物をろ過し、乾燥して白色粉末２．５ｇを得た。
製剤の調製
表１の比較例２の処方において、アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸ナトリウムを上記のアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムに変えて同様に製造し、比較例４とした。
【００５０】
これらの実験結果を表５に示した。その結果、単純にアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムを添加した場合、同じ界面活性剤、使用量にもかかわらず、白色のけんだく状態であり、３時間後には沈降してしまうのに対し、本発明の製剤は乳青白色の溶液で均一性が高かった。また、４０℃１ヶ月後の安定性においても比較例よりも安定性に優れていた。
【００５１】
【表５】
【実施例３】
【００５２】
本発明の組成物の美白効果（メラニン生成抑制試験）
対数増殖期にあるメラノーマを６０ｍｍのシャーレに３×１０４個／ｍＬ懸濁液を１．０ｍＬ加え、アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸が２０μＭとなるように各実施例の試料を添加し、含むＥａｇｌｅｓ’ＭＥＭ（１０％牛胎児血清含有）３．０ｍＬを加え、３７℃、５％ＣＯ２条件下にて培養した。培養５日後に細胞をシャーレから剥離し、細胞を超音波破砕した後に、４Ｎ水酸化ナトリウム水溶液０．５ｍＬを加え、６０℃で２時間の処理を行い、分光光度計でＯ．Ｄ．４７５ｎｍを測定した。なお、超音波処理後の細胞破砕液をＬｏｗｒｙの方法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９３，２６５−２７５，１９５１）でタンパク定量し、タンパク量当りのメラニン量を比較することによって、メラニン生成抑制作用の指標とした。
【００５３】
これらの実験結果を表６に示した。その結果、本発明のアスコルビン酸誘導体は２価以上の金属塩を用いないアスコルビン酸誘導体よりも特に優れたメラニン生成抑制作用を示した。また、本発明の製法にて得られたアスコルビン酸誘導体を含有する製剤は、単純にアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムを添加する方法に比べて顕著なメラニン生成抑制作用を示した。
【００５４】
【表６】
【実施例４】
【００５５】
本発明の組成物のコラーゲン合成促進効果
培養ヒト皮膚線維芽細胞におけるコラーゲン合成の促進作用を下記の条件にて測定した。コンフルエントな状態の正常ヒト皮膚線維芽細胞をアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸が１０μＭとなるように各実施例の試料を添加したＥａｇｌｅ’ｓ ＭＥＭ培地で２４時間培養した後、総ＲＮＡの抽出を行った。正常ヒト皮膚線維芽細胞から抽出した総ＲＮＡを基にＲＴ−ＰＣＲ法によりコラーゲンｍＲＮＡ発現量の測定を行った。ＲＴ−ＰＣＲ法にはＴａＫａＲａ ＲＮＡ ＰＣＲ Ｋｉｔ （ＡＭＶ） Ｖｅｒ．２．１を用いた。また、内部標準としてはＧＡＰＤＨを用いた。その他の操作は定められた方法に従い、ＰＣＲ反応液をアガロースゲル電気泳動に供し、コラーゲン及びＧＡＰＤＨのｍＲＮＡ発現をバンドとして確認した。これらのバンドをカメラにて撮影してデンシトメーターを用いて定量化し、コラーゲンｍＲＮＡの発現量を内部標準であるＧＡＰＤＨ ｍＲＮＡ発現量に対する割合として求めた。コントロールのコラーゲンｍＲＮＡ発現量に対する試料添加時のコラーゲンｍＲＮＡ発現量値からコラーゲン合成促進率を求めた。
コラーゲン合成促進率（％）＝Ａ／Ｂ×１００
Ａ：試料添加時のコラーゲンｍＲＮＡの発現量
Ｂ：試料未添加時のコラーゲンｍＲＮＡの発現量
【００５６】
これらの実験結果を表７に示した。その結果、本発明のアスコルビン酸誘導体は２価以上の金属塩を用いないアスコルビン酸誘導体よりも特に優れたコラーゲン合成促進効果を示した。また、本発明にて得られたアスコルビン酸誘導体を含有する製剤は、単純にアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムを添加する方法に比べて顕著なコラーゲン合成促進効果を示した。
【００５７】
【表７】
【実施例５】
【００５８】
次に本発明の皮膚外用剤の処方例を示す。
【００５９】
処方例１ 濃縮エッセンス
配合成分 配合量（重量％）
（１）アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸ナトリウム ５．０
（２）モノステアリン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン １０．０
（３）イソノナン酸イソトリデシル ５．０
（４）精製水 ５６．０
（５）塩化マグネシウム・６水和物 １．８
（６）精製水 １５．２
（７）水酸化カリウム水溶液（５重量％） ７．０
〔製法〕実施例１と同じ方法で製造した。
【００６０】
処方例２ 化粧水
配合成分 配合量（重量％）
（１）処方例１の濃縮エッセンス ５．０
（２）１，３ブチレングリコール ５．０
（３）エタノール ５．０
（４）防腐剤 適 量
（５）香料 適 量
（６）精製水で全量 １００．０
〔製法〕（１）〜（６）を混合する。平均粒子径は２２０ｎｍであった。
【００６１】
処方例３ 美容液
配合成分 配合量（重量％）
（１）処方例１の濃縮エッセンス ４０．０
（２）カルボキシビニルポリマー ０．５
（３）水酸化カリウム 適 量
（４）グリセリン １０．０
（５）１，３ブチレングリコール ８．０
（６）エタノール ３．０
（７）防腐剤 適 量
（８）精製水で全量 １００．０
〔製法〕（１）〜（８）を混合する。
【００６２】
この美容液を男性５人、女性５人で１ヶ月使用試験を行った結果、８０％が有効又はやや有効と評価した。
【００６３】
処方例４ 乳液
配合成分 配合量（重量％）
（１）処方例１の濃縮エッセンス ２．０
（２）モノステアリン酸ＰＯＥ（５）グリセリル １．０
（３）親油型モノステアリン酸グリセリル １．０
（４）スクワラン １０．０
（５）ジカプリン酸ネオペンチルグリコール ５．０
（６）パルミチン酸セチル ２．０
（７）ベヘニルアルコール ０．４
（８）グリセリン ５．０
（９）１，３−ブチレングリコール ８．０
（１０）キサンタンガム ０．１
（１１）防腐剤 適 量
（１２）精製水で全量 １００．０
（１３）カルボキシビニルポリマー ０．２
（１４）精製水 ２０．０
（１５）水酸化カリウム 適 量
〔製法〕（１３）は（１２）によく分散させ、これに（１４）（１５）次いで（８）〜（１１）を添加し、水相とする。（２）〜（７）の油相部の原料および水相部をそれぞれ７５℃に加熱し完全溶解した後、水相部を油相部へ混合し乳化し、４０℃で（１）を添加し、室温まで冷却する。
【００６４】
処方例５ クリーム
配合成分 配合量（重量％）
（１）処方例１の濃縮エッセンス ２０．０
（２）モノステアリン酸ＰＯＥ（５）グリセリル ２．０
（３）モノステアリン酸グリセリル ２．０
（４）セタノール ３．０
（５）スクワラン １０．０
（６）流動パラフィン ５．０
（７）香料 適 量
（８）グリセリン ５．０
（９）１，３−ブチレングリコール ５．０
（１０）キサンタンガム ０．２
（１１）防腐剤 適 量
（１２）精製水で全量 １００．０
〔製法〕（２）〜（７）の油相部の原料および（８）〜（１２）の水相部の原料をそれぞれ７５℃に加熱し完全溶解した後、水相部を油相部へ混合し乳化し、４０℃で（１）を添加し、室温まで冷却する。
【００６５】
処方例６ ファンデーション
配合成分 配合量（重量％）
（１）処方例１の濃縮エッセンス ２．０
（２）モノステアリン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン １．０
（３）ＰＯＥ（２０）セチルエーテル ２．０
（４）セタノール １．０
（５）液状ラノリン ２．０
（６）流動パラフィン ３．０
（７）ミリスチン酸イソプロピル ６．５
（８）パラオキシ安息香酸ブチル ０．１
（９）カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．１
（１０）ベントナイト ０．５
（１１）プロピレングリコール ４．０
（１２）トリエタノールアミン １．１
（１３）パラオキシ安息香酸メチル ０．２
（１４）二酸化チタン ８．０
（１５）タルク ４．０
（１６）ベンガラ １．０
（１７）黄酸化鉄 ２．０
（１８）香料 ０．１
（１９）精製水で全量 １００．０
［製造方法］成分（２）〜（８）を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分（１９）に成分（９）をよく膨潤させ、続いて、成分（１０）〜（１３）を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分（１４）〜（１７）を加え、ホモミキサーで撹拌し７５℃に保ち水相とする。この水相に油相をかき混ぜながら加え、冷却し、４５℃で成分（１８）を加え、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【産業上の利用可能性】
【００６６】
本発明の皮膚外用剤により、特定のアスコルビン酸−２−リン酸エステルの安定性を飛躍的に向上させることが可能となり、美白効果やしわの予防改善効果などに特に優れており、皮膚外用剤として化粧料、医薬部外品、医薬品等に利用できる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（１）で表されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体を含有し、その化合物の安定性を飛躍的に向上させ、美白効果やしわの予防改善効果などに特に優れた組成物に関する。
【０００２】
【背景技術】
【０００３】
アスコルビン酸およびその種々の誘導体は、美白作用、抗酸化作用、コラーゲン合成促進作用等の効能効果を示す化合物として知られており、医薬品、化粧品等に配合されている。
【０００４】
とくに、アスコルビン酸誘導体のうち、アスコルビン酸の２位の水酸基をリン酸エステル化し、かつ６位の水酸基を高級脂肪酸エステル化した化合物は、生体への親和性が高く、皮膚等の生体組織への移行が速やかであり、医薬品、化粧品等への適用が期待されている。
【０００５】
しかしながら、このアスコルビン酸−２−リン酸エステルの高級脂肪酸エステルおよび／またはその塩は製剤中での安定性が満足ではなかった。
【０００６】
前記アスコルビン酸−２−リン酸エステルの高級脂肪酸エステルの塩を含有する皮膚外用剤において、そのｐＨを７〜９に調整することにより、該エステル塩の剤中での分解を抑制し、安定性、溶解性を改善した皮膚外用剤が知られている（特許文献１参照）。さらに、高級アルコールなどと併用し、乳化することで安定性を向上させることも知られている（特許文献２参照）。
【特許文献１】特開２００３−１７６２１７号公報
【特許文献２】特開２００５−１８７４６５号公報
【０００７】
しかしながら、製剤中に存在するアスコルビン酸−２−リン酸エステルについて、さらなる安定化が求められていた。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
すなわち本発明はアスコルビン酸誘導体のうち、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステルの安定性を飛躍的に高め、美白効果やしわの予防改善効果に優れた組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記実情に鑑みて鋭意検討した結果、上記式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水を含有する組成物を調製し、これとアルカリ土類金属塩又はその水溶液を混合することにより、アスコルビン酸−２−リン酸エステルの分解が飛躍的に抑制でき、生理活性も向上することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち、本発明は下記の通りである。
【００１１】
〔１〕
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製した組成物。
【００１２】
〔２〕
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製した組成物。
【００１３】
〔３〕
式（１）中のＲが、炭素原子数８〜２２の脂肪酸残基であることを特徴とする〔１〕又は〔２〕記載の組成物。
【００１４】
〔４〕
２価以上の金属塩の含有量が、式（１）の化合物１モルに対し、０．５倍モル以上であることを特徴とする〔１〕〜〔３〕のいずれか記載の組成物。
【００１５】
〔５〕
非イオン性界面活性剤のＨＬＢが９〜１７の範囲であることを特徴とする〔１〕〜〔４〕のいずれか記載の組成物。
【００１６】
〔６〕
平均粒子径が３００ｎｍ以下であることを特徴とする〔１〕〜〔５〕のいずれか記載の組成物。
【００１７】
〔７〕
〔１〕〜〔６〕のいずれか１項記載の組成物を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【００１８】
〔８〕
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び２価以上の金属塩を含有する組成物、又は式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び２価以上の金属塩を含有する組成物。
【００１９】
本発明に用いるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体とは、上記式（１）で表される化合物であって、アスコルビン酸−２−リン酸エステルの６位の水酸基の水素原子をアシル基に置換したものである（式１のＲがアシル基である）。アシル基の置換方法としては周知の方法を用いることができ、例えば、アスコルビン酸−２−リン酸塩に酸性触媒下、アシル酸又はアシル酸のエステルを反応させることによって得ることができる。アシル酸としては脂肪族カルボン酸、芳香族カルボン酸などが挙げられる。中でも、炭素原子数８〜２２の脂肪酸が好ましい。すなわち、式（１）中のＲは炭素原子数８〜２２の脂肪酸残基が好ましい。中でも、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、２−ヘキシルデカン酸、イソステアリン酸などが汎用性の面で好ましい。
【００２０】
上記式（１）で表される化合物における、Ｘは水素及び／又はアルカリ金属である。アルカリ金属としては、リチウム、ナトリウム、カリウムなどが挙げられる。該アスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体に置換するアルカリ金属のモル数は、それ自身の安定性の面から1モル以上が好ましく、２モル以上が最も好ましい。
【００２１】
該アスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体としては、例えば、アスコルビン酸−２−リン酸−６−ラウリン酸ナトリウム、アスコルビン酸−２−リン酸−６−ミリスチン酸ナトリウム、アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸ナトリウム、アスコルビン酸−２−リン酸−６−ステアリン酸ナトリウム、アスコルビン酸−２−リン酸−６−イソステアリン酸ナトリウム、アスコルビン酸−２−リン酸−６−（２−ヘキシルデカン酸）ナトリウム、これらの物質のナトリウムをカリウムにしたものなどが挙げられる。
【００２２】
これらの化合物は、１種単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。本発明の組成物において、アスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体は、組成物中、０．０００１〜２０重量％含有することが好ましく、より好ましくは０．０１〜１０重量％含有されるように用いると良い。
【００２３】
本発明に用いる非イオン性界面活性剤は、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビトールテトラ脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシドなどがあげられる。中でも、ＰＯＥ（２５）ラウリルエーテル、ＰＯＥ（２０）オレイルエーテル、モノパルミチン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン、モノステアリン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン、トリステアリン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン、モノイソステアリン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン、モノオレイン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン、ＰＯＥ（４０）硬化ヒマシ油、ＰＯＥ（６０）硬化ヒマシ油、ＰＯＥ（３０）フィトステロール、モノステアリン酸デカグリセリル、ショ糖ステアリン酸モノエステルなどが好ましい。
【００２４】
これらの非イオン性界面活性剤は、１種単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよいが、本発明に用いる非イオン性界面活性剤の混合ＨＬＢ（２種以上の非イオン性界面活性剤を用いた場合にはその混合ＨＬＢを定法によって算出する）が９〜１７の範囲で用いることが好ましい。なお、ＨＬＢとは親水性と親油性のバランスを示すものであり、本発明においてはＧｒｉｆｆｉｎの算出法を用いた。
【００２５】
本発明の皮膚外用剤において、非イオン性界面活性剤は、油性成分の使用量などによっても異なるが、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体に対して５０重量％以上用いるのが好ましく、１００重量％以上用いるのがより好ましく、２００重量％以上用いるのが最も好ましい。
【００２６】
本発明は、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製した組成物を得る方法と、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製した組成物を得る方法があるが、油性成分を用いる後者の方が製剤（乳化粒子）の安定性の面から好ましい。
【００２７】
本発明に用いる油性成分は、炭化水素類、ロウ・エステル類、油脂類、シリコーン油類などがあげられる。これらは化粧品や医薬部外品、医薬品に用いられるものを使用できる。例えば、スクワレン、スクワラン、流動パラフィン、ミネラルオイル、ワセリン等の炭化水素類や、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、イソノナン酸イソノニル、イソノナン酸オクチル、イソノナン酸トリデシル、イソノナン酸イソトリデシル等のエステル類、トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル、トリイソステアリン酸グリセリルなどのトリグリセライド類、メチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン等のシリコーン油類、天然の油性成分である、ホホバ油、カルナウバロウ、キャンデリラロウ、オリーブ油、マカデミアナッツ油、メドウホーム油などがあげられる。また、トコフェロールやレチノールなどの油溶性ビタミンやこれらの誘導体、アスタキサンチン、カロテンなどの油性成分も使用できる。
【００２８】
これらの油性成分は、１種単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。油性成分の使用量は、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体に対して２０重量％以上用いるのが好ましく、１００重量％以上用いるのがより好ましい。
【００２９】
本発明に用いる２価以上の金属塩とは、カルシウムをはじめとするアルカリ土類金属、マグネシウム、亜鉛などの塩酸塩、硫酸塩、炭酸塩、リン酸塩、硝酸塩、有機酸塩などがあげられる。中でも、カルシウム、マグネシウム塩が好ましく、塩化マグネシウムや硫酸マグネシウム、塩化カルシウムがより好ましい。２価以上の金属塩は上記式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体を含有する組成物に直接混合することができるし、水溶液にして混合することもできる。
【００３０】
これらの２価以上の金属塩は、１種単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。本発明の組成物において、式（１）の化合物１モルに対し、０．１モル以上使用することが好ましく、０．５モル以上がより好ましく、１〜５モルが最も好ましい。
【００３１】
本発明の組成物は、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水（及び油性成分）を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製できる。その混合方法はアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体を含有する前記組成物に２価以上の金属塩又はその水溶液を添加する方法や、２価以上の金属塩又はその水溶液にアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体を含有する前記組成物を添加することができるが、組成物の安定性の面から前者が好ましい。
【００３２】
本発明の組成物は、式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステルの安定性の面から、ｐＨを７以上にすることが好ましい。また、ｐＨを７．５以上９以下にすることがより好ましい。ｐＨ調整に用いる塩基としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムなどの無機塩基や、トリエタノールアミンやアミノメチルプロパンジオール、アルギニン、リシンなどの有機塩基が挙げられる。
【００３３】
本発明の組成物は、製剤の安定性の面で平均粒子径は３００ｎｍ以下が好ましく、２００ｎｍ以下が最も好ましい。大塚電子株式会社製の光散乱方式の粒子径測定装置などが使用できる。
【００３４】
本発明の組成物又は皮膚外用剤は、化粧品、医薬部外品及び医薬品のいずれにも用いることができ、その剤形としては、例えば、化粧水、クリーム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデーション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤等が挙げられる。
【００３５】
本発明の組成物又は皮膚外用剤には、上記アスコルビン酸−２−リン酸エステルと２価以上の金属塩を含有する組成物をそのまま使用しても良く、本発明の効果を損なわない範囲内で、一般の外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、抗炎症剤、キレート剤等の成分を配合することもできる。
【発明の効果】
【００３６】
本発明の皮膚外用剤によれば、製剤中のアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体の安定性が高く、分解による製剤の黄変や褐変が極めて起こりにくく、美白効果やしわ予防改善効果に優れている。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３７】
以下に実施例及び比較例を挙げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明は下記実施例において制限されるものではない。なお、処方中の各成分の含有量は重量％とする。
【実施例１】
【００３８】
本発明の組成物の物性及び安定性評価
種々の構造の非イオン性界面活性剤、油性成分、２価以上の金属塩で調製した製剤の平均粒子径と変色性およびアスコルビン酸誘導体の残存率について比較検討した結果を表１に示す。用いたアスコルビン酸誘導体はＮａが２〜３モル置換されたものを用いた。表２中のアスコルビン酸誘導体に対するＭｇのモル比については、アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸ナトリウム Ｍｗ：５６０．４６（３Ｎａ体）として算出した。
【００３９】
なお、製剤の製造方法については以下の手順で行った。まず、常温下でＡ部を混合し、４０℃のＢ部を徐々に添加する。次に超音波洗浄器内でＣ部を加え、４０℃で１５分間保持する。３０℃まで冷却後、Ｄ、Ｅ部を加えて目的とする製剤を得た。
【００４０】
平均粒子径の測定は大塚電子株式会社製の光散乱方式の粒子径測定装置（ＦＰＡＲ−１０００）で行い、キュムラント（ｃｕｍｕｌａｎｔ）法により求めた。測定温度は２５±１℃で行った。なお、平均粒子径の測定は製剤の調製後３時間後に行った。
【００４１】
経時観察は５０℃で１ヶ月経過後に評価を行い、指標にはアスコルビン酸などが分解して生じる褐色化の有無（変色の有無）、アスコルビン酸−２−リン酸エステルの残存率を判断した。
【００４２】
また、製剤中のアスコルビン酸−２−リン酸エステルの残存率（％）は、下記測定条件の高速液体クロマトグラフィーによって測定し下記式により算出した。
分析試料は、各製剤０．２ｇをとり、２０重量％のリン酸水溶液１ｍＬを加え、５０容量％のエタノールを加えて５０ｍＬとしたものを用いた。
【００４３】
残存率（％）＝１００×［５０℃静置１ヵ月後の製剤中のアスコルビン酸誘導体濃度（ｇ／Ｌ）／調製直後の剤中のアスコルビン酸誘導体濃度（ｇ／Ｌ）］
＜高速液体クロマトグラフィー測定条件＞
カラム：オクタデシル化シリカゲル（ＯＤＳ） ４．６ｍｍφ×２５０ｍｍ
カラム温度：４０℃
溶離液：２０ｍＭリン酸水素二カリウム（リン酸でｐＨ７．０）／アセトニトリル＝４０／６０
流速：１ｍＬ／分
検出：ＵＶ２６５ｎｍ
上記残存率について、下記の４段階の評価項目で評点付けをした。
◎：残存率９０％以上
○：残存率８０％以上９０％未満
△：残存率７０％以上８０％未満
×：残存率７０％未満
【００４４】
【表１】
【００４５】
【表２】
【００４６】
【表３】
【００４７】
【表４】
【実施例２】
【００４８】
本発明の製剤と、単純にアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムを添加した製剤との製造比較及び製剤の安定性（４０℃で１ヶ月）について評価した。
保存安定性評価項目
◎：乳化粒子の変化がほとんど認められない。
○：顕微鏡で観察すると若干の乳化粒子径の増大が確認できる。
×：相分離が顕著である。
【００４９】
比較例４の製造方法
アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムの調製
アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸ナトリウム２．８ｇを精製水３５０ｍＬに溶解し、硫酸マグネシウム・７水和物１．８５ｇを精製水１５０ｍＬに溶解した水溶液を撹拌しながらゆっくりと添加した後３０分間反応させ、生じた沈殿物をろ過し、乾燥して白色粉末２．５ｇを得た。
製剤の調製
表１の比較例２の処方において、アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸ナトリウムを上記のアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムに変えて同様に製造し、比較例４とした。
【００５０】
これらの実験結果を表５に示した。その結果、単純にアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムを添加した場合、同じ界面活性剤、使用量にもかかわらず、白色のけんだく状態であり、３時間後には沈降してしまうのに対し、本発明の製剤は乳青白色の溶液で均一性が高かった。また、４０℃１ヶ月後の安定性においても比較例よりも安定性に優れていた。
【００５１】
【表５】
【実施例３】
【００５２】
本発明の組成物の美白効果（メラニン生成抑制試験）
対数増殖期にあるメラノーマを６０ｍｍのシャーレに３×１０４個／ｍＬ懸濁液を１．０ｍＬ加え、アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸が２０μＭとなるように各実施例の試料を添加し、含むＥａｇｌｅｓ’ＭＥＭ（１０％牛胎児血清含有）３．０ｍＬを加え、３７℃、５％ＣＯ２条件下にて培養した。培養５日後に細胞をシャーレから剥離し、細胞を超音波破砕した後に、４Ｎ水酸化ナトリウム水溶液０．５ｍＬを加え、６０℃で２時間の処理を行い、分光光度計でＯ．Ｄ．４７５ｎｍを測定した。なお、超音波処理後の細胞破砕液をＬｏｗｒｙの方法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９３，２６５−２７５，１９５１）でタンパク定量し、タンパク量当りのメラニン量を比較することによって、メラニン生成抑制作用の指標とした。
【００５３】
これらの実験結果を表６に示した。その結果、本発明のアスコルビン酸誘導体は２価以上の金属塩を用いないアスコルビン酸誘導体よりも特に優れたメラニン生成抑制作用を示した。また、本発明の製法にて得られたアスコルビン酸誘導体を含有する製剤は、単純にアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムを添加する方法に比べて顕著なメラニン生成抑制作用を示した。
【００５４】
【表６】
【実施例４】
【００５５】
本発明の組成物のコラーゲン合成促進効果
培養ヒト皮膚線維芽細胞におけるコラーゲン合成の促進作用を下記の条件にて測定した。コンフルエントな状態の正常ヒト皮膚線維芽細胞をアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸が１０μＭとなるように各実施例の試料を添加したＥａｇｌｅ’ｓ ＭＥＭ培地で２４時間培養した後、総ＲＮＡの抽出を行った。正常ヒト皮膚線維芽細胞から抽出した総ＲＮＡを基にＲＴ−ＰＣＲ法によりコラーゲンｍＲＮＡ発現量の測定を行った。ＲＴ−ＰＣＲ法にはＴａＫａＲａ ＲＮＡ ＰＣＲ Ｋｉｔ （ＡＭＶ） Ｖｅｒ．２．１を用いた。また、内部標準としてはＧＡＰＤＨを用いた。その他の操作は定められた方法に従い、ＰＣＲ反応液をアガロースゲル電気泳動に供し、コラーゲン及びＧＡＰＤＨのｍＲＮＡ発現をバンドとして確認した。これらのバンドをカメラにて撮影してデンシトメーターを用いて定量化し、コラーゲンｍＲＮＡの発現量を内部標準であるＧＡＰＤＨ ｍＲＮＡ発現量に対する割合として求めた。コントロールのコラーゲンｍＲＮＡ発現量に対する試料添加時のコラーゲンｍＲＮＡ発現量値からコラーゲン合成促進率を求めた。
コラーゲン合成促進率（％）＝Ａ／Ｂ×１００
Ａ：試料添加時のコラーゲンｍＲＮＡの発現量
Ｂ：試料未添加時のコラーゲンｍＲＮＡの発現量
【００５６】
これらの実験結果を表７に示した。その結果、本発明のアスコルビン酸誘導体は２価以上の金属塩を用いないアスコルビン酸誘導体よりも特に優れたコラーゲン合成促進効果を示した。また、本発明にて得られたアスコルビン酸誘導体を含有する製剤は、単純にアスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸マグネシウムを添加する方法に比べて顕著なコラーゲン合成促進効果を示した。
【００５７】
【表７】
【実施例５】
【００５８】
次に本発明の皮膚外用剤の処方例を示す。
【００５９】
処方例１ 濃縮エッセンス
配合成分 配合量（重量％）
（１）アスコルビン酸−２−リン酸−６−パルミチン酸ナトリウム ５．０
（２）モノステアリン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン １０．０
（３）イソノナン酸イソトリデシル ５．０
（４）精製水 ５６．０
（５）塩化マグネシウム・６水和物 １．８
（６）精製水 １５．２
（７）水酸化カリウム水溶液（５重量％） ７．０
〔製法〕実施例１と同じ方法で製造した。
【００６０】
処方例２ 化粧水
配合成分 配合量（重量％）
（１）処方例１の濃縮エッセンス ５．０
（２）１，３ブチレングリコール ５．０
（３）エタノール ５．０
（４）防腐剤 適 量
（５）香料 適 量
（６）精製水で全量 １００．０
〔製法〕（１）〜（６）を混合する。平均粒子径は２２０ｎｍであった。
【００６１】
処方例３ 美容液
配合成分 配合量（重量％）
（１）処方例１の濃縮エッセンス ４０．０
（２）カルボキシビニルポリマー ０．５
（３）水酸化カリウム 適 量
（４）グリセリン １０．０
（５）１，３ブチレングリコール ８．０
（６）エタノール ３．０
（７）防腐剤 適 量
（８）精製水で全量 １００．０
〔製法〕（１）〜（８）を混合する。
【００６２】
この美容液を男性５人、女性５人で１ヶ月使用試験を行った結果、８０％が有効又はやや有効と評価した。
【００６３】
処方例４ 乳液
配合成分 配合量（重量％）
（１）処方例１の濃縮エッセンス ２．０
（２）モノステアリン酸ＰＯＥ（５）グリセリル １．０
（３）親油型モノステアリン酸グリセリル １．０
（４）スクワラン １０．０
（５）ジカプリン酸ネオペンチルグリコール ５．０
（６）パルミチン酸セチル ２．０
（７）ベヘニルアルコール ０．４
（８）グリセリン ５．０
（９）１，３−ブチレングリコール ８．０
（１０）キサンタンガム ０．１
（１１）防腐剤 適 量
（１２）精製水で全量 １００．０
（１３）カルボキシビニルポリマー ０．２
（１４）精製水 ２０．０
（１５）水酸化カリウム 適 量
〔製法〕（１３）は（１２）によく分散させ、これに（１４）（１５）次いで（８）〜（１１）を添加し、水相とする。（２）〜（７）の油相部の原料および水相部をそれぞれ７５℃に加熱し完全溶解した後、水相部を油相部へ混合し乳化し、４０℃で（１）を添加し、室温まで冷却する。
【００６４】
処方例５ クリーム
配合成分 配合量（重量％）
（１）処方例１の濃縮エッセンス ２０．０
（２）モノステアリン酸ＰＯＥ（５）グリセリル ２．０
（３）モノステアリン酸グリセリル ２．０
（４）セタノール ３．０
（５）スクワラン １０．０
（６）流動パラフィン ５．０
（７）香料 適 量
（８）グリセリン ５．０
（９）１，３−ブチレングリコール ５．０
（１０）キサンタンガム ０．２
（１１）防腐剤 適 量
（１２）精製水で全量 １００．０
〔製法〕（２）〜（７）の油相部の原料および（８）〜（１２）の水相部の原料をそれぞれ７５℃に加熱し完全溶解した後、水相部を油相部へ混合し乳化し、４０℃で（１）を添加し、室温まで冷却する。
【００６５】
処方例６ ファンデーション
配合成分 配合量（重量％）
（１）処方例１の濃縮エッセンス ２．０
（２）モノステアリン酸ＰＯＥ（２０）ソルビタン １．０
（３）ＰＯＥ（２０）セチルエーテル ２．０
（４）セタノール １．０
（５）液状ラノリン ２．０
（６）流動パラフィン ３．０
（７）ミリスチン酸イソプロピル ６．５
（８）パラオキシ安息香酸ブチル ０．１
（９）カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．１
（１０）ベントナイト ０．５
（１１）プロピレングリコール ４．０
（１２）トリエタノールアミン １．１
（１３）パラオキシ安息香酸メチル ０．２
（１４）二酸化チタン ８．０
（１５）タルク ４．０
（１６）ベンガラ １．０
（１７）黄酸化鉄 ２．０
（１８）香料 ０．１
（１９）精製水で全量 １００．０
［製造方法］成分（２）〜（８）を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分（１９）に成分（９）をよく膨潤させ、続いて、成分（１０）〜（１３）を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分（１４）〜（１７）を加え、ホモミキサーで撹拌し７５℃に保ち水相とする。この水相に油相をかき混ぜながら加え、冷却し、４５℃で成分（１８）を加え、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【産業上の利用可能性】
【００６６】
本発明の皮膚外用剤により、特定のアスコルビン酸−２−リン酸エステルの安定性を飛躍的に向上させることが可能となり、美白効果やしわの予防改善効果などに特に優れており、皮膚外用剤として化粧料、医薬部外品、医薬品等に利用できる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製したことを特徴とする組成物。
【請求項２】
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製したことを特徴とする組成物。
【請求項３】
式（１）中のＲが、炭素原子数８〜２２の脂肪酸残基であることを特徴とする請求項１又は２記載の組成物。
【請求項４】
２価以上の金属塩の含有量が、式（１）の化合物１モルに対し、０．５倍モル以上であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項記載の組成物。
【請求項５】
非イオン性界面活性剤の混合ＨＬＢが９〜１７の範囲であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項記載の組成物。
【請求項６】
平均粒子径が３００ｎｍ以下であることを特徴とする請求項１〜５のいずれか１項記載の組成物。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項記載の組成物を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項８】
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び２価以上の金属塩を含有する組成物、
又は式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び２価以上の金属塩を含有することを特徴とする組成物。
【請求項１】
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製したことを特徴とする組成物。
【請求項２】
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び水を含有する組成物を調製し、これと２価以上の金属塩又はその水溶液を混合することにより調製したことを特徴とする組成物。
【請求項３】
式（１）中のＲが、炭素原子数８〜２２の脂肪酸残基であることを特徴とする請求項１又は２記載の組成物。
【請求項４】
２価以上の金属塩の含有量が、式（１）の化合物１モルに対し、０．５倍モル以上であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項記載の組成物。
【請求項５】
非イオン性界面活性剤の混合ＨＬＢが９〜１７の範囲であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項記載の組成物。
【請求項６】
平均粒子径が３００ｎｍ以下であることを特徴とする請求項１〜５のいずれか１項記載の組成物。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項記載の組成物を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項８】
式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤及び２価以上の金属塩を含有する組成物、
又は式（１）で示されるアスコルビン酸−２−リン酸エステル誘導体、非イオン性界面活性剤、油性成分及び２価以上の金属塩を含有することを特徴とする組成物。
【公開番号】特開２００７−３２０８５８（Ｐ２００７−３２０８５８Ａ）
【公開日】平成１９年１２月１３日（２００７．１２．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−１４９７９８（Ｐ２００６−１４９７９８）
【出願日】平成１８年５月３０日（２００６．５．３０）
【出願人】（５９２２６２５４３）日本メナード化粧品株式会社 (223)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年１２月１３日（２００７．１２．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年５月３０日（２００６．５．３０）
【出願人】（５９２２６２５４３）日本メナード化粧品株式会社 (223)
【Ｆターム（参考）】
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