アスパラギン酸誘導体
【課題】記憶障害、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血などの神経変性疾患、また統合失調症、不安及びその関連疾患、大うつ病などの精神医学的障害、及び神経因性疼痛などの慢性疼痛の治療及び予防効果を有する薬物であって、EAAT2に抑制作用を有する薬物を提供することにある。
【解決手段】式（Ｉ）
（式中、Ｗは式−Ｗ１−Ｗ２−で表される基(式中、Ｗ１は酸素原子等を示し、Ｗ２はC1〜C6のアルキレン等を示す。)、ＹはC1〜C6のアルキレン、式ｂ−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−ＮＲ５−ａで表される基（式中、Ｙ１は単結合等を示し、Ｒ４及びＲ５は水素原子等を示し、Ｚは酸素原子等を示す。）等を示し、ａ及びｂはそれぞれＣｙｃＡ及びＣｙｃＢにおけるＹの結合方向を示し、ＣｙｃＡ及びＣｙｃＢは、同一又は異なって、アリール等を示す。）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物である。
【解決手段】式（Ｉ）
（式中、Ｗは式−Ｗ１−Ｗ２−で表される基(式中、Ｗ１は酸素原子等を示し、Ｗ２はC1〜C6のアルキレン等を示す。)、ＹはC1〜C6のアルキレン、式ｂ−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−ＮＲ５−ａで表される基（式中、Ｙ１は単結合等を示し、Ｒ４及びＲ５は水素原子等を示し、Ｚは酸素原子等を示す。）等を示し、ａ及びｂはそれぞれＣｙｃＡ及びＣｙｃＢにおけるＹの結合方向を示し、ＣｙｃＡ及びＣｙｃＢは、同一又は異なって、アリール等を示す。）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、興奮性アミノ酸輸送体のグルタミン酸取り込み活性の抑制作用を有するアスパラギン酸誘導体に関する。さらに詳しくは、老人性あるいはアルツハイマーによる記憶障害、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部外傷等の神経変性疾患、また統合失調症、不安及びその関連疾患、双極性障害、単極性障害、大うつ病等の精神医学的障害、及び神経因性疼痛等の慢性疼痛の治療及び予防に有効なアスパラギン酸誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
脳内の興奮性伝達物質として知られるグルタミン酸は、シナプス間の神経伝達を介在しているが、細胞外に代謝経路はなく興奮性アミノ酸輸送体（Excitatory Amino Acid Transporter：EAAT）により細胞内へ取り込まれる（非特許文献１参照）。また、EAATにはこれまで５種類のサブタイプがクローニングされているが、脳内大脳皮質等でグルタミン酸調節に関与しているのは主としてEAAT2と考えられている。
【０００３】
これまで、EAAT2と種々の疾患との関連が示唆されている。虚血時等にはEAATの逆行性輸送により大量のグルタミン酸がグリアより遊離され、神経細胞死を惹起することが示唆されている（非特許文献２参照）。実験動物で虚血により惹起されるグルタミン酸遊離は、EAAT2阻害薬で拮抗されることも報告されている（非特許文献３参照）。
【０００４】
また、細胞外グルタミン酸濃度を上昇させ、シナプス伝達効果を高めることにより記憶障害を改善することが考えられる（非特許文献４参照）。
【０００５】
精神医学的障害の一つである統合失調症は、グルタミン酸機能の低下がその一因とされている。その治療薬の作用機序の一つには、EAAT2を介した作用が報告されている（非特許文献５参照）。また、不安症、うつ病等もグルタミン酸との関連が示唆されており、EAATの役割が推測される。
【０００６】
グルタミン酸は、脊髄において痛覚伝達物質として重要な役割を担っている。また、疼痛反応発現にEAATが関与している可能性が示唆されており、EAAT2阻害により疼痛反応が軽減されることも報告されている（非特許文献６参照）。
【０００７】
本発明は、老人性あるいはアルツハイマーによる記憶障害、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部外傷等の神経変性疾患、また統合失調症、不安及びその関連疾患、双極性障害、単極性障害、大うつ病等の精神医学的障害、及び神経因性疼痛等の慢性疼痛の治療及び予防効果を有する薬物であって、EAAT2に抑制作用を有する薬物を提供することを目的とする。
【０００８】
また、EAAT2阻害剤として、特許文献１及び特許文献２には３−ヒドロキシアスパラギン酸誘導体が開示されているが、いずれの特許文献にも本願記載の化合物の開示はない。
【０００９】
【特許文献１】ＥＰ０８４４２３４
【特許文献２】ＷＯ０３／０００６９８
【非特許文献１】TiPS, 11, 462 (1990)
【非特許文献２】Neuron, 11, 401 (1993)
【非特許文献３】Stroke, 30, 433 (1999)
【非特許文献４】Nature, 319, 774 (1986)
【非特許文献５】Neurosci. Lett., 347, 81 (2003)
【非特許文献６】Neuroscience, 116, 81 (2003)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明の目的は、新規なアスパラギン酸誘導体、さらに詳しくは、興奮性アミノ酸輸送体のグルタミン酸取り込み活性を抑制し、老人性あるいはアルツハイマーによる記憶障害、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部外傷等の神経変性疾患、また統合失調症、不安及びその関連疾患、双極性障害、単極性障害、大うつ病等の精神医学的障害、及び神経因性疼痛等の慢性疼痛の治療及び予防に有効なアスパラギン酸誘導体を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは上記目的のため鋭意研究を行った結果、ある種のアスパラギン酸誘導体が興奮性アミノ酸輸送体のグルタミン酸取り込み活性を強く抑制する作用を有していることを見出し、本発明を完成した。
すなわち本発明は、式（Ｉ）
【００１２】
【化１】
【００１３】
（式中、Ｗは式−Ｗ１−Ｗ２−で表される基(式中、Ｗ１は酸素原子、硫黄原子、メチレン、モノフルオロメチレン、ジフロロメチレン又は式−ＮＲ１−で表される基（式中、Ｒ１は水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示す。）を示し、Ｗ２は単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示す。)を示し、
Ｙは単結合、C1〜C6のアルキレン、置換されたC1〜C6のアルキレン、
式ｂ−Ｙ１−ＣＯ−ＮＲ２−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＳＯ2−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−ＮＲ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ２−Ｏ−Ｙ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−ＣＲ６＝ＣＲ７−Ｙ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−Ｃ≡Ｃ−Ｙ５−ａで表される基又は式ｂ−Ｙ１−ＮＲ３−ＣＯ−ａで表される基（式中、Ｙ１は単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｙ２及びＹ３は、同一又は異なって、単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｙ４及びＹ５は、同一又は異なって、単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｒ２はC1〜C6のアルキル基又は置換されたC1〜C6のアルキル基を示し、Ｒ３は水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示し、Ｒ４及びＲ５は、同一又は異なって、水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示すか、Ｒ４及びＲ５は一緒になって環構造を示し、Ｒ６及びＲ７は、同一又は異なって、水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキル基を示し、Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、ａ及びｂはそれぞれＣｙｃＡ及びＣｙｃＢにおけるＹの結合方向を示す。）を示し、
ＣｙｃＡ及びＣｙｃＢは、同一又は異なって、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、飽和複素環又は置換された飽和複素環を示す。）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物である。
【００１４】
好ましくは、Ｗが式−Ｏ−ＣＨ2−で表される基を示し、
ＹがC1〜C6のアルキレン、式ｂ−Ｙ１−ＳＯ2−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−ＮＲ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ２−Ｏ−Ｙ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−ＣＲ６＝ＣＲ７−Ｙ５−ａで表される基又は式ｂ−Ｙ１−ＮＲ３−ＣＯ−ａで表される基（式中、Ｙ１〜Ｙ５、Ｒ３〜Ｒ７、ａ及びｂは前記と同じである。）を示し、
ＣｙｃＡ及びＣｙｃＢが、同一又は異なって、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールである式（Ｉ）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物である。
【００１５】
さらに好ましくは、Ｙが式ｂ−ＣＨ2−ＣＨ2−ａ、式ｂ−ＳＯ2−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＭｅ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＣＨ2−Ｏ−ａ、式ｂ−ＣＨ＝ＣＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＯ−ａを示し、
ＣｙｃＡがアリールであり、ＣｙｃＢがアリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールである式（Ｉ）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物である。
【００１６】
また、より具体的には式（ＩＩ）
【００１７】
【化２】
【００１８】
（式中、ＣｙｃＢはアリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールを示す。）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物である。
【発明の効果】
【００１９】
本発明の化合物は、グルタミン酸取り込み阻害活性の増強が認められ、優れたEAAT2阻害活性が確認された。従って、本発明の化合物は、老人性あるいはアルツハイマーによる記憶障害、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部外傷等の神経変性疾患、また統合失調症、不安及びその関連疾患、双極性障害、単極性障害、大うつ病等の精神医学的障害、及び神経因性疼痛等の慢性疼痛の治療及び予防に有効である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
本発明において、アリールとは、例えば、フェニル又はナフチルである。
【００２１】
置換されたアリール基とは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルキル、置換されたC1〜C6のアルキル、C2〜C6のアルケニル、置換されたC2〜C6のアルケニル、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、C1〜C6のアルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環、アリールオキシ及びヘテロアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたフェニル基又はナフチル基である。
【００２２】
ヘテロアリールとは、例えば、ピリジル、ピロリル、フリル、キノリル、シンノリル、ピリミジル、ピラゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、イミダゾリル、チエニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、ベンゾジオキサニル、ベンゾモルホニル、ベンゾフラニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾピラニル、イソキノリル、ナフチリジル、キノキサリル、キナゾリニル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、インドリル、カルバゾリジル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル又はベンゾイソオキサゾリルである。
【００２３】
置換されたヘテロアリールとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルキル、置換されたC1〜C6のアルキル、C2〜C6のアルケニル、置換されたC2〜C6のアルケニル、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、C1〜C6のアルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環、アリールオキシ及びヘテロアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたヘテロアリールである。
【００２４】
シクロアルキルとは、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチルである。
【００２５】
置換されたシクロアルキルとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルキル、置換されたC1〜C6のアルキル、C2〜C6のアルケニル、置換されたC2〜C6のアルケニル、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたシクロアルキルである。
【００２６】
飽和複素環とは、例えば、アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノ又はテトラヒドロフリルである。
【００２７】
置換された飽和複素環とは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルキル、置換されたC1〜C6のアルキル、C2〜C6のアルケニル、置換されたC2〜C6のアルケニル、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換された飽和複素環である。
【００２８】
C1〜C6のアルキルとは、C1〜C6の直鎖又は分枝状のアルキルである。例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ペンチル又はヘキシルである。
【００２９】
置換されたC1〜C6のアルキルとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたC1〜C6の直鎖状又は分枝状のアルキルである。
【００３０】
C1〜C6のアルキレンとは、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン又はヘキシレンである。
【００３１】
置換されたC1〜C6のアルキレンとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルキル、置換されたC1〜C6のアルキル、C2〜C6のアルケニル、置換されたC2〜C6のアルケニル、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたC1〜C6のアルキレンである。
【００３２】
ハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子であり、好ましくはフッ素原子、塩素原子又は臭素原子である。
【００３３】
C2〜C6のアルケニルとは、C2〜C6の直鎖又は分枝状のアルケニルである。例えば、ビニル、アリル、プロペニル、ブテニル、イソブテニル、ペンテニル又はヘキセニルである。
【００３４】
置換されたC2〜C6のアルケニルとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシからなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたC2〜C6の直鎖又は分枝状のアルケニルである。
【００３５】
C1〜C6のアルコキシとは、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、tert−ブトキシ、シクロプロピルメトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ又はシクロヘキシルオキシである。
【００３６】
置換されたC1〜C6のアルコキシとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたC1〜C6のアルコキシである。
【００３７】
C1〜C6のアルキルチオとは、C1〜C6の直鎖又は分枝状のアルキルチオである。例えば、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、イソブチルチオ、tert−ブチルチオ、ペンチルチオ又はヘキシルチオである。
【００３８】
置換されたC1〜C6のアルキルチオとは、例えば、「ハロゲン原子、ヒドロキシ、C1〜C6のアルコキシ、C3〜C8のシクロアルキル、C2〜C8のアルコキシカルボニル、置換されたアミノ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル及び飽和複素環」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたC1〜C6のアルキルチオである。
【００３９】
置換されたアミノとは、例えば、「C1〜C6のアルキル、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、C1〜C6アルキルスルホニル、アリールスルホニル及びC1〜C10アシル」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたアミノである。
【００４０】
C2〜C10のアルコキシカルボニルとは、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、tert−ブトキシカルボニル、ペンチルオキシカルボニル、ヘキシルオキシカルボニル又はベンジルオキシカルボニルである。
【００４１】
C1〜C10のアミノカルボニルとは、例えば、カルバモイル、メチルアミノカルボニル、ベンジルアミノカルボニル又はアニリノカルボニルである。
【００４２】
アシルとは、例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル、シクロヘキサンカルボニル、ベンゾイル、ピコリニル又はニコチニルである。
【００４３】
アリールオキシとは、前記「アリール」と酸素原子が結合した基であり、例えば、フェノキシである。
【００４４】
ヘテロアリールオキシとは、前記「ヘテロアリール」と酸素原子が結合した基であり、例えば、ピリジルオキシである。
【００４５】
C1〜C6アルキルスルホニルとは、例えば、メタンスルホニル又はエタンスルホニルである。
【００４６】
アリールスルホニルとは、例えば、フェニルスルホニル又はトルエンスルホニルである。
【００４７】
本発明において、医薬上許容される塩とは、例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、フマール酸、乳酸、安息香酸、リンゴ酸、ニコチン酸、シュウ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２-ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸又は硫酸等との塩、又は、トリメチルアミン、メチルアミン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン等との塩である。
【００４８】
本発明は、下記に示した反応スキーム１〜５に示した工程により実施することができる。また各反応スキーム中、ＣｙｃＡ、ＣｙｃＢ及びＹは前記と同意義である。
【００４９】
反応スキーム1
反応スキーム中、ＰＧ１はアミノ基の保護基であり、例としてフルオレニルオキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、tert-ブトキシカルボニル基、トリチル基、ｏ−ニトロベンゼンスルフェニル基、ＰＧ２及びＰＧ３はカルボン酸の保護基であり、例としてメチル基、エチル基、tert-ブチル基等があげられる。また、Ｌ１は臭素原子等のハロゲン原子、メタンスルホン酸エステル等のスルホン酸エステル及びトリクロロアミデートといった脱離基となり得る基を示す。
【００５０】
【化３】
【００５１】
工程１：式（１）で表される３−ヒドロキシアスパラギン酸誘導体の水酸基を式（２）で表される化合物を用いた置換反応により式（３）で表される化合物を得ることができる。例えば、式（２）で表される化合物のＬ１が塩素原子、臭素原子等のハロゲン原子やメタンスルホン酸エステル等のスルホン酸エステルといった脱離基の場合、塩基を用いた置換反応を行うことができる。塩基として水素化ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、ｎ−ブチルリチウム等を用い、溶媒としては、反応に関与しないアセトン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、トルエン等を用いることができる。この際、添加剤を用いて反応することができ、添加剤としてはヨウ化ナトリウム、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムヨージド等を用いることができる。反応温度は−７８℃〜還流温度で得ることができる。また例えば、式（２）で表される化合物のＬ１がトリクロロアセトイミデートの場合、酸を用いた置換反応を行うことができる。酸としてはトリフルオロメタンスルホン酸、カンファースルホン酸、ピリジウムｐ−トルエンスルホン酸、過塩素酸トリチル、三フッ化ホウ素等を用い、溶媒としては、反応に関与しないジエチルエーテル、ジオキサン、ジクロロメタン、ヘキサン等を用いることができる。反応温度は−２０℃〜還流温度で得ることができる。
【００５２】
工程２：式（３）で表される化合物のＰＧ１、ＰＧ２及びＰＧ３を別々にあるいは同時に脱保護し、式（４）で表される化合物を得ることができる。ＰＧ１の脱保護の方法としては、例えばＰＧ１が塩基で脱保護されるフルオレニルオキシカルボニル基等の保護基の場合は、ジエチルアミン、ピペリジン、アンモニア、水酸化ナトリウム、炭酸カリウム等の塩基を用いて脱保護することができる。これらの塩基は、単独で、あるいは溶媒に希釈又は懸濁してして用いることができる。この際、溶媒としては水、エタノール、メタノール、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等を単独あるいは２種以上混合して用いることができる。反応温度は0〜100℃で行うことができる。
【００５３】
また、例えば、ＰＧ１がアリルオキシカルボニル基等の金属触媒により脱保護される基の場合は、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム等を触媒又は試薬として用いることにより脱保護することができる。この際、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン等の反応に関与しない溶媒中で行うことができる。反応温度は0〜100℃で行うことができる。
【００５４】
さらに例えば、ＰＧ１がtert-ブトキシカルボニル基、トリチル基、ｏ−ニトロベンゼンスルフェニル基等の酸で脱保護される基の場合は、塩酸、硫酸、トリフルオロ酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸等の酸を用い、脱保護することができる。反応溶媒としては、例えばエタノール、メタノール、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、酢酸エチル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等があげられる。反応温度は−50〜50℃で行うことができる。
【００５５】
また、ＰＧ２及びＰＧ３の脱保護の方法は、例えば、ＰＧ２及びＰＧ３がメチル、エチル基等の保護基の場合は、塩基を用いた加水分解による脱保護ができる。水酸化ナトリウム、炭酸カリウム等の塩基を用いて脱保護することができる。反応溶媒は水あるいは水と有機溶媒の混合溶媒中で行うことができ、有機溶媒としてはメタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、１,４−ジオキサン等を用いることができる。反応温度は0〜100℃で行うことができる。
【００５６】
また、例えば、ＰＧ２及びＰＧ３がtert-ブチル基等の酸で脱保護される基の場合は、塩酸、硫酸、トリフルオロ酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸等の酸を用い、脱保護することができる。反応溶媒としては、例えばエタノール、メタノール、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、１,４−ジオキサン等があげられる。反応温度は−50〜100℃で行うことができる。
【００５７】
この脱保護については、上記以外にもPROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS, THEODORA W. GREENE and PETER G. M. WU TS著に記載の方法を用いることができる。
【００５８】
反応スキーム２
反応スキーム中、ＰＧ１、ＰＧ２、ＰＧ３及びＬ１は前記と同意義である。Ｙ’は−Ｙ１−ＳＯ2−、−Ｙ１−Ｏ−ＣＯ−、−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−を示し、Ｙ１、Ｒ４及びＺは前記と同意義である。
【００５９】
【化４】
【００６０】
工程１：式（１）で表される３−ヒドロキシアスパラギン酸誘導体の水酸基を式（５）で表される化合物を用いた置換反応により式（６）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程１）と同様の方法で行うことができる。
【００６１】
工程２：式（６）で表される化合物のニトロ基をアミノ基に還元し、式（７）で表される化合物を得ることができる。例えば金属触媒を用いた接触水素添加反応で行うことができる。金属触媒としてはパラジウム−カーボン、パラジウム−炭酸カルシウムといったパラジウム触媒以外にも白金触媒、ニッケル触媒等を用いることができる。溶媒としてはエタノール、メタノール、テトラヒドロフラン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒があげられる。反応温度は0〜50℃で行うことができる。この反応は水素ガスを用いて行うこともできるし、ギ酸−ギ酸アンモニウム、水素化ほう素ナトリウム等の試薬を用いることもできる。また、例えば鉄、亜鉛等の金属を用いた還元反応で行うことができる。溶媒としてはメタノール、エタノール、プロパノール等を用い、反応温度は0〜100℃で行うことができる。この反応は添加物として塩化アンモニウム、塩酸等を用いることができる。この還元反応については上記以外にも選択的にニトロ基をアミノ基に還元できる方法であれば特に限定されない。たとえば塩化すず、塩化鉄等を用いた還元法等があげられる。
【００６２】
工程３：式（７）で表される化合物から縮合反応によりスルホンアミド体、カーバメート体、ウレア体又はチオウレア体等の式（８）で表される化合物を得ることができる。
ここで、カーバメート体を得る反応は、例えば、クロロ炭酸エステルや二炭酸ジエステル等を用い、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒中で行うことができる。この際、塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等のアミン類、炭酸カリウム等の無機塩基があげられる。これらの反応は、−50〜100℃で行うことができる。
【００６３】
また、ウレア体を得る反応は、イソシアネート等を用い、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒中で行うことができる。これらの反応は、−50〜100℃で行うことができる。また、ウレア体を得る反応では式（８）で表される化合物をイソシアネート化した後に相当するアミンを用いてウレア体を得ることができる。イソシアネート化ではクロロギ酸トリクロロメチルや炭酸ビス（トリクロロメチル）等を用い、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒中で行うことができる。この際、塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン等のアミン類があげられる。これらの反応は、−50〜100℃で行うことができる。
【００６４】
また、チオウレア体を得る反応は、例えば、チオイソシアネート等を用い、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒中で行うことができる。これらの反応は、−50〜100℃で行うことができる。
【００６５】
工程４：式（８）で表される化合物のＰＧ１、ＰＧ２及びＰＧ３を別々にあるいは同時に脱保護し、式（９）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程２）と同様の方法で行うことができる。
【００６６】
反応スキーム３
反応スキーム中、Ｒ６、Ｒ７、ＰＧ１、ＰＧ２、ＰＧ３及びＬ１は前記と同意義である。Ｌ２は臭素原子等の脱離基となり得る基、Ｌ３は水素原子又はほう素、マグネシウム、すず等の典型金属原子を示す。
【００６７】
【化５】
【００６８】
工程１：式（１）で表される３−ヒドロキシアスパラギン酸誘導体の水酸基を式（１０）で表される化合物を用いた置換反応により、式（１１）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程１）と同様の方法で行うことができる。
【００６９】
工程２： 式（１１）で表される化合物と式（１２）で表される化合物から、式（１３）で表される化合物を得ることができる。この際、金属触媒としてパラジウム等の遷移金属試薬を用い、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等の溶媒中で行うことができる。塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン等のアミン類、炭酸カリウム等の無機塩基があげられる。また、添加剤としてトリフェニルホスフィン等の遷移金属の配位子となり得る試薬を用いることができる。これらの反応は、−50〜100℃で行うことができる。
【００７０】
工程３：式（１３）で表される化合物のＰＧ１、ＰＧ２及びＰＧ３を別々にあるいは同時に脱保護し、式（１４）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程２）と同様の方法で行うことができる。
【００７１】
反応スキーム４
反応スキーム中、ＰＧ１、ＰＧ２及びＰＧ３は前記と同意義である。
【００７２】
【化６】
【００７３】
工程１：式（１３）で表される化合物の二重結合を還元し、式（１５）で表される化合物を得ることができる。例えば金属触媒を用いた接触水素添加反応で行うことができる。金属触媒としてはクロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（Ｉ）といったロジウム触媒以外にもパラジウム−カーボンといったパラジウム触媒、白金触媒、ニッケル触媒等を用いることができる。溶媒としてはエタノール、メタノール、テトラヒドロフラン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒があげられる。反応温度は0〜50℃で行うことができる。この反応は水素ガスを用いて行うこともできるし、ギ酸−ギ酸アンモニウム等の試薬を用いることもできる。
【００７４】
工程２：式（１５）で表される化合物のＰＧ１、ＰＧ２及びＰＧ３を別々にあるいは同時に脱保護し、式（１６）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程２）と同様の方法で行うことができる。
【００７５】
反応スキーム５
反応スキーム中、Ｒ３、ＰＧ１、ＰＧ２、ＰＧ３及びＬ１は前記と同意義である。ＰＧ４はＰＧ２及びＰＧ３とは選択的に脱保護できるカルボン酸の保護基を示し、例としてメチル基、エチル基、tert-ブチル基等があげられる。
【００７６】
【化７】
【００７７】
工程１：３−ヒドロキシアスパラギン酸誘導体（１）の水酸基を式（１７）で表される化合物を用いた置換反応により、式（１８）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程１）と同様の方法で行うことができる。
【００７８】
工程２：式（１８）で表される化合物のＰＧ４を脱保護し、式（１９）で表される化合物を得ることができる。例えば、保護基がメチル、エチル基等の保護基の場合は、塩基を用いた加水分解による脱保護ができる。水酸化ナトリウム、炭酸カリウム等の塩基を用いて脱保護することができる。反応溶媒は水あるいは水と有機溶媒の混合溶媒中で行うことができ、有機溶媒としてはメタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、１,４−ジオキサン等を用いることができる。反応温度は０〜100℃で行うことができる。
【００７９】
また、例えば、保護基がtert-ブチル基等の酸で脱保護される基の場合は、塩酸、硫酸、トリフルオロ酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸等の酸を用い、脱保護することができる。反応溶媒としては、例えばエタノール、メタノール、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、１,４−ジオキサン等があげられる。反応温度は−50〜100℃で行うことができる。
【００８０】
この脱保護については、上記以外にもPROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS, THEODORA W. GREENE and PETER G. M. WU TS著に記載の方法を用いることができる。
【００８１】
工程３：式（１９）で表される化合物と式（２０）で表される化合物の縮合反応を行い、式（２１）で表される化合物を得ることができる。この縮合反応は、例えば、脱水縮合剤を用いて反応することができる。脱水縮合剤には例えば１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジフェニルホスホリルアジド、カルボニルジイミダゾール等があげられ、必要に応じて１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、ヒドロキシスクシンイミド等の活性化剤を用いることができる。反応溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、酢酸エチル等があげられる。この際、塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等のアミン類、炭酸カリウム等の無機塩基があげられる。反応温度は−50〜50℃で行うことができる。
【００８２】
また、例えば、式（１９）で表される化合物とクロル炭酸エステル等から得られる混合酸無水物を用いてアミド化することができる。反応溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒があげられる。この際、塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等のアミン類、炭酸カリウム等の無機塩基があげられる。反応温度は−50〜50℃で行うことができる。
【００８３】
また、別の例として、式（１９）で表される化合物と塩化チオニル等から得られるカルボン酸クロリド等のカルボン酸ハライドを用いてアミド化することができる。反応溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒があげられる。この際、塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等のアミン類、炭酸カリウム等の無機塩基があげられる。反応温度は−50〜50℃で行うことができる。
【００８４】
工程４：式（２１）で表される化合物のアミノ基の保護基（ＰＧ１）及びカルボン酸の保護基（ＰＧ２、ＰＧ３）を別々にあるいは同時に脱保護し、式（２２）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程２）と同様の方法で行うことができる。
【００８５】
本発明のアスパラギン酸誘導体は、経口投与又は非経口投与される。成人を治療する場合、投与量は１回につき1〜1000mgであり、例えば、これを１日１〜数回投与するか、又は、１日１時間〜２４時間の範囲で静脈内に持続投与する。この投与量は、患者の年齢、体重及び症状によって適宜増減することができる。
【００８６】
経口投与する場合は、賦形剤、結合剤、滑沢剤、抗酸化剤、コーティング剤、界面活性剤、可塑剤、着色剤、矯味矯臭剤等を混合して、散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤等の製剤として投与され、非経口投与する場合は、注射剤、点滴剤等の製剤として投与される。製剤化する際には、通常の製剤化の方法が使用できる。
【００８７】
次に、参考例、実施例及び試験例にて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００８８】
参考例１
（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【００８９】
【化８】
【００９０】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−ヒドロキシアスパラギン酸(8.49g)の１，４−ジオキサン(60mL)懸濁液に２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液(60mL)を室温で加えた後、氷冷下、二炭酸−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(124.4g)を加え、徐々に昇温し室温で１７．５時間撹拌した。１，４−ジオキサンを減圧下留去後、得られた水層を酢酸エチルで洗浄した。水層に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸(120mL)を加え、酢酸エチルで抽出した後、有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣にジイソプロピルエーテルを加え、生じた粉末をろ取、ジイソプロピルエーテル洗浄し、無色粉末として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸(8.2g)を得た。
【００９１】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸(8.05g)に１，１−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシトリメチルアミン(75mL)を加え、アルゴン雰囲気下、室温で２時間、６０℃で１時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮した後、酢酸エチルで希釈し、０．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸で洗浄した。水層を酢酸エチルで抽出した後、有機層を合わせ、水、炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝８：１）で精製し、無色固体として表題化合物(7.44g)を得た。
【００９２】
参考例２
（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−［（３−ニトロベンジル）オキシ］アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル
【００９３】
【化９】
【００９４】
（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.29g)をアセトン(36mL)に溶解し、３−ニトロベンジルブロミド(1.54g)及び炭酸カリウム(987mg)を加え、アルゴン雰囲気下、６６時間加熱還流した。反応液を室温まで冷却した後、不溶物をろ別し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈し、水及び飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：クロロホルム：アセトン＝３０：３０：１）で精製し、無色油状物として表題化合物 (1.33g)を得た。
MS(ESI pos.) m/z: 497([M+H]+)、519([M+Na]+)、 (ESI neg.) m/z: 495([M-H]-)
【００９５】
参考例３
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−アミノベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル
【００９６】
【化１０】
【００９７】
（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−［（３−ニトロベンジル）オキシ］アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.32g)をメタノール(66mL)に溶解し、５％パラジウム−炭素(66mg)を加え、反応系内を水素置換し水素雰囲気下、室温で５０分撹拌した。反応系内を窒素置換した後、５％パラジウム−炭素をセライトを用いてろ別し、ろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：クロロホルム：アセトン＝１０：１０：１）で精製し、淡黄色固体として表題化合物(1.14g)を得た。
MS(ESI pos.) m/z: 489([M+Na]+)
【実施例１】
【００９８】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛［３−（｛［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸の合成（化合物１）
【００９９】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−アミノベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(300mg)をクロロホルム(3mL)に溶解し、窒素雰囲気下、イソシアン酸２，４−ジクロロフェニル (180mg)を加え、室温で１晩撹拌した。反応液をそのままシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１〜６：１）で精製し、無色固体として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（｛［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(407mg)を得た。
【０１００】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（｛［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(384mg)を４ｍｏｌ／Ｌ塩化水素−１，４−ジオキサン(7.5mL)に溶解し、室温で１日撹拌した後、反応液を減圧下濃縮した。残渣に水を加え、減圧下濃縮することを３回繰り返した。再度、残渣に水を加え、粉末をろ取、水洗いし、無色粉末として表題化合物(252mg)を得た。
【０１０１】
同様にして、下記表１−１〜表１−３に示す化合物２〜化合物２３を得た。
【実施例２】
【０１０２】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛［３−（｛［メチル（フェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸の合成（化合物２４）
【０１０３】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−アミノベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(159mg)のクロロホルム(1mL)溶液に、トリエチルアミン(0.1mL)を加え、氷冷下クロロギ酸トリクロロメチル(30μL)を加えた後室温まで昇温し３０分撹拌した。反応液を再び氷冷し、Ｎ−メチルアニリン(70μL)を加えた後室温まで昇温し３０分撹拌した。反応液をクロロホルムで希釈し、０．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸、水、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製後、ＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：クロロホルム：アセトン＝４０：４０：１）で精製し、淡黄色アモルファスとして（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（｛［メチル（フェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(153mg)を得た。
【０１０４】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（｛［メチル（フェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(145mg)を用いて実施例１−（２）と同様にして褐色粉末として表題化合物（87mg）を得た。
【０１０５】
同様にして、下記表１−３に示す化合物２５を得た。
【実施例３】
【０１０６】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−（｛３−［（フェニルスルホニル）アミノ］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸の合成（化合物２６）
【０１０７】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−アミノベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(200mg)をクロロホルム(2mL)に溶解し、氷冷下、ピリジン(40μL)及びベンゼンスルホニルクロリド(60μL)を加え、氷冷下１５分、室温で２時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、０．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸、水、炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１〜４：１）で精製し、無色アモルファスとして（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［（フェニルスルホニル）アミノ］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(214mg)を得た。
【０１０８】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［（フェニルスルホニル）アミノ］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(175mg)を用いて、実施例１−（２）と同様にして無色粉末として表題化合物(79mg)を得た。
【０１０９】
同様にして、下記表１−３に示す化合物２７を得た。
【実施例４】
【０１１０】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝ベンジル）オキシ］アスパラギン酸の合成（化合物２８）
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−アミノベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(200mg)をクロロホルム(2mL)に溶解し、氷冷下、ピリジン(50μL)及びクロロギ酸ベンジル(80μL)を加え、氷冷下１５分、室温で５時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、０．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸、水、炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝２０：１〜１０：１）で精製し、無色アモルファスとして（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−［（３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝ベンジル）オキシ］アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(245mg)を得た。
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−［（３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝ベンジル）オキシ］アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(225mg)を用いて、実施例１−（２）と同様にして無色粉末として表題化合物(125mg)を得た。
【実施例５】
【０１１１】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛［３−（ベンジルオキシ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸の合成（化合物２９）
【０１１２】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(500mg)、３−ベンジルオキシベンジルブロミド(767mg)及び炭酸カリウム(477mg)を用いて参考例２と同様にして、無色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（ベンジルオキシ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(570mg)を得た。
（２）（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（ベンジルオキシ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(580mg)を用いて実施例１−（２）と同様にして、無色粉末として表題化合物(173mg)を得た。
【実施例６】
【０１１３】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−（｛３−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸の合成（化合物３０）
【０１１４】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.1g)、３−ブロモベンジルブロミド(1.5g)及び炭酸カリウム(1.0g)を用いて参考例２と同様にして、無色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−ブロモベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.14g)を得た。
【０１１５】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−ブロモベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(981mg)、スチレン(0.26mL)、酢酸パラジウム（ＩＩ）(21mg)、トリ−ｏ−トリルホスフィン(39mg)及びトリエチルアミン(0.5mL)のアセトニトリル(3.9mL)懸濁液を１００℃にて撹拌しながら１５分間マイクロウェーブを照射した。反応液にさらに酢酸パラジウム（ＩＩ）(21mg)及びトリ−ｏ−トリルホスフィン(39mg)を加え、１００℃にて撹拌しながら３０分間マイクロウェーブを照射した。不溶物をセライトを用いてろ別し、ろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：アセトン＝１０：１）で精製し、無色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(945mg)を得た。
【０１１６】
（３）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(450mg) を用いて実施例１−（２）と同様にして褐色粉末として表題化合物(142mg)を得た。
【実施例７】
【０１１７】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−（｛３−［（Ｅ）−２−フェニルエチル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸の合成（化合物３１）
【０１１８】
（１）実施例６−（２）で得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(396mg)をテトラヒドロフラン(2.5mL)及びｔｅｒｔ−ブチルアルコール(2.5mL)の混合溶媒に溶解し、クロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（Ｉ）(20mg)を加え、水素雰囲気下７日間室温で撹拌した。反応液をセライトを通し、ろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製し、無色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［−２−フェニルエチル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(337mg)を得た。
【０１１９】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［−２−フェニルエチル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(337mg)を用いて実施例１−（２）と同様にして褐色粉末として表題化合物(82mg)を得た。
【実施例８】
【０１２０】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛３−［（アニリノカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸の合成（化合物３２）
【０１２１】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.1g)、３−（ブロモメチル）安息香酸メチル(1.4g)及び炭酸カリウム(1.0g)を用いて参考例２と同様にして、無色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（メトキシカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.31g)を得た。
【０１２２】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（メトキシカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.23g)の１，４−ジオキサン溶液(12mL)に水(1.3mL)及び２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液(1.3mL)を加え、室温で２２時間撹拌した。反応液に０．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加え撹拌した後、飽和塩化ナトリウム水溶液にあけ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝２：１〜１：１）で精製し、無色アモルファスとして（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（ヒドロキシカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(0.589g)を得た。
【０１２３】
（３）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（ヒドロキシカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(100mg)のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(1mL)溶液にアニリン(0.06mL)、１−（３，３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩(116mg)及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール１水和物(82mg)を加え、室温で１４時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層をあわせて飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水及び飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、薄褐色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛３−［（アニリノカルボニル）ベンジル］オキシ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの粗生成物(160mg)を得た。（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（ヒドロキシカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(150mg)を用いて同様にして得られた（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛３−［（アニリノカルボニル）ベンジル］オキシ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの粗生成物(220mg)と先に得られた粗生成物(160mg)を合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：クロロホルム：酢酸エチル＝７：７：１〜４：４：１）で精製し、無色アモルファスとして（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛３−［（アニリノカルボニル）ベンジル］オキシ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(255mg)を得た。
【０１２４】
（４）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛３−［（アニリノカルボニル）ベンジル］オキシ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(250mg)を用いて実施例１−（２）と同様にして無色粉末として表題化合物(112mg)を得た。
【０１２５】
下記に実施例で得た化合物を表１−１〜表１−４に示す。なお、表の構造式中＊＊は（２Ｓ，３Ｓ）体及び（２Ｒ，３Ｒ）体の混合物を示す。
【０１２６】
【表１−１】
【０１２７】
【表１−２】
【０１２８】
【表１−３】
【０１２９】
【表１−４】
【０１３０】
試験例
グルタミン酸取り込み阻害試験
グルタミン酸取り込み阻害試験はMol. Pharmacol., 53, 195(1998)に記載された方法に従って行った。試験化合物として化合物1及び化合物2、比較薬剤としてWO03/000698号第３４ページ記載のCF3−BzA−TBOAを検体として用いた。
【０１３１】
Ｙ７９細胞
Ｙ７９細胞はこれまでの報告より（J. Neurochem., 70, 993(1998))、EAAT2を発現しており、さらにＹ７９細胞によるグルタミン酸の取り込みはそのほとんどがEAAT2を介していることが知られている。よってＹ７９細胞を本試験に用いた。
【０１３２】
Ｙ７９細胞は理化学研究所細胞バンク（埼玉県、日本）より購入し、１０％仔ウシ血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地（ギブコ社製）中にて、３７℃、５％二酸化炭素のインキュベーターで維持した。Ｙ７９細胞は１０００回転/分、５分遠心により回収し、グルコースを含むリン酸緩衝液（+）（137ｍＭ ＮａＣｌ、2.7ｍＭ ＫＣｌ、8.1ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4、1.5ｍＭ ＫＨ2ＰＯ4、1ｍＭ ＭｇＣｌ2、1ｍＭ ＣａＣｌ2、10ｍＭ Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｅ、ｐＨ7.4）に３×１０6個／ｍＬとなるように懸濁してグルタミン酸取り込み阻害試験に使用した。
【０１３３】
グルタミン酸取り込み阻害試験
試験にはＹ７９細胞を用いた。細胞液は９６ウェルMULTISCREEN PLATE （ミリポア社製）に１００μＬ／ウェルとなるように分注した。被検体は最終濃度の１００倍となるようにジメチルスルホキシドに溶解し、グルコースを含むリン酸緩衝液（+）にてさらに２５倍に希釈した後、上記プレートに５０μＬ／ウェル加えた。３７℃、５％二酸化炭素のインキュベーターで１０分間インキュベーションして検体と細胞を反応させた後、８μＭ [１４C]グルタミン酸を５０μＬ／ウェル加えて（最終濃度２μＭグルタミン酸）取り込みを開始した。取り込みは３７℃、５％二酸化炭素のインキュベーターで２０分もしくは５０分間行った。ハーベストにより反応液を除去して取り込みを停止させ、氷冷グルコースを含むリン酸緩衝液（+）で２回洗浄した。１００μＬ／ウェル １Ｍ ＮａＯＨを加えて細胞を溶解させ、１５０μＬ／ウェルのシンチレーターを加えてマイクロベータにて放射活性を測定した。１０ｍＭグルタミン酸を作用させたときの放射活性を非特異的な放射活性としてコントロール値から差し引き、その値を１００％として示した。化合物の阻害活性は各濃度での測定値をコントロールとの割合で示した。５０％ 阻害活性の認められた時の濃度を IC50 値として示した。Ｙ７９細胞を用いたグルタミン酸取り込み阻害試験結果を下記表２に示した。
【０１３４】
【表２】
【０１３５】
本発明の化合物は、比較薬剤より、グルタミン酸取り込み阻害活性の増強が認められ、優れたEAAT2阻害活性が確認された。
【産業上の利用可能性】
【０１３６】
本発明の化合物は、老人性あるいはアルツハイマーによる記憶障害、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部外傷等の神経変性疾患、また統合失調症、不安及びその関連疾患、双極性障害、単極性障害、大うつ病等の精神医学的障害、及び神経因性疼痛等の慢性疼痛の治療薬及び予防薬として利用できる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、興奮性アミノ酸輸送体のグルタミン酸取り込み活性の抑制作用を有するアスパラギン酸誘導体に関する。さらに詳しくは、老人性あるいはアルツハイマーによる記憶障害、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部外傷等の神経変性疾患、また統合失調症、不安及びその関連疾患、双極性障害、単極性障害、大うつ病等の精神医学的障害、及び神経因性疼痛等の慢性疼痛の治療及び予防に有効なアスパラギン酸誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
脳内の興奮性伝達物質として知られるグルタミン酸は、シナプス間の神経伝達を介在しているが、細胞外に代謝経路はなく興奮性アミノ酸輸送体（Excitatory Amino Acid Transporter：EAAT）により細胞内へ取り込まれる（非特許文献１参照）。また、EAATにはこれまで５種類のサブタイプがクローニングされているが、脳内大脳皮質等でグルタミン酸調節に関与しているのは主としてEAAT2と考えられている。
【０００３】
これまで、EAAT2と種々の疾患との関連が示唆されている。虚血時等にはEAATの逆行性輸送により大量のグルタミン酸がグリアより遊離され、神経細胞死を惹起することが示唆されている（非特許文献２参照）。実験動物で虚血により惹起されるグルタミン酸遊離は、EAAT2阻害薬で拮抗されることも報告されている（非特許文献３参照）。
【０００４】
また、細胞外グルタミン酸濃度を上昇させ、シナプス伝達効果を高めることにより記憶障害を改善することが考えられる（非特許文献４参照）。
【０００５】
精神医学的障害の一つである統合失調症は、グルタミン酸機能の低下がその一因とされている。その治療薬の作用機序の一つには、EAAT2を介した作用が報告されている（非特許文献５参照）。また、不安症、うつ病等もグルタミン酸との関連が示唆されており、EAATの役割が推測される。
【０００６】
グルタミン酸は、脊髄において痛覚伝達物質として重要な役割を担っている。また、疼痛反応発現にEAATが関与している可能性が示唆されており、EAAT2阻害により疼痛反応が軽減されることも報告されている（非特許文献６参照）。
【０００７】
本発明は、老人性あるいはアルツハイマーによる記憶障害、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部外傷等の神経変性疾患、また統合失調症、不安及びその関連疾患、双極性障害、単極性障害、大うつ病等の精神医学的障害、及び神経因性疼痛等の慢性疼痛の治療及び予防効果を有する薬物であって、EAAT2に抑制作用を有する薬物を提供することを目的とする。
【０００８】
また、EAAT2阻害剤として、特許文献１及び特許文献２には３−ヒドロキシアスパラギン酸誘導体が開示されているが、いずれの特許文献にも本願記載の化合物の開示はない。
【０００９】
【特許文献１】ＥＰ０８４４２３４
【特許文献２】ＷＯ０３／０００６９８
【非特許文献１】TiPS, 11, 462 (1990)
【非特許文献２】Neuron, 11, 401 (1993)
【非特許文献３】Stroke, 30, 433 (1999)
【非特許文献４】Nature, 319, 774 (1986)
【非特許文献５】Neurosci. Lett., 347, 81 (2003)
【非特許文献６】Neuroscience, 116, 81 (2003)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明の目的は、新規なアスパラギン酸誘導体、さらに詳しくは、興奮性アミノ酸輸送体のグルタミン酸取り込み活性を抑制し、老人性あるいはアルツハイマーによる記憶障害、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部外傷等の神経変性疾患、また統合失調症、不安及びその関連疾患、双極性障害、単極性障害、大うつ病等の精神医学的障害、及び神経因性疼痛等の慢性疼痛の治療及び予防に有効なアスパラギン酸誘導体を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは上記目的のため鋭意研究を行った結果、ある種のアスパラギン酸誘導体が興奮性アミノ酸輸送体のグルタミン酸取り込み活性を強く抑制する作用を有していることを見出し、本発明を完成した。
すなわち本発明は、式（Ｉ）
【００１２】
【化１】
【００１３】
（式中、Ｗは式−Ｗ１−Ｗ２−で表される基(式中、Ｗ１は酸素原子、硫黄原子、メチレン、モノフルオロメチレン、ジフロロメチレン又は式−ＮＲ１−で表される基（式中、Ｒ１は水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示す。）を示し、Ｗ２は単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示す。)を示し、
Ｙは単結合、C1〜C6のアルキレン、置換されたC1〜C6のアルキレン、
式ｂ−Ｙ１−ＣＯ−ＮＲ２−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＳＯ2−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−ＮＲ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ２−Ｏ−Ｙ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−ＣＲ６＝ＣＲ７−Ｙ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−Ｃ≡Ｃ−Ｙ５−ａで表される基又は式ｂ−Ｙ１−ＮＲ３−ＣＯ−ａで表される基（式中、Ｙ１は単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｙ２及びＹ３は、同一又は異なって、単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｙ４及びＹ５は、同一又は異なって、単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｒ２はC1〜C6のアルキル基又は置換されたC1〜C6のアルキル基を示し、Ｒ３は水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示し、Ｒ４及びＲ５は、同一又は異なって、水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示すか、Ｒ４及びＲ５は一緒になって環構造を示し、Ｒ６及びＲ７は、同一又は異なって、水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキル基を示し、Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、ａ及びｂはそれぞれＣｙｃＡ及びＣｙｃＢにおけるＹの結合方向を示す。）を示し、
ＣｙｃＡ及びＣｙｃＢは、同一又は異なって、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、飽和複素環又は置換された飽和複素環を示す。）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物である。
【００１４】
好ましくは、Ｗが式−Ｏ−ＣＨ2−で表される基を示し、
ＹがC1〜C6のアルキレン、式ｂ−Ｙ１−ＳＯ2−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−ＮＲ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ２−Ｏ−Ｙ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−ＣＲ６＝ＣＲ７−Ｙ５−ａで表される基又は式ｂ−Ｙ１−ＮＲ３−ＣＯ−ａで表される基（式中、Ｙ１〜Ｙ５、Ｒ３〜Ｒ７、ａ及びｂは前記と同じである。）を示し、
ＣｙｃＡ及びＣｙｃＢが、同一又は異なって、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールである式（Ｉ）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物である。
【００１５】
さらに好ましくは、Ｙが式ｂ−ＣＨ2−ＣＨ2−ａ、式ｂ−ＳＯ2−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＭｅ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＣＨ2−Ｏ−ａ、式ｂ−ＣＨ＝ＣＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＯ−ａを示し、
ＣｙｃＡがアリールであり、ＣｙｃＢがアリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールである式（Ｉ）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物である。
【００１６】
また、より具体的には式（ＩＩ）
【００１７】
【化２】
【００１８】
（式中、ＣｙｃＢはアリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールを示す。）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物である。
【発明の効果】
【００１９】
本発明の化合物は、グルタミン酸取り込み阻害活性の増強が認められ、優れたEAAT2阻害活性が確認された。従って、本発明の化合物は、老人性あるいはアルツハイマーによる記憶障害、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部外傷等の神経変性疾患、また統合失調症、不安及びその関連疾患、双極性障害、単極性障害、大うつ病等の精神医学的障害、及び神経因性疼痛等の慢性疼痛の治療及び予防に有効である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
本発明において、アリールとは、例えば、フェニル又はナフチルである。
【００２１】
置換されたアリール基とは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルキル、置換されたC1〜C6のアルキル、C2〜C6のアルケニル、置換されたC2〜C6のアルケニル、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、C1〜C6のアルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環、アリールオキシ及びヘテロアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたフェニル基又はナフチル基である。
【００２２】
ヘテロアリールとは、例えば、ピリジル、ピロリル、フリル、キノリル、シンノリル、ピリミジル、ピラゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、イミダゾリル、チエニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、ベンゾジオキサニル、ベンゾモルホニル、ベンゾフラニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾピラニル、イソキノリル、ナフチリジル、キノキサリル、キナゾリニル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、インドリル、カルバゾリジル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル又はベンゾイソオキサゾリルである。
【００２３】
置換されたヘテロアリールとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルキル、置換されたC1〜C6のアルキル、C2〜C6のアルケニル、置換されたC2〜C6のアルケニル、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、C1〜C6のアルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環、アリールオキシ及びヘテロアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたヘテロアリールである。
【００２４】
シクロアルキルとは、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチルである。
【００２５】
置換されたシクロアルキルとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルキル、置換されたC1〜C6のアルキル、C2〜C6のアルケニル、置換されたC2〜C6のアルケニル、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたシクロアルキルである。
【００２６】
飽和複素環とは、例えば、アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノ又はテトラヒドロフリルである。
【００２７】
置換された飽和複素環とは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルキル、置換されたC1〜C6のアルキル、C2〜C6のアルケニル、置換されたC2〜C6のアルケニル、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換された飽和複素環である。
【００２８】
C1〜C6のアルキルとは、C1〜C6の直鎖又は分枝状のアルキルである。例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ペンチル又はヘキシルである。
【００２９】
置換されたC1〜C6のアルキルとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたC1〜C6の直鎖状又は分枝状のアルキルである。
【００３０】
C1〜C6のアルキレンとは、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン又はヘキシレンである。
【００３１】
置換されたC1〜C6のアルキレンとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルキル、置換されたC1〜C6のアルキル、C2〜C6のアルケニル、置換されたC2〜C6のアルケニル、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたC1〜C6のアルキレンである。
【００３２】
ハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子であり、好ましくはフッ素原子、塩素原子又は臭素原子である。
【００３３】
C2〜C6のアルケニルとは、C2〜C6の直鎖又は分枝状のアルケニルである。例えば、ビニル、アリル、プロペニル、ブテニル、イソブテニル、ペンテニル又はヘキセニルである。
【００３４】
置換されたC2〜C6のアルケニルとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシからなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたC2〜C6の直鎖又は分枝状のアルケニルである。
【００３５】
C1〜C6のアルコキシとは、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、tert−ブトキシ、シクロプロピルメトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ又はシクロヘキシルオキシである。
【００３６】
置換されたC1〜C6のアルコキシとは、例えば、「ハロゲン原子、C1〜C6のアルコキシ、置換されたC1〜C6のアルコキシ、C1〜C6のアルキルチオ、置換されたC1〜C6のアルキルチオ、アミノ、置換されたアミノ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、アシル、オキソ、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、飽和複素環及びアリールオキシ」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたC1〜C6のアルコキシである。
【００３７】
C1〜C6のアルキルチオとは、C1〜C6の直鎖又は分枝状のアルキルチオである。例えば、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、イソブチルチオ、tert−ブチルチオ、ペンチルチオ又はヘキシルチオである。
【００３８】
置換されたC1〜C6のアルキルチオとは、例えば、「ハロゲン原子、ヒドロキシ、C1〜C6のアルコキシ、C3〜C8のシクロアルキル、C2〜C8のアルコキシカルボニル、置換されたアミノ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル及び飽和複素環」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたC1〜C6のアルキルチオである。
【００３９】
置換されたアミノとは、例えば、「C1〜C6のアルキル、C2〜C10のアルコキシカルボニル、C1〜C10のアミノカルボニル、C1〜C6アルキルスルホニル、アリールスルホニル及びC1〜C10アシル」からなる群から選ばれる一つ以上の基で置換されたアミノである。
【００４０】
C2〜C10のアルコキシカルボニルとは、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、tert−ブトキシカルボニル、ペンチルオキシカルボニル、ヘキシルオキシカルボニル又はベンジルオキシカルボニルである。
【００４１】
C1〜C10のアミノカルボニルとは、例えば、カルバモイル、メチルアミノカルボニル、ベンジルアミノカルボニル又はアニリノカルボニルである。
【００４２】
アシルとは、例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル、シクロヘキサンカルボニル、ベンゾイル、ピコリニル又はニコチニルである。
【００４３】
アリールオキシとは、前記「アリール」と酸素原子が結合した基であり、例えば、フェノキシである。
【００４４】
ヘテロアリールオキシとは、前記「ヘテロアリール」と酸素原子が結合した基であり、例えば、ピリジルオキシである。
【００４５】
C1〜C6アルキルスルホニルとは、例えば、メタンスルホニル又はエタンスルホニルである。
【００４６】
アリールスルホニルとは、例えば、フェニルスルホニル又はトルエンスルホニルである。
【００４７】
本発明において、医薬上許容される塩とは、例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、フマール酸、乳酸、安息香酸、リンゴ酸、ニコチン酸、シュウ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２-ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸又は硫酸等との塩、又は、トリメチルアミン、メチルアミン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン等との塩である。
【００４８】
本発明は、下記に示した反応スキーム１〜５に示した工程により実施することができる。また各反応スキーム中、ＣｙｃＡ、ＣｙｃＢ及びＹは前記と同意義である。
【００４９】
反応スキーム1
反応スキーム中、ＰＧ１はアミノ基の保護基であり、例としてフルオレニルオキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、tert-ブトキシカルボニル基、トリチル基、ｏ−ニトロベンゼンスルフェニル基、ＰＧ２及びＰＧ３はカルボン酸の保護基であり、例としてメチル基、エチル基、tert-ブチル基等があげられる。また、Ｌ１は臭素原子等のハロゲン原子、メタンスルホン酸エステル等のスルホン酸エステル及びトリクロロアミデートといった脱離基となり得る基を示す。
【００５０】
【化３】
【００５１】
工程１：式（１）で表される３−ヒドロキシアスパラギン酸誘導体の水酸基を式（２）で表される化合物を用いた置換反応により式（３）で表される化合物を得ることができる。例えば、式（２）で表される化合物のＬ１が塩素原子、臭素原子等のハロゲン原子やメタンスルホン酸エステル等のスルホン酸エステルといった脱離基の場合、塩基を用いた置換反応を行うことができる。塩基として水素化ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、ｎ−ブチルリチウム等を用い、溶媒としては、反応に関与しないアセトン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、トルエン等を用いることができる。この際、添加剤を用いて反応することができ、添加剤としてはヨウ化ナトリウム、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムヨージド等を用いることができる。反応温度は−７８℃〜還流温度で得ることができる。また例えば、式（２）で表される化合物のＬ１がトリクロロアセトイミデートの場合、酸を用いた置換反応を行うことができる。酸としてはトリフルオロメタンスルホン酸、カンファースルホン酸、ピリジウムｐ−トルエンスルホン酸、過塩素酸トリチル、三フッ化ホウ素等を用い、溶媒としては、反応に関与しないジエチルエーテル、ジオキサン、ジクロロメタン、ヘキサン等を用いることができる。反応温度は−２０℃〜還流温度で得ることができる。
【００５２】
工程２：式（３）で表される化合物のＰＧ１、ＰＧ２及びＰＧ３を別々にあるいは同時に脱保護し、式（４）で表される化合物を得ることができる。ＰＧ１の脱保護の方法としては、例えばＰＧ１が塩基で脱保護されるフルオレニルオキシカルボニル基等の保護基の場合は、ジエチルアミン、ピペリジン、アンモニア、水酸化ナトリウム、炭酸カリウム等の塩基を用いて脱保護することができる。これらの塩基は、単独で、あるいは溶媒に希釈又は懸濁してして用いることができる。この際、溶媒としては水、エタノール、メタノール、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等を単独あるいは２種以上混合して用いることができる。反応温度は0〜100℃で行うことができる。
【００５３】
また、例えば、ＰＧ１がアリルオキシカルボニル基等の金属触媒により脱保護される基の場合は、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム等を触媒又は試薬として用いることにより脱保護することができる。この際、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン等の反応に関与しない溶媒中で行うことができる。反応温度は0〜100℃で行うことができる。
【００５４】
さらに例えば、ＰＧ１がtert-ブトキシカルボニル基、トリチル基、ｏ−ニトロベンゼンスルフェニル基等の酸で脱保護される基の場合は、塩酸、硫酸、トリフルオロ酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸等の酸を用い、脱保護することができる。反応溶媒としては、例えばエタノール、メタノール、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、酢酸エチル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等があげられる。反応温度は−50〜50℃で行うことができる。
【００５５】
また、ＰＧ２及びＰＧ３の脱保護の方法は、例えば、ＰＧ２及びＰＧ３がメチル、エチル基等の保護基の場合は、塩基を用いた加水分解による脱保護ができる。水酸化ナトリウム、炭酸カリウム等の塩基を用いて脱保護することができる。反応溶媒は水あるいは水と有機溶媒の混合溶媒中で行うことができ、有機溶媒としてはメタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、１,４−ジオキサン等を用いることができる。反応温度は0〜100℃で行うことができる。
【００５６】
また、例えば、ＰＧ２及びＰＧ３がtert-ブチル基等の酸で脱保護される基の場合は、塩酸、硫酸、トリフルオロ酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸等の酸を用い、脱保護することができる。反応溶媒としては、例えばエタノール、メタノール、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、１,４−ジオキサン等があげられる。反応温度は−50〜100℃で行うことができる。
【００５７】
この脱保護については、上記以外にもPROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS, THEODORA W. GREENE and PETER G. M. WU TS著に記載の方法を用いることができる。
【００５８】
反応スキーム２
反応スキーム中、ＰＧ１、ＰＧ２、ＰＧ３及びＬ１は前記と同意義である。Ｙ’は−Ｙ１−ＳＯ2−、−Ｙ１−Ｏ−ＣＯ−、−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−を示し、Ｙ１、Ｒ４及びＺは前記と同意義である。
【００５９】
【化４】
【００６０】
工程１：式（１）で表される３−ヒドロキシアスパラギン酸誘導体の水酸基を式（５）で表される化合物を用いた置換反応により式（６）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程１）と同様の方法で行うことができる。
【００６１】
工程２：式（６）で表される化合物のニトロ基をアミノ基に還元し、式（７）で表される化合物を得ることができる。例えば金属触媒を用いた接触水素添加反応で行うことができる。金属触媒としてはパラジウム−カーボン、パラジウム−炭酸カルシウムといったパラジウム触媒以外にも白金触媒、ニッケル触媒等を用いることができる。溶媒としてはエタノール、メタノール、テトラヒドロフラン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒があげられる。反応温度は0〜50℃で行うことができる。この反応は水素ガスを用いて行うこともできるし、ギ酸−ギ酸アンモニウム、水素化ほう素ナトリウム等の試薬を用いることもできる。また、例えば鉄、亜鉛等の金属を用いた還元反応で行うことができる。溶媒としてはメタノール、エタノール、プロパノール等を用い、反応温度は0〜100℃で行うことができる。この反応は添加物として塩化アンモニウム、塩酸等を用いることができる。この還元反応については上記以外にも選択的にニトロ基をアミノ基に還元できる方法であれば特に限定されない。たとえば塩化すず、塩化鉄等を用いた還元法等があげられる。
【００６２】
工程３：式（７）で表される化合物から縮合反応によりスルホンアミド体、カーバメート体、ウレア体又はチオウレア体等の式（８）で表される化合物を得ることができる。
ここで、カーバメート体を得る反応は、例えば、クロロ炭酸エステルや二炭酸ジエステル等を用い、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒中で行うことができる。この際、塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等のアミン類、炭酸カリウム等の無機塩基があげられる。これらの反応は、−50〜100℃で行うことができる。
【００６３】
また、ウレア体を得る反応は、イソシアネート等を用い、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒中で行うことができる。これらの反応は、−50〜100℃で行うことができる。また、ウレア体を得る反応では式（８）で表される化合物をイソシアネート化した後に相当するアミンを用いてウレア体を得ることができる。イソシアネート化ではクロロギ酸トリクロロメチルや炭酸ビス（トリクロロメチル）等を用い、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒中で行うことができる。この際、塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン等のアミン類があげられる。これらの反応は、−50〜100℃で行うことができる。
【００６４】
また、チオウレア体を得る反応は、例えば、チオイソシアネート等を用い、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒中で行うことができる。これらの反応は、−50〜100℃で行うことができる。
【００６５】
工程４：式（８）で表される化合物のＰＧ１、ＰＧ２及びＰＧ３を別々にあるいは同時に脱保護し、式（９）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程２）と同様の方法で行うことができる。
【００６６】
反応スキーム３
反応スキーム中、Ｒ６、Ｒ７、ＰＧ１、ＰＧ２、ＰＧ３及びＬ１は前記と同意義である。Ｌ２は臭素原子等の脱離基となり得る基、Ｌ３は水素原子又はほう素、マグネシウム、すず等の典型金属原子を示す。
【００６７】
【化５】
【００６８】
工程１：式（１）で表される３−ヒドロキシアスパラギン酸誘導体の水酸基を式（１０）で表される化合物を用いた置換反応により、式（１１）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程１）と同様の方法で行うことができる。
【００６９】
工程２： 式（１１）で表される化合物と式（１２）で表される化合物から、式（１３）で表される化合物を得ることができる。この際、金属触媒としてパラジウム等の遷移金属試薬を用い、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等の溶媒中で行うことができる。塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン等のアミン類、炭酸カリウム等の無機塩基があげられる。また、添加剤としてトリフェニルホスフィン等の遷移金属の配位子となり得る試薬を用いることができる。これらの反応は、−50〜100℃で行うことができる。
【００７０】
工程３：式（１３）で表される化合物のＰＧ１、ＰＧ２及びＰＧ３を別々にあるいは同時に脱保護し、式（１４）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程２）と同様の方法で行うことができる。
【００７１】
反応スキーム４
反応スキーム中、ＰＧ１、ＰＧ２及びＰＧ３は前記と同意義である。
【００７２】
【化６】
【００７３】
工程１：式（１３）で表される化合物の二重結合を還元し、式（１５）で表される化合物を得ることができる。例えば金属触媒を用いた接触水素添加反応で行うことができる。金属触媒としてはクロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（Ｉ）といったロジウム触媒以外にもパラジウム−カーボンといったパラジウム触媒、白金触媒、ニッケル触媒等を用いることができる。溶媒としてはエタノール、メタノール、テトラヒドロフラン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒があげられる。反応温度は0〜50℃で行うことができる。この反応は水素ガスを用いて行うこともできるし、ギ酸−ギ酸アンモニウム等の試薬を用いることもできる。
【００７４】
工程２：式（１５）で表される化合物のＰＧ１、ＰＧ２及びＰＧ３を別々にあるいは同時に脱保護し、式（１６）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程２）と同様の方法で行うことができる。
【００７５】
反応スキーム５
反応スキーム中、Ｒ３、ＰＧ１、ＰＧ２、ＰＧ３及びＬ１は前記と同意義である。ＰＧ４はＰＧ２及びＰＧ３とは選択的に脱保護できるカルボン酸の保護基を示し、例としてメチル基、エチル基、tert-ブチル基等があげられる。
【００７６】
【化７】
【００７７】
工程１：３−ヒドロキシアスパラギン酸誘導体（１）の水酸基を式（１７）で表される化合物を用いた置換反応により、式（１８）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程１）と同様の方法で行うことができる。
【００７８】
工程２：式（１８）で表される化合物のＰＧ４を脱保護し、式（１９）で表される化合物を得ることができる。例えば、保護基がメチル、エチル基等の保護基の場合は、塩基を用いた加水分解による脱保護ができる。水酸化ナトリウム、炭酸カリウム等の塩基を用いて脱保護することができる。反応溶媒は水あるいは水と有機溶媒の混合溶媒中で行うことができ、有機溶媒としてはメタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、１,４−ジオキサン等を用いることができる。反応温度は０〜100℃で行うことができる。
【００７９】
また、例えば、保護基がtert-ブチル基等の酸で脱保護される基の場合は、塩酸、硫酸、トリフルオロ酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸等の酸を用い、脱保護することができる。反応溶媒としては、例えばエタノール、メタノール、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、１,４−ジオキサン等があげられる。反応温度は−50〜100℃で行うことができる。
【００８０】
この脱保護については、上記以外にもPROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS, THEODORA W. GREENE and PETER G. M. WU TS著に記載の方法を用いることができる。
【００８１】
工程３：式（１９）で表される化合物と式（２０）で表される化合物の縮合反応を行い、式（２１）で表される化合物を得ることができる。この縮合反応は、例えば、脱水縮合剤を用いて反応することができる。脱水縮合剤には例えば１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、ジシクロヘキシルカルボジイミド、ジフェニルホスホリルアジド、カルボニルジイミダゾール等があげられ、必要に応じて１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、ヒドロキシスクシンイミド等の活性化剤を用いることができる。反応溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、酢酸エチル等があげられる。この際、塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等のアミン類、炭酸カリウム等の無機塩基があげられる。反応温度は−50〜50℃で行うことができる。
【００８２】
また、例えば、式（１９）で表される化合物とクロル炭酸エステル等から得られる混合酸無水物を用いてアミド化することができる。反応溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒があげられる。この際、塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等のアミン類、炭酸カリウム等の無機塩基があげられる。反応温度は−50〜50℃で行うことができる。
【００８３】
また、別の例として、式（１９）で表される化合物と塩化チオニル等から得られるカルボン酸クロリド等のカルボン酸ハライドを用いてアミド化することができる。反応溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、トルエン、酢酸エチル等の反応に関与しない溶媒があげられる。この際、塩基を用いて行うことができ、塩基の例としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等のアミン類、炭酸カリウム等の無機塩基があげられる。反応温度は−50〜50℃で行うことができる。
【００８４】
工程４：式（２１）で表される化合物のアミノ基の保護基（ＰＧ１）及びカルボン酸の保護基（ＰＧ２、ＰＧ３）を別々にあるいは同時に脱保護し、式（２２）で表される化合物を得ることができる。この反応は前述の方法（反応スキーム１−工程２）と同様の方法で行うことができる。
【００８５】
本発明のアスパラギン酸誘導体は、経口投与又は非経口投与される。成人を治療する場合、投与量は１回につき1〜1000mgであり、例えば、これを１日１〜数回投与するか、又は、１日１時間〜２４時間の範囲で静脈内に持続投与する。この投与量は、患者の年齢、体重及び症状によって適宜増減することができる。
【００８６】
経口投与する場合は、賦形剤、結合剤、滑沢剤、抗酸化剤、コーティング剤、界面活性剤、可塑剤、着色剤、矯味矯臭剤等を混合して、散剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤等の製剤として投与され、非経口投与する場合は、注射剤、点滴剤等の製剤として投与される。製剤化する際には、通常の製剤化の方法が使用できる。
【００８７】
次に、参考例、実施例及び試験例にて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００８８】
参考例１
（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【００８９】
【化８】
【００９０】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−ヒドロキシアスパラギン酸(8.49g)の１，４−ジオキサン(60mL)懸濁液に２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液(60mL)を室温で加えた後、氷冷下、二炭酸−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(124.4g)を加え、徐々に昇温し室温で１７．５時間撹拌した。１，４−ジオキサンを減圧下留去後、得られた水層を酢酸エチルで洗浄した。水層に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸(120mL)を加え、酢酸エチルで抽出した後、有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣にジイソプロピルエーテルを加え、生じた粉末をろ取、ジイソプロピルエーテル洗浄し、無色粉末として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸(8.2g)を得た。
【００９１】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸(8.05g)に１，１−ジ−ｔｅｒｔ−ブトキシトリメチルアミン(75mL)を加え、アルゴン雰囲気下、室温で２時間、６０℃で１時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮した後、酢酸エチルで希釈し、０．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸で洗浄した。水層を酢酸エチルで抽出した後、有機層を合わせ、水、炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝８：１）で精製し、無色固体として表題化合物(7.44g)を得た。
【００９２】
参考例２
（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−［（３−ニトロベンジル）オキシ］アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル
【００９３】
【化９】
【００９４】
（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.29g)をアセトン(36mL)に溶解し、３−ニトロベンジルブロミド(1.54g)及び炭酸カリウム(987mg)を加え、アルゴン雰囲気下、６６時間加熱還流した。反応液を室温まで冷却した後、不溶物をろ別し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈し、水及び飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：クロロホルム：アセトン＝３０：３０：１）で精製し、無色油状物として表題化合物 (1.33g)を得た。
MS(ESI pos.) m/z: 497([M+H]+)、519([M+Na]+)、 (ESI neg.) m/z: 495([M-H]-)
【００９５】
参考例３
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−アミノベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル
【００９６】
【化１０】
【００９７】
（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−［（３−ニトロベンジル）オキシ］アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.32g)をメタノール(66mL)に溶解し、５％パラジウム−炭素(66mg)を加え、反応系内を水素置換し水素雰囲気下、室温で５０分撹拌した。反応系内を窒素置換した後、５％パラジウム−炭素をセライトを用いてろ別し、ろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：クロロホルム：アセトン＝１０：１０：１）で精製し、淡黄色固体として表題化合物(1.14g)を得た。
MS(ESI pos.) m/z: 489([M+Na]+)
【実施例１】
【００９８】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛［３−（｛［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸の合成（化合物１）
【００９９】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−アミノベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(300mg)をクロロホルム(3mL)に溶解し、窒素雰囲気下、イソシアン酸２，４−ジクロロフェニル (180mg)を加え、室温で１晩撹拌した。反応液をそのままシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１〜６：１）で精製し、無色固体として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（｛［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(407mg)を得た。
【０１００】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（｛［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(384mg)を４ｍｏｌ／Ｌ塩化水素−１，４−ジオキサン(7.5mL)に溶解し、室温で１日撹拌した後、反応液を減圧下濃縮した。残渣に水を加え、減圧下濃縮することを３回繰り返した。再度、残渣に水を加え、粉末をろ取、水洗いし、無色粉末として表題化合物(252mg)を得た。
【０１０１】
同様にして、下記表１−１〜表１−３に示す化合物２〜化合物２３を得た。
【実施例２】
【０１０２】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛［３−（｛［メチル（フェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸の合成（化合物２４）
【０１０３】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−アミノベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(159mg)のクロロホルム(1mL)溶液に、トリエチルアミン(0.1mL)を加え、氷冷下クロロギ酸トリクロロメチル(30μL)を加えた後室温まで昇温し３０分撹拌した。反応液を再び氷冷し、Ｎ−メチルアニリン(70μL)を加えた後室温まで昇温し３０分撹拌した。反応液をクロロホルムで希釈し、０．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸、水、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製後、ＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：クロロホルム：アセトン＝４０：４０：１）で精製し、淡黄色アモルファスとして（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（｛［メチル（フェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(153mg)を得た。
【０１０４】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（｛［メチル（フェニル）アミノ］カルボニル｝アミノ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(145mg)を用いて実施例１−（２）と同様にして褐色粉末として表題化合物（87mg）を得た。
【０１０５】
同様にして、下記表１−３に示す化合物２５を得た。
【実施例３】
【０１０６】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−（｛３−［（フェニルスルホニル）アミノ］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸の合成（化合物２６）
【０１０７】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−アミノベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(200mg)をクロロホルム(2mL)に溶解し、氷冷下、ピリジン(40μL)及びベンゼンスルホニルクロリド(60μL)を加え、氷冷下１５分、室温で２時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、０．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸、水、炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１〜４：１）で精製し、無色アモルファスとして（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［（フェニルスルホニル）アミノ］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(214mg)を得た。
【０１０８】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［（フェニルスルホニル）アミノ］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(175mg)を用いて、実施例１−（２）と同様にして無色粉末として表題化合物(79mg)を得た。
【０１０９】
同様にして、下記表１−３に示す化合物２７を得た。
【実施例４】
【０１１０】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝ベンジル）オキシ］アスパラギン酸の合成（化合物２８）
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−アミノベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(200mg)をクロロホルム(2mL)に溶解し、氷冷下、ピリジン(50μL)及びクロロギ酸ベンジル(80μL)を加え、氷冷下１５分、室温で５時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、０．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸、水、炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝２０：１〜１０：１）で精製し、無色アモルファスとして（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−［（３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝ベンジル）オキシ］アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(245mg)を得た。
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−［（３−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝ベンジル）オキシ］アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(225mg)を用いて、実施例１−（２）と同様にして無色粉末として表題化合物(125mg)を得た。
【実施例５】
【０１１１】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛［３−（ベンジルオキシ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸の合成（化合物２９）
【０１１２】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(500mg)、３−ベンジルオキシベンジルブロミド(767mg)及び炭酸カリウム(477mg)を用いて参考例２と同様にして、無色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（ベンジルオキシ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(570mg)を得た。
（２）（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（ベンジルオキシ）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(580mg)を用いて実施例１−（２）と同様にして、無色粉末として表題化合物(173mg)を得た。
【実施例６】
【０１１３】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−（｛３−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸の合成（化合物３０）
【０１１４】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.1g)、３−ブロモベンジルブロミド(1.5g)及び炭酸カリウム(1.0g)を用いて参考例２と同様にして、無色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−ブロモベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.14g)を得た。
【０１１５】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−３−［（３−ブロモベンジル）オキシ］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(981mg)、スチレン(0.26mL)、酢酸パラジウム（ＩＩ）(21mg)、トリ−ｏ−トリルホスフィン(39mg)及びトリエチルアミン(0.5mL)のアセトニトリル(3.9mL)懸濁液を１００℃にて撹拌しながら１５分間マイクロウェーブを照射した。反応液にさらに酢酸パラジウム（ＩＩ）(21mg)及びトリ−ｏ−トリルホスフィン(39mg)を加え、１００℃にて撹拌しながら３０分間マイクロウェーブを照射した。不溶物をセライトを用いてろ別し、ろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：アセトン＝１０：１）で精製し、無色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(945mg)を得た。
【０１１６】
（３）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(450mg) を用いて実施例１−（２）と同様にして褐色粉末として表題化合物(142mg)を得た。
【実施例７】
【０１１７】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−（｛３−［（Ｅ）−２−フェニルエチル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸の合成（化合物３１）
【０１１８】
（１）実施例６−（２）で得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［（Ｅ）−２−フェニルビニル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(396mg)をテトラヒドロフラン(2.5mL)及びｔｅｒｔ−ブチルアルコール(2.5mL)の混合溶媒に溶解し、クロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（Ｉ）(20mg)を加え、水素雰囲気下７日間室温で撹拌した。反応液をセライトを通し、ろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製し、無色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［−２−フェニルエチル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(337mg)を得た。
【０１１９】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（｛３−［−２−フェニルエチル］ベンジル｝オキシ）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(337mg)を用いて実施例１−（２）と同様にして褐色粉末として表題化合物(82mg)を得た。
【実施例８】
【０１２０】
（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛３−［（アニリノカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸の合成（化合物３２）
【０１２１】
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシアスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.1g)、３−（ブロモメチル）安息香酸メチル(1.4g)及び炭酸カリウム(1.0g)を用いて参考例２と同様にして、無色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（メトキシカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.31g)を得た。
【０１２２】
（２）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（メトキシカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(1.23g)の１，４−ジオキサン溶液(12mL)に水(1.3mL)及び２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液(1.3mL)を加え、室温で２２時間撹拌した。反応液に０．５ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加え撹拌した後、飽和塩化ナトリウム水溶液にあけ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝２：１〜１：１）で精製し、無色アモルファスとして（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（ヒドロキシカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(0.589g)を得た。
【０１２３】
（３）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（ヒドロキシカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(100mg)のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(1mL)溶液にアニリン(0.06mL)、１−（３，３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩(116mg)及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール１水和物(82mg)を加え、室温で１４時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄した。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層をあわせて飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水及び飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ別後、ろ液を減圧下濃縮し、薄褐色油状物として（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛３−［（アニリノカルボニル）ベンジル］オキシ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの粗生成物(160mg)を得た。（２Ｓ，３Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−｛［３−（ヒドロキシカルボニル）ベンジル］オキシ｝アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(150mg)を用いて同様にして得られた（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛３−［（アニリノカルボニル）ベンジル］オキシ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルの粗生成物(220mg)と先に得られた粗生成物(160mg)を合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒；ヘキサン：クロロホルム：酢酸エチル＝７：７：１〜４：４：１）で精製し、無色アモルファスとして（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛３−［（アニリノカルボニル）ベンジル］オキシ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(255mg)を得た。
【０１２４】
（４）得られた（２Ｓ，３Ｓ）−３−｛３−［（アニリノカルボニル）ベンジル］オキシ｝−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル(250mg)を用いて実施例１−（２）と同様にして無色粉末として表題化合物(112mg)を得た。
【０１２５】
下記に実施例で得た化合物を表１−１〜表１−４に示す。なお、表の構造式中＊＊は（２Ｓ，３Ｓ）体及び（２Ｒ，３Ｒ）体の混合物を示す。
【０１２６】
【表１−１】
【０１２７】
【表１−２】
【０１２８】
【表１−３】
【０１２９】
【表１−４】
【０１３０】
試験例
グルタミン酸取り込み阻害試験
グルタミン酸取り込み阻害試験はMol. Pharmacol., 53, 195(1998)に記載された方法に従って行った。試験化合物として化合物1及び化合物2、比較薬剤としてWO03/000698号第３４ページ記載のCF3−BzA−TBOAを検体として用いた。
【０１３１】
Ｙ７９細胞
Ｙ７９細胞はこれまでの報告より（J. Neurochem., 70, 993(1998))、EAAT2を発現しており、さらにＹ７９細胞によるグルタミン酸の取り込みはそのほとんどがEAAT2を介していることが知られている。よってＹ７９細胞を本試験に用いた。
【０１３２】
Ｙ７９細胞は理化学研究所細胞バンク（埼玉県、日本）より購入し、１０％仔ウシ血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地（ギブコ社製）中にて、３７℃、５％二酸化炭素のインキュベーターで維持した。Ｙ７９細胞は１０００回転/分、５分遠心により回収し、グルコースを含むリン酸緩衝液（+）（137ｍＭ ＮａＣｌ、2.7ｍＭ ＫＣｌ、8.1ｍＭ Ｎａ2ＨＰＯ4、1.5ｍＭ ＫＨ2ＰＯ4、1ｍＭ ＭｇＣｌ2、1ｍＭ ＣａＣｌ2、10ｍＭ Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｅ、ｐＨ7.4）に３×１０6個／ｍＬとなるように懸濁してグルタミン酸取り込み阻害試験に使用した。
【０１３３】
グルタミン酸取り込み阻害試験
試験にはＹ７９細胞を用いた。細胞液は９６ウェルMULTISCREEN PLATE （ミリポア社製）に１００μＬ／ウェルとなるように分注した。被検体は最終濃度の１００倍となるようにジメチルスルホキシドに溶解し、グルコースを含むリン酸緩衝液（+）にてさらに２５倍に希釈した後、上記プレートに５０μＬ／ウェル加えた。３７℃、５％二酸化炭素のインキュベーターで１０分間インキュベーションして検体と細胞を反応させた後、８μＭ [１４C]グルタミン酸を５０μＬ／ウェル加えて（最終濃度２μＭグルタミン酸）取り込みを開始した。取り込みは３７℃、５％二酸化炭素のインキュベーターで２０分もしくは５０分間行った。ハーベストにより反応液を除去して取り込みを停止させ、氷冷グルコースを含むリン酸緩衝液（+）で２回洗浄した。１００μＬ／ウェル １Ｍ ＮａＯＨを加えて細胞を溶解させ、１５０μＬ／ウェルのシンチレーターを加えてマイクロベータにて放射活性を測定した。１０ｍＭグルタミン酸を作用させたときの放射活性を非特異的な放射活性としてコントロール値から差し引き、その値を１００％として示した。化合物の阻害活性は各濃度での測定値をコントロールとの割合で示した。５０％ 阻害活性の認められた時の濃度を IC50 値として示した。Ｙ７９細胞を用いたグルタミン酸取り込み阻害試験結果を下記表２に示した。
【０１３４】
【表２】
【０１３５】
本発明の化合物は、比較薬剤より、グルタミン酸取り込み阻害活性の増強が認められ、優れたEAAT2阻害活性が確認された。
【産業上の利用可能性】
【０１３６】
本発明の化合物は、老人性あるいはアルツハイマーによる記憶障害、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、筋硬直に伴う運動障害、脳虚血、脳不全、脊髄障害、頭部外傷等の神経変性疾患、また統合失調症、不安及びその関連疾患、双極性障害、単極性障害、大うつ病等の精神医学的障害、及び神経因性疼痛等の慢性疼痛の治療薬及び予防薬として利用できる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
（式中、Ｗは式−Ｗ１−Ｗ２−で表される基(式中、Ｗ１は酸素原子、硫黄原子、メチレン、モノフルオロメチレン、ジフロロメチレン又は式−ＮＲ１−で表される基（式中、Ｒ１は水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示す。）を示し、Ｗ２は単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示す。）を示し、
Ｙは単結合、C1〜C6のアルキレン、置換されたC1〜C6のアルキレン、
式ｂ−Ｙ１−ＣＯ−ＮＲ２−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＳＯ2−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−ＮＲ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ２−Ｏ−Ｙ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−ＣＲ６＝ＣＲ７−Ｙ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−Ｃ≡Ｃ−Ｙ５−ａで表される基又は式ｂ−Ｙ１−ＮＲ３−ＣＯ−ａで表される基（式中、Ｙ１は単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｙ２及びＹ３は、同一又は異なって、単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｙ４及びＹ５は、同一又は異なって、単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｒ２はC1〜C6のアルキル基又は置換されたC1〜C6のアルキル基を示し、Ｒ３は水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示し、Ｒ４及びＲ５は、同一又は異なって、水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示すか、Ｒ４及びＲ５は一緒になって環構造を示し、Ｒ６及びＲ７は、同一又は異なって、水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキル基を示し、Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、ａ及びｂはそれぞれＣｙｃＡ及びＣｙｃＢにおけるＹの結合方向を示す。）を示し、
ＣｙｃＡ及びＣｙｃＢは、同一又は異なって、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、飽和複素環又は置換された飽和複素環を示す。）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物。
【請求項２】
Ｗが式−Ｏ−ＣＨ2−で表される基を示し、
ＹがC1〜C6のアルキレン、式ｂ−Ｙ１−ＳＯ2−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−ＮＲ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ２−Ｏ−Ｙ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−ＣＲ６＝ＣＲ７−Ｙ５−ａで表される基又は式ｂ−Ｙ１−ＮＲ３−ＣＯ−ａで表される基（式中、Ｙ１〜Ｙ５、Ｒ３〜Ｒ７、ａ及びｂは前記と同じである。）を示し、
ＣｙｃＡ及びＣｙｃＢが、同一又は異なって、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールである請求項１記載のアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物。
【請求項３】
Ｙが式ｂ−ＣＨ2−ＣＨ2−ａ、式ｂ−ＳＯ2−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＭｅ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＣＨ2−Ｏ−ａ、式ｂ−ＣＨ＝ＣＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＯ−ａを示し、
ＣｙｃＡがアリールであり、ＣｙｃＢがアリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールである請求項２記載のアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物。
【請求項４】
式（ＩＩ）
【化２】
（式中、ＣｙｃＢはアリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールを示す。）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物。
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
（式中、Ｗは式−Ｗ１−Ｗ２−で表される基(式中、Ｗ１は酸素原子、硫黄原子、メチレン、モノフルオロメチレン、ジフロロメチレン又は式−ＮＲ１−で表される基（式中、Ｒ１は水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示す。）を示し、Ｗ２は単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示す。）を示し、
Ｙは単結合、C1〜C6のアルキレン、置換されたC1〜C6のアルキレン、
式ｂ−Ｙ１−ＣＯ−ＮＲ２−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＳＯ2−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−ＮＲ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ２−Ｏ−Ｙ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−ＣＲ６＝ＣＲ７−Ｙ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−Ｃ≡Ｃ−Ｙ５−ａで表される基又は式ｂ−Ｙ１−ＮＲ３−ＣＯ−ａで表される基（式中、Ｙ１は単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｙ２及びＹ３は、同一又は異なって、単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｙ４及びＹ５は、同一又は異なって、単結合、C1〜C6のアルキレン又は置換されたC1〜C6のアルキレンを示し、Ｒ２はC1〜C6のアルキル基又は置換されたC1〜C6のアルキル基を示し、Ｒ３は水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示し、Ｒ４及びＲ５は、同一又は異なって、水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキルを示すか、Ｒ４及びＲ５は一緒になって環構造を示し、Ｒ６及びＲ７は、同一又は異なって、水素原子、C1〜C6のアルキル又は置換されたC1〜C6のアルキル基を示し、Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、ａ及びｂはそれぞれＣｙｃＡ及びＣｙｃＢにおけるＹの結合方向を示す。）を示し、
ＣｙｃＡ及びＣｙｃＢは、同一又は異なって、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、飽和複素環又は置換された飽和複素環を示す。）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物。
【請求項２】
Ｗが式−Ｏ−ＣＨ2−で表される基を示し、
ＹがC1〜C6のアルキレン、式ｂ−Ｙ１−ＳＯ2−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ１−ＮＲ４−Ｃ（＝Ｚ）−ＮＲ５−ａで表される基、式ｂ−Ｙ２−Ｏ−Ｙ３−ａで表される基、式ｂ−Ｙ４−ＣＲ６＝ＣＲ７−Ｙ５−ａで表される基又は式ｂ−Ｙ１−ＮＲ３−ＣＯ−ａで表される基（式中、Ｙ１〜Ｙ５、Ｒ３〜Ｒ７、ａ及びｂは前記と同じである。）を示し、
ＣｙｃＡ及びＣｙｃＢが、同一又は異なって、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールである請求項１記載のアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物。
【請求項３】
Ｙが式ｂ−ＣＨ2−ＣＨ2−ａ、式ｂ−ＳＯ2−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＣＨ2−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＮＭｅ−ＣＯ−ＮＨ−ａ、式ｂ−ＣＨ2−Ｏ−ａ、式ｂ−ＣＨ＝ＣＨ−ａ、式ｂ−ＮＨ−ＣＯ−ａを示し、
ＣｙｃＡがアリールであり、ＣｙｃＢがアリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールである請求項２記載のアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物。
【請求項４】
式（ＩＩ）
【化２】
（式中、ＣｙｃＢはアリール、置換されたアリール、ヘテロアリール又は置換されたヘテロアリールを示す。）で表されるアスパラギン酸誘導体、その医学上許容される塩又はその水和物。
【公開番号】特開２００６−１５１９５４（Ｐ２００６−１５１９５４Ａ）
【公開日】平成１８年６月１５日（２００６．６．１５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−３０５７０４（Ｐ２００５−３０５７０４）
【出願日】平成１７年１０月２０日（２００５．１０．２０）
【出願人】（０００００２８１９）大正製薬株式会社 (437)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年６月１５日（２００６．６．１５）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年１０月２０日（２００５．１０．２０）
【出願人】（０００００２８１９）大正製薬株式会社 (437)
【Ｆターム（参考）】
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