本発明により、内皮細胞特異的プロモーター活性を示す単離されたポリヌクレオチド配列、新規のシス調節因子、及び異常な血管新生又は細胞増殖によって特徴付けられる弛緩の治療を可能にするそれらの使用方法が開示される。また、本発明により、アデノウイルスの血管形成内皮細胞における転写を指向させることができるシス調節因子に転写的に連結された条件付きで複製するアデノウイルスを含む単離されたポリヌクレオチドが開示される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
アデノウイルスの血管形成内皮細胞における転写を指向させることができるシス調節因子に転写的に連結された条件付きで複製するアデノウイルスを含む単離されたポリヌクレオチド。
【請求項２】
前記シス調節因子は、ＰＰＥ−１プロモーター、ＰＰＥ−１−３ｘプロモーター、ＴＩＥ−１プロモーター、ＴＩＥ−２プロモーター、エンドグリンプロモーター、フォンヴィレブランドプロモーター、ＫＤＲ／ｆｌｋ−１プロモーター、ＦＬＴ−１プロモーター、Ｅｇｒ−１プロモーター、ＩＣＡＭ−１プロモーター、ＶＣＡＭ−１プロモーター、ＰＥＣＡＭ−１プロモーター及び大動脈カルボキシペプチダーゼ様タンパク質（ＡＣＬＰ）プロモーターからなる群から選択される内皮細胞特異的又は内皮周囲細胞特異的プロモーターである、請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチド。
【請求項３】
前記プロモーターは、プレプロエンドセリン−１プロモーターである、請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチド。
【請求項４】
前記プロモーターは、ＰＰＥ−１−３Ｘプロモーターである、請求項１に記載の単離されたポリヌクレオリド。
【請求項５】
前記シス調節因子は、配列番号：１６に記載の配列の少なくとも一部に共有結合された配列番号：１５に記載の配列の少なくとも一部を含む、請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチド。
【請求項６】
前記シス調節因子は、配列番号：６に記載の配列の少なくとも一つのコピーをさらに含む、請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチド。
【請求項７】
前記シス調節因子は、配列番号：６に記載の配列の少なくとも二つのコピーをさらに含む、請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチド。
【請求項８】
配列番号：１に記載の配列の少なくとも一つのコピーをさらに含む、請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチド。
【請求項９】
低酸素応答因子をさらに含む、請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチド。
【請求項１０】
前記低酸素応答因子は、配列番号：５に記載の配列の少なくとも一つのコピーを含む、請求項９に記載の単離されたポリヌクレオチド。
【請求項１１】
前記シス調節因子は、配列番号：７に記載される、請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチド。
【請求項１２】
プロ血管形成因子又は抗血管形成因子をコードする非ウイルス性の外来配列を欠いている、請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチド。
【請求項１３】
請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチドを含む核酸構築物。
【請求項１４】
請求項１２に記載の単離されたポリヌクレオチドを含む核酸構築物。
【請求項１５】
請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチドを含む細胞。
【請求項１６】
請求項１３に記載の核酸構築物を発現する細胞。
【請求項１７】
請求項１に記載の単離されたポリヌクレオチド及び医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１８】
被験者の組織における血管形成をダウンレギュレートする方法であって、組織において、請求項１３に記載の核酸構築物を発現させ、それによって前記組織における血管形成をダウンレギュレートすることを含む方法。
【請求項１９】
前記シス調節因子は、プレプロエンドセリン−１プロモーターである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記プロモーターは、ＰＰＥ−１−３Ｘプロモーターである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記シス調節因子は、配列番号：１６に記載の配列の少なくとも一部に共有結合された配列番号：１５に記載の配列の少なくとも一部を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記シス調節因子は、配列番号：６に記載の配列の少なくとも一つのコピーをさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２３】
前記シス調節因子は、配列番号：６に記載の配列の少なくとも二つのコピーをさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記シス調節因子は、配列番号：１に記載の配列の少なくとも一つのコピーをさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２５】
前記シス調節因子は、低酸素応答因子をさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２６】
前記低酸素応答因子は、配列番号：５に記載の配列の少なくとも一つのコピーを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記アデノウイルスのコピー数を増大することができるか及び／又は前記血管形成調節因子の発現を増大することができるように選択された少なくとも一つの化合物を前記組織に投与することをさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２８】
前記化合物はコルチコステロイド及び／又はＮ−アセチルシステインである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
相乗作用方式で前記内皮特異的プロモーターの活性をさらに増強することができるように選択された少なくとも一つの血管形成のモジュレーターを前記組織に投与することをさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項３０】
前記血管形成のモジュレーターは、エンドセリン受容体アンタゴニストである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記エンドセリン受容体アンタゴニストは、二重Ａ型及びＢ型エンドセリン受容体アンタゴニストである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記エンドセリン受容体アンタゴニストは、Ｂ型特異的エンドセリン受容体アンタゴニストである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記Ｂ型特異的エンドセリン受容体アンタゴニストは、Ａ１９２，６２１；ＢＱ７８８；Ｒｅｓ ７０１−１及びＲｏ ４６−８４４３からなる群から選択される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記エンドセリン受容体アンタゴニストは、Ｂｏｓｅｎｔａｎを除くエンドセリン受容体アンタゴニストである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３５】
被験者の組織における血管形成をダウンレギュレートする方法であって、組織において、請求項１２に記載の核酸構築物を発現させ、それによって前記組織における血管形成をダウンレギュレートすることを含む方法。
【請求項３６】
過剰の血管新生に関連する疾患又は症状を治療する方法であって、治療を必要とする被験者に、アデノウイルスの血管形成内皮細胞における転写を指向させることができるシス調節因子に転写的に連結された条件付きで複製するアデノウイルスを含む核酸構築物の治療有効量を投与し、それによって組織における血管形成をダウンレギュレートし、過剰の血管新生に関連する疾患又は症状を治療することを含む方法。
【請求項３７】
前記シス調節因子は、プレプロエンドセリン−１プロモーターである、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記プロモーターは、ＰＰＥ−１−３Ｘプロモーターである、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記シス調節因子は、配列番号：１６に記載の配列の少なくとも一部に共有結合された配列番号：１５に記載の配列の少なくとも一部を含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項４０】
前記シス調節因子は、配列番号：６に記載の配列の少なくとも一つのコピーをさらに含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項４１】
前記シス調節因子は、配列番号：６に記載の配列の少なくとも二つのコピーをさらに含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
配列番号：１に記載の配列の少なくとも一つのコピーをさらに含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項４３】
低酸素応答因子をさらに含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項４４】
前記低酸素応答因子は、配列番号：５に記載の配列の少なくとも一つのコピーを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項４５】
前記過剰の血管新生に関連する疾患又は症状は、癌、転移性疾患、糖尿病性網膜症、乾癬、及びアテローム性動脈硬化からなる群から選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項４６】
前記核酸構築物の治療有効量は、約１０^３個〜約１０^１６個のウイルス粒子である、請求項３６に記載の方法。
【請求項４７】
前記核酸構築物の治療有効量は、約１０^５個〜約１０^１３個のウイルス粒子である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記核酸構築物の治療有効量は、約１０^７個〜約１０^１２個のウイルス粒子である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４９】
被験者の腫瘍を治療する方法であって、治療を必要とする被験者に、アデノウイルスの血管形成内皮細胞における転写を指向させることができるシス調節因子に転写的に連結された条件付きで複製するアデノウイルスを含む核酸構築物の治療有効量を投与し、それによって組織における血管形成をダウンレギュレートし、腫瘍を治療することを含む方法。
【請求項５０】
前記シス調節因子は、ＰＰＥ−１プロモーター、ＰＰＥ−１−３ｘプロモーター、ＴＩＥ−１プロモーター、ＴＩＥ−２プロモーター、エンドグリンプロモーター、フォンヴィレブランドプロモーター、ＫＤＲ／ｆｌｋ−１プロモーター、ＦＬＴ−１プロモーター、Ｅｇｒ−１プロモーター、ＩＣＡＭ−１プロモーター、ＶＣＡＭ−１プロモーター、ＰＥＣＡＭ−１プロモーター及び大動脈カルボキシペプチダーゼ様タンパク質（ＡＣＬＰ）プロモーターからなる群から選択される内皮細胞特異的又は内皮周囲細胞特異的プロモーターである、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記核酸構築物は、条件付きで複製するアデノウイルスをさらに含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５２】
前記アデノウイルスのコピー数を増大することができるか及び／又は導入遺伝子の発現を増大することができるように選択された少なくとも一つの化合物を前記組織に投与することをさらに含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５３】
前記化合物は、コルチコステロイド及び／又はＮ−アセチルシステインである、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
相乗作用方式で前記シス調節因子の活性をさらに増強することができるように選択された少なくとも一つの血管形成のモジュレーターを前記組織に投与することをさらに含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５５】
前記血管形成のモジュレーターは、エンドセリン受容体アンタゴニストである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記エンドセリン受容体アンタゴニストは、Ｂ型特異的エンドセリン受容体アンタゴニストである、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記Ｂ型特異的エンドセリン受容体アンタゴニストは、Ａ１９２，６２１；ＢＱ７８８；Ｒｅｓ ７０１−１及びＲｏ ４６−８４４３からなる群から選択される、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記核酸構築物の治療有効量は、約１０^３個〜約１０^１６個のウイルス粒子である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５９】
前記核酸構築物の治療有効量は、約１０^５個〜約１０^１３個のウイルス粒子である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記核酸構築物の治療有効量は、約１０^７個〜約１０^１２個のウイルス粒子である、請求項５９に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６ａ−ｂ】

【図６ｃ−ｄ】

【図７】

【図８】

【図９ａ−ｂ】

【図９ｃ−ｅ】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１ａ−ｂ】

【図３１ｃ−ｄ】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７ａ】

【図３７ｂ】

【図３８ａ−ｂ】

【図３８ｃ−ｄ】

【図３８ｅ】

【図３８ｆ】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【図４３】

【図４４】

【図４５】

【図４６】

【図４７ａ−ｂ】

【図４７ｃ−ｄ】

【図４８】

【図４９】

【図５０】

【図５１】

【図５２】

【図５３】

【図５４ａ−ｃ】

【図５４ｄ−ｈ】

【図５５】

【図５６ａ−ｂ】

【図５６ｃ】

【図５６ｄ】

【図５７ａ−ｂ】

【図５７ｃ−ｇ】

【図５８】

【図５９】

【図６０】

【図６１】

【図６２】

【図６３】

【図６４】

【図６５】

【図６６】

【図６７】

【図６８】

【図６９】

【図７０】

【図７１】

【図７２ａ−ｂ】

【図７２ｃ】

【図７３】

【図７４】

【図７５ａ】

【図７５ｂ−ｃ】

【図７５ｄ】

【図７６】

【図７７】

【図７８】

【図７９ａ】

【図７９ｂ】

【図７９ｃ】

【図７９ｄ−ｅ】

【図７９ｆ−ｇ】

【図８０】

【図８１】

【図８２】

【図８３】

【図８４】

【図８５】

【図８６ａ−ｂ】

【図８６ｃ−ｄ】

【図８７】

【図８８】

【図８９】

【図９０】

【図９１】

【図９２】

【図９３】

【図９４】

【図９５】

【図９６】

【図９７ａ】

【図９７ｂ】

【図９８】

【図９９】

【図１００】

【図１０１ａ−ｄ】

【図１０１ｅ】

【図１０２】

【図１０３ａ−ｄ】

【図１０３ｅ−ｈ】

【図１０４】

【図１０５】

【図１０６】

【図１０７】

【図１０８】

【図１０９】

【図１１０ａ−ｄ】

【図１１０ｅ】

【図１１１ａ−ｄ】

【図１１１ｅ−ｊ】

【図１１２】

【図１１３】

【公表番号】特表２０１０−５２５８０５（Ｐ２０１０−５２５８０５Ａ）
【公表日】平成２２年７月２９日（２０１０．７．２９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５０５００２（Ｐ２０１０−５０５００２）
【出願日】平成２０年４月２７日（２００８．４．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＬ２００８／０００５４３
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１３２７２９
【国際公開日】平成２０年１１月６日（２００８．１１．６）
【出願人】（５０３１７９２６３）ヴァスキュラー　バイオジェニックス　リミテッド (12)
【Ｆターム（参考）】