エラスターゼ活性阻害剤
【課題】天然抽出物を含有したエラスターゼ活性阻害剤及び化粧料を提供することを目的とする。
【解決手段】エラスターゼ活性阻害剤に、ツルレンゲ（Astragalus complanatus R.Br.）からの抽出物を有効成分として含有せしめる。また、化粧料に当該エラスターゼ活性阻害剤を配合する。
【解決手段】エラスターゼ活性阻害剤に、ツルレンゲ（Astragalus complanatus R.Br.）からの抽出物を有効成分として含有せしめる。また、化粧料に当該エラスターゼ活性阻害剤を配合する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、安全性の高い植物抽出物を有効成分として含有するエラスターゼ活性阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の真皮・表皮は、表皮細胞、線維芽細胞及びこれらの細胞の外にあって皮膚構造を支持するエラスチン、コラーゲン等の真皮細胞外マトリックスによって構成されており、若い皮膚においてはこれらの皮膚組織が恒常性を維持することにより水分保持、柔軟性、弾力性等が確保され、肌は外見的にも張りや艶があってみずみずしい状態に維持される。
【０００３】
ところが、紫外線の照射、空気の著しい乾燥、過度の皮膚洗浄等、ある種の外的因子の影響があったり、加齢が進んだりすることによって、真皮細胞外マトリックスの主要構成成分であるエラスチン、コラーゲン等の産生量が減少するとともに、変性や分解を引き起こす。その結果、角質は異常剥離を始め、肌は張りや艶を失い、肌荒れやシワ等の老化症状を呈するようになる。
【０００４】
このように、皮膚の老化に伴う変化、すなわち、シワの形成、張りの消失、弾力性の低下等には、エラスチン、コラーゲン等の真皮細胞外マトリックス成分の減少、変性が関与している。
【０００５】
これらのマトリックス成分のうち、エラスチンは、皮膚組織に弾力性を与える線維であり、加齢等に伴ってエラスチンが分解されると皮膚の張りが失われるとともに、弾力性が低下する。エラスチンを分解する酵素であるエラスターゼは、紫外線の照射により活性化され、これによりエラスチンの分解が加速し、皮膚の張りが失われるとともに、弾力性が低下する。そのため、エラスターゼの活性を阻害することによりエラスチンの分解が抑制され、張りの消失、弾力性の低下等の皮膚の老化症状を予防・改善できると考えられる。
【０００６】
また、喫煙等によって生体内でのエラスターゼの活性が亢進することが知られている。そして、肺の基質は、コラーゲンとエラスチンとから構成されているため、喫煙等によってエラスターゼの活性が亢進すると、肺胞壁を破壊して肺気腫等を招くおそれがあると考えられる。さらに、エラスターゼの活性の亢進により肺毛細血管が破壊され、肺水腫等の急性呼吸促進症候群（ＡＲＤＳ）を招くおそれがあると考えられる。
【０００７】
そのため、生体内でのエラスターゼの活性を阻害することができれば、肺気腫、肺水腫等の呼吸器系疾患を予防・治療することができるものと考えられる。従来、エラスターゼ活性阻害作用を有するものとして、例えば、スターフルーツ果実抽出物等が知られている（特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００３−３００８９３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、天然物の中からエラスターゼ活性阻害作用を有するものを見出し、それを有効成分とするエラスターゼ活性阻害剤及び当該エラスターゼ活性阻害剤を配合してなる化粧料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記目的を達成するため、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、ツルレンゲからの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。また、本発明の化粧料は、上記エラスターゼ活性阻害剤を配合したことを特徴とする。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、安全性の高い天然物由来成分を有効成分として含有するエラスターゼ活性阻害剤及び当該エラスターゼ活性阻害剤を配合してなる化粧料を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、ツルレンゲからの抽出物を有効成分として含有するものである。
【００１３】
ここで、本発明において、「ツルレンゲからの抽出物」には、ツルレンゲを抽出原料として得られる抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１４】
抽出原料として用いる植物は、ツルレンゲ（学名：Astragalus complanatus R.Br.）である。ツルレンゲは、まめ科の植物であり、多年草である。中国や内モンゴル等の山野に自生しており、これらの地域から容易に入手することができる。その種子は特にシャエンシ（沙苑子）といわれ、漢方薬の成分として肝臓や腎臓の機能低下を改善したり、めまいを改善したりするのに用いられている。
【００１５】
抽出原料として使用することのできるツルレンゲの部位としては、特に限定されるわけではなく、例えば、花、花穂、果皮、果実、球果、蕾、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子又は全草等が挙げられ、これらのうち１種又は２種以上を抽出原料として使用することができるが、特に種子を使用することが好ましい。
【００１６】
抽出原料として使用するツルレンゲは、採取後直ちに乾燥し粉砕したものが適当である。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、ツルレンゲの極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００１７】
ツルレンゲからの抽出物に含有されるエラスターゼ活性阻害物質の詳細は不明であるが、植物の抽出に一般に使用される抽出方法によって、ツルレンゲから、エラスターゼ活性阻害作用を有する抽出物を得ることができる。
【００１８】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用することが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００１９】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２０】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００２１】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族アルコール１〜９０容量部を混合することが好ましく、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族ケトン１〜４０容量部を混合することが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して多価アルコール１０〜９０容量部を混合することが好ましい。
【００２２】
抽出処理は、ツルレンゲに含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の１〜２０倍量（質量比）の抽出溶媒に、ツルレンゲを浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
【００２３】
精製は、例えば、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等により行うことができる。得られた抽出液はそのままでもエラスターゼ活性阻害剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又は乾燥物としたものの方が使用しやすい。
【００２４】
ツルレンゲからの抽出物は特有の色、匂い等を有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、医薬品、医薬部外品、化粧料、飲食品等に配合する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
【００２５】
以上のようにして得られるツルレンゲからの抽出物は、エラスターゼ活性阻害作用を有するため、この作用を利用してエラスターゼ活性阻害剤の有効成分として使用することができる。
【００２６】
ツルレンゲからの抽出物は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。これにより、ツルレンゲからの抽出物を有効成分として含有するエラスターゼ活性阻害剤を製造することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯臭剤等を用いることができる。ツルレンゲからの抽出物は、他の組成物（例えば、医薬品、医薬部外品、化粧料、飲食品等）に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。
【００２７】
なお、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、必要に応じて、エラスターゼ活性阻害作用を有する他の天然抽出物を配合して有効成分として用いることができる。
【００２８】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤の投与方法としては、一般に経皮投与、経口投与、血管（静脈）内投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。また、本発明のエラスターゼ活性阻害剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００２９】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、有効成分であるツルレンゲ抽出物が有するエラスターゼ活性阻害作用を通じて、エラスチンの分解を抑制し、張りの消失、弾力性の低下等の皮膚の老化症状を予防・改善することができる。ただし、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、これらの用途以外にも、エラスターゼ活性阻害作用を発揮することに意義あるすべての用途に用いることができる。
【００３０】
例えば、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、エラスターゼの活性亢進に起因する疾患の予防・治療用医薬品又は医薬部外品の有効成分として用いることができる。このような疾患としては、例えば、肺気腫、肺水腫等の呼吸器疾患等が挙げられる。
【００３１】
また、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、化粧料に配合して用いることもできる。本発明のエラスターゼ活性阻害剤を配合することで、化粧料にエラスターゼ活性阻害作用を付与することができる。
【００３２】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤を配合し得る化粧料は特に限定されないが、例えば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ゼリー、リップクリーム、口紅、アイライナー、マスカラ、マニキュア、日焼け止め料、ファンデーション、下地料、入浴剤等の皮膚化粧料；シャンプー、リンス、整髪料等の頭髪化粧料等が挙げられる。
【００３３】
化粧料におけるエラスターゼ活性阻害剤の配合量は、化粧料の種類や抽出物の生理活性等によって適宜調整することができる。化粧料へのエラスターゼ活性阻害剤の配合率は、ツルレンゲからの抽出物の乾燥物に換算して０．０００１〜１０質量％であるのが好ましく、０．００１〜１質量％であるのが特に好ましい。上記範囲内で配合することで、化粧料に対し、ツルレンゲからの抽出物が有するエラスターゼ活性阻害作用を効果的に付与することができる。
【００３４】
上記化粧料は、エラスターゼ活性阻害剤の有効成分であるツルレンゲからの抽出物が有するエラスターゼ活性阻害作用を妨げることがない限り、その化粧料の製造に通常使用される各種主剤及び助剤、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、美白剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、抗酸化・活性酸素消去剤等を併用することができる。このように併用することで、より一般性のある製品となり、また、それにより、併用された他の有効成分との間の相乗作用が通常期待される以上の優れた効果をもたらすことがある。
【００３５】
なお、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、ヒトに対して好適に適用されるものではあるが、所望の作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。例えば、本発明のエラスターゼ活性阻害剤を、ドッグフード、キャットフード等の愛玩動物や家畜の食餌に添加し、愛玩動物や家畜の各種疾患を予防・治療することもできる。
【実施例】
【００３６】
以下、製造例、試験例及び配合例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は、下記の各例に何ら限定されるものではない。
【００３７】
〔製造例１〕ツルレンゲ抽出物の製造
ツルレンゲ種子３００ｇに抽出溶媒として３０容量％エタノール（水とエタノールとの容量比＝７：３）４５００ｍＬを加え、９５℃、還流下で１時間加熱抽出した。得られた抽出液を減圧下に濃縮し、さらに乾燥してツルレンゲ抽出物２９．８ｇ（試料１）を得た。
【００３８】
〔試験例１〕エラスターゼ活性阻害作用試験
製造例１で得られたツルレンゲ抽出物（試料１）について、以下のようにしてエラスターゼ活性阻害作用を試験した。
【００３９】
試料（試料１）を水に溶解させ、４ｍｇ／ｍＬの水溶液として試料溶液を調製した。また、エラスチン様合成基質としてのＮ−サクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｐ−ニトロアニリド（SIGMA社製）をＤＭＳＯに溶解させてなる０．１ｍｏｌ／Ｌの溶液を、０．０５ｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．８）緩衝液で希釈して、１ｍｍｏｌ／Ｌの基質溶液を調製した。さらに、豚膵臓由来エラスターゼ酵素を水で希釈し、０．０５ｕｎｉｔｓ／ｍＬの酵素溶液を調製した。
【００４０】
上記のようにして調製された試料溶液５０μＬと、基質溶液１００μＬとを混合した後、酵素溶液５０μＬを添加し、３７℃にて３０分間反応させた（試料最終濃度：１ｍｇ／ｍＬ）。反応終了後、分光光度計（BIO-TEK INSTRUMENTS, INC社製）を用いて波長４０５ｎｍにおける吸光度を測定した。測定結果に基づいて、下記式によりエラスターゼ活性阻害率（％）を算出した。
【００４１】
エラスターゼ活性阻害率(％)＝{１−(Ａ−Ｂ)／(Ｃ−Ｄ)}×１００
式中、Ａは「試料添加・酵素添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｂは「試料添加・酵素無添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｃは「試料無添加・酵素添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｄは「試料無添加・酵素無添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表す。
【００４２】
上記のようにして算出した結果、ツルレンゲ抽出物のエラスターゼ活性阻害率は７９．０％であった。この結果から、ツルレンゲ抽出物は、優れたエラスターゼ活性阻害作用を有することが確認された。
【００４３】
〔配合例１〕
下記組成の乳液を常法により製造した。
ツルレンゲ抽出物（製造例１） ０．１ｇ
ホホバオイル ４．０ｇ
オリーブオイル ２．０ｇ
スクワラン ２．０ｇ
セタノール ２．０ｇ
モノステアリン酸グリセリル ２．０ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.O.） ２．５ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.） ２．０ｇ
黄杞エキス ０．１ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１ｇ
イチョウ葉エキス ０．１ｇ
コンキオリン ０．１ｇ
オウバクエキス ０．１ｇ
カミツレエキス ０．１ｇ
１，３−ブチレングリコール ３．０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル ０．１５ｇ
香料 ０．０５ｇ
精製水 残部（全量を１００ｇとする）
【００４４】
〔配合例２〕
下記組成の化粧水を常法により製造した。
ツルレンゲ抽出物（製造例１） ０．１ｇ
グリセリン ３．０ｇ
１，３−ブチレングリコール ３．０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.） ０．５ｇ
パラオキシ安息香酸メチル ０．１５ｇ
クエン酸 ０．１ｇ
クエン酸ソーダ ０．１ｇ
油溶性甘草エキス ０．１ｇ
海藻エキス ０．１ｇ
キシロビオースミクスチャー ０．５ｇ
クジンエキス ０．１ｇ
香料 ０．０５ｇ
精製水 残部（全量を１００ｇとする）
【００４５】
〔配合例３〕
下記組成のクリームを常法により製造した。
ツルレンゲ抽出物（製造例１） ０．０１ｇ
流動パラフィン ５ｇ
サラシミツロウ ４ｇ
セタノール ３ｇ
スクワラン １０ｇ
ラノリン ２ｇ
ステアリン酸 １ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.） １．５ｇ
モノステアリン酸グリセリル ３ｇ
１，３−ブチレングリコール ６ｇ
パラオキシ安息香酸メチル １．５ｇ
香料 ０．１ｇ
精製水 残部（全量を１００ｇとする）
【００４６】
〔配合例４〕
下記組成のシャンプー（クリームシャンプー）を常法により製造した。
ツルレンゲ抽出物（製造例１） ０．２ｇ
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム ３０．０ｇ
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸アンモニウム ２０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン ６．０ｇ
ヤシ油脂肪酸モジエタノールアミド ４．０ｇ
ジステアリン酸エチレングリコール ２．０ｇ
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル） ０．１５ｇ
香料 ０．０１ｇ
１，３−ブチレングリコール ３．０ｇ
精製水 残部（全量を１００ｇとする）
【００４７】
〔配合例５〕
下記組成のヘアトニックを常法により製造した。
ツルレンゲ抽出物（製造例１） ０．１ｇ
塩酸ピリドキシン ０．１ｇ
レゾルシン ０．０１ｇ
Ｄ−パントテニルアルコール ０．１ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１ｇ
センブリ抽出液 ０．２ｇ
Ｌ−メントール ０．０５ｇ
１，３−ブチレングリコール ４．０ｇ
ニンジンエキス ０．５ｇ
クジンエキス ０．３ｇ
カミツレ抽出液 ０．２ｇ
サリチル酸 ０．２ｇ
ピロリドンカルボン酸ナトリウム １．０ｇ
エタノール ２５．０ｇ
香料 適量
精製水 残部（全量を１００ｇとする）
【産業上の利用可能性】
【００４８】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、皮膚の老化の予防・改善に大きく貢献できる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、安全性の高い植物抽出物を有効成分として含有するエラスターゼ活性阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の真皮・表皮は、表皮細胞、線維芽細胞及びこれらの細胞の外にあって皮膚構造を支持するエラスチン、コラーゲン等の真皮細胞外マトリックスによって構成されており、若い皮膚においてはこれらの皮膚組織が恒常性を維持することにより水分保持、柔軟性、弾力性等が確保され、肌は外見的にも張りや艶があってみずみずしい状態に維持される。
【０００３】
ところが、紫外線の照射、空気の著しい乾燥、過度の皮膚洗浄等、ある種の外的因子の影響があったり、加齢が進んだりすることによって、真皮細胞外マトリックスの主要構成成分であるエラスチン、コラーゲン等の産生量が減少するとともに、変性や分解を引き起こす。その結果、角質は異常剥離を始め、肌は張りや艶を失い、肌荒れやシワ等の老化症状を呈するようになる。
【０００４】
このように、皮膚の老化に伴う変化、すなわち、シワの形成、張りの消失、弾力性の低下等には、エラスチン、コラーゲン等の真皮細胞外マトリックス成分の減少、変性が関与している。
【０００５】
これらのマトリックス成分のうち、エラスチンは、皮膚組織に弾力性を与える線維であり、加齢等に伴ってエラスチンが分解されると皮膚の張りが失われるとともに、弾力性が低下する。エラスチンを分解する酵素であるエラスターゼは、紫外線の照射により活性化され、これによりエラスチンの分解が加速し、皮膚の張りが失われるとともに、弾力性が低下する。そのため、エラスターゼの活性を阻害することによりエラスチンの分解が抑制され、張りの消失、弾力性の低下等の皮膚の老化症状を予防・改善できると考えられる。
【０００６】
また、喫煙等によって生体内でのエラスターゼの活性が亢進することが知られている。そして、肺の基質は、コラーゲンとエラスチンとから構成されているため、喫煙等によってエラスターゼの活性が亢進すると、肺胞壁を破壊して肺気腫等を招くおそれがあると考えられる。さらに、エラスターゼの活性の亢進により肺毛細血管が破壊され、肺水腫等の急性呼吸促進症候群（ＡＲＤＳ）を招くおそれがあると考えられる。
【０００７】
そのため、生体内でのエラスターゼの活性を阻害することができれば、肺気腫、肺水腫等の呼吸器系疾患を予防・治療することができるものと考えられる。従来、エラスターゼ活性阻害作用を有するものとして、例えば、スターフルーツ果実抽出物等が知られている（特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００３−３００８９３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、天然物の中からエラスターゼ活性阻害作用を有するものを見出し、それを有効成分とするエラスターゼ活性阻害剤及び当該エラスターゼ活性阻害剤を配合してなる化粧料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記目的を達成するため、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、ツルレンゲからの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。また、本発明の化粧料は、上記エラスターゼ活性阻害剤を配合したことを特徴とする。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、安全性の高い天然物由来成分を有効成分として含有するエラスターゼ活性阻害剤及び当該エラスターゼ活性阻害剤を配合してなる化粧料を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、ツルレンゲからの抽出物を有効成分として含有するものである。
【００１３】
ここで、本発明において、「ツルレンゲからの抽出物」には、ツルレンゲを抽出原料として得られる抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１４】
抽出原料として用いる植物は、ツルレンゲ（学名：Astragalus complanatus R.Br.）である。ツルレンゲは、まめ科の植物であり、多年草である。中国や内モンゴル等の山野に自生しており、これらの地域から容易に入手することができる。その種子は特にシャエンシ（沙苑子）といわれ、漢方薬の成分として肝臓や腎臓の機能低下を改善したり、めまいを改善したりするのに用いられている。
【００１５】
抽出原料として使用することのできるツルレンゲの部位としては、特に限定されるわけではなく、例えば、花、花穂、果皮、果実、球果、蕾、茎、葉、枝、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子又は全草等が挙げられ、これらのうち１種又は２種以上を抽出原料として使用することができるが、特に種子を使用することが好ましい。
【００１６】
抽出原料として使用するツルレンゲは、採取後直ちに乾燥し粉砕したものが適当である。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、ツルレンゲの極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００１７】
ツルレンゲからの抽出物に含有されるエラスターゼ活性阻害物質の詳細は不明であるが、植物の抽出に一般に使用される抽出方法によって、ツルレンゲから、エラスターゼ活性阻害作用を有する抽出物を得ることができる。
【００１８】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用することが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００１９】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２０】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００２１】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族アルコール１〜９０容量部を混合することが好ましく、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族ケトン１〜４０容量部を混合することが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して多価アルコール１０〜９０容量部を混合することが好ましい。
【００２２】
抽出処理は、ツルレンゲに含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の１〜２０倍量（質量比）の抽出溶媒に、ツルレンゲを浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
【００２３】
精製は、例えば、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等により行うことができる。得られた抽出液はそのままでもエラスターゼ活性阻害剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又は乾燥物としたものの方が使用しやすい。
【００２４】
ツルレンゲからの抽出物は特有の色、匂い等を有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、医薬品、医薬部外品、化粧料、飲食品等に配合する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
【００２５】
以上のようにして得られるツルレンゲからの抽出物は、エラスターゼ活性阻害作用を有するため、この作用を利用してエラスターゼ活性阻害剤の有効成分として使用することができる。
【００２６】
ツルレンゲからの抽出物は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。これにより、ツルレンゲからの抽出物を有効成分として含有するエラスターゼ活性阻害剤を製造することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯臭剤等を用いることができる。ツルレンゲからの抽出物は、他の組成物（例えば、医薬品、医薬部外品、化粧料、飲食品等）に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。
【００２７】
なお、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、必要に応じて、エラスターゼ活性阻害作用を有する他の天然抽出物を配合して有効成分として用いることができる。
【００２８】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤の投与方法としては、一般に経皮投与、経口投与、血管（静脈）内投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。また、本発明のエラスターゼ活性阻害剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００２９】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、有効成分であるツルレンゲ抽出物が有するエラスターゼ活性阻害作用を通じて、エラスチンの分解を抑制し、張りの消失、弾力性の低下等の皮膚の老化症状を予防・改善することができる。ただし、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、これらの用途以外にも、エラスターゼ活性阻害作用を発揮することに意義あるすべての用途に用いることができる。
【００３０】
例えば、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、エラスターゼの活性亢進に起因する疾患の予防・治療用医薬品又は医薬部外品の有効成分として用いることができる。このような疾患としては、例えば、肺気腫、肺水腫等の呼吸器疾患等が挙げられる。
【００３１】
また、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、化粧料に配合して用いることもできる。本発明のエラスターゼ活性阻害剤を配合することで、化粧料にエラスターゼ活性阻害作用を付与することができる。
【００３２】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤を配合し得る化粧料は特に限定されないが、例えば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ゼリー、リップクリーム、口紅、アイライナー、マスカラ、マニキュア、日焼け止め料、ファンデーション、下地料、入浴剤等の皮膚化粧料；シャンプー、リンス、整髪料等の頭髪化粧料等が挙げられる。
【００３３】
化粧料におけるエラスターゼ活性阻害剤の配合量は、化粧料の種類や抽出物の生理活性等によって適宜調整することができる。化粧料へのエラスターゼ活性阻害剤の配合率は、ツルレンゲからの抽出物の乾燥物に換算して０．０００１〜１０質量％であるのが好ましく、０．００１〜１質量％であるのが特に好ましい。上記範囲内で配合することで、化粧料に対し、ツルレンゲからの抽出物が有するエラスターゼ活性阻害作用を効果的に付与することができる。
【００３４】
上記化粧料は、エラスターゼ活性阻害剤の有効成分であるツルレンゲからの抽出物が有するエラスターゼ活性阻害作用を妨げることがない限り、その化粧料の製造に通常使用される各種主剤及び助剤、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、美白剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、抗酸化・活性酸素消去剤等を併用することができる。このように併用することで、より一般性のある製品となり、また、それにより、併用された他の有効成分との間の相乗作用が通常期待される以上の優れた効果をもたらすことがある。
【００３５】
なお、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、ヒトに対して好適に適用されるものではあるが、所望の作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。例えば、本発明のエラスターゼ活性阻害剤を、ドッグフード、キャットフード等の愛玩動物や家畜の食餌に添加し、愛玩動物や家畜の各種疾患を予防・治療することもできる。
【実施例】
【００３６】
以下、製造例、試験例及び配合例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は、下記の各例に何ら限定されるものではない。
【００３７】
〔製造例１〕ツルレンゲ抽出物の製造
ツルレンゲ種子３００ｇに抽出溶媒として３０容量％エタノール（水とエタノールとの容量比＝７：３）４５００ｍＬを加え、９５℃、還流下で１時間加熱抽出した。得られた抽出液を減圧下に濃縮し、さらに乾燥してツルレンゲ抽出物２９．８ｇ（試料１）を得た。
【００３８】
〔試験例１〕エラスターゼ活性阻害作用試験
製造例１で得られたツルレンゲ抽出物（試料１）について、以下のようにしてエラスターゼ活性阻害作用を試験した。
【００３９】
試料（試料１）を水に溶解させ、４ｍｇ／ｍＬの水溶液として試料溶液を調製した。また、エラスチン様合成基質としてのＮ−サクシニル−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｐ−ニトロアニリド（SIGMA社製）をＤＭＳＯに溶解させてなる０．１ｍｏｌ／Ｌの溶液を、０．０５ｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．８）緩衝液で希釈して、１ｍｍｏｌ／Ｌの基質溶液を調製した。さらに、豚膵臓由来エラスターゼ酵素を水で希釈し、０．０５ｕｎｉｔｓ／ｍＬの酵素溶液を調製した。
【００４０】
上記のようにして調製された試料溶液５０μＬと、基質溶液１００μＬとを混合した後、酵素溶液５０μＬを添加し、３７℃にて３０分間反応させた（試料最終濃度：１ｍｇ／ｍＬ）。反応終了後、分光光度計（BIO-TEK INSTRUMENTS, INC社製）を用いて波長４０５ｎｍにおける吸光度を測定した。測定結果に基づいて、下記式によりエラスターゼ活性阻害率（％）を算出した。
【００４１】
エラスターゼ活性阻害率(％)＝{１−(Ａ−Ｂ)／(Ｃ−Ｄ)}×１００
式中、Ａは「試料添加・酵素添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｂは「試料添加・酵素無添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｃは「試料無添加・酵素添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｄは「試料無添加・酵素無添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表す。
【００４２】
上記のようにして算出した結果、ツルレンゲ抽出物のエラスターゼ活性阻害率は７９．０％であった。この結果から、ツルレンゲ抽出物は、優れたエラスターゼ活性阻害作用を有することが確認された。
【００４３】
〔配合例１〕
下記組成の乳液を常法により製造した。
ツルレンゲ抽出物（製造例１） ０．１ｇ
ホホバオイル ４．０ｇ
オリーブオイル ２．０ｇ
スクワラン ２．０ｇ
セタノール ２．０ｇ
モノステアリン酸グリセリル ２．０ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.O.） ２．５ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.） ２．０ｇ
黄杞エキス ０．１ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１ｇ
イチョウ葉エキス ０．１ｇ
コンキオリン ０．１ｇ
オウバクエキス ０．１ｇ
カミツレエキス ０．１ｇ
１，３−ブチレングリコール ３．０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル ０．１５ｇ
香料 ０．０５ｇ
精製水 残部（全量を１００ｇとする）
【００４４】
〔配合例２〕
下記組成の化粧水を常法により製造した。
ツルレンゲ抽出物（製造例１） ０．１ｇ
グリセリン ３．０ｇ
１，３−ブチレングリコール ３．０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.） ０．５ｇ
パラオキシ安息香酸メチル ０．１５ｇ
クエン酸 ０．１ｇ
クエン酸ソーダ ０．１ｇ
油溶性甘草エキス ０．１ｇ
海藻エキス ０．１ｇ
キシロビオースミクスチャー ０．５ｇ
クジンエキス ０．１ｇ
香料 ０．０５ｇ
精製水 残部（全量を１００ｇとする）
【００４５】
〔配合例３〕
下記組成のクリームを常法により製造した。
ツルレンゲ抽出物（製造例１） ０．０１ｇ
流動パラフィン ５ｇ
サラシミツロウ ４ｇ
セタノール ３ｇ
スクワラン １０ｇ
ラノリン ２ｇ
ステアリン酸 １ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.） １．５ｇ
モノステアリン酸グリセリル ３ｇ
１，３−ブチレングリコール ６ｇ
パラオキシ安息香酸メチル １．５ｇ
香料 ０．１ｇ
精製水 残部（全量を１００ｇとする）
【００４６】
〔配合例４〕
下記組成のシャンプー（クリームシャンプー）を常法により製造した。
ツルレンゲ抽出物（製造例１） ０．２ｇ
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム ３０．０ｇ
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸アンモニウム ２０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン ６．０ｇ
ヤシ油脂肪酸モジエタノールアミド ４．０ｇ
ジステアリン酸エチレングリコール ２．０ｇ
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル） ０．１５ｇ
香料 ０．０１ｇ
１，３−ブチレングリコール ３．０ｇ
精製水 残部（全量を１００ｇとする）
【００４７】
〔配合例５〕
下記組成のヘアトニックを常法により製造した。
ツルレンゲ抽出物（製造例１） ０．１ｇ
塩酸ピリドキシン ０．１ｇ
レゾルシン ０．０１ｇ
Ｄ−パントテニルアルコール ０．１ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１ｇ
センブリ抽出液 ０．２ｇ
Ｌ−メントール ０．０５ｇ
１，３−ブチレングリコール ４．０ｇ
ニンジンエキス ０．５ｇ
クジンエキス ０．３ｇ
カミツレ抽出液 ０．２ｇ
サリチル酸 ０．２ｇ
ピロリドンカルボン酸ナトリウム １．０ｇ
エタノール ２５．０ｇ
香料 適量
精製水 残部（全量を１００ｇとする）
【産業上の利用可能性】
【００４８】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、皮膚の老化の予防・改善に大きく貢献できる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ツルレンゲからの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするエラスターゼ活性阻害剤。
【請求項２】
請求項１に記載のエラスターゼ活性阻害剤を配合したことを特徴とする化粧料。
【請求項１】
ツルレンゲからの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするエラスターゼ活性阻害剤。
【請求項２】
請求項１に記載のエラスターゼ活性阻害剤を配合したことを特徴とする化粧料。
【公開番号】特開２０１０−２１５５３６（Ｐ２０１０−２１５５３６Ａ）
【公開日】平成２２年９月３０日（２０１０．９．３０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−６１６８５（Ｐ２００９−６１６８５）
【出願日】平成２１年３月１３日（２００９．３．１３）
【出願人】（５９１０８２４２１）丸善製薬株式会社 (239)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年９月３０日（２０１０．９．３０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年３月１３日（２００９．３．１３）
【出願人】（５９１０８２４２１）丸善製薬株式会社 (239)
【Ｆターム（参考）】
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