カルバメート化合物
式Ｉ（式中Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は本出願の中で定義されている）：
（Ｉ）
によって表される構造を有するカルバメート化合物は、抗腫瘍剤として有用である。
（Ｉ）
によって表される構造を有するカルバメート化合物は、抗腫瘍剤として有用である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗癌剤として有用であるカルバメート化合物、並びにそれらの製造および使用についての方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、国立衛生研究所によって与えられる認可番号５Ｒ４３ ＣＡ１０９８４０−０２に基づき、一部アメリカ政府の支援を受けて発明された。アメリカ政府は、本発明において一定の権利を有する。
【０００３】
プロテインが真核細胞核内および核外へ移動する通過は、厳しく制御された能動輸送過程であり、核内移行（または核外輸送）といわれる。輸送されるプロテインには特徴的な短いアミノ酸配列が含まれ、核内移行配列（「ＮＬＳ」）または核外輸送配列（「ＮＥＳ」）と呼ばれ、それらをそれぞれ、核内移行または核外輸送される「カーゴ・プロテイン（cargo protein）」として同定した。輸送因子プロテインはＮＬＳまたはＮＥＳを認識し、カーゴ・プロテインと結合し、核膜孔複合体（それは、核内および核外への出入り口である）を通って運ばれる。核内移行を媒介する輸送因子をインポーチンと呼び；逆に、核外輸送を媒介するものをエクスポーチンと呼ぶ。
【０００４】
エクスポーチンはＣＲＭ１であり、エクスポーチン１ともいわれる。核外輸送に係わる別のプロテインはＲａｎであり、それはグアノシン三リン酸が結合した形（「Ｒａｎ−ＧＴＰ」）およびグアノシン二リン酸が結合した形（「Ｒａｎ−ＧＤＰ」）で存在する。核の中で、ＣＲＭ１はＲａｎ−ＧＴＰおよびカーゴ・プロテインとともに三重複合体を形成する。複合体は核膜孔複合体を通って核から出て、細胞質へ入る。そこで、プロテインＲａｎＧＡＰはＲａｎ−ＧＴＰの内因性ＡＴＰ合成酵素活性を活性化し、それをＲａｎ−ＧＤＰに変換し、三重複合体の解離を引き起こして、カーゴ・プロテインを放出する。次いで、ＣＲＭ１は再び核に入り、新たにサイクルを開始する。核外輸送が阻害されれば、通常の細胞周期の進行は乱され、アポトーシスが生じ得る。
【０００５】
Hokanson et al., US 4,771,070 (1988) and Nettleton et al., US 4,792,522 (1988) で報告されているように、レプトマイシンＢ（「ＬＭＢ」、かつてはエラクトシン（elactocin）、ＮＳＣ３６４３７２、またはＰＤ１１４７２０として知られていた）は抗腫瘍剤であり、抗菌性の天然物で元々はストレプトマイセスｓｐｐ.から単離された。
【化１】
【０００６】
その後、ＬＭＢはＣＲＭ１の共有結合的阻害剤であることが発見された。ＣＲＭ１カーゴ・プロテインの中で、その核外輸送が結果的にＬＭＢによって阻害されるのは、ｐ５３、ｐ７３、ＳＴＡＴ１、（ｉ）ＡＤＡＲ１、Ｒｅｖ、アクチン、およびＢｃｒ−Ａｂｌである。例えば、 Nishi et al., J. Biol. Chem. 1994, 269 (9), 6320-6324; Fukuda et al., Nature 1997, 390, 308-311; Kudo et al., Exp. Cell Res. 1998, 242, 540-547 を参照。これらのカーゴ・プロテインの多くは癌に係わっており、潜在的な抗癌剤としてのＬＭＢへの関心をもたらす（Komiyama et al., J. Antibiotics 1985, 38 (3), 427-429; Wang et al., US 2003／0162740 A1 (2003)）。しかしながら、哺乳類細胞に対するＬＢＭの細胞毒性は(Hamamoto et al., J. Antibiotics 1983, 36 (6), 639-645)、その抗癌剤としての可能性を相殺してしまう。１９９４年のＬＭＢ第１相試験は、過剰の毒性のせいで中止させられた（Newlands et al., Br. Cancer J. 1996, 74, 648-649）。
【０００７】
ＬＭＢは、レプトマイシンファミリーといわれる天然物ファミリーの原型であり、分子の一方の端に２，３−デヒドロ−δ−バレロラクトン環を有し（Ｃ１〜Ｃ５）、Ｃ５の位置から伸びた炭素鎖が６Ｅ、８Ｚおよび１２Ｅ、１４Ｅジエン系を有する、特徴がある。レプトマイシンファミリーの化学および生物学的な概説は、Kalesse et al., Synthesis 2002, 8, 981-1003 を参照。レプトマイシンファミリーの他のメンバーには、レプトマイシンＡ、ラトジャドン（Ratjadone）、アングイノマイシンＡ〜Ｄ、カリスタチン（callystatin）Ａ、カズサマイシンＡ（かつてはＣＬ−１９５７Ｂとして知られた）、カズサマイシンＢ（かつてはＣＬ−１９５７Ｅとして知られた）、レプトルスタチン、およびレプトフラニンＡ〜Ｄが含まれる。レプトマイシンファミリーの他のいくつかのメンバーの構造を、以下に示す。
【化２】
【０００８】
レプトマイシンファミリー化合物の構造活性相関に関する研究は、わずかである。上記のKudo et al., の文献は、ＬＭＢのニトロメチルバレロラクトン誘導体が不活性であることを示し、２，３−デヒドロ−δ−バレロラクトン部分が不可欠なファルマコフォアであることを示唆した。Kuhnt et al., Applied Environ. Microbiol. 1998, 64 (2), 714-720 によると、ＬＭＢを多くの細菌および真菌による生物変換にさらした結果、いくつかの誘導体が生じた。Dong et al., US 2005/0272727 A1 (2005) および Dong et al., WO 2007/033214 (2007) には、それぞれ、レプトマイシンファミリー化合物のアミドおよびエステルが開示されている。
【化３】
【０００９】
この節で引用している文書の開示物は、本明細書で引例として援用されている。
【００１０】
（発明の簡単な説明）
本発明は、抗癌剤として有用であり、レプトマイシンファミリーと構造的に関係がある化合物を提供する。
【００１１】
１つ目の形態において、式Ｉ：
【化４】
［式中、
Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ５アルキルであり；
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ５アルキルであり；
Ｒ３は、ＨまたはＯＨであり；
Ｒ４およびＲ５は、各々独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＣＨＲ７Ｒ９、または（ＣＨＲ９）ｎＲ８であるか、あるいはＲ４およびＲ５は、それらが結合している窒素と一緒になって、結合して
【化５】
を形成するが、ただしＲ５はＣ（＝Ｏ）ＮＨ２もあり得て；
Ｒ６は、ＨまたはＣ（＝Ｏ）ＮＲ４Ｒ５であり；
Ｒ７は、無置換もしくは置換アリール、無置換もしくは置換ヘテロアリール、無置換もしくは置換シクロ脂肪族、無置換もしくは置換ヘテロシクロ脂肪族、ＣＯ２Ｒ９、シアノ、またはＣＯＲ９であり；
Ｒ８は、無置換もしくは置換アリール、無置換もしくは置換ヘテロアリール、無置換もしくは置換シクロ脂肪族、無置換もしくは置換ヘテロシクロ脂肪族、ＮＲ４Ｒ５、ＣＯ２Ｒ９、ＯＨ、ハロ、シアノ、ＯＲ９、またはＣＯＲ９であり；
Ｒ９は、各々独立して、Ｈ、ＯＨまたはＣ１〜Ｃ５アルキルであり；並びに
ｎは、各々独立して、２、３、４、５、または６である］
によって表される構造を有する化合物、またはそれの医薬的に許容される塩が提供されている。
【００１２】
２つ目の形態において、本発明の化合物の有効量を標的細胞に接触させることを特徴とする、標的細胞の増殖を阻害する方法が提供されている。該標的細胞は、癌細胞（特に膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、または腎癌細胞）であり得る。
【００１３】
３つ目の形態において、本発明の化合物の治療上の有効量を、過剰増殖性疾患に罹患している患者に投与することを特徴とする、過剰増殖性疾患の治療方法が提供されている。治療される該過剰増殖性疾患は、癌（特に膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、または腎癌）であり得る。患者は、好ましくは哺乳類、特にヒトである。
【００１４】
４つ目の形態において、過剰増殖性疾患（それは癌、特に膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、または腎癌であり得る）を治療する薬物の製造のための、本発明の化合物の使用が提供されている。
【００１５】
５つ目の形態において、本発明の化合物および賦形剤を含む医薬製剤が提供されている。
【００１６】
６つ目の形態において、本発明の化合物の阻害量を細胞に接触させることを特徴とする、ＣＲＭ１媒介性プロセスによって細胞核からのプロテインの外への輸送を阻害する方法が提供されている。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
図１〜３は、本発明の化合物の合成に関して、１つ目、２つ目、３つ目の反応式を示す。
【００１８】
図４〜１５は、本発明の化合物に関する、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【００１９】
（発明の詳細な説明）
（定義）
「脂肪族」は、特定の数の炭素原子（例えば、「Ｃ３脂肪族」、「Ｃ１〜Ｃ５脂肪族」、または「Ｃ１からＣ５脂肪族」のようにであり、後者２つの語句は１〜５炭素原子を有する脂肪族部分と同義語である）、または炭素原子の数が明確に指定されていない場合には１〜４炭素原子（不飽和脂肪族部分の場合は、２〜４炭素）を有する、直鎖もしくは分岐鎖であり、飽和もしくは不飽和の、非芳香族炭化水素部分を意味する。
【００２０】
「アルキル」は、飽和脂肪族部分を意味し、炭素原子の番号を指定するための同じ慣例が適用できる。例として、Ｃ１〜Ｃ５アルキル部分には、これらに限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｔ−ブチル、１−ブチル、２−ブチル、ｎ−ペンチル、などが含まれる。
【００２１】
「アルケニル」は、少なくとも一つの炭素−炭素二重結合を有する脂肪族部分を意味し、炭素原子の番号を指定するための同じ慣例が適用できる。例として、Ｃ２〜Ｃ５アルケニル部分には、これらに限定されないが、エテニル（ビニル）、２−プロペニル（アリルまたはプロパ−２−エニル）、シス−１−プロペニル、トランス−１−プロペニル、Ｅ−（またはＺ−）２−ブテニル、３−ブテニル、１，３−ブタジエニル（ブタ−１，３−ジエニル）、１−ペンテニル、などが含まれる。
【００２２】
「アルキニル」は、少なくとも一つの炭素−炭素三重結合を有する脂肪族部分を意味し、炭素原子の番号を指定するための同じ慣例が適用できる。例として、Ｃ２〜Ｃ５アルキニル基には、エチニル（アセチレニル）、プロパルギル（プロパ−２−イニル）、１−プロピニル、ブタ−２−イニル、などが含まれる。
【００２３】
「シクロ脂肪族」は、１〜３の環を有し、それぞれの環が３〜８（好ましくは３〜６）の炭素原子を有する、飽和もしくは不飽和の、非芳香族炭化水素部分を意味する。「シクロアルキル」は、それぞれの環が飽和である、シクロ脂肪族部分を意味する。「シクロアルケニル」は、少なくとも一つの環が少なくとも一つの炭素−炭素二重結合を有する、シクロ脂肪族部分を意味する。「シクロアルキニル」は、少なくとも一つの環が少なくとも一つの炭素−炭素三重結合を有する、シクロ脂肪族部分を意味する。例として、シクロ脂肪族部分には、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロへプチル、シクロオクチル、およびアダマンチルが含まれる。好ましいシクロ脂肪族部分はシクロアルキルであり、特にシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルである。
【００２４】
「ヘテロシクロ脂肪族」は、少なくとも一つの環において、３（好ましくは１〜２）炭素までがＮ、Ｏ、またはＳ（ここで、ＮおよびＳは適宜酸化されてもよく、またＮは適宜四級化されてもよい）から独立に選択されるヘテロ原子に置換された、シクロ脂肪族部分を意味する。同様に、「ヘテロシクロアルキル」、「ヘテロシクロアルケニル」、および「ヘテロシクロアルキニル」は、それぞれ、その環の少なくとも一つが修飾された、シクロアルキル、シクロアルケニル、またはシクロアルキニル部分を意味する。典型的なヘテロシクロ脂肪族部分には、アジリジニル、アゼチジニル、１，３−ジオキサニル、オキセタニル、テトラヒドロフリル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロチオピラニルスルホン、モルホリニル、チオモルホリニル、チオモルホリニルスルホキシド、チオモルホリニルスルホン、１，３−ジオキソラニル、テトラヒドロ−１，１−ジオキソチエニル、１，４−ジオキサニル、チエタニル、などが含まれる。
【００２５】
「アルコキシ」、「アリールオキシ」、「アルキルチオ」、および「アリールチオ」は、それぞれ、−Ｏ（アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｓ（アルキル）、および−Ｓ（アリール）を意味する。例にはそれぞれ、メトキシ、フェノキシ、メチルチオ、およびフェニルチオがある。
【００２６】
「ハロゲン」または「ハロ」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
【００２７】
「アリール」は、それぞれの環が３〜７炭素原子を有し、少なくとも一つの環が芳香族である、単環式、二環式、または三環式環系を有する、炭化水素部分を意味する。その環系における環は、互いと縮合する（例えば、ナフチルにおけるように）か、または互いと結合して（例えば、ビフェニルにおけるように）もよく、そして非芳香族環と縮合または結合してもよい（例えば、インダニルまたはシクロヘキシルフェニルにおけるように）。さらなる例として、アリール部分には、これらに限定されないが、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、フェナントリル、アントラセニル、およびアセナフチルが含まれる。
【００２８】
「ヘテロアリール」は、それぞれの環が３〜７炭素原子を有し、少なくとも一つの環が芳香族環で、Ｎ、Ｏ、またはＳ（ここで、ＮおよびＳは適宜酸化されてもよく、またＮは適宜四級化されてもよい）から独立に選択されるヘテロ原子が１〜４含まれる、単環式、二環式、または三環式環系を有する部分を意味する。そのような、少なくとも一つのヘテロ原子を含む芳香族環は、別の種類の環と縮合するか（例えば、ベンゾフラニルまたはテトラヒドロイソキノリルにおけるように）、または別の種類の環と直接結合する（例えば、フェニルピリジルまたは２−シクロペンチルピリジルにおけるように）ことができる。さらなる例として、ヘテロアリール部分には、ピロリル、フラニル、チオフェニル（チエニル）、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、Ｎ−オキソピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、シンノリニル、キノザリニル、ナフチリジニル、ベンゾフラニル、インドリル、ベンゾチオフェニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、フェノチアゾリル、ベンジミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ジベンゾフラニル、カルバゾリル、ジベンゾチオフェニル、アクリジニル、などが含まれる。
【００２９】
部分が置換されてもよいと示されている（例えば、「置換もしくは無置換」または「独立して置換された」を用いて、「置換もしくは無置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル」または「独立して置換されたヘテロアリール」のように表現されている）場合に、そのような部分は、一またはそれ以上（好ましくは１〜５、より好ましくは１または２）の独立に選択された置換基を有する。当業者は、化学的に安定であり、当技術分野で公知の技術並びに本明細書で記述している方法によって合成できる化合物を提供するために、置換基が結合している部分を考慮して、置換基および置換パターンを選択することができる。
【００３０】
「アリールアルキル」、「（ヘテロシクロ脂肪族）アルキル」、「アリールアルケニル」、「アリールアルキニル」、「ビアリールアルキル」などは、例えば、ベンジル、フェネチル、Ｎ−イミダゾリルエチル、Ｎ−モルホリノエチルなどにおけるように、アルキル、アルケニル、またはアルキニル部分が開いた（open）（満たされていない（unsatisfied））原子価を伴う、場合によっては、アリール、ヘテロシクロ脂肪族、ビアリール、などの部分によって置換される、場合によっては、アルキル、アルケニル、またはアルキニル部分を意味する。逆に、「アルキルアリール」、「アルケニルシクロアルキル」などは、例えば、メチルフェニル（トリル）またはアリルシクロヘキシルにおけるように、場合によっては、アルキル、アルケニルなどの部分によって置換される、場合によっては、アリール、シクロアルキル、などの部分を意味する。「ヒドロキシアルキル」、「ハロアルキル」、「アルキルアリール」、「シアノアリール」などは、特定されている置換基（場合によっては、ヒドロキシル、ハロなど）の一またはそれ以上によって置換される、場合によっては、アルキル、アリール、などの部分を意味する。
【００３１】
例として、許容される置換基には、これらに限定されないが、アルキル（特にメチルまたはエチル）、アルケニル（特にアリル）、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、ハロ（特にフルオロ）、ハロアルキル（特にトリフルオロメチル）、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル（特にヒドロキシエチル）、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）（特に−ＯＣＦ３）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、−Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ（アルキル）、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（シクロアルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２、などが含まれる。
【００３２】
置換されている部分が脂肪族部分の場合に、好ましい置換基は、アリール、ヘテロアリール、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、−Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ（アルキル）、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（シクロアルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、および−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２である。より好ましい置換基は、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（アリール）、＝Ｏ、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、および−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２である。
【００３３】
置換されている部分がシクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、アリール、またはヘテロアリール部分の場合に、好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、−Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（シクロアルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、および−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２である。より好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、および−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２である。
【００３４】
本発明のアリール基、ヘテロアリール基、ヘテロ脂肪族基、およびヘテロシクロ脂肪族基にとって好ましい置換基には、Ｃ１〜Ｃ５アルキル、Ｃ２〜Ｃ５アルケニル、Ｃ２〜Ｃ５アルキニル、ハロ（特にフルオロまたはクロロ）、Ｏ（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）、ＯＣＦ３、ＣＦ３、ＣＦ２ＣＦ３、シアノ、ニトロ、Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）、ＯＨ、Ｏ（ＣＨ２）ｍＯＨ、Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）、およびＯ（ＣＨ２）ｍ（ハロ）が含まれる（ここで、ｍは２〜４）。
【００３５】
範囲が述べられている場合に（例えば、「Ｃ１〜Ｃ５アルキル」または「５〜１０％」におけるように）、そのような範囲にはその範囲の終点が含まれる。
【００３６】
特定の立体異性体が特に示されている場合（例えば、構造式において関連する立体中心が太線または破線の結合によって、構造式においてＥまたはＺ配置を有するために二重結合の描写によって、あるいは立体化学命名法を用いることによって示されている場合）でない限り、本発明の範囲内においてあるゆる立体異性体が、純粋な化合物並びにそれらの混合物として含まれる。特に断りがなければ、個々の鏡像異性体、ジアステレオマー、幾何異性体、および組み合わせ、並びにそれらの混合物は全て本発明によって包含されている。
【００３７】
当業者は、化合物が、本明細書で用いられる構造式に描かれたものと等しい、互変異性型（例えば、ケト型およびエノール型）、共鳴構造型、および双性イオン型を有してもよく、またその構造式がそのような互変異性型、共鳴構造型、または双性イオン型を包含することを、理解している。
【００３８】
「医薬的に許容される塩」は、医薬製剤に適した化合物の塩を意味する。化合物が一またはそれ以上の塩基性官能基を有する場合、その塩は、硫酸塩、臭化水素塩、酒石酸塩、メシル酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、酢酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、ヨウ化水素塩、硝酸塩、塩酸塩、乳酸塩、メチル硫酸塩、フマル酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、メシル酸塩、ラクトビオン酸塩、スベリン酸塩、トシル酸塩、などの酸付加塩であってもよい。化合物が一またはそれ以上の酸性部分を有する場合、その塩は、カルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、アンモニウム塩、亜鉛塩、ピペラジン塩、トロメタミン塩、リチウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、４−フェニルシクロヘキシルアミン塩、ベンザチン塩、ナトリウム塩、テトラメチルアンモニウム塩などの塩であってもよい。多形性の結晶形および溶媒和物も、本発明の範囲内において包含されている。
【００３９】
（化合物および方法）
好ましい形態において、式Ｉ中のＲ１はＨまたはＭｅである。別の好ましい形態において、式Ｉ中のＲ２はＭｅまたはＥｔである。別の好ましい形態において、式Ｉ中のＲ１はＨまたはＭｅであり、かつＲ２はＭｅまたはＥｔである。
【００４０】
別の好ましい形態において、Ｒ４およびＲ５のそれぞれは、生理的ｐＨでイオン化される官能基を欠く。
【００４１】
別の好ましい形態において、式Ｉ中のＲ１はＨ、Ｒ２はＭｅ、そしてＲ３はＨであり、式Ｉ−ａ：
【化６】
によって表される構造を有する化合物に対応する。
【００４２】
式ＩまたはＩ−ａの化合物の好ましい形態において、Ｒ５はＨである。式ＩまたはＩ−ａの化合物の、さらに好ましい形態において、Ｒ６はＨである。式ＩまたはＩ−ａの化合物の、さらに好ましい形態において、Ｒ５およびＲ６のそれぞれはＨである。
【００４３】
別の好ましい形態において、式Ｉ中で、
Ｒ４およびＲ５は、各々独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＣＨＲ７Ｒ９、または（ＣＨＲ９）ｎＲ８であるか、あるいはＲ４およびＲ５は、それらが結合している窒素と一緒になって結合して
【化７】
を形成し；並びに
Ｒ９は、各々独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ５アルキルである。
【００４４】
式ＩまたはＩ−ａ中の、好ましいＮＲ４Ｒ５基には：
【化８】
【化９】
が含まれる。
【００４５】
本発明の化合物の例を、表Ａで一覧にする。
【表１−１】
【表１−２】
【表１−３】
【００４６】
これらの中で、好ましい化合物はＡ−１、Ａ−２、Ａ−４、Ａ−１５、Ａ−１６、Ａ−１７、Ａ−１９、およびＡ−２１である。それらの構造の全体を、以下：
【化１０】
【化１１】
に示す。
【００４７】
式Ｉ−ａの化合物の、別の好ましい形態において、ＮＲ４Ｒ５部分にはトリフルオロメチル置換ピリジル環が含まれ、またＲ６はＨである。そのような化合物の具体例には：
【化１２】
が含まれる。
【００４８】
別の好ましい形態において、本発明の化合物は式Ａ−４：
【化１３】
の構造を有する。
【００４９】
本発明の化合物を製造するための１つ目の方法を、図１に示す。Ｃ２４アルコールＩＩ（ここでＲ１、Ｒ２、およびＲ３は上で定義されている）から出発し、イソシアネートＯ＝Ｃ＝ＮＲ４とのカルバモイル化により、化合物Ｉ−ｂを得る（すなわち、化合物ＩでＲ５およびＲ６がいずれもＨ）。Ｃ２４の第一アルコール基はＣ１９の第二アルコール基よりも反応性に富み、したがって基本的にＣ２４だけでカルバモイル化が起こり、それは４−（ジメチルアミノ）ピリジン（「ＤＭＡＰ」）が加えられた、より強い条件（more forcing conditions）下においても同じである。図１の方法は、イソシアネートＯ＝Ｃ＝ＮＲ４が市販のものであり、もっとも実用的である。
【００５０】
２つ目の方法を図２に示す。図１の方法と異なり、この方法では、Ｒ６がＨ（すなわち、化合物Ｉ−ｃ）またはＣ（＝Ｏ）ＮＲ４Ｒ５（すなわち、化合物Ｉ−ｄ）である化合物Ｉを得ることができる。さらに図１の方法と異なり、この方法では、Ｒ５がＨでない化合物を得ることもできる。再びＣ２４アルコールＩＩから出発し、カルボニルジイミダゾール（１.０〜１.２等量）と反応させて、モノアシルイミダゾールＩＩＩ−ａを得る。しかし、より多くのカルボニルジイミダゾール（約２.５等量）を用いると、ビスアシルイミダゾール化合物ＩＩＩ−ｂが形成される。アミンＨＮＲ４Ｒ５と、アシルイミダゾールＩＩＩ−ａまたはＩＩＩ−ｂを反応させて、それぞれ、化合物Ｉ−ｃまたはＩ−ｄを得る。
【００５１】
３つ目の方法を図３に示す。この方法は、式Ｉ中のＮＲ４Ｒ５部分（Ｃ２４またはＣ１９のいずれとの結合でもよい）がＮＨ２である場合に適当である。Ｃ２４アルコールＩＩをイソシアン酸トリクロロアセチル（約１.７５等量）と反応させ、続いて中性アルミナで処理して、Ｉ−ｅ（すなわち化合物Ｉで、Ｒ６がＨ、ＮＲ４Ｒ５がＮＨ２）およびＩ−ｆ（すなわち化合物Ｉで、Ｒ６がＮＲ４Ｒ５、ＮＲ４Ｒ５そのそれぞれがＮＨ２）の化合物の混合物（約１：１）を得た。しかし、より多くのイソシアン酸トリクロロアセチル（約５等量）を用いると、化合物Ｉ−fのみが得られた。
【００５２】
適したＣ２４アルコールＩＩはレプトルスタチン（かつてはＳ−５９９１７ａとして知られていた）であり、それは微生物のストレプトマイセスｓｐ．ＳＡＭ１５９５によって生合成される。その生成、単離、解析は、Abe et al., J. Antibiotics 1993, 46(5), 735-40; Abe et al., JP 05-039283 (1993) (対応するケミカル・アブストラクト・ナンバーは、１１９：１３７５２４); および Abe et al., J. Antibiotics 1993, 46(5), 728-734 に記述されており；それらの開示物は引例として援用されている。
【化１４】
【００５３】
別の適したＣ２４アルコールＩＩはレダクトレプトマイシンＡであり、その製造およびストレプトマイセスｓｐ．ＭＪ１３２−ＮＦ５培養からの単離は、Hosokawa et al., J. Antibiotics 1993, 46(4), 676-8、に記述されており、その開示物は引例として援用されている。構造的に、レダクトレプトマイシンＡは、Ｃ２４カルボン酸基がアルコールに還元されたレプトマイシンＡと一致する。
【化１５】
【００５４】
Ｃ２４カルボン酸基が還元されたレプトマイシンＢ誘導体は、レダクトレプトマイシンＡと類似し、それは用いることのできる、さらに別の適したＣ２４アルコールＩＩである。その製造は、Kobayashi et al., Tetrahedron Lett. 1998, 39(45), 8291-8294 に記述されており、その開示物は引例として援用されている。
【化１６】
【００５５】
他の、天然に存在するレプトマイシンファミリーのメンバー（例えば、カズサマイシンおよびアングイノマイシン）におけるＣ２４カルボン酸基の還元によって、さらに他のＣ２４アルコールＩＩを製造できることも、当業者は理解している。
【００５６】
別の形態において、式（ＩＶ）：
【化１７】
によって表される構造を有するカルバメート化合物が提供されている。
【００５７】
理論によって束縛されるものではないが、本発明の化合物は、標的癌細胞においてＣＲＭ−１媒介性の核外輸送プロセスを阻害するＬＭＢと類似の機構により働き、したがって細胞周期停止および／またはアポトーシスも含むと考えられる。ＬＭＢの２，３−デヒドロ−δ−バレロラクトン部分は、マイケル反応受容体である。ＬＭＢは、酵母ＣＲＭ１のシステイン５２９と一緒にマイケル付加物を形成することによって、ＣＲＭ１を阻害することが示されている。Kudo et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. (USA) 1999, 96(3), 9112-9117（ヒトＣＲＭ１のシステインに対応するのは、５２８の位置）。ラトジャドン（Ratjadone）というレプトマイシンファミリーの別のメンバーは、同じ機構によってＣＲＭ１を阻害することが示されている。Meissner et al., FEBS Lett. 2004, 576, 27-30.
【化１８】
【００５８】
本発明の化合物はマイケル受容体ファルマコフォアを保有し、したがって同じ阻害機構によって機能することが期待される。
【００５９】
多くの癌細胞は、アポトーシス誘導性の癌抑制プロテインｐ５３の機能の低下をもらたらす突然変異を有する（Vousden et al., Nat. Rev. Cancer 2002, 2, 594-504）。そのような癌の例には、前立腺癌およびヒト・パピローマウイルス（ＨＰＶ）に伴う子宮頸癌が含まれる。ＬＭＢは、子宮頸癌細胞核において、ｐ５３プロテインの蓄積を引き起こすことが示されている（Lane et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. (USA) 2000, 97(15), 8501-8506）。ＬＭＢは、核でｐ５３を捕捉し（trap）、前立腺癌細胞でアポトーシスを誘導することが示されいる。したがって、前立腺癌細胞はＬＭＢに対して感受性が高い（Peehl et al., Prostate 2003, 54, 258-267）。
【００６０】
適当な癌の種類に対して、本発明の化合物は他の抗癌剤と一緒に相乗的に用いることができ、特にチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、イマチニブ（そのメシレートはグリベック（登録商標）という商標名で知られている））と一緒にである。いくつかの癌（例えば、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ））は、融合プロテインＢｃｒ−Ａｂｌの発現によって引き起こされる特徴を有する。通常、Ｂｃｒ−Ａｂｌは核内へ輸送されないが、Ｂｃｒ−Ａｂｌ／イマチニブ複合体は核内へ輸送される。ＬＭＢも存在するなら、それはＢｃｒ−Ａｂｌが核外へ輸送されるのを妨げる。核内に閉じ込められたＢｃｒ−Ａｂｌは、イマチニブとの可逆的複合体から解離することによりアポトーシスを引き起こし、結果的にＢｃｒ−Ａｂｌ陽性細胞は死ぬ。例えば、 Vigneri et al., Nature Medicine 2001, 7, 228-234; Wang et al., US 2003/0162740 A1 (2003) を参照。従って、イマチニブおよび本発明の化合物の組み合わせは、Ｂｃｒ−Ａｂｌ陽性癌細胞を相乗的に攻撃するための機構を提供することができる。
【００６１】
Santi et al., US 2005/0203174 A1 (2005)（その開示物は本明細書で引用として援用している）では、様々な併用療法（ＬＭＢおよび第２の（second）抗癌剤が含まれる）を説明している。作用の機構がおそらく共通であることを考えれば、そこに開示されている併用療法は、ＬＭＢの代わりに本発明の化合物を用いて行うことができると予想される。
【００６２】
従って、本発明の化合物は、プロテイン（例えば、ｐ５３、ｐ７３、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＳＴＡＴ１、（ｉ）ＡＤＡＲ１、Ｒｅｖ、および細胞核からのアクチン）の核外輸送を阻害するために用いることができ、それは、上のようなプロテインに関してＣＲＭ１と共有結合付加体を形成し、ＣＲＭ１媒介輸送プロセスを干渉することによって行う。ある形態において、阻害されるプロテインはｐ５３である。別の形態において、阻害されるプロテインはＢｃｒ−Ａｂｌである。細胞型および標的プロテインに依存して若干のばらつきが予想されるが、一般に、用いられる阻害量は０.０３〜７４０ｎＭの範囲内であり、好ましくは０.３〜１００ｎＭ、より好ましくは０.３〜２０ｎＭである。
【００６３】
本発明の化合物は、これらに限定されないが、過剰増殖性疾患：例えば、頭頸部癌（例えば、頭部腫瘍、頚部腫瘍、鼻腔腫瘍、副鼻腔腫瘍、鼻咽頭腫瘍、口腔腫瘍、中咽頭腫瘍、喉頭腫瘍、下咽頭腫瘍、唾液腺腫瘍、および傍神経節腫）；肝癌および胆道系（biliary tree）癌（特に肝細胞癌）；腸癌（特に結腸直腸癌）；卵巣癌；小細胞および非小細胞肺癌；乳癌；肉腫（例えば、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、胎児性横紋筋肉腫、平滑筋肉腫、神経線維肉腫、骨肉腫、滑膜肉腫、脂肪肉腫、および胞状軟部肉腫；白血病（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ））；中枢神経系の腫瘍（特に脳腫瘍）；リンパ腫（例えば、ホジキンリンパ腫、リンパ球様形質（lymphoplasmacytoid）リンパ腫、濾胞性リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、Ｂ系列大細胞（B−lineage large cell）リンパ腫、バーキットリンパ腫、およびＴ細胞未分化大細胞リンパ腫）のような疾患を治療するために用いることができる。臨床的には、本明細書で記述されている方法の実践および組成物の使用は、癌性増殖における大きさもしくは数の低下、および／または（適用される場合）随伴症状における低下をもたらす。病理学的には、本明細書で記述されている方法の実行および組成物の使用は、病理学的に関連性のある反応（例えば、癌細胞増殖の抑制、癌または腫瘍の大きさの低下、さらなる転移の予防、および腫瘍血管新生の阻害）を生み出す。そのような疾患の治療方法には、患者に、独創的な組み合わせの治療上の有効量を投与することが含まれる。その方法は、必要であれば繰り返してもよい。特に、癌は前立腺癌、白血病、肺癌、乳癌、神経芽細胞腫、腎癌、子宮頸癌（特にヒト・パピローマウイルス（ＨＰＶ）が係わる子宮頸癌）、および結腸癌であり得る。
【００６４】
細胞の過剰増殖を特徴とする非癌性疾患もまた、本発明の化合物によって治療できる。そのような疾患の実例には、これらに限定されないが：萎縮性胃炎、炎症性溶血性貧血、移植片拒絶、炎症性好中球減少、水疱性類天疱瘡、セリアック病、脱髄性神経障害、皮膚筋炎、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎およびクローン病）、多発性硬化症、心筋炎、筋炎、鼻ポリープ、慢性副鼻腔炎、尋常性天疱瘡、原発性糸球体腎炎、乾癬、術後の癒着、狭窄または再狭窄、強膜炎、強皮症、湿疹（例えば、アトピー性皮膚炎、刺激性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎）、歯周病（すなわち、歯周炎）、多発性嚢胞腎、および１型糖尿病が含まれる。他の例には、血管炎（例えば、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎、高安動脈炎）、結節性多発動脈炎、アレルギー性血管炎および肉芽腫症（チャーグ−ストラウス病（Churg−Strauss disease））、多発性血管炎重複症候群、過敏性血管炎（ヘノッホ・シェーンライン紫斑病）、血清病、薬物性血管炎、感染性血管炎、腫瘍性血管炎、結合組織病と関連する血管炎、補体系の先天性欠損に関連する血管炎、ウェゲナー（Wegener’s）肉芽腫症、川崎病、中枢神経系の血管炎、バージャー病および全身性硬化症）；胃腸菅疾患（例えば、膵炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、潰瘍性直腸炎、原発性硬化性胆管炎、特発性が含まれるいかなる原因の良性狭窄（例えば、胆管、食道、十二指腸、小腸または大腸の狭窄）；気道疾患（例えば、喘息、過敏性肺炎、石綿症、珪肺症、並びに塵肺症、慢性気管支炎および慢性閉塞性気道疾患の他の形態）；鼻涙管疾患（例えば、特発性が含まれるいかなる原因の狭窄）；および耳菅疾患（例えば、特発性が含まれるいかなる原因の狭窄）が含まれる。特に、非癌性の症状は足底疣贅、心臓肥大、または癌悪液質があり得る。
【００６５】
本発明の化合物は、他の抗癌剤または細胞毒性薬と組み合わせて投与することができ、それには、アルキル化剤、血管形成阻害剤、代謝拮抗剤、ＤＮＡ切断剤、ＤＮＡ架橋剤、ＤＮＡ挿入剤、ＤＮＡマイナー・グルーブ（minor groove）結合剤、エンジイン、熱ショックプロテイン９０阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、免疫調節剤、微小管安定剤、ヌクレオシド（プリンまたはピリミジン）類似体、核外輸送阻害剤、プロテアソーム阻害剤、トポイソメラーゼ（ＩまたはＩＩ）阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、およびセリン／スレオニンキナーゼ阻害剤が含まれる。特定の抗癌剤または細胞毒性薬には、β−ラパコン、アンサミトシン（ansamitocin）Ｐ３、アウリスタチン、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カリスタチン（callistatin）Ａ、カンプトセシン、カペシタビン、ＣＣ−１０６５、シスプラチン、クリプトフィシン、ダウノルビシン、ジソラゾール、ドセタキセル、ドキソルビシン、デュオカルマイシン、ダイネミシン（dynemycin）Ａ、エポチロン、エトポシド、フロクスウリジン、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、ゲフィチニブ、ゲルダナマイシン、１７−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７−ＡＡＧ）、１７−（２−ジメチルアミノエチル）アミノ１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７−ＤＭＡＧ）、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、イマチニブ、インターフェロン、インターロイキン、イリノテカン、マイタンシン、メトトレキサート、マイトマイシンＣ、オキサリプラチン、パクリタキセル、スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、チオテパ、トポテカン、トリコスタチンＡ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、レナリドマイド（レブリミド（登録商標））、ベバシズマブ（アバスチン（登録商標））、トラスツズマブ（ハーセプチン（登録商標））、およびセツキシマブ（アービタックス（Erbitux）（登録商標））が含まれる。
【００６６】
好ましくは、本発明の化合物は、精製および単離された形で提供され、例えばカラムクロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー、再結晶、または他の精製技術を用いる。本発明の化合物の特定の立体異性体が示されている場合、そのような立体異性体には実質的に他の立体異性体が含まれないことが好ましい。
【００６７】
本発明の化合物は、本発明の化合物および賦形剤を含む医薬製剤として用いてもよい。用いられ得る賦形剤には、担体、界面活性剤、増粘剤または乳化剤、固体結合剤、分散補助剤または攪拌補助剤、可溶化剤、着色剤、香味剤、コーティング剤、崩壊剤、潤滑剤、甘味剤、防腐剤、等張剤、およびそれの組み合わせが含まれる。適当な賦形剤の選択および使用は、Gennaro, ed., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed. (Lippincott Williams & Wilkins 2003) に示されており、その開示物は本明細書で引用として援用している。
【００６８】
組成物は、固体、半固体、または液体の形態のような、いずれかの適当な形であり得る。一般に、医薬品は、有機もしくは無機で、外部からの、腸内への、もしくは非経口の投与（application）に適した担体または賦形剤と混合した、活性成分として本発明の化合物の一またはそれ以上を含む。該活性成分は、例えば、通常の非毒性で、錠剤、ペレット、カプセル、坐剤、ペッサリー、溶液、乳液、懸濁液、および使用に適した他の任意の形にとって医薬的に許容される担体を用いて作られ得る。用いることができる担体には、水、グルコース、ラクトース、アラビア・ゴム、ゼラチン、マンニトール、デンプン糊、三ケイ酸マグネシウム、タルク、コーンスターチ、ケラチン、コロイド状シリカ、ジャガイモデンプン、尿素、および製造に用いるのに適した他の担体が、固体、半固体、または液体の形で、含まれる。また、補助安定剤、増粘剤、および着色剤、並びに芳香剤を用いてもよい。投与の好ましい様式には、静脈内に、および特定の徴候（子宮頸癌、膀胱癌、または足底疣贅）の場合には局所的に投与することが含まれる。
【００６９】
適用できる場合において、本発明の化合物はマイクロカプセルおよびナノ粒子として製造してもよい。一般的な手順は、例えば、Bosch et al., US 5,510,118 (1996); De Castro, US 5,534,270 (1996); および Bagchi et al., US 5,662,883 (1997), の中で説明されており、それらは本明細書で引用により全て援用されている。体積に対する面積の比率を増加させることで、これらの剤形で化合物の経口デリバリーができ、そうすることによってはじめて経口投与が可能となった。
【００７０】
本発明の化合物の投与量レベルは、約０.１ｍｇ〜約１００ｍｇ／体重ｋｇ／日、好ましくは約１ｍｇ〜約５０ｍｇ／体重ｋｇ／日の範囲である。より好ましくは、投与量レベルは約１ｍｇ〜約２０ｍｇ／体重ｋｇ／日であり、それは患者を７０ｋｇと仮定すれば、患者一人あたり７０ｍｇ〜１４００ｍｇ／日に相当する。本発明の化合物は断続的に（すなわち、半週、週、半月、月に１回の間隔で）投与すればよい。
【００７１】
担体物質と組み合わせて一つの剤形を製造し得る活性成分の量は、治療される宿主および投与の特定の様式に依存して変わる。例えば、ヒトの経口投与のために意図される剤形は担体物質を含むことができ、それは組成物総量の約５％〜約９５％の間で変わり得る。投与単位形態は、一般に活性成分の約５ｍｇ〜約５００ｍｇを含む。
【００７２】
しかしながら、どんな特定の患者における具体的な投与レベルも、様々な要素に依存することが理解される。これらの要素には、用いられる特定の化合物の活性；患者の年齢、体重、全体的な健康、性別、および食事；投与の時間およびルート、並びに薬剤の排出の割合；治療において混合薬が用いられているか否か；そして、治療がされている、特定の疾患または症状の重症度が含まれる。
【００７３】
本発明の実践（practice）は、以下の実施例を参照することによってさらに理解することができ、それらは実例として提供されるのであって、限定のために提供されるのではない。
【００７４】
実施例１：レプトルスタチン
ストレプトマイセスｓｐ．菌株ＳＡＭ１５９５を、−８０℃のバイアル内で、グリセロール（３０％、ｖ／ｖ）に貯蔵した。一つのバイアルを解凍し（thawed）、その内容物をＬ２培地（大豆油、６０ｍＬ／Ｌ； ベーシック酵母（basic yeast）、３０ｇ／Ｌ；ＫＣｌ、３ｇ／Ｌ；Ｋ２ＨＰＯ４、０.２ｇ／Ｌ；ＣａＣＯ３、３ｇ／Ｌ）が５０ｍＬ含まれる、バッフル付２５０ｍＬの三角振盪フラスコに移した。フラスコを、２４℃で４日間、２インチのスロー・インキュベーター（throw incubator）内で培養した。フラスコの中身を、Ｌ２培地（５００ｍＬ）が含まれる、２.８Ｌのフェルンバッハ・フラスコ（Fernbach flask）へ移した。フェルンバッハ・フラスコ（Fernbach flask）を、２４℃で２日間、２インチのスロー・インキュベーター（throw incubator）内で培養した。二次的（secondary）種培養液（２００ｍＬ）は、バイオリアクター内で、Ｌ２培地の４Ｌを播種するために用いた。培養条件は２４℃、通気速度を０.５ｖ／ｖ／ｍ、はじめに６００ｒｐｍに設定された攪拌カスケード（stir cascade）を用いて溶存酸素圧を飽和状態の３０％、そしてｐＨはＨ２ＳＯ４（２.５Ｎ）またはＮａＯＨ（２.５Ｎ）を用いて７.０に、調節した。培養して７日後、培養液（３Ｌ）を、１００％メタノール溶液（３Ｌ）で終夜抽出した。抽出混合物をブフナー漏斗で濾過し、濾過ケーキ（filter cake）を５０：５０＝メタノール：水（２００ｍＬ）で洗浄した。精製プロセスに用いられた全ての溶媒には、０.１％（ｖ／ｖ）酢酸が含まれていた。レプトルスタチンをメタノール抽出物から、低圧Ｃ１８クロマトグラフィーによって精製した。全回収率が３２％で、レプトルスタチンを黄色の油状物として得た（総量１１５ｍｇ）。
【００７５】
実施例２：２４−アシルイミダゾールレプトルスタチン
この実施例では、代表的なＣ２４アルコールＩＩとしてレプトルスタチンを用いて、図２の反応式によるモノアシルイミダゾール化合物ＩＩＩ−ａの製造を説明する。
【００７６】
１，１’−カルボニルジイミダゾール（５４ｍｇ、０.３３３３ｍｍｏｌ、１.０１ｅｑ）を、レプトルスタチン（１６４ｍｇ、０.３２９３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥アセトニトリル溶液（１ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で２．５時間攪拌し、溶媒を取り除いた。生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（１０〜５０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント)により精製し、２４−アシルイミダゾールレプトルスタチンを得た（１８２ｍｇ）。MS (m/z): C35H48N2O6の計算値 592.765 ;実験値 615.427 (M+Na+).
【化１９】
【００７７】
実施例３：１９，２４−ビスアシルイミダゾールレプトルスタチン
この実施例では、代表的なＣ２４アルコールＩＩとしてレプトルスタチンを用いて、図２の反応式によるビスアシルイミダゾール化合物ＩＩＩ−ｂの製造を説明する。
【００７８】
１，１’−カルボニルジイミダゾール（１２７ｍｇ、０.７８４０ｍｍｏｌ、２.４ｅｑ）を、レプトルスタチン（１６３ｍｇ、０.３２７３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥アセトニトリル溶液（３ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で終夜攪拌し、溶媒を取り除いた。生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（１０〜５０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント)により精製し、１９，２４−ビスアシルイミダゾールレプトルスタチンを得た（１２８ｍｇ）。MS (m/z): C39H50N4O7の計算値 686.4 ;実験値 687.5 (M+H+), 709.5 (M+Na+).
【化２０】
【００７９】
実施例３：化合物Ａ−１
この実施例では、図１の反応式に従って化合物Ａ−１の合成を説明する。
【００８０】
ベンジルイソシアネート（１９２μＬ、１.５５６２ｍｍｏｌ、２.４８ｅｑ）およびＤＭＡＰ（１１５ｍｇ）を、レプトルスタチン（３１２ｍｇ、０.６２６５ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２溶液（５ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で２．５時間攪拌し、溶媒を取り除いた。生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（１０〜５０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント)により精製し、続いてＣ−１８逆相ＭＰＬＣ（２０〜１００％アセトニトリル水溶液グラジエント）を行い、化合物Ａ−１を得た（２７９ｍｇ）。MS (m/z): C39H53NO6の計算値 631.4 ;実験値 654.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.42, 164.08, 156.72, 144.88, 139.94, 139.00, 138.63, 136.24, 136.34, 130.75, 129.45, 128.57, 128.33, 127.70, 127.41, 127.34, 125.40, 121.50, 121.06, 78.65, 74.09, 61.67, 46.71, 45.61, 44.99, 44.01, 40.70, 33.12, 32.25, 30.01, 20.70, 20.34, 16.16, 15.98, 13.73, 13.06, 12.57. 化合物Ａ−１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図４に示す。
【００８１】
実施例４：化合物Ａ−２
これは、図１の反応式による合成の別の例である。
【００８２】
イソシアン酸メチル（６６μＬ、１.１００ｍｍｏｌ、２.５ｅｑ）およびＤＭＡＰ（４０ｍｇ）を、レプトルスタチン（２１９ｍｇ、０.４３９８ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２溶液（５ｍＬ）に加えた。反応混合物を窒素下の室温で４時間攪拌し、溶媒を取り除いた。生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（５〜４０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント)により精製し、続いてＣ−１８逆相ＭＰＬＣ（２０〜１００％アセトニトリル水溶液グラジエント）を行い、化合物Ａ−２を得た（１８５ｍｇ）。MS (m/z): C33H49NO6の計算値 555.4 ;実験値 578.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.54, 164.03, 157.29, 144.70, 139.87, 139.05, 136.29, 135.34, 130.81, 129.47, 128.34, 127.75, 125.40, 121.65, 121.22, 78.66, 74.19, 61.52, 46.49, 45.62, 43.95, 40.73, 33.10, 32.28, 30.08, 27.54, 20.72, 20.36, 16.15, 15.99, 13.92, 13.08, 12.29. 化合物Ａ−２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図５に示す。
【００８３】
実施例５：化合物Ａ−３およびＡ−４（混合物）
この実施例では、図３の反応式に従って、化合物Ａ−３およびＡ−４の混合物の合成を説明する。
【００８４】
トリクロロアセチルイソシアネート（５μＬ、０.０４２０４ｍｍｏｌ、１.７４ｅｑ）を、レプトルスタチン（１２ｍｇ、０.０２４１ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２溶液（１ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌し、次いで中性Ａｌ２Ｏ３クロマトグラフィーカラムに直接乗せた。４時間後、生成物をアセトンで溶離した。溶媒を蒸発させ、生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（５〜６０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント）により精製し、化合物Ａ−３（６ｍｇ）および化合物Ａ−４（６ｍｇ）(MS (m/z): C33H48N2O7の計算値 584.346.340 ;実験値 607.392 (M+Na+))を得た。化合物Ａ−３の MS (m/z) : C32H47NO6の計算値 541.3 ;実験値 564.4 (M+Na+). 化合物Ａ−３の 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.54, 164.05, 156.87, 144.71, 140.25, 139.05, 136.30, 135.34, 130.82, 129.48, 128.33, 127.77, 125.39, 121.65, 120.82, 78.66, 74.19, 61.81, 46.49, 45.63, 43.94, 40.73, 33.09, 32.28, 30.08, 20.72, 20.36, 16.14, 16.00, 13.93, 13.09, 12.28. 化合物Ａ−３の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図６に示す。化合物Ａ−４に関する分析の詳細は、次の実施例を参照。
【００８５】
実施例６：化合物Ａ−４
この実施例では、限られた量のトリクロロアセチルイソシアネートを用いて、図１の反応式による化合物Ａ−４の合成を説明する。
【００８６】
トリクロロアセチルイソシアネート（７３.６μＬ、０.６１８９ｍｍｏｌ、５ｅｑ）を、レプトルスタチン（７４ｍｇ、０.１２３７ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２溶液（２ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌し、次いで中性Ａｌ２Ｏ３クロマトグラフィーカラムに直接乗せた。４時間後、生成物をアセトンで溶離した。溶媒を蒸発させ、生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（５〜６０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント）により精製し、化合物Ａ−４を得た（５５ｍｇ）。 MS (m/z): C33H48N2O7の計算値 584.4 ;実験値 607.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 211.89 (C17), 164.16 (C1), 157.25, 157.13, 145.02 (C3), 139.36 (22), 139.05 (C9), 136.25 (C14), 135.29 (C13), 130.89 (C7), 129.52 (C8), 128.53 (C15), 127.83 (C12), 125.36 (C6), 121.48 (C2), 121.05 (C23), 78.94 (C5), 76.64 (C19), 61.78 (C24), 46.78 (C18), 45.45 (C16), 44.38 (C21), 40.77 (C11), 32.79 (C20), 32.54 (C10), 30.11 (C4), 20.87 (10Me), 20.34 (8Me), 16.05 (16Me), 15.91 (22Me), 14.07 (18Me), 13.13 (14Me), 12.82 (20Me). 化合物Ａ−３の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図６に示す。
【００８７】
化合物Ａ−４は、以下のようにも合成できる：レプトルスタチン（１７.７８ｇ、３５.７０ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２溶液（３６０ｍＬ）に、トリクロロアセチルイソシアネート（１０.５７ｍＬ、８９.２５ｍｍｏｌ、２．５ｅｑ）を加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌した。ＣＨ２Ｃｌ２をロータリーエバポレーターで除去し、メタノール（３６０ｍＬ）を加え、続いてＮａＨＣＯ３（８９g）を加えた。反応混合物を室温で２．５時間攪拌した。固形物を濾過により除去し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（５〜６０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント)により精製し、化合物Ａ−４を得た（１６.５ｇ）。
【００８８】
実施例７：化合物Ａ−５
化合物Ａ−５を図２の反応式に従い、中間体ＩＩＩ−ａを経由して合成した。
【００８９】
Ｎ−（２−アミノエチル）ピロリジン（６.８μＬ、０.０５３７４ｍｍｏｌ、４.４ｅｑ）および酢酸（３μＬ、０.０５３ｍｍｏｌ、４.３ｅｑ）を、２４−アシルイミダゾールレプトルスタチン（７.３ｍｇ、０.０１２３３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥テトラヒドロフラン溶液（１.５ｍＬ）に加えた。反応混合物を、室温で５時間攪拌した。反応混合物をシリカ・ゲル・クロマトグラフィーカラムに直接乗せて精製し（２〜６％メタノールのＣＨ２Ｃｌ２溶液グラジエント）、化合物Ａ−５を得た（７.１ｍｇ）。MS (m/z): C38H58N2O6の計算値 638.4 ;実験値 639.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.52, 164.04, 156.78, 144.73, 139.76, 139.05, 136.27, 135.35, 130.80, 129.46, 128.34, 127.73, 125.40, 121.63, 121.20, 78.67, 74.07, 61.63, 55.22, 54.03, 46.54, 45.62, 43.95, 40.72, 38.86, 33.08, 32.28, 30.07, 29.68, 20.71, 20.36, 16.16, 15.98, 13.91, 13.08, 12.36. 化合物Ａ−５の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図８に示す。
【００９０】
以下の実施例では、先の実施例と同じように行われた合成は、単にそう述べて簡潔化する。特に断りがなければ、そのような合成で、遊離塩基または塩酸塩として用いるアミンは市販品として入手可能であった。塩酸塩として得た場合、遊離塩基は、塩酸塩をメタノール溶液中に溶解し、過剰の固形炭酸ナトリウムで処理し、濾過し、ロータリーエバポレーターによってメタノールを除去し、高減圧下で乾燥することにより生成した。
【００９１】
実施例８：化合物Ａ−６
化合物Ａ−６を、化合物Ａ−５と同じように製造したが、但し２−（ピリジン−３−イル）エタンアミンを用いた。MS (m/z): C39H54N2O6の計算値 646.4 ;実験値 647.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.44, 164.02, 156.52, 150.14, 147.85, 144.69, 140.12, 139.05, 136.38, 136.24 135.39, 134.33, 130.77, 129.46, 128.340, 127.68, 125.41, 123.54, 121.65, 121.00, 78.64, 73.54, 61.54, 46.89, 45.70, 44.05, 41.84, 40.73, 33.37, 33.06, 32.28, 30.08, 20.70, 20.37, 16.18, 15.92, 13.88, 13.09, 12.82. 化合物Ａ−６の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図９に示す。
【００９２】
実施例９：化合物Ａ−７
化合物Ａ−７を、化合物Ａ−５と同じように製造したが、但し２−モルホリノエタンアミンを用いた。MS (m/z): C38H58N2O7の計算値 654.4 ;実験値 655.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.45, 164.02, 156.62, 144.70, 139.95, 139.03, 136.29, 135.34, 130.81, 129.48, 128.33, 127.75, 125.40, 121.65, 121.15, 78.65, 74.11, 66.88, 61.55, 57.44, 53.32, 46.56, 45.61, 43.98, 40.73, 37.19, 33.10, 32.29, 30.08, 20.72, 20.37, 16.17, 16.01, 13.86, 13.08, 12.41. 化合物Ａ−７の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１０に示す。
【００９３】
実施例１０：化合物Ａ−８
化合物Ａ−８を、化合物Ａ−５と同じように製造したが、但しＮ１，Ｎ１−ジエチルエタン−１，２−ジアミンを用いた。MS (m/z): C38H60N2O6の計算値 640.5 ;実験値 641.5(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.52, 164.02, 156.74, 144.70, 139.70, 139.04, 136.27, 135.35, 130.80, 129.46, 128.34, 127.74, 125.40, 121.45, 121.31, 78.66, 74.18, 61.46, 51.87, 46.75, 46.50, 45.61, 43.96, 40.72, 38.41, 33.09, 32.28, 30.07, 20.71, 20.36, 16.17, 15.98, 13.91, 13.08, 12.30, 11.51. 化合物Ａ−８の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１１に示す。
【００９４】
実施例１１：化合物Ａ−９
２−（４−フルオロフェニル）エチルアミン（１３μＬ、０.０９９２３ｍｍｏｌ、４.０２ｅｑ）および酢酸（３μＬ、０.０５３ｍｍｏｌ、２.１５ｅｑ）を、２４−アシルイミダゾールレプトルスタチン（１４.６ｍｇ、０.０２４６６ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥テトラヒドロフラン溶液（１ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物をシリカ・ゲル・クロマトグラフィーカラム（５〜４０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント）に直接乗せて精製し、化合物Ａ−９を得た（９.６ｍｇ）。MS (m/z): C40H54NO6の計算値 663.4 ;実験値 686.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.49, 164.03, 162.84, 160.41, 156.55, 144.71, 140.00, 139.03, 136.29, 135.34, 134.41, 130.80, 130.20, 130.13, 129.48, 128.33, 127.75, 125.40, 121.64, 121.08, 115.48, 115.26, 78.65, 74.16, 61.54, 46.51, 45.61, 43.94, 42.23, 40.73, 36.63, 35.38, 33.09, 32.28, 30.07, 20.72, 20.36, 16.16, 16.00, 13.87, 13.08, 12.34. 化合物Ａ−９の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１２に示す。
【００９５】
実施例１２：化合物Ａ−１０
化合物Ａ−１０を、化合物Ａ−９と同じように製造したが、但し２−メトキシエタンアミンを用いた。MS (m/z): C35H53NO7の計算値 599.4 ;実験値 622.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.52, 164.02, 156.67, 144.69, 139.88, 139.04, 136.28, 135.34, 130.81, 129.47, 128.34, 127.75, 125.40, 121.66, 121.15, 78.66, 74.19, 71.43, 61.57, 58.74, 46.49, 45.61, 43.94, 40.73, 33.09, 32.29, 30.07, 29.68, 20.71, 20.36, 16.16, 15.99, 13.90, 13.08, 12.28. 化合物Ａ−１０の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１３に示す。
【００９６】
実施例１３：化合物Ａ−１１
化合物Ａ−１１を、化合物Ａ−９と同じように製造したが、但し２−（３，５−ジメチルイソオキサゾール−４−イル）エタンアミンを用いた。MS (m/z): C39H56N2O7の計算値 664.4 ;実験値 665.4(M+H+), 687.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.45, 165.85, 164.05, 159.62, 156.58, 144.73, 140.12, 139.03, 136.28, 135.35, 130.80, 129.49, 128.34, 127.75, 125.40, 121.63, 120.95, 110.57, 78.65, 74.08, 61.62, 46.58, 45.62, 43.95, 40.73, 40.61, 33.08, 32.28, 30.08, 22.28, 20.72, 20.36, 16.16, 15.98, 13.86, 13.09, 12.42, 10.90, 10.13. 化合物Ａ−１１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１４に示す。
【００９７】
実施例１４：化合物Ａ−１２
化合物Ａ−１２を、化合物Ａ−９と同じように製造したが、但し（４−フルオロフェニル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): C39H52FNO6の計算値 649.4 ;実験値 672.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.44, 164.09, 163.30, 160.86, 156.69, 144.84, 140.06, 139.02, 136.26, 135.33, 134.46, 130.78, 129.46, 129.15, 129.07, 128.32, 127.73, 125.38, 121.53, 120.98, 115.48, 115.26, 78.66, 74.08, 61.73, 46.66, 45.61, 44.28, 43.98, 40.71, 33.11, 32.26, 30.03, 20.70, 20.34, 16.15, 15.98, 13.76, 13.06, 12.51. 化合物Ａ−１２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１５に示す。
【００９８】
実施例１５：化合物Ａ−１３
化合物Ａ−１３を、化合物Ａ−５と同じような方法で製造したが、但し１−（２−アミノエチル）ピロリジン−２−オンを用いた。MS (m/z): 675.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.42, 176.08, 164.03, 156.88, 144.73, 139.77, 139.01, 136.21, 135.35, 130.74, 129.43, 128.36, 127.66, 125.38, 121.59, 121.12, 78.63, 73.69, 61.55, 47.59, 46.77, 45.61, 44.03, 42.51, 40.69, 38.95, 33.00, 32.24, 30.84, 20.67, 20.33, 18.03, 16.03, 16.15, 15.87, 13.78, 13.05, 12.68.
【００９９】
実施例１６：化合物Ａ−１４
２４−アシルイミダゾリドレプトルスタチン（１９０ｍｇ、０.３２０４ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥テトラヒドロフラン溶液（５ｍＬ）に、２−（イミダゾル−１−イル）−エチルアミン（１４２ｍｇ、１.２８１ｍｍｏｌ、４ｅｑ）および酢酸（９０.７μＬ、１.６０２３ｍｍｏｌ、５ｅｑ）を加えた。反応混合物を室温で５時間攪拌した。反応混合物をシリカ・ゲル・カラム（２〜６％メタノールのジクロロメタン溶液）に直接乗せて精製し、化合物Ａ−１４を得た（１０２ｍｇ）。MS (m/z): 実験値 636.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.40, 164.09, 156.72, 144.90, 140.23, 139.01, 137.41, 136.12, 135.41, 130.70, 129.40, 128.42, 127.55, 125.38, 121.48, 120.80, 118.86, 78.65, 72.93, 61.71, 47.41, 46.43, 45.74, 44.19,, 41.68, 40.68, 33.09, 32.22, 30.01, 20.64, 20.33, 16.20, 15.86, 13.65, 13.51, 13.04.
【０１００】
実施例１７：化合物Ａ−１５
化合物Ａ−１５を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（５−メチルイソオキサゾール−３−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 659.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.41, 169.88, 164.06, 161.62, 156.65, 144.83, 140.15, 138.99, 136.25, 135.32, 130.75, 129.45, 128.31, 127.71, 125.40, 121.54, 120.84, 100.85, 78.64, 74.04, 61.91, 46.67, 45.60, 43.98, 40.70, 36.91, 33.09, 32.24, 30.03, 20.69, 20.34, 16.14, 15.97, 13.75, 13.06, 12.53, 12.21.
【０１０１】
実施例１８：化合物Ａ−１６
化合物Ａ−１６を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但しピリジン−２−イルメタンアミンを用いた。MS (m/z): 655.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.36, 164.02, 157.22, 156.78, 149.04, 144.82, 139.85, 138.98, 136.71, 136.20, 135.33, 130.72, 129.42, 128.34, 127.67, 125.40, 122.25, 121.63, 121.51, 121.08, 78.62, 74.05, 61.70, 46.74, 46.03, 45.59, 44.03, 40.69, 33.12, 32.23, 30.01, 20.68, 20.33, 16.15, 15.96, 13.71, 13.05, 12.60.
【０１０２】
実施例１９：化合物Ａ−１７
化合物Ａ−１７を化合物Ａ−５と同じような方法で製造したが、但し（Ｒ）−３−アミノプロパン−１，２−ジオールを用い、また溶媒にはＴＨＦ／ＤＭＦ（１ｍＬ：１ｍＬ）を用いた。MS (m/z): 638.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.49, 164.26, 157.96, 145.00, 140.15, 139.06, 136.30, 135.34, 130.84, 129.45, 128.27, 127.72, 125.32, 121.51, 120.91, 78.75, 73.57, 71.17, 63.75, 61.96, 47.00, 45.71, 44.10, 43.27, 40.71, 33.10, 32.27, 30.04, 20.71, 20.35, 16.16, 15.96, 13.65, 13.08, 13.08.
【０１０３】
実施例２０：化合物Ａ−１８
化合物Ａ−１８を化合物Ａ−４と同じような方法で製造した。この場合に、化合物Ａ−１を出発物質として用い、トリクロロアセチルイソシアネート（２.５ｅｑ）と反応させた。MS (m/z): 740.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 211.75, 164.08, 156.80, 155.88, 155.41, 144.86, 141.40, 139.00, 138.16, 136.30, 135.26, 130.87, 129.52, 128.51, 128.24(2x), 127.85(3x), 127.11, 125.33, 121.55, 119.59, 78.90, 76.48, 63.61, 46.77, 46.64, 45.38, 44.38, 40.76, 32.67, 32.53, 30.13, 20.84, 20.35, 16.02, 15.98, 14.19, 13.15, 12.82.
【０１０４】
実施例２１：化合物Ａ−１９
化合物Ａ−１９を化合物Ａ−５と同じような方法で製造したが、但しアミンとしてチアゾール−２−イルメタンアミンを用いた。MS (m/z): 661.3 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.28, 168.32, 163.97, 156.47, 144.74, 142.33, 140.11, 138.89, 136.13, 135.23, 130.65, 129.34, 128.23, 127.59, 125.28, 121.42, 120.70, 119.23, 78.54, 73.88, 61.93, 46.65, 45.50, 43.92, 42.39, 40.59, 33.00, 32.14, 29.92, 20.59, 20.24, 16.06, 15.88, 13.62, 12.96, 12.55.
【０１０５】
実施例２２：化合物Ａ−２０
化合物Ａ−２０を化合物Ａ−４と同じような方法で製造した。この場合に、化合物Ａ−１９を出発物質として用い、トリクロロアセチルイソシアネート（１.２ｅｑ）と反応させた。MS (m/z): 704.3 (M+Na+). 1H NMR (400 MHz, CDCL3), δ (ppm), 7.70 (d, J=3.2 Hz, 1H), 7.28 (d, J=3.2 Hz, 1H), 6.91 (dt, J=9.6, 4.4 Hz, 1H), 6.69 (d, J=15.6 Hz, 1H), 6.05 (d, J=9.6 Hz, 1H), 6.02 (d, J=15.6 Hz, 1H), 5.72 (dd, J=15.6, 7.2 Hz, 1H), 5.57 (dt, J=15.6, 6.8 Hz, 1H), 5.49 (br, 1H), 5.31 (t, J=6.4 Hz, 1H), 5.26 (d, J=10 Hz, 1H), 5.09 (d, J=9.6 Hz, 1H), 5.01 (dd, J=8.8, 2 Hz, 1H), 4.95 (q-like, J=7.6 Hz, 1H), 4.72 (br, 2H), 4.68 (d, J=6 Hz, 2H), 4.63 (m, 2H), 3.66 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 2.65 (m, 1H), 2.46 (m, 2H), 2.06 (m, 3H), 1.83 (s, 3H), 1.82 (s, 3H), 1.66 (m, 1H), 1.64 (s, 3H), 1.13 (d, J=6.8 Hz, 3H), 1.10 (d, J=6.4 Hz, 3H), 0.96 (d, J=6.4 Hz, 3H), 0.67 (d, J=6.4 Hz, 3H).
【０１０６】
実施例２３：化合物Ａ−２１
化合物Ａ−２１を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（５−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 701.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.42, 164.05, 161.48, 156.79, 146.08 (d, J = 4 Hz), 144.78, 140.18, 139.01, 136.27, 135.32, 133.86 (d, J = 3 Hz) 130.78, 129.46, 128.31, 127.73, 125.37, 125.32 (q, J = 66 Hz), 121.57, 121.30, 120.88, 78.65, 74.04, 61.92, 46.64, 46.01, 45.61, 43.98, 40.71, 33.11, 32.26, 30.04, 20.69, 20.33, 16.14, 15.99, 13.77, 13.06, 12.49.
【０１０７】
（５−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミン（ＶＩ）を以下のように製造した：炭酸水素ナトリウム（０.２５g）およびパラジウム炭素（０.５ｇ、５０％ウェット（wet）、１０％Ｐｄ／Ｃ）を、（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミン（Ｖ）塩酸塩（５０ｍＬメタノール溶液中、０.５ｇ）のメタノール溶液に加えた。混合物を、水素バルーン下で３時間かけて水素化した。反応混合物を濾過し、減圧下で蒸発させた。残渣をメタノール溶液（５ｍＬ）に再び溶解し、再び濾過し、再び蒸発させて、粗生成物（ＶＩ）を得た（０.３３g）。1H-NMR (CD3OD, 400 MHz): δ 8.92 (s, 1H), 8.16 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.35 (s, 2H).
【化２１】
【０１０８】
実施例２４：化合物Ａ−２２
化合物Ａ−２２を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 723.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.42, 164.07, 156.75, 149.08, 147.00 (q, J=34.5 Hz), 144.81, 140.40, 138.99, 137.79, 136.39, 136.25, 135.28, 130.77, 129.44, 128.25, 127.70, 125.31, 121.49, 120.65, 120.27, 78.63, 73.97, 62.00, 46.62, 45.59, 43.91, 42.09, 40.68, 33.07, 32.22, 30.01, 20.66, 20.29, 16.09, 15.95, 13.76, 13.02, 12.45.
【０１０９】
実施例２５：化合物Ａ−２３
化合物Ａ−２３を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 723.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.46, 164.02, 158.33, 156.72, 147.57 (q, J=35 Hz), 144.73, 140.18, 138.98, 138.04, 136.25, 135.29, 130.76, 129.43, 128.28, 127.71, 125.36, 124.46, 121.55, 120.88, 118.93, 78.62, 74.13, 61.86, 46.51, 45.80, 45.57, 43.91, 40.68, 33.07, 32.23, 30.01, 20.66, 20.30, 16.10, 15.96, 13.82, 13.03, 12.30.
【０１１０】
実施例２６：化合物Ａ−２４
化合物Ａ−２４を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（４−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 701.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.45, 164.04, 159.25, 156.76, 150.17, 144.77, 140.19, 139.01, 138.97 (q, J = 68 Hz), 136.25, 135.33, 130.77, 129.45, 128.32, 127.72, 125.38, 121.57,120.88, 117.91, 117.17, 78.65, 74.09, 61.93, 46.62, 46.05, 45.61, 43.96, 40.70, 33.11, 32.26, 30.04, 20.68, 20.33, 16.14, 15.98, 13.78, 13.05, 12.43.
【０１１１】
実施例２７：化合物Ａ−２５
化合物Ａ−２５を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 723.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.53, 164.02, 156.55, 154.22, 151.50, 144.72, 139.92, 139.03, 136.28, 135.34, 134.22, 134.17, 130.80, 129.45, 128.34, 127.74, 125.40, 124.36, 124.04, 123.71, 123.38, 122.14, 121.87, 121.62, 121.15, 78.66, 74.21, 61.77, 46.50, 45.61, 43.96, 43.07, 40.71, 33.10, 32.27, 30.05, 20.69, 20.34, 16.15, 16.00, 13.90, 13.07, 12.27.
【０１１２】
実施例２８：化合物ＩＶ
トリクロロアセチルイソシアネート（１２５μＬ、１.０５４ｍｍｏｌ、２.５ｅｑ）を、２４−アシルイミダゾリドレプトルスタチン（２５０ｍｇ、０.４２１６ｍｍｏｌ、１ｅｑ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（３ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌し、次いで中性Ａｌ２Ｏ３カラム上に乗せ、終夜カラムの上に置いた。生成物を、メタノールを用いてカラムから溶離し、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（３〜４％ＭｅＯＨのＣＨ２Ｃｌ２溶液グラジエント）で精製した。化合物ＩＶの生成物を得た（１００ｍｇ）。MS (m/z): 564.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 211.80, 164.14, 157.13, 144.95, 139.05, 136.89, 136.38, 135.26, 130.95, 129.5, 128.52, 127.93, 126.15, 125.31, 121.54, 79.02, 75.52, 59.13, 46.93, 45.39, 44.73, 40.80, 32.65, 32.52, 30.15, 20.93, 20.36, 15.93, 15.50, 14.27, 13.29, 13.19.
実施例２９：核外輸送阻害
【０１１３】
本発明の化合物が核外輸送を阻害する能力は、以下のようにして評価した。
【０１１４】
１〜５×１０４細胞を、１２ｍｍカバーガラスまたはチャンバースライド（例えば、Ｌａｂ−Ｔｅｋ＃１７７４４５）のウェルにまいた（seeded）。細胞を３７℃で終夜かけて成長させ、細胞を表面に付着させた。培地を除去し、望ましい試験化合物が含まれる培地に置き換え、必要な期間（典型的に１時間）インキュベートした。回復実験（recovery experiment）のために、細胞をＰＢＳまたは培地で洗浄し、試験化合物のない培地で目的の回復期間（典型的に８、２４、または４８時間）インキュベートした。培地を除去し、カバーガラス／ウェルをＰＢＳ（ｐＨ７.４）で１分間洗浄した。カバーガラスまたはスライドを室温で２０分間、３.７％ホルムアルデヒドのＰＢＳ溶液で固定し、ＰＢＳ溶液で３回洗浄し、ＣＲＭ１基質ＲａｎＢＰ１（CRM1 substrate RanBP1）を染色した。
【０１１５】
カバーガラスまたはチャンバースライドを透過処理し、１０％ ｄｏｎｋｅｙ ｓｅｒｕｍ、０.１％トリトン Ｘ−１００のＰＢＳ溶液で、３０分間室温でブロッキングした（blocked）。一次抗体をＰＢＳ溶液で希釈し、室温で１時間インキュベートした：ヤギ抗ＲａｎＢＰ１（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ｓｃ−１１６０；１：５０希釈）およびマウス抗チューブリン（Ｓｉｇｍａ、Ｔ９０２６；１：４００）。細胞をＰＢＳ溶液で５分間洗浄した（３回）。二次抗体ロバ抗ヤギＣｙ３（７０５−１６５−１４７、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）およびロバ抗マウスＦＩＴＣ（７１５−０９５−１５０、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）をＰＢＳ溶液で１：２００に希釈し、室温で１時間インキュベートした。二次抗体を除去し、細胞を核染色色素（例えば、ＤＡＰＩ（Ｓｉｇｍａ、Ｄ８４１７；２.５μｇ／ｍＬのＰＢＳ溶液）またはＨｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ、Ｈ３５７０；１００ｎｇ／ｍＬのＰＢＳ溶液））を用いて、室温で５分間染色した。細胞をＰＢＳ溶液で５分間洗浄し（３回）、カバーガラスをＦｌｕｏｒＳａｖｅ（ＥＭＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、８００５８−１０８）を用いてマウントした（mounted）。ＲａｎＢＰ１の核（Ｎ）局在性または細胞質（Ｃ）局在性を、４０倍の対物レンズを付けたＺｅｉｓｓ Ａｘｉｏｖｅｒｔ２００倒立落射蛍光顕微鏡を用いて調べた。最初のドラッギング（drugging）期間の後、核局在化（Ｎ＞Ｃ）を確認した。回復（Recovery）を以下のように定義した：速い（fast）回復（８時間で、Ｃ≧Ｎ）、緩やかな（moderate）回復（２４時間で、Ｃ≧Ｎ）、または遅い（slow）回復（２４時間で、Ｎ＞Ｃ）。
【０１１６】
天然のレプトマイシンＡ、レプトマイシンＢ、およびレプトルスタチンが含まれる比較のデータと一緒に、結果を表Ｂに示す。結果から分かるように、核外輸送阻害の持続期間は、試験化合物に依存して変わる。
【表２】
実施例３０：生物活性
【０１１７】
本発明の化合物の生物活性を、様々な腫瘍細胞株の増殖に対する阻害効果を測定することにより評価した。結果（レプトマイシンＡ、レプトマイシンＢ、およびレプトルスタチンに関する比較データも含まれる）は、表Ｃで一覧にしている。ＨＣＴ−１１６は、ヒト結腸癌細胞株である。ＬＮＣａｐは、ヒト前立腺癌細胞株である。ＳｉＨａは、ＨＰＶ−１６陽性ヒト子宮頸癌株である。
【表３−１】
【表３−２】
【０１１８】
表Ｄは、様々な細胞株に対する化合物Ａ−１およびＡ−４の活性に関する、付加的なデータを示す。場合によっては、レプトマイシンＢ（ＬＭＢ）および／または化合物ＶＩ（Dong et al., US 2005/0272727 A1 (2005)）における比較データも提供する。
【化２２】
【表４−１】
【表４−２】
【０１１９】
試験に用いられた追加の細胞株は、様々な異なる癌を表す：膀胱癌（ＵＭ−ＵＣ−３）、乳癌（ＢＴ４７４、ＨＣＣ１９３７、ＭＤＡ−ＭＢ４６８、ＮＣＩ−ＡＤＲ）、中枢神経系の癌（Ｕ８７ＭＧ（グリオーマ）、ＳＫＮＳＨ（神経芽細胞腫））、結腸癌（ＬｏＶｏ、ＬＳ４１１Ｎ、ＬＳ５１３）、頭頸部癌（ＣＡＬ−２７、ＦａＤｕ）、白血病（ＣＣＲＦ−ＣＥＭ、ＭＯＬＴ−４）、肝癌（ＨｅｐＧ２）、肺癌（Ａ５４９、ＮＣＩ−Ｈ２３、ＮＣＩ−Ｈ３５８）、黒色腫（Ｃｏｌｏ８２９）、卵巣癌（ＯＶＣＡＲ−４）、膵癌（ＢｘＰＣ−３、Ｍｉａ−ＰａＣａ２）、前立腺癌（２２Ｒｖ１、ＰＣ−３）、および腎癌（Ａ−４９８、Ｃａｋｉ−１）。
【０１２０】
要約すると、表ＣおよびＤのデータは、本発明の化合物が様々な癌（すなわち、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、および腎癌）を治療するのに効果的であることを示す。
【０１２１】
上述した本発明の詳細な説明には、本発明の特定の部分または側面に、主としてまたは排他的に関係している箇所が含まれる。これは明確化および便宜上のためであること、ある特定の特徴はそれが開示されている箇所のみではなくそれ以上に関連し得ること、並びに本明細書の開示には、異なる箇所にある情報の、あらゆる適当な組み合わせが含まれることが理解される。同じように、本明細書の様々な図および説明は本発明の特定の形態に関するものだが、理解されるべきことは、特定の図または形態との関連で特定の特徴が開示されている場合に、そのような特徴も、適当な範囲において、他の図もしくは形態との関連で、他の特徴との組み合わせで、または一般に本発明の中で用いることができることである。
【０１２２】
さらに、本発明は特に、ある好ましい形態という観点から説明されているが、本発明はそのような好ましい形態に限定されない。むしろ、本発明の範囲は添付した特許請求の範囲によって定義される。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗癌剤として有用であるカルバメート化合物、並びにそれらの製造および使用についての方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、国立衛生研究所によって与えられる認可番号５Ｒ４３ ＣＡ１０９８４０−０２に基づき、一部アメリカ政府の支援を受けて発明された。アメリカ政府は、本発明において一定の権利を有する。
【０００３】
プロテインが真核細胞核内および核外へ移動する通過は、厳しく制御された能動輸送過程であり、核内移行（または核外輸送）といわれる。輸送されるプロテインには特徴的な短いアミノ酸配列が含まれ、核内移行配列（「ＮＬＳ」）または核外輸送配列（「ＮＥＳ」）と呼ばれ、それらをそれぞれ、核内移行または核外輸送される「カーゴ・プロテイン（cargo protein）」として同定した。輸送因子プロテインはＮＬＳまたはＮＥＳを認識し、カーゴ・プロテインと結合し、核膜孔複合体（それは、核内および核外への出入り口である）を通って運ばれる。核内移行を媒介する輸送因子をインポーチンと呼び；逆に、核外輸送を媒介するものをエクスポーチンと呼ぶ。
【０００４】
エクスポーチンはＣＲＭ１であり、エクスポーチン１ともいわれる。核外輸送に係わる別のプロテインはＲａｎであり、それはグアノシン三リン酸が結合した形（「Ｒａｎ−ＧＴＰ」）およびグアノシン二リン酸が結合した形（「Ｒａｎ−ＧＤＰ」）で存在する。核の中で、ＣＲＭ１はＲａｎ−ＧＴＰおよびカーゴ・プロテインとともに三重複合体を形成する。複合体は核膜孔複合体を通って核から出て、細胞質へ入る。そこで、プロテインＲａｎＧＡＰはＲａｎ−ＧＴＰの内因性ＡＴＰ合成酵素活性を活性化し、それをＲａｎ−ＧＤＰに変換し、三重複合体の解離を引き起こして、カーゴ・プロテインを放出する。次いで、ＣＲＭ１は再び核に入り、新たにサイクルを開始する。核外輸送が阻害されれば、通常の細胞周期の進行は乱され、アポトーシスが生じ得る。
【０００５】
Hokanson et al., US 4,771,070 (1988) and Nettleton et al., US 4,792,522 (1988) で報告されているように、レプトマイシンＢ（「ＬＭＢ」、かつてはエラクトシン（elactocin）、ＮＳＣ３６４３７２、またはＰＤ１１４７２０として知られていた）は抗腫瘍剤であり、抗菌性の天然物で元々はストレプトマイセスｓｐｐ.から単離された。
【化１】
【０００６】
その後、ＬＭＢはＣＲＭ１の共有結合的阻害剤であることが発見された。ＣＲＭ１カーゴ・プロテインの中で、その核外輸送が結果的にＬＭＢによって阻害されるのは、ｐ５３、ｐ７３、ＳＴＡＴ１、（ｉ）ＡＤＡＲ１、Ｒｅｖ、アクチン、およびＢｃｒ−Ａｂｌである。例えば、 Nishi et al., J. Biol. Chem. 1994, 269 (9), 6320-6324; Fukuda et al., Nature 1997, 390, 308-311; Kudo et al., Exp. Cell Res. 1998, 242, 540-547 を参照。これらのカーゴ・プロテインの多くは癌に係わっており、潜在的な抗癌剤としてのＬＭＢへの関心をもたらす（Komiyama et al., J. Antibiotics 1985, 38 (3), 427-429; Wang et al., US 2003／0162740 A1 (2003)）。しかしながら、哺乳類細胞に対するＬＢＭの細胞毒性は(Hamamoto et al., J. Antibiotics 1983, 36 (6), 639-645)、その抗癌剤としての可能性を相殺してしまう。１９９４年のＬＭＢ第１相試験は、過剰の毒性のせいで中止させられた（Newlands et al., Br. Cancer J. 1996, 74, 648-649）。
【０００７】
ＬＭＢは、レプトマイシンファミリーといわれる天然物ファミリーの原型であり、分子の一方の端に２，３−デヒドロ−δ−バレロラクトン環を有し（Ｃ１〜Ｃ５）、Ｃ５の位置から伸びた炭素鎖が６Ｅ、８Ｚおよび１２Ｅ、１４Ｅジエン系を有する、特徴がある。レプトマイシンファミリーの化学および生物学的な概説は、Kalesse et al., Synthesis 2002, 8, 981-1003 を参照。レプトマイシンファミリーの他のメンバーには、レプトマイシンＡ、ラトジャドン（Ratjadone）、アングイノマイシンＡ〜Ｄ、カリスタチン（callystatin）Ａ、カズサマイシンＡ（かつてはＣＬ−１９５７Ｂとして知られた）、カズサマイシンＢ（かつてはＣＬ−１９５７Ｅとして知られた）、レプトルスタチン、およびレプトフラニンＡ〜Ｄが含まれる。レプトマイシンファミリーの他のいくつかのメンバーの構造を、以下に示す。
【化２】
【０００８】
レプトマイシンファミリー化合物の構造活性相関に関する研究は、わずかである。上記のKudo et al., の文献は、ＬＭＢのニトロメチルバレロラクトン誘導体が不活性であることを示し、２，３−デヒドロ−δ−バレロラクトン部分が不可欠なファルマコフォアであることを示唆した。Kuhnt et al., Applied Environ. Microbiol. 1998, 64 (2), 714-720 によると、ＬＭＢを多くの細菌および真菌による生物変換にさらした結果、いくつかの誘導体が生じた。Dong et al., US 2005/0272727 A1 (2005) および Dong et al., WO 2007/033214 (2007) には、それぞれ、レプトマイシンファミリー化合物のアミドおよびエステルが開示されている。
【化３】
【０００９】
この節で引用している文書の開示物は、本明細書で引例として援用されている。
【００１０】
（発明の簡単な説明）
本発明は、抗癌剤として有用であり、レプトマイシンファミリーと構造的に関係がある化合物を提供する。
【００１１】
１つ目の形態において、式Ｉ：
【化４】
［式中、
Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ５アルキルであり；
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ５アルキルであり；
Ｒ３は、ＨまたはＯＨであり；
Ｒ４およびＲ５は、各々独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＣＨＲ７Ｒ９、または（ＣＨＲ９）ｎＲ８であるか、あるいはＲ４およびＲ５は、それらが結合している窒素と一緒になって、結合して
【化５】
を形成するが、ただしＲ５はＣ（＝Ｏ）ＮＨ２もあり得て；
Ｒ６は、ＨまたはＣ（＝Ｏ）ＮＲ４Ｒ５であり；
Ｒ７は、無置換もしくは置換アリール、無置換もしくは置換ヘテロアリール、無置換もしくは置換シクロ脂肪族、無置換もしくは置換ヘテロシクロ脂肪族、ＣＯ２Ｒ９、シアノ、またはＣＯＲ９であり；
Ｒ８は、無置換もしくは置換アリール、無置換もしくは置換ヘテロアリール、無置換もしくは置換シクロ脂肪族、無置換もしくは置換ヘテロシクロ脂肪族、ＮＲ４Ｒ５、ＣＯ２Ｒ９、ＯＨ、ハロ、シアノ、ＯＲ９、またはＣＯＲ９であり；
Ｒ９は、各々独立して、Ｈ、ＯＨまたはＣ１〜Ｃ５アルキルであり；並びに
ｎは、各々独立して、２、３、４、５、または６である］
によって表される構造を有する化合物、またはそれの医薬的に許容される塩が提供されている。
【００１２】
２つ目の形態において、本発明の化合物の有効量を標的細胞に接触させることを特徴とする、標的細胞の増殖を阻害する方法が提供されている。該標的細胞は、癌細胞（特に膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、または腎癌細胞）であり得る。
【００１３】
３つ目の形態において、本発明の化合物の治療上の有効量を、過剰増殖性疾患に罹患している患者に投与することを特徴とする、過剰増殖性疾患の治療方法が提供されている。治療される該過剰増殖性疾患は、癌（特に膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、または腎癌）であり得る。患者は、好ましくは哺乳類、特にヒトである。
【００１４】
４つ目の形態において、過剰増殖性疾患（それは癌、特に膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、または腎癌であり得る）を治療する薬物の製造のための、本発明の化合物の使用が提供されている。
【００１５】
５つ目の形態において、本発明の化合物および賦形剤を含む医薬製剤が提供されている。
【００１６】
６つ目の形態において、本発明の化合物の阻害量を細胞に接触させることを特徴とする、ＣＲＭ１媒介性プロセスによって細胞核からのプロテインの外への輸送を阻害する方法が提供されている。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
図１〜３は、本発明の化合物の合成に関して、１つ目、２つ目、３つ目の反応式を示す。
【００１８】
図４〜１５は、本発明の化合物に関する、１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【００１９】
（発明の詳細な説明）
（定義）
「脂肪族」は、特定の数の炭素原子（例えば、「Ｃ３脂肪族」、「Ｃ１〜Ｃ５脂肪族」、または「Ｃ１からＣ５脂肪族」のようにであり、後者２つの語句は１〜５炭素原子を有する脂肪族部分と同義語である）、または炭素原子の数が明確に指定されていない場合には１〜４炭素原子（不飽和脂肪族部分の場合は、２〜４炭素）を有する、直鎖もしくは分岐鎖であり、飽和もしくは不飽和の、非芳香族炭化水素部分を意味する。
【００２０】
「アルキル」は、飽和脂肪族部分を意味し、炭素原子の番号を指定するための同じ慣例が適用できる。例として、Ｃ１〜Ｃ５アルキル部分には、これらに限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｔ−ブチル、１−ブチル、２−ブチル、ｎ−ペンチル、などが含まれる。
【００２１】
「アルケニル」は、少なくとも一つの炭素−炭素二重結合を有する脂肪族部分を意味し、炭素原子の番号を指定するための同じ慣例が適用できる。例として、Ｃ２〜Ｃ５アルケニル部分には、これらに限定されないが、エテニル（ビニル）、２−プロペニル（アリルまたはプロパ−２−エニル）、シス−１−プロペニル、トランス−１−プロペニル、Ｅ−（またはＺ−）２−ブテニル、３−ブテニル、１，３−ブタジエニル（ブタ−１，３−ジエニル）、１−ペンテニル、などが含まれる。
【００２２】
「アルキニル」は、少なくとも一つの炭素−炭素三重結合を有する脂肪族部分を意味し、炭素原子の番号を指定するための同じ慣例が適用できる。例として、Ｃ２〜Ｃ５アルキニル基には、エチニル（アセチレニル）、プロパルギル（プロパ−２−イニル）、１−プロピニル、ブタ−２−イニル、などが含まれる。
【００２３】
「シクロ脂肪族」は、１〜３の環を有し、それぞれの環が３〜８（好ましくは３〜６）の炭素原子を有する、飽和もしくは不飽和の、非芳香族炭化水素部分を意味する。「シクロアルキル」は、それぞれの環が飽和である、シクロ脂肪族部分を意味する。「シクロアルケニル」は、少なくとも一つの環が少なくとも一つの炭素−炭素二重結合を有する、シクロ脂肪族部分を意味する。「シクロアルキニル」は、少なくとも一つの環が少なくとも一つの炭素−炭素三重結合を有する、シクロ脂肪族部分を意味する。例として、シクロ脂肪族部分には、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロへプチル、シクロオクチル、およびアダマンチルが含まれる。好ましいシクロ脂肪族部分はシクロアルキルであり、特にシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルである。
【００２４】
「ヘテロシクロ脂肪族」は、少なくとも一つの環において、３（好ましくは１〜２）炭素までがＮ、Ｏ、またはＳ（ここで、ＮおよびＳは適宜酸化されてもよく、またＮは適宜四級化されてもよい）から独立に選択されるヘテロ原子に置換された、シクロ脂肪族部分を意味する。同様に、「ヘテロシクロアルキル」、「ヘテロシクロアルケニル」、および「ヘテロシクロアルキニル」は、それぞれ、その環の少なくとも一つが修飾された、シクロアルキル、シクロアルケニル、またはシクロアルキニル部分を意味する。典型的なヘテロシクロ脂肪族部分には、アジリジニル、アゼチジニル、１，３−ジオキサニル、オキセタニル、テトラヒドロフリル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロチオピラニルスルホン、モルホリニル、チオモルホリニル、チオモルホリニルスルホキシド、チオモルホリニルスルホン、１，３−ジオキソラニル、テトラヒドロ−１，１−ジオキソチエニル、１，４−ジオキサニル、チエタニル、などが含まれる。
【００２５】
「アルコキシ」、「アリールオキシ」、「アルキルチオ」、および「アリールチオ」は、それぞれ、−Ｏ（アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｓ（アルキル）、および−Ｓ（アリール）を意味する。例にはそれぞれ、メトキシ、フェノキシ、メチルチオ、およびフェニルチオがある。
【００２６】
「ハロゲン」または「ハロ」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
【００２７】
「アリール」は、それぞれの環が３〜７炭素原子を有し、少なくとも一つの環が芳香族である、単環式、二環式、または三環式環系を有する、炭化水素部分を意味する。その環系における環は、互いと縮合する（例えば、ナフチルにおけるように）か、または互いと結合して（例えば、ビフェニルにおけるように）もよく、そして非芳香族環と縮合または結合してもよい（例えば、インダニルまたはシクロヘキシルフェニルにおけるように）。さらなる例として、アリール部分には、これらに限定されないが、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、フェナントリル、アントラセニル、およびアセナフチルが含まれる。
【００２８】
「ヘテロアリール」は、それぞれの環が３〜７炭素原子を有し、少なくとも一つの環が芳香族環で、Ｎ、Ｏ、またはＳ（ここで、ＮおよびＳは適宜酸化されてもよく、またＮは適宜四級化されてもよい）から独立に選択されるヘテロ原子が１〜４含まれる、単環式、二環式、または三環式環系を有する部分を意味する。そのような、少なくとも一つのヘテロ原子を含む芳香族環は、別の種類の環と縮合するか（例えば、ベンゾフラニルまたはテトラヒドロイソキノリルにおけるように）、または別の種類の環と直接結合する（例えば、フェニルピリジルまたは２−シクロペンチルピリジルにおけるように）ことができる。さらなる例として、ヘテロアリール部分には、ピロリル、フラニル、チオフェニル（チエニル）、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、Ｎ−オキソピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、シンノリニル、キノザリニル、ナフチリジニル、ベンゾフラニル、インドリル、ベンゾチオフェニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、フェノチアゾリル、ベンジミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ジベンゾフラニル、カルバゾリル、ジベンゾチオフェニル、アクリジニル、などが含まれる。
【００２９】
部分が置換されてもよいと示されている（例えば、「置換もしくは無置換」または「独立して置換された」を用いて、「置換もしくは無置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル」または「独立して置換されたヘテロアリール」のように表現されている）場合に、そのような部分は、一またはそれ以上（好ましくは１〜５、より好ましくは１または２）の独立に選択された置換基を有する。当業者は、化学的に安定であり、当技術分野で公知の技術並びに本明細書で記述している方法によって合成できる化合物を提供するために、置換基が結合している部分を考慮して、置換基および置換パターンを選択することができる。
【００３０】
「アリールアルキル」、「（ヘテロシクロ脂肪族）アルキル」、「アリールアルケニル」、「アリールアルキニル」、「ビアリールアルキル」などは、例えば、ベンジル、フェネチル、Ｎ−イミダゾリルエチル、Ｎ−モルホリノエチルなどにおけるように、アルキル、アルケニル、またはアルキニル部分が開いた（open）（満たされていない（unsatisfied））原子価を伴う、場合によっては、アリール、ヘテロシクロ脂肪族、ビアリール、などの部分によって置換される、場合によっては、アルキル、アルケニル、またはアルキニル部分を意味する。逆に、「アルキルアリール」、「アルケニルシクロアルキル」などは、例えば、メチルフェニル（トリル）またはアリルシクロヘキシルにおけるように、場合によっては、アルキル、アルケニルなどの部分によって置換される、場合によっては、アリール、シクロアルキル、などの部分を意味する。「ヒドロキシアルキル」、「ハロアルキル」、「アルキルアリール」、「シアノアリール」などは、特定されている置換基（場合によっては、ヒドロキシル、ハロなど）の一またはそれ以上によって置換される、場合によっては、アルキル、アリール、などの部分を意味する。
【００３１】
例として、許容される置換基には、これらに限定されないが、アルキル（特にメチルまたはエチル）、アルケニル（特にアリル）、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、ハロ（特にフルオロ）、ハロアルキル（特にトリフルオロメチル）、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル（特にヒドロキシエチル）、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）（特に−ＯＣＦ３）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、−Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ（アルキル）、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（シクロアルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２、などが含まれる。
【００３２】
置換されている部分が脂肪族部分の場合に、好ましい置換基は、アリール、ヘテロアリール、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、−Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ（アルキル）、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（シクロアルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、および−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２である。より好ましい置換基は、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（アリール）、＝Ｏ、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、および−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２である。
【００３３】
置換されている部分がシクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、アリール、またはヘテロアリール部分の場合に、好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｏ（ハロアルキル）、−Ｏ（シクロアルキル）、−Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、−Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、アジド、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−ＯＳＯ２（アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（アルキル）、−Ｓ（アリール）、−Ｓ（シクロアルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）アルキル、−ＳＯ２（アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（アルキル）、および−ＳＯ２Ｎ（アルキル）２である。より好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、−Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＮＨ（アリール）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、および−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２である。
【００３４】
本発明のアリール基、ヘテロアリール基、ヘテロ脂肪族基、およびヘテロシクロ脂肪族基にとって好ましい置換基には、Ｃ１〜Ｃ５アルキル、Ｃ２〜Ｃ５アルケニル、Ｃ２〜Ｃ５アルキニル、ハロ（特にフルオロまたはクロロ）、Ｏ（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）、ＯＣＦ３、ＣＦ３、ＣＦ２ＣＦ３、シアノ、ニトロ、Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）、ＯＨ、Ｏ（ＣＨ２）ｍＯＨ、Ｏ（ＣＨ２）ｍＯ（Ｃ１〜Ｃ５アルキル）、およびＯ（ＣＨ２）ｍ（ハロ）が含まれる（ここで、ｍは２〜４）。
【００３５】
範囲が述べられている場合に（例えば、「Ｃ１〜Ｃ５アルキル」または「５〜１０％」におけるように）、そのような範囲にはその範囲の終点が含まれる。
【００３６】
特定の立体異性体が特に示されている場合（例えば、構造式において関連する立体中心が太線または破線の結合によって、構造式においてＥまたはＺ配置を有するために二重結合の描写によって、あるいは立体化学命名法を用いることによって示されている場合）でない限り、本発明の範囲内においてあるゆる立体異性体が、純粋な化合物並びにそれらの混合物として含まれる。特に断りがなければ、個々の鏡像異性体、ジアステレオマー、幾何異性体、および組み合わせ、並びにそれらの混合物は全て本発明によって包含されている。
【００３７】
当業者は、化合物が、本明細書で用いられる構造式に描かれたものと等しい、互変異性型（例えば、ケト型およびエノール型）、共鳴構造型、および双性イオン型を有してもよく、またその構造式がそのような互変異性型、共鳴構造型、または双性イオン型を包含することを、理解している。
【００３８】
「医薬的に許容される塩」は、医薬製剤に適した化合物の塩を意味する。化合物が一またはそれ以上の塩基性官能基を有する場合、その塩は、硫酸塩、臭化水素塩、酒石酸塩、メシル酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、酢酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、ヨウ化水素塩、硝酸塩、塩酸塩、乳酸塩、メチル硫酸塩、フマル酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、メシル酸塩、ラクトビオン酸塩、スベリン酸塩、トシル酸塩、などの酸付加塩であってもよい。化合物が一またはそれ以上の酸性部分を有する場合、その塩は、カルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、アンモニウム塩、亜鉛塩、ピペラジン塩、トロメタミン塩、リチウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、４−フェニルシクロヘキシルアミン塩、ベンザチン塩、ナトリウム塩、テトラメチルアンモニウム塩などの塩であってもよい。多形性の結晶形および溶媒和物も、本発明の範囲内において包含されている。
【００３９】
（化合物および方法）
好ましい形態において、式Ｉ中のＲ１はＨまたはＭｅである。別の好ましい形態において、式Ｉ中のＲ２はＭｅまたはＥｔである。別の好ましい形態において、式Ｉ中のＲ１はＨまたはＭｅであり、かつＲ２はＭｅまたはＥｔである。
【００４０】
別の好ましい形態において、Ｒ４およびＲ５のそれぞれは、生理的ｐＨでイオン化される官能基を欠く。
【００４１】
別の好ましい形態において、式Ｉ中のＲ１はＨ、Ｒ２はＭｅ、そしてＲ３はＨであり、式Ｉ−ａ：
【化６】
によって表される構造を有する化合物に対応する。
【００４２】
式ＩまたはＩ−ａの化合物の好ましい形態において、Ｒ５はＨである。式ＩまたはＩ−ａの化合物の、さらに好ましい形態において、Ｒ６はＨである。式ＩまたはＩ−ａの化合物の、さらに好ましい形態において、Ｒ５およびＲ６のそれぞれはＨである。
【００４３】
別の好ましい形態において、式Ｉ中で、
Ｒ４およびＲ５は、各々独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＣＨＲ７Ｒ９、または（ＣＨＲ９）ｎＲ８であるか、あるいはＲ４およびＲ５は、それらが結合している窒素と一緒になって結合して
【化７】
を形成し；並びに
Ｒ９は、各々独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ５アルキルである。
【００４４】
式ＩまたはＩ−ａ中の、好ましいＮＲ４Ｒ５基には：
【化８】
【化９】
が含まれる。
【００４５】
本発明の化合物の例を、表Ａで一覧にする。
【表１−１】
【表１−２】
【表１−３】
【００４６】
これらの中で、好ましい化合物はＡ−１、Ａ−２、Ａ−４、Ａ−１５、Ａ−１６、Ａ−１７、Ａ−１９、およびＡ−２１である。それらの構造の全体を、以下：
【化１０】
【化１１】
に示す。
【００４７】
式Ｉ−ａの化合物の、別の好ましい形態において、ＮＲ４Ｒ５部分にはトリフルオロメチル置換ピリジル環が含まれ、またＲ６はＨである。そのような化合物の具体例には：
【化１２】
が含まれる。
【００４８】
別の好ましい形態において、本発明の化合物は式Ａ−４：
【化１３】
の構造を有する。
【００４９】
本発明の化合物を製造するための１つ目の方法を、図１に示す。Ｃ２４アルコールＩＩ（ここでＲ１、Ｒ２、およびＲ３は上で定義されている）から出発し、イソシアネートＯ＝Ｃ＝ＮＲ４とのカルバモイル化により、化合物Ｉ−ｂを得る（すなわち、化合物ＩでＲ５およびＲ６がいずれもＨ）。Ｃ２４の第一アルコール基はＣ１９の第二アルコール基よりも反応性に富み、したがって基本的にＣ２４だけでカルバモイル化が起こり、それは４−（ジメチルアミノ）ピリジン（「ＤＭＡＰ」）が加えられた、より強い条件（more forcing conditions）下においても同じである。図１の方法は、イソシアネートＯ＝Ｃ＝ＮＲ４が市販のものであり、もっとも実用的である。
【００５０】
２つ目の方法を図２に示す。図１の方法と異なり、この方法では、Ｒ６がＨ（すなわち、化合物Ｉ−ｃ）またはＣ（＝Ｏ）ＮＲ４Ｒ５（すなわち、化合物Ｉ−ｄ）である化合物Ｉを得ることができる。さらに図１の方法と異なり、この方法では、Ｒ５がＨでない化合物を得ることもできる。再びＣ２４アルコールＩＩから出発し、カルボニルジイミダゾール（１.０〜１.２等量）と反応させて、モノアシルイミダゾールＩＩＩ−ａを得る。しかし、より多くのカルボニルジイミダゾール（約２.５等量）を用いると、ビスアシルイミダゾール化合物ＩＩＩ−ｂが形成される。アミンＨＮＲ４Ｒ５と、アシルイミダゾールＩＩＩ−ａまたはＩＩＩ−ｂを反応させて、それぞれ、化合物Ｉ−ｃまたはＩ−ｄを得る。
【００５１】
３つ目の方法を図３に示す。この方法は、式Ｉ中のＮＲ４Ｒ５部分（Ｃ２４またはＣ１９のいずれとの結合でもよい）がＮＨ２である場合に適当である。Ｃ２４アルコールＩＩをイソシアン酸トリクロロアセチル（約１.７５等量）と反応させ、続いて中性アルミナで処理して、Ｉ−ｅ（すなわち化合物Ｉで、Ｒ６がＨ、ＮＲ４Ｒ５がＮＨ２）およびＩ−ｆ（すなわち化合物Ｉで、Ｒ６がＮＲ４Ｒ５、ＮＲ４Ｒ５そのそれぞれがＮＨ２）の化合物の混合物（約１：１）を得た。しかし、より多くのイソシアン酸トリクロロアセチル（約５等量）を用いると、化合物Ｉ−fのみが得られた。
【００５２】
適したＣ２４アルコールＩＩはレプトルスタチン（かつてはＳ−５９９１７ａとして知られていた）であり、それは微生物のストレプトマイセスｓｐ．ＳＡＭ１５９５によって生合成される。その生成、単離、解析は、Abe et al., J. Antibiotics 1993, 46(5), 735-40; Abe et al., JP 05-039283 (1993) (対応するケミカル・アブストラクト・ナンバーは、１１９：１３７５２４); および Abe et al., J. Antibiotics 1993, 46(5), 728-734 に記述されており；それらの開示物は引例として援用されている。
【化１４】
【００５３】
別の適したＣ２４アルコールＩＩはレダクトレプトマイシンＡであり、その製造およびストレプトマイセスｓｐ．ＭＪ１３２−ＮＦ５培養からの単離は、Hosokawa et al., J. Antibiotics 1993, 46(4), 676-8、に記述されており、その開示物は引例として援用されている。構造的に、レダクトレプトマイシンＡは、Ｃ２４カルボン酸基がアルコールに還元されたレプトマイシンＡと一致する。
【化１５】
【００５４】
Ｃ２４カルボン酸基が還元されたレプトマイシンＢ誘導体は、レダクトレプトマイシンＡと類似し、それは用いることのできる、さらに別の適したＣ２４アルコールＩＩである。その製造は、Kobayashi et al., Tetrahedron Lett. 1998, 39(45), 8291-8294 に記述されており、その開示物は引例として援用されている。
【化１６】
【００５５】
他の、天然に存在するレプトマイシンファミリーのメンバー（例えば、カズサマイシンおよびアングイノマイシン）におけるＣ２４カルボン酸基の還元によって、さらに他のＣ２４アルコールＩＩを製造できることも、当業者は理解している。
【００５６】
別の形態において、式（ＩＶ）：
【化１７】
によって表される構造を有するカルバメート化合物が提供されている。
【００５７】
理論によって束縛されるものではないが、本発明の化合物は、標的癌細胞においてＣＲＭ−１媒介性の核外輸送プロセスを阻害するＬＭＢと類似の機構により働き、したがって細胞周期停止および／またはアポトーシスも含むと考えられる。ＬＭＢの２，３−デヒドロ−δ−バレロラクトン部分は、マイケル反応受容体である。ＬＭＢは、酵母ＣＲＭ１のシステイン５２９と一緒にマイケル付加物を形成することによって、ＣＲＭ１を阻害することが示されている。Kudo et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. (USA) 1999, 96(3), 9112-9117（ヒトＣＲＭ１のシステインに対応するのは、５２８の位置）。ラトジャドン（Ratjadone）というレプトマイシンファミリーの別のメンバーは、同じ機構によってＣＲＭ１を阻害することが示されている。Meissner et al., FEBS Lett. 2004, 576, 27-30.
【化１８】
【００５８】
本発明の化合物はマイケル受容体ファルマコフォアを保有し、したがって同じ阻害機構によって機能することが期待される。
【００５９】
多くの癌細胞は、アポトーシス誘導性の癌抑制プロテインｐ５３の機能の低下をもらたらす突然変異を有する（Vousden et al., Nat. Rev. Cancer 2002, 2, 594-504）。そのような癌の例には、前立腺癌およびヒト・パピローマウイルス（ＨＰＶ）に伴う子宮頸癌が含まれる。ＬＭＢは、子宮頸癌細胞核において、ｐ５３プロテインの蓄積を引き起こすことが示されている（Lane et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. (USA) 2000, 97(15), 8501-8506）。ＬＭＢは、核でｐ５３を捕捉し（trap）、前立腺癌細胞でアポトーシスを誘導することが示されいる。したがって、前立腺癌細胞はＬＭＢに対して感受性が高い（Peehl et al., Prostate 2003, 54, 258-267）。
【００６０】
適当な癌の種類に対して、本発明の化合物は他の抗癌剤と一緒に相乗的に用いることができ、特にチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、イマチニブ（そのメシレートはグリベック（登録商標）という商標名で知られている））と一緒にである。いくつかの癌（例えば、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ））は、融合プロテインＢｃｒ−Ａｂｌの発現によって引き起こされる特徴を有する。通常、Ｂｃｒ−Ａｂｌは核内へ輸送されないが、Ｂｃｒ−Ａｂｌ／イマチニブ複合体は核内へ輸送される。ＬＭＢも存在するなら、それはＢｃｒ−Ａｂｌが核外へ輸送されるのを妨げる。核内に閉じ込められたＢｃｒ−Ａｂｌは、イマチニブとの可逆的複合体から解離することによりアポトーシスを引き起こし、結果的にＢｃｒ−Ａｂｌ陽性細胞は死ぬ。例えば、 Vigneri et al., Nature Medicine 2001, 7, 228-234; Wang et al., US 2003/0162740 A1 (2003) を参照。従って、イマチニブおよび本発明の化合物の組み合わせは、Ｂｃｒ−Ａｂｌ陽性癌細胞を相乗的に攻撃するための機構を提供することができる。
【００６１】
Santi et al., US 2005/0203174 A1 (2005)（その開示物は本明細書で引用として援用している）では、様々な併用療法（ＬＭＢおよび第２の（second）抗癌剤が含まれる）を説明している。作用の機構がおそらく共通であることを考えれば、そこに開示されている併用療法は、ＬＭＢの代わりに本発明の化合物を用いて行うことができると予想される。
【００６２】
従って、本発明の化合物は、プロテイン（例えば、ｐ５３、ｐ７３、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＳＴＡＴ１、（ｉ）ＡＤＡＲ１、Ｒｅｖ、および細胞核からのアクチン）の核外輸送を阻害するために用いることができ、それは、上のようなプロテインに関してＣＲＭ１と共有結合付加体を形成し、ＣＲＭ１媒介輸送プロセスを干渉することによって行う。ある形態において、阻害されるプロテインはｐ５３である。別の形態において、阻害されるプロテインはＢｃｒ−Ａｂｌである。細胞型および標的プロテインに依存して若干のばらつきが予想されるが、一般に、用いられる阻害量は０.０３〜７４０ｎＭの範囲内であり、好ましくは０.３〜１００ｎＭ、より好ましくは０.３〜２０ｎＭである。
【００６３】
本発明の化合物は、これらに限定されないが、過剰増殖性疾患：例えば、頭頸部癌（例えば、頭部腫瘍、頚部腫瘍、鼻腔腫瘍、副鼻腔腫瘍、鼻咽頭腫瘍、口腔腫瘍、中咽頭腫瘍、喉頭腫瘍、下咽頭腫瘍、唾液腺腫瘍、および傍神経節腫）；肝癌および胆道系（biliary tree）癌（特に肝細胞癌）；腸癌（特に結腸直腸癌）；卵巣癌；小細胞および非小細胞肺癌；乳癌；肉腫（例えば、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、胎児性横紋筋肉腫、平滑筋肉腫、神経線維肉腫、骨肉腫、滑膜肉腫、脂肪肉腫、および胞状軟部肉腫；白血病（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ））；中枢神経系の腫瘍（特に脳腫瘍）；リンパ腫（例えば、ホジキンリンパ腫、リンパ球様形質（lymphoplasmacytoid）リンパ腫、濾胞性リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、Ｂ系列大細胞（B−lineage large cell）リンパ腫、バーキットリンパ腫、およびＴ細胞未分化大細胞リンパ腫）のような疾患を治療するために用いることができる。臨床的には、本明細書で記述されている方法の実践および組成物の使用は、癌性増殖における大きさもしくは数の低下、および／または（適用される場合）随伴症状における低下をもたらす。病理学的には、本明細書で記述されている方法の実行および組成物の使用は、病理学的に関連性のある反応（例えば、癌細胞増殖の抑制、癌または腫瘍の大きさの低下、さらなる転移の予防、および腫瘍血管新生の阻害）を生み出す。そのような疾患の治療方法には、患者に、独創的な組み合わせの治療上の有効量を投与することが含まれる。その方法は、必要であれば繰り返してもよい。特に、癌は前立腺癌、白血病、肺癌、乳癌、神経芽細胞腫、腎癌、子宮頸癌（特にヒト・パピローマウイルス（ＨＰＶ）が係わる子宮頸癌）、および結腸癌であり得る。
【００６４】
細胞の過剰増殖を特徴とする非癌性疾患もまた、本発明の化合物によって治療できる。そのような疾患の実例には、これらに限定されないが：萎縮性胃炎、炎症性溶血性貧血、移植片拒絶、炎症性好中球減少、水疱性類天疱瘡、セリアック病、脱髄性神経障害、皮膚筋炎、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎およびクローン病）、多発性硬化症、心筋炎、筋炎、鼻ポリープ、慢性副鼻腔炎、尋常性天疱瘡、原発性糸球体腎炎、乾癬、術後の癒着、狭窄または再狭窄、強膜炎、強皮症、湿疹（例えば、アトピー性皮膚炎、刺激性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎）、歯周病（すなわち、歯周炎）、多発性嚢胞腎、および１型糖尿病が含まれる。他の例には、血管炎（例えば、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎、高安動脈炎）、結節性多発動脈炎、アレルギー性血管炎および肉芽腫症（チャーグ−ストラウス病（Churg−Strauss disease））、多発性血管炎重複症候群、過敏性血管炎（ヘノッホ・シェーンライン紫斑病）、血清病、薬物性血管炎、感染性血管炎、腫瘍性血管炎、結合組織病と関連する血管炎、補体系の先天性欠損に関連する血管炎、ウェゲナー（Wegener’s）肉芽腫症、川崎病、中枢神経系の血管炎、バージャー病および全身性硬化症）；胃腸菅疾患（例えば、膵炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、潰瘍性直腸炎、原発性硬化性胆管炎、特発性が含まれるいかなる原因の良性狭窄（例えば、胆管、食道、十二指腸、小腸または大腸の狭窄）；気道疾患（例えば、喘息、過敏性肺炎、石綿症、珪肺症、並びに塵肺症、慢性気管支炎および慢性閉塞性気道疾患の他の形態）；鼻涙管疾患（例えば、特発性が含まれるいかなる原因の狭窄）；および耳菅疾患（例えば、特発性が含まれるいかなる原因の狭窄）が含まれる。特に、非癌性の症状は足底疣贅、心臓肥大、または癌悪液質があり得る。
【００６５】
本発明の化合物は、他の抗癌剤または細胞毒性薬と組み合わせて投与することができ、それには、アルキル化剤、血管形成阻害剤、代謝拮抗剤、ＤＮＡ切断剤、ＤＮＡ架橋剤、ＤＮＡ挿入剤、ＤＮＡマイナー・グルーブ（minor groove）結合剤、エンジイン、熱ショックプロテイン９０阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、免疫調節剤、微小管安定剤、ヌクレオシド（プリンまたはピリミジン）類似体、核外輸送阻害剤、プロテアソーム阻害剤、トポイソメラーゼ（ＩまたはＩＩ）阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、およびセリン／スレオニンキナーゼ阻害剤が含まれる。特定の抗癌剤または細胞毒性薬には、β−ラパコン、アンサミトシン（ansamitocin）Ｐ３、アウリスタチン、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カリスタチン（callistatin）Ａ、カンプトセシン、カペシタビン、ＣＣ−１０６５、シスプラチン、クリプトフィシン、ダウノルビシン、ジソラゾール、ドセタキセル、ドキソルビシン、デュオカルマイシン、ダイネミシン（dynemycin）Ａ、エポチロン、エトポシド、フロクスウリジン、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、ゲフィチニブ、ゲルダナマイシン、１７−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７−ＡＡＧ）、１７−（２−ジメチルアミノエチル）アミノ１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７−ＤＭＡＧ）、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、イマチニブ、インターフェロン、インターロイキン、イリノテカン、マイタンシン、メトトレキサート、マイトマイシンＣ、オキサリプラチン、パクリタキセル、スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、チオテパ、トポテカン、トリコスタチンＡ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、レナリドマイド（レブリミド（登録商標））、ベバシズマブ（アバスチン（登録商標））、トラスツズマブ（ハーセプチン（登録商標））、およびセツキシマブ（アービタックス（Erbitux）（登録商標））が含まれる。
【００６６】
好ましくは、本発明の化合物は、精製および単離された形で提供され、例えばカラムクロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー、再結晶、または他の精製技術を用いる。本発明の化合物の特定の立体異性体が示されている場合、そのような立体異性体には実質的に他の立体異性体が含まれないことが好ましい。
【００６７】
本発明の化合物は、本発明の化合物および賦形剤を含む医薬製剤として用いてもよい。用いられ得る賦形剤には、担体、界面活性剤、増粘剤または乳化剤、固体結合剤、分散補助剤または攪拌補助剤、可溶化剤、着色剤、香味剤、コーティング剤、崩壊剤、潤滑剤、甘味剤、防腐剤、等張剤、およびそれの組み合わせが含まれる。適当な賦形剤の選択および使用は、Gennaro, ed., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed. (Lippincott Williams & Wilkins 2003) に示されており、その開示物は本明細書で引用として援用している。
【００６８】
組成物は、固体、半固体、または液体の形態のような、いずれかの適当な形であり得る。一般に、医薬品は、有機もしくは無機で、外部からの、腸内への、もしくは非経口の投与（application）に適した担体または賦形剤と混合した、活性成分として本発明の化合物の一またはそれ以上を含む。該活性成分は、例えば、通常の非毒性で、錠剤、ペレット、カプセル、坐剤、ペッサリー、溶液、乳液、懸濁液、および使用に適した他の任意の形にとって医薬的に許容される担体を用いて作られ得る。用いることができる担体には、水、グルコース、ラクトース、アラビア・ゴム、ゼラチン、マンニトール、デンプン糊、三ケイ酸マグネシウム、タルク、コーンスターチ、ケラチン、コロイド状シリカ、ジャガイモデンプン、尿素、および製造に用いるのに適した他の担体が、固体、半固体、または液体の形で、含まれる。また、補助安定剤、増粘剤、および着色剤、並びに芳香剤を用いてもよい。投与の好ましい様式には、静脈内に、および特定の徴候（子宮頸癌、膀胱癌、または足底疣贅）の場合には局所的に投与することが含まれる。
【００６９】
適用できる場合において、本発明の化合物はマイクロカプセルおよびナノ粒子として製造してもよい。一般的な手順は、例えば、Bosch et al., US 5,510,118 (1996); De Castro, US 5,534,270 (1996); および Bagchi et al., US 5,662,883 (1997), の中で説明されており、それらは本明細書で引用により全て援用されている。体積に対する面積の比率を増加させることで、これらの剤形で化合物の経口デリバリーができ、そうすることによってはじめて経口投与が可能となった。
【００７０】
本発明の化合物の投与量レベルは、約０.１ｍｇ〜約１００ｍｇ／体重ｋｇ／日、好ましくは約１ｍｇ〜約５０ｍｇ／体重ｋｇ／日の範囲である。より好ましくは、投与量レベルは約１ｍｇ〜約２０ｍｇ／体重ｋｇ／日であり、それは患者を７０ｋｇと仮定すれば、患者一人あたり７０ｍｇ〜１４００ｍｇ／日に相当する。本発明の化合物は断続的に（すなわち、半週、週、半月、月に１回の間隔で）投与すればよい。
【００７１】
担体物質と組み合わせて一つの剤形を製造し得る活性成分の量は、治療される宿主および投与の特定の様式に依存して変わる。例えば、ヒトの経口投与のために意図される剤形は担体物質を含むことができ、それは組成物総量の約５％〜約９５％の間で変わり得る。投与単位形態は、一般に活性成分の約５ｍｇ〜約５００ｍｇを含む。
【００７２】
しかしながら、どんな特定の患者における具体的な投与レベルも、様々な要素に依存することが理解される。これらの要素には、用いられる特定の化合物の活性；患者の年齢、体重、全体的な健康、性別、および食事；投与の時間およびルート、並びに薬剤の排出の割合；治療において混合薬が用いられているか否か；そして、治療がされている、特定の疾患または症状の重症度が含まれる。
【００７３】
本発明の実践（practice）は、以下の実施例を参照することによってさらに理解することができ、それらは実例として提供されるのであって、限定のために提供されるのではない。
【００７４】
実施例１：レプトルスタチン
ストレプトマイセスｓｐ．菌株ＳＡＭ１５９５を、−８０℃のバイアル内で、グリセロール（３０％、ｖ／ｖ）に貯蔵した。一つのバイアルを解凍し（thawed）、その内容物をＬ２培地（大豆油、６０ｍＬ／Ｌ； ベーシック酵母（basic yeast）、３０ｇ／Ｌ；ＫＣｌ、３ｇ／Ｌ；Ｋ２ＨＰＯ４、０.２ｇ／Ｌ；ＣａＣＯ３、３ｇ／Ｌ）が５０ｍＬ含まれる、バッフル付２５０ｍＬの三角振盪フラスコに移した。フラスコを、２４℃で４日間、２インチのスロー・インキュベーター（throw incubator）内で培養した。フラスコの中身を、Ｌ２培地（５００ｍＬ）が含まれる、２.８Ｌのフェルンバッハ・フラスコ（Fernbach flask）へ移した。フェルンバッハ・フラスコ（Fernbach flask）を、２４℃で２日間、２インチのスロー・インキュベーター（throw incubator）内で培養した。二次的（secondary）種培養液（２００ｍＬ）は、バイオリアクター内で、Ｌ２培地の４Ｌを播種するために用いた。培養条件は２４℃、通気速度を０.５ｖ／ｖ／ｍ、はじめに６００ｒｐｍに設定された攪拌カスケード（stir cascade）を用いて溶存酸素圧を飽和状態の３０％、そしてｐＨはＨ２ＳＯ４（２.５Ｎ）またはＮａＯＨ（２.５Ｎ）を用いて７.０に、調節した。培養して７日後、培養液（３Ｌ）を、１００％メタノール溶液（３Ｌ）で終夜抽出した。抽出混合物をブフナー漏斗で濾過し、濾過ケーキ（filter cake）を５０：５０＝メタノール：水（２００ｍＬ）で洗浄した。精製プロセスに用いられた全ての溶媒には、０.１％（ｖ／ｖ）酢酸が含まれていた。レプトルスタチンをメタノール抽出物から、低圧Ｃ１８クロマトグラフィーによって精製した。全回収率が３２％で、レプトルスタチンを黄色の油状物として得た（総量１１５ｍｇ）。
【００７５】
実施例２：２４−アシルイミダゾールレプトルスタチン
この実施例では、代表的なＣ２４アルコールＩＩとしてレプトルスタチンを用いて、図２の反応式によるモノアシルイミダゾール化合物ＩＩＩ−ａの製造を説明する。
【００７６】
１，１’−カルボニルジイミダゾール（５４ｍｇ、０.３３３３ｍｍｏｌ、１.０１ｅｑ）を、レプトルスタチン（１６４ｍｇ、０.３２９３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥アセトニトリル溶液（１ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で２．５時間攪拌し、溶媒を取り除いた。生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（１０〜５０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント)により精製し、２４−アシルイミダゾールレプトルスタチンを得た（１８２ｍｇ）。MS (m/z): C35H48N2O6の計算値 592.765 ;実験値 615.427 (M+Na+).
【化１９】
【００７７】
実施例３：１９，２４−ビスアシルイミダゾールレプトルスタチン
この実施例では、代表的なＣ２４アルコールＩＩとしてレプトルスタチンを用いて、図２の反応式によるビスアシルイミダゾール化合物ＩＩＩ−ｂの製造を説明する。
【００７８】
１，１’−カルボニルジイミダゾール（１２７ｍｇ、０.７８４０ｍｍｏｌ、２.４ｅｑ）を、レプトルスタチン（１６３ｍｇ、０.３２７３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥アセトニトリル溶液（３ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で終夜攪拌し、溶媒を取り除いた。生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（１０〜５０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント)により精製し、１９，２４−ビスアシルイミダゾールレプトルスタチンを得た（１２８ｍｇ）。MS (m/z): C39H50N4O7の計算値 686.4 ;実験値 687.5 (M+H+), 709.5 (M+Na+).
【化２０】
【００７９】
実施例３：化合物Ａ−１
この実施例では、図１の反応式に従って化合物Ａ−１の合成を説明する。
【００８０】
ベンジルイソシアネート（１９２μＬ、１.５５６２ｍｍｏｌ、２.４８ｅｑ）およびＤＭＡＰ（１１５ｍｇ）を、レプトルスタチン（３１２ｍｇ、０.６２６５ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２溶液（５ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で２．５時間攪拌し、溶媒を取り除いた。生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（１０〜５０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント)により精製し、続いてＣ−１８逆相ＭＰＬＣ（２０〜１００％アセトニトリル水溶液グラジエント）を行い、化合物Ａ−１を得た（２７９ｍｇ）。MS (m/z): C39H53NO6の計算値 631.4 ;実験値 654.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.42, 164.08, 156.72, 144.88, 139.94, 139.00, 138.63, 136.24, 136.34, 130.75, 129.45, 128.57, 128.33, 127.70, 127.41, 127.34, 125.40, 121.50, 121.06, 78.65, 74.09, 61.67, 46.71, 45.61, 44.99, 44.01, 40.70, 33.12, 32.25, 30.01, 20.70, 20.34, 16.16, 15.98, 13.73, 13.06, 12.57. 化合物Ａ−１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図４に示す。
【００８１】
実施例４：化合物Ａ−２
これは、図１の反応式による合成の別の例である。
【００８２】
イソシアン酸メチル（６６μＬ、１.１００ｍｍｏｌ、２.５ｅｑ）およびＤＭＡＰ（４０ｍｇ）を、レプトルスタチン（２１９ｍｇ、０.４３９８ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２溶液（５ｍＬ）に加えた。反応混合物を窒素下の室温で４時間攪拌し、溶媒を取り除いた。生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（５〜４０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント)により精製し、続いてＣ−１８逆相ＭＰＬＣ（２０〜１００％アセトニトリル水溶液グラジエント）を行い、化合物Ａ−２を得た（１８５ｍｇ）。MS (m/z): C33H49NO6の計算値 555.4 ;実験値 578.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.54, 164.03, 157.29, 144.70, 139.87, 139.05, 136.29, 135.34, 130.81, 129.47, 128.34, 127.75, 125.40, 121.65, 121.22, 78.66, 74.19, 61.52, 46.49, 45.62, 43.95, 40.73, 33.10, 32.28, 30.08, 27.54, 20.72, 20.36, 16.15, 15.99, 13.92, 13.08, 12.29. 化合物Ａ−２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図５に示す。
【００８３】
実施例５：化合物Ａ−３およびＡ−４（混合物）
この実施例では、図３の反応式に従って、化合物Ａ−３およびＡ−４の混合物の合成を説明する。
【００８４】
トリクロロアセチルイソシアネート（５μＬ、０.０４２０４ｍｍｏｌ、１.７４ｅｑ）を、レプトルスタチン（１２ｍｇ、０.０２４１ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２溶液（１ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌し、次いで中性Ａｌ２Ｏ３クロマトグラフィーカラムに直接乗せた。４時間後、生成物をアセトンで溶離した。溶媒を蒸発させ、生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（５〜６０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント）により精製し、化合物Ａ−３（６ｍｇ）および化合物Ａ−４（６ｍｇ）(MS (m/z): C33H48N2O7の計算値 584.346.340 ;実験値 607.392 (M+Na+))を得た。化合物Ａ−３の MS (m/z) : C32H47NO6の計算値 541.3 ;実験値 564.4 (M+Na+). 化合物Ａ−３の 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.54, 164.05, 156.87, 144.71, 140.25, 139.05, 136.30, 135.34, 130.82, 129.48, 128.33, 127.77, 125.39, 121.65, 120.82, 78.66, 74.19, 61.81, 46.49, 45.63, 43.94, 40.73, 33.09, 32.28, 30.08, 20.72, 20.36, 16.14, 16.00, 13.93, 13.09, 12.28. 化合物Ａ−３の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図６に示す。化合物Ａ−４に関する分析の詳細は、次の実施例を参照。
【００８５】
実施例６：化合物Ａ−４
この実施例では、限られた量のトリクロロアセチルイソシアネートを用いて、図１の反応式による化合物Ａ−４の合成を説明する。
【００８６】
トリクロロアセチルイソシアネート（７３.６μＬ、０.６１８９ｍｍｏｌ、５ｅｑ）を、レプトルスタチン（７４ｍｇ、０.１２３７ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２溶液（２ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌し、次いで中性Ａｌ２Ｏ３クロマトグラフィーカラムに直接乗せた。４時間後、生成物をアセトンで溶離した。溶媒を蒸発させ、生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（５〜６０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント）により精製し、化合物Ａ−４を得た（５５ｍｇ）。 MS (m/z): C33H48N2O7の計算値 584.4 ;実験値 607.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 211.89 (C17), 164.16 (C1), 157.25, 157.13, 145.02 (C3), 139.36 (22), 139.05 (C9), 136.25 (C14), 135.29 (C13), 130.89 (C7), 129.52 (C8), 128.53 (C15), 127.83 (C12), 125.36 (C6), 121.48 (C2), 121.05 (C23), 78.94 (C5), 76.64 (C19), 61.78 (C24), 46.78 (C18), 45.45 (C16), 44.38 (C21), 40.77 (C11), 32.79 (C20), 32.54 (C10), 30.11 (C4), 20.87 (10Me), 20.34 (8Me), 16.05 (16Me), 15.91 (22Me), 14.07 (18Me), 13.13 (14Me), 12.82 (20Me). 化合物Ａ−３の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図６に示す。
【００８７】
化合物Ａ−４は、以下のようにも合成できる：レプトルスタチン（１７.７８ｇ、３５.７０ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２溶液（３６０ｍＬ）に、トリクロロアセチルイソシアネート（１０.５７ｍＬ、８９.２５ｍｍｏｌ、２．５ｅｑ）を加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌した。ＣＨ２Ｃｌ２をロータリーエバポレーターで除去し、メタノール（３６０ｍＬ）を加え、続いてＮａＨＣＯ３（８９g）を加えた。反応混合物を室温で２．５時間攪拌した。固形物を濾過により除去し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。生成物をシリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（５〜６０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント)により精製し、化合物Ａ−４を得た（１６.５ｇ）。
【００８８】
実施例７：化合物Ａ−５
化合物Ａ−５を図２の反応式に従い、中間体ＩＩＩ−ａを経由して合成した。
【００８９】
Ｎ−（２−アミノエチル）ピロリジン（６.８μＬ、０.０５３７４ｍｍｏｌ、４.４ｅｑ）および酢酸（３μＬ、０.０５３ｍｍｏｌ、４.３ｅｑ）を、２４−アシルイミダゾールレプトルスタチン（７.３ｍｇ、０.０１２３３ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥テトラヒドロフラン溶液（１.５ｍＬ）に加えた。反応混合物を、室温で５時間攪拌した。反応混合物をシリカ・ゲル・クロマトグラフィーカラムに直接乗せて精製し（２〜６％メタノールのＣＨ２Ｃｌ２溶液グラジエント）、化合物Ａ−５を得た（７.１ｍｇ）。MS (m/z): C38H58N2O6の計算値 638.4 ;実験値 639.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.52, 164.04, 156.78, 144.73, 139.76, 139.05, 136.27, 135.35, 130.80, 129.46, 128.34, 127.73, 125.40, 121.63, 121.20, 78.67, 74.07, 61.63, 55.22, 54.03, 46.54, 45.62, 43.95, 40.72, 38.86, 33.08, 32.28, 30.07, 29.68, 20.71, 20.36, 16.16, 15.98, 13.91, 13.08, 12.36. 化合物Ａ−５の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図８に示す。
【００９０】
以下の実施例では、先の実施例と同じように行われた合成は、単にそう述べて簡潔化する。特に断りがなければ、そのような合成で、遊離塩基または塩酸塩として用いるアミンは市販品として入手可能であった。塩酸塩として得た場合、遊離塩基は、塩酸塩をメタノール溶液中に溶解し、過剰の固形炭酸ナトリウムで処理し、濾過し、ロータリーエバポレーターによってメタノールを除去し、高減圧下で乾燥することにより生成した。
【００９１】
実施例８：化合物Ａ−６
化合物Ａ−６を、化合物Ａ−５と同じように製造したが、但し２−（ピリジン−３−イル）エタンアミンを用いた。MS (m/z): C39H54N2O6の計算値 646.4 ;実験値 647.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.44, 164.02, 156.52, 150.14, 147.85, 144.69, 140.12, 139.05, 136.38, 136.24 135.39, 134.33, 130.77, 129.46, 128.340, 127.68, 125.41, 123.54, 121.65, 121.00, 78.64, 73.54, 61.54, 46.89, 45.70, 44.05, 41.84, 40.73, 33.37, 33.06, 32.28, 30.08, 20.70, 20.37, 16.18, 15.92, 13.88, 13.09, 12.82. 化合物Ａ−６の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図９に示す。
【００９２】
実施例９：化合物Ａ−７
化合物Ａ−７を、化合物Ａ−５と同じように製造したが、但し２−モルホリノエタンアミンを用いた。MS (m/z): C38H58N2O7の計算値 654.4 ;実験値 655.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.45, 164.02, 156.62, 144.70, 139.95, 139.03, 136.29, 135.34, 130.81, 129.48, 128.33, 127.75, 125.40, 121.65, 121.15, 78.65, 74.11, 66.88, 61.55, 57.44, 53.32, 46.56, 45.61, 43.98, 40.73, 37.19, 33.10, 32.29, 30.08, 20.72, 20.37, 16.17, 16.01, 13.86, 13.08, 12.41. 化合物Ａ−７の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１０に示す。
【００９３】
実施例１０：化合物Ａ−８
化合物Ａ−８を、化合物Ａ−５と同じように製造したが、但しＮ１，Ｎ１−ジエチルエタン−１，２−ジアミンを用いた。MS (m/z): C38H60N2O6の計算値 640.5 ;実験値 641.5(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.52, 164.02, 156.74, 144.70, 139.70, 139.04, 136.27, 135.35, 130.80, 129.46, 128.34, 127.74, 125.40, 121.45, 121.31, 78.66, 74.18, 61.46, 51.87, 46.75, 46.50, 45.61, 43.96, 40.72, 38.41, 33.09, 32.28, 30.07, 20.71, 20.36, 16.17, 15.98, 13.91, 13.08, 12.30, 11.51. 化合物Ａ−８の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１１に示す。
【００９４】
実施例１１：化合物Ａ−９
２−（４−フルオロフェニル）エチルアミン（１３μＬ、０.０９９２３ｍｍｏｌ、４.０２ｅｑ）および酢酸（３μＬ、０.０５３ｍｍｏｌ、２.１５ｅｑ）を、２４−アシルイミダゾールレプトルスタチン（１４.６ｍｇ、０.０２４６６ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥テトラヒドロフラン溶液（１ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物をシリカ・ゲル・クロマトグラフィーカラム（５〜４０％アセトンのヘキサン溶液グラジエント）に直接乗せて精製し、化合物Ａ−９を得た（９.６ｍｇ）。MS (m/z): C40H54NO6の計算値 663.4 ;実験値 686.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.49, 164.03, 162.84, 160.41, 156.55, 144.71, 140.00, 139.03, 136.29, 135.34, 134.41, 130.80, 130.20, 130.13, 129.48, 128.33, 127.75, 125.40, 121.64, 121.08, 115.48, 115.26, 78.65, 74.16, 61.54, 46.51, 45.61, 43.94, 42.23, 40.73, 36.63, 35.38, 33.09, 32.28, 30.07, 20.72, 20.36, 16.16, 16.00, 13.87, 13.08, 12.34. 化合物Ａ−９の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１２に示す。
【００９５】
実施例１２：化合物Ａ−１０
化合物Ａ−１０を、化合物Ａ−９と同じように製造したが、但し２−メトキシエタンアミンを用いた。MS (m/z): C35H53NO7の計算値 599.4 ;実験値 622.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.52, 164.02, 156.67, 144.69, 139.88, 139.04, 136.28, 135.34, 130.81, 129.47, 128.34, 127.75, 125.40, 121.66, 121.15, 78.66, 74.19, 71.43, 61.57, 58.74, 46.49, 45.61, 43.94, 40.73, 33.09, 32.29, 30.07, 29.68, 20.71, 20.36, 16.16, 15.99, 13.90, 13.08, 12.28. 化合物Ａ−１０の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１３に示す。
【００９６】
実施例１３：化合物Ａ−１１
化合物Ａ−１１を、化合物Ａ−９と同じように製造したが、但し２−（３，５−ジメチルイソオキサゾール−４−イル）エタンアミンを用いた。MS (m/z): C39H56N2O7の計算値 664.4 ;実験値 665.4(M+H+), 687.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.45, 165.85, 164.05, 159.62, 156.58, 144.73, 140.12, 139.03, 136.28, 135.35, 130.80, 129.49, 128.34, 127.75, 125.40, 121.63, 120.95, 110.57, 78.65, 74.08, 61.62, 46.58, 45.62, 43.95, 40.73, 40.61, 33.08, 32.28, 30.08, 22.28, 20.72, 20.36, 16.16, 15.98, 13.86, 13.09, 12.42, 10.90, 10.13. 化合物Ａ−１１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１４に示す。
【００９７】
実施例１４：化合物Ａ−１２
化合物Ａ−１２を、化合物Ａ−９と同じように製造したが、但し（４−フルオロフェニル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): C39H52FNO6の計算値 649.4 ;実験値 672.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.44, 164.09, 163.30, 160.86, 156.69, 144.84, 140.06, 139.02, 136.26, 135.33, 134.46, 130.78, 129.46, 129.15, 129.07, 128.32, 127.73, 125.38, 121.53, 120.98, 115.48, 115.26, 78.66, 74.08, 61.73, 46.66, 45.61, 44.28, 43.98, 40.71, 33.11, 32.26, 30.03, 20.70, 20.34, 16.15, 15.98, 13.76, 13.06, 12.51. 化合物Ａ−１２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを、図１５に示す。
【００９８】
実施例１５：化合物Ａ−１３
化合物Ａ−１３を、化合物Ａ−５と同じような方法で製造したが、但し１−（２−アミノエチル）ピロリジン−２−オンを用いた。MS (m/z): 675.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.42, 176.08, 164.03, 156.88, 144.73, 139.77, 139.01, 136.21, 135.35, 130.74, 129.43, 128.36, 127.66, 125.38, 121.59, 121.12, 78.63, 73.69, 61.55, 47.59, 46.77, 45.61, 44.03, 42.51, 40.69, 38.95, 33.00, 32.24, 30.84, 20.67, 20.33, 18.03, 16.03, 16.15, 15.87, 13.78, 13.05, 12.68.
【００９９】
実施例１６：化合物Ａ−１４
２４−アシルイミダゾリドレプトルスタチン（１９０ｍｇ、０.３２０４ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の乾燥テトラヒドロフラン溶液（５ｍＬ）に、２−（イミダゾル−１−イル）−エチルアミン（１４２ｍｇ、１.２８１ｍｍｏｌ、４ｅｑ）および酢酸（９０.７μＬ、１.６０２３ｍｍｏｌ、５ｅｑ）を加えた。反応混合物を室温で５時間攪拌した。反応混合物をシリカ・ゲル・カラム（２〜６％メタノールのジクロロメタン溶液）に直接乗せて精製し、化合物Ａ−１４を得た（１０２ｍｇ）。MS (m/z): 実験値 636.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.40, 164.09, 156.72, 144.90, 140.23, 139.01, 137.41, 136.12, 135.41, 130.70, 129.40, 128.42, 127.55, 125.38, 121.48, 120.80, 118.86, 78.65, 72.93, 61.71, 47.41, 46.43, 45.74, 44.19,, 41.68, 40.68, 33.09, 32.22, 30.01, 20.64, 20.33, 16.20, 15.86, 13.65, 13.51, 13.04.
【０１００】
実施例１７：化合物Ａ−１５
化合物Ａ−１５を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（５−メチルイソオキサゾール−３−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 659.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.41, 169.88, 164.06, 161.62, 156.65, 144.83, 140.15, 138.99, 136.25, 135.32, 130.75, 129.45, 128.31, 127.71, 125.40, 121.54, 120.84, 100.85, 78.64, 74.04, 61.91, 46.67, 45.60, 43.98, 40.70, 36.91, 33.09, 32.24, 30.03, 20.69, 20.34, 16.14, 15.97, 13.75, 13.06, 12.53, 12.21.
【０１０１】
実施例１８：化合物Ａ−１６
化合物Ａ−１６を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但しピリジン−２−イルメタンアミンを用いた。MS (m/z): 655.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.36, 164.02, 157.22, 156.78, 149.04, 144.82, 139.85, 138.98, 136.71, 136.20, 135.33, 130.72, 129.42, 128.34, 127.67, 125.40, 122.25, 121.63, 121.51, 121.08, 78.62, 74.05, 61.70, 46.74, 46.03, 45.59, 44.03, 40.69, 33.12, 32.23, 30.01, 20.68, 20.33, 16.15, 15.96, 13.71, 13.05, 12.60.
【０１０２】
実施例１９：化合物Ａ−１７
化合物Ａ−１７を化合物Ａ−５と同じような方法で製造したが、但し（Ｒ）−３−アミノプロパン−１，２−ジオールを用い、また溶媒にはＴＨＦ／ＤＭＦ（１ｍＬ：１ｍＬ）を用いた。MS (m/z): 638.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.49, 164.26, 157.96, 145.00, 140.15, 139.06, 136.30, 135.34, 130.84, 129.45, 128.27, 127.72, 125.32, 121.51, 120.91, 78.75, 73.57, 71.17, 63.75, 61.96, 47.00, 45.71, 44.10, 43.27, 40.71, 33.10, 32.27, 30.04, 20.71, 20.35, 16.16, 15.96, 13.65, 13.08, 13.08.
【０１０３】
実施例２０：化合物Ａ−１８
化合物Ａ−１８を化合物Ａ−４と同じような方法で製造した。この場合に、化合物Ａ−１を出発物質として用い、トリクロロアセチルイソシアネート（２.５ｅｑ）と反応させた。MS (m/z): 740.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 211.75, 164.08, 156.80, 155.88, 155.41, 144.86, 141.40, 139.00, 138.16, 136.30, 135.26, 130.87, 129.52, 128.51, 128.24(2x), 127.85(3x), 127.11, 125.33, 121.55, 119.59, 78.90, 76.48, 63.61, 46.77, 46.64, 45.38, 44.38, 40.76, 32.67, 32.53, 30.13, 20.84, 20.35, 16.02, 15.98, 14.19, 13.15, 12.82.
【０１０４】
実施例２１：化合物Ａ−１９
化合物Ａ−１９を化合物Ａ−５と同じような方法で製造したが、但しアミンとしてチアゾール−２−イルメタンアミンを用いた。MS (m/z): 661.3 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.28, 168.32, 163.97, 156.47, 144.74, 142.33, 140.11, 138.89, 136.13, 135.23, 130.65, 129.34, 128.23, 127.59, 125.28, 121.42, 120.70, 119.23, 78.54, 73.88, 61.93, 46.65, 45.50, 43.92, 42.39, 40.59, 33.00, 32.14, 29.92, 20.59, 20.24, 16.06, 15.88, 13.62, 12.96, 12.55.
【０１０５】
実施例２２：化合物Ａ−２０
化合物Ａ−２０を化合物Ａ−４と同じような方法で製造した。この場合に、化合物Ａ−１９を出発物質として用い、トリクロロアセチルイソシアネート（１.２ｅｑ）と反応させた。MS (m/z): 704.3 (M+Na+). 1H NMR (400 MHz, CDCL3), δ (ppm), 7.70 (d, J=3.2 Hz, 1H), 7.28 (d, J=3.2 Hz, 1H), 6.91 (dt, J=9.6, 4.4 Hz, 1H), 6.69 (d, J=15.6 Hz, 1H), 6.05 (d, J=9.6 Hz, 1H), 6.02 (d, J=15.6 Hz, 1H), 5.72 (dd, J=15.6, 7.2 Hz, 1H), 5.57 (dt, J=15.6, 6.8 Hz, 1H), 5.49 (br, 1H), 5.31 (t, J=6.4 Hz, 1H), 5.26 (d, J=10 Hz, 1H), 5.09 (d, J=9.6 Hz, 1H), 5.01 (dd, J=8.8, 2 Hz, 1H), 4.95 (q-like, J=7.6 Hz, 1H), 4.72 (br, 2H), 4.68 (d, J=6 Hz, 2H), 4.63 (m, 2H), 3.66 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 2.65 (m, 1H), 2.46 (m, 2H), 2.06 (m, 3H), 1.83 (s, 3H), 1.82 (s, 3H), 1.66 (m, 1H), 1.64 (s, 3H), 1.13 (d, J=6.8 Hz, 3H), 1.10 (d, J=6.4 Hz, 3H), 0.96 (d, J=6.4 Hz, 3H), 0.67 (d, J=6.4 Hz, 3H).
【０１０６】
実施例２３：化合物Ａ−２１
化合物Ａ−２１を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（５−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 701.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.42, 164.05, 161.48, 156.79, 146.08 (d, J = 4 Hz), 144.78, 140.18, 139.01, 136.27, 135.32, 133.86 (d, J = 3 Hz) 130.78, 129.46, 128.31, 127.73, 125.37, 125.32 (q, J = 66 Hz), 121.57, 121.30, 120.88, 78.65, 74.04, 61.92, 46.64, 46.01, 45.61, 43.98, 40.71, 33.11, 32.26, 30.04, 20.69, 20.33, 16.14, 15.99, 13.77, 13.06, 12.49.
【０１０７】
（５−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミン（ＶＩ）を以下のように製造した：炭酸水素ナトリウム（０.２５g）およびパラジウム炭素（０.５ｇ、５０％ウェット（wet）、１０％Ｐｄ／Ｃ）を、（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミン（Ｖ）塩酸塩（５０ｍＬメタノール溶液中、０.５ｇ）のメタノール溶液に加えた。混合物を、水素バルーン下で３時間かけて水素化した。反応混合物を濾過し、減圧下で蒸発させた。残渣をメタノール溶液（５ｍＬ）に再び溶解し、再び濾過し、再び蒸発させて、粗生成物（ＶＩ）を得た（０.３３g）。1H-NMR (CD3OD, 400 MHz): δ 8.92 (s, 1H), 8.16 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.35 (s, 2H).
【化２１】
【０１０８】
実施例２４：化合物Ａ−２２
化合物Ａ−２２を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 723.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.42, 164.07, 156.75, 149.08, 147.00 (q, J=34.5 Hz), 144.81, 140.40, 138.99, 137.79, 136.39, 136.25, 135.28, 130.77, 129.44, 128.25, 127.70, 125.31, 121.49, 120.65, 120.27, 78.63, 73.97, 62.00, 46.62, 45.59, 43.91, 42.09, 40.68, 33.07, 32.22, 30.01, 20.66, 20.29, 16.09, 15.95, 13.76, 13.02, 12.45.
【０１０９】
実施例２５：化合物Ａ−２３
化合物Ａ−２３を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 723.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.46, 164.02, 158.33, 156.72, 147.57 (q, J=35 Hz), 144.73, 140.18, 138.98, 138.04, 136.25, 135.29, 130.76, 129.43, 128.28, 127.71, 125.36, 124.46, 121.55, 120.88, 118.93, 78.62, 74.13, 61.86, 46.51, 45.80, 45.57, 43.91, 40.68, 33.07, 32.23, 30.01, 20.66, 20.30, 16.10, 15.96, 13.82, 13.03, 12.30.
【０１１０】
実施例２６：化合物Ａ−２４
化合物Ａ−２４を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（４−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 701.4(M+H+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.45, 164.04, 159.25, 156.76, 150.17, 144.77, 140.19, 139.01, 138.97 (q, J = 68 Hz), 136.25, 135.33, 130.77, 129.45, 128.32, 127.72, 125.38, 121.57,120.88, 117.91, 117.17, 78.65, 74.09, 61.93, 46.62, 46.05, 45.61, 43.96, 40.70, 33.11, 32.26, 30.04, 20.68, 20.33, 16.14, 15.98, 13.78, 13.05, 12.43.
【０１１１】
実施例２７：化合物Ａ−２５
化合物Ａ−２５を、化合物Ａ−１４と同じような方法で製造したが、但し（３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタンアミンを用いた。MS (m/z): 723.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 215.53, 164.02, 156.55, 154.22, 151.50, 144.72, 139.92, 139.03, 136.28, 135.34, 134.22, 134.17, 130.80, 129.45, 128.34, 127.74, 125.40, 124.36, 124.04, 123.71, 123.38, 122.14, 121.87, 121.62, 121.15, 78.66, 74.21, 61.77, 46.50, 45.61, 43.96, 43.07, 40.71, 33.10, 32.27, 30.05, 20.69, 20.34, 16.15, 16.00, 13.90, 13.07, 12.27.
【０１１２】
実施例２８：化合物ＩＶ
トリクロロアセチルイソシアネート（１２５μＬ、１.０５４ｍｍｏｌ、２.５ｅｑ）を、２４−アシルイミダゾリドレプトルスタチン（２５０ｍｇ、０.４２１６ｍｍｏｌ、１ｅｑ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（３ｍＬ）に加えた。反応混合物を室温で３０分間攪拌し、次いで中性Ａｌ２Ｏ３カラム上に乗せ、終夜カラムの上に置いた。生成物を、メタノールを用いてカラムから溶離し、シリカゲル・カラム・クロマトグラフィー（３〜４％ＭｅＯＨのＣＨ２Ｃｌ２溶液グラジエント）で精製した。化合物ＩＶの生成物を得た（１００ｍｇ）。MS (m/z): 564.4 (M+Na+). 13C NMR (100 MHz, CDCL3), δ (ppm), 211.80, 164.14, 157.13, 144.95, 139.05, 136.89, 136.38, 135.26, 130.95, 129.5, 128.52, 127.93, 126.15, 125.31, 121.54, 79.02, 75.52, 59.13, 46.93, 45.39, 44.73, 40.80, 32.65, 32.52, 30.15, 20.93, 20.36, 15.93, 15.50, 14.27, 13.29, 13.19.
実施例２９：核外輸送阻害
【０１１３】
本発明の化合物が核外輸送を阻害する能力は、以下のようにして評価した。
【０１１４】
１〜５×１０４細胞を、１２ｍｍカバーガラスまたはチャンバースライド（例えば、Ｌａｂ−Ｔｅｋ＃１７７４４５）のウェルにまいた（seeded）。細胞を３７℃で終夜かけて成長させ、細胞を表面に付着させた。培地を除去し、望ましい試験化合物が含まれる培地に置き換え、必要な期間（典型的に１時間）インキュベートした。回復実験（recovery experiment）のために、細胞をＰＢＳまたは培地で洗浄し、試験化合物のない培地で目的の回復期間（典型的に８、２４、または４８時間）インキュベートした。培地を除去し、カバーガラス／ウェルをＰＢＳ（ｐＨ７.４）で１分間洗浄した。カバーガラスまたはスライドを室温で２０分間、３.７％ホルムアルデヒドのＰＢＳ溶液で固定し、ＰＢＳ溶液で３回洗浄し、ＣＲＭ１基質ＲａｎＢＰ１（CRM1 substrate RanBP1）を染色した。
【０１１５】
カバーガラスまたはチャンバースライドを透過処理し、１０％ ｄｏｎｋｅｙ ｓｅｒｕｍ、０.１％トリトン Ｘ−１００のＰＢＳ溶液で、３０分間室温でブロッキングした（blocked）。一次抗体をＰＢＳ溶液で希釈し、室温で１時間インキュベートした：ヤギ抗ＲａｎＢＰ１（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ｓｃ−１１６０；１：５０希釈）およびマウス抗チューブリン（Ｓｉｇｍａ、Ｔ９０２６；１：４００）。細胞をＰＢＳ溶液で５分間洗浄した（３回）。二次抗体ロバ抗ヤギＣｙ３（７０５−１６５−１４７、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）およびロバ抗マウスＦＩＴＣ（７１５−０９５−１５０、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）をＰＢＳ溶液で１：２００に希釈し、室温で１時間インキュベートした。二次抗体を除去し、細胞を核染色色素（例えば、ＤＡＰＩ（Ｓｉｇｍａ、Ｄ８４１７；２.５μｇ／ｍＬのＰＢＳ溶液）またはＨｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ、Ｈ３５７０；１００ｎｇ／ｍＬのＰＢＳ溶液））を用いて、室温で５分間染色した。細胞をＰＢＳ溶液で５分間洗浄し（３回）、カバーガラスをＦｌｕｏｒＳａｖｅ（ＥＭＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、８００５８−１０８）を用いてマウントした（mounted）。ＲａｎＢＰ１の核（Ｎ）局在性または細胞質（Ｃ）局在性を、４０倍の対物レンズを付けたＺｅｉｓｓ Ａｘｉｏｖｅｒｔ２００倒立落射蛍光顕微鏡を用いて調べた。最初のドラッギング（drugging）期間の後、核局在化（Ｎ＞Ｃ）を確認した。回復（Recovery）を以下のように定義した：速い（fast）回復（８時間で、Ｃ≧Ｎ）、緩やかな（moderate）回復（２４時間で、Ｃ≧Ｎ）、または遅い（slow）回復（２４時間で、Ｎ＞Ｃ）。
【０１１６】
天然のレプトマイシンＡ、レプトマイシンＢ、およびレプトルスタチンが含まれる比較のデータと一緒に、結果を表Ｂに示す。結果から分かるように、核外輸送阻害の持続期間は、試験化合物に依存して変わる。
【表２】
実施例３０：生物活性
【０１１７】
本発明の化合物の生物活性を、様々な腫瘍細胞株の増殖に対する阻害効果を測定することにより評価した。結果（レプトマイシンＡ、レプトマイシンＢ、およびレプトルスタチンに関する比較データも含まれる）は、表Ｃで一覧にしている。ＨＣＴ−１１６は、ヒト結腸癌細胞株である。ＬＮＣａｐは、ヒト前立腺癌細胞株である。ＳｉＨａは、ＨＰＶ−１６陽性ヒト子宮頸癌株である。
【表３−１】
【表３−２】
【０１１８】
表Ｄは、様々な細胞株に対する化合物Ａ−１およびＡ−４の活性に関する、付加的なデータを示す。場合によっては、レプトマイシンＢ（ＬＭＢ）および／または化合物ＶＩ（Dong et al., US 2005/0272727 A1 (2005)）における比較データも提供する。
【化２２】
【表４−１】
【表４−２】
【０１１９】
試験に用いられた追加の細胞株は、様々な異なる癌を表す：膀胱癌（ＵＭ−ＵＣ−３）、乳癌（ＢＴ４７４、ＨＣＣ１９３７、ＭＤＡ−ＭＢ４６８、ＮＣＩ−ＡＤＲ）、中枢神経系の癌（Ｕ８７ＭＧ（グリオーマ）、ＳＫＮＳＨ（神経芽細胞腫））、結腸癌（ＬｏＶｏ、ＬＳ４１１Ｎ、ＬＳ５１３）、頭頸部癌（ＣＡＬ−２７、ＦａＤｕ）、白血病（ＣＣＲＦ−ＣＥＭ、ＭＯＬＴ−４）、肝癌（ＨｅｐＧ２）、肺癌（Ａ５４９、ＮＣＩ−Ｈ２３、ＮＣＩ−Ｈ３５８）、黒色腫（Ｃｏｌｏ８２９）、卵巣癌（ＯＶＣＡＲ−４）、膵癌（ＢｘＰＣ−３、Ｍｉａ−ＰａＣａ２）、前立腺癌（２２Ｒｖ１、ＰＣ−３）、および腎癌（Ａ−４９８、Ｃａｋｉ−１）。
【０１２０】
要約すると、表ＣおよびＤのデータは、本発明の化合物が様々な癌（すなわち、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、および腎癌）を治療するのに効果的であることを示す。
【０１２１】
上述した本発明の詳細な説明には、本発明の特定の部分または側面に、主としてまたは排他的に関係している箇所が含まれる。これは明確化および便宜上のためであること、ある特定の特徴はそれが開示されている箇所のみではなくそれ以上に関連し得ること、並びに本明細書の開示には、異なる箇所にある情報の、あらゆる適当な組み合わせが含まれることが理解される。同じように、本明細書の様々な図および説明は本発明の特定の形態に関するものだが、理解されるべきことは、特定の図または形態との関連で特定の特徴が開示されている場合に、そのような特徴も、適当な範囲において、他の図もしくは形態との関連で、他の特徴との組み合わせで、または一般に本発明の中で用いることができることである。
【０１２２】
さらに、本発明は特に、ある好ましい形態という観点から説明されているが、本発明はそのような好ましい形態に限定されない。むしろ、本発明の範囲は添付した特許請求の範囲によって定義される。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
［式中、
Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ５アルキルであり；
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ５アルキルであり；
Ｒ３は、ＨまたはＯＨであり；
Ｒ４およびＲ５は、各々独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＣＨＲ７Ｒ９、または（ＣＨＲ９）ｎＲ８であるか、あるいはＲ４およびＲ５は、それらが結合している窒素と一緒になって、結合して
【化２】
を形成するが、ただしＲ５はＣ（＝Ｏ）ＮＨ２もあり得て；
Ｒ６は、ＨまたはＣ（＝Ｏ）ＮＲ４Ｒ５であり；
Ｒ７は、無置換もしくは置換アリール、無置換もしくは置換ヘテロアリール、無置換もしくは置換シクロ脂肪族、無置換もしくは置換ヘテロシクロ脂肪族、ＣＯ２Ｒ９、シアノ、またはＣＯＲ９であり；
Ｒ８は、無置換もしくは置換アリール、無置換もしくは置換ヘテロアリール、無置換もしくは置換シクロ脂肪族、無置換もしくは置換ヘテロシクロ脂肪族、ＮＲ４Ｒ５、ＣＯ２Ｒ９、ＯＨ、ハロ、シアノ、ＯＲ９、またはＣＯＲ９であり；
Ｒ９は、各々独立して、Ｈ、ＯＨまたはＣ１〜Ｃ５アルキルであり；並びに
ｎは、各々独立して、２、３、４、５、または６である］
によって表される構造を有する化合物、またはそれの医薬的に許容される塩。
【請求項２】
式Ｉ−ａ：
【化３】
によって表される構造を有する、請求項１の化合物。
【請求項３】
ＮＲ４Ｒ５が、
【化４】
からなる群より選択される、請求項２の化合物。
【請求項４】
【化５−１】
【化５−２】
からなる群より選択される、請求項２の化合物。
【請求項５】
ＮＲ５Ｒ６にトリフルオロメチル置換ピリジル部分が含まれ、Ｒ６がＨである、請求項２の化合物。
【請求項６】
【化６−１】
【化６−２】
からなる群より選択される、請求項５の化合物。
【請求項７】
式Ａ−４：
【化７】
によって表される構造を有する、請求項２の化合物。
【請求項８】
請求項１の化合物の有効量を標的細胞に接触させることを特徴とする、標的細胞の増殖を阻害する方法。
【請求項９】
該標的細胞が癌細胞である、請求項８の方法。
【請求項１０】
該標的細胞が膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、または腎癌細胞である、請求項８の方法。
【請求項１１】
請求項１の化合物の治療上の有効量を、過剰増殖性疾患に罹患している患者に投与することを特徴とする、過剰増殖性疾患の治療方法。
【請求項１２】
該過剰増殖性疾患が癌である、請求項１１の方法。
【請求項１３】
該過剰増殖性疾患が膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、または腎癌である、請求項１１の方法。
【請求項１４】
過剰増殖性疾患を治療する薬物の製造のための、請求項１の化合物の使用。
【請求項１５】
請求項１の化合物および賦形剤を含む、医薬製剤。
【請求項１６】
請求項１の化合物の阻害量を細胞に接触させることを特徴とする、ＣＲＭ１媒介性プロセスによって細胞核からのプロテインの外への輸送を阻害する方法。
【請求項１７】
式（ＩＶ）：
【化８】
によって表される構造を有する化合物。
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
［式中、
Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ５アルキルであり；
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ５アルキルであり；
Ｒ３は、ＨまたはＯＨであり；
Ｒ４およびＲ５は、各々独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、ＣＨＲ７Ｒ９、または（ＣＨＲ９）ｎＲ８であるか、あるいはＲ４およびＲ５は、それらが結合している窒素と一緒になって、結合して
【化２】
を形成するが、ただしＲ５はＣ（＝Ｏ）ＮＨ２もあり得て；
Ｒ６は、ＨまたはＣ（＝Ｏ）ＮＲ４Ｒ５であり；
Ｒ７は、無置換もしくは置換アリール、無置換もしくは置換ヘテロアリール、無置換もしくは置換シクロ脂肪族、無置換もしくは置換ヘテロシクロ脂肪族、ＣＯ２Ｒ９、シアノ、またはＣＯＲ９であり；
Ｒ８は、無置換もしくは置換アリール、無置換もしくは置換ヘテロアリール、無置換もしくは置換シクロ脂肪族、無置換もしくは置換ヘテロシクロ脂肪族、ＮＲ４Ｒ５、ＣＯ２Ｒ９、ＯＨ、ハロ、シアノ、ＯＲ９、またはＣＯＲ９であり；
Ｒ９は、各々独立して、Ｈ、ＯＨまたはＣ１〜Ｃ５アルキルであり；並びに
ｎは、各々独立して、２、３、４、５、または６である］
によって表される構造を有する化合物、またはそれの医薬的に許容される塩。
【請求項２】
式Ｉ−ａ：
【化３】
によって表される構造を有する、請求項１の化合物。
【請求項３】
ＮＲ４Ｒ５が、
【化４】
からなる群より選択される、請求項２の化合物。
【請求項４】
【化５−１】
【化５−２】
からなる群より選択される、請求項２の化合物。
【請求項５】
ＮＲ５Ｒ６にトリフルオロメチル置換ピリジル部分が含まれ、Ｒ６がＨである、請求項２の化合物。
【請求項６】
【化６−１】
【化６−２】
からなる群より選択される、請求項５の化合物。
【請求項７】
式Ａ−４：
【化７】
によって表される構造を有する、請求項２の化合物。
【請求項８】
請求項１の化合物の有効量を標的細胞に接触させることを特徴とする、標的細胞の増殖を阻害する方法。
【請求項９】
該標的細胞が癌細胞である、請求項８の方法。
【請求項１０】
該標的細胞が膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、または腎癌細胞である、請求項８の方法。
【請求項１１】
請求項１の化合物の治療上の有効量を、過剰増殖性疾患に罹患している患者に投与することを特徴とする、過剰増殖性疾患の治療方法。
【請求項１２】
該過剰増殖性疾患が癌である、請求項１１の方法。
【請求項１３】
該過剰増殖性疾患が膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、中枢神経系の癌、結腸癌、頭頸部癌、白血病、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、または腎癌である、請求項１１の方法。
【請求項１４】
過剰増殖性疾患を治療する薬物の製造のための、請求項１の化合物の使用。
【請求項１５】
請求項１の化合物および賦形剤を含む、医薬製剤。
【請求項１６】
請求項１の化合物の阻害量を細胞に接触させることを特徴とする、ＣＲＭ１媒介性プロセスによって細胞核からのプロテインの外への輸送を阻害する方法。
【請求項１７】
式（ＩＶ）：
【化８】
によって表される構造を有する化合物。
【公表番号】特表２０１０−５１９３３７（Ｐ２０１０−５１９３３７Ａ）
【公表日】平成２２年６月３日（２０１０．６．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５５１９９２（Ｐ２００９−５５１９９２）
【出願日】平成２０年２月２０日（２００８．２．２０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／００２３０９
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１０６０４７
【国際公開日】平成２０年９月４日（２００８．９．４）
【出願人】（５０００１７８３０）コーサン バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド (12)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年６月３日（２０１０．６．３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年２月２０日（２００８．２．２０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／００２３０９
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１０６０４７
【国際公開日】平成２０年９月４日（２００８．９．４）
【出願人】（５０００１７８３０）コーサン バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド (12)
【Ｆターム（参考）】
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