タンパク質キナーゼ阻害剤としての化合物および組成物
本発明は、新規クラスの化合物、このような化合物を含む医薬組成物および、異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性と関連する疾患または障害、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４キナーゼの異常な活性化が関与する疾患または障害の処置または予防のためのこのような化合物の使用法を提供する。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、３５ Ｕ.Ｓ.Ｃ.§１１９(ｅ)の下、２００３年９月３０日出願の米国仮出願６０／５０７,５９２の優先権の利益を主張する。該優先権主張出願の記載は、引用により、その全体として、かつすべての目的に関して、本出願に包含される。
【０００２】
技術分野
本出願は、３５ Ｕ.Ｓ.Ｃ.§１１９(ｅ)の下、２００３年７月１０日出願の米国仮出願６０／４８６,１３４の優先権の利益を主張する。該優先権主張出願の記載は、引用により、その全体として、かつすべての目的に関して、本出願に包含される。本発明は、新規クラスの化合物、このような化合物を含む医薬組成物および異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性と関連する疾患または障害、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４キナーゼの異常な活性化が関与する疾患または障害の処置または予防におけるこのような化合物の使用法を提供する。
【０００３】
背景技術
タンパク質キナーゼは、広範囲の細胞過程の制御ならびに細胞機能の制御の維持に中心的役割を有する、タンパク質の大きなファミリーを代表する。これらのキナーゼの部分的、非限定的リストは下記を含む：受容体チロシンキナーゼ、例えば血小板由来増殖因子受容体キナーゼ(ＰＤＧＦ−Ｒ)、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＶＥＧＦ−受容体キナーゼ(例えばＫＤＲ、Ｆｌｔ−１およびＦｌｔ−４)、ＴＧＦβ、上皮細胞増殖因子受容体(ＥＧＦ−Ｒ)、幹細胞因子のための受容体キナーゼ、ｃ−ｋｉｔ；非受容体チロシンキナーゼ、例えばＡｂｌおよび融合キナーゼＢＣＲ−Ａｂｌ；およびセリン／スレオニンキナーゼ、例えばｐ３８、ｂ−ＲＡＦおよびｃ−ＲＡＦ。異常なキナーゼ活性が良性および悪性増殖性障害ならびに不適切な免疫系および神経系の活性化に由来する疾患を含む、多くの疾患状態で観察されている。
【０００４】
本発明の新規化合物は、１種またはそれ以上のタンパク質キナーゼを阻害し、故に、キナーゼ−関連疾患の処置に有用であると期待される。
【０００５】
発明の概要
第一の局面において、本発明は、式Ｉ：
【化１】
〔式中、
ｎは０、１、２または３であり；
Ｚは＝Ｎ−および＝ＣＨ−から選択され；
Ｒ１は水素および−ＮＲ４Ｒ５から選択され；ここで、Ｒ４は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そしてＲ５はＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、Ｒ５の全てのアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望によりシアノ、ニトロ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシおよび−ＮＲ６Ｒ７から独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｒ６およびＲ７は、独立して水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ２は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３はハロ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｒ９、−ＸＣ(Ｏ)Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ(Ｏ)Ｒ９および−ＸＣ(Ｏ)ＮＲ８Ｒ９から選択され；ここで、Ｘは結合またはＣ１−４アルキレンであり、Ｒ８は水素およびＣ１−６アルキルから選択され、そしてＲ９はＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され；ここで、Ｒ９の全てのアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望によりハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、−ＸＯＲ８、−ＸＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)２Ｎ(ＯＲ８)２、−ＸＳ(Ｏ)Ｎ(ＸＯＲ８)２、−ＸＳＮ(ＯＲ８)２、−ＸＳＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)Ｒ１０および−ＸＳ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘは結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ８は水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてＲ１０はＣ３−８ヘテロシクロアルキルおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるラジカルであり；そしてＲ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、所望によりハロ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよく；そして、Ｒ１０の任意の１個の環炭素は、所望により−Ｃ(Ｏ)−で置換されていてよく；そして、フェニル環ＡおよびＢは、−Ｎ＝で置換された−Ｃ＝基を４個まで有し得る。〕
の化合物およびそのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、被保護誘導体、個々の異性体および異性体の混合物；およびこのような化合物の薬学的に許容される塩および溶媒和物(例えば水和物)を提供する。
【０００６】
第二の局面において、本発明は、式Ｉの化合物またはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体の混合物；またはその薬学的に許容される塩を１種またはそれ以上の適当な賦形剤との混合物として含む、医薬組成物を提供する。
【０００７】
第三の局面において、本発明は、治療的有効量の式Ｉの化合物またはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体の混合物、またはその薬学的に許容される塩を動物に投与することを含む、動物における、キナーゼ活性、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４活性の阻害がその疾患の病状および／または総体症状を予防、阻止または軽減できるものである疾患を処置する方法を提供する。
【０００８】
弟四の局面において、本発明は、キナーゼ活性、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４活性がその疾患の病状および／または総体症状に関与するものである、動物における疾患の処置用医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【０００９】
第五の局面において、本発明は、式Ｉの化合物およびそのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、被保護誘導体、個々の異性体および異性体の混合物、およびその薬学的に許容される塩の製造法を提供する。
【００１０】
発明の詳細な説明
定義
基または他の基、例えばハロ−置換−アルキルおよびアルコキシの構造要素としての“アルキル”は、直鎖または分枝鎖であり得る。Ｃ１−４−アルコキシは、メトキシ、エトキシなどを含む。ハロ−置換アルキルは、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルなどを含む。
【００１１】
“アリール”は、６個から１０個の環炭素原子を含む、単環式または縮合二環式芳香環集合体を意味する。例えば、アリールは、フェニルまたはナフチル、好ましくはフェニルであり得る。アリール基由来の“アリーレン”は、２価ラジカルである。“ヘテロアリール”は、環員の１個またはそれ以上がヘテロ原子である、上記で定義のアリールである。例えばヘテロアリールは、ピリジル、インドリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾ[１,３]ジオキソール、イミダゾリル、ベンゾ−イミダゾリル、ピリミジニル、フラニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、チエニルなどを含む。
【００１２】
“シクロアルキル”は、指示された炭素原子数を含む、飽和または部分的不飽和の、単環式、縮合二環式または架橋された多環式環集合体を意味する。例えば、Ｃ３−１０シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。“ヘテロシクロアルキル”は、１個またはそれ以上の示される環炭素が−Ｏ−、−Ｎ＝、−ＮＲ−、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｓ−、−Ｓ(Ｏ)−または−Ｓ(Ｏ)２−(ここで、Ｒは水素、Ｃ１−４アルキルまたは窒素保護基である)から選択されから選択される部分で置換されている、本明細書で定義の通りのシクロアルキルである。例えば、本発明の化合物を述べるために本明細書で使用するＣ３−８ヘテロシクロアルキルは、モルホリノ、ピロリジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニロン、１,４−ジオキサ−８−アザ−スピロ[４.５]デク−８−イルなどを含む。
【００１３】
“ハロゲン”(またはハロ)は、好ましくはクロロまたはフルオロを意味するが、またブロモまたはヨードでもあり得る。
【００１４】
“処置”、“処置し”および“処置する”は、疾患および／または附随する症状を軽減するまたは無くす方法を意味する。
【００１５】
好ましい態様の記載
本発明は、キナーゼ関連疾患、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４キナーゼ関連疾患の処置のための、化合物、組成物および方法を提供する。例えば、ＢＣＲ−Ａｂｌに関連する白血病および他の増殖障害は、野生型および変異型のＢｃｒ−Ａｂｌの阻害により処置できる。
【００１６】
一つの態様において、式Ｉの化合物に関して、Ｒ１が水素および−ＮＲ４Ｒ５から選択され；ここで、Ｒ４が水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そしてＲ５が所望によりハロ−置換−Ｃ１−６アルキルおよび−ＮＲ６Ｒ７から独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよいＣ６−１０アリールであり；ここで、Ｒ６およびＲ７は、独立して水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そして
Ｒ２が水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３がハロ、Ｃ１−６アルキル、−ＸＣ(Ｏ)Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ(Ｏ)Ｒ９および−ＸＣ(Ｏ)ＮＲ８Ｒ９から選択され；ここで、Ｘが結合またはＣ１−４アルキレンであり、Ｒ８が水素およびＣ１−６アルキルから選択され、そしてＲ９がＣ６−１０アリールおよびＣ３−１２シクロアルキルから選択され；Ｒ９の全てのアリールまたはシクロアルキルが、所望により−ＸＯＲ８、−ＸＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)２Ｎ(ＸＯＲ８)２および−ＸＳ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘが結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ８が水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてＲ１０がＣ３−８ヘテロシクロアルキルおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるラジカルであり；ここで、Ｒ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールが、所望により１個から３個のＣ１−６アルキル基で置換されていてよく；そしてＲ１０の任意の１個の環炭素が、所望により−Ｃ(Ｏ)−で置換されていてよい。
【００１７】
他の態様において、Ｒ１が水素および−ＮＨＲ５から選択され；ここで、Ｒ５が所望によりトリフルオロメチルおよびジメチルアミノから独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよいフェニルであり；そしてＲ２が水素である。
【００１８】
さらなる態様において、Ｒ３がハロ、メチル、ホルミル、ジメチルアミノ、−ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ９および−Ｃ(Ｏ)ＮＨＲ９から選択され；ここで、Ｒ９がフェニルおよびシクロプロピルから選択され；Ｒ９の全てのアリールまたはシクロアルキルが所望により−ＣＨ２ＯＨ、−ＸＲ１０、−Ｓ(Ｏ)２Ｎ(Ｃ２Ｈ４ＯＨ)２および−Ｓ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘが結合またはメチレンであり、そしてＲ１０がピペラジニル、モルホリノおよび５−オキソ−４,５−ジヒドロ−ピラゾル−１−イルから選択されるラジカルであり；ここで、Ｒ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールが、所望により１個から３個までのメチル基で置換されていてよい。
【００１９】
他の態様において、Ｒ４がハロ、トリフルオロメチルおよび−ＸＲ１０から選択され；ここで、Ｘが結合またはメチレンであり；Ｒ１０がイミダゾリル、ピペラジニルおよびモルホリノから選択され；ここで、全てのヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルが所望によりメチルで置換されていてよい。
【００２０】
好ましい式Ｉの化合物は：Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−(３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−ヒドロキシメチル−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−３−(モルホリン−４−スルホニル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(３−メチル−５−オキソ−４,５−ジヒドロ−ピラゾル−１−イル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−３−(４−メチル−ピペラジン−１−スルホニル)−ベンズアミド；４−[ビス−(２−ヒドロキシ−エチル)−スルファモイル]−Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−[３−(２−ピリミジン−４−イル−フェニルアミノ)−フェニル]−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピル−３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアミド；｛６−[２−(３−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(２−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(４−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(２−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(３−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(４−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｏ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｍ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｐ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアルデヒド；４−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアルデヒド；(４−トリフルオロメチル−フェニル)−｛６−[２−(２−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−アミン；(４−トリフルオロメチル−フェニル)−｛６−[２−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−アミン；Ｎ,Ｎ−ジメチル−Ｎ’−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニル｝−ベンゼン−１,４−ジアミン；フェニル−[６−(２−フェニルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−アミン；｛６−[２−(２,６−ジクロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(３,４,５−トリメトキシ−フェニル)−アミン；および｛６−[２−(２,６−ジクロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−フェニル]−アミンから選択される。
【００２１】
さらに好ましい式Ｉの化合物は、下記実施例および表Ｉに詳述する。
【００２２】
薬理学および有用性
本発明の化合物は、タンパク質チロシンキナーゼの活性を調節し、それ自体、タンパク質チロシンキナーゼ、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４キナーゼがその疾患の病状および／または総体症状に関与する疾患または障害の処置に有用である。
【００２３】
アベルソンチロシンキナーゼ(すなわちＡｂｌ、ｃ−Ａｂｌ)は、細胞サイクルの制御、遺伝毒性ストレスに対する細胞応答、およびインテグリンシグナル伝達を介した細胞環境についての情報伝達に関与する。全体として、Ａｂｌタンパク質は、様々な細胞外および細胞内供給源からのシグナルを統合し、細胞サイクルおよびアポトーシスに関する決定に影響を与える、細胞性モジュールとして複雑な役割を果たしているように見える。アベルソンチロシンキナーゼは、脱制御されたチロシンキナーゼ活性を伴うキメラ融合体(オンコプロテイン)ＢＣＲ−Ａｂｌまたはｖ−Ａｂｌのようなサブタイプ誘導体を含む。ＢＣＲ−Ａｂｌは、９５％の慢性骨髄性(myelogenous)白血病(ＣＭＬ)および１０％の急性リンパ性白血病の病因において重要である。ＳＴＩ５７１(Gleevec)は発癌性ＢＣＲ−Ａｂｌチロシンキナーゼの阻害剤であり、慢性骨髄性(myeloid)白血病(ＣＭＬ)の処置に使用されている。しかしながら、ＣＭＬの急性転化期にある患者の幾分かは、ＢＣＲ−Ａｂｌキナーゼの変異により、ＳＴＩ−５７１に耐性である。２２を超える変異が今日までに報告されており、最も一般的なのはＧ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１Ｔである。
【００２４】
本発明の化合物は、ａｂｌキナーゼ、とりわけｖ−ａｂｌキナーゼを阻害する。本発明の化合物はまた野生型ＢＣＲ−ＡｂｌキナーゼおよびＢＣＲ−Ａｂｌキナーゼの変異を阻害し、故に、白血病(とりわけアポトーシス作用の機構が見られるとき、とりわけ慢性骨髄性(myeloid)白血病および急性リンパ芽球性白血病)のようなＢｃｒ−ａｂｌ−陽性癌および腫瘍疾患の処置に適当であり、また、白血病性幹細胞のサブグループにおける効果を示し、ならびにこれらの細胞を、該細胞を摘出した後(例えば、骨髄摘出)インビトロで精製し、それらが癌細胞から浄化された後細胞を再移植する(例えば、精製骨髄細胞の再移植)可能性がある。
【００２５】
ＰＤＧＦ(血小板由来増殖因子)は非常に一般的に存在する増殖因子であり、発癌および血管の平滑筋細胞の疾患、例えばアテローム性動脈硬化症および血栓症に見られるように、正常増殖およびまた病的細胞増殖の両方において重要な役割を演ずる。本発明の化合物は、ＰＤＧＦ受容体(ＰＤＧＦＲ)活性を阻害でき、従って、神経膠腫、肉腫、前立腺腫瘍、および結腸、乳房および卵巣の腫瘍のような腫瘍疾患の処置に適当である。
【００２６】
本発明の化合物は、例えば小細胞肺癌における腫瘍阻害物質としてだけでなく、またアテローム性動脈硬化症、血栓症、乾癬、強皮症および線維症のような非悪性増殖性障害にも、ならびに幹細胞を、例えば、５−フルオロウラシルのような化学療法剤の血液毒性作用と戦うために保護するために、および喘息において使用できる。本発明の化合物は、とりわけＰＤＧＦ受容体キナーゼの阻害に応答する疾患の処置に有用である。
【００２７】
本発明の化合物は、移植、例えば、異種移植に起因する障害、とりわけ閉塞性細気管支炎(ＯＢ)、すなわち異種肺移植の慢性拒絶のような、とりわけ組織拒絶反応の処置に有効である。ＯＢのない患者と比較して、ＯＢを有する者は、しばしば気管支肺胞洗浄液中のＰＤＧＦ濃度の上昇を示す。
【００２８】
本発明の化合物はまた再狭窄およびアテローム性動脈硬化症のような、血管平滑筋細胞移動および増殖(ＰＤＧＦおよびＰＤＧＦ−Ｒがしばしば役割を有する場所である)が関連する疾患に有用である。血管平滑筋細胞インビトロおよびインビボにおけるこれらの効果および増殖または移動にに対するそれらの結果は、本発明の化合物の投与により、またインビボでの血管内膜の機械的損傷後の肥厚に対する影響の試験により証明し得る。
【００２９】
本発明の化合物はまた、ＳＣＦ受容体(ｋｉｔ)自己リン酸化およびＭＡＰＫキナーゼ(マイトージェン−活性タンパク質キナーゼ)のＳＣＦ刺激活性化の阻害のように、幹細胞因子(ＳＣＦ、ｃ−ｋｉｔリガンドまたはスチール因子としても既知)が関与する細胞過程を阻害する。ＭＯ７ｅ細胞は、増殖をＳＣＦに依存するヒト前巨核球性(Promegakaryocytic)白血病細胞系である。本発明の化合物は、ＳＣＦ受容体の自己リン酸化を阻害できる。
【００３０】
Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫシグナル伝達経路は、増殖シグナルに対する細胞応答を介在する。Ｒａｓは、ヒト癌の〜１５％で発癌性形に変異している。Ｒａｆファミリーはセリン／スレオニンタンパク質キナーゼに属し、それは３種のメンバー、Ａ−Ｒａｆ、Ｂ−Ｒａｆおよびｃ−Ｒａｆ(またはＲａｆ−１)を含む。薬剤標的としてのＲａｆの焦点は、Ｒａｓの下流因子エフェクターとしてのＲａｆの関係に絞られている。しかしながら、近年のデータは、Ｂ−Ｒａｆが、Ｒａｓ対立遺伝子の活性化を必要としないある種の腫瘍において顕著な役割を有し得ることを示唆する(Nature 417, 949 - 954(01 Jul 2002)。特に、Ｂ−Ｒａｆ変異は、悪性黒色腫の高い割合で検出されている。
【００３１】
黒色腫の既存の薬物処置は、その効果が限定されており、とりわけ後期黒色腫で限定されている。本発明の化合物はまたｂ−Ｒａｆキナーゼが関与する細胞過程も阻害し、ヒト癌、とりわけ黒色腫の処置の新しい治療の機会を提供する。
【００３２】
本発明の化合物はまたｃ−Ｒａｆキナーゼが関与する細胞過程を阻害する。ｃ−Ｒａｆはｒａｓ癌遺伝子により活性化され、これは多くのヒト癌で変異している。故に、ｃ−Ｒａｆのキナーゼ活性の阻害は、ｒａｓ介在腫瘍増殖を予防する方法を提供する[Campbell, S. L., Oncogene, 17, 1395(1998)]。
【００３３】
本発明の化合物はまたＫＤＲ、Ｆｌｔ−１およびＦｌｔ−４が関与する細胞過程を阻害する。脱制御された血管形成と関連する多くの疾患、例えば眼血管新生が原因の疾患、とりわけ網膜症(糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症)；乾癬；“イチゴ状血管腫”(＝血管腫)のような血管芽腫；関節炎、とりわけリウマチ性関節炎、アテローム性動脈硬化症および移植後に起こるアテローム性動脈硬化症、子宮内膜症または慢性喘息のような種々の炎症性疾患；および、とりわけ、腫瘍疾患(固形腫瘍だけでなく、また多くの初生血液細胞および白血病細胞がｃ−ｋｉｔ、ＫＤＲ、Ｆｌｔ−１およびＦｌｔ−４を発現するため、多くの白血病および他の液性腫瘍も)が既知である。Ｆｌｔ−４は、発育中のリンパ管で発現される。成人組織においてリンパ性内皮および幾分かの高内皮細静脈のみがＦｌｔ４ ｍＲＮＡを発現し、転移リンパ節およびリンパ管腫におけるリンパ性洞で増加した発現が起こる。ＫＤＲ−介在機能的効果のＫＤＲの触媒活性を阻害することによる阻害は、癌を含む血管形成性(angiogenized)疾患状態の処置における重要な治療的戦略であると考えられる。
【００３４】
別々の遺伝子によりそれぞれコードされるｐ３８ＭＡＰＫ(α、β、γ、δ)の多くの形は、浸透圧ストレス、ＵＶ光およびサイトカイン介在事象を含む様々な刺激に対する細胞の応答に関与するキナーゼカスケードの一部を形成する。ｐ３８のこれら４つのイソ型は、細胞内シグナル伝達の異なる態様を制御すると考えられる。その活性化は、ＴＮＦαのような前炎症性サイトカインの合成および酸性に至るシグナル伝達事象のカスケードの一部である。Ｐ３８は、他のキナーゼおよび転写因子を含む、下流基質のリン酸化により機能する。ｐ３８キナーゼを阻害する薬剤は、ＴＮＦα、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＩＬ−１βを含むが、これらに限定されないサイトカインの酸性を遮断することが示されている。末梢血単球(ＰＢＭＣ)は、インビトロでリポポリサッカライド(ＬＰＳ)で刺激されたとき、前炎症性サイトカインを発現および分泌することが示されている。Ｐ３８阻害剤は、ＰＢＭＣを、ＬＰＳでの刺激前にこのような化合物で前処置したときに、この作用を有効に遮断する。Ｐ３８阻害剤は、炎症性疾患の動物モデルにおいて有用である。多くの疾患状態の破壊的影響は、前炎症性サイトカインの過剰発現が原因である。ｐ３８阻害剤がこの過剰発現を制御する能力により、それらは疾患修飾剤として有効である。
【００３５】
ｐ３８の機能を遮断する分子は、骨再吸収、炎症、ならびに他の免疫および炎症が基本の病態の阻害に有効であることが示されている。故に、安全で有効なｐ３８阻害剤が、ｐ３８シグナル伝達、例えば、ＲＡの調節により制御できる疾患を軽減するための処置の手段を提供するであろう。故に、ｐ３８活性を阻害する本発明の化合物は、炎症、骨関節症、リウマチ性関節炎、癌、自己免疫性疾患の処置に、および他のサイトカイン介在疾患の処置に有用である。
【００３６】
トランスフォーミング増殖因子−ベータ(ＴＧＦβ)は、例えば、ＴＧＦβ１、ＴＧＦβ２、およびＴＧＦβ３を含む、タンパク質のスーパーファミリーを示し、これらは細胞増殖および分化、胚および骨発育、細胞外マトリックス形成、造血、免疫および炎症性応答の多面的(pleotropic)調節剤である。ＴＧＦβファミリーのメンバーは、細胞内シグナル伝達経路を開始して、最終的に細胞サイクルを制御する遺伝子の発現、増殖性応答の制御に至るか、またはアウトサイド−イン細胞シグナル伝達、細胞接着、移動および細胞間コミュニケーションを介在する細胞外マトリックスタンパク質に関する。結果として、ＴＧＦβ細胞内シグナル伝達経路の阻害剤である本発明の化合物は、制御されていないＴＧＦβ活性と関連する腎臓障害ならびに、糸球体腎炎(ＧＮ)、例えばメサンギウム増殖性ＧＮ、免疫性ＧＮ、および半月状ＧＮを含む過剰な線維症を含む、線維増殖性疾患の処置に有用である。他の腎臓状態は、糖尿病性腎症、腎臓間質性線維症、シクロスポリンを投与されている移植患者の腎臓線維症、およびＨＩＶ関連ネフロパシーを含む。コラーゲン血管障害は、進行性全身性硬化症、多発性筋炎、強皮症、皮膚筋炎、好酸球性筋膜炎、モルヘア、またはレイノー病の発生と関連するこれらのものを含む。過剰なＴＧＦβ活性が原因の肺線維症は、成人呼吸窮迫症候群、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、およびしばしば自己免疫性障害と関連する間質性肺線維症、例えば全身性エリテマトーデスおよび強皮症、化学物質接触、またはアレルギーを含む。線維増殖性特性と関連する他の自己免疫性障害は、リウマチ性関節炎である。線維増殖性状態は、外科的眼科工程と関連し得る。このような工程は、増殖性硝子体網膜症、眼内レンズ移植を伴う白内障摘出、および緑内障後ドレナージ手術を含む。
【００３７】
繊維芽細胞増殖因子受容体３は、骨増殖の負の制御作用を示し、そして軟骨細胞増殖の阻害をすることが示された。致死性骨異形成症は繊維芽細胞増殖因子受容体３の様々な変異により引き起こされ、１種の変異であるＴＤＩＩ ＦＧＦＲ３が構造的チロシンキナーゼ活性を有し、それは転写因子Ｓｔａｔ１を活性化し、細胞サイクル阻害因子の発現、細胞サイクル阻害、増殖停止および異常な骨発育に至る(Su et al., Nature, 1997, 386, 288-292)。ＦＧＦＲ３はまた多発性骨髄腫型の癌でしばしば発現される。
【００３８】
キナーゼであるｃ−Ｓｒｃは、多くの受容体の発癌性シグナルを伝達する。例えば、腫瘍におけるＥＧＦＲまたはＨＥＲ２／ｎｅｕの過剰発現はｃ−ｓｒｃの構造的活性化をもたらし、それは悪性細胞の特徴であるが、正常細胞には存在しない。他方、ｃ−ｓｒｃの発現を欠損するマウスは、大理石骨病表現型を示し、破骨細胞機能におけるｃ−ｓｒｃの重要な関与および関連障害への関与の可能性を示唆する。
【００３９】
細胞サイクルチェックポイントキナーゼであるＣｈｋ２は、ＤＮＡ損傷により活性化され、活性化Ｃｈｋ２はＣｄｃ２５Ｃをリン酸化し、それにより不活性化する。活性なＣｈｋ２がない細胞は、ＤＮＡ損傷に対するそれらのチェックポイント応答を欠く。Ｃｈｋ２の不活性化は、損傷されたＤＮＡにより誘発されるＧ２／Ｍ停止を廃止し、得られるチェックポイント欠損細胞をＤＮＡ損傷事象による致死に感受性にする。癌細胞がＧ２／Ｍチェックポイントの廃止に正常細胞よりも感受性であるため、Ｃｈｋ２を阻害する化合物は非常に興味深く、ＤＮＡ損傷事象による癌細胞の致死を改善する。
【００４０】
ヒトリボソームＳ６タンパク質キナーゼのファミリーは、少なくとも８種のメンバーから成る(ＲＳＫ１、ＲＳＫ２、ＲＳＫ３、ＲＳＫ４、ＭＳＫ１、ＭＳＫ２、ｐ７０Ｓ６Ｋおよびｐ７０Ｓ６ Ｋｂ)。リボソームタンパク質Ｓ６タンパク質キナーゼは、多面的機能において重要な役割を有し、その中でもタンパク質生合成中のｍＲＮＡ翻訳の制御に重要な役割を有する(Eur. J. Biochem 2000 November;267(21):6321-30, Exp Cell Res. Nov. 25, 1999;253(1):100-9, Mol Cell Endocrinol. May 25, 1999;151(1-2):65-77)。Ｓ６リボソームタンパク質のｐ７０Ｓ６によるリン酸化はまた細胞運動性(Immunol. Cell Biol. 2000 August;78(4):447-51)および細胞増殖(Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 2000;65:101-27)の制御にも関与しており、故に、腫瘍転移、免疫応答および腫瘍修復ならびに他の疾患状態において重要であり得る。
【００４１】
前記によって、本発明は、さらに、処置を必要とする対象における、上記のいずれかの疾患または障害を処置する方法であり、該対象に治療的有効量(下記“投与および医薬組成物”参照)の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することをを含む、方法を提供する。上記の全ての使用に関して、必要な投与量は投与形態、処置すべき特定の状態および所望の効果に依存して変化するであろう。
【００４２】
投与および医薬組成物
一般に、本発明の化合物は、治療的有効量で、当分野で既知の通常のかつ許容されるいずれかの形態を介して、単独でまたは１種もしくはそれ以上の他の治療剤と共に、投与されるであろう。治療的有効量は、疾患の重症度、対象の年齢および関連する健康状態、使用する化合物の効果および他の因子に依存して広範囲に変化し得る。一般に、全身的に十分な結果が、約０.０３から２.５mg／体重kgの投与により得られることが指示される。大型哺乳類、例えばヒトにおける指示される一日投与量は、約０.５mgから約１００mgであり、簡便には、例えば１日４回までの分割用量で、または遅延形で投与する。経口投与用の適当な単位投与形は、約１から５０mg活性成分を含む。
【００４３】
本発明の化合物は、医薬組成物として、任意の慣用の経路で、特に経腸的、例えば、経口的に、例えば、錠剤またはカプセルの形で、または非経腸的に、例えば、注射可能溶液または懸濁液の形で、局所的に、例えば、ローション、ゲル、軟膏またはクリームの形で、または経鼻または坐薬形で投与できる。遊離形または薬学的に許容される塩形の本発明の化合物を、少なくとも１種の薬学的に許容される担体または希釈剤と共に含む医薬組成物は、混合、造粒またはコーティング法による慣用の方法で製造できる。例えば、経口組成物は、活性成分をａ)希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリシン；ｂ)滑剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウムまたはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール；錠剤についてはまたｃ)結合剤、例えば、マグネシウムアルミニウムシリケート、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドン；望むならばｄ)崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、アルギン酸またはそのナトリウム塩、または起沸性混合物；および／またはｅ)吸収剤、着色剤、香味剤および甘味剤と共に含む、錠剤またはゼラチンカプセルである。注射可能組成物は、水性等張溶液または懸濁液であり、坐薬は脂肪エマルジョンまたは懸濁液から製造できる。本組成物は滅菌できおよび／またはアジュバント、例えば、防腐剤、安定化剤、湿潤剤または乳化剤、溶解促進剤、浸透圧調整用塩および／または緩衝剤を含んでよい。加えて、それらは他の治療的に価値のある物質も含み得る。経皮的投与のための適当な製剤は、有効量の本発明の化合物と担体を含む。担体は、宿主の皮膚を介した通過を助けるための吸収可能な薬理学的に許容される溶媒を含む。例えば、経皮デバイスは、裏打ち部材、化合物を所望により担体と含む貯蔵部、所望により、化合物の宿主の皮膚への送達を制御されかつ予定された速度で長時間送達するための速度制御バリアおよび、皮膚にデバイスを固定するための手段を含む、バンデージの形である。マトリックス経皮製剤も使用し得る。例えば皮膚および眼への、局所適用のための適当な製剤は、好ましくは当分野で既知の水性溶液、軟膏、クリームまたはゲルを含む。これらは可溶化剤、安定化剤、張性増強剤(tonicity enhancing agent)、緩衝剤および防腐剤を含み得る。
【００４４】
本発明の化合物は、１種またはそれ以上の治療剤との組み合わせで、治療的有効量で投与できる(医薬的組み合わせ)。例えば、上記の疾患または障害のいずれかを予防または処置する他の薬剤と相乗効果が起こり得る。これらは、例えばシクロスポリン、ラパマイシン、またはアスコマイシンもしくはそれらの免疫抑制性類似体、例えばシクロスポリンＡ(ＣｓＡ)、シクロスポリンＧ、ＦＫ−５０６、ラパマイシン、または同等な化合物、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、メトトレキサート、ブレキナール、レフルノミド、ミゾルビン、ミコフェノール酸、ミコフェノール酸モフェチル、１５−デオキシスペルグアリン、免疫抑制性抗体、とりわけ白血球受容体、例えばＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ２５、ＣＤ２８、Ｂ７、ＣＤ４５、ＣＤ５８またはそれらのリガンドに対するモノクローナル抗体、または他の免疫調節性化合物、例えばＣＴＬＡ４１ｇと組み合わせたときの、免疫調節性または抗炎症性物質を含む。本発明の化合物を他の治療剤と共に投与するとき、併用投与する化合物の投与量は、もちろん、用いる併用剤のタイプ、用いる具体的薬剤、処置すべき状態などに依存して変化するであろう。
【００４５】
本発明はまた、ａ)本明細書に記載の通りの、遊離形または薬学的に許容される塩形の本発明の化合物である第一剤、およびｂ)少なくとも１種の併用剤を含む、医薬的組み合わせ、例えばキットを提供する。該キットはその投与のための指示書を含み得る。
【００４６】
本明細書で利用する“併用投与”または“組み合わせ投与”などの用語は、選択した複数の治療剤の単独の患者への投与を包含することを意味し、薬剤を必ずしも同じ投与経路でまたは同時に投与するものではない処置レジメンを含むことを意図する。
【００４７】
本明細書で使用する“医薬的組み合わせ”なる用語は、１種以上の活性成分の混合または組み合わせに由来する製品を意味し、活性成分の固定されたまたは固定されていない組み合わせの両方を含む。“固定された組み合わせ”は、活性成分、例えば式Ｉの化合物および併用剤を、両方とも患者に同時に１つの物または投与量として投与することを意味する。“固定されていない組み合わせ”は、活性成分、例えば式Ｉの化合物および併用剤を、患者に、別々の物として、同時に、一緒にまたは具体的時間制限なしに連続して投与し、ここで、このような投与が患者の体内で２種の化合物の治療的有効レベルを提供することを意味する。後者はまたカクテル療法、例えば、３種またはそれ以上の活性成分の投与にも適用できる。
【００４８】
本発明の化合物の製造法
本発明はまた本発明の化合物の製造法を含む。記載の反応において、反応性官能基、例えばヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオまたはカルボキシ基を、これらが最終産物で望まれるとき、反応へのそれらの望ましくない参加を避けるために、保護する必要があり得る。慣用の保護基を、標準的技法に従い行うことができ、例えば、T.W. Greene and P. G. M. Wuts in “Protective Groups in Organic Chemistry”, John Wiley and Sons, 1991を参照のこと。
【００４９】
Ｒ５が水素である式Ｉの化合物は、下記反応スキームＩの通りに進行して製造できる：
【化２】
(式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、発明の概要において式Ｉについて定義した通りである)。
【００５０】
本発明の化合物(式Ｉ)は、式２の化合物と式３の化合物を、適当な溶媒(例えば、塩化メチレンなど)、適切なアミン(例えば、ジイソプロピルエチルアミンなど)の存在下、適切な触媒(酢酸銅(II)など)を使用して反応させることにより製造できる。該反応は、１０から５０℃の範囲の温度で行い、完了まで約２４時間かかり得る。式Ｉの化合物の合成は、下記実施例に詳述する。
【００５１】
本発明の化合物を製造するための付加的方法
本発明の化合物は、遊離塩基形の化合物と、薬学的に許容される無機または有機酸の反応により、薬学的に許容される酸付加塩として製造できる。あるいは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩基付加塩を、遊離酸形の化合物と、薬学的に許容される無機または有機塩基の反応により製造できる。あるいは、塩形の本発明の化合物を、塩の出発物質または中間体を使用して製造できる。
【００５２】
本発明の化合物の遊離酸または遊離塩基形は、対応する塩基付加塩または酸付加塩形から各々製造できる。例えば酸付加塩形の本発明の化合物は、対応する遊離塩基に、適当な塩基(例えば、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど)で処理することにより変換できる。塩基付加塩形の本発明の化合物は、対応する遊離酸に、適当な酸(例えば、塩酸など)で処理することにより変換できる。
【００５３】
酸化されていない形の本発明の化合物を、本発明の化合物のＮ−オキシドから、還元剤(例えば、硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、リチウムボロハイドライド、水素化ホウ素ナトリウム、リントリクロライド、トリブロマイドなど)で、適当な不活性有機溶媒(例えばアセトニトリル、エタノール、水性ジオキサンなど)中、０から８０℃で処理することにより製造できる。
【００５４】
本発明の化合物のプロドラッグ誘導体を、当業者に既知の方法により製造できる(例えば、さらなる詳細はSaulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985参照)。例えば、適切なプロドラッグは、誘導体化していない本発明の化合物と、適当なカルバミル化剤(例えば、１,１−アシルオキシアルキルカルバノクロリデート、パラ−ニトロフェニルカーボネートなど)を反応させることにより製造できる。
【００５５】
本発明の化合物の被保護誘導体は、当業者に既知の手段により製造できる。保護基の創成およびそれらの除去に適用できる技術の詳述は、“Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999に見ることができる。
【００５６】
本発明の化合物は、溶媒和物(例えば、水和物)として簡便に製造でき、または本発明の工程中に形成される。本発明の化合物の水和物は、ジオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールのような有機溶媒を使用する、水性／有機溶媒混合物からの再結晶により簡便に製造できる。
【００５７】
本発明の化合物は、該化合物のラセミ混合物と、光学活性分割剤を反応させ、ジアステレオ異性体化合物のペアを形成され、ジアステレオマーを分離し、光学的に純粋なエナンチオマーを回収することにより、それらの個々の立体異性体として製造できる。エナンチオマーの分離は本発明の化合物の共有結合的ジアステレオ誘導体を使用して行うことができるが、分離可能な複合体(例えば、結晶性ジアステレオマー塩)が好ましい。ジアステレオマーは、異なる物理特性(例えば、融点、沸点、溶解度、反応性など)を有し、これらの差異を利用して容易に分割できる。ジアステレオマーは、クロマトグラフィー、または好ましくは、溶解度の差異を利用した分離／分割法により分離できる。光学的に純粋なエナンチオマーを、次いで、ラセミ体化をもたらさない任意の実際的手段により、分割剤と共に回収する。化合物の立体異性体それらのラセミ混合物からの分離に適用可能な技術のより詳細な記載は、Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolution”, John Wiley and Sons, Inc., 1981に見ることができる。
【００５８】
要約すると、式Ｉの化合物は、下記を含む方法により製造できる：
(ａ)反応スキームＩのもの；および
(ｂ)所望により、本発明の化合物の薬学的に許容される塩への変換；
(ｃ)所望により、塩形の本発明の化合物の非塩形への変換；
(ｄ)所望により、酸化されていない本発明の化合物の薬学的に許容されるＮ−オキシドの変換；
(ｅ)所望により、本発明の化合物のＮ−オキシド形の、その酸化されていない形への変換；
(ｆ)所望により、異性体の混合物からの本発明の化合物の個々の異性体への分割；
(ｇ)所望により、誘導体化されていない本発明の化合物の、薬学的に許容されるプロドラッグ誘導体への変換；および
(ｈ)所望により、本発明の化合物のプロドラッグ誘導体の、その誘導体化されていない形への変換。
【００５９】
出発物質の製造法が具体的に記載されていない限り、該化合物は既知であるか、当分野で既知の方法に準じて製造できるか、または、後記の実施例に記載の通りに製造できる。
【００６０】
当業者には、上記の変換が本発明の化合物の製造法の代表的な方法であるだけであり、他の既知の方法を同様に使用できることは明白であろう。
【００６１】
実施例
本発明を、本発明の式Ｉの化合物の製造法を説明する下記実施例によりさらに例示するが、限定するものではない。
実施例１
Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド
【化３】
【００６２】
３−(Ｎ,Ｎ−ジメチルアミン)アニリン(１０.０ｇ、０.０４０mol)およびジイソプロピルエチルアミン(１５.７ｇ、０.１２１mol)の混合物のブタノール(４００mL)溶液を１００℃に加熱する。４,６−ジクロロピリミジン(７.８１ｇ、０.０５２４mol)を２０分かけてゆっくり添加する。白色ガスおよび溶媒の沸騰が、添加中観察される。得られた溶液を２４時間撹拌し、ｐＨ測定は酸性条件を示す。さらにジイソプロピルエチルアミン(７.８１ｇ、０.０５２４mol)を添加し、反応混合物を２４時間撹拌する。ｐＨ測定はまた酸性混合物を示し、さらにジイソプロピルエチルアミン(７.８１ｇ、０.０５２４mol)を添加し、混合物をさらに２４時間撹拌する。反応混合物を急速に冷却し、溶媒を真空下で除去する。残った黄色残渣を酢酸エチル(１００mL)に溶解し、水(３×)で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、大量の沈殿が出現するまで濃縮する。固体を濾過により単離し、ヘキサンで洗浄し、高真空で２４時間乾燥させて、化合物２(７.０２ｇ、７０％)を得る；ＭＳ ｍ／ｚ(Ｍ＋Ｈ＋)２４９.１０。
【００６３】
化合物２(１００mg、０.４mmol)、２−(ボロン酸)アニリン(１１０mg、０.８mmol)の混合物のＮ,Ｎ−ジメチルホルミド(５mL)溶液に、テトラキス−(トリフェニルホスフィン)−パラジウム(０)(９３mg、０.０８mmol)および４Ｍ 炭酸ナトリウム(１.６mL、１.６mmol)を添加する。試験管を密閉し、マイクロ波中に１２００秒、１４０℃で置く。混合物を次いで塩水(１０mL)に注ぎ、酢酸エチル(３×)で抽出する。有機層を合わせ、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させる。濾過後、有機溶媒を除去し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、化合物３(１００mg、８１％)を得る；ＭＳ ｍ／ｚ(Ｍ＋Ｈ＋)３０６.１。
【００６４】
化合物３(１５０mg、０.５mmol)、３−ニトロベンゼンボロン酸(２５０mg、１.５mmol)、酢酸銅(II)(４５mg、０.２５mmol)およびジイソプロピルエチルアミンアミン(２５０mg、２.０mmol)の混合物の塩化メチレン(１０mL)溶液を室温で一晩撹拌する。混合物を塩化メチレンで希釈し、飽和重炭酸ナトリウムで洗浄する。有機部分を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物を次いでシリカゲルクロマトグラフィー(そのままの塩化メチレン)で精製し、化合物４(１５０mg、７１％収率)を得る；ＭＳ ｍ／ｚ(Ｍ＋Ｈ＋)４２７.１０。
【００６５】
化合物４(１５０mg、０.３５mmol)および１０％Ｐｄ−Ｃ(１５mg)の混合物のメタノール(１０mL)を水素(１気圧)下、室温で３０分撹拌した。パラジウム触媒を濾過により除去し、メタノール溶液を濃縮乾固し、化合物５(１００mg、７７％収率)を黄色シロップとして得た；ＭＳ ｍ／ｚ(Ｍ＋Ｈ＋)３９７.３０。
【００６６】
化合物５(２０mg、０.０５mmol)、４−(Ｎ−メチル−ピペラジル)−メチル−安息香酸(１４mg、０.０６mmol)、Ｏ−(７−アザベンゾトリアゾル−１−イル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ’,Ｎ’−テトラメチル−ウロニウムヘキサフルオロホスフェート(２３mg、０.０６mmol)およびジイソプロピルエチルアミン(８mg、０.０６mmol)の塩化メチレン(２mL)を室温で一晩撹拌する。ＬＣＭＳ精製により、Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド(９.２mg、３０％収率)を得る：1H NMR 400 Hz(CDCl3)δ 2.51(s, 3H), 2.61(br, 4H), 2.78(br, 4H), 2.97(s, 6H), 3.58(s, 2H), 6.57(m, 1H), 6.68(m, 2H), 6.84(m, 1H), 6.97(m, 1H), 7.10(m, 2H), 7.18(m, 1H), 7.26(m, 2H), 7.40(d, J = 8.12 Hz, 2H), 7.46(d, J = 8.12 Hz, 2H), 7.54(s, br, 1H), 7.79(d, J = 8.14 Hz, 2H), 7.86(s, 1H), 8.69(s, 1H); MS m/z(M+H+)613.30。
【００６７】
上記の実施例に記載の方法を繰り返し、適当な出発物質を使用して、表１に示す通りの下記の式Ｉの化合物を得る。
表１
【表１】
【表２】
【表３】
【表４】
【表５】
【表６】
【表７】
【表８】
【表９】
【００６８】
アッセイ
本発明の化合物を、それらがＢＣＲ−Ａｂｌを発現する３２Ｄ細胞(３２Ｄ−ｐ２１０)の細胞増殖を、親３２Ｄ細胞と比較して選択的に阻害する能力についてアッセイする。これらのＢＣＲ−Ａｂｌで形質転換した細胞の増殖を選択的に阻害する化合物を、Ｂｃｒ−ａｂｌの野生型または変異型のいずれかを発現するＢａ／Ｆ３細胞の増殖性活性について試験する。加えて、化合物をそれらがｂ−Ｒａｆを阻害する能力についてアッセイする。
【００６９】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ依存性増殖の阻害(ハイスループット法)
使用するマウス細胞系は、ＢＣＲ−Ａｂｌ ｃＤＮＡ(３２Ｄ−ｐ２１０)で形質転換した３２Ｄ造血先祖細胞系である。これらの細胞を、ペニシリン５０μg／mL、ストレプトマイシン５０μg／mLおよびＬ−グルタミン２００mMを添加したＲＰＭＩ／１０％胎児ウシ血清(ＲＰＭＩ／ＦＣＳ)に維持する。形質転換されていない３２Ｄ細胞を、ＩＬ３の供給源として１５％のＷＥＨＩを添加された馴化培地で同様に維持する。
【００７０】
５０μlの３２Ｄまたは３２Ｄ−ｐ２１０細胞懸濁液を、Greiner 384ウェルマイクロプレート(黒色)に、５０００細胞／ウェルの密度で播種する。５０ｎｌの試験化合物(ＤＭＳＯ貯蔵溶液中１mMを)を各ウェルに添加する(ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する)。細胞を７２時間、３７℃で、５％ＣＯ２でインキュベートする。１０μlの６０％Alamar Blue溶液(Tek diagnostics)を各ウェルに添加し、細胞をさらに２４時間インキュベートする。蛍光強度(励起５３０nm、発光５８０nm)を、AcquestＴＭシステム(Molecular Devices)を使用して定量する。
【００７１】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ依存性増殖の阻害
３２Ｄ−ｐ２１０細胞を９６ウェルＴＣプレートに１５,０００細胞／ウェルの密度で播種する。５０μLの試験化合物の２倍連続希釈(Ｃｍａｘは４０μM)を各ウェルに添加する(ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する)。細胞を４８時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベート後、１５μLのＭＴＴ(Promega)を各ウェルに添加し、細胞をさらに５時間インキュベートする。５７０nmの光学密度を分光測光により定量し、ＩＣ５０値、すなわち５０％阻害に必要な化合物の濃度を用量応答曲線から決定する。
【００７２】
細胞サイクル分布に対する効果
３２Ｄおよび３２Ｄ−ｐ２１０細胞を６ウェルＴＣプレートに、５mlの培地中２.５×１０６細胞／ウェルで播種し、１または１０μMの試験化合物を添加する(ＳＴＩ５７１を対照として包含する)。細胞を次いで２４時間または４８時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。２mlの細胞懸濁液をＰＢＳで洗浄し、７０％ＥｔＯＨに１時間固定し、ＰＢＳ／ＥＤＴＡ／ＲＮａｓｅ Ａで３０分処置する。ヨウ化プロピジウム(Ｃｆ＝１０μg／ml)を添加し、蛍光強度をFACScaliburＴＭシステム(BD Biosciences)でのフローサイトメトリーにより定量する。本発明の試験化合物は、３２Ｄ−ｐ２１０細胞に対してアポトーシス作用を証明するが、３２Ｄ親細胞ではアポトーシスを誘発しない。
【００７３】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化に対する効果
ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化を、ｃ−ａｂｌ特異的捕捉抗体および抗ホスホチロシン抗体を使用した、捕捉Ｅｌｉｓａで定量する。３２Ｄ−ｐ２１０細胞を９６ウェルＴＣプレートに、５０μLの培地中２×１０５細胞／ウェルで播種する。５０μLの試験化合物の２倍連続希釈(Ｃｍａｘは１０μM)を各ウェルに添加する(ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する)。細胞を、９０分、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。次いで、細胞を１時間、氷上でプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含む１５０μLの融解緩衝液(５０mM Ｔｒｉｓ ＨＣｌ、ｐＨ７.４、１５０mM ＮａＣｌ、５mM ＥＤＴＡ、１mM ＥＧＴＡおよび１％ＮＰ−４０)で処理する。５０μLの細胞融解物を、予め抗ａｂｌ特異的抗体でコーティングし、ブロックした９６ウェルoptiplateに添加する。プレートを、４時間、４℃でインキュベートする。ＴＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ２０緩衝液で洗浄後、５０μLのアルカリホスファターゼ結合抗ホスホチロシン抗体を添加し、プレートをさらに一晩４℃でインキュベートする。ＴＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ２０緩衝液で洗浄後、９０μLの発光基質を添加し、発光をAcquestＴＭシステム(Molecular Devices)を使用して定量する。ＢＣＲ−Ａｂｌ発現細胞の増殖を阻害する本発明の試験化合物は、細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化を用量依存的方法で阻害する。
【００７４】
Ｂｃｒ−ａｂｌの変異型を発現する細胞の増殖に対する効果
本発明の化合物を、ＢＣＲ−Ａｂｌの野生型または、ＳＴＩ５７１に対する耐性を付与するか感受性を低下させる変異型(Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７Ｌ、Ｍ３５１Ｔ)のいずれかを発現するＢａ／Ｆ３細胞に対するそれらの抗増殖効果を試験する。変異体ＢＣＲ−Ａｂｌ発現細胞および非形質転換細胞に対するこれらの化合物の抗増殖性効果を、上記の通り１０、３.３、１.１および０.３７μMで試験した(ＩＬ３を欠く培地中)。非形質転換細胞に対して毒性がない化合物のＩＣ５０値を、上記の通りに得た用量応答曲線から決定した。
【００７５】
ｂ−Ｒａｆ
本発明の化合物を、それらのｂ−Ｒａｆを阻害する能力について試験する。アッセイを、黒色壁かつ透明底の３８４ウェルMaxiSorpプレート(NUNC)で行う。基質、ＩκＢαをＤＰＢＳ(１：７５０)で希釈し、１５μlを各ウェルに添加する。プレートを４℃で一晩インキュベートし、ＥＭＢＬＡプレート洗浄機を使用して、３回ＴＢＳＴ(２５mM Ｔｒｉｓ、ｐＨ８.０、１５０mM ＮａＣｌおよび０.０５％Ｔｗｅｅｎ−２０)で洗浄する。プレートをSuperblock(１５μl／ウェル)で３時間、室温でブロックし、ＴＢＳＴで３回洗浄し、軽く叩いて乾燥させる。２０μM ＡＴＰ(１０μl)含有アッセイ緩衝液、続いて１００ｎｌまたは５００ｎｌの化合物を各ウェルに添加する。Ｂ−Ｒａｆをアッセイ緩衝液で希釈し(２５μl中に１μl)、１０μlの希釈したｂ−Ｒａｆを各ウェルに添加する(０.４μg／ウェル)。プレートを室温で２.５時間インキュベートする。キナーゼ反応を、プレートを６回ＴＢＳＴで洗浄することにより停止させる。Ｐｈｏｓｐｈ−ＩκＢα(Ｓｅｒ３２／３６)抗体をSuperblock中で希釈し(１：１０,０００)、１５μlを各ウェルに添加する。プレートを４℃で一晩インキュベートし、ＴＢＳＴで６回洗浄する。ＡＰ結合ヤギ抗マウスＩｇＧをSuperblockで希釈し(１：１,５００)、１５μlを各ウェルに添加する。プレートを室温で１時間インキュベートし、ＴＢＳＴで６回洗浄する。１５μlのAttophos AP基質を各ウェルに添加し、プレートを室温で１５分インキュベートする。プレートをAcquestまたはAnalyst GTで、Fluorescence Intensity Nanxin BBT anion(５０５二色性ミラー)を使用して読み取る。
【００７６】
Upstate KinaseProfilerＴＭ−放射酵素的フィルター結合アッセイ
本発明の化合物を、一連のキナーゼの個々のメンバーを阻害する能力についてアッセイする(キナーゼの部分的、非限定的リストは下記を含む：Ａｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１およびＦＬＴ４)。化合物を、１０μMの最終濃度でデュプリケートで、この一般的プロトコールに従い試験する。キナーゼ緩衝液組成および基質は、“Upstate KinaseProfilerＴＭ”パネルに含まれる異なるキナーゼについて変わることは注意すべきである。キナーゼ緩衝液(２.５μL、１０×−必要であればＭｎＣｌ２含有)、キナーゼ緩衝液中の活性キナーゼ(０.００１−０.０１単位；２.５μL)、特異的またはポリ(Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ)ペプチド(５−５００μMまたは.０１mg／ml)およびキナーゼ緩衝液(５０μM；５μL)を、氷上でエッペンドルフで混合する。Ｍｇ／ＡＴＰミックス(１０μL；６７.５(または３３.７５)mM ＭｇＣｌ２、４５０(または２２５)μM ＡＴＰおよび１μCi／μl [γ−３２Ｐ]−ＡＴＰ(３０００Ci／mmol))を添加し、反応物を約３０℃で約１０分インキュベートする。反応混合物を２cm×２cm Ｐ８１(ホスホセルロース、正に荷電したペプチド基質のため)またはWhatman No. 1(ポリ(Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ)ペプチド基質のため)試験紙升目にスポット(２０μL)する。アッセイ升目を４回、各５分、０.７５％リン酸で、そして１回アセトンで５分洗浄する。アッセイ升目をシンチレーションバイアルに移し、５mlシンチレーションカクテルを添加し、基質への３２Ｐ取り込み(cpm)をBeckmanシンチレーションカウンターで計数する。各反応について阻害パーセントを計算する。
【００７７】
遊離形または薬学的に許容される塩形の式Ｉの化合物は、例えば、本願に記載のインビトロ試験法により示される通り、価値のある薬理学的特性を示す。例えば、式Ｉの化合物は、好ましくは１×１０−１０から１×１０−５ＭのＩＣ５０を示し、好ましくは野生型ＢＣＲ−Ａｂｌおよびｂ−Ｒａｆに対しては１μMより少ない。例えば、Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド(実施例１)は、ｂ−Ｒａｆに対して０.６６７μMのＩＣ５０を有する。
【００７８】
式Ｉの化合物は、１０μMの濃度で、Ａｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４キナーゼに対して、好ましくは５０％より大きい、好ましくは約７０％より大きい阻害パーセンテージを示す。例えば、Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド(実施例１)は、１０μMの濃度で、下記キナーゼを括弧内に示すパーセンテージで阻害する(例えば、１００％は完全な阻害、０％は阻害なしを意味する)：Ａｂｌ(９０％)、ｃ−ＲＡＦ(９６％)、ＣＨＫ２(５９％)、ＦＧＦＲ３(５６％)、ｐ７０Ｓ６Ｋ(７９％)、ＰＤＧＦＲα(７１％)およびＰＫＣα(６４％)。
【００７９】
ここに記載の例および態様は、説明の目的のためのみであり、それに照らした様々な修飾または変化が当業者には示唆され、それらは本発明の精神および範囲の範囲内および添付の特許請求の範囲内に包含されることは理解されるべきである。本明細書で引用する全ての刊行物、特許および特許出願は全ての目的のために引用して本明細書に包含する。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、３５ Ｕ.Ｓ.Ｃ.§１１９(ｅ)の下、２００３年９月３０日出願の米国仮出願６０／５０７,５９２の優先権の利益を主張する。該優先権主張出願の記載は、引用により、その全体として、かつすべての目的に関して、本出願に包含される。
【０００２】
技術分野
本出願は、３５ Ｕ.Ｓ.Ｃ.§１１９(ｅ)の下、２００３年７月１０日出願の米国仮出願６０／４８６,１３４の優先権の利益を主張する。該優先権主張出願の記載は、引用により、その全体として、かつすべての目的に関して、本出願に包含される。本発明は、新規クラスの化合物、このような化合物を含む医薬組成物および異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性と関連する疾患または障害、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４キナーゼの異常な活性化が関与する疾患または障害の処置または予防におけるこのような化合物の使用法を提供する。
【０００３】
背景技術
タンパク質キナーゼは、広範囲の細胞過程の制御ならびに細胞機能の制御の維持に中心的役割を有する、タンパク質の大きなファミリーを代表する。これらのキナーゼの部分的、非限定的リストは下記を含む：受容体チロシンキナーゼ、例えば血小板由来増殖因子受容体キナーゼ(ＰＤＧＦ−Ｒ)、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＶＥＧＦ−受容体キナーゼ(例えばＫＤＲ、Ｆｌｔ−１およびＦｌｔ−４)、ＴＧＦβ、上皮細胞増殖因子受容体(ＥＧＦ−Ｒ)、幹細胞因子のための受容体キナーゼ、ｃ−ｋｉｔ；非受容体チロシンキナーゼ、例えばＡｂｌおよび融合キナーゼＢＣＲ−Ａｂｌ；およびセリン／スレオニンキナーゼ、例えばｐ３８、ｂ−ＲＡＦおよびｃ−ＲＡＦ。異常なキナーゼ活性が良性および悪性増殖性障害ならびに不適切な免疫系および神経系の活性化に由来する疾患を含む、多くの疾患状態で観察されている。
【０００４】
本発明の新規化合物は、１種またはそれ以上のタンパク質キナーゼを阻害し、故に、キナーゼ−関連疾患の処置に有用であると期待される。
【０００５】
発明の概要
第一の局面において、本発明は、式Ｉ：
【化１】
〔式中、
ｎは０、１、２または３であり；
Ｚは＝Ｎ−および＝ＣＨ−から選択され；
Ｒ１は水素および−ＮＲ４Ｒ５から選択され；ここで、Ｒ４は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そしてＲ５はＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、Ｒ５の全てのアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望によりシアノ、ニトロ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシおよび−ＮＲ６Ｒ７から独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｒ６およびＲ７は、独立して水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ２は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３はハロ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｒ９、−ＸＣ(Ｏ)Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ(Ｏ)Ｒ９および−ＸＣ(Ｏ)ＮＲ８Ｒ９から選択され；ここで、Ｘは結合またはＣ１−４アルキレンであり、Ｒ８は水素およびＣ１−６アルキルから選択され、そしてＲ９はＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され；ここで、Ｒ９の全てのアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望によりハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、−ＸＯＲ８、−ＸＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)２Ｎ(ＯＲ８)２、−ＸＳ(Ｏ)Ｎ(ＸＯＲ８)２、−ＸＳＮ(ＯＲ８)２、−ＸＳＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)Ｒ１０および−ＸＳ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘは結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ８は水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてＲ１０はＣ３−８ヘテロシクロアルキルおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるラジカルであり；そしてＲ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、所望によりハロ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよく；そして、Ｒ１０の任意の１個の環炭素は、所望により−Ｃ(Ｏ)−で置換されていてよく；そして、フェニル環ＡおよびＢは、−Ｎ＝で置換された−Ｃ＝基を４個まで有し得る。〕
の化合物およびそのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、被保護誘導体、個々の異性体および異性体の混合物；およびこのような化合物の薬学的に許容される塩および溶媒和物(例えば水和物)を提供する。
【０００６】
第二の局面において、本発明は、式Ｉの化合物またはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体の混合物；またはその薬学的に許容される塩を１種またはそれ以上の適当な賦形剤との混合物として含む、医薬組成物を提供する。
【０００７】
第三の局面において、本発明は、治療的有効量の式Ｉの化合物またはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体の混合物、またはその薬学的に許容される塩を動物に投与することを含む、動物における、キナーゼ活性、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４活性の阻害がその疾患の病状および／または総体症状を予防、阻止または軽減できるものである疾患を処置する方法を提供する。
【０００８】
弟四の局面において、本発明は、キナーゼ活性、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４活性がその疾患の病状および／または総体症状に関与するものである、動物における疾患の処置用医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【０００９】
第五の局面において、本発明は、式Ｉの化合物およびそのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、被保護誘導体、個々の異性体および異性体の混合物、およびその薬学的に許容される塩の製造法を提供する。
【００１０】
発明の詳細な説明
定義
基または他の基、例えばハロ−置換−アルキルおよびアルコキシの構造要素としての“アルキル”は、直鎖または分枝鎖であり得る。Ｃ１−４−アルコキシは、メトキシ、エトキシなどを含む。ハロ−置換アルキルは、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルなどを含む。
【００１１】
“アリール”は、６個から１０個の環炭素原子を含む、単環式または縮合二環式芳香環集合体を意味する。例えば、アリールは、フェニルまたはナフチル、好ましくはフェニルであり得る。アリール基由来の“アリーレン”は、２価ラジカルである。“ヘテロアリール”は、環員の１個またはそれ以上がヘテロ原子である、上記で定義のアリールである。例えばヘテロアリールは、ピリジル、インドリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾ[１,３]ジオキソール、イミダゾリル、ベンゾ−イミダゾリル、ピリミジニル、フラニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、チエニルなどを含む。
【００１２】
“シクロアルキル”は、指示された炭素原子数を含む、飽和または部分的不飽和の、単環式、縮合二環式または架橋された多環式環集合体を意味する。例えば、Ｃ３−１０シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。“ヘテロシクロアルキル”は、１個またはそれ以上の示される環炭素が−Ｏ−、−Ｎ＝、−ＮＲ−、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｓ−、−Ｓ(Ｏ)−または−Ｓ(Ｏ)２−(ここで、Ｒは水素、Ｃ１−４アルキルまたは窒素保護基である)から選択されから選択される部分で置換されている、本明細書で定義の通りのシクロアルキルである。例えば、本発明の化合物を述べるために本明細書で使用するＣ３−８ヘテロシクロアルキルは、モルホリノ、ピロリジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニロン、１,４−ジオキサ−８−アザ−スピロ[４.５]デク−８−イルなどを含む。
【００１３】
“ハロゲン”(またはハロ)は、好ましくはクロロまたはフルオロを意味するが、またブロモまたはヨードでもあり得る。
【００１４】
“処置”、“処置し”および“処置する”は、疾患および／または附随する症状を軽減するまたは無くす方法を意味する。
【００１５】
好ましい態様の記載
本発明は、キナーゼ関連疾患、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４キナーゼ関連疾患の処置のための、化合物、組成物および方法を提供する。例えば、ＢＣＲ−Ａｂｌに関連する白血病および他の増殖障害は、野生型および変異型のＢｃｒ−Ａｂｌの阻害により処置できる。
【００１６】
一つの態様において、式Ｉの化合物に関して、Ｒ１が水素および−ＮＲ４Ｒ５から選択され；ここで、Ｒ４が水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そしてＲ５が所望によりハロ−置換−Ｃ１−６アルキルおよび−ＮＲ６Ｒ７から独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよいＣ６−１０アリールであり；ここで、Ｒ６およびＲ７は、独立して水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そして
Ｒ２が水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３がハロ、Ｃ１−６アルキル、−ＸＣ(Ｏ)Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ(Ｏ)Ｒ９および−ＸＣ(Ｏ)ＮＲ８Ｒ９から選択され；ここで、Ｘが結合またはＣ１−４アルキレンであり、Ｒ８が水素およびＣ１−６アルキルから選択され、そしてＲ９がＣ６−１０アリールおよびＣ３−１２シクロアルキルから選択され；Ｒ９の全てのアリールまたはシクロアルキルが、所望により−ＸＯＲ８、−ＸＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)２Ｎ(ＸＯＲ８)２および−ＸＳ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘが結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ８が水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてＲ１０がＣ３−８ヘテロシクロアルキルおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるラジカルであり；ここで、Ｒ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールが、所望により１個から３個のＣ１−６アルキル基で置換されていてよく；そしてＲ１０の任意の１個の環炭素が、所望により−Ｃ(Ｏ)−で置換されていてよい。
【００１７】
他の態様において、Ｒ１が水素および−ＮＨＲ５から選択され；ここで、Ｒ５が所望によりトリフルオロメチルおよびジメチルアミノから独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよいフェニルであり；そしてＲ２が水素である。
【００１８】
さらなる態様において、Ｒ３がハロ、メチル、ホルミル、ジメチルアミノ、−ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ９および−Ｃ(Ｏ)ＮＨＲ９から選択され；ここで、Ｒ９がフェニルおよびシクロプロピルから選択され；Ｒ９の全てのアリールまたはシクロアルキルが所望により−ＣＨ２ＯＨ、−ＸＲ１０、−Ｓ(Ｏ)２Ｎ(Ｃ２Ｈ４ＯＨ)２および−Ｓ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘが結合またはメチレンであり、そしてＲ１０がピペラジニル、モルホリノおよび５−オキソ−４,５−ジヒドロ−ピラゾル−１−イルから選択されるラジカルであり；ここで、Ｒ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールが、所望により１個から３個までのメチル基で置換されていてよい。
【００１９】
他の態様において、Ｒ４がハロ、トリフルオロメチルおよび−ＸＲ１０から選択され；ここで、Ｘが結合またはメチレンであり；Ｒ１０がイミダゾリル、ピペラジニルおよびモルホリノから選択され；ここで、全てのヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルが所望によりメチルで置換されていてよい。
【００２０】
好ましい式Ｉの化合物は：Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−(３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−ヒドロキシメチル−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−３−(モルホリン−４−スルホニル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(３−メチル−５−オキソ−４,５−ジヒドロ−ピラゾル−１−イル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−３−(４−メチル−ピペラジン−１−スルホニル)−ベンズアミド；４−[ビス−(２−ヒドロキシ−エチル)−スルファモイル]−Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−[３−(２−ピリミジン−４−イル−フェニルアミノ)−フェニル]−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピル−３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアミド；｛６−[２−(３−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(２−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(４−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(２−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(３−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(４−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｏ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｍ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｐ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアルデヒド；４−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアルデヒド；(４−トリフルオロメチル−フェニル)−｛６−[２−(２−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−アミン；(４−トリフルオロメチル−フェニル)−｛６−[２−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−アミン；Ｎ,Ｎ−ジメチル−Ｎ’−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニル｝−ベンゼン−１,４−ジアミン；フェニル−[６−(２−フェニルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−アミン；｛６−[２−(２,６−ジクロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(３,４,５−トリメトキシ−フェニル)−アミン；および｛６−[２−(２,６−ジクロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−フェニル]−アミンから選択される。
【００２１】
さらに好ましい式Ｉの化合物は、下記実施例および表Ｉに詳述する。
【００２２】
薬理学および有用性
本発明の化合物は、タンパク質チロシンキナーゼの活性を調節し、それ自体、タンパク質チロシンキナーゼ、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４キナーゼがその疾患の病状および／または総体症状に関与する疾患または障害の処置に有用である。
【００２３】
アベルソンチロシンキナーゼ(すなわちＡｂｌ、ｃ−Ａｂｌ)は、細胞サイクルの制御、遺伝毒性ストレスに対する細胞応答、およびインテグリンシグナル伝達を介した細胞環境についての情報伝達に関与する。全体として、Ａｂｌタンパク質は、様々な細胞外および細胞内供給源からのシグナルを統合し、細胞サイクルおよびアポトーシスに関する決定に影響を与える、細胞性モジュールとして複雑な役割を果たしているように見える。アベルソンチロシンキナーゼは、脱制御されたチロシンキナーゼ活性を伴うキメラ融合体(オンコプロテイン)ＢＣＲ−Ａｂｌまたはｖ−Ａｂｌのようなサブタイプ誘導体を含む。ＢＣＲ−Ａｂｌは、９５％の慢性骨髄性(myelogenous)白血病(ＣＭＬ)および１０％の急性リンパ性白血病の病因において重要である。ＳＴＩ５７１(Gleevec)は発癌性ＢＣＲ−Ａｂｌチロシンキナーゼの阻害剤であり、慢性骨髄性(myeloid)白血病(ＣＭＬ)の処置に使用されている。しかしながら、ＣＭＬの急性転化期にある患者の幾分かは、ＢＣＲ−Ａｂｌキナーゼの変異により、ＳＴＩ−５７１に耐性である。２２を超える変異が今日までに報告されており、最も一般的なのはＧ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１Ｔである。
【００２４】
本発明の化合物は、ａｂｌキナーゼ、とりわけｖ−ａｂｌキナーゼを阻害する。本発明の化合物はまた野生型ＢＣＲ−ＡｂｌキナーゼおよびＢＣＲ−Ａｂｌキナーゼの変異を阻害し、故に、白血病(とりわけアポトーシス作用の機構が見られるとき、とりわけ慢性骨髄性(myeloid)白血病および急性リンパ芽球性白血病)のようなＢｃｒ−ａｂｌ−陽性癌および腫瘍疾患の処置に適当であり、また、白血病性幹細胞のサブグループにおける効果を示し、ならびにこれらの細胞を、該細胞を摘出した後(例えば、骨髄摘出)インビトロで精製し、それらが癌細胞から浄化された後細胞を再移植する(例えば、精製骨髄細胞の再移植)可能性がある。
【００２５】
ＰＤＧＦ(血小板由来増殖因子)は非常に一般的に存在する増殖因子であり、発癌および血管の平滑筋細胞の疾患、例えばアテローム性動脈硬化症および血栓症に見られるように、正常増殖およびまた病的細胞増殖の両方において重要な役割を演ずる。本発明の化合物は、ＰＤＧＦ受容体(ＰＤＧＦＲ)活性を阻害でき、従って、神経膠腫、肉腫、前立腺腫瘍、および結腸、乳房および卵巣の腫瘍のような腫瘍疾患の処置に適当である。
【００２６】
本発明の化合物は、例えば小細胞肺癌における腫瘍阻害物質としてだけでなく、またアテローム性動脈硬化症、血栓症、乾癬、強皮症および線維症のような非悪性増殖性障害にも、ならびに幹細胞を、例えば、５−フルオロウラシルのような化学療法剤の血液毒性作用と戦うために保護するために、および喘息において使用できる。本発明の化合物は、とりわけＰＤＧＦ受容体キナーゼの阻害に応答する疾患の処置に有用である。
【００２７】
本発明の化合物は、移植、例えば、異種移植に起因する障害、とりわけ閉塞性細気管支炎(ＯＢ)、すなわち異種肺移植の慢性拒絶のような、とりわけ組織拒絶反応の処置に有効である。ＯＢのない患者と比較して、ＯＢを有する者は、しばしば気管支肺胞洗浄液中のＰＤＧＦ濃度の上昇を示す。
【００２８】
本発明の化合物はまた再狭窄およびアテローム性動脈硬化症のような、血管平滑筋細胞移動および増殖(ＰＤＧＦおよびＰＤＧＦ−Ｒがしばしば役割を有する場所である)が関連する疾患に有用である。血管平滑筋細胞インビトロおよびインビボにおけるこれらの効果および増殖または移動にに対するそれらの結果は、本発明の化合物の投与により、またインビボでの血管内膜の機械的損傷後の肥厚に対する影響の試験により証明し得る。
【００２９】
本発明の化合物はまた、ＳＣＦ受容体(ｋｉｔ)自己リン酸化およびＭＡＰＫキナーゼ(マイトージェン−活性タンパク質キナーゼ)のＳＣＦ刺激活性化の阻害のように、幹細胞因子(ＳＣＦ、ｃ−ｋｉｔリガンドまたはスチール因子としても既知)が関与する細胞過程を阻害する。ＭＯ７ｅ細胞は、増殖をＳＣＦに依存するヒト前巨核球性(Promegakaryocytic)白血病細胞系である。本発明の化合物は、ＳＣＦ受容体の自己リン酸化を阻害できる。
【００３０】
Ｒａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫシグナル伝達経路は、増殖シグナルに対する細胞応答を介在する。Ｒａｓは、ヒト癌の〜１５％で発癌性形に変異している。Ｒａｆファミリーはセリン／スレオニンタンパク質キナーゼに属し、それは３種のメンバー、Ａ−Ｒａｆ、Ｂ−Ｒａｆおよびｃ−Ｒａｆ(またはＲａｆ−１)を含む。薬剤標的としてのＲａｆの焦点は、Ｒａｓの下流因子エフェクターとしてのＲａｆの関係に絞られている。しかしながら、近年のデータは、Ｂ−Ｒａｆが、Ｒａｓ対立遺伝子の活性化を必要としないある種の腫瘍において顕著な役割を有し得ることを示唆する(Nature 417, 949 - 954(01 Jul 2002)。特に、Ｂ−Ｒａｆ変異は、悪性黒色腫の高い割合で検出されている。
【００３１】
黒色腫の既存の薬物処置は、その効果が限定されており、とりわけ後期黒色腫で限定されている。本発明の化合物はまたｂ−Ｒａｆキナーゼが関与する細胞過程も阻害し、ヒト癌、とりわけ黒色腫の処置の新しい治療の機会を提供する。
【００３２】
本発明の化合物はまたｃ−Ｒａｆキナーゼが関与する細胞過程を阻害する。ｃ−Ｒａｆはｒａｓ癌遺伝子により活性化され、これは多くのヒト癌で変異している。故に、ｃ−Ｒａｆのキナーゼ活性の阻害は、ｒａｓ介在腫瘍増殖を予防する方法を提供する[Campbell, S. L., Oncogene, 17, 1395(1998)]。
【００３３】
本発明の化合物はまたＫＤＲ、Ｆｌｔ−１およびＦｌｔ−４が関与する細胞過程を阻害する。脱制御された血管形成と関連する多くの疾患、例えば眼血管新生が原因の疾患、とりわけ網膜症(糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症)；乾癬；“イチゴ状血管腫”(＝血管腫)のような血管芽腫；関節炎、とりわけリウマチ性関節炎、アテローム性動脈硬化症および移植後に起こるアテローム性動脈硬化症、子宮内膜症または慢性喘息のような種々の炎症性疾患；および、とりわけ、腫瘍疾患(固形腫瘍だけでなく、また多くの初生血液細胞および白血病細胞がｃ−ｋｉｔ、ＫＤＲ、Ｆｌｔ−１およびＦｌｔ−４を発現するため、多くの白血病および他の液性腫瘍も)が既知である。Ｆｌｔ−４は、発育中のリンパ管で発現される。成人組織においてリンパ性内皮および幾分かの高内皮細静脈のみがＦｌｔ４ ｍＲＮＡを発現し、転移リンパ節およびリンパ管腫におけるリンパ性洞で増加した発現が起こる。ＫＤＲ−介在機能的効果のＫＤＲの触媒活性を阻害することによる阻害は、癌を含む血管形成性(angiogenized)疾患状態の処置における重要な治療的戦略であると考えられる。
【００３４】
別々の遺伝子によりそれぞれコードされるｐ３８ＭＡＰＫ(α、β、γ、δ)の多くの形は、浸透圧ストレス、ＵＶ光およびサイトカイン介在事象を含む様々な刺激に対する細胞の応答に関与するキナーゼカスケードの一部を形成する。ｐ３８のこれら４つのイソ型は、細胞内シグナル伝達の異なる態様を制御すると考えられる。その活性化は、ＴＮＦαのような前炎症性サイトカインの合成および酸性に至るシグナル伝達事象のカスケードの一部である。Ｐ３８は、他のキナーゼおよび転写因子を含む、下流基質のリン酸化により機能する。ｐ３８キナーゼを阻害する薬剤は、ＴＮＦα、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＩＬ−１βを含むが、これらに限定されないサイトカインの酸性を遮断することが示されている。末梢血単球(ＰＢＭＣ)は、インビトロでリポポリサッカライド(ＬＰＳ)で刺激されたとき、前炎症性サイトカインを発現および分泌することが示されている。Ｐ３８阻害剤は、ＰＢＭＣを、ＬＰＳでの刺激前にこのような化合物で前処置したときに、この作用を有効に遮断する。Ｐ３８阻害剤は、炎症性疾患の動物モデルにおいて有用である。多くの疾患状態の破壊的影響は、前炎症性サイトカインの過剰発現が原因である。ｐ３８阻害剤がこの過剰発現を制御する能力により、それらは疾患修飾剤として有効である。
【００３５】
ｐ３８の機能を遮断する分子は、骨再吸収、炎症、ならびに他の免疫および炎症が基本の病態の阻害に有効であることが示されている。故に、安全で有効なｐ３８阻害剤が、ｐ３８シグナル伝達、例えば、ＲＡの調節により制御できる疾患を軽減するための処置の手段を提供するであろう。故に、ｐ３８活性を阻害する本発明の化合物は、炎症、骨関節症、リウマチ性関節炎、癌、自己免疫性疾患の処置に、および他のサイトカイン介在疾患の処置に有用である。
【００３６】
トランスフォーミング増殖因子−ベータ(ＴＧＦβ)は、例えば、ＴＧＦβ１、ＴＧＦβ２、およびＴＧＦβ３を含む、タンパク質のスーパーファミリーを示し、これらは細胞増殖および分化、胚および骨発育、細胞外マトリックス形成、造血、免疫および炎症性応答の多面的(pleotropic)調節剤である。ＴＧＦβファミリーのメンバーは、細胞内シグナル伝達経路を開始して、最終的に細胞サイクルを制御する遺伝子の発現、増殖性応答の制御に至るか、またはアウトサイド−イン細胞シグナル伝達、細胞接着、移動および細胞間コミュニケーションを介在する細胞外マトリックスタンパク質に関する。結果として、ＴＧＦβ細胞内シグナル伝達経路の阻害剤である本発明の化合物は、制御されていないＴＧＦβ活性と関連する腎臓障害ならびに、糸球体腎炎(ＧＮ)、例えばメサンギウム増殖性ＧＮ、免疫性ＧＮ、および半月状ＧＮを含む過剰な線維症を含む、線維増殖性疾患の処置に有用である。他の腎臓状態は、糖尿病性腎症、腎臓間質性線維症、シクロスポリンを投与されている移植患者の腎臓線維症、およびＨＩＶ関連ネフロパシーを含む。コラーゲン血管障害は、進行性全身性硬化症、多発性筋炎、強皮症、皮膚筋炎、好酸球性筋膜炎、モルヘア、またはレイノー病の発生と関連するこれらのものを含む。過剰なＴＧＦβ活性が原因の肺線維症は、成人呼吸窮迫症候群、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、およびしばしば自己免疫性障害と関連する間質性肺線維症、例えば全身性エリテマトーデスおよび強皮症、化学物質接触、またはアレルギーを含む。線維増殖性特性と関連する他の自己免疫性障害は、リウマチ性関節炎である。線維増殖性状態は、外科的眼科工程と関連し得る。このような工程は、増殖性硝子体網膜症、眼内レンズ移植を伴う白内障摘出、および緑内障後ドレナージ手術を含む。
【００３７】
繊維芽細胞増殖因子受容体３は、骨増殖の負の制御作用を示し、そして軟骨細胞増殖の阻害をすることが示された。致死性骨異形成症は繊維芽細胞増殖因子受容体３の様々な変異により引き起こされ、１種の変異であるＴＤＩＩ ＦＧＦＲ３が構造的チロシンキナーゼ活性を有し、それは転写因子Ｓｔａｔ１を活性化し、細胞サイクル阻害因子の発現、細胞サイクル阻害、増殖停止および異常な骨発育に至る(Su et al., Nature, 1997, 386, 288-292)。ＦＧＦＲ３はまた多発性骨髄腫型の癌でしばしば発現される。
【００３８】
キナーゼであるｃ−Ｓｒｃは、多くの受容体の発癌性シグナルを伝達する。例えば、腫瘍におけるＥＧＦＲまたはＨＥＲ２／ｎｅｕの過剰発現はｃ−ｓｒｃの構造的活性化をもたらし、それは悪性細胞の特徴であるが、正常細胞には存在しない。他方、ｃ−ｓｒｃの発現を欠損するマウスは、大理石骨病表現型を示し、破骨細胞機能におけるｃ−ｓｒｃの重要な関与および関連障害への関与の可能性を示唆する。
【００３９】
細胞サイクルチェックポイントキナーゼであるＣｈｋ２は、ＤＮＡ損傷により活性化され、活性化Ｃｈｋ２はＣｄｃ２５Ｃをリン酸化し、それにより不活性化する。活性なＣｈｋ２がない細胞は、ＤＮＡ損傷に対するそれらのチェックポイント応答を欠く。Ｃｈｋ２の不活性化は、損傷されたＤＮＡにより誘発されるＧ２／Ｍ停止を廃止し、得られるチェックポイント欠損細胞をＤＮＡ損傷事象による致死に感受性にする。癌細胞がＧ２／Ｍチェックポイントの廃止に正常細胞よりも感受性であるため、Ｃｈｋ２を阻害する化合物は非常に興味深く、ＤＮＡ損傷事象による癌細胞の致死を改善する。
【００４０】
ヒトリボソームＳ６タンパク質キナーゼのファミリーは、少なくとも８種のメンバーから成る(ＲＳＫ１、ＲＳＫ２、ＲＳＫ３、ＲＳＫ４、ＭＳＫ１、ＭＳＫ２、ｐ７０Ｓ６Ｋおよびｐ７０Ｓ６ Ｋｂ)。リボソームタンパク質Ｓ６タンパク質キナーゼは、多面的機能において重要な役割を有し、その中でもタンパク質生合成中のｍＲＮＡ翻訳の制御に重要な役割を有する(Eur. J. Biochem 2000 November;267(21):6321-30, Exp Cell Res. Nov. 25, 1999;253(1):100-9, Mol Cell Endocrinol. May 25, 1999;151(1-2):65-77)。Ｓ６リボソームタンパク質のｐ７０Ｓ６によるリン酸化はまた細胞運動性(Immunol. Cell Biol. 2000 August;78(4):447-51)および細胞増殖(Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 2000;65:101-27)の制御にも関与しており、故に、腫瘍転移、免疫応答および腫瘍修復ならびに他の疾患状態において重要であり得る。
【００４１】
前記によって、本発明は、さらに、処置を必要とする対象における、上記のいずれかの疾患または障害を処置する方法であり、該対象に治療的有効量(下記“投与および医薬組成物”参照)の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することをを含む、方法を提供する。上記の全ての使用に関して、必要な投与量は投与形態、処置すべき特定の状態および所望の効果に依存して変化するであろう。
【００４２】
投与および医薬組成物
一般に、本発明の化合物は、治療的有効量で、当分野で既知の通常のかつ許容されるいずれかの形態を介して、単独でまたは１種もしくはそれ以上の他の治療剤と共に、投与されるであろう。治療的有効量は、疾患の重症度、対象の年齢および関連する健康状態、使用する化合物の効果および他の因子に依存して広範囲に変化し得る。一般に、全身的に十分な結果が、約０.０３から２.５mg／体重kgの投与により得られることが指示される。大型哺乳類、例えばヒトにおける指示される一日投与量は、約０.５mgから約１００mgであり、簡便には、例えば１日４回までの分割用量で、または遅延形で投与する。経口投与用の適当な単位投与形は、約１から５０mg活性成分を含む。
【００４３】
本発明の化合物は、医薬組成物として、任意の慣用の経路で、特に経腸的、例えば、経口的に、例えば、錠剤またはカプセルの形で、または非経腸的に、例えば、注射可能溶液または懸濁液の形で、局所的に、例えば、ローション、ゲル、軟膏またはクリームの形で、または経鼻または坐薬形で投与できる。遊離形または薬学的に許容される塩形の本発明の化合物を、少なくとも１種の薬学的に許容される担体または希釈剤と共に含む医薬組成物は、混合、造粒またはコーティング法による慣用の方法で製造できる。例えば、経口組成物は、活性成分をａ)希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリシン；ｂ)滑剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウムまたはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール；錠剤についてはまたｃ)結合剤、例えば、マグネシウムアルミニウムシリケート、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドン；望むならばｄ)崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、アルギン酸またはそのナトリウム塩、または起沸性混合物；および／またはｅ)吸収剤、着色剤、香味剤および甘味剤と共に含む、錠剤またはゼラチンカプセルである。注射可能組成物は、水性等張溶液または懸濁液であり、坐薬は脂肪エマルジョンまたは懸濁液から製造できる。本組成物は滅菌できおよび／またはアジュバント、例えば、防腐剤、安定化剤、湿潤剤または乳化剤、溶解促進剤、浸透圧調整用塩および／または緩衝剤を含んでよい。加えて、それらは他の治療的に価値のある物質も含み得る。経皮的投与のための適当な製剤は、有効量の本発明の化合物と担体を含む。担体は、宿主の皮膚を介した通過を助けるための吸収可能な薬理学的に許容される溶媒を含む。例えば、経皮デバイスは、裏打ち部材、化合物を所望により担体と含む貯蔵部、所望により、化合物の宿主の皮膚への送達を制御されかつ予定された速度で長時間送達するための速度制御バリアおよび、皮膚にデバイスを固定するための手段を含む、バンデージの形である。マトリックス経皮製剤も使用し得る。例えば皮膚および眼への、局所適用のための適当な製剤は、好ましくは当分野で既知の水性溶液、軟膏、クリームまたはゲルを含む。これらは可溶化剤、安定化剤、張性増強剤(tonicity enhancing agent)、緩衝剤および防腐剤を含み得る。
【００４４】
本発明の化合物は、１種またはそれ以上の治療剤との組み合わせで、治療的有効量で投与できる(医薬的組み合わせ)。例えば、上記の疾患または障害のいずれかを予防または処置する他の薬剤と相乗効果が起こり得る。これらは、例えばシクロスポリン、ラパマイシン、またはアスコマイシンもしくはそれらの免疫抑制性類似体、例えばシクロスポリンＡ(ＣｓＡ)、シクロスポリンＧ、ＦＫ−５０６、ラパマイシン、または同等な化合物、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、メトトレキサート、ブレキナール、レフルノミド、ミゾルビン、ミコフェノール酸、ミコフェノール酸モフェチル、１５−デオキシスペルグアリン、免疫抑制性抗体、とりわけ白血球受容体、例えばＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ２５、ＣＤ２８、Ｂ７、ＣＤ４５、ＣＤ５８またはそれらのリガンドに対するモノクローナル抗体、または他の免疫調節性化合物、例えばＣＴＬＡ４１ｇと組み合わせたときの、免疫調節性または抗炎症性物質を含む。本発明の化合物を他の治療剤と共に投与するとき、併用投与する化合物の投与量は、もちろん、用いる併用剤のタイプ、用いる具体的薬剤、処置すべき状態などに依存して変化するであろう。
【００４５】
本発明はまた、ａ)本明細書に記載の通りの、遊離形または薬学的に許容される塩形の本発明の化合物である第一剤、およびｂ)少なくとも１種の併用剤を含む、医薬的組み合わせ、例えばキットを提供する。該キットはその投与のための指示書を含み得る。
【００４６】
本明細書で利用する“併用投与”または“組み合わせ投与”などの用語は、選択した複数の治療剤の単独の患者への投与を包含することを意味し、薬剤を必ずしも同じ投与経路でまたは同時に投与するものではない処置レジメンを含むことを意図する。
【００４７】
本明細書で使用する“医薬的組み合わせ”なる用語は、１種以上の活性成分の混合または組み合わせに由来する製品を意味し、活性成分の固定されたまたは固定されていない組み合わせの両方を含む。“固定された組み合わせ”は、活性成分、例えば式Ｉの化合物および併用剤を、両方とも患者に同時に１つの物または投与量として投与することを意味する。“固定されていない組み合わせ”は、活性成分、例えば式Ｉの化合物および併用剤を、患者に、別々の物として、同時に、一緒にまたは具体的時間制限なしに連続して投与し、ここで、このような投与が患者の体内で２種の化合物の治療的有効レベルを提供することを意味する。後者はまたカクテル療法、例えば、３種またはそれ以上の活性成分の投与にも適用できる。
【００４８】
本発明の化合物の製造法
本発明はまた本発明の化合物の製造法を含む。記載の反応において、反応性官能基、例えばヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオまたはカルボキシ基を、これらが最終産物で望まれるとき、反応へのそれらの望ましくない参加を避けるために、保護する必要があり得る。慣用の保護基を、標準的技法に従い行うことができ、例えば、T.W. Greene and P. G. M. Wuts in “Protective Groups in Organic Chemistry”, John Wiley and Sons, 1991を参照のこと。
【００４９】
Ｒ５が水素である式Ｉの化合物は、下記反応スキームＩの通りに進行して製造できる：
【化２】
(式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、発明の概要において式Ｉについて定義した通りである)。
【００５０】
本発明の化合物(式Ｉ)は、式２の化合物と式３の化合物を、適当な溶媒(例えば、塩化メチレンなど)、適切なアミン(例えば、ジイソプロピルエチルアミンなど)の存在下、適切な触媒(酢酸銅(II)など)を使用して反応させることにより製造できる。該反応は、１０から５０℃の範囲の温度で行い、完了まで約２４時間かかり得る。式Ｉの化合物の合成は、下記実施例に詳述する。
【００５１】
本発明の化合物を製造するための付加的方法
本発明の化合物は、遊離塩基形の化合物と、薬学的に許容される無機または有機酸の反応により、薬学的に許容される酸付加塩として製造できる。あるいは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩基付加塩を、遊離酸形の化合物と、薬学的に許容される無機または有機塩基の反応により製造できる。あるいは、塩形の本発明の化合物を、塩の出発物質または中間体を使用して製造できる。
【００５２】
本発明の化合物の遊離酸または遊離塩基形は、対応する塩基付加塩または酸付加塩形から各々製造できる。例えば酸付加塩形の本発明の化合物は、対応する遊離塩基に、適当な塩基(例えば、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど)で処理することにより変換できる。塩基付加塩形の本発明の化合物は、対応する遊離酸に、適当な酸(例えば、塩酸など)で処理することにより変換できる。
【００５３】
酸化されていない形の本発明の化合物を、本発明の化合物のＮ−オキシドから、還元剤(例えば、硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、リチウムボロハイドライド、水素化ホウ素ナトリウム、リントリクロライド、トリブロマイドなど)で、適当な不活性有機溶媒(例えばアセトニトリル、エタノール、水性ジオキサンなど)中、０から８０℃で処理することにより製造できる。
【００５４】
本発明の化合物のプロドラッグ誘導体を、当業者に既知の方法により製造できる(例えば、さらなる詳細はSaulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985参照)。例えば、適切なプロドラッグは、誘導体化していない本発明の化合物と、適当なカルバミル化剤(例えば、１,１−アシルオキシアルキルカルバノクロリデート、パラ−ニトロフェニルカーボネートなど)を反応させることにより製造できる。
【００５５】
本発明の化合物の被保護誘導体は、当業者に既知の手段により製造できる。保護基の創成およびそれらの除去に適用できる技術の詳述は、“Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999に見ることができる。
【００５６】
本発明の化合物は、溶媒和物(例えば、水和物)として簡便に製造でき、または本発明の工程中に形成される。本発明の化合物の水和物は、ジオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールのような有機溶媒を使用する、水性／有機溶媒混合物からの再結晶により簡便に製造できる。
【００５７】
本発明の化合物は、該化合物のラセミ混合物と、光学活性分割剤を反応させ、ジアステレオ異性体化合物のペアを形成され、ジアステレオマーを分離し、光学的に純粋なエナンチオマーを回収することにより、それらの個々の立体異性体として製造できる。エナンチオマーの分離は本発明の化合物の共有結合的ジアステレオ誘導体を使用して行うことができるが、分離可能な複合体(例えば、結晶性ジアステレオマー塩)が好ましい。ジアステレオマーは、異なる物理特性(例えば、融点、沸点、溶解度、反応性など)を有し、これらの差異を利用して容易に分割できる。ジアステレオマーは、クロマトグラフィー、または好ましくは、溶解度の差異を利用した分離／分割法により分離できる。光学的に純粋なエナンチオマーを、次いで、ラセミ体化をもたらさない任意の実際的手段により、分割剤と共に回収する。化合物の立体異性体それらのラセミ混合物からの分離に適用可能な技術のより詳細な記載は、Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolution”, John Wiley and Sons, Inc., 1981に見ることができる。
【００５８】
要約すると、式Ｉの化合物は、下記を含む方法により製造できる：
(ａ)反応スキームＩのもの；および
(ｂ)所望により、本発明の化合物の薬学的に許容される塩への変換；
(ｃ)所望により、塩形の本発明の化合物の非塩形への変換；
(ｄ)所望により、酸化されていない本発明の化合物の薬学的に許容されるＮ−オキシドの変換；
(ｅ)所望により、本発明の化合物のＮ−オキシド形の、その酸化されていない形への変換；
(ｆ)所望により、異性体の混合物からの本発明の化合物の個々の異性体への分割；
(ｇ)所望により、誘導体化されていない本発明の化合物の、薬学的に許容されるプロドラッグ誘導体への変換；および
(ｈ)所望により、本発明の化合物のプロドラッグ誘導体の、その誘導体化されていない形への変換。
【００５９】
出発物質の製造法が具体的に記載されていない限り、該化合物は既知であるか、当分野で既知の方法に準じて製造できるか、または、後記の実施例に記載の通りに製造できる。
【００６０】
当業者には、上記の変換が本発明の化合物の製造法の代表的な方法であるだけであり、他の既知の方法を同様に使用できることは明白であろう。
【００６１】
実施例
本発明を、本発明の式Ｉの化合物の製造法を説明する下記実施例によりさらに例示するが、限定するものではない。
実施例１
Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド
【化３】
【００６２】
３−(Ｎ,Ｎ−ジメチルアミン)アニリン(１０.０ｇ、０.０４０mol)およびジイソプロピルエチルアミン(１５.７ｇ、０.１２１mol)の混合物のブタノール(４００mL)溶液を１００℃に加熱する。４,６−ジクロロピリミジン(７.８１ｇ、０.０５２４mol)を２０分かけてゆっくり添加する。白色ガスおよび溶媒の沸騰が、添加中観察される。得られた溶液を２４時間撹拌し、ｐＨ測定は酸性条件を示す。さらにジイソプロピルエチルアミン(７.８１ｇ、０.０５２４mol)を添加し、反応混合物を２４時間撹拌する。ｐＨ測定はまた酸性混合物を示し、さらにジイソプロピルエチルアミン(７.８１ｇ、０.０５２４mol)を添加し、混合物をさらに２４時間撹拌する。反応混合物を急速に冷却し、溶媒を真空下で除去する。残った黄色残渣を酢酸エチル(１００mL)に溶解し、水(３×)で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、大量の沈殿が出現するまで濃縮する。固体を濾過により単離し、ヘキサンで洗浄し、高真空で２４時間乾燥させて、化合物２(７.０２ｇ、７０％)を得る；ＭＳ ｍ／ｚ(Ｍ＋Ｈ＋)２４９.１０。
【００６３】
化合物２(１００mg、０.４mmol)、２−(ボロン酸)アニリン(１１０mg、０.８mmol)の混合物のＮ,Ｎ−ジメチルホルミド(５mL)溶液に、テトラキス−(トリフェニルホスフィン)−パラジウム(０)(９３mg、０.０８mmol)および４Ｍ 炭酸ナトリウム(１.６mL、１.６mmol)を添加する。試験管を密閉し、マイクロ波中に１２００秒、１４０℃で置く。混合物を次いで塩水(１０mL)に注ぎ、酢酸エチル(３×)で抽出する。有機層を合わせ、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させる。濾過後、有機溶媒を除去し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、化合物３(１００mg、８１％)を得る；ＭＳ ｍ／ｚ(Ｍ＋Ｈ＋)３０６.１。
【００６４】
化合物３(１５０mg、０.５mmol)、３−ニトロベンゼンボロン酸(２５０mg、１.５mmol)、酢酸銅(II)(４５mg、０.２５mmol)およびジイソプロピルエチルアミンアミン(２５０mg、２.０mmol)の混合物の塩化メチレン(１０mL)溶液を室温で一晩撹拌する。混合物を塩化メチレンで希釈し、飽和重炭酸ナトリウムで洗浄する。有機部分を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物を次いでシリカゲルクロマトグラフィー(そのままの塩化メチレン)で精製し、化合物４(１５０mg、７１％収率)を得る；ＭＳ ｍ／ｚ(Ｍ＋Ｈ＋)４２７.１０。
【００６５】
化合物４(１５０mg、０.３５mmol)および１０％Ｐｄ−Ｃ(１５mg)の混合物のメタノール(１０mL)を水素(１気圧)下、室温で３０分撹拌した。パラジウム触媒を濾過により除去し、メタノール溶液を濃縮乾固し、化合物５(１００mg、７７％収率)を黄色シロップとして得た；ＭＳ ｍ／ｚ(Ｍ＋Ｈ＋)３９７.３０。
【００６６】
化合物５(２０mg、０.０５mmol)、４−(Ｎ−メチル−ピペラジル)−メチル−安息香酸(１４mg、０.０６mmol)、Ｏ−(７−アザベンゾトリアゾル−１−イル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ’,Ｎ’−テトラメチル−ウロニウムヘキサフルオロホスフェート(２３mg、０.０６mmol)およびジイソプロピルエチルアミン(８mg、０.０６mmol)の塩化メチレン(２mL)を室温で一晩撹拌する。ＬＣＭＳ精製により、Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド(９.２mg、３０％収率)を得る：1H NMR 400 Hz(CDCl3)δ 2.51(s, 3H), 2.61(br, 4H), 2.78(br, 4H), 2.97(s, 6H), 3.58(s, 2H), 6.57(m, 1H), 6.68(m, 2H), 6.84(m, 1H), 6.97(m, 1H), 7.10(m, 2H), 7.18(m, 1H), 7.26(m, 2H), 7.40(d, J = 8.12 Hz, 2H), 7.46(d, J = 8.12 Hz, 2H), 7.54(s, br, 1H), 7.79(d, J = 8.14 Hz, 2H), 7.86(s, 1H), 8.69(s, 1H); MS m/z(M+H+)613.30。
【００６７】
上記の実施例に記載の方法を繰り返し、適当な出発物質を使用して、表１に示す通りの下記の式Ｉの化合物を得る。
表１
【表１】
【表２】
【表３】
【表４】
【表５】
【表６】
【表７】
【表８】
【表９】
【００６８】
アッセイ
本発明の化合物を、それらがＢＣＲ−Ａｂｌを発現する３２Ｄ細胞(３２Ｄ−ｐ２１０)の細胞増殖を、親３２Ｄ細胞と比較して選択的に阻害する能力についてアッセイする。これらのＢＣＲ−Ａｂｌで形質転換した細胞の増殖を選択的に阻害する化合物を、Ｂｃｒ−ａｂｌの野生型または変異型のいずれかを発現するＢａ／Ｆ３細胞の増殖性活性について試験する。加えて、化合物をそれらがｂ−Ｒａｆを阻害する能力についてアッセイする。
【００６９】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ依存性増殖の阻害(ハイスループット法)
使用するマウス細胞系は、ＢＣＲ−Ａｂｌ ｃＤＮＡ(３２Ｄ−ｐ２１０)で形質転換した３２Ｄ造血先祖細胞系である。これらの細胞を、ペニシリン５０μg／mL、ストレプトマイシン５０μg／mLおよびＬ−グルタミン２００mMを添加したＲＰＭＩ／１０％胎児ウシ血清(ＲＰＭＩ／ＦＣＳ)に維持する。形質転換されていない３２Ｄ細胞を、ＩＬ３の供給源として１５％のＷＥＨＩを添加された馴化培地で同様に維持する。
【００７０】
５０μlの３２Ｄまたは３２Ｄ−ｐ２１０細胞懸濁液を、Greiner 384ウェルマイクロプレート(黒色)に、５０００細胞／ウェルの密度で播種する。５０ｎｌの試験化合物(ＤＭＳＯ貯蔵溶液中１mMを)を各ウェルに添加する(ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する)。細胞を７２時間、３７℃で、５％ＣＯ２でインキュベートする。１０μlの６０％Alamar Blue溶液(Tek diagnostics)を各ウェルに添加し、細胞をさらに２４時間インキュベートする。蛍光強度(励起５３０nm、発光５８０nm)を、AcquestＴＭシステム(Molecular Devices)を使用して定量する。
【００７１】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ依存性増殖の阻害
３２Ｄ−ｐ２１０細胞を９６ウェルＴＣプレートに１５,０００細胞／ウェルの密度で播種する。５０μLの試験化合物の２倍連続希釈(Ｃｍａｘは４０μM)を各ウェルに添加する(ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する)。細胞を４８時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベート後、１５μLのＭＴＴ(Promega)を各ウェルに添加し、細胞をさらに５時間インキュベートする。５７０nmの光学密度を分光測光により定量し、ＩＣ５０値、すなわち５０％阻害に必要な化合物の濃度を用量応答曲線から決定する。
【００７２】
細胞サイクル分布に対する効果
３２Ｄおよび３２Ｄ−ｐ２１０細胞を６ウェルＴＣプレートに、５mlの培地中２.５×１０６細胞／ウェルで播種し、１または１０μMの試験化合物を添加する(ＳＴＩ５７１を対照として包含する)。細胞を次いで２４時間または４８時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。２mlの細胞懸濁液をＰＢＳで洗浄し、７０％ＥｔＯＨに１時間固定し、ＰＢＳ／ＥＤＴＡ／ＲＮａｓｅ Ａで３０分処置する。ヨウ化プロピジウム(Ｃｆ＝１０μg／ml)を添加し、蛍光強度をFACScaliburＴＭシステム(BD Biosciences)でのフローサイトメトリーにより定量する。本発明の試験化合物は、３２Ｄ−ｐ２１０細胞に対してアポトーシス作用を証明するが、３２Ｄ親細胞ではアポトーシスを誘発しない。
【００７３】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化に対する効果
ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化を、ｃ−ａｂｌ特異的捕捉抗体および抗ホスホチロシン抗体を使用した、捕捉Ｅｌｉｓａで定量する。３２Ｄ−ｐ２１０細胞を９６ウェルＴＣプレートに、５０μLの培地中２×１０５細胞／ウェルで播種する。５０μLの試験化合物の２倍連続希釈(Ｃｍａｘは１０μM)を各ウェルに添加する(ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する)。細胞を、９０分、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。次いで、細胞を１時間、氷上でプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含む１５０μLの融解緩衝液(５０mM Ｔｒｉｓ ＨＣｌ、ｐＨ７.４、１５０mM ＮａＣｌ、５mM ＥＤＴＡ、１mM ＥＧＴＡおよび１％ＮＰ−４０)で処理する。５０μLの細胞融解物を、予め抗ａｂｌ特異的抗体でコーティングし、ブロックした９６ウェルoptiplateに添加する。プレートを、４時間、４℃でインキュベートする。ＴＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ２０緩衝液で洗浄後、５０μLのアルカリホスファターゼ結合抗ホスホチロシン抗体を添加し、プレートをさらに一晩４℃でインキュベートする。ＴＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ２０緩衝液で洗浄後、９０μLの発光基質を添加し、発光をAcquestＴＭシステム(Molecular Devices)を使用して定量する。ＢＣＲ−Ａｂｌ発現細胞の増殖を阻害する本発明の試験化合物は、細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化を用量依存的方法で阻害する。
【００７４】
Ｂｃｒ−ａｂｌの変異型を発現する細胞の増殖に対する効果
本発明の化合物を、ＢＣＲ−Ａｂｌの野生型または、ＳＴＩ５７１に対する耐性を付与するか感受性を低下させる変異型(Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７Ｌ、Ｍ３５１Ｔ)のいずれかを発現するＢａ／Ｆ３細胞に対するそれらの抗増殖効果を試験する。変異体ＢＣＲ−Ａｂｌ発現細胞および非形質転換細胞に対するこれらの化合物の抗増殖性効果を、上記の通り１０、３.３、１.１および０.３７μMで試験した(ＩＬ３を欠く培地中)。非形質転換細胞に対して毒性がない化合物のＩＣ５０値を、上記の通りに得た用量応答曲線から決定した。
【００７５】
ｂ−Ｒａｆ
本発明の化合物を、それらのｂ−Ｒａｆを阻害する能力について試験する。アッセイを、黒色壁かつ透明底の３８４ウェルMaxiSorpプレート(NUNC)で行う。基質、ＩκＢαをＤＰＢＳ(１：７５０)で希釈し、１５μlを各ウェルに添加する。プレートを４℃で一晩インキュベートし、ＥＭＢＬＡプレート洗浄機を使用して、３回ＴＢＳＴ(２５mM Ｔｒｉｓ、ｐＨ８.０、１５０mM ＮａＣｌおよび０.０５％Ｔｗｅｅｎ−２０)で洗浄する。プレートをSuperblock(１５μl／ウェル)で３時間、室温でブロックし、ＴＢＳＴで３回洗浄し、軽く叩いて乾燥させる。２０μM ＡＴＰ(１０μl)含有アッセイ緩衝液、続いて１００ｎｌまたは５００ｎｌの化合物を各ウェルに添加する。Ｂ−Ｒａｆをアッセイ緩衝液で希釈し(２５μl中に１μl)、１０μlの希釈したｂ−Ｒａｆを各ウェルに添加する(０.４μg／ウェル)。プレートを室温で２.５時間インキュベートする。キナーゼ反応を、プレートを６回ＴＢＳＴで洗浄することにより停止させる。Ｐｈｏｓｐｈ−ＩκＢα(Ｓｅｒ３２／３６)抗体をSuperblock中で希釈し(１：１０,０００)、１５μlを各ウェルに添加する。プレートを４℃で一晩インキュベートし、ＴＢＳＴで６回洗浄する。ＡＰ結合ヤギ抗マウスＩｇＧをSuperblockで希釈し(１：１,５００)、１５μlを各ウェルに添加する。プレートを室温で１時間インキュベートし、ＴＢＳＴで６回洗浄する。１５μlのAttophos AP基質を各ウェルに添加し、プレートを室温で１５分インキュベートする。プレートをAcquestまたはAnalyst GTで、Fluorescence Intensity Nanxin BBT anion(５０５二色性ミラー)を使用して読み取る。
【００７６】
Upstate KinaseProfilerＴＭ−放射酵素的フィルター結合アッセイ
本発明の化合物を、一連のキナーゼの個々のメンバーを阻害する能力についてアッセイする(キナーゼの部分的、非限定的リストは下記を含む：Ａｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１およびＦＬＴ４)。化合物を、１０μMの最終濃度でデュプリケートで、この一般的プロトコールに従い試験する。キナーゼ緩衝液組成および基質は、“Upstate KinaseProfilerＴＭ”パネルに含まれる異なるキナーゼについて変わることは注意すべきである。キナーゼ緩衝液(２.５μL、１０×−必要であればＭｎＣｌ２含有)、キナーゼ緩衝液中の活性キナーゼ(０.００１−０.０１単位；２.５μL)、特異的またはポリ(Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ)ペプチド(５−５００μMまたは.０１mg／ml)およびキナーゼ緩衝液(５０μM；５μL)を、氷上でエッペンドルフで混合する。Ｍｇ／ＡＴＰミックス(１０μL；６７.５(または３３.７５)mM ＭｇＣｌ２、４５０(または２２５)μM ＡＴＰおよび１μCi／μl [γ−３２Ｐ]−ＡＴＰ(３０００Ci／mmol))を添加し、反応物を約３０℃で約１０分インキュベートする。反応混合物を２cm×２cm Ｐ８１(ホスホセルロース、正に荷電したペプチド基質のため)またはWhatman No. 1(ポリ(Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ)ペプチド基質のため)試験紙升目にスポット(２０μL)する。アッセイ升目を４回、各５分、０.７５％リン酸で、そして１回アセトンで５分洗浄する。アッセイ升目をシンチレーションバイアルに移し、５mlシンチレーションカクテルを添加し、基質への３２Ｐ取り込み(cpm)をBeckmanシンチレーションカウンターで計数する。各反応について阻害パーセントを計算する。
【００７７】
遊離形または薬学的に許容される塩形の式Ｉの化合物は、例えば、本願に記載のインビトロ試験法により示される通り、価値のある薬理学的特性を示す。例えば、式Ｉの化合物は、好ましくは１×１０−１０から１×１０−５ＭのＩＣ５０を示し、好ましくは野生型ＢＣＲ−Ａｂｌおよびｂ−Ｒａｆに対しては１μMより少ない。例えば、Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド(実施例１)は、ｂ−Ｒａｆに対して０.６６７μMのＩＣ５０を有する。
【００７８】
式Ｉの化合物は、１０μMの濃度で、Ａｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４キナーゼに対して、好ましくは５０％より大きい、好ましくは約７０％より大きい阻害パーセンテージを示す。例えば、Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド(実施例１)は、１０μMの濃度で、下記キナーゼを括弧内に示すパーセンテージで阻害する(例えば、１００％は完全な阻害、０％は阻害なしを意味する)：Ａｂｌ(９０％)、ｃ−ＲＡＦ(９６％)、ＣＨＫ２(５９％)、ＦＧＦＲ３(５６％)、ｐ７０Ｓ６Ｋ(７９％)、ＰＤＧＦＲα(７１％)およびＰＫＣα(６４％)。
【００７９】
ここに記載の例および態様は、説明の目的のためのみであり、それに照らした様々な修飾または変化が当業者には示唆され、それらは本発明の精神および範囲の範囲内および添付の特許請求の範囲内に包含されることは理解されるべきである。本明細書で引用する全ての刊行物、特許および特許出願は全ての目的のために引用して本明細書に包含する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
〔式中、
ｎは０、１、２または３であり；
Ｚは＝Ｎ−および＝ＣＨ−から選択され；
Ｒ１は水素および−ＮＲ４Ｒ５から選択され；ここで、Ｒ４は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そしてＲ５はＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、Ｒ５の全てのアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望によりシアノ、ニトロ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシおよび−ＮＲ６Ｒ７から独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｒ６およびＲ７は、独立して水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ２は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３はハロ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｒ９、−ＸＣ(Ｏ)Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ(Ｏ)Ｒ９および−ＸＣ(Ｏ)ＮＲ８Ｒ９から選択され；ここで、Ｘは結合またはＣ１−４アルキレンであり、Ｒ８は水素およびＣ１−６アルキルから選択され、そしてＲ９はＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され；ここで、Ｒ９の全てのアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望によりハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、−ＸＯＲ８、−ＸＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)２Ｎ(ＯＲ８)２、−ＸＳ(Ｏ)Ｎ(ＸＯＲ８)２、−ＸＳＮ(ＯＲ８)２、−ＸＳＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)Ｒ１０および−ＸＳ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘは結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ８は水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてＲ１０はＣ３−８ヘテロシクロアルキルおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるラジカルであり；ここで、Ｒ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、所望によりハロ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよく；そしてＲ１０の任意の１個の環炭素は所望により−Ｃ(Ｏ)−で置換されていてよく；そしてフェニル環ＡおよびＢは−Ｎ＝で置換された−Ｃ＝基を４個まで有し得る。〕
の化合物およびその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物および異性体。
【請求項２】
Ｒ１が水素および−ＮＲ４Ｒ５から選択され；ここで、Ｒ４が水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そしてＲ５が、所望によりハロ−置換−Ｃ１−６アルキルおよび−ＮＲ６Ｒ７から独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよいＣ６−１０アリールであり；Ｒ６およびＲ７が、独立して水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そして
Ｒ２が水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３がハロ、Ｃ１−６アルキル、−ＸＣ(Ｏ)Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ(Ｏ)Ｒ９および−ＸＣ(Ｏ)ＮＲ８Ｒ９から選択され；ここで、Ｘが結合またはＣ１−４アルキレンであり、Ｒ８が水素およびＣ１−６アルキルから選択され、そしてＲ９がＣ６−１０アリールおよびＣ３−１２シクロアルキルから選択され；ここで、Ｒ９の全てのアリールまたはシクロアルキルが、所望により−ＸＯＲ８、−ＸＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)２Ｎ(ＸＯＲ８)２および−ＸＳ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘが結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ８が水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてＲ１０がＣ３−８ヘテロシクロアルキルおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるラジカルであり；ここで、Ｒ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、所望により１個から３個のＣ１−６アルキル基で置換されていてよく；そしてＲ１０の任意の１個の環炭素が所望により−Ｃ(Ｏ)−で置換されていてよい、
請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が水素および−ＮＨＲ５から選択され；ここで、Ｒ５が所望によりトリフルオロメチルおよびジメチルアミノから独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよいフェニルであり；そしてＲ２が水素である、
請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３がハロ、メチル、ホルミル、ジメチルアミノ、−ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ９および−Ｃ(Ｏ)ＮＨＲ９から選択され；ここで、Ｒ９がフェニルおよびシクロプロピルから選択され；Ｒ９の全てのアリールまたはシクロアルキルが、所望により−ＣＨ２ＯＨ、−ＸＲ１０、−Ｓ(Ｏ)２Ｎ(Ｃ２Ｈ４ＯＨ)２および−Ｓ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘが結合またはメチレンであり、そしてＲ１０がピペラジニル、モルホリノおよび５−オキソ−４,５−ジヒドロ−ピラゾル−１−イルから選択されるラジカルであり；ここで、Ｒ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、所望により１個から３個までのメチル基で置換されていてよい、
請求項２記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ４がハロ、トリフルオロメチルおよび−ＸＲ１０から選択され；ここで、Ｘが結合またはメチレンであり；Ｒ１０がイミダゾリル、ピペラジニルおよびモルホリノから選択され；ここで、全てのヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルは、所望によりメチルで置換されていてよい、
請求項２記載の化合物。
【請求項６】
Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−(３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−ヒドロキシメチル−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−３−(モルホリン−４−スルホニル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(３−メチル−５−オキソ−４,５−ジヒドロ−ピラゾル−１−イル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−３−(４−メチル−ピペラジン−１−スルホニル)−ベンズアミド；４−[ビス−(２−ヒドロキシ−エチル)−スルファモイル]−Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−[３−(２−ピリミジン−４−イル−フェニルアミノ)−フェニル]−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピル−３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアミド；｛６−[２−(３−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(２−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(４−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(２−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(３−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(４−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｏ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｍ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｐ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアルデヒド；４−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアルデヒド；(４−トリフルオロメチル−フェニル)−｛６−[２−(２−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−アミン；(４−トリフルオロメチル−フェニル)−｛６−[２−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−アミン；Ｎ,Ｎ−ジメチル−Ｎ’−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニル｝−ベンゼン−１,４−ジアミン；フェニル−[６−(２−フェニルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−アミン；｛６−[２−(２,６−ジクロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(３,４,５−トリメトキシ−フェニル)−アミン；および｛６−[２−(２,６−ジクロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−フェニル]−アミン
から選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項７】
治療的有効量の請求項１記載の化合物を、薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて含む、医薬組成物。
【請求項８】
動物に治療的有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、動物における、キナーゼおよび／またはサイトカイン活性の阻害が、その疾患の病状および／または総体症状を予防、阻止または軽減できるものである疾患を処置する方法。
【請求項９】
キナーゼがＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１およびＦＬＴ４から選択される、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
Ａｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４のキナーゼ活性が、その疾患の病状および／または総体症状に関与するものである、動物における疾患の処置用医薬の製造のための、請求項１記載の化合物の使用。
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
〔式中、
ｎは０、１、２または３であり；
Ｚは＝Ｎ−および＝ＣＨ−から選択され；
Ｒ１は水素および−ＮＲ４Ｒ５から選択され；ここで、Ｒ４は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そしてＲ５はＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、Ｒ５の全てのアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望によりシアノ、ニトロ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシおよび−ＮＲ６Ｒ７から独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｒ６およびＲ７は、独立して水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ２は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３はハロ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｒ９、−ＸＣ(Ｏ)Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ(Ｏ)Ｒ９および−ＸＣ(Ｏ)ＮＲ８Ｒ９から選択され；ここで、Ｘは結合またはＣ１−４アルキレンであり、Ｒ８は水素およびＣ１−６アルキルから選択され、そしてＲ９はＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され；ここで、Ｒ９の全てのアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは、所望によりハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、−ＸＯＲ８、−ＸＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)２Ｎ(ＯＲ８)２、−ＸＳ(Ｏ)Ｎ(ＸＯＲ８)２、−ＸＳＮ(ＯＲ８)２、−ＸＳＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)Ｒ１０および−ＸＳ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘは結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ８は水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてＲ１０はＣ３−８ヘテロシクロアルキルおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるラジカルであり；ここで、Ｒ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、所望によりハロ、シアノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよく；そしてＲ１０の任意の１個の環炭素は所望により−Ｃ(Ｏ)−で置換されていてよく；そしてフェニル環ＡおよびＢは−Ｎ＝で置換された−Ｃ＝基を４個まで有し得る。〕
の化合物およびその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物および異性体。
【請求項２】
Ｒ１が水素および−ＮＲ４Ｒ５から選択され；ここで、Ｒ４が水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そしてＲ５が、所望によりハロ−置換−Ｃ１−６アルキルおよび−ＮＲ６Ｒ７から独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよいＣ６−１０アリールであり；Ｒ６およびＲ７が、独立して水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そして
Ｒ２が水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３がハロ、Ｃ１−６アルキル、−ＸＣ(Ｏ)Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｒ８、−ＸＮＲ８Ｃ(Ｏ)Ｒ９および−ＸＣ(Ｏ)ＮＲ８Ｒ９から選択され；ここで、Ｘが結合またはＣ１−４アルキレンであり、Ｒ８が水素およびＣ１−６アルキルから選択され、そしてＲ９がＣ６−１０アリールおよびＣ３−１２シクロアルキルから選択され；ここで、Ｒ９の全てのアリールまたはシクロアルキルが、所望により−ＸＯＲ８、−ＸＲ１０、−ＸＳ(Ｏ)２Ｎ(ＸＯＲ８)２および−ＸＳ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘが結合またはＣ１−６アルキレンであり、Ｒ８が水素またはＣ１−６アルキルであり、そしてＲ１０がＣ３−８ヘテロシクロアルキルおよびＣ５−１０ヘテロアリールから選択されるラジカルであり；ここで、Ｒ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、所望により１個から３個のＣ１−６アルキル基で置換されていてよく；そしてＲ１０の任意の１個の環炭素が所望により−Ｃ(Ｏ)−で置換されていてよい、
請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が水素および−ＮＨＲ５から選択され；ここで、Ｒ５が所望によりトリフルオロメチルおよびジメチルアミノから独立して選択される１個から３個のラジカルで置換されていてよいフェニルであり；そしてＲ２が水素である、
請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３がハロ、メチル、ホルミル、ジメチルアミノ、−ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ９および−Ｃ(Ｏ)ＮＨＲ９から選択され；ここで、Ｒ９がフェニルおよびシクロプロピルから選択され；Ｒ９の全てのアリールまたはシクロアルキルが、所望により−ＣＨ２ＯＨ、−ＸＲ１０、−Ｓ(Ｏ)２Ｎ(Ｃ２Ｈ４ＯＨ)２および−Ｓ(Ｏ)２Ｒ１０から選択されるラジカルで置換されていてよく；ここで、Ｘが結合またはメチレンであり、そしてＲ１０がピペラジニル、モルホリノおよび５−オキソ−４,５−ジヒドロ−ピラゾル−１−イルから選択されるラジカルであり；ここで、Ｒ１０の全てのヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、所望により１個から３個までのメチル基で置換されていてよい、
請求項２記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ４がハロ、トリフルオロメチルおよび−ＸＲ１０から選択され；ここで、Ｘが結合またはメチレンであり；Ｒ１０がイミダゾリル、ピペラジニルおよびモルホリノから選択され；ここで、全てのヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルは、所望によりメチルで置換されていてよい、
請求項２記載の化合物。
【請求項６】
Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−(３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−ヒドロキシメチル−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−３−(モルホリン−４−スルホニル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−４−(３−メチル−５−オキソ−４,５−ジヒドロ−ピラゾル−１−イル)−ベンズアミド；Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−３−(４−メチル−ピペラジン−１−スルホニル)−ベンズアミド；４−[ビス−(２−ヒドロキシ−エチル)−スルファモイル]−Ｎ−(３−｛２−[６−(３−ジメチルアミノ−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−フェニル)−ベンズアミド；４−(４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−[３−(２−ピリミジン−４−イル−フェニルアミノ)−フェニル]−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピル−３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアミド；｛６−[２−(３−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(２−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(４−フルオロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(２−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(３−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；｛６−[２−(４−クロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｏ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｍ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；[６−(２−ｐ−トリルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−アミン；３−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアルデヒド；４−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニルアミノ｝−ベンズアルデヒド；(４−トリフルオロメチル−フェニル)−｛６−[２−(２−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−アミン；(４−トリフルオロメチル−フェニル)−｛６−[２−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−アミン；Ｎ,Ｎ−ジメチル−Ｎ’−｛２−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ)−ピリミジン−４−イル]−フェニル｝−ベンゼン−１,４−ジアミン；フェニル−[６−(２−フェニルアミノ−フェニル)−ピリミジン−４−イル]−アミン；｛６−[２−(２,６−ジクロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−(３,４,５−トリメトキシ−フェニル)−アミン；および｛６−[２−(２,６−ジクロロ−フェニルアミノ)−フェニル]−ピリミジン−４−イル｝−[４−(４−メチル−ピペラジン−１−イル)−フェニル]−アミン
から選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項７】
治療的有効量の請求項１記載の化合物を、薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて含む、医薬組成物。
【請求項８】
動物に治療的有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、動物における、キナーゼおよび／またはサイトカイン活性の阻害が、その疾患の病状および／または総体症状を予防、阻止または軽減できるものである疾患を処置する方法。
【請求項９】
キナーゼがＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１およびＦＬＴ４から選択される、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
Ａｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＥＧＦ−Ｒ、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ(ＨＥＲ−２)、ＣＨＫ２、ＦＧＦＲ３、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＫＣ、ＰＤＧＦ−Ｒ、ｐ３８、ＴＧＦβ、ＫＤＲ、ｃ−Ｋｉｔ、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ＦＬＴ１および／またはＦＬＴ４のキナーゼ活性が、その疾患の病状および／または総体症状に関与するものである、動物における疾患の処置用医薬の製造のための、請求項１記載の化合物の使用。
【公表番号】特表２００７−５０７５３１（Ｐ２００７−５０７５３１Ａ）
【公表日】平成１９年３月２９日（２００７．３．２９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５３４１７１（Ｐ２００６−５３４１７１）
【出願日】平成１６年９月３０日（２００４．９．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０３２４７３
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０３３０８６
【国際公開日】平成１７年４月１４日（２００５．４．１４）
【出願人】（５０３２６１５２４）アイアールエム・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー (158)
【氏名又は名称原語表記】ＩＲＭ，ＬＬＣ
【出願人】（５９７０１１４６３）ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト (942)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年３月２９日（２００７．３．２９）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年９月３０日（２００４．９．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０３２４７３
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０３３０８６
【国際公開日】平成１７年４月１４日（２００５．４．１４）
【出願人】（５０３２６１５２４）アイアールエム・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー (158)
【氏名又は名称原語表記】ＩＲＭ，ＬＬＣ
【出願人】（５９７０１１４６３）ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト (942)
【Ｆターム（参考）】
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