ポリマー粒子およびその使用
本発明は、ポリマー粒子およびその使用に関する。ポリマー粒子は、ポリ‐ベータ-アミノ酸、ポリラクテート、ポリチオエステルおよびポリエステルから選択されるポリマーを含み得る。特に本発明は、機能化ポリマー粒子、その産生方法および使用に関する。本発明の方法、ポリマー粒子および融合タンパク質は、診断、タンパク質産生、生体触媒固定化および薬剤送達において有用性を有する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリマー粒子の産生方法であって、以下の：
Ａ）強力なプロモーターと操作可能的に連結される少なくとも1つの発現構築物を含み、発現構築物が以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列
を含む宿主を提供し；
Ｂ）発現構築物の発現のためにならびにポリマー合成酵素によるポリマー粒子の生成のために適した条件下で宿主細胞を培養し；そして
Ｃ）培養宿主細胞からポリマー粒子を分離してポリマー粒子を含む組成物を産生する
ことを包含する方法。
【請求項２】
ポリマー粒子の産生方法であって、以下の：
Ａ）強力なプロモーターと操作可能的に連結される少なくとも1つの発現構築物を含み、発現構築物が以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列；ならびに
（３）粒子形成タンパク質をコードする少なくとも1つの核酸配列または付加的融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列あるいはその組合せ（ここで、付加的融合ポリペプチドは以下のものを含む：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインまたはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質を含むポリペプチド、および少なくとも１つの融合相手、あるいは
（ｂ）少なくとも1つのポリペプチドならびに融合ポリペプチドまたは付加的融合ポリペプチドの融合相手を結合する結合ドメイン）
を含む宿主を提供し；
Ｂ）発現構築物の発現のためにならびにポリマー合成酵素によるポリマー粒子の生成のために適した条件下で宿主細胞を培養し；そして
Ｃ）培養細胞からポリマー粒子を分離してポリマー粒子を含む組成物を産生する
ことを包含する方法。
【請求項３】
ポリマー粒子の産生方法であって、以下の：
Ａ）強力なプロモーターと操作可能的に連結される少なくとも1つの発現構築物を含み、発現構築物が以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列；ならびに
（３）ポリマー粒子結合ドメインを含む付加的融合ポリペプチド、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質；および少なくとも１つの融合相手をコードする少なくとも１つの核酸配列；ならびに
（４）融合ポリペプチドの融合相手または付加的融合ポリペプチドを結合するポリペプチドおよび結合ドメインを含むさらなる融合ポリペプチドをコードする少なくとも１つの核酸配列
を含む宿主細胞を提供し；
Ｂ）発現構築物の発現のためにならびにポリマー合成酵素によるポリマー粒子の生成のために適した条件下で宿主細胞を培養し；そして
Ｃ）培養細胞からポリマー粒子を分離してポリマー粒子を含む組成物を産生する
ことを包含する方法。
【請求項４】
宿主細胞が付加的融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列を含む付加的発現構築物をさらに含む請求項１記載の方法であって、融合ポリペプチドが、以下の：
ａ．ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
ｂ．少なくとも1つの融合相手
を含む方法。
【請求項５】
宿主細胞がさらに粒子形成タンパク質をコードする少なくとも1つの核酸配列を含む付加的発現構築物を含む請求項１記載の方法。
【請求項６】
宿主細胞がさらなる融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列を含む付加的発現構築物をさらに含む請求項１記載の方法であって、融合ポリペプチドが融合ポリペプチドの融合相手を結合するポリペプチドおよび結合ドメインを含む方法。
【請求項７】
ポリマー粒子の産生方法であって、以下の：
Ａ）強力なプロモーターと操作可能的に連結される少なくとも1つの発現構築物を含み、発現構築物が以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列（前記ポリマー合成酵素はポリマー粒子結合ドメインを含む）；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列（前記ポリマー合成酵素はポリマー粒子結合ドメインを含む）；ならびに
（３）任意に、ポリマー粒子結合ドメインを含む付加的融合ポリペプチド、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質；および少なくとも１つの融合相手をコードする少なくとも１つの核酸配列
を含む細胞を提供し；
Ｂ）発現構築物の発現のためにならびにポリマー合成酵素によるポリマー粒子の生成のために適した条件下で宿主細胞を培養し（前記ポリマー合成酵素が前記粒子と会合したままである場合、それが生じ、そして任意の融合ポリペプチドが存在する場合はポリマー粒子を結合する）；そして
Ｃ）培養細胞からポリマー粒子を分離してポリマー粒子を含む組成物を産生する
ことを包含する方法。
【請求項８】
強力なプロモーターがウイルスプロモーターまたはファージプロモーターである請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
プロモーターがファージプロモーターである請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
プロモーターがＴ７ファージプロモーターである請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
宿主細胞が異なる融合ポリペプチドを各々がコードする2またはそれより多くの異なる発現構築物を含む請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
宿主細胞が異なる融合ポリペプチドを各々がコードする3またはそれより多くの異なる発現構築物を含む請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約1％が表面結合タンパク質により被覆される請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約10％が表面結合タンパク質により被覆される請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約50％が表面結合タンパク質により被覆される請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
約200 nm未満の平均直径を有するポリマー粒子を産生する請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
約150 nm未満の平均直径を有するポリマー粒子を産生する請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
約110 nm未満の平均直径を有するポリマー粒子を産生する請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
宿主細胞当たり少なくとも約20個の粒子を産生する請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
宿主細胞当たり少なくとも約40個の粒子を産生する請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
宿主細胞当たり少なくとも約60個の粒子を産生する請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
約110 nm未満の平均直径を有する少なくとも約20個／宿主細胞の粒子を産生する請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
以下の：
ａ．カップリング試薬を融合相手と結合すること、あるいは
ｂ．カップリング試薬を融合相手と結合し、そしてある物質をカップリング試薬と結合すること、あるいは
ｃ．ある物質を融合相手と結合すること、あるいは
ｄ．ポリマー合成酵素または粒子形成タンパク質をカップリング試薬と接触することにより前記ポリマー合成酵素または前記タンパク質を化学的に修飾して、少なくとも1つの結合ドメインを生成すること、
ｅ．あるいはその組合せ
をさらに包含する請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
融合相手が結合ドメインを含む請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法であって、以下の：
ａ．カップリング試薬を結合ドメインと結合すること、あるいは
ｂ．カップリング試薬を結合ドメインと結合し、そしてある物質をカップリング試薬と結合すること、あるいは
ｃ．ある物質を結合ドメインと結合すること、あるいは
ｄ．あるいはその組合せ
をさらに包含する請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
少なくとも1つのポリペプチドまたは少なくとも1つの物質がポリマー粒子と結合するかまたはそれに組入れられるよう、宿主細胞を培養しながら、少なくとも1つのポリペプチドまたは少なくとも1つの物質またはその組合せを付加することをさらに包含する請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
ポリマー粒子を接触することを、ポリマー粒子と結合するかまたはそれに吸着される少なくとも1つのポリペプチドまたは少なくとも1つの物質またはその組合せを付加することとともにさらに包含する請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記物質がポリマー粒子中に組入れられるかまたは吸着される親油性物質である請求項２５または２６記載の方法。
【請求項２８】
前記物質が日焼け止め剤、粒状物質、コンディショニング剤、増粘剤、水溶性ビタミン、水分散性ビタミン、油分散性ビタミン、ジメチコン・コポリオール・クロスポリマーを含む乳化エラストマー、ジメチコン／ビニルジメチコン・クロスポリマーを含む非乳化エラストマー、油溶性テルペンアルコールを含む油溶性スキンケア活性剤、フィトステロール、抗アクネ活性剤、ベータヒドロキシ酸、ビタミンＢ3化合物、レチノイド、酸化防止剤／ラジカル・スカベンジャー、キレート化剤、フラボノイド、抗炎症剤、抗セルライト剤、局所麻酔剤、制汗剤および芳香剤またはその組合せから選択される１つまたは複数のスキンケア剤である請求項２５または２６記載の方法。
【請求項２９】
前記物質が以下の：
ａ）酵素、例えばセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、グルコアミラーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β-グルカナーゼおよびアラビノシダーゼ、あるいは
ｂ）再汚染防止剤、例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ポリアクリレートポリマー、無水マレイン酸およびアクリル酸のコポリマー、無水マレイン酸およびエチレンのコポリマー、無水マレイン酸およびメチルビニルエーテルのコポリマー、無水マレイン酸およびメタクリル酸のコポリマー、あるいは
ｃ）その組合せ
から選択される１つまたは複数の清浄剤である請求項２５または２６記載の方法。
【請求項３０】
前記物質が着色または蛍光分子、放射性同位体、１つまたは複数の金属イオン、あるいはその組合せである請求項２５または２６記載の方法。
【請求項３１】
前記融合相手がタンパク質、タンパク質断片、結合ドメイン、標的結合ドメイン、結合タンパク質、結合タンパク質断片、抗体、抗体断片、抗体重鎖、抗体軽鎖、１本鎖抗体、単一ドメイン抗体、Ｆａｂ抗体断片、Ｆｃ抗体断片、Ｆｖ抗体断片、Ｆ（ａｂ‘）２抗体断片、Ｆａｂ’抗体断片、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原決定基、エピトープ、ハプテン、免疫原、免疫原断片、ビオチン、ビオチン誘導体、アビジン、ストレプトアビジン、基質、酵素、抗体酵素、補因子、受容体、受容体断片、受容体サブユニット、受容体サブユニット断片、リガンド、阻害剤、ホルモン、レクチン、ポリヒスチジン、カップリングドメイン、ＤＮＡ結合ドメイン、ＦＬＡＧエピトープ、システイン残基、ライブラリーペプチド、レポーターペプチドおよびアフィニティー精製ペプチド、またはその組合せから選択される請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記融合相手が以下の：
ａ）抗原、抗原決定基、エピトープまたは免疫原、あるいは
ｂ）抗体または抗体断片、あるいは
ｃ）抗体結合ドメイン
を包含する請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記融合相手が抗体結合ドメインを包含する請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
約200 nm未満の平均直径を有する複数のポリマー粒子を含む組成物であって、ポリマー粒子が以下の：
Ａ）少なくとも1つのポリマー合成酵素、または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド、ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）少なくとも1つの付加的粒子形成タンパク質、または
（２）以下を含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）少なくとも1つの（１）および少なくとも1つの（２）
を含む組成物。
【請求項３５】
約150 nm未満の平均直径を有する複数のポリマー粒子を含む組成物であって、ポリマー粒子が以下の：
Ａ）少なくとも1つのポリマー合成酵素、または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド、ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）少なくとも1つの付加的粒子形成タンパク質、または
（２）以下を含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）少なくとも1つの（１）および少なくとも1つの（２）
を含む組成物。
【請求項３６】
約110 nm未満の平均直径を有する複数のポリマー粒子を含む組成物であって、ポリマー粒子が以下の：
Ａ）少なくとも1つのポリマー合成酵素、または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド、ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）少なくとも1つの付加的粒子形成タンパク質、または
（２）以下を含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）少なくとも1つの（１）および少なくとも1つの（２）
を含む組成物。
【請求項３７】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約1％が表面結合タンパク質により被覆される請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約10％が表面結合タンパク質により被覆される請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約50％が表面結合タンパク質により被覆される請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
ポリマー粒子またはその組合せに結合されるかまたは組入れられる少なくとも1つの物質をさらに含む請求項３４〜３９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４１】
前記物質がリン油性物質である請求項４０記載の組成物。
【請求項４２】
前記物質が日焼け止め剤、粒状物質、コンディショニング剤、増粘剤、水溶性ビタミン、水分散性ビタミン、油分散性ビタミン、ジメチコン・コポリオール・クロスポリマーを含む乳化エラストマー、ジメチコン／ビニルジメチコン・クロスポリマーを含む非乳化エラストマー、油溶性テルペンアルコールを含む油溶性スキンケア活性剤、フィトステロール、抗アクネ活性剤、ベータヒドロキシ酸、ビタミンＢ3化合物、レチノイド、酸化防止剤／ラジカル・スカベンジャー、キレート化剤、フラボノイド、抗炎症剤、抗セルライト剤、局所麻酔剤、制汗剤および芳香剤またはその組合せから選択される１つまたは複数のスキンケア剤である請求項４０記載の組成物。
【請求項４３】
前記物質が以下の：
ａ）酵素、例えばセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、グルコアミラーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β-グルカナーゼおよびアラビノシダーゼ、あるいは
ｂ）再汚染防止剤、例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ポリアクリレートポリマー、無水マレイン酸およびアクリル酸のコポリマー、無水マレイン酸およびエチレンのコポリマー、無水マレイン酸およびメチルビニルエーテルのコポリマー、無水マレイン酸およびメタクリル酸のコポリマー、あるいは
ｃ）その組合せ
から選択される１つまたは複数の清浄剤である請求項４０記載の組成物。
【請求項４４】
前記物質が着色または蛍光分子、放射性同位体、１つまたは複数の金属イオン、あるいはその組合せである請求項４０記載の組成物。
【請求項４５】
前記融合相手がタンパク質、タンパク質断片、結合ドメイン、標的結合ドメイン、結合タンパク質、結合タンパク質断片、抗体、抗体断片、抗体重鎖、抗体軽鎖、１本鎖抗体、単一ドメイン抗体、Ｆａｂ抗体断片、Ｆｃ抗体断片、Ｆｖ抗体断片、Ｆ（ａｂ’）２抗体断片、Ｆａｂ’抗体断片、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原決定基、エピトープ、ハプテン、免疫原、免疫原断片、ビオチン、ビオチン誘導体、アビジン、ストレプトアビジン、基質、酵素、抗体酵素、補因子、受容体、受容体断片、受容体サブユニット、受容体サブユニット断片、リガンド、阻害剤、ホルモン、レクチン、ポリヒスチジン、カップリングドメイン、ＤＮＡ結合ドメイン、ＦＬＡＧエピトープ、システイン残基、ライブラリーペプチド、レポーターペプチドおよびアフィニティー精製ペプチド、またはその組合せから選択される請求項３４〜４４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４６】
前記融合相手が以下の：
ａ）抗原、抗原決定基、エピトープまたは免疫原、あるいは
ｂ）抗体または抗体断片、あるいは
ｃ）抗体結合ドメイン
である請求項３４〜４４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４７】
前記融合相手が抗体結合ドメインを包含する請求項３４〜４４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４８】
ａ． カップリング試薬が融合相手と結合され、あるいは
ｂ． カップリング試薬が融合相手と結合され、そしてある物質がカップリング試薬と結合され、あるいは
ｃ． ある物質が融合相手と結合され、あるいは
ｄ． ポリマー合成酵素または粒子形成タンパク質がカップリング試薬で化学的に修飾されて、少なくとも1つの結合ドメインを形成しているか、あるいは
ｅ． その組合せである
請求項３４〜４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４９】
融合相手が結合ドメインを含み、そして
ａ． カップリング試薬が結合ドメインと結合され、あるいは
ｂ． カップリング試薬が結合ドメインと結合され、そしてある物質がカップリング試薬と結合され、あるいは
ｃ． ある物質が結合ドメインと結合され、
ｄ． あるいはその組合せである
請求項３４〜４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５０】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法に従って産生される請求項３４〜４９のいずれか一項に記載のポリマー粒子の組成物。
【請求項５１】
以下の：
Ａ）ポリマー合成酵素を含む少なくとも1つのポリペプチド；または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド；ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）粒子形成タンパク質を含む少なくとも1つのポリペプチド、または
（２）以下のものを含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）その組合せ
を含むポリマー粒子であって、前記ポリマー粒子の表面積の少なくとも約1％がポリペプチドにより被覆されるポリマー粒子。
【請求項５２】
以下の：
Ａ）ポリマー合成酵素を含む少なくとも1つのポリペプチド；または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド；ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）粒子形成タンパク質を含む少なくとも1つのポリペプチド、または
（２）以下のものを含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）その組合せ
を含むポリマー粒子であって、前記ポリマー粒子の表面積の少なくとも約10％がポリペプチドにより被覆されるポリマー粒子。
【請求項５３】
以下の：
Ａ）ポリマー合成酵素を含む少なくとも1つのポリペプチド；または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド；ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）粒子形成タンパク質を含む少なくとも1つのポリペプチド、または
（２）以下のものを含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）その組合せ
を含むポリマー粒子であって、前記ポリマー粒子の表面積の少なくとも約50％がポリペプチドにより被覆されるポリマー粒子。
【請求項５４】
ポリマー粒子またはその組合せと結合されるかまたはその中に組入れられる少なくとも1つの物質をさらに含む請求項５１〜５３のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項５５】
前記物質がタンパク質またはタンパク質断片、ペプチド、ポリペプチド、抗体または抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原決定基、エピトープ、免疫原またはその断片、金属イオン、金属イオン被覆分子、ビオチン、アビジン、ストレプトアビジンまたはその誘導体、阻害剤、補因子、基質、酵素、補因子、受容体、受容体サブユニットまたはその断片、リガンド、阻害剤、単糖、オリゴ糖、多糖、糖タンパク質、脂質、細胞またはその断片、細胞抽出物、ウイルス、ホルモン、血清タンパク質、ミルクタンパク質、高分子、乱用薬物、あるいはその組合せである請求項５４記載のポリマー粒子。
【請求項５６】
前記物質が日焼け止め剤、粒状物質、コンディショニング剤、増粘剤、水溶性ビタミン、水分散性ビタミン、油分散性ビタミン、ジメチコン・コポリオール・クロスポリマーを含む乳化エラストマー、ジメチコン／ビニルジメチコン・クロスポリマーを含む非乳化エラストマー、油溶性テルペンアルコールを含む油溶性スキンケア活性剤、フィトステロール、抗アクネ活性剤、ベータヒドロキシ酸、ビタミンＢ3化合物、レチノイド、酸化防止剤／ラジカル・スカベンジャー、キレート化剤、フラボノイド、抗炎症剤、抗セルライト剤、局所麻酔剤、制汗剤および芳香剤またはその組合せから選択される１つまたは複数のスキンケア剤である請求項５４記載のポリマー粒子。
【請求項５７】
前記物質が以下の：
ａ）酵素、例えばセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、グルコアミラーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β-グルカナーゼおよびアラビノシダーゼ、あるいは
ｂ）再汚染防止剤、例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ポリアクリレートポリマー、無水マレイン酸およびアクリル酸のコポリマー、無水マレイン酸およびエチレンのコポリマー、無水マレイン酸およびメチルビニルエーテルのコポリマー、無水マレイン酸およびメタクリル酸のコポリマー、あるいは
ｃ）その組合せ
から選択される１つまたは複数の清浄剤である請求項５４記載のポリマー粒子。
【請求項５８】
前記物質が着色または蛍光分子、放射性同位体、１つまたは複数の金属イオン、あるいはその組合せである請求項５４記載のポリマー粒子。
【請求項５９】
前記融合相手がタンパク質、タンパク質断片、結合ドメイン、標的結合ドメイン、結合タンパク質、結合タンパク質断片、抗体、抗体断片、抗体重鎖、抗体軽鎖、１本鎖抗体、単一ドメイン抗体、Ｆａｂ抗体断片、Ｆｃ抗体断片、Ｆｖ抗体断片、Ｆ（ａｂ’）２抗体断片、Ｆａｂ’抗体断片、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原決定基、エピトープ、ハプテン、免疫原、免疫原断片、ビオチン、ビオチン誘導体、アビジン、ストレプトアビジン、基質、酵素、抗体酵素、補因子、受容体、受容体断片、受容体サブユニット、受容体サブユニット断片、リガンド、阻害剤、ホルモン、レクチン、ポリヒスチジン、カップリングドメイン、ＤＮＡ結合ドメイン、ＦＬＡＧエピトープ、システイン残基、ライブラリーペプチド、レポーターペプチドおよびアフィニティー精製ペプチド、またはその組合せから選択される請求項５１〜５８のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６０】
前記融合相手が以下の：
ａ）抗原、抗原決定基、エピトープまたは免疫原、あるいは
ｂ）抗体または抗体断片、あるいは
ｃ）抗体結合ドメイン
である請求項５１〜５８のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６１】
前記融合相手が抗体結合ドメインを包含する請求項５１〜５８のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６２】
ａ． カップリング試薬が融合相手と結合され、あるいは
ｂ． カップリング試薬が融合相手と結合され、そしてある物質がカップリング試薬と結合され、あるいは
ｃ． ある物質が融合相手と結合され、あるいは
ｄ． ポリマー合成酵素または粒子形成タンパク質がカップリング試薬で化学的に修飾されて、少なくとも1つの結合ドメインを形成しているか、あるいは
ｅ． その組合せである
請求項５１〜６１のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６３】
融合相手が結合ドメインを含み、そして
ａ． カップリング試薬が結合ドメインと結合され、あるいは
ｂ． カップリング試薬が結合ドメインと結合され、そしてある物質がカップリング試薬と結合され、あるいは
ｃ． ある物質が結合ドメインと結合され、
ｄ． あるいはその組合せである
請求項５１〜６１のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６４】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法に従って産生される請求項５１〜６３のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６５】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法に従って産生される請求項５１〜６３のいずれか一項に記載のポリマー粒子を含む組成物。
【請求項６６】
請求項３４〜５０のいずれか一項に記載のポリマー粒子の組成物を含む、あるいは請求項５１〜６４のいずれか一項に記載の１つまたは複数のポリマー粒子を含む診断試薬。
【請求項６７】
請求項３４〜５０のいずれか一項に記載のポリマー粒子の組成物を含む、あるいは請求項５１〜６４のいずれか一項に記載の１つまたは複数のポリマー粒子を含む診断キット。
【請求項６８】
ＥＬＩＳＡプレート、マイクロアレイ・スライドまたはクロマトグラフィー・マトリックス、あるいはその組合せの上にポリマー粒子が固定化される請求項６７記載の診断キット。
【請求項６９】
試料中の少なくとも1つの標的構成成分を検出し、そして任意に単離する方法であって、以下の：
（ａ）ポリマー粒子と共有的または非共有的に結合される少なくとも1つの融合ポリペプチドを含む少なくとも1つのポリマー粒子であって、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）標的構成成分を結合する少なくとも1つのドメイン
を含むポリマー粒子を提供すること、
（ｂ）結合ドメインが標的構成成分を結合して複合体を形成するよう、標的構成成分を含む試料とポリマー粒子を接触させること、
（ｃ）複合体を検出すること、そして
（ｄ）任意に試料から複合体を分離すること
を包含する方法。
【請求項７０】
複合体を検出することが、複合体と、少なくとも1つの融合ポリペプチドと、またはポリマー粒子と結合する標識化分子とポリマー粒子を接触させ、そして標識化分子を検出することを包含する請求項６９記載の方法。
【請求項７１】
標識化分子が標識化抗体である請求項７０記載の方法。
【請求項７２】
ポリマー粒子が以下の：
ａ）ポリマー粒子と結合されるかまたはその中に組入れられる標識、あるいは
ｂ）以下のものを含む少なくとも1つの付加的融合ポリマー：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）標識化分子を結合する結合ドメイン、あるいは
ｃ）レポータータンパク質を含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド
を含む請求項６９〜７１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７３】
ポリマー粒子が2またはそれより多くの異なる融合ポリペプチドを含む請求項６９〜７２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７４】
ポリマー粒子がポリマー粒子表面上に2またはそれより多くの異なる融合ポリペプチドを含む請求項６８記載の方法または系。
【請求項７５】
ポリマー粒子がポリマー粒子表面上に3またはそれより多くの異なる融合ポリペプチドを含む請求項６８記載の方法または系。
【請求項７６】
ポリマー粒子がさらにポリマー粒子またはその組合せと結合されるかまたはその中に組入れられる少なくとも1つの化合物を含む請求項６９〜７５のいずれか一項に記載の方法または系。
【請求項７７】
前記化合物が着色蛍光分子、放射性同位体、１つまたは複数の金属イオン、あるいはその組合せである請求項７６記載の方法または系。
【請求項７８】
前記結合ドメインが、以下の：
ａ）抗原、抗原決定基、エピトープまたは免疫原、あるいは
ｂ）抗体または抗体断片、あるいは
ｃ）抗体結合ドメイン
である請求項６９〜７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７９】
前記結合ドメインがプロテインＡまたはＺＺドメインである請求項６９〜７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８０】
前記標的構成成分がタンパク質またはタンパク質断片、ペプチド、ポリペプチド、ポリペプチド断片、抗体または抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原断片、抗原決定基、エピトープ、ハプテン、免疫原、免疫原断片、金属イオン、金属イオン被覆分子、ビオチン、ビオチン誘導体、アビジン、ストレプトアビジン、阻害剤、補因子、基質、酵素、抗体酵素、受容体、受容体断片、受容体サブユニット、受容体サブユニット断片、リガンド、受容体リガンド、受容体アゴニスト、受容体アンタゴニスト、シグナル伝達分子、シグナル伝達タンパク質、シグナル伝達タンパク質断片、成長因子、成長因子断片、転写因子、転写因子断片、阻害剤、サイトカイン、ケモカイン、炎症媒介物質、単糖、オリゴ糖、多糖、糖タンパク質、脂質、細胞、細胞表面タンパク質、細胞表面脂質、細胞表面炭水化物、細胞表面糖タンパク質、細胞抽出物、ウイルス、ウイルス外被タンパク質、ホルモン、血清タンパク質、ミルクタンパク質、高分子、乱用薬物、カップリング試薬、ポリヒスチジン、薬学的活性物質、生物学的活性物質、標識、カップリング試薬、ライブラリーペプチド、発現構築物、核酸、あるいはその組合せから選択される請求項６９〜７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８１】
標的構成成分がインターロイキン-３（ＩＬ‐３）、インターロイキン-４（ＩＬ‐４）、インターロイキン-５（ＩＬ‐５）、インターロイキン１０-（ＩＬ‐１０）、インターロイキン-７（ＩＬ‐７）、インターロイキン-１β（ＩＬ‐１β）、インターロイキン-６（ＩＬ‐６）、インターロイキン-１２ｐ７０（ＩＬ‐１２ｐ７０）、顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ-ＣＳＦ）、切断ＰＡＲＰ、Ｂｃｌ-２および活性カスパーゼ-３タンパク質レベル、インターロイキン-８（ＩＬ‐８）、塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、アンギオゲニン（ＡＮＧ）、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）および腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターロイキン-８（ＣＸＣＬ８／ＩＬ‐８）、ＲＡＮＴＥＳ（ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳ）、インターフェロン-γにより誘導されるモノカイン（ＣＸＣＬ９／ＭＩＧ）、単球化学誘引物質タンパク質-１（ＣＣＬ２／ＭＣＰ-１）、またはインターフェロンガンマ誘導性タンパク質-１０（ＣＸＣＬ１０／ＩＰ-１０）、あるいはその混合物から選択される請求項６９〜７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８２】
ＥＬＩＳＡプレート、マイクロアレイ・スライドまたはクロマトグラフィーマトリックスを含む支持体上に少なくとも1つのポリマー粒子が固定化される請求項６９〜８１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８３】
少なくとも1つのポリマー粒子が、以下の：
ａ． 請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法に従って産生されるポリマー粒子、
ｂ． 請求項３４〜５０のいずれか一項に記載の組成物、あるいは
ｃ． 請求項５１〜６４のいずれか一項に記載のポリマー粒子
を含む請求項６９〜８１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８４】
融合ポリペプチドをコードする核酸配列を含む発現構築物を含む粒子産生宿主細胞を培養することを包含する組換えポリペプチドの産生方法であって、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）細胞発現系において発現される場合に封入体を形成するポリペプチド
を含む方法であって、培養条件が発現構築物からの融合ポリペプチドの発現のために、そしてポリマー粒子の形成のために適している方法。
【請求項８５】
組換えポリペプチドの産生方法であって、以下の：
（ａ）以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）細胞発現系において発現される場合に封入体を形成するポリペプチド
を含む少なくとも1つの融合ポリペプチドを提供し、そして
（ｂ）融合ポリペプチドを粒子形成反応混合物と接触させて少なくとも1つのポリマー粒子を形成する
ことを包含する方法。
【請求項８６】
粒子形成タンパク質がポリマー合成酵素を含む請求項８５記載の方法。
【請求項８７】
粒子形成反応混合物がポリマー合成酵素を含む請求項８５記載の方法。
【請求項８８】
融合相手が細胞発現系中で発現される場合に封入体を形成するポリペプチドである請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８９】
宿主細胞が各々異なる融合ポリペプチドをコードする2またはそれより多くの異なる発現構築物を含む請求項８４〜８８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９０】
以下の：
（ａ）細胞発現系で発現される場合に封入体を形成することが予め確定されているポリペプチドを同定するために文献検索を実行し；あるいは
（ｂ）ポリマー粒子を生成し得ない細胞中で候補ポリペプチドを発現し、そして細胞を顕微鏡的に検査して、発現ポリペプチドが封入体を形成したか否かを確定する
ことにより、細胞発現系で発現される場合に封入体を形成するポリペプチドを選択する初期ステップを包含する請求項８４〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９１】
以下の：
（１）ポリマー粒子を細胞または反応混合物から分離して、ポリマー粒子を含む組成物を産生し、そして
（２）任意にポリマー粒子から融合ポリペプチドを分離し、そして
（２）任意に融合ポリペプチドからポリペプチドを分離する
ことをさらに包含する請求項８４〜９０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９２】
組換えポリペプチドがリフォールディングを必要としない請求項８４〜９３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９３】
受容体ポリペプチドを結合する標的分子の同定方法であって、以下の：
ｄ）少なくとも1つの融合ポリペプチドを含み、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）少なくとも1つの受容体ポリペプチド
を含む少なくとも1つのポリマー粒子を提供し、そして
ｅ）少なくとも1つのポリマー粒子を少なくとも1つの標的分子と接触させ、そして
ｆ）受容体ポリペプチドを結合する標的分子を同定する
ことを包含する方法。
【請求項９４】
受容体リガンドを結合する標的分子の同定方法であって、以下の：
（ｂ）少なくとも1つの融合ポリペプチドを含み、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）少なくとも1つの受容体リガンド
を含む少なくとも1つのポリマー粒子を提供し、そして
（ｃ）少なくとも1つのポリマー粒子を少なくとも1つの標的分子と接触させ、そして
（ｄ）受容体リガンドを結合する標的分子を同定する
ことを包含する方法。
【請求項９５】
ポリマー粒子の混合集団の産生方法であって、以下の：
ｄ）発現構築物の混合集団を含有し、各発現構築物が融合ポリペプチドをコードする核酸配列を含み、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）少なくとも1つの当該ポリペプチド
を含む混合集団を含有する粒子産生宿主細胞を提供し；
ｅ）ポリマー粒子を産生し、発現構築物を発現するよう宿主細胞を誘導して、ポリマー粒子を結合する融合ポリペプチドの混合集団を産生し；そして
ｆ）任意に、ポリマー粒子の混合集団を宿主細胞から分離する
ことを包含する方法。
【請求項９６】
ライブラリーポリペプチドを結合する標的分子の同定方法であって、以下の：
ｄ）融合ポリペプチドの混合集団を含み、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）少なくとも1つのライブラリーポリペプチド
を含むポリマー粒子の混合集団を提供し；
ｅ）ポリマー粒子を少なくとも1つの標的分子と接触させ；
ｆ）ライブラリーポリペプチドを結合する標的分子を同定する
ことを包含する方法。
【請求項９７】
少なくとも1つの当該ポリペプチド、少なくとも1つのライブラリーポリペプチド、または少なくとも1つの受容体リガンドがタンパク質、タンパク質断片、結合ドメイン、標的結合ドメイン、結合タンパク質、結合タンパク質断片、抗体、抗体断片、抗体重鎖、抗体軽鎖、１本鎖抗体、単一ドメイン抗体、Ｆａｂ抗体断片、Ｆｃ抗体断片、Ｆｖ抗体断片、Ｆ（ａｂ‘）２抗体断片、Ｆａｂ’抗体断片、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原決定基、エピトープ、ハプテン、免疫原、免疫原断片、ビオチン、ビオチン誘導体、アビジン、ストレプトアビジン、基質、酵素、抗体酵素、補因子、受容体、受容体断片、受容体サブユニット、受容体サブユニット断片、阻害剤、結合ドメイン、またはその組合せから選択される請求項９３〜９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
融合ポリペプチドを結合する標的分子の同定方法であって、以下の：
（ｄ）融合相手が少なくとも1つの受容体ポリペプチド、少なくとも1つの受容体リガンド、少なくとも1つ当該ポリペプチド、少なくとも1つのライブラリーポリペプチド、またはその組合せを含む請求項３４〜５１のいずれか一項に記載の組成物を提供し、
（ｅ）前記組成物を少なくとも1つの標的分子と接触させ、そして
（ｆ）融合相手を結合する標的分子を同定する
ことを包含する方法。
【請求項９９】
標的分子を同定することがポリマー粒子を標的分子と、少なくとも1つの融合ポリペプチドと、またはポリマー粒子と結合する標識化分子と接触させること、そして標識化分子を検出することを包含する請求項９３〜９８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１００】
ＥＬＩＳＡプレート、マイクロアレイ・スライドまたはクロマトグラフィー・マトリックスを含む支持体上にポリマー粒子が固定化される請求項９３〜９９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０１】
請求項６９〜１００のいずれか一項で定義されたようなポリマー粒子を含む診断試薬。
【請求項１０２】
請求項６９〜１００のいずれか一項で定義されたようなポリマー粒子を包含する診断キット。
【請求項１０３】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法、または請求項３４〜５０のいずれか一項に記載の組成物であって、
（ｇ）前記組成物中の粒子の80％が約10 nm〜約150 nmの直径を有し；
（ｈ）前記組成物中の粒子の60％が約10 nm〜約100 nmの直径を有し；
（ｉ）前記組成物中の粒子の45％が約10 nm〜約80 nmの直径を有し；
（ｊ）前記組成物中の粒子の40％が約10 nm〜約60 nmの直径を有し；
（ｋ）前記組成物中の粒子の25％が約10 nm〜約50 nmの直径を有し；あるいは
（ｌ）前記組成物中の粒子の5％が約10 nm〜約35 nmの直径を有する
方法または組成物。
【請求項１０４】
強力なプロモーターと操作可能的に連結される発現構築物であって、以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列
を含む発現構築物。
【請求項１０５】
強力なプロモーターと操作可能的に連結される発現構築物であって、以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列；ならびに
（３）粒子形成タンパク質をコードする少なくとも1つの核酸配列または付加的融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列あるいはその組合せ（ここで、付加的融合ポリペプチドは以下のものを含む：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインまたはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質を含むポリペプチド、および少なくとも１つの融合相手、あるいは
（ｂ）少なくとも1つの融合相手）
を含む発現構築物。
【請求項１０６】
強力なプロモーターと操作可能的に連結される発現構築物であって、以下の：
（１）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列；ならびに
（３）少なくとも1つのポリペプチドならびに融合ポリペプチドの融合相手を結合する結合ドメインを含む付加的融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列
を含む発現構築物。
【請求項１０７】
請求項１０４、１０５または１０６の発現構築物を包含するベクター。
【請求項１０８】
請求項１０４、１０５または１０６の発現構築物を包含する高コピー数ベクター。
【請求項１０９】
請求項１０４〜１０８のいずれか一項に記載の発現構築物またはベクターを含む宿主細胞。
【請求項１】
ポリマー粒子の産生方法であって、以下の：
Ａ）強力なプロモーターと操作可能的に連結される少なくとも1つの発現構築物を含み、発現構築物が以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列
を含む宿主を提供し；
Ｂ）発現構築物の発現のためにならびにポリマー合成酵素によるポリマー粒子の生成のために適した条件下で宿主細胞を培養し；そして
Ｃ）培養宿主細胞からポリマー粒子を分離してポリマー粒子を含む組成物を産生する
ことを包含する方法。
【請求項２】
ポリマー粒子の産生方法であって、以下の：
Ａ）強力なプロモーターと操作可能的に連結される少なくとも1つの発現構築物を含み、発現構築物が以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列；ならびに
（３）粒子形成タンパク質をコードする少なくとも1つの核酸配列または付加的融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列あるいはその組合せ（ここで、付加的融合ポリペプチドは以下のものを含む：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインまたはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質を含むポリペプチド、および少なくとも１つの融合相手、あるいは
（ｂ）少なくとも1つのポリペプチドならびに融合ポリペプチドまたは付加的融合ポリペプチドの融合相手を結合する結合ドメイン）
を含む宿主を提供し；
Ｂ）発現構築物の発現のためにならびにポリマー合成酵素によるポリマー粒子の生成のために適した条件下で宿主細胞を培養し；そして
Ｃ）培養細胞からポリマー粒子を分離してポリマー粒子を含む組成物を産生する
ことを包含する方法。
【請求項３】
ポリマー粒子の産生方法であって、以下の：
Ａ）強力なプロモーターと操作可能的に連結される少なくとも1つの発現構築物を含み、発現構築物が以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列；ならびに
（３）ポリマー粒子結合ドメインを含む付加的融合ポリペプチド、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質；および少なくとも１つの融合相手をコードする少なくとも１つの核酸配列；ならびに
（４）融合ポリペプチドの融合相手または付加的融合ポリペプチドを結合するポリペプチドおよび結合ドメインを含むさらなる融合ポリペプチドをコードする少なくとも１つの核酸配列
を含む宿主細胞を提供し；
Ｂ）発現構築物の発現のためにならびにポリマー合成酵素によるポリマー粒子の生成のために適した条件下で宿主細胞を培養し；そして
Ｃ）培養細胞からポリマー粒子を分離してポリマー粒子を含む組成物を産生する
ことを包含する方法。
【請求項４】
宿主細胞が付加的融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列を含む付加的発現構築物をさらに含む請求項１記載の方法であって、融合ポリペプチドが、以下の：
ａ．ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
ｂ．少なくとも1つの融合相手
を含む方法。
【請求項５】
宿主細胞がさらに粒子形成タンパク質をコードする少なくとも1つの核酸配列を含む付加的発現構築物を含む請求項１記載の方法。
【請求項６】
宿主細胞がさらなる融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列を含む付加的発現構築物をさらに含む請求項１記載の方法であって、融合ポリペプチドが融合ポリペプチドの融合相手を結合するポリペプチドおよび結合ドメインを含む方法。
【請求項７】
ポリマー粒子の産生方法であって、以下の：
Ａ）強力なプロモーターと操作可能的に連結される少なくとも1つの発現構築物を含み、発現構築物が以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列（前記ポリマー合成酵素はポリマー粒子結合ドメインを含む）；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列（前記ポリマー合成酵素はポリマー粒子結合ドメインを含む）；ならびに
（３）任意に、ポリマー粒子結合ドメインを含む付加的融合ポリペプチド、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質；および少なくとも１つの融合相手をコードする少なくとも１つの核酸配列
を含む細胞を提供し；
Ｂ）発現構築物の発現のためにならびにポリマー合成酵素によるポリマー粒子の生成のために適した条件下で宿主細胞を培養し（前記ポリマー合成酵素が前記粒子と会合したままである場合、それが生じ、そして任意の融合ポリペプチドが存在する場合はポリマー粒子を結合する）；そして
Ｃ）培養細胞からポリマー粒子を分離してポリマー粒子を含む組成物を産生する
ことを包含する方法。
【請求項８】
強力なプロモーターがウイルスプロモーターまたはファージプロモーターである請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
プロモーターがファージプロモーターである請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
プロモーターがＴ７ファージプロモーターである請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
宿主細胞が異なる融合ポリペプチドを各々がコードする2またはそれより多くの異なる発現構築物を含む請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
宿主細胞が異なる融合ポリペプチドを各々がコードする3またはそれより多くの異なる発現構築物を含む請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約1％が表面結合タンパク質により被覆される請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約10％が表面結合タンパク質により被覆される請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約50％が表面結合タンパク質により被覆される請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
約200 nm未満の平均直径を有するポリマー粒子を産生する請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
約150 nm未満の平均直径を有するポリマー粒子を産生する請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
約110 nm未満の平均直径を有するポリマー粒子を産生する請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
宿主細胞当たり少なくとも約20個の粒子を産生する請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
宿主細胞当たり少なくとも約40個の粒子を産生する請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
宿主細胞当たり少なくとも約60個の粒子を産生する請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
約110 nm未満の平均直径を有する少なくとも約20個／宿主細胞の粒子を産生する請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
以下の：
ａ．カップリング試薬を融合相手と結合すること、あるいは
ｂ．カップリング試薬を融合相手と結合し、そしてある物質をカップリング試薬と結合すること、あるいは
ｃ．ある物質を融合相手と結合すること、あるいは
ｄ．ポリマー合成酵素または粒子形成タンパク質をカップリング試薬と接触することにより前記ポリマー合成酵素または前記タンパク質を化学的に修飾して、少なくとも1つの結合ドメインを生成すること、
ｅ．あるいはその組合せ
をさらに包含する請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
融合相手が結合ドメインを含む請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法であって、以下の：
ａ．カップリング試薬を結合ドメインと結合すること、あるいは
ｂ．カップリング試薬を結合ドメインと結合し、そしてある物質をカップリング試薬と結合すること、あるいは
ｃ．ある物質を結合ドメインと結合すること、あるいは
ｄ．あるいはその組合せ
をさらに包含する請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
少なくとも1つのポリペプチドまたは少なくとも1つの物質がポリマー粒子と結合するかまたはそれに組入れられるよう、宿主細胞を培養しながら、少なくとも1つのポリペプチドまたは少なくとも1つの物質またはその組合せを付加することをさらに包含する請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
ポリマー粒子を接触することを、ポリマー粒子と結合するかまたはそれに吸着される少なくとも1つのポリペプチドまたは少なくとも1つの物質またはその組合せを付加することとともにさらに包含する請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記物質がポリマー粒子中に組入れられるかまたは吸着される親油性物質である請求項２５または２６記載の方法。
【請求項２８】
前記物質が日焼け止め剤、粒状物質、コンディショニング剤、増粘剤、水溶性ビタミン、水分散性ビタミン、油分散性ビタミン、ジメチコン・コポリオール・クロスポリマーを含む乳化エラストマー、ジメチコン／ビニルジメチコン・クロスポリマーを含む非乳化エラストマー、油溶性テルペンアルコールを含む油溶性スキンケア活性剤、フィトステロール、抗アクネ活性剤、ベータヒドロキシ酸、ビタミンＢ3化合物、レチノイド、酸化防止剤／ラジカル・スカベンジャー、キレート化剤、フラボノイド、抗炎症剤、抗セルライト剤、局所麻酔剤、制汗剤および芳香剤またはその組合せから選択される１つまたは複数のスキンケア剤である請求項２５または２６記載の方法。
【請求項２９】
前記物質が以下の：
ａ）酵素、例えばセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、グルコアミラーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β-グルカナーゼおよびアラビノシダーゼ、あるいは
ｂ）再汚染防止剤、例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ポリアクリレートポリマー、無水マレイン酸およびアクリル酸のコポリマー、無水マレイン酸およびエチレンのコポリマー、無水マレイン酸およびメチルビニルエーテルのコポリマー、無水マレイン酸およびメタクリル酸のコポリマー、あるいは
ｃ）その組合せ
から選択される１つまたは複数の清浄剤である請求項２５または２６記載の方法。
【請求項３０】
前記物質が着色または蛍光分子、放射性同位体、１つまたは複数の金属イオン、あるいはその組合せである請求項２５または２６記載の方法。
【請求項３１】
前記融合相手がタンパク質、タンパク質断片、結合ドメイン、標的結合ドメイン、結合タンパク質、結合タンパク質断片、抗体、抗体断片、抗体重鎖、抗体軽鎖、１本鎖抗体、単一ドメイン抗体、Ｆａｂ抗体断片、Ｆｃ抗体断片、Ｆｖ抗体断片、Ｆ（ａｂ‘）２抗体断片、Ｆａｂ’抗体断片、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原決定基、エピトープ、ハプテン、免疫原、免疫原断片、ビオチン、ビオチン誘導体、アビジン、ストレプトアビジン、基質、酵素、抗体酵素、補因子、受容体、受容体断片、受容体サブユニット、受容体サブユニット断片、リガンド、阻害剤、ホルモン、レクチン、ポリヒスチジン、カップリングドメイン、ＤＮＡ結合ドメイン、ＦＬＡＧエピトープ、システイン残基、ライブラリーペプチド、レポーターペプチドおよびアフィニティー精製ペプチド、またはその組合せから選択される請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記融合相手が以下の：
ａ）抗原、抗原決定基、エピトープまたは免疫原、あるいは
ｂ）抗体または抗体断片、あるいは
ｃ）抗体結合ドメイン
を包含する請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記融合相手が抗体結合ドメインを包含する請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
約200 nm未満の平均直径を有する複数のポリマー粒子を含む組成物であって、ポリマー粒子が以下の：
Ａ）少なくとも1つのポリマー合成酵素、または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド、ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）少なくとも1つの付加的粒子形成タンパク質、または
（２）以下を含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）少なくとも1つの（１）および少なくとも1つの（２）
を含む組成物。
【請求項３５】
約150 nm未満の平均直径を有する複数のポリマー粒子を含む組成物であって、ポリマー粒子が以下の：
Ａ）少なくとも1つのポリマー合成酵素、または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド、ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）少なくとも1つの付加的粒子形成タンパク質、または
（２）以下を含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）少なくとも1つの（１）および少なくとも1つの（２）
を含む組成物。
【請求項３６】
約110 nm未満の平均直径を有する複数のポリマー粒子を含む組成物であって、ポリマー粒子が以下の：
Ａ）少なくとも1つのポリマー合成酵素、または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド、ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）少なくとも1つの付加的粒子形成タンパク質、または
（２）以下を含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）少なくとも1つの（１）および少なくとも1つの（２）
を含む組成物。
【請求項３７】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約1％が表面結合タンパク質により被覆される請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約10％が表面結合タンパク質により被覆される請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
ポリマー粒子の表面積の少なくとも約50％が表面結合タンパク質により被覆される請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
ポリマー粒子またはその組合せに結合されるかまたは組入れられる少なくとも1つの物質をさらに含む請求項３４〜３９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４１】
前記物質がリン油性物質である請求項４０記載の組成物。
【請求項４２】
前記物質が日焼け止め剤、粒状物質、コンディショニング剤、増粘剤、水溶性ビタミン、水分散性ビタミン、油分散性ビタミン、ジメチコン・コポリオール・クロスポリマーを含む乳化エラストマー、ジメチコン／ビニルジメチコン・クロスポリマーを含む非乳化エラストマー、油溶性テルペンアルコールを含む油溶性スキンケア活性剤、フィトステロール、抗アクネ活性剤、ベータヒドロキシ酸、ビタミンＢ3化合物、レチノイド、酸化防止剤／ラジカル・スカベンジャー、キレート化剤、フラボノイド、抗炎症剤、抗セルライト剤、局所麻酔剤、制汗剤および芳香剤またはその組合せから選択される１つまたは複数のスキンケア剤である請求項４０記載の組成物。
【請求項４３】
前記物質が以下の：
ａ）酵素、例えばセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、グルコアミラーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β-グルカナーゼおよびアラビノシダーゼ、あるいは
ｂ）再汚染防止剤、例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ポリアクリレートポリマー、無水マレイン酸およびアクリル酸のコポリマー、無水マレイン酸およびエチレンのコポリマー、無水マレイン酸およびメチルビニルエーテルのコポリマー、無水マレイン酸およびメタクリル酸のコポリマー、あるいは
ｃ）その組合せ
から選択される１つまたは複数の清浄剤である請求項４０記載の組成物。
【請求項４４】
前記物質が着色または蛍光分子、放射性同位体、１つまたは複数の金属イオン、あるいはその組合せである請求項４０記載の組成物。
【請求項４５】
前記融合相手がタンパク質、タンパク質断片、結合ドメイン、標的結合ドメイン、結合タンパク質、結合タンパク質断片、抗体、抗体断片、抗体重鎖、抗体軽鎖、１本鎖抗体、単一ドメイン抗体、Ｆａｂ抗体断片、Ｆｃ抗体断片、Ｆｖ抗体断片、Ｆ（ａｂ’）２抗体断片、Ｆａｂ’抗体断片、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原決定基、エピトープ、ハプテン、免疫原、免疫原断片、ビオチン、ビオチン誘導体、アビジン、ストレプトアビジン、基質、酵素、抗体酵素、補因子、受容体、受容体断片、受容体サブユニット、受容体サブユニット断片、リガンド、阻害剤、ホルモン、レクチン、ポリヒスチジン、カップリングドメイン、ＤＮＡ結合ドメイン、ＦＬＡＧエピトープ、システイン残基、ライブラリーペプチド、レポーターペプチドおよびアフィニティー精製ペプチド、またはその組合せから選択される請求項３４〜４４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４６】
前記融合相手が以下の：
ａ）抗原、抗原決定基、エピトープまたは免疫原、あるいは
ｂ）抗体または抗体断片、あるいは
ｃ）抗体結合ドメイン
である請求項３４〜４４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４７】
前記融合相手が抗体結合ドメインを包含する請求項３４〜４４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４８】
ａ． カップリング試薬が融合相手と結合され、あるいは
ｂ． カップリング試薬が融合相手と結合され、そしてある物質がカップリング試薬と結合され、あるいは
ｃ． ある物質が融合相手と結合され、あるいは
ｄ． ポリマー合成酵素または粒子形成タンパク質がカップリング試薬で化学的に修飾されて、少なくとも1つの結合ドメインを形成しているか、あるいは
ｅ． その組合せである
請求項３４〜４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４９】
融合相手が結合ドメインを含み、そして
ａ． カップリング試薬が結合ドメインと結合され、あるいは
ｂ． カップリング試薬が結合ドメインと結合され、そしてある物質がカップリング試薬と結合され、あるいは
ｃ． ある物質が結合ドメインと結合され、
ｄ． あるいはその組合せである
請求項３４〜４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５０】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法に従って産生される請求項３４〜４９のいずれか一項に記載のポリマー粒子の組成物。
【請求項５１】
以下の：
Ａ）ポリマー合成酵素を含む少なくとも1つのポリペプチド；または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド；ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）粒子形成タンパク質を含む少なくとも1つのポリペプチド、または
（２）以下のものを含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）その組合せ
を含むポリマー粒子であって、前記ポリマー粒子の表面積の少なくとも約1％がポリペプチドにより被覆されるポリマー粒子。
【請求項５２】
以下の：
Ａ）ポリマー合成酵素を含む少なくとも1つのポリペプチド；または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド；ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）粒子形成タンパク質を含む少なくとも1つのポリペプチド、または
（２）以下のものを含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）その組合せ
を含むポリマー粒子であって、前記ポリマー粒子の表面積の少なくとも約10％がポリペプチドにより被覆されるポリマー粒子。
【請求項５３】
以下の：
Ａ）ポリマー合成酵素を含む少なくとも1つのポリペプチド；または
Ｂ）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む少なくとも1つの融合ポリペプチド；ならびに
Ｃ）任意に、以下の：
（１）粒子形成タンパク質を含む少なくとも1つのポリペプチド、または
（２）以下のものを含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）少なくとも1つの融合相手、または
（３）その組合せ
を含むポリマー粒子であって、前記ポリマー粒子の表面積の少なくとも約50％がポリペプチドにより被覆されるポリマー粒子。
【請求項５４】
ポリマー粒子またはその組合せと結合されるかまたはその中に組入れられる少なくとも1つの物質をさらに含む請求項５１〜５３のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項５５】
前記物質がタンパク質またはタンパク質断片、ペプチド、ポリペプチド、抗体または抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原決定基、エピトープ、免疫原またはその断片、金属イオン、金属イオン被覆分子、ビオチン、アビジン、ストレプトアビジンまたはその誘導体、阻害剤、補因子、基質、酵素、補因子、受容体、受容体サブユニットまたはその断片、リガンド、阻害剤、単糖、オリゴ糖、多糖、糖タンパク質、脂質、細胞またはその断片、細胞抽出物、ウイルス、ホルモン、血清タンパク質、ミルクタンパク質、高分子、乱用薬物、あるいはその組合せである請求項５４記載のポリマー粒子。
【請求項５６】
前記物質が日焼け止め剤、粒状物質、コンディショニング剤、増粘剤、水溶性ビタミン、水分散性ビタミン、油分散性ビタミン、ジメチコン・コポリオール・クロスポリマーを含む乳化エラストマー、ジメチコン／ビニルジメチコン・クロスポリマーを含む非乳化エラストマー、油溶性テルペンアルコールを含む油溶性スキンケア活性剤、フィトステロール、抗アクネ活性剤、ベータヒドロキシ酸、ビタミンＢ3化合物、レチノイド、酸化防止剤／ラジカル・スカベンジャー、キレート化剤、フラボノイド、抗炎症剤、抗セルライト剤、局所麻酔剤、制汗剤および芳香剤またはその組合せから選択される１つまたは複数のスキンケア剤である請求項５４記載のポリマー粒子。
【請求項５７】
前記物質が以下の：
ａ）酵素、例えばセルラーゼ、ペルオキシダーゼ、プロテアーゼ、グルコアミラーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β-グルカナーゼおよびアラビノシダーゼ、あるいは
ｂ）再汚染防止剤、例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ポリアクリレートポリマー、無水マレイン酸およびアクリル酸のコポリマー、無水マレイン酸およびエチレンのコポリマー、無水マレイン酸およびメチルビニルエーテルのコポリマー、無水マレイン酸およびメタクリル酸のコポリマー、あるいは
ｃ）その組合せ
から選択される１つまたは複数の清浄剤である請求項５４記載のポリマー粒子。
【請求項５８】
前記物質が着色または蛍光分子、放射性同位体、１つまたは複数の金属イオン、あるいはその組合せである請求項５４記載のポリマー粒子。
【請求項５９】
前記融合相手がタンパク質、タンパク質断片、結合ドメイン、標的結合ドメイン、結合タンパク質、結合タンパク質断片、抗体、抗体断片、抗体重鎖、抗体軽鎖、１本鎖抗体、単一ドメイン抗体、Ｆａｂ抗体断片、Ｆｃ抗体断片、Ｆｖ抗体断片、Ｆ（ａｂ’）２抗体断片、Ｆａｂ’抗体断片、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原決定基、エピトープ、ハプテン、免疫原、免疫原断片、ビオチン、ビオチン誘導体、アビジン、ストレプトアビジン、基質、酵素、抗体酵素、補因子、受容体、受容体断片、受容体サブユニット、受容体サブユニット断片、リガンド、阻害剤、ホルモン、レクチン、ポリヒスチジン、カップリングドメイン、ＤＮＡ結合ドメイン、ＦＬＡＧエピトープ、システイン残基、ライブラリーペプチド、レポーターペプチドおよびアフィニティー精製ペプチド、またはその組合せから選択される請求項５１〜５８のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６０】
前記融合相手が以下の：
ａ）抗原、抗原決定基、エピトープまたは免疫原、あるいは
ｂ）抗体または抗体断片、あるいは
ｃ）抗体結合ドメイン
である請求項５１〜５８のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６１】
前記融合相手が抗体結合ドメインを包含する請求項５１〜５８のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６２】
ａ． カップリング試薬が融合相手と結合され、あるいは
ｂ． カップリング試薬が融合相手と結合され、そしてある物質がカップリング試薬と結合され、あるいは
ｃ． ある物質が融合相手と結合され、あるいは
ｄ． ポリマー合成酵素または粒子形成タンパク質がカップリング試薬で化学的に修飾されて、少なくとも1つの結合ドメインを形成しているか、あるいは
ｅ． その組合せである
請求項５１〜６１のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６３】
融合相手が結合ドメインを含み、そして
ａ． カップリング試薬が結合ドメインと結合され、あるいは
ｂ． カップリング試薬が結合ドメインと結合され、そしてある物質がカップリング試薬と結合され、あるいは
ｃ． ある物質が結合ドメインと結合され、
ｄ． あるいはその組合せである
請求項５１〜６１のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６４】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法に従って産生される請求項５１〜６３のいずれか一項に記載のポリマー粒子。
【請求項６５】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法に従って産生される請求項５１〜６３のいずれか一項に記載のポリマー粒子を含む組成物。
【請求項６６】
請求項３４〜５０のいずれか一項に記載のポリマー粒子の組成物を含む、あるいは請求項５１〜６４のいずれか一項に記載の１つまたは複数のポリマー粒子を含む診断試薬。
【請求項６７】
請求項３４〜５０のいずれか一項に記載のポリマー粒子の組成物を含む、あるいは請求項５１〜６４のいずれか一項に記載の１つまたは複数のポリマー粒子を含む診断キット。
【請求項６８】
ＥＬＩＳＡプレート、マイクロアレイ・スライドまたはクロマトグラフィー・マトリックス、あるいはその組合せの上にポリマー粒子が固定化される請求項６７記載の診断キット。
【請求項６９】
試料中の少なくとも1つの標的構成成分を検出し、そして任意に単離する方法であって、以下の：
（ａ）ポリマー粒子と共有的または非共有的に結合される少なくとも1つの融合ポリペプチドを含む少なくとも1つのポリマー粒子であって、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）標的構成成分を結合する少なくとも1つのドメイン
を含むポリマー粒子を提供すること、
（ｂ）結合ドメインが標的構成成分を結合して複合体を形成するよう、標的構成成分を含む試料とポリマー粒子を接触させること、
（ｃ）複合体を検出すること、そして
（ｄ）任意に試料から複合体を分離すること
を包含する方法。
【請求項７０】
複合体を検出することが、複合体と、少なくとも1つの融合ポリペプチドと、またはポリマー粒子と結合する標識化分子とポリマー粒子を接触させ、そして標識化分子を検出することを包含する請求項６９記載の方法。
【請求項７１】
標識化分子が標識化抗体である請求項７０記載の方法。
【請求項７２】
ポリマー粒子が以下の：
ａ）ポリマー粒子と結合されるかまたはその中に組入れられる標識、あるいは
ｂ）以下のものを含む少なくとも1つの付加的融合ポリマー：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）標識化分子を結合する結合ドメイン、あるいは
ｃ）レポータータンパク質を含む少なくとも1つの付加的融合ポリペプチド
を含む請求項６９〜７１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７３】
ポリマー粒子が2またはそれより多くの異なる融合ポリペプチドを含む請求項６９〜７２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７４】
ポリマー粒子がポリマー粒子表面上に2またはそれより多くの異なる融合ポリペプチドを含む請求項６８記載の方法または系。
【請求項７５】
ポリマー粒子がポリマー粒子表面上に3またはそれより多くの異なる融合ポリペプチドを含む請求項６８記載の方法または系。
【請求項７６】
ポリマー粒子がさらにポリマー粒子またはその組合せと結合されるかまたはその中に組入れられる少なくとも1つの化合物を含む請求項６９〜７５のいずれか一項に記載の方法または系。
【請求項７７】
前記化合物が着色蛍光分子、放射性同位体、１つまたは複数の金属イオン、あるいはその組合せである請求項７６記載の方法または系。
【請求項７８】
前記結合ドメインが、以下の：
ａ）抗原、抗原決定基、エピトープまたは免疫原、あるいは
ｂ）抗体または抗体断片、あるいは
ｃ）抗体結合ドメイン
である請求項６９〜７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７９】
前記結合ドメインがプロテインＡまたはＺＺドメインである請求項６９〜７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８０】
前記標的構成成分がタンパク質またはタンパク質断片、ペプチド、ポリペプチド、ポリペプチド断片、抗体または抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原断片、抗原決定基、エピトープ、ハプテン、免疫原、免疫原断片、金属イオン、金属イオン被覆分子、ビオチン、ビオチン誘導体、アビジン、ストレプトアビジン、阻害剤、補因子、基質、酵素、抗体酵素、受容体、受容体断片、受容体サブユニット、受容体サブユニット断片、リガンド、受容体リガンド、受容体アゴニスト、受容体アンタゴニスト、シグナル伝達分子、シグナル伝達タンパク質、シグナル伝達タンパク質断片、成長因子、成長因子断片、転写因子、転写因子断片、阻害剤、サイトカイン、ケモカイン、炎症媒介物質、単糖、オリゴ糖、多糖、糖タンパク質、脂質、細胞、細胞表面タンパク質、細胞表面脂質、細胞表面炭水化物、細胞表面糖タンパク質、細胞抽出物、ウイルス、ウイルス外被タンパク質、ホルモン、血清タンパク質、ミルクタンパク質、高分子、乱用薬物、カップリング試薬、ポリヒスチジン、薬学的活性物質、生物学的活性物質、標識、カップリング試薬、ライブラリーペプチド、発現構築物、核酸、あるいはその組合せから選択される請求項６９〜７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８１】
標的構成成分がインターロイキン-３（ＩＬ‐３）、インターロイキン-４（ＩＬ‐４）、インターロイキン-５（ＩＬ‐５）、インターロイキン１０-（ＩＬ‐１０）、インターロイキン-７（ＩＬ‐７）、インターロイキン-１β（ＩＬ‐１β）、インターロイキン-６（ＩＬ‐６）、インターロイキン-１２ｐ７０（ＩＬ‐１２ｐ７０）、顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ-ＣＳＦ）、切断ＰＡＲＰ、Ｂｃｌ-２および活性カスパーゼ-３タンパク質レベル、インターロイキン-８（ＩＬ‐８）、塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、アンギオゲニン（ＡＮＧ）、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）および腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターロイキン-８（ＣＸＣＬ８／ＩＬ‐８）、ＲＡＮＴＥＳ（ＣＣＬ５／ＲＡＮＴＥＳ）、インターフェロン-γにより誘導されるモノカイン（ＣＸＣＬ９／ＭＩＧ）、単球化学誘引物質タンパク質-１（ＣＣＬ２／ＭＣＰ-１）、またはインターフェロンガンマ誘導性タンパク質-１０（ＣＸＣＬ１０／ＩＰ-１０）、あるいはその混合物から選択される請求項６９〜７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８２】
ＥＬＩＳＡプレート、マイクロアレイ・スライドまたはクロマトグラフィーマトリックスを含む支持体上に少なくとも1つのポリマー粒子が固定化される請求項６９〜８１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８３】
少なくとも1つのポリマー粒子が、以下の：
ａ． 請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法に従って産生されるポリマー粒子、
ｂ． 請求項３４〜５０のいずれか一項に記載の組成物、あるいは
ｃ． 請求項５１〜６４のいずれか一項に記載のポリマー粒子
を含む請求項６９〜８１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８４】
融合ポリペプチドをコードする核酸配列を含む発現構築物を含む粒子産生宿主細胞を培養することを包含する組換えポリペプチドの産生方法であって、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｂ）細胞発現系において発現される場合に封入体を形成するポリペプチド
を含む方法であって、培養条件が発現構築物からの融合ポリペプチドの発現のために、そしてポリマー粒子の形成のために適している方法。
【請求項８５】
組換えポリペプチドの産生方法であって、以下の：
（ａ）以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）細胞発現系において発現される場合に封入体を形成するポリペプチド
を含む少なくとも1つの融合ポリペプチドを提供し、そして
（ｂ）融合ポリペプチドを粒子形成反応混合物と接触させて少なくとも1つのポリマー粒子を形成する
ことを包含する方法。
【請求項８６】
粒子形成タンパク質がポリマー合成酵素を含む請求項８５記載の方法。
【請求項８７】
粒子形成反応混合物がポリマー合成酵素を含む請求項８５記載の方法。
【請求項８８】
融合相手が細胞発現系中で発現される場合に封入体を形成するポリペプチドである請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８９】
宿主細胞が各々異なる融合ポリペプチドをコードする2またはそれより多くの異なる発現構築物を含む請求項８４〜８８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９０】
以下の：
（ａ）細胞発現系で発現される場合に封入体を形成することが予め確定されているポリペプチドを同定するために文献検索を実行し；あるいは
（ｂ）ポリマー粒子を生成し得ない細胞中で候補ポリペプチドを発現し、そして細胞を顕微鏡的に検査して、発現ポリペプチドが封入体を形成したか否かを確定する
ことにより、細胞発現系で発現される場合に封入体を形成するポリペプチドを選択する初期ステップを包含する請求項８４〜８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９１】
以下の：
（１）ポリマー粒子を細胞または反応混合物から分離して、ポリマー粒子を含む組成物を産生し、そして
（２）任意にポリマー粒子から融合ポリペプチドを分離し、そして
（２）任意に融合ポリペプチドからポリペプチドを分離する
ことをさらに包含する請求項８４〜９０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９２】
組換えポリペプチドがリフォールディングを必要としない請求項８４〜９３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９３】
受容体ポリペプチドを結合する標的分子の同定方法であって、以下の：
ｄ）少なくとも1つの融合ポリペプチドを含み、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）少なくとも1つの受容体ポリペプチド
を含む少なくとも1つのポリマー粒子を提供し、そして
ｅ）少なくとも1つのポリマー粒子を少なくとも1つの標的分子と接触させ、そして
ｆ）受容体ポリペプチドを結合する標的分子を同定する
ことを包含する方法。
【請求項９４】
受容体リガンドを結合する標的分子の同定方法であって、以下の：
（ｂ）少なくとも1つの融合ポリペプチドを含み、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）少なくとも1つの受容体リガンド
を含む少なくとも1つのポリマー粒子を提供し、そして
（ｃ）少なくとも1つのポリマー粒子を少なくとも1つの標的分子と接触させ、そして
（ｄ）受容体リガンドを結合する標的分子を同定する
ことを包含する方法。
【請求項９５】
ポリマー粒子の混合集団の産生方法であって、以下の：
ｄ）発現構築物の混合集団を含有し、各発現構築物が融合ポリペプチドをコードする核酸配列を含み、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）少なくとも1つの当該ポリペプチド
を含む混合集団を含有する粒子産生宿主細胞を提供し；
ｅ）ポリマー粒子を産生し、発現構築物を発現するよう宿主細胞を誘導して、ポリマー粒子を結合する融合ポリペプチドの混合集団を産生し；そして
ｆ）任意に、ポリマー粒子の混合集団を宿主細胞から分離する
ことを包含する方法。
【請求項９６】
ライブラリーポリペプチドを結合する標的分子の同定方法であって、以下の：
ｄ）融合ポリペプチドの混合集団を含み、前記融合ポリペプチドが以下の：
（ｉ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインを含むポリペプチド、またはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質、ならびに
（ｉｉ）少なくとも1つのライブラリーポリペプチド
を含むポリマー粒子の混合集団を提供し；
ｅ）ポリマー粒子を少なくとも1つの標的分子と接触させ；
ｆ）ライブラリーポリペプチドを結合する標的分子を同定する
ことを包含する方法。
【請求項９７】
少なくとも1つの当該ポリペプチド、少なくとも1つのライブラリーポリペプチド、または少なくとも1つの受容体リガンドがタンパク質、タンパク質断片、結合ドメイン、標的結合ドメイン、結合タンパク質、結合タンパク質断片、抗体、抗体断片、抗体重鎖、抗体軽鎖、１本鎖抗体、単一ドメイン抗体、Ｆａｂ抗体断片、Ｆｃ抗体断片、Ｆｖ抗体断片、Ｆ（ａｂ‘）２抗体断片、Ｆａｂ’抗体断片、１本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）抗体断片、抗体結合ドメイン、抗原、抗原決定基、エピトープ、ハプテン、免疫原、免疫原断片、ビオチン、ビオチン誘導体、アビジン、ストレプトアビジン、基質、酵素、抗体酵素、補因子、受容体、受容体断片、受容体サブユニット、受容体サブユニット断片、阻害剤、結合ドメイン、またはその組合せから選択される請求項９３〜９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
融合ポリペプチドを結合する標的分子の同定方法であって、以下の：
（ｄ）融合相手が少なくとも1つの受容体ポリペプチド、少なくとも1つの受容体リガンド、少なくとも1つ当該ポリペプチド、少なくとも1つのライブラリーポリペプチド、またはその組合せを含む請求項３４〜５１のいずれか一項に記載の組成物を提供し、
（ｅ）前記組成物を少なくとも1つの標的分子と接触させ、そして
（ｆ）融合相手を結合する標的分子を同定する
ことを包含する方法。
【請求項９９】
標的分子を同定することがポリマー粒子を標的分子と、少なくとも1つの融合ポリペプチドと、またはポリマー粒子と結合する標識化分子と接触させること、そして標識化分子を検出することを包含する請求項９３〜９８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１００】
ＥＬＩＳＡプレート、マイクロアレイ・スライドまたはクロマトグラフィー・マトリックスを含む支持体上にポリマー粒子が固定化される請求項９３〜９９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０１】
請求項６９〜１００のいずれか一項で定義されたようなポリマー粒子を含む診断試薬。
【請求項１０２】
請求項６９〜１００のいずれか一項で定義されたようなポリマー粒子を包含する診断キット。
【請求項１０３】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法、または請求項３４〜５０のいずれか一項に記載の組成物であって、
（ｇ）前記組成物中の粒子の80％が約10 nm〜約150 nmの直径を有し；
（ｈ）前記組成物中の粒子の60％が約10 nm〜約100 nmの直径を有し；
（ｉ）前記組成物中の粒子の45％が約10 nm〜約80 nmの直径を有し；
（ｊ）前記組成物中の粒子の40％が約10 nm〜約60 nmの直径を有し；
（ｋ）前記組成物中の粒子の25％が約10 nm〜約50 nmの直径を有し；あるいは
（ｌ）前記組成物中の粒子の5％が約10 nm〜約35 nmの直径を有する
方法または組成物。
【請求項１０４】
強力なプロモーターと操作可能的に連結される発現構築物であって、以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列
を含む発現構築物。
【請求項１０５】
強力なプロモーターと操作可能的に連結される発現構築物であって、以下の：
（１）ポリマー合成酵素をコードする少なくとも1つの核酸配列；または
（２）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列；ならびに
（３）粒子形成タンパク質をコードする少なくとも1つの核酸配列または付加的融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列あるいはその組合せ（ここで、付加的融合ポリペプチドは以下のものを含む：
（ａ）ポリマー粒子結合ドメイン、ポリマー粒子結合ドメインまたはポリマー粒子結合ドメインを含む粒子形成タンパク質を含むポリペプチド、および少なくとも１つの融合相手、あるいは
（ｂ）少なくとも1つの融合相手）
を含む発現構築物。
【請求項１０６】
強力なプロモーターと操作可能的に連結される発現構築物であって、以下の：
（１）ポリマー合成酵素および少なくとも1つの融合相手を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列；ならびに
（３）少なくとも1つのポリペプチドならびに融合ポリペプチドの融合相手を結合する結合ドメインを含む付加的融合ポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸配列
を含む発現構築物。
【請求項１０７】
請求項１０４、１０５または１０６の発現構築物を包含するベクター。
【請求項１０８】
請求項１０４、１０５または１０６の発現構築物を包含する高コピー数ベクター。
【請求項１０９】
請求項１０４〜１０８のいずれか一項に記載の発現構築物またはベクターを含む宿主細胞。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【公表番号】特表２００９−５０９５３０（Ｐ２００９−５０９５３０Ａ）
【公表日】平成２１年３月１２日（２００９．３．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５３３２８３（Ｐ２００８−５３３２８３）
【出願日】平成１８年９月２７日（２００６．９．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＮＺ２００６／０００２５１
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０３７７０６
【国際公開日】平成１９年４月５日（２００７．４．５）
【出願人】（５０８０９４６３９）
【出願人】（５０８０９４６４０）
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年３月１２日（２００９．３．１２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年９月２７日（２００６．９．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＮＺ２００６／０００２５１
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０３７７０６
【国際公開日】平成１９年４月５日（２００７．４．５）
【出願人】（５０８０９４６３９）
【出願人】（５０８０９４６４０）
【Ｆターム（参考）】
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