【課題】様々な夾雑物の存在下でも容易に目的遺伝子を鋳型とする鎖伸長反応による核酸合成を行うことができる核酸合成用酵素組成物及び該組成物を用いた核酸合成法を提供する。
【解決手段】本発明の目的遺伝子を鋳型とする鎖伸長反応による核酸合成用酵素組成物は、ＣＤ及びＤＮＡポリメラーゼを含有する。本発明の核酸合成法は、本発明の核酸合成用酵素組成物と、目的遺伝子を含む反応溶液と、を混合し、上記目的遺伝子を鋳型とする鎖伸長反応を行う方法である。 （もっと読む）

【課題】酵素の改善された熱安定性をもたらす新規な突然変異を導入することにより、T7RNAポリメラーゼの改善された変異体を提供する。
【解決手段】Val426、Ser633、Val650、Thr654、Ala702、Val795、およびそれらの組合せの位置で示された、新規な突然変異を導入することにより得られた、T7RNAポリメラーゼの改善された熱安定性をもたらす変異体。 （もっと読む）

【課題】 望ましい鎖長を有する一重鎖ポリヌクレオチド、或いは二重鎖ポリヌクレオチドの酵素的合成法を提供することを課題とする。
【解決手段】基質としてポリリボヌクレオチドフォスフォリラーゼ（ＰＮＰ）を用い、基質に対して適当量のオリゴＡをプライマーとして添加することによる望ましい鎖長の一重鎖ポリヌクレオチドを製造する方法であり、望ましい鎖長が２００〜５００塩基対であり、オリゴＡの量が、基質の１／１０〜１／１００の濃度であることを特徴とするポリヌクレオチドを製造する方法であり、合成されるポリヌクレオチドが、Ｐｏｌｙ（Ｉ）又はＰｏｌｙ（Ｃ）或いはＰｏｌｙ（Ｉ：Ｃ）である合成法。 （もっと読む）

本明細書には、ポリマー合成のための方法、装置、及び他の成分が開示される。いくつかの実施形態において、多数の部位が互いに多重化されて、効果的な核酸合成が可能となる。
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本発明は、シード領域中での塩基対合と比較して、アンチセンス鎖(ガイド鎖)の3’末端およびセンス鎖(パッセンジャー鎖)の5’末端それぞれにおいて増加した熱力学的安定性を示す低分子干渉RNA分子に関する。本発明のsiRNAは、ターゲッティングされる遺伝子に対して増加したノックダウン活性を示し、RNAse、特に血清RNAseに対して改善された抵抗性を示す。本発明はまた、siRNA分子を産生する方法、本発明の改善されたsiRNA分子を使用する標的特異性のRNA干渉の方法、ならびに当該siRNA分子を含む医薬組成物に関する。
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非特異的ヌクレアーゼとＴ７エンドＩ突然変異体とを１：２００未満の単位比で含む酵素調製物を記載する。この酵素調製物は、ＤＮＡ配列決定に適したサイズの二本鎖ＤＮＡ断片を製造するために使用されうる。該断片の末端は、必要に応じて、該二本鎖ＤＮＡ断片の一方の鎖にアダプターまたは個々のヌクレオチドを連結するために容易に修飾されうる。 （もっと読む）

閉鎖型直鎖状デオキシリボ核酸（DNA）の製造のためのin vitro無細胞法は、以下のステップ：(a)少なくとも1つのプロテロメラーゼ標的配列を含むDNA鋳型を、該鋳型の増幅を促進する条件下で、少なくとも1種のプライマーの存在下で、少なくとも1種のDNAポリメラーゼと接触させるステップ；および(b)閉鎖型直鎖状DNAの製造を促進する条件下で、ステップ(a)で生成された増幅されたDNAを、少なくとも1種のプロテロメラーゼと接触させるステップを含む。キットは、該方法において必要な構成要素を提供する。 （もっと読む）

ヘリカーゼ依存性反応において標的核酸を増幅する方法が、本明細書に開示される。また、ヘリカーゼ依存性反応において標的核酸を増幅および検出する方法、ならびに検出を補助するための修飾された検出標識も開示される。また、本発明は、修飾されたＴａｑＭａｎプローブ（およびこのプローブを用いる方法）も提供する。ここで、プローブは、５’または３’末端と相補的な短尾３’または５’末端を有し、ここでＴａｑＭａｎプローブは、この短尾を除いて標的核酸と相補的であり、短尾配列は、ステムループ構造を形成してもよい。 （もっと読む）

本発明は、免疫応答を抗原に対するＴｈ１型応答に向けることを目的とする医薬組成物を調製するための、より具体的には、癌、感染症、およびアレルギーの予防および／または処置のためのサッカロマイセス・セレビシエのミトコンドリア核酸画分および前記抗原の使用に関する。相乗効果を有するアジュバント組成物、相乗効果を有するワクチン組成物、およびパーツキットも提供される。その個体の処置方法も提供される。 （もっと読む）

本発明は、標的配列の他の変種の１個以上の増幅の対立遺伝子特異的抑制により増強される、標的配列のある変種の選択的増幅の改良法である。この改良は、標的配列の所望の変種に対し、標的配列の不要な変種に対するよりも小さい親和性でハイブリダイズし得るオリゴヌクレオチドを提供し、かつ場合により化学修飾プライマーとホットスタート条件とを提供することにより、達成される。 （もっと読む）

【課題】微小流体デバイスを提供すること。
【解決手段】種々の環境から採取された細胞およびウイルス由来の核酸が、微小流体技術を利用して精製および発現され得る。本発明の実施形態に従って、個々の細胞またはウイルスあるいは細胞またはウイルスの小さな集団が、希釈、分類および／またはセグメント化によって微小流体チャンバに単離され得る。単離された細胞またはウイルスは、微小流体チャンバ内で直接溶解され得、生じた核酸は、親和性ビーズに曝露することによって精製される。その後の精製核酸の溶出の後に、すべて同じ微小流体チップ内で、連結および細胞形質転換が続き得る。１つの特定の適用において、細胞の単離、溶解および核酸精製が、高度に並行化した微小流体アーキテクチャーを利用して実施され、ｇＤＮＡライブラリーおよびｃＤＮＡライブラリーを構築し得る。 （もっと読む）

【課題】新規のベクター、前記ベクターを含むDNAワクチンおよび遺伝子治療物質、前記ベクターおよび前記ベクターを含むDNAワクチンおよび前記遺伝子治療物質の製造方法、並びに前記ベクターの治療的な使用方法の提供。
【解決手段】（a）（i）特定のDNA配列に結合できるDNA結合ドメイン（ii）核構成要素に結合できる機能ドメインを含む、核アンカータンパク質の遺伝子発現カセットと、（b）核アンカータンパク質のための結合部位を形成する多量体化されたDNAと、（c）対象となるDNA配列の1つまたは複数の発現カセットとを含むベクター。パピローマウイルス複製開始点を欠損し、哺乳類細胞における機能的な複製開始点を欠損する。核アンカータンパク質は、ウシの1型パピローマウイルスまたはエプスタイン・バーウイルス核抗原1のE2タンパク質を含む。さらに、被験者において対象となるDNA配列を発現させるための方法。 （もっと読む）

【課題】高温で高い活性を有する新規な耐熱性エンドヌクレアーゼVを提供する。
【解決手段】エンドヌクレアーゼＶ活性を有し、かつ４５℃以上６０℃未満の範囲内で至適活性を示す耐熱性を有し、かつ特定のアミノ酸配列、または該アミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が付加、欠損、若しくは置換されたアミノ酸配列を有するタンパク質。耐熱性エンドヌクレアーゼＶ遺伝子であって該タンパク質のアミノ酸をコードする塩基配列を含むＤＮＡ、および該塩基配列を含むＤＮＡとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするＤＮＡ。該耐熱性エンドヌクレアーゼＶ遺伝子をベクターＤＮＡに挿入した組換え体ＤＮＡ。該組換え体ＤＮＡを含む形質転換体または形質導入体。該形質転換体または形質導入体を培養し、培養物から該耐熱性エンドヌクレアーゼＶを採取する、耐熱性エンドヌクレアーゼＶの製造法。該耐熱性エンドヌクレアーゼＶを用いる核酸の切断方法。 （もっと読む）

本発明は、核酸を単離する方法に関し、当該方法は、以下：結合緩衝剤の存在下、第一のｐＨで、核酸を固相に結合させる工程、結合した核酸を洗浄溶液で洗浄する工程；及び前記第一のｐＨよりも高い第二のｐＨで、核酸を固相から溶出させる工程を含む。前記洗浄溶液は、前記第一のｐＨよりも高いｐＨを包含する緩衝範囲（ｂｕｆｆｅｒｉｎｇ ｒａｎｇｅ）を有する緩衝剤を含み、及び前記洗浄溶液のｐＨは、前記結合緩衝剤の緩衝範囲内であるが、前記洗浄溶液の緩衝剤の緩衝範囲よりも低い。前記方法に使用される溶液、組成物及びキットにも関する。
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DNA修復のための方法およびキットが提供される。本明細書中に記載される方法およびキットは、複数のタイプのDNA損傷を修復する。キットには、いずれかの単一の酵素が修復することができるものよりもより多くの種類の損傷を修復するための多数の酵素が含まれていてもよい。損傷DNAの修復には、損傷塩基をDNA鎖から除去する工程、損傷部位でDNAにニックを形成する工程、5'-3'エキソヌクレアーゼ活性を介してニックを翻訳する工程、そしてニックをシールする工程、が含まれてもよい。修復プロセスにおいて使用される酵素は、次いで、熱-不活性化することができ、それにより精製プロセスを回避する。次いで、修復DNAを様々なDNA解析方法を使用して解析することができる。 （もっと読む）

本教示は、核酸を増幅するための改良した方法、キット、および反応混合物に関する。いくつかの実施態様において、新規直接緩衝剤処方が提供され、それは最低限のサンプル精製で、粗製サンプルにおいて核酸を直接増幅することを可能にする。本教示は、以下の工程を含むポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う方法を提供する：デオキシリボ核酸を含む粗製サンプルを提供する工程；必要に応じてその粗製サンプルを５ｍＭから２５ｍＭのＮａＯＨとインキュベートする工程；その粗製サンプルを直接緩衝剤と混合して、核酸を含む溶液を形成する工程；およびそのデオキシリボ核酸に対してＰＣＲを行う工程。
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ここに、遺伝子組換えヌクレアーゼを用いてＢａｋ−および／またはＢａｘ−欠損細胞株を生成するための方法および組成物が開示される。
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【課題】標的特異的ＲＮＡ干渉またはＤＮＡメチル化のような他の標的特異的な核酸改変を媒介することができる新規の物質を提供すること。
【解決手段】単離された二本鎖ＲＮＡ分子であって、各鎖が３９〜５２塩基長を有し、該ＲＮＡ分子は標的特異的なＲＮＡ干渉が可能な１以上の二本鎖断片にプロセシングされることができ、該ＲＮＡ分子は、第１の鎖が予め決定したｍＲＮＡ標的分子に対して少なくとも７０％の同一性を有する配列からなり、第２の鎖が該第１の鎖に相補的な配列からなる、上記ＲＮＡ分子、ならびに該ＲＮＡ分子の使用。 （もっと読む）

本発明は、５’末端の特定の化学的な部分が異なる所望のクラスのＲＮＡ分子に選択的に５’ライゲーションによりタグを付加するための、ＲＮＡ５’ポリホスファターゼ、ＲＮＡ５’モノホスファターゼ、キャッピング酵素、デキャッピング酵素、核酸に対するピロホスファターゼおよびＲＮＡリガーゼ、ならびに他の酵素を使用する新規な組成物、キットおよび方法を提供する。５’にタグが付加されたＲＮＡ分子は、種々の用途に使用するタグが付加された第一鎖ｃＤＮＡ、二本鎖ｃＤＮＡ、およびセンスＲＮＡまたはアンチセンスＲＮＡを合成するために用いることができる。
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