大山蓮華抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用化粧料組成物
本発明は、大山蓮華抽出物を有効成分として含む皮膚美白用化粧料組成物を提供する。本発明の大山蓮華抽出物は従来の美白成分と比べて向上されたチロシナーゼ活性抑制効果及び優れたメラノサイトのメラニン合成抑制効果を示し、本発明の大山蓮華抽出物を有効成分として含有する化粧料組成物は皮膚美白改善効果が非常に優れている。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、大山蓮華抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用化粧料組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
人の皮膚や毛髪の色素は日差し、特に紫外線の有害な影響から皮膚や毛髪を保護する役割をする。このような色素に欠けている人は、日差しに非常に敏感で、火傷を負いやすく、若い年でも皮膚癌の発生確率が高い。
短波長の紫外線（２９０−３２０ｎｍ）及び発癌物質は皮膚で有害ラジカル、例えば、酸素ラジカルを形成し、このような酸素ラジカルが皮膚細胞を攻撃し、皮膚を老化させると知られている。メラニンの主な機能はこのような有害ラジカルを除去し、これによる損傷から皮膚を保護することである。従って、メラニン量が多いというのは、物理的又は化学的毒性物質から皮膚を保護することが可能な効果的な対応体系を有していることを意味する。
このようなメラニン生成を促進する要因としては、日差し（紫外線）だけでなく、エストロゲン又はプロスタグランディンなどがある。メラニンは、紫外線によってメラノサイトでチロシンがチロシナーゼ（Ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ）という酵素によりドーパ、ドーパクロムに変換された後、複雑な酸化と縮合反応を経て生成される。
生成されたメラニンは皮膚細胞に伝達され、表皮剥離とともにメラニンが消失され消滅される循環作用を示す。このようなメラニン生成過程は自然に起こる現象であって、正常状態の人の皮膚ではメラニンの過多生成は起こらない。
しかし、皮膚が外部の刺激、例えば、紫外線、環境汚染、又はストレスなどに反応すると、メラニンが過多生成される。過多生成されたメラニンが皮膚外に排出されず、皮膚内に残ると、色素沈着が起こる。上記外部刺激要因のうち、紫外線は、一番大きなメラニン生合成刺激源であって、メラニン生成と関連された様々な過程に影響を与える。
即ち、紫外線はメラニン生成細胞であるメラノサイトの活性促進、メラニン生合成刺激ホルモンの分泌促進、メラニンの酸化促進、またはチロシナーゼ活性促進などを通してメラニン過多生成を誘導する重要要因として作用する。
【０００３】
このようなメラニン生成メカニズムの一番大きな特徴は、チロシナーゼというたった一つの酵素が関与するということであって、前記チロシナーゼ活性を抑制してメラニン生成を防止すると、美白効果を期待することができる。
【０００４】
従来技術としては、美白物質としてアスコルビン酸を使用することが知られている（日本特開平４−９３２０号）。しかし、アスコルビン酸は剤形内で相安定性が悪くて、時間の経過とともにその有効成分の活性度が落ちる問題がある。従って、最近は、カプセル又はリポソームでアスコルビン酸を安定化させるなどの多様な方法が提起されているが、まだ目立つ安定化方法は提示されていない。
【０００５】
他の美白物質としてハイドロキノンを使用することが知られている（日本特開平６−１９２０６２号）。ハイドロキノンはその効果は優れているが、発癌性物質であるため、化粧料としての使用に制限がある。
【０００６】
更に他の美白物質として、コウジ酸を使用することが知られている（日本特開平５６−７７１０号）。コウジ酸はチロシナーゼの阻害能力に卓越しており、美白効果は優れているが、これも同様に、剤形内安全性の側面で問題があり、最近、発癌物質と発表されたことがある。
【０００７】
更に他の美白物質として、アルブチンを使用することが知られている（日本特開平４−９３１５号）。アルブチンは高山地帯のコケモモから抽出するか、合成を通して得られ、コウジ酸と同様に、チロシナーゼに対する抑制能力が検証されている。しかし、アルブチン自体はハイドロキノンに糖が付いている状態であって、化粧料に適用する際に皮膚酵素によって糖が分離され、ハイドロキノンによる皮膚刺激が誘発される問題がある。
【０００８】
本明細書の全体に亘って多数の特許文献及び論文が参照され、その引用が表示されている。引用された特許文献及び論文の開示内容はその全体として本明細書に参照として挿入され、本発明の属する技術分野の水準及び本発明の内容が更に明確に説明される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明者らは皮膚色素沈着を改善するために、天然植物成分に対する多様な皮膚生理活性を検索した結果、天然植物抽出物のうち、大山蓮華抽出物がチロシナーゼ活性抑制効果及びメラニン生成抑制効果に優れており、皮膚刺激がない上に、皮膚美白改善効果が非常に優れていることを確認することにより、本発明を完成した。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
従って、本発明の目的は、大山蓮華抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用化粧料組成物を提供することにある。
【００１１】
本発明の他の目的は、前記大山蓮華抽出物を含有する化粧料組成物を人間の皮膚に塗布することを特徴とする化粧方法を提供することにある。
【００１２】
本発明の他の目的及び利点は、下記の発明の詳細な説明及び請求範囲によって更に明確になる。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は、大山蓮華（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｉｅｂｏｌｄｉｉ）抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用化粧料組成物を提供する。
【００１４】
本発明の化粧料組成物の有効成分である大山蓮華は、木蓮科の落葉闊葉小喬木であるオオヤマレンゲ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｉｅｂｏｌｄｉｉ）であり、大山蓮華抽出物は大山蓮華の多様な部位のうち、花から抽出したものである。
【００１５】
大山蓮華の高さは７メートル位であり、葉は散発的で長い楕円型をであって、光沢がある。５〜６月に白く大きい花が下を向いて咲き、果実は９月に熟する。観賞用であって、深い山の中腹の谷で育ち、咸鏡北道を除いた韓国各地と日本、中国などで分布する。
【００１６】
本発明で利用される大山蓮華は、大山蓮華の花、葉、枝、根から得られ、好ましくは花または枝、更に好ましくは花から得られる。
【００１７】
本発明の大山蓮華抽出物は当業界で公知された通常の方法により、即ち、通常的な温度と圧力の条件下で通常的な溶媒を使用して製造される。
【００１８】
本発明の組成物の有効成分である大山蓮華抽出物は、水、炭素数１〜４の無水又は含水低級アルコール、アセトン、エチルアセテート、ブチルアセテート及び１，３−ブチレングリコールから構成された群から選択される溶媒を使用して抽出することが好ましく、更に好ましくは、エチルアルコール、ブタノール又はメタノールであって、 更に好ましくは、エチルアルコールである。前記エチルアルコールは好ましくは７０％エチルアルコールである。前記抽出溶媒の適した量は大山蓮華乾燥重量の１−１０倍であって、更に好ましくは５−８倍であって、一番好ましくは６倍である。
【００１９】
本発明の大山蓮華抽出物は次の段階を含む過程によって製造される。：（ａ）乾燥した大山蓮華に１−１０倍の水、炭素数１−４個の無水又は含水低級アルコール、アセトン、エチルアセテート、ブチルアセテート及び１，３−ブチレングリコールから構成された群から選択される抽出溶媒を添加する段階；
【００２０】
（ｂ）前記段階（ａ）の溶媒添加された大山蓮華を４０−１００℃で３−２０時間加熱して抽出するか、４−４０℃で１−１５日間抽出する段階；
【００２１】
（ｃ）前記段階（ｂ）の抽出液を濾過した後、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、濾過する段階；及び
（ｄ）前記段階（ｃ）の濾過液を回転減圧蒸発器で乾燥させる段階。
この際に１，３−ブチレングリコールを抽出溶媒として使用する場合、回転減圧蒸発器を用いて乾燥することは難しいため、抽出段階（ｂ）を行った後、乾燥減量が１％（ｗ／ｖ）となるように調整する。
【００２２】
一方、本発明の大山蓮華抽出物は上述した抽出法による抽出物だけでなく、通常の精製過程を経た抽出物も含む。例えば、一定の分子量カット−オフ値を有する限外濾過膜を用いた分離、様々なクロマトグラフィー（サイズ、電荷、疎水性、又は親和性による分離のために製作されたもの）による分離など、追加的に実施された様々な精製方法を用いて得られた分画も本発明の大山蓮華抽出物に含まれると解釈される。
【００２３】
本発明の大山蓮華抽出物は、減圧蒸留及び凍結乾燥、又は噴霧乾燥などのような追加的な過程により、粉末状態に製造されることもある。
【００２４】
本発明の大山蓮華抽出物は、皮膚に局所的に塗るか、撒くことによりその効果が達成される。従って、本発明の好ましい一様態によると、本発明の組成物はクリーム、ローション及び柔軟水などの化粧料組成物の形態で製造される。
【００２５】
本発明の好ましい具現例によると、本発明の大山蓮華抽出物の含量は皮膚美白用化粧料組成物の総重量に対し、０．００００１−３０．０重量％、好ましくは０．０００１−２０．０重量％である。この際に大山蓮華抽出物の総重量が０．００００１％未満である時にはその効果が現れにくく、３０％以上である時には皮膚に刺激を誘発する可能性が高く、剤形の安定化にも大きな影響を与えかねない。本発明の好ましい実施例では大山蓮華抽出物を２．０％含む化粧料組成物を製造し、これを皮膚に直接塗布することにより、皮膚美白効果に優れていることを確認した。
【００２６】
また、本発明の皮膚美白用化粧料組成物は、有効成分として前記大山蓮華抽出物以外に、化粧品組成物に通常的に利用される成分を含み、例えば、抗酸化剤、安定化剤、溶解化剤、ヴィタミン、顔料、及び香料といった通常の補助剤、そして担体を含む。
【００２７】
本発明の化粧料組成物は、当業界で通常的に製造されるいかなる剤形にも製造でき、例えば、溶液、懸濁液、乳濁液、ペースト、ゲル、クリーム、ローション、パウダー、石鹸、界面活性剤‐含有クレンジング、オイル、粉末ファンデーション、乳濁液ファンデーション、ワックスファンデーション、及びスプレー等に剤形化することができるが、これに限定されるものではない。より詳しくは、柔軟化粧水（スキン）、栄養化粧水（ミルクローション）、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、スプレー、又はパウダーの剤形に製造されることができる。
【００２８】
本発明の剤形がペースト、クリーム又はゲルである場合は、担体成分として、動物性油、植物性油、ワックス、パラフィン、澱粉、トラカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト、シリカ、滑石、又は酸化亜鉛などが用いられる。
【００２９】
本発明の剤形がパウダー、又はスプレーである場合は、担体成分として、ラクトース、滑石、シリカ、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、又はポリアミドパウダーが用いられ、特にスプレーである場合は、追加的にクロロフルオロヒドロカーボン、プロパン／ブタン、又はジメチルエーテルのような推進体を含むことができる。
【００３０】
本発明の剤形が溶液、又は乳濁液である場合は、担体成分として、溶媒、溶解化剤、又は乳濁化剤が用いられ、例えば、水、エタノール、イソプロパノール、エチルカーボネート、エチルアセテート、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレングリコール、１，３−ブチルグリコールオイル、グリセロール脂肪族エステル、ポリエチレングリコール、又はソルビタンの脂肪酸エステルがある。
【００３１】
本発明の剤形が懸濁液である場合は、担体成分として、水、エタノール、或いはプロピレングリコールのような液状の希釈剤、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールエステル、及びポリオキシエチレンソルビタンエステルのような懸濁剤、微小結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天 、又はトラカント等が用いられる。
【００３２】
本発明の剤形が界面活性剤−含有クレンジングである場合は、担体成分として、脂肪族アルコールサルフェート、脂肪族アルコールエーテルサルフェート、スルホコハク酸モノエステル、イセチオネート、イミダゾリウム誘導体、メチルタウレート、サルコシネート、脂肪酸アミドエーテルサルフェート、アルキルアミドベタイン、脂肪族アルコール、脂肪酸グリセリド、脂肪酸ジエタノールアミド、植物性油、ラノリン誘導体、又はエトキシル化グリセロール脂肪酸エステルなどが用いられる。
【００３３】
また、本発明は、本発明の大山蓮華抽出物を含有する化粧料組成物を人間の皮膚に塗布することを特徴とする化粧方法を提供する。
【００３４】
本発明の化粧方法は、本発明の化粧料組成物を人間の皮膚に塗布する全ての化粧方法を指す。即ち、化粧料組成物を皮膚に塗布する当業界に公知された全ての方法が本発明の化粧方法に属する。
【００３５】
本発明の化粧料組成物は単独又は重複塗布して使用するか、本発明以外の他の化粧料組成物と重複塗布して使用することができる。また、本発明による皮膚保護効果に優れた化粧料組成物は、通常的な使用方法によって使用し、使用者の皮膚状態又は好みによってその使用回数を異ならせることができる。
【００３６】
本発明の化粧料組成物が石鹸、界面活性剤含有クレンジング、又は界面活性剤非含有クレンジング剤形である場合、皮膚に塗布した後、拭き取るか、外すか、水で洗うこともできる。具体的な例として、前記石鹸は、液状石鹸、粉石鹸、固形石鹸、及びオイル石鹸であり、前記界面活性剤含有クレンジング剤形は、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、クレンジングタオルおよびクレンジングパックであり、前記界面活性剤非含有クレンジング剤形は、クレンジングクリーム、クレンジングローション、クレンジングウォーターおよびクレンジングゲルであり、これに限定されるものではない。
【００３７】
本発明の大山蓮華抽出物を含む化粧料組成物を人間の皮膚に塗布する化粧方法を行うと、優れた皮膚美白改善効果が得られる。
【００３８】
以下、実施例を通して本発明を更に詳細に説明する。これらの実施例はただ本発明を更に具体的に説明するためのものであって、本発明の要旨により、本発明の範囲がこれらの実施例によって制限されないということは、当業界で通常の知識を有する者にとって自明である。
【実施例】
【００３９】
製造例１． 大山蓮華抽出物の製造 I
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを水１．２Ｌに入れ、冷却コンデンサが装置された抽出機で５時間、７０−９０℃で加熱して抽出した後、３００メッシュ濾過布で濾過し、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、ワットマン５番濾過紙で濾過した。この濾液を６５℃で回転減圧蒸発器で乾燥し、乾燥重量１０．８ｇを得た。
【００４０】
製造例２． 大山蓮華抽出物の製造 II
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを水１．２Ｌに入れ、１５−３５℃で５日間抽出した後、３００メッシュ濾過布で濾過し、またワットマン５番濾過紙で濾過した後、回転減圧蒸発器で２倍濃縮した。ここに１００％エタノール０．６Ｌを加え、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、ワットマン５番濾過紙で濾過した。この濾液を６５℃で回転減圧蒸発器で乾燥し、乾燥重量１２．５ｇを得た。
【００４１】
製造例３． 大山蓮華抽出物の製造 III
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを水１．２Ｌに入れ、４−４０℃で５日間抽出した後、３００メッシュ濾過布で濾過し、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、ワットマン５番濾過紙で濾過した。この濾液を６５℃で回転減圧蒸発器で乾燥し、乾燥重量１０．６ｇを得た。
【００４２】
製造例４−２１． 大山蓮華抽出物の製造 IV
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを下記表１の抽出溶媒１．２Ｌに入れ、製造例３と同一な方法で各々抽出した。その結果は下記表１に記載した。
【００４３】
【表１】
【００４４】
製造例２２． 大山蓮華抽出物の製造 V
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを１，３−ブチレングリコール１．２Ｌに入れ、４８時間抽出した後、３００メッシュ濾過布で濾過し、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、ワットマン５番濾過紙で濾過した。この抽出物はまた乾燥減量を求めて最終濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにした。
【００４５】
製造例２３． 大山蓮華抽出物の製造 VI
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを１０％エタノール１．２Ｌに入れ、冷却コンデンサが装置された抽出機で５時間加熱して抽出した後、３００メッシュ濾過布で濾過し、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、ワットマン５番濾過紙で濾過した。この抽出物を６５℃で回転減圧蒸発器で乾燥し、乾燥重量１３．８ｇを得た。
【００４６】
製造例２４． 大山蓮華抽出物の製造 VII
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを下記表２の抽出溶媒１．２Ｌに入れ、製造例２３と同一な方法で抽出し、その結果を表２に記載した。
【００４７】
【表２】
【００４８】
実験例１．大山蓮華抽出物のチロシナーゼ活性阻害実験
リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．８）に溶解した１．５ ｍｍｄ／ｌのチロシン（シグマ社、米合衆国）４０μｌを基質として使用し、前記製造例１−３２で抽出した大山蓮華抽出物を０．０５Ｍ リン酸ナトリウム緩衝溶液（ｐＨ６．８）で希釈して試料液を製造した。チロシン４０μｌに前記濃度別試料液２４０μｌを各々添加し、前記溶液にチロシナーゼ（シグマ社、１５００Ｕ／ｍｌ）２０μｌを添加した後、３７℃で１５分間反応させた後、４９０ｎｍで吸光度を測定した。この際に大山蓮華抽出物を添加しなかったものを対照群として使用した。チロシナーゼ活性抑制率は下記の数学式１によって計算し、その結果を表３に示した。
【００４９】
【数１】
【００５０】
【表３】
前記表３の結果から分かるように、大山蓮華抽出物は多様な抽出方法を通して得た試料がチロシナーゼ活性阻害効果を示した。従って、本発明の大山蓮華抽出物を含有する組成物は優れたチロシナーゼ活性阻害効果を示すことが分かる。
【００５１】
実験例２． 大山蓮華抽出物のメラニン生成阻害実験（メラニン分析法）
Ｂ−１６細胞（マウスメラノーマ細胞、韓国細胞株銀行）を１２−ウェルプレート（ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅ）に１０４ ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌとなるように接種した後、一日間培養した。各ウェルに濃度別に大山蓮華抽出物を処理し、３−４日間培養した後、各ウェルの培養液を遠心分離した。分離された細胞はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解した１Ｎ ＮａＯＨ溶液５００μｌで溶解して１０分間９０℃水浴（ｗａｔｅｒ ｂａｔｈ）で加熱した。これを再び遠心分離し、５７０ｎｍで上澄液の吸光度を測定した。対照群としては大山蓮華抽出物を処理しなかったものを使用した。メラニン生成阻害度は下記の数学式２によって計算し、その結果は表４に示した。
【００５２】
【数２】
【００５３】
【表４】
【００５４】
上記表４の結果から分かるように、大山蓮華抽出物はメラノーマ細胞のメラニン生成抑制に優れた効果があることを確認した。また、各実験で細胞毒性は観察されなかった。
【００５５】
これに、本発明の大山蓮華抽出物を有効成分として含有する化粧料組成物の剤形例を具体的に提示するが、本発明の化粧料組成物がこの処方例に限定されるものではない。また、下記の処方例で使用した大山蓮華抽出物は製造例１０の原料を１％（ｗ／ｖ）となるように３０％１，３ブチレングリコールに溶かしたものを使用した。
【００５６】
処方例１．柔軟化粧水
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、柔軟化粧水の処方例は次の表５のようである。
【００５７】
【表５】
【００５８】
処方例２：収斂化粧水
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、収斂化粧水の処方例は次の表６のようである。
【００５９】
【表６】
【００６０】
処方例３：栄養化粧水
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、栄養化粧水の処方例は次の表７のようである。
【００６１】
【表７】
【００６２】
処方例４：栄養クリーム
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、栄養クリームの処方例は次の表８のようである。
【００６３】
【表８】
【００６４】
処方例５：マッサージクリーム
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、マッサージクリームの処方例は次の表９のようである。
【００６５】
【表９】
【００６６】
処方例６：エッセンス
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、エッセンスの処方例は次の表１０のようである。
【００６７】
【表１０】
【００６８】
処方例７：パック
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、パックの処方例は次の表１１のようである。
【００６９】
【表１１】
【００７０】
実験例４． 大山蓮華抽出物を含有する化粧料の美白効果実験
１９−４０歳の、特に黒い皮膚の韓国女性２０名を対象にした本発明の大山蓮華抽出物が含有された化粧料組成物の美白効果実験を実施した。測定部位は、腕の三箇所を縦横１ｃｍずつ表示し、前記処方例４の方法によって製造した、本発明の大山蓮華抽出物を含有する実施例１及び大山蓮華抽出物を含有しない比較実施例１の化粧料を各々塗布し、残り一箇所は比較のために対照群として使用した。各化粧料は２週間隔に８週間続いて塗布し、８週後にＭｉｎｏｌｔａ ＣＲ ３００を用いて皮膚色（Ｌ値）を測定した後、下記の数学式３によって皮膚色の変化度（ΔＬ）を計算し、その結果を下記の表１２に示した。
【００７１】
【表１２】
【００７２】
前記表１２に示したように、８週後の皮膚色の変化度（ΔＬ）を見ると、大山蓮華抽出物を含有する化粧料剤形例である実施例１における美白効果が非常に高いことがわかる。従って、大山蓮華抽出物を含有する化粧料組成物は非常に優れた美白効果を有していることがわかる。
【００７３】
［発明の効果］
本発明は、大山蓮華抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用化粧料組成物を提供する。本発明の大山蓮華抽出物は従来の美白成分と比べて向上されたチロシナーゼ活性抑制効果及び優れたメラノサイトのメラニン合成抑制効果を示し、本発明の大山蓮華抽出物を有効成分として含有する化粧料組成物は皮膚美白改善効果が非常に優れている。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、大山蓮華抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用化粧料組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
人の皮膚や毛髪の色素は日差し、特に紫外線の有害な影響から皮膚や毛髪を保護する役割をする。このような色素に欠けている人は、日差しに非常に敏感で、火傷を負いやすく、若い年でも皮膚癌の発生確率が高い。
短波長の紫外線（２９０−３２０ｎｍ）及び発癌物質は皮膚で有害ラジカル、例えば、酸素ラジカルを形成し、このような酸素ラジカルが皮膚細胞を攻撃し、皮膚を老化させると知られている。メラニンの主な機能はこのような有害ラジカルを除去し、これによる損傷から皮膚を保護することである。従って、メラニン量が多いというのは、物理的又は化学的毒性物質から皮膚を保護することが可能な効果的な対応体系を有していることを意味する。
このようなメラニン生成を促進する要因としては、日差し（紫外線）だけでなく、エストロゲン又はプロスタグランディンなどがある。メラニンは、紫外線によってメラノサイトでチロシンがチロシナーゼ（Ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ）という酵素によりドーパ、ドーパクロムに変換された後、複雑な酸化と縮合反応を経て生成される。
生成されたメラニンは皮膚細胞に伝達され、表皮剥離とともにメラニンが消失され消滅される循環作用を示す。このようなメラニン生成過程は自然に起こる現象であって、正常状態の人の皮膚ではメラニンの過多生成は起こらない。
しかし、皮膚が外部の刺激、例えば、紫外線、環境汚染、又はストレスなどに反応すると、メラニンが過多生成される。過多生成されたメラニンが皮膚外に排出されず、皮膚内に残ると、色素沈着が起こる。上記外部刺激要因のうち、紫外線は、一番大きなメラニン生合成刺激源であって、メラニン生成と関連された様々な過程に影響を与える。
即ち、紫外線はメラニン生成細胞であるメラノサイトの活性促進、メラニン生合成刺激ホルモンの分泌促進、メラニンの酸化促進、またはチロシナーゼ活性促進などを通してメラニン過多生成を誘導する重要要因として作用する。
【０００３】
このようなメラニン生成メカニズムの一番大きな特徴は、チロシナーゼというたった一つの酵素が関与するということであって、前記チロシナーゼ活性を抑制してメラニン生成を防止すると、美白効果を期待することができる。
【０００４】
従来技術としては、美白物質としてアスコルビン酸を使用することが知られている（日本特開平４−９３２０号）。しかし、アスコルビン酸は剤形内で相安定性が悪くて、時間の経過とともにその有効成分の活性度が落ちる問題がある。従って、最近は、カプセル又はリポソームでアスコルビン酸を安定化させるなどの多様な方法が提起されているが、まだ目立つ安定化方法は提示されていない。
【０００５】
他の美白物質としてハイドロキノンを使用することが知られている（日本特開平６−１９２０６２号）。ハイドロキノンはその効果は優れているが、発癌性物質であるため、化粧料としての使用に制限がある。
【０００６】
更に他の美白物質として、コウジ酸を使用することが知られている（日本特開平５６−７７１０号）。コウジ酸はチロシナーゼの阻害能力に卓越しており、美白効果は優れているが、これも同様に、剤形内安全性の側面で問題があり、最近、発癌物質と発表されたことがある。
【０００７】
更に他の美白物質として、アルブチンを使用することが知られている（日本特開平４−９３１５号）。アルブチンは高山地帯のコケモモから抽出するか、合成を通して得られ、コウジ酸と同様に、チロシナーゼに対する抑制能力が検証されている。しかし、アルブチン自体はハイドロキノンに糖が付いている状態であって、化粧料に適用する際に皮膚酵素によって糖が分離され、ハイドロキノンによる皮膚刺激が誘発される問題がある。
【０００８】
本明細書の全体に亘って多数の特許文献及び論文が参照され、その引用が表示されている。引用された特許文献及び論文の開示内容はその全体として本明細書に参照として挿入され、本発明の属する技術分野の水準及び本発明の内容が更に明確に説明される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明者らは皮膚色素沈着を改善するために、天然植物成分に対する多様な皮膚生理活性を検索した結果、天然植物抽出物のうち、大山蓮華抽出物がチロシナーゼ活性抑制効果及びメラニン生成抑制効果に優れており、皮膚刺激がない上に、皮膚美白改善効果が非常に優れていることを確認することにより、本発明を完成した。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
従って、本発明の目的は、大山蓮華抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用化粧料組成物を提供することにある。
【００１１】
本発明の他の目的は、前記大山蓮華抽出物を含有する化粧料組成物を人間の皮膚に塗布することを特徴とする化粧方法を提供することにある。
【００１２】
本発明の他の目的及び利点は、下記の発明の詳細な説明及び請求範囲によって更に明確になる。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は、大山蓮華（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｉｅｂｏｌｄｉｉ）抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用化粧料組成物を提供する。
【００１４】
本発明の化粧料組成物の有効成分である大山蓮華は、木蓮科の落葉闊葉小喬木であるオオヤマレンゲ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｉｅｂｏｌｄｉｉ）であり、大山蓮華抽出物は大山蓮華の多様な部位のうち、花から抽出したものである。
【００１５】
大山蓮華の高さは７メートル位であり、葉は散発的で長い楕円型をであって、光沢がある。５〜６月に白く大きい花が下を向いて咲き、果実は９月に熟する。観賞用であって、深い山の中腹の谷で育ち、咸鏡北道を除いた韓国各地と日本、中国などで分布する。
【００１６】
本発明で利用される大山蓮華は、大山蓮華の花、葉、枝、根から得られ、好ましくは花または枝、更に好ましくは花から得られる。
【００１７】
本発明の大山蓮華抽出物は当業界で公知された通常の方法により、即ち、通常的な温度と圧力の条件下で通常的な溶媒を使用して製造される。
【００１８】
本発明の組成物の有効成分である大山蓮華抽出物は、水、炭素数１〜４の無水又は含水低級アルコール、アセトン、エチルアセテート、ブチルアセテート及び１，３−ブチレングリコールから構成された群から選択される溶媒を使用して抽出することが好ましく、更に好ましくは、エチルアルコール、ブタノール又はメタノールであって、 更に好ましくは、エチルアルコールである。前記エチルアルコールは好ましくは７０％エチルアルコールである。前記抽出溶媒の適した量は大山蓮華乾燥重量の１−１０倍であって、更に好ましくは５−８倍であって、一番好ましくは６倍である。
【００１９】
本発明の大山蓮華抽出物は次の段階を含む過程によって製造される。：（ａ）乾燥した大山蓮華に１−１０倍の水、炭素数１−４個の無水又は含水低級アルコール、アセトン、エチルアセテート、ブチルアセテート及び１，３−ブチレングリコールから構成された群から選択される抽出溶媒を添加する段階；
【００２０】
（ｂ）前記段階（ａ）の溶媒添加された大山蓮華を４０−１００℃で３−２０時間加熱して抽出するか、４−４０℃で１−１５日間抽出する段階；
【００２１】
（ｃ）前記段階（ｂ）の抽出液を濾過した後、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、濾過する段階；及び
（ｄ）前記段階（ｃ）の濾過液を回転減圧蒸発器で乾燥させる段階。
この際に１，３−ブチレングリコールを抽出溶媒として使用する場合、回転減圧蒸発器を用いて乾燥することは難しいため、抽出段階（ｂ）を行った後、乾燥減量が１％（ｗ／ｖ）となるように調整する。
【００２２】
一方、本発明の大山蓮華抽出物は上述した抽出法による抽出物だけでなく、通常の精製過程を経た抽出物も含む。例えば、一定の分子量カット−オフ値を有する限外濾過膜を用いた分離、様々なクロマトグラフィー（サイズ、電荷、疎水性、又は親和性による分離のために製作されたもの）による分離など、追加的に実施された様々な精製方法を用いて得られた分画も本発明の大山蓮華抽出物に含まれると解釈される。
【００２３】
本発明の大山蓮華抽出物は、減圧蒸留及び凍結乾燥、又は噴霧乾燥などのような追加的な過程により、粉末状態に製造されることもある。
【００２４】
本発明の大山蓮華抽出物は、皮膚に局所的に塗るか、撒くことによりその効果が達成される。従って、本発明の好ましい一様態によると、本発明の組成物はクリーム、ローション及び柔軟水などの化粧料組成物の形態で製造される。
【００２５】
本発明の好ましい具現例によると、本発明の大山蓮華抽出物の含量は皮膚美白用化粧料組成物の総重量に対し、０．００００１−３０．０重量％、好ましくは０．０００１−２０．０重量％である。この際に大山蓮華抽出物の総重量が０．００００１％未満である時にはその効果が現れにくく、３０％以上である時には皮膚に刺激を誘発する可能性が高く、剤形の安定化にも大きな影響を与えかねない。本発明の好ましい実施例では大山蓮華抽出物を２．０％含む化粧料組成物を製造し、これを皮膚に直接塗布することにより、皮膚美白効果に優れていることを確認した。
【００２６】
また、本発明の皮膚美白用化粧料組成物は、有効成分として前記大山蓮華抽出物以外に、化粧品組成物に通常的に利用される成分を含み、例えば、抗酸化剤、安定化剤、溶解化剤、ヴィタミン、顔料、及び香料といった通常の補助剤、そして担体を含む。
【００２７】
本発明の化粧料組成物は、当業界で通常的に製造されるいかなる剤形にも製造でき、例えば、溶液、懸濁液、乳濁液、ペースト、ゲル、クリーム、ローション、パウダー、石鹸、界面活性剤‐含有クレンジング、オイル、粉末ファンデーション、乳濁液ファンデーション、ワックスファンデーション、及びスプレー等に剤形化することができるが、これに限定されるものではない。より詳しくは、柔軟化粧水（スキン）、栄養化粧水（ミルクローション）、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、スプレー、又はパウダーの剤形に製造されることができる。
【００２８】
本発明の剤形がペースト、クリーム又はゲルである場合は、担体成分として、動物性油、植物性油、ワックス、パラフィン、澱粉、トラカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト、シリカ、滑石、又は酸化亜鉛などが用いられる。
【００２９】
本発明の剤形がパウダー、又はスプレーである場合は、担体成分として、ラクトース、滑石、シリカ、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、又はポリアミドパウダーが用いられ、特にスプレーである場合は、追加的にクロロフルオロヒドロカーボン、プロパン／ブタン、又はジメチルエーテルのような推進体を含むことができる。
【００３０】
本発明の剤形が溶液、又は乳濁液である場合は、担体成分として、溶媒、溶解化剤、又は乳濁化剤が用いられ、例えば、水、エタノール、イソプロパノール、エチルカーボネート、エチルアセテート、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレングリコール、１，３−ブチルグリコールオイル、グリセロール脂肪族エステル、ポリエチレングリコール、又はソルビタンの脂肪酸エステルがある。
【００３１】
本発明の剤形が懸濁液である場合は、担体成分として、水、エタノール、或いはプロピレングリコールのような液状の希釈剤、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールエステル、及びポリオキシエチレンソルビタンエステルのような懸濁剤、微小結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天 、又はトラカント等が用いられる。
【００３２】
本発明の剤形が界面活性剤−含有クレンジングである場合は、担体成分として、脂肪族アルコールサルフェート、脂肪族アルコールエーテルサルフェート、スルホコハク酸モノエステル、イセチオネート、イミダゾリウム誘導体、メチルタウレート、サルコシネート、脂肪酸アミドエーテルサルフェート、アルキルアミドベタイン、脂肪族アルコール、脂肪酸グリセリド、脂肪酸ジエタノールアミド、植物性油、ラノリン誘導体、又はエトキシル化グリセロール脂肪酸エステルなどが用いられる。
【００３３】
また、本発明は、本発明の大山蓮華抽出物を含有する化粧料組成物を人間の皮膚に塗布することを特徴とする化粧方法を提供する。
【００３４】
本発明の化粧方法は、本発明の化粧料組成物を人間の皮膚に塗布する全ての化粧方法を指す。即ち、化粧料組成物を皮膚に塗布する当業界に公知された全ての方法が本発明の化粧方法に属する。
【００３５】
本発明の化粧料組成物は単独又は重複塗布して使用するか、本発明以外の他の化粧料組成物と重複塗布して使用することができる。また、本発明による皮膚保護効果に優れた化粧料組成物は、通常的な使用方法によって使用し、使用者の皮膚状態又は好みによってその使用回数を異ならせることができる。
【００３６】
本発明の化粧料組成物が石鹸、界面活性剤含有クレンジング、又は界面活性剤非含有クレンジング剤形である場合、皮膚に塗布した後、拭き取るか、外すか、水で洗うこともできる。具体的な例として、前記石鹸は、液状石鹸、粉石鹸、固形石鹸、及びオイル石鹸であり、前記界面活性剤含有クレンジング剤形は、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、クレンジングタオルおよびクレンジングパックであり、前記界面活性剤非含有クレンジング剤形は、クレンジングクリーム、クレンジングローション、クレンジングウォーターおよびクレンジングゲルであり、これに限定されるものではない。
【００３７】
本発明の大山蓮華抽出物を含む化粧料組成物を人間の皮膚に塗布する化粧方法を行うと、優れた皮膚美白改善効果が得られる。
【００３８】
以下、実施例を通して本発明を更に詳細に説明する。これらの実施例はただ本発明を更に具体的に説明するためのものであって、本発明の要旨により、本発明の範囲がこれらの実施例によって制限されないということは、当業界で通常の知識を有する者にとって自明である。
【実施例】
【００３９】
製造例１． 大山蓮華抽出物の製造 I
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを水１．２Ｌに入れ、冷却コンデンサが装置された抽出機で５時間、７０−９０℃で加熱して抽出した後、３００メッシュ濾過布で濾過し、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、ワットマン５番濾過紙で濾過した。この濾液を６５℃で回転減圧蒸発器で乾燥し、乾燥重量１０．８ｇを得た。
【００４０】
製造例２． 大山蓮華抽出物の製造 II
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを水１．２Ｌに入れ、１５−３５℃で５日間抽出した後、３００メッシュ濾過布で濾過し、またワットマン５番濾過紙で濾過した後、回転減圧蒸発器で２倍濃縮した。ここに１００％エタノール０．６Ｌを加え、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、ワットマン５番濾過紙で濾過した。この濾液を６５℃で回転減圧蒸発器で乾燥し、乾燥重量１２．５ｇを得た。
【００４１】
製造例３． 大山蓮華抽出物の製造 III
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを水１．２Ｌに入れ、４−４０℃で５日間抽出した後、３００メッシュ濾過布で濾過し、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、ワットマン５番濾過紙で濾過した。この濾液を６５℃で回転減圧蒸発器で乾燥し、乾燥重量１０．６ｇを得た。
【００４２】
製造例４−２１． 大山蓮華抽出物の製造 IV
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを下記表１の抽出溶媒１．２Ｌに入れ、製造例３と同一な方法で各々抽出した。その結果は下記表１に記載した。
【００４３】
【表１】
【００４４】
製造例２２． 大山蓮華抽出物の製造 V
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを１，３−ブチレングリコール１．２Ｌに入れ、４８時間抽出した後、３００メッシュ濾過布で濾過し、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、ワットマン５番濾過紙で濾過した。この抽出物はまた乾燥減量を求めて最終濃度が１％（ｗ／ｖ）となるようにした。
【００４５】
製造例２３． 大山蓮華抽出物の製造 VI
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを１０％エタノール１．２Ｌに入れ、冷却コンデンサが装置された抽出機で５時間加熱して抽出した後、３００メッシュ濾過布で濾過し、５−１０℃で７−１０日間放置して熟成させた後、ワットマン５番濾過紙で濾過した。この抽出物を６５℃で回転減圧蒸発器で乾燥し、乾燥重量１３．８ｇを得た。
【００４６】
製造例２４． 大山蓮華抽出物の製造 VII
精製水で洗滌して乾燥した大山蓮華の花２００ｇを下記表２の抽出溶媒１．２Ｌに入れ、製造例２３と同一な方法で抽出し、その結果を表２に記載した。
【００４７】
【表２】
【００４８】
実験例１．大山蓮華抽出物のチロシナーゼ活性阻害実験
リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．８）に溶解した１．５ ｍｍｄ／ｌのチロシン（シグマ社、米合衆国）４０μｌを基質として使用し、前記製造例１−３２で抽出した大山蓮華抽出物を０．０５Ｍ リン酸ナトリウム緩衝溶液（ｐＨ６．８）で希釈して試料液を製造した。チロシン４０μｌに前記濃度別試料液２４０μｌを各々添加し、前記溶液にチロシナーゼ（シグマ社、１５００Ｕ／ｍｌ）２０μｌを添加した後、３７℃で１５分間反応させた後、４９０ｎｍで吸光度を測定した。この際に大山蓮華抽出物を添加しなかったものを対照群として使用した。チロシナーゼ活性抑制率は下記の数学式１によって計算し、その結果を表３に示した。
【００４９】
【数１】
【００５０】
【表３】
前記表３の結果から分かるように、大山蓮華抽出物は多様な抽出方法を通して得た試料がチロシナーゼ活性阻害効果を示した。従って、本発明の大山蓮華抽出物を含有する組成物は優れたチロシナーゼ活性阻害効果を示すことが分かる。
【００５１】
実験例２． 大山蓮華抽出物のメラニン生成阻害実験（メラニン分析法）
Ｂ−１６細胞（マウスメラノーマ細胞、韓国細胞株銀行）を１２−ウェルプレート（ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅ）に１０４ ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌとなるように接種した後、一日間培養した。各ウェルに濃度別に大山蓮華抽出物を処理し、３−４日間培養した後、各ウェルの培養液を遠心分離した。分離された細胞はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解した１Ｎ ＮａＯＨ溶液５００μｌで溶解して１０分間９０℃水浴（ｗａｔｅｒ ｂａｔｈ）で加熱した。これを再び遠心分離し、５７０ｎｍで上澄液の吸光度を測定した。対照群としては大山蓮華抽出物を処理しなかったものを使用した。メラニン生成阻害度は下記の数学式２によって計算し、その結果は表４に示した。
【００５２】
【数２】
【００５３】
【表４】
【００５４】
上記表４の結果から分かるように、大山蓮華抽出物はメラノーマ細胞のメラニン生成抑制に優れた効果があることを確認した。また、各実験で細胞毒性は観察されなかった。
【００５５】
これに、本発明の大山蓮華抽出物を有効成分として含有する化粧料組成物の剤形例を具体的に提示するが、本発明の化粧料組成物がこの処方例に限定されるものではない。また、下記の処方例で使用した大山蓮華抽出物は製造例１０の原料を１％（ｗ／ｖ）となるように３０％１，３ブチレングリコールに溶かしたものを使用した。
【００５６】
処方例１．柔軟化粧水
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、柔軟化粧水の処方例は次の表５のようである。
【００５７】
【表５】
【００５８】
処方例２：収斂化粧水
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、収斂化粧水の処方例は次の表６のようである。
【００５９】
【表６】
【００６０】
処方例３：栄養化粧水
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、栄養化粧水の処方例は次の表７のようである。
【００６１】
【表７】
【００６２】
処方例４：栄養クリーム
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、栄養クリームの処方例は次の表８のようである。
【００６３】
【表８】
【００６４】
処方例５：マッサージクリーム
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、マッサージクリームの処方例は次の表９のようである。
【００６５】
【表９】
【００６６】
処方例６：エッセンス
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、エッセンスの処方例は次の表１０のようである。
【００６７】
【表１０】
【００６８】
処方例７：パック
大山蓮華抽出物を含有した化粧料のうち、パックの処方例は次の表１１のようである。
【００６９】
【表１１】
【００７０】
実験例４． 大山蓮華抽出物を含有する化粧料の美白効果実験
１９−４０歳の、特に黒い皮膚の韓国女性２０名を対象にした本発明の大山蓮華抽出物が含有された化粧料組成物の美白効果実験を実施した。測定部位は、腕の三箇所を縦横１ｃｍずつ表示し、前記処方例４の方法によって製造した、本発明の大山蓮華抽出物を含有する実施例１及び大山蓮華抽出物を含有しない比較実施例１の化粧料を各々塗布し、残り一箇所は比較のために対照群として使用した。各化粧料は２週間隔に８週間続いて塗布し、８週後にＭｉｎｏｌｔａ ＣＲ ３００を用いて皮膚色（Ｌ値）を測定した後、下記の数学式３によって皮膚色の変化度（ΔＬ）を計算し、その結果を下記の表１２に示した。
【００７１】
【表１２】
【００７２】
前記表１２に示したように、８週後の皮膚色の変化度（ΔＬ）を見ると、大山蓮華抽出物を含有する化粧料剤形例である実施例１における美白効果が非常に高いことがわかる。従って、大山蓮華抽出物を含有する化粧料組成物は非常に優れた美白効果を有していることがわかる。
【００７３】
［発明の効果］
本発明は、大山蓮華抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用化粧料組成物を提供する。本発明の大山蓮華抽出物は従来の美白成分と比べて向上されたチロシナーゼ活性抑制効果及び優れたメラノサイトのメラニン合成抑制効果を示し、本発明の大山蓮華抽出物を有効成分として含有する化粧料組成物は皮膚美白改善効果が非常に優れている。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
大山蓮華（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｉｅｂｏｌｄｉｉ）抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用化粧料組成物。
【請求項２】
前記大山蓮華抽出物は、化粧料組成物の総重量に対し、０．００００１−３０．０重量％で含まれることを特徴とする、請求項１に記載の皮膚美白用化粧料組成物。
【請求項３】
前記大山蓮華抽出物は、水、炭素数１〜４の無水又は含水低級アルコール、アセトン、エチルアセテート、及びブチルアセテートから構成された群から選択される抽出溶媒で抽出されたことを特徴とする、請求項１に記載の皮膚美白用化粧料組成物。
【請求項４】
前記化粧料組成物は、溶液、懸濁液、乳濁液、ペースト、ゲル、クリーム、ローション、パウダー、石鹸、界面活性剤‐含有クレンジング、オイル、粉末ファンデーション、乳濁液ファンデーション、ワックスファンデーション、及びスプレーで構成された群から選択される剤形であることを特徴とする、請求項１に記載の皮膚美白用化粧料組成物。
【請求項５】
第１項乃至第４項の何れか一つの化粧料組成物を人間の皮膚に塗布することを特徴とする、化粧方法。
【請求項１】
大山蓮華（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｉｅｂｏｌｄｉｉ）抽出物を有効成分として含有する皮膚美白用化粧料組成物。
【請求項２】
前記大山蓮華抽出物は、化粧料組成物の総重量に対し、０．００００１−３０．０重量％で含まれることを特徴とする、請求項１に記載の皮膚美白用化粧料組成物。
【請求項３】
前記大山蓮華抽出物は、水、炭素数１〜４の無水又は含水低級アルコール、アセトン、エチルアセテート、及びブチルアセテートから構成された群から選択される抽出溶媒で抽出されたことを特徴とする、請求項１に記載の皮膚美白用化粧料組成物。
【請求項４】
前記化粧料組成物は、溶液、懸濁液、乳濁液、ペースト、ゲル、クリーム、ローション、パウダー、石鹸、界面活性剤‐含有クレンジング、オイル、粉末ファンデーション、乳濁液ファンデーション、ワックスファンデーション、及びスプレーで構成された群から選択される剤形であることを特徴とする、請求項１に記載の皮膚美白用化粧料組成物。
【請求項５】
第１項乃至第４項の何れか一つの化粧料組成物を人間の皮膚に塗布することを特徴とする、化粧方法。
【公表番号】特表２０１０−５２７９９４（Ｐ２０１０−５２７９９４Ａ）
【公表日】平成２２年８月１９日（２０１０．８．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５０９２５９（Ｐ２０１０−５０９２５９）
【出願日】平成１９年１１月３０日（２００７．１１．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＫＲ２００７／００６１２３
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０６９８３９
【国際公開日】平成２１年６月４日（２００９．６．４）
【出願人】（５０２０９１１３５）コリアナ・コズメティック・カンパニー・リミテッド (6)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年８月１９日（２０１０．８．１９）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年１１月３０日（２００７．１１．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＫＲ２００７／００６１２３
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０６９８３９
【国際公開日】平成２１年６月４日（２００９．６．４）
【出願人】（５０２０９１１３５）コリアナ・コズメティック・カンパニー・リミテッド (6)
【Ｆターム（参考）】
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