本発明は、造血幹細胞のような幹細胞の増幅を調節する方法および物質を提供する。したがって、本発明は、造血幹細胞、生殖幹細胞、神経幹細胞のような幹細胞の増幅を調節するための方法であって、（Ａ）幹細胞に、増幅を調節するに十分な量のＢｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子を提供する工程；および（Ｂ）該幹細胞を、該増幅を調節するに十分な時間培養する工程、を包含する、方法を提供する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
幹細胞の増幅を調節するための方法であって、
（Ａ）幹細胞に、増幅を調節するに十分な量のＢｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子を提供する工程；および
（Ｂ）該幹細胞を、該増幅を調節するに十分な時間培養する工程、
を包含する、方法。
【請求項２】
前記増幅の調節は、増幅促進である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記Ｂｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子は、外因性または内因性である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記Ｂｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子は、外因性である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記Ｂｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子は、核酸形態および／またはタンパク質形態である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記Ｂｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子は、
（ａ）配列番号１または３に記載の核酸配列（それぞれ、アクセッション番号Ｌ１３６８９またはＭ６４２７９）もしくはそのフラグメントによってコードされる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号２または４に記載のアミノ酸配列もしくはそのフラグメントを有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号２または４に記載のアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される少なくとも１つの変異を有する改変体ポリペプチドであって、生物学的活性を有する、改変体ポリペプチド；または
（ｄ）（ａ）〜（ｃ）のいずれか１つのポリペプチドのアミノ酸配列に対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列からなり、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記Ｂｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子は、
（ａ）配列番号１または３に記載の塩基配列（それぞれ、アクセッション番号Ｌ１３６８９またはＭ６４２７９）またはそのフラグメント配列を有する、ポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２または４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントをコードする、ポリヌクレオチド、
（ｃ）配列番号２または４に記載のアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される少なくとも１つの変異を有する改変体ポリペプチドであって、生物学的活性を有する改変体ポリペプチドをコードする、ポリヌクレオチド；
（ｄ）（ａ）〜（ｃ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、ポリヌクレオチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｃ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列を有し、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記Ｂｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子は、低分子、脂質分子、糖鎖分子、およびそれらの複合分子からなる群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記幹細胞は、造血幹細胞、生殖幹細胞および神経幹細胞からなる群より選択される幹細胞を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
造血、生殖または神経系に関連する疾患、障害または異常状態を調節するための方法であって、
（Ａ）幹細胞の増幅を調節するに十分な量のＢｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子を被検体に提供する工程；および
（Ｂ）該被検体を、該増幅を調節するに十分な時間インキュベートする工程、
を包含する、方法。
【請求項１１】
幹細胞の増幅を調節するための組成物であって、増幅を調節するに十分な量のＢｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子を含む、組成物。
【請求項１２】
前記増幅の調節は、増幅促進である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記幹細胞は、造血幹細胞、生殖幹細胞および神経幹細胞からなる群より選択される幹細胞を含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１４】
前記Ｂｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子は、
（ａ）配列番号１または３に記載の核酸配列（それぞれ、アクセッション番号Ｌ１３６８９またはＭ６４２７９）もしくはそのフラグメントによってコードされる、ポリペプチド；
（ｂ）配列番号２または４に記載のアミノ酸配列もしくはそのフラグメントを有する、ポリペプチド；
（ｃ）配列番号２または４に記載のアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される少なくとも１つの変異を有する改変体ポリペプチドであって、生物学的活性を有する、改変体ポリペプチド；または
（ｄ）（ａ）〜（ｃ）のいずれか１つのポリペプチドのアミノ酸配列に対する同一性が少なくとも７０％であるアミノ酸配列を有し、かつ、生物学的活性を有する、ポリペプチド、
を含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１５】
前記Ｂｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子は、
（ａ）配列番号１または３に記載の塩基配列（それぞれ、アクセッション番号Ｌ１３６８９またはＭ６４２７９）またはそのフラグメント配列を有する、ポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号２または４に記載のアミノ酸配列またはそのフラグメントをコードする、ポリヌクレオチド、
（ｃ）配列番号２または４に記載のアミノ酸配列において、１以上のアミノ酸が、置換、付加および欠失からなる群より選択される少なくとも１つの変異を有する改変体ポリペプチドであって、生物学的活性を有する改変体ポリペプチドをコードする、ポリヌクレオチド；
（ｄ）（ａ）〜（ｃ）のいずれか１つのポリヌクレオチドにストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；または
（ｅ）（ａ）〜（ｃ）のいずれか１つのポリヌクレオチドまたはその相補配列に対する同一性が少なくとも７０％である塩基配列を有し、かつ、生物学的活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、
を含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１６】
前記Ｂｍｉ−１は、Ｍｐｈ−１／Ｒａｅ２８またはＭ３３と複合体を形成する、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１７】
前記Ｂｍｉ−１は、Ｍｐｈ−１／Ｒａｅ２８およびＭ３３と複合体を形成する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記Ｂｍｉ−１またはそのフラグメントもしくは改変体および／またはＢｍｉ−１調節因子は、恒常的に活性型である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１９】
前記Ｂｍｉ−１またはそのフラグメントもしくは改変体および／またはＢｍｉ−１調節因子は、一過的に活性型である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２０】
前記Ｂｍｉ−１は、配列番号１（アクセッション番号Ｌ１３６８９）に記載の配列からなる、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２１】
さらなる細胞生理活性物質を含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２２】
前記細胞生理活性物質は、ＳＣＦ、ＴＰＯおよびＦｌｔ−３Ｌからなる群より選択される因子を含む、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
さらに、薬学的に受容可能なキャリアを含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２４】
前記Ｂｍｉ−１調節因子は、Ｂｍｉ−１の活性化因子を含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２５】
Ｂｍｉ−１のプロモーターの活性を上げる因子またはＢｍｉ−１を含むＰｃＧ複合体に結合しその機能を増強する因子をさらに含む、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２６】
前記Ｂｍｉ−１またはそのフラグメントもしくは改変体および／またはＢｍｉ−１調節因子は、タンパク質または複合タンパク質形態をとる、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２７】
前記Ｂｍｉ−１またはそのフラグメントもしくは改変体および／またはＢｍｉ−１調節因子は、核酸形態をとる、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２８】
前記核酸形態のＢｍｉ−１またはそのフラグメントもしくは改変体および／またはＢｍｉ−１調節因子は、ベクターに含まれる、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記ベクターは、レトロウイルスベクターである、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
造血、生殖および神経系に関連する疾患、障害または異常状態を処置または予防するための方法であって、
処置または予防するに十分な量のＢｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子を、そのような調節を必要とする被検体に投与する工程、
を包含する、方法。
【請求項３１】
造血、生殖および神経系に関連する疾患、障害または異常状態を処置または予防するための薬学的組成物であって、処置または予防するに十分な量のＢｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子を含む、組成物。
【請求項３２】
幹細胞の増幅を調節するためのキットであって、
（Ａ）増幅を調節するに十分な量のＢｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子を含む組成物；および
（Ｂ）該組成物を幹細胞へ提供し、造血幹細胞を培養することを指示する指示書、
を備える、キット。
【請求項３３】
幹細胞の増幅を調節するための、Ｂｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子の使用。
【請求項３４】
幹細胞系列の増幅細胞を生産するための方法であって、
（Ａ）幹細胞または始原細胞を提供する工程；
（Ｂ）該幹細胞または始原細胞に、増幅を調節するに十分な量のＢｍｉ−１またはその改変体もしくはフラグメントおよび／またはＢｍｉ−１調節因子を提供する工程；および
（Ｃ）該幹細胞を、該増幅を調節するに十分な時間培養する工程、
を包含する、方法。
【請求項３５】
前記幹細胞は、造血系、生殖系および神経系からなる群より選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
請求項３５に記載の方法によって得られた細胞。
【請求項３７】
請求項３５に記載の方法によって得られた細胞から得られた組織。
【請求項３８】
請求項３５に記載の方法によって得られた細胞から得られた臓器。
【請求項３９】
請求項３５に記載の方法によって得られた細胞を含む、医薬。
【請求項４０】
幹細胞またはそれに由来する増幅細胞を必要とする疾患または障害を処置または予防するための方法であって、
Ａ）請求項３５に記載の方法によって得られた細胞をそのような処置または予防を必要とする被検体に投与する工程、
を包含する、方法。
【請求項４１】
請求項３５に記載の方法によって得られた細胞の、幹細胞またはそれに由来する増幅細胞を必要とする疾患または障害を処置または予防するための使用。
【請求項４２】
幹細胞の増幅を調節するための因子をスクリーニングするための方法であって、
Ａ）該因子の候補物質を提供する工程；
Ｂ）該物質をＢｍｉ−１を含む細胞に曝露する工程；および
Ｃ）該Ｂｍｉ−１が調節されたかどうかを決定する工程であって、該Ｂｍｉ−１が調節された場合、該物質を幹細胞の増幅調節因子であると判断する、工程、
を包含する、方法。
【請求項４３】
請求項４２に記載の方法によって得られる、造血幹細胞の増幅調節因子。

【図１８】

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１９】

【公表番号】特表２００７−５０７２０６（Ｐ２００７−５０７２０６Ａ）
【公表日】平成１９年３月２９日（２００７．３．２９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５２７７７５（Ｐ２００６−５２７７７５）
【出願日】平成１６年９月２９日（２００４．９．２９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０１４７１３
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０３０９３９
【国際公開日】平成１７年４月７日（２００５．４．７）
【出願人】（５０３３４１６７５）株式会社リプロセル (13)
【Ｆターム（参考）】