膜貫通型タンパク質ＡＭＩＧＯおよびその用途
細胞外領域に６個のロイシン−リッチリピート（ＬＲＲ）と１個の免疫グロブリンドメインを含む、膜貫通型タンパク質であるＡＭＩＧＯ、ＡＭＩＧＯ２およびＡＭＩＧＯ３（Amphoterin induced gene and orphan receptor、即ち、「アンフォテリン誘導性遺伝子とオーファン受容体」）。これらのタンパク質を用いた、神経系細胞の成長、遊走、軸索伸長、ミエリン形成、束形成または増殖を制御する方法、ならびに癌、腫瘍増殖および転移腫瘍の処置方法。２つのＡＭＩＧＯ化合物間の相互作用、またはＡＭＩＧＯと上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）との相互作用を制御する物質のスクリーニング方法。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号２、４または６に記載のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を包含する、単離精製したＡＭＩＧＯ核酸。
【請求項２】
配列番号１、３または５に記載のヌクレオチド配列を包含する、単離精製したＡＭＩＧＯ核酸。
【請求項３】
配列番号１、３または５に記載のヌクレオチド配列、その相同体、またはそれらの断片を含む組換えヌクレオチド配列を包含する、単離精製した核酸。
【請求項４】
発現制御配列に発現可能な状態に連結した請求項２の核酸を包含し、ＡＭＩＧＯポリペプチドまたはその変異体をコードしうる発現構築物。
【請求項５】
請求項４の発現構築物で形質転換またはトランスフェクトした宿主細胞。
【請求項６】
ポリヌクレオチドで形質転換またはトランスフェクトした宿主細胞であって、該ポリヌクレオチドはヒト ヌクレオチド配列を含んだヌクレオチド鎖を含み、該ヒト ヌクレオチド配列は、配列番号１、３または５に記載の配列に相補的な非コード鎖を含むＤＮＡと以下のハイブリダイゼーション条件下においてハイブリダイズすることを特徴とする、宿主細胞。
（ａ）５０％ホルムアミド、５×ＳＳＰＥ、５×デンハルト溶液、０．１％ＳＤＳおよび０．１ｍｇ／ｍｌの変性サケ精子ＤＮＡを含む溶液中、４２℃で２０時間の条件下でフィルターのハイブリダイゼーションを行い、そして
（ｂ）該フィルターの洗浄を、１×ＳＳＣおよび０．１％ＳＤＳを含む洗浄液を用い、室温で３０分間を２回、そして６５℃で３０分間を２回行う。
【請求項７】
配列番号２、４または６に記載のアミノ酸配列を包含する、単離精製したＡＭＩＧＯポリペプチド。
【請求項８】
請求項５の宿主細胞であって、発現可能となるようにプロモーター配列と共にＡＭＩＧＯポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを有し、該ポリペプチドをコードする核酸配列を発現する宿主細胞を培養し、そして
該宿主細胞または該宿主細胞を培養した培地から該ポリペプチドを単離する
ことを包含する、請求項７のＡＭＩＧＯポリペプチドの製造方法。
【請求項９】
請求項７の単離精製したＡＭＩＧＯポリペプチドまたはその抗原性断片で哺乳類を免疫することを包含する、抗体の製造方法。
【請求項１０】
請求項７の単離精製したＡＭＩＧＯポリペプチドまたはその抗原性断片を用いた抗原。
【請求項１１】
請求項９の方法で製造した抗体。
【請求項１２】
検出可能な標識で標識した、請求項１１に記載の抗体。
【請求項１３】
− 容器、および
− 該容器に入っている、ＡＭＩＧＯまたはその対立遺伝子変異体を検出しうる化合物、好ましくは標識されている化合物
を包含することを特徴とする、生物学的試料中のＡＭＩＧＯまたはその対立遺伝子変異体の存在を検出するための、複数の試薬からなるキット。
【請求項１４】
該化合物がプライマーまたはプローブであることを特徴とする、請求項１３に記載のキット。
【請求項１５】
該化合物が請求項１１の抗体であることを特徴とする、請求項１３に記載のキット。
【請求項１６】
ＡＭＩＧＯの変異または機能不全が影響する病態に関する個体の疾病素質を評価するための、請求項１３または１４に記載のキット。
【請求項１７】
該キットを用いるための説明書をさらに包含する、請求項１６に記載のキット。
【請求項１８】
ヒトまたはマウスのＡＭＩＧＯ遺伝子をトランスジーンとして有する、トランスジェニックなヒト以外の動物。
【請求項１９】
ＡＭＩＧＯ遺伝子またはその相同体の発現を妨害するトランスジーンまたは挿入物を有する、トランスジェニックなヒト以外の動物。
【請求項２０】
ＡＭＩＧＯ核酸分子、ＡＭＩＧＯタンパク質、ＡＭＩＧＯペプチド断片、ＡＭＩＧＯ融合タンパク質、ＡＭＩＧＯ作用物質、ＡＭＩＧＯ拮抗物質または抗ＡＭＩＧＯ抗体を包含する医療用化合物。
【請求項２１】
薬学的に有効な量の請求項２０の医療用化合物を、治療を必要とする患者に投与することを特徴とする、ＡＭＩＧＯに依存する病態の治療方法。
【請求項２２】
以下の工程を包含する、ＡＭＩＧＯに結合するリガンドを親和性精製する方法。
（ａ）ＡＭＩＧＯに対する精製すべき受容体が支持体に固定化したＡＭＩＧＯ上に選択的に吸着される条件下で、該受容体の原料を固定化したＡＭＩＧＯに接触させ、
（ｂ）固定化したＡＭＩＧＯとその支持体を、吸着されていない物質を取り除くために洗浄し、そして
（ｃ）固定化したＡＭＩＧＯに吸着している受容体分子を溶離緩衝液で溶離して、ＡＭＩＧＯに結合するリガンドを得る。
【請求項２３】
以下の工程を包含する、ＡＭＩＧＯ受容体と他のＡＭＩＧＯ受容体との結合に対する制御物質を同定する方法。
（ａ）制御物質と推定される化合物の存在下および不在下で、ＡＭＩＧＯ受容体を含有するＡＭＩＧＯ受容体組成物を、該ＡＭＩＧＯ受容体のリガンドとなる他のＡＭＩＧＯ受容体を含有するＡＭＩＧＯ組成物に接触させ、
（ｂ）制御物質と推定される化合物の存在下および不在下で、ＡＭＩＧＯ受容体と他のＡＭＩＧＯ受容体との結合を検出し、そして
（ｃ）制御物質と推定される化合物の不在下における結合との比較によって確認することのできる、制御物質と推定される化合物の存在下におけるＡＭＩＧＯ受容体と他のＡＭＩＧＯ受容体との結合の増減を指標として、制御物質を同定する。
【請求項２４】
次の工程（ｄ）をさらに包含する請求項２３に記載の方法。
（ｄ）工程（ｃ）において同定した制御物質を、薬学的に許容される担体と組み合わせて制御組成物を作製する。
【請求項２５】
次の工程（ｅ）をさらに包含する請求項２４に記載の方法。
（ｅ）ＡＭＩＧＯ受容体を発現する細胞を有する動物に該制御組成物を投与し、動物における制御組成物の生理学的影響を判定する。
【請求項２６】
該ＡＭＩＧＯ受容体組成物が、下記（ａ）、（ｂ）および（ｃ）からなる群より選ばれる１種を含有することを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
（ａ）ＡＭＩＧＯ受容体の、ＡＭＩＧＯに結合する細胞外ドメイン断片を包含する、精製したポリペプチド、
（ｂ）ＡＭＩＧＯ受容体ポリペプチドを包むリン脂質膜、および
（ｃ）細胞表面のＡＭＩＧＯ受容体の発現量が増加するように組換え技術によって修飾した細胞。
【請求項２７】
該ＡＭＩＧＯ受容体組成物が、固体支持体に固定されているＡＭＩＧＯ受容体細胞外ドメイン断片を含有することを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
該ＡＭＩＧＯ受容体組成物が、免疫グロブリンのＦｃ断片と融合したＡＭＩＧＯ受容体細胞外ドメイン断片を含有することを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
該ＡＭＩＧＯ受容体が、哺乳類のＡＭＩＧＯ、ＡＭＩＧＯ２およびＡＭＩＧＯ３からなる群より選ばれることを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
該ＡＭＩＧＯ受容体がヒト由来であることを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
該ＡＭＩＧＯ組成物が、下記（ａ）、（ｂ）および（ｃ）からなる群より選ばれる１種を含有することを特徴とする、請求項２３〜３０のいずれかに記載の方法。
（ａ）該ＡＭＩＧＯ受容体に結合するＡＭＩＧＯ断片を包含する、精製したポリペプチド、
（ｂ）ＡＭＩＧＯポリペプチドを包むリン脂質膜、および
（ｃ）細胞表面のＡＭＩＧＯの発現量が増加するように組換え技術によって修飾した細胞。
【請求項３２】
該ＡＭＩＧＯ組成物が、固体支持体に固定されているＡＭＩＧＯ細胞外ドメイン断片を含有することを特徴とする、請求項２３〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】
該ＡＭＩＧＯ組成物が、免疫グロブリンのＦｃ断片と融合したＡＭＩＧＯ細胞外ドメイン断片を含有することを特徴とする、請求項２３〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
該ＡＭＩＧＯがヒト由来であることを特徴とする、請求項２３〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３５】
該ＡＭＩＧＯ受容体組成物が細胞表面のＡＭＩＧＯ受容体の発現量が増加するように組換え技術によって修飾した細胞を含有し、工程（ｂ）はＡＭＩＧＯの結合が誘導する細胞の生理学的変化の測定を含むことを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
該ＡＭＩＧＯ組成物が細胞表面のＡＭＩＧＯの発現量が増加するように組換え技術によって修飾した細胞を含有し、工程（ｂ）はＡＭＩＧＯの結合が誘導する細胞の生理学的変化の測定を含むことを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
以下の工程を包含する、ＡＭＩＧＯとＥＧＦＲとの結合に対する選択性を示す制御物質をスクリーニングするための方法。
（ａ）ＡＭＩＧＯ受容体とＥＧＦＲ受容体との結合を制御する化合物の存在下および不在下で、ＡＭＩＧＯ受容体を含有するＡＭＩＧＯ受容体組成物を、ＥＧＦＲ受容体を含有するＥＧＦＲ受容体組成物に接触させ、
（ｂ）制御化合物の存在下および不在下で、ＡＭＩＧＯ受容体組成物とＥＧＦＲ受容体組成物との結合を検出し、そして
（ｃ）制御化合物の不在下における結合との比較によって確認することのできる、制御化合物の存在下におけるＡＭＩＧＯ受容体とＥＧＦＲ受容体との結合の増減を指標として、選択性を示す制御化合物を同定するが、ＡＭＩＧＯ−ＥＧＦＲ結合に対する該制御化合物の選択性の増加は、ＡＭＩＧＯ−ＥＧＦＲ結合の他の結合との差異の減少と関連する。
【請求項３８】
以下の工程を包含する、哺乳類の生体における細胞の成長、遊走、軸索伸長、ミエリン形成、束形成または増殖を制御する方法。
（ａ）ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種を発現する細胞を有する哺乳類の生体を同定し、そして
（ｂ）該哺乳類の生体においてＡＭＩＧＯを発現する細胞の成長、遊走または増殖の制御に効果的な量の、以下の物質(i)〜(vi)からなる群より選ばれる１種を含有する組成物を該哺乳類の生体に投与する。
(i) ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するＡＭＩＧＯ受容体を包含するポリペプチド、または該ポリペプチドをコードする核酸、
(ii) ＡＭＩＧＯの断片を包含するポリペプチドまたは該ポリペプチドをコードする核酸であって、該ポリペプチドおよび該断片は共にＡＭＩＧＯの有するＡＭＩＧＯ結合特性を保持する、
(iii) 上記(i)または(ii)のポリペプチドに特異的に結合し、該ポリペプチドがＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するのを阻害する抗体、あるいは該抗体の、上記(i)または(ii)のポリペプチドに特異的に結合する断片、
(iv) 抗原結合性である上記(iii)の抗体断片を包含するポリペプチドであって、上記(i)または(ii)のポリペプチドがＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲ受容体からなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するのを阻害するポリペプチド、
(v) ＡＭＩＧＯが該ＥＧＦＲ受容体に結合するのを阻害することなく、ＡＭＩＧＯが該ＡＭＩＧＯ受容体に結合するのを選択的に阻害する分子、および
(vi) ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲ受容体に選択的に結合する分子。
【請求項３９】
該哺乳類の生体がヒトであることを特徴とする、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
該細胞が神経系細胞を含むことを特徴とする、請求項３８または３９に記載の方法。
【請求項４１】
神経系細胞または神経突起の成長、遊走または増殖の異常を特徴とする疾病に該生体が罹患していることを特徴とする、請求項３８〜４０のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
該生体が神経系細胞に外傷を有することを特徴とする、請求項３８〜４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４３】
さらに以下の工程を包含することを特徴とする、請求項３８に記載の方法。
神経系細胞の成長、遊走、再生または増殖を制御するために第２の薬剤を生体に投与する工程であって、該薬剤は、上記物質(i)〜(vi)のいずれかのポリペプチドに特異的に結合する抗体、上記物質(i)〜(vi)のいずれかのポリペプチドに対する受容体に特異的に結合する抗体、および該抗体の抗原結合性断片を包含するポリペプチドからなる群より選ばれる１種である。
【請求項４４】
投与する組成物中のＡＭＩＧＯが、ＡＭＩＧＯの細胞外断片がＦｃドメインに結合したＡＭＩＧＯ−Ｆｃタンパク質であることを特徴とする、請求項３８に記載の方法。
【請求項４５】
該ＡＭＩＧＯ−Ｆｃタンパク質が、ラットＡＭＩＧＯ−Ｆｃ融合タンパク質配列をヒトＡＭＩＧＯ配列およびヒトＦｃ配列で実質的に置換したものであることを特徴とする、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
請求項３８〜４５のいずれかで定義したポリペプチドであって、ＡＭＩＧＯ受容体を発現する細胞の成長、遊走、再生または増殖の異常を特徴とする疾病の治療剤の製造に用いるポリペプチド。
【請求項４７】
該細胞が、海馬細胞、大脳細胞、小脳細胞、外傷を受けた神経系細胞、グリア性瘢痕細胞、脊髄細胞、視神経細胞、網膜細胞、腎臓細胞、ならびに束形成、軸索誘導、軸索伸長またはミエリン形成の際に機能する細胞からなる群より選ばれる神経系細胞であることを特徴とする、請求項３８〜４５のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】
以下の工程を包含する、哺乳類の生体における癌、腫瘍の増殖または癌転移を制御する方法。
（ａ）ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種を発現する細胞を有する哺乳類の生体を同定し、そして
（ｂ）該哺乳類の生体において、癌の進行またはＡＭＩＧＯを発現する細胞の転移を制御するのに効果的な量の、以下の物質(i)〜(vi)からなる群より選ばれる１種を含有する組成物を該哺乳類の生体に投与する。
(i) ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するＡＭＩＧＯ受容体を包含するポリペプチド、または該ポリペプチドをコードする核酸、
(ii) ＡＭＩＧＯの断片を包含するポリペプチドまたは該ポリペプチドをコードする核酸であって、該ポリペプチドおよび該断片は共にＡＭＩＧＯの有するＡＭＩＧＯ結合特性を保持する、
(iii) 上記(i)または(ii)のポリペプチドに特異的に結合し、該ポリペプチドがＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するのを阻害する抗体、あるいは該抗体の、上記(i)または(ii)のポリペプチドに特異的に結合する断片、
(iv) 抗原結合性である上記(iii)の抗体断片を包含するポリペプチドであって、上記(i)または(ii)のポリペプチドがＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲ受容体からなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するのを阻害するポリペプチド、
(v) ＡＭＩＧＯが該ＥＧＦＲ受容体に結合するのを阻害することなく、ＡＭＩＧＯが該ＡＭＩＧＯ受容体に結合するのを選択的に阻害する分子、および
(vi) ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲ受容体に選択的に結合する分子。
【請求項４９】
該哺乳類の生体がヒトであることを特徴とする、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
該細胞が、グリオーマ、グリオブラストーマ、アストロサイトーマ、異型性アストロサイトーマ、脳室上衣腫、乏突起膠腫、髄芽細胞腫、髄膜腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽頭腫、胚細胞腫瘍、松果体芽細胞腫、松果体細胞腫、胚細胞腫細胞、肺癌、乳癌、卵巣癌、結腸直腸癌、膀胱癌、膵臓癌、扁平上皮細胞癌または腎臓癌の細胞を含むことを特徴とする、請求項４８または４９に記載の方法。
【請求項５１】
癌または癌転移と診断される疾病に該生体が罹患していることを特徴とする、請求項４８〜５０のいずれかに記載の方法。
【請求項５２】
該疾病が脳腫瘍を含むことを特徴とする、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
さらに以下の工程を包含することを特徴とする、請求項４８に記載の方法。
癌の進行または癌転移の進行を制御するために第２の薬剤を生体に投与する工程であって、該薬剤は、上記物質(i)〜(vi)のいずれかのポリペプチドに特異的に結合する抗体、上記物質(i)〜(vi)のいずれかのポリペプチドに対する受容体に特異的に結合する抗体、および該抗体の抗原結合性断片を包含するポリペプチドからなる群より選ばれる１種である。
【請求項５４】
投与する組成物中のＡＭＩＧＯが、ＡＭＩＧＯの細胞外断片がＦｃドメインに結合したＡＭＩＧＯ−Ｆｃタンパク質であることを特徴とする、請求項４８に記載の方法。
【請求項５５】
該ＡＭＩＧＯ−Ｆｃタンパク質が、ラットＡＭＩＧＯ−Ｆｃ融合タンパク質配列をヒトＡＭＩＧＯ配列およびヒトＦｃ配列で実質的に置換したものであることを特徴とする、請求項４８に記載の方法。
【請求項５６】
グリオーマ、グリオブラストーマ、アストロサイトーマ、異型性アストロサイトーマ、脳室上衣腫、乏突起膠腫、神経髄芽細胞腫、髄膜腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽頭腫、胚細胞腫瘍である胚細胞腫、肺癌、乳癌、卵巣癌、結腸直腸癌、膀胱癌、膵臓癌、扁平上皮細胞癌および腎臓癌からなる群より選ばれる癌または癌細胞転移の進行を処置するための方法であって、治療を必要とする対象に請求項２０の化合物を投与する工程を包含する方法。
【請求項５７】
海馬細胞、大脳細胞、小脳細胞、外傷を受けた神経系細胞、グリア性瘢痕細胞、脊髄細胞、視神経細胞、網膜細胞、腎臓細胞、ならびに束形成、軸索誘導、軸索伸長およびミエリン形成の際に機能する細胞からなる群より選ばれる神経系細胞を処置するための方法であって、治療を必要とする対象に請求項２０の化合物を投与する工程を包含する方法。
【請求項５８】
ＡＭＩＧＯ受容体を発現する細胞の成長、遊走、再生または増殖の異常を特徴とする疾病用の治療剤を製造するための、ＡＭＩＧＯ受容体に結合するＡＭＩＧＯの断片を包含するポリペプチドまたは該ポリペプチドをコードする核酸。
【請求項５９】
細胞または組織をＡＭＩＧＯ化合物と接触させることを包含する、細胞または組織のヒト上皮成長因子受容体のリン酸化を制御する方法。
【請求項６０】
該ＡＭＩＧＯ化合物が、配列番号１、３および５からなる群より選ばれるヌクレオチド配列によってコードされるＡＭＩＧＯペプチドを包含することを特徴とする、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
該ＡＭＩＧＯ化合物が、抗ＡＭＩＧＯ抗体を包含することを特徴とする、請求項５９に記載の方法。
【請求項１】
配列番号２、４または６に記載のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を包含する、単離精製したＡＭＩＧＯ核酸。
【請求項２】
配列番号１、３または５に記載のヌクレオチド配列を包含する、単離精製したＡＭＩＧＯ核酸。
【請求項３】
配列番号１、３または５に記載のヌクレオチド配列、その相同体、またはそれらの断片を含む組換えヌクレオチド配列を包含する、単離精製した核酸。
【請求項４】
発現制御配列に発現可能な状態に連結した請求項２の核酸を包含し、ＡＭＩＧＯポリペプチドまたはその変異体をコードしうる発現構築物。
【請求項５】
請求項４の発現構築物で形質転換またはトランスフェクトした宿主細胞。
【請求項６】
ポリヌクレオチドで形質転換またはトランスフェクトした宿主細胞であって、該ポリヌクレオチドはヒト ヌクレオチド配列を含んだヌクレオチド鎖を含み、該ヒト ヌクレオチド配列は、配列番号１、３または５に記載の配列に相補的な非コード鎖を含むＤＮＡと以下のハイブリダイゼーション条件下においてハイブリダイズすることを特徴とする、宿主細胞。
（ａ）５０％ホルムアミド、５×ＳＳＰＥ、５×デンハルト溶液、０．１％ＳＤＳおよび０．１ｍｇ／ｍｌの変性サケ精子ＤＮＡを含む溶液中、４２℃で２０時間の条件下でフィルターのハイブリダイゼーションを行い、そして
（ｂ）該フィルターの洗浄を、１×ＳＳＣおよび０．１％ＳＤＳを含む洗浄液を用い、室温で３０分間を２回、そして６５℃で３０分間を２回行う。
【請求項７】
配列番号２、４または６に記載のアミノ酸配列を包含する、単離精製したＡＭＩＧＯポリペプチド。
【請求項８】
請求項５の宿主細胞であって、発現可能となるようにプロモーター配列と共にＡＭＩＧＯポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを有し、該ポリペプチドをコードする核酸配列を発現する宿主細胞を培養し、そして
該宿主細胞または該宿主細胞を培養した培地から該ポリペプチドを単離する
ことを包含する、請求項７のＡＭＩＧＯポリペプチドの製造方法。
【請求項９】
請求項７の単離精製したＡＭＩＧＯポリペプチドまたはその抗原性断片で哺乳類を免疫することを包含する、抗体の製造方法。
【請求項１０】
請求項７の単離精製したＡＭＩＧＯポリペプチドまたはその抗原性断片を用いた抗原。
【請求項１１】
請求項９の方法で製造した抗体。
【請求項１２】
検出可能な標識で標識した、請求項１１に記載の抗体。
【請求項１３】
− 容器、および
− 該容器に入っている、ＡＭＩＧＯまたはその対立遺伝子変異体を検出しうる化合物、好ましくは標識されている化合物
を包含することを特徴とする、生物学的試料中のＡＭＩＧＯまたはその対立遺伝子変異体の存在を検出するための、複数の試薬からなるキット。
【請求項１４】
該化合物がプライマーまたはプローブであることを特徴とする、請求項１３に記載のキット。
【請求項１５】
該化合物が請求項１１の抗体であることを特徴とする、請求項１３に記載のキット。
【請求項１６】
ＡＭＩＧＯの変異または機能不全が影響する病態に関する個体の疾病素質を評価するための、請求項１３または１４に記載のキット。
【請求項１７】
該キットを用いるための説明書をさらに包含する、請求項１６に記載のキット。
【請求項１８】
ヒトまたはマウスのＡＭＩＧＯ遺伝子をトランスジーンとして有する、トランスジェニックなヒト以外の動物。
【請求項１９】
ＡＭＩＧＯ遺伝子またはその相同体の発現を妨害するトランスジーンまたは挿入物を有する、トランスジェニックなヒト以外の動物。
【請求項２０】
ＡＭＩＧＯ核酸分子、ＡＭＩＧＯタンパク質、ＡＭＩＧＯペプチド断片、ＡＭＩＧＯ融合タンパク質、ＡＭＩＧＯ作用物質、ＡＭＩＧＯ拮抗物質または抗ＡＭＩＧＯ抗体を包含する医療用化合物。
【請求項２１】
薬学的に有効な量の請求項２０の医療用化合物を、治療を必要とする患者に投与することを特徴とする、ＡＭＩＧＯに依存する病態の治療方法。
【請求項２２】
以下の工程を包含する、ＡＭＩＧＯに結合するリガンドを親和性精製する方法。
（ａ）ＡＭＩＧＯに対する精製すべき受容体が支持体に固定化したＡＭＩＧＯ上に選択的に吸着される条件下で、該受容体の原料を固定化したＡＭＩＧＯに接触させ、
（ｂ）固定化したＡＭＩＧＯとその支持体を、吸着されていない物質を取り除くために洗浄し、そして
（ｃ）固定化したＡＭＩＧＯに吸着している受容体分子を溶離緩衝液で溶離して、ＡＭＩＧＯに結合するリガンドを得る。
【請求項２３】
以下の工程を包含する、ＡＭＩＧＯ受容体と他のＡＭＩＧＯ受容体との結合に対する制御物質を同定する方法。
（ａ）制御物質と推定される化合物の存在下および不在下で、ＡＭＩＧＯ受容体を含有するＡＭＩＧＯ受容体組成物を、該ＡＭＩＧＯ受容体のリガンドとなる他のＡＭＩＧＯ受容体を含有するＡＭＩＧＯ組成物に接触させ、
（ｂ）制御物質と推定される化合物の存在下および不在下で、ＡＭＩＧＯ受容体と他のＡＭＩＧＯ受容体との結合を検出し、そして
（ｃ）制御物質と推定される化合物の不在下における結合との比較によって確認することのできる、制御物質と推定される化合物の存在下におけるＡＭＩＧＯ受容体と他のＡＭＩＧＯ受容体との結合の増減を指標として、制御物質を同定する。
【請求項２４】
次の工程（ｄ）をさらに包含する請求項２３に記載の方法。
（ｄ）工程（ｃ）において同定した制御物質を、薬学的に許容される担体と組み合わせて制御組成物を作製する。
【請求項２５】
次の工程（ｅ）をさらに包含する請求項２４に記載の方法。
（ｅ）ＡＭＩＧＯ受容体を発現する細胞を有する動物に該制御組成物を投与し、動物における制御組成物の生理学的影響を判定する。
【請求項２６】
該ＡＭＩＧＯ受容体組成物が、下記（ａ）、（ｂ）および（ｃ）からなる群より選ばれる１種を含有することを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
（ａ）ＡＭＩＧＯ受容体の、ＡＭＩＧＯに結合する細胞外ドメイン断片を包含する、精製したポリペプチド、
（ｂ）ＡＭＩＧＯ受容体ポリペプチドを包むリン脂質膜、および
（ｃ）細胞表面のＡＭＩＧＯ受容体の発現量が増加するように組換え技術によって修飾した細胞。
【請求項２７】
該ＡＭＩＧＯ受容体組成物が、固体支持体に固定されているＡＭＩＧＯ受容体細胞外ドメイン断片を含有することを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
該ＡＭＩＧＯ受容体組成物が、免疫グロブリンのＦｃ断片と融合したＡＭＩＧＯ受容体細胞外ドメイン断片を含有することを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
該ＡＭＩＧＯ受容体が、哺乳類のＡＭＩＧＯ、ＡＭＩＧＯ２およびＡＭＩＧＯ３からなる群より選ばれることを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
該ＡＭＩＧＯ受容体がヒト由来であることを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
該ＡＭＩＧＯ組成物が、下記（ａ）、（ｂ）および（ｃ）からなる群より選ばれる１種を含有することを特徴とする、請求項２３〜３０のいずれかに記載の方法。
（ａ）該ＡＭＩＧＯ受容体に結合するＡＭＩＧＯ断片を包含する、精製したポリペプチド、
（ｂ）ＡＭＩＧＯポリペプチドを包むリン脂質膜、および
（ｃ）細胞表面のＡＭＩＧＯの発現量が増加するように組換え技術によって修飾した細胞。
【請求項３２】
該ＡＭＩＧＯ組成物が、固体支持体に固定されているＡＭＩＧＯ細胞外ドメイン断片を含有することを特徴とする、請求項２３〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】
該ＡＭＩＧＯ組成物が、免疫グロブリンのＦｃ断片と融合したＡＭＩＧＯ細胞外ドメイン断片を含有することを特徴とする、請求項２３〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
該ＡＭＩＧＯがヒト由来であることを特徴とする、請求項２３〜３３のいずれかに記載の方法。
【請求項３５】
該ＡＭＩＧＯ受容体組成物が細胞表面のＡＭＩＧＯ受容体の発現量が増加するように組換え技術によって修飾した細胞を含有し、工程（ｂ）はＡＭＩＧＯの結合が誘導する細胞の生理学的変化の測定を含むことを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
該ＡＭＩＧＯ組成物が細胞表面のＡＭＩＧＯの発現量が増加するように組換え技術によって修飾した細胞を含有し、工程（ｂ）はＡＭＩＧＯの結合が誘導する細胞の生理学的変化の測定を含むことを特徴とする、請求項２３〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
以下の工程を包含する、ＡＭＩＧＯとＥＧＦＲとの結合に対する選択性を示す制御物質をスクリーニングするための方法。
（ａ）ＡＭＩＧＯ受容体とＥＧＦＲ受容体との結合を制御する化合物の存在下および不在下で、ＡＭＩＧＯ受容体を含有するＡＭＩＧＯ受容体組成物を、ＥＧＦＲ受容体を含有するＥＧＦＲ受容体組成物に接触させ、
（ｂ）制御化合物の存在下および不在下で、ＡＭＩＧＯ受容体組成物とＥＧＦＲ受容体組成物との結合を検出し、そして
（ｃ）制御化合物の不在下における結合との比較によって確認することのできる、制御化合物の存在下におけるＡＭＩＧＯ受容体とＥＧＦＲ受容体との結合の増減を指標として、選択性を示す制御化合物を同定するが、ＡＭＩＧＯ−ＥＧＦＲ結合に対する該制御化合物の選択性の増加は、ＡＭＩＧＯ−ＥＧＦＲ結合の他の結合との差異の減少と関連する。
【請求項３８】
以下の工程を包含する、哺乳類の生体における細胞の成長、遊走、軸索伸長、ミエリン形成、束形成または増殖を制御する方法。
（ａ）ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種を発現する細胞を有する哺乳類の生体を同定し、そして
（ｂ）該哺乳類の生体においてＡＭＩＧＯを発現する細胞の成長、遊走または増殖の制御に効果的な量の、以下の物質(i)〜(vi)からなる群より選ばれる１種を含有する組成物を該哺乳類の生体に投与する。
(i) ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するＡＭＩＧＯ受容体を包含するポリペプチド、または該ポリペプチドをコードする核酸、
(ii) ＡＭＩＧＯの断片を包含するポリペプチドまたは該ポリペプチドをコードする核酸であって、該ポリペプチドおよび該断片は共にＡＭＩＧＯの有するＡＭＩＧＯ結合特性を保持する、
(iii) 上記(i)または(ii)のポリペプチドに特異的に結合し、該ポリペプチドがＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するのを阻害する抗体、あるいは該抗体の、上記(i)または(ii)のポリペプチドに特異的に結合する断片、
(iv) 抗原結合性である上記(iii)の抗体断片を包含するポリペプチドであって、上記(i)または(ii)のポリペプチドがＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲ受容体からなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するのを阻害するポリペプチド、
(v) ＡＭＩＧＯが該ＥＧＦＲ受容体に結合するのを阻害することなく、ＡＭＩＧＯが該ＡＭＩＧＯ受容体に結合するのを選択的に阻害する分子、および
(vi) ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲ受容体に選択的に結合する分子。
【請求項３９】
該哺乳類の生体がヒトであることを特徴とする、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
該細胞が神経系細胞を含むことを特徴とする、請求項３８または３９に記載の方法。
【請求項４１】
神経系細胞または神経突起の成長、遊走または増殖の異常を特徴とする疾病に該生体が罹患していることを特徴とする、請求項３８〜４０のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
該生体が神経系細胞に外傷を有することを特徴とする、請求項３８〜４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４３】
さらに以下の工程を包含することを特徴とする、請求項３８に記載の方法。
神経系細胞の成長、遊走、再生または増殖を制御するために第２の薬剤を生体に投与する工程であって、該薬剤は、上記物質(i)〜(vi)のいずれかのポリペプチドに特異的に結合する抗体、上記物質(i)〜(vi)のいずれかのポリペプチドに対する受容体に特異的に結合する抗体、および該抗体の抗原結合性断片を包含するポリペプチドからなる群より選ばれる１種である。
【請求項４４】
投与する組成物中のＡＭＩＧＯが、ＡＭＩＧＯの細胞外断片がＦｃドメインに結合したＡＭＩＧＯ−Ｆｃタンパク質であることを特徴とする、請求項３８に記載の方法。
【請求項４５】
該ＡＭＩＧＯ−Ｆｃタンパク質が、ラットＡＭＩＧＯ−Ｆｃ融合タンパク質配列をヒトＡＭＩＧＯ配列およびヒトＦｃ配列で実質的に置換したものであることを特徴とする、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
請求項３８〜４５のいずれかで定義したポリペプチドであって、ＡＭＩＧＯ受容体を発現する細胞の成長、遊走、再生または増殖の異常を特徴とする疾病の治療剤の製造に用いるポリペプチド。
【請求項４７】
該細胞が、海馬細胞、大脳細胞、小脳細胞、外傷を受けた神経系細胞、グリア性瘢痕細胞、脊髄細胞、視神経細胞、網膜細胞、腎臓細胞、ならびに束形成、軸索誘導、軸索伸長またはミエリン形成の際に機能する細胞からなる群より選ばれる神経系細胞であることを特徴とする、請求項３８〜４５のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】
以下の工程を包含する、哺乳類の生体における癌、腫瘍の増殖または癌転移を制御する方法。
（ａ）ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種を発現する細胞を有する哺乳類の生体を同定し、そして
（ｂ）該哺乳類の生体において、癌の進行またはＡＭＩＧＯを発現する細胞の転移を制御するのに効果的な量の、以下の物質(i)〜(vi)からなる群より選ばれる１種を含有する組成物を該哺乳類の生体に投与する。
(i) ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するＡＭＩＧＯ受容体を包含するポリペプチド、または該ポリペプチドをコードする核酸、
(ii) ＡＭＩＧＯの断片を包含するポリペプチドまたは該ポリペプチドをコードする核酸であって、該ポリペプチドおよび該断片は共にＡＭＩＧＯの有するＡＭＩＧＯ結合特性を保持する、
(iii) 上記(i)または(ii)のポリペプチドに特異的に結合し、該ポリペプチドがＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲからなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するのを阻害する抗体、あるいは該抗体の、上記(i)または(ii)のポリペプチドに特異的に結合する断片、
(iv) 抗原結合性である上記(iii)の抗体断片を包含するポリペプチドであって、上記(i)または(ii)のポリペプチドがＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲ受容体からなる群より選ばれる少なくとも１種に結合するのを阻害するポリペプチド、
(v) ＡＭＩＧＯが該ＥＧＦＲ受容体に結合するのを阻害することなく、ＡＭＩＧＯが該ＡＭＩＧＯ受容体に結合するのを選択的に阻害する分子、および
(vi) ＡＭＩＧＯ受容体およびＥＧＦＲ受容体に選択的に結合する分子。
【請求項４９】
該哺乳類の生体がヒトであることを特徴とする、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
該細胞が、グリオーマ、グリオブラストーマ、アストロサイトーマ、異型性アストロサイトーマ、脳室上衣腫、乏突起膠腫、髄芽細胞腫、髄膜腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽頭腫、胚細胞腫瘍、松果体芽細胞腫、松果体細胞腫、胚細胞腫細胞、肺癌、乳癌、卵巣癌、結腸直腸癌、膀胱癌、膵臓癌、扁平上皮細胞癌または腎臓癌の細胞を含むことを特徴とする、請求項４８または４９に記載の方法。
【請求項５１】
癌または癌転移と診断される疾病に該生体が罹患していることを特徴とする、請求項４８〜５０のいずれかに記載の方法。
【請求項５２】
該疾病が脳腫瘍を含むことを特徴とする、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
さらに以下の工程を包含することを特徴とする、請求項４８に記載の方法。
癌の進行または癌転移の進行を制御するために第２の薬剤を生体に投与する工程であって、該薬剤は、上記物質(i)〜(vi)のいずれかのポリペプチドに特異的に結合する抗体、上記物質(i)〜(vi)のいずれかのポリペプチドに対する受容体に特異的に結合する抗体、および該抗体の抗原結合性断片を包含するポリペプチドからなる群より選ばれる１種である。
【請求項５４】
投与する組成物中のＡＭＩＧＯが、ＡＭＩＧＯの細胞外断片がＦｃドメインに結合したＡＭＩＧＯ−Ｆｃタンパク質であることを特徴とする、請求項４８に記載の方法。
【請求項５５】
該ＡＭＩＧＯ−Ｆｃタンパク質が、ラットＡＭＩＧＯ−Ｆｃ融合タンパク質配列をヒトＡＭＩＧＯ配列およびヒトＦｃ配列で実質的に置換したものであることを特徴とする、請求項４８に記載の方法。
【請求項５６】
グリオーマ、グリオブラストーマ、アストロサイトーマ、異型性アストロサイトーマ、脳室上衣腫、乏突起膠腫、神経髄芽細胞腫、髄膜腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽頭腫、胚細胞腫瘍である胚細胞腫、肺癌、乳癌、卵巣癌、結腸直腸癌、膀胱癌、膵臓癌、扁平上皮細胞癌および腎臓癌からなる群より選ばれる癌または癌細胞転移の進行を処置するための方法であって、治療を必要とする対象に請求項２０の化合物を投与する工程を包含する方法。
【請求項５７】
海馬細胞、大脳細胞、小脳細胞、外傷を受けた神経系細胞、グリア性瘢痕細胞、脊髄細胞、視神経細胞、網膜細胞、腎臓細胞、ならびに束形成、軸索誘導、軸索伸長およびミエリン形成の際に機能する細胞からなる群より選ばれる神経系細胞を処置するための方法であって、治療を必要とする対象に請求項２０の化合物を投与する工程を包含する方法。
【請求項５８】
ＡＭＩＧＯ受容体を発現する細胞の成長、遊走、再生または増殖の異常を特徴とする疾病用の治療剤を製造するための、ＡＭＩＧＯ受容体に結合するＡＭＩＧＯの断片を包含するポリペプチドまたは該ポリペプチドをコードする核酸。
【請求項５９】
細胞または組織をＡＭＩＧＯ化合物と接触させることを包含する、細胞または組織のヒト上皮成長因子受容体のリン酸化を制御する方法。
【請求項６０】
該ＡＭＩＧＯ化合物が、配列番号１、３および５からなる群より選ばれるヌクレオチド配列によってコードされるＡＭＩＧＯペプチドを包含することを特徴とする、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
該ＡＭＩＧＯ化合物が、抗ＡＭＩＧＯ抗体を包含することを特徴とする、請求項５９に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【公表番号】特表２００６−５２５７８４（Ｐ２００６−５２５７８４Ａ）
【公表日】平成１８年１１月１６日（２００６．１１．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−５６０５４０（Ｐ２００４−５６０５４０）
【出願日】平成１５年１２月１２日（２００３．１２．１２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＩ２００３／０００９４９
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０５５０５５
【国際公開日】平成１６年７月１日（２００４．７．１）
【出願人】（５０２０１０３２１）
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年１１月１６日（２００６．１１．１６）
【国際特許分類】
【出願日】平成１５年１２月１２日（２００３．１２．１２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＩ２００３／０００９４９
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０５５０５５
【国際公開日】平成１６年７月１日（２００４．７．１）
【出願人】（５０２０１０３２１）
【Ｆターム（参考）】
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