ＣＲＦ１受容体拮抗剤である化合物
本発明は、式Ｉの化合物、その立体異性体、その薬学的に許容できる塩またはそのプロドラッグに関する。本発明の化合物は、ＣＲＦ１受容体拮抗剤である。本発明の化合物は、温血動物において、特にほ乳類において、更に特にヒトにおいて、ＣＲＦまたはＣＲＦ１受容体に関連した種々の障害、または、ＣＲＦ１受容体に対して拮抗作用を及ぼすことによって治療効果が生じる或いは治療が容易になる障害を治療する上で有効である。
【化１】
【化１】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＣＲＦ受容体に結合する化合物全般に関連し、特にＣＲＦ１受容体拮抗剤である新規化合物およびこれをＣＲＦまたはＣＲＦ１受容体に関連する障害の治療への使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
コルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ）とは、４１個のアミノ酸からなるペプチドであり、脳下垂体前葉からのプロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来のペプチド分泌を調節する主要な生理学的制御因子である［J．Rivierら，Proc．Natl．Acad．Sci(USA)
80:4851 (1983)；W．Valeら，Science 213:1394
(1981)]。脳下垂体の内分泌を司る働きに加えて、ＣＲＦは、視床下部外の中枢神経系に広範囲に分布を有することが知られ、脳における神経伝達物質または神経調節物質と一致する幅広い自律的行動と生理的作用に寄与している［W．Valeら，Rec．Prog．Horm．Res．39:245
(1983)；G．F．Koob，Persp．Behav．Med．2:39 (1985)；E．B．De Souzaら，J．Neurosci．5:3189 (1985)]。ＣＲＦは、中枢神経系のＣＲＦ神経の機能障害に関係するようなうつ病、不安関連障害、摂食障害を含む精神障害および神経学的疾患において、並びに、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、進行性核上麻痺および筋萎縮性側索硬化症の病因および病態生理において、生理学的、心理学的および免疫学的ストレッサに対する免疫系反応を統合する上で、重要な働きを果たしていることを示す証拠がある[J．E．Blalock，Physiological
Reviews 69 :1 (1989)；J．E．Morley，Life Sci．41：527 (1987)；E．B．De
Souze，Hosp．Practice 23：59 (1988)]。
【０００３】
ＣＲＦが気分障害においてある役割を果たしていることを示す証拠がある。気分障害は、情動障害としても知られているが、当技術分野においてはよく認知されており、大うつ病、単一エピソード性うつ病、再発性うつ病、児童虐待誘発性のうつ病および産後うつ病を含むうつ病；気分変調；双極性障害；並びに循環気質を含む。情動障害または大うつ病の患者では、脳脊髄液（ＣＳＦ）中のＣＲＦ濃度が顕著にに増加していることが示されている[C．B．Nemeroffら，Science
226：1342 (1984)；C．M．Bankiら, Am．J．Psychiatry 144：873 (1987)；R．D．Franceら, Biol．Psychiatry
28：86 (1988)；M．Aratoら, Biol．Psychiatry 25：355 (1989)]。また、自殺者の前頭皮質では、ＣＲＦ受容体密度が大幅に減少しており、このことはＣＲＦの過剰に分泌することとも合致している[C．B．Memeroffら,
Arch．Gen．Psychiatry
45:577 (1988)]。更に、うつ病患者では、アドレノコルチコトロピン（ＡＣＴＨ）の（静注による）ＣＲＦに対する反応が鈍いことが観察されている[P．W．Goldら，Am．J．Psychiatry
141：619 (1984)；F．Holsboerら，Psychoneuroendocrinology 9：147 (1984)；P．W．Goldら，New Engl．J．Med．314：1129 (1986)]。ラットおよびヒト以外の霊長類を用いた前臨床試験からも、ＣＲＦの分泌過剰がヒトのうつ病に見られる症状と関係しうるという仮説を裏づける追加的な証拠が得られている[R．M．Sapolsky，Arch．Gen．Psychiatry 46：1047 (1989)]。また、三環系抗うつ薬がＣＲＦ濃度に変化を及ぼすことにより、脳中の受容体数を調節することができることを示す予備的な証拠もある[Grigoriadisら，Neuropsychopharmacology 2：53 (1989)]。
【０００４】
ＣＲＦは、また、不安関連障害の病因との関連性が示唆されている。不安障害は、当技術分野において認知されている一群の疾患であって、恐怖性障害、不安状態、外傷後ストレス障害、全般性不安障害、社会不安障害、併発するうつ病を伴う不安症、パニック障害、強迫性障害および非定型不安障害を含む［The Merck Manual of Diagnosis and Therapy，16th edition (1992)］。情緒的ストレスは、不安障害を進行させる因子である場合が多く、このような障害は、ストレスに対する反応を抑える薬物に反応するのが一般的である。ＣＲＦの過剰なレベルは、不安惹起性作用が生じることが動物モデルでは知られている［例えばBrittonら，1982；BerridgeおよびDunn，1986，1987を参照されたい］。ベンゾジアゼピン／非ベンゾジアゼピン系抗不安薬とＣＲＦとの間の相互作用は、多くの行動学的不安モデルで実証されている［D．R．Brittonら，Life Sci．31：363 (1982)；C．W．BerridgeおよびA．J．Dunn，Regul．Peptides 16：83 (1986)]。ＣＲＦ受容体拮抗剤と推定されるヒツジα−ヘリカルＣＲＦ（９−４１）を種々の行動学的パラダイムにおいて用いた研究によって、該拮抗剤はベンゾジアゼピン類と質的に類似した「抗不安薬様」作用を及ぼすことが示されている［C．W．BerridgeおよびA．J．Dunn，Horm．Behav．21：393 (1987)，Brain Research Reviews 15:71 (1990)；G．F．KoobおよびK．T．Britton，In :Corticotropin-Releasing Factor．Basic and Clinical Studies of a Neuropeptide，E．B．De SouzaおよびC．B．Nemeroff 編.，CRC Press p．221 (1990)]。神経化学、内分泌および受容体結合に関する研究は、全てＣＲＦとベンゾジアゼピン抗不安薬との間に相互作用があることを示しており、これらの障害にＣＲＦが関与していることを示す更なる証拠となっている。クロルジアゼポキシド、ラットにおけるコンフリクト実験［K．T．Brittonら，Psychopharmacology 86：170 (1985)；K．T．Brittonら，Psychopharmacology 94：306 (1988)]および聴覚性驚愕試験（Acoustic Startle Test）[N．R．Swerdlowら，Psychopharmacology 88:147 (1986)] の両方においてＣＲＦの「不安惹起性」作用を和らげる。ベンゾジアゼピン受容体拮抗剤であるＲｏ１５−１７８８は、オペラント・コンフリクト実験において、行動活性のみを有していなかったが、ＣＲＦの作用を用量依存的に逆転させ、ベンゾジアゼピン逆作動薬であるＦＧ７１４２は、ＣＲＦの作用を亢進した［K．T．Brittonら，Psychopharmacology 94：396 (1988)]。
【０００５】
ＣＲＦ１拮抗剤のシンドロームＸの治療のための使用は、ＥＰ１０９７７０９Ａ２号に記載がある。
【０００６】
ＣＲＦ１拮抗剤のうっ血性心疾患の治療のための使用は、米国特許第６，０４３，２６０号に記載がある。
【０００７】
ＣＲＦ１拮抗剤は関節炎および炎症性障害［E．L．Websterら，J．Rheumatol 29：1252 (2002)；E．P．Murphyら，Arthritis Rheum 44：782 (2001)];ストレス関連性消化器系障害[K．E．Gabryら，Molecular Psychiatry 7：474 (2002)];および皮膚障害[C．C．Zouboulisら，Proc．Natl．Acad．Sci．99：7148 (2002)]の治療に有用であることが示唆されている。
【０００８】
動物モデルにおいて、慢性接触性皮膚炎のストレス誘発性増悪が選択的ＣＲＦ１拮抗剤によって抑制されることが最近になって示され、このことは、ＣＲＦ１が慢性接触性皮膚炎のストレス誘発性増悪に関与しており、ＣＲＦ１拮抗剤が該障害を治療する上において有用である可能性を示唆している［K．Kanekoら，Exp Dermatol，12：47 (2003)]。
【０００９】
ＷＯ０１６０８０６号は、ＣＲＦ１受容体の拮抗剤である化合物を開示している。
【００１０】
ＷＯ９７３５９０１号は、ハイ・ソリッド・コ−ティング材として使用する樹脂である化合物を開示している。以下の特許または特許出願は、ファルネシルプロテイントランスフェラーゼ阻害化合物である化合物を開示している：ＷＯ９８２９１１９号、ＷＯ９７３６８８６号およびＷＯ９７３６８９８号並びに米国特許第５８７２１３６号、５８８０１４０号および５８８３１０５号。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、新規化合物を提供することである。
【００１２】
本発明の他の目的は、新規ＣＲＦ１受容体拮抗剤を提供することである。
【００１３】
本発明の他の目的は、例えば不安障害、うつ病およびストレス関連性障害のように、ＣＲＦまたはＣＲＦ１受容体に関連した障害または状態を治療するために用いる新規化合物を提供することである。
【００１４】
本発明の他の目的は、例えば不安関連障害、気分障害およびストレス関連性障害のように、ＣＲＦまたはＣＲＦ１受容体に関連した障害または状態を治療する方法を提供することである。
【００１５】
更に、本発明の他の目的は、例えば不安関連障害、気分障害およびストレス関連性障害のように、ＣＲＦまたはＣＲＦ１受容体に関連した障害または状態を治療する上で有用な医薬組成物を提供することである。
【００１６】
本発明のその他の目的は、本出願に係る明細書にある本特許の記載から明白または明確である。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、式Ｉの化合物、
【化１】
またはその立体異性体、その薬学的に許容できる塩またはそのプロドラッグを提供するものであり、式Ｉ中、Ａｒはアリール、置換アリール、ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから選ばれ；
Ｖはヘテロアリールまたはフェニルであり、該ヘテロアリールおよびフェニルは１〜５のＲｔによって置換されてもよく；
各Ｒａはそれぞれ独立してＨ、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルから選ばれ、該アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクロアルキルは、１つから５のＲｔ、−Ｏアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｍＲｔ、ＮＲｔＲｔ、オキソ（＝Ｏ）、チオン（＝Ｓ）、フェニル、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルによって置換されてもよく；
各Ｒｔは、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎアルキルアルキル、−Ｏアルキル、−Ｏハロアルキル、ＮＨアルキル、Ｎアルキルアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｍアルキル、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨアルキル、ＳＯ２Ｎアルキルアルキル、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルから選ばれ；
ｍは０、１または２である。
【００１８】
本発明は、その一態様において、式Ｉの化合物、その立体異性体、その薬学的に許容できる塩、そのプロドラッグまたはそのプロドラッグの薬学的に許容できる塩を含む医薬組成物を提供するものである。該組成物は、錠剤、丸剤、散剤、ロゼンジ剤、小包剤（ｓａｃｈｅｔ）、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳濁液、溶液、シロップ剤、エアロゾルおよび軟膏など、任意の適切な剤型によっても、調製することができる。
【００１９】
本発明の化合物は、ＣＲＦ１受容体拮抗剤である。従って、本発明は、他の態様において、ＣＲＦ１受容体に対してアンタゴナイズするのに有効な量の本発明の化合物を動物に対して投与することを含む、温血動物のＣＲＦ１受容体に対してアンタゴナイズする方法を提供する。
【００２０】
本発明は、他の態様において、ＣＲＦ１受容体に対するリガンドをスクリーニングする方法を提供するものであり、該方法は以下を含む：ａ）ＣＲＦ１受容体、検出可能な標識による標識化を行った式Ｉの化合物および候補のリガンドを用いて競合的結合アッセイを実施すること、並びに、ｂ）該候補のリガンドが標識化を行った該化合物を置換する能力を測定すること。
【００２１】
本発明は、他の態様において、ａ）検出可能な標識で標識化を行った式Ｉの化合物を、組織との結合が可能な条件下で組織と接触させること、およびｂ）該組織と結合した該標識化合物を検出することを含む、組織中のＣＲＦ１受容体を検出する方法を提供する。
【００２２】
本発明は、更に他の態様において、ＣＲＦがＣＲＦ１受容体に対してインビトロで結合することを阻害する方法を提供するものであり、該方法は、ＣＲＦ１受容体を発現する細胞（例えばＩＭＲ３２細胞など）を含む溶液に、本発明化合物を接触させることを含み、、該化合物は、ＣＲＦがＣＲＦ１受容体に結合するのを阻害するのに十分な濃度で溶液中に存在する。
【００２３】
本発明の化合物は、温血動物において、特にほ乳類において、更に特にヒトにおいて、ＣＲＦまたはＣＲＦ１受容体に関連した種々の障害、または、ＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズすることによって治療効果が生じる或いは治療が容易になる障害を治療する上で有用である。そのような障害の例としては、不安関連障害（例えば、不安状態、全般性不安障害、社会不安障害、併発する抑うつ性疾患を伴う不安症、パニック障害、強迫性障害、恐怖症障害、外傷後ストレス障害および非定型不安障害）；情動障害としても知られる、気分障害（大うつ病、単一エピソード性うつ病、再発性うつ病、児童虐待誘発性のうつ病および産後うつ病を含むうつ病を含む、うつ病；気分変調；双極性障害；並びに循環気質）；外傷後ストレス障害；核上性麻痺；免疫抑制；薬物またはアルコール離脱症状；薬物乱用障害（例えば、ニコチン、コカイン、エタノール、アヘンその他の薬物）；炎症性障害（例えば、関節リウマチおよび骨関節炎）；不妊症を含む妊娠問題；疼痛；喘息；乾癬およびアレルギー；恐怖症；ストレス誘発性の睡眠障害；疼痛知覚（例えば、線維筋痛症）；気分変調障害；双極性障害；気分循環症；疲労症候群；ストレス性頭痛；ガン；ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症；神経変性疾患（例えばアルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病）；消化器系疾患（例えば、潰瘍、過敏性腸症候群、クローン病、痙性結腸、下痢および術後腸閉塞、および精神病理学的障害またはストレスに関連した結腸過敏症）；摂食障害（拒食症、過食症その他の摂食に関連した障害）；出血性ストレス；ストレス誘発性の精神病性挿間症；偽甲状腺機能低下症候群（Ｅｕｔｈｙｒｏｉｄ ｓｉｃｋ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）；抗利尿ホルモン（ＡＤＨ）異常症候群；肥満；頭部外傷；脊椎外傷；虚血性神経細胞障害（例えば、脳海馬虚血のような脳虚血）；興奮毒性による神経細胞障害；てんかん；心血管系および心臓関連疾患（例えば、高血圧症、頻脈およびうっ血性心不全）；脳卒中；ストレス誘発性免疫不全を含む免疫不全（例えば、ストレス誘発性の発熱、ブタストレス症候群、ウシの出荷熱（ｂｏｖｉｎｅ ｓｈｉｐｐｉｎｇ ｆｅｖｅｒ）、ウマの発作性細動、ニワトリの監禁誘発性機能不全（ｃｏｎｆｉｎｅｍｅｎｔ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ）、ヒツジの毛刈りストレス、イヌにおけるヒト−動物との触れ合いに関係するストレス）；筋痙攣；尿失禁；アルツハイマー型老人性痴呆症；多発梗塞性痴呆；筋萎縮性側索硬化症；薬物依存症および中毒症（例えば、アルコール、コカイン、ヘロイン、ベンゾジアゼピンその他の薬物に対する依存症）；骨粗鬆症；心理社会的小人症、低血糖症および皮膚障害（例えば、座瘡、乾癬、慢性接触性皮膚炎およびストレスで増悪する皮膚障害）が含まれる。これらの化合物は、禁煙の促進、体毛の成長促進および脱毛の治療にも有用である。
【００２４】
このように、本発明は、別の態様において、温血動物における障害を治療する方法であって、該治療は、ＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズすることにより作用が及ぶ或いは容易となる障害の治療であり、該方法はそれを必要とする患者に対して式Ｉの有効な量を投与することを含む、治療方法を提供する。特に具体的例において、本発明は、ＣＲＦの分泌過剰を示す障害を治療する方法を提供する。本発明の化合物によって治療することができる障害の例には、全般性不安障害；社会不安障害；不安症；強迫性障害；併発するうつ病を伴う不安症；パニック障害；および、大うつ病、単一エピソード性うつ病、再発性うつ病、児童虐待誘発性のうつ病、産後うつ病、脱毛および接触性皮膚炎を含む、うつ病などの気分障害が含まれる。該温血動物はほ乳類であることが好ましく、更に好ましくは、該動物はヒトである。
【００２５】
本発明は、上記式Ｉの化合物を提供する。本発明の特定の化合物の具体例は、下記に記載する実施例１−２６に示しており、各化合物は、化学名と構造式の両方により特定している。
【００２６】
本発明の化合物は、以下のチャートに示す反応または、当業者に知られるその変法により、調製することができる。チャートＡに示すように、アミノピラジン体Ａ−ＩＩは、適切な官能基を有するクロロピラジン体Ａ−Ｉ（チャートＣを参照のこと）を、遷移金属触媒［例えば、酢酸パラジウム（ＩＩ）またはトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、塩基（例えば、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドまたはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド）］の存在下で適切なピロリジニルアミンと、溶媒中［例えば、トルエン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）或いはジオキサンがあるが、これに限定されない］で反応させることによって、調製することができる(例えば、Buchwald，S．L.ら，J．Org．Chem．2000，65，1158を参照されたい)。Ａ−ＩＩのハロゲン化反応は、当業者にはよく知られた、多数の方法により実施することができ、その方法としては、Ｎ−クロロコハク酸イミド、Ｎ−ブロモコハク酸イミド、Ｎ−ヨウ化コハク酸イミド、臭素、ヨウ素、三臭化ピリジニウムのような試薬を、ジクロロメタン、酢酸、ＤＭＦ等の溶媒中で用いることにより、ハロピラジン体Ａ−ＩＩＩが得られる。クレームされた化合物Ｉの形成は、Ａ−ＩＩＩと適切な金属アリール試薬とを用いた遷移金属触媒カップリング反応により合成することができ、該試薬には、例えばアリールボロン酸(例えば、Miyaura，N．らChem．Rev．1995，95，2457を参照されたい)、アリールスタンナン類（例えば、Mitchell，T．N．Synthesis
1992，803を参照されたい）またはアリールグリニャール試薬（例えば、Miller，J．A．Tetrahedron Lett．1998，39，7275を参照されたい）がある。或いは、Ａ−Ｉに対して、上述した適切な金属アリール試薬によるカップリングを行って、アリールピラジン体Ａ−ＩＶを得ることもできる。立体的に障害が少ない窒素原子の酸化は、公知の多くの酸化剤（例えば、ＭＣＰＢＡ、過酸化水素）により酸化を行うことができ、生成するＮ−オキシド化合物は、オキシ臭化リンで処理を行い、臭化ピラジン体Ａ−Ｖを得ることができる。上述したハロゲン体とアミン体との反応により、Ａ−ＶＩＩを得る。
【化２】
【００２７】
本発明の化合物を調製する他の方法をチャートＢに示す。ジアルキルジクロロピラジンＢ−Ｉ（チャートＣを参照されたい）を出発化合物とし、塩素原子を適切なピロリジニルアミン（チャートＡに記載）で順番に置換した後、適切な金属アリール試薬（チャートＡに記載）によりビアリール化を行って、Ｂ−ＩＩを得る。場合によっては、この順序を逆にして、すなわち、ビアリール化反応を行った後に、ピロリジニルアミンによる求核置換を行うこともありうる。
【化３】
【００２８】
チャートＣには、Ｒａ置換基がアルキルおよび同等体である場合のモノおよびジクロロピラジンＡ−ＩおよびＢ−Ｉの調製方法を示す。以下に示す反応経路は、Chemical and
Pharmaceutical Bulletin of Japan，1979，27，2027に記載された方法に従ったものである。
【化４】
【００２９】
２つの置換基が等価でない場合の、非対称な置換基を有するピラジンの調製方法をチャートＤに示す。この合成方法は、当業者には公知である方法を用いて、適切な保護基を有するアミノ酸（例えばＤ−Ｉ）をＮ−保護アミノ酸（例えばＤ−ＩＩ）とカップリングさせることにより開始する。Ｄ−ＩＩＩからＮ−保護基を外すことによって、Ｄ−ＩＶが得られる。Ｄ−ＩＶに環化反応を行ってＤ−Ｖとし、Ｄ−Ｖをクロロピラジンの位置異性体Ｄ−ＶＩおよびＤ−ＶＩＩへの変換は、標準的な方法（Chemical
and Pharmaceutical Bulletin of Japan，1979，27，2027を参照されたい）により行われる。
【化５】
【００３０】
チャートＥにおいて、エポキシド体Ｅ−Ｉは、市販のオレフィン化合物（２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−カルボン酸ベンジル）をＭＣＰＢＡで処理することにより調製することができる。生成するエポキシド体は、Ｊａｃｏｂｓｅｎらによるプロトコール (J．Org．Chem．1997，62，4197)
に従ってアジドにより不斉体として開環することができ、あるいは水酸化アンモニウム処理によりラセミ体として開環することができる。トランス体のアミノアルコールをシス体に変換することは、Ｊａｃｏｂｓｅｎらによるプロトコール
(J．Org．Chem．1997，62，4197) によって行う。ピロリジンアミンを塩化ピラジニルとＢｕｃｈｗａｌｄらのプロトコール(J．Org．Chem．2000，1158.)
により反応させて、目的のアニリン体を得る。ＮａＨおよびヨウ化エチルのような求電子試薬によってアルキル化を行い、必要とされるエーテル体を得る。Ｎ−ヨードコハク酸イミド（ＮＩＳ）によりハロゲン化を行って、ヨウ化化合物Ｅ−ＶＩを得る。或いは、アミノアルコールＥ−ＩＩＩは、当業者によって、異なる保護基または異なる方法で調製することもできる。
【化６】
【００３１】
本発明の化合物の別の調製方法をチャートＦに開示する。Ｆ−Ｉと適切なアリールボロン酸またはハロゲン化アリールとに対してパラジウム触媒を用いた鈴木カップリングまたは根岸カップリングを行うことにより、ビアリール化合物Ｆ−ＩＩを得る（Chem．Rev．1995，95，2457或いはTetrahedron
1998，54，263を参照されたい）。水素化反応、水素移動反応或いはルイス酸による処理によって、ＣＢＺ基を除き、アミン体Ｆ−ＩＩＩを得る。引き続いて、Ｂｕｃｈｗａｌｄ、Ｈａｒｔｗｉｇ或いはＮｏｌａｎのプロトコールに従いＮ−アリール化を行って、目的のヘテロアリール化合物Ｆ−ＩＶを得た(J．Org．Chem．2000，1158、Org．Lett．2000，1423或いはJ．Org．Chem．2001，7729を参照されたい。）。
【化７】
【００３２】
本明細書中で示した化合物は一つ以上の不斉中心または不斉面を持ち得、該化合物のあらゆるキラル体（エナンチオマーおよびジアステレオマー）およびラセミ体は本発明に含まれると解さるべきである。オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合およびその類似体の多くの幾何異性体も、本化合物中に存在することができ、そのような安定な異性体は、すべて本発明において意図されている。本発明の化合物は、ラセミ体の形でも、また、光学的に純粋な形でも分離することができ、例えば、分割剤の存在下で結晶化を行う方法或いは例えばキラルＨＰＬＣカラムを用いたクロマトグラフィー法などの通常の方法によってラセミ体の分割を行うことにより得られ、あるいは一方のエナンチオマーが多く含まれる物質の調製が可能な不斉合成反応経路によって合成することができる。本発明は、式Ｉで表される化合物のあらゆる可能な互変異性体を含む。
【００３３】
本発明は、また、式Ｉの化合物の薬学的に許容できる塩を含む。薬学的に許容できる塩の例には、無機或いは有機酸から調製する塩があり、例えば、アミンのような塩基性残基の無機或いは有機酸や、例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エテンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩化水素酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、バルビツール酸、ｐ−トルエンスルホン酸およびその類似物がある。また、該塩の例には、カルボン酸のような酸性残基のアルカリ或いは有機塩があり、例えば、以下の塩基からできるアルカリ金属或いはアルカリ土類金属塩がある：水素化ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化アルミニウム、水酸化リチウム、水酸化マグネシウム、水酸化亜鉛、アンモニア、トリメチルアンモニア、トリエチルアンモニア、エチレンジアミン、リジン、アルギニン、オルニチン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、プロカイン、ｎ−ベンジルフェネチルアミン、ジエチルアミン、ピペラジン、トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン、水酸化テトラメチルアンモニウム、およびその類似物。
【００３４】
本発明の化合物の薬学的に許容できる塩は、従来の化学的方法により調製できる。一般的には、そのような塩は、例えば、これらの化合物のフリーの酸または塩基と、水または有機溶媒或いはその両者の混合物中で化学量論的な量の適切な塩または酸とを反応させて調製する。一般的には、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール或いはアセトニトリルのような非水系溶媒が好ましい。適切な塩の一覧は、第17版のRemington's
Pharmaceutical Sciences（Mack Publishing Company，Easton，PA，1985，p.1418）にあり、この記載は、参照により本明細書中に含める。
【００３５】
本発明は、他の態様において、式Ｉの化合物のプロドラッグを提供する。該プロドラッグは、化学的安定性の向上、患者の受け入れやすさおよびコンプライアンスの向上、バイオアベイラビリティの向上、作用時間の延長、臓器選択性の向上（脳への浸透性向上を含む。）、製剤化の向上（例えば、水溶性の向上）、および／または副作用の減少（例えば、毒性）を目的として作られる。例えば、T．HiguchiおよびV．Stella,"Prodrugs
as Novel Delivery Systems"，Vol．14 of the A．C．S．Symposium Series；Bioreversible
Carriers in Drug Design，Edward B．Roche編，American Pharmaceutical
Association and Pergamon Press，(1987)を参照されたい。プロドラッグには、式Ｉの化合物から導出される化合物であって、式中に水酸基、アミン基或いはスルフヒドリル基が存在する場合には、対象に投与した際に、それぞれフリーな水酸基、アミノ基またはスルフヒドリル基となるように結合が切れるような任意の基に結合した化合物を含むが、これに限定されない。選択例としては、アルコールおよびアミン官能基の生分解性を有するアミド類および生分解性を有するエステル類および生分解性を有するカルバメート類、炭酸塩、酢酸、ギ酸および安息香酸誘導体が含まれるが、これに限定されない。
【００３６】
プロドラッグは、式Ｉの化合物から、当技術分野で公知の方法を用いて容易に調製することができる。例えば、Notari，R．E．,"Theory
and Practice of Prodrug Kinetics，"Methods in Enzymology，112：309-323 (1985)；Bodor，N.,"Novel
Approaches in Prodrug Design，"Drugs of the Future，6 (3):165-182 (1981);およびBundgaard，H．,"Design
of Prodrugs:Bioreversible-Derivatives for Various Functional Groups and
Chemical Entities,"in Design of Prodrugs (H．Bundgaard，ed.)，Elsevier，N．Y．(1985)；Burger's
Medicinal Chemistry and Drug Chemistry，Fifth Ed.，Vol．1，pp．172-178，949-982 (1995)を参照されたい。例えば、式Ｉの化合物は、一つ以上の水酸基或いはカルボキシ基をエステルに変換することによってプロドラッグに変えることができる。
【００３７】
本発明には、同位元素で標識した化合物も含まれるが、該化合物は、一つ以上の原子が、原子量または質量数が自然界で通常見られる原子量または質量数とは異なる原子によって置き換わったこと以外は、式Ｉで表される化合物と同一であるものである。本発明の化合物に含むことができる同位元素の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、ヨウ素および塩素の同位元素が含まれ、例えば、３Ｈ、１１Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆおよび１２３Ｉおよび１２５Ｉがある。上述の同位元素および／または他の元素の同位元素を含む式Ｉの化合物は、本発明の範囲内である。同位元素により標識化した本発明の化合物、例えば、３Ｈおよび１４Ｃのような放射性同位元素を含むものは、薬物および／または基質の組織内分布を調べる際に有用である。三重水素、すなわち３Ｈおよび炭素１４、すなわち１４Ｃ同位元素は、特にＰＥＴ（陽電子放射断層撮影法）において有用であり、１２５Ｉは特にＳＰＥＣＴ（単一光子放射型コンピュータ断層撮影法）において有用であり、全て脳の画像撮影に有用である。更に、重水素、すなわち２Ｈなどのように重い同位元素で置換を行うことにより、代謝安定性が高くなり、それによって、例えば、インビボ半減期が長くなったり投与量を低くすることができるという一定の治療上の利点が得られ、場合によっては好ましいことがある。同位元素で標識化した式Ｉの本発明の化合物は、一般的には同位元素によって標識化した試薬を同位元素で標識化していない試薬の代わりに用いて合成反応を行うことによって、調製することができる。
【００３８】
式Ｉの化合物は、ＣＲＦ１受容体の拮抗剤であり、ＣＲＦがＣＲＦ１受容体に特異的に結合するのを阻害し、ＣＲＦ１受容体に関連した拮抗作用を及ぼすことができる。化合物のＣＲＦ受容体拮抗剤としての有効性は、種々のアッセイ法により測定することができる。式Ｉの化合物によるＣＲＦ拮抗剤としての活性は、この目的のために一般的に受け入れられている一つ以上のアッセイによって測定することができ、その方法には、DeSouzaら(J．Neuroscience
7:88,1987)およびBattagliaら(Synapse 1：572,1987)による方法があるが、これに限定されない。ＣＲＦ受容体に対する親和性は、化合物が、放射標識したＣＲＦ（例えば、［１２５Ｉ］チロシン−ＣＦＲ）のその受容体（例えば、ラットの大脳皮質の細胞膜から調製した受容体）への結合を阻害する能力を測定する結合実験により測定することができる。DeSouzaら（上述、1987）による放射性リガンド結合アッセイは、化合物のＣＲＦ受容体に対する親和性を測定するアッセイ方法を提供する。このような活性は、放射標識したリガンドが受容体に結合するのを５０％阻害するために必要な化合物濃度であるＩＣ５０値から計算するのが一般的であり、「Ｋｉ値」として記録する。ＩＣ５０値およびＫｉ値は、当技術分野で公知の標準的な方法により計算し、非線型曲線適合プログラムであるＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、サンディエゴ、ＣＡ）などにより行う。Ｋｉ値がおよそ１０マイクロモル（μＭ）未満である場合に、化合物にはＣＲＦ１受容体を阻害する活性があると考えられる。Ｋｉ値で表す式Ｉの化合物の結合親和性は、一般的にはおよそ０．５ナノモルからおよそ１０ミクロモルの範囲にある。好ましい式Ｉの化合物では、Ｋｉ値が１ミクロモル以下であり、より好ましい式Ｉの化合物では、Ｋｉ値が１００ナノモル未満であり、更に好ましい式Ｉの化合物では、Ｋｉ値が１０ナノモル未満である。
【００３９】
ＣＲＦ受容体の結合を阻害することに加えて、化合物のＣＲＦ受容体拮抗剤としての活性は、ＣＲＦに関連した活性に対して拮抗する能力によって表すことができる。例えば、ＣＲＦは、種々の生化学的反応を刺激することが知られており、その中にはアデニル酸シクラーゼ活性がある。従って、ＣＲＦ拮抗剤としての能力は、例えばｃＡＭＰ濃度を測定するなどの方法により、ＣＲＦ作用によるアデニル酸シクラーゼ活性に対して拮抗する能力として評価することができる。Battagliaら（上述、1987）によるＣＲＦ作用性アデニル酸シクラーゼ活性アッセイは、ＣＲＦ活性に拮抗する能力を測定する方法を提供する。或いは、アデニル酸シクラーゼ活性またはｃＡＭＰ産生は、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（ベッドフォード、ＭＡ）によるｃＡＭＰ競合的ＥＬＩＳＡシステムを用いた９６／３８４−ウェルフォーマットによって、提供されるプロトコールに従って測定できる。手短に述べるならば、阻害剤を加え、或いは加えないでＣＲＦにより活性化した細胞由来の検体を入れた９６或いは３８６ウェルプレートに、希釈したｃＡＭＰ−アルカリホスファターゼ（ｃＡＭＰ−ＡＰ）複合体を一定量加える。抗ｃＡＭＰ抗体を混合物に加えて、１時間インキュべーションを行う。洗浄過程を連続して行った後、化学発光基質／促進剤水溶液を加えることにより、Ｐａｃｋａｒｄ ＴｏｐＣｏｕｎｔなどのマイクロプレートシンチレーションカウンタを用いて、検出できる光信号が生じる。細胞によって生成したｃＡＭＰが抗体由来のｃＡＭＰ−ＡＰ複合体を置換し、検出できる信号が減少する。ＣＲＦで刺激されたアデニル酸シクラーゼ活性アッセイの例を下記の実施例Ｃに示す。
【００４０】
このように、本発明は、他の態様において、ＣＲＦ１受容体をアンタゴナイズするのに有効な量の本発明の化合物を動物に対して投与することを含む、温血動物のＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズする方法を提供する。該温血動物は、ほ乳類であることが好ましく、更に好ましくはヒトである。
【００４１】
本発明は、別の態様において、温血動物における障害を治療する方法であって、該障害はＣＲＦの分泌過剰を示し、或いは、ＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズすることにより、該障害の治療に効果がある或いは治療が容易となる障害の治療において、それを必要とする動物に対して本発明の化合物の治療的に有効な量を投与することを含む、治療方法を提供する。該温血動物はほ乳類であることが好ましく、更に好ましくはヒトである。
【００４２】
本発明は、他の態様において、ＣＲＦ１受容体に対するリガンドをスクリーニングする方法を提供するものであり、該方法は以下を含む：ａ）ＣＲＦ１受容体、検出可能な標識による標識化を行った式Ｉの化合物および候補のリガンドを用いて競合的結合アッセイを実施すること、並びに、ｂ）該候補のリガンドが標識化を行った該化合物を置換する能力を測定すること。競合的結合アッセイに対するアッセイ手順は、当技術分野において公知であり、実施例Ａに具体例を示す。
【００４３】
本発明は、他の態様において、ａ）検出可能な標識で標識化を行った式Ｉの化合物を、組織との結合が可能な条件下で組織と接触させること、およびｂ）該組織と結合した該標識化合物を検出することを含む、組織中のＣＲＦ１受容体を検出する方法を提供する。組織中の受容体を検知するアッセイ手順は、当技術分野において公知である。
【００４４】
本発明は、他の態様において、ＣＲＦ１受容体を発現する細胞を含む溶液に対して、本発明の化合物を接触させることを含む、ＣＲＦがＣＲＦ１受容体に対して結合することを阻害する方法を提供する。ここで、該化合物は該溶液中に、ＣＲＦがＣＲＦ１受容体への結合を阻害するのに十分な濃度で存在する。ＣＲＦ１受容体を発現し、インビトロアッセイにおいて使用することができる細胞系の例としては、ＩＭＲ３２細胞が当技術分野において知られている。
【００４５】
式Ｉの化合物、或いはその立体異性体、薬学的に許容できる塩またはプロドラッグは、温血動物におけるＣＲＦの分泌過剰を示す障害の治療、或いは、ＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズすることにより該障害の治療に効果がある、或いは治療が容易となるような障害の治療に有用である。そのような障害の例は、本明細書中に上述してある。これらの化合物は、禁煙の促進または体毛の成長促進にも有用である。
【００４６】
従って、本発明は、更に他の態様において、治療的に有効な量の本発明の化合物を温血動物に対して投与することを含む、本明細書中に上述した障害を治療する方法を提供する。該温血動物は、ほ乳類、特にヒトであることが好ましい。
【００４７】
本発明の方法によって治療することができる特定の障害は、好ましくは、以下を含む：不安関連障害、例えば、全般性不安障害、社会不安障害、併発する抑うつ性疾患を伴う不安症、強迫性障害、パニック障害、不安状態、恐怖性障害、併発する抑うつ性疾患を伴う不安症、強迫性障害、外傷後ストレス障害および非定型不安障害；気分障害、例えば、うつ病（大うつ病、単一エピソード性うつ病、再発性うつ病、児童虐待誘発性のうつ病および産後うつ病を含む）、双極性障害、外傷後ストレス障害、気分変調、および循環気質；薬物中毒障害（例えば、ニコチン、コカイン、エタノール、アヘンその他の薬物）；例えば、関節リウマチおよび骨関節炎のような炎症性障害；消化器系疾患（例えば、過敏性腸症候群、潰瘍、クローン病、痙性結腸、下痢および術後腸閉塞および精神病理学的障害またはストレスに関連した結腸過敏症）；並びに、例えば、座瘡、乾癬および慢性接触性皮膚炎のような皮膚障害。
【００４８】
本発明の方法によって治療することができる特定の障害は、より好ましくは、以下を含む：不安関連障害、気分障害、炎症性障害、および慢性接触性皮膚炎。
【００４９】
本発明の方法によって治療することができる特定の障害は、より更に好ましくは、不安関連障害、特に、全般性不安障害および気分障害を含み、特に、大うつ病を含む。
【００５０】
温血動物において上述した疾患または障害を治療する際に、治療的に有効な本発明の化合物の量は、当業者には公知の種々の方法により決定することができ、例えば、特定の症状がある動物に対して特定の薬剤の種々の量を投与して、該動物に対する作用を決定する方法がある。一般的には、本発明の化合物の治療的に有効な量としては、有効成分として体重当たり０．００２から２００ｍｇ／ｋｇ含む投与量を毎日経口で投与することができる。通常の場合には、０．０１から１０ｍｇ／ｋｇの投与量を１日１回から４回に分けて投与したり、或いは、目的とする薬学的効果を得るために持続放出製剤として投与することは有効であろう。しかしながら、特定の患者に対する特定の投与量は、用いる特定の化合物の活性、年齢、体重、全般的な健康、性別、食事、投与する時刻、投与経路、排泄率、薬物の組合せおよび特定の疾患の重症度が含まれる種々の要因に依存する。投与頻度についても、用いる化合物および治療する特定の疾患によって変わる。しかし、ほとんどのＣＮＳ障害の治療に際しては、１日当たり４回以下の投与レジメンが好ましい。しかし、ストレスおよびうつ病の治療に際しては、１日当たり１回または２回の投与レジメンが特に好ましい。
【００５１】
上記障害を治療するに当たり、本発明の化合物は、活性薬剤がほ乳類体内の作用部位に接触するような方法、例えば、経口投与、局所投与、経皮投与、非経口的投与或いは直腸投与、適切な投与剤型による吸入または噴霧によって投与することができる。本明細書において用いる「非経口的」投与という用語は、皮下注射、静脈注射、筋肉注射、胸骨注射または注入法を含む。該化合物は、単独で投与することも可能であるが、薬学的に許容できる担体、希釈剤或いは賦形剤と共に投与するのが一般的である。
【００５２】
このように、本発明は、更にその一態様において、式Ｉの化合物、その立体異性体、その薬学的に許容できる塩、そのプロドラッグまたはそのプロドラッグの薬学的に許容できる塩を含む医薬組成物を提供するものである。一実施形態において、該医薬組成物は、更に、薬学的に許容できる担体、希釈剤或いは賦形剤を含む。「薬学的に許容できる担体、希釈剤或いは賦形剤」は、生物活性薬剤をほ乳類、例えばヒトに送達するために当技術分野において一般的に許容できる媒体である。そのような担体は、一般的に、決定し、説明する当業者の権限の範囲内の多くの要因に従って製剤化される。そのような要因には、以下が含まれるが、これらに限定されるものではない：調合する活性薬剤の種類および性質、該薬剤を含む組成物を投与する対象、該組成物を投与する上で意図する経路、および目的とする治療的効能。薬学的に許容できる担体および賦形剤には、水溶性および非水溶性液体媒体が含まれる他、多くの固形および半固形の剤型を含む。このような担体には、活性薬剤の他に多数の異なる成分および添加物を含むことができ、このような追加成分は、当業者によく知られる種々の理由、例えば、活性薬剤の安定化により製剤中に含まれる。薬学的に許容できる適切な担体およびその選択に際しての要因に関する記載は、例えば、第17版のRemington's
Pharmaceutical Sciences（Mack Publishing Company，Easton，PA，1985年）などの種々の容易に入手可能な資料中に見ることができ、この内容は、参照により本明細書中に含める。
【００５３】
経口投与を意図した組成物は、錠剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、水性或いは油性懸濁液、分散性粉末或いは顆粒、エマルジョン、硬或いは軟カプセル剤、シロップ剤、エリキシル剤の剤型で用いられ、当技術分野に公知の方法により調製することができる。このような組成物には、薬剤学的に上品で口当たりの良い製剤とするために、甘味料、香味料、着色料および保存料からなる群から選ばれる一つ以上の物質を含んでもよい。
【００５４】
錠剤は、錠剤の調製に適した、無毒性の薬学的に許容できる賦形剤を有効成分とともに含む。このような賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムのような不活性の希釈剤；コーンスターチまたはアルギン酸のような顆粒化剤・崩壊剤；デンプン、ゼラチンまたはアラビアゴムのような結合剤、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクのような滑沢剤を含んでもよい。錠剤には、コーティングを施さなくてもよいし、既知の技法によってコーティングを施して、崩壊および消化管における吸収を遅らせることもある。モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリンのような遅延剤を用いてもよい。
【００５５】
経口投与用製剤は、硬ゼラチンカプセルとして調製してもよい。ここで、有効成分は、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンのような不活性な固体希釈剤と混ぜ合わせる。または、軟ゼラチンカプセルとして調製してもよい。ここで、有効成分は、水またはピーナツ油、流動パラフィンまたはオリーブ油のような油性の媒体と混合する。
【００５６】
水性懸濁液には、水性懸濁液の調製に適した賦形剤との混合物中に有効成分を含む。そのような賦形剤には、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガムおよびアラビアゴムのような懸濁剤；分散剤或いは湿潤剤は天然に生成するリン脂質であってもよく（例えば、レシチン）、或いは、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン）、或いはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、或いはエチレンオキシドと、脂肪酸とヘキシタールから得られた部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート）、或いは、エチレンオキシドと、脂肪酸と無水ヘキシトールから得られた部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレエート）であってもよい。水性懸濁液は、一つ以上の保存剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル或いはｐ−ヒドロキシ安息香酸ｎ−プロピル、一つ以上の着色料、一つ以上の甘味料、例えばショ糖またはサッカリンをも含んでもよい。
【００５７】
油性懸濁液は、有効成分を例えば、ラッカセイ油、オリーブ油、大豆油、ゴマ油またはココナツ油のような植物油若しくは流動パラフィンのような鉱物油に懸濁させて調合してもよい。油性懸濁液には、密ろう、固形パラフィンまたはセチルアルコールのような増粘剤を含んでもよい。上述したような甘味料および香味料は、口当たりの良い経口製剤とするために加えてもよい。このような組成物には、アスコルビン酸のような抗酸化剤を加えて保存ができるようにしてもよい。
【００５８】
水を加えることにより水性懸濁液を調製するのに適した分散性粉末および顆粒は、分散剤または湿潤剤、懸濁剤および一つ以上の保存剤と混合した有効成分を提供する。適切な分散剤または湿潤剤、および懸濁剤は、上述したところによって、既に例示してある。更に追加する賦形剤として、例えば、甘味料、香味料および着色料が加えられてもよい。
【００５９】
本発明の医薬組成物は、水中油型エマルジョンの形態であってもよい。油相は、植物油、例えばオリーブ油またはラッカセイ油でも、流動パラフィンのような鉱物油でも、若しくはこれらの混合物であってもよい。適切な乳化剤は、アラビアゴムまたはトラガカントガムのような天然のガム、大豆およびレシチンのような天然のリン脂質、脂肪酸とヘキシトール無水物から得られるエステル或いは部分エステル、例えば、モノオレイン酸ソルビタン、該部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンであってもよい。該エマルジョンは、甘味料および香味料を含んでもよい。
【００６０】
シロップ剤およびエリキシル剤は、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールまたはショ糖のような甘味料と共に調合してもよい。このような製剤には、粘滑剤、保存料、香味料および着色料を含んでもよい。
【００６１】
本発明の化合物の直腸投与を行うための坐薬は、該化合物を適切な非刺激性添加物とを混ぜ合わせて調製するが、該添加物は通常の温度では固体であるが、直腸内温度においては液体となって直腸内で溶解し、薬物を放出する。そのような化合物の例としては、カカオ脂およびポリエチレングリコールがある。
【００６２】
医薬組成物は、滅菌済みの水性または油性懸濁液注射剤型であってもよい。この懸濁液は、既知の手法により、適切な分散剤または湿潤剤、および懸濁剤を用いて調製してもよく、これらについては既に上述してある。滅菌済みの注射溶液または懸濁液は、無毒性の非経口的に許容できる希釈液または溶媒により調製してもよく、例えば、１，３−ブタンジオールによる溶液としてもよい。許容できる媒体または溶媒として用いてもよいものには、水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液がある。更に、通常、滅菌した不揮発性油を溶媒または懸濁媒体として用いることができる。この目的に関しては、刺激性のない不揮発性油であれば、いかなるものであっても用いることができ、合成モノまたはジグリセリドが含まれる。更に、オレイン酸のような脂肪酸は、注射剤の調製に使用する。
【００６３】
投与に適した剤型には、１つの単位当たり約１ｍｇから約１００ｍｇの有効成分を含むのが一般的である。このような医薬組成物の場合、組成物の全重量に基づいて約０．５から９５重量％の量の有効成分を含むのが通例である。本発明の化合物の投与剤型の例としては、以下を含む：（１）カプセル剤。標準の一対型硬ゼラチン・カプセルにそれぞれ１００ｍｇの粉体有効成分、１５０ｍｇの乳糖、５０ｍｇのセルロースおよび６ｍｇのステアリン酸マグネシウムを充填することによって、多数の単位カプセルを調製する；（２）軟ゼラチン・カプセル。有効成分をダイズ油、綿実油、オリーブ油などの食用油に混合し、容積移送によりゼラチン中に注入して、有効成分１００ｍｇを含む軟ゼラチン・カプセルを調製する。カプセルを洗浄し、乾燥する；（３）錠剤。投与単位は有効成分が１００ｍｇ、コロイド状二酸化ケイ素が０．２ｍｇ、ステアリン酸マグネシウムが５ｍｇ、微結晶セルロースが２７５ｍｇ、デンプンが１１ｍｇおよび乳糖が９８．８ｍｇにより、慣用方法を用いて多数の錠剤が製造される。口当たりを改善したり、吸着を遅延するために、適切なコーティングを施してもよい。
【００６４】
本発明は、更に他の態様において、以下を含む製品を提供する：ａ）包装材料；ｂ）該包装材料に入った本発明の化合物を含む医薬品；およびｃ）該医薬品が上述の障害を治療するために使用することができる旨を示すラベルまたは添付文書。
（定義および慣例表記）
【００６５】
本特許出願全体を通して、特段の定めがない限り、以下の定義を用いている。
【００６６】
「ハロゲン」という用語は、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＢｒおよびＩから選ばれる基を意味する。
【００６７】
「アルキル」という用語は、１〜１０個の炭素原子を有する直鎖または分岐炭化水素部分を意味し、１つ以上の二重結合或いは三重結合を含んでもよい。
【００６８】
「シクロアルキル」という用語は、３〜１０個の炭素原子を有する単環式或いは二環式非芳香族炭化水素部分を意味し、１〜２個の二重結合を含んでもよい。
【００６９】
「ハロアルキル」という用語は、１〜（２ｖ＋１）個の独立して選ばれるハロゲン置換基を持つアルキル部分であり、ｖは該部分中の炭素原子数である。
【００７０】
「アリール」という用語は、フェニルまたはナフチルのいずれかを意味する。
【００７１】
「置換アリール」という用語は、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ，−Ｒａ，−ＯＲａ、−Ｓ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲａＲａ、−ＮＲａＳ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＯＲａ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲａおよびＯＣ（Ｏ）ＯＲａから独立して選ばれる１〜５の置換基で置換されたアリール基を意味する。
【００７２】
「ヘテロアリール」という用語は、５または６個の環式原子を含み、炭素と、ペルオキシドではないＯ、ＳおよびＮからなる群よりそれぞれ選ばれる１〜４個のヘテロ原子からなり、適切な結合により原子価の要求を満たす単環式芳香族化合物の基を意味する。ここで、環中の炭素またはＮが環中に存在する場合には環中のＮを介して結合してもよい。また、「ヘテロアリール」という用語は、８〜１０個の環式原子を含み、炭素と、ペルオキシドではないＯ、ＳおよびＮからなる群よりそれぞれ選ばれる１〜６個のヘテロ原子からなり、適切な結合により原子価の要求を満たす縮合二環式ヘテロ芳香族化合物の基を意味する。ここで、環中の炭素またはＮが環中に存在する場合には環中のＮを介して結合してもよい。ヘテロアリールの例には、チエニル、ベンゾチエニル、ピリジル、チアゾリル、キノリル、ピラジニル、ピリミジル、イミダゾリル、フラニル、ベンゾフラニル、ベンゾチアゾリル、イソチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイソキサゾリル、ベンゾイミダゾリル、インドリル、ベンゾオキサゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソキサゾリル、オキサゾリル、ピロリル、イソキノリニル、シンノリニル、インダゾリル、インドリジニル、フタラジニル、ピドリダジニル、トリアジニル、イソインドリル、プリニル、オキサジアゾリル、フラザニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフトリジニルおよびフロピリジニルが含まれる。
【００７３】
「置換ヘテロアリール」という用語は、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ，−Ｒａ，−ＯＲａ、−Ｓ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲａＲａ、−ＮＲａＳ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＯＲａ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲａおよびＯＣ（Ｏ）ＯＲａから独立して選ばれる１〜５個の置換基を有するヘテロアリール基を意味する。
【００７４】
「ヘテロシクロアルキル」という用語は、４員から８員の非芳香族単環或いは二環系環状基であって、少なくとも１個の炭素原子が酸素、窒素、−ＮＨ−或いは−Ｓ（Ｏ）ｍ−から選ばれるヘテロメンバーによって置き換えられており、ｍが０、１あるいは２であって、環が炭素或いは窒素原子で結合している基を意味する。ヘテロシクロアルキルは、１〜３個の二重結合を有していてもよい。ヘテロシクロアルキルの例には、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、モルホリニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、［２．２．１］−アザビシクロ環、［２．２．２］−アザビシクロ環、［３．３．１］−アザビシクロ環、キヌクリジニル、アゼチジニル、アゼチジノニル、オキシインドリル、ジヒドロイミダゾリルおよびピロリジノニルが含まれる。
【００７５】
「置換ヘテロシクロアルキル」という用語は、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、オキソ（＝Ｏ）、チオン（＝Ｓ）、−Ｒａ、−ＯＲａ、−Ｓ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｓ（Ｏ）ｍＮＲａＲａ、−ＮＲａＳ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＯＲａ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲａおよびＯＣ（Ｏ）ＯＲａから独立して選ばれる１〜５個の置換基を有するヘテロシクロアルキル基を意味する。
【００７６】
「薬学的に許容できる」という用語は、特段の定めがない限り、ヒトおよび動物の組織と接触して使用することに適しており、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応またはその他の問題または合併症を引き起こすことなく、妥当な利益／リスク比を有すると健全な医学的見識の範囲内で判断される、化合物、化合物、組成物および／または剤型を意味する。
【００７７】
「薬学的に許容できる塩」という用語は、本発明の化合物の生物学的有効性および特性を保持し、かつ生物学的またはその他の見地から見て望ましくないものではない、塩を意味する。
【００７８】
「立体異性体」という用語は、同じ結合により結合した同じ原子からなる化合物であって、互換性のない異なる三次元構造を有する化合物を意味する。三次元構造は、形態とも呼ばれる。本明細書において用いる「エナンチオマー」という用語は、分子が互いに重ね合わせることができない鏡像関係にある２つの立体異性体を意味する。「不斉中心」とは、異なる４つの基が結合した炭素原子を言う。本明細書において用いる「ジアステレオマー」という用語は、エナンチオマーではない立体異性体を意味する。更に、１つの不斉中心のみにおいて異なる形態を有する２つのジアステレオマーは、本明細書において「エピマー」と云う。「ラセミ化合物」或いは「ラセミ混合物」という用語は、エナンチオマーの当量混合物を意味する。
【００７９】
「プロドラッグ」という用語は、インビボで式Ｉの化合物に変化する化合物を意味する。この変化は、例えば血液中での加水分解によるなど、種々の機序により起こりうる。
【００８０】
「治療的に有効な量」、「有効な量」、「治療量」或いは「有効投与量」という用語は、目的とする薬理学的或いは治療的作用を生じるのに十分な量であって、疾患の予防或いは治療に有効な量を意味する。
【００８１】
「本発明の化合物」、「提示された本発明の化合物」、「提示された本発明の複数の化合物」「式Ｉによる化合物」および類似の用語は、式Ｉの化合物、その立体異性体、その薬学的に許容できる塩、そのプロドラッグまたは式Ｉの化合物のプロドラッグの薬学的に許容できる塩を意味する。
【００８２】
「治療」、「治療する」、「治療的」および類似の用語は、障害の進行を遅らせることまたは逆転することの両方を含む他、障害を治癒することを含む。これらの用語はまた、たとえ、該障害または状態を実際に除かなくとも、また、たとえ該障害または状態の進行それ自体が遅くなったり逆転しなくても、障害または状態の１つ以上の症状を、緩和すること、改善すること、和らげること、除くことまたは低減することを含む。。「治療」および類似の用語は、更に、予防的（例えば、阻害的）および緩和的治療を含む。疾患の予防は、疾患の症状の発現を引き延ばす或いは遅延することによって明白になる。
【実施例】
【００８３】
更に説明を加えずとも、当業者であれば、これまでの記載を用いて、本発明をその最大限実施することができると考えられる。以下の実施例は、本発明を例示するために提示するものであり、本発明の範囲または精神を、実施例中に記載した特定の方法に限定するものと考えてはならない。数字の連番をつけた調製例および実施例は、本発明の化合物の調製法を例示するために提示しており、実施例Ａ−Ｄは、本発明の化合物の生物学的特性を測定するために用いることができる生物学的アッセイ法を例示するために提示している。当業者であれば、これらの例に記載した方法に対する適切な変法を瞬時にして思いつくことができよう。
（調製例１）
６−オキサ−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ベンジルの調製
【化８】
【００８４】
オレフィン（１０．０ｇ、４９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２５０ｍｌ、０．２Ｍ）溶液にＭＣＰＢＡ（２２ｇ、２．０当量）を加えた。反応混合液を４８時間撹拌し、飽和チオ硫酸ナトリウム２００ｍｌを加えた。２０分後に層を分離し、有機層を２ＮのＮａＯＨで洗浄した（２×１００ｍｌ）。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮して、表題化合物を油状物質（１０．７９ｇ、９９％）として得た。 １Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．３５，５．１３，３．９３−３．８４，３．７１，３．４３−３．３８；ＩＲ（液体）２２０９（ｗ），２０６８（ｗ），１９５８（ｗ），１７０６（ｓ），１４５５，１４４８，１４２８（ｓ），１３９７（ｓ），１３６４，１３２７（ｓ），１２１４，１２０６，１１０７（ｓ），８４８（ｓ），６９９，ｃｍ−１， Ｃ１２Ｈ１３ＮＯ３について算出した理論値：Ｃ，６５．７４；Ｈ，５．９８；Ｎ，６．３９、実測値：Ｃ，６５．４５；Ｈ，６．０７；Ｎ，５．９９。
（調製例２）
（３Ｒ，４Ｒ）−３−（アジド）−４−［（トリメチルシリル）オキシ］ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化９】
【００８５】
６−オキサ−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ベンジル（１０．４ｇ、４８ｍｍｏｌ）にＴＭＳＮ３（６．６５ｍｌ、１．０５当量）および１Ｓ，２Ｓ−（−）−［１，２−シクロヘキサンジアミノ−Ｎ，Ｎ’−ビス（３，５−ジ−ｔ−ブチルサリチリデン）］塩化クロム（ＩＩＩ）（ＳＴＲＥＭ２４−０８５１）（９０４ｍｇ，０．０３当量）を加えた。反応混合液をＮ２下で１８時間撹拌した。赤色油状物質は、そのままで次の段階に用いた。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．１８（ｍ，５Ｈ），４．９８（ｓ，２Ｈ），３．９９（ｍ，１Ｈ），３．６９（ｍ，１Ｈ），３．６１−３．５１（ｍ，２Ｈ），３．３１−３．０５（ｍ，２Ｈ）。
（調製例３）
（３Ｒ，４Ｒ）−３−アミノ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１０】
【００８６】
（３Ｒ，４Ｒ）−３−（２λ〜５〜−トリアザ−１，２−ジエニル）−４−［（トリメチルシリル）オキシ］ピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（２３．６ｇ）のＭｅＯＨ（２５０ｍｌ、０．３Ｍ）溶液をトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（１５μｌ）で１．５時間処理した。リンドラー触媒（１０ｇ）を１気圧のＨ２下で加えた。６日間撹拌を行った。（リンドラー触媒を更に５ｇ４日目に加えた。）該Ｐｄ触媒をセライトで濾過した。濾液を濃縮し、Ｅｔ２Ｏ（２５０ｍｌ）と１ＮのＨＣｌ（２５０ｍｌ）で希釈した。分離した１ＮのＨＣｌ層をＮａＯＨ（固体）でアルカリ性にしてｐＨ１２とし、ＣＨ３Ｃｌ：ｉＰｒＯＨ（９：１混合物、４×３００ｍｌ）およびＥｔＯＡｃ（３×３００ｍｌ）で抽出し、乾燥して（ＭｇＳＯ４）そのまま用いた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ３．２２（ｍ，１Ｈ），３．３８（ｍ，２Ｈ），３．７８（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），５．１５（ｓ，２Ｈ），７．３７（ｍ，５Ｈ）。
（調製例４）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１１】
【００８７】
オーブン乾燥を行った５０ｍｌ丸底フラスコに（３Ｒ，４Ｒ）−３−アミノ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（４．２３５ｇ、１７．９３ｍｍｏｌ）を入れ、６０ｍｌのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）に溶解した。無水トリフルオロ酢酸（２．５４ｍｌ、１７．９３ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（３ｍｌ、２１．５２ｍｍｏｌ）を０℃で順次加えた。反応液を室温にし、一晩撹拌を行った。反応液をＨ２Ｏ（２５０ｍｌ）で希釈し、２５０ｍｌのＣＨＣｌ３：ｉＰｒＯＨ混合液（９：１、ｘ４）で抽出して、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。
【００８８】
この粗製物のトリフルオロアミド生成物（ＬＣ−ＭＳにより確認）を９０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２（０．２Ｍ）に溶解し、Ｎ２下で０℃に冷却した後、ＴＥＡ（２１．５２ｍｍｏｌ、３ｍｌ）およびＭｓＣｌ（１．６３ｍｌ、１９．７２ｍｏｌ）を加えた。反応液を０℃で１５分、室温で１時間撹拌してから、ＤＢＵ（５．３９ｍｌ、５３．７９ｍｍｏｌ）を加えた後、一晩撹拌した。反応混合物をシリカで濾過し、８００ｍｌ（ＥｔＯＡｃを８０％含むヘプタン）で洗浄した。濾液を集めて濃縮した。
【００８９】
オキサゾリンに８０ｍｌのＭｅＯＨ／４０ｍｌのＨ２Ｏ中のＫ２ＣＯ３（１４．８７ｇ）を加えて、１８時間加水分解を行った。容量を減らし、２００ｍｌ（ＣＨＣｌ３：ｉＰｒＯＨが９：１）で５回抽出した。有機溶媒を合わせて、乾燥し（Ｋ２ＣＯ３）、濾過し、濃縮し、バイオタージクロマトグラフィー（１％から５％のＭｅＯＨのＣＨ２Ｃｌ２溶液、０．５％ＮＨ４ＯＨ）で精製して表題化合物を固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ３．２２（ｍ，１Ｈ），３．３８（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），５．１５（ｓ，２Ｈ），７．４０（ｍ，５Ｈ）；ＩＲ（拡散反射法）３３７４，２９４９，２３１６（ｗ），１９６６（ｗ），１９４７（ｗ），１６８６（ｓ），１４５０（ｓ），１４２３（ｓ），１３５４，１３２１，１１４４，１０９６，１０８４，７６５，６９５，ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ１２Ｈ１６Ｎ２Ｏ３＋Ｈについて算出した理論値２３７．１２３９、実測値２３７．１２３６。比旋光度（２５ Ｃ Ｄ）＝−１７（ｃ ０．９７、クロロホルム）。
（調製例５）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチルピラジン−２−イル）アミノ］−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１２】
【００９０】
２５０ｍｌ丸底フラスコに（３Ｒ，４Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（４．９７１４ｇ、２１．０４ｍｍｏｌ）、塩化物（３．９４９ｇ、２３．１５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１０ｍｏｌ％、１．９２６ｇ）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ビフェニル（２０ｍｏｌ％、１．６５６ｇ）およびＤＭＥ（１１０ｍｌ）を順次加えた。次にＣｓ２ＣＯ３（９．５７ｇ）を加えて、反応混合物を８０℃で２０時間撹拌した。冷却し、Ｅｔ２Ｏ（１００ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３（８０ｍｌ）に注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍｌ×３）で抽出し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。バイオタージクロマトグラフィー（ヘプタン中３５％ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．２８（ｍ，６Ｈ），２．６５（ｍ，４Ｈ），３．３６（ｍ，１Ｈ），３．６３（ｍ，１Ｈ），３．７３（ｍ，１Ｈ），４．００（ｍ，１Ｈ），４．５１（ｍ，１Ｈ），４．６４（ｍ，１Ｈ），４．８０（ｍ，１Ｈ），５．１８（ｓ，２Ｈ），７．３８（ｍ，６Ｈ），７．７４（ｄ，１Ｈ）；ＩＲ（液体）２９６９，２３４４（ｗ），１９９６（ｗ），１９５２（ｗ），１７０３（ｓ），１６９１（ｓ），１５４６，１４９９（ｓ），１４４９（ｓ），１４２６（ｓ），１３９５，１３５９（ｓ），１１７５，１１３３，１０９５，ｃｍ−１：ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ２０Ｈ２６Ｎ４Ｏ３＋Ｈについて算出した理論値３７１．２０８３、実測値３７１．２０８９。
（調製例６）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチルピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１３】
【００９１】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチルピラジン−２−イル）アミノ］−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（１７．７０ｇ、４７．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３Ｍ）溶液にＮ２下０℃でＮａＨ（２．４８ｇ、１．３当量）を数回に分けて加えた。１５分後にヨウ化エチル（４．９３ｍｌ、１．３当量）を滴下した。２時間後に、反応混合液にブライン（２００ｍｌ）を加えてクエンチングし、２×２００ｍｌの酢酸エチルで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。真空クロマトグラフィー（ｖａｃｕｕｍ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）を１Ｌガラス・ロートにて行い、２０−４０％の酢酸エチル／ヘプタンで溶出して、油状物質１４．６４ｇ（７７％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．６８，７．３７，５．１９，５．０８，４．７２，４．０６，３．９８，３．７４−３．５６，３．４５，３．２６，２．６３，１．３４−１．２２；ＩＲ（液体）２９７１（ｓ），２９３６，２３４０（ｗ），１９５０（ｗ），１７０９（ｓ），１５４６（ｓ），１４９９（ｓ），１４６４（ｓ），１４４８（ｓ），１４２２（ｓ），１３９５（ｓ），１３５０（ｓ），１１７３，１１２９（ｓ），１０９７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２２Ｈ３０Ｎ４Ｏ３＋Ｈ１について算出した理論値３９９．２３９６、実測値３９９．２３９２。比旋光度（２５ Ｃ Ｄ）＝−５０（ｃ ０．５５，０．１Ｎ ＨＣｌ）。
（調製例７）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチル−５−ヨードピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１４】
【００９２】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチル−５−ヨードピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸メチルの製造方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチルピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用いることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．３０−７．２５，５．０６，４．９６，４．５３，３．９６，３．８６，３．６４−３．４７，３．３５，３．２５−３．１３，２．６８，２．５１，１．２０−１．１２；ＩＲ（液体）２９７２，２３３８（ｗ），１９４９（ｗ），１７０８（ｓ），１５５４（ｓ），１５３７（ｓ），１４７５（ｓ），１４５６（ｓ），１４４７（ｓ），１４２１（ｓ），１３９４（ｓ），１３５１（ｓ），１１６５，１１２６，１０９７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２２Ｈ２９Ｎ４Ｏ３Ｉ＋Ｈ１に対する理論値５２５．１３６４、実測値５２５．１３５９。Ｃ２２Ｈ２９ＩＮ４Ｏ３に対する理論値：Ｃ，５０．３９；Ｈ，５．５７；Ｎ，１０．６８、実測値：Ｃ，５０．４８；Ｈ，５．６０；Ｎ，１０．４４。
（調製例８）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３、６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１５】
【００９３】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチル−５−ヨードピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（１．９３ｇ）のエチレングリコールジメチルエーテル（１８．４ｍｌ）溶液に、２−ジメチルアミノ−４−メチル−５−ピリジルボロン酸（１．３２ｇ、２当量）およびテトラキスパラジウム化合物（４２５ｍｇ、０．１当量）と２Ｎ炭酸ナトリウム（３．７ｍｌ）を加えた。反応混合液を８０℃で１８時間加熱し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍｌ）に注ぎ、１００ｍｌ酢酸エチルで２回抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。バイオタージＭＰＬＣにより、２０−７０％酢酸エチル／ヘプタンで溶出して精製し、表題化合物を油状物質（７６０ｍｇ、３９％）として得た。 １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．９８，７．４０−７．３４，６．４５，５．１８−５．０６，４．７４，４．０９，３．９７，３．７６−３．３０，３．１２，２．６８，２．５３，２．１１，１．３１−１．２４，１．１４；ＩＲ（拡散反射法）２９７１，２９３２，２４５３（ｗ），２３４０（ｗ），１９４９（ｗ），１７０８（ｓ），１６０５（ｓ），１５６６，１４９０（ｓ），１４４５（ｓ），１４１８（ｓ），１３９５（ｓ），１３５０（ｓ），１１２７，１０９５ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ３０Ｈ４０Ｎ６Ｏ３＋Ｈ１について算出した理論値５３３．３２４０、実測値５３３．３２４０。
（調製例９）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２，４−ジクロロフェニル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１６】
【００９４】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製方法に従い、替わりに２，４−ジクロロフェニルボロン酸を代用し、軽度の変更を用いることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．４９，７．４０−７．２５，５．２０−５．１３，４．７６，４．１１，３．９８，３．７３−３．６０，３．５１−３．３１，２．７０，２．４７，１．３１−１．２４，１．１５；ＩＲ（液体）２９７２，２３４２（ｗ），１９４８（ｗ），１７０９（ｓ），１５６７，１５５２，１４９８（ｓ），１４７０（ｓ），１４４９（ｓ），１４２０（ｓ），１３９７（ｓ），１３５０，１１２６，１１００（ｓ），１０８０，ｃｍ−１。
（調製例１０）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１７】
【００９５】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３、６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製方法に従い、替わりに２−クロロ−４−メトキシフェニルボロン酸を代用し、軽度の変更を用いることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ）１．０４，１．１６，２．３８，２．６８，３．３４，３．４０，３．５４，３．７０，３．８２，４．１８，４．６２，５．１０，５．９５，６．９８，７．１０，７．２６，７．３８；ＩＲ（拡散反射法）２９７１，２９３４，２３５０（ｗ），２３３８（ｗ），２０６３（ｗ），１９４９（ｗ），１７１０（ｓ），１５６８，１４８２（ｓ），１４１９（ｓ），１３９７（ｓ），１３４８，１２８７，１２２８，１０９６，ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ２９Ｈ３５ＣｌＮ４Ｏ４＋Ｈについて算出した理論値５３９．２４２５、実測値５３９．２４３６。Ｃ２９Ｈ３５ＣｌＮ４Ｏ４について算出した理論値：Ｃ，６４．６１；Ｈ，６．５４；Ｎ，１０．３９；Ｃｌ，６．５８、実測値：Ｃ，６４．３０；Ｈ，６．５６；Ｎ，１０．２６。
（調製例１１）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１８】
【００９６】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製方法に従い、替わりに６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イルボロン酸を用いることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．４１−７．３６，６．６４，５．１７−５．１５，４．７８，４．１１，４．０２−３．９７，３．７３−３．３５，２．７０，２．４６，２．２８，１．３２−１．２１，１．１３；ＩＲ（液体）２２３６（ｗ），２０１８（ｗ），１９４９（ｗ），１７０９（ｓ），１５９６，１５６５，１４９９，１４７４（ｓ），１４２０（ｓ），１３９６，１３６０，１３５０，１３０４（ｓ），１１２６，１０９７ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２９Ｈ３７Ｎ５Ｏ４＋Ｈ１について算出した理論値 ５２０．２９２４、実測値５２０．２９２４。
（調製例１２）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１９】
【００９７】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製方法に従い、替わりに２−メチル−４−メトキシ−フェニルボロン酸を用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．０４，１．２１，２．０４，２．４０，２．６５，３．２２−３．２６，３．４１，３．５２−３．６８，３．７５，３．９４，４．０３，４．６８，５．０８，６．７０，６．７４，７．０２，７．２８−７．３２；ＩＲ（液体）２９７１（ｓ），２３３９（ｗ），２１６６（ｗ），２０８２（ｗ），１９５７（ｗ），１７０８（ｓ），１５６４（ｓ），１４８２（ｓ），１４２０（ｓ），１３９５（ｓ），１３４９（ｓ），１２４２（ｓ），１１６９（ｓ），１１２５（ｓ），１０９６（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ３０Ｈ３８Ｎ４Ｏ４＋Ｈ１について算出した理論値５１９．２９７１、実測値５１９．２９７４。
（調製例１３）
６−メトキシ−３−ニトロ−２−（トリフルオロメチル）ピリジンの調製
【化２０】
【００９８】
２−クロロ−６−メトキシ−３−ニトロピリジン（５ｇ）をＣｕＩ（６．０５ｇ）、ＫＦ（無水物、３．０ｇ）、２−クロロ−２，２−ジフルオロ酢酸メチル（６．８ｍｌ）と共にＤＭＦ（２８ｍｌ）中で１３０℃で８時間加熱した。冷却した後、１：９のＮＨ４ＯＨ／ＮＨ４Ｃｌ混合液（１００ｍｌ）中に注ぎ、均一になるまで撹拌し、酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせて、ブラインで洗い、乾燥した（ＭｇＳＯ４）。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ヘプタン中に１−３％ＥｔＯＡｃ）により、３．９０ｇ（６５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ４．０２，６．９６，８．１０；ＩＲ（液体）２３８９（ｗ），２２５４（ｗ），２１９６（ｗ），２１６３（ｗ），２０１７（ｗ），１６０５（ｓ），１５８６（ｓ），１５３８（ｓ），１４８２（ｓ），１３４０（ｓ），１２９０（ｓ），１２６１（ｓ），１２０５（ｓ），１１８０（ｓ），１１５５（ｓ）ｃｍ−１；Ｃ７Ｈ５Ｆ３Ｎ２Ｏ３について算出した理論値：Ｃ，３７．８５；Ｈ，２．２７；Ｎ，１２．６１；Ｆ，２５．６６、実測値：Ｃ，３７．６８；Ｈ，２．２９；Ｎ，１２．３０。
（調製例１４）
６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミンの調製
【化２１】
【００９９】
６−メトキシ−３−ニトロ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン（３．６１ｇ）の９５％エチルアルコール溶液（１６２ｍｌ）に塩化スズ（ＩＩ）二水和物を加え、７０℃で３時間加熱した。室温まで冷却した後、氷水に注ぎ、２ＮのＮａＯＨでｐＨを１１に調節した。酢酸エチルを加えてよく撹拌し、セライトで濾過した。有機層を分離して、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ヘプタン中に３−８％ＥｔＯＡｃ）によって、表題化合物を得た（２．２０ｇ、７１％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ３．８１，６．７０，７．０５；１９Ｆ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ６５．７３；ＩＲ（液体）２４３４（ｗ），２３８９，２２７２，２２２９，２１７４，１４８８（ｓ），１４３６（ｓ），１４２６（ｓ），１２７６（ｓ），１１７０（ｓ），１１０２（ｓ，ｂ），１０５０（ｓ），１０２４（ｓ），７４０（ｓ），６５８（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ７Ｈ７Ｎ２ＯＦ３＋Ｈ１について算出した理論値１９３．０５８９、実測値１９３．０５８１。Ｃ７Ｈ７Ｆ３Ｎ２Ｏについて算出した理論値：Ｃ，４３．７６；Ｈ，３．６７；Ｎ，１４．５８；Ｆ，２９．６６、実測値：Ｃ，４３．６１；Ｈ，３．４９；Ｎ，１４．４９。
（調製例１５）
３−ヨード−６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジンの調製
【化２２】
【０１００】
６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミン（１ｇ）をＨ２ＳＯ４（３ｍｌ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３ｍｌ）中の亜硝酸ナトリウム（７１８ｍｇ）を０℃で反応混合液に滴下した。０℃で２時間撹拌した後、室温にもどした。Ｈ２Ｏ（３ｍｌ）中のヨウ化カリウム（１．７３ｇ）を反応混合液に滴下し、６０℃で３時間加熱した。酢酸エチルで抽出し、チオ硫酸ナトリウム水溶液（飽和）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ヘプタン中に１−５％ＥｔＯＡｃ）によって、表題化合物を得た（３．４７ｇ、６７％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ３．９７，６．６８，８．０８；１９Ｆ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３） δ ６６．１６；ＩＲ（液体）２４７８（ｗ），２３６４（ｗ），２２３０（ｗ），２１７３（ｗ），２０２６（ｗ），１５８５（ｓ），１４７１（ｓ），１４２２（ｓ），１３９６（ｓ），１３３８（ｓ），１２８０（ｓ），１２３８（ｓ），１２００（ｓ），１１８０，１１４０（ｓ）ｃｍ−１；Ｃ７Ｈ５Ｆ３ＩＮＯについて算出した理論値：Ｃ，２７．７５；Ｈ，１．６６；Ｎ，４．６２；Ｆ，１８．８１、実測値：Ｃ，２７．９３；Ｈ，１．８０；Ｎ，４．６２。
（調製例１６）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）ピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化２３】
【０１０１】
３−ヨード−６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン（１６２ｍｇ、３当量）および塩化亜鉛（０．５Ｍ ＴＨＦ、９当量）のＴＨＦ（２．６７ｍｌ）溶液にＮ２下−７８℃でｔ−ブチルリチウム（９当量）を加えた。５分後に、反応混合液を室温に加温し、（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチル−５−ヨードピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（１２０ｍｇ）およびテトラキスパラジウム（３１ｍｇ）を入れたフラスコにカニューレで移した。反応混合液を１６時間加熱還流し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）に注ぎ、５０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。ＭＰＬＣクロマトグラフィーにより、２０−４５％酢酸エチル／ヘプタンで溶出して精製し、表題化合物をアモルファス固体（６３ｍｇ、５３％）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．０５，１．１８，２．３４，２．６３，３．２１−３．３２，３．３８，３．５７，３．６５，３．９０，３．９５，４．０３，４．６６，５．０８，５．１５，６．８８，７．２８−７．３２，７．４６；ＩＲ（液体）２３４６（ｗ），２１７８（ｗ），２０２６（ｗ），１９５１（ｗ），１７０９（ｓ），１４８０（ｓ），１４２１（ｓ），１４００（ｓ），１３４４（ｓ），１２７９（ｓ），１２３９（ｓ），１１９２（ｓ），１１７６（ｓ），１１３７（ｓ），１０９７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２９Ｈ３４Ｎ５Ｏ４Ｆ３＋Ｈ１について算出した理論値５７４．２６４１、実測値５７４．２６４４。Ｃ２９Ｈ３４Ｆ３Ｎ５Ｏ４について算出した理論値：Ｃ，６０．７２；Ｈ，５．９７；Ｎ，１２．２１；Ｆ，９．９４、実測値：Ｃ，６０．８８；Ｈ，６．１２；Ｎ，１２．０１。
（調製例１７）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化２４】
【０１０２】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製方法に従い、替わりに２，６−ジメトキシピリジン−３−イルボロン酸を用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．５３，７．４０−７．２８，６．４２，５．１７，５．０７，４．７６，４．１５，４．０１，３．８７，３．９２，３．７６−３．６４，３．５０−３．３３，２．７０，２．５１，１．３２−１．２４，１．１８；ＩＲ（拡散反射法）２４１６（ｗ），２３４９（ｗ），２３２５（ｗ），２２６５（ｗ），２１８４（ｗ），１７０９（ｓ），１６０２（ｓ），１５７９（ｓ），１４７５（ｓ），１４５８（ｓ），１４１９（ｓ），１３９７（ｓ），１３７６（ｓ），１３１２（ｓ），１１０１（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２９Ｈ３７Ｎ５Ｏ５＋Ｈ１について算出した理論値５３６．２８７３、実測値５３６．２８６７。Ｃ２９Ｈ３７Ｎ５Ｏ５について算出した理論値：Ｃ，６５．０３；Ｈ，６．９６；Ｎ，１３．０７、実測値：Ｃ，６４．７１；Ｈ，７．０３；Ｎ，１２．８２。
（調製例１８）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化２５】
【０１０３】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２，４−ジクロロフェニル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（８．６０ｇ、１５．８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（０．１Ｍ、１５８ｍｌ）溶液に、Ｎ２下で塩化パラジウム（２７９ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３．２９ｍｌ、１．５当量）を加えた。トリエチルシラン（３．７８ｍｌ、１．５当量）を１５分かけて滴下した。１時間後に、トリエチルシランを更に８．７４ｍｌ滴下した。更に２時間後、反応混合液をセライトで濾過した。トリフルオロ酢酸（８ｍｌ）を加え、反応混合液を３０分間撹拌した。２ＮのＮａＯＨでｐＨを１０にしてクエンチングし、３００ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。真空クロマトグラフィーを１Ｌガラスロートで、０．５％ＮＨ４ＯＨを含む５−１５％のＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２にて行い、油状の化合物５．９５ｇ（９２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．４９，７．３３−７．２６，５．３８，４．５４，４．０７，３．６８，３．５２，３．２２，２．９５，２．７１，２．４６，１．２９，１．１５；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ２０Ｈ２６Ｃｌ２Ｎ４Ｏ＋Ｈについて算出した理論値４０９．１５６２、実測値４０９．１５６７。Ｃ２０Ｈ２６Ｃｌ２Ｎ４Ｏについて算出した理論値：Ｃ，５８．６８；Ｈ，６．４０；Ｎ，１３．６９、実測値：Ｃ，５８．４２；Ｈ，６．４３；Ｎ，１３．５０。
（調製例１９）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化２６】
【０１０４】
（５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用い、軽度の変更を加えることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．１５，１．２２−１．３４，２．４５，２．７１，２．８９，３．０６，３．２２，３．４１，３．５１，３．６５，３．８５，４．５１，５．３２，６．８８，７．０２，７．２４；ＩＲ（液体）２９７１（ｓ），２９３５，２４９６（ｗ），２４４６，２４０２（ｗ），２２６１（ｗ），２０７２（ｗ），１６０５，１５６６（ｓ），１４８３（ｓ），１４４１，１３９５，１２８７（ｓ），１２３０（ｓ），１０４５（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２１Ｈ２９Ｎ４Ｏ２Ｃｌ＋Ｈ１について算出した理論値４０５．２０５７、実測値４０５．２０４４。
（調製例２０）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製
【化２７】
【０１０５】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（１．３５ｇ）のエタノール（２６ｍｌ）溶液に１，４シクロヘキサジエン（２．４５ｍｌ、１０当量）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１．５ｇ）を加えた。反応混合液を２時間撹拌し、セライトで濾過し、濃縮した。ＭＰＬＣクロマトグラフィーにより、０．５％水酸化アンモニウムを含む２−６％メタノール／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出して精製し、表題化合物を琥珀色の油状物質（８７０ｍｇ、８７％）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．４１，６．６４，５．３４−５．３２，４．５２，４．０５，３．９７，３．６８，３．５３，３．４３，３．２２，３．１５，２．９２，２．７０，２．４６，２．２９，１．３２−１．２５，１．１４；ＩＲ（液体）２９７２，２９３５，２４０８（ｗ），２２３８（ｗ），２０１９（ｗ），１９７１（ｗ），１５９６，１５６３（ｓ），１４９９，１４７４（ｓ），１４２６，１３９４，１３０４（ｓ），１２５１，１０４２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２１Ｈ３１Ｎ５Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値３８６．２５５６、実測値３８６．２５４４。
（調製例２１）
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化２８】
【０１０６】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３、６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用いることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．９８，６．４５，５．３０，４．５１，４．０４，３．６７，３．５２，３．４３，３．１９，３．１２，２．９２，２．６９，２．５１，２．１１，１．３２−１．２５，１．１５；ＩＲ（液体）２９７１（ｓ），２９３３（ｓ），２８７３（ｓ），２３４５（ｂ），１９４６（ｗ），１６０７（ｓ），１５６５（ｓ），１５１６（ｓ），１４９０（ｓ），１３９５（ｓ），１３７３，１２０７，１１６３，１１２５，１０８０ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２２Ｈ３４Ｎ６Ｏ＋Ｈ１について算出した理論値３９９．２８７２、実測値３９９．２８７７。
（調製例２２）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンの調製
【化２９】
【０１０７】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用いることによって、琥珀色油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．１２，１．３０，２．１２，２．４６，２．７２，２．９２−３．１４，３．３６，３．５２，３．６３−３．８２，３．８４，４．１８−４．２４，４．７１−４．８６，５．１１−５．２２，６．７８，６．８３，７．０９；ＩＲ（拡散反射法）２９７０（ｓ），２９３３（ｓ），２８７５，２８３５，２４９３（ｂ），２４６７（ｂ），２４３９（ｂ），２３５３，２３３８（ｗ），１５６８（ｓ），１５６３，１４８２（ｓ），１３９７（ｓ），１３９３，１２４２（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２２Ｈ３２Ｎ４Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値３８５．２６０３、実測値３８５．２６０３。
（調製例２３）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンの調製
【化３０】
【０１０８】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用いることによって、琥珀色油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．１３，１．２８，２．４１，２．６９，３．１４，３．３７，３．５１，３．６６−３．７５，４．０４，４．１６，４．６９，５．２９，６．９６，７．５４；ＩＲ（液体）２９７５（ｓ），２４１７（ｂ），２１７７（ｂ），２０２９（ｗ），１９２３（ｗ），１６０９（ｓ），１５６５（ｓ），１４７９（ｓ），１４００（ｓ），１３４１（ｓ），１２７８（ｓ），１２３９（ｓ），１１９２（ｓ），１１７７（ｓ），１１３８（ｓ）ｃｍ−１。
（調製例２４）
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３１】
【０１０９】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用いることによって、琥珀色油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．５３，６．４２，５．２９，４．５２，４．０４，３．９８，３．９２，３．６６，３．５１，３．４０，３．２１，３．１２，２．９１，２．７２，２．４８，１．２８，１．１８；ＩＲ（液体）２９７２，２４１８（ｗ），２１８４（ｗ），２０３６（ｗ），１９９３（ｗ），１６０３，１５８１（ｓ），１５６４，１４７７（ｓ），１４２３，１３９５，１３７６（ｓ），１３１３（ｓ），１２３３，１０２２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２１Ｈ３１Ｎ５Ｏ３＋Ｈ１について算出した理論値４０２．２５０５、実測値４０２．２５１６。
（実施例1）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル］ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３２】
【０１１０】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン（１２０ｍｇ）のエチレングリコールジメチルエーテル（０．５８６ｍｌ）溶液に、２−ブロモ−１，３−チアゾール（０．０４０ｍｌ、１．５当量）、炭酸セシウム（１４４ｍｇ、１．５当量）、Ｎ−［２’−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−１，１’−ビフェニル−２−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミン（１６ｍｇ，０．１４当量）およびトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（１９ｍｇ、０．７当量）を加えた。反応混合液を１００℃で１６時間加熱し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）に注ぎ、５０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。ＭＰＬＣクロマトグラフィーにより、１０−３０％酢酸エチル／ヘプタンで溶出して精製し、表題化合物をアモルファス固体（７７ｍｇ、５０％）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．５０，７．３４，７．２８−７．２３，６．５３，５．３０，４．９２，４．２７，４．０２，３．８２−３．７２，３．５５，３．４６，２．７２，２．４８，１．３３−１．２７，１．１６；ＩＲ（液体）２９７２（ｓ），２９３４，２３３５（ｗ），１５６４（ｓ），１５３９（ｓ），１４９４（ｓ），１４７０（ｓ），１３９６（ｓ），１３５７，１３５０，１２０１，１１４１，１１２１（ｓ），１１０１，６１０ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２３Ｈ２７Ｎ５ＯＳＣｌ２＋Ｈ１について算出した理論値４９２．１３９１、実測値４９２．１３７８。
（実施例２）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３３】
【０１１１】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、２−ブロモピリジンを代用することによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．２０，７．５０，７．３２，７．２８，６．６９，６．５３，５．３３，４．９２，４．２８，４．０５，３．９２−３．７８，３．５８，３．４２，２．７３，２．５０，１．３３−１．２５，１．１６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ２９Ｎ５ＯＣｌ２＋Ｈ１について算出した理論値４８６．１８２７、実測値４８６．１８２７。
（実施例３）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−３−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３４】
【０１１２】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに３−ブロモピリジンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．９７，７．５１，７．４６，７．３３−７．２８，７．１１，５．３１，４．９２，４．３１，３．９２，３．８５，３．７８−３．３３，２．７３，２．４９，１．３５−１．２９，１．１６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ２９Ｎ５ＯＣｌ２＋Ｈｌについて算出した理論値４８６．１８２７、実測値４８６．１８３４。
（実施例４）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−４−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３５】
【０１１３】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに４−ブロモピリジンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．２３，７．５０，７．３５，７．２８，６．５０，５．３０，４．９０，４．２９，３．９５，３．７６，３．６５−３．５８，３．４２，２．７３，２．４９，１．３５−１．２７，１．１６；ＩＲ（拡散反射法）２９７１（ｓ），２４９７（ｗ），２３８８（ｗ），２３５０（ｗ），２３３８（ｗ），２３２８（ｗ），１５９６（ｓ），１５６９，１５５０（ｓ），１５１６，１５０８，１４９９（ｓ），１４６７（ｓ），１３９７（ｓ），１３９３（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ２９Ｎ５ＯＣｌ２＋Ｈ１について算出した理論値４８６．１８２７、実測値４８６．１８１０。
（実施例５）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３６】
【０１１４】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリミジンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．３８，７．５０，７．３２，７．２６，６．５６，５．３０，４．９１，４．２５，３．９４，３．７６，３．５５，２．７３，２．４７，１．３３−１．２６，１．１６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２４Ｈ２８Ｎ６ＯＣｌ２＋Ｈ１について算出した理論値４８７．１７８０、実測値４８７．１７７０。
（実施例６）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製
【化３７】
【０１１５】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミン（１１２ｍｇ）のジオキサン（１．４５ｍｌ）溶液に、２−ブロモピリミジン（６９ｍｇ、１．５当量）、１，３ビス（２，６−ジイソプロピルフェニル）イミダゾリウムクロリド（２０ｍｇ，０．１６当量）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（２１ｍｇ、０．８当量）、およびカリウムｔ−ブトキシド（４９ｍｇ、１．５当量）を加えた。反応混合液を１００℃で１６時間加熱し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）に注ぎ、５０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。ＭＰＬＣクロマトグラフィーにより、２０−５０％酢酸エチル／ヘプタンで溶出して精製し、表題化合物をアモルファス固体（７０ｍｇ、５２％）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．３６，７．４２，６．６３，６．５４，５．２４，４．９０，４．２４，３．９７，３．９２，３．８１−３．７４，３．５７−３．４６，２．７１，２．４７，２．２９，１．３３−１．２６，１．１５；ＩＲ（液体）２９７２，２３９７（ｗ），２３０７（ｗ），２２１４（ｗ），２０１９（ｗ），１９４５（ｗ），１５８５（ｓ），１５６５（ｓ），１５４８（ｓ），１５１０（ｓ），１４７４（ｓ），１３９５，１３８４，１３０４（ｓ），１０４２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ３３Ｎ７Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値４６４．２７７４、実測値４６４．２７６６。
（実施例７）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製
【化３８】
【０１１６】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．２０，７．５０，７．４２，６．６５，６．６０，６．４３，５．２８，４．９０，４．２６，４．０４，３．９７，３．７９−３．７５，３．５６，３．４１，２．７３，２．４８，２．２９，１．３３−１．２６，１．１５；ＩＲ（拡散反射法）２３５８（ｗ），２０１８（ｗ），１９３３（ｗ），１５９８（ｓ），１５６１，１４９４，１４７２（ｓ），１４４３，１３９２，１３６０，１３０３，１２５０，１１２２，１０４１，７６９ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３４Ｎ６Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値４６３．２８２１、実測値４６３．２８１６。
（実施例８）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製
【化３９】
【０１１７】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモ−１，３−チアゾールを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．４２，７．２５，６．６５，６．５４，５．２４，４．９２，４．２７，４．０２，３．９７，３．８８−３．７９，３．５６−３．４６，２．７０，２．４８，２．２９，１．３３−１．２７，１．１５；ＩＲ（液体）２９７２，２４１０（ｗ），２２３７（ｗ），２０１９（ｗ），１９７２（ｗ），１５９６（ｓ），１５６３（ｓ），１５４０（ｓ），１４９３（ｓ），１４７４（ｓ），１４２６，１３９５（ｓ），１３０４（ｓ），１２５１，１０４２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２４Ｈ３２Ｎ６Ｏ２Ｓ＋Ｈ１について算出した理論値４６９．２３８６、実測値４６９．２３７５。
（実施例９）
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４０】
【０１１８】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンおよび５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．１９，７．９９，７．４７，６．５８，６．４６，６．４１，５．２５，４．９０，４．２５，４．０２，３．８０−３．７２，３．５５，３．４０，３．１３，２．７０，２．５４，２．１２，１．２９，１．１６；ＩＲ（液体）２９６９，２９３０，２８７１，２４１４（ｗ），１９４１（ｗ），１６０２（ｓ），１５５８（ｓ），１４９０（ｓ），１４７４（ｓ），１４４３（ｓ），１３９５（ｓ），１３７４，１１６６，１１２４，７７０ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２７Ｈ３７Ｎ７Ｏ＋Ｈ１について算出した理論値４７６．３１３８、実測値４７６．３１３４。
（実施例１０）
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４１】
【０１１９】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．３６，７．９９，６．５３，６．４６，５．１９，４．９１，４．２２，３．９５，３．７３，３．５８−３．４４，３．１３，２．７１，２．５４，２．１２，１．３２−１．２６，１．１６；ＩＲ（拡散反射法）２９６９，２９３１，２４０３（ｗ），２３５１（ｗ），２３０６（ｗ），２２１２（ｗ），２１６８（ｗ），１６０６（ｓ），１５８３（ｓ），１５６８（ｂ），１５４７（ｓ），１５０８（ｓ），１４７４（ｓ），１３９３（ｓ），７９８ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３６Ｎ８Ｏ＋Ｈ１について算出した理論値４７７．３０９０、実測値４７７．３１１３。
（実施例１１）
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４２】
【０１２０】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモ−１，３−チアゾールおよび５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．９９，７．２３，６．５３，６．４６，５．２０，４．９２，４．２９，４．０２，３．７８，３．５８，３．４２，３．１３，２．７１，２．５３，２．１２，１．３３−１．２７，１．１６；ＩＲ（拡散反射法）２９７０，２９３１，２８７２，２３５０（ｗ），１６０６（ｓ），１５３７（ｓ），１４８９（ｓ），１３９３（ｓ），１３７２，１３６０，１３４７，１３４３，１３３８，１２１０，１１２２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ３５Ｎ７ＯＳ＋Ｈ１について算出した理論値４８２．２７０２、実測値４８２．２６９９。
（実施例１２）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（４−メトキシピリミジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４３】
【０１２１】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンおよび２−クロロ−４−メトキシピリミジンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．０３，７．２５，７．０２，６．９０，６．０２，５．２５，４．８８，４．２２，３．９２−３．７８，３．５５，２．７４，２．５０，１．３３−１．２６，１．１６；ＩＲ（拡散反射法）２９７２，２４７５（ｗ），２３５０（ｗ），２３１０（ｗ），２１８３（ｗ），２０６９（ｗ），１５８５（ｓ），１５６８（ｓ），１５１６（ｓ），１４８２（ｓ），１４６６（ｓ），１３９７，１３９３，１２９２，１２３１ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３３Ｎ６Ｏ３Ｃｌ＋Ｈ１について算出した理論値５１３．２３８０、実測値５１３．２３５６。
（実施例１３）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（４−メトキシピリジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン塩酸塩の調製
【化４４】
【０１２２】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンおよび２−クロロ−４−メトキシピリジンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．６，８．０８，７．２２，７．１２，７．０５，６．９０，６．４０，５．９２，５．４０，５．００，４．３２，４．２０−４．１０，３．９５，３．８６，３．５２，２．８１，２．６０，１．３３，１．２６，１．１８；ＩＲ（拡散反射法）２９６６，２９３４，２６８５（ｂ），２０３６（ｗ），１９７４（ｗ），１６５７，１６０７（ｓ），１４９３，１４６３，１４４２，１４０４，１２９３，１２６５，１２３２，８２６ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２７Ｈ３４Ｎ５Ｏ３Ｃｌ＋Ｈ１について算出した理論値５１２．２４２９、実測値５１２．２４１７。
（実施例１４）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４５】
【０１２３】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリミジンを用い、開始化合物として５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１７，１．２６−１．３４，２．５１，２．７６，３．５４，３．７８，３．８６，３．９７，４．２７，４．９１，５．２５，６．６１，６．９０，７．０２，７．２５，８．４０；ＩＲ（拡散反射法）２９７１，２３９２（ｗ），２３５２（ｗ），２３０７（ｗ），２２６５（ｗ），２１７０（ｗ），１５８３（ｓ），１５６９，１５４９（ｓ），１５０８（ｓ），１４８１（ｓ），１４７５（ｓ），１３９７，１３９２，１３８４ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＩ）Ｃ２５Ｈ３１ＣｌＮ６Ｏ２について算出した理論値４８２．２１９７、実測値４８２．２１９２。
（実施例１５）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４６】
【０１２４】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンおよびテトラフルオロホウ酸１，３−ビス（２，６−ジ−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−イミダゾリウムを用い、開始化合物として５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．１７，１．２４−１．３４，２．５１，２．７６，３．５６，３．７６，３．８６，３．９９，４．２５，４．９１，５．２５，６．６１，６．９０，７．０２，７．２５，８．４１；ＩＲ（拡散反射法）２３５２（ｗ），２３４０（ｗ），２０６２（ｗ），１９４０（ｗ），１９０６（ｗ），１６００（ｓ），１５６７，１５５９，１５５５，１４８２（ｓ），１４７４（ｓ），１４４１（ｓ），１３９２，１２８７，１２２９ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３２Ｎ５Ｏ２Ｃｌ＋Ｈ１について算出した理論値４８２．２３２２、実測値４８２．２３３２。
（実施例１６）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−３−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４７】
【０１２５】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに３−ブロモピリジンを用い、開始化合物として５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１７，１．２６−１．３３，２．５１，２．７３，３．３９，３．５７，３．７６，３．７８，３．８６，３．９３，４．３１，４．９１，５．２６，６．８９，７．０４，７．２５，８．００；ＩＲ（拡散反射法）２９７０，２４３０（ｗ），２０５４（ｗ），１９１４（ｗ），１６０３，１５８４，１５６６（ｓ），１４８１（ｓ），１４３４，１３９６，１３７２，１２８７，１２２８，１１２２，１０４４ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３２Ｎ５Ｏ２Ｃｌ＋Ｈ１について算出した理論値４８２．２３２２、実測値４８２．２３１１。
（実施例１７）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４８】
【０１２６】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、開始化合物として５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを使用することによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１７，１．２５−１．３５，２．５０，２．７２，３．４５，３．５８，３．７５，３．８６，４．０４，４．２７，４．９３，５．２６，６．５５，６．９０，７．０２，７．２４；ＩＲ（拡散反射法）２９７０，２３５１（ｗ），２３３７（ｗ），２０６３（ｗ），１６０４，１５６８，１５４９（ｓ），１５３７（ｓ），１４８２（ｓ），１３９７，１３５９，１２８６，１２２８，１１９９，１０４３ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２４Ｈ３０Ｎ５Ｏ２ＳＣｌ＋Ｈ１について算出した理論値４８８．１８８７、実測値４８８．１８８０。
（実施例１８）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンの調製
【化４９】
【０１２７】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリミジンを用い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンを使用することによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．２８，２．１３，２．４８，２．７４，３．５１，３．７７，３．８５，３．９８，４．２５，４．９０，５．２０，６．５６，６．８１，７．１２，８．３７；ＩＲ（拡散反射法）２９７０，２４０２（ｗ），２３５０（ｗ），２３０７（ｗ），２２１２（ｗ），２１６９（ｗ），１５８３（ｓ），１５６８，１５４８（ｓ），１５０８（ｓ），１４７５（ｓ），１３９３，１３８３，１２４２，７９８ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３４Ｎ６Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値４６３．２８２１、実測値４６３．２８１６。
（実施例１９）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンの調製
【化５０】
【０１２８】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンを用い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．３１，２．１４，２．４９，２．７１，３．４２，３．５４，３．７８，３．８５，４．０７，４．２８，４．９２，５．２１，６．５０−６．６６，６．７９，６．８４，７．１２，８．２０；ＩＲ（拡散反射法）２９６９，２４０５（ｗ），２３５１（ｗ），２３３７（ｗ），２２１２（ｗ），２０１５（ｗ），１５９９（ｓ），１５６０，１４８２（ｓ），１４７４（ｓ），１４４２（ｓ），１３９２，１３８５，１２４２，７６９ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２７Ｈ３５Ｎ５Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値４６２．２８６９、実測値４６２．２８５９。
（実施例２０）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンの調製
【化５１】
【０１２９】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンを使用することによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．３１，２．１３，２．４７，２．７１，３．４５−３．５９，３．７７，３．８５，４．０３，４．２８，４．９３，５．２１，６．５４，６．８１，６．８３，７．１１，７．２６；ＩＲ（拡散反射法）２９７０，２９３２，２４０３（ｗ），２３５０（ｗ），２３３４（ｗ），２２１２（ｗ），１９６５（ｗ），１６０８，１５３７（ｓ），１４８２（ｓ），１３９３，１２９４，１２４２，１２００，１１６５ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ３３Ｎ５Ｏ２Ｓ＋Ｈ１について算出した理論値４６８．２４３３、実測値４６８．２４１６。
（実施例２１）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンの調製
【化５２】
【０１３０】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリミジンを用い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンを使用することによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．３０，２．４３，２．６９，３．５３，３．７８，３．８７，３．９９，４．０４，４．２７，４．９１，５．２７，６．６１，６．９７，７．５６，８．４１；ＩＲ（拡散反射法）２３９８（ｗ），２３５２（ｗ），２３０７（ｗ），２２１４（ｗ），２１７３（ｗ），１５８４（ｓ），１５６９，１５４９（ｓ），１５０８（ｓ），１４７６（ｓ），１３９７，１３４１，１２７７，１１７５，１１３７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ３０Ｎ７Ｏ２Ｆ３＋Ｈ１について算出した理論値５１８．２４９１、実測値５１８．２４７９。
（実施例２２）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンの調製
【化５３】
【０１３１】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンを用い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンを使用することによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．３０，２．４４，２．７０，３．４３，３．５８，３．７５−３．８５，４．０５，４．２７，４．９０，５．３２，６．４６，６．６２，６．９７，７．５２，７．５６，８．２０；ＩＲ（拡散反射法）２３５２（ｗ），２３３８（ｗ），２２５７（ｗ），２１７５（ｗ），２０２５（ｗ），１６００（ｓ），１５５９，１４７５（ｓ），１４４３（ｓ），１３９７，１３３９，１２７７，１２３９，１１７４，１１３７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３１Ｎ６Ｏ２Ｆ３＋Ｈ１について算出した理論値５１７．２５３８、実測値５１７．２５３３。
（実施例２３）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンの調製
【化５４】
【０１３２】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．３０，２．４５，２．６８，３．４８−３．５８，３．７７，３．８８，４．０４，４．２９，４．９４，５．２９，６．５６，６．９８，７．５６；ＩＲ（拡散反射法）２９７４，２３５０（ｗ），２３３７（ｗ），１９２１（ｗ），１６０７，１５６８，１５３８（ｓ），１４７７（ｓ），１３９７，１３４２，１２７８（ｓ），１２３９，１１９２，１１７５，１１３７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２４Ｈ２９Ｎ６Ｏ２ＳＦ３＋Ｈ１について算出した理論値５２３．２１０３、実測値５２３．２１０８。
（実施例２４）
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン塩酸塩の調製
【化５５】
【０１３３】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンを用い、出発化合物として５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．２２，７．８１，７．５４，６．８３，６．７４，６．４３，５．１９，４．９５，４．３３，４．１５，４．９７，３．９３，３．８２，３．５７，３．４８，２．７２，２．５３，１．３４−１．２６，１．１７；ＩＲ（拡散反射法）２９７２，２３４０（ｗ），２０２２（ｗ），１９３０（ｗ），１６４６，１６０２（ｓ），１５７６，１４８１，１４６６，１４０１，１３７６，１３１４，１２４０，１０２２，７６５ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３４Ｎ６Ｏ３＋Ｈ１について算出した理論値４７９．２７７０、実測値４７９．２７６５。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ６Ｏ３．ＨＣｌについて算出した理論値：Ｃ，６０．６３；Ｈ，６．８５；Ｎ，１６．３２；Ｃｌ，６．８８、実測値：Ｃ，６０．６６；Ｈ，６．９１；Ｎ，１６．０３。
（実施例２５）
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化５６】
【０１３４】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモチアゾールを用い、出発化合物として５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．５４，７．２３，６．５２，６．４３，５．２１，４．９２，４．２５，４．００，３．９７，３．９３，３．８０−３．７３，３．５４，３．４４，２．７２，２．５２，１．３３−１．２６，１．１８；ＩＲ（拡散反射法）２９６３，２３２７（ｗ），２１８７（ｗ），２０５６（ｗ），１９９７（ｗ），１６０４，１５８０，１５６７，１５３８（ｓ），１４７４（ｓ），１３９７，１３７７，１３１１，１２３５，１０３１ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２４Ｈ３２Ｎ６Ｏ３Ｓ＋Ｈ１について算出した理論値４８５．２３３５、実測値４８５．２３３３。
（実施例２６）
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化５７】
【０１３５】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリミジンを用い、出発化合物として５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．３５，７．５３，６．５２，６．４２，５．１８，４．９０，４．２０，３．９７，３．９３，３．８９，３．７７，３．５２，２．７２，２．５２，１．３３−１．２５，１．１８；ＩＲ（拡散反射法）２４０２（ｗ），２３４７（ｗ），２３０７（ｗ），２２６４（ｗ），２１９４（ｗ），１６０１，１５８２（ｓ），１５６６，１５４７（ｓ），１５１０（ｓ），１４７４（ｓ），１３９５，１３７７（ｓ），１３１２（ｓ），１０２２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ３３Ｎ７Ｏ３＋Ｈ１について算出した理論値４８０．２７２３、実測値４８０．２７１５。
（実施例Ａ）
生物学的活性評価のためのインビトロＣＲＦ１受容体結合アッセイ
【０１３６】
以下は、被験化合物のＣＲＦ１受容体に対する生物学的活性を評価するための、標準的なインビトロ結合アッセイの記載である。これは、ＤｅＳｏｕｚａ（De
Souza，1987）によって記載された修正プロトコールに基づく。
【０１３７】
結合アッセイには、一般的にはラット由来の脳の細胞膜を用いる。脳細胞膜を結合アッセイ用に調製するために、ラットの前頭皮質を氷冷した１０ｍＬの組織緩衝液（ｐＨ７．０の５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液に１０ｍＭのＭｇＣｌ２、２ｍＭのＥＧＴＡ、１μｇ／ｍＬアプロチニン、１μｇ／ｍＬロイペプチンおよび１μｇ／ｍＬペプスタチンを含む）にてホモジナイズする。ホモジネートは、４８，０００×ｇで１０分間遠心分離を行い、生じた沈殿を１０ｍＬの組織緩衝液にて再びホモジナイズする。再び４８，０００×ｇで１０分間遠心分離を行い、生じた沈殿をタンパク質濃度が３００μｇ／ｍＬになるように再懸濁する。
【０１３８】
９６ウェルプレートを用い最終量が３００μＬとなるようにして、結合アッセイを行う。アッセイは、１５０μＬ細胞膜懸濁液を、１２５Ｉ−ヒツジ−ＣＲＦ（最終濃度は１５０ｐＭ）および種々の濃度の阻害剤を含む１５０μＬのアッセイ緩衝液に加えて行う。アッセイ緩衝液は、上述の細胞膜調製液に０．１％卵白アルブミンおよび０．１５ｍＭのバシトラシンを加えたものと同じである。放射性リガンドによる結合は、室温にて２時間経過した後に、Ｐａｃｋａｒｄ社製ＧＦ／Ｃユニフィルタ・プレート（事前に０．３％ポリエチレンイミンに浸しておいたもの）により、Ｐａｃｋａｒｄ社のセルハーベスタを用いて濾過して停止した。フィルタは、氷冷したｐＨが７．０で０．０１％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含むリン酸緩衝液生理食塩水によって３回洗浄を行った。フィルタは、Ｐａｃｋａｒｄ社製ＴｏｐＣｏｕｎｔで放射能測定を行った。
【０１３９】
或いは、ＩＭＲ−３２ヒト神経芽腫細胞（ＡＴＣＣ、Hoggら,1996）のような、ＣＲＦ受容体を自然に発現する組織および細胞を、上述したアッセイ法に類似した結合アッセイ法に用いることができる。
【０１４０】
ＣＲＦ阻害に関しＫｉ値がおよそ１０μＭ未満である場合に、化合物には活性があると考えられる。非特異的結合については、過剰な（１０μＭ）α−ヘリカルＣＲＦの存在下で測定する。
（実施例Ｂ）
生物学的活性評価のためのエクスビボＣＲＦ１受容体結合アッセイ
【０１４１】
以下に、被験化合物のＣＲＦ１受容体に対する生物学的活性を評価するための、典型的なエクスビボＣＲＦ１受容体結合アッセイを記載した。
【０１４２】
絶食させたＨａｒｌｅｎ社製の雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（１７０−２１０ｇ）に対して、午後０：３０から午後２：００の間の胃洗浄を経て、被験化合物或いは溶媒を経口投与した。化合物は、溶媒（通例では、蒸留水中に１０％ダイズ油と５％ポリソルベート８０）により調製した。薬物投与から２時間後に、ラットを断頭により致死させ、前頭皮質をすばやく摘出し、ドライアイス上に置き、アッセイまで−８０℃で冷凍した。大動脈血をヘパリン処理した試験管に収集し、遠心分離（２５００ＲＰＭで２０分間）により血漿を分離し、−２０℃で冷凍した。
【０１４３】
結合アッセイの当日、組織サンプルの重量を測り、氷冷した５０ｍＭのＨｅｐｅｓ緩衝液（１０ｍＭのＭｇＣｌ２、２ｍＭのＥＧＴＡ、１μｇ／ｍＬのアプロチニン、１μｇ／ｍＬのロイペプチンヘミ硫酸塩、１μｇ／ｍＬのペプスタチンＡ、０．１５ｍＭのバシトラシンおよび０．１％卵白アルブミンを含む。２３℃におけるｐＨ＝７．０）中で解凍した後、Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ社のＰｏｌｙｔｒｏｎで設定を５にして３０秒ホモジナイズした。ホモジネートをアッセイ緩衝液（上述）またはＤＭＰ−９０４（１０μＭ）の存在下で、［１２５Ｉ］ＣＲＦ（０．１５ｎＭ、ＮＥＮ）と共にインキュべートした（２３℃で２時間、暗所）。濾過（Ｐａｃｋａｒｄ社ＦｉｌｔｅｒＭａｔｅ、ＧＦ／Ｃフィルタープレート）により、アッセイを停止し、プレートをＰａｃｋａｒｄ社ＴｏｐＣｏｕｎｔ液体シンチレーションカウンタ（ＬＳＣ）により測定した。総ｆｍｏｌｅおよび非特異的ｆｍｏｌｅをＤＰＭから計算した。データは、溶媒対照に対するパーセント（結合した特異的ｆｍｏｌｅ）として表した。統計的有意性は、スチューデントのｔ検定を用いて評価を行った。
（実施例Ｃ）
ＣＲＦで刺激されたアデニル酸シクラーゼ活性 の阻害
【０１４４】
ＣＲＦ作用性アデニル酸シクラーゼ活性の阻害アッセイは、既述の方法で行うことができる［G．Battagliaら，Synapse 1：572
(1987)］。簡明に述べるならば、アッセイは、３７℃で１０分間、１００ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（３７℃でｐＨ７．４）、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、０．４ｍＭのＥＧＴＡ、０．１％ＢＳＡ、１ｍＭのイソブチルメチルキサンチン（ＩＢＭＸ）、２５０単位／ｍＬのホスホクレアチン・キナーゼ、５ｍＭのリン酸クレアチン、１００ｍＭのグアノシン５’−三リン酸塩、１００ｎＭのｏ−ＣＲＦ、拮抗ペプチド（種々の濃度）およびもともとの湿重量で０．８ｍｇの組織（およそ４０−６０ｍｇタンパク質）を含む２００ｍＬの緩衝液中で行う。反応は、１ｍＭのＡＴＰ／［３２Ｐ］ＡＴＰ（試験管当たりおよそ２−４ｍＣｉ）を添加して開始し、５０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、４５ｍＭのＡＴＰおよび２％ドデシル硫酸ナトリウムを含む１００ｍＬ液を添加して、停止する。１ｍＬの［３Ｈ］ｃＡＭＰ（およそ４０，０００ｄｐｍ）を分離前に各試験管に添加して、ｃＡＭＰの回復をモニターする。Ｄｏｗｅｘおよびアルミナカラムで連続的に溶出を行うことにより、［３２Ｐ］ｃＡＭＰの［３２Ｐ］ＡＴＰからの分離が起こる。
【０１４５】
或いは、アデニル酸シクラーゼ活性は、ＮＥＮ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社のＡｄｅｎｙｌｙｌ Ｃｙｃｌａｓｅ Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ＦｌａｓｈＰｌａｔｅ Ａｓｓａｙを用いた９６−ウェルフォーマットによって、提供されたプロトコールに従って測定できる。簡明に述べるならば、放射性標識したｃＡＭＰの一定量を、抗ｃＡＭＰ抗体をコーティングした９６−ウェルプレートに加える。阻害化合物の存在下、或いは存在していない状態で、細胞または組織を加えて、活性化する。細胞が生産する未標識ｃＡＭＰは、抗体と結合した放射性標識ｃＡＭＰと置き換わる。結合した放射性標識ｃＡＭＰは、Ｐａｃｋａｒｄ ＴｏｐＣｏｕｎｔのようなマイクロプレートシンチレーションカウンタで検出可能な光信号を発生する。非標識化ｃＡＭＰの量が増えることにより、設定したインキュべーション時間（２−２４時間）に亘って、検出可能な信号が低下する。
（実施例Ｄ）
インビボ生物学的アッセイ
【０１４６】
本発明の化合物のインビボ活性は、当技術分野において認められている利用可能な生物学的アッセイを用いて評価できる。このような試験の例としては、聴覚性驚愕反射アッセイ（Ａｃｏｕｓｔｉｃ Ｓｔａｒｔｌｅ Ａｓｓａｙ）、階段登行試験（Ｓｔａｉｒ Ｃｌｉｍｂｉｎｇ Ｔｅｓｔ）および慢性投与アッセイ（Ｃｈｒｏｎｉｃ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ）が含まれる。これらの方法およびその他の方法であって、本発明の化合物のアッセイを行うために有用なアッセイ法は、C．W．BerridgeおよびA．J．Dunnによる
Brain Research Reviews 15:71 (1990)に概要が示されている。齧歯類または小ほ乳類のいかなる種においても、化合物のアッセイを行うことができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＣＲＦ受容体に結合する化合物全般に関連し、特にＣＲＦ１受容体拮抗剤である新規化合物およびこれをＣＲＦまたはＣＲＦ１受容体に関連する障害の治療への使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
コルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ）とは、４１個のアミノ酸からなるペプチドであり、脳下垂体前葉からのプロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来のペプチド分泌を調節する主要な生理学的制御因子である［J．Rivierら，Proc．Natl．Acad．Sci(USA)
80:4851 (1983)；W．Valeら，Science 213:1394
(1981)]。脳下垂体の内分泌を司る働きに加えて、ＣＲＦは、視床下部外の中枢神経系に広範囲に分布を有することが知られ、脳における神経伝達物質または神経調節物質と一致する幅広い自律的行動と生理的作用に寄与している［W．Valeら，Rec．Prog．Horm．Res．39:245
(1983)；G．F．Koob，Persp．Behav．Med．2:39 (1985)；E．B．De Souzaら，J．Neurosci．5:3189 (1985)]。ＣＲＦは、中枢神経系のＣＲＦ神経の機能障害に関係するようなうつ病、不安関連障害、摂食障害を含む精神障害および神経学的疾患において、並びに、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、進行性核上麻痺および筋萎縮性側索硬化症の病因および病態生理において、生理学的、心理学的および免疫学的ストレッサに対する免疫系反応を統合する上で、重要な働きを果たしていることを示す証拠がある[J．E．Blalock，Physiological
Reviews 69 :1 (1989)；J．E．Morley，Life Sci．41：527 (1987)；E．B．De
Souze，Hosp．Practice 23：59 (1988)]。
【０００３】
ＣＲＦが気分障害においてある役割を果たしていることを示す証拠がある。気分障害は、情動障害としても知られているが、当技術分野においてはよく認知されており、大うつ病、単一エピソード性うつ病、再発性うつ病、児童虐待誘発性のうつ病および産後うつ病を含むうつ病；気分変調；双極性障害；並びに循環気質を含む。情動障害または大うつ病の患者では、脳脊髄液（ＣＳＦ）中のＣＲＦ濃度が顕著にに増加していることが示されている[C．B．Nemeroffら，Science
226：1342 (1984)；C．M．Bankiら, Am．J．Psychiatry 144：873 (1987)；R．D．Franceら, Biol．Psychiatry
28：86 (1988)；M．Aratoら, Biol．Psychiatry 25：355 (1989)]。また、自殺者の前頭皮質では、ＣＲＦ受容体密度が大幅に減少しており、このことはＣＲＦの過剰に分泌することとも合致している[C．B．Memeroffら,
Arch．Gen．Psychiatry
45:577 (1988)]。更に、うつ病患者では、アドレノコルチコトロピン（ＡＣＴＨ）の（静注による）ＣＲＦに対する反応が鈍いことが観察されている[P．W．Goldら，Am．J．Psychiatry
141：619 (1984)；F．Holsboerら，Psychoneuroendocrinology 9：147 (1984)；P．W．Goldら，New Engl．J．Med．314：1129 (1986)]。ラットおよびヒト以外の霊長類を用いた前臨床試験からも、ＣＲＦの分泌過剰がヒトのうつ病に見られる症状と関係しうるという仮説を裏づける追加的な証拠が得られている[R．M．Sapolsky，Arch．Gen．Psychiatry 46：1047 (1989)]。また、三環系抗うつ薬がＣＲＦ濃度に変化を及ぼすことにより、脳中の受容体数を調節することができることを示す予備的な証拠もある[Grigoriadisら，Neuropsychopharmacology 2：53 (1989)]。
【０００４】
ＣＲＦは、また、不安関連障害の病因との関連性が示唆されている。不安障害は、当技術分野において認知されている一群の疾患であって、恐怖性障害、不安状態、外傷後ストレス障害、全般性不安障害、社会不安障害、併発するうつ病を伴う不安症、パニック障害、強迫性障害および非定型不安障害を含む［The Merck Manual of Diagnosis and Therapy，16th edition (1992)］。情緒的ストレスは、不安障害を進行させる因子である場合が多く、このような障害は、ストレスに対する反応を抑える薬物に反応するのが一般的である。ＣＲＦの過剰なレベルは、不安惹起性作用が生じることが動物モデルでは知られている［例えばBrittonら，1982；BerridgeおよびDunn，1986，1987を参照されたい］。ベンゾジアゼピン／非ベンゾジアゼピン系抗不安薬とＣＲＦとの間の相互作用は、多くの行動学的不安モデルで実証されている［D．R．Brittonら，Life Sci．31：363 (1982)；C．W．BerridgeおよびA．J．Dunn，Regul．Peptides 16：83 (1986)]。ＣＲＦ受容体拮抗剤と推定されるヒツジα−ヘリカルＣＲＦ（９−４１）を種々の行動学的パラダイムにおいて用いた研究によって、該拮抗剤はベンゾジアゼピン類と質的に類似した「抗不安薬様」作用を及ぼすことが示されている［C．W．BerridgeおよびA．J．Dunn，Horm．Behav．21：393 (1987)，Brain Research Reviews 15:71 (1990)；G．F．KoobおよびK．T．Britton，In :Corticotropin-Releasing Factor．Basic and Clinical Studies of a Neuropeptide，E．B．De SouzaおよびC．B．Nemeroff 編.，CRC Press p．221 (1990)]。神経化学、内分泌および受容体結合に関する研究は、全てＣＲＦとベンゾジアゼピン抗不安薬との間に相互作用があることを示しており、これらの障害にＣＲＦが関与していることを示す更なる証拠となっている。クロルジアゼポキシド、ラットにおけるコンフリクト実験［K．T．Brittonら，Psychopharmacology 86：170 (1985)；K．T．Brittonら，Psychopharmacology 94：306 (1988)]および聴覚性驚愕試験（Acoustic Startle Test）[N．R．Swerdlowら，Psychopharmacology 88:147 (1986)] の両方においてＣＲＦの「不安惹起性」作用を和らげる。ベンゾジアゼピン受容体拮抗剤であるＲｏ１５−１７８８は、オペラント・コンフリクト実験において、行動活性のみを有していなかったが、ＣＲＦの作用を用量依存的に逆転させ、ベンゾジアゼピン逆作動薬であるＦＧ７１４２は、ＣＲＦの作用を亢進した［K．T．Brittonら，Psychopharmacology 94：396 (1988)]。
【０００５】
ＣＲＦ１拮抗剤のシンドロームＸの治療のための使用は、ＥＰ１０９７７０９Ａ２号に記載がある。
【０００６】
ＣＲＦ１拮抗剤のうっ血性心疾患の治療のための使用は、米国特許第６，０４３，２６０号に記載がある。
【０００７】
ＣＲＦ１拮抗剤は関節炎および炎症性障害［E．L．Websterら，J．Rheumatol 29：1252 (2002)；E．P．Murphyら，Arthritis Rheum 44：782 (2001)];ストレス関連性消化器系障害[K．E．Gabryら，Molecular Psychiatry 7：474 (2002)];および皮膚障害[C．C．Zouboulisら，Proc．Natl．Acad．Sci．99：7148 (2002)]の治療に有用であることが示唆されている。
【０００８】
動物モデルにおいて、慢性接触性皮膚炎のストレス誘発性増悪が選択的ＣＲＦ１拮抗剤によって抑制されることが最近になって示され、このことは、ＣＲＦ１が慢性接触性皮膚炎のストレス誘発性増悪に関与しており、ＣＲＦ１拮抗剤が該障害を治療する上において有用である可能性を示唆している［K．Kanekoら，Exp Dermatol，12：47 (2003)]。
【０００９】
ＷＯ０１６０８０６号は、ＣＲＦ１受容体の拮抗剤である化合物を開示している。
【００１０】
ＷＯ９７３５９０１号は、ハイ・ソリッド・コ−ティング材として使用する樹脂である化合物を開示している。以下の特許または特許出願は、ファルネシルプロテイントランスフェラーゼ阻害化合物である化合物を開示している：ＷＯ９８２９１１９号、ＷＯ９７３６８８６号およびＷＯ９７３６８９８号並びに米国特許第５８７２１３６号、５８８０１４０号および５８８３１０５号。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、新規化合物を提供することである。
【００１２】
本発明の他の目的は、新規ＣＲＦ１受容体拮抗剤を提供することである。
【００１３】
本発明の他の目的は、例えば不安障害、うつ病およびストレス関連性障害のように、ＣＲＦまたはＣＲＦ１受容体に関連した障害または状態を治療するために用いる新規化合物を提供することである。
【００１４】
本発明の他の目的は、例えば不安関連障害、気分障害およびストレス関連性障害のように、ＣＲＦまたはＣＲＦ１受容体に関連した障害または状態を治療する方法を提供することである。
【００１５】
更に、本発明の他の目的は、例えば不安関連障害、気分障害およびストレス関連性障害のように、ＣＲＦまたはＣＲＦ１受容体に関連した障害または状態を治療する上で有用な医薬組成物を提供することである。
【００１６】
本発明のその他の目的は、本出願に係る明細書にある本特許の記載から明白または明確である。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、式Ｉの化合物、
【化１】
またはその立体異性体、その薬学的に許容できる塩またはそのプロドラッグを提供するものであり、式Ｉ中、Ａｒはアリール、置換アリール、ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから選ばれ；
Ｖはヘテロアリールまたはフェニルであり、該ヘテロアリールおよびフェニルは１〜５のＲｔによって置換されてもよく；
各Ｒａはそれぞれ独立してＨ、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルから選ばれ、該アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクロアルキルは、１つから５のＲｔ、−Ｏアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｍＲｔ、ＮＲｔＲｔ、オキソ（＝Ｏ）、チオン（＝Ｓ）、フェニル、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルによって置換されてもよく；
各Ｒｔは、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎアルキルアルキル、−Ｏアルキル、−Ｏハロアルキル、ＮＨアルキル、Ｎアルキルアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｍアルキル、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨアルキル、ＳＯ２Ｎアルキルアルキル、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルから選ばれ；
ｍは０、１または２である。
【００１８】
本発明は、その一態様において、式Ｉの化合物、その立体異性体、その薬学的に許容できる塩、そのプロドラッグまたはそのプロドラッグの薬学的に許容できる塩を含む医薬組成物を提供するものである。該組成物は、錠剤、丸剤、散剤、ロゼンジ剤、小包剤（ｓａｃｈｅｔ）、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳濁液、溶液、シロップ剤、エアロゾルおよび軟膏など、任意の適切な剤型によっても、調製することができる。
【００１９】
本発明の化合物は、ＣＲＦ１受容体拮抗剤である。従って、本発明は、他の態様において、ＣＲＦ１受容体に対してアンタゴナイズするのに有効な量の本発明の化合物を動物に対して投与することを含む、温血動物のＣＲＦ１受容体に対してアンタゴナイズする方法を提供する。
【００２０】
本発明は、他の態様において、ＣＲＦ１受容体に対するリガンドをスクリーニングする方法を提供するものであり、該方法は以下を含む：ａ）ＣＲＦ１受容体、検出可能な標識による標識化を行った式Ｉの化合物および候補のリガンドを用いて競合的結合アッセイを実施すること、並びに、ｂ）該候補のリガンドが標識化を行った該化合物を置換する能力を測定すること。
【００２１】
本発明は、他の態様において、ａ）検出可能な標識で標識化を行った式Ｉの化合物を、組織との結合が可能な条件下で組織と接触させること、およびｂ）該組織と結合した該標識化合物を検出することを含む、組織中のＣＲＦ１受容体を検出する方法を提供する。
【００２２】
本発明は、更に他の態様において、ＣＲＦがＣＲＦ１受容体に対してインビトロで結合することを阻害する方法を提供するものであり、該方法は、ＣＲＦ１受容体を発現する細胞（例えばＩＭＲ３２細胞など）を含む溶液に、本発明化合物を接触させることを含み、、該化合物は、ＣＲＦがＣＲＦ１受容体に結合するのを阻害するのに十分な濃度で溶液中に存在する。
【００２３】
本発明の化合物は、温血動物において、特にほ乳類において、更に特にヒトにおいて、ＣＲＦまたはＣＲＦ１受容体に関連した種々の障害、または、ＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズすることによって治療効果が生じる或いは治療が容易になる障害を治療する上で有用である。そのような障害の例としては、不安関連障害（例えば、不安状態、全般性不安障害、社会不安障害、併発する抑うつ性疾患を伴う不安症、パニック障害、強迫性障害、恐怖症障害、外傷後ストレス障害および非定型不安障害）；情動障害としても知られる、気分障害（大うつ病、単一エピソード性うつ病、再発性うつ病、児童虐待誘発性のうつ病および産後うつ病を含むうつ病を含む、うつ病；気分変調；双極性障害；並びに循環気質）；外傷後ストレス障害；核上性麻痺；免疫抑制；薬物またはアルコール離脱症状；薬物乱用障害（例えば、ニコチン、コカイン、エタノール、アヘンその他の薬物）；炎症性障害（例えば、関節リウマチおよび骨関節炎）；不妊症を含む妊娠問題；疼痛；喘息；乾癬およびアレルギー；恐怖症；ストレス誘発性の睡眠障害；疼痛知覚（例えば、線維筋痛症）；気分変調障害；双極性障害；気分循環症；疲労症候群；ストレス性頭痛；ガン；ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染症；神経変性疾患（例えばアルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病）；消化器系疾患（例えば、潰瘍、過敏性腸症候群、クローン病、痙性結腸、下痢および術後腸閉塞、および精神病理学的障害またはストレスに関連した結腸過敏症）；摂食障害（拒食症、過食症その他の摂食に関連した障害）；出血性ストレス；ストレス誘発性の精神病性挿間症；偽甲状腺機能低下症候群（Ｅｕｔｈｙｒｏｉｄ ｓｉｃｋ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）；抗利尿ホルモン（ＡＤＨ）異常症候群；肥満；頭部外傷；脊椎外傷；虚血性神経細胞障害（例えば、脳海馬虚血のような脳虚血）；興奮毒性による神経細胞障害；てんかん；心血管系および心臓関連疾患（例えば、高血圧症、頻脈およびうっ血性心不全）；脳卒中；ストレス誘発性免疫不全を含む免疫不全（例えば、ストレス誘発性の発熱、ブタストレス症候群、ウシの出荷熱（ｂｏｖｉｎｅ ｓｈｉｐｐｉｎｇ ｆｅｖｅｒ）、ウマの発作性細動、ニワトリの監禁誘発性機能不全（ｃｏｎｆｉｎｅｍｅｎｔ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ）、ヒツジの毛刈りストレス、イヌにおけるヒト−動物との触れ合いに関係するストレス）；筋痙攣；尿失禁；アルツハイマー型老人性痴呆症；多発梗塞性痴呆；筋萎縮性側索硬化症；薬物依存症および中毒症（例えば、アルコール、コカイン、ヘロイン、ベンゾジアゼピンその他の薬物に対する依存症）；骨粗鬆症；心理社会的小人症、低血糖症および皮膚障害（例えば、座瘡、乾癬、慢性接触性皮膚炎およびストレスで増悪する皮膚障害）が含まれる。これらの化合物は、禁煙の促進、体毛の成長促進および脱毛の治療にも有用である。
【００２４】
このように、本発明は、別の態様において、温血動物における障害を治療する方法であって、該治療は、ＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズすることにより作用が及ぶ或いは容易となる障害の治療であり、該方法はそれを必要とする患者に対して式Ｉの有効な量を投与することを含む、治療方法を提供する。特に具体的例において、本発明は、ＣＲＦの分泌過剰を示す障害を治療する方法を提供する。本発明の化合物によって治療することができる障害の例には、全般性不安障害；社会不安障害；不安症；強迫性障害；併発するうつ病を伴う不安症；パニック障害；および、大うつ病、単一エピソード性うつ病、再発性うつ病、児童虐待誘発性のうつ病、産後うつ病、脱毛および接触性皮膚炎を含む、うつ病などの気分障害が含まれる。該温血動物はほ乳類であることが好ましく、更に好ましくは、該動物はヒトである。
【００２５】
本発明は、上記式Ｉの化合物を提供する。本発明の特定の化合物の具体例は、下記に記載する実施例１−２６に示しており、各化合物は、化学名と構造式の両方により特定している。
【００２６】
本発明の化合物は、以下のチャートに示す反応または、当業者に知られるその変法により、調製することができる。チャートＡに示すように、アミノピラジン体Ａ−ＩＩは、適切な官能基を有するクロロピラジン体Ａ−Ｉ（チャートＣを参照のこと）を、遷移金属触媒［例えば、酢酸パラジウム（ＩＩ）またはトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、塩基（例えば、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドまたはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド）］の存在下で適切なピロリジニルアミンと、溶媒中［例えば、トルエン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）或いはジオキサンがあるが、これに限定されない］で反応させることによって、調製することができる(例えば、Buchwald，S．L.ら，J．Org．Chem．2000，65，1158を参照されたい)。Ａ−ＩＩのハロゲン化反応は、当業者にはよく知られた、多数の方法により実施することができ、その方法としては、Ｎ−クロロコハク酸イミド、Ｎ−ブロモコハク酸イミド、Ｎ−ヨウ化コハク酸イミド、臭素、ヨウ素、三臭化ピリジニウムのような試薬を、ジクロロメタン、酢酸、ＤＭＦ等の溶媒中で用いることにより、ハロピラジン体Ａ−ＩＩＩが得られる。クレームされた化合物Ｉの形成は、Ａ−ＩＩＩと適切な金属アリール試薬とを用いた遷移金属触媒カップリング反応により合成することができ、該試薬には、例えばアリールボロン酸(例えば、Miyaura，N．らChem．Rev．1995，95，2457を参照されたい)、アリールスタンナン類（例えば、Mitchell，T．N．Synthesis
1992，803を参照されたい）またはアリールグリニャール試薬（例えば、Miller，J．A．Tetrahedron Lett．1998，39，7275を参照されたい）がある。或いは、Ａ−Ｉに対して、上述した適切な金属アリール試薬によるカップリングを行って、アリールピラジン体Ａ−ＩＶを得ることもできる。立体的に障害が少ない窒素原子の酸化は、公知の多くの酸化剤（例えば、ＭＣＰＢＡ、過酸化水素）により酸化を行うことができ、生成するＮ−オキシド化合物は、オキシ臭化リンで処理を行い、臭化ピラジン体Ａ−Ｖを得ることができる。上述したハロゲン体とアミン体との反応により、Ａ−ＶＩＩを得る。
【化２】
【００２７】
本発明の化合物を調製する他の方法をチャートＢに示す。ジアルキルジクロロピラジンＢ−Ｉ（チャートＣを参照されたい）を出発化合物とし、塩素原子を適切なピロリジニルアミン（チャートＡに記載）で順番に置換した後、適切な金属アリール試薬（チャートＡに記載）によりビアリール化を行って、Ｂ−ＩＩを得る。場合によっては、この順序を逆にして、すなわち、ビアリール化反応を行った後に、ピロリジニルアミンによる求核置換を行うこともありうる。
【化３】
【００２８】
チャートＣには、Ｒａ置換基がアルキルおよび同等体である場合のモノおよびジクロロピラジンＡ−ＩおよびＢ−Ｉの調製方法を示す。以下に示す反応経路は、Chemical and
Pharmaceutical Bulletin of Japan，1979，27，2027に記載された方法に従ったものである。
【化４】
【００２９】
２つの置換基が等価でない場合の、非対称な置換基を有するピラジンの調製方法をチャートＤに示す。この合成方法は、当業者には公知である方法を用いて、適切な保護基を有するアミノ酸（例えばＤ−Ｉ）をＮ−保護アミノ酸（例えばＤ−ＩＩ）とカップリングさせることにより開始する。Ｄ−ＩＩＩからＮ−保護基を外すことによって、Ｄ−ＩＶが得られる。Ｄ−ＩＶに環化反応を行ってＤ−Ｖとし、Ｄ−Ｖをクロロピラジンの位置異性体Ｄ−ＶＩおよびＤ−ＶＩＩへの変換は、標準的な方法（Chemical
and Pharmaceutical Bulletin of Japan，1979，27，2027を参照されたい）により行われる。
【化５】
【００３０】
チャートＥにおいて、エポキシド体Ｅ−Ｉは、市販のオレフィン化合物（２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロル−１−カルボン酸ベンジル）をＭＣＰＢＡで処理することにより調製することができる。生成するエポキシド体は、Ｊａｃｏｂｓｅｎらによるプロトコール (J．Org．Chem．1997，62，4197)
に従ってアジドにより不斉体として開環することができ、あるいは水酸化アンモニウム処理によりラセミ体として開環することができる。トランス体のアミノアルコールをシス体に変換することは、Ｊａｃｏｂｓｅｎらによるプロトコール
(J．Org．Chem．1997，62，4197) によって行う。ピロリジンアミンを塩化ピラジニルとＢｕｃｈｗａｌｄらのプロトコール(J．Org．Chem．2000，1158.)
により反応させて、目的のアニリン体を得る。ＮａＨおよびヨウ化エチルのような求電子試薬によってアルキル化を行い、必要とされるエーテル体を得る。Ｎ−ヨードコハク酸イミド（ＮＩＳ）によりハロゲン化を行って、ヨウ化化合物Ｅ−ＶＩを得る。或いは、アミノアルコールＥ−ＩＩＩは、当業者によって、異なる保護基または異なる方法で調製することもできる。
【化６】
【００３１】
本発明の化合物の別の調製方法をチャートＦに開示する。Ｆ−Ｉと適切なアリールボロン酸またはハロゲン化アリールとに対してパラジウム触媒を用いた鈴木カップリングまたは根岸カップリングを行うことにより、ビアリール化合物Ｆ−ＩＩを得る（Chem．Rev．1995，95，2457或いはTetrahedron
1998，54，263を参照されたい）。水素化反応、水素移動反応或いはルイス酸による処理によって、ＣＢＺ基を除き、アミン体Ｆ−ＩＩＩを得る。引き続いて、Ｂｕｃｈｗａｌｄ、Ｈａｒｔｗｉｇ或いはＮｏｌａｎのプロトコールに従いＮ−アリール化を行って、目的のヘテロアリール化合物Ｆ−ＩＶを得た(J．Org．Chem．2000，1158、Org．Lett．2000，1423或いはJ．Org．Chem．2001，7729を参照されたい。）。
【化７】
【００３２】
本明細書中で示した化合物は一つ以上の不斉中心または不斉面を持ち得、該化合物のあらゆるキラル体（エナンチオマーおよびジアステレオマー）およびラセミ体は本発明に含まれると解さるべきである。オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合およびその類似体の多くの幾何異性体も、本化合物中に存在することができ、そのような安定な異性体は、すべて本発明において意図されている。本発明の化合物は、ラセミ体の形でも、また、光学的に純粋な形でも分離することができ、例えば、分割剤の存在下で結晶化を行う方法或いは例えばキラルＨＰＬＣカラムを用いたクロマトグラフィー法などの通常の方法によってラセミ体の分割を行うことにより得られ、あるいは一方のエナンチオマーが多く含まれる物質の調製が可能な不斉合成反応経路によって合成することができる。本発明は、式Ｉで表される化合物のあらゆる可能な互変異性体を含む。
【００３３】
本発明は、また、式Ｉの化合物の薬学的に許容できる塩を含む。薬学的に許容できる塩の例には、無機或いは有機酸から調製する塩があり、例えば、アミンのような塩基性残基の無機或いは有機酸や、例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エテンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩化水素酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、バルビツール酸、ｐ−トルエンスルホン酸およびその類似物がある。また、該塩の例には、カルボン酸のような酸性残基のアルカリ或いは有機塩があり、例えば、以下の塩基からできるアルカリ金属或いはアルカリ土類金属塩がある：水素化ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化アルミニウム、水酸化リチウム、水酸化マグネシウム、水酸化亜鉛、アンモニア、トリメチルアンモニア、トリエチルアンモニア、エチレンジアミン、リジン、アルギニン、オルニチン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、プロカイン、ｎ−ベンジルフェネチルアミン、ジエチルアミン、ピペラジン、トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン、水酸化テトラメチルアンモニウム、およびその類似物。
【００３４】
本発明の化合物の薬学的に許容できる塩は、従来の化学的方法により調製できる。一般的には、そのような塩は、例えば、これらの化合物のフリーの酸または塩基と、水または有機溶媒或いはその両者の混合物中で化学量論的な量の適切な塩または酸とを反応させて調製する。一般的には、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール或いはアセトニトリルのような非水系溶媒が好ましい。適切な塩の一覧は、第17版のRemington's
Pharmaceutical Sciences（Mack Publishing Company，Easton，PA，1985，p.1418）にあり、この記載は、参照により本明細書中に含める。
【００３５】
本発明は、他の態様において、式Ｉの化合物のプロドラッグを提供する。該プロドラッグは、化学的安定性の向上、患者の受け入れやすさおよびコンプライアンスの向上、バイオアベイラビリティの向上、作用時間の延長、臓器選択性の向上（脳への浸透性向上を含む。）、製剤化の向上（例えば、水溶性の向上）、および／または副作用の減少（例えば、毒性）を目的として作られる。例えば、T．HiguchiおよびV．Stella,"Prodrugs
as Novel Delivery Systems"，Vol．14 of the A．C．S．Symposium Series；Bioreversible
Carriers in Drug Design，Edward B．Roche編，American Pharmaceutical
Association and Pergamon Press，(1987)を参照されたい。プロドラッグには、式Ｉの化合物から導出される化合物であって、式中に水酸基、アミン基或いはスルフヒドリル基が存在する場合には、対象に投与した際に、それぞれフリーな水酸基、アミノ基またはスルフヒドリル基となるように結合が切れるような任意の基に結合した化合物を含むが、これに限定されない。選択例としては、アルコールおよびアミン官能基の生分解性を有するアミド類および生分解性を有するエステル類および生分解性を有するカルバメート類、炭酸塩、酢酸、ギ酸および安息香酸誘導体が含まれるが、これに限定されない。
【００３６】
プロドラッグは、式Ｉの化合物から、当技術分野で公知の方法を用いて容易に調製することができる。例えば、Notari，R．E．,"Theory
and Practice of Prodrug Kinetics，"Methods in Enzymology，112：309-323 (1985)；Bodor，N.,"Novel
Approaches in Prodrug Design，"Drugs of the Future，6 (3):165-182 (1981);およびBundgaard，H．,"Design
of Prodrugs:Bioreversible-Derivatives for Various Functional Groups and
Chemical Entities,"in Design of Prodrugs (H．Bundgaard，ed.)，Elsevier，N．Y．(1985)；Burger's
Medicinal Chemistry and Drug Chemistry，Fifth Ed.，Vol．1，pp．172-178，949-982 (1995)を参照されたい。例えば、式Ｉの化合物は、一つ以上の水酸基或いはカルボキシ基をエステルに変換することによってプロドラッグに変えることができる。
【００３７】
本発明には、同位元素で標識した化合物も含まれるが、該化合物は、一つ以上の原子が、原子量または質量数が自然界で通常見られる原子量または質量数とは異なる原子によって置き換わったこと以外は、式Ｉで表される化合物と同一であるものである。本発明の化合物に含むことができる同位元素の例には、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、ヨウ素および塩素の同位元素が含まれ、例えば、３Ｈ、１１Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆおよび１２３Ｉおよび１２５Ｉがある。上述の同位元素および／または他の元素の同位元素を含む式Ｉの化合物は、本発明の範囲内である。同位元素により標識化した本発明の化合物、例えば、３Ｈおよび１４Ｃのような放射性同位元素を含むものは、薬物および／または基質の組織内分布を調べる際に有用である。三重水素、すなわち３Ｈおよび炭素１４、すなわち１４Ｃ同位元素は、特にＰＥＴ（陽電子放射断層撮影法）において有用であり、１２５Ｉは特にＳＰＥＣＴ（単一光子放射型コンピュータ断層撮影法）において有用であり、全て脳の画像撮影に有用である。更に、重水素、すなわち２Ｈなどのように重い同位元素で置換を行うことにより、代謝安定性が高くなり、それによって、例えば、インビボ半減期が長くなったり投与量を低くすることができるという一定の治療上の利点が得られ、場合によっては好ましいことがある。同位元素で標識化した式Ｉの本発明の化合物は、一般的には同位元素によって標識化した試薬を同位元素で標識化していない試薬の代わりに用いて合成反応を行うことによって、調製することができる。
【００３８】
式Ｉの化合物は、ＣＲＦ１受容体の拮抗剤であり、ＣＲＦがＣＲＦ１受容体に特異的に結合するのを阻害し、ＣＲＦ１受容体に関連した拮抗作用を及ぼすことができる。化合物のＣＲＦ受容体拮抗剤としての有効性は、種々のアッセイ法により測定することができる。式Ｉの化合物によるＣＲＦ拮抗剤としての活性は、この目的のために一般的に受け入れられている一つ以上のアッセイによって測定することができ、その方法には、DeSouzaら(J．Neuroscience
7:88,1987)およびBattagliaら(Synapse 1：572,1987)による方法があるが、これに限定されない。ＣＲＦ受容体に対する親和性は、化合物が、放射標識したＣＲＦ（例えば、［１２５Ｉ］チロシン−ＣＦＲ）のその受容体（例えば、ラットの大脳皮質の細胞膜から調製した受容体）への結合を阻害する能力を測定する結合実験により測定することができる。DeSouzaら（上述、1987）による放射性リガンド結合アッセイは、化合物のＣＲＦ受容体に対する親和性を測定するアッセイ方法を提供する。このような活性は、放射標識したリガンドが受容体に結合するのを５０％阻害するために必要な化合物濃度であるＩＣ５０値から計算するのが一般的であり、「Ｋｉ値」として記録する。ＩＣ５０値およびＫｉ値は、当技術分野で公知の標準的な方法により計算し、非線型曲線適合プログラムであるＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、サンディエゴ、ＣＡ）などにより行う。Ｋｉ値がおよそ１０マイクロモル（μＭ）未満である場合に、化合物にはＣＲＦ１受容体を阻害する活性があると考えられる。Ｋｉ値で表す式Ｉの化合物の結合親和性は、一般的にはおよそ０．５ナノモルからおよそ１０ミクロモルの範囲にある。好ましい式Ｉの化合物では、Ｋｉ値が１ミクロモル以下であり、より好ましい式Ｉの化合物では、Ｋｉ値が１００ナノモル未満であり、更に好ましい式Ｉの化合物では、Ｋｉ値が１０ナノモル未満である。
【００３９】
ＣＲＦ受容体の結合を阻害することに加えて、化合物のＣＲＦ受容体拮抗剤としての活性は、ＣＲＦに関連した活性に対して拮抗する能力によって表すことができる。例えば、ＣＲＦは、種々の生化学的反応を刺激することが知られており、その中にはアデニル酸シクラーゼ活性がある。従って、ＣＲＦ拮抗剤としての能力は、例えばｃＡＭＰ濃度を測定するなどの方法により、ＣＲＦ作用によるアデニル酸シクラーゼ活性に対して拮抗する能力として評価することができる。Battagliaら（上述、1987）によるＣＲＦ作用性アデニル酸シクラーゼ活性アッセイは、ＣＲＦ活性に拮抗する能力を測定する方法を提供する。或いは、アデニル酸シクラーゼ活性またはｃＡＭＰ産生は、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（ベッドフォード、ＭＡ）によるｃＡＭＰ競合的ＥＬＩＳＡシステムを用いた９６／３８４−ウェルフォーマットによって、提供されるプロトコールに従って測定できる。手短に述べるならば、阻害剤を加え、或いは加えないでＣＲＦにより活性化した細胞由来の検体を入れた９６或いは３８６ウェルプレートに、希釈したｃＡＭＰ−アルカリホスファターゼ（ｃＡＭＰ−ＡＰ）複合体を一定量加える。抗ｃＡＭＰ抗体を混合物に加えて、１時間インキュべーションを行う。洗浄過程を連続して行った後、化学発光基質／促進剤水溶液を加えることにより、Ｐａｃｋａｒｄ ＴｏｐＣｏｕｎｔなどのマイクロプレートシンチレーションカウンタを用いて、検出できる光信号が生じる。細胞によって生成したｃＡＭＰが抗体由来のｃＡＭＰ−ＡＰ複合体を置換し、検出できる信号が減少する。ＣＲＦで刺激されたアデニル酸シクラーゼ活性アッセイの例を下記の実施例Ｃに示す。
【００４０】
このように、本発明は、他の態様において、ＣＲＦ１受容体をアンタゴナイズするのに有効な量の本発明の化合物を動物に対して投与することを含む、温血動物のＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズする方法を提供する。該温血動物は、ほ乳類であることが好ましく、更に好ましくはヒトである。
【００４１】
本発明は、別の態様において、温血動物における障害を治療する方法であって、該障害はＣＲＦの分泌過剰を示し、或いは、ＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズすることにより、該障害の治療に効果がある或いは治療が容易となる障害の治療において、それを必要とする動物に対して本発明の化合物の治療的に有効な量を投与することを含む、治療方法を提供する。該温血動物はほ乳類であることが好ましく、更に好ましくはヒトである。
【００４２】
本発明は、他の態様において、ＣＲＦ１受容体に対するリガンドをスクリーニングする方法を提供するものであり、該方法は以下を含む：ａ）ＣＲＦ１受容体、検出可能な標識による標識化を行った式Ｉの化合物および候補のリガンドを用いて競合的結合アッセイを実施すること、並びに、ｂ）該候補のリガンドが標識化を行った該化合物を置換する能力を測定すること。競合的結合アッセイに対するアッセイ手順は、当技術分野において公知であり、実施例Ａに具体例を示す。
【００４３】
本発明は、他の態様において、ａ）検出可能な標識で標識化を行った式Ｉの化合物を、組織との結合が可能な条件下で組織と接触させること、およびｂ）該組織と結合した該標識化合物を検出することを含む、組織中のＣＲＦ１受容体を検出する方法を提供する。組織中の受容体を検知するアッセイ手順は、当技術分野において公知である。
【００４４】
本発明は、他の態様において、ＣＲＦ１受容体を発現する細胞を含む溶液に対して、本発明の化合物を接触させることを含む、ＣＲＦがＣＲＦ１受容体に対して結合することを阻害する方法を提供する。ここで、該化合物は該溶液中に、ＣＲＦがＣＲＦ１受容体への結合を阻害するのに十分な濃度で存在する。ＣＲＦ１受容体を発現し、インビトロアッセイにおいて使用することができる細胞系の例としては、ＩＭＲ３２細胞が当技術分野において知られている。
【００４５】
式Ｉの化合物、或いはその立体異性体、薬学的に許容できる塩またはプロドラッグは、温血動物におけるＣＲＦの分泌過剰を示す障害の治療、或いは、ＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズすることにより該障害の治療に効果がある、或いは治療が容易となるような障害の治療に有用である。そのような障害の例は、本明細書中に上述してある。これらの化合物は、禁煙の促進または体毛の成長促進にも有用である。
【００４６】
従って、本発明は、更に他の態様において、治療的に有効な量の本発明の化合物を温血動物に対して投与することを含む、本明細書中に上述した障害を治療する方法を提供する。該温血動物は、ほ乳類、特にヒトであることが好ましい。
【００４７】
本発明の方法によって治療することができる特定の障害は、好ましくは、以下を含む：不安関連障害、例えば、全般性不安障害、社会不安障害、併発する抑うつ性疾患を伴う不安症、強迫性障害、パニック障害、不安状態、恐怖性障害、併発する抑うつ性疾患を伴う不安症、強迫性障害、外傷後ストレス障害および非定型不安障害；気分障害、例えば、うつ病（大うつ病、単一エピソード性うつ病、再発性うつ病、児童虐待誘発性のうつ病および産後うつ病を含む）、双極性障害、外傷後ストレス障害、気分変調、および循環気質；薬物中毒障害（例えば、ニコチン、コカイン、エタノール、アヘンその他の薬物）；例えば、関節リウマチおよび骨関節炎のような炎症性障害；消化器系疾患（例えば、過敏性腸症候群、潰瘍、クローン病、痙性結腸、下痢および術後腸閉塞および精神病理学的障害またはストレスに関連した結腸過敏症）；並びに、例えば、座瘡、乾癬および慢性接触性皮膚炎のような皮膚障害。
【００４８】
本発明の方法によって治療することができる特定の障害は、より好ましくは、以下を含む：不安関連障害、気分障害、炎症性障害、および慢性接触性皮膚炎。
【００４９】
本発明の方法によって治療することができる特定の障害は、より更に好ましくは、不安関連障害、特に、全般性不安障害および気分障害を含み、特に、大うつ病を含む。
【００５０】
温血動物において上述した疾患または障害を治療する際に、治療的に有効な本発明の化合物の量は、当業者には公知の種々の方法により決定することができ、例えば、特定の症状がある動物に対して特定の薬剤の種々の量を投与して、該動物に対する作用を決定する方法がある。一般的には、本発明の化合物の治療的に有効な量としては、有効成分として体重当たり０．００２から２００ｍｇ／ｋｇ含む投与量を毎日経口で投与することができる。通常の場合には、０．０１から１０ｍｇ／ｋｇの投与量を１日１回から４回に分けて投与したり、或いは、目的とする薬学的効果を得るために持続放出製剤として投与することは有効であろう。しかしながら、特定の患者に対する特定の投与量は、用いる特定の化合物の活性、年齢、体重、全般的な健康、性別、食事、投与する時刻、投与経路、排泄率、薬物の組合せおよび特定の疾患の重症度が含まれる種々の要因に依存する。投与頻度についても、用いる化合物および治療する特定の疾患によって変わる。しかし、ほとんどのＣＮＳ障害の治療に際しては、１日当たり４回以下の投与レジメンが好ましい。しかし、ストレスおよびうつ病の治療に際しては、１日当たり１回または２回の投与レジメンが特に好ましい。
【００５１】
上記障害を治療するに当たり、本発明の化合物は、活性薬剤がほ乳類体内の作用部位に接触するような方法、例えば、経口投与、局所投与、経皮投与、非経口的投与或いは直腸投与、適切な投与剤型による吸入または噴霧によって投与することができる。本明細書において用いる「非経口的」投与という用語は、皮下注射、静脈注射、筋肉注射、胸骨注射または注入法を含む。該化合物は、単独で投与することも可能であるが、薬学的に許容できる担体、希釈剤或いは賦形剤と共に投与するのが一般的である。
【００５２】
このように、本発明は、更にその一態様において、式Ｉの化合物、その立体異性体、その薬学的に許容できる塩、そのプロドラッグまたはそのプロドラッグの薬学的に許容できる塩を含む医薬組成物を提供するものである。一実施形態において、該医薬組成物は、更に、薬学的に許容できる担体、希釈剤或いは賦形剤を含む。「薬学的に許容できる担体、希釈剤或いは賦形剤」は、生物活性薬剤をほ乳類、例えばヒトに送達するために当技術分野において一般的に許容できる媒体である。そのような担体は、一般的に、決定し、説明する当業者の権限の範囲内の多くの要因に従って製剤化される。そのような要因には、以下が含まれるが、これらに限定されるものではない：調合する活性薬剤の種類および性質、該薬剤を含む組成物を投与する対象、該組成物を投与する上で意図する経路、および目的とする治療的効能。薬学的に許容できる担体および賦形剤には、水溶性および非水溶性液体媒体が含まれる他、多くの固形および半固形の剤型を含む。このような担体には、活性薬剤の他に多数の異なる成分および添加物を含むことができ、このような追加成分は、当業者によく知られる種々の理由、例えば、活性薬剤の安定化により製剤中に含まれる。薬学的に許容できる適切な担体およびその選択に際しての要因に関する記載は、例えば、第17版のRemington's
Pharmaceutical Sciences（Mack Publishing Company，Easton，PA，1985年）などの種々の容易に入手可能な資料中に見ることができ、この内容は、参照により本明細書中に含める。
【００５３】
経口投与を意図した組成物は、錠剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、水性或いは油性懸濁液、分散性粉末或いは顆粒、エマルジョン、硬或いは軟カプセル剤、シロップ剤、エリキシル剤の剤型で用いられ、当技術分野に公知の方法により調製することができる。このような組成物には、薬剤学的に上品で口当たりの良い製剤とするために、甘味料、香味料、着色料および保存料からなる群から選ばれる一つ以上の物質を含んでもよい。
【００５４】
錠剤は、錠剤の調製に適した、無毒性の薬学的に許容できる賦形剤を有効成分とともに含む。このような賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムのような不活性の希釈剤；コーンスターチまたはアルギン酸のような顆粒化剤・崩壊剤；デンプン、ゼラチンまたはアラビアゴムのような結合剤、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクのような滑沢剤を含んでもよい。錠剤には、コーティングを施さなくてもよいし、既知の技法によってコーティングを施して、崩壊および消化管における吸収を遅らせることもある。モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリンのような遅延剤を用いてもよい。
【００５５】
経口投与用製剤は、硬ゼラチンカプセルとして調製してもよい。ここで、有効成分は、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンのような不活性な固体希釈剤と混ぜ合わせる。または、軟ゼラチンカプセルとして調製してもよい。ここで、有効成分は、水またはピーナツ油、流動パラフィンまたはオリーブ油のような油性の媒体と混合する。
【００５６】
水性懸濁液には、水性懸濁液の調製に適した賦形剤との混合物中に有効成分を含む。そのような賦形剤には、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガムおよびアラビアゴムのような懸濁剤；分散剤或いは湿潤剤は天然に生成するリン脂質であってもよく（例えば、レシチン）、或いは、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン）、或いはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、或いはエチレンオキシドと、脂肪酸とヘキシタールから得られた部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート）、或いは、エチレンオキシドと、脂肪酸と無水ヘキシトールから得られた部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレエート）であってもよい。水性懸濁液は、一つ以上の保存剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル或いはｐ−ヒドロキシ安息香酸ｎ−プロピル、一つ以上の着色料、一つ以上の甘味料、例えばショ糖またはサッカリンをも含んでもよい。
【００５７】
油性懸濁液は、有効成分を例えば、ラッカセイ油、オリーブ油、大豆油、ゴマ油またはココナツ油のような植物油若しくは流動パラフィンのような鉱物油に懸濁させて調合してもよい。油性懸濁液には、密ろう、固形パラフィンまたはセチルアルコールのような増粘剤を含んでもよい。上述したような甘味料および香味料は、口当たりの良い経口製剤とするために加えてもよい。このような組成物には、アスコルビン酸のような抗酸化剤を加えて保存ができるようにしてもよい。
【００５８】
水を加えることにより水性懸濁液を調製するのに適した分散性粉末および顆粒は、分散剤または湿潤剤、懸濁剤および一つ以上の保存剤と混合した有効成分を提供する。適切な分散剤または湿潤剤、および懸濁剤は、上述したところによって、既に例示してある。更に追加する賦形剤として、例えば、甘味料、香味料および着色料が加えられてもよい。
【００５９】
本発明の医薬組成物は、水中油型エマルジョンの形態であってもよい。油相は、植物油、例えばオリーブ油またはラッカセイ油でも、流動パラフィンのような鉱物油でも、若しくはこれらの混合物であってもよい。適切な乳化剤は、アラビアゴムまたはトラガカントガムのような天然のガム、大豆およびレシチンのような天然のリン脂質、脂肪酸とヘキシトール無水物から得られるエステル或いは部分エステル、例えば、モノオレイン酸ソルビタン、該部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンであってもよい。該エマルジョンは、甘味料および香味料を含んでもよい。
【００６０】
シロップ剤およびエリキシル剤は、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールまたはショ糖のような甘味料と共に調合してもよい。このような製剤には、粘滑剤、保存料、香味料および着色料を含んでもよい。
【００６１】
本発明の化合物の直腸投与を行うための坐薬は、該化合物を適切な非刺激性添加物とを混ぜ合わせて調製するが、該添加物は通常の温度では固体であるが、直腸内温度においては液体となって直腸内で溶解し、薬物を放出する。そのような化合物の例としては、カカオ脂およびポリエチレングリコールがある。
【００６２】
医薬組成物は、滅菌済みの水性または油性懸濁液注射剤型であってもよい。この懸濁液は、既知の手法により、適切な分散剤または湿潤剤、および懸濁剤を用いて調製してもよく、これらについては既に上述してある。滅菌済みの注射溶液または懸濁液は、無毒性の非経口的に許容できる希釈液または溶媒により調製してもよく、例えば、１，３−ブタンジオールによる溶液としてもよい。許容できる媒体または溶媒として用いてもよいものには、水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液がある。更に、通常、滅菌した不揮発性油を溶媒または懸濁媒体として用いることができる。この目的に関しては、刺激性のない不揮発性油であれば、いかなるものであっても用いることができ、合成モノまたはジグリセリドが含まれる。更に、オレイン酸のような脂肪酸は、注射剤の調製に使用する。
【００６３】
投与に適した剤型には、１つの単位当たり約１ｍｇから約１００ｍｇの有効成分を含むのが一般的である。このような医薬組成物の場合、組成物の全重量に基づいて約０．５から９５重量％の量の有効成分を含むのが通例である。本発明の化合物の投与剤型の例としては、以下を含む：（１）カプセル剤。標準の一対型硬ゼラチン・カプセルにそれぞれ１００ｍｇの粉体有効成分、１５０ｍｇの乳糖、５０ｍｇのセルロースおよび６ｍｇのステアリン酸マグネシウムを充填することによって、多数の単位カプセルを調製する；（２）軟ゼラチン・カプセル。有効成分をダイズ油、綿実油、オリーブ油などの食用油に混合し、容積移送によりゼラチン中に注入して、有効成分１００ｍｇを含む軟ゼラチン・カプセルを調製する。カプセルを洗浄し、乾燥する；（３）錠剤。投与単位は有効成分が１００ｍｇ、コロイド状二酸化ケイ素が０．２ｍｇ、ステアリン酸マグネシウムが５ｍｇ、微結晶セルロースが２７５ｍｇ、デンプンが１１ｍｇおよび乳糖が９８．８ｍｇにより、慣用方法を用いて多数の錠剤が製造される。口当たりを改善したり、吸着を遅延するために、適切なコーティングを施してもよい。
【００６４】
本発明は、更に他の態様において、以下を含む製品を提供する：ａ）包装材料；ｂ）該包装材料に入った本発明の化合物を含む医薬品；およびｃ）該医薬品が上述の障害を治療するために使用することができる旨を示すラベルまたは添付文書。
（定義および慣例表記）
【００６５】
本特許出願全体を通して、特段の定めがない限り、以下の定義を用いている。
【００６６】
「ハロゲン」という用語は、−Ｆ、−Ｃｌ、−ＢｒおよびＩから選ばれる基を意味する。
【００６７】
「アルキル」という用語は、１〜１０個の炭素原子を有する直鎖または分岐炭化水素部分を意味し、１つ以上の二重結合或いは三重結合を含んでもよい。
【００６８】
「シクロアルキル」という用語は、３〜１０個の炭素原子を有する単環式或いは二環式非芳香族炭化水素部分を意味し、１〜２個の二重結合を含んでもよい。
【００６９】
「ハロアルキル」という用語は、１〜（２ｖ＋１）個の独立して選ばれるハロゲン置換基を持つアルキル部分であり、ｖは該部分中の炭素原子数である。
【００７０】
「アリール」という用語は、フェニルまたはナフチルのいずれかを意味する。
【００７１】
「置換アリール」という用語は、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ，−Ｒａ，−ＯＲａ、−Ｓ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲａＲａ、−ＮＲａＳ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＯＲａ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲａおよびＯＣ（Ｏ）ＯＲａから独立して選ばれる１〜５の置換基で置換されたアリール基を意味する。
【００７２】
「ヘテロアリール」という用語は、５または６個の環式原子を含み、炭素と、ペルオキシドではないＯ、ＳおよびＮからなる群よりそれぞれ選ばれる１〜４個のヘテロ原子からなり、適切な結合により原子価の要求を満たす単環式芳香族化合物の基を意味する。ここで、環中の炭素またはＮが環中に存在する場合には環中のＮを介して結合してもよい。また、「ヘテロアリール」という用語は、８〜１０個の環式原子を含み、炭素と、ペルオキシドではないＯ、ＳおよびＮからなる群よりそれぞれ選ばれる１〜６個のヘテロ原子からなり、適切な結合により原子価の要求を満たす縮合二環式ヘテロ芳香族化合物の基を意味する。ここで、環中の炭素またはＮが環中に存在する場合には環中のＮを介して結合してもよい。ヘテロアリールの例には、チエニル、ベンゾチエニル、ピリジル、チアゾリル、キノリル、ピラジニル、ピリミジル、イミダゾリル、フラニル、ベンゾフラニル、ベンゾチアゾリル、イソチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイソキサゾリル、ベンゾイミダゾリル、インドリル、ベンゾオキサゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソキサゾリル、オキサゾリル、ピロリル、イソキノリニル、シンノリニル、インダゾリル、インドリジニル、フタラジニル、ピドリダジニル、トリアジニル、イソインドリル、プリニル、オキサジアゾリル、フラザニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフトリジニルおよびフロピリジニルが含まれる。
【００７３】
「置換ヘテロアリール」という用語は、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ，−Ｒａ，−ＯＲａ、−Ｓ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲａＲａ、−ＮＲａＳ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＯＲａ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲａおよびＯＣ（Ｏ）ＯＲａから独立して選ばれる１〜５個の置換基を有するヘテロアリール基を意味する。
【００７４】
「ヘテロシクロアルキル」という用語は、４員から８員の非芳香族単環或いは二環系環状基であって、少なくとも１個の炭素原子が酸素、窒素、−ＮＨ−或いは−Ｓ（Ｏ）ｍ−から選ばれるヘテロメンバーによって置き換えられており、ｍが０、１あるいは２であって、環が炭素或いは窒素原子で結合している基を意味する。ヘテロシクロアルキルは、１〜３個の二重結合を有していてもよい。ヘテロシクロアルキルの例には、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、モルホリニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、［２．２．１］−アザビシクロ環、［２．２．２］−アザビシクロ環、［３．３．１］−アザビシクロ環、キヌクリジニル、アゼチジニル、アゼチジノニル、オキシインドリル、ジヒドロイミダゾリルおよびピロリジノニルが含まれる。
【００７５】
「置換ヘテロシクロアルキル」という用語は、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、オキソ（＝Ｏ）、チオン（＝Ｓ）、−Ｒａ、−ＯＲａ、−Ｓ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｓ（Ｏ）ｍＮＲａＲａ、−ＮＲａＳ（Ｏ）ｍＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＯＲａ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｏ）ＮＲａＲａ、−ＮＲａＣ（Ｓ）ＮＲａＲａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲａおよびＯＣ（Ｏ）ＯＲａから独立して選ばれる１〜５個の置換基を有するヘテロシクロアルキル基を意味する。
【００７６】
「薬学的に許容できる」という用語は、特段の定めがない限り、ヒトおよび動物の組織と接触して使用することに適しており、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応またはその他の問題または合併症を引き起こすことなく、妥当な利益／リスク比を有すると健全な医学的見識の範囲内で判断される、化合物、化合物、組成物および／または剤型を意味する。
【００７７】
「薬学的に許容できる塩」という用語は、本発明の化合物の生物学的有効性および特性を保持し、かつ生物学的またはその他の見地から見て望ましくないものではない、塩を意味する。
【００７８】
「立体異性体」という用語は、同じ結合により結合した同じ原子からなる化合物であって、互換性のない異なる三次元構造を有する化合物を意味する。三次元構造は、形態とも呼ばれる。本明細書において用いる「エナンチオマー」という用語は、分子が互いに重ね合わせることができない鏡像関係にある２つの立体異性体を意味する。「不斉中心」とは、異なる４つの基が結合した炭素原子を言う。本明細書において用いる「ジアステレオマー」という用語は、エナンチオマーではない立体異性体を意味する。更に、１つの不斉中心のみにおいて異なる形態を有する２つのジアステレオマーは、本明細書において「エピマー」と云う。「ラセミ化合物」或いは「ラセミ混合物」という用語は、エナンチオマーの当量混合物を意味する。
【００７９】
「プロドラッグ」という用語は、インビボで式Ｉの化合物に変化する化合物を意味する。この変化は、例えば血液中での加水分解によるなど、種々の機序により起こりうる。
【００８０】
「治療的に有効な量」、「有効な量」、「治療量」或いは「有効投与量」という用語は、目的とする薬理学的或いは治療的作用を生じるのに十分な量であって、疾患の予防或いは治療に有効な量を意味する。
【００８１】
「本発明の化合物」、「提示された本発明の化合物」、「提示された本発明の複数の化合物」「式Ｉによる化合物」および類似の用語は、式Ｉの化合物、その立体異性体、その薬学的に許容できる塩、そのプロドラッグまたは式Ｉの化合物のプロドラッグの薬学的に許容できる塩を意味する。
【００８２】
「治療」、「治療する」、「治療的」および類似の用語は、障害の進行を遅らせることまたは逆転することの両方を含む他、障害を治癒することを含む。これらの用語はまた、たとえ、該障害または状態を実際に除かなくとも、また、たとえ該障害または状態の進行それ自体が遅くなったり逆転しなくても、障害または状態の１つ以上の症状を、緩和すること、改善すること、和らげること、除くことまたは低減することを含む。。「治療」および類似の用語は、更に、予防的（例えば、阻害的）および緩和的治療を含む。疾患の予防は、疾患の症状の発現を引き延ばす或いは遅延することによって明白になる。
【実施例】
【００８３】
更に説明を加えずとも、当業者であれば、これまでの記載を用いて、本発明をその最大限実施することができると考えられる。以下の実施例は、本発明を例示するために提示するものであり、本発明の範囲または精神を、実施例中に記載した特定の方法に限定するものと考えてはならない。数字の連番をつけた調製例および実施例は、本発明の化合物の調製法を例示するために提示しており、実施例Ａ−Ｄは、本発明の化合物の生物学的特性を測定するために用いることができる生物学的アッセイ法を例示するために提示している。当業者であれば、これらの例に記載した方法に対する適切な変法を瞬時にして思いつくことができよう。
（調製例１）
６−オキサ−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ベンジルの調製
【化８】
【００８４】
オレフィン（１０．０ｇ、４９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２５０ｍｌ、０．２Ｍ）溶液にＭＣＰＢＡ（２２ｇ、２．０当量）を加えた。反応混合液を４８時間撹拌し、飽和チオ硫酸ナトリウム２００ｍｌを加えた。２０分後に層を分離し、有機層を２ＮのＮａＯＨで洗浄した（２×１００ｍｌ）。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮して、表題化合物を油状物質（１０．７９ｇ、９９％）として得た。 １Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．３５，５．１３，３．９３−３．８４，３．７１，３．４３−３．３８；ＩＲ（液体）２２０９（ｗ），２０６８（ｗ），１９５８（ｗ），１７０６（ｓ），１４５５，１４４８，１４２８（ｓ），１３９７（ｓ），１３６４，１３２７（ｓ），１２１４，１２０６，１１０７（ｓ），８４８（ｓ），６９９，ｃｍ−１， Ｃ１２Ｈ１３ＮＯ３について算出した理論値：Ｃ，６５．７４；Ｈ，５．９８；Ｎ，６．３９、実測値：Ｃ，６５．４５；Ｈ，６．０７；Ｎ，５．９９。
（調製例２）
（３Ｒ，４Ｒ）−３−（アジド）−４−［（トリメチルシリル）オキシ］ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化９】
【００８５】
６−オキサ−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ベンジル（１０．４ｇ、４８ｍｍｏｌ）にＴＭＳＮ３（６．６５ｍｌ、１．０５当量）および１Ｓ，２Ｓ−（−）−［１，２−シクロヘキサンジアミノ−Ｎ，Ｎ’−ビス（３，５−ジ−ｔ−ブチルサリチリデン）］塩化クロム（ＩＩＩ）（ＳＴＲＥＭ２４−０８５１）（９０４ｍｇ，０．０３当量）を加えた。反応混合液をＮ２下で１８時間撹拌した。赤色油状物質は、そのままで次の段階に用いた。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．１８（ｍ，５Ｈ），４．９８（ｓ，２Ｈ），３．９９（ｍ，１Ｈ），３．６９（ｍ，１Ｈ），３．６１−３．５１（ｍ，２Ｈ），３．３１−３．０５（ｍ，２Ｈ）。
（調製例３）
（３Ｒ，４Ｒ）−３−アミノ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１０】
【００８６】
（３Ｒ，４Ｒ）−３−（２λ〜５〜−トリアザ−１，２−ジエニル）−４−［（トリメチルシリル）オキシ］ピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（２３．６ｇ）のＭｅＯＨ（２５０ｍｌ、０．３Ｍ）溶液をトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（１５μｌ）で１．５時間処理した。リンドラー触媒（１０ｇ）を１気圧のＨ２下で加えた。６日間撹拌を行った。（リンドラー触媒を更に５ｇ４日目に加えた。）該Ｐｄ触媒をセライトで濾過した。濾液を濃縮し、Ｅｔ２Ｏ（２５０ｍｌ）と１ＮのＨＣｌ（２５０ｍｌ）で希釈した。分離した１ＮのＨＣｌ層をＮａＯＨ（固体）でアルカリ性にしてｐＨ１２とし、ＣＨ３Ｃｌ：ｉＰｒＯＨ（９：１混合物、４×３００ｍｌ）およびＥｔＯＡｃ（３×３００ｍｌ）で抽出し、乾燥して（ＭｇＳＯ４）そのまま用いた。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ３．２２（ｍ，１Ｈ），３．３８（ｍ，２Ｈ），３．７８（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），５．１５（ｓ，２Ｈ），７．３７（ｍ，５Ｈ）。
（調製例４）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１１】
【００８７】
オーブン乾燥を行った５０ｍｌ丸底フラスコに（３Ｒ，４Ｒ）−３−アミノ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（４．２３５ｇ、１７．９３ｍｍｏｌ）を入れ、６０ｍｌのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）に溶解した。無水トリフルオロ酢酸（２．５４ｍｌ、１７．９３ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（３ｍｌ、２１．５２ｍｍｏｌ）を０℃で順次加えた。反応液を室温にし、一晩撹拌を行った。反応液をＨ２Ｏ（２５０ｍｌ）で希釈し、２５０ｍｌのＣＨＣｌ３：ｉＰｒＯＨ混合液（９：１、ｘ４）で抽出して、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。
【００８８】
この粗製物のトリフルオロアミド生成物（ＬＣ−ＭＳにより確認）を９０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２（０．２Ｍ）に溶解し、Ｎ２下で０℃に冷却した後、ＴＥＡ（２１．５２ｍｍｏｌ、３ｍｌ）およびＭｓＣｌ（１．６３ｍｌ、１９．７２ｍｏｌ）を加えた。反応液を０℃で１５分、室温で１時間撹拌してから、ＤＢＵ（５．３９ｍｌ、５３．７９ｍｍｏｌ）を加えた後、一晩撹拌した。反応混合物をシリカで濾過し、８００ｍｌ（ＥｔＯＡｃを８０％含むヘプタン）で洗浄した。濾液を集めて濃縮した。
【００８９】
オキサゾリンに８０ｍｌのＭｅＯＨ／４０ｍｌのＨ２Ｏ中のＫ２ＣＯ３（１４．８７ｇ）を加えて、１８時間加水分解を行った。容量を減らし、２００ｍｌ（ＣＨＣｌ３：ｉＰｒＯＨが９：１）で５回抽出した。有機溶媒を合わせて、乾燥し（Ｋ２ＣＯ３）、濾過し、濃縮し、バイオタージクロマトグラフィー（１％から５％のＭｅＯＨのＣＨ２Ｃｌ２溶液、０．５％ＮＨ４ＯＨ）で精製して表題化合物を固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ３．２２（ｍ，１Ｈ），３．３８（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），５．１５（ｓ，２Ｈ），７．４０（ｍ，５Ｈ）；ＩＲ（拡散反射法）３３７４，２９４９，２３１６（ｗ），１９６６（ｗ），１９４７（ｗ），１６８６（ｓ），１４５０（ｓ），１４２３（ｓ），１３５４，１３２１，１１４４，１０９６，１０８４，７６５，６９５，ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ１２Ｈ１６Ｎ２Ｏ３＋Ｈについて算出した理論値２３７．１２３９、実測値２３７．１２３６。比旋光度（２５ Ｃ Ｄ）＝−１７（ｃ ０．９７、クロロホルム）。
（調製例５）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチルピラジン−２−イル）アミノ］−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１２】
【００９０】
２５０ｍｌ丸底フラスコに（３Ｒ，４Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（４．９７１４ｇ、２１．０４ｍｍｏｌ）、塩化物（３．９４９ｇ、２３．１５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１０ｍｏｌ％、１．９２６ｇ）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ビフェニル（２０ｍｏｌ％、１．６５６ｇ）およびＤＭＥ（１１０ｍｌ）を順次加えた。次にＣｓ２ＣＯ３（９．５７ｇ）を加えて、反応混合物を８０℃で２０時間撹拌した。冷却し、Ｅｔ２Ｏ（１００ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３（８０ｍｌ）に注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍｌ×３）で抽出し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。バイオタージクロマトグラフィー（ヘプタン中３５％ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．２８（ｍ，６Ｈ），２．６５（ｍ，４Ｈ），３．３６（ｍ，１Ｈ），３．６３（ｍ，１Ｈ），３．７３（ｍ，１Ｈ），４．００（ｍ，１Ｈ），４．５１（ｍ，１Ｈ），４．６４（ｍ，１Ｈ），４．８０（ｍ，１Ｈ），５．１８（ｓ，２Ｈ），７．３８（ｍ，６Ｈ），７．７４（ｄ，１Ｈ）；ＩＲ（液体）２９６９，２３４４（ｗ），１９９６（ｗ），１９５２（ｗ），１７０３（ｓ），１６９１（ｓ），１５４６，１４９９（ｓ），１４４９（ｓ），１４２６（ｓ），１３９５，１３５９（ｓ），１１７５，１１３３，１０９５，ｃｍ−１：ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ２０Ｈ２６Ｎ４Ｏ３＋Ｈについて算出した理論値３７１．２０８３、実測値３７１．２０８９。
（調製例６）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチルピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１３】
【００９１】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチルピラジン−２−イル）アミノ］−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（１７．７０ｇ、４７．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３Ｍ）溶液にＮ２下０℃でＮａＨ（２．４８ｇ、１．３当量）を数回に分けて加えた。１５分後にヨウ化エチル（４．９３ｍｌ、１．３当量）を滴下した。２時間後に、反応混合液にブライン（２００ｍｌ）を加えてクエンチングし、２×２００ｍｌの酢酸エチルで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。真空クロマトグラフィー（ｖａｃｕｕｍ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）を１Ｌガラス・ロートにて行い、２０−４０％の酢酸エチル／ヘプタンで溶出して、油状物質１４．６４ｇ（７７％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ７．６８，７．３７，５．１９，５．０８，４．７２，４．０６，３．９８，３．７４−３．５６，３．４５，３．２６，２．６３，１．３４−１．２２；ＩＲ（液体）２９７１（ｓ），２９３６，２３４０（ｗ），１９５０（ｗ），１７０９（ｓ），１５４６（ｓ），１４９９（ｓ），１４６４（ｓ），１４４８（ｓ），１４２２（ｓ），１３９５（ｓ），１３５０（ｓ），１１７３，１１２９（ｓ），１０９７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２２Ｈ３０Ｎ４Ｏ３＋Ｈ１について算出した理論値３９９．２３９６、実測値３９９．２３９２。比旋光度（２５ Ｃ Ｄ）＝−５０（ｃ ０．５５，０．１Ｎ ＨＣｌ）。
（調製例７）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチル−５−ヨードピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１４】
【００９２】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチル−５−ヨードピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸メチルの製造方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチルピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用いることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．３０−７．２５，５．０６，４．９６，４．５３，３．９６，３．８６，３．６４−３．４７，３．３５，３．２５−３．１３，２．６８，２．５１，１．２０−１．１２；ＩＲ（液体）２９７２，２３３８（ｗ），１９４９（ｗ），１７０８（ｓ），１５５４（ｓ），１５３７（ｓ），１４７５（ｓ），１４５６（ｓ），１４４７（ｓ），１４２１（ｓ），１３９４（ｓ），１３５１（ｓ），１１６５，１１２６，１０９７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２２Ｈ２９Ｎ４Ｏ３Ｉ＋Ｈ１に対する理論値５２５．１３６４、実測値５２５．１３５９。Ｃ２２Ｈ２９ＩＮ４Ｏ３に対する理論値：Ｃ，５０．３９；Ｈ，５．５７；Ｎ，１０．６８、実測値：Ｃ，５０．４８；Ｈ，５．６０；Ｎ，１０．４４。
（調製例８）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３、６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１５】
【００９３】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチル−５−ヨードピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（１．９３ｇ）のエチレングリコールジメチルエーテル（１８．４ｍｌ）溶液に、２−ジメチルアミノ−４−メチル−５−ピリジルボロン酸（１．３２ｇ、２当量）およびテトラキスパラジウム化合物（４２５ｍｇ、０．１当量）と２Ｎ炭酸ナトリウム（３．７ｍｌ）を加えた。反応混合液を８０℃で１８時間加熱し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍｌ）に注ぎ、１００ｍｌ酢酸エチルで２回抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。バイオタージＭＰＬＣにより、２０−７０％酢酸エチル／ヘプタンで溶出して精製し、表題化合物を油状物質（７６０ｍｇ、３９％）として得た。 １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．９８，７．４０−７．３４，６．４５，５．１８−５．０６，４．７４，４．０９，３．９７，３．７６−３．３０，３．１２，２．６８，２．５３，２．１１，１．３１−１．２４，１．１４；ＩＲ（拡散反射法）２９７１，２９３２，２４５３（ｗ），２３４０（ｗ），１９４９（ｗ），１７０８（ｓ），１６０５（ｓ），１５６６，１４９０（ｓ），１４４５（ｓ），１４１８（ｓ），１３９５（ｓ），１３５０（ｓ），１１２７，１０９５ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ３０Ｈ４０Ｎ６Ｏ３＋Ｈ１について算出した理論値５３３．３２４０、実測値５３３．３２４０。
（調製例９）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２，４−ジクロロフェニル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１６】
【００９４】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製方法に従い、替わりに２，４−ジクロロフェニルボロン酸を代用し、軽度の変更を用いることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．４９，７．４０−７．２５，５．２０−５．１３，４．７６，４．１１，３．９８，３．７３−３．６０，３．５１−３．３１，２．７０，２．４７，１．３１−１．２４，１．１５；ＩＲ（液体）２９７２，２３４２（ｗ），１９４８（ｗ），１７０９（ｓ），１５６７，１５５２，１４９８（ｓ），１４７０（ｓ），１４４９（ｓ），１４２０（ｓ），１３９７（ｓ），１３５０，１１２６，１１００（ｓ），１０８０，ｃｍ−１。
（調製例１０）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１７】
【００９５】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３、６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製方法に従い、替わりに２−クロロ−４−メトキシフェニルボロン酸を代用し、軽度の変更を用いることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ）１．０４，１．１６，２．３８，２．６８，３．３４，３．４０，３．５４，３．７０，３．８２，４．１８，４．６２，５．１０，５．９５，６．９８，７．１０，７．２６，７．３８；ＩＲ（拡散反射法）２９７１，２９３４，２３５０（ｗ），２３３８（ｗ），２０６３（ｗ），１９４９（ｗ），１７１０（ｓ），１５６８，１４８２（ｓ），１４１９（ｓ），１３９７（ｓ），１３４８，１２８７，１２２８，１０９６，ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ２９Ｈ３５ＣｌＮ４Ｏ４＋Ｈについて算出した理論値５３９．２４２５、実測値５３９．２４３６。Ｃ２９Ｈ３５ＣｌＮ４Ｏ４について算出した理論値：Ｃ，６４．６１；Ｈ，６．５４；Ｎ，１０．３９；Ｃｌ，６．５８、実測値：Ｃ，６４．３０；Ｈ，６．５６；Ｎ，１０．２６。
（調製例１１）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１８】
【００９６】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製方法に従い、替わりに６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イルボロン酸を用いることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．４１−７．３６，６．６４，５．１７−５．１５，４．７８，４．１１，４．０２−３．９７，３．７３−３．３５，２．７０，２．４６，２．２８，１．３２−１．２１，１．１３；ＩＲ（液体）２２３６（ｗ），２０１８（ｗ），１９４９（ｗ），１７０９（ｓ），１５９６，１５６５，１４９９，１４７４（ｓ），１４２０（ｓ），１３９６，１３６０，１３５０，１３０４（ｓ），１１２６，１０９７ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２９Ｈ３７Ｎ５Ｏ４＋Ｈ１について算出した理論値 ５２０．２９２４、実測値５２０．２９２４。
（調製例１２）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化１９】
【００９７】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製方法に従い、替わりに２−メチル−４−メトキシ−フェニルボロン酸を用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．０４，１．２１，２．０４，２．４０，２．６５，３．２２−３．２６，３．４１，３．５２−３．６８，３．７５，３．９４，４．０３，４．６８，５．０８，６．７０，６．７４，７．０２，７．２８−７．３２；ＩＲ（液体）２９７１（ｓ），２３３９（ｗ），２１６６（ｗ），２０８２（ｗ），１９５７（ｗ），１７０８（ｓ），１５６４（ｓ），１４８２（ｓ），１４２０（ｓ），１３９５（ｓ），１３４９（ｓ），１２４２（ｓ），１１６９（ｓ），１１２５（ｓ），１０９６（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ３０Ｈ３８Ｎ４Ｏ４＋Ｈ１について算出した理論値５１９．２９７１、実測値５１９．２９７４。
（調製例１３）
６−メトキシ−３−ニトロ−２−（トリフルオロメチル）ピリジンの調製
【化２０】
【００９８】
２−クロロ−６−メトキシ−３−ニトロピリジン（５ｇ）をＣｕＩ（６．０５ｇ）、ＫＦ（無水物、３．０ｇ）、２−クロロ−２，２−ジフルオロ酢酸メチル（６．８ｍｌ）と共にＤＭＦ（２８ｍｌ）中で１３０℃で８時間加熱した。冷却した後、１：９のＮＨ４ＯＨ／ＮＨ４Ｃｌ混合液（１００ｍｌ）中に注ぎ、均一になるまで撹拌し、酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせて、ブラインで洗い、乾燥した（ＭｇＳＯ４）。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ヘプタン中に１−３％ＥｔＯＡｃ）により、３．９０ｇ（６５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ４．０２，６．９６，８．１０；ＩＲ（液体）２３８９（ｗ），２２５４（ｗ），２１９６（ｗ），２１６３（ｗ），２０１７（ｗ），１６０５（ｓ），１５８６（ｓ），１５３８（ｓ），１４８２（ｓ），１３４０（ｓ），１２９０（ｓ），１２６１（ｓ），１２０５（ｓ），１１８０（ｓ），１１５５（ｓ）ｃｍ−１；Ｃ７Ｈ５Ｆ３Ｎ２Ｏ３について算出した理論値：Ｃ，３７．８５；Ｈ，２．２７；Ｎ，１２．６１；Ｆ，２５．６６、実測値：Ｃ，３７．６８；Ｈ，２．２９；Ｎ，１２．３０。
（調製例１４）
６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミンの調製
【化２１】
【００９９】
６−メトキシ−３−ニトロ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン（３．６１ｇ）の９５％エチルアルコール溶液（１６２ｍｌ）に塩化スズ（ＩＩ）二水和物を加え、７０℃で３時間加熱した。室温まで冷却した後、氷水に注ぎ、２ＮのＮａＯＨでｐＨを１１に調節した。酢酸エチルを加えてよく撹拌し、セライトで濾過した。有機層を分離して、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ヘプタン中に３−８％ＥｔＯＡｃ）によって、表題化合物を得た（２．２０ｇ、７１％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ３．８１，６．７０，７．０５；１９Ｆ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ６５．７３；ＩＲ（液体）２４３４（ｗ），２３８９，２２７２，２２２９，２１７４，１４８８（ｓ），１４３６（ｓ），１４２６（ｓ），１２７６（ｓ），１１７０（ｓ），１１０２（ｓ，ｂ），１０５０（ｓ），１０２４（ｓ），７４０（ｓ），６５８（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ７Ｈ７Ｎ２ＯＦ３＋Ｈ１について算出した理論値１９３．０５８９、実測値１９３．０５８１。Ｃ７Ｈ７Ｆ３Ｎ２Ｏについて算出した理論値：Ｃ，４３．７６；Ｈ，３．６７；Ｎ，１４．５８；Ｆ，２９．６６、実測値：Ｃ，４３．６１；Ｈ，３．４９；Ｎ，１４．４９。
（調製例１５）
３−ヨード−６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジンの調製
【化２２】
【０１００】
６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミン（１ｇ）をＨ２ＳＯ４（３ｍｌ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（３ｍｌ）中の亜硝酸ナトリウム（７１８ｍｇ）を０℃で反応混合液に滴下した。０℃で２時間撹拌した後、室温にもどした。Ｈ２Ｏ（３ｍｌ）中のヨウ化カリウム（１．７３ｇ）を反応混合液に滴下し、６０℃で３時間加熱した。酢酸エチルで抽出し、チオ硫酸ナトリウム水溶液（飽和）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ヘプタン中に１−５％ＥｔＯＡｃ）によって、表題化合物を得た（３．４７ｇ、６７％）。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ３．９７，６．６８，８．０８；１９Ｆ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３） δ ６６．１６；ＩＲ（液体）２４７８（ｗ），２３６４（ｗ），２２３０（ｗ），２１７３（ｗ），２０２６（ｗ），１５８５（ｓ），１４７１（ｓ），１４２２（ｓ），１３９６（ｓ），１３３８（ｓ），１２８０（ｓ），１２３８（ｓ），１２００（ｓ），１１８０，１１４０（ｓ）ｃｍ−１；Ｃ７Ｈ５Ｆ３ＩＮＯについて算出した理論値：Ｃ，２７．７５；Ｈ，１．６６；Ｎ，４．６２；Ｆ，１８．８１、実測値：Ｃ，２７．９３；Ｈ，１．８０；Ｎ，４．６２。
（調製例１６）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）ピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化２３】
【０１０１】
３−ヨード−６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン（１６２ｍｇ、３当量）および塩化亜鉛（０．５Ｍ ＴＨＦ、９当量）のＴＨＦ（２．６７ｍｌ）溶液にＮ２下−７８℃でｔ−ブチルリチウム（９当量）を加えた。５分後に、反応混合液を室温に加温し、（３Ｒ，４Ｓ）−３−［（３，６−ジエチル−５−ヨードピラジン−２−イル）アミノ］−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（１２０ｍｇ）およびテトラキスパラジウム（３１ｍｇ）を入れたフラスコにカニューレで移した。反応混合液を１６時間加熱還流し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）に注ぎ、５０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。ＭＰＬＣクロマトグラフィーにより、２０−４５％酢酸エチル／ヘプタンで溶出して精製し、表題化合物をアモルファス固体（６３ｍｇ、５３％）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．０５，１．１８，２．３４，２．６３，３．２１−３．３２，３．３８，３．５７，３．６５，３．９０，３．９５，４．０３，４．６６，５．０８，５．１５，６．８８，７．２８−７．３２，７．４６；ＩＲ（液体）２３４６（ｗ），２１７８（ｗ），２０２６（ｗ），１９５１（ｗ），１７０９（ｓ），１４８０（ｓ），１４２１（ｓ），１４００（ｓ），１３４４（ｓ），１２７９（ｓ），１２３９（ｓ），１１９２（ｓ），１１７６（ｓ），１１３７（ｓ），１０９７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２９Ｈ３４Ｎ５Ｏ４Ｆ３＋Ｈ１について算出した理論値５７４．２６４１、実測値５７４．２６４４。Ｃ２９Ｈ３４Ｆ３Ｎ５Ｏ４について算出した理論値：Ｃ，６０．７２；Ｈ，５．９７；Ｎ，１２．２１；Ｆ，９．９４、実測値：Ｃ，６０．８８；Ｈ，６．１２；Ｎ，１２．０１。
（調製例１７）
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製
【化２４】
【０１０２】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルの調製方法に従い、替わりに２，６−ジメトキシピリジン−３−イルボロン酸を用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．５３，７．４０−７．２８，６．４２，５．１７，５．０７，４．７６，４．１５，４．０１，３．８７，３．９２，３．７６−３．６４，３．５０−３．３３，２．７０，２．５１，１．３２−１．２４，１．１８；ＩＲ（拡散反射法）２４１６（ｗ），２３４９（ｗ），２３２５（ｗ），２２６５（ｗ），２１８４（ｗ），１７０９（ｓ），１６０２（ｓ），１５７９（ｓ），１４７５（ｓ），１４５８（ｓ），１４１９（ｓ），１３９７（ｓ），１３７６（ｓ），１３１２（ｓ），１１０１（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２９Ｈ３７Ｎ５Ｏ５＋Ｈ１について算出した理論値５３６．２８７３、実測値５３６．２８６７。Ｃ２９Ｈ３７Ｎ５Ｏ５について算出した理論値：Ｃ，６５．０３；Ｈ，６．９６；Ｎ，１３．０７、実測値：Ｃ，６４．７１；Ｈ，７．０３；Ｎ，１２．８２。
（調製例１８）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化２５】
【０１０３】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２，４−ジクロロフェニル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（８．６０ｇ、１５．８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（０．１Ｍ、１５８ｍｌ）溶液に、Ｎ２下で塩化パラジウム（２７９ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３．２９ｍｌ、１．５当量）を加えた。トリエチルシラン（３．７８ｍｌ、１．５当量）を１５分かけて滴下した。１時間後に、トリエチルシランを更に８．７４ｍｌ滴下した。更に２時間後、反応混合液をセライトで濾過した。トリフルオロ酢酸（８ｍｌ）を加え、反応混合液を３０分間撹拌した。２ＮのＮａＯＨでｐＨを１０にしてクエンチングし、３００ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で３回抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。真空クロマトグラフィーを１Ｌガラスロートで、０．５％ＮＨ４ＯＨを含む５−１５％のＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２にて行い、油状の化合物５．９５ｇ（９２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．４９，７．３３−７．２６，５．３８，４．５４，４．０７，３．６８，３．５２，３．２２，２．９５，２．７１，２．４６，１．２９，１．１５；ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ２０Ｈ２６Ｃｌ２Ｎ４Ｏ＋Ｈについて算出した理論値４０９．１５６２、実測値４０９．１５６７。Ｃ２０Ｈ２６Ｃｌ２Ｎ４Ｏについて算出した理論値：Ｃ，５８．６８；Ｈ，６．４０；Ｎ，１３．６９、実測値：Ｃ，５８．４２；Ｈ，６．４３；Ｎ，１３．５０。
（調製例１９）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化２６】
【０１０４】
（５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用い、軽度の変更を加えることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．１５，１．２２−１．３４，２．４５，２．７１，２．８９，３．０６，３．２２，３．４１，３．５１，３．６５，３．８５，４．５１，５．３２，６．８８，７．０２，７．２４；ＩＲ（液体）２９７１（ｓ），２９３５，２４９６（ｗ），２４４６，２４０２（ｗ），２２６１（ｗ），２０７２（ｗ），１６０５，１５６６（ｓ），１４８３（ｓ），１４４１，１３９５，１２８７（ｓ），１２３０（ｓ），１０４５（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２１Ｈ２９Ｎ４Ｏ２Ｃｌ＋Ｈ１について算出した理論値４０５．２０５７、実測値４０５．２０４４。
（調製例２０）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製
【化２７】
【０１０５】
（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジル（１．３５ｇ）のエタノール（２６ｍｌ）溶液に１，４シクロヘキサジエン（２．４５ｍｌ、１０当量）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１．５ｇ）を加えた。反応混合液を２時間撹拌し、セライトで濾過し、濃縮した。ＭＰＬＣクロマトグラフィーにより、０．５％水酸化アンモニウムを含む２−６％メタノール／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出して精製し、表題化合物を琥珀色の油状物質（８７０ｍｇ、８７％）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．４１，６．６４，５．３４−５．３２，４．５２，４．０５，３．９７，３．６８，３．５３，３．４３，３．２２，３．１５，２．９２，２．７０，２．４６，２．２９，１．３２−１．２５，１．１４；ＩＲ（液体）２９７２，２９３５，２４０８（ｗ），２２３８（ｗ），２０１９（ｗ），１９７１（ｗ），１５９６，１５６３（ｓ），１４９９，１４７４（ｓ），１４２６，１３９４，１３０４（ｓ），１２５１，１０４２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２１Ｈ３１Ｎ５Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値３８６．２５５６、実測値３８６．２５４４。
（調製例２１）
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化２８】
【０１０６】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−３、６−ジエチルピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用いることによって、油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．９８，６．４５，５．３０，４．５１，４．０４，３．６７，３．５２，３．４３，３．１９，３．１２，２．９２，２．６９，２．５１，２．１１，１．３２−１．２５，１．１５；ＩＲ（液体）２９７１（ｓ），２９３３（ｓ），２８７３（ｓ），２３４５（ｂ），１９４６（ｗ），１６０７（ｓ），１５６５（ｓ），１５１６（ｓ），１４９０（ｓ），１３９５（ｓ），１３７３，１２０７，１１６３，１１２５，１０８０ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２２Ｈ３４Ｎ６Ｏ＋Ｈ１について算出した理論値３９９．２８７２、実測値３９９．２８７７。
（調製例２２）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンの調製
【化２９】
【０１０７】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用いることによって、琥珀色油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．１２，１．３０，２．１２，２．４６，２．７２，２．９２−３．１４，３．３６，３．５２，３．６３−３．８２，３．８４，４．１８−４．２４，４．７１−４．８６，５．１１−５．２２，６．７８，６．８３，７．０９；ＩＲ（拡散反射法）２９７０（ｓ），２９３３（ｓ），２８７５，２８３５，２４９３（ｂ），２４６７（ｂ），２４３９（ｂ），２３５３，２３３８（ｗ），１５６８（ｓ），１５６３，１４８２（ｓ），１３９７（ｓ），１３９３，１２４２（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２２Ｈ３２Ｎ４Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値３８５．２６０３、実測値３８５．２６０３。
（調製例２３）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンの調製
【化３０】
【０１０８】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−（｛３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−イル｝アミノ）−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用いることによって、琥珀色油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．１３，１．２８，２．４１，２．６９，３．１４，３．３７，３．５１，３．６６−３．７５，４．０４，４．１６，４．６９，５．２９，６．９６，７．５４；ＩＲ（液体）２９７５（ｓ），２４１７（ｂ），２１７７（ｂ），２０２９（ｗ），１９２３（ｗ），１６０９（ｓ），１５６５（ｓ），１４７９（ｓ），１４００（ｓ），１３４１（ｓ），１２７８（ｓ），１２３９（ｓ），１１９２（ｓ），１１７７（ｓ），１１３８（ｓ）ｃｍ−１。
（調製例２４）
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３１】
【０１０９】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに（３Ｒ，４Ｓ）−３−｛［５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−３，６−ジエチルピラジン−２−イル］アミノ｝−４−エトキシピロリジン−１−カルボン酸ベンジルを用いることによって、琥珀色油状の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．５３，６．４２，５．２９，４．５２，４．０４，３．９８，３．９２，３．６６，３．５１，３．４０，３．２１，３．１２，２．９１，２．７２，２．４８，１．２８，１．１８；ＩＲ（液体）２９７２，２４１８（ｗ），２１８４（ｗ），２０３６（ｗ），１９９３（ｗ），１６０３，１５８１（ｓ），１５６４，１４７７（ｓ），１４２３，１３９５，１３７６（ｓ），１３１３（ｓ），１２３３，１０２２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２１Ｈ３１Ｎ５Ｏ３＋Ｈ１について算出した理論値４０２．２５０５、実測値４０２．２５１６。
（実施例1）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル］ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３２】
【０１１０】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン（１２０ｍｇ）のエチレングリコールジメチルエーテル（０．５８６ｍｌ）溶液に、２−ブロモ−１，３−チアゾール（０．０４０ｍｌ、１．５当量）、炭酸セシウム（１４４ｍｇ、１．５当量）、Ｎ−［２’−（ジシクロヘキシルホスフィノ）−１，１’−ビフェニル−２−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミン（１６ｍｇ，０．１４当量）およびトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（１９ｍｇ、０．７当量）を加えた。反応混合液を１００℃で１６時間加熱し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）に注ぎ、５０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。ＭＰＬＣクロマトグラフィーにより、１０−３０％酢酸エチル／ヘプタンで溶出して精製し、表題化合物をアモルファス固体（７７ｍｇ、５０％）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．５０，７．３４，７．２８−７．２３，６．５３，５．３０，４．９２，４．２７，４．０２，３．８２−３．７２，３．５５，３．４６，２．７２，２．４８，１．３３−１．２７，１．１６；ＩＲ（液体）２９７２（ｓ），２９３４，２３３５（ｗ），１５６４（ｓ），１５３９（ｓ），１４９４（ｓ），１４７０（ｓ），１３９６（ｓ），１３５７，１３５０，１２０１，１１４１，１１２１（ｓ），１１０１，６１０ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２３Ｈ２７Ｎ５ＯＳＣｌ２＋Ｈ１について算出した理論値４９２．１３９１、実測値４９２．１３７８。
（実施例２）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３３】
【０１１１】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、２−ブロモピリジンを代用することによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．２０，７．５０，７．３２，７．２８，６．６９，６．５３，５．３３，４．９２，４．２８，４．０５，３．９２−３．７８，３．５８，３．４２，２．７３，２．５０，１．３３−１．２５，１．１６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ２９Ｎ５ＯＣｌ２＋Ｈ１について算出した理論値４８６．１８２７、実測値４８６．１８２７。
（実施例３）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−３−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３４】
【０１１２】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに３−ブロモピリジンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．９７，７．５１，７．４６，７．３３−７．２８，７．１１，５．３１，４．９２，４．３１，３．９２，３．８５，３．７８−３．３３，２．７３，２．４９，１．３５−１．２９，１．１６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ２９Ｎ５ＯＣｌ２＋Ｈｌについて算出した理論値４８６．１８２７、実測値４８６．１８３４。
（実施例４）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−４−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３５】
【０１１３】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに４−ブロモピリジンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．２３，７．５０，７．３５，７．２８，６．５０，５．３０，４．９０，４．２９，３．９５，３．７６，３．６５−３．５８，３．４２，２．７３，２．４９，１．３５−１．２７，１．１６；ＩＲ（拡散反射法）２９７１（ｓ），２４９７（ｗ），２３８８（ｗ），２３５０（ｗ），２３３８（ｗ），２３２８（ｗ），１５９６（ｓ），１５６９，１５５０（ｓ），１５１６，１５０８，１４９９（ｓ），１４６７（ｓ），１３９７（ｓ），１３９３（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ２９Ｎ５ＯＣｌ２＋Ｈ１について算出した理論値４８６．１８２７、実測値４８６．１８１０。
（実施例５）
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化３６】
【０１１４】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリミジンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．３８，７．５０，７．３２，７．２６，６．５６，５．３０，４．９１，４．２５，３．９４，３．７６，３．５５，２．７３，２．４７，１．３３−１．２６，１．１６；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２４Ｈ２８Ｎ６ＯＣｌ２＋Ｈ１について算出した理論値４８７．１７８０、実測値４８７．１７７０。
（実施例６）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製
【化３７】
【０１１５】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミン（１１２ｍｇ）のジオキサン（１．４５ｍｌ）溶液に、２−ブロモピリミジン（６９ｍｇ、１．５当量）、１，３ビス（２，６−ジイソプロピルフェニル）イミダゾリウムクロリド（２０ｍｇ，０．１６当量）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（２１ｍｇ、０．８当量）、およびカリウムｔ−ブトキシド（４９ｍｇ、１．５当量）を加えた。反応混合液を１００℃で１６時間加熱し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）に注ぎ、５０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。ＭＰＬＣクロマトグラフィーにより、２０−５０％酢酸エチル／ヘプタンで溶出して精製し、表題化合物をアモルファス固体（７０ｍｇ、５２％）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．３６，７．４２，６．６３，６．５４，５．２４，４．９０，４．２４，３．９７，３．９２，３．８１−３．７４，３．５７−３．４６，２．７１，２．４７，２．２９，１．３３−１．２６，１．１５；ＩＲ（液体）２９７２，２３９７（ｗ），２３０７（ｗ），２２１４（ｗ），２０１９（ｗ），１９４５（ｗ），１５８５（ｓ），１５６５（ｓ），１５４８（ｓ），１５１０（ｓ），１４７４（ｓ），１３９５，１３８４，１３０４（ｓ），１０４２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ３３Ｎ７Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値４６４．２７７４、実測値４６４．２７６６。
（実施例７）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製
【化３８】
【０１１６】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．２０，７．５０，７．４２，６．６５，６．６０，６．４３，５．２８，４．９０，４．２６，４．０４，３．９７，３．７９−３．７５，３．５６，３．４１，２．７３，２．４８，２．２９，１．３３−１．２６，１．１５；ＩＲ（拡散反射法）２３５８（ｗ），２０１８（ｗ），１９３３（ｗ），１５９８（ｓ），１５６１，１４９４，１４７２（ｓ），１４４３，１３９２，１３６０，１３０３，１２５０，１１２２，１０４１，７６９ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３４Ｎ６Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値４６３．２８２１、実測値４６３．２８１６。
（実施例８）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製
【化３９】
【０１１７】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモ−１，３−チアゾールを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．４２，７．２５，６．６５，６．５４，５．２４，４．９２，４．２７，４．０２，３．９７，３．８８−３．７９，３．５６−３．４６，２．７０，２．４８，２．２９，１．３３−１．２７，１．１５；ＩＲ（液体）２９７２，２４１０（ｗ），２２３７（ｗ），２０１９（ｗ），１９７２（ｗ），１５９６（ｓ），１５６３（ｓ），１５４０（ｓ），１４９３（ｓ），１４７４（ｓ），１４２６，１３９５（ｓ），１３０４（ｓ），１２５１，１０４２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２４Ｈ３２Ｎ６Ｏ２Ｓ＋Ｈ１について算出した理論値４６９．２３８６、実測値４６９．２３７５。
（実施例９）
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４０】
【０１１８】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンおよび５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．１９，７．９９，７．４７，６．５８，６．４６，６．４１，５．２５，４．９０，４．２５，４．０２，３．８０−３．７２，３．５５，３．４０，３．１３，２．７０，２．５４，２．１２，１．２９，１．１６；ＩＲ（液体）２９６９，２９３０，２８７１，２４１４（ｗ），１９４１（ｗ），１６０２（ｓ），１５５８（ｓ），１４９０（ｓ），１４７４（ｓ），１４４３（ｓ），１３９５（ｓ），１３７４，１１６６，１１２４，７７０ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２７Ｈ３７Ｎ７Ｏ＋Ｈ１について算出した理論値４７６．３１３８、実測値４７６．３１３４。
（実施例１０）
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４１】
【０１１９】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．３６，７．９９，６．５３，６．４６，５．１９，４．９１，４．２２，３．９５，３．７３，３．５８−３．４４，３．１３，２．７１，２．５４，２．１２，１．３２−１．２６，１．１６；ＩＲ（拡散反射法）２９６９，２９３１，２４０３（ｗ），２３５１（ｗ），２３０６（ｗ），２２１２（ｗ），２１６８（ｗ），１６０６（ｓ），１５８３（ｓ），１５６８（ｂ），１５４７（ｓ），１５０８（ｓ），１４７４（ｓ），１３９３（ｓ），７９８ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３６Ｎ８Ｏ＋Ｈ１について算出した理論値４７７．３０９０、実測値４７７．３１１３。
（実施例１１）
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４２】
【０１２０】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモ−１，３−チアゾールおよび５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．９９，７．２３，６．５３，６．４６，５．２０，４．９２，４．２９，４．０２，３．７８，３．５８，３．４２，３．１３，２．７１，２．５３，２．１２，１．３３−１．２７，１．１６；ＩＲ（拡散反射法）２９７０，２９３１，２８７２，２３５０（ｗ），１６０６（ｓ），１５３７（ｓ），１４８９（ｓ），１３９３（ｓ），１３７２，１３６０，１３４７，１３４３，１３３８，１２１０，１１２２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ３５Ｎ７ＯＳ＋Ｈ１について算出した理論値４８２．２７０２、実測値４８２．２６９９。
（実施例１２）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（４−メトキシピリミジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４３】
【０１２１】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンおよび２−クロロ−４−メトキシピリミジンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．０３，７．２５，７．０２，６．９０，６．０２，５．２５，４．８８，４．２２，３．９２−３．７８，３．５５，２．７４，２．５０，１．３３−１．２６，１．１６；ＩＲ（拡散反射法）２９７２，２４７５（ｗ），２３５０（ｗ），２３１０（ｗ），２１８３（ｗ），２０６９（ｗ），１５８５（ｓ），１５６８（ｓ），１５１６（ｓ），１４８２（ｓ），１４６６（ｓ），１３９７，１３９３，１２９２，１２３１ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３３Ｎ６Ｏ３Ｃｌ＋Ｈ１について算出した理論値５１３．２３８０、実測値５１３．２３５６。
（実施例１３）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（４−メトキシピリジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン塩酸塩の調製
【化４４】
【０１２２】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンおよび２−クロロ−４−メトキシピリジンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．６，８．０８，７．２２，７．１２，７．０５，６．９０，６．４０，５．９２，５．４０，５．００，４．３２，４．２０−４．１０，３．９５，３．８６，３．５２，２．８１，２．６０，１．３３，１．２６，１．１８；ＩＲ（拡散反射法）２９６６，２９３４，２６８５（ｂ），２０３６（ｗ），１９７４（ｗ），１６５７，１６０７（ｓ），１４９３，１４６３，１４４２，１４０４，１２９３，１２６５，１２３２，８２６ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２７Ｈ３４Ｎ５Ｏ３Ｃｌ＋Ｈ１について算出した理論値５１２．２４２９、実測値５１２．２４１７。
（実施例１４）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４５】
【０１２３】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリミジンを用い、開始化合物として５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１７，１．２６−１．３４，２．５１，２．７６，３．５４，３．７８，３．８６，３．９７，４．２７，４．９１，５．２５，６．６１，６．９０，７．０２，７．２５，８．４０；ＩＲ（拡散反射法）２９７１，２３９２（ｗ），２３５２（ｗ），２３０７（ｗ），２２６５（ｗ），２１７０（ｗ），１５８３（ｓ），１５６９，１５４９（ｓ），１５０８（ｓ），１４８１（ｓ），１４７５（ｓ），１３９７，１３９２，１３８４ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＩ）Ｃ２５Ｈ３１ＣｌＮ６Ｏ２について算出した理論値４８２．２１９７、実測値４８２．２１９２。
（実施例１５）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４６】
【０１２４】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンおよびテトラフルオロホウ酸１，３−ビス（２，６−ジ−イソプロピルフェニル）−４，５−ジヒドロ−イミダゾリウムを用い、開始化合物として５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．１７，１．２４−１．３４，２．５１，２．７６，３．５６，３．７６，３．８６，３．９９，４．２５，４．９１，５．２５，６．６１，６．９０，７．０２，７．２５，８．４１；ＩＲ（拡散反射法）２３５２（ｗ），２３４０（ｗ），２０６２（ｗ），１９４０（ｗ），１９０６（ｗ），１６００（ｓ），１５６７，１５５９，１５５５，１４８２（ｓ），１４７４（ｓ），１４４１（ｓ），１３９２，１２８７，１２２９ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３２Ｎ５Ｏ２Ｃｌ＋Ｈ１について算出した理論値４８２．２３２２、実測値４８２．２３３２。
（実施例１６）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−３−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４７】
【０１２５】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに３−ブロモピリジンを用い、開始化合物として５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１７，１．２６−１．３３，２．５１，２．７３，３．３９，３．５７，３．７６，３．７８，３．８６，３．９３，４．３１，４．９１，５．２６，６．８９，７．０４，７．２５，８．００；ＩＲ（拡散反射法）２９７０，２４３０（ｗ），２０５４（ｗ），１９１４（ｗ），１６０３，１５８４，１５６６（ｓ），１４８１（ｓ），１４３４，１３９６，１３７２，１２８７，１２２８，１１２２，１０４４ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３２Ｎ５Ｏ２Ｃｌ＋Ｈ１について算出した理論値４８２．２３２２、実測値４８２．２３１１。
（実施例１７）
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化４８】
【０１２６】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、開始化合物として５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを使用することによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１７，１．２５−１．３５，２．５０，２．７２，３．４５，３．５８，３．７５，３．８６，４．０４，４．２７，４．９３，５．２６，６．５５，６．９０，７．０２，７．２４；ＩＲ（拡散反射法）２９７０，２３５１（ｗ），２３３７（ｗ），２０６３（ｗ），１６０４，１５６８，１５４９（ｓ），１５３７（ｓ），１４８２（ｓ），１３９７，１３５９，１２８６，１２２８，１１９９，１０４３ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２４Ｈ３０Ｎ５Ｏ２ＳＣｌ＋Ｈ１について算出した理論値４８８．１８８７、実測値４８８．１８８０。
（実施例１８）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンの調製
【化４９】
【０１２７】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリミジンを用い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンを使用することによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．２８，２．１３，２．４８，２．７４，３．５１，３．７７，３．８５，３．９８，４．２５，４．９０，５．２０，６．５６，６．８１，７．１２，８．３７；ＩＲ（拡散反射法）２９７０，２４０２（ｗ），２３５０（ｗ），２３０７（ｗ），２２１２（ｗ），２１６９（ｗ），１５８３（ｓ），１５６８，１５４８（ｓ），１５０８（ｓ），１４７５（ｓ），１３９３，１３８３，１２４２，７９８ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３４Ｎ６Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値４６３．２８２１、実測値４６３．２８１６。
（実施例１９）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンの調製
【化５０】
【０１２８】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンを用い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンを用いることによって、表題化合物をアモルファス固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．３１，２．１４，２．４９，２．７１，３．４２，３．５４，３．７８，３．８５，４．０７，４．２８，４．９２，５．２１，６．５０−６．６６，６．７９，６．８４，７．１２，８．２０；ＩＲ（拡散反射法）２９６９，２４０５（ｗ），２３５１（ｗ），２３３７（ｗ），２２１２（ｗ），２０１５（ｗ），１５９９（ｓ），１５６０，１４８２（ｓ），１４７４（ｓ），１４４２（ｓ），１３９２，１３８５，１２４２，７６９ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２７Ｈ３５Ｎ５Ｏ２＋Ｈ１について算出した理論値４６２．２８６９、実測値４６２．２８５９。
（実施例２０）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンの調製
【化５１】
【０１２９】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミンを使用することによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．３１，２．１３，２．４７，２．７１，３．４５−３．５９，３．７７，３．８５，４．０３，４．２８，４．９３，５．２１，６．５４，６．８１，６．８３，７．１１，７．２６；ＩＲ（拡散反射法）２９７０，２９３２，２４０３（ｗ），２３５０（ｗ），２３３４（ｗ），２２１２（ｗ），１９６５（ｗ），１６０８，１５３７（ｓ），１４８２（ｓ），１３９３，１２９４，１２４２，１２００，１１６５ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ３３Ｎ５Ｏ２Ｓ＋Ｈ１について算出した理論値４６８．２４３３、実測値４６８．２４１６。
（実施例２１）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンの調製
【化５２】
【０１３０】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリミジンを用い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンを使用することによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．３０，２．４３，２．６９，３．５３，３．７８，３．８７，３．９９，４．０４，４．２７，４．９１，５．２７，６．６１，６．９７，７．５６，８．４１；ＩＲ（拡散反射法）２３９８（ｗ），２３５２（ｗ），２３０７（ｗ），２２１４（ｗ），２１７３（ｗ），１５８４（ｓ），１５６９，１５４９（ｓ），１５０８（ｓ），１４７６（ｓ），１３９７，１３４１，１２７７，１１７５，１１３７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ３０Ｎ７Ｏ２Ｆ３＋Ｈ１について算出した理論値５１８．２４９１、実測値５１８．２４７９。
（実施例２２）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンの調製
【化５３】
【０１３１】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンを用い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンを使用することによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．３０，２．４４，２．７０，３．４３，３．５８，３．７５−３．８５，４．０５，４．２７，４．９０，５．３２，６．４６，６．６２，６．９７，７．５２，７．５６，８．２０；ＩＲ（拡散反射法）２３５２（ｗ），２３３８（ｗ），２２５７（ｗ），２１７５（ｗ），２０２５（ｗ），１６００（ｓ），１５５９，１４７５（ｓ），１４４３（ｓ），１３９７，１３３９，１２７７，１２３９，１１７４，１１３７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３１Ｎ６Ｏ２Ｆ３＋Ｈ１について算出した理論値５１７．２５３８、実測値５１７．２５３３。
（実施例２３）
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンの調製
【化５４】
【０１３２】
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル｝−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製方法に従い、開始化合物としてＮ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １．１５，１．３０，２．４５，２．６８，３．４８−３．５８，３．７７，３．８８，４．０４，４．２９，４．９４，５．２９，６．５６，６．９８，７．５６；ＩＲ（拡散反射法）２９７４，２３５０（ｗ），２３３７（ｗ），１９２１（ｗ），１６０７，１５６８，１５３８（ｓ），１４７７（ｓ），１３９７，１３４２，１２７８（ｓ），１２３９，１１９２，１１７５，１１３７（ｓ）ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２４Ｈ２９Ｎ６Ｏ２ＳＦ３＋Ｈ１について算出した理論値５２３．２１０３、実測値５２３．２１０８。
（実施例２４）
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン塩酸塩の調製
【化５５】
【０１３３】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリジンを用い、出発化合物として５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．２２，７．８１，７．５４，６．８３，６．７４，６．４３，５．１９，４．９５，４．３３，４．１５，４．９７，３．９３，３．８２，３．５７，３．４８，２．７２，２．５３，１．３４−１．２６，１．１７；ＩＲ（拡散反射法）２９７２，２３４０（ｗ），２０２２（ｗ），１９３０（ｗ），１６４６，１６０２（ｓ），１５７６，１４８１，１４６６，１４０１，１３７６，１３１４，１２４０，１０２２，７６５ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２６Ｈ３４Ｎ６Ｏ３＋Ｈ１について算出した理論値４７９．２７７０、実測値４７９．２７６５。Ｃ２６Ｈ３４Ｎ６Ｏ３．ＨＣｌについて算出した理論値：Ｃ，６０．６３；Ｈ，６．８５；Ｎ，１６．３２；Ｃｌ，６．８８、実測値：Ｃ，６０．６６；Ｈ，６．９１；Ｎ，１６．０３。
（実施例２５）
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化５６】
【０１３４】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモチアゾールを用い、出発化合物として５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ）７．５４，７．２３，６．５２，６．４３，５．２１，４．９２，４．２５，４．００，３．９７，３．９３，３．８０−３．７３，３．５４，３．４４，２．７２，２．５２，１．３３−１．２６，１．１８；ＩＲ（拡散反射法）２９６３，２３２７（ｗ），２１８７（ｗ），２０５６（ｗ），１９９７（ｗ），１６０４，１５８０，１５６７，１５３８（ｓ），１４７４（ｓ），１３９７，１３７７，１３１１，１２３５，１０３１ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２４Ｈ３２Ｎ６Ｏ３Ｓ＋Ｈ１について算出した理論値４８５．２３３５、実測値４８５．２３３３。
（実施例２６）
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンの調製
【化５７】
【０１３５】
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミンの調製方法に従い、替わりに２−ブロモピリミジンを用い、出発化合物として５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミンを用いることによって、アモルファス固体の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｈｚ，ＣＤＣｌ３）δ）８．３５，７．５３，６．５２，６．４２，５．１８，４．９０，４．２０，３．９７，３．９３，３．８９，３．７７，３．５２，２．７２，２．５２，１．３３−１．２５，１．１８；ＩＲ（拡散反射法）２４０２（ｗ），２３４７（ｗ），２３０７（ｗ），２２６４（ｗ），２１９４（ｗ），１６０１，１５８２（ｓ），１５６６，１５４７（ｓ），１５１０（ｓ），１４７４（ｓ），１３９５，１３７７（ｓ），１３１２（ｓ），１０２２ｃｍ−１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）Ｃ２５Ｈ３３Ｎ７Ｏ３＋Ｈ１について算出した理論値４８０．２７２３、実測値４８０．２７１５。
（実施例Ａ）
生物学的活性評価のためのインビトロＣＲＦ１受容体結合アッセイ
【０１３６】
以下は、被験化合物のＣＲＦ１受容体に対する生物学的活性を評価するための、標準的なインビトロ結合アッセイの記載である。これは、ＤｅＳｏｕｚａ（De
Souza，1987）によって記載された修正プロトコールに基づく。
【０１３７】
結合アッセイには、一般的にはラット由来の脳の細胞膜を用いる。脳細胞膜を結合アッセイ用に調製するために、ラットの前頭皮質を氷冷した１０ｍＬの組織緩衝液（ｐＨ７．０の５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液に１０ｍＭのＭｇＣｌ２、２ｍＭのＥＧＴＡ、１μｇ／ｍＬアプロチニン、１μｇ／ｍＬロイペプチンおよび１μｇ／ｍＬペプスタチンを含む）にてホモジナイズする。ホモジネートは、４８，０００×ｇで１０分間遠心分離を行い、生じた沈殿を１０ｍＬの組織緩衝液にて再びホモジナイズする。再び４８，０００×ｇで１０分間遠心分離を行い、生じた沈殿をタンパク質濃度が３００μｇ／ｍＬになるように再懸濁する。
【０１３８】
９６ウェルプレートを用い最終量が３００μＬとなるようにして、結合アッセイを行う。アッセイは、１５０μＬ細胞膜懸濁液を、１２５Ｉ−ヒツジ−ＣＲＦ（最終濃度は１５０ｐＭ）および種々の濃度の阻害剤を含む１５０μＬのアッセイ緩衝液に加えて行う。アッセイ緩衝液は、上述の細胞膜調製液に０．１％卵白アルブミンおよび０．１５ｍＭのバシトラシンを加えたものと同じである。放射性リガンドによる結合は、室温にて２時間経過した後に、Ｐａｃｋａｒｄ社製ＧＦ／Ｃユニフィルタ・プレート（事前に０．３％ポリエチレンイミンに浸しておいたもの）により、Ｐａｃｋａｒｄ社のセルハーベスタを用いて濾過して停止した。フィルタは、氷冷したｐＨが７．０で０．０１％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含むリン酸緩衝液生理食塩水によって３回洗浄を行った。フィルタは、Ｐａｃｋａｒｄ社製ＴｏｐＣｏｕｎｔで放射能測定を行った。
【０１３９】
或いは、ＩＭＲ−３２ヒト神経芽腫細胞（ＡＴＣＣ、Hoggら,1996）のような、ＣＲＦ受容体を自然に発現する組織および細胞を、上述したアッセイ法に類似した結合アッセイ法に用いることができる。
【０１４０】
ＣＲＦ阻害に関しＫｉ値がおよそ１０μＭ未満である場合に、化合物には活性があると考えられる。非特異的結合については、過剰な（１０μＭ）α−ヘリカルＣＲＦの存在下で測定する。
（実施例Ｂ）
生物学的活性評価のためのエクスビボＣＲＦ１受容体結合アッセイ
【０１４１】
以下に、被験化合物のＣＲＦ１受容体に対する生物学的活性を評価するための、典型的なエクスビボＣＲＦ１受容体結合アッセイを記載した。
【０１４２】
絶食させたＨａｒｌｅｎ社製の雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（１７０−２１０ｇ）に対して、午後０：３０から午後２：００の間の胃洗浄を経て、被験化合物或いは溶媒を経口投与した。化合物は、溶媒（通例では、蒸留水中に１０％ダイズ油と５％ポリソルベート８０）により調製した。薬物投与から２時間後に、ラットを断頭により致死させ、前頭皮質をすばやく摘出し、ドライアイス上に置き、アッセイまで−８０℃で冷凍した。大動脈血をヘパリン処理した試験管に収集し、遠心分離（２５００ＲＰＭで２０分間）により血漿を分離し、−２０℃で冷凍した。
【０１４３】
結合アッセイの当日、組織サンプルの重量を測り、氷冷した５０ｍＭのＨｅｐｅｓ緩衝液（１０ｍＭのＭｇＣｌ２、２ｍＭのＥＧＴＡ、１μｇ／ｍＬのアプロチニン、１μｇ／ｍＬのロイペプチンヘミ硫酸塩、１μｇ／ｍＬのペプスタチンＡ、０．１５ｍＭのバシトラシンおよび０．１％卵白アルブミンを含む。２３℃におけるｐＨ＝７．０）中で解凍した後、Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ社のＰｏｌｙｔｒｏｎで設定を５にして３０秒ホモジナイズした。ホモジネートをアッセイ緩衝液（上述）またはＤＭＰ−９０４（１０μＭ）の存在下で、［１２５Ｉ］ＣＲＦ（０．１５ｎＭ、ＮＥＮ）と共にインキュべートした（２３℃で２時間、暗所）。濾過（Ｐａｃｋａｒｄ社ＦｉｌｔｅｒＭａｔｅ、ＧＦ／Ｃフィルタープレート）により、アッセイを停止し、プレートをＰａｃｋａｒｄ社ＴｏｐＣｏｕｎｔ液体シンチレーションカウンタ（ＬＳＣ）により測定した。総ｆｍｏｌｅおよび非特異的ｆｍｏｌｅをＤＰＭから計算した。データは、溶媒対照に対するパーセント（結合した特異的ｆｍｏｌｅ）として表した。統計的有意性は、スチューデントのｔ検定を用いて評価を行った。
（実施例Ｃ）
ＣＲＦで刺激されたアデニル酸シクラーゼ活性 の阻害
【０１４４】
ＣＲＦ作用性アデニル酸シクラーゼ活性の阻害アッセイは、既述の方法で行うことができる［G．Battagliaら，Synapse 1：572
(1987)］。簡明に述べるならば、アッセイは、３７℃で１０分間、１００ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（３７℃でｐＨ７．４）、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、０．４ｍＭのＥＧＴＡ、０．１％ＢＳＡ、１ｍＭのイソブチルメチルキサンチン（ＩＢＭＸ）、２５０単位／ｍＬのホスホクレアチン・キナーゼ、５ｍＭのリン酸クレアチン、１００ｍＭのグアノシン５’−三リン酸塩、１００ｎＭのｏ−ＣＲＦ、拮抗ペプチド（種々の濃度）およびもともとの湿重量で０．８ｍｇの組織（およそ４０−６０ｍｇタンパク質）を含む２００ｍＬの緩衝液中で行う。反応は、１ｍＭのＡＴＰ／［３２Ｐ］ＡＴＰ（試験管当たりおよそ２−４ｍＣｉ）を添加して開始し、５０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、４５ｍＭのＡＴＰおよび２％ドデシル硫酸ナトリウムを含む１００ｍＬ液を添加して、停止する。１ｍＬの［３Ｈ］ｃＡＭＰ（およそ４０，０００ｄｐｍ）を分離前に各試験管に添加して、ｃＡＭＰの回復をモニターする。Ｄｏｗｅｘおよびアルミナカラムで連続的に溶出を行うことにより、［３２Ｐ］ｃＡＭＰの［３２Ｐ］ＡＴＰからの分離が起こる。
【０１４５】
或いは、アデニル酸シクラーゼ活性は、ＮＥＮ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社のＡｄｅｎｙｌｙｌ Ｃｙｃｌａｓｅ Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ＦｌａｓｈＰｌａｔｅ Ａｓｓａｙを用いた９６−ウェルフォーマットによって、提供されたプロトコールに従って測定できる。簡明に述べるならば、放射性標識したｃＡＭＰの一定量を、抗ｃＡＭＰ抗体をコーティングした９６−ウェルプレートに加える。阻害化合物の存在下、或いは存在していない状態で、細胞または組織を加えて、活性化する。細胞が生産する未標識ｃＡＭＰは、抗体と結合した放射性標識ｃＡＭＰと置き換わる。結合した放射性標識ｃＡＭＰは、Ｐａｃｋａｒｄ ＴｏｐＣｏｕｎｔのようなマイクロプレートシンチレーションカウンタで検出可能な光信号を発生する。非標識化ｃＡＭＰの量が増えることにより、設定したインキュべーション時間（２−２４時間）に亘って、検出可能な信号が低下する。
（実施例Ｄ）
インビボ生物学的アッセイ
【０１４６】
本発明の化合物のインビボ活性は、当技術分野において認められている利用可能な生物学的アッセイを用いて評価できる。このような試験の例としては、聴覚性驚愕反射アッセイ（Ａｃｏｕｓｔｉｃ Ｓｔａｒｔｌｅ Ａｓｓａｙ）、階段登行試験（Ｓｔａｉｒ Ｃｌｉｍｂｉｎｇ Ｔｅｓｔ）および慢性投与アッセイ（Ｃｈｒｏｎｉｃ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ）が含まれる。これらの方法およびその他の方法であって、本発明の化合物のアッセイを行うために有用なアッセイ法は、C．W．BerridgeおよびA．J．Dunnによる
Brain Research Reviews 15:71 (1990)に概要が示されている。齧歯類または小ほ乳類のいかなる種においても、化合物のアッセイを行うことができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物、
【化１】
またはその立体異性体、その薬学的に許容できる塩またはそのプロドラッグ。
［式Ｉ中、
Ａｒはアリール、置換アリール、ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから選ばれ；
Ｖはヘテロアリールまたはフェニルであり、該ヘテロアリールおよびフェニルは１〜５のＲｔによって置換されてもよく；
Ｒａはそれぞれ独立してＨ、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルから選ばれ、該アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクロアルキルは、１〜５のＲｔ、−Ｏアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｍＲｔ、ＮＲｔＲｔ、オキソ（＝Ｏ）、チオン（＝Ｓ）、フェニル、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルによって置換されてもよく；
Ｒｔは、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎアルキルアルキル、−Ｏアルキル、−Ｏハロアルキル、ＮＨアルキル、Ｎアルキルアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｍアルキル、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨアルキル、ＳＯ２Ｎアルキルアルキル、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルから選ばれ；
ｍは０、１または２である。］
【請求項２】
以下からなる群から選ばれる請求項１に記載の化合物：
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−３−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−４−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミン、
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（４−メトキシピリミジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（４−メトキシピリジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン塩酸塩、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−３−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミン、
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン塩酸塩、
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、および
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン。
【請求項３】
請求項１または２に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項４】
ＣＲＦがＣＲＦ１受容体に対してインビトロにおいて結合することを阻害する方法であって、ＣＲＦの存在下で請求項１または２に記載の化合物を含む溶液をＣＲＦ１受容体を発現する細胞と接触させることを含み、該化合物が該溶液中に、ＣＲＦがインビトロにおいて細胞と結合するレベルを阻害するのに十分な濃度で存在することを特徴とする方法。
【請求項５】
ほ乳類においてＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズする方法であって、該ほ乳類に対して請求項１または２に記載の化合物の治療的に有効な量を投与することを特徴とする方法。
【請求項６】
ＣＲＦ１受容体に対するリガンドをスクリーニングする方法であって：ａ）ＣＲＦ１受容体、検出可能な標識で標識化された請求項１または２に記載の化合物および候補のリガンドを用いて競合的結合アッセイを実施すること、並びに、ｂ）該候補のリガンドが標識化された該化合物を置換する能力を測定することを含む方法。
【請求項７】
ほ乳類において障害を治療する方法であって、該障害の治療は、ＣＲＦに拮抗することによって該障害の治療効果が生じる或いは治療が容易になる方法。
【請求項８】
前記障害がＣＲＦの分泌過剰を示す、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
請求項８に記載の方法であって、該ほ乳類がヒトであり、かつ該障害が不安関連障害；気分障害；外傷後ストレス障害；核上麻痺；免疫抑制；薬物またはアルコール離脱症状；炎症性障害；疼痛；喘息；乾癬およびアレルギー；恐怖症；ストレス誘発性の睡眠障害；線維筋痛症；気分変調；双極性障害；循環気質；疲労症候群；ストレス性頭痛；ガン；ヒト免疫不全ウイルス感染症；神経変性疾患；消化器系疾患；摂食障害；出血性ストレス；ストレス誘発性の精神病性エピソード；偽甲状腺機能低下症候群；抗利尿ホルモン異常症候群；肥満；不妊；頭部外傷；脊椎外傷；虚血性神経細胞障害；興奮毒性による神経細胞障害；てんかん；心血管系および心臓関連疾患；免疫不全；筋痙攣；尿失禁；アルツハイマー型老人性痴呆症；多発梗塞性痴呆；筋萎縮性側索硬化症；薬物依存症および中毒症；心理社会的小人症、低血糖症および皮膚障害；並びに脱毛から選ばれる、方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法であって、該障害が不安関連障害；気分障害；双極性障害；外傷後ストレス障害；炎症性障害；薬物依存症および中毒症；消化器系障害；および皮膚障害から選ばれることを特徴とする方法。
【請求項１１】
請求項１０に記載の方法であって、該障害が不安関連障害または気分障害から選ばれ、かつ該不安関連障害が全般性不安症であり、該気分障害がうつ病であることを特徴とする方法。
【請求項１２】
ヒトにおいて体毛の成長を促進する方法であって、その必要があるヒトに対して、請求項１または２の化合物の治療的に有効な量を投与することを特徴とする方法。
【請求項１３】
ヒトにおいて禁煙を促進する方法であって、その必要があるヒトに対して、請求項１または２の化合物の治療的に有効な量を投与することを特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項１または２の化合物であって、標準的インビトロＣＲＦ受容体結合アッセイにおいて該化合物が１ミクロモル以下のＫｉ値を示すことを特徴とする化合物。
【請求項１５】
請求項１４の化合物であって、該化合物が１００ナノモル以下のＫｉ値を示すことを特徴とする化合物。
【請求項１】
式Ｉの化合物、
【化１】
またはその立体異性体、その薬学的に許容できる塩またはそのプロドラッグ。
［式Ｉ中、
Ａｒはアリール、置換アリール、ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから選ばれ；
Ｖはヘテロアリールまたはフェニルであり、該ヘテロアリールおよびフェニルは１〜５のＲｔによって置換されてもよく；
Ｒａはそれぞれ独立してＨ、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルから選ばれ、該アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクロアルキルは、１〜５のＲｔ、−Ｏアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｍＲｔ、ＮＲｔＲｔ、オキソ（＝Ｏ）、チオン（＝Ｓ）、フェニル、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルによって置換されてもよく；
Ｒｔは、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨアルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｎアルキルアルキル、−Ｏアルキル、−Ｏハロアルキル、ＮＨアルキル、Ｎアルキルアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｍアルキル、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨアルキル、ＳＯ２Ｎアルキルアルキル、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキルから選ばれ；
ｍは０、１または２である。］
【請求項２】
以下からなる群から選ばれる請求項１に記載の化合物：
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−３−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−４−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（６−メトキシ−２−メチルピリジン−３−イル）ピラジン−２−アミン、
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−［６−（ジメチルアミノ）−４−メチルピリジン−３−イル］−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（４−メトキシピリミジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（４−メトキシピリジン−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン塩酸塩、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−３−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
５−（２−クロロ−４−メトキシフェニル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミン、
Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチル−５−［６−メトキシ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル］ピラジン−２−アミン、
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン塩酸塩、
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン、および
５−（２，６−ジメトキシピリジン−３−イル）−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ）−４−エトキシ−１−ピリミジン−２−イルピロリジン−３−イル］−３，６−ジエチルピラジン−２−アミン。
【請求項３】
請求項１または２に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項４】
ＣＲＦがＣＲＦ１受容体に対してインビトロにおいて結合することを阻害する方法であって、ＣＲＦの存在下で請求項１または２に記載の化合物を含む溶液をＣＲＦ１受容体を発現する細胞と接触させることを含み、該化合物が該溶液中に、ＣＲＦがインビトロにおいて細胞と結合するレベルを阻害するのに十分な濃度で存在することを特徴とする方法。
【請求項５】
ほ乳類においてＣＲＦ１受容体にアンタゴナイズする方法であって、該ほ乳類に対して請求項１または２に記載の化合物の治療的に有効な量を投与することを特徴とする方法。
【請求項６】
ＣＲＦ１受容体に対するリガンドをスクリーニングする方法であって：ａ）ＣＲＦ１受容体、検出可能な標識で標識化された請求項１または２に記載の化合物および候補のリガンドを用いて競合的結合アッセイを実施すること、並びに、ｂ）該候補のリガンドが標識化された該化合物を置換する能力を測定することを含む方法。
【請求項７】
ほ乳類において障害を治療する方法であって、該障害の治療は、ＣＲＦに拮抗することによって該障害の治療効果が生じる或いは治療が容易になる方法。
【請求項８】
前記障害がＣＲＦの分泌過剰を示す、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
請求項８に記載の方法であって、該ほ乳類がヒトであり、かつ該障害が不安関連障害；気分障害；外傷後ストレス障害；核上麻痺；免疫抑制；薬物またはアルコール離脱症状；炎症性障害；疼痛；喘息；乾癬およびアレルギー；恐怖症；ストレス誘発性の睡眠障害；線維筋痛症；気分変調；双極性障害；循環気質；疲労症候群；ストレス性頭痛；ガン；ヒト免疫不全ウイルス感染症；神経変性疾患；消化器系疾患；摂食障害；出血性ストレス；ストレス誘発性の精神病性エピソード；偽甲状腺機能低下症候群；抗利尿ホルモン異常症候群；肥満；不妊；頭部外傷；脊椎外傷；虚血性神経細胞障害；興奮毒性による神経細胞障害；てんかん；心血管系および心臓関連疾患；免疫不全；筋痙攣；尿失禁；アルツハイマー型老人性痴呆症；多発梗塞性痴呆；筋萎縮性側索硬化症；薬物依存症および中毒症；心理社会的小人症、低血糖症および皮膚障害；並びに脱毛から選ばれる、方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法であって、該障害が不安関連障害；気分障害；双極性障害；外傷後ストレス障害；炎症性障害；薬物依存症および中毒症；消化器系障害；および皮膚障害から選ばれることを特徴とする方法。
【請求項１１】
請求項１０に記載の方法であって、該障害が不安関連障害または気分障害から選ばれ、かつ該不安関連障害が全般性不安症であり、該気分障害がうつ病であることを特徴とする方法。
【請求項１２】
ヒトにおいて体毛の成長を促進する方法であって、その必要があるヒトに対して、請求項１または２の化合物の治療的に有効な量を投与することを特徴とする方法。
【請求項１３】
ヒトにおいて禁煙を促進する方法であって、その必要があるヒトに対して、請求項１または２の化合物の治療的に有効な量を投与することを特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項１または２の化合物であって、標準的インビトロＣＲＦ受容体結合アッセイにおいて該化合物が１ミクロモル以下のＫｉ値を示すことを特徴とする化合物。
【請求項１５】
請求項１４の化合物であって、該化合物が１００ナノモル以下のＫｉ値を示すことを特徴とする化合物。
【公表番号】特表２００６−５２５９９３（Ｐ２００６−５２５９９３Ａ）
【公表日】平成１８年１１月１６日（２００６．１１．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５０６６２０（Ｐ２００６−５０６６２０）
【出願日】平成１６年５月５日（２００４．５．５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００４／００１５５３
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０９９２０１
【国際公開日】平成１６年１１月１８日（２００４．１１．１８）
【出願人】（５０４３９６３７９）ファルマシア・アンド・アップジョン・カンパニー・エルエルシー (130)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年１１月１６日（２００６．１１．１６）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年５月５日（２００４．５．５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００４／００１５５３
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０９９２０１
【国際公開日】平成１６年１１月１８日（２００４．１１．１８）
【出願人】（５０４３９６３７９）ファルマシア・アンド・アップジョン・カンパニー・エルエルシー (130)
【Ｆターム（参考）】
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