【課題】環境に感受性のあるレポータータンパク質である修飾された甲虫ルシフェラーゼタンパク質が提供される。
【解決手段】関心のある分子と相互作用するアミノ酸配列を含む挿入を含み、修飾に寛容性のある親甲虫ルシフェラーゼ配列の残基又は領域において環状置換された甲虫ルシフェラーゼをコードするポリヌクレオチド。前記ポリヌクレオチドによってコードされる修飾された甲虫ルシフェラーゼ。前記ポリヌクレオチドを細胞に形質導入し、細胞内の関心のある分子を検出する方法。 （もっと読む）

本発明は、（ａ）二重役割ヘキソキナーゼ活性を有するポリペプチドをコードする内因性ポリヌクレオチドにおける修飾と、（ｂ）ヘキソースキナーゼ活性を有するポリペプチドをコードする異種ポリヌクレオチドと、任意選択的に、（ｃ）ピルビン酸デカルボキシラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする内因性ポリヌクレオチドにおける修飾とを有する組換え宿主細胞に関する。さらに本発明は、例えば、グルコース消費の増大方法、酸化還元バランスの改善方法、および／またはピルベート利用経路の産物の産生の増大方法を含む、このような組換え宿主細胞の作製および使用方法に関する。
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本発明は、ショ糖からのイソマルツロースおよびイソマルツロース含有組成物のバイオテクノロジー的製造のために、改善された手段、特に改善された生成物特異性を有するスクロースムターゼおよび改善されたスクロースムターゼを含む微生物細胞を提供する。 （もっと読む）

【課題】既知／未知問わず、テルペン類を生物生産できるようにするためには、その合成酵素の遺伝子を取得する必要がある。また、その生物生産系の構築のためには、酵素活性の高いテルペン合成酵素変異体のスクリーニング方法が必要である。
【解決手段】テルペン合成酵素の「基質消費能」に基づき、テルペン合成酵素をスクリーニングする方法を提供する。具体的には、テルペン酵素群と同じ基質を原料とする種々の色素の生合成経路を細胞内に構築し、これらの細胞にテルペン合成酵素の遺伝子を導入して色素合成経路から原料を奪うことにより、細胞あたりの色素合成量が減少することを指標にした、テルペン合成酵素のスクリーニング方法を提供する。また、本発明の方法により得られたファルネシル二リン酸合成酵素変異体及びその遺伝子を提供する。 （もっと読む）

【課題】熱安定性および／または保存安定性の優れたホタルルシフェラーゼおよびその製造法を提供する。
【解決手段】ホタルルシフェラーゼのアミノ酸配列において、ヘイケボタルルシフェラーゼの２８７位に相当するアミノ酸がアラニンに置換されているか、３９２位に相当するアミノ酸がイソロイシンに変異されているアミノ酸配列を有することを特徴とするホタルルシフェラーゼおよびホタルルシフェラーゼ遺伝子。
【効果】当該遺伝子を利用することにより、安定性が向上したホタルルシフェラーゼを効率よく製造することが可能である。また、３２６位のアミノ酸がセリンに置換された変異、および／または４６７位のアミノ酸がイソロイシンに置換された変異と組み合わせることにより、さらに安定性が向上したホタルルシフェラーゼを得ることができる。 （もっと読む）

【課題】公知のＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼの欠点を克服し、広い温度域において十分な反応性を有し、且つ、基質特異性に優れた改変型ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼを提供すること。
【解決手段】ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼを遺伝子レベルで改変することで、改変前のＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼよりも温度依存性が改善し且つ、キシロース作用性が低下した改変型ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼ。 （もっと読む）

【課題】Vdh及びVdhと構造的に関連したVdh-K1などの水酸化酵素を改変することによりビタミンD類の水酸化反応における副反応を抑制し、さらに水酸化酵素の比活性を改善して水酸化ビタミンD誘導体を効率よく生産する方法を提供する。
【解決手段】ビタミンD類の水酸化において活性が増強され、望ましくない副反応が低減したポリペプチド（酵素）をコードするDNA、そのDNAによりコードされる改変型ビタミンD類水酸化酵素、そのDNAを含む自律複製性または組み込み複製性の組換えベクター、そのDNAを含む形質転換体、及びその形質転換体を培地で培養し、その培養液から水酸化ビタミンD誘導体を採取する水酸化ビタミンD誘導体の製造方法。 （もっと読む）

本発明は、プロテアーゼ変異体、プロテアーゼ変異体を含む組成物、並びに、このようなプロテアーゼ変異体及び組成物を使用する方法を提供する。
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【課題】高濃度グルコースによる阻害をほとんど受けず、セロビオースに高い特性を有し、酸性領域で活性を有するβ-グルコシダーゼ及びそれを利用したセルロースの糖化方法を提供することである。
【解決手段】くさや汁由来のメタゲノムライブラリのスクリーニングによって単離された、500mMの高濃度グルコース存在下で酵素活性を有するβ-グルコシダーゼを提供し、またその酵素を用いたセルロースを分解する方法を提供する。 （もっと読む）

本発明は、サッカロミセス・セレヴィシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）などの酵母中における、７−デヒドロコレステロール、２５−ヒドロキシ−７−デヒドロコレステロール、および２５−ヒドロキシエルゴステロールの生成に関する。それはまた、ラノステロール、ジメチルチモステロール、メチルチモステロール、チモステロール、コレスタ−７，２４−ジエノール、またはコレスタ−５，７，２４−トリエノールの２４位における二重結合の還元；またはエルゴステロール、７−デヒドロコレステロール、コレスタ−８−エノール、およびコレスタ−７−エノールの２５位におけるヒドロキシル化を触媒する、様々な酵素にも関する。それはまた、コレステロールＣ２５−ヒドロキシラーゼおよびステロールΔ２４−還元酵素をコードする様々な核酸に関し、７−デヒドロコレステロールまたはエルゴステロールを生成してヒドロキシル化するためのそれらの使用にも関する。それはまた、このようにして生成された酵母株に関し、形質転換酵母細胞を培養するステップと、得られたステロールを収集するステップを含んでなる、これらのステロールを生成する方法にも関する。
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本発明は、エンドヌクレアーゼおよび異種DNA結合ドメインを含むキメラエンドヌクレアーゼ、ならびにキメラエンドヌクレアーゼを用いたポリヌクレオチドの標的組み込み、標的欠失もしくは標的変異の方法に関する。 （もっと読む）

【課題】D-グルコースに対する基質特異性が高いグルコースデヒドロゲナーゼ（ＧＤＨ）および前記ＧＤＨを利用する高精度のグルコース測定法を提供する。
【解決手段】バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）・メガテリウム（ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）由来ＧＤＨのアミノ酸配列の２５９位および／または２６１位、あるいはそれと同等の位置のアミノ酸がアラニンあるいはバリンに置換されており、かつ、ＧＤＨ活性を有する変異型グルコースデヒドロゲナーゼ。 （もっと読む）

【課題】脂質蓄積に関与するジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ（ＤＧＡＴ）蛋白質のN末端から２３〜３７番目の配列を欠失させたN末端側配列欠失DGAT蛋白質。
【解決手段】該蛋白質は全長のＤＧＡＴ蛋白質よりも活性が大幅に向上している。該蛋白質は、表面プラズモン共鳴測定用基板に固定化し、表面プラズモン共鳴測定法を利用することにより、DGAT蛋白質の阻害因子あるいは活性化因子の検出、定量、スクリーニングを極めて迅速、効率的に行うことが可能となる。 （もっと読む）

【課題】コンドロイチナーゼタンパク質の変異体の調整と欠損、治療成分の組織への拡散を促す方法におけるその使用、中枢神経系（「ＣＮＳ」）の障害または疾患後の神経機能回復に対するその使用を提供する。
【解決手段】コンドロイチナーゼＡＢＣタイプＩ、コンドロイチナーゼＡＢＣタイプＩＩ、コンドロイチナーゼＡＣ、コンドロイチナーゼＢの欠損、置換変異体または融合タンパク質。また、他の哺乳類酵素変異体、ヒアルロニダーゼ１、ヒアルロニダーゼ２、ヒアルロニダーゼ３、ヒアルロニダーゼ４、及び任意にＰＨ−２０などの酵素をそれぞれ独立して含む治療用組成物。 （もっと読む）

【課題】オキサロ酢酸産生の欠損した、それ故シュウ酸産生の欠損した細胞、例えば糸状菌細胞、特にＡ．ニガーの細胞の突然変異体の提供。
【解決手段】オキサロ酢酸ヒドロラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする単離された核酸。当該核酸配列を含んで成る核酸構築体、ベクター及び宿主、並びに当該ポリペプチドを生産するための組換方法。具体的には、オキサロ酢酸ヒドロラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする単離された核酸であって：（ａ）アミノ酸１〜３４１と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列をもつポリペプチドをコードする核酸；及び（ｂ）特定のポリヌクレオチドから構成されるポリヌクレオチド配列と少なくとも９０％の相同性を有する核酸；から成る群から選ばれる核酸。 （もっと読む）

本発明の主題は、細胞、核酸及び酵素並びにソホロリピッドの製造のためのその使用とソホロリピッドの製造方法である。 （もっと読む）

【課題】公知のＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼの欠点を克服し、広い温度域において十分な反応性を有し、且つ、基質特異性に優れた改変型ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼを提供すること。
【解決手段】ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼを遺伝子レベルで改変することで、改変前のＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼよりも温度依存性が改善し且つ、キシロース作用性が低下した改変型ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼ。 （もっと読む）

本発明は、呼吸器管の粘液レベルが高い対象の呼吸器管における粘液量を低下させる方法を提供する。この方法は、対象に、シアリダーゼ又はその有効成分と、アンカードメインを含む治療的有効量の融合タンパク質を含む化合物又は組成物を投与するステップを具える。この治療的有効量は、この化合物又は組成物を投与する前の粘液量に比べて、この化合物又は組成物を投与した後に呼吸器管の粘液量を低下させる融合タンパク質の量を含む。 （もっと読む）

【課題】グランザイムＢプロテアーゼ（ＥＣ３．４．２１．７９）を用いた融合タンパク質の酵素開裂により真正形態の興味のあるポリペプチドを調製する方法の提供。
【解決手段】真正形態における興味のあるポリペプチドの調製法であって（ｉ）そのＮ末端からＣ末端までに、（ａ）融合パートナー、（ｂ）グランザイムＢプロテアーゼ開裂部位を含むグランザイムＢプロテアーゼ認識部位、（ｃ）興味のあるポリペプチド（前記開裂部位が興味のあるポリペプチドに隣接している）を含む融合タンパク質を提供する工程、および（ｉｉ）前記融合タンパク質をグランザイムＢプロテアーゼと接触させて、これを前記開裂部位で開裂させて、真正形態の興味のある前記ポリペプチドを得る工程を含む方法。 （もっと読む）

【課題】 所望の活性を有する遺伝子生成物をコードする1つ以上の遺伝子エレメントを単離する方法を提供する。
【解決手段】 本発明は、所望の活性を有する遺伝子生成物をコードする1つ以上の遺伝子エレメントを単離する方法であって、(a) 遺伝子エレメントをマイクロカプセル中に区画化し; (b) マイクロカプセル内で遺伝子エレメントを発現させてそれらの各遺伝子産物を産生させ; (c) 遺伝子エレメントの光学特性の変化を利用して所望の活性を有する遺伝子産物を産生する遺伝子エレメントを分取するステップを含む、前記方法を記載する。本発明は、反復的な突然変異誘発と本発明の方法の反復的な適用により、核酸およびタンパク質のin vitroにおける進化を可能とする。 （もっと読む）