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カスパーゼ3活性の計画的な操作により、治療目的のために幹細胞の運命を方向付ける方法を提供する。幹細胞の分化を誘導するのに使用することができるカスパーゼ3活性化剤及び/またはエフェクター、及び幹細胞の分化を抑制しそれによって幹細胞の増殖を促進あるいは維持することができるカスパーゼ3抑制剤も含めて、幹細胞の分化を調節するためのカスパーゼ3活性調節剤の使用を開示する。カスパーゼ3調節剤のスクリーニング方法及びこのような化合物を幹細胞の分化をin vitroあるいはin vivoで調節するために使用することも、該化合物の治療的適用として提供する。 (もっと読む)


本発明は、位置特異的標識試薬でリン酸化タンパク質遺伝情報のリン酸化位置特異的ラベリングのための方法及び収得されたラベルされたものを分析する方法に関するもので、より詳細には、求核性(nucleophilic)標識試薬でリン酸化タンパク質のリン酸化位置をポリマーのゲル内に維持された状態そのまま標識するための方法と、求核体標識試薬の適切な選定によって、前リン酸化位置に新規タンパク質加水分解の単離可能な位置を発現する方法に関するものである。さらに、本発明はあらかじめゲル内で標識されたタンパク質のゲル内の単離と連続する収得ペプチドの質量分析によって、リン酸化タンパク質分析及びリン酸化位置同定方法に関するものである。前記のような構成の本発明は、生体内のタンパク質のリン酸化状態及びリン酸化程度を効果的に分析するのに有用であり、多様な疾病の診断及び治療剤開発等に応用され、タンパク質の生体内での役割等をより深く理解するのに寄与することができる。

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本発明は、候補タンパク質発現ライブラリー内の可溶性候補タンパク質の発現についてスクリーニングする方法に関する。本方法は、ライブラリーの各タンパク質をペプチド基質と融合させ、更に前記ペプチド基質の酵素による改変を検出することによって可溶性候補タンパク質を発現する細胞を同定することを必要とする。
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本発明は、細胞、組織および動物における代謝活性を分析するために、そしてシトクロムP450活性に及ぼす試験化合物の作用に関してスクリーニングするために有用な方法、組成物、基質およびキットを提供する。具体的には、シトクロムP450基質でありかつ生物発光酵素、例えばルシフェラーゼの基質前駆体でもある発光原分子、例えばルシフェリンまたはセレンテラジンを用いた、一段階および二段階の方法が提供される。P450反応にルシフェリン誘導体またはその他の発光原分子を添加すると、P450反応においてP450酵素により該発光原分子が代謝されて生物発光酵素の基質、例えばルシフェリンおよび/またはルシフェリン誘導体代謝産物になる。その結果生じる代謝産物(単数または複数)は、光を生成する二次反応において、生物発光酵素、例えばルシフェラーゼの基質としての役割を果たす。バックグラウンドシグナルが低く感度が高いシトクロムP450発光アッセイが開示され、アイソフォーム選択性が実証される。本発明は、夾雑物としてルシフェラーゼ反応混合物中に存在する可能性がある、または反応中に生成される可能性があるルシフェラーゼ阻害剤である無機ピロリン酸塩を除去するためにピロホスファターゼを添加する、ルシフェラーゼ反応を実施するための改良型方法も提供する。本発明の方法はさらに、可逆的ルシフェラーゼ阻害剤などのルシフェラーゼ安定化剤を用いて、ルシフェラーゼを用いるアッセイにおける発光シグナルを安定化し、延長するための方法を提供する。 (もっと読む)


【課題】 生体内での脂肪の代謝を促進する物質を、より簡便かつ安価にスクリーニングする方法を提供すること。
【解決手段】 脂肪代謝改善効果を有する被験試料のスクリーニング方法を提供する。この方法は、脂肪代謝改善効果を有すると思われる試料を溶媒に溶解する工程、肝実質細胞に、該試料含有溶液を添加して培養する工程、該培養された肝実質細胞を破砕して上清を得る工程、該上清の中性脂質量を測定する工程、および該中性脂質量が、試料非含有溶液を添加して培養された肝実質細胞中の中性脂質量と比較して、低い値の試料を選別する工程を包含する。 (もっと読む)


【課題】 NMR式アッセイ用の過分極リガンド又は標的を含んだNMR法の提供。
【解決手段】 当該方法は、1種以上の過分極リガンドと標的と適宜1種以上の追加リガンドとを含む混合物又は過分極標的と1種以上のリガンドとを含む混合物いずれかのNMRスペクトルを生成するステップと、NMRスペクトルを1種以上の過分極リガンド又は過分極標的の参照スペクトルと比較するステップを含む。好ましい実施形態では、当該NMR法は、(a)1種以上のリガンド又は標的を過分極させ、(b)1種以上の過分極リガンドを標的又は標的及び1種以上の追加リガンドと接触させるか或いは過分極標的を1種以上のリガンドと接触させて混合物を形成し、(c)混合物のNMRスペクトルを生成し、(d)このNMRスペクトルを、1種以上の過分極リガンド又は過分極標的の参照スペクトルと比較することによって実施される。 (もっと読む)


本発明はプロゲステロン受容体により仲介されるプロセスを調整するための化合物、医薬組成物、および方法に向けられる。また提供されるものは、そのような化合物および医薬組成物を製造する方法である。 (もっと読む)


【課題】酵素を用いた酸素インジケーターであって、より安定的に、酸素の有無を明確に判別できる酸素インジケーターを提供すること。
【解決手段】基質が酸素の存在下に酵素の触媒作用を介して光吸収スペクトル変化する反応を用いて、発色性基質、酸化還元酵素を少なくとも含む酸素感応性溶液(pH緩衝剤、還元剤を含んでもよい)からなる酵素を用いた酸素インジケーターであって、酸素感応性溶液のpHが特定の範囲内にあり、酸素検知前の酸素感応性溶液の酵素活性Mが0.1U/ml以上である酸素インジケーター。 (もっと読む)


本発明は、サンプル中のポリグリコペプチドを同定しかつ定量するための方法を提供する。本発明は、固体支持体に対してグリコポリペプチドを固定する工程と;この固定されたグリコポリペプチドを切断して、これによって非グリコシル化ペプチドを遊離して固定されたグリコペプチドを保持する工程と;この固体支持体からこのグリコペプチドを遊離する工程と;この遊離されたグリコペプチドを解析する工程とを包含する。この方法はさらに、例えば、質量分析法を用いて、1つ以上のグリコペプチドを同定する工程を包含してもよい。
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消泡剤は、ポリヌクレオチド増幅反応の検出を改善し、およびマイクロ流体デバイスにおける液体の操作を改善する。 (もっと読む)


本発明は、図1に示されるように、酵素活性を調節する化合物を同定するための「係留」の使用に関する。本発明は、目的の標的部位の外側の標的に結合されているエクステンダーの使用に依存する、係留の形態に関する。エクステンダーは、目的の部位の外側の標的に接着しているので、目的の部位内の構造的混乱または機能的混乱の可能性が最小にされる。さらに、標的変異体は、構造的完全性および機能的完全性について、機能的スクリーニングを使用して、評価され得る。
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血液のグルコース含量を、血液サンプルを、補因子としてのPQQ(またはその誘導体または異性体)に依存性のグルコースデヒドロゲナーゼ、テトラゾリウム塩指示薬を含有するが、メディエータを含有しない試験ストリップと、接触させることにより、決定することができる。 (もっと読む)


本発明は、マーキング剤、微生物のゲノムに向けた前記マーキング剤の分子通過を促進する少なくとも1種の細胞浸透試薬を含む反応媒体を利用する微生物検出方法を対象とする。本発明は、前記マーキング反応媒体も同様に対象とする。 (もっと読む)


全長強度を模倣する強度レベルを有する蛍光補完産物は、発色団の前の位置に突然変異によって改善された折りたたみの能力を導入することによって得られる。これは、特に緑色蛍光タンパク質(GFP)の黄色変異体によってみられる。アミノ酸172と173の間でGFPを分割することによって、相加的な増加が得られる。タンパク質間の相互作用を防止することができる薬物のスクリーニングは、蛍光標示式細胞分取(FACS)で最高のダイナミックレンジを有する細胞を選択することによって行われ、タクロリムスがFRBとFKBPの間のラパマイシンで誘導される相互作用を弱める能力によって例証した。
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【課題】 各種の動物を解体したときに露出する解体面からの血液等の液体の浸出、腐敗の進行、腐敗臭の拡散を防止して、動物の検査あるいは解体作業の環境を改善する。
【解決手段】 動物10を解体して内部組織を露出させた解体面12、22を保護する方法であって、前記解体面12、22に露出する動物内部組織に対する接合性を有する保護膜30で解体面12、22を覆う工程(a)を含む。解体面12、22が、死亡牛10のBSE検査のために切開された首部20の解体面12、22であり、工程(a)が、解体面12、22に粉体状の保護膜形成剤を散布し、解体面12、22に露出する動物の内部組織から浸出する液体との接触により保護膜30を形成させることができる。 (もっと読む)


ビオチン化蛍光ポリマーとビオチン結合タンパク質との複合体および該蛍光ポリマー複合体でコートされた固体支持体が述べられる。この複合体は生物学的認識事象(たとえば、核酸ハイブリダイゼーション反応または酵素誘導ポリペプチド開裂)の検出センサとして使用することができる。この複合体の作製方法ならびに試料中の標的検体の存在および/または量を検出するためのこの複合体の使用方法も述べられる。標的検体は酵素(たとえば、β−セクレターゼ)または核酸(たとえば、1本鎖または2本鎖核酸)であってよい。
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本発明は、野生型ポリペプチドと比較して、基質選択性及び/又は増大した活性を有するストレプトミセス属細菌のPapMポリペプチドの新規な変異体に関するものである。本発明はまた、当該変異体をコードする核酸、その核酸を組み込んだ微生物、及びストレプトグラミンB成分を生成するためのそれらの使用に関するものである。 (もっと読む)


テスト化合物溶液が細胞活性を誘導しているかどうかを決定する装置および方法であって、本発明の方法の1つの実施形態が、細胞を含有する細胞懸濁媒体に接触させて、テスト化合物溶液を配置するステップと、点源から細胞懸濁液内にテスト化合物溶液を拡散するステップと、点源からの距離に対して細胞の活性を検出するステップとを含む。細胞における活性を検出するステップは、点源に最も近い第1の群の細胞の活性を検出するステップと、点源から第1の群より遠くにある第2の群の細胞の活性を検出するステップとを含み得る。 (もっと読む)


【課題】特別な技術を必要としない簡易な手法により、アレイ上に固定化された基質ペプチドのリン酸化効率を定量化できる方法を提供する。
【解決手段】チップ上に固定化された基質のリン酸化反応率の定量化方法であって、予めリン酸化された基質の固定化部位におけるシグナル強度に対する定量すべき基質の固定化部位におけるシグナル強度の比を算出することにより求めることを特徴とする、特にSPRによる解析において有用なリン酸化効率の定量化方法。 (もっと読む)


【課題】
βアミロイドによりアストログリア細胞で発現が誘導される新規な遺伝子を見出すことであり、さらに該遺伝子がコードするポリペプチドを同定し、該遺伝子および該ポリペプチド等をβアミロイドに関連した神経疾患の診断および治療を目的とする手段として使用すること。
【解決手段】
βアミロイド刺激により発現が誘導される新規遺伝子をcDNAサブトラクション法により取得し、新規ポリヌクレオチド、該ポリヌクレオチドがコードするポリペプチド、該ポリヌクレオチドを含む組換えベクター、該組換えベクターを有する形質転換体、該ポリペプチドに対する抗体、該ポリペプチドの製造法、上記のものを用いた該遺伝子および/または蛋白質の発現を調節する化合物の同定法、該方法で得られる化合物、ならびにこれらを用いたβアミロイドに関連した神経疾患のための医薬組成物、診断方法、診断用キット、治療方法等を提供する。 (もっと読む)


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