本発明は、レナラーゼとしても知られる哺乳類モノアミンオキシダーゼＣ（ＭＡＯ−Ｃ）の同定、単離及び使用を提供する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号：２のアミノ酸配列と少なくとも約１５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチド。
【請求項２】
配列番号：２のアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチド。
【請求項３】
配列番号：２のアミノ酸残基１７〜３４２のアミノ酸配列を含む単離されたポリペプチド。
【請求項４】
前記ポリペプチドがＮ末端にシグナルペプチドを含まない、請求項１に記載の単離されたポリペプチド。
【請求項５】
前記ポリペプチドがＦＡＤ結合部位を含む、請求項１に記載の単離されたポリペプチド。
【請求項６】
前記ポリペプチドが活性レナラーゼタンパク質である、請求項１に記載の単離されたポリペプチド。
【請求項７】
前記ポリペプチドが哺乳類レナラーゼタンパク質である、請求項１に記載の単離されたポリペプチド。
【請求項８】
前記ポリペプチドがヒトレナラーゼタンパク質である、請求項１に記載の単離されたポリペプチド。
【請求項９】
前記ポリペプチドがさらに補因子を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の単離されたポリペプチド。
【請求項１０】
前記補因子がフラビンアデニンジヌクレオチド（ＦＡＤ）又はその類似体である、請求項９に記載の単離されたポリペプチド。
【請求項１１】
前記補因子がフラビンアデニンジヌクレオチド（ＦＡＤ）である、請求項９に記載の単離されたポリペプチド。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の単離されたポリペプチド及び薬学的に許容可能な担体、希釈剤若しくはビヒクルを含む、又は基本的にそれらから構成されている組成物。
【請求項１３】
経口又は注射投与向けに処方されている、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物が即放性又は徐放性剤形である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
前記ポリペプチドが微晶質形態である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１６】
前記ポリペプチドがナノ粒子中に封入されている、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１７】
ポリペプチド及び薬学的に許容可能な担体、希釈剤若しくはビヒクルを含む、又は基本的にそれらで構成されている組成物であって、ポリペプチドが配列番号：２のアミノ酸配列又は配列番号：２の残基１７〜３４２のアミノ酸配列を有する組成物。
【請求項１８】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の単離されたポリペプチドとフラビンアデニンジヌクレオチド（ＦＡＤ）を結合させる工程を含む、活性レナラーゼポリペプチドの生産方法。
【請求項１９】
前記補因子がフラビンアデニンジヌクレオチド（ＦＡＤ）又はその類似体である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記酵素補因子がフラビンアデニンジヌクレオチド（ＦＡＤ）である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
少なくとも１つの体液からタンパク質を単離することにより、レナラーゼタンパク質を得る工程を含むレナラーゼタンパク質の獲得方法。
【請求項２２】
前記体液が血液、血清、血漿、唾液、尿、リンパ液、全血、髄液組織培地及び細胞抽出物からなる群から選択される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
イオン交換クロマトグラフィ、吸着クロマトグラフィ、リガンド結合アフィニティクロマトグラフィ、ゲル透過クロマトグラフィ又はそれらの任意の組合せを使用することにより、得られた前記レナラーゼタンパク質をさらに精製する工程をさらに含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
レナラーゼタンパク質を産生する細胞、細胞培養、組織、組織培養、器官又は器官培養から該タンパク質を単離することにより、前記レナラーゼタンパク質を得る工程を含むレナラーゼタンパク質の獲得方法。
【請求項２５】
レナラーゼタンパク質を産生するように培地中で細胞を培養し、前記細胞及び／又は培地からタンパク質を単離することによってレナラーゼタンパク質を得る工程を含む、レナラーゼタンパク質の獲得方法。
【請求項２６】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の単離されたポリペプチドと特異的に結合する抗体。
【請求項２７】
哺乳類のレナラーゼタンパク質又はそのフラグメントと特異的に結合する抗体。
【請求項２８】
前記抗体がポリクローナル抗体、モノクローナル抗体及び合成抗体からなる群から選択される、請求項２６又は２７に記載の抗体。
【請求項２９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の単離されたポリペプチドの治療上有効な量を哺乳類に投与する工程を含む、哺乳類におけるレナラーゼ媒介型身体状態、障害又は疾病を予防、治療又は改善する方法。
【請求項３０】
前記身体状態、障害又は疾病が、腎臓の状態、障害又は疾病；心臓血管の状態、障害又は疾病；心臓の状態、障害又は疾病；中枢神経系（ＣＮＳ）の状態、障害又は疾病；及びそれらのあらゆる組合せからなる群から選択される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記心臓血管の身体状態、障害又は疾病が、高血圧、無症候性左心室機能障害、慢性うっ血性心不全（ＣＨＦ）、心筋梗塞（ＭＩ）、心調律障害、卒中、アテローム性動脈硬化及びこれらのあらゆる組合せからなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記高血圧が、慢性高血圧、収縮期高血圧、孤立性収縮期高血圧、糖尿病性高血圧、肺高血圧、急性重症高血圧及びそれらのあらゆる組合せからなる群から選択される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記腎臓の状態、障害又は疾病が、末期腎不全（ＥＳＲＤ）、慢性腎不全及びそれらの組合せからなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
レナラーゼ療法を必要とする哺乳類に対しレナラーゼ療法を提供するための方法であって、前記哺乳類に対し請求項１〜８のいずれか１項に記載の単離されたポリペプチドの治療上有効な量を投与する工程を含む方法。
【請求項３５】
ＥＳＲＤを予防、治療又は改善する方法であって、請求項１〜８のいずれか１項に記載の単離されたポリペプチドの治療上有効な量を、ＥＳＲＤの予防、治療又は改善を必要とする哺乳類に対し投与する工程を含む方法。
【請求項３６】
ＣＮＳの状態、障害又は疾病を予防、治療又は改善する方法であって、治療上有効な量のレナラーゼ阻害物質を、ＣＮＳの状態、障害又は疾病の予防、治療又は改善を必要とする哺乳類に対し投与する工程を含む方法。
【請求項３７】
ＣＮＳの状態、障害又は疾病が、うつ病、不安症、躁病、統合失調症及びそれらの組合せからなる群から選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記レナラーゼ阻害物質が、低分子阻害物質、抗体、リボザイム、干渉ＲＮＡ及びアンチセンス核酸分子及びそれらの組合せからなる群から選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
前記哺乳類がヒトである、請求項３６〜３８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
レナラーゼ媒介型の身体状態、障害又は疾病の予防、治療又は改善を必要としている哺乳類において、レナラーゼ媒介型の身体状態、障害又は疾病を予防、治療又は改善するための遺伝子治療の方法であって、前記哺乳類に対し配列番号：１の核酸配列を含む又は配列番号：１の残基２４〜１０４９の核酸配列を含む単離された核酸分子を投与する工程を含む方法。
【請求項４１】
単離された核酸が、さらに、配列番号：１の核酸配列又は配列番号：１の残基２４〜１０４９の核酸配列に対し操作可能に連結されたプロモータを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
単離された核酸がウイルスベクターを用いて投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
レナラーゼ媒介型の身体状態、障害又は疾病の予防、治療又は改善を必要とする哺乳類において、レナラーゼ媒介型の身体状態、障害又は疾病を予防、治療又は改善するための遺伝子治療の方法であって、（ａ）前記哺乳類由来の細胞をｅｘ ｖｉｖｏで配列番号：１の核酸配列で又は配列番号：１の残基２４〜１０４９の核酸配列で工学的に処理する工程；及び（ｂ）前記工学的に処理した細胞を前記哺乳類に戻す工程を含む方法。
【請求項４４】
高血圧の予防、治療又は改善を必要とする哺乳類において高血圧を予防、治療又は改善するための方法であって、前記哺乳類に対し治療上有効な量のレナラーゼアゴニストを投与し、それによりレナラーゼの発現を増大させ、哺乳類における高血圧を予防、治療又は改善する工程を含む方法。
【請求項４５】
ＥＳＲＤの予防、治療又は改善を必要とする哺乳類においてＥＳＲＤを予防、治療又は改善するための方法であって、前記哺乳類に対し治療上有効な量のレナラーゼアゴニストを投与し、それによりレナラーゼの発現を増大させ哺乳類におけるＥＳＲＤを予防、治療又は改善する工程を含む方法。
【請求項４６】
哺乳類の身体状態、障害又は疾病の診断若しくは診断の補助をする方法、又は哺乳類の身体状態、障害又は疾病に対する感受性の診断若しくは診断の補助をする方法であって、前記身体状態、障害又は疾病が前記哺乳類において改変されたレナラーゼの発現に関連するものであり、前記方法が、前記哺乳類のレナラーゼ発現レベルを検出する工程と、前記哺乳類の前記レナラーゼ発現レベルを、前記身体状態、障害又は疾病を罹患していない哺乳類の前記レナラーゼ発現レベルと比較し、それにより、前記身体状態、障害又は疾病を罹患している、又は前記身体状態、障害若しくは疾病に対する感受性をもつ哺乳類の診断又は診断の補助をする工程と、を含む方法。
【請求項４７】
前記身体状態、障害又は疾病がＥＳＲＤ、高血圧、ＡＮＴ、心臓血管疾患及びそれらの組合せからなる群から選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記身体状態、障害又は疾病がＣＮＳの身体状態、障害又は疾病である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４９】
細胞内のレナラーゼの発現を増大させる化合物を同定する方法であって、
内部でレナラーゼが発現している細胞と１つの化合物を接触させ、該化合物と接触させられた前記細胞内のレナラーゼの発現レベルを、前記化合物と接触させられていない点を除いて同一である細胞内のレナラーゼの発現レベルと比較する工程を含み、
前記化合物と接触させられていない点を除いて同一である細胞内のレナラーゼ発現レベルと比較して、前記化合物と接触させられた前記細胞のレナラーゼ発現レベルがより高いものであることを、前記化合物が前記細胞内でのレナラーゼの発現を増大させたことの指標とする方法。
【請求項５０】
細胞内のレナラーゼの発現を減少させる化合物を同定する方法であって、
内部でレナラーゼが発現している細胞を化合物と接触させ、該化合物と接触させられた前記細胞内のレナラーゼの発現レベルを、前記化合物と接触させられていない点を除いて同一である細胞内のレナラーゼの発現レベルと比較する工程を含み、
前記化合物と接触させられていない点を除いて同一である細胞内のレナラーゼ発現レベルと比較して、前記化合物と接触させられた前記細胞のレナラーゼ発現レベルがより低いものであることを、前記化合物が前記細胞内でのレナラーゼの発現を減少させたことの指標とする方法。
【請求項５１】
請求項４９又は５０に記載の方法により同定された化合物。
【請求項５２】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の単離されたポリペプチドに対する結合パートナーを同定するための方法であって、（ａ）潜在的結合パートナーと前記単離されたポリペプチドを接触させる工程及び（ｂ）前記結合パートナーが前記ポリペプチドの活性に影響を及ぼすか否かを判定し、それにより結合パートナーを同定する工程を含む方法。
【請求項５３】
プロモータ／調節配列を含む核酸に対し操作可能に連結された配列番号：１の核酸配列を含む単離された核酸分子。
【請求項５４】
プロモータ／調節配列を含む核酸に対し操作可能に連結された配列番号：１の核酸配列の残基２４〜１０４９を含む単離された核酸分子。
【請求項５５】
プロモータ／調節配列をコードする核酸配列に対し操作可能に連結された配列番号：１の核酸配列と少なくとも約４０％の同一性を有する核酸配列を含む単離された核酸分子。
【請求項５６】
共有結合で連結されたタグポリペプチドをコードする核酸配列をさらに含む、請求項５５に記載の単離された核酸分子。
【請求項５７】
請求項５５又は５６に記載の核酸分子を含むベクター。
【請求項５８】
請求項５５に記載の核酸分子、請求項５６に記載の核酸分子又は請求項５７に記載のベクターを含む組換え細胞。
【請求項５９】
レナラーゼポリペプチドの生産方法であって、前記レナラーゼポリペプチドを発現する能力をもつ組換え細胞を培養する工程を含み、前記レナラーゼポリペプチドは、配列番号：１の核酸配列と少なくとも約４０％の同一性を有する核酸配列を有する核酸分子によってコードされている、方法。
【請求項６０】
請求項５９に記載の方法によって生産される単離されたレナラーゼポリペプチド。
【請求項６１】
前記核酸分子が、アミノ酸配列が配列番号：２のアミノ酸配列と少なくとも約９５％同一であるレナラーゼタンパク質をコードする、請求項５９に記載の方法。
【請求項６２】
請求項６１に記載の方法により生産される単離されたレナラーゼタンパク質。
【請求項６３】
レナラーゼポリペプチドを生産する方法であって、（ａ）請求項５３に記載の単離された核酸分子を含む組換え細胞を、該核酸分子の発現を可能にする条件下で培養する工程、及び（ｂ）前記細胞により産生された前記レナラーゼタンパク質を回収する工程を含む方法。
【請求項６４】
請求項６３に記載の方法によって生産される単離されたレナラーゼポリペプチド。
【請求項６５】
配列番号：１の核酸配列と少なくとも約４０％の同一性を有する核酸配列に相補的である単離された核酸分子であって、該相補的核酸分子がアンチセンス配向にある、核酸分子。
【請求項６６】
操作可能に連結されたプロモータ／調節領域をさらに含む、請求項６５に記載の単離された核酸分子。
【請求項６７】
レナラーゼポリペプチドの生産方法であって、前記レナラーゼポリペプチドをコードする核酸を発現する能力をもつ組換え細胞を培養する工程を含み、前記レナラーゼポリペプチドが、配列番号：１の核酸配列と少なくとも約４０％の同一性を有する核酸配列を有する核酸分子によってコードされ、前記相補的核酸がアンチセンス配向にある方法。
【請求項６８】
前記核酸配列がさらに、操作可能に連結されたプロモータ／調節領域をさらに含む、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
請求項６７又は６８に記載の方法によって生産された単離されたレナラーゼポリペプチド。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図１Ｃ】

【図１Ｄ】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図２Ｃ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図４Ｃ】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図７Ｄ】

【図７Ｅ】

【図７Ｆ】

【図７Ｇ】

【公表番号】特表２００７−５３１５１８（Ｐ２００７−５３１５１８Ａ）
【公表日】平成１９年１１月８日（２００７．１１．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５０４１７２（Ｐ２００７−５０４１７２）
【出願日】平成１７年３月２１日（２００５．３．２１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００５／００９２４８
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０８９５０５
【国際公開日】平成１７年９月２９日（２００５．９．２９）
【出願人】（５０３４６９３９３）イエール　ユニバーシティ (11)
【Ｆターム（参考）】