【課題】試料中の１つ以上の分析物の特異的な検出法を提供する。
【解決手段】この方法は、試料中の１つ以上の任意の分析物を、散乱光の検出が可能な粒子と特異的に会合させる段階と、前記粒子から散乱光が生じ、かつ１個以上の該粒子から散乱した光を、電子増幅せずに５００倍未満の倍率で肉眼検出し得る条件下で、該分析物と会合した任意の粒子に光を照射する段階とを含む。この方法はまた、このような任意の粒子によってそれらの条件下で散乱された光を、分析物の存在の目安として検出する段階をも含む。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中の１つ以上の分析物の特異的な検出法であって、
前記試料中の前記１つ以上の分析物に散乱光が検出可能な粒子を特異的に会合させる段階と、
前記粒子から散乱光が生じ、かつ１個以上の前記粒子から散乱した光を電子増幅せずに５００倍未満の倍率で肉眼検出し得る条件下で、前記分析物と会合した前記粒子に光を照射する段階と、
前記条件下で前記粒子によって散乱された前記光を、前記１つ以上の分析物の存在の目安として検出する段階と
を含む方法。
【請求項２】
前記肉眼で観察し、白色光を照射すると、前記粒子が特定の有色光を生じるのに適したサイズを有する、請求の範囲第１項の方法。
【請求項３】
前記特定の有色光の色により、前記１つ以上の分析物の存在または量の目安が提供される、請求の範囲第２項の方法。
【請求項４】
前記検出が、前記１つ以上の分析物の濃度の測定値として散乱光強度の測定を含む、請求の範囲第１項の方法。
【請求項５】
前記検出が、前記１つ以上の分析物の濃度の測定として散乱光の色の測定を含む、請求の範囲第１項の方法。
【請求項６】
前記肉眼で観察し、白色光を照射すると、前記粒子が特定の有色光を生じるのに適した組成を有する、請求の範囲第１項の方法。
【請求項７】
前記粒子が固相結合分析物と会合した、請求の範囲第１項の方法。
【請求項８】
前記検出段階の間前記粒子が液相中にある、請求の範囲第１項の方法。
【請求項９】
前記分析物が固相と結合した、請求の範囲第１項の方法。
【請求項１０】
前記分析物が溶液中に遊離した、請求の範囲第１項の方法。
【請求項１１】
前記試料が、前記１つ以上の分析物を各々含んだ別個の領域を含むマイクロアレイまたはアレイチップである、請求の範囲第１項の方法。
【請求項１２】
前記光が多色白色光である、請求の範囲第１項の方法。
【請求項１３】
単色光照射光源を用いて前記光を供給する、請求の範囲第１項の方法。
【請求項１４】
前記方法が、前記肉眼で観察すると各々異なる視覚的外観を有する複数の異なる粒子を提供する段階を含む、請求の範囲第１項の方法。
【請求項１５】
前記粒子を同種(homogeneous)アッセイの中で用い、２個以上の粒子を互いに十分に接近させていずれか１個の粒子の光散乱特性を変化させるようにし、前記変化が前記１つ以上の分析物の存在の目安となる、請求の範囲第１項の方法。
【請求項１６】
前記粒子をアッセイの中で用い、２個以上の粒子を互いに十分に接近させて２個以上の粒子の光散乱特性が単一粒子から識別可能となるようにし、前記光散乱が前記１つ以上の分析物の存在の目安となる、請求の範囲第１項の方法。
【請求項１７】
前記粒子を同種アッセイの中で用い、２個以上の粒子を互いに十分に接近させて２個以上の粒子の光散乱特性が単一粒子から識別可能となるようにし、前記光散乱が前記１つ以上の分析物の存在の目安となる、請求の範囲第１項の方法。
【請求項１８】
前記粒子を同種アッセイの中で用い、互いに近接して保持した２個以上の粒子を引き離していずれか１個の粒子の光散乱特性を変化させるようにし、前記変化が前記１つ以上の分析物の存在の目安となる、請求の範囲第１項の方法。
【請求項１９】
前記粒子を同種アッセイの中で用い、１つ以上の分子間相互作用により２個以上の粒子を互いに連結した方法であって、粒子を粒子を一体保持する分子間相互作用を分断して１個以上の粒子を分子間相互作用から解放し、前記解放が前記１個以上の粒子の存在の目安となる、請求の範囲第１項の方法。
【請求項２０】
前記粒子が金粒子または銀粒子である、請求の範囲第１項の方法。
【請求項２１】
前記粒子が１から５００ナノメートルの間のサイズを有する、請求の範囲第１項の方法。
【請求項２２】
プリズムまたはその他の導光系により前記光を前記粒子に指向させる、請求の範囲第１項の方法。
【請求項２３】
少なくとも１種類の光散乱物質から作成された特異的に検出し得る金属様の光散乱粒子の集団であって、前記粒子が、化学的安定性ならびに分析物と結合する能力を前記粒子に付与する、少なくともさらに１種類の材料をその表面に含み、前記粒子の集団が十分なサイズ均一性をもつのに適し、したがって前記集団中の個々の粒子の光散乱特性が粒子相互間で類似する集団。
【請求項２４】
前記粒子を金属、金属化合物、金属酸化物、半導体、超伝導体から成るグループから選択される材料から形成する、請求の範囲第２３項の粒子。
【請求項２５】
金属様の材料を組成物の一部として含む混合組成物で前記粒子を形成する、請求の範囲第２３項の集団。
【請求項２６】
金属、金属化合物、金属酸化物、半導体、超伝導体から成るグループから選択される少なくとも１つの材料から形成され、直径１から５００ナノメートルの特異的に検出可能な光散乱粒子試薬であって、前記粒子試薬が粒子表面と結合するのに適し、かつ結合試薬と結合するのに適した基礎分子を含み、前記粒子試薬が分析物と結合し得る光散乱粒子試薬。
【請求項２７】
前記粒子がポリマー、無機材料、有機材料、蛋白質材料、基礎分子材料、結合剤から成るグループから選択される被覆を有する、請求の範囲第２３項または第２６項の集団または粒子。
【請求項２８】
前記粒子が球状である、請求の範囲第２３項または第２６項の集団または粒子。
【請求項２９】
前記粒子が卵形または楕円体である、請求の範囲第２８項の集団または粒子。
【請求項３０】
前記粒子が非対称である、請求の範囲第２９項の集団または粒子。
【請求項３１】
前記粒子が変動係数５％未満の粒度分布を有する、請求の範囲第２３項または第２６項の集団または粒子。
【請求項３２】
前記粒子が変動係数１０％未満の粒度分布を有する、請求の範囲第２３項または第２６項の集団または粒子。
【請求項３３】
前記粒子が変動係数１５％未満の粒度分布を有する、請求の範囲第２３項または第２６項の集団または粒子。
【請求項３４】
前記粒子が金を含む、請求の範囲第２３項の集団。
【請求項３５】
前記粒子が金と銀の混合組成物を含む、請求の範囲第２３項の集団。
【請求項３６】
前記粒子が銀と磁性材料または強誘電性材料から構成される、請求の範囲第２３項の集団。
【請求項３７】
前記粒子が金と磁性材料または強誘電性材料から構成される、請求の範囲第２３項の集団。
【請求項３８】
前記粒子が金属様の材料と磁性材料または強誘電性材料との混合物から構成される、請求の範囲第２３項の集団。
【請求項３９】
前記粒子がポリマー、蛋白質、核酸、無機化合物および有機化合物、基礎材料分子、結合剤から成るグループから選択される表面被覆を有する金から成り、前記粒子が１０から５０ナノメートルの間の直径を有し、白色光を照射すると緑色散乱光を生じる、請求の範囲第２３項の集団。
【請求項４０】
前記粒子がポリマー、蛋白質、無機化合物および有機化合物、基礎材料分子、結合剤から成るグループから選択される表面被覆を有する金から成り、前記粒子の直径が５０から７０ナノメートルの間であり、白色光を照射すると黄緑色ないし黄色の散乱光を生じる、請求の範囲第２３項の集団。
【請求項４１】
前記粒子がポリマー、蛋白質、無機化合物、有機化合物、基礎材料分子、結合剤から成るグループから選択される表面被覆を有する金から成り、前記粒子が約７０から１２０ナノメートルの間の直径を有し、白色光を照射すると橙色ないし橙赤色の散乱光を生じる、請求の範囲第２３項の集団。
【請求項４２】
前記粒子がポリマー、蛋白質、無機化合物、有機化合物、基礎材料分子、結合剤から成るグループから選択される表面被覆を有する金から成り、前記粒子が１２０ナノメートルより大きく１ミクロンより小さい直径を有し、白色光を照射すると橙色ないし橙赤色の散乱光を生じる、請求の範囲第２３項の集団。
【請求項４３】
前記粒子がポリマー、蛋白質、無機化合物、有機化合物、基礎材料分子、結合剤から成るグループから選択される表面被覆を有する銀から成り、前記粒子が５から５０ナノメートルの間の直径を有し、白色光を照射すると青色散乱光を生じる、請求の範囲第２３項の集団。
【請求項４４】
光が前記試料に届き、かつ前記試料と結合した粒子からの散乱光が最大限に検出できるような角度に向けた光源を含む固相試料分析用の装置であって、前記粒子から散乱光が生じ、かつ１個以上の前記粒子から散乱した光を電子増幅せずに５００倍未満の倍率で肉眼検出し得る条件下で、前記試料と会合した前記粒子に前記光を照射し得るように、前記装置を組み立て配置した装置。
【請求項４５】
前記試料からの散乱光前方の強度包絡線外に集光レンズ検出器を置いた、請求の範囲第４４項の装置。
【請求項４６】
前記散乱光を検出できるように構成、配置された、必要なコンピュータ・ソフトウェアまたはファームウェアを有する粒子計数器を備えた、請求の範囲第４４項の装置。
【請求項４７】
前記試料を載せる表面に対してほぼ垂直となるように前記装置の中に集光レンズを設けた、請求の範囲第４４項の装置。
【請求項４８】
マイクロアレイの測定ができるように前記装置を組み立て配置し、前記マイクロアレイが１０立方ミクロンから１立方ミリメートルの間の寸法を有する、請求の範囲第４４項の装置。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４ＡＢ】

【図４Ｃ】

【図５Ａ】

【図５ＡＢ】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２ＡＢ】

【図１２ＣＤ】

【図１２Ｅ】

【図１３】

【図１４】

【図１５Ａ】

【図１５Ｂ】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６ＡＢ】

【図２６ＣＤ】

【図２６ＥＦ】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【公開番号】特開２００９−２３６９２１（Ｐ２００９−２３６９２１Ａ）
【公開日】平成２１年１０月１５日（２００９．１０．１５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１３８７５５（Ｐ２００９−１３８７５５）
【出願日】平成２１年６月１０日（２００９．６．１０）
【分割の表示】特願平９−５３８２２７の分割
【原出願日】平成９年４月１７日（１９９７．４．１７）
【出願人】（５０２２２１２８２）ライフ　テクノロジーズ　コーポレーション (113)
【出願人】（５９２１３０６９９）ザ　リージェンツ　オブ　ザ　ユニバーシティ　オブ　カリフォルニア (364)
【氏名又は名称原語表記】Ｔｈｅ　Ｒｅｇｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｔｈｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ
【Ｆターム（参考）】