睡眠導入剤、並びに、これを含有する医薬組成物及び食品
【課題】睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れ、かつ安全性の高い睡眠導入剤、並びに、前記睡眠導入剤を含有する医薬組成物及び食品を提供すること。
【解決手段】以下の構造式（１）で表されるハイパフォリン、及びその医薬的に許容され得る塩の少なくともいずれかを含有することを特徴とする睡眠導入剤、並びに、前記睡眠導入剤を含有する医薬組成物及び食品である。
【化４】
【解決手段】以下の構造式（１）で表されるハイパフォリン、及びその医薬的に許容され得る塩の少なくともいずれかを含有することを特徴とする睡眠導入剤、並びに、前記睡眠導入剤を含有する医薬組成物及び食品である。
【化４】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、不眠状態や睡眠が必要な状態の患者に適用され得る、睡眠導入剤、並びに、前記睡眠導入剤を含有する医薬組成物及び食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
不眠状態や睡眠が必要な状態の患者に適用される睡眠導入剤としては、従来から様々なものが知られており、例えば、トリアゾラム、ロルメタゼパム、フルニトラゼパム等のベンゾジアゼピン系の薬剤；エチゾラム等のチエノジアゼピン系の薬剤；ペントバルビタール等のバルビツール酸系の薬剤；抗ヒスタミン薬などが知られている。以前は、これらの中でもバルビツール酸系の薬剤がよく用いられていたものの、副作用が強いことなどから、現在では比較的安全なベンゾジアゼピン系の薬剤が多く用いられる傾向にある。
しかし、程度に差はあるものの、前記従来の睡眠導入剤はいずれも、依存形成、一過性の健忘、覚醒後の眠気、悪夢などの副作用の可能性があり、このため、より副作用の心配の少ない睡眠導入剤が求められていた。
【０００３】
そこで、より副作用の少ない睡眠導入剤を開発する目的で、従来から、植物由来成分をはじめとした種々の天然由来成分の、睡眠導入剤としての使用が提案されている。
例えば、アキノワスレグサ（Ｈｅｍｅｒｏｃａｌｌｉｓ ｆｕｌｖａ ｖａｒ．ｓｅｍｐｅｒｖｉｒｅｎｓ）の発酵処理物は、総睡眠時間を延長させる等の睡眠改善作用を有することが報告されている（特許文献１参照）。また、バレリアーナ（Ｖａｌｅｒｉａｎａｃｅａｅ）属植物又はその抽出物は、主観的な睡眠感を改善させる等の睡眠改善作用を有することが報告されている（特許文献２参照）。また、例えばヒノキやヒバ等の針葉樹に含まれる香気成分の１種であるセドロール等のセスキテルペンアルコール類は、交感神経を抑制し副交感神経活動を優位にさせることができ、睡眠深度を深める等の睡眠改善作用を有することが報告されている（特許文献３参照）。
【０００４】
前記したような天然由来成分を利用した睡眠導入剤は、一般に安全性が高く、副作用の少ない睡眠導入剤としての使用が有望である。しかし一方で、前記天然由来成分を利用した睡眠導入剤では、効果が弱く、所望の睡眠改善効果が得られない場合も多い。
したがって、安全性の高さ、及び睡眠改善効果の高さのいずれをも兼ね備えた、優れた睡眠導入剤の開発は、未だ望まれているのが現状である。
【０００５】
【特許文献１】特許公開第２００６−６２９９８号公報
【特許文献２】特許公開第２００３−１８３１７４号公報
【特許文献３】国際公開第０１／０５８４３５号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れ、かつ安全性の高い睡眠導入剤、並びに、前記睡眠導入剤を含有する医薬組成物及び食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
前記課題を解決するために、本発明者らは鋭意検討した結果、以下のような知見を得た。即ち、マメ科エリスリナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ）属に属する植物から得られる生理活性物質、ハイパフォリンが、優れた睡眠導入作用を有するという知見である。
前記ハイパフォリン（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ：Ｎ，Ｎ，Ｎ−Ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−１−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｏ−２−（１Ｈ−ｉｎｄｏｌｅ−３−ｙｌ）ｅｔｈａｎａｍｉｎｉｕｍ）は、後述する構造式（１）で表される、インド−ルアルカロイド化合物の１種であり、植物においては、例えばコツブタケ等の外生菌根菌に含まれ、共生する植物の根毛の伸長を阻害する働きがあることなどが知られている（例えば、Ｐｌａｎｔａ．２０００ Ｏｃｔ；２１１（５）：７２２−８参照）。
しかしながら、前記ハイパフォリンが、優れた睡眠導入作用を有しており、安全性の高い睡眠導入剤として使用可能であることは従来全く知られておらず、本発明者らの新たな知見である。
【０００８】
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞ 以下の構造式（１）で表されるハイパフォリン、及びその医薬的に許容され得る塩の少なくともいずれかを含有することを特徴とする睡眠導入剤である。
【化２】
＜２＞ ハイパフォリンが（＋）−ハイパフォリンである前記＜１＞に記載の睡眠導入剤である。
＜３＞ ハイパフォリンが植物由来である前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の睡眠導入剤である。
＜４＞ ハイパフォリンがマメ科エリスリナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ）属に属する植物由来である前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の睡眠導入剤である。
＜５＞ マメ科エリスリナ属に属する植物が、エリスリナ ベルチナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｎａ）、デイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖａｒｉｅｇａｔａ）、及び、アメリカデイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｃｒｉｓｔａ−ｇａｌｌｉ）からなる群より選択される少なくとも１種である前記＜４＞に記載の睡眠導入剤である。
＜６＞ 前記＜１＞から＜５＞のいずれかに記載の睡眠導入剤を含有することを特徴とする医薬組成物である。
＜７＞ 前記＜１＞から＜５＞のいずれかに記載の睡眠導入剤を含有することを特徴とする食品である。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によると、従来における諸問題を解決することができ、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れ、かつ安全性の高い睡眠導入剤、並びに、前記睡眠導入剤を含有する医薬組成物及び食品を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
（睡眠導入剤）
本発明の睡眠導入剤は、ハイパフォリン、及びその医薬的に許容され得る塩の少なくともいずれかを含有してなり、必要に応じて更にその他の成分を含有してなる。
【００１１】
＜ハイパフォリン＞
前記ハイパフォリン（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ：Ｎ，Ｎ，Ｎ−Ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−１−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｏ−２−（１Ｈ−ｉｎｄｏｌｅ−３−ｙｌ）ｅｔｈａｎａｍｉｎｉｕｍ）は、後述する構造式（１）で表される、インド−ルアルカロイド化合物の１種である。
【化３】
【００１２】
なお、前記ハイパフォリンとしては、（＋）体である（＋）−ハイパフォリンを使用することが、特に好ましい。
また、前記医薬的に許容され得る塩としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、無機塩及び有機塩のいずれかが挙げられ、より具体的には、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩などが挙げられる。
前記ハイパフォリン、及びその医薬的に許容され得る塩は、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。
【００１３】
前記ハイパフォリンは、その入手方法に特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、化学的に合成されたものを使用してもよいし、天然物由来のものを使用してもよい。これらの中でも、より副作用の心配が低減されるという点で、天然物由来のものが好ましい。
前記ハイパフォリンが天然物由来のものである場合、その由来としては特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、植物由来であることが好ましく、中でも、マメ科エリスリナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ）属に属する植物由来であることがより好ましい。前記マメ科エリスリナ属に属する植物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、エリスリナ ベルチナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｎａ）、デイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖａｒｉｅｇａｔａ）、アメリカデイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｃｒｉｓｔａ−ｇａｌｌｉ）、エリスリナ リシステモン（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｌｙｓｉｓｔｅｍｏｎ）、エリスリナ コラロデンドロン（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｃｏｒａｌｌｏｄｅｎｄｒｏｎ）、エリスリナ セネガレンシス（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｓｅｎｅｇａｌｅｎｓｉｓ）、エリスリナ ブレビフロラ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｂｒｅｖｉｆｌｏｒａ）、エリスリナ アビシニカ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ａｂｙｓｓｉｎｉｃａ）などが挙げられる。
【００１４】
前記ハイパフォリンは、例えば、前記マメ科エリスリナ属に属する植物の植物体から分離することができ、前記植物体としては、例えば、樹皮、葉、枝、実、種子などが挙げられる。
【００１５】
前記マメ科エリスリナ属に属する植物の植物体からの前記ハイパフォリンの分離方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、後述する実施例に示すような方法で行うことができる。
【００１６】
前記睡眠導入剤中の前記ハイパフォリンの含有量は、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、また、前記睡眠導入剤は前記ハイパフォリンそのものであってもよい。
【００１７】
＜その他の成分＞
前記その他の成分としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記ハイパフォリンを溶解、希釈等するための、生理食塩液などが挙げられる。また、前記睡眠導入剤中の前記その他の成分の含有量も、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００１８】
前記睡眠導入剤は、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を投与から短時間で誘導する効果に優れる。ここで、前記短時間とは、特に制限はないが、通常、前記睡眠導入剤を投与してから１〜２時間程度のことをいう。前記睡眠導入剤がノンレム睡眠を短時間で誘導可能であることは、例えば、当該技術分野における通常の方法を用い、確認することができる。例えば、マウス等の実験動物に前記睡眠導入剤を投与し、脳波や筋電図測定を利用して睡眠状態を観察することにより、確認することができる。また、後述する実施例に示すように、マウスの脳に直接電極を装着し、マウスを無拘束状態としたまま、脳波や筋電図を測定して睡眠状態を観察する方法を使用すれば、本発明の睡眠導入剤が睡眠状態に及ぼす影響を、より厳密に確認することが可能であり、好ましい。
前記睡眠導入剤は、例えば、後述する本発明の医薬組成物、食品などに好適に使用可能である。
【００１９】
（医薬組成物）
本発明の医薬組成物は、本発明の前記睡眠導入剤を少なくとも含み、必要に応じて更にその他の成分を含む。
【００２０】
前記医薬組成物中の、前記睡眠導入剤の含有量としては、特に制限はなく、例えば、後述する前記医薬組成物の剤型や、所望の効果の程度等に応じて適宜選択することができる。
【００２１】
−その他の成分−
前記その他の成分としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲内で、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、医薬的に許容され得る担体などが挙げられる。前記担体としても、特に制限はなく、例えば、後述する前記医薬組成物の剤型等に応じて適宜選択することができる。また、前記医薬組成物中の前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて、適宜選択することができる。
【００２２】
−剤型−
前記医薬組成物の剤型としては、特に制限はなく、例えば、後述するような所望の投与方法に応じて適宜選択することができ、例えば、経口固形剤（錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等）、経口液剤（内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等）、注射剤（溶液、懸濁液、用事溶解用固形剤等）、坐剤、軟膏剤、貼付剤、ゲル剤、クリーム剤、外用散剤、スプレー剤、吸入散剤などが挙げられる。
【００２３】
前記経口固形剤としては、例えば、前記睡眠導入剤に、賦形剤、更には必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味・矯臭剤等の添加剤を加え、常法により製造することができる。
前記賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸などが挙げられる。前記結合剤としては、例えば、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。前記崩壊剤としては、例えば、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖などが挙げられる。前記滑沢剤としては、例えば、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコールなどが挙げられる。前記着色剤としては、例えば、酸化チタン、酸化鉄などが挙げられる。前記矯味・矯臭剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸などが挙げられる。
【００２４】
前記経口液剤としては、例えば、前記睡眠導入剤に、矯味・矯臭剤、緩衝剤、安定化剤等の添加剤を加え、常法により製造することができる。
前記矯味・矯臭剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸などが挙げられる。前記緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウムなどが挙げられる。前記安定化剤としては、例えば、トラガント、アラビアゴム、ゼラチンなどが挙げられる。
【００２５】
前記注射剤としては、例えば、前記睡眠導入剤に、ｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下用、筋肉内用、静脈内用等の注射剤を製造することができる。
前記ｐＨ調節剤及び前記緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウムなどが挙げられる。前記安定化剤としては、例えば、ピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸などが挙げられる。前記等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、ブドウ糖などが挙げられる。前記局所麻酔剤としては、例えば、塩酸プロカイン、塩酸リドカインなどが挙げられる。
【００２６】
前記坐剤としては、例えば、前記睡眠導入剤に、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセリド等の公知の坐剤製剤用担体と、必要に応じてツイーン（ＴＷＥＥＮ：登録商標）等の界面活性剤などを加えた後、常法により製造することができる。
【００２７】
前記軟膏剤としては、例えば、前記睡眠導入剤に、公知の基剤、安定剤、湿潤剤、保存剤等を配合し、常法により混合し、製造することができる。
前記基剤としては、例えば、流動パラフィン、白色ワセリン、サラシミツロウ、オクチルドデシルアルコール、パラフィンなどが挙げられる。前記保存剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピルなどが挙げられる。
【００２８】
前記貼付剤としては、例えば、公知の支持体に前記軟膏剤としてのクリーム剤、ゲル剤、ペースト剤等を、常法により塗布し、製造することができる。前記支持体としては、例えば、綿、スフ、化学繊維からなる織布、不織布、軟質塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン等のフィルム、発泡体シートなどが挙げられる。
【００２９】
前記医薬組成物は、本発明の前記睡眠導入剤を少なくとも含むので、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れる。そのため、前記医薬組成物は、不眠状態や睡眠が必要な状態の患者への適用に好適である。
【００３０】
（食品）
本発明の食品は、本発明の前記睡眠導入剤を少なくとも含み、必要に応じて更にその他の成分を含む。
【００３１】
前記食品中の、前記睡眠導入剤の含有量としては、特に制限はなく、例えば、後述する前記食品の種類や、所望の効果の程度等に応じて適宜選択することができる。
【００３２】
−その他の成分−
前記その他の成分としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲内で、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、各種食品原料などが挙げられる。前記食品原料としても、特に制限はなく、例えば、後述する前記食品の種類等に応じて適宜選択することができる。また、前記食品中の前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３３】
−食品の種類−
前記食品の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ゼリー、キャンディー、チョコレート、ビスケット等の菓子類；緑茶、紅茶、コーヒー、清涼飲料等の嗜好飲料；原料乳、ヨーグルト、アイスクリーム等の乳製品；野菜飲料、果実飲料、ジャム類等の野菜・果実加工品；スープ等の液体食品；パン類、麺類等の穀物加工品；などが挙げられる。これらの食品の製造方法としては、特に制限はなく、例えば、通常の各種食品の製造方法に応じて、適宜製造することができる。
また、前記食品は、例えば、錠剤、顆粒剤、カプセル剤等の経口固形剤や、内服液剤、シロップ剤等の経口液剤として製造されたものであってもよい。前記経口固形剤、経口液剤の製造方法は、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記した医薬組成物の経口固形剤、経口液剤の製造方法にならい、製造することができる。
【００３４】
前記食品は、本発明の前記睡眠導入剤を少なくとも含むので、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れる。そのため、前記食品は、例えば、不眠状態や睡眠が必要な状態を改善する目的で摂取される、機能性食品として特に有用であると考えられる。
【００３５】
（投与）
前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品は、例えば、不眠状態や睡眠が必要な状態の患者への適用に好適であり、例えば、これらの患者に投与することにより使用することができる。
前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品の投与対象動物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ヒト、マウス、ラット、ウシ、ブタ、サルなどが挙げられる。
また、前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品の投与方法としては、特に制限はなく、例えば、前記医薬組成物の剤型等に応じ、適宜選択することができ、経口投与、腹腔内投与などが挙げられる。
また、前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品の投与量としては、特に制限はなく、投与対象である患者の年齢、体重、所望の効果の程度等に応じて適宜選択することができるが、例えば、成人への１回の投与あたり、有効成分である前記ハイパフォリンの量として、１００〜５００ｍｇ／ｋｇ体重が好ましく、１００〜３００ｍｇ／ｋｇ体重がより好ましい。
【００３６】
また、前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品の投与時期としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品は投与から短時間（例えば、１〜２時間）でのノンレム睡眠導入効果に優れるため、例えば、ノンレム睡眠を誘導したい時間帯の０．５〜１時間前に投与されることが望ましいと考えられる。
【００３７】
（効果）
前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品は、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れるので、例えば、不眠状態や睡眠が必要な状態の患者への適用に好適であり、中でも、投与から短時間でのノンレム睡眠の増加が望まれる患者への適用に特に好適である。また、前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品は、その有効成分が天然物から得ることのできる前記ハイパフォリンであることから、副作用の可能性が低く、安全性の高い点でも、有利である。
【実施例】
【００３８】
以下に本発明の実施例を説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００３９】
（製造例１：ハイパフォリンの調製）
以下のようにしてハイパフォリンを調製し、後述する実施例１において本発明の睡眠導入剤として使用した。
【００４０】
−ハイパフォリンの分離−
エリスリナ ベルチナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｎａ）の種子、３０３ｇを用い、図５に記載した分離スキームに従い、前記種子からハイパフォリンを分離した。
まず、エリスリナ ベルチナの種子を粉砕後、メタノールで抽出し、得られたメタノール抽出液を濃縮後、水と石油エーテルを加え、酒石酸にて酸性（ＰＨ３）とし、その後、酢酸エチルにて抽出し、中性画分を得た。次に水層に、炭酸ナトリウムを加え、アルカリ性とした後、クロロホルム、ブタノールにて、順次抽出し、各々アルカロイド画分として得た（図５）。
【００４１】
−ハイパフォリンの同定−
前記分離により得られたハイパフォリンの構造は、質量分析法（ＦＡＢＭＡＳＳ)、及び、核磁気共鳴法（ＮＭＲ）により決定した（図６参照）。得られたハイパフォリンのＭＡＳＳ、ＮＭＲスペクトルデータをそれぞれ以下に示す。なお、旋光度から、得られたハイパフォリンの絶対構造をＳと決定した。［α］Ｄ ＋８９．６（ｃ＝０．１２５，ｗａｔｅｒ，２５℃，Ｈ２Ｏ）。
１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）７．１８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２），７．３２（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝８．６４，Ｈ−４），７．０４（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１．２５，８．６４，Ｈ−５），７．１０（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１．２５，８．６４，Ｈ−６），７．６２（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝８．６４，Ｈ−７），３．４（２Ｈ，ｍ，Ｈ−８），３．８８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．６５，６．１５，Ｈ−９），３．２６，−３．２７（９Ｈ，ｓ，ＮＭｅ３），１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）１２５．１３（Ｃ−２），１０９．０１（Ｃ−３），１２８．３２（Ｃ−３ａ），１１２．４６（Ｃ−４），１１９．０５（Ｃ−５），１２２．６２（Ｃ−６），１１９．０５（Ｃ−７），１３８．１２（Ｃ−７ａ），５２．７０，５２．７３，５２．７６（Ｎ−Ｍｅ），１７１．６８（Ｃ−１０）．ＦＡＢ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２４７．
【００４２】
（実施例１：ハイパフォリンの睡眠導入効果）
前記製造例１で得られたハイパフォリンの睡眠導入効果を、以下のようにして検証した。
【００４３】
−マウスへの脳波・筋電図記録用電極の装着−
実験動物として、Ｃ５７ＢＬマウス（♂；１６〜２１週齢、日本クレア株式会社）を用いた。飼育環境は、明期を０７：００〜１９：００、暗期を１９：００〜０７：００、室温を２４±１℃、湿度を５６±６％とした。
マウス頭部に装着する脳波（ＥＥＧ）・筋電図（ＥＭＧ）記録用電極を、以下のようにして作成した。雌型ソケット（ＳＭＱ、ヒロセ電機株式会社）の端子５本を利用して、端子１にはＥＥＧ測定用電極（金ビス電極；直径０．９ｍｍ、長さ３．０ｍｍ）接着用のコードを、端子２、３には銀線（直径０．２ｍｍ）の先端を球状にしたＥＥＧ測定用の銀ボール電極をそれぞれ半田付けした。更に、ＥＭＧ測定用の２本の銀線（直径０．２ｍｍ）を接続した（図１参照）。
図１に、前記脳波・筋電図記録用電極をマウスへ装着する様子を示した。ネンブタール（１０ｍｇ／ｋｇ；腹腔内投与）で麻酔したマウスを脳定位固定装置に固定し、頭蓋骨を露出した。ＥＥＧ測定用電極を植込むために頭蓋骨に歯科用ドリルで穴を開けた。前記したように電極には金ビス電極及び銀ボール電極を使用し、不関電極１本と皮質電極２本の計３本とした。続いて、ＥＭＧ測定用の銀線電極をマウスの後部頸筋に刺入した。なお、ＥＥＧ用電極、ＥＭＧ用電極は歯科用アクリル樹脂のリペアジン（株式会社ＧＣ）にて頭蓋骨と完全に固定した。電極植え込み手術からの回復のため、１週間の期間をおいた後、マウスを脳波・筋電図記録用ケージに移し、レコーディングシステムに接続し、以下の投与実験に供した。
なお、前記のような手法で、マウスに脳波・筋電図記録用電極を装着して、睡眠データ記録を行うことにより、無拘束状態のマウスにおける、脳波及び筋電図の時系列変化を連続的に測定することが可能となる。したがって、マウスの自然な睡眠覚醒リズムが脳波及び筋電図測定の影響により乱れることがなく、そのため、評価したい生理活性物質、ここではハイパフォリンの睡眠覚醒に対する作用を、より厳密に評価することが可能となる。
【００４４】
−ハイパフォリン投与−
試料には、前記製造例１で得られたハイパフォリン（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）３００ｍｇ／ｋｇを使用し、前記脳波・筋電図記録用電極を装着したマウスに腹腔内投与した。前記腹腔内投与は、飼育環境の暗期の始まる約３０分前の１８：２０〜１８：３０の間に全て行った。比較対照として、ビヒクル（Ｖｅｈｉｃｌｅ）の生理食塩液（Ｓａｌｉｎｅ）のみを、同様に腹腔内投与した。脳波・筋電図による睡眠データ記録を、夜行性マウスの活動期を対象とした１９：００から翌朝０７：００までの暗期連続記録として行った（図２参照）。これらのうち、１９：００〜２３：００の４時間における睡眠データについて、ハイパフォリン投与群（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）と、対照である生理食塩液投与群（Ｓａｌｉｎｅ）とを比較した。結果を図３に示す。
なお、実験は２回に分け、１回目の実験には４匹のマウス（マウス番号１〜４）を、また４ヶ月後に行った２回目の実験には別のマウス４匹（マウス番号５〜８）を用い、合計８匹を用いて行った。ハイパフォリン投与（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）と生理食塩液のみの投与（Ｓａｌｉｎｅ）とを、合計８匹のマウスによるクロスオーバー実験とした（表１参照）。
【００４５】
【表１】
【００４６】
−結果−
ハイパフォリン３００ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与後１時間に、ハイパフォリン投与群（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）では、対照の生理食塩液投与群（Ｓａｌｉｎｅ）と比較し、ノンレム睡眠時間を約４０％増加させる、統計的有意な睡眠効果が観察された（図３）。この結果に応じ、ハイパフォリン投与群の覚醒時間は、対照群と比較して減少した。更に、ハイパフォリン投与群のノンレム睡眠とレム睡眠を合計した総睡眠時間も同様に、対照群と比較して増加した。なお、レム睡眠についてはハイパフォリン投与群と対照群との間に差はなかった。また、続く腹腔内投与後２、３、４時間では、ハイパフォリン投与群と対照群との間に統計的に有意となるような睡眠データの差は検出されなかった。
また、前記同様の実験を再度行うことによりデータの再現性について確認したところ、同様な結果が得られた。
以上の結果から、ハイパフォリンは、優れた睡眠導入効果、特に投与後の比較的短時間に、ノンレム睡眠を誘導できる効果を有しており、安全性にも問題が無いことが示された。
【００４７】
なお、夜行性の行動を示すマウス等の小動物は多相性睡眠で、数分間隔で睡眠と覚醒を繰り返すことが判明している。暗期には覚醒時間が多く出現し、睡眠量は少ないが、暗期でも睡眠量はゼロにはならない。一方、明期における睡眠量は、暗期と比較するとほぼ２倍となる。例えば、マウスのノンレム睡眠量、レム睡眠量、及び覚醒時間を時系列上に１時間ごとに集計すると、図４に示すような明瞭な２４時間の睡眠覚醒日周リズムを示す。
図４に示すように、マウス等の小動物では、通常は、明期の睡眠状態から目覚めるにつれ、徐々に睡眠量が減少していくが、本発明の睡眠導入剤を投与すると、睡眠量、特にノンレム睡眠量を効果的に増加することができる（図３参照）。したがって、本発明の睡眠導入剤は、効果的に睡眠を「導入」できる剤であるということができる。
【産業上の利用可能性】
【００４８】
本発明の睡眠導入剤、医薬組成物、及び食品は、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れるので、例えば、不眠状態や睡眠が必要な状態の患者への適用に好適であり、中でも、投与から短時間でのノンレム睡眠の増加が望まれる患者への適用に特に好適である。
【図面の簡単な説明】
【００４９】
【図１】図１は、マウスへの脳波・筋電図記録用電極の装着の様子を示した図である。（左図は、マウスに各電極を装着する手術の様子を示す写真像であり、右図は、マウス頭部における各電極の装着部位を示す図である。）
【図２】図２は、マウスへの各試料（ハイパフォリン（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）又は生理食塩液(Ｓａｌｉｎｅ)）の腹腔内（ｉｐ）投与を行った時間、及び、投与後の脳波記録を行った時間を示した図である。
【図３】図３は、各試料（ハイパフォリン（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）又は生理食塩液(Ｓａｌｉｎｅ)）の腹腔内（ｉｐ）投与がマウスのノンレム（ＮＲＥＭ）睡眠時間に及ぼす影響を経時的に示したグラフ図である。
【図４】図４は、マウスの、２４時間の睡眠覚醒日周リズムを示した図である。
【図５】図５は、ハイパフォリンの分離スキームを示した図である。
【図６】図６は、ＮＭＲデータによるハイパフォリンの構造決定を示した図である。
【符号の説明】
【００５０】
１ ＥＥＧ（脳波）測定用電極
２ ＥＭＧ（筋電図）測定用電極
３ 不関電極
【技術分野】
【０００１】
本発明は、不眠状態や睡眠が必要な状態の患者に適用され得る、睡眠導入剤、並びに、前記睡眠導入剤を含有する医薬組成物及び食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
不眠状態や睡眠が必要な状態の患者に適用される睡眠導入剤としては、従来から様々なものが知られており、例えば、トリアゾラム、ロルメタゼパム、フルニトラゼパム等のベンゾジアゼピン系の薬剤；エチゾラム等のチエノジアゼピン系の薬剤；ペントバルビタール等のバルビツール酸系の薬剤；抗ヒスタミン薬などが知られている。以前は、これらの中でもバルビツール酸系の薬剤がよく用いられていたものの、副作用が強いことなどから、現在では比較的安全なベンゾジアゼピン系の薬剤が多く用いられる傾向にある。
しかし、程度に差はあるものの、前記従来の睡眠導入剤はいずれも、依存形成、一過性の健忘、覚醒後の眠気、悪夢などの副作用の可能性があり、このため、より副作用の心配の少ない睡眠導入剤が求められていた。
【０００３】
そこで、より副作用の少ない睡眠導入剤を開発する目的で、従来から、植物由来成分をはじめとした種々の天然由来成分の、睡眠導入剤としての使用が提案されている。
例えば、アキノワスレグサ（Ｈｅｍｅｒｏｃａｌｌｉｓ ｆｕｌｖａ ｖａｒ．ｓｅｍｐｅｒｖｉｒｅｎｓ）の発酵処理物は、総睡眠時間を延長させる等の睡眠改善作用を有することが報告されている（特許文献１参照）。また、バレリアーナ（Ｖａｌｅｒｉａｎａｃｅａｅ）属植物又はその抽出物は、主観的な睡眠感を改善させる等の睡眠改善作用を有することが報告されている（特許文献２参照）。また、例えばヒノキやヒバ等の針葉樹に含まれる香気成分の１種であるセドロール等のセスキテルペンアルコール類は、交感神経を抑制し副交感神経活動を優位にさせることができ、睡眠深度を深める等の睡眠改善作用を有することが報告されている（特許文献３参照）。
【０００４】
前記したような天然由来成分を利用した睡眠導入剤は、一般に安全性が高く、副作用の少ない睡眠導入剤としての使用が有望である。しかし一方で、前記天然由来成分を利用した睡眠導入剤では、効果が弱く、所望の睡眠改善効果が得られない場合も多い。
したがって、安全性の高さ、及び睡眠改善効果の高さのいずれをも兼ね備えた、優れた睡眠導入剤の開発は、未だ望まれているのが現状である。
【０００５】
【特許文献１】特許公開第２００６−６２９９８号公報
【特許文献２】特許公開第２００３−１８３１７４号公報
【特許文献３】国際公開第０１／０５８４３５号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れ、かつ安全性の高い睡眠導入剤、並びに、前記睡眠導入剤を含有する医薬組成物及び食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
前記課題を解決するために、本発明者らは鋭意検討した結果、以下のような知見を得た。即ち、マメ科エリスリナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ）属に属する植物から得られる生理活性物質、ハイパフォリンが、優れた睡眠導入作用を有するという知見である。
前記ハイパフォリン（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ：Ｎ，Ｎ，Ｎ−Ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−１−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｏ−２−（１Ｈ−ｉｎｄｏｌｅ−３−ｙｌ）ｅｔｈａｎａｍｉｎｉｕｍ）は、後述する構造式（１）で表される、インド−ルアルカロイド化合物の１種であり、植物においては、例えばコツブタケ等の外生菌根菌に含まれ、共生する植物の根毛の伸長を阻害する働きがあることなどが知られている（例えば、Ｐｌａｎｔａ．２０００ Ｏｃｔ；２１１（５）：７２２−８参照）。
しかしながら、前記ハイパフォリンが、優れた睡眠導入作用を有しており、安全性の高い睡眠導入剤として使用可能であることは従来全く知られておらず、本発明者らの新たな知見である。
【０００８】
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞ 以下の構造式（１）で表されるハイパフォリン、及びその医薬的に許容され得る塩の少なくともいずれかを含有することを特徴とする睡眠導入剤である。
【化２】
＜２＞ ハイパフォリンが（＋）−ハイパフォリンである前記＜１＞に記載の睡眠導入剤である。
＜３＞ ハイパフォリンが植物由来である前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の睡眠導入剤である。
＜４＞ ハイパフォリンがマメ科エリスリナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ）属に属する植物由来である前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の睡眠導入剤である。
＜５＞ マメ科エリスリナ属に属する植物が、エリスリナ ベルチナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｎａ）、デイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖａｒｉｅｇａｔａ）、及び、アメリカデイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｃｒｉｓｔａ−ｇａｌｌｉ）からなる群より選択される少なくとも１種である前記＜４＞に記載の睡眠導入剤である。
＜６＞ 前記＜１＞から＜５＞のいずれかに記載の睡眠導入剤を含有することを特徴とする医薬組成物である。
＜７＞ 前記＜１＞から＜５＞のいずれかに記載の睡眠導入剤を含有することを特徴とする食品である。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によると、従来における諸問題を解決することができ、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れ、かつ安全性の高い睡眠導入剤、並びに、前記睡眠導入剤を含有する医薬組成物及び食品を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
（睡眠導入剤）
本発明の睡眠導入剤は、ハイパフォリン、及びその医薬的に許容され得る塩の少なくともいずれかを含有してなり、必要に応じて更にその他の成分を含有してなる。
【００１１】
＜ハイパフォリン＞
前記ハイパフォリン（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ：Ｎ，Ｎ，Ｎ−Ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−１−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｏ−２−（１Ｈ−ｉｎｄｏｌｅ−３−ｙｌ）ｅｔｈａｎａｍｉｎｉｕｍ）は、後述する構造式（１）で表される、インド−ルアルカロイド化合物の１種である。
【化３】
【００１２】
なお、前記ハイパフォリンとしては、（＋）体である（＋）−ハイパフォリンを使用することが、特に好ましい。
また、前記医薬的に許容され得る塩としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、無機塩及び有機塩のいずれかが挙げられ、より具体的には、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩などが挙げられる。
前記ハイパフォリン、及びその医薬的に許容され得る塩は、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。
【００１３】
前記ハイパフォリンは、その入手方法に特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、化学的に合成されたものを使用してもよいし、天然物由来のものを使用してもよい。これらの中でも、より副作用の心配が低減されるという点で、天然物由来のものが好ましい。
前記ハイパフォリンが天然物由来のものである場合、その由来としては特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、植物由来であることが好ましく、中でも、マメ科エリスリナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ）属に属する植物由来であることがより好ましい。前記マメ科エリスリナ属に属する植物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、エリスリナ ベルチナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｎａ）、デイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖａｒｉｅｇａｔａ）、アメリカデイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｃｒｉｓｔａ−ｇａｌｌｉ）、エリスリナ リシステモン（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｌｙｓｉｓｔｅｍｏｎ）、エリスリナ コラロデンドロン（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｃｏｒａｌｌｏｄｅｎｄｒｏｎ）、エリスリナ セネガレンシス（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｓｅｎｅｇａｌｅｎｓｉｓ）、エリスリナ ブレビフロラ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｂｒｅｖｉｆｌｏｒａ）、エリスリナ アビシニカ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ａｂｙｓｓｉｎｉｃａ）などが挙げられる。
【００１４】
前記ハイパフォリンは、例えば、前記マメ科エリスリナ属に属する植物の植物体から分離することができ、前記植物体としては、例えば、樹皮、葉、枝、実、種子などが挙げられる。
【００１５】
前記マメ科エリスリナ属に属する植物の植物体からの前記ハイパフォリンの分離方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、後述する実施例に示すような方法で行うことができる。
【００１６】
前記睡眠導入剤中の前記ハイパフォリンの含有量は、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、また、前記睡眠導入剤は前記ハイパフォリンそのものであってもよい。
【００１７】
＜その他の成分＞
前記その他の成分としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記ハイパフォリンを溶解、希釈等するための、生理食塩液などが挙げられる。また、前記睡眠導入剤中の前記その他の成分の含有量も、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００１８】
前記睡眠導入剤は、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を投与から短時間で誘導する効果に優れる。ここで、前記短時間とは、特に制限はないが、通常、前記睡眠導入剤を投与してから１〜２時間程度のことをいう。前記睡眠導入剤がノンレム睡眠を短時間で誘導可能であることは、例えば、当該技術分野における通常の方法を用い、確認することができる。例えば、マウス等の実験動物に前記睡眠導入剤を投与し、脳波や筋電図測定を利用して睡眠状態を観察することにより、確認することができる。また、後述する実施例に示すように、マウスの脳に直接電極を装着し、マウスを無拘束状態としたまま、脳波や筋電図を測定して睡眠状態を観察する方法を使用すれば、本発明の睡眠導入剤が睡眠状態に及ぼす影響を、より厳密に確認することが可能であり、好ましい。
前記睡眠導入剤は、例えば、後述する本発明の医薬組成物、食品などに好適に使用可能である。
【００１９】
（医薬組成物）
本発明の医薬組成物は、本発明の前記睡眠導入剤を少なくとも含み、必要に応じて更にその他の成分を含む。
【００２０】
前記医薬組成物中の、前記睡眠導入剤の含有量としては、特に制限はなく、例えば、後述する前記医薬組成物の剤型や、所望の効果の程度等に応じて適宜選択することができる。
【００２１】
−その他の成分−
前記その他の成分としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲内で、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、医薬的に許容され得る担体などが挙げられる。前記担体としても、特に制限はなく、例えば、後述する前記医薬組成物の剤型等に応じて適宜選択することができる。また、前記医薬組成物中の前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて、適宜選択することができる。
【００２２】
−剤型−
前記医薬組成物の剤型としては、特に制限はなく、例えば、後述するような所望の投与方法に応じて適宜選択することができ、例えば、経口固形剤（錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等）、経口液剤（内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等）、注射剤（溶液、懸濁液、用事溶解用固形剤等）、坐剤、軟膏剤、貼付剤、ゲル剤、クリーム剤、外用散剤、スプレー剤、吸入散剤などが挙げられる。
【００２３】
前記経口固形剤としては、例えば、前記睡眠導入剤に、賦形剤、更には必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味・矯臭剤等の添加剤を加え、常法により製造することができる。
前記賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸などが挙げられる。前記結合剤としては、例えば、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。前記崩壊剤としては、例えば、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖などが挙げられる。前記滑沢剤としては、例えば、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコールなどが挙げられる。前記着色剤としては、例えば、酸化チタン、酸化鉄などが挙げられる。前記矯味・矯臭剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸などが挙げられる。
【００２４】
前記経口液剤としては、例えば、前記睡眠導入剤に、矯味・矯臭剤、緩衝剤、安定化剤等の添加剤を加え、常法により製造することができる。
前記矯味・矯臭剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸などが挙げられる。前記緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウムなどが挙げられる。前記安定化剤としては、例えば、トラガント、アラビアゴム、ゼラチンなどが挙げられる。
【００２５】
前記注射剤としては、例えば、前記睡眠導入剤に、ｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下用、筋肉内用、静脈内用等の注射剤を製造することができる。
前記ｐＨ調節剤及び前記緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウムなどが挙げられる。前記安定化剤としては、例えば、ピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸などが挙げられる。前記等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、ブドウ糖などが挙げられる。前記局所麻酔剤としては、例えば、塩酸プロカイン、塩酸リドカインなどが挙げられる。
【００２６】
前記坐剤としては、例えば、前記睡眠導入剤に、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセリド等の公知の坐剤製剤用担体と、必要に応じてツイーン（ＴＷＥＥＮ：登録商標）等の界面活性剤などを加えた後、常法により製造することができる。
【００２７】
前記軟膏剤としては、例えば、前記睡眠導入剤に、公知の基剤、安定剤、湿潤剤、保存剤等を配合し、常法により混合し、製造することができる。
前記基剤としては、例えば、流動パラフィン、白色ワセリン、サラシミツロウ、オクチルドデシルアルコール、パラフィンなどが挙げられる。前記保存剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピルなどが挙げられる。
【００２８】
前記貼付剤としては、例えば、公知の支持体に前記軟膏剤としてのクリーム剤、ゲル剤、ペースト剤等を、常法により塗布し、製造することができる。前記支持体としては、例えば、綿、スフ、化学繊維からなる織布、不織布、軟質塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン等のフィルム、発泡体シートなどが挙げられる。
【００２９】
前記医薬組成物は、本発明の前記睡眠導入剤を少なくとも含むので、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れる。そのため、前記医薬組成物は、不眠状態や睡眠が必要な状態の患者への適用に好適である。
【００３０】
（食品）
本発明の食品は、本発明の前記睡眠導入剤を少なくとも含み、必要に応じて更にその他の成分を含む。
【００３１】
前記食品中の、前記睡眠導入剤の含有量としては、特に制限はなく、例えば、後述する前記食品の種類や、所望の効果の程度等に応じて適宜選択することができる。
【００３２】
−その他の成分−
前記その他の成分としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲内で、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、各種食品原料などが挙げられる。前記食品原料としても、特に制限はなく、例えば、後述する前記食品の種類等に応じて適宜選択することができる。また、前記食品中の前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３３】
−食品の種類−
前記食品の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ゼリー、キャンディー、チョコレート、ビスケット等の菓子類；緑茶、紅茶、コーヒー、清涼飲料等の嗜好飲料；原料乳、ヨーグルト、アイスクリーム等の乳製品；野菜飲料、果実飲料、ジャム類等の野菜・果実加工品；スープ等の液体食品；パン類、麺類等の穀物加工品；などが挙げられる。これらの食品の製造方法としては、特に制限はなく、例えば、通常の各種食品の製造方法に応じて、適宜製造することができる。
また、前記食品は、例えば、錠剤、顆粒剤、カプセル剤等の経口固形剤や、内服液剤、シロップ剤等の経口液剤として製造されたものであってもよい。前記経口固形剤、経口液剤の製造方法は、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記した医薬組成物の経口固形剤、経口液剤の製造方法にならい、製造することができる。
【００３４】
前記食品は、本発明の前記睡眠導入剤を少なくとも含むので、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れる。そのため、前記食品は、例えば、不眠状態や睡眠が必要な状態を改善する目的で摂取される、機能性食品として特に有用であると考えられる。
【００３５】
（投与）
前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品は、例えば、不眠状態や睡眠が必要な状態の患者への適用に好適であり、例えば、これらの患者に投与することにより使用することができる。
前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品の投与対象動物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ヒト、マウス、ラット、ウシ、ブタ、サルなどが挙げられる。
また、前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品の投与方法としては、特に制限はなく、例えば、前記医薬組成物の剤型等に応じ、適宜選択することができ、経口投与、腹腔内投与などが挙げられる。
また、前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品の投与量としては、特に制限はなく、投与対象である患者の年齢、体重、所望の効果の程度等に応じて適宜選択することができるが、例えば、成人への１回の投与あたり、有効成分である前記ハイパフォリンの量として、１００〜５００ｍｇ／ｋｇ体重が好ましく、１００〜３００ｍｇ／ｋｇ体重がより好ましい。
【００３６】
また、前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品の投与時期としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品は投与から短時間（例えば、１〜２時間）でのノンレム睡眠導入効果に優れるため、例えば、ノンレム睡眠を誘導したい時間帯の０．５〜１時間前に投与されることが望ましいと考えられる。
【００３７】
（効果）
前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品は、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れるので、例えば、不眠状態や睡眠が必要な状態の患者への適用に好適であり、中でも、投与から短時間でのノンレム睡眠の増加が望まれる患者への適用に特に好適である。また、前記睡眠導入剤、前記医薬組成物、及び前記食品は、その有効成分が天然物から得ることのできる前記ハイパフォリンであることから、副作用の可能性が低く、安全性の高い点でも、有利である。
【実施例】
【００３８】
以下に本発明の実施例を説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００３９】
（製造例１：ハイパフォリンの調製）
以下のようにしてハイパフォリンを調製し、後述する実施例１において本発明の睡眠導入剤として使用した。
【００４０】
−ハイパフォリンの分離−
エリスリナ ベルチナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｎａ）の種子、３０３ｇを用い、図５に記載した分離スキームに従い、前記種子からハイパフォリンを分離した。
まず、エリスリナ ベルチナの種子を粉砕後、メタノールで抽出し、得られたメタノール抽出液を濃縮後、水と石油エーテルを加え、酒石酸にて酸性（ＰＨ３）とし、その後、酢酸エチルにて抽出し、中性画分を得た。次に水層に、炭酸ナトリウムを加え、アルカリ性とした後、クロロホルム、ブタノールにて、順次抽出し、各々アルカロイド画分として得た（図５）。
【００４１】
−ハイパフォリンの同定−
前記分離により得られたハイパフォリンの構造は、質量分析法（ＦＡＢＭＡＳＳ)、及び、核磁気共鳴法（ＮＭＲ）により決定した（図６参照）。得られたハイパフォリンのＭＡＳＳ、ＮＭＲスペクトルデータをそれぞれ以下に示す。なお、旋光度から、得られたハイパフォリンの絶対構造をＳと決定した。［α］Ｄ ＋８９．６（ｃ＝０．１２５，ｗａｔｅｒ，２５℃，Ｈ２Ｏ）。
１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）７．１８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２），７．３２（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝８．６４，Ｈ−４），７．０４（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１．２５，８．６４，Ｈ−５），７．１０（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１．２５，８．６４，Ｈ−６），７．６２（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝８．６４，Ｈ−７），３．４（２Ｈ，ｍ，Ｈ−８），３．８８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．６５，６．１５，Ｈ−９），３．２６，−３．２７（９Ｈ，ｓ，ＮＭｅ３），１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）１２５．１３（Ｃ−２），１０９．０１（Ｃ−３），１２８．３２（Ｃ−３ａ），１１２．４６（Ｃ−４），１１９．０５（Ｃ−５），１２２．６２（Ｃ−６），１１９．０５（Ｃ−７），１３８．１２（Ｃ−７ａ），５２．７０，５２．７３，５２．７６（Ｎ−Ｍｅ），１７１．６８（Ｃ−１０）．ＦＡＢ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２４７．
【００４２】
（実施例１：ハイパフォリンの睡眠導入効果）
前記製造例１で得られたハイパフォリンの睡眠導入効果を、以下のようにして検証した。
【００４３】
−マウスへの脳波・筋電図記録用電極の装着−
実験動物として、Ｃ５７ＢＬマウス（♂；１６〜２１週齢、日本クレア株式会社）を用いた。飼育環境は、明期を０７：００〜１９：００、暗期を１９：００〜０７：００、室温を２４±１℃、湿度を５６±６％とした。
マウス頭部に装着する脳波（ＥＥＧ）・筋電図（ＥＭＧ）記録用電極を、以下のようにして作成した。雌型ソケット（ＳＭＱ、ヒロセ電機株式会社）の端子５本を利用して、端子１にはＥＥＧ測定用電極（金ビス電極；直径０．９ｍｍ、長さ３．０ｍｍ）接着用のコードを、端子２、３には銀線（直径０．２ｍｍ）の先端を球状にしたＥＥＧ測定用の銀ボール電極をそれぞれ半田付けした。更に、ＥＭＧ測定用の２本の銀線（直径０．２ｍｍ）を接続した（図１参照）。
図１に、前記脳波・筋電図記録用電極をマウスへ装着する様子を示した。ネンブタール（１０ｍｇ／ｋｇ；腹腔内投与）で麻酔したマウスを脳定位固定装置に固定し、頭蓋骨を露出した。ＥＥＧ測定用電極を植込むために頭蓋骨に歯科用ドリルで穴を開けた。前記したように電極には金ビス電極及び銀ボール電極を使用し、不関電極１本と皮質電極２本の計３本とした。続いて、ＥＭＧ測定用の銀線電極をマウスの後部頸筋に刺入した。なお、ＥＥＧ用電極、ＥＭＧ用電極は歯科用アクリル樹脂のリペアジン（株式会社ＧＣ）にて頭蓋骨と完全に固定した。電極植え込み手術からの回復のため、１週間の期間をおいた後、マウスを脳波・筋電図記録用ケージに移し、レコーディングシステムに接続し、以下の投与実験に供した。
なお、前記のような手法で、マウスに脳波・筋電図記録用電極を装着して、睡眠データ記録を行うことにより、無拘束状態のマウスにおける、脳波及び筋電図の時系列変化を連続的に測定することが可能となる。したがって、マウスの自然な睡眠覚醒リズムが脳波及び筋電図測定の影響により乱れることがなく、そのため、評価したい生理活性物質、ここではハイパフォリンの睡眠覚醒に対する作用を、より厳密に評価することが可能となる。
【００４４】
−ハイパフォリン投与−
試料には、前記製造例１で得られたハイパフォリン（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）３００ｍｇ／ｋｇを使用し、前記脳波・筋電図記録用電極を装着したマウスに腹腔内投与した。前記腹腔内投与は、飼育環境の暗期の始まる約３０分前の１８：２０〜１８：３０の間に全て行った。比較対照として、ビヒクル（Ｖｅｈｉｃｌｅ）の生理食塩液（Ｓａｌｉｎｅ）のみを、同様に腹腔内投与した。脳波・筋電図による睡眠データ記録を、夜行性マウスの活動期を対象とした１９：００から翌朝０７：００までの暗期連続記録として行った（図２参照）。これらのうち、１９：００〜２３：００の４時間における睡眠データについて、ハイパフォリン投与群（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）と、対照である生理食塩液投与群（Ｓａｌｉｎｅ）とを比較した。結果を図３に示す。
なお、実験は２回に分け、１回目の実験には４匹のマウス（マウス番号１〜４）を、また４ヶ月後に行った２回目の実験には別のマウス４匹（マウス番号５〜８）を用い、合計８匹を用いて行った。ハイパフォリン投与（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）と生理食塩液のみの投与（Ｓａｌｉｎｅ）とを、合計８匹のマウスによるクロスオーバー実験とした（表１参照）。
【００４５】
【表１】
【００４６】
−結果−
ハイパフォリン３００ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与後１時間に、ハイパフォリン投与群（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）では、対照の生理食塩液投与群（Ｓａｌｉｎｅ）と比較し、ノンレム睡眠時間を約４０％増加させる、統計的有意な睡眠効果が観察された（図３）。この結果に応じ、ハイパフォリン投与群の覚醒時間は、対照群と比較して減少した。更に、ハイパフォリン投与群のノンレム睡眠とレム睡眠を合計した総睡眠時間も同様に、対照群と比較して増加した。なお、レム睡眠についてはハイパフォリン投与群と対照群との間に差はなかった。また、続く腹腔内投与後２、３、４時間では、ハイパフォリン投与群と対照群との間に統計的に有意となるような睡眠データの差は検出されなかった。
また、前記同様の実験を再度行うことによりデータの再現性について確認したところ、同様な結果が得られた。
以上の結果から、ハイパフォリンは、優れた睡眠導入効果、特に投与後の比較的短時間に、ノンレム睡眠を誘導できる効果を有しており、安全性にも問題が無いことが示された。
【００４７】
なお、夜行性の行動を示すマウス等の小動物は多相性睡眠で、数分間隔で睡眠と覚醒を繰り返すことが判明している。暗期には覚醒時間が多く出現し、睡眠量は少ないが、暗期でも睡眠量はゼロにはならない。一方、明期における睡眠量は、暗期と比較するとほぼ２倍となる。例えば、マウスのノンレム睡眠量、レム睡眠量、及び覚醒時間を時系列上に１時間ごとに集計すると、図４に示すような明瞭な２４時間の睡眠覚醒日周リズムを示す。
図４に示すように、マウス等の小動物では、通常は、明期の睡眠状態から目覚めるにつれ、徐々に睡眠量が減少していくが、本発明の睡眠導入剤を投与すると、睡眠量、特にノンレム睡眠量を効果的に増加することができる（図３参照）。したがって、本発明の睡眠導入剤は、効果的に睡眠を「導入」できる剤であるということができる。
【産業上の利用可能性】
【００４８】
本発明の睡眠導入剤、医薬組成物、及び食品は、睡眠導入効果、特にノンレム睡眠を短時間で誘導する効果に優れるので、例えば、不眠状態や睡眠が必要な状態の患者への適用に好適であり、中でも、投与から短時間でのノンレム睡眠の増加が望まれる患者への適用に特に好適である。
【図面の簡単な説明】
【００４９】
【図１】図１は、マウスへの脳波・筋電図記録用電極の装着の様子を示した図である。（左図は、マウスに各電極を装着する手術の様子を示す写真像であり、右図は、マウス頭部における各電極の装着部位を示す図である。）
【図２】図２は、マウスへの各試料（ハイパフォリン（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）又は生理食塩液(Ｓａｌｉｎｅ)）の腹腔内（ｉｐ）投与を行った時間、及び、投与後の脳波記録を行った時間を示した図である。
【図３】図３は、各試料（ハイパフォリン（Ｈｙｐａｐｈｏｒｉｎｅ）又は生理食塩液(Ｓａｌｉｎｅ)）の腹腔内（ｉｐ）投与がマウスのノンレム（ＮＲＥＭ）睡眠時間に及ぼす影響を経時的に示したグラフ図である。
【図４】図４は、マウスの、２４時間の睡眠覚醒日周リズムを示した図である。
【図５】図５は、ハイパフォリンの分離スキームを示した図である。
【図６】図６は、ＮＭＲデータによるハイパフォリンの構造決定を示した図である。
【符号の説明】
【００５０】
１ ＥＥＧ（脳波）測定用電極
２ ＥＭＧ（筋電図）測定用電極
３ 不関電極
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の構造式（１）で表されるハイパフォリン、及びその医薬的に許容され得る塩の少なくともいずれかを含有することを特徴とする睡眠導入剤。
【化１】
【請求項２】
ハイパフォリンが（＋）−ハイパフォリンである請求項１に記載の睡眠導入剤。
【請求項３】
ハイパフォリンが植物由来である請求項１から２のいずれかに記載の睡眠導入剤。
【請求項４】
ハイパフォリンがマメ科エリスリナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ）属に属する植物由来である請求項１から３のいずれかに記載の睡眠導入剤。
【請求項５】
マメ科エリスリナ属に属する植物が、エリスリナ ベルチナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｎａ）、デイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖａｒｉｅｇａｔａ）、及び、アメリカデイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｃｒｉｓｔａ−ｇａｌｌｉ）からなる群より選択される少なくとも１種である請求項４に記載の睡眠導入剤。
【請求項６】
請求項１から５のいずれかに記載の睡眠導入剤を含有することを特徴とする医薬組成物。
【請求項７】
請求項１から５のいずれかに記載の睡眠導入剤を含有することを特徴とする食品。
【請求項１】
以下の構造式（１）で表されるハイパフォリン、及びその医薬的に許容され得る塩の少なくともいずれかを含有することを特徴とする睡眠導入剤。
【化１】
【請求項２】
ハイパフォリンが（＋）−ハイパフォリンである請求項１に記載の睡眠導入剤。
【請求項３】
ハイパフォリンが植物由来である請求項１から２のいずれかに記載の睡眠導入剤。
【請求項４】
ハイパフォリンがマメ科エリスリナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ）属に属する植物由来である請求項１から３のいずれかに記載の睡眠導入剤。
【請求項５】
マメ科エリスリナ属に属する植物が、エリスリナ ベルチナ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｎａ）、デイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｖａｒｉｅｇａｔａ）、及び、アメリカデイゴ（Ｅｒｙｔｈｒｉｎａ ｃｒｉｓｔａ−ｇａｌｌｉ）からなる群より選択される少なくとも１種である請求項４に記載の睡眠導入剤。
【請求項６】
請求項１から５のいずれかに記載の睡眠導入剤を含有することを特徴とする医薬組成物。
【請求項７】
請求項１から５のいずれかに記載の睡眠導入剤を含有することを特徴とする食品。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【公開番号】特開２００８−２４６４９（Ｐ２００８−２４６４９Ａ）
【公開日】平成２０年２月７日（２００８．２．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−１９９２７４（Ｐ２００６−１９９２７４）
【出願日】平成１８年７月２１日（２００６．７．２１）
【出願人】（５０４１７９２５５）国立大学法人 東京医科歯科大学 (228)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年２月７日（２００８．２．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年７月２１日（２００６．７．２１）
【出願人】（５０４１７９２５５）国立大学法人 東京医科歯科大学 (228)
【Ｆターム（参考）】
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