補酵素Ｑを有効成分とする皮膚用組成物
【課題】補酵素Ｑを有効成分とする皮膚用組成物を提供し、皮膚疾患に対して安全で有効性の高い治療薬を提供すること。
【解決手段】酸化型補酵素Ｑ及び／又は還元型補酵素Ｑを有効成分とする皮膚用組成物であって、組成物全量のうち前記酸化型補酵素Ｑと前記還元型補酵素Ｑの合計割合が０．０１から９９重量％である皮膚用組成物。上記皮膚用組成物からなる皮膚疾患治療用組成物、化粧用組成物、皮膚のヘルスケア用組成物及び入浴剤組成物。上記皮膚疾患治療用組成物を、皮膚疾患を患う患者に適用する、皮膚疾患の治療方法、又は、上記皮膚疾患治療用組成物と、酸化型補酵素Ｑ及び還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療薬を、皮膚疾患を患う患者に、並行して適用する、皮膚疾患の治療方法。
【解決手段】酸化型補酵素Ｑ及び／又は還元型補酵素Ｑを有効成分とする皮膚用組成物であって、組成物全量のうち前記酸化型補酵素Ｑと前記還元型補酵素Ｑの合計割合が０．０１から９９重量％である皮膚用組成物。上記皮膚用組成物からなる皮膚疾患治療用組成物、化粧用組成物、皮膚のヘルスケア用組成物及び入浴剤組成物。上記皮膚疾患治療用組成物を、皮膚疾患を患う患者に適用する、皮膚疾患の治療方法、又は、上記皮膚疾患治療用組成物と、酸化型補酵素Ｑ及び還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療薬を、皮膚疾患を患う患者に、並行して適用する、皮膚疾患の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、補酵素Ｑを有効成分とする皮膚用組成物、特に、皮膚疾患治療用組成物、化粧用組成物、皮膚のヘルスケア用組成物及び入浴剤組成物、並びに、この皮膚用組成物を用いる皮膚疾患の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
補酵素Ｑは、細菌から哺乳動物まで広く生体に分布し、生体内の細胞中におけるミトコンドリアの電子伝達系構成成分として存在する生理学的必須成分である。補酵素Ｑは、生体内において酸化と還元を繰り返すことで、電子伝達系における伝達成分としての機能を担っているほか、還元型補酵素Ｑは抗酸化物質であることが知られている。ヒトを始めとする多くの動物、あるいは魚や鳥では、補酵素Ｑの側鎖が繰り返し構造を１０個持つ補酵素Ｑ１０が主成分であり、また、この補酵素Ｑ１０は生体内においては通常４０〜９０％程度が還元型で存在していることが知られている。
【０００３】
補酵素Ｑの実際上の用途としては、例えば、酸化型補酵素Ｑ１０は鬱血性心不全薬として用いられており、医薬用途以外でもビタミン類と同様に、栄養剤、栄養補助剤などとして広く利用されている。しかし、還元型補酵素Ｑ１０は実際の使用には供されていない。
【０００４】
特許文献１には、補酵素Ｑ１０として酸化型補酵素Ｑ１０（ユビキノン）あるいは還元型補酵素Ｑ１０（ユビキノール）を含む皮膚用剤が開示されている。しかし、この文献では、数多く挙げられている構成成分の例示の１つとして開示されているに過ぎず、特にユビキノールについては実際の使用例は示されていない。また、これらの補酵素Ｑ１０を含有する皮膚用剤は、アトピー性皮膚炎に対して有効であると記載されているが、これも多くの皮膚疾患の一例として記載されているに過ぎず、実施例もないことから実際の効果については明らかでない。
【０００５】
我々は特許文献２において、還元型補酵素Ｑ１０と酸化型補酵素Ｑ１０を混合することにより、酸化型補酵素Ｑ１０単独に比較して経口吸収性が向上することを開示しているが、経口以外の投与経路での吸収性に対する還元型補酵素Ｑの効果、更にはアトピー性皮膚炎に対する有効性については全く不明であった。
【０００６】
皮膚疾患は、患者の生活に対して肉体的にはもちろん精神的にも多大な影響を与えていることが問題となっている。その中でも特にアトピー性皮膚炎は難治性の皮膚疾患として患者数も多く、また、近年では成人のアトピー性皮膚炎患者が増加し、社会生活を営む上での大きな問題となっている。
【０００７】
アトピー性皮膚炎の治療薬としては、一般にステロイド薬が知られているが、副作用が強いこと、あるいはリバウンド現象がみられることから使用を制限される例も少なくなく、アトピー性皮膚炎を完治するのに充分な薬剤ではない。更にステロイド薬が無効な場合は、事実上、治療薬がないという状況であり、民間療法による被害も社会問題となっている。
【０００８】
近年、免疫抑制剤であるタクロリムスがアトピー性皮膚炎治療薬として認められたが、副作用の懸念が大きく幼児に対する使用が認められておらず、安心して用いられる薬剤とは言い難い。
【０００９】
このような状況のもと、アトピー性皮膚炎に対して安心して使用できる薬剤は強く求められている。
【特許文献１】特表平９−５０１９２５号公報
【特許文献２】特開平１０−１０９９３３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、補酵素Ｑ、特に補酵素Ｑ１０を有効成分とする皮膚用組成物を提供し、皮膚疾患、特にアトピー性皮膚炎に対して安全で有効性の高い治療薬を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは上記課題を解決すべく研究した結果、酸化型補酵素Ｑ１０のアトピー性皮膚炎に対する効果を調べた結果、優れた治療効果を発揮することを見出した。更に、驚くべきことにステロイド薬あるいはタクロリムスなどの既存薬と酸化型補酵素Ｑ１０を併用することにより相乗作用が得られ、既存薬単独に比較して強い効果が得られることを見出した。
【００１２】
更に、我々は、還元型補酵素Ｑ１０を含有する皮膚用剤を作製し、皮膚吸収性試験を実施したところ、補酵素Ｑ１０として還元型補酵素Ｑ１０を一定の割合で含有する組成物を皮膚に塗布することで、酸化型補酵素Ｑ１０のみを含有する組成物と比較して明らかに高い皮膚吸収性が得られ、皮膚中の補酵素Ｑ１０量をより多く増加できることを見出した。更に驚くべき事に、還元型補酵素Ｑ１０を含有する組成物を塗布することにより、抗酸化作用の活性本体である還元型補酵素Ｑ１０の皮膚での含量を、酸化型補酵素Ｑ１０のみの塗布に比較して、著しく増加させられることをも見出した。従来、酸化型補酵素Ｑ１０を投与すれば、生体中で還元され還元型になることによって抗酸化活性を示しうると考えられてきたが、我々の研究の結果、酸化型補酵素Ｑ１０の皮膚中での還元は非常に緩やかにしか進行せず、還元型補酵素Ｑ１０を含有する組成物の塗布には及ばないことが明らかになった。強い抗酸化活性を示す還元型補酵素Ｑ１０の皮膚中含量を増加させることで、酸化型補酵素Ｑ１０のみの塗布に比較して、より強いスキンケア活性が期待できる。
【００１３】
また、還元型補酵素Ｑ１０を含有する軟膏についてもアトピー性皮膚炎に対する有効性を評価した。その結果、還元型補酵素Ｑ１０軟膏単独でもプレドニソロンと同等の強い治療効果があることを見出した。また、還元型補酵素Ｑ１０軟膏とステロイド薬あるいはタクロリムスの併用により、より強い治療効果を見出すに至った。
【００１４】
更に、我々は、これら補酵素Ｑ１０を主成分とする皮膚用剤に皮膚の修復力の促進効果があることを見出した。これは、補酵素Ｑ１０が褥瘡を始めとする皮膚疾患にも有効であることを示している。
【００１５】
すなわち、本発明は、下記式（１）
【００１６】
【化１】
【００１７】
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す)で表される酸化型補酵素Ｑ、及び／又は、下記式（２）
【００１８】
【化２】
【００１９】
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す)で表される還元型補酵素Ｑを有効成分とする皮膚用組成物であって、組成物全量のうち前記酸化型補酵素Ｑと前記還元型補酵素Ｑの合計割合が０．０１から９９重量％である皮膚用組成物である。
【００２０】
また本発明は、上記皮膚用組成物からなる皮膚疾患治療用組成物、化粧用組成物、皮膚のヘルスケア用組成物及び入浴剤組成物である。
【００２１】
さらに本発明は、上記皮膚疾患治療用組成物を、皮膚疾患を患う患者に適用する、皮膚疾患の治療方法、又は、上記皮膚疾患治療用組成物と、式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療薬を、皮膚疾患を患う患者に、並行して適用する、皮膚疾患の治療方法である。
以下に本発明を詳述する。
【００２２】
上記式（１）で表される化合物は酸化型補酵素Ｑであり、上記式（２）で表される化合物は還元型補酵素Ｑである。
【００２３】
酸化型補酵素Ｑおよび還元型補酵素Ｑを得る方法としては特に限定されず、例えば、合成、発酵、天然物からの抽出等の従来公知の方法により補酵素Ｑを得ることができる。あるいは、上記の方法によって得た後、クロマトグラフィーにより流出液中の酸化型補酵素Ｑ区分あるいは還元型補酵素Ｑ区分を濃縮する方法などを採用することもできる。酸化型補酵素Ｑを得る場合には、公知の方法により得ることができる。還元型補酵素Ｑを得る場合には、必要に応じて上記補酵素Ｑに対し、水素化ほう素ナトリウム、亜ジチオン酸ナトリウム（ハイドロサルファイトナトリウム）等の一般的な還元剤を添加し、常法により上記補酵素Ｑ中に含まれる酸化型補酵素Ｑを還元して還元型補酵素Ｑとした後にクロマトグラフィーによる濃縮を行っても良い。また、既存の高純度補酵素Ｑに上記還元剤を作用させる方法によっても還元型補酵素Ｑを得ることができる。
【００２４】
本発明の組成物を得る方法としては特に限定されず、例えば、上述のようにして得られる還元型補酵素Ｑと、市販あるいは公知の方法で得られる酸化型補酵素Ｑとを、混合あるいは別々に適当な基剤に溶解させることにより得ることができる。あるいは、上述した補酵素Ｑの製造工程で得られる還元型補酵素Ｑと酸化型補酵素Ｑの混合物をそのまま基剤に溶解してもよい。基剤としては、必要に応じて本発明の効果を損なわない範囲で、医薬品、化粧品などに通常用いられている基剤が使用できる。
【００２５】
本発明の組成物においては、組成物全量のうち酸化型補酵素Ｑと還元型補酵素Ｑがしめる合計割合（酸化型補酵素Ｑのみが含まれる場合には、組成物全量のうち酸化型補酵素Ｑが占める割合であり、還元型補酵素Ｑのみが含まれる場合には、組成物全量のうち還元型補酵素Ｑが占める割合である）が０．０１〜９９重量％である。好ましくは０．１〜９５重量％、より好ましくは０．５〜５０重量％、さらに好ましくは１〜３０重量％である。
【００２６】
また、経皮吸収性の観点から、酸化型補酵素Ｑと還元型補酵素Ｑの合計量のうち還元型補酵素Ｑの割合が２０重量％以上含有するのが好ましく、より好ましくは４０重量％以上含有することである。しかしながら、還元型補酵素Ｑを含まず、酸化型補酵素Ｑのみを含む組成物も好ましく用いることができる。また、酸化型補酵素Ｑと還元型補酵素Ｑの合計量のうち還元型補酵素Ｑの割合が９５重量％以下であることが好ましい。
【００２７】
本発明で使用できる酸化型補酵素Ｑ及び還元型補酵素Ｑは、前記式（１）および式（２）で表されるように、側鎖の繰り返し単位（式中ｎ）が１〜１２のものを使用することができるが、なかでも側鎖繰り返し単位が１０のもの、すなわち酸化型補酵素Ｑ１０及び還元型補酵素Ｑ１０が特に好適に使用できる。
【００２８】
上記皮膚用組成物、皮膚疾患治療用組成物、化粧用組成物、皮膚のヘルスケア用組成物及び入浴剤組成物は、人に適用するためのものであってもよいし、ペット、家畜及び／又は鳥、特に、犬及び／又は猫に適用するものであってもよい。
【００２９】
本発明の皮膚用組成物の剤型は、特に限定されるものではなく、例えば、適当な基剤中に上記薬物を溶解または混合分散させてクリーム状、ペースト状、ジェリー状、ゲル状、乳液状又は液状の形状になされたもの（軟膏剤、リニメント剤、ローション剤、スプレー剤など）、基剤中に上記薬物を溶解または混合分散させたものを支持体上に展延したもの（パップ剤など）、粘着剤中に上記薬物を溶解または混合分散させたものを支持体上に展延したもの（プラスター剤、テープ剤など）などが挙げられる。
【００３０】
本発明の皮膚用組成物は皮膚疾患治療用組成物として使用することができる。適用できる皮膚疾患としては、アトピー性皮膚炎、褥瘡、創傷、火傷、乾癬、かぶれ、接触性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、ヴィダール苔癬、貨幣状湿疹、主婦湿疹、日光皮膚炎、皮膚掻痒症、痒疹、薬疹、扁平苔癬、毛孔性紅色粃糠症、ジベル薔薇色粃糠症、紅斑症、紅皮症、水虫および皮膚潰瘍などが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。
【００３１】
本発明の皮膚用組成物を皮膚疾患用組成物として使用する場合には、上記組成物は、さらに、抗酸化作用を示す物質、例えば、スーパーオキサイドディスムターゼ、カタラーゼ、グルタチオンパーオキシダーゼ、ビタミンＥ、ビタミンＣ、グルタチオン、グルタチオン還元酵素、多価不飽和脂肪酸などを含むことができる。また、皮膚を活性化する成分、例えば、コラーゲン、ヒアルロン酸、ムチン、セラミド、スクワレン、スクワランなど、あるいは、経皮吸収促進剤を含むことができる。
【００３２】
さらに、酸化型補酵素Ｑ及び還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療成分を含んでもよい。このような成分としては、皮膚科の治療に通常使用されるような薬剤を挙げることができ、例えば、抗炎症剤、免疫抑制剤、抗菌物質、抗真菌剤、消毒剤など、更に、上に示したような抗酸化物質あるいは皮膚の活性化成分を挙げることができる。
【００３３】
本発明の皮膚疾患治療用組成物が特にアトピー性皮膚炎の治療を目的とする場合には、さらに、酸化型補酵素Ｑ及び還元型補酵素Ｑ以外のアトピー性皮膚炎治療薬を含むことが好ましい。このようなアトピー性皮膚炎治療薬としては、アトピー性皮膚炎治療に通常使用されるような薬剤であればよく、例えば、ステロイド剤、更に詳しくは吉草酸酢酸プレドニソロン、アムシノニド、吉草酸ジフルコルトロン、吉草酸デキサメタゾン、プロピオン酸クロベタゾール、酢酸ジフロラゾン、プロピオン酸デキサメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、ジフルプロドナート、フルオシノニド、ハルシノニド、プデソニド、酪酸プロピオン酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ベタメタゾン、プロピオン酸ベクロメタゾン、フルオシノロナセトニド、トリアムシノロナセトニド、ピバル酸フルメタゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、酪酸クロベタゾン、プロピオン酸アルクロメタゾン、デキサメタゾン、酢酸メチルプレドニソロン、プレドニソロン、酢酸ヒドロコルチゾン、あるいは、ステロイド剤以外の薬剤、例えば、タクロリムス、抗ヒスタミン剤などの成分を含むことができる。
【００３４】
本発明の皮膚用組成物は、化粧用組成物又は皮膚のヘルスケア用組成物として用いることができる。具体的な用途としては、洗顔料、アイクリーム、アイシャドウ、クリーム、乳液、化粧水、香水、おしろい、化粧油、練香水、パウダー、パック、ひげそり用クリーム、ひげそり用ローション、日焼けオイル、日焼け止めオイル、日焼けローション、日焼け止めローション、爪クリーム、美爪エナメル、浴用化粧品、ほお紅、マスカラ、口紅、リップクリーム、アイライナー、デオドランド剤、オーデコロンなどが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。
【００３５】
この場合、上記組成物中に、従来から化粧用または皮膚のヘルスケア用組成物に使用されている化粧品補助剤を含んでもよく、例えば、保存剤、殺菌剤、香料、発泡性抑制剤、着色剤、着色作用を持つ顔料、増粘剤、界面活性剤、乳化剤、柔軟剤、増湿剤及び／又は保湿剤、脂肪、油、ワックス、あるいは、アルコール、ポリオール、ポリマー、気泡安定剤、電解質、有機溶剤またはシリコン誘導体等の成分を挙げることができる。
【００３６】
本発明の皮膚用組成物は、入浴剤組成物としても使用することができる。ここで入浴剤組成物とは、入浴時に水又は湯のなかに溶かすことにより用いる組成物のことをいう。本発明の入浴剤組成物としては、従来、入浴剤の成分として用いられてきた添加剤、その他の成分を含むことができる。
【発明の効果】
【００３７】
本発明の組成物は上述の構成よりなるもので、補酵素Ｑ１０の経皮吸収性に優れており、アトピー性皮膚炎などの皮膚疾患および皮膚のヘルスケアに対して優れた効果を発揮する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３８】
以下に実施例及び製剤例を揚げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例および製剤例のみに限定されるものではない。
【００３９】
（実施例１）
（１）検体試料１の調製
０．１ｇの還元型補酵素Ｑ１０（約５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む)を５０℃水浴上で融解させた後、同様に溶解させたポリエチレングリコール１５００（ＰＥＧ１５００）を添加して１０ｍｌとした。これを５０℃で均質に溶融混合し、室温にて固化させ軟膏状組成物を得た。
【００４０】
（２）比較試料１の調製
０．１ｇの酸化型補酵素Ｑ１０を５０℃水浴上で融解させた後、ＰＥＧ１５００を添加して１０ｍｌとした。これを５０℃で均質に溶融混合し、室温にて固化させ軟膏状組成物を得た。
【００４１】
（３）経皮吸収試験
試料として、検体試料１および比較試料１を使用した。試験は、飽食条件下で飼育した雄のヘアレスラット(体重２５０〜３００ｇ)を用いて行った。エーテルにて軽く麻酔をかけたヘアレスラットの背部に、０．１ｇの検体試料１あるいは比較試料１、および対照としてＰＥＧ１５００をそれぞれ３ｃｍ四方の範囲内に塗布した。塗布３時間、８時間および２４時間後に、ラットを安楽死させ塗布部を十分洗浄後、皮膚を採取した。皮膚中の補酵素Ｑ１０量は皮膚をホモジナイトした後、プロパノールで抽出し、固相カラムを用いて濃縮した後、高速液体クロマトグラフィーによって定量した。皮膚中の総補酵素Ｑ１０量を表１に示した。数値は平均値±標準偏差である。
【００４２】
【表１】
【００４３】
平均値±ＳＤ、ｎ＝３〜８
＊：ｐ＜０．０５、＊＊＊：ｐ＜０．００１、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔの片側検定
＃１：但し、約５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む
【００４４】
上記の如く、還元型補酵素Ｑ１０を９５％含有する補酵素Ｑ１０は酸化型補酵素Ｑ１０を１００％含有するものに比較して、皮膚中の補酵素Ｑ１０量を増加させるために極めて有効であることが明らかになった。
【００４５】
前述の皮膚をホモジナイトし、ヘキサンで抽出、乾固した後、エタノールに溶解し、高速液体クロマトグラフィーと電気化学的検出器によって皮膚中還元型補酵素Ｑ１０の割合を定量した。皮膚中還元型補酵素Ｑ１０量を表２に示した。数値は平均値±標準偏差である。
【００４６】
【表２】
【００４７】
平均値±ＳＤ、ｎ＝３〜８
＊：ｐ＜０．０５、＊＊：ｐ＜０．０１、＊＊＊：ｐ＜０．００１、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔの片側検定
＃１：但し、約５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む
【００４８】
上記の如く、還元型補酵素Ｑ１０を９５％含有する補酵素Ｑ１０は酸化型補酵素Ｑ１０を１００％含有するものに比較して、皮膚中の還元型補酵素Ｑ１０量を増加させるために極めて有効であることが明らかになった。皮膚中の還元型補酵素Ｑ１０量は、酸化型補酵素Ｑ１０の塗布によっても皮膚中での還元により徐々に増加するがその速度は決して速いものではなく、皮膚中還元型補酵素Ｑ１０量は酸化型補酵素Ｑ１０塗布後２４時間でも、還元型補酵素Ｑ１０塗布後３時間の半分以下の量でしかない。
【００４９】
（実施例２）
（１）検体試料２の調製
酸化型補酵素Ｑ１０：還元型補酵素Ｑ１０の重量比が８０：２０である混合物を用いて、上記実施例１記載の検体試料１と同様にして調製した。
【００５０】
（２）検体試料３の調製
酸化型補酵素Ｑ１０：還元型補酵素Ｑ１０の重量比が６０：４０である混合物を用いて、上記実施例１記載の検体試料１と同様にして調製した。
【００５１】
（３）検体試料４の調製
酸化型補酵素Ｑ１０：還元型補酵素Ｑ１０の重量比が４０：６０である混合物を用いて、上記実施例１記載の検体試料１と同様にして調製した。
【００５２】
（４）検体試料５の調製
酸化型補酵素Ｑ１０：還元型補酵素Ｑ１０の重量比が２０：８０である混合物を用いて、上記実施例１記載の検体試料１と同様にして調製した。
【００５３】
（５）皮膚吸収性試験
試験試料として検体試料２、検体試料３、検体試料４、検体試料５及び比較試料１を使用し、上記実施例１と同様にして行った。
【００５４】
試験結果を図１に示した。なお、図１中、縦軸は、塗布３時間後の皮膚中の総補酵素Ｑ１０量および還元型補酵素Ｑ１０量であり、横軸は、塗布した試料中の総補酵素Ｑ１０に対する還元型補酵素Ｑ１０の含有量（重量％）であり、各棒は平均値である。
【００５５】
図１より明らかなように、還元型補酵素Ｑ１０が２０重量％の組成物では、酸化型補酵素Ｑ１０単独からなる組成物に比較して皮膚中還元型補酵素Ｑ１０濃度の有意な増加が認められた。更に、還元型補酵素Ｑ１０を４０重量％含有する組成物では、２０重量％の組成物に比較して更に高い濃度が認められた。この結果より、本発明の組成物は還元型補酵素Ｑ１０を２０重量％以上含むことにより酸化型補酵素Ｑ１０のみを含有するものや、還元型補酵素Ｑ１０の含有量が補酵素Ｑ１０全量の２０重量％以下であるものに比較して、明らかに皮膚中還元型補酵素Ｑ１０量を増加できることが判った。
【００５６】
（実施例３）
アトピー性皮膚炎モデルマウス（ＮＣマウス）に対する治療効果１
平澤等の方法を用いて評価した（応用薬理、Ｖｏｌ．５９、Ｎｏ．６、ｐ１２３−１３４、２０００）。酸化型補酵素Ｑ１０軟膏および還元型補酵素Ｑ１０軟膏（但し、補酵素Ｑ１０中に５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む）のアトピー性皮膚炎モデルマウス（ＮＣマウス）における治療効果を調べた。各群７匹のＮＣマウスにハプテンを用いて、皮膚炎を感作、誘発（週１回）した。３回目の感作時より被験化合物による治療を実施した。補酵素Ｑ１０軟膏（１％）は連日０．１ｇを塗布し、陽性対照のプレドニソロン軟膏は２日に１回塗布した。プレドニソロン軟膏と補酵素Ｑ１０軟膏の併用群では、各軟膏を交互に塗布した。治療効果は、１．掻痒症、２．発赤・出血、３．浮腫、４．擦傷・組織欠損、５．痂皮形成・乾燥の５項目について、３段階の評点（０：無症状、１：軽度、２：中等度、３：高度）をつけて評価した。表３に塗布開始１５日目における皮膚炎スコアの試験開始時との差を示した。値は平均値±標準偏差である。
【００５７】
【表３】
【００５８】
平均値±ＳＤ、ｎ＝７
＊ 但し補酵素Ｑ１０中に約５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む
【００５９】
スコアの値が大きいほど試験中の皮膚炎の増悪の程度が大きいことを示しているが、酸化型および還元型補酵素Ｑ１０軟膏群は対照薬であるプレドニソロン軟膏と同様に対照群に比較して明らかな皮膚炎の増悪抑制効果を示した。また、プレドニソロンとの併用群では、プレドニソロン単独群に比較して、より強い治療効果を示し、特に還元型補酵素Ｑ１０軟膏は、試験開始時のスコアよりも低くなり、皮膚炎の治癒能力があることを示している。このように補酵素Ｑを主成分とする軟膏がアトピー性皮膚炎に対して実際に有効性を示すことは、今までに全く知られていなかったことである。更に、ステロイド剤と併用することで更に強い効果を示すことは、全く予期できないことであった。
【００６０】
（実施例４)
アトピー性皮膚炎モデルマウス（ＮＣマウス）に対する治療効果２
実施例３と同様の試験を用いて、高濃度補酵素Ｑ１０軟膏（１０％）単独効果およびアトピー性皮膚炎治療剤であるプロトピック軟膏（タクロリムス）と低濃度補酵素Ｑ１０軟膏（１％）の併用効果を調べた。単独評価群では被験薬を連日塗布し、併用評価群ではプロトピック軟膏は０．１ｇを週１回塗布し、週６日は低濃度補酵素Ｑ１０軟膏を０．１ｇ塗布した。対照であるプロトピック軟膏の単独群では、週６回は軟膏基剤を塗布した。また、陽性対照としてプレドニソロン軟膏を隔日で塗布した。塗布開始後１５日目の結果を表４に示した。数値は平均値±標準偏差である。
【００６１】
【表４】
【００６２】
平均値±ＳＤ、ｎ＝７
＊ 但し補酵素Ｑ１０中に約５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む
【００６３】
高濃度還元型補酵素Ｑ１０軟膏は、陽性対照のプレドニソロン軟膏と同程度の治療効果を示し、単独でも強い治療効果を示すことが示された。一方、プロトピック軟膏単独群は、塗布回数が少ないことによるのか有効性を示さなかったが、低濃度補酵素Ｑ１０軟膏と併用することで明らかな相乗効果を示し、増悪が抑制された。補酵素Ｑ１０軟膏が、タクロリムスとの併用においても、ステロイド剤との併用と同様に相乗作用を示したことは、アトピー性皮膚炎に対する補酵素Ｑ１０軟膏の相乗作用はステロイド剤に特異的な作用ではないことを示している。
【００６４】
（実施例５）
ラット皮膚切創治癒試験
１２週齢のＳＤラット（雄）を毛刈りの後、体重が平均化するように群１０匹に分け、試験に供した。ジエチルエーテル麻酔下で正中線に切創を作製した。切開部の３ヶ所をミヘル縫合し、１％酸化型補酵素Ｑ１０軟膏および１％還元型補酵素Ｑ１０軟膏を０．２ｇ／日で４日間塗布した。対照群としては、無塗布群と軟膏基剤を同様に塗布した軟膏基剤群を設けた。切創作製３日後にミヘルを除去し、４日後にジエチルエーテル過麻酔で安楽死させた後、切創部の周辺の皮膚を剥離して皮膚切片を作製した。皮膚切片の張力を引張試験器で測定した。
その結果、酸化型補酵素Ｑ１０および還元型補酵素Ｑ１０に皮膚修復力の促進効果が認められた。
【００６５】
（実施例６）
軟膏中の還元型補酵素Ｑ１０の酸化安定性評価
還元型補酵素Ｑ１０軟膏の酸化安定性を評価した。軟膏基剤はＰＥＧ１５００、親水軟膏、吸水軟膏、および単軟膏を用いた。ＰＥＧ１５００は和光純薬の製品を、親水軟膏、吸水軟膏、単軟膏はそれぞれ日本薬局方品を用いた。それぞれの基剤と還元型補酵素Ｑ１０を実施例１と同様にして軟膏を作製した。作製した還元型補酵素Ｑ１０軟膏を２３℃で２週間空気中あるいは容器内を窒素置換して保存し、軟膏中の補酵素Ｑ１０の還元型の割合をＨＰＬＣにて測定した。その結果を表５に示した。
【００６６】
【表５】
【００６７】
平均値、ｎ＝２
＊１ 軟膏中の補酵素Ｑ１０の濃度
＊２ 各条件で２週間保存後の軟膏中の補酵素Ｑ１０中に占める還元型補酵素Ｑ１０の割合
−：未試験
【００６８】
単軟膏および親水軟膏を基剤として作製した還元型補酵素Ｑ１０軟膏では、保存２週間後で補酵素Ｑ１０の約８０％が還元型を維持していたが、ＰＥＧ１５００および吸水軟膏を基剤とした軟膏では、還元型はそれぞれ６０％と３０％しか残っていなかった。また、軟膏中の還元型補酵素Ｑ１０の酸化安定性に関しては保存容器中の窒素置換による保護効果は見られなかった。また、ＰＥＧ１５００を基剤とした軟膏を４℃で冷蔵保存した場合は、２週間安定であった。また、軟膏中の還元型補酵素Ｑ１０の濃度依存性を評価したところ、１％に比較して１０％が安定性が高く、高濃度がより安定であることが判った。
【００６９】
（製剤例１）
補酵素Ｑ１０を含有する親水軟膏を既知の方法により以下の組成で作製した。
親水軟膏 ９９．０００重量％
補酵素Ｑ１０ １．０００重量％
【００７０】
（製剤例２）
補酵素Ｑ１０を含有するＷ／Ｏクリームを既知の方法により以下の組成で作製した。
グリセロールソルビタン脂肪酸エステル ６．０００重量％
微晶性ワックス １．０００重量％
オリーブオイル ３．０００重量％
流動パラフィン １９．０００重量％
ステアリン酸マグネシウム １．０００重量％
プロピレングリコール ３．７００重量％
硫酸マグネシウム(ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ) ０．７００重量％
補酵素Ｑ１０ １．０００重量％
脱水化塩 １００．０００重量％に
【００７１】
(製剤例３)
補酵素Ｑ１０を含有するＷ／Ｏ乳化物を既知の方法により以下の組成で作製した。
ポリオキシエチレングリセロールソルビタン
脂肪酸エステル ３．６００重量％
ポリオキシエチレン脂肪酸エステル １．４００重量％
セテアリルアルコール ２．０００重量％
鉱油、ＧＰ９ ２０．０００重量％
パラベン混合物 適宜
硫酸マグネシウム(ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ) ０．７００重量％
補酵素Ｑ１０ １．０００重量％
塩化カルシウム(ＣａＣｌ２) ０．８５重量％
脱水化塩 １００．０００重量％に
【００７２】
(製剤例４)
補酵素Ｑ１０を含有するＷ／Ｏローションを既知の方法により以下の組成で作製した。
グリセロールソルビタン脂肪酸エステル １．３００重量％
ポリオキシエチレン脂肪酸エステル ３．７００重量％
中性油 ６．０００重量％
流動パラフィン、ＧＰ９ １４．０００重量％
プロピレングリコール ３．８００重量％
硫酸マグネシウム(ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ) ０．７００重量％
リポン酸 １．５００重量％
補酵素Ｑ１０ １．０００重量％
脱塩化水 １００．０００重量％に
【図面の簡単な説明】
【００７３】
【図１】皮膚中の補酵素Ｑ１０濃度と試料中の還元型補酵素Ｑ１０含有量の関係を示すグラフを示す。縦軸は皮膚中の総補酵素Ｑ１０濃度を示す。横軸は塗布した試料の補酵素Ｑ１０中の還元型補酵素Ｑ１０の含有量を表す。各棒は平均±標準偏差（ｎ＝４〜５）を表す。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、補酵素Ｑを有効成分とする皮膚用組成物、特に、皮膚疾患治療用組成物、化粧用組成物、皮膚のヘルスケア用組成物及び入浴剤組成物、並びに、この皮膚用組成物を用いる皮膚疾患の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
補酵素Ｑは、細菌から哺乳動物まで広く生体に分布し、生体内の細胞中におけるミトコンドリアの電子伝達系構成成分として存在する生理学的必須成分である。補酵素Ｑは、生体内において酸化と還元を繰り返すことで、電子伝達系における伝達成分としての機能を担っているほか、還元型補酵素Ｑは抗酸化物質であることが知られている。ヒトを始めとする多くの動物、あるいは魚や鳥では、補酵素Ｑの側鎖が繰り返し構造を１０個持つ補酵素Ｑ１０が主成分であり、また、この補酵素Ｑ１０は生体内においては通常４０〜９０％程度が還元型で存在していることが知られている。
【０００３】
補酵素Ｑの実際上の用途としては、例えば、酸化型補酵素Ｑ１０は鬱血性心不全薬として用いられており、医薬用途以外でもビタミン類と同様に、栄養剤、栄養補助剤などとして広く利用されている。しかし、還元型補酵素Ｑ１０は実際の使用には供されていない。
【０００４】
特許文献１には、補酵素Ｑ１０として酸化型補酵素Ｑ１０（ユビキノン）あるいは還元型補酵素Ｑ１０（ユビキノール）を含む皮膚用剤が開示されている。しかし、この文献では、数多く挙げられている構成成分の例示の１つとして開示されているに過ぎず、特にユビキノールについては実際の使用例は示されていない。また、これらの補酵素Ｑ１０を含有する皮膚用剤は、アトピー性皮膚炎に対して有効であると記載されているが、これも多くの皮膚疾患の一例として記載されているに過ぎず、実施例もないことから実際の効果については明らかでない。
【０００５】
我々は特許文献２において、還元型補酵素Ｑ１０と酸化型補酵素Ｑ１０を混合することにより、酸化型補酵素Ｑ１０単独に比較して経口吸収性が向上することを開示しているが、経口以外の投与経路での吸収性に対する還元型補酵素Ｑの効果、更にはアトピー性皮膚炎に対する有効性については全く不明であった。
【０００６】
皮膚疾患は、患者の生活に対して肉体的にはもちろん精神的にも多大な影響を与えていることが問題となっている。その中でも特にアトピー性皮膚炎は難治性の皮膚疾患として患者数も多く、また、近年では成人のアトピー性皮膚炎患者が増加し、社会生活を営む上での大きな問題となっている。
【０００７】
アトピー性皮膚炎の治療薬としては、一般にステロイド薬が知られているが、副作用が強いこと、あるいはリバウンド現象がみられることから使用を制限される例も少なくなく、アトピー性皮膚炎を完治するのに充分な薬剤ではない。更にステロイド薬が無効な場合は、事実上、治療薬がないという状況であり、民間療法による被害も社会問題となっている。
【０００８】
近年、免疫抑制剤であるタクロリムスがアトピー性皮膚炎治療薬として認められたが、副作用の懸念が大きく幼児に対する使用が認められておらず、安心して用いられる薬剤とは言い難い。
【０００９】
このような状況のもと、アトピー性皮膚炎に対して安心して使用できる薬剤は強く求められている。
【特許文献１】特表平９−５０１９２５号公報
【特許文献２】特開平１０−１０９９３３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、補酵素Ｑ、特に補酵素Ｑ１０を有効成分とする皮膚用組成物を提供し、皮膚疾患、特にアトピー性皮膚炎に対して安全で有効性の高い治療薬を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは上記課題を解決すべく研究した結果、酸化型補酵素Ｑ１０のアトピー性皮膚炎に対する効果を調べた結果、優れた治療効果を発揮することを見出した。更に、驚くべきことにステロイド薬あるいはタクロリムスなどの既存薬と酸化型補酵素Ｑ１０を併用することにより相乗作用が得られ、既存薬単独に比較して強い効果が得られることを見出した。
【００１２】
更に、我々は、還元型補酵素Ｑ１０を含有する皮膚用剤を作製し、皮膚吸収性試験を実施したところ、補酵素Ｑ１０として還元型補酵素Ｑ１０を一定の割合で含有する組成物を皮膚に塗布することで、酸化型補酵素Ｑ１０のみを含有する組成物と比較して明らかに高い皮膚吸収性が得られ、皮膚中の補酵素Ｑ１０量をより多く増加できることを見出した。更に驚くべき事に、還元型補酵素Ｑ１０を含有する組成物を塗布することにより、抗酸化作用の活性本体である還元型補酵素Ｑ１０の皮膚での含量を、酸化型補酵素Ｑ１０のみの塗布に比較して、著しく増加させられることをも見出した。従来、酸化型補酵素Ｑ１０を投与すれば、生体中で還元され還元型になることによって抗酸化活性を示しうると考えられてきたが、我々の研究の結果、酸化型補酵素Ｑ１０の皮膚中での還元は非常に緩やかにしか進行せず、還元型補酵素Ｑ１０を含有する組成物の塗布には及ばないことが明らかになった。強い抗酸化活性を示す還元型補酵素Ｑ１０の皮膚中含量を増加させることで、酸化型補酵素Ｑ１０のみの塗布に比較して、より強いスキンケア活性が期待できる。
【００１３】
また、還元型補酵素Ｑ１０を含有する軟膏についてもアトピー性皮膚炎に対する有効性を評価した。その結果、還元型補酵素Ｑ１０軟膏単独でもプレドニソロンと同等の強い治療効果があることを見出した。また、還元型補酵素Ｑ１０軟膏とステロイド薬あるいはタクロリムスの併用により、より強い治療効果を見出すに至った。
【００１４】
更に、我々は、これら補酵素Ｑ１０を主成分とする皮膚用剤に皮膚の修復力の促進効果があることを見出した。これは、補酵素Ｑ１０が褥瘡を始めとする皮膚疾患にも有効であることを示している。
【００１５】
すなわち、本発明は、下記式（１）
【００１６】
【化１】
【００１７】
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す)で表される酸化型補酵素Ｑ、及び／又は、下記式（２）
【００１８】
【化２】
【００１９】
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す)で表される還元型補酵素Ｑを有効成分とする皮膚用組成物であって、組成物全量のうち前記酸化型補酵素Ｑと前記還元型補酵素Ｑの合計割合が０．０１から９９重量％である皮膚用組成物である。
【００２０】
また本発明は、上記皮膚用組成物からなる皮膚疾患治療用組成物、化粧用組成物、皮膚のヘルスケア用組成物及び入浴剤組成物である。
【００２１】
さらに本発明は、上記皮膚疾患治療用組成物を、皮膚疾患を患う患者に適用する、皮膚疾患の治療方法、又は、上記皮膚疾患治療用組成物と、式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療薬を、皮膚疾患を患う患者に、並行して適用する、皮膚疾患の治療方法である。
以下に本発明を詳述する。
【００２２】
上記式（１）で表される化合物は酸化型補酵素Ｑであり、上記式（２）で表される化合物は還元型補酵素Ｑである。
【００２３】
酸化型補酵素Ｑおよび還元型補酵素Ｑを得る方法としては特に限定されず、例えば、合成、発酵、天然物からの抽出等の従来公知の方法により補酵素Ｑを得ることができる。あるいは、上記の方法によって得た後、クロマトグラフィーにより流出液中の酸化型補酵素Ｑ区分あるいは還元型補酵素Ｑ区分を濃縮する方法などを採用することもできる。酸化型補酵素Ｑを得る場合には、公知の方法により得ることができる。還元型補酵素Ｑを得る場合には、必要に応じて上記補酵素Ｑに対し、水素化ほう素ナトリウム、亜ジチオン酸ナトリウム（ハイドロサルファイトナトリウム）等の一般的な還元剤を添加し、常法により上記補酵素Ｑ中に含まれる酸化型補酵素Ｑを還元して還元型補酵素Ｑとした後にクロマトグラフィーによる濃縮を行っても良い。また、既存の高純度補酵素Ｑに上記還元剤を作用させる方法によっても還元型補酵素Ｑを得ることができる。
【００２４】
本発明の組成物を得る方法としては特に限定されず、例えば、上述のようにして得られる還元型補酵素Ｑと、市販あるいは公知の方法で得られる酸化型補酵素Ｑとを、混合あるいは別々に適当な基剤に溶解させることにより得ることができる。あるいは、上述した補酵素Ｑの製造工程で得られる還元型補酵素Ｑと酸化型補酵素Ｑの混合物をそのまま基剤に溶解してもよい。基剤としては、必要に応じて本発明の効果を損なわない範囲で、医薬品、化粧品などに通常用いられている基剤が使用できる。
【００２５】
本発明の組成物においては、組成物全量のうち酸化型補酵素Ｑと還元型補酵素Ｑがしめる合計割合（酸化型補酵素Ｑのみが含まれる場合には、組成物全量のうち酸化型補酵素Ｑが占める割合であり、還元型補酵素Ｑのみが含まれる場合には、組成物全量のうち還元型補酵素Ｑが占める割合である）が０．０１〜９９重量％である。好ましくは０．１〜９５重量％、より好ましくは０．５〜５０重量％、さらに好ましくは１〜３０重量％である。
【００２６】
また、経皮吸収性の観点から、酸化型補酵素Ｑと還元型補酵素Ｑの合計量のうち還元型補酵素Ｑの割合が２０重量％以上含有するのが好ましく、より好ましくは４０重量％以上含有することである。しかしながら、還元型補酵素Ｑを含まず、酸化型補酵素Ｑのみを含む組成物も好ましく用いることができる。また、酸化型補酵素Ｑと還元型補酵素Ｑの合計量のうち還元型補酵素Ｑの割合が９５重量％以下であることが好ましい。
【００２７】
本発明で使用できる酸化型補酵素Ｑ及び還元型補酵素Ｑは、前記式（１）および式（２）で表されるように、側鎖の繰り返し単位（式中ｎ）が１〜１２のものを使用することができるが、なかでも側鎖繰り返し単位が１０のもの、すなわち酸化型補酵素Ｑ１０及び還元型補酵素Ｑ１０が特に好適に使用できる。
【００２８】
上記皮膚用組成物、皮膚疾患治療用組成物、化粧用組成物、皮膚のヘルスケア用組成物及び入浴剤組成物は、人に適用するためのものであってもよいし、ペット、家畜及び／又は鳥、特に、犬及び／又は猫に適用するものであってもよい。
【００２９】
本発明の皮膚用組成物の剤型は、特に限定されるものではなく、例えば、適当な基剤中に上記薬物を溶解または混合分散させてクリーム状、ペースト状、ジェリー状、ゲル状、乳液状又は液状の形状になされたもの（軟膏剤、リニメント剤、ローション剤、スプレー剤など）、基剤中に上記薬物を溶解または混合分散させたものを支持体上に展延したもの（パップ剤など）、粘着剤中に上記薬物を溶解または混合分散させたものを支持体上に展延したもの（プラスター剤、テープ剤など）などが挙げられる。
【００３０】
本発明の皮膚用組成物は皮膚疾患治療用組成物として使用することができる。適用できる皮膚疾患としては、アトピー性皮膚炎、褥瘡、創傷、火傷、乾癬、かぶれ、接触性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、ヴィダール苔癬、貨幣状湿疹、主婦湿疹、日光皮膚炎、皮膚掻痒症、痒疹、薬疹、扁平苔癬、毛孔性紅色粃糠症、ジベル薔薇色粃糠症、紅斑症、紅皮症、水虫および皮膚潰瘍などが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。
【００３１】
本発明の皮膚用組成物を皮膚疾患用組成物として使用する場合には、上記組成物は、さらに、抗酸化作用を示す物質、例えば、スーパーオキサイドディスムターゼ、カタラーゼ、グルタチオンパーオキシダーゼ、ビタミンＥ、ビタミンＣ、グルタチオン、グルタチオン還元酵素、多価不飽和脂肪酸などを含むことができる。また、皮膚を活性化する成分、例えば、コラーゲン、ヒアルロン酸、ムチン、セラミド、スクワレン、スクワランなど、あるいは、経皮吸収促進剤を含むことができる。
【００３２】
さらに、酸化型補酵素Ｑ及び還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療成分を含んでもよい。このような成分としては、皮膚科の治療に通常使用されるような薬剤を挙げることができ、例えば、抗炎症剤、免疫抑制剤、抗菌物質、抗真菌剤、消毒剤など、更に、上に示したような抗酸化物質あるいは皮膚の活性化成分を挙げることができる。
【００３３】
本発明の皮膚疾患治療用組成物が特にアトピー性皮膚炎の治療を目的とする場合には、さらに、酸化型補酵素Ｑ及び還元型補酵素Ｑ以外のアトピー性皮膚炎治療薬を含むことが好ましい。このようなアトピー性皮膚炎治療薬としては、アトピー性皮膚炎治療に通常使用されるような薬剤であればよく、例えば、ステロイド剤、更に詳しくは吉草酸酢酸プレドニソロン、アムシノニド、吉草酸ジフルコルトロン、吉草酸デキサメタゾン、プロピオン酸クロベタゾール、酢酸ジフロラゾン、プロピオン酸デキサメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、ジフルプロドナート、フルオシノニド、ハルシノニド、プデソニド、酪酸プロピオン酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ベタメタゾン、プロピオン酸ベクロメタゾン、フルオシノロナセトニド、トリアムシノロナセトニド、ピバル酸フルメタゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、酪酸クロベタゾン、プロピオン酸アルクロメタゾン、デキサメタゾン、酢酸メチルプレドニソロン、プレドニソロン、酢酸ヒドロコルチゾン、あるいは、ステロイド剤以外の薬剤、例えば、タクロリムス、抗ヒスタミン剤などの成分を含むことができる。
【００３４】
本発明の皮膚用組成物は、化粧用組成物又は皮膚のヘルスケア用組成物として用いることができる。具体的な用途としては、洗顔料、アイクリーム、アイシャドウ、クリーム、乳液、化粧水、香水、おしろい、化粧油、練香水、パウダー、パック、ひげそり用クリーム、ひげそり用ローション、日焼けオイル、日焼け止めオイル、日焼けローション、日焼け止めローション、爪クリーム、美爪エナメル、浴用化粧品、ほお紅、マスカラ、口紅、リップクリーム、アイライナー、デオドランド剤、オーデコロンなどが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。
【００３５】
この場合、上記組成物中に、従来から化粧用または皮膚のヘルスケア用組成物に使用されている化粧品補助剤を含んでもよく、例えば、保存剤、殺菌剤、香料、発泡性抑制剤、着色剤、着色作用を持つ顔料、増粘剤、界面活性剤、乳化剤、柔軟剤、増湿剤及び／又は保湿剤、脂肪、油、ワックス、あるいは、アルコール、ポリオール、ポリマー、気泡安定剤、電解質、有機溶剤またはシリコン誘導体等の成分を挙げることができる。
【００３６】
本発明の皮膚用組成物は、入浴剤組成物としても使用することができる。ここで入浴剤組成物とは、入浴時に水又は湯のなかに溶かすことにより用いる組成物のことをいう。本発明の入浴剤組成物としては、従来、入浴剤の成分として用いられてきた添加剤、その他の成分を含むことができる。
【発明の効果】
【００３７】
本発明の組成物は上述の構成よりなるもので、補酵素Ｑ１０の経皮吸収性に優れており、アトピー性皮膚炎などの皮膚疾患および皮膚のヘルスケアに対して優れた効果を発揮する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３８】
以下に実施例及び製剤例を揚げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例および製剤例のみに限定されるものではない。
【００３９】
（実施例１）
（１）検体試料１の調製
０．１ｇの還元型補酵素Ｑ１０（約５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む)を５０℃水浴上で融解させた後、同様に溶解させたポリエチレングリコール１５００（ＰＥＧ１５００）を添加して１０ｍｌとした。これを５０℃で均質に溶融混合し、室温にて固化させ軟膏状組成物を得た。
【００４０】
（２）比較試料１の調製
０．１ｇの酸化型補酵素Ｑ１０を５０℃水浴上で融解させた後、ＰＥＧ１５００を添加して１０ｍｌとした。これを５０℃で均質に溶融混合し、室温にて固化させ軟膏状組成物を得た。
【００４１】
（３）経皮吸収試験
試料として、検体試料１および比較試料１を使用した。試験は、飽食条件下で飼育した雄のヘアレスラット(体重２５０〜３００ｇ)を用いて行った。エーテルにて軽く麻酔をかけたヘアレスラットの背部に、０．１ｇの検体試料１あるいは比較試料１、および対照としてＰＥＧ１５００をそれぞれ３ｃｍ四方の範囲内に塗布した。塗布３時間、８時間および２４時間後に、ラットを安楽死させ塗布部を十分洗浄後、皮膚を採取した。皮膚中の補酵素Ｑ１０量は皮膚をホモジナイトした後、プロパノールで抽出し、固相カラムを用いて濃縮した後、高速液体クロマトグラフィーによって定量した。皮膚中の総補酵素Ｑ１０量を表１に示した。数値は平均値±標準偏差である。
【００４２】
【表１】
【００４３】
平均値±ＳＤ、ｎ＝３〜８
＊：ｐ＜０．０５、＊＊＊：ｐ＜０．００１、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔの片側検定
＃１：但し、約５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む
【００４４】
上記の如く、還元型補酵素Ｑ１０を９５％含有する補酵素Ｑ１０は酸化型補酵素Ｑ１０を１００％含有するものに比較して、皮膚中の補酵素Ｑ１０量を増加させるために極めて有効であることが明らかになった。
【００４５】
前述の皮膚をホモジナイトし、ヘキサンで抽出、乾固した後、エタノールに溶解し、高速液体クロマトグラフィーと電気化学的検出器によって皮膚中還元型補酵素Ｑ１０の割合を定量した。皮膚中還元型補酵素Ｑ１０量を表２に示した。数値は平均値±標準偏差である。
【００４６】
【表２】
【００４７】
平均値±ＳＤ、ｎ＝３〜８
＊：ｐ＜０．０５、＊＊：ｐ＜０．０１、＊＊＊：ｐ＜０．００１、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔの片側検定
＃１：但し、約５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む
【００４８】
上記の如く、還元型補酵素Ｑ１０を９５％含有する補酵素Ｑ１０は酸化型補酵素Ｑ１０を１００％含有するものに比較して、皮膚中の還元型補酵素Ｑ１０量を増加させるために極めて有効であることが明らかになった。皮膚中の還元型補酵素Ｑ１０量は、酸化型補酵素Ｑ１０の塗布によっても皮膚中での還元により徐々に増加するがその速度は決して速いものではなく、皮膚中還元型補酵素Ｑ１０量は酸化型補酵素Ｑ１０塗布後２４時間でも、還元型補酵素Ｑ１０塗布後３時間の半分以下の量でしかない。
【００４９】
（実施例２）
（１）検体試料２の調製
酸化型補酵素Ｑ１０：還元型補酵素Ｑ１０の重量比が８０：２０である混合物を用いて、上記実施例１記載の検体試料１と同様にして調製した。
【００５０】
（２）検体試料３の調製
酸化型補酵素Ｑ１０：還元型補酵素Ｑ１０の重量比が６０：４０である混合物を用いて、上記実施例１記載の検体試料１と同様にして調製した。
【００５１】
（３）検体試料４の調製
酸化型補酵素Ｑ１０：還元型補酵素Ｑ１０の重量比が４０：６０である混合物を用いて、上記実施例１記載の検体試料１と同様にして調製した。
【００５２】
（４）検体試料５の調製
酸化型補酵素Ｑ１０：還元型補酵素Ｑ１０の重量比が２０：８０である混合物を用いて、上記実施例１記載の検体試料１と同様にして調製した。
【００５３】
（５）皮膚吸収性試験
試験試料として検体試料２、検体試料３、検体試料４、検体試料５及び比較試料１を使用し、上記実施例１と同様にして行った。
【００５４】
試験結果を図１に示した。なお、図１中、縦軸は、塗布３時間後の皮膚中の総補酵素Ｑ１０量および還元型補酵素Ｑ１０量であり、横軸は、塗布した試料中の総補酵素Ｑ１０に対する還元型補酵素Ｑ１０の含有量（重量％）であり、各棒は平均値である。
【００５５】
図１より明らかなように、還元型補酵素Ｑ１０が２０重量％の組成物では、酸化型補酵素Ｑ１０単独からなる組成物に比較して皮膚中還元型補酵素Ｑ１０濃度の有意な増加が認められた。更に、還元型補酵素Ｑ１０を４０重量％含有する組成物では、２０重量％の組成物に比較して更に高い濃度が認められた。この結果より、本発明の組成物は還元型補酵素Ｑ１０を２０重量％以上含むことにより酸化型補酵素Ｑ１０のみを含有するものや、還元型補酵素Ｑ１０の含有量が補酵素Ｑ１０全量の２０重量％以下であるものに比較して、明らかに皮膚中還元型補酵素Ｑ１０量を増加できることが判った。
【００５６】
（実施例３）
アトピー性皮膚炎モデルマウス（ＮＣマウス）に対する治療効果１
平澤等の方法を用いて評価した（応用薬理、Ｖｏｌ．５９、Ｎｏ．６、ｐ１２３−１３４、２０００）。酸化型補酵素Ｑ１０軟膏および還元型補酵素Ｑ１０軟膏（但し、補酵素Ｑ１０中に５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む）のアトピー性皮膚炎モデルマウス（ＮＣマウス）における治療効果を調べた。各群７匹のＮＣマウスにハプテンを用いて、皮膚炎を感作、誘発（週１回）した。３回目の感作時より被験化合物による治療を実施した。補酵素Ｑ１０軟膏（１％）は連日０．１ｇを塗布し、陽性対照のプレドニソロン軟膏は２日に１回塗布した。プレドニソロン軟膏と補酵素Ｑ１０軟膏の併用群では、各軟膏を交互に塗布した。治療効果は、１．掻痒症、２．発赤・出血、３．浮腫、４．擦傷・組織欠損、５．痂皮形成・乾燥の５項目について、３段階の評点（０：無症状、１：軽度、２：中等度、３：高度）をつけて評価した。表３に塗布開始１５日目における皮膚炎スコアの試験開始時との差を示した。値は平均値±標準偏差である。
【００５７】
【表３】
【００５８】
平均値±ＳＤ、ｎ＝７
＊ 但し補酵素Ｑ１０中に約５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む
【００５９】
スコアの値が大きいほど試験中の皮膚炎の増悪の程度が大きいことを示しているが、酸化型および還元型補酵素Ｑ１０軟膏群は対照薬であるプレドニソロン軟膏と同様に対照群に比較して明らかな皮膚炎の増悪抑制効果を示した。また、プレドニソロンとの併用群では、プレドニソロン単独群に比較して、より強い治療効果を示し、特に還元型補酵素Ｑ１０軟膏は、試験開始時のスコアよりも低くなり、皮膚炎の治癒能力があることを示している。このように補酵素Ｑを主成分とする軟膏がアトピー性皮膚炎に対して実際に有効性を示すことは、今までに全く知られていなかったことである。更に、ステロイド剤と併用することで更に強い効果を示すことは、全く予期できないことであった。
【００６０】
（実施例４)
アトピー性皮膚炎モデルマウス（ＮＣマウス）に対する治療効果２
実施例３と同様の試験を用いて、高濃度補酵素Ｑ１０軟膏（１０％）単独効果およびアトピー性皮膚炎治療剤であるプロトピック軟膏（タクロリムス）と低濃度補酵素Ｑ１０軟膏（１％）の併用効果を調べた。単独評価群では被験薬を連日塗布し、併用評価群ではプロトピック軟膏は０．１ｇを週１回塗布し、週６日は低濃度補酵素Ｑ１０軟膏を０．１ｇ塗布した。対照であるプロトピック軟膏の単独群では、週６回は軟膏基剤を塗布した。また、陽性対照としてプレドニソロン軟膏を隔日で塗布した。塗布開始後１５日目の結果を表４に示した。数値は平均値±標準偏差である。
【００６１】
【表４】
【００６２】
平均値±ＳＤ、ｎ＝７
＊ 但し補酵素Ｑ１０中に約５％の酸化型補酵素Ｑ１０を含む
【００６３】
高濃度還元型補酵素Ｑ１０軟膏は、陽性対照のプレドニソロン軟膏と同程度の治療効果を示し、単独でも強い治療効果を示すことが示された。一方、プロトピック軟膏単独群は、塗布回数が少ないことによるのか有効性を示さなかったが、低濃度補酵素Ｑ１０軟膏と併用することで明らかな相乗効果を示し、増悪が抑制された。補酵素Ｑ１０軟膏が、タクロリムスとの併用においても、ステロイド剤との併用と同様に相乗作用を示したことは、アトピー性皮膚炎に対する補酵素Ｑ１０軟膏の相乗作用はステロイド剤に特異的な作用ではないことを示している。
【００６４】
（実施例５）
ラット皮膚切創治癒試験
１２週齢のＳＤラット（雄）を毛刈りの後、体重が平均化するように群１０匹に分け、試験に供した。ジエチルエーテル麻酔下で正中線に切創を作製した。切開部の３ヶ所をミヘル縫合し、１％酸化型補酵素Ｑ１０軟膏および１％還元型補酵素Ｑ１０軟膏を０．２ｇ／日で４日間塗布した。対照群としては、無塗布群と軟膏基剤を同様に塗布した軟膏基剤群を設けた。切創作製３日後にミヘルを除去し、４日後にジエチルエーテル過麻酔で安楽死させた後、切創部の周辺の皮膚を剥離して皮膚切片を作製した。皮膚切片の張力を引張試験器で測定した。
その結果、酸化型補酵素Ｑ１０および還元型補酵素Ｑ１０に皮膚修復力の促進効果が認められた。
【００６５】
（実施例６）
軟膏中の還元型補酵素Ｑ１０の酸化安定性評価
還元型補酵素Ｑ１０軟膏の酸化安定性を評価した。軟膏基剤はＰＥＧ１５００、親水軟膏、吸水軟膏、および単軟膏を用いた。ＰＥＧ１５００は和光純薬の製品を、親水軟膏、吸水軟膏、単軟膏はそれぞれ日本薬局方品を用いた。それぞれの基剤と還元型補酵素Ｑ１０を実施例１と同様にして軟膏を作製した。作製した還元型補酵素Ｑ１０軟膏を２３℃で２週間空気中あるいは容器内を窒素置換して保存し、軟膏中の補酵素Ｑ１０の還元型の割合をＨＰＬＣにて測定した。その結果を表５に示した。
【００６６】
【表５】
【００６７】
平均値、ｎ＝２
＊１ 軟膏中の補酵素Ｑ１０の濃度
＊２ 各条件で２週間保存後の軟膏中の補酵素Ｑ１０中に占める還元型補酵素Ｑ１０の割合
−：未試験
【００６８】
単軟膏および親水軟膏を基剤として作製した還元型補酵素Ｑ１０軟膏では、保存２週間後で補酵素Ｑ１０の約８０％が還元型を維持していたが、ＰＥＧ１５００および吸水軟膏を基剤とした軟膏では、還元型はそれぞれ６０％と３０％しか残っていなかった。また、軟膏中の還元型補酵素Ｑ１０の酸化安定性に関しては保存容器中の窒素置換による保護効果は見られなかった。また、ＰＥＧ１５００を基剤とした軟膏を４℃で冷蔵保存した場合は、２週間安定であった。また、軟膏中の還元型補酵素Ｑ１０の濃度依存性を評価したところ、１％に比較して１０％が安定性が高く、高濃度がより安定であることが判った。
【００６９】
（製剤例１）
補酵素Ｑ１０を含有する親水軟膏を既知の方法により以下の組成で作製した。
親水軟膏 ９９．０００重量％
補酵素Ｑ１０ １．０００重量％
【００７０】
（製剤例２）
補酵素Ｑ１０を含有するＷ／Ｏクリームを既知の方法により以下の組成で作製した。
グリセロールソルビタン脂肪酸エステル ６．０００重量％
微晶性ワックス １．０００重量％
オリーブオイル ３．０００重量％
流動パラフィン １９．０００重量％
ステアリン酸マグネシウム １．０００重量％
プロピレングリコール ３．７００重量％
硫酸マグネシウム(ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ) ０．７００重量％
補酵素Ｑ１０ １．０００重量％
脱水化塩 １００．０００重量％に
【００７１】
(製剤例３)
補酵素Ｑ１０を含有するＷ／Ｏ乳化物を既知の方法により以下の組成で作製した。
ポリオキシエチレングリセロールソルビタン
脂肪酸エステル ３．６００重量％
ポリオキシエチレン脂肪酸エステル １．４００重量％
セテアリルアルコール ２．０００重量％
鉱油、ＧＰ９ ２０．０００重量％
パラベン混合物 適宜
硫酸マグネシウム(ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ) ０．７００重量％
補酵素Ｑ１０ １．０００重量％
塩化カルシウム(ＣａＣｌ２) ０．８５重量％
脱水化塩 １００．０００重量％に
【００７２】
(製剤例４)
補酵素Ｑ１０を含有するＷ／Ｏローションを既知の方法により以下の組成で作製した。
グリセロールソルビタン脂肪酸エステル １．３００重量％
ポリオキシエチレン脂肪酸エステル ３．７００重量％
中性油 ６．０００重量％
流動パラフィン、ＧＰ９ １４．０００重量％
プロピレングリコール ３．８００重量％
硫酸マグネシウム(ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ) ０．７００重量％
リポン酸 １．５００重量％
補酵素Ｑ１０ １．０００重量％
脱塩化水 １００．０００重量％に
【図面の簡単な説明】
【００７３】
【図１】皮膚中の補酵素Ｑ１０濃度と試料中の還元型補酵素Ｑ１０含有量の関係を示すグラフを示す。縦軸は皮膚中の総補酵素Ｑ１０濃度を示す。横軸は塗布した試料の補酵素Ｑ１０中の還元型補酵素Ｑ１０の含有量を表す。各棒は平均±標準偏差（ｎ＝４〜５）を表す。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）
【化１】
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す)で表される酸化型補酵素Ｑ、及び／又は、下記式（２）
【化２】
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す)で表される還元型補酵素Ｑを有効成分とする皮膚用組成物であって、組成物全量のうち前記酸化型補酵素Ｑと前記還元型補酵素Ｑの合計割合が０．０１から９９重量％であることを特徴とする皮膚用組成物。
【請求項２】
式（１）で表される酸化型補酵素Ｑと式（２）で表される還元型補酵素Ｑの合計量のうち前記還元型補酵素Ｑの割合が２０重量％以上である請求項１記載の皮膚用組成物。
【請求項３】
式（１）で表される酸化型補酵素Ｑと式（２）で表される還元型補酵素Ｑの合計量のうち前記還元型補酵素Ｑの割合が４０重量％以上である請求項２記載の皮膚用組成物。
【請求項４】
式（１）で表される酸化型補酵素Ｑと式（２）で表される還元型補酵素Ｑの合計量のうち前記還元型補酵素Ｑの割合が９５重量％以下である請求項１〜３のいずれか１項に記載の皮膚用組成物。
【請求項５】
式（２）で表される還元型補酵素Ｑを含まず、式（１）で表される酸化型補酵素Ｑを含む請求項１に記載の皮膚用組成物。
【請求項６】
一般式（１）で表される酸化型補酵素Ｑが酸化型補酵素Ｑ１０であり、一般式（２）で表される還元型補酵素Ｑが還元型補酵素Ｑ１０である請求項１〜５のいずれか１項に記載の皮膚用組成物。
【請求項７】
人に適用するための請求項１〜６のいずれか１項に記載の皮膚用組成物。
【請求項８】
ペット、家畜及び／又は鳥に適用するための請求項１〜６のいずれか１項に記載の皮膚用組成物。
【請求項９】
犬及び／又は猫に適用するための請求項８に記載の皮膚用組成物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の皮膚用組成物からなる皮膚疾患治療用組成物。
【請求項１１】
皮膚疾患が、アトピー性皮膚炎、褥瘡、創傷、火傷、乾癬、かぶれ、接触性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、ヴィダール苔癬、貨幣状湿疹、主婦湿疹、日光皮膚炎、皮膚掻痒症、痒疹、薬疹、扁平苔癬、毛孔性紅色粃糠症、ジベル薔薇色粃糠症、紅斑症、紅皮症、水虫及び皮膚潰瘍からなる群より選択される少なくとも１種である請求項１０に記載の皮膚疾患治療用組成物。
【請求項１２】
さらに、式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療成分を含有する請求項１０又は１１記載の皮膚疾患治療用組成物。
【請求項１３】
式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療成分が、式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外のアトピー性皮膚炎治療薬である請求項１２記載の皮膚疾患治療用組成物。
【請求項１４】
式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外のアトピー性皮膚炎治療薬が、ステロイド剤又はタクロリムスである請求項１３記載の皮膚疾患治療用組成物。
【請求項１５】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の皮膚用組成物からなる化粧用組成物。
【請求項１６】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の皮膚用組成物からなる、皮膚のヘルスケア用組成物。
【請求項１７】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の皮膚用組成物からなる入浴剤組成物。
【請求項１８】
請求項１０〜１４のいずれか１項に記載の皮膚疾患治療用組成物を、皮膚疾患を患う患者に適用することを特徴とする、皮膚疾患の治療方法。
【請求項１９】
請求項１０〜１４のいずれか１項に記載の皮膚疾患治療用組成物と、式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療薬を、皮膚疾患を患う患者に、並行して適用することを特徴とする、皮膚疾患の治療方法。
【請求項１】
下記式（１）
【化１】
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す)で表される酸化型補酵素Ｑ、及び／又は、下記式（２）
【化２】
(式中、ｎは１〜１２の整数を表す)で表される還元型補酵素Ｑを有効成分とする皮膚用組成物であって、組成物全量のうち前記酸化型補酵素Ｑと前記還元型補酵素Ｑの合計割合が０．０１から９９重量％であることを特徴とする皮膚用組成物。
【請求項２】
式（１）で表される酸化型補酵素Ｑと式（２）で表される還元型補酵素Ｑの合計量のうち前記還元型補酵素Ｑの割合が２０重量％以上である請求項１記載の皮膚用組成物。
【請求項３】
式（１）で表される酸化型補酵素Ｑと式（２）で表される還元型補酵素Ｑの合計量のうち前記還元型補酵素Ｑの割合が４０重量％以上である請求項２記載の皮膚用組成物。
【請求項４】
式（１）で表される酸化型補酵素Ｑと式（２）で表される還元型補酵素Ｑの合計量のうち前記還元型補酵素Ｑの割合が９５重量％以下である請求項１〜３のいずれか１項に記載の皮膚用組成物。
【請求項５】
式（２）で表される還元型補酵素Ｑを含まず、式（１）で表される酸化型補酵素Ｑを含む請求項１に記載の皮膚用組成物。
【請求項６】
一般式（１）で表される酸化型補酵素Ｑが酸化型補酵素Ｑ１０であり、一般式（２）で表される還元型補酵素Ｑが還元型補酵素Ｑ１０である請求項１〜５のいずれか１項に記載の皮膚用組成物。
【請求項７】
人に適用するための請求項１〜６のいずれか１項に記載の皮膚用組成物。
【請求項８】
ペット、家畜及び／又は鳥に適用するための請求項１〜６のいずれか１項に記載の皮膚用組成物。
【請求項９】
犬及び／又は猫に適用するための請求項８に記載の皮膚用組成物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の皮膚用組成物からなる皮膚疾患治療用組成物。
【請求項１１】
皮膚疾患が、アトピー性皮膚炎、褥瘡、創傷、火傷、乾癬、かぶれ、接触性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、ヴィダール苔癬、貨幣状湿疹、主婦湿疹、日光皮膚炎、皮膚掻痒症、痒疹、薬疹、扁平苔癬、毛孔性紅色粃糠症、ジベル薔薇色粃糠症、紅斑症、紅皮症、水虫及び皮膚潰瘍からなる群より選択される少なくとも１種である請求項１０に記載の皮膚疾患治療用組成物。
【請求項１２】
さらに、式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療成分を含有する請求項１０又は１１記載の皮膚疾患治療用組成物。
【請求項１３】
式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療成分が、式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外のアトピー性皮膚炎治療薬である請求項１２記載の皮膚疾患治療用組成物。
【請求項１４】
式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外のアトピー性皮膚炎治療薬が、ステロイド剤又はタクロリムスである請求項１３記載の皮膚疾患治療用組成物。
【請求項１５】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の皮膚用組成物からなる化粧用組成物。
【請求項１６】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の皮膚用組成物からなる、皮膚のヘルスケア用組成物。
【請求項１７】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の皮膚用組成物からなる入浴剤組成物。
【請求項１８】
請求項１０〜１４のいずれか１項に記載の皮膚疾患治療用組成物を、皮膚疾患を患う患者に適用することを特徴とする、皮膚疾患の治療方法。
【請求項１９】
請求項１０〜１４のいずれか１項に記載の皮膚疾患治療用組成物と、式（１）で表される酸化型補酵素Ｑ及び式（２）で表される還元型補酵素Ｑ以外の皮膚疾患治療薬を、皮膚疾患を患う患者に、並行して適用することを特徴とする、皮膚疾患の治療方法。
【図１】
【公開番号】特開２００６−５２２３５（Ｐ２００６−５２２３５Ａ）
【公開日】平成１８年２月２３日（２００６．２．２３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−３１８６６０（Ｐ２００５−３１８６６０）
【出願日】平成１７年１１月１日（２００５．１１．１）
【分割の表示】特願２００１−５８１８１０（Ｐ２００１−５８１８１０）の分割
【原出願日】平成１３年５月９日（２００１．５．９）
【出願人】（００００００９４１）株式会社カネカ (3,932)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年２月２３日（２００６．２．２３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年１１月１日（２００５．１１．１）
【分割の表示】特願２００１−５８１８１０（Ｐ２００１−５８１８１０）の分割
【原出願日】平成１３年５月９日（２００１．５．９）
【出願人】（００００００９４１）株式会社カネカ (3,932)
【Ｆターム（参考）】
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