本発明は、ＰＳＭＡに対する安定化した高親和性の核酸リガンドを提供する。２’−Ｏ−メチル置換核酸によるＳＥＬＥＸ^ＴＭ法、および細胞表面ＳＥＬＥＸ^ＴＭを使用した、ＰＳＭＡに対する新規の安定な高親和性リガンドの同定および調製のための方法が、本明細書中に記載される。ＰＳＭＡ発現によって特徴付けられる疾患の処置および診断のための方法および組成物もまた含まれ、この処置および診断は、記載される核酸リガンドを使用する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＰＳＭＡに結合するアプタマーであって、配列番号１１〜１３、配列番号１５〜２６、配列番号３０〜９０、配列番号１２２〜１６５、および配列番号１６７からなる群より選択される核酸配列を含む、アプタマー。
【請求項２】
前記アプタマーは、インビトロでＰＳＭＡのＮＡＡＬＡＤａｓｅ活性を調節する、請求項１に記載のアプタマー。
【請求項３】
前記アプタマーは、さらに改変されて、少なくとも１つの化学的改変を含む、請求項１に記載のアプタマー。
【請求項４】
前記改変は、前記核酸の糖の位置における化学的置換、該核酸のリン酸の位置における化学的置換、および該核酸の塩基の位置における化学的置換からなる群より選択される、請求項３に記載のアプタマー。
【請求項５】
前記改変は、改変ヌクレオチドの組み込み、３’キャッピング、アミンリンカーへの結合体化、高分子量の非免疫原性化合物への結合体化、脂肪親和性化合物への結合体化、薬物への結合体化、細胞傷害性部分への結合体化および放射性同位体による標識化からなる群より選択される、請求項３に記載のアプタマー。
【請求項６】
前記細胞傷害性部分は、前記アプタマーの５’末端に結合体化される、請求項５に記載のアプタマー。
【請求項７】
前記細胞傷害性部分は、前記アプタマーの３’末端に結合体化される、請求項５に記載のアプタマー。
【請求項８】
前記細胞傷害性部分は、ナノ粒子中に封入される、請求項５に記載のアプタマー。
【請求項９】
前記ナノ粒子は、リポソーム、デンドリマー、およびくし型ポリマーからなる群より選択される、請求項８に記載のアプタマー。
【請求項１０】
前記細胞傷害性部分は、低分子細胞傷害性薬剤である、請求項５に記載のアプタマー。
【請求項１１】
前記低分子細胞傷害性部分は、ビンブラスチンヒドラジド、カリケアマイシン、ビンカアルカロイド、クリプトフィシン、チューブリシン、ドラスタチン−１０、ドラスタチン−１５、オーリスタチンＥ、リゾキシン、エポチロンＢ、エピチロンＤ、タキソイド、メイタンシノイド、ならびにそれらの任意の改変体および誘導体からなる群より選択される、請求項１０に記載のアプタマー。
【請求項１２】
前記放射性同位体は、イットリウム−９０、インジウム−１１１、ヨウ素−１３１、ルテチウム−１７７、銅−６７、レニウム−１８６、レニウム−１８８、ビスマス−２１２、ビスマス−２１３、アスタチン−２１１、およびアクチニウム−２２５からなる群より選択される、請求項５に記載のアプタマー。
【請求項１３】
前記細胞傷害性部分は、タンパク質毒素である、請求項５に記載のアプタマー。
【請求項１４】
前記タンパク質毒素は、ジフテリア毒素、リシン、アブリン、ゲロニン、およびシュードモナス属体外毒素Ａからなる群より選択される、請求項１３に記載のアプタマー。
【請求項１５】
前記非免疫原性の高分子量化合物は、ポリアルキレングリコールである、請求項５に記載のアプタマー。
【請求項１６】
前記ポリアルキレングリコールは、ポリエチレングリコールである、請求項１５に記載のアプタマー。
【請求項１７】
治療的に有効な量の請求項１０に記載のアプタマーまたはその塩および薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤を含む、薬学的組成物。
【請求項１８】
ＰＳＭＡの発現に関連する疾患を処置または改善する方法であって、請求項１７に記載の組成物を、ＰＳＭＡの発現に関連する疾患を処置または改善する必要のある患者に投与する工程を包含する、方法。
【請求項１９】
治療的に有効な量の請求項１３に記載のアプタマーまたはその塩、および薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤を含む、薬学的組成物。
【請求項２０】
ＰＳＭＡのアップレギュレーションに関連する疾患を処置または改善する方法であって、請求項１９に記載の組成物を、ＰＳＭＡのアップレギュレーションに関連する疾患を処置または改善する必要のある患者に投与する工程を包含する、方法。
【請求項２１】
配列番号１７（ＡＲＣ１０９１）、配列番号１８（ＡＲＣ１１４２）、配列番号１９（ＡＲＣ１７８６）、配列番号２２（ＡＲＣ５９１）、配列番号２３（ＡＲＣ２０３８）、配列番号２４（ＡＲＣ２０３９）、配列番号８８（ＡＲＣ１１１３）、配列番号８９（ＡＲＣ２０３５）、配列番号９０（ＡＲＣ２０３６）、配列番号１２８（ＡＲＣ９４２）、配列番号１２９（ＡＲＣ２０３７）、配列番号１３０（ＡＲＣ１０２６）、配列番号１５６（ＡＲＣ１７２１）、配列番号１５７（ＡＲＣ２０３３）、配列番号１５８（ＡＲＣ２０３８）、配列番号１６２（ＡＲＣ１７２５）、配列番号１６３（ＡＲＣ２０３２）、配列番号１６７（ＡＲＣ９６４）、および配列番号１６８からなる群より選択される核酸配列を含むアプタマーであって、該核酸配列が、細胞傷害性部分に結合体化される、アプタマー。
【請求項２２】
前記細胞傷害性部分は、メイタンシノイド誘導体およびビンブラスチンヒドラジドからなる群より選択される、請求項２１に記載のアプタマー。
【請求項２３】
前記細胞傷害性部分は、前記アプタマーの５’末端に結合体化される、請求項２１に記載のアプタマー。
【請求項２４】
前記細胞傷害性部分は、前記アプタマーの３’末端に結合体化される、請求項２１に記載のアプタマー。
【請求項２５】
前記細胞傷害性部分は、ナノ粒子中に封入される、請求項２１に記載のアプタマー。
【請求項２６】
前記ナノ粒子は、リポソーム、デンドリマー、およびくし型ポリマーからなる群より選択される、請求項２５に記載のアプタマー。
【請求項２７】
以下の構造：
【化１】

を含むアプタマーであって、
該アプタマーが、配列番号１７および配列番号９０のうちのいずれか１つからなる群より選択される、
アプタマー。
【請求項２８】
以下の構造：
【化２】

を含むアプタマーであって、
該アプタマーが、配列番号１８、配列番号１３０および配列番号１６７のうちのいずれか１つからなる群より選択される、
アプタマー。
【請求項２９】
前記アプタマーは、γ線を放出する放射性同位体によって標識される、請求項１に記載のアプタマー。
【請求項３０】
請求項１に記載のアプタマーと組成物とを接触させる工程、および該組成物におけるＰＳＭＡまたはその改変体の存在または非存在を検出する工程を包含する、診断方法。
【請求項３１】
請求項２９に記載のアプタマーを被験体に投与する工程、および該患者において局在した放射性金属を検出する工程を包含する、診断方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【公表番号】特表２００８−５３６４８５（Ｐ２００８−５３６４８５Ａ）
【公表日】平成２０年９月１１日（２００８．９．１１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５００８６３（Ｐ２００８−５００８６３）
【出願日】平成１８年３月７日（２００６．３．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００８１９３
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０９６７５４
【国際公開日】平成１８年９月１４日（２００６．９．１４）
【出願人】（５０７２７２８９８）アーケミックス　コーポレイション (7)
【Ｆターム（参考）】