ヒドロラーゼ、それをコードする核酸並びにその製造および使用方法
【課題】本発明は、ヒドロラーゼ、それをコードするポリヌクレオチド、並びにこれらのポリヌクレオチドおよびポリペプチドを製造および使用する方法を提供する。
【解決手段】ある特徴では、本発明は、ポリペプチド(例えばヒドロラーゼ活性(例えばエステラーゼ、アシラーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ(例えばホスホリパーゼA、B、CおよびD活性、パタチン活性、脂質アシルヒドロラーゼ(LAH)活性)、またはプロテアーゼ活性であり、熱安定性および耐熱性のヒドロラーゼ活性を含む)を有する酵素)、およびこれらの酵素をコードするポリヌクレオチド、並びに、これらのポリヌクレオチドおよびポリペプチドの製造および使用を対象とする。
【解決手段】ある特徴では、本発明は、ポリペプチド(例えばヒドロラーゼ活性(例えばエステラーゼ、アシラーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ(例えばホスホリパーゼA、B、CおよびD活性、パタチン活性、脂質アシルヒドロラーゼ(LAH)活性)、またはプロテアーゼ活性であり、熱安定性および耐熱性のヒドロラーゼ活性を含む)を有する酵素)、およびこれらの酵素をコードするポリヌクレオチド、並びに、これらのポリヌクレオチドおよびポリペプチドの製造および使用を対象とする。
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【特許請求の範囲】
【請求項1】
(a)エステラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする核酸であって、配列番号:1、配列番号:3、配列番号:5、配列番号:7、配列番号:9、配列番号:11、配列番号:13、配列番号:15、配列番号:17、配列番号:19、配列番号:21、配列番号:23、配列番号:25、配列番号:27、配列番号:29、配列番号:31、配列番号:33、配列番号:35、配列番号:37、配列番号:39、配列番号:41、配列番号:43、配列番号:45、配列番号:47、配列番号:49、配列番号:51、配列番号:53、配列番号:55、配列番号:57、配列番号:59、配列番号:61、配列番号:63、配列番号:65、配列番号:67、配列番号:69、配列番号:71、配列番号:73、配列番号:75、配列番号:77、配列番号:79、配列番号:81、配列番号:83、配列番号:85、配列番号:87、配列番号:89、配列番号:91、配列番号:93、配列番号:95、配列番号:97、配列番号:99、配列番号:101、配列番号:103、配列番号:105、配列番号:107、配列番号:109、配列番号:111、配列番号:113、配列番号:115、配列番号:117、配列番号:119、配列番号:121、配列番号:123、配列番号:125、配列番号:127、配列番号:129、配列番号:131、配列番号:133、配列番号:135、配列番号:137、配列番号:139、配列番号:141、配列番号:143、配列番号:145、配列番号:147、配列番号:149、配列番号:151、配列番号:153、配列番号:155、配列番号:157、配列番号:159、配列番号:161、配列番号:163、配列番号:165、配列番号:167、配列番号:169、配列番号:171、配列番号:173、配列番号:175、配列番号:177、配列番号:179、配列番号:181、配列番号:183、配列番号:185、配列番号:187、配列番号:189、配列番号:191、配列番号:193、配列番号:195、配列番号:197、配列番号:199、配列番号:201、配列番号:203、配列番号:205、配列番号:207、配列番号:209、配列番号:211、配列番号:213、配列番号:215、配列番号:217、配列番号:219、配列番号:221、配列番号:223、配列番号:225、配列番号:227、配列番号:229、配列番号:231、配列番号:233、配列番号:235、配列番号:237、配列番号:239、配列番号:241、配列番号:243、配列番号:245、配列番号:247、配列番号:249、配列番号:251、配列番号:253、配列番号:255、配列番号:257、配列番号:259、配列番号:261、配列番号:263、配列番号:265、配列番号:267、配列番号:269、配列番号:271、配列番号:273、配列番号:275、配列番号:277、配列番号:279、配列番号:281、配列番号:283、配列番号:285、配列番号:287、配列番号:289、配列番号:291、配列番号:293、配列番号:295、配列番号:297、配列番号:299、配列番号:301、配列番号:303、配列番号:305、配列番号:307、配列番号:309、配列番号:311、配列番号:313、配列番号:315、配列番号:317、配列番号:319、配列番号:321、配列番号:323、配列番号:325、配列番号:327、配列番号:329、配列番号:331、配列番号:333、配列番号:335、配列番号:337、配列番号:339、配列番号:341、配列番号:343、配列番号:345、配列番号:347、配列番号:349、配列番号:351、配列番号:353、配列番号:355、配列番号:357、配列番号:359、配列番号:361、配列番号:363、配列番号:365、配列番号:367、配列番号:369、配列番号:371、配列番号:373、配列番号:375、配列番号:377、配列番号:379、配列番号:381、配列番号:383、配列番号:385、配列番号:387、配列番号:389、配列番号:391、配列番号:393、配列番号:395、配列番号:397、配列番号:399、配列番号:401、配列番号:403、配列番号:405、配列番号:407、配列番号:409、配列番号:411、配列番号:413、配列番号:415、配列番号:417、配列番号:419、配列番号:421、配列番号:423、配列番号:425、配列番号:427、配列番号:429、配列番号:431、配列番号:433、配列番号:435、配列番号:437、配列番号:439、配列番号:441、配列番号:443、配列番号:445、配列番号:447、配列番号:449、配列番号:451、配列番号:453、配列番号:455、配列番号:457、配列番号:459、配列番号:461、配列番号:463、配列番号:465、配列番号:467、配列番号:469、配列番号:471、配列番号:473、配列番号:475、配列番号:477、配列番号:479、配列番号:481、配列番号:483、配列番号:485、配列番号:487、配列番号:489、配列番号:491、配列番号:493、配列番号:495、配列番号:497、配列番号:499、配列番号:501、配列番号:503、配列番号:505、配列番号:507、配列番号:509、配列番号:511、配列番号:513、配列番号:515、配列番号:517、配列番号:519、配列番号:521、配列番号:523、配列番号:525、配列番号:527、配列番号:529、配列番号:531、配列番号:533、配列番号:535、配列番号:537、配列番号:539、配列番号:541、配列番号:543、配列番号:545、配列番号:547、配列番号:549、配列番号:551、配列番号:553、配列番号:555、配列番号:557、配列番号:559、配列番号:561、配列番号:563、配列番号:565、配列番号:567、配列番号:569、配列番号:571、配列番号:573、配列番号:575、配列番号:577、配列番号:579、配列番号:581、配列番号:583、配列番号:585、配列番号:587、配列番号:589、配列番号:591、配列番号:593、配列番号:595、配列番号:597、配列番号:599、配列番号:601、配列番号:603、配列番号:605、配列番号:607、配列番号:609、配列番号:611、配列番号:613、配列番号:615、配列番号:617、配列番号:619、配列番号:621、配列番号:623、配列番号:625、配列番号:627、配列番号:629、配列番号:631、配列番号:633、配列番号:635、配列番号:637、配列番号:639、配列番号:641、配列番号:643、配列番号:645、配列番号:647、配列番号:649、配列番号:651、配列番号:653、配列番号:655、配列番号:657、配列番号:659、配列番号:661、配列番号:663、配列番号:665、配列番号:667、配列番号:669、配列番号:671、配列番号:673、配列番号:675、配列番号:677、配列番号:679、配列番号:681、配列番号:683、配列番号:685、配列番号:687、配列番号:689、配列番号:691、配列番号:693、配列番号:695、配列番号:697、配列番号:699、配列番号:701、配列番号:703、配列番号:705、配列番号:707、配列番号:709、配列番号:711、配列番号:713、配列番号:715、配列番号:717、配列番号:719、配列番号:721、配列番号:723、配列番号:725、配列番号:727、配列番号:729、配列番号:731、配列番号:733、配列番号:735、配列番号:737、配列番号:739、配列番号:741、配列番号:743、配列番号:745、配列番号:747、配列番号:749、配列番号:751、配列番号:753、配列番号:755、配列番号:757、配列番号:759、配列番号:761、配列番号:763、配列番号:765、配列番号:767、配列番号:769、配列番号:771、配列番号:773、配列番号:775、配列番号:777、配列番号:779、配列番号:781、配列番号:783、配列番号:785、配列番号:787、配列番号:789、配列番号:791、配列番号:793、配列番号:795、配列番号:797、配列番号:799、配列番号:801、配列番号:803、配列番号:805、配列番号:807、配列番号:809、配列番号:811、配列番号:813、配列番号:815、配列番号:817、配列番号:819、配列番号:821、配列番号:823、配列番号:825、配列番号:827、配列番号:829、配列番号:831、配列番号:833、配列番号:835、配列番号:837、配列番号:839、配列番号:841、配列番号:843、配列番号:845、配列番号:847、配列番号:849、配列番号:851、配列番号:853、配列番号:855、配列番号:857、配列番号:859、配列番号:861、配列番号:863、配列番号:865、配列番号:867、配列番号:869、配列番号:871、配列番号:873、配列番号:875、配列番号:877、配列番号:879、配列番号:881、配列番号:883、配列番号:885、配列番号:887、配列番号:889、配列番号:891、配列番号:893、配列番号:895、配列番号:897、配列番号:899、配列番号:901、配列番号:903、配列番号:905、配列番号:907、配列番号:909、配列番号:911、配列番号:913、配列番号:915、配列番号:917、配列番号:919、配列番号:921、配列番号:925、配列番号:927、配列番号:929、配列番号:931、配列番号:933、配列番号:935、配列番号:937、配列番号:939、配列番号:941、配列番号:943、配列番号:945、配列番号:947、配列番号:949、配列番号:951、配列番号:953、配列番号:955、配列番号:957、配列番号:959、配列番号:961、配列番号:963、配列番号:965、配列番号:967、配列番号:969、配列番号:971、配列番号:973、配列番号:975、配列番号:977、配列番号:979、配列番号:981または配列番号:983の全長、またはエストラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列番号:1から配列番号:983の奇数番号の配列番号(配列番号:923を除く)の断片と、少なくとも70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%若しくはそれより高い、または100%の配列同一性を有する配列を有する前記核酸;
(b)配列番号:2から配列番号:984の偶数番号の配列番号(配列番号:924を除く)の配列を有するポリペプチドをコードする核酸;または、
(c)(a)または(b)と相補的な配列を含む核酸、
を含む、単離、合成または組換え核酸。
【請求項2】
請求項1記載の核酸を含む発現カセット、ベクターまたはクローニングビヒクル。
【請求項3】
請求項1記載の核酸または請求項2記載の発現カセット、ベクターまたはクローニングビヒクルを含む形質転換細胞。
【請求項4】
(a)請求項1記載の核酸を含む非ヒトトランスジェニック哺乳動物、または、
(b)マウス、ヤギ、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシまたはラットである、(a)の非ヒトトランスジェニック哺乳動物。
【請求項5】
(a)請求項1記載の核酸を含むトランスジェニック植物またはトランスジェニック種子、または、
(b)植物は、トウモロコシ、モロコシ、ジャガイモ、トマト、コムギ、油糧種子植物、ナタネ、ダイズ、イネ、オオムギ、草本、またはタバコであり、あるいは、種子は、イネ、トウモロコシ種子、コムギ核、油糧種子、ナタネ種子、ヤシ核、ヒマワリ種子、ゴマ種子、コメ、オオムギ、ラッカセイ、タバコ種子である、(a)のトランスジェニック植物またはトランスジェニック種子。
【請求項6】
(i)エストラーゼ活性を有し、かつ、配列番号:2、配列番号:4、配列番号:6、配列番号:8、配列番号:10、配列番号:12、配列番号:14、配列番号:16、配列番号:18、配列番号:20、配列番号:22、配列番号:24、配列番号:26、配列番号:28、配列番号:30、配列番号:32、配列番号:34、配列番号:36、配列番号:38、配列番号:40、配列番号:42、配列番号:44、配列番号:46、配列番号:48、配列番号:50、配列番号:52、配列番号:54、配列番号:56、配列番号:58、配列番号:60、配列番号:62、配列番号:64、配列番号:66、配列番号:68、配列番号:70、配列番号:72、配列番号:74、配列番号:76、配列番号:78、配列番号:80、配列番号:82、配列番号:84、配列番号:86、配列番号:88、配列番号:90、配列番号:92、配列番号:94、配列番号:96、配列番号:98、配列番号:100、配列番号:102、配列番号:104、配列番号:106、配列番号:108、配列番号:110、配列番号:112、配列番号:114、配列番号:116、配列番号:118、配列番号:120、配列番号:122、配列番号:124、配列番号:126、配列番号:128、配列番号:130、配列番号:132、配列番号:134、配列番号:136、配列番号:138、配列番号:140、配列番号:142、配列番号:143、配列番号:146、配列番号:148、配列番号:150、配列番号:152、配列番号:154、配列番号:156、配列番号:158、配列番号:160、配列番号:162、配列番号:164、配列番号:166、配列番号:168、配列番号:170、配列番号:172、配列番号:174、配列番号:176、配列番号:178、配列番号:180、配列番号:182、配列番号:184、配列番号:186、配列番号:188、配列番号:190、配列番号:192、配列番号:194、配列番号:196、配列番号:198、配列番号:200、配列番号:202、配列番号:204、配列番号:206、配列番号:208、配列番号:210、配列番号:212、配列番号:214、配列番号:216、配列番号:218、配列番号:220、配列番号:222、配列番号:224、配列番号:226、配列番号:228、配列番号:230、配列番号:232、配列番号:234、配列番号:236、配列番号:238、配列番号:240、配列番号:242、配列番号:244、配列番号:246、配列番号:248、配列番号:250、配列番号:252、配列番号:254、配列番号:256、配列番号:258、配列番号:260、配列番号:262、配列番号:264、配列番号:266、配列番号:268、配列番号:270、配列番号:272、配列番号:274、配列番号:276、配列番号:278、配列番号:280、配列番号:282、配列番号:284、配列番号:286、配列番号:288、配列番号:290、配列番号:292、配列番号:294、配列番号:296、配列番号:298、配列番号:300、配列番号:302、配列番号:304、配列番号:306、配列番号:308、配列番号:310、配列番号:312、配列番号:314、配列番号:316、配列番号:318、配列番号:320、配列番号:322、配列番号:324、配列番号:326、配列番号:328、配列番号:330、配列番号:332、配列番号:334、配列番号:336、配列番号:338、配列番号:340、配列番号:342、配列番号:344、配列番号:346、配列番号:348、配列番号:350、配列番号:352、配列番号:354、配列番号:356、配列番号:358、配列番号:360、配列番号:362、配列番号:364、配列番号:366、配列番号:368、配列番号:370、配列番号:372、配列番号:374、配列番号:376、配列番号:378、配列番号:380、配列番号:382、配列番号:384、配列番号:386、配列番号:388、配列番号:390、配列番号:392、配列番号:394、配列番号:396、配列番号:398、配列番号:400、配列番号:402、配列番号:404、配列番号:406、配列番号:408、配列番号:410、配列番号:412、配列番号:414、配列番号:416、配列番号:418、配列番号:420、配列番号:422、配列番号:424、配列番号:426、配列番号:428、配列番号:430、配列番号:432、配列番号:434、配列番号:436、配列番号:438、配列番号:440、配列番号:442、配列番号:444、配列番号:446、配列番号:448、配列番号:450、配列番号:452、配列番号:454、配列番号:456、配列番号:458、配列番号:460、配列番号:462、配列番号:464、配列番号:466、配列番号:468、配列番号:470、配列番号:472、配列番号:474、配列番号:476、配列番号:478、配列番号:480、配列番号:482、配列番号:484、配列番号:486、配列番号:488、配列番号:490、配列番号:492、配列番号:494、配列番号:496、配列番号:498、配列番号:500、配列番号:502、配列番号:504、配列番号:506、配列番号:508、配列番号:510、配列番号:512、配列番号:514、配列番号:516、配列番号:518、配列番号:520、配列番号:522、配列番号:524、配列番号:526、配列番号:528、配列番号:530、配列番号:532、配列番号:534、配列番号:536、配列番号:538、配列番号:540、配列番号:542、配列番号:544、配列番号:546、配列番号:548、配列番号:550、配列番号:552、配列番号:554、配列番号:556、配列番号:558、配列番号:560、配列番号:562、配列番号:564、配列番号:566、配列番号:568、配列番号:570、配列番号:572、配列番号:574、配列番号:576、配列番号:578、配列番号:580、配列番号:582、配列番号:584、配列番号:586、配列番号:588、配列番号:590、配列番号:592、配列番号:594、配列番号:596、配列番号:598、配列番号:600、配列番号:602、配列番号:604、配列番号:606、配列番号:608、配列番号:610、配列番号:612、配列番号:614、配列番号:616、配列番号:618、配列番号:620、配列番号:622、配列番号:624、配列番号:626、配列番号:628、配列番号:630、配列番号:632、配列番号:634、配列番号:636、配列番号:638、配列番号:640、配列番号:642、配列番号:644、配列番号:646、配列番号:648、配列番号:650、配列番号:652、配列番号:654、配列番号:656、配列番号:658、配列番号:660、配列番号:662、配列番号:664、配列番号:666、配列番号:668、配列番号:670、配列番号:672、配列番号:674、配列番号:676、配列番号:678、配列番号:680、配列番号:682、配列番号:684、配列番号:686、配列番号:688、配列番号:690、配列番号:692、配列番号:694、配列番号:696、配列番号:698、配列番号:700、配列番号:702、配列番号:704、配列番号:706、配列番号:708、配列番号:710、配列番号:712、配列番号:714、配列番号:716、配列番号:718、配列番号:720、配列番号:722、配列番号:724、配列番号:726、配列番号:728、配列番号:730、配列番号:732、配列番号:734、配列番号:736、配列番号:738、配列番号:740、配列番号:742、配列番号:744、配列番号:746、配列番号:748、配列番号:750、配列番号:752、配列番号:754、配列番号:756、配列番号:758、配列番号:760、配列番号:762、配列番号:764、配列番号:766、配列番号:768、配列番号:770、配列番号:772、配列番号:774、配列番号:776、配列番号:778、配列番号:780、配列番号:782、配列番号:784、配列番号:786、配列番号:788、配列番号:790、配列番号:792、配列番号:794、配列番号:796、配列番号:798、配列番号:800、配列番号:802、配列番号:804、配列番号:808、配列番号:808、配列番号:810、配列番号:812、配列番号:814、配列番号:816、配列番号:818、配列番号:820、配列番号:822、配列番号:824、配列番号:826、配列番号:828、配列番号:830、配列番号:832、配列番号:834、配列番号:836、配列番号:838、配列番号:840、配列番号:842、配列番号:844、配列番号:846、配列番号:848、配列番号:850、配列番号:852、配列番号:854、配列番号:856、配列番号:858、配列番号:860、配列番号:862、配列番号:864、配列番号:866、配列番号:868、配列番号:870、配列番号:872、配列番号:874、配列番号:876、配列番号:878、配列番号:880、配列番号:882、配列番号:884、配列番号:886、配列番号:888、配列番号:890、配列番号:892、配列番号:894、配列番号:896、配列番号:898、配列番号:900、配列番号:902、配列番号:904、配列番号:906、配列番号:908、配列番号:910、配列番号:912、配列番号:914、配列番号:916、配列番号:918、配列番号:920、配列番号:922、配列番号:926、配列番号:928、配列番号:930、配列番号:932、配列番号:934、配列番号:936、配列番号:938、配列番号:940、配列番号:942、配列番号:944、配列番号:946、配列番号:948、配列番号:950、配列番号:952、配列番号:954、配列番号:956、配列番号:958、配列番号:960、配列番号:962、配列番号:964、配列番号:966、配列番号:968、配列番号:970、配列番号:972、配列番号:974、配列番号:976、配列番号:978、配列番号:980、配列番号:982または配列番号:984、またはエストラーゼ活性を有する配列番号:2から配列番号:984の偶数番号の配列番号(配列番号:924を除く)の断片と、少なくとも70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%またはそれより高い、または100%の配列同一性を有する;または、
(ii)請求項1記載の核酸によってコードされる;
単離、合成または組換えポリペプチド;または、
(iii)グリコシル化されているか、または、少なくとも一つのグリコシル化部位を含む、(i)または(ii)の単離、合成または組換えポリペプチド。
【請求項7】
(a)請求項6記載のポリペプチドを含む固定化ポリペプチド、または、
(b)細胞上、金属上、樹脂上、ポリマー上、セラミック上、ガラス上、微小電極上、グラファイト粒子上、ビーズ上、ゲル上、プレート上、アレイ上、またはキャピラリー管上に固定化されている、(a)の固定化ポリペプチド。
【請求項8】
請求項6記載のポリペプチドに特異的に結合する単離、合成または組換え抗体。
【請求項9】
以下を含む、組換えポリペプチドを製造する方法:
(a)請求項1記載の核酸を提供すること;および、
(b)(a)の核酸を、ポリペプチドの発現が可能な条件下で発現させ、それによって組換えポリペプチドを生成させること、または、
(c)前記方法は更に、核酸を発現させる前に(a)の核酸で宿主細胞を形質転換し、それにより形質転換細胞において組換えポリペプチドを生成させることを含む、(a)または(b)の方法。
【請求項10】
以下を含む、エステラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする核酸の変種を作製する方法:
(a)請求項1記載の核酸を含む鋳型核酸を提供すること;および、
(b)前記鋳型配列における1以上のヌクレオチドを改変、欠失または付加、またはそれらの組合せにより、前記鋳型核酸の変種を作製すること;または、
(c)前記方法は、変種核酸を発現させて変種エステラーゼポリペプチドを生成させることを更に含む、(a)または(b)の方法。
【請求項11】
以下を含む、トリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を加水分解する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)トリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を含む組成物を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドがトリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を加水分解する条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させること。
【請求項12】
以下を含む、組成物からトリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を除去またはその量を低減する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)トリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を含む組成物を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドがトリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を除去またはその量を低減する条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させること。
【請求項13】
以下を含む、動物またはヒトによって消費されるに先立って、飼料または食物中あるいは飼料補助物または食物補助物中の油を加水分解する方法:
(a)油を含む飼料または食物材料を入手することであって、前記油はエステラーゼ活性を有するポリペプチドで加水分解され得、ここで前記ポリペプチドは請求項6記載のポリペプチドによってコードされるポリペプチドを含む、前記こと;および、
(b)前記油が加水分解され処理済食物または飼料が生成されるために十分な量で十分な時間、(a)のポリペプチドを前記飼料または食物材料に加え、それによって動物またはヒトが消費する前に前記食物または飼料中の油を加水分解すること。
【請求項14】
請求項6記載のポリペプチドを含む組成物。
【請求項15】
請求項6記載のポリペプチドの部分を有するペプチドを含む、または前記ペプチドからなるシグナルペプチド。
【請求項16】
(a)請求項15記載のシグナルペプチドを含む第一のドメインおよび少なくとも第二のドメインを含む、キメラタンパク質、
(b)融合タンパク質である、(a)のキメラタンパク質、または、
(c)第二のドメインは酵素を含む、(a)または(b)のキメラタンパク質。
【請求項17】
以下を含む、構造脂質を生体触媒合成する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)トリアシルグリセリド(TAG)を含む組成物を提供すること;
(c)トリアシルグリセリド(TAG)のSn2位にあるアシル残基をポリペプチドが加水分解する条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させ、それによって1,3-ジアシルグリセリド(DAG)を生成すること;
(d)R1エステルを提供すること;
(e)R1-特異的ヒドロラーゼまたはSn2-特異的リパーゼを提供すること;および、
(f)R1-特異的ヒドロラーゼまたはSn2-特異的リパーゼがSn2位のエステル化を触媒する条件下で(c)の1,3-DAGを(d)のR1エステルおよび(e)のR1-特異的ヒドロラーゼまたはSn2-特異的リパーゼと接触させ、それによって構造脂質を生成すること;または、
(g)構造脂質はココアバター代替物(CBA)、合成ココアバター、天然ココアバター、1,3-ジパルミトイル-2-オレオイルグリセロール(POP)、1,3-ジステアロイル-2-オレオイルグリセロール(SOS)、1-パルミトイル-2-オレオイル-3-ステアロイルグリセロール(POS)または1-オレオイル-2,3-ジミリストイルグリセロール(OMM)を含む、(a)から(f)の方法。
【請求項18】
以下を含む、構造脂質を生体触媒合成する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)トリアシルグリセリド(TAG)を含む組成物を提供すること;
(c)ポリペプチドがトリアシルグリセリド(TAG)のSn1位またはSn3位にあるアシル残基を加水分解する条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させ、それによって1,2-DAGまたは2,3-DAGを生成すること;および、
(d)動力学的に制御された条件下で(c)の1,2-DAGまたは2,3-DAGにおけるアシル移動を促進し、それによって1,3-DAGを生成すること。
【請求項19】
以下を含む、プロピオン酸のラセミエステルからプロピオン酸の1つの光学異性体を調製する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供することであって、前記ポリペプチドはプロピオン酸の1つの光学異性体に対する立体選択性を有する、前記こと;
(b)ラセミエステルを提供すること;
(c)エステルの加水分解を選択的に触媒することができる(a)のポリペプチドを(b)のラセミエステルと接触させ、それによってプロピオン酸の前記光学異性体を生成すること;または、
(d)プロピオン酸の光学異性体は2-(6-メトキシ-2-ナフチル)プロピオン酸のS(+)体を含み、そしてラセミエステルが2-(6-メトキシ-2-ナフチル)プロピオン酸のラセミ(R,S)エステルを含む、(a)から(c)の方法。
【請求項20】
以下を含む、2-置換酸のエステルのラセミ混合物を立体選択的に加水分解する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供することであって、前記ポリペプチドは立体選択的である、前記こと;
(b)2-置換酸のエステルのラセミ混合物を含む組成物を提供すること;および、
(c)(b)のポリペプチドが前記エステルを選択的に加水分解し得る条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させること;または、
(d)2-置換酸は、2-アリールオキシ置換酸、R-2-(4-ヒドロキシフェノキシ)プロピオン酸または2-アリールプロピオン酸を含み、または、2-置換酸はケトプロフェンを含む、(a)から(c)の方法。
【請求項21】
以下を含む、油または脂肪を改変する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)油または脂肪を提供すること;および、
(c)前記ヒドロラーゼが前記油または脂肪を改変し得る条件下で(a)のポリペプチドを(b)の油または脂肪と接触させること。
【請求項22】
以下を含む、ポリ不飽和脂肪酸(PUFA)エステルを加水分解する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)ポリ不飽和脂肪酸エステルを含む組成物を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドが前記ポリ不飽和脂肪酸(PUFA)を加水分解し得る条件下でポリペプチドを(b)の組成物と接触させること。
【請求項23】
以下を含む、脂肪酸エステルを加水分解する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)脂肪酸エステルの混合物を含む組成物を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドが前記脂肪酸エステルを加水分解し得る条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させること;または、
(d)脂肪酸エステルが、ポリ不飽和脂肪酸エステルまたは飽和脂肪酸エステルである、(a)から(c)の方法;または、
(e)脂肪酸エステルが、リノレン酸、リノール酸、オレイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸またはそれらの組み合わせを含む、(a)から(c)の方法。
【請求項24】
以下を含む、ポリ不飽和脂肪酸(PUFA)を含む食物または飼料、あるいは食物または飼料添加物を調製する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供することであって、前記ポリペプチドはポリ不飽和脂肪酸(PUFA)エステルを選択的に加水分解する、前記こと;
(b)PUFAエステルを含む組成物を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドが前記ポリ不飽和脂肪酸エステルの加水分解を選択的に触媒し得る条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させ、それによってPUFA-含有食物または飼料添加物を製造すること。
【請求項25】
以下を含む、繊維製品を処理する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供することであって、前記ポリペプチドはカルボキシルエステルを選択的に加水分解し得る、前記こと;
(b)繊維製品を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドがカルボキシルエステルを選択的に加水分解し得る条件下で前記繊維製品をポリペプチドで処理し、それによって繊維製品を処理すること。
【請求項26】
食物または油の汚れを除去またはその量を低減する方法であって、請求項6記載のポリペプチドを、前記ヒドロラーゼが汚れの中の油または脂肪を加水分解し得る条件下で、食物または油の汚れと接触させることを含む、前記方法。
【請求項27】
以下を含む、エステル交換反応を触媒して新たなトリグリセリドを生成する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)トリグリセリドと遊離脂肪酸の混合物を提供すること;
(c)前記ポリペプチドが遊離脂肪酸とトリグリセリドのアシル基との交換を触媒し得る条件下で(b)の組成物を(a)のポリペプチドで処理し、それによって付加脂肪酸のエンリッチされた新たなトリグリセリドを生成すること;または、
(d)ポリペプチドはSn1、Sn3-特異的リパーゼである、(a)から(c)の方法。
【請求項28】
以下を含む、食物、飼料または油を調製するためのエステル転移方法:
(a)ステアリン酸、低分子量一価アルコールのステアリン酸モノエステルおよびそれらの混合物からなる群より選択されるステアリン酸原料物質を含むエステル転移反応混合物を提供すること;
(b)トリアシルグリセリドを含む食物、飼料または油を提供すること;
(c)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(d)ステアリン酸原料物質およびトリアシルグリセリドをエステル転移して、反応混合物のグリセリド成分の1-、3-位にあるエステル基を非グリセリド脂肪酸成分と実質的に平衡化すること;および、
(e)エステル転移混合物のグリセリド成分からエステル転移化遊離脂肪酸成分を分離して、エステル転移化生成物と、食物、飼料または油から遊離された脂肪酸、脂肪酸モノエステルまたはそれらの混合物を含む脂肪酸混合物とを提供すること;または、
(f)前記脂肪酸混合物を水素添加することをさらに含む、(a)から(e)の方法。
【請求項29】
以下を含む、1-パルミトイル-3-ステアロイル-2-モノレイン(POSt)および1,3-ジステアロイル-2-モノレイン(StOSt)を含む組成物を製造する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチド(前記ポリペプチドは、1,3-ジパルミトイル-2-モノレイン(POP)とステアリン酸またはトリステアリンとの1,3-特異的リパーゼ-触媒エステル交換によって1-パルミトイル-3-ステアロイル-2-モノレイン(POSt)または1,3-ジステアロイル-2-モノレイン(StOSt)のエンリッチされた生成物を製造することが可能である)を提供し、
前記ポリペプチドをステアリン酸またはトリステアリンとともに1,3-ジパルミトイル-2-モノレイン(POP)と接触させること、または、
(b)ポリペプチドはSn1、Sn3-特異的リパーゼである、(a)の方法。
【請求項30】
請求項21記載の方法によって改変された油または脂肪。
【請求項31】
請求項9記載の方法により作製されたポリペプチド。
【請求項1】
(a)エステラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする核酸であって、配列番号:1、配列番号:3、配列番号:5、配列番号:7、配列番号:9、配列番号:11、配列番号:13、配列番号:15、配列番号:17、配列番号:19、配列番号:21、配列番号:23、配列番号:25、配列番号:27、配列番号:29、配列番号:31、配列番号:33、配列番号:35、配列番号:37、配列番号:39、配列番号:41、配列番号:43、配列番号:45、配列番号:47、配列番号:49、配列番号:51、配列番号:53、配列番号:55、配列番号:57、配列番号:59、配列番号:61、配列番号:63、配列番号:65、配列番号:67、配列番号:69、配列番号:71、配列番号:73、配列番号:75、配列番号:77、配列番号:79、配列番号:81、配列番号:83、配列番号:85、配列番号:87、配列番号:89、配列番号:91、配列番号:93、配列番号:95、配列番号:97、配列番号:99、配列番号:101、配列番号:103、配列番号:105、配列番号:107、配列番号:109、配列番号:111、配列番号:113、配列番号:115、配列番号:117、配列番号:119、配列番号:121、配列番号:123、配列番号:125、配列番号:127、配列番号:129、配列番号:131、配列番号:133、配列番号:135、配列番号:137、配列番号:139、配列番号:141、配列番号:143、配列番号:145、配列番号:147、配列番号:149、配列番号:151、配列番号:153、配列番号:155、配列番号:157、配列番号:159、配列番号:161、配列番号:163、配列番号:165、配列番号:167、配列番号:169、配列番号:171、配列番号:173、配列番号:175、配列番号:177、配列番号:179、配列番号:181、配列番号:183、配列番号:185、配列番号:187、配列番号:189、配列番号:191、配列番号:193、配列番号:195、配列番号:197、配列番号:199、配列番号:201、配列番号:203、配列番号:205、配列番号:207、配列番号:209、配列番号:211、配列番号:213、配列番号:215、配列番号:217、配列番号:219、配列番号:221、配列番号:223、配列番号:225、配列番号:227、配列番号:229、配列番号:231、配列番号:233、配列番号:235、配列番号:237、配列番号:239、配列番号:241、配列番号:243、配列番号:245、配列番号:247、配列番号:249、配列番号:251、配列番号:253、配列番号:255、配列番号:257、配列番号:259、配列番号:261、配列番号:263、配列番号:265、配列番号:267、配列番号:269、配列番号:271、配列番号:273、配列番号:275、配列番号:277、配列番号:279、配列番号:281、配列番号:283、配列番号:285、配列番号:287、配列番号:289、配列番号:291、配列番号:293、配列番号:295、配列番号:297、配列番号:299、配列番号:301、配列番号:303、配列番号:305、配列番号:307、配列番号:309、配列番号:311、配列番号:313、配列番号:315、配列番号:317、配列番号:319、配列番号:321、配列番号:323、配列番号:325、配列番号:327、配列番号:329、配列番号:331、配列番号:333、配列番号:335、配列番号:337、配列番号:339、配列番号:341、配列番号:343、配列番号:345、配列番号:347、配列番号:349、配列番号:351、配列番号:353、配列番号:355、配列番号:357、配列番号:359、配列番号:361、配列番号:363、配列番号:365、配列番号:367、配列番号:369、配列番号:371、配列番号:373、配列番号:375、配列番号:377、配列番号:379、配列番号:381、配列番号:383、配列番号:385、配列番号:387、配列番号:389、配列番号:391、配列番号:393、配列番号:395、配列番号:397、配列番号:399、配列番号:401、配列番号:403、配列番号:405、配列番号:407、配列番号:409、配列番号:411、配列番号:413、配列番号:415、配列番号:417、配列番号:419、配列番号:421、配列番号:423、配列番号:425、配列番号:427、配列番号:429、配列番号:431、配列番号:433、配列番号:435、配列番号:437、配列番号:439、配列番号:441、配列番号:443、配列番号:445、配列番号:447、配列番号:449、配列番号:451、配列番号:453、配列番号:455、配列番号:457、配列番号:459、配列番号:461、配列番号:463、配列番号:465、配列番号:467、配列番号:469、配列番号:471、配列番号:473、配列番号:475、配列番号:477、配列番号:479、配列番号:481、配列番号:483、配列番号:485、配列番号:487、配列番号:489、配列番号:491、配列番号:493、配列番号:495、配列番号:497、配列番号:499、配列番号:501、配列番号:503、配列番号:505、配列番号:507、配列番号:509、配列番号:511、配列番号:513、配列番号:515、配列番号:517、配列番号:519、配列番号:521、配列番号:523、配列番号:525、配列番号:527、配列番号:529、配列番号:531、配列番号:533、配列番号:535、配列番号:537、配列番号:539、配列番号:541、配列番号:543、配列番号:545、配列番号:547、配列番号:549、配列番号:551、配列番号:553、配列番号:555、配列番号:557、配列番号:559、配列番号:561、配列番号:563、配列番号:565、配列番号:567、配列番号:569、配列番号:571、配列番号:573、配列番号:575、配列番号:577、配列番号:579、配列番号:581、配列番号:583、配列番号:585、配列番号:587、配列番号:589、配列番号:591、配列番号:593、配列番号:595、配列番号:597、配列番号:599、配列番号:601、配列番号:603、配列番号:605、配列番号:607、配列番号:609、配列番号:611、配列番号:613、配列番号:615、配列番号:617、配列番号:619、配列番号:621、配列番号:623、配列番号:625、配列番号:627、配列番号:629、配列番号:631、配列番号:633、配列番号:635、配列番号:637、配列番号:639、配列番号:641、配列番号:643、配列番号:645、配列番号:647、配列番号:649、配列番号:651、配列番号:653、配列番号:655、配列番号:657、配列番号:659、配列番号:661、配列番号:663、配列番号:665、配列番号:667、配列番号:669、配列番号:671、配列番号:673、配列番号:675、配列番号:677、配列番号:679、配列番号:681、配列番号:683、配列番号:685、配列番号:687、配列番号:689、配列番号:691、配列番号:693、配列番号:695、配列番号:697、配列番号:699、配列番号:701、配列番号:703、配列番号:705、配列番号:707、配列番号:709、配列番号:711、配列番号:713、配列番号:715、配列番号:717、配列番号:719、配列番号:721、配列番号:723、配列番号:725、配列番号:727、配列番号:729、配列番号:731、配列番号:733、配列番号:735、配列番号:737、配列番号:739、配列番号:741、配列番号:743、配列番号:745、配列番号:747、配列番号:749、配列番号:751、配列番号:753、配列番号:755、配列番号:757、配列番号:759、配列番号:761、配列番号:763、配列番号:765、配列番号:767、配列番号:769、配列番号:771、配列番号:773、配列番号:775、配列番号:777、配列番号:779、配列番号:781、配列番号:783、配列番号:785、配列番号:787、配列番号:789、配列番号:791、配列番号:793、配列番号:795、配列番号:797、配列番号:799、配列番号:801、配列番号:803、配列番号:805、配列番号:807、配列番号:809、配列番号:811、配列番号:813、配列番号:815、配列番号:817、配列番号:819、配列番号:821、配列番号:823、配列番号:825、配列番号:827、配列番号:829、配列番号:831、配列番号:833、配列番号:835、配列番号:837、配列番号:839、配列番号:841、配列番号:843、配列番号:845、配列番号:847、配列番号:849、配列番号:851、配列番号:853、配列番号:855、配列番号:857、配列番号:859、配列番号:861、配列番号:863、配列番号:865、配列番号:867、配列番号:869、配列番号:871、配列番号:873、配列番号:875、配列番号:877、配列番号:879、配列番号:881、配列番号:883、配列番号:885、配列番号:887、配列番号:889、配列番号:891、配列番号:893、配列番号:895、配列番号:897、配列番号:899、配列番号:901、配列番号:903、配列番号:905、配列番号:907、配列番号:909、配列番号:911、配列番号:913、配列番号:915、配列番号:917、配列番号:919、配列番号:921、配列番号:925、配列番号:927、配列番号:929、配列番号:931、配列番号:933、配列番号:935、配列番号:937、配列番号:939、配列番号:941、配列番号:943、配列番号:945、配列番号:947、配列番号:949、配列番号:951、配列番号:953、配列番号:955、配列番号:957、配列番号:959、配列番号:961、配列番号:963、配列番号:965、配列番号:967、配列番号:969、配列番号:971、配列番号:973、配列番号:975、配列番号:977、配列番号:979、配列番号:981または配列番号:983の全長、またはエストラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列番号:1から配列番号:983の奇数番号の配列番号(配列番号:923を除く)の断片と、少なくとも70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%若しくはそれより高い、または100%の配列同一性を有する配列を有する前記核酸;
(b)配列番号:2から配列番号:984の偶数番号の配列番号(配列番号:924を除く)の配列を有するポリペプチドをコードする核酸;または、
(c)(a)または(b)と相補的な配列を含む核酸、
を含む、単離、合成または組換え核酸。
【請求項2】
請求項1記載の核酸を含む発現カセット、ベクターまたはクローニングビヒクル。
【請求項3】
請求項1記載の核酸または請求項2記載の発現カセット、ベクターまたはクローニングビヒクルを含む形質転換細胞。
【請求項4】
(a)請求項1記載の核酸を含む非ヒトトランスジェニック哺乳動物、または、
(b)マウス、ヤギ、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシまたはラットである、(a)の非ヒトトランスジェニック哺乳動物。
【請求項5】
(a)請求項1記載の核酸を含むトランスジェニック植物またはトランスジェニック種子、または、
(b)植物は、トウモロコシ、モロコシ、ジャガイモ、トマト、コムギ、油糧種子植物、ナタネ、ダイズ、イネ、オオムギ、草本、またはタバコであり、あるいは、種子は、イネ、トウモロコシ種子、コムギ核、油糧種子、ナタネ種子、ヤシ核、ヒマワリ種子、ゴマ種子、コメ、オオムギ、ラッカセイ、タバコ種子である、(a)のトランスジェニック植物またはトランスジェニック種子。
【請求項6】
(i)エストラーゼ活性を有し、かつ、配列番号:2、配列番号:4、配列番号:6、配列番号:8、配列番号:10、配列番号:12、配列番号:14、配列番号:16、配列番号:18、配列番号:20、配列番号:22、配列番号:24、配列番号:26、配列番号:28、配列番号:30、配列番号:32、配列番号:34、配列番号:36、配列番号:38、配列番号:40、配列番号:42、配列番号:44、配列番号:46、配列番号:48、配列番号:50、配列番号:52、配列番号:54、配列番号:56、配列番号:58、配列番号:60、配列番号:62、配列番号:64、配列番号:66、配列番号:68、配列番号:70、配列番号:72、配列番号:74、配列番号:76、配列番号:78、配列番号:80、配列番号:82、配列番号:84、配列番号:86、配列番号:88、配列番号:90、配列番号:92、配列番号:94、配列番号:96、配列番号:98、配列番号:100、配列番号:102、配列番号:104、配列番号:106、配列番号:108、配列番号:110、配列番号:112、配列番号:114、配列番号:116、配列番号:118、配列番号:120、配列番号:122、配列番号:124、配列番号:126、配列番号:128、配列番号:130、配列番号:132、配列番号:134、配列番号:136、配列番号:138、配列番号:140、配列番号:142、配列番号:143、配列番号:146、配列番号:148、配列番号:150、配列番号:152、配列番号:154、配列番号:156、配列番号:158、配列番号:160、配列番号:162、配列番号:164、配列番号:166、配列番号:168、配列番号:170、配列番号:172、配列番号:174、配列番号:176、配列番号:178、配列番号:180、配列番号:182、配列番号:184、配列番号:186、配列番号:188、配列番号:190、配列番号:192、配列番号:194、配列番号:196、配列番号:198、配列番号:200、配列番号:202、配列番号:204、配列番号:206、配列番号:208、配列番号:210、配列番号:212、配列番号:214、配列番号:216、配列番号:218、配列番号:220、配列番号:222、配列番号:224、配列番号:226、配列番号:228、配列番号:230、配列番号:232、配列番号:234、配列番号:236、配列番号:238、配列番号:240、配列番号:242、配列番号:244、配列番号:246、配列番号:248、配列番号:250、配列番号:252、配列番号:254、配列番号:256、配列番号:258、配列番号:260、配列番号:262、配列番号:264、配列番号:266、配列番号:268、配列番号:270、配列番号:272、配列番号:274、配列番号:276、配列番号:278、配列番号:280、配列番号:282、配列番号:284、配列番号:286、配列番号:288、配列番号:290、配列番号:292、配列番号:294、配列番号:296、配列番号:298、配列番号:300、配列番号:302、配列番号:304、配列番号:306、配列番号:308、配列番号:310、配列番号:312、配列番号:314、配列番号:316、配列番号:318、配列番号:320、配列番号:322、配列番号:324、配列番号:326、配列番号:328、配列番号:330、配列番号:332、配列番号:334、配列番号:336、配列番号:338、配列番号:340、配列番号:342、配列番号:344、配列番号:346、配列番号:348、配列番号:350、配列番号:352、配列番号:354、配列番号:356、配列番号:358、配列番号:360、配列番号:362、配列番号:364、配列番号:366、配列番号:368、配列番号:370、配列番号:372、配列番号:374、配列番号:376、配列番号:378、配列番号:380、配列番号:382、配列番号:384、配列番号:386、配列番号:388、配列番号:390、配列番号:392、配列番号:394、配列番号:396、配列番号:398、配列番号:400、配列番号:402、配列番号:404、配列番号:406、配列番号:408、配列番号:410、配列番号:412、配列番号:414、配列番号:416、配列番号:418、配列番号:420、配列番号:422、配列番号:424、配列番号:426、配列番号:428、配列番号:430、配列番号:432、配列番号:434、配列番号:436、配列番号:438、配列番号:440、配列番号:442、配列番号:444、配列番号:446、配列番号:448、配列番号:450、配列番号:452、配列番号:454、配列番号:456、配列番号:458、配列番号:460、配列番号:462、配列番号:464、配列番号:466、配列番号:468、配列番号:470、配列番号:472、配列番号:474、配列番号:476、配列番号:478、配列番号:480、配列番号:482、配列番号:484、配列番号:486、配列番号:488、配列番号:490、配列番号:492、配列番号:494、配列番号:496、配列番号:498、配列番号:500、配列番号:502、配列番号:504、配列番号:506、配列番号:508、配列番号:510、配列番号:512、配列番号:514、配列番号:516、配列番号:518、配列番号:520、配列番号:522、配列番号:524、配列番号:526、配列番号:528、配列番号:530、配列番号:532、配列番号:534、配列番号:536、配列番号:538、配列番号:540、配列番号:542、配列番号:544、配列番号:546、配列番号:548、配列番号:550、配列番号:552、配列番号:554、配列番号:556、配列番号:558、配列番号:560、配列番号:562、配列番号:564、配列番号:566、配列番号:568、配列番号:570、配列番号:572、配列番号:574、配列番号:576、配列番号:578、配列番号:580、配列番号:582、配列番号:584、配列番号:586、配列番号:588、配列番号:590、配列番号:592、配列番号:594、配列番号:596、配列番号:598、配列番号:600、配列番号:602、配列番号:604、配列番号:606、配列番号:608、配列番号:610、配列番号:612、配列番号:614、配列番号:616、配列番号:618、配列番号:620、配列番号:622、配列番号:624、配列番号:626、配列番号:628、配列番号:630、配列番号:632、配列番号:634、配列番号:636、配列番号:638、配列番号:640、配列番号:642、配列番号:644、配列番号:646、配列番号:648、配列番号:650、配列番号:652、配列番号:654、配列番号:656、配列番号:658、配列番号:660、配列番号:662、配列番号:664、配列番号:666、配列番号:668、配列番号:670、配列番号:672、配列番号:674、配列番号:676、配列番号:678、配列番号:680、配列番号:682、配列番号:684、配列番号:686、配列番号:688、配列番号:690、配列番号:692、配列番号:694、配列番号:696、配列番号:698、配列番号:700、配列番号:702、配列番号:704、配列番号:706、配列番号:708、配列番号:710、配列番号:712、配列番号:714、配列番号:716、配列番号:718、配列番号:720、配列番号:722、配列番号:724、配列番号:726、配列番号:728、配列番号:730、配列番号:732、配列番号:734、配列番号:736、配列番号:738、配列番号:740、配列番号:742、配列番号:744、配列番号:746、配列番号:748、配列番号:750、配列番号:752、配列番号:754、配列番号:756、配列番号:758、配列番号:760、配列番号:762、配列番号:764、配列番号:766、配列番号:768、配列番号:770、配列番号:772、配列番号:774、配列番号:776、配列番号:778、配列番号:780、配列番号:782、配列番号:784、配列番号:786、配列番号:788、配列番号:790、配列番号:792、配列番号:794、配列番号:796、配列番号:798、配列番号:800、配列番号:802、配列番号:804、配列番号:808、配列番号:808、配列番号:810、配列番号:812、配列番号:814、配列番号:816、配列番号:818、配列番号:820、配列番号:822、配列番号:824、配列番号:826、配列番号:828、配列番号:830、配列番号:832、配列番号:834、配列番号:836、配列番号:838、配列番号:840、配列番号:842、配列番号:844、配列番号:846、配列番号:848、配列番号:850、配列番号:852、配列番号:854、配列番号:856、配列番号:858、配列番号:860、配列番号:862、配列番号:864、配列番号:866、配列番号:868、配列番号:870、配列番号:872、配列番号:874、配列番号:876、配列番号:878、配列番号:880、配列番号:882、配列番号:884、配列番号:886、配列番号:888、配列番号:890、配列番号:892、配列番号:894、配列番号:896、配列番号:898、配列番号:900、配列番号:902、配列番号:904、配列番号:906、配列番号:908、配列番号:910、配列番号:912、配列番号:914、配列番号:916、配列番号:918、配列番号:920、配列番号:922、配列番号:926、配列番号:928、配列番号:930、配列番号:932、配列番号:934、配列番号:936、配列番号:938、配列番号:940、配列番号:942、配列番号:944、配列番号:946、配列番号:948、配列番号:950、配列番号:952、配列番号:954、配列番号:956、配列番号:958、配列番号:960、配列番号:962、配列番号:964、配列番号:966、配列番号:968、配列番号:970、配列番号:972、配列番号:974、配列番号:976、配列番号:978、配列番号:980、配列番号:982または配列番号:984、またはエストラーゼ活性を有する配列番号:2から配列番号:984の偶数番号の配列番号(配列番号:924を除く)の断片と、少なくとも70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%またはそれより高い、または100%の配列同一性を有する;または、
(ii)請求項1記載の核酸によってコードされる;
単離、合成または組換えポリペプチド;または、
(iii)グリコシル化されているか、または、少なくとも一つのグリコシル化部位を含む、(i)または(ii)の単離、合成または組換えポリペプチド。
【請求項7】
(a)請求項6記載のポリペプチドを含む固定化ポリペプチド、または、
(b)細胞上、金属上、樹脂上、ポリマー上、セラミック上、ガラス上、微小電極上、グラファイト粒子上、ビーズ上、ゲル上、プレート上、アレイ上、またはキャピラリー管上に固定化されている、(a)の固定化ポリペプチド。
【請求項8】
請求項6記載のポリペプチドに特異的に結合する単離、合成または組換え抗体。
【請求項9】
以下を含む、組換えポリペプチドを製造する方法:
(a)請求項1記載の核酸を提供すること;および、
(b)(a)の核酸を、ポリペプチドの発現が可能な条件下で発現させ、それによって組換えポリペプチドを生成させること、または、
(c)前記方法は更に、核酸を発現させる前に(a)の核酸で宿主細胞を形質転換し、それにより形質転換細胞において組換えポリペプチドを生成させることを含む、(a)または(b)の方法。
【請求項10】
以下を含む、エステラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする核酸の変種を作製する方法:
(a)請求項1記載の核酸を含む鋳型核酸を提供すること;および、
(b)前記鋳型配列における1以上のヌクレオチドを改変、欠失または付加、またはそれらの組合せにより、前記鋳型核酸の変種を作製すること;または、
(c)前記方法は、変種核酸を発現させて変種エステラーゼポリペプチドを生成させることを更に含む、(a)または(b)の方法。
【請求項11】
以下を含む、トリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を加水分解する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)トリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を含む組成物を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドがトリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を加水分解する条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させること。
【請求項12】
以下を含む、組成物からトリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を除去またはその量を低減する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)トリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を含む組成物を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドがトリアシルグリセロール(TAG)、ジアシルグリセロール(DAG)またはモノアシルグリセロール(MAG)を除去またはその量を低減する条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させること。
【請求項13】
以下を含む、動物またはヒトによって消費されるに先立って、飼料または食物中あるいは飼料補助物または食物補助物中の油を加水分解する方法:
(a)油を含む飼料または食物材料を入手することであって、前記油はエステラーゼ活性を有するポリペプチドで加水分解され得、ここで前記ポリペプチドは請求項6記載のポリペプチドによってコードされるポリペプチドを含む、前記こと;および、
(b)前記油が加水分解され処理済食物または飼料が生成されるために十分な量で十分な時間、(a)のポリペプチドを前記飼料または食物材料に加え、それによって動物またはヒトが消費する前に前記食物または飼料中の油を加水分解すること。
【請求項14】
請求項6記載のポリペプチドを含む組成物。
【請求項15】
請求項6記載のポリペプチドの部分を有するペプチドを含む、または前記ペプチドからなるシグナルペプチド。
【請求項16】
(a)請求項15記載のシグナルペプチドを含む第一のドメインおよび少なくとも第二のドメインを含む、キメラタンパク質、
(b)融合タンパク質である、(a)のキメラタンパク質、または、
(c)第二のドメインは酵素を含む、(a)または(b)のキメラタンパク質。
【請求項17】
以下を含む、構造脂質を生体触媒合成する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)トリアシルグリセリド(TAG)を含む組成物を提供すること;
(c)トリアシルグリセリド(TAG)のSn2位にあるアシル残基をポリペプチドが加水分解する条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させ、それによって1,3-ジアシルグリセリド(DAG)を生成すること;
(d)R1エステルを提供すること;
(e)R1-特異的ヒドロラーゼまたはSn2-特異的リパーゼを提供すること;および、
(f)R1-特異的ヒドロラーゼまたはSn2-特異的リパーゼがSn2位のエステル化を触媒する条件下で(c)の1,3-DAGを(d)のR1エステルおよび(e)のR1-特異的ヒドロラーゼまたはSn2-特異的リパーゼと接触させ、それによって構造脂質を生成すること;または、
(g)構造脂質はココアバター代替物(CBA)、合成ココアバター、天然ココアバター、1,3-ジパルミトイル-2-オレオイルグリセロール(POP)、1,3-ジステアロイル-2-オレオイルグリセロール(SOS)、1-パルミトイル-2-オレオイル-3-ステアロイルグリセロール(POS)または1-オレオイル-2,3-ジミリストイルグリセロール(OMM)を含む、(a)から(f)の方法。
【請求項18】
以下を含む、構造脂質を生体触媒合成する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)トリアシルグリセリド(TAG)を含む組成物を提供すること;
(c)ポリペプチドがトリアシルグリセリド(TAG)のSn1位またはSn3位にあるアシル残基を加水分解する条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させ、それによって1,2-DAGまたは2,3-DAGを生成すること;および、
(d)動力学的に制御された条件下で(c)の1,2-DAGまたは2,3-DAGにおけるアシル移動を促進し、それによって1,3-DAGを生成すること。
【請求項19】
以下を含む、プロピオン酸のラセミエステルからプロピオン酸の1つの光学異性体を調製する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供することであって、前記ポリペプチドはプロピオン酸の1つの光学異性体に対する立体選択性を有する、前記こと;
(b)ラセミエステルを提供すること;
(c)エステルの加水分解を選択的に触媒することができる(a)のポリペプチドを(b)のラセミエステルと接触させ、それによってプロピオン酸の前記光学異性体を生成すること;または、
(d)プロピオン酸の光学異性体は2-(6-メトキシ-2-ナフチル)プロピオン酸のS(+)体を含み、そしてラセミエステルが2-(6-メトキシ-2-ナフチル)プロピオン酸のラセミ(R,S)エステルを含む、(a)から(c)の方法。
【請求項20】
以下を含む、2-置換酸のエステルのラセミ混合物を立体選択的に加水分解する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供することであって、前記ポリペプチドは立体選択的である、前記こと;
(b)2-置換酸のエステルのラセミ混合物を含む組成物を提供すること;および、
(c)(b)のポリペプチドが前記エステルを選択的に加水分解し得る条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させること;または、
(d)2-置換酸は、2-アリールオキシ置換酸、R-2-(4-ヒドロキシフェノキシ)プロピオン酸または2-アリールプロピオン酸を含み、または、2-置換酸はケトプロフェンを含む、(a)から(c)の方法。
【請求項21】
以下を含む、油または脂肪を改変する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)油または脂肪を提供すること;および、
(c)前記ヒドロラーゼが前記油または脂肪を改変し得る条件下で(a)のポリペプチドを(b)の油または脂肪と接触させること。
【請求項22】
以下を含む、ポリ不飽和脂肪酸(PUFA)エステルを加水分解する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)ポリ不飽和脂肪酸エステルを含む組成物を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドが前記ポリ不飽和脂肪酸(PUFA)を加水分解し得る条件下でポリペプチドを(b)の組成物と接触させること。
【請求項23】
以下を含む、脂肪酸エステルを加水分解する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)脂肪酸エステルの混合物を含む組成物を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドが前記脂肪酸エステルを加水分解し得る条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させること;または、
(d)脂肪酸エステルが、ポリ不飽和脂肪酸エステルまたは飽和脂肪酸エステルである、(a)から(c)の方法;または、
(e)脂肪酸エステルが、リノレン酸、リノール酸、オレイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸またはそれらの組み合わせを含む、(a)から(c)の方法。
【請求項24】
以下を含む、ポリ不飽和脂肪酸(PUFA)を含む食物または飼料、あるいは食物または飼料添加物を調製する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供することであって、前記ポリペプチドはポリ不飽和脂肪酸(PUFA)エステルを選択的に加水分解する、前記こと;
(b)PUFAエステルを含む組成物を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドが前記ポリ不飽和脂肪酸エステルの加水分解を選択的に触媒し得る条件下で(a)のポリペプチドを(b)の組成物と接触させ、それによってPUFA-含有食物または飼料添加物を製造すること。
【請求項25】
以下を含む、繊維製品を処理する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供することであって、前記ポリペプチドはカルボキシルエステルを選択的に加水分解し得る、前記こと;
(b)繊維製品を提供すること;および、
(c)前記ポリペプチドがカルボキシルエステルを選択的に加水分解し得る条件下で前記繊維製品をポリペプチドで処理し、それによって繊維製品を処理すること。
【請求項26】
食物または油の汚れを除去またはその量を低減する方法であって、請求項6記載のポリペプチドを、前記ヒドロラーゼが汚れの中の油または脂肪を加水分解し得る条件下で、食物または油の汚れと接触させることを含む、前記方法。
【請求項27】
以下を含む、エステル交換反応を触媒して新たなトリグリセリドを生成する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(b)トリグリセリドと遊離脂肪酸の混合物を提供すること;
(c)前記ポリペプチドが遊離脂肪酸とトリグリセリドのアシル基との交換を触媒し得る条件下で(b)の組成物を(a)のポリペプチドで処理し、それによって付加脂肪酸のエンリッチされた新たなトリグリセリドを生成すること;または、
(d)ポリペプチドはSn1、Sn3-特異的リパーゼである、(a)から(c)の方法。
【請求項28】
以下を含む、食物、飼料または油を調製するためのエステル転移方法:
(a)ステアリン酸、低分子量一価アルコールのステアリン酸モノエステルおよびそれらの混合物からなる群より選択されるステアリン酸原料物質を含むエステル転移反応混合物を提供すること;
(b)トリアシルグリセリドを含む食物、飼料または油を提供すること;
(c)請求項6記載のポリペプチドを提供すること;
(d)ステアリン酸原料物質およびトリアシルグリセリドをエステル転移して、反応混合物のグリセリド成分の1-、3-位にあるエステル基を非グリセリド脂肪酸成分と実質的に平衡化すること;および、
(e)エステル転移混合物のグリセリド成分からエステル転移化遊離脂肪酸成分を分離して、エステル転移化生成物と、食物、飼料または油から遊離された脂肪酸、脂肪酸モノエステルまたはそれらの混合物を含む脂肪酸混合物とを提供すること;または、
(f)前記脂肪酸混合物を水素添加することをさらに含む、(a)から(e)の方法。
【請求項29】
以下を含む、1-パルミトイル-3-ステアロイル-2-モノレイン(POSt)および1,3-ジステアロイル-2-モノレイン(StOSt)を含む組成物を製造する方法:
(a)請求項6記載のポリペプチド(前記ポリペプチドは、1,3-ジパルミトイル-2-モノレイン(POP)とステアリン酸またはトリステアリンとの1,3-特異的リパーゼ-触媒エステル交換によって1-パルミトイル-3-ステアロイル-2-モノレイン(POSt)または1,3-ジステアロイル-2-モノレイン(StOSt)のエンリッチされた生成物を製造することが可能である)を提供し、
前記ポリペプチドをステアリン酸またはトリステアリンとともに1,3-ジパルミトイル-2-モノレイン(POP)と接触させること、または、
(b)ポリペプチドはSn1、Sn3-特異的リパーゼである、(a)の方法。
【請求項30】
請求項21記載の方法によって改変された油または脂肪。
【請求項31】
請求項9記載の方法により作製されたポリペプチド。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27】
【図28】
【図29】
【図30A】
【図30B】
【図30C】
【図30D】
【図30E】
【図30F】
【図30G】
【図30H】
【図30I】
【図30J】
【図30K】
【図30L】
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【図30O】
【図30P】
【図30Q】
【図30R】
【図30S】
【図30T】
【図30U】
【図30V】
【図30W】
【図30X】
【図30Y】
【図30Z】
【図30AA】
【図30BB】
【図30CC】
【図30DD】
【図30EE】
【図30FF】
【図30GG】
【図30HH】
【図30II】
【図30JJ】
【図30KK】
【図30LL】
【図30MM】
【図30NN】
【図30OO】
【図30PP】
【図30QQ】
【図30RR】
【図30SS】
【図30TT】
【図30UU】
【図30VV】
【図30WW】
【図30XX】
【図30YY】
【図30ZZ】
【図30AAA】
【図30BBB】
【図30CCC】
【図30DDD】
【図30EEE】
【図30FFF】
【図30GGG】
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【図30III】
【図30JJJ】
【図30KKK】
【図30LLL】
【図30MMM】
【図30NNN】
【図30OOO】
【図30PPP】
【図30QQQ】
【図30RRR】
【図30SSS】
【図30TTT】
【図30UUU】
【図30VVV】
【図30WWW】
【図30XXX】
【図30YYY】
【図30ZZZ】
【図30AAAA】
【図30BBBB】
【図30CCCC】
【図30DDDD】
【図30EEEE】
【図30FFFF】
【図30GGGG】
【図30HHHH】
【図30IIII】
【図30JJJJ】
【図30KKKK】
【図30LLLL】
【図30MMMM】
【図30NNNN】
【図30OOOO】
【図30PPPP】
【図30QQQQ】
【図30RRRR】
【図30SSSS】
【図30TTTT】
【図30UUUU】
【図30VVVV】
【図30WWWW】
【図30XXXX】
【図30YYYY】
【図30ZZZZ】
【図30AAAAA】
【図30BBBBB】
【図30CCCCC】
【図30DDDDD】
【図31】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
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【図20】
【図21】
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【図30AAAAA】
【図30BBBBB】
【図30CCCCC】
【図30DDDDD】
【図31】
【公開番号】特開2010−284168(P2010−284168A)
【公開日】平成22年12月24日(2010.12.24)
【国際特許分類】
【出願番号】特願2010−171845(P2010−171845)
【出願日】平成22年7月30日(2010.7.30)
【分割の表示】特願2006−509241(P2006−509241)の分割
【原出願日】平成16年3月8日(2004.3.8)
【出願人】(503089489)ヴェレニウム コーポレイション (31)
【Fターム(参考)】
【公開日】平成22年12月24日(2010.12.24)
【国際特許分類】
【出願日】平成22年7月30日(2010.7.30)
【分割の表示】特願2006−509241(P2006−509241)の分割
【原出願日】平成16年3月8日(2004.3.8)
【出願人】(503089489)ヴェレニウム コーポレイション (31)
【Fターム(参考)】
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