【課題】核酸リガンドの生物活性は、インビボにおいて所望の生物学的作用を生むように制御（すなわち促進または阻害）する方法の提供。
【解決手段】核酸リガンドの投与を受ける患者に該核酸リガンドに結合するモジュレータを投与することを含み、該投与は、該モジュレータが該核酸リガンドに結合すると標的分子に対する該核酸リガンドのアフィニティーが変化するような条件下で行う、患者における標的分子に対する核酸リガンドのアフィニティーを変化させる方法。該モジュレータは、患者の病状の進行、および最適な治療をいかに達成するかという医師の判断などさまざまな要因に基づき、必要に応じてリアルタイムで投与することができ、核酸リガンド療法の治療単位において制御可能な治療法である。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
核酸リガンドの投与を受ける患者に該核酸リガンドに結合するモジュレータを投与することを含み、該投与は、該モジュレータが該核酸リガンドに結合すると標的分子に対する該核酸リガンドのアフィニティーが変化するような条件下で行う、患者における標的分子に対する核酸リガンドのアフィニティーを変化させる方法。
【請求項２】
該モジュレータが該核酸リガンドに結合すると、該標的分子に対する該核酸リガンドのアフィニティーが低下する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
該モジュレータが該核酸リガンドに結合すると、該標的分子に対する該核酸リガンドのアフィニティーが上昇する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
該モジュレータが、該患者の体内に存在する遊離の核酸リガンドに結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
該モジュレータが、該患者の体内で該標的分子に結合して存在する核酸リガンドに結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
該モジュレータが、該核酸リガンド、核酸結合性のペプチド、ポリペプチドもしくはタンパク質、または核酸結合性オリゴサッカライドに相補的なオリゴヌクレオチドである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
該モジュレータが該オリゴヌクレオチドである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
該オリゴヌクレオチドが、該核酸リガンドの６から２５ヌクレオチドに相補的な配列を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
該オリゴヌクレオチドが、該核酸リガンドの８から２０ヌクレオチドに相補的な配列を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
該オリゴヌクレオチドが、該核酸リガンドの１０から１５ヌクレオチドに相補的な配列を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
該オリゴヌクレオチドが５から８０ヌクレオチドを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
該オリゴヌクレオチドが１０から３０ヌクレオチドを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
該オリゴヌクレオチドが１５から２０ヌクレオチドを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
該オリゴヌクレオチドが化学置換を有する、請求項７に記載の方法。
【請求項１５】
該オリゴヌクレオチドが、第５位で置換されたピリミジン基、または２’位で置換された糖を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
該オリゴヌクレオチドが２’−アミノ基、２’−フルオロ基、または２’−Ｏ−メチル基の置換を含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
該オリゴヌクレオチドがロックド核酸（ｌｏｃｋｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１８】
該オリゴヌクレオチドが、該核酸リガンドの一本鎖領域に相補的である、請求項７に記載の方法。
【請求項１９】
該オリゴヌクレオチドが、該核酸リガンドの一本鎖領域、および該核酸リガンドの二本鎖領域に相補的である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
該核酸リガンドが一本鎖の末端部を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項２１】
該オリゴヌクレオチドが、該核酸リガンドの該一本鎖末端部に相補的である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
該核酸リガンドおよび該オリゴヌクレオチドがＤ−ヌクレオチドを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項２３】
該オリゴヌクレオチドをコードする配列を含むコンストラクトを患者に投与した後に、該患者の中で該オリゴヌクレオチドが産生される、請求項７に記載の方法。
【請求項２４】
該核酸リガンドがフィブリン沈着またはフィブリン溶解を阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
該核酸リガンドが抗血液凝固性または抗血栓性の核酸リガンドである、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
該モジュレータが、該核酸リガンドの抗血液凝固性または抗血栓性の作用を逆転させる、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
該標的分子が、組織因子（ＴＦ）／第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）、第ＶＩＩＩａ因子（ＦＶＩＩＩａ）／第ＩＸａ因子（ＦＩＸａ）、第Ｖａ因子（ＦＶａ）／第Ｘａ因子（ＦＸａ）などの酵素複合体、ｇｐＩＩｂＩＩＩａ、ｇｐＩｂＩＸ、ｇｐＶＩ、Ｇａｓ６、ＰＡＩ−Ｉ（プラスミノゲン活性化因子）、凝固因子ＸＩＩＩａ（ＦＸＩＩＩａ）、ＡＴＩＩＩ（抗トロンビンＩＩＩ）、トロンビン、または凝固因子ＸＩａ（ＦＸＩａ）である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
該患者が感染症に罹りやすく、インターロイキンに結合する核酸リガンドの投与を受けており、該モジュレータが、インターロイキンに対する該核酸リガンドのアフィニティーを低下させ、それによって該核酸リガンドの免疫抑制作用を逆転させる、請求項１に記載の方法。
【請求項２９】
該モジュレータが該核酸リガンドに相補的なオリゴヌクレオチドである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
該患者が自己免疫を発症する危険をもち、ＣＴＬＡ４に結合する核酸リガンドの投与を受けており、該モジュレータが、ＣＴＬＡ４に対する該核酸リガンドのアフィニティーを低下させ、それによって該核酸リガンドの免疫促進作用を逆転させる、請求項１に記載の方法。
【請求項３１】
該モジュレータが該核酸リガンドに相補的なオリゴヌクレオチドである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
該患者が腫瘍を有し、成長因子に結合する核酸リガンドの投与を受けており、該モジュレータが、該成長因子に対する該核酸リガンドのアフィニティーを低下させ、それによって該患者の正常組織に対する該核酸リガンドの有害作用を逆転させる、請求項１に記載の方法。
【請求項３３】
該モジュレータが該核酸リガンドに相補的なオリゴヌクレオチドである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
該患者が、グルコースに結合する核酸リガンドの投与を受けており、該モジュレータが、グルコースに対する該核酸リガンドのアフィニティーを低下させ、それによって該患者の低血糖症を回避する、請求項１に記載の方法。
【請求項３５】
該モジュレータが該核酸リガンドに相補的なオリゴヌクレオチドである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
該患者が、骨格筋の神経筋接合部または自律神経節における神経インパルスの伝達に関与するレセプターに結合し、それによって神経筋作用を遮断する核酸リガンドの投与を受けており、また、該モジュレータが、該レセプターに対する該核酸リガンドのアフィニティーを低下させ、それによって該核酸リガンドの神経筋遮断作用を逆転させる、請求項１に記載の方法。
【請求項３７】
該モジュレータが該核酸リガンドに相補的なオリゴヌクレオチドである、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
該核酸リガンドがＥ２Ｆファミリーの成員に結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項３９】
核酸リガンドの投与を受けている患者に、標的組織に対する該核酸リガンドの結合を阻害するモジュレータを投与することを含む、標的組織に対する標識を有する核酸リガンドの結合を逆転させる方法。
【請求項４０】
該モジュレータが該核酸リガンドに相補的なオリゴヌクレオチドである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
該標識が細胞毒性標識である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
該標識が放射性標識である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４３】
該標識が検出可能な標識である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４４】
該患者がヒトである、請求項１または３９に記載の方法。
【請求項４５】
該患者がヒト以外の哺乳動物である、請求項１または３９に記載の方法。
【請求項４６】
核酸リガンドが標的分子に結合しやすい条件下、テスト化合物の存在および不在下で該核酸リガンドを該標的分子に接触させること、および、該テスト化合物が、該核酸リガンドの該標的分子への結合を促進するか、阻害するかを決定することを含む、テスト化合物について、標的分子に対する核酸リガンドのアフィニティーを変えることができる能力をスクリーニングする方法。
【請求項４７】
テスト化合物を核酸リガンドに接触させること、および、テスト化合物が該核酸リガンドに結合するか否かを判定することを含み、核酸リガンドに結合するテスト化合物が該核酸リガンド活性の有望なモジュレータである、テスト化合物が核酸リガンド活性の有望なモジュレータかどうかをスクリーニングする方法。
【請求項４８】
核酸リガンドを、核酸リガンドに結合するモジュレータと接触させることを含み、該モジュレータが該核酸リガンドに結合することによって、トロンビンでない標的分子に対する該核酸リガンドのアフィニティーを変えるような条件下で該接触を行う、インビトロにおいて標的分子に対する核酸リガンドのアフィニティーを変える方法。
【請求項４９】
該モジュレータが該核酸リガンドに相補的なオリゴヌクレオチドである、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
配列番号２０、２１、２２、２５から３６、３８、３９、４０もしくは４１に示された配列、または、それらと９５％以上の配列相同性を有するオリゴヌクレオチド。
【請求項５１】
請求項５０に記載のオリゴヌクレオチド、および担体を含む組成物。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図５Ｃ】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図７】

【図８】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１０Ｃ】

【図１１】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１３Ａ】

【図１３Ｂ】

【図１４Ａ】

【図１４Ｂ】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８Ａ】

【図１８Ｂ】

【図１９Ａ】

【図１９Ｂ】

【図２０】

【図２１Ａ】

【図２１Ｂ】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６Ａ】

【図２６Ｂ】

【公開番号】特開２００９−１８５０３５（Ｐ２００９−１８５０３５Ａ）
【公開日】平成２１年８月２０日（２００９．８．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−６８０５５（Ｐ２００９−６８０５５）
【出願日】平成２１年３月１９日（２００９．３．１９）
【分割の表示】特願２００３−５００１０５（Ｐ２００３−５００１０５）の分割
【原出願日】平成１４年５月２８日（２００２．５．２８）
【出願人】（５０２３４７０８７）デューク・ユニバーシティ (19)
【氏名又は名称原語表記】ＤＵＫＥ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
【Ｆターム（参考）】