本発明は、生物細胞または試験化合物（chemicals）からの少量の液体試料での翻訳後修飾活性を定性的に検出する方法に関する。リン酸化酵素および脱リン酸化酵素によるタンパク質のリン酸化／脱リン酸化は、翻訳後修飾の例である。本方法は、タンパク質フラグメントまたはポリペプチドがセンサーとして合成されることを特徴とする。上記は、荷電アミノ酸基および１つまたは複数の修飾基（Ｘ）を有する認識部位を含む部分（１）および部分（２）を含む。センサーは、特別な静電電位分布および双極子モーメントを有する。酵素を加えると、分子静電電位分布のシフトおよび双極子モーメントの変化が伴うセンサーの修飾が生じる。電位シフトは翻訳後修飾活性の決定要因（determinator）である。本方法の実際に実行するためのいくつかの装置システムが開示される。本方法は、特に、生物学的多重検出システム（バイオチップおよび高スループットスクリーニング）に適した、各種の翻訳後活性を検出する、迅速で、高感度、かつ効率的な方法を提供し、そして特に医薬品開発、医療診断、基礎研究、および環境保護に応用を見いだす。
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式Ｉにより表されるピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン誘導体及びその薬学的に許容される塩は、優れたキナーゼ阻害活性を示す。したがって、前記化合物を有効成分として含有する薬剤は、炎症性疾患、自己免疫性疾患、破壊性骨障害、癌及び／又は腫瘍増殖など、キナーゼとの関連が確認されているプロテインキナーゼ媒介障害の治療薬又は予防薬として有用と期待される。

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本発明は、被験体にインビボで投与される場合、生物学的標的のインヒビターである化合物（「試験化合物」）が目的の生物学的コンパートメントにおいて生物学的標的を阻害する能力を評価する方法を提供する。被験体の細胞において試験化合物が生物学的標的を不活性化する能力を測定する方法であって、以下の工程：（ａ）試験化合物を被験体に投与して、試験化合物と反応する、被験体の身体中の生物学的標的が不活性化され、試験化合物と反応しない生物学的標的は遊離のままである、工程；（ｂ）１つ以上の細胞種を含む生物学的サンプルを被験体から除去する工程；（ｃ）生物学的サンプル又はそれらのフラクション内の遊離の生物学的標的の量を決定する工程；及び（ｄ）工程（ｃ）において決定される量とコントロールサンプル中の遊離の生物学的標的の量とを比較する工程を含む、方法。 （もっと読む）

本発明は、異種移植片として宿主に導入することが企図されている細胞を組み換えるもしくは操作する方法を提供するが、細胞の組み換えもしくは操作は少なくとも１つの適切なレポーター系の含有物を含む。レポーター系の含有物は、適切かつ便宜的な測定システムを通しての異種移植片のモニタリングおよび当該の異種移植パラメーターの決定を許容する。 （もっと読む）

本発明は、細胞表面膜受容体の二量体を含む、患者試料中の新しい種類のバイオマーカーを対象とする。一態様では、本発明は、患者試料、特に固定組織試料において直接測定した１種またはそれ以上の細胞表面膜受容体二量体の量と、疾患状態または健康状態を相関させることによって、そのような状態の状況を判定する方法を含む。他の態様では、本発明は、検体の細胞における１種またはそれ以上の細胞表面膜受容体二量体の量の測定値を、前癌状態の有無、癌性状態の有無、癌の予後、または治療に対する応答性を含めた癌の状態と相関させることによって、個人由来の検体において癌の状態を判定する方法を含む。好ましくは、１種またはそれ以上の種類の受容体二量体の複数の成分に特異的である遊離可能な分子タグを有する結合性化合物のセットを使用することによって、本発明の方法を実施する。結合後、分子タグを遊離させ、アッセイ混合物からそれを分離して分析する。
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本発明は、心室リモデリングにおける心機能低下や心不全の開始を抑制できる心不全の予防および治療の少なくとも一方のための医薬、および、そのスクリーニング方法を提供する。本発明の心不全の予防および治療の少なくとも一方のための医薬は、心筋細胞におけるＡＳＫ１タンパク質の機能発現を阻害する化合物を有効成分とする医薬であり、本発明の心不全の予防および治療の少なくとも一方のための医薬のスクリーニング方法は、ＡＳＫ１タンパク質の機能発現の阻害を指標として、薬剤候補化合物から、心不全の予防および治療の少なくとも一方のための医薬成分を選択する工程を含むスクリーニング方法である。図１に示すように、ＡＳＫ１タンパク質を排除すれば、例えば、心筋梗塞や圧負荷等の後の心室リモデリングにおいて、心室拡張を減衰できるから、心不全の予防治療が可能となる。
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本発明は、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）θ、特に、ＰＫＣθの触媒ドメインの立体構造に関する。結晶学で製造するための、ＰＫＣθ触媒ドメインの発現方法、精製方法および結晶化方法を提供する。ＰＫＣθとインヒビターの複合体の原子座標もまた提供する。 （もっと読む）

本発明は、血栓塞栓障害の治療のためのMstタンパクまたはMstタンパクのヌクレオチド配列コーディングの使用およびMstタンパクまたはMstタンパクのヌクレオチド配列コーディングのモジュレーターをスクリーニングする方法に関する。 （もっと読む）

【課題】 恐怖体験に対する心的障害の発生を防止する向精神薬や、空間認知、記憶に関する能力を高める向精神薬の開発等に利用できるＰＫＮ１ａノックアウト動物、及び向精神薬のスクリーニング方法などを提供すること。
【解決手段】 本発明は、相同染色体上のＰＫＮ１ａ遺伝子を破壊することによって、ＰＫＮ１ａの発現が抑制されたノックアウト動物等を提供する。作製したＰＫＮ１ａノックアウトマウスは、行動検査において恐怖学習能の低下に加えて空間記憶能の亢進が認められるなど、ユニークな特徴を有するマウスであった。また、ＰＫＮ１ａを阻害もしくは活性化する物質の探索は、向精神薬のスクリーニング方法として有用である。 （もっと読む）

本発明は、ヘキソキナーゼVのモジュレーターを同定する方法を提供する。そのようなモジュレーターは、糖尿病の処置のために、または糖尿病の発症を遅らせるために、用いられうる。本発明はまた、ヘキソキナーゼV核酸およびタンパク質の検出に基づいて、糖尿病または前糖尿病を診断する方法ならびに予測を行う方法を提供する。
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ヒトレプチンに存在するアミノ酸配列を含むポリペプチドは、ヒトレプチンに対するヒトＣ反応性タンパク質の阻害作用を阻止する。したがって、上記のようなポリペプチドは、レプチンに対するCRPの影響に関連する症状を治療または予防するための手法に関連する。 （もっと読む）

本発明は、キナーゼを阻害する化合物を同定する方法を提供する。さらに、プロテインキナーゼをプロファイルする方法も提供される。さらに、キナーゼ阻害剤の作用様式を決定する方法も提供される。 （もっと読む）

本発明は、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）ＲＣＣ３５６の天然リガンドとしてのイソ吉草酸の同定に関する。ＲＣＣ３５６受容体の活性を調節する薬剤のスクリーニングアッセイの基礎として、本発明にはＲＣＣ３５６ポリペプチドとイソ吉草酸との相互作用の利用が含まれる。本発明には、診断およびスクリーニングアッセイの実施用キットの他、ＲＣＣ３５６／イソ吉草酸の相互作用に基づいて実施される診断および他のアッセイも含まれる。 （もっと読む）

随意に関心タンパク質と融合させた変異ヒドロラーゼが提供される。この変異ヒドロラーゼは、対応する非変異(野生型)ヒドロラーゼの基質と、野生型ヒドロラーゼと該基質の間で形成される結合よりも安定した結合を形成することができるし、また野生型ヒドロラーゼと比べて2つのアミノ酸置換を含む。1つまたは複数の機能性基を含むヒドロラーゼ基質もまた、本発明の変異ヒドロラーゼと基質の使用方法と共に、提供される。基質と安定した結合を形成しうる融合タンパク質、それに該融合タンパク質を発現する細胞もまた提供される。
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【課題】ヒトｐ２１活性キナーゼｐ６５（「ｈＰＡＫ６５」）核酸またはタンパク質の配列を含有する組成物の調製および使用する方法の提供。
【解決手段】ｈＰＡＫ６５タンパク質またそれから誘導された少なくとも25アミノ酸の断片をコードする配列を含む、精製、単離された核酸であって、上述の核酸がｈＰＡＫ６５のｃＤＮＡ配列を含む核酸、または特定のポリヌクレオチド中に見出される配列に対応する、単離および精製されたタンパク質もしくはその断片。 （もっと読む）

【課題】タンパク質のリン酸化を測定するための方法を提供する。
【解決手段】標的タンパク質のインビトロでのリン酸化を含むが、それは、このタンパク質（非リン酸化）を、タンパク質のリン酸化形態の作製を可能にするホスホキナーゼを含むすべての試薬を含んでなる反応混合物とすることを条件とする。このリン酸化タンパク質は、このリン酸化部位に特異性を持つ抗体との接合によって測定する。測定に有用な抗体を含む。特に、タウタンパク質、Ｒｂタンパク質およびＥＧＦＲタンパク質のリン酸化、ならびにタウタンパク質、Ｒｂタンパク質またはＥＧＦＲタンパク質のリン酸化の部位に特異性を持つ抗体からなる。 （もっと読む）

本発明は、式(Ｉ)
【化１】


(式中、可変置換基は明細書に定義の通りである。)の化合物を、処置を必要とする患者に投与することによる、異常なＭＡＰキナーゼシグナル伝達経路を特徴とする疾患の処置法である。本発明の方法は、特に、変異ＲＡＦキナーゼを有する癌、とりわけ黒色腫の治療に有用である。
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【課題】アレイ作製条件や基板のロットなどの変動要因による影響をほとんど回避され、再現性に非常に優れた精度や信頼性の高いプロファイリングデータを得る手法を提供する。
【解決手段】複数種のペプチドが固定化されてなるアレイを用いて、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）解析によりプロテインキナーゼ活性を解析する方法であって、該アレイ上に予めリン酸化されたペプチドが１種以上固定化されてなり、かつアレイ上のリン酸化反応後における固定化された各種ペプチドにおけるＳＰＲシグナル強度と該予めリン酸化されたペプチドにおけるＳＰＲシグナル強度の比の値を算出して対比することを特徴とするプロテインキナーゼ活性のプロファイリング方法。 （もっと読む）

【課題】ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ、および類薬の感受性を示す組織におけるＤＮＡの簡便な検査方法及びそれに用いられるプライマーセットを提供すること。
【解決手段】特定の塩基配列からなる第１のプライマー、特定の塩基配列からなる第２のプライマー、特定の塩基配列からなる第３のプライマーおよびこれらのプライマーを含んでなるプライマーセットとし、これらのプライマーを用いてＰＣＲを行い、ＰＣＲ産物に対して電気泳動を行うことで、ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ、及び類薬応答性遺伝子変異の判定方法を提供する。 （もっと読む）

血液、血清、血漿、脳脊髄液(CSF)、胸膜液、腹水、組織、細胞およびその抽出液などの生体サンプル中のチミジンキナーゼ(TK)の活性を測定するための方法およびアッセイキットが記載される。方法は、緩衝液中で、固体表面接着プライマーおよび／またはテンプレート、キナーゼ酵素基質としてのブロモデオキシウリジン、ヨードデオキシウリジン、フルオロデオキシウリジンまたはビニルデオキシチミジンなどの修飾デオキシヌクレオシド、リン酸供与体、ヌクレオチド重合酵素および酵母抽出物などのTK活性のないキナーゼ酵素源を含む基本反応混合物を生体サンプルと接触させることを含む。インキュベートした後、固体表面接着プライマーおよび／またはテンプレートに組み込まれた修飾デオキシヌクレオシドの量を測定し、そして、生体サンプル中に存在するTK活性は、組み込まれた修飾デオキシヌクレオシドの量に直接比例する。方法およびアッセイキットは、ガンなどの細胞増殖性障害または疾患の診断、疾患進行および治療効果の予後観察およびたとえば、新規薬物候補などの化合物のスクリーニング、リン酸チミジンの形成を妨害するか、または核酸合成を妨げることができる酵素経路への影響において有用である。
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