【課題】より実用的な血糖測定センサ用酵素を開発し、より具体的には、センサ用途での広範な利用に耐えうるよう、基質親和性と比活性を向上させた改変型ＦＡＤＧＤＨの提供。
【解決手段】基質親和性と比活性に優れ、溶存酸素の影響を受けることのないフラビンアデニンジヌクレオチド依存性グルコースデヒドロゲナーゼ（ＦＡＤＧＤＨ）。具体的には、野生型アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）由来ＦＡＤＧＤＨの特定のアミノ酸を他のアミノ酸に置換することにより基質親和性および／または比活性を向上させた改変型ＦＡＤＧＤＨおよび該改変型ＦＡＤＧＤＨをコードするＤＮＡ。 （もっと読む）

本発明は、優れた薬物動態学的、薬力学的及び薬化学的性質を有し、かつ簡略化された手順を用いて精製することができる、改良型アピラ−ゼ（ＥＮ−アピラ−ゼ）の新しいクラスを提供する。本発明はさらに、このようなＥＮ−アピラ−ゼを生産するために細胞を形質転換するための核酸構築物を提供する。ＥＮ−アピラ−ゼ構築物は、シグナル配列、リンカ−、及び可溶性アピラ−ゼをコ−ドする配列を含む。また、アピラ−ゼの調製物、並びに培養細胞でのアピラ−ゼの生産方法及びその精製方法も提供される。 （もっと読む）

【課題】ペプチジルグリシンα−アミド化モノオキシゲナーゼ（ＰＡＭ）、またはその２つの触媒ドメインの一方を発現させるための細胞株を提供する。
【解決手段】非動物供給源の低タンパク質組織培養培地を用いつつ、高レベルの酵素発現が達成される。ロバストな２工程の下流精製により高い酵素純度がもたらされる。得られるＰＡＭまたはそのＰＨＭ触媒ドメインは、Ｘ−α−ヒドロキシ−ＧｌｙまたはＸ−ＮＨ_２（Ｘは、グリシン基が共有結合し得るカルボニル基を有するペプチドまたは任意の化学的化合物である）へのＸ−Ｇｌｙの変換の酵素的変換を触媒するために使用される。また、好ましい細胞株の調製方法も示す。 （もっと読む）

【課題】環境に感受性のあるレポータータンパク質である修飾された甲虫ルシフェラーゼタンパク質が提供される。
【解決手段】関心のある分子と相互作用するアミノ酸配列を含む挿入を含み、修飾に寛容性のある親甲虫ルシフェラーゼ配列の残基又は領域において環状置換された甲虫ルシフェラーゼをコードするポリヌクレオチド。前記ポリヌクレオチドによってコードされる修飾された甲虫ルシフェラーゼ。前記ポリヌクレオチドを細胞に形質導入し、細胞内の関心のある分子を検出する方法。 （もっと読む）

【課題】
白色腐朽菌の中から液体培養においてラッカーゼ分泌が盛んな種を選抜し、様々なラッカーゼ誘導成分を用いて誘導性の高い成分と成分に対しての応答性に優れた菌株を選抜し酸化還元電位を持つラッカーゼを効率よく生産すること、より具体的には、精製工程を必要としない純度で、大量の高酸化還元電位型ラッカーゼの分泌生産系の確立をすること。
【解決手段】
オツネンタケモドキ、特に野生株オツネンタケモドキIBRC05015株（寄託番号 NITE P-822）から高酸化還元電位型ラッカーゼを分泌生産する方法であって、銅添加培地を使用することを特徴とする。 （もっと読む）

【課題】トキソプラズマ原虫における、プロテインキナーゼ阻害剤誘導体を用いたプロテインキナーゼの条件付けノックアウトによる機能抑制を可能にする、トキソプラズマ原虫株を提供する。
【解決手段】内在する特定のプロテインキナーゼ阻害剤誘導体に対して、感受性のプロテインキナーゼに非感受性となる変異を導入し、特定のプロテインキナーゼ阻害剤誘導体に対する感受性を有するプロテインキナーゼをなくし、一方で機能解析を行いたいプロテインキナーゼに対して特定のプロテインキナーゼ阻害剤誘導体に対する感受性を付与する変異を生じさせた、トキソプラズマ原虫。 （もっと読む）

【課題】リフォールディング効率が良くかつ発光の減衰時間が長い変異ガウシアルシフェラーゼの提供。
【解決手段】ガウシアルシフェラーゼに含まれる、特定な配列からなるアミノ酸配列において59番目のシステインが他のアミノ酸と置換したアミノ酸配列からなる変異ガウシアルシフェラーゼ。 （もっと読む）

【課題】新規酵素を提供する。
【解決手段】ルシフェラーゼ活性を有し、かつ、フォティナス・ピラリス、ルシオラ・ミングレリカ、ルシオラ・クルシアタ又はルシオラ・ラテラリス、ホタリア・パロウラ、ピロフォラス・プラギオフタラマス、ラムピリス・ノクチルカ、ピロコエリア・ナヤコ又はフォティナス・ペンシランヴァニカ由来のルシフェラーゼと少なくとも６０％の類似性を有するタンパク質であって、前記酵素の配列が対応の野生型配列において現れるアミノ酸とは異なるものであり、かつ、該ルシフェラーゼ酵素が、当該部位に対応の野生型ルシフェラーゼのアミノ酸を有する酵素と比較して増加した熱安定性を有することを特徴とする酵素。 （もっと読む）

【課題】Vdh及びVdhと構造的に関連したVdh-K1などの水酸化酵素を改変することによりビタミンD類の水酸化反応における副反応を抑制し、さらに水酸化酵素の比活性を改善して水酸化ビタミンD誘導体を効率よく生産する方法を提供する。
【解決手段】ビタミンD類の水酸化において活性が増強され、望ましくない副反応が低減したポリペプチド（酵素）をコードするDNA、そのDNAによりコードされる改変型ビタミンD類水酸化酵素、そのDNAを含む自律複製性または組み込み複製性の組換えベクター、そのDNAを含む形質転換体、及びその形質転換体を培地で培養し、その培養液から水酸化ビタミンD誘導体を採取する水酸化ビタミンD誘導体の製造方法。 （もっと読む）

【課題】公知のＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼの欠点を克服し、広い温度域において十分な反応性を有し、且つ、基質特異性に優れた改変型ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼを提供すること。
【解決手段】ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼを遺伝子レベルで改変することで、改変前のＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼよりも温度依存性が改善し且つ、キシロース作用性が低下した改変型ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼ。 （もっと読む）

本発明は、サッカロミセス・セレヴィシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）などの酵母中における、７−デヒドロコレステロール、２５−ヒドロキシ−７−デヒドロコレステロール、および２５−ヒドロキシエルゴステロールの生成に関する。それはまた、ラノステロール、ジメチルチモステロール、メチルチモステロール、チモステロール、コレスタ−７，２４−ジエノール、またはコレスタ−５，７，２４−トリエノールの２４位における二重結合の還元；またはエルゴステロール、７−デヒドロコレステロール、コレスタ−８−エノール、およびコレスタ−７−エノールの２５位におけるヒドロキシル化を触媒する、様々な酵素にも関する。それはまた、コレステロールＣ２５−ヒドロキシラーゼおよびステロールΔ２４−還元酵素をコードする様々な核酸に関し、７−デヒドロコレステロールまたはエルゴステロールを生成してヒドロキシル化するためのそれらの使用にも関する。それはまた、このようにして生成された酵母株に関し、形質転換酵母細胞を培養するステップと、得られたステロールを収集するステップを含んでなる、これらのステロールを生成する方法にも関する。
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【課題】D-グルコースに対する基質特異性が高いグルコースデヒドロゲナーゼ（ＧＤＨ）および前記ＧＤＨを利用する高精度のグルコース測定法を提供する。
【解決手段】バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）・メガテリウム（ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）由来ＧＤＨのアミノ酸配列の２５９位および／または２６１位、あるいはそれと同等の位置のアミノ酸がアラニンあるいはバリンに置換されており、かつ、ＧＤＨ活性を有する変異型グルコースデヒドロゲナーゼ。 （もっと読む）

【課題】シス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンを経済的・効率的に製造する方法を開発すること。
【解決手段】本発明は、Ｌ−プロリン シス−ヒドロキシラーゼを提供する。この酵素は、放線菌ストレプトスポランギウム・ロセウムＳｔｒｅｐｔｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ ｒｏｓｅｕｍ ＮＢＲＣ ３７７６株由来である。本発明は前記酵素を用いてＬ−プロリンからシス−３−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン及びシス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンを製造する方法を提供する。本発明は、前記酵素をエンコードするポリヌクレオチドを含む組換えベクターと、該ベクターを含む形質転換体とを提供する。 （もっと読む）

【課題】公知のＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼの欠点を克服し、広い温度域において十分な反応性を有し、且つ、基質特異性に優れた改変型ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼを提供すること。
【解決手段】ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼを遺伝子レベルで改変することで、改変前のＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼよりも温度依存性が改善し且つ、キシロース作用性が低下した改変型ＦＡＤ依存性グルコースデヒドロゲナーゼ。 （もっと読む）

【課題】耐熱性および耐久性に優れたラッカーゼ活性を有するタンパク質、当該タンパク質をコードするポリヌクレオチド、当該タンパク質を産生する方法および当該ポリヌクレオチドを簡便に取得する方法を提供する。
【解決手段】ラッカーゼ活性を有し、特定のアミノ酸配列および前記アミノ酸配列において１又は複数のアミノ酸の欠失、置換、挿入および付加から選択される１以上の改変が生じたアミノ酸配列を有するタンパク質、および堆肥試料から抽出したメタゲノムＤＮＡ由来であって、ラッカーゼ活性を有するタンパク質をコードするポリヌクレオチド。 （もっと読む）

【課題】ルシフェラーゼ酵素が、対応する野生型ルシフェラーゼと比較して異なる波長の光を発することができ、および／または対応する野生型ルシフェラーゼと比較して熱安定性が向上している組換えタンパク質を提供する。
【解決手段】野生型ルシフェラーゼと少なくとも６０％の類似性を有する組換えタンパク質であって、この酵素の配列中、Photinus pyralisのルシフェラーゼ中の残基３５７に対応するアミノ酸残基が対応する野生型ルシフェラーゼと比較して変異させられている。変異型ルシフェラーゼは、発せられる光の大きな（５０ｎｍ）波長のシフトを生み出すことができ、優れた熱安定性を有し、その結果生、カラーシフトは、補酵素Ａを加えることによって逆転させることができる。これらの性質によって、この変異体はさまざまなアッセイにおいて非常に有用である。 （もっと読む）

【課題】耐熱性および耐ｐＨ性に優れ、温度安定性およびｐＨ安定性に優れたキノプロテイングルコース脱水素酵素の提供。
【解決手段】ピロバキュラム由来の、下記の性質を有するキノプロテイングルコース脱水素酵素。（１）分子量（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ法）：３３±６ｋＤａ（２）一量体タンパク質（３）最適ｐＨ：ｐＨ７〜９（４）最適温度：７５℃以上（５）温度安定性：８０℃以下（６）ｐＨ安定性：ｐＨ４〜１１および、該酵素の製造方法、この酵素と補酵素との複合体、グルコース測定キット、前記酵素遺伝子、前記酵素遺伝子を含むベクター、前記ベクターを含む形質転換体。 （もっと読む）

【課題】シリンガアルデヒド、パニリン、ｐ−ヒドロキシベンズアルデヒド等のリグニン由来の芳香族アルデヒドを効率よく酸化して対応する合成繊維やプラスチックの原料である芳香族カルボン酸に変換する新規遺伝子、新規タンパク質、及び該芳香族カルボン酸の製造法を提供する。
【解決手段】以下の（ａ）又は（ｂ）のタンパク質：（ａ）特定のアミノ酸配列からなるタンパク質；（ｂ）（ａ）のアミノ酸配列において、１個もしくは２個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列からなり、かつベンズアルデヒドデヒドロゲナーゼ活性を有するタンパク質。；該タンパク質をコードする遺伝子；及び、芳香族カルボン酸の製造法。 （もっと読む）

【課題】発光輝度が高く、容易に設計可能な一分子型プローブを提供する。
【解決手段】本発明に係る融合タンパク質は、標的物質を検出するプローブとして使用されるものであり、前記標的物質が結合する結合部位を有する一次結合タンパク質と、前記一次結合タンパク質に前記標的物質が結合したことを認識する二次結合タンパク質と、前記一次結合タンパク質と前記二次結合タンパク質との間に位置する、活性型の酵素又はその前駆体とを有し、前記一次結合タンパク質に前記標的物質が結合したことを前記二次結合タンパク質が認識した場合に、酵素活性度を増加するものである。 （もっと読む）

【課題】シリンガアルデヒド及びp-ヒドロキシベンズアルデヒドから、PDC（２Ｈ−ピラン−２−オン−４，６−ジカルボン酸）を工業的スケールで発酵生産する方法を提供する。
【解決手段】特定の塩基配列からなるベンズアルデヒドデヒドロゲナーゼ遺伝子（ligV2）と、別の特定塩基配列に示すプロトカテク酸4,5-ジオキシゲナーゼ遺伝子（ligA）と、さらに別の特定塩基配列に示すプロトカテク酸4,5-ジオキシゲナーゼ遺伝子（ligB）、さらに別の特定塩基配列に示す4-カルボキシ-2-ヒドロキシムコン酸-6-セミアルデヒドデヒドロゲナーゼ遺伝子（ligC）とを含む組換えベクター；形質転換体；及びPDCの製造方法。 （もっと読む）