ヒアルロン酸産生促進剤、及びこれを含有する化粧料
【課題】解決しようとする問題点は、皮膚の老化を根本的に改善し、しかも皮膚に弊害がなく、安全に使用できる老化防止に有効な化粧料の提供である。
【解決手段】ウリ科植物の種子から得られた抽出物が、ケラチノサイトのヒアルロン酸産生能を活性化し、細胞外マトリックスの産生を増加させることにより、皮膚のハリ・シワの改善に顕著な作用を示すことを見出し、安全に使用できる老化防止に有効な化粧料の提供を可能とした。
【解決手段】ウリ科植物の種子から得られた抽出物が、ケラチノサイトのヒアルロン酸産生能を活性化し、細胞外マトリックスの産生を増加させることにより、皮膚のハリ・シワの改善に顕著な作用を示すことを見出し、安全に使用できる老化防止に有効な化粧料の提供を可能とした。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ケラチノサイトのヒアルロン酸産生を促進することにより、皮膚のハリ・シワの改善を目的とした化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、高齢化社会が進行するにつれて、美しく年を重ねるために、化粧品に求められる役割が大きくなってきている。ところが、肌は、加齢等の内的因子や紫外線、活性酸素等の外的因子によって、皮膚が本来維持している収縮性、柔軟性、保湿性等の機能が衰え、様々なトラブルを発生する。
【０００３】
これらのトラブルの一つであるシワは、真皮の細胞外マトリックスを産生する細胞数の減少、分裂速度の衰え等による細胞機能の老化や、コラーゲン線維の減少及び変性、皮下脂肪組織の減少等により、皮膚の弛緩及び弾力性の損失の起こることが原因となって発生する。
【０００４】
従来、皮膚老化への対処法としては、老化によって失われるコラーゲン、ヒアルロン酸等の物質を皮膚に塗布し補う組成物や、紫外線や活性酸素から皮膚を守るための防御物質を配合した間接的な老化防止剤が主流であった。しかしながら、これらの方法は満足のいく効果を奏するものではなかった。また、老化特に生成したシワを根本的に改善しようとする試みとしてはレチノイン酸（特開２００５−１５３８８）やグリコール酸に代表されるα−ヒドロキシ酸等（特開平８−２５９４２０，特開平９−３０１８８３）があるが、これらは高い配合量が必要とされ、腫れを伴う炎症等を起こす等安全性に問題があり、長期使用に耐え得るものではなかった。
【特許文献１】特開平８−２５９４２０号公報
【特許文献１】特開平９−３０１８８３号公報
【特許文献１】特開２００５−１５３８８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
解決しようとする問題点は、皮膚の老化を根本的に改善し、しかも皮膚に弊害がなく、安全に使用できる老化防止に有効な化粧料の提供である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
そこで本発明者は、係る実情に鑑み鋭意検討した結果、ウリ科植物の種子から得られた抽出物が、ケラチノサイトのヒアルロン酸産生能を活性化し、細胞外マトリックスの産生を増加させることにより、皮膚のハリ・シワの改善に顕著な作用を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
即ち、本発明は、ウリ科植物の種子から得られた抽出物を含有することを特徴とする老化防止に有効な皮膚外用剤を提供するものである。
【０００８】
本発明で使用されるウリ科植物の種子は、特に限定はされないが、カボチャ（Cucurbita moschata Duch. var. Toonas Makino）、ヘチマ（Luffa cylindrical Roem.）の種子が好ましい。そして、抽出方法も特に限定は無く、通常、各種溶剤で抽出し、抽出物（エキス）を精製することにより得ることができる。
【０００９】
即ち、ウリ科植物の種子から得られた抽出物は、抽出溶媒としては、水、各種極性有機溶媒及びそれらの混液、及び塩酸酸性にした極性溶媒を用いることができる。
【００１０】
本発明に係るウリ科植物の種子から得られた抽出物の各種化粧料に対する配合量は、化粧料の実施態様、化粧料の使用形態等に応じて変動させることができるので特に限定されない。原則的には、有効量存在すれば良いことになるが、一般的には化粧料組成物中、乾燥重量に換算して０．０００１〜１００質量％が利用でき、好ましくは０．０１〜１０質量％、更に好ましくは０．１〜５．０質量％である。
【００１１】
本発明に係る化粧料の適用範囲は、特に限定されない。つまり、この発明の有効成分が有する作用効果に応じて各作用効果を利用できる全ての化粧料に適用できる。
【００１２】
例えば、本発明に係る有効成分を各種化粧料基剤等に配合して、クリーム、乳液、化粧水、パック剤、洗顔料等の各種基礎化粧料、ファンデーション、口紅、ほほ紅、白粉等の各種メーキャップ料、洗髪料、養毛剤、シャンプー、リンス等の各種頭髪用化粧料、石鹸、美爪料、オーデコロン等その他化粧料に対して広範囲に適用できる。また、前記各種化粧料の実施態様は、ローション、エマルジョン、軟膏、ゾル、ゲル、パウダー、スプレー、固形等の各種態様で適用できる。
【実施例】
【００１３】
以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００１４】
〔実施例１〕カボチャ種子から得られるエキスの作成
原材料として、カボチャ種子の種皮を除いた胚乳を５０ｇ使用した。前記原材料５０ｇにイオン交換水２００ｍｌを加え、６０℃で６時間加熱抽出した後上澄みを遠心分離し、比較的大きい浮遊物を除去したあと、メッシュ径０．２２μｍのろ紙を用いてろ過する。ロータリーエバポレーターにて減圧濃縮し、カボチャ種子エキス約０．５ｇを得た。
【００１５】
〔実施例２〕ケラチノサイトを用いたヒアルロン酸産生試験
（１）試験溶液調製
前記カボチャ種子エキスを５％牛胎児血清含有DULBECCO’S MODIFICATION OF EAGLE’S MEDIUM（EME）培地に１．０（ｗ／ｖ）％になるように溶解後、０．２μｍメンブランフィルターにて濾過滅菌し、適宜希釈したものを、試験溶液とした。
（２）細胞培養
ケラチノサイトを、DULBECCO’S-EME培地に５（ｖ／ｖ）％の牛胎児血清を添加したもので培養した。前記培地にて５×１０５ｃｅｌｌ／ｍＬに調整した細胞を、内径６．５ｍｍの滅菌プラスチック９６穴プレートに０．１ｍＬずつ接種し、４８時間培養した。
（３）培地内ヒアルロン酸の定量
ヒアルロン酸の定量は生化学工業株式会社製のヒアルロン酸測定キットを用いた。培養した細胞から培地を取りだし、ヒアルロン酸結合蛋白質（HABP）が固定化されたマイクロプレートに５０μＬ添加した。続いて、ビオチン標識HABP溶液を各ウェルあたり、５０μＬずつ添加した。プレートミキサーを用い、１分間混和後、３７℃で６０分間静置した。（１時反応）各ウェルの洗浄後HRP標識ストレプトアビジン溶液を１００μＬずつ添加した後、３７℃で６０分間静置した。（２次反応）各ウェルの洗浄後、酵素基質溶液を１００μＬずつ添加した後、アルミホイルなどで遮光し常温で３０分間静置した。（発光反応）各ウェルに反応停止溶液を１００μＬずつ添加した。プレートリーダーで各ウェルの吸光度を測定した。
【００１６】
レチノイン酸およびウリ科種子エキスのケラチノサイトにおけるヒアルロン酸産生能を表１に示す。
【００１７】
【表１】
【００１８】
表１の結果より、ウリ科種子エキスは高いヒアルロン酸産生を促進する効果を有するとされているレチノイン酸にはおよばないものの明らかにヒアルロン酸産生を促進することが判明した。
【００１９】
以下に本発明の処方例を挙げる。
＜処方例１＞化粧水
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．０１
グリセリン ５．０
ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（２０Ｅ．０） １．５
エタノール １０．０
防腐剤・酸化防止剤 適量
香料 適量
精製水 残部
【００２０】
＜処方例２＞クリーム
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．０００１
ミツロウ ２．０
ステアリルアルコール ５．０
ステアリン酸 ８．０
スクワラン １０．０
自己乳化型グリセリルモノステアレート ３．０
ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．０） １．０
グリセリン ５．０
水酸化カリウム ０．３
香料 適量
防腐剤・酸化防止剤 適量
精製水 残部
【００２１】
＜処方例３＞乳液
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．１
スクワラン ８．０
ワセリン ２．０
ミツロウ ０．５
ソルビタンセスキオレエート ０．８
ポリオキシエチレンオレイルエーテル（２０Ｅ．０） １．２
カルボキシビニルポリマー ０．２
グリセリン １．５
水酸化カリウム ０．１
エタノール ７．０
香料 適量
防腐剤・酸化防止剤 適量
精製水 残部
【００２２】
＜処方例４＞パック剤
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．０１
酢酸ビニル樹脂エマルジョン １５．０
ポリビニルアルコール １０．０
ホホバ油 ３．０
グリセリン ５．０
酸化チタン ８．０
カオリン ７．０
エタノール ５．０
香料 適量
防腐剤・酸化防止剤 適量
精製水 残部
【００２３】
＜処方例５＞軟膏
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．０００１
酢酸トコフェロール ０．５
パラジメチルアミノ安息香酸オクチル ４．０
ブチルメトキシベンゾイルメタン ４．０
ステアリルアルコール １８．０
モクロウ ２０．０
グリセリンモノステアリン酸エステル ０．３
ワセリン ３３．０
香料 適量
防腐剤・酸化防止剤 適量
精製水 残部
【００２４】
＜処方例６＞パウダーファンデーション
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．０１
タルク ４３．０
カオリン １８．０
マイカ ８．０
酸化亜鉛 １０．０
酸化チタン ５．０
着色顔料 適量
ステアリン酸マグネシウム ６．０
流動パラフィン ４．０
白色ワセリン １．０
セレシン １．０
ミリスチン酸イソプロピル １．５
防腐剤・酸化防止剤 適量
香料 適量
【００２５】
処方例2のクリームを健常成人女性２０名に１ヶ月間使用させたところ、１８名に皮膚の潤い及びハリ、シワが改善したとの結果を得た。また、使用中に肌に何らかの異常を感じたパネラーは無かった。
【産業上の利用可能性】
【００２６】
本発明によれば、ウリ科種子エキス、特にカボチャ及びヘチマの種子抽出物に高いヒアルロン酸産生促進効果が見られることから、それを含有させることにより、高い安全性を有したシワ改善に有効な化粧料の提供が期待できる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ケラチノサイトのヒアルロン酸産生を促進することにより、皮膚のハリ・シワの改善を目的とした化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、高齢化社会が進行するにつれて、美しく年を重ねるために、化粧品に求められる役割が大きくなってきている。ところが、肌は、加齢等の内的因子や紫外線、活性酸素等の外的因子によって、皮膚が本来維持している収縮性、柔軟性、保湿性等の機能が衰え、様々なトラブルを発生する。
【０００３】
これらのトラブルの一つであるシワは、真皮の細胞外マトリックスを産生する細胞数の減少、分裂速度の衰え等による細胞機能の老化や、コラーゲン線維の減少及び変性、皮下脂肪組織の減少等により、皮膚の弛緩及び弾力性の損失の起こることが原因となって発生する。
【０００４】
従来、皮膚老化への対処法としては、老化によって失われるコラーゲン、ヒアルロン酸等の物質を皮膚に塗布し補う組成物や、紫外線や活性酸素から皮膚を守るための防御物質を配合した間接的な老化防止剤が主流であった。しかしながら、これらの方法は満足のいく効果を奏するものではなかった。また、老化特に生成したシワを根本的に改善しようとする試みとしてはレチノイン酸（特開２００５−１５３８８）やグリコール酸に代表されるα−ヒドロキシ酸等（特開平８−２５９４２０，特開平９−３０１８８３）があるが、これらは高い配合量が必要とされ、腫れを伴う炎症等を起こす等安全性に問題があり、長期使用に耐え得るものではなかった。
【特許文献１】特開平８−２５９４２０号公報
【特許文献１】特開平９−３０１８８３号公報
【特許文献１】特開２００５−１５３８８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
解決しようとする問題点は、皮膚の老化を根本的に改善し、しかも皮膚に弊害がなく、安全に使用できる老化防止に有効な化粧料の提供である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
そこで本発明者は、係る実情に鑑み鋭意検討した結果、ウリ科植物の種子から得られた抽出物が、ケラチノサイトのヒアルロン酸産生能を活性化し、細胞外マトリックスの産生を増加させることにより、皮膚のハリ・シワの改善に顕著な作用を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
即ち、本発明は、ウリ科植物の種子から得られた抽出物を含有することを特徴とする老化防止に有効な皮膚外用剤を提供するものである。
【０００８】
本発明で使用されるウリ科植物の種子は、特に限定はされないが、カボチャ（Cucurbita moschata Duch. var. Toonas Makino）、ヘチマ（Luffa cylindrical Roem.）の種子が好ましい。そして、抽出方法も特に限定は無く、通常、各種溶剤で抽出し、抽出物（エキス）を精製することにより得ることができる。
【０００９】
即ち、ウリ科植物の種子から得られた抽出物は、抽出溶媒としては、水、各種極性有機溶媒及びそれらの混液、及び塩酸酸性にした極性溶媒を用いることができる。
【００１０】
本発明に係るウリ科植物の種子から得られた抽出物の各種化粧料に対する配合量は、化粧料の実施態様、化粧料の使用形態等に応じて変動させることができるので特に限定されない。原則的には、有効量存在すれば良いことになるが、一般的には化粧料組成物中、乾燥重量に換算して０．０００１〜１００質量％が利用でき、好ましくは０．０１〜１０質量％、更に好ましくは０．１〜５．０質量％である。
【００１１】
本発明に係る化粧料の適用範囲は、特に限定されない。つまり、この発明の有効成分が有する作用効果に応じて各作用効果を利用できる全ての化粧料に適用できる。
【００１２】
例えば、本発明に係る有効成分を各種化粧料基剤等に配合して、クリーム、乳液、化粧水、パック剤、洗顔料等の各種基礎化粧料、ファンデーション、口紅、ほほ紅、白粉等の各種メーキャップ料、洗髪料、養毛剤、シャンプー、リンス等の各種頭髪用化粧料、石鹸、美爪料、オーデコロン等その他化粧料に対して広範囲に適用できる。また、前記各種化粧料の実施態様は、ローション、エマルジョン、軟膏、ゾル、ゲル、パウダー、スプレー、固形等の各種態様で適用できる。
【実施例】
【００１３】
以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００１４】
〔実施例１〕カボチャ種子から得られるエキスの作成
原材料として、カボチャ種子の種皮を除いた胚乳を５０ｇ使用した。前記原材料５０ｇにイオン交換水２００ｍｌを加え、６０℃で６時間加熱抽出した後上澄みを遠心分離し、比較的大きい浮遊物を除去したあと、メッシュ径０．２２μｍのろ紙を用いてろ過する。ロータリーエバポレーターにて減圧濃縮し、カボチャ種子エキス約０．５ｇを得た。
【００１５】
〔実施例２〕ケラチノサイトを用いたヒアルロン酸産生試験
（１）試験溶液調製
前記カボチャ種子エキスを５％牛胎児血清含有DULBECCO’S MODIFICATION OF EAGLE’S MEDIUM（EME）培地に１．０（ｗ／ｖ）％になるように溶解後、０．２μｍメンブランフィルターにて濾過滅菌し、適宜希釈したものを、試験溶液とした。
（２）細胞培養
ケラチノサイトを、DULBECCO’S-EME培地に５（ｖ／ｖ）％の牛胎児血清を添加したもので培養した。前記培地にて５×１０５ｃｅｌｌ／ｍＬに調整した細胞を、内径６．５ｍｍの滅菌プラスチック９６穴プレートに０．１ｍＬずつ接種し、４８時間培養した。
（３）培地内ヒアルロン酸の定量
ヒアルロン酸の定量は生化学工業株式会社製のヒアルロン酸測定キットを用いた。培養した細胞から培地を取りだし、ヒアルロン酸結合蛋白質（HABP）が固定化されたマイクロプレートに５０μＬ添加した。続いて、ビオチン標識HABP溶液を各ウェルあたり、５０μＬずつ添加した。プレートミキサーを用い、１分間混和後、３７℃で６０分間静置した。（１時反応）各ウェルの洗浄後HRP標識ストレプトアビジン溶液を１００μＬずつ添加した後、３７℃で６０分間静置した。（２次反応）各ウェルの洗浄後、酵素基質溶液を１００μＬずつ添加した後、アルミホイルなどで遮光し常温で３０分間静置した。（発光反応）各ウェルに反応停止溶液を１００μＬずつ添加した。プレートリーダーで各ウェルの吸光度を測定した。
【００１６】
レチノイン酸およびウリ科種子エキスのケラチノサイトにおけるヒアルロン酸産生能を表１に示す。
【００１７】
【表１】
【００１８】
表１の結果より、ウリ科種子エキスは高いヒアルロン酸産生を促進する効果を有するとされているレチノイン酸にはおよばないものの明らかにヒアルロン酸産生を促進することが判明した。
【００１９】
以下に本発明の処方例を挙げる。
＜処方例１＞化粧水
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．０１
グリセリン ５．０
ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（２０Ｅ．０） １．５
エタノール １０．０
防腐剤・酸化防止剤 適量
香料 適量
精製水 残部
【００２０】
＜処方例２＞クリーム
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．０００１
ミツロウ ２．０
ステアリルアルコール ５．０
ステアリン酸 ８．０
スクワラン １０．０
自己乳化型グリセリルモノステアレート ３．０
ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．０） １．０
グリセリン ５．０
水酸化カリウム ０．３
香料 適量
防腐剤・酸化防止剤 適量
精製水 残部
【００２１】
＜処方例３＞乳液
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．１
スクワラン ８．０
ワセリン ２．０
ミツロウ ０．５
ソルビタンセスキオレエート ０．８
ポリオキシエチレンオレイルエーテル（２０Ｅ．０） １．２
カルボキシビニルポリマー ０．２
グリセリン １．５
水酸化カリウム ０．１
エタノール ７．０
香料 適量
防腐剤・酸化防止剤 適量
精製水 残部
【００２２】
＜処方例４＞パック剤
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．０１
酢酸ビニル樹脂エマルジョン １５．０
ポリビニルアルコール １０．０
ホホバ油 ３．０
グリセリン ５．０
酸化チタン ８．０
カオリン ７．０
エタノール ５．０
香料 適量
防腐剤・酸化防止剤 適量
精製水 残部
【００２３】
＜処方例５＞軟膏
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．０００１
酢酸トコフェロール ０．５
パラジメチルアミノ安息香酸オクチル ４．０
ブチルメトキシベンゾイルメタン ４．０
ステアリルアルコール １８．０
モクロウ ２０．０
グリセリンモノステアリン酸エステル ０．３
ワセリン ３３．０
香料 適量
防腐剤・酸化防止剤 適量
精製水 残部
【００２４】
＜処方例６＞パウダーファンデーション
（成分名） （質量％）
カボチャ種子エキス ０．０１
タルク ４３．０
カオリン １８．０
マイカ ８．０
酸化亜鉛 １０．０
酸化チタン ５．０
着色顔料 適量
ステアリン酸マグネシウム ６．０
流動パラフィン ４．０
白色ワセリン １．０
セレシン １．０
ミリスチン酸イソプロピル １．５
防腐剤・酸化防止剤 適量
香料 適量
【００２５】
処方例2のクリームを健常成人女性２０名に１ヶ月間使用させたところ、１８名に皮膚の潤い及びハリ、シワが改善したとの結果を得た。また、使用中に肌に何らかの異常を感じたパネラーは無かった。
【産業上の利用可能性】
【００２６】
本発明によれば、ウリ科種子エキス、特にカボチャ及びヘチマの種子抽出物に高いヒアルロン酸産生促進効果が見られることから、それを含有させることにより、高い安全性を有したシワ改善に有効な化粧料の提供が期待できる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウリ科植物の種子から得られた抽出物を有効成分として含有することを特徴とするヒアルロン酸産生促進剤。
【請求項２】
請求項１記載のヒアルロン酸産生促進剤からなる群より１種又は２種以上を有効成分として含有することを特徴とする化粧料。
【請求項１】
ウリ科植物の種子から得られた抽出物を有効成分として含有することを特徴とするヒアルロン酸産生促進剤。
【請求項２】
請求項１記載のヒアルロン酸産生促進剤からなる群より１種又は２種以上を有効成分として含有することを特徴とする化粧料。
【公開番号】特開２００６−２７３８１５（Ｐ２００６−２７３８１５Ａ）
【公開日】平成１８年１０月１２日（２００６．１０．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−９９９３５（Ｐ２００５−９９９３５）
【出願日】平成１７年３月３０日（２００５．３．３０）
【出願人】（５９１２３０６１９）株式会社ナリス化粧品 (200)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年１０月１２日（２００６．１０．１２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年３月３０日（２００５．３．３０）
【出願人】（５９１２３０６１９）株式会社ナリス化粧品 (200)
【Ｆターム（参考）】
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