爆砕発酵バガス含有ＡＣＥ阻害剤
【課題】本発明は、副作用がなく安全性の高い、かつ経済的に安価で容易に入手し得る天然資源を利用した高血圧の予防・治療のためのＡＣＥ阻害組成物やＡＣＥ阻害作用を備えた機能性食品又は食品素材を提供する。
【解決手段】ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を有効成分とすること。
【解決手段】ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を有効成分とすること。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アンジオテンシンＩをアンジオテンシンIIに変換させるアンジオテンシン変換酵素の活性を阻害するアンジオテンシン変換酵素活性阻害組成物（ＡＣＥ阻害組成物）及び該阻害剤を含有する機能性食品又は機能性食品素材に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代社会においては、ライフスタイル（運動不足等）の変化や食の欧米化（脂肪過多等）、また、情報機器、制御機器を使うことが多い仕事や営業等の仕事の過多からくる強いストレス等の影響により、高血圧の症状をもつヒトが増加している。
【０００３】
高血圧症は、自覚症状が無く、放置すると心臓病、脳血管障害といった重大な疾患を二次的に引き起こす疾病であり、高血圧症の治療及び予防が大きな課題となっている。高血圧症には昇圧系であるレニン−アンジオテンシン系を司るアンジオテンシンI変換酵素（Angiotensin I Converting Enzyme 、以下ＡＣＥという）が深く関与することが知られている。ＡＣＥの作用により、アンジオテンシンIのＣ末端ジペプチドＨｉｓ−ｌｅｕがはずれて、活性を有するアンジオテンシンIIを生成する。アンジオテンシンIに生理活性がないのに対して、アンジオテンシンIIには強力な血管収縮作用、すなわち昇圧作用がある。また、ＡＣＥはキナーゼIIとも呼ばれ、強力な血管拡張作用のあるブラジキニン（ｂｒａｄｙｋｉｎｉｎ）を分解して昇圧に働く。したがって、これらの作用を有するＡＣＥを阻害することにより高血圧を予防ないし治療することが可能である。
【０００４】
ＡＣＥ変換酵素を阻害する薬剤をＡＣＥ変換酵素阻害薬又はＡＣＥ阻害剤といい、このような作用を有する医薬製剤としてメチルドバ、ヒドララジン、クロニジン等が知られているが、高血圧の予防ないし治療は長期間摂取することが必要となるため、副作用が極めて低いことも重要な要因となる。そのため、高血圧を予防する原料として、副作用のない可食性の天然物資源を用いて加工、処理し、これを含む機能性食品又は機能性食品素材の開発が求められている。
【０００５】
食経験のある天然物資源を原料とする技術としては、例えば、鰯などの魚類や甲殻類を原料とし、この原料を加水分解した後、酵素を用いてインキュベートして加水分解液を得、その後、加水分解液を濾過、カラムクロマトグラフィー処理等することにより得られたＡＣＥ活性阻害物質（例えば、特許文献１及び２参照）や、大豆蛋白を原料とし、蛋白質分解酵素を用いて分解し、その後、濾過し、ゲル濾過、イオン交換性ゲル濾過等により分離取得したＡＣＥ活性阻害物質（例えば、特許文献３〜５参照）や、原料体（各種の食品蛋白質）に麹菌を接種して製麹し、この製麹処理による生成物に加水することにより加水分解して、前記原料体中にアンジオテンシン変換酵素阻害物質を生成せしめるアンジオテンシン変換酵素活性阻害物質を含有する生成物の製造方法（例えば、特許文献６参照）が知られている。
【０００６】
また、Ｊａｔｏｂａ（Ｈｙｍｅｎａｅａ ｃｏｕｒｂａｒｉｌ）の実の殻、グアバの葉、ムラヤコエンジ、オオバナサルスベリ、桑葉、西河柳、仙鶴草、ミサキノハナの抽出物、コンキオリン、コンキオリン加水分解物を無水コハク酸で処理した物の１種以上を配合した、高血圧症の予防、改善作用を有するアンジオテンシン変換酵素阻害剤および抗高血圧食品（例えば、特許文献７参照）や、シイタケ、レイシ、マイタケ、アガリクス、およびフサハリタケよりなる群から選択されるキノコの抽出物をサモアーゼまたはブロメラインで処理することによって得られる、アンジオテンシン変換酵素阻害剤（例えば、特許文献８参照）が知られている。
【０００７】
さらに、ローヤルゼリー由来の蛋白質をAspergillus oryzae由来のプロテアーゼで加水分解する特定のアミノ酸配列を有するアンジオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチドを含む、味のよい蛋白分解物の製造方法（例えば、特許文献９参照）が知られている。
【０００８】
しかしながら、食経験のある天然資源を利用するとしても、原料を、コスト面や流通面からみて、かつその一定量を恒常的に入手することができるものは限られており、これらを満足する原料を処理して得られるＡＣＥ阻害剤や、この作用を有する機能性食品は知られていない。
【０００９】
【特許文献１】特開平３−１１０９７号公報
【特許文献２】特開平４−７４１２６号公報
【特許文献３】特開平３−１６７１９８号公報
【特許文献４】特開平４−７４１２７号公報
【特許文献５】特開平４−２９９９９１号公報
【特許文献６】特開平７−２８９２８１号公報
【特許文献７】特開２００４−１８９６６２号公報
【特許文献８】特開２００６−２５７００７号公報
【特許文献９】特開２００５−２８１１４５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、副作用がなく安全性の高い、かつ経済的に安価で容易に入手し得る天然資源を利用した高血圧の予防・治療のためのＡＣＥ阻害組成物やＡＣＥ阻害作用を備えた機能性食品又は機能性食品素材を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、サトウキビの絞りカスであるバガスの有効利用について鋭意研究しており、その製造方法として、バガスを蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理バガスに発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、原料となる蒸煮爆砕処理バガスの一部を用いて製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に蒸煮爆砕処理バガスを混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵して爆砕発酵処理バガスを得る方法を開発し、先に出願（特願２００５−１４３３２７号）した。そして、得られた爆砕発酵処理バガスには、キシロビオースとキシロトリオ−ス等のキシロオリゴ糖、フェルラ酸等の抗酸化性物質、食物繊維に富むものであった。このように爆砕発酵処理バガスは、糖類、抗酸化性物質及び食物繊維を含有することから、医薬又は有用な食品素材として利用可能性の高いことが推察された。本発明者らは、さらに、研究を進め、爆砕発酵処理バガスにヒトメタボリックシンドローム改善作用、糖尿病を含むヒトメタボリックシンドローム改善作用、ヒト用抗酸化作用のあることを確認し、先に出願（特願２００６−２４０３３２号）した。その後、それ以外の種々の医薬効果について鋭意検討した結果、上記バガスにヒトの降圧作用に関連するＡＣＥ阻害活性を有することが認められ、本発明を完成するに至った。
【００１２】
すなわち本発明は、（１）ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を有効成分とすることを特徴とするＡＣＥ阻害組成物や、（２）ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする上記（１）記載のＡＣＥ阻害組成物や、（３）爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有することを特徴とする上記（１）又は（２）記載のＡＣＥ阻害組成物や、（４）爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上含有することを特徴とする上記（３）記載のＡＣＥ阻害組成物に関する。
【００１３】
また本発明は、（５）爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有することを特徴とする上記（１）〜（４）のいずれか記載のＡＣＥ阻害組成物や、（６）ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を含有し、ＡＣＥ阻害活性の改善作用を有するものであることを特徴とし、ＡＣＥ阻害活性改善のために用いられる旨の表示を付した機能性食品又は食品素材や、（７）ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする上記（６）記載の機能性食品又は食品素材や、（８）ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を添加した食品又は食品素材を、ＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材として使用する方法に関する。
【００１４】
さらに本発明は、（９）ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維をＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材の配合剤として使用する方法や、（１０）ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を食品又は食品素材に添加することを特徴とするＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材を製造する方法や、（１１）ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする上記（８）〜（１０）のいずれか記載の方法に関する。
【発明の効果】
【００１５】
本発明の爆砕発酵処理食物繊維を含有する組成物は、何ら副作用を伴うことなくＡＣＥ阻害活性作用に顕著な効果を奏することができ、また、黒糖に似たフレーバーを有するので、食品に添加して前記作用を有する一般食品として食することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本発明のＡＣＥ阻害組成物としては、ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を含有する組成物であれば、発酵処理後の液状物やその乾燥物など特に制限されるものではなく、上記ヘミセルロース含有植物資源としては、サトウキビから砂糖を製造する過程で複製されるサトウキビの圧搾カスであるバガスの他、イネやトウモロコシの芯、木等の不溶性キシランを含む他の植物資源を挙げることができる。以下、ヘミセルロース含有植物資源としてバガスを用いた場合を例にとって説明する。
【００１７】
ヘミセルロース含有植物資源としてバガスを用いた場合、本発明の爆砕発酵処理食物繊維を爆砕発酵処理バガスといい、かかる爆砕発酵処理バガスは、バガスを蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵する方法により得られることになる。
【００１８】
上記蒸煮爆砕処理としては、耐圧反応容器内で、高温・高圧の水蒸気によりバガスを蒸煮し、キシランをある程度加水分解させた後、耐圧反応容器に設けられたバルブを一気に開放し、瞬間的に大気圧に放出する処理であれば特に制限されず、この蒸煮爆砕処理により、加水分解による化学的反応と、水の断熱膨張による物理的反応の相乗効果によって、バガスを粉砕することができる。この蒸煮爆砕処理条件としては、１．０Ｍｐａ〜３．０Ｍｐａで３０秒〜１０分、好ましくは２．０Ｍｐａ〜２．８Ｍｐａで１〜５分、より好ましくは２．４Ｍｐａ〜２．６Ｍｐａで６０〜８０秒を例示することができる。また、バガスをあらかじめ粉砕処理した後、蒸煮爆砕処理を行うことが好ましく、粉砕の程度としては、平均粒径２〜５ｍｍ、特に３〜４ｍｍ、中でも３．５ｍｍの長さに粗粉砕することが好ましい。
【００１９】
蒸煮爆砕処理されたバガスは発酵基質と混合されるが、かかる発酵基質としては、小麦フスマ、米ヌカ、廃糖蜜等を例示することができるが、小麦フスマが好ましい。例えば、発酵基質として小麦フスマを用いる場合、蒸煮爆砕処理されたバガス１００重量部に対して、小麦フスマを１〜５０重量部、好ましくは１０〜５０重量部、より好ましくは４０〜４５重量部配合することができる。製麹にあたっては、この混合物に加水して、水分含量を調整することが必要であり、水分含量が４０〜６０％、好ましくは４５〜５５％、より好ましくは約５０％になるように加水する。
【００２０】
製麹に使用する麹菌としては、通常の製麹に用いられる麹菌を挙げることができ、具体的には、アスペルギルス・オリゼー（Aspergillus oryzae）、アスペルギルス・ソーヤ（Aspergillus sojae）等を例示することができる。使用する麹菌としては、キシロオリゴ糖を多く含有する食品素材を得ることができることから、高キシラナーゼ活性を有する株が好ましい。このキシラナーゼによりヘミセルロースからキシロオリゴ糖が産生される。高キシラナーゼ活性株の調製方法として、紫外線や変異誘発剤を用いた変異株の調製方法も利用しうるが、安全性の点で単胞子分離を実施して得られる自然変異株が好ましい。キシラナーゼ活性は、キシランから４０℃で１分間に１μｍｏｌのキシロースを遊離する活性を１単位として定義し、その測定方法としては、公知方法を利用することができる。高キシラナーゼ活性を有する麹菌としては、この条件により、０．３５単位／ｇ以上であることが好ましい。また、キシロオリゴ糖の中でも、キシロビオースやキシロトリオースを主として含むものが、キシロオリゴ糖の中でも胃酸に対する抵抗性が他のオリゴ糖に比べて高く、分解されず腸内に到達することから好ましい。爆砕発酵処理バガスに含有されるキシロビオースやキシロトリオースを主成分とするキシロオリゴ糖は、整腸作用等の観点から、３．９％以上が好ましく、かかるキシロビオースやキシロトリオースを主とするキシロオリゴ糖を３．９％以上含む爆砕発酵処理バガスを製造するため、麹菌として、アスペルギルス・ソーヤ（ＮＦＲＩ１１４７）から単胞子分離を実施して得られるキシラナーゼ活性の高い麹菌を用いることが好ましい。製麹は、２８〜３２℃、特に３０℃で５〜７日培養することにより行うことが好ましい。
【００２１】
次いで、製麹した麹を水に分散し、この麹分散液に前記蒸煮爆砕処理バガスを混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵する。麹分散液に混合する蒸煮爆砕処理物として、製麹に用いた蒸煮爆砕処理物の５〜１０倍量、好ましくは８〜９倍量を用いることができる。麹分散液に蒸煮爆砕処理バガスを混合した混合物に加水して、水分含量を調整することが必要であり、水分含量が４０〜６０％、好ましくは４５〜５５％、より好ましくは略５０％になるように加水する。発酵は、２８〜３２℃、特に３０℃で４８〜７２時間培養することにより行うことが好ましい。発酵後、発酵停止処理を実施することが、過発酵防止の点で好ましい。かかる発酵停止処理としては、８０〜１００℃の蒸気に３０分間暴露する方法を具体的に例示することができる。
【００２２】
上記爆砕発酵処理バガスとしては、乾燥品が好ましく、特に乾燥微粉末が好ましい。この乾燥微粉末の平均粒径としては、１ｍｍ以下、好ましくは５００μｍ以下、より好ましくは２００〜３００μｍを好適に例示することができる。また、本発明の製造方法によって得られる爆砕発酵処理バガスとしては、キシロビオースやキシロトリオースを主成分とするキシロオリゴ糖を３．９％以上含有するものや、フェルラ酸等の抗酸化活性物質を含有して抗酸化活性を示すものや、酵素法により測定した食物繊維を５０重量％以上含むものが好ましい。
【００２３】
次に、爆砕発酵処理食物繊維（爆砕発酵処理バガス）としては、食物繊維を５０重量％以上含有するものや、食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上、好ましくは１％以上、より好ましくは２％以上、中でも３％以上、特に３．９％以上含有するものや、食物繊維を５０重量％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有するものや、食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上、好ましくは１％以上、より好ましくは２％以上、中でも３％以上、特に３．９％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有するものが好ましい。
【００２４】
本発明のＡＣＥ阻害組成物が有するＡＣＥ阻害作用とは、アンジオテンシンI変換酵素（Angiotensin I Converting Enzyme 、ＡＣＥ）がアンジオテンシンIのＣ端の２つ目のアミノ酸と３つ目のアミノ酸との間のペプチド結合を水解（Ｃ末端ジペプチドＨｉｓ−ｌｅｕがはずれる）してアンジオテンシンIIを生成するのを阻害する作用を意味する。アンジオテンシンIに生理活性がないのに対して、アンジオテンシンIIには強力な血管収縮作用、すなわち昇圧作用があることから、ＡＣＥ阻害組成物の使用により、ＡＣＥの作用を阻害することができ、その結果、血管収縮作用や昇圧作用を阻止又は減じることができる。
【００２５】
本発明のＡＣＥ阻害組成物は、ＡＣＥ阻害剤として有用であり、サプリメントや医薬品として、あるいは食品に添加・配合して摂取することができる。
【００２６】
本発明の爆砕発酵処理食物繊維を含有するＡＣＥ阻害組成物は、常法により錠剤、顆粒、カプセル、シロップ等製剤化して、健康サプリメントや医薬品として用いることができる。サプリメントや医薬品として用いる場合、それらの分野で通常用いられている賦形剤を配合することが好ましい。また、摂取量は、ヒトの体重、年齢、性別、症状等により異なり、特に症状に応じて１日当たりの投与量を決定するが、長期に服用することもできる。
【００２７】
本発明のＡＣＥ阻害組成物は、含まれる爆砕発酵処理食物繊維（爆砕発酵処理バガス）が、黒糖に似たフレーバーを有し、一般食品に含有してもその食品の風味を損なうことがないので、食品に添加・配合して用いることができ、ＡＣＥ阻害作用を奏する食品を容易に提供することができる。添加される食品としては、例えば、麺類、飴、クッキー、シリアル類、菓子類（スナック類）、ふりかけ類、畜産加工品類、魚肉加工品類、缶詰類、ジュース類、清涼飲料、栄養ドリンク剤等を挙げることができる。
【００２８】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。
【実施例１】
【００２９】
［爆砕発酵処理バガスの製造方法］
（麹菌の選択）
独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 食品総合研究所の保存菌株であるアスペルギルス・ソーヤ（Aspergillus sojae）ＮＦＲＩ１１４７株の単胞子分離を実施し、各単胞子をＰＡＤ培地で生育させ、培養後の培養液中のキシラナーゼ活性を測定することにより、キシラナーゼ活性の高い自然変異株を選択した。３０００ｒｐｍで１０分間の遠心分離後の培養上清１ｇ当たりのキシラナーゼ活性は、単胞子分離を実施する前の０．２５４Ｕから、０．３５１Ｕに上昇した。
【００３０】
上記キシラナーゼ活性の測定は、１％濃度の可溶性キシラン（シグマ社製）を含む１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）０．１ｍｌに、同じ緩衝液に適当に希釈した培養上清０．１ｍｌを加え、３７℃、１０分間反応させ銅試薬１．０ｍｌを添加して反応を停止した。それに０．８ｍｌの同緩衝液を加えて全量を２．０ｍｌとし、生成した還元糖をソモギー・ネルソン（Somogyi-Nelson）法で測定した。すなわち、これを１００℃、１５分間加熱した後、流水で急冷し次いでネルソン液１．０ｍｌを加え室温で２０分間静置して発色させた。そこへ、純水７．０ｍｌを加えて不溶物を遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分間）により除去した後、５００ｎｍの吸光度を測定した。還元糖量は、キシロースを同様の系で測定して作成した検量線により求めた。なお、培養上清を加える前に銅試薬をあらかじめ加えて同様に発色させたものをブランクとした。また酵素活性単位は、１分間に１ｍｍｏｌの還元糖（キシロースとして）を生成する酵素量を１単位（Ｕ）とした。
【００３１】
（製麹工程）
乾燥バガス粉砕機を用いて平均粒径３．５ｍｍの長さに粗粉砕し、反応釜（オートクレーブ）内に収容した後、反応釜に加熱水蒸気を送り込み、２．５Ｍｐａ（２２０℃），７０秒間の蒸煮処理を行った後、反応釜から急激に水蒸気を排出し、圧力を瞬時に大気圧にまで戻すことにより爆砕処理を行った。この蒸煮爆砕処理を行ったバガス３５ｋｇに小麦フスマ１５ｋｇを混合し、水５０Ｌを加水して水分が約５０重量％となるように調整した後、単胞子分離により選択した麹菌を接種し、３０℃、６日間培養して麹を製造した。
【００３２】
（発酵工程）
この製麹した麹を水７０Ｌに分散し、麹の製造で用いた爆砕処理したバガス３００ｋｇに混合した。そして、水分が全体の５０重量％となるように加水し調整した後、３０℃、６０時間の発酵処理した後、８０〜１００℃の蒸気に３０分間暴露して発酵停止処理を行った。この発酵処理物をディスク型乾燥機（月島機械社製）を用い、乾燥温度８０〜１００℃（品温）で乾燥した後、微粉砕処理をして、平均粒径２５０μｍの爆砕発酵処理バガスとした。この爆砕発酵処理バガスの栄養組成を表１に示す。
【００３３】
【表１】
【００３４】
表１に示されるように、爆砕発酵処理バガスは食物繊維に富み、キシロビオースとキシロトリオ−スを約４％含んでいる。なお、キシロビオースやキシロトリオ−スのキシロオリゴ糖の測定は、ＤＸ−５００を用いＨＰＬＣ法（日本ダイオネクス社製）に則り測定した。また、別法として、同じＨＰＬＣ法であるが、カラム：Biorad Aminex Carbohydrate HPX-42A 300×7.8、flow rate１．０ｍｌ／ｍｉｎで移動相を水とし、カラム温度８０℃にて測定した。
【実施例２】
【００３５】
［阻害活性試験］
（サンプルの調製）
実施例１により製造された爆砕発酵処理バガスと対照例として用いた未処理バガスとの各サンプル１０ｇを取り、１０倍量の８０％エタノールを加えて１００ｍＬとした。１２時間静置後、抽出後ろ過し、残渣に同じく１０ｍＬの８０％エタノールを加え、再度１２時間静置抽出し、ろ過して分画前サンプルとした。合成吸着剤であるＸＡＤ−２を用いて、前記の爆砕発酵処理バガス８０％エタノール抽出物及び未処理のバガス８０％エタノール抽出物について、水、種々の濃度のメタノール及びアセトンの順序で、それぞれ６００ｍＬずつ使用し分画を行った。それによって、水画分、２５％メタノール画分、５０％メタノール画分、７５％メタノール画分、１００％メタノール画分、アセトン画分が得られた。
【００３６】
（ＡＣＥ阻害活性）
得られた水抽出物は蒸留水に、それ以外については５０％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）にそれぞれ濃度が２０ｍｇ／ｍＬになるように溶解し、試験に供した。各サンプル１５μＬとＡＣＥ５０μＬを混合後、３７℃で５分間プレインキュベートし、その後塩化ナトリウムを含むホウ酸緩衝液に溶解した基質（Hippuryl-L-histidyl-L-leucine）１２５μＬを添加して３７℃、３０分間反応させた。反応後、１０％ＴＦＡを２０μＬを加え反応を停止させた。反応停止後、ＨＰＬＣにより生成した各馬尿酸量（Hippuric-acid）を測定し、コントロールとして水を用いた場合をＡＣＥ活性１００％とした結果を図１に示す。
【００３７】
図１に示すように、分画前では、発酵バガスは未処理バガスより若干強い活性が確認でき、分画後では、７５％及び１００％メタノール画分において未処理バガスより強い活性が確認できた。以上より、バガスを爆砕発酵処理することでＡＣＥ阻害活性が増加することが明らかにされた。
【００３８】
以上のとおり、高血圧の症状を有するヒトが、本発明に係る爆砕発酵処理バガスを摂取することにより、高血圧の症状を改善するのに有効であることがわかった。
【実施例３】
【００３９】
（ドリンク）
本発明の醗酵バガス末と他の原料を、表２記載の配合量で、常法の製造方法により粉末ドリンクを製造した。高血圧の傾向にあるヒトが該粉末タイプのドリンクをお湯、水または低脂肪乳などに溶かして飲むことができ、また、薬としてではなく、食間の飲料として日常的、恒常的に飲みやすいものであった。
【００４０】
【表２】
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】本発明の爆砕発酵処理バガスと未処理バガスについて、ＸＡＤ−２（合成吸着剤）使用における各溶媒による分画物のＡＣＥ阻害活性測定の結果を示す図である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アンジオテンシンＩをアンジオテンシンIIに変換させるアンジオテンシン変換酵素の活性を阻害するアンジオテンシン変換酵素活性阻害組成物（ＡＣＥ阻害組成物）及び該阻害剤を含有する機能性食品又は機能性食品素材に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代社会においては、ライフスタイル（運動不足等）の変化や食の欧米化（脂肪過多等）、また、情報機器、制御機器を使うことが多い仕事や営業等の仕事の過多からくる強いストレス等の影響により、高血圧の症状をもつヒトが増加している。
【０００３】
高血圧症は、自覚症状が無く、放置すると心臓病、脳血管障害といった重大な疾患を二次的に引き起こす疾病であり、高血圧症の治療及び予防が大きな課題となっている。高血圧症には昇圧系であるレニン−アンジオテンシン系を司るアンジオテンシンI変換酵素（Angiotensin I Converting Enzyme 、以下ＡＣＥという）が深く関与することが知られている。ＡＣＥの作用により、アンジオテンシンIのＣ末端ジペプチドＨｉｓ−ｌｅｕがはずれて、活性を有するアンジオテンシンIIを生成する。アンジオテンシンIに生理活性がないのに対して、アンジオテンシンIIには強力な血管収縮作用、すなわち昇圧作用がある。また、ＡＣＥはキナーゼIIとも呼ばれ、強力な血管拡張作用のあるブラジキニン（ｂｒａｄｙｋｉｎｉｎ）を分解して昇圧に働く。したがって、これらの作用を有するＡＣＥを阻害することにより高血圧を予防ないし治療することが可能である。
【０００４】
ＡＣＥ変換酵素を阻害する薬剤をＡＣＥ変換酵素阻害薬又はＡＣＥ阻害剤といい、このような作用を有する医薬製剤としてメチルドバ、ヒドララジン、クロニジン等が知られているが、高血圧の予防ないし治療は長期間摂取することが必要となるため、副作用が極めて低いことも重要な要因となる。そのため、高血圧を予防する原料として、副作用のない可食性の天然物資源を用いて加工、処理し、これを含む機能性食品又は機能性食品素材の開発が求められている。
【０００５】
食経験のある天然物資源を原料とする技術としては、例えば、鰯などの魚類や甲殻類を原料とし、この原料を加水分解した後、酵素を用いてインキュベートして加水分解液を得、その後、加水分解液を濾過、カラムクロマトグラフィー処理等することにより得られたＡＣＥ活性阻害物質（例えば、特許文献１及び２参照）や、大豆蛋白を原料とし、蛋白質分解酵素を用いて分解し、その後、濾過し、ゲル濾過、イオン交換性ゲル濾過等により分離取得したＡＣＥ活性阻害物質（例えば、特許文献３〜５参照）や、原料体（各種の食品蛋白質）に麹菌を接種して製麹し、この製麹処理による生成物に加水することにより加水分解して、前記原料体中にアンジオテンシン変換酵素阻害物質を生成せしめるアンジオテンシン変換酵素活性阻害物質を含有する生成物の製造方法（例えば、特許文献６参照）が知られている。
【０００６】
また、Ｊａｔｏｂａ（Ｈｙｍｅｎａｅａ ｃｏｕｒｂａｒｉｌ）の実の殻、グアバの葉、ムラヤコエンジ、オオバナサルスベリ、桑葉、西河柳、仙鶴草、ミサキノハナの抽出物、コンキオリン、コンキオリン加水分解物を無水コハク酸で処理した物の１種以上を配合した、高血圧症の予防、改善作用を有するアンジオテンシン変換酵素阻害剤および抗高血圧食品（例えば、特許文献７参照）や、シイタケ、レイシ、マイタケ、アガリクス、およびフサハリタケよりなる群から選択されるキノコの抽出物をサモアーゼまたはブロメラインで処理することによって得られる、アンジオテンシン変換酵素阻害剤（例えば、特許文献８参照）が知られている。
【０００７】
さらに、ローヤルゼリー由来の蛋白質をAspergillus oryzae由来のプロテアーゼで加水分解する特定のアミノ酸配列を有するアンジオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチドを含む、味のよい蛋白分解物の製造方法（例えば、特許文献９参照）が知られている。
【０００８】
しかしながら、食経験のある天然資源を利用するとしても、原料を、コスト面や流通面からみて、かつその一定量を恒常的に入手することができるものは限られており、これらを満足する原料を処理して得られるＡＣＥ阻害剤や、この作用を有する機能性食品は知られていない。
【０００９】
【特許文献１】特開平３−１１０９７号公報
【特許文献２】特開平４−７４１２６号公報
【特許文献３】特開平３−１６７１９８号公報
【特許文献４】特開平４−７４１２７号公報
【特許文献５】特開平４−２９９９９１号公報
【特許文献６】特開平７−２８９２８１号公報
【特許文献７】特開２００４−１８９６６２号公報
【特許文献８】特開２００６−２５７００７号公報
【特許文献９】特開２００５−２８１１４５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、副作用がなく安全性の高い、かつ経済的に安価で容易に入手し得る天然資源を利用した高血圧の予防・治療のためのＡＣＥ阻害組成物やＡＣＥ阻害作用を備えた機能性食品又は機能性食品素材を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、サトウキビの絞りカスであるバガスの有効利用について鋭意研究しており、その製造方法として、バガスを蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理バガスに発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、原料となる蒸煮爆砕処理バガスの一部を用いて製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に蒸煮爆砕処理バガスを混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵して爆砕発酵処理バガスを得る方法を開発し、先に出願（特願２００５−１４３３２７号）した。そして、得られた爆砕発酵処理バガスには、キシロビオースとキシロトリオ−ス等のキシロオリゴ糖、フェルラ酸等の抗酸化性物質、食物繊維に富むものであった。このように爆砕発酵処理バガスは、糖類、抗酸化性物質及び食物繊維を含有することから、医薬又は有用な食品素材として利用可能性の高いことが推察された。本発明者らは、さらに、研究を進め、爆砕発酵処理バガスにヒトメタボリックシンドローム改善作用、糖尿病を含むヒトメタボリックシンドローム改善作用、ヒト用抗酸化作用のあることを確認し、先に出願（特願２００６−２４０３３２号）した。その後、それ以外の種々の医薬効果について鋭意検討した結果、上記バガスにヒトの降圧作用に関連するＡＣＥ阻害活性を有することが認められ、本発明を完成するに至った。
【００１２】
すなわち本発明は、（１）ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を有効成分とすることを特徴とするＡＣＥ阻害組成物や、（２）ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする上記（１）記載のＡＣＥ阻害組成物や、（３）爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有することを特徴とする上記（１）又は（２）記載のＡＣＥ阻害組成物や、（４）爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上含有することを特徴とする上記（３）記載のＡＣＥ阻害組成物に関する。
【００１３】
また本発明は、（５）爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有することを特徴とする上記（１）〜（４）のいずれか記載のＡＣＥ阻害組成物や、（６）ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を含有し、ＡＣＥ阻害活性の改善作用を有するものであることを特徴とし、ＡＣＥ阻害活性改善のために用いられる旨の表示を付した機能性食品又は食品素材や、（７）ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする上記（６）記載の機能性食品又は食品素材や、（８）ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を添加した食品又は食品素材を、ＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材として使用する方法に関する。
【００１４】
さらに本発明は、（９）ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維をＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材の配合剤として使用する方法や、（１０）ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を食品又は食品素材に添加することを特徴とするＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材を製造する方法や、（１１）ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする上記（８）〜（１０）のいずれか記載の方法に関する。
【発明の効果】
【００１５】
本発明の爆砕発酵処理食物繊維を含有する組成物は、何ら副作用を伴うことなくＡＣＥ阻害活性作用に顕著な効果を奏することができ、また、黒糖に似たフレーバーを有するので、食品に添加して前記作用を有する一般食品として食することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本発明のＡＣＥ阻害組成物としては、ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を含有する組成物であれば、発酵処理後の液状物やその乾燥物など特に制限されるものではなく、上記ヘミセルロース含有植物資源としては、サトウキビから砂糖を製造する過程で複製されるサトウキビの圧搾カスであるバガスの他、イネやトウモロコシの芯、木等の不溶性キシランを含む他の植物資源を挙げることができる。以下、ヘミセルロース含有植物資源としてバガスを用いた場合を例にとって説明する。
【００１７】
ヘミセルロース含有植物資源としてバガスを用いた場合、本発明の爆砕発酵処理食物繊維を爆砕発酵処理バガスといい、かかる爆砕発酵処理バガスは、バガスを蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵する方法により得られることになる。
【００１８】
上記蒸煮爆砕処理としては、耐圧反応容器内で、高温・高圧の水蒸気によりバガスを蒸煮し、キシランをある程度加水分解させた後、耐圧反応容器に設けられたバルブを一気に開放し、瞬間的に大気圧に放出する処理であれば特に制限されず、この蒸煮爆砕処理により、加水分解による化学的反応と、水の断熱膨張による物理的反応の相乗効果によって、バガスを粉砕することができる。この蒸煮爆砕処理条件としては、１．０Ｍｐａ〜３．０Ｍｐａで３０秒〜１０分、好ましくは２．０Ｍｐａ〜２．８Ｍｐａで１〜５分、より好ましくは２．４Ｍｐａ〜２．６Ｍｐａで６０〜８０秒を例示することができる。また、バガスをあらかじめ粉砕処理した後、蒸煮爆砕処理を行うことが好ましく、粉砕の程度としては、平均粒径２〜５ｍｍ、特に３〜４ｍｍ、中でも３．５ｍｍの長さに粗粉砕することが好ましい。
【００１９】
蒸煮爆砕処理されたバガスは発酵基質と混合されるが、かかる発酵基質としては、小麦フスマ、米ヌカ、廃糖蜜等を例示することができるが、小麦フスマが好ましい。例えば、発酵基質として小麦フスマを用いる場合、蒸煮爆砕処理されたバガス１００重量部に対して、小麦フスマを１〜５０重量部、好ましくは１０〜５０重量部、より好ましくは４０〜４５重量部配合することができる。製麹にあたっては、この混合物に加水して、水分含量を調整することが必要であり、水分含量が４０〜６０％、好ましくは４５〜５５％、より好ましくは約５０％になるように加水する。
【００２０】
製麹に使用する麹菌としては、通常の製麹に用いられる麹菌を挙げることができ、具体的には、アスペルギルス・オリゼー（Aspergillus oryzae）、アスペルギルス・ソーヤ（Aspergillus sojae）等を例示することができる。使用する麹菌としては、キシロオリゴ糖を多く含有する食品素材を得ることができることから、高キシラナーゼ活性を有する株が好ましい。このキシラナーゼによりヘミセルロースからキシロオリゴ糖が産生される。高キシラナーゼ活性株の調製方法として、紫外線や変異誘発剤を用いた変異株の調製方法も利用しうるが、安全性の点で単胞子分離を実施して得られる自然変異株が好ましい。キシラナーゼ活性は、キシランから４０℃で１分間に１μｍｏｌのキシロースを遊離する活性を１単位として定義し、その測定方法としては、公知方法を利用することができる。高キシラナーゼ活性を有する麹菌としては、この条件により、０．３５単位／ｇ以上であることが好ましい。また、キシロオリゴ糖の中でも、キシロビオースやキシロトリオースを主として含むものが、キシロオリゴ糖の中でも胃酸に対する抵抗性が他のオリゴ糖に比べて高く、分解されず腸内に到達することから好ましい。爆砕発酵処理バガスに含有されるキシロビオースやキシロトリオースを主成分とするキシロオリゴ糖は、整腸作用等の観点から、３．９％以上が好ましく、かかるキシロビオースやキシロトリオースを主とするキシロオリゴ糖を３．９％以上含む爆砕発酵処理バガスを製造するため、麹菌として、アスペルギルス・ソーヤ（ＮＦＲＩ１１４７）から単胞子分離を実施して得られるキシラナーゼ活性の高い麹菌を用いることが好ましい。製麹は、２８〜３２℃、特に３０℃で５〜７日培養することにより行うことが好ましい。
【００２１】
次いで、製麹した麹を水に分散し、この麹分散液に前記蒸煮爆砕処理バガスを混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵する。麹分散液に混合する蒸煮爆砕処理物として、製麹に用いた蒸煮爆砕処理物の５〜１０倍量、好ましくは８〜９倍量を用いることができる。麹分散液に蒸煮爆砕処理バガスを混合した混合物に加水して、水分含量を調整することが必要であり、水分含量が４０〜６０％、好ましくは４５〜５５％、より好ましくは略５０％になるように加水する。発酵は、２８〜３２℃、特に３０℃で４８〜７２時間培養することにより行うことが好ましい。発酵後、発酵停止処理を実施することが、過発酵防止の点で好ましい。かかる発酵停止処理としては、８０〜１００℃の蒸気に３０分間暴露する方法を具体的に例示することができる。
【００２２】
上記爆砕発酵処理バガスとしては、乾燥品が好ましく、特に乾燥微粉末が好ましい。この乾燥微粉末の平均粒径としては、１ｍｍ以下、好ましくは５００μｍ以下、より好ましくは２００〜３００μｍを好適に例示することができる。また、本発明の製造方法によって得られる爆砕発酵処理バガスとしては、キシロビオースやキシロトリオースを主成分とするキシロオリゴ糖を３．９％以上含有するものや、フェルラ酸等の抗酸化活性物質を含有して抗酸化活性を示すものや、酵素法により測定した食物繊維を５０重量％以上含むものが好ましい。
【００２３】
次に、爆砕発酵処理食物繊維（爆砕発酵処理バガス）としては、食物繊維を５０重量％以上含有するものや、食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上、好ましくは１％以上、より好ましくは２％以上、中でも３％以上、特に３．９％以上含有するものや、食物繊維を５０重量％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有するものや、食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上、好ましくは１％以上、より好ましくは２％以上、中でも３％以上、特に３．９％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有するものが好ましい。
【００２４】
本発明のＡＣＥ阻害組成物が有するＡＣＥ阻害作用とは、アンジオテンシンI変換酵素（Angiotensin I Converting Enzyme 、ＡＣＥ）がアンジオテンシンIのＣ端の２つ目のアミノ酸と３つ目のアミノ酸との間のペプチド結合を水解（Ｃ末端ジペプチドＨｉｓ−ｌｅｕがはずれる）してアンジオテンシンIIを生成するのを阻害する作用を意味する。アンジオテンシンIに生理活性がないのに対して、アンジオテンシンIIには強力な血管収縮作用、すなわち昇圧作用があることから、ＡＣＥ阻害組成物の使用により、ＡＣＥの作用を阻害することができ、その結果、血管収縮作用や昇圧作用を阻止又は減じることができる。
【００２５】
本発明のＡＣＥ阻害組成物は、ＡＣＥ阻害剤として有用であり、サプリメントや医薬品として、あるいは食品に添加・配合して摂取することができる。
【００２６】
本発明の爆砕発酵処理食物繊維を含有するＡＣＥ阻害組成物は、常法により錠剤、顆粒、カプセル、シロップ等製剤化して、健康サプリメントや医薬品として用いることができる。サプリメントや医薬品として用いる場合、それらの分野で通常用いられている賦形剤を配合することが好ましい。また、摂取量は、ヒトの体重、年齢、性別、症状等により異なり、特に症状に応じて１日当たりの投与量を決定するが、長期に服用することもできる。
【００２７】
本発明のＡＣＥ阻害組成物は、含まれる爆砕発酵処理食物繊維（爆砕発酵処理バガス）が、黒糖に似たフレーバーを有し、一般食品に含有してもその食品の風味を損なうことがないので、食品に添加・配合して用いることができ、ＡＣＥ阻害作用を奏する食品を容易に提供することができる。添加される食品としては、例えば、麺類、飴、クッキー、シリアル類、菓子類（スナック類）、ふりかけ類、畜産加工品類、魚肉加工品類、缶詰類、ジュース類、清涼飲料、栄養ドリンク剤等を挙げることができる。
【００２８】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。
【実施例１】
【００２９】
［爆砕発酵処理バガスの製造方法］
（麹菌の選択）
独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 食品総合研究所の保存菌株であるアスペルギルス・ソーヤ（Aspergillus sojae）ＮＦＲＩ１１４７株の単胞子分離を実施し、各単胞子をＰＡＤ培地で生育させ、培養後の培養液中のキシラナーゼ活性を測定することにより、キシラナーゼ活性の高い自然変異株を選択した。３０００ｒｐｍで１０分間の遠心分離後の培養上清１ｇ当たりのキシラナーゼ活性は、単胞子分離を実施する前の０．２５４Ｕから、０．３５１Ｕに上昇した。
【００３０】
上記キシラナーゼ活性の測定は、１％濃度の可溶性キシラン（シグマ社製）を含む１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）０．１ｍｌに、同じ緩衝液に適当に希釈した培養上清０．１ｍｌを加え、３７℃、１０分間反応させ銅試薬１．０ｍｌを添加して反応を停止した。それに０．８ｍｌの同緩衝液を加えて全量を２．０ｍｌとし、生成した還元糖をソモギー・ネルソン（Somogyi-Nelson）法で測定した。すなわち、これを１００℃、１５分間加熱した後、流水で急冷し次いでネルソン液１．０ｍｌを加え室温で２０分間静置して発色させた。そこへ、純水７．０ｍｌを加えて不溶物を遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分間）により除去した後、５００ｎｍの吸光度を測定した。還元糖量は、キシロースを同様の系で測定して作成した検量線により求めた。なお、培養上清を加える前に銅試薬をあらかじめ加えて同様に発色させたものをブランクとした。また酵素活性単位は、１分間に１ｍｍｏｌの還元糖（キシロースとして）を生成する酵素量を１単位（Ｕ）とした。
【００３１】
（製麹工程）
乾燥バガス粉砕機を用いて平均粒径３．５ｍｍの長さに粗粉砕し、反応釜（オートクレーブ）内に収容した後、反応釜に加熱水蒸気を送り込み、２．５Ｍｐａ（２２０℃），７０秒間の蒸煮処理を行った後、反応釜から急激に水蒸気を排出し、圧力を瞬時に大気圧にまで戻すことにより爆砕処理を行った。この蒸煮爆砕処理を行ったバガス３５ｋｇに小麦フスマ１５ｋｇを混合し、水５０Ｌを加水して水分が約５０重量％となるように調整した後、単胞子分離により選択した麹菌を接種し、３０℃、６日間培養して麹を製造した。
【００３２】
（発酵工程）
この製麹した麹を水７０Ｌに分散し、麹の製造で用いた爆砕処理したバガス３００ｋｇに混合した。そして、水分が全体の５０重量％となるように加水し調整した後、３０℃、６０時間の発酵処理した後、８０〜１００℃の蒸気に３０分間暴露して発酵停止処理を行った。この発酵処理物をディスク型乾燥機（月島機械社製）を用い、乾燥温度８０〜１００℃（品温）で乾燥した後、微粉砕処理をして、平均粒径２５０μｍの爆砕発酵処理バガスとした。この爆砕発酵処理バガスの栄養組成を表１に示す。
【００３３】
【表１】
【００３４】
表１に示されるように、爆砕発酵処理バガスは食物繊維に富み、キシロビオースとキシロトリオ−スを約４％含んでいる。なお、キシロビオースやキシロトリオ−スのキシロオリゴ糖の測定は、ＤＸ−５００を用いＨＰＬＣ法（日本ダイオネクス社製）に則り測定した。また、別法として、同じＨＰＬＣ法であるが、カラム：Biorad Aminex Carbohydrate HPX-42A 300×7.8、flow rate１．０ｍｌ／ｍｉｎで移動相を水とし、カラム温度８０℃にて測定した。
【実施例２】
【００３５】
［阻害活性試験］
（サンプルの調製）
実施例１により製造された爆砕発酵処理バガスと対照例として用いた未処理バガスとの各サンプル１０ｇを取り、１０倍量の８０％エタノールを加えて１００ｍＬとした。１２時間静置後、抽出後ろ過し、残渣に同じく１０ｍＬの８０％エタノールを加え、再度１２時間静置抽出し、ろ過して分画前サンプルとした。合成吸着剤であるＸＡＤ−２を用いて、前記の爆砕発酵処理バガス８０％エタノール抽出物及び未処理のバガス８０％エタノール抽出物について、水、種々の濃度のメタノール及びアセトンの順序で、それぞれ６００ｍＬずつ使用し分画を行った。それによって、水画分、２５％メタノール画分、５０％メタノール画分、７５％メタノール画分、１００％メタノール画分、アセトン画分が得られた。
【００３６】
（ＡＣＥ阻害活性）
得られた水抽出物は蒸留水に、それ以外については５０％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）にそれぞれ濃度が２０ｍｇ／ｍＬになるように溶解し、試験に供した。各サンプル１５μＬとＡＣＥ５０μＬを混合後、３７℃で５分間プレインキュベートし、その後塩化ナトリウムを含むホウ酸緩衝液に溶解した基質（Hippuryl-L-histidyl-L-leucine）１２５μＬを添加して３７℃、３０分間反応させた。反応後、１０％ＴＦＡを２０μＬを加え反応を停止させた。反応停止後、ＨＰＬＣにより生成した各馬尿酸量（Hippuric-acid）を測定し、コントロールとして水を用いた場合をＡＣＥ活性１００％とした結果を図１に示す。
【００３７】
図１に示すように、分画前では、発酵バガスは未処理バガスより若干強い活性が確認でき、分画後では、７５％及び１００％メタノール画分において未処理バガスより強い活性が確認できた。以上より、バガスを爆砕発酵処理することでＡＣＥ阻害活性が増加することが明らかにされた。
【００３８】
以上のとおり、高血圧の症状を有するヒトが、本発明に係る爆砕発酵処理バガスを摂取することにより、高血圧の症状を改善するのに有効であることがわかった。
【実施例３】
【００３９】
（ドリンク）
本発明の醗酵バガス末と他の原料を、表２記載の配合量で、常法の製造方法により粉末ドリンクを製造した。高血圧の傾向にあるヒトが該粉末タイプのドリンクをお湯、水または低脂肪乳などに溶かして飲むことができ、また、薬としてではなく、食間の飲料として日常的、恒常的に飲みやすいものであった。
【００４０】
【表２】
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】本発明の爆砕発酵処理バガスと未処理バガスについて、ＸＡＤ−２（合成吸着剤）使用における各溶媒による分画物のＡＣＥ阻害活性測定の結果を示す図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を有効成分とすることを特徴とするＡＣＥ阻害組成物。
【請求項２】
ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする請求項１記載のＡＣＥ阻害組成物。
【請求項３】
爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有することを特徴とする請求項１又は２記載のＡＣＥ阻害組成物。
【請求項４】
爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上含有することを特徴とする請求項３記載のＡＣＥ阻害組成物。
【請求項５】
爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有することを特徴とする請求項１〜４のいずれか記載のＡＣＥ阻害組成物。
【請求項６】
ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を含有し、ＡＣＥ阻害活性の改善作用を有するものであることを特徴とし、ＡＣＥ阻害活性改善のために用いられる旨の表示を付した機能性食品又は食品素材。
【請求項７】
ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする請求項６記載の機能性食品又は食品素材。
【請求項８】
ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を添加した食品又は食品素材を、ＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材として使用する方法。
【請求項９】
ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維をＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材の配合剤として使用する方法。
【請求項１０】
ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を食品又は食品素材に添加することを特徴とするＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材を製造する方法。
【請求項１１】
ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする請求項８〜１０のいずれか記載の方法。
【請求項１】
ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を有効成分とすることを特徴とするＡＣＥ阻害組成物。
【請求項２】
ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする請求項１記載のＡＣＥ阻害組成物。
【請求項３】
爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有することを特徴とする請求項１又は２記載のＡＣＥ阻害組成物。
【請求項４】
爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを０．５％以上含有することを特徴とする請求項３記載のＡＣＥ阻害組成物。
【請求項５】
爆砕発酵処理食物繊維が、食物繊維を５０重量％以上含有し、１００ｇ中にフェルラ酸を１ｍｇ以上含有することを特徴とする請求項１〜４のいずれか記載のＡＣＥ阻害組成物。
【請求項６】
ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を含有し、ＡＣＥ阻害活性の改善作用を有するものであることを特徴とし、ＡＣＥ阻害活性改善のために用いられる旨の表示を付した機能性食品又は食品素材。
【請求項７】
ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする請求項６記載の機能性食品又は食品素材。
【請求項８】
ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を添加した食品又は食品素材を、ＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材として使用する方法。
【請求項９】
ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維をＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材の配合剤として使用する方法。
【請求項１０】
ヘミセルロース含有植物資源を蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理物に発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理物を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することにより得られる爆砕発酵処理食物繊維を食品又は食品素材に添加することを特徴とするＡＣＥ阻害活性改善用の食品又は食品素材を製造する方法。
【請求項１１】
ヘミセルロース含有植物資源がバガスであることを特徴とする請求項８〜１０のいずれか記載の方法。
【図１】
【公開番号】特開２００８−１２０７３９（Ｐ２００８−１２０７３９Ａ）
【公開日】平成２０年５月２９日（２００８．５．２９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−３０７１６３（Ｐ２００６−３０７１６３）
【出願日】平成１８年１１月１３日（２００６．１１．１３）
【出願人】（３９７０３１７８４）株式会社琉球バイオリソース開発 (21)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年５月２９日（２００８．５．２９）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１１月１３日（２００６．１１．１３）
【出願人】（３９７０３１７８４）株式会社琉球バイオリソース開発 (21)
【Ｆターム（参考）】
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