本発明は、分子及び細胞生物学、並びに生化学に関する。一つの態様において、本発明は、セルラーゼ活性、例えばエンドグルカナーゼ、セロビオヒドロラーゼ、マンナナーゼ及び／又はβ−グルコシダーゼ活性を有するポリペプチド、これらのポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、並びにこれらのポリヌクレオチド及びポリペプチドを作製する及び使用する方法を提供する。一つの態様において、本発明は、熱安定及び耐熱活性を含む、セルラーゼ活性、例えばエンドグルカナーゼ、セロビオヒドロラーゼ、マンナナーゼ及び／又はβ−グルコシダーゼ活性を有するポリペプチド、これらの酵素をコードするポリヌクレオチド、並びにこれらのポリヌクレオチド及びポリペプチドを作製及び使用する方法を対象とする。本発明のポリペプチドは、多様な薬学、農業、食物及び飼料加工、並びに産業の状況で使用することができる。
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【課題】 本発明は、表皮の不全角化のメカニズムを解明することで、従来技術とは異なる全く新規なアプローチで表皮不全角化の抑制・治療手段を開発することを課題とする。
【解決手段】 本発明は、扁平上皮細胞癌関連抗原−１（Squamous Cell Carcinoma Antigen Type 1、以下「ＳＣＣＡ−１」と称す）が保有するシステインプロテアーゼ阻害活性を抑制する候補物質の活性を指標とする、表皮不全角化を抑制する物質のスクリーニング方法、そのような方法によりスクリーニングされた表皮不全角化を抑制する物質、そしてさらには表皮細胞中のＳＣＣＡ−１のカスパーゼ−14阻害活性を抑制することで、表皮細胞の角化の正常化を図り、表皮不全角化を抑制する方法を提供する。 （もっと読む）

生物学的活性ペプチドとの組み合わせで、該生物学的活性ペプチドのイン・ヴィヴォでのプロテアーゼ消失半減期を増大させることが可能なペプチド安定化化合物が提供される。前記ペプチド安定化化合物は、好ましくは、生物学的活性ペプチドとの抱合時に、タンパク分解に対する耐性を与えるペプチド配列として構成される。又、イン・ヴィトロ生成ライブラリーから新規なタンパク分解耐性化合物を選択するための方法と、それによって同定される安定化化合物を含む薬用組成物も提供される。
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本発明は、ヘキソキナーゼVのモジュレーターを同定する方法を提供する。そのようなモジュレーターは、糖尿病の処置のために、または糖尿病の発症を遅らせるために、用いられうる。本発明はまた、ヘキソキナーゼV核酸およびタンパク質の検出に基づいて、糖尿病または前糖尿病を診断する方法ならびに予測を行う方法を提供する。
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【課題】 恐怖体験に対する心的障害の発生を防止する向精神薬や、空間認知、記憶に関する能力を高める向精神薬の開発等に利用できるＰＫＮ１ａノックアウト動物、及び向精神薬のスクリーニング方法などを提供すること。
【解決手段】 本発明は、相同染色体上のＰＫＮ１ａ遺伝子を破壊することによって、ＰＫＮ１ａの発現が抑制されたノックアウト動物等を提供する。作製したＰＫＮ１ａノックアウトマウスは、行動検査において恐怖学習能の低下に加えて空間記憶能の亢進が認められるなど、ユニークな特徴を有するマウスであった。また、ＰＫＮ１ａを阻害もしくは活性化する物質の探索は、向精神薬のスクリーニング方法として有用である。 （もっと読む）

随意に関心タンパク質と融合させた変異ヒドロラーゼが提供される。この変異ヒドロラーゼは、対応する非変異(野生型)ヒドロラーゼの基質と、野生型ヒドロラーゼと該基質の間で形成される結合よりも安定した結合を形成することができるし、また野生型ヒドロラーゼと比べて2つのアミノ酸置換を含む。1つまたは複数の機能性基を含むヒドロラーゼ基質もまた、本発明の変異ヒドロラーゼと基質の使用方法と共に、提供される。基質と安定した結合を形成しうる融合タンパク質、それに該融合タンパク質を発現する細胞もまた提供される。
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本発明は、ＡＤＡＭ−ＴＳプロテアーゼの活性を測定するための基質としての、式Ｒ−（Ｘａａ）_n−Ｐｒｏ−Ｘ−Ｇｌｙ−Ｓ−Ｙ−Ｚ−Ｇｌｙ−（Ｘａａ）_m−Ｒ₁（Ｉ）で示されるチオペプトリドの使用、およびＡＤＡＭ−ＴＳプロテアーゼ調節因子、より詳しくは阻害剤を発現する方法に関する。 （もっと読む）

本発明は、環状ヌクレオチドcGMPおよびcAMPの細胞内濃度の光学的定量解析の方法であって、ある種のCNGチャンネル、カルシウム感受性発光タンパク質、および調節物質を発見しようとする別の標的タンパク質を組み合わせて組換え手法により発現する細胞株を使用する方法、に関する。このように改変された細胞株は、ハイスループットスクリーニング（HTSおよびuHTS）に適し、環状ヌクレオチドcGMPおよびcAMPの合成および分解に関与する受容体または酵素の活性に影響する医薬を同定するために使用することができる。
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可能性のある治療剤の同定方法であって、比較的高いｐＨと比較的低いｐＨでアデノシン受容体に対する試験化合物の親和性および／または有効性を決定することを含む。低いｐＨでより高い親和性および／または有効性を有する化合物が、特に、疼痛または炎症の処置のための可能性のある治療剤として同定される。 （もっと読む）

【課題】タンパク質のリン酸化を測定するための方法を提供する。
【解決手段】標的タンパク質のインビトロでのリン酸化を含むが、それは、このタンパク質（非リン酸化）を、タンパク質のリン酸化形態の作製を可能にするホスホキナーゼを含むすべての試薬を含んでなる反応混合物とすることを条件とする。このリン酸化タンパク質は、このリン酸化部位に特異性を持つ抗体との接合によって測定する。測定に有用な抗体を含む。特に、タウタンパク質、Ｒｂタンパク質およびＥＧＦＲタンパク質のリン酸化、ならびにタウタンパク質、Ｒｂタンパク質またはＥＧＦＲタンパク質のリン酸化の部位に特異性を持つ抗体からなる。 （もっと読む）

【課題】アレイ作製条件や基板のロットなどの変動要因による影響をほとんど回避され、再現性に非常に優れた精度や信頼性の高いプロファイリングデータを得る手法を得る。
【解決手段】複数種のペプチドが固定化されてなるアレイを用いて、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）解析によりキレート化合物を用いてプロテインキナーゼ活性を解析する方法であって、該アレイ上に予めリン酸化されたペプチドが１種以上固定化されてなり、かつアレイ上のリン酸化反応後における固定化された各種ペプチドにおけるＳＰＲシグナル強度と該予めリン酸化されたペプチドにおけるＳＰＲシグナル強度の比の値を算出して対比することを特徴とするプロテインキナーゼ活性のプロファイリング方法。 （もっと読む）

本発明は、配列番号３−４のアミノ酸配列を含む、新規ヒト分泌ポリペプチドを提供する。本発明のポリペプチドは、心臓血管障害の血漿において減少したレベルで循環している。本発明はまたポリペプチド、それらをコードするポリヌクレオチドおよび、これらのポリペプチドに特異的な抗体を含む組成物を提供する。また提供されるのは、このような組成物の製造法、および本発明の組成物の心臓血管障害の診断、予後および処置における使用法である。 （もっと読む）

【課題】材料の生理活性機能を多元かつ多項目にわたり、安全で、効率的で、かつ信頼性高く評価できる高スループット機能性評価方法、装置、プログラムを提供する。
【解決手段】ヒト由来培養細胞に機能性未知材料、例えば食材成分を混ぜる。食材成分に応答した細胞抽出物を被検試料とし、機能性評価能が異なる複数の測定部位を備えた評価系にかける。評価試験では、抗原抗体反応に基づくイムノアッセイにより、各抗体に対応するバイオマーカーの発現量を測定する。得られたバイオマーカー発現量は、機能性既知試料のバイオマーカー発現量と比較したり、あるいは機能性既知試料のバイオマーカー発現量と対応付けされた機能性値に基づき、計算機プログラムを介してその機能性を推定したりすることからなる。好適な評価機能性未知材料には、食材を含む生物資源、その他の化学物質を挙げることができる。 （もっと読む）

本発明は、ｓｇｋ１（血清および糖質コルチコイド依存性キナーゼ１）の診断用の測定のための物質の利用と、組織因子の活性阻害に関連した疾患の治療的処置のためにｓｇｋ１に影響を与えるための活性薬剤の利用と、それに関連する診断用キットとに関する。 （もっと読む）

本発明は、基転移反応における供与体生成物および該供与体生成物を産生させる触媒活性の検出、定量および高処理量スクリーニング方法に関する。本発明は、さらに、本発明の方法を実施するのに使用することができるイムノアッセイ法、抗体およびキットも提供する。
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本発明ではヒトの自閉症感受性遺伝子の同定が開示されており、該遺伝子は医薬的に活性な薬剤のスクリーニングの他、自閉症および関連する障害の診断、予防、治療に有用となりうる。本発明ではより具体的には、１番染色体上のＭＡＲＫ１およびその特定の対立遺伝子が自閉症への感受性と関連しており、治療的診断の新しい標的を示していることが開示されている。本発明は、ＭＡＲＫ１遺伝子内の特定の突然変異および発現産物、そしてこれらの突然変異に基づいた診断ツールおよびキットと関連する。本発明は、アスペルガー症候群、広汎性発達障害、精神遅滞、心配、憂うつ、注意不足活動過多症障害、発語の遅れ、てんかん、代謝異常、免疫障害、双極性疾患および精神分裂症などの他の精神疾患および神経疾患の素因の診断、発見、予防および／または治療に使用可能である。 （もっと読む）

本明細書中には、それらが切断する標的分子について変化した特異性を有するプロテアーゼを生成するための方法が開示される。本発明はさらに、標的タンパク質が関係している疾患を処置するためにこれらのプロテアーゼを用いる方法を開示する。プロテアーゼを用いた特定の基質配列での特定の標的タンパク質の切断は、これらの病状を処置するための方法である。基質配列を切断するプロテアーゼを同定する方法が提供される。この方法は、プロテアーゼ配列のライブラリーを生成する工程であって、該ライブラリーの各メンバーが、野生型骨格配列に対してＮ個の変異を有するプロテアーゼ骨格を有する、工程；該基質配列を切断する際における該ライブラリーの各メンバーの活性を測定する工程；および各メンバーの該活性を該ライブラリーの平均活性に対して比較する工程であって、それによりどのプロテアーゼが最も高い切断活性を有するかを同定する、工程を包含する。
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本発明は、アンモニア生産酵素の活性を決定する方法、および、このような酵素の活性を調節することができる化合物を同定する方法を提供する。 （もっと読む）

迅速な酵素駆動式アッセイ法を実施するための側方流動クロマトグラフィーアッセイ形式を記載する。意図された試料には存在しないか、または所望の反応を完了させるには不十分にそこに存在する、特異的酵素反応を誘発するために必要な構成成分の組合せは、乾燥型の基質として、所望の反応の発生時に所望の色を形成するのに必要な成分と共に、予め沈着されている。ストリップには、 液体試料が適用された、流動流中の基質沈着の前方に配置された試料パッドが装着されている。この試料は、試料パッドから基質ゾーンへと流動し、そこで直ちに、乾燥成分を再構成すると同時に、それらを密に混合し、それらと流体最前部で反応する。流体最前部は、迅速に最終「リードゾーン」へ移動し、そこで発色した色は、所望の反応について予め決定された色標準に対して読みとられる。必要ならば、試料の前処理パッド(例えば、全血中の赤血球溶解のための溶解パッド)が、適宜流路中の試料パッドの最前部に配置される。本発明の形式のアッセイ法は、類似の湿式化学アッセイ法よりも、迅速かつ容易に行うことができる。グルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ(「G-6PD」)、総血清コレステロール、β-ラクタマーゼ活性およびペルオキシダーゼ活性に関する特異的アッセイ法を開示する。 （もっと読む）

本発明は、リパーゼ活性またはホスホリパーゼ活性をインビトロで検出および／または測定する方法に関する。前記方法は、リパーゼまたはホスホリパーゼを含有している可能性のある試料を、前記リパーゼまたは前記ホスホリパーゼによって加水分解されてα−エレオステアリン酸を遊離可能な脂質基質の層で被覆した微量滴定プレートのウェルに添加すること；および前工程中に遊離されたα−エレオステアリン酸のＵＶスペクトルを測定することによって、リパーゼ活性またはホスホリパーゼ活性を検出および／または測定することからなることを特徴とする。また、本発明は、血漿リパーゼ濃度の上昇に関連する病理をインビトロ診断する、前記方法の使用に関する。
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