シリビン配糖体水溶液及び皮膚外用組成物
【課題】着色安定性に優れたシリビン配糖体溶液を開発する
【解決手段】ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−ペンタンジオール、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、１，３−ブタンジオールからなる群から選ばれる１種又は２種以上とシリビン配糖体を含有するシリビン配糖体水溶液。
【解決手段】ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−ペンタンジオール、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、１，３−ブタンジオールからなる群から選ばれる１種又は２種以上とシリビン配糖体を含有するシリビン配糖体水溶液。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シリビン溶解技術及びその溶解液の利用技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
シリマリンはＩ型コラーゲン産生促進作用、エラスチン産生促進作用（特許文献１：ＷＯ２００４／８５４２９号公報）、表皮細胞分化抑制作用（特許文献２：特開２００４−９１３９７号公報）、光老化防止作用（特許文献３：特開２００６−２６５１８６号公報）、異常タンパク質除去作用（特許文献４：特開２００７−９９６５０号公報）を有することが知られている。
一方、シリビンは、水、油にはほとんど溶解しないため、皮膚外用剤等の組成物に配合し難いという課題点を有しており、多価アルコール、界面活性剤、強塩基を用いて分散する技術（特許文献５：特開２００６−８９４１８号公報）、リン脂質、ポリグリセリン脂肪酸エステル、グリセリンを用いて分散する技術（特許文献６：特開２００６−２８２５６８号公報）が開示されている。
しかしながら、これらの技術を用いると処方設計上の制約がある。
シリビンのグルコース配糖体、ガラクトース配糖体、ラクトース配糖体、マルトース配糖体が、シリビンと比べて水溶性に優れることが知られている（非特許文献１：Kosina P.et al.,Phytother. Res. 16,S33-S39(2002)参照）。
【０００３】
本出願人は、シリビン配糖体の研究を継続しており、シリビン配糖体を含有し、シワ形成抑制効果、表皮角化細胞分化抑制効果、Ｉ型コラーゲン産生促進効果を有する皮膚外用組成物を特許出願している（特願２００８−１４３６１）。
本発明者は、シリビン配糖体を皮膚外用剤に配合した際に、シリビン配糖体溶液の経時的な褐変の問題に直面した。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第２００４／８５４２９号公報
【特許文献２】特開２００４−９１３９７号公報
【特許文献３】特開２００６−２６５１８６号公報
【特許文献４】特開２００７−９９６５０号公報
【特許文献５】特開２００６−８９４１８号公報
【特許文献６】特開２００６−２８２５６８号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Kosina P.et al.,Phytother. Res. 16,S33-S39(2002)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、着色安定性に優れたシリビン配糖体溶液を開発することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の主な構成は、次のとおりである。
１．ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−ペンタンジオール、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、１，３−ブタンジオールからなる群から選ばれる１種又は２種以上とシリビン配糖体を含有することを特徴とするシリビン配糖体水溶液。
２．シリビン配糖体を、ポリオキシプロピレン基を有する化合物を含有する水溶液に溶解したことを特徴とするシリビン配糖体水溶液。
３．ポリオキシプロピレン基を有する化合物が、ポリオキシプロピレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリオキシプロピレンメチルグルコシド、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン、ポリオキシプロピレングリセリルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシプロピレンソルビトールからなる群から選ばれる１種又は２種以上であることを特徴とする２．記載のシリビン配糖体水溶液。
４．シリビン配糖体がシリビンマルトシドであることを特徴とする１．〜３．のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液。
５．１．〜４．のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液を含有する皮膚外用剤。
６．１．〜４．のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液を含有するシワ形成抑制剤。
【発明の効果】
【０００８】
ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−ペンタンジオール、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、１，３−ブタンジオールのいずれかを配合することにより、経時的な褐変を抑えることができる安定したシリビン配糖体水溶液を実現することができた。また、ポリオキシプロピレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリオキシプロピレンメチルグルコシド、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン、ポリオキシプロピレングリセリルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシプロピレンソルビトールなどのポリオキシプロピレン基を有する化合物を配合することにより、経時的な褐変を抑えることができる安定したシリビン配糖体水溶液を実現することができた。
安定した長期保存及び透明性に優れたシリビン高濃度水溶液が実現できたので、水溶液を使用した皮膚外用剤や化粧料などの剤型へ、実用的な適用範囲を拡大することができた。
即ち、
１．溶解性の高いシリビン配糖体を用いることにより、シリビンの作用機序を向上させた皮膚外用組成物、シワ形成抑制剤、表皮角化細胞分化抑制剤、老化防止用皮膚外用組成物、Ｉ型コラーゲン産生促進剤、日焼けによる肌荒れ改善剤を提供することが可能となった。特に、水溶解性が高く、安全性、低刺激性、使用範囲が向上する。
２．特に、シリビン配糖体として、化学式（１）に示されるシリビンマルトシドが有効である。
３．本発明で用いるシリビン配糖体は水溶性が高く、水溶液タイプの剤型として利用できる。化粧水、ジェル状美容液、乳液、クリーム、パック等の皮膚外用組成物、メイクアップベースローション、メイクアップクリーム、乳液状又はクリーム状のファンデーションといったメイクアップ皮膚外用組成物、ハンドクリーム、レッグクリーム、ボディローション等の身体用皮膚外用組成物、入浴剤等とすることができる。
４．本発明で用いるシリビン配糖体は、乳液やクリームなどでも、水性部分に高配合することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】実施例１における５０℃５ヶ月保存試験による色変化を示すグラフ。
【図２】実施例２における５０℃保存色変化について３０日間推移を示すグラフ。
【図３】実施例３における５０℃３ヶ月保存試験による色変化を示すグラフ。
【図４】表皮角化細胞増殖維持試験結果を示すグラフ。
【図５】Ｉ型コラーゲン産生促進試験結果を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明のシリビン配糖体水溶液は、ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−ペンタンジオール、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、１，３−ブタンジオールのいずれかを含有する水溶液にシリビン配糖体が溶解しているものである。
また、本発明のシリビン配糖体水溶液は、ポリオキシプロピレン基を有する化合物を含有する水溶液にシリビン配糖体が溶解しているものである。ポリオキシプロピレン基を有する化合物としては、例えば、ポリオキシプロピレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリオキシプロピレンメチルグルコシド、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン、ポリオキシプロピレングリセリルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシプロピレンソルビトールが挙げられる。
シリビン（Ｓｉｌｙｂｉｎ；ＣＡＳ Ｎｏ．２２８８８−７０−６）は、キク科マリアアザミ（学名シリバム・マリアナムＳｉｌｉｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ Ｇａｅｒｔｎ、別名オオアザミ、オオヒレアザミ、ミルクアザミ；ＣＡＳ Ｎｏ．８４６０４−２０−６）から抽出されるフラボノリグナンの一種である。マリアアザミから抽出されるフラボノリグナンはシリマリン（Ｓｉｌｙｍａｒｉｎ；ＣＡＳ Ｎｏ．６５６６６−０７−１）の総称で呼ばれ、シリビン以外に、シリジアニン（Ｓｉｌｙｄｉａｎｉｎ；ＣＡＳ Ｎｏ．２９７８２−６８−１）、シリクリスチン（Ｓｉｌｙｃｈｒｉｓｔｉｎ；ＣＡＳ Ｎｏ．３３８８９−６９−９）、イソシリビン（Ｉｓｏｓｉｌｙｂｉｎ；ＣＡＳ Ｎｏ．７２５８１−７１−６）などが含まれている。
シリビンはシリマリンからクロマトグラフィーを用いて単離することが可能であり、また、試薬を購入して入手することが可能である。
【００１１】
本発明に用いるシリビン配糖体は文献（Kren V. et al., J.Chem.Soc.,Perkin Trans 1,2467-2474(1997)）に従って、ルイス酸を触媒として、シリビンにアセチル基で水酸基を保護した糖を結合し、脱アセチル化することにより調製できる。この反応系ではシリマリンの第一級アルコールの水酸基に糖が選択的にグリコシド結合する。
【００１２】
シリビンに、ルイス酸を触媒として、パーアセチルマルトースを反応させてグリコシド結合を生成し、脱アセチル化することにより、式（１）のシリビンマルトシドが得られる。
【００１３】
【化１】
式（１）
【００１４】
具体的には、以下の手順によりシリビンマルトシドを合成できる。
〔シリビンマルトシドの合成〕
Ｈｅｌｆｅｒｉｃｈの方法に従ってシリビンマルトシドを合成した。
シリビン（３．０ｇ、６．２ｍｏｌ）とオクタ−Ｏ−アセチル−Ｄ−マルトース（６．３ｇ、９．２ｍｏｌ）とを１８０ｍｌのジクロロメタン−アセトニトリル（１：１、ｖ／ｖ）の溶媒中で、三フッ化ホウ素ジメチルエーテル錯体（１．１４ｍｌ、１２．４ｍｍｏｌ）を窒素存在下、室温で１９時間攪拌反応させた。反応終了後、氷冷しながら飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、１５０ｍｌジクロロメタンで２回抽出処理し、無水硫酸ナトリウム処理後に抽出溶媒をエバポレーターにて除去した。
トリエチルアミン−メタノール−水（１：８：１）を３５℃３０時間反応させたのち、エバポレーターにより溶媒を除去した。BONDESIL-C18(Varian)を用いて精製を行い、シリビンマルトシド（１．０ｇ, 収率２０％）を得た。得られたシリビンマルトシドをＭＳスペクトルで確認し、［Ｍ＋Ｈ］＋：８０７．５のピークを検出した。
【００１５】
シリビンに、ルイス酸を触媒として、パーアセチルラクトースを反応させてグリコシド結合を生成し、脱アセチル化することにより、式（２）のシリビンラクトシドが得られる。
【００１６】
【化２】
式（２）
【００１７】
具体的には、以下の手順によりシリビンラクトシドを合成できる。
〔シリビンラクトシドの合成〕
Ｈｅｌｆｅｒｉｃｈの方法に従ってシリビンラクトシドを合成した。
シリビン（３．０ｇ、６．２ｍｏｌ）とオクタ−Ｏ−アセチル−Ｄ−ラクトース（６．３ｇ、９．２ｍｏｌ）とを１８０ｍｌのジクロロメタン−アセトニトリル（１：１、ｖ／ｖ）の溶媒中で、三ふっ化ほう素ジメチルエーテル錯体（１．１４ｍｌ、１２．４ｍｍｏｌ）を窒素存在下、室温で１９時間攪拌反応させた。反応終了後、氷冷しながら飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、１５０ｍｌジクロロメタンで２回抽出処理し、無水硫酸ナトリウム処理後に抽出溶媒をエバポレーターにて除去した。
トリエチルアミン−メタノール−水（１：８：１）を３５℃３０時間反応させたのち、エバポレーターにより溶媒を除去した。BONDESIL-C18(Varian)を用いて精製を行い、シリビンラクトシド（１．０ｇ, 収率２０％）を得た。得られたシリビンラクトシドをＭＳスペクトルで確認し、［Ｍ＋Ｈ］＋：８０７．５のピークを検出した。
【００１８】
本発明のシリビン配糖体を有効成分とするシワ形成抑制剤としては、化粧水、乳液、クリーム、パック等のシワ改善用皮膚外用組成物、シワ改善用の医薬部外品、シワ改善用医薬品が挙げられる。乳液やクリームであっても、水性部分にシリビン配糖体を高濃度で配合することができる。
【００１９】
本発明のシリビン配糖体を有効成分とする表皮角化細胞分化抑制剤は、表皮角化細胞の分化を抑制し、増殖を維持し、ターンオーバーの遅延を予防、防止、改善し、加齢や紫外線照射により引き起こされる表皮の偏平化を防ぎ、老化した皮膚を再生する作用を有するので、老化防止用皮膚外用組成物として用いることができる。
本発明の、シリビン配糖体を有効成分とするＩ型コラーゲン産生促進剤は、皮膚のはりや弾力性を向上させ、しわやたるみを予防、防止、改善することが期待できるので、老化防止用皮膚外用組成物として用いることができる。
【００２０】
本発明に用いるポリオキシアルキレンジグリセリルエーテルは、ジグリセリンに酸化アルキレンを付加重合して得られる化合物である。
ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテルとしては、ジグリセリンに酸化プロピレンを付加重合したポリオキシプロピレンジグリセリルエーテル、ジグリセリンに酸化エチレンを付加重合したポリオキシエチレンジグリセリルエーテル等が挙げられる。
ポリオキシプロピレンジグリセリルエーテルは市販品を用いることができる。市販品としては、阪本薬品工業株式会社製ＳＹ−ＤＰ４（表示名称ＰＰＧ−４ジグリセリル：ジグリセリンへの酸化プロピレンの平均付加モル数が４）、ＳＹ−ＤＰ９（表示名称ＰＰＧ−９ジグリセリル：ジグリセリンへの酸化プロピレンの平均付加モル数が９）、ＳＹ−ＤＰ１４Ｔ（表示名称ＰＰＧ−１４ジグリセリル：ジグリセリンへの酸化プロピレンの平均付加モル数が１４）、ＳＣ−Ｐ４００、ＳＣ−Ｐ７５０、ＳＣ−Ｐ１０００、日油株式会社製ユニルーブＤＧＰ−７００（表示名称ＰＰＧ−９ジグリセリル：ジグリセリンへの酸化プロピレンの平均付加モル数が９）、ＤＧＰ−９５０（表示名称ＰＰＧ−１４ジグリセリル：ジグリセリンへの酸化プロピレンの平均付加モル数が１４）等が挙げられる。
ポリオキシエチレンジグリセリルエーテルは市販品を用いることができる。市販品としては、阪本薬品工業株式会社製ＳＣ−Ｅ４５０、ＳＣ−Ｅ７５０、ＳＣ−Ｅ１０００等が挙げられる。
本発明に用いるポリオキシプロピレンメチルグルコシドは、メチルグルコシドのポリプロピレングリコールエーテルであり、ＣＨ３（Ｃ６Ｈ１０Ｏ５）（ＯＣ（ＣＨ３）ＨＣＨ２）ｎＯＨで表される。ポリオキシプロピレンメチルグルコシドは、市販品を用いることができる。例えば日油製マクビオブライドＭＧ−１０Ｐ（ＰＯＰ(１０)メチルグルコシド 表示名称ＰＰＧ−１０メチルグルコース：エーテル結合しているポリプロピレングリコールの鎖長ｎの平均は１０）、マクビオブライドＭＧ−２０Ｐ（ＰＯＰ(２０)メチルグルコシド 表示名称ＰＰＧ−２０メチルグルコース：エーテル結合しているポリプロピレングリコールの鎖長ｎの平均は２０）、ノベオン製ＧＬＵＣＡＭ Ｐ−１０（ＰＯＰ(１０)メチルグルコシド 表示名称ＰＰＧ−１０メチルグルコース）、ＧＬＵＣＡＭ Ｐ−２０（ＰＯＰ(２０)メチルグルコシド 表示名称ＰＰＧ−２０メチルグルコース）が挙げられる。
本発明に用いるポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリンは、グリセリンの全てのヒドロキシ基にエチレンオキシド、プロピレンオキシド、ブチレンオキシドを付加して得られる化合物であり、市販品を用いることができる。例えば日油製ウィルブライドＳ−７５３（表示名称ＰＥＧ／ＰＰＧ／ポリブチレングリコール−８／５／３グリセリン）が挙げられる。
本発明に用いるポリオキシプロピレングリセリルエーテルは、グリセリンのポリプロプレングリコールエーテルであり、Ｃ３Ｈ７Ｏ２（ＯＣ（ＣＨ３）ＨＣＨ２）ｎＯＨで表される。ポリオキシプロピレングリセリルエーテルは、市販品を用いることができる。例えば日油製ユニオールＴＧ−１０００（表示名称ＰＰＧ−１６グリセリル：エーテル結合しているポリプロピレングリコールの鎖長ｎの平均は１６）、ユニオールＳＧＰ−６５（表示名称ＰＰＧ−８グリセリル：エーテル結合しているポリプロピレングリコールの鎖長ｎの平均は８）、ユニオールＴＧ−１５００（表示名称ＰＰＧ−２４グリセリル：エーテル結合しているポリプロピレングリコールの鎖長ｎの平均は２４）等が挙げられる。
本発明に用いるポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテルは、高級アルコールにエチレンオキシドとプロピレンオキシドを付加したエーテルで、Ｒ−（ＯＣ（ＣＨ３）ＣＨ２）Ｘ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ＹＯＨで表される。市販品を用いることができる。例えば日光ケミカルズ社製ＰＥＮ−４６２０（ＰＯＥ(２０)ＰＯＰ(６)デシルテトラデシルエーテル 表示名称ＰＰＧ−６デシルテトラデセス−２０：デシルテトラデカノールに平均６モルのプロピレンオキシドと平均２０モルのエチレンオキシドを付加重合した化合物）、ＰＥＮ−４６１２（ＰＯＥ(１２)ＰＯＰ(６)デシルテトラデシルエーテル 表示名称ＰＰＧ−６デシルテトラデセス−１２：デシルテトラデカノールに平均６モルのプロピレンオキシドと平均１２モルのエチレンオキシドを付加重合した化合物）、ＰＥＮ−４６３０（ＰＯＥ(３０)ＰＯＰ(６)デシルテトラデシルエーテル 表示名称ＰＰＧ−６デシルテトラデセス−３０：デシルテトラデカノールに平均６モルのプロピレンオキシドと平均３０モルのエチレンオキシドを付加重合した化合物）、日油製ユニルーブ５０ＭＴ−２２００Ｂ（ＰＯＥ(２４)ＰＯＰ(１３)デシルテトラデシルエーテル 表示名称ＰＰＧ−１３デシルテトラデセス−２４：デシルテトラデカノールに平均１３モルのプロピレンオキシドと平均２４モルのエチレンオキシドを付加重合した化合物）、ユニルーブ５０ＭＴ−２０００Ｂ（ＰＯＥ(１０)ＰＯＰ(２０)デシルテトラデシルエーテル 表示名称ＰＰＧ−２０デシルテトラデセス−１０：デシルテトラデカノールに平均２０モルのプロピレンオキシドと平均１０モルのエチレンオキシドを付加重合した化合物）等が挙げられる。
本発明に用いるポリオキシプロピレンソルビトールはソルビトールのポリプロピレングリコールエーテルである。市販品を用いることができ、例えば日油製ユニオールＨＳ−１６００Ｄ（ＰＯＰ(２５)ソルビトール 表示名称ＰＰＧ−２５ソルビトール：プロピレンオキシドの平均付加モル数は２５）が挙げられる。
【００２１】
本発明に用いるジプロピレングリコール（ＤＰＧ）、１，２−ヘキサンジオール（１，２−ＨＤ）、１，２−ペンタンジオール（１，２−ＰＤ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ１５４０、ＰＥＧ４０００）、ポリオキシエチレンメチルグルコシド（メチルグルセス−１０）、１，３−ブタンジオールはいずれも化粧品原料として汎用されている。
市販品としては、例えば、１，２−ヘキサンジオールは株式会社感光社製ＫＭＯ−６等を用いることができる。１，２−ペンタンジオールはシムライズ株式会社製ハイドロライト−５等を用いることができる。ポリエチレングリコールは東邦化学工業株式会社製ＰＥＧ１５４０、ＰＥＧ４０００等を用いることができる。ポリオキシエチレンメチルグルコシドは日本ルーブリゾール株式会社製グルカムＥ−１０、日油株式会社製マグビオブライドＭＧ−１０Ｅ等を用いることができる。
【００２２】
本発明のシリビン配糖体水溶液を含有する皮膚外用剤は、化粧料、医薬部外品、医薬品として用いることができる。本発明の皮膚外用剤は、溶液のみならず、乳化組成物であってもよい。乳化組成物は水中油型、油中水型のいずれにも適用できる。具体的には、化粧水、乳液、クリーム、美容液、パック等の剤型とすることができる。
本発明の皮膚外用剤には、油剤、界面活性剤、防腐剤、多価アルコール、エタノール、糖類、金属イオン封鎖剤、水溶性高分子のような高分子、増粘剤、粉体成分、紫外線吸収剤、紫外線遮断剤、保湿剤、香料、ｐＨ調整剤等を含有させることができる。また、ビタミン類、皮膚賦活剤、血行促進剤、常在菌コントロール剤、活性酸素消去剤、抗炎症剤、美白剤、殺菌剤等の他の薬効成分、生理活性成分を含有させることもできる。
【実施例１】
【００２３】
１．０質量％相当量のシリビンマルトシド（岩城製薬社製）を５０質量％相当量の以下の１７種類の親水性溶媒（グリセリン、ジグリセリン、ポリグリセリン４量体、ポリグリセリン１０量体、ポリグリセリン６量体、１，３−プロパンジオール、プロピレングリコール、エタノール、１，３−ブタンジオール、ＰＯＥ(１０)メチルグルコシド（ポリオキシエチレンメチルグルコシド）、ＰＥＧ１５４０（ポリエチレングリコール）、ＰＥＧ４０００（ポリエチレングリコール）、１，２−ペンタンジオール、１，２−ヘキサンジオール、ジプロピレングリコール、ＳＹ−ＤＰ１４Ｔ（ＰＰＧ−１４ジグリセリル：ポリオキシエチレンジグリセリルエーテル ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で１４モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物）、ＳＹ−ＤＰ９（ＰＰＧ−９ジグリセリル：ポリオキシエチレンジグリセリルエーテル ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物））に分散した後、精製水に溶解し、１％ＫＯＨ水溶液にてｐＨを５．５に調整して、１００質量％とした。。
コニカミノルタ製分光測色計ＣＭ−３５００ｄを用いて、厚さ２ｍｍのガラスセル（ＣＭ−Ａ９７）に１７種類のシリビンマルトシド水溶液を入れて、透過法により測色した。
１７種類のシリビンマルトシド水溶液を５０℃で５ヶ月保存し、同様に測色し、５０℃で保存する前との色差を求めた。また、以下の基準により、５０℃５ヶ月保存後の褐変度合を目視評価した。
【００２４】
目視評価の基準
○：ごくわずかに黄変、殆ど変化なし
△：やや黄変
×：褐変
結果を表１に示す。表１の結果を図１にグラフ化した。
【００２５】
【表１】
【実施例２】
【００２６】
１．０質量％相当量のシリビンマルトシド（岩城製薬社製）を５０質量％相当量の以下の５種類の親水性溶媒（ジグリセリン、ＳＹ−ＤＰ４（ＰＰＧ−４ジグリセリル：ジグリセリンのヒドロキシ基に合計４モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物）、ＳＹ−ＤＰ９（ＰＰＧ−９ジグリセリル：ジグリセリンのヒドロキシ基に合計９モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物）、ＳＹ−ＤＰ１４Ｔ（ＰＰＧ−１４ジグリセリル：ジグリセリンのヒドロキシ基に合計１４モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物）、ＳＣ−Ｅ７５０（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計13モルの酸化エチレンが付加重合した化合物）に分散した後、精製水に溶解し、１％ＫＯＨ水溶液にてｐＨを５．５に調整して、１００質量％とした。
コニカミノルタ製分光測色計ＣＭ−３５００ｄを用いて、厚さ２ｍｍのガラスセル（ＣＭ−Ａ９７）に５種類のシリビンマルトシド水溶液を入れて、透過法により測色した。
５種類のシリビンマルトシド水溶液を５０℃に保存し、７日後、１４日後、２８日後に同様に測色し、５０℃で保存する前との色差を求めた。
結果を図２にグラフ化した。
【実施例３】
【００２７】
１．０質量％相当量のシリビンマルトシド（岩城製薬社製）を５０質量％相当量の以下の７種類の親水性溶媒（ＰＯＰ(１０)メチルグルコシド（ポリオキシプロピレンメチルグルコシド日油製マクビオブライドＭＧ−１０Ｐ）、ＰＰＧ−１４ジグリセリル（ポリオキシエチレンジグリセリルエーテル 阪本薬品工業製ＳＹ−ＤＰ１４Ｔジグリセリンのヒドロキシ基に合計で１４モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物）、ＰＥＧ／ＰＰＧ／ポリブチレングリコール−８／５／３グリセリン（ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン 日油製ウィルブライドＳ−７５３）、ＰＰＧ−１６グリセリル（ポリオキシプロピレングリセリルエーテル 日油製ユニオール ＴＧ−１０００）、ＰＰＧ−９ジグリセリル（ポリオキシエチレンジグリセリルエーテル 阪本薬品工業製ＳＹ−ＤＰ９ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物））、ＰＯＥ(２０)ＰＯＰ(１６)デシルテトラデシルエーテル（ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル 日光ケミカルズ製ＰＥＮ−４６２０）、ＰＰＧ−２５ソルビトール（ポリオキシプロピレンソルビトール 日油製ユニオールＨＳ−１６００Ｄ）に分散した後、精製水に溶解し、１％ＫＯＨ水溶液にてｐＨを５．５に調整して、１００質量％とした。
コニカミノルタ製分光測色計ＣＭ−３５００ｄを用いて、厚さ２ｍｍのガラスセル（ＣＭ−Ａ９７）に７種類のシリビンマルトシド水溶液を入れて、透過法により測色した。
７種類のシリビンマルトシド水溶液を５０℃で３ヶ月保存し、同様に測色し、５０℃で保存する前との色差を求めた。また、以下の基準により、５０℃３ヶ月保存後の褐変度合を目視評価した。
【００２８】
目視評価の基準
○：ごくわずかに黄変、殆ど変化なし
△：やや黄変
×：褐変
結果を表５に示す。表５の結果を図３にグラフ化した。
【００２９】
（表５）
【００３０】
実施例１にて、ＰＰＧ−１４ジグリセリルの５０℃保管５ヵ月後の色差は、１０．８であったが、実施例３においては、５０℃保管３ヶ月後の色差が１４．５であった。一方、実施例１にて、ＰＰＧ−９ジグリセリルの５０℃保管５ヵ月後の色差は、９．１であったが、実施例３においては、５０℃保管３ヶ月後の色差が７．３であった。この様な差が生じたのは、別時期に、別ロットのシリビンマルトシドで実験を行ったためである。
実施例１並びに実施例３に示されたように、ＰＰＧ−１４ジグリセリルとＰＰＧ−９ジグリセリルはシリビンマルトシド水溶液の経時的な褐変を抑制する効果に優れるが、同様にポリオキシエチレン基を有するＰＯＰ(１０)メチルグルコシド（ポリオキシプロピレンメチルグルコシド）、ＰＥＧ／ＰＰＧ／ポリブチレングリコール−８／５／３グリセリン（ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン）、ＰＰＧ−１６グリセリルエーテル（ポリオキシプロピレングリセリルエーテル）、ＰＯＥ(２０)ＰＯＰ(１６)デシルテトラデシルエーテル（ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル）、ＰＰＧ−２５ソルビトール（ポリオキシプロピレンソルビトール）についても、シリビンマルトシド水溶液の経時的な褐変を抑制する優れた効果が認められた。
【００３１】
[試験例１]
表皮角化細胞分化抑制試験・増殖維持作用
１．実験材料
１．１ ヒト正常表皮角化細胞
ヒト正常表皮角化細胞NHEK（旭テクノグラス）を表皮角化細胞用培地：ＫＧＭ（旭テクノグラス）で３７℃-５％ ＣＯ２インキュベーターにて培養した。本実験には経代数が３〜５代の細胞を利用した。
１．２ ＫＧＭ（表皮角化細胞用培地）
ＫＧＭは表皮角化細胞基礎培地にヒト上皮細胞増殖因子（０．１ｎｇ／ｍｌ）、インシュリン（５．０μｇ／ｍｌ）、ハイドロコルチゾン（０．５μｇ／ｍｌ）、ゲンタマイシン（５０μｇ／ｍｌ）、アンフォテリシンＢ（５０μｇ／ｍｌ）、牛脳下垂体抽出液（２ｍｌ）を添加したものである。シリビン配糖体をはじめとするサンプルを細胞に添加する場合には、牛脳下垂体抽出液のみを除いた、ＫＧＭ培地を用いて実験を行った。
１．３ 添加サンプル
シリビン（ＳＢ）、シリビンマルトシド（ＳＢＭ）、シリビンラクトシド（ＳＢＬ）をＤＭＳＯ（ジメチルスフフォキシド：和光純薬）に溶解し、各種濃度にて添加した。
【００３２】
２．実験方法
２．１ 表皮角化細胞分化抑制試験
ＮＨＥＫをＫＧＭで５×１０４／ｍｌになるように懸濁し、４ｍｌ／ウエルで６穴プレートに播種し、２４時間培養して、プレートに細胞を接着させた。各化合物を添加した牛脳下垂体抽出液を除いたＫＧＭを４ｍｌ／ウエルで処理し、２日毎に培地交換しながら、８〜１０日間培養した。毎日顕微鏡で形態観察を行い、ＤＭＳＯ処理したコントロール細胞が分化様の形態変化（扁平化）を示した時点で、写真撮影を行い、培養を終了した。
２．２ 表皮角化細胞増殖維持試験
上記実験で得られた細胞をトリプシン処理によりプレートからはがした後に、ＫＧＭ中で２．５×１０４／ｍｌとなるように懸濁した。細胞懸濁液を２ｍｌ／ウエルで２４穴プレートに播種し、２日ごとに培地交換しながら、８日間培養した。培養後、ＮＨＥＫをトリプシン処理によりプレートからはがし、コールカウンター（ベックマン・コールター）により細胞数を測定した。
３．実験結果
３．１ 表皮角化細胞分化抑制試験
ＤＭＳＯを処理した比較対照群であるControl並びにＳＢ ３μＭ（シリビンを３μＭ添加した培地で培養）では、表皮角化細胞は扁平化し、分化様の形態変化を示した。それに対して、ＳＢＭ３μＭ、ＳＢＬ３μＭでは分化様の形態は認められなかった。ＳＢ、ＳＢＬ、ＳＢＭをそれぞれ１０μＭ添加した培地で培養した場合には、全て、表皮角化細胞の分化が抑制された。ＳＢ、ＳＢＬ、ＳＢＭは表皮角化細胞の分化抑制作用を有するが、ＳＢＭ、ＳＢＬはＳＢに比べて表皮角化細胞分化抑制効果に優れている。
【００３３】
３．２ 表皮角化細胞増殖維持試験
上記の表皮角化細胞分化抑制試験において、分化が抑制されていれば細胞は増殖能を維持し、継代作業をすることで順次増殖するはずである。分化誘導された細胞は分化が付加逆的な反応であるため増殖することはできない。
そこで上記試験で得られた細胞を経代し、維持されている増殖能を増殖した細胞の数を測定することで調べた。
【００３４】
その結果を図４に示す。試料濃度３μＭでは、ＳＢを添加したものについて細胞増殖能は殆ど維持されていないが、ＳＢＭは試料無添加と比べて１．８倍、ＳＢＬは試料無添加と比べて１．４倍に細胞数が増加し、細胞増殖能の維持効果が認められた。試料濃度１０μＭでは、ＳＢ、ＳＢＭ、ＳＢＬともに細胞数が増加し、ＳＢは試料無添加と比べて１．５倍、ＳＢＭは試料無添加と比べて２．１倍、ＳＢＬは試料無添加と比べて１．８倍に細胞数が増加し、細胞増殖能の維持効果が認められた。ＳＢと比べて、ＳＢＭ、ＳＢＬの細胞増殖能の維持効果が高いことがわかる。
【００３５】
[試験例２]
Ｉ型コラーゲン産生促進作用
１．実験材料
１．１ ヒト皮膚繊維芽細胞
ヒト皮膚繊維芽細胞ＣＣＤ１０７４ＳＫ（大日本住友製薬）をＤ−ＭＥＭ中で３７℃-５％ ＣＯ２インキュベーターにて培養した。本実験には経代数が１０〜１５代の細胞を利用した。
１．２ Ｄ−ＭＥＭ
Ｄ−ＭＥＭは、Ｄ−ＭＥＭ基礎培地（ＧＩＢＣＯ）に牛胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を１０％になるよう添加して用いた。またサンプルを処理する際には、牛胎児血清を入れないＤ−ＭＥＭを用いて実験を行った。
２．実験方法
ヒト皮膚繊維芽細胞ＣＣＤ１０７４ＳＫを１０％牛胎児血清を含むＤ−ＭＥＭ培地で３×１０５／ｍｌになるように懸濁し、１０ｃｍシャーレに１ｍｌ播種し、２４時間培養し、プレートに細胞を接着させた。培地をＤＭＳＯに溶解させた各サンプルを各濃度で添加した牛胎児血清を入れないＤ−ＭＥＭ培地に交換した。培地交換４８時間後に細胞培養液を回収し、限外ろ過装置を用いて培養液を濃縮した。約５００ｍｌ以下に濃縮後、タンパク質定量を行い、タンパク質量をそろえた後に、細胞培養液濃縮サンプルとしてウエスタンブロティングに使用した。
１レーン当り１０μｇのタンパク質をアプライし、ＳＤＳ-ＰＡＧＥで分離後、ニトロセルロース膜に転写した。転写後のニトロセルロース膜をブロッキング溶液（スキムミルクを５％の濃度になるように０．１％のポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレートを含むＰＢＳで溶解した溶液）に浸し、４℃で一昼夜ブロッキングした。洗浄液｛０．１％のポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレートを含むＰＢＳ｝で洗浄後、一次抗体｛洗浄液で５００ｎｇ／ｍｌに調製したＩ型コラーゲンに対するポリクローナル抗体（ロックランド）｝に浸し、室温で１時間反応させた。洗浄後、二次抗体（洗浄液で２５０ｎｇ／ｍｌに調製したホースラディッシュパーオキシダーゼ標識化抗ウサギイムノグロブリンＧ）に浸し、室温で１時間反応させた。洗浄後、ＥＣＬプラスウエスタンプロッティング検出試薬（アマシャムバイオサイエンス社）を用いて検出した。
【００３６】
実験結果
実験の結果、ＳＢと同様にＳＢＬ、ＳＢＭの両者にもＩ型コラーゲン産生促進作用が認められた。実験結果を図５に示す。
【００３７】
得られたバンドの強度をプログラムソフトＩｍａｇｅ Ｊにより数値化した結果、及びＤＭＳＯ処理時のＩ型コラーゲンの産生量を１とした際の比較産生量を表２に示す
【００３８】
【表２】
【００３９】
ＳＢ、ＳＢＭ、ＳＢＬともにＩ型コラーゲン産生促進作用を示した。ＳＢと比べて、ＳＢＭ、ＳＢＬはＩ型コラーゲン産生促進効果が強い。特に、試料濃度１０μＭでは、ＳＢＭ、ＳＢＬの作用効果が大きく、高濃度での顕著な作用効果が認められる。
【００４０】
[試験例３]
紫外線照射による水分蒸散抑制作用シワ形成抑制作用
１．実験材料・器具
実験動物ヘアレスマウスHos;HR１ ♀ ５週齢 (星野実験材料)
１．２ 紫外線照射装置
紫外線Ａ波（ＦＬ３２ＳＢＬ／ＤＭＲ：（株）クリニカルサプライ製）
紫外線Ｂ波（ＦＬ３２ＳＥ／ＤＭＲ：（株）クリニカルサプライ製）
１．３ 経皮水分蒸散量測定装置
Vapometer（キーサイエンス社製）
１．４ レプリカ採取器具およびレプリカ解析システム
(有)アサヒバイオメッド製の反射型レプリカ採取キット及びレプリカ解析システムASA‐03RXD
【００４１】
２．実験方法
２．１ 飼育環境
２５℃±２℃、湿度５０％±５％、食餌は飼料MR、水道水をそれぞれ自由摂取できるコンベンショナルな飼育環境で飼育した。
一群につき５匹を群分けし同一ケージにて飼育した。
日照は午前７時〜午後７時までの１２時間ごとに昼夜を設定した。
２．２ 紫外線照射
へアレスマウスHos;HR１を１週間馴化したのち紫外線照射を開始した。紫外線照射時は、ヘアレスマウスを専用のケージに移し、１群ずつＵＶＢ２０ｍＪ／ｃｍ２およびＵＶＡ１０Ｊ／ｃｍ２の紫外線を照射した。照射は月、水および金の週３日サイクルで１０週間実施し、合計３０回紫外線を照射した。
【００４２】
２．３ 群設定
紫外線照射後３０分以内にＳＢ、ＳＢＬ、ＳＢＭメタノール溶液又は溶媒（メタノール）をマウス背部皮膚全面に１００μＬ処理した。ＳＢ、ＳＢＬ、ＳＢＭ塗布の濃度設定をそれぞれ１．０％、０．３％、０．１％の３点設定し、これら全群については紫外線照射を行った。溶媒であるメタノールのみを塗布するものについて、紫外線未照射及び紫外線照射の群を設けた。溶媒にメタノールを用いたのはＳＢを溶解するためである。メタノール中において、ＳＢＭ、ＳＢＬは１％濃度においても完全に溶解していたが、ＳＢは０．１％のみが完全に溶解しているが、０．３％は若干析出が認められ、１％においては不溶物が認められた。
ＳＢメタノール溶液に不溶物が認められた場合も、そのまま実験に用いた。
【００４３】
２．４ 経皮水分蒸散量の測定
経皮水分蒸散量の測定は、VapoMeter（キーストン サイエンティフィック社製）を用い、背部の尾付け根より首に向かい２ｃｍ、腰椎から右側に０．５ｃｍ部位を３回測定して平均を求めた。測定端末の開口部はＮａｉｌモード（開口部を狭くすることで、マウス皮膚の狭い範囲に対応した）を用い、１回ごとの測定時間に約１９秒を要した。測定日は、紫外線照射１０週間後に行った。
【００４４】
２．５ レプリカ画像解析
シワの形成を正確に把握するためレプリカを採取した。レプリカ画像解析は反射用レプリカ解析システムＡＳＡ−０３ＲＸＤ（(有)アサヒバイオメッド製）を使用して行った。ＡＳＡ−０３ＲＸＤを用いて、採取したレプリカに角度２７度からの平行光（ＬＥＤ光源）を照射する事により得られるシワの形状に応じた陰影画像をＣＣＤカメラで撮像し、コンピュータに取り込み画像処理することでレプリカ表面のしわ体積率（μｍ３／ｍｍ２／１００）を計測した。
【００４５】
２．６ 統計解析
試験結果は平均値±標準偏差（Ｓ．Ｄ．）で表し、有意差検定は等分散性の検定をバートレット検定により行った。等分散性の仮定が棄却されなかった時はDunnettの多重検定を行い、等分散性の仮定が棄却された時は参考データとしてDunnettの多重検定を行った。
【００４６】
３．試験結果
３．１ 体重変動、外観観察
１０週間照射終了後、各群間で体重変遷に目立った違いは無かった。重篤な病変を示したマウスもいなかった。
マウス皮膚の外観を観察した結果、群２の紫外線照射メタノール処理群ではシワ形成が認められるのに対し、群４の０．３％シリビン塗布群、群６〜群８の全てのＳＢＭ塗布群、群９〜群１１の全てのＳＢＬ塗布群においてシワ抑制作用が認められた。
【００４７】
３．２ 経皮水分蒸散量
肌荒れの指標として、紫外線照射１０週間後にVapoMeterを用いて各群の水分蒸散量を測定した。結果を表３に示す。
群１の紫外線未照射群に比べて群２の紫外線照射群では経皮水分蒸散量が高くなる。群３〜群１１のシリビン（ＳＢ）、シリビン配糖体（ＳＢＭ、ＳＢＬ）塗布群では、危険率１％以下で有意に経皮水分蒸散量の上昇が抑制されていた。
【００４８】
１群（紫外線非照射、メタノール塗布）の水分蒸散量を０％、２群（紫外線照射、メタノール塗布）の水分蒸散量を１００％としたとき、３〜５群（紫外線照射、ＳＢ０．１〜１％塗布）の水分蒸散量は２６〜７６％、６〜８群（紫外線照射、ＳＢＭ０．１〜１％塗布）の水分量は１１〜２１％、９〜１１群（紫外線照射、ＳＢＬ０．１〜１％塗布）の水分量は２４〜２７％となり、ＳＢ、ＳＢＭ、ＳＢＬを添加することにより水分蒸散量の上昇が抑制された。特に、シリビン配糖体であるＳＢＭ、ＳＢＬの水分蒸散量の上昇抑制効果が高い。つまり日焼けによる肌荒れを改善する効果がある。
【００４９】
【表３】
【００５０】
３．３ シワ体積率
１０週間照射終了後、シワの形成を正確に把握するためレプリカを採取し、画像解析によりレプリカ表面のしわ体積率（μｍ３／ｍｍ２／１００）を計測した。結果を表４に示す。
【００５１】
Dunnettの有意差検定を実施した結果、群２（紫外線照射メタノール塗布）に対して、群１（紫外線未照射メタノール塗布）、群４（紫外線照射 ＳＢ０．３％塗布）、群７（紫外線照射 ＳＢＭ０．３％塗布）、群１１（紫外線照射 ＳＢＬ１．０％塗布）は、それぞれ危険率５％以下で有意にシワ体積が抑制された。
【００５２】
【表４】
【００５３】
〔処方例１ 化粧水〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．３
２．ＳＹ−ＤＰ９（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加
重合した化合物） ５．０
３．ジプロピレングリコール ５．０
４．水酸化カリウム 適量
５．クエン酸 適量
６．精製水 残余
（製法）
６に１〜５を溶解した。
【００５４】
〔処方例２ 乳液〕
質量％
１．シリビンマルトシド ３．０
２．水素添加大豆リン脂質 ０．７
３．ステアリン酸デカグリセリル（HLB12） ２．０
４．ＳＹ−ＤＰ９（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加
重合した化合物） ８．０
５．オリーブ油 ８．０
６．ベヘニルアルコール １．０
７．ジプロピレングリコール ８．０
８．カルボキシビニルポリマー ０．１
９．キサンタンガム ０．２
１０．水酸化カリウム 適量
１１．クエン酸 適量
１２．精製水 残余
（製法）
１〜４及び７〜１２を８０℃で加温溶解する。これに、約８０℃に加温した５、６を加え、ホモミキサーで攪拌混合し、３０℃まで冷却し、乳液を得た。
【００５５】
〔処方例３ モイスチャー美容液〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．２
２．水素添加大豆リン脂質 ０．６
３．モノオレイン酸デカグリセリル（HLB12） １．５
４．ジプロピレングリコール ７．０
５．１，３−ブタンジオール ５．０
６．ポリエチレングリコール４０００ ０．１
７．スクワラン ５．０
８．シリコーン ０．５
９．ラウロイルグルタミン酸ジ(フィトステリル/オクチルドデシル)
０．２
１０．キサンタンガム ０．３
１１．水酸化カリウム 適量
１２．クエン酸 適量
１３．精製水 残余
（製法）
１及び１１〜１３を攪拌溶解し、４〜６、１０を添加後約８０℃に加温溶解する。
これに、約８０℃に加温した２、３、７〜９を加え、３０℃まで冷却し、モイスチャー美容液
を得た。
【００５６】
〔処方例４ エモリエントクリーム〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．５
２．ＳＹ−ＤＰ９（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加
重合した化合物） １０．０
３．ジプロピレングリコール ８．０
４．１，２−ペンタンジオール ０．５
５．Ｌ−セリン ０．０１
６．ジステアリン酸デカグリセリル（HLB9.5） ０．５
７．モノミリスチン酸デカグリセリル（HLB14） １．５
８．オリーブ油 １０．０
９．マカデミアナッツ油 １．０
１０．ベヘニルアルコール １．５
１１．シリコーン ２．０
１２．ホホバ油 ３．０
１３．トコフェロール ０．００１
１４．ＳＩＭＵＬＧＥＬ ＮＳ（ＳＥＰＰＩＣ社製） ２．０
１５．キサンタンガム ０．１
１６．水酸化カリウム 適量
１７．クエン酸 適量
１８．精製水 残余
（製法）
１及び１６〜１８を攪拌溶解し、２〜５を添加後約８０℃に加温溶解する。これに、約８０℃に加温した６〜１４を加え、３０℃まで冷却し、エモリエントクリームを得た。
【００５７】
〔処方例５ ボディ用乳液〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．２
２．ＰＥＧ−６０水添ヒマシ油（HLB14） １．５
３．ＳＹ−ＤＰ１４Ｔ（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で１４モルの酸化プロピレン
が付加重合した化合物） ９．０
４．ジプロピレングリコール ７．０
５．ヒアルロン酸Ｎａ ０．００１
６．流動パラフィン １０．０
７．シリコーン ３．０
８．オクチルドデカノール ４．０
９．(アクリル酸/アクリル酸アルキル(C10-30))コポリマー ０．２
１０．水酸化カリウム 適量
１１．クエン酸 適量
１２．精製水 残余
１３. エタノール ２．５
（製法）
１及び１０〜１２を攪拌溶解し、２〜５、９を添加後約８０℃に加温溶解する。これに、約８０℃に加温した６〜８を加え、３０℃まで冷却、１３を添加し、ボディ用乳液を得た。
【００５８】
〔処方例６ マッサージクリーム〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．０５
２．ＳＹ−ＤＰ４（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で４モルの酸化プロピレンが付加
重合した化合物） １０．０
３．ＰＯＥ（１０）メチルグルコシド ２．０
４．ジプロピレングリコール ７．０
５．モノステアリン酸デカグリセリル（HLB12） １．０
６．エチルヘキサン酸セチル １ ２．０
７．ベヘニルアルコール ２．０
８．ステアリン酸 ０．５
９．セピノブ EMT10（ＳＥＰＰＩＣ社製） ０．５
１０．香料 適量
１１．フェノキシエタノール ０．３
１２．水酸化カリウム 適量
１３．クエン酸 適量
１４．精製水 残余
（製法）
１及び１１〜１４を攪拌溶解し、２〜４を添加後約８０℃に加温溶解する。これに、約８０℃に加温した５〜９を加え、３０℃まで冷却、１０を添加し、マッサージクリームを得た。
【００５９】
〔処方例７ 乳化型ファンデーション〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．１
２．ＳＹ−ＤＰ９（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加
重合した化合物） １０．０
３．ジプロピレングリコール ８．０
４．１，２−ペンタンジオール １．０
５．キサンタンガム ０．３
６．トリイソステアリン酸ポリグリセリル-２ １．０
７．シクロメチコン ８．０
８．シリコーン ５．０
９．ネオペンタン酸イソステアリル ５．０
１０．イソステアリン酸 １．５
１１．ベヘニルアルコール ０．５
１２．パルミチン酸デキストリン １．０
１３．タルク ３．０
１４．二酸化チタン ５．０
１５．ベンガラ ０．５
１６．黄酸化鉄 １．４
１７．黒酸化鉄 ０．１
１８．水酸化カリウム 適量
１９．クエン酸 適量
２０．精製水 残余
（製法）
１及び１８〜２０を攪拌溶解し、２〜５を添加後約７０℃に加温溶解する。次に、よく粉砕した１３〜１７を添加し、攪拌混合する。これに、約８０℃に加温した６〜１２を加え、３０℃まで冷却し、乳化型ファンデーションを得た。
〔処方例８ ジェル状美容液〕
質量％
１．シリビンマルトシド １．０
２．ユニルーブ ＤＧＰ−７００ ５．０
３．１，３−ブタンジオール ７．０
４．ベタイン ２．０
５．ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液） １．０
６．スクレロチウムガム ０．１
７．カルボキシビニルポリマー ０．２
８．水酸化カリウム 適量
９．精製水 残余
（製法）
９に７を溶解させ、１〜６を攪拌溶解する。８を添加しジェル状美容液を得た。
〔処方例９ シート状マスク〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．５
２．ユニルーブ ＤＧＰ−７００ ５．０
３．ジプロピレングリコール ８．０
４．ウィルブライドＳ−７５３ １．０
５．ネオペンタン酸イソステアリル ５．０
６．ビタミンＡ油 ０．００１
７．水素添加大豆リン脂質 １．０
８．ポリソルベート６０ ０．２
９．アルカリゲネス産生多糖体 ０．１
１０．カルボキシビニルポリマー ０．２
１１．水酸化カリウム 適量
１２．精製水 残余
（製法）
５〜８まで８０℃に加温溶解し、１〜４および９、１０、１２を加温溶解したものを添加し、攪拌混合する。
１１を加えて中和した後、３０℃まで冷却する。
その後、不織布に含浸させシート状マスクとする。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シリビン溶解技術及びその溶解液の利用技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
シリマリンはＩ型コラーゲン産生促進作用、エラスチン産生促進作用（特許文献１：ＷＯ２００４／８５４２９号公報）、表皮細胞分化抑制作用（特許文献２：特開２００４−９１３９７号公報）、光老化防止作用（特許文献３：特開２００６−２６５１８６号公報）、異常タンパク質除去作用（特許文献４：特開２００７−９９６５０号公報）を有することが知られている。
一方、シリビンは、水、油にはほとんど溶解しないため、皮膚外用剤等の組成物に配合し難いという課題点を有しており、多価アルコール、界面活性剤、強塩基を用いて分散する技術（特許文献５：特開２００６−８９４１８号公報）、リン脂質、ポリグリセリン脂肪酸エステル、グリセリンを用いて分散する技術（特許文献６：特開２００６−２８２５６８号公報）が開示されている。
しかしながら、これらの技術を用いると処方設計上の制約がある。
シリビンのグルコース配糖体、ガラクトース配糖体、ラクトース配糖体、マルトース配糖体が、シリビンと比べて水溶性に優れることが知られている（非特許文献１：Kosina P.et al.,Phytother. Res. 16,S33-S39(2002)参照）。
【０００３】
本出願人は、シリビン配糖体の研究を継続しており、シリビン配糖体を含有し、シワ形成抑制効果、表皮角化細胞分化抑制効果、Ｉ型コラーゲン産生促進効果を有する皮膚外用組成物を特許出願している（特願２００８−１４３６１）。
本発明者は、シリビン配糖体を皮膚外用剤に配合した際に、シリビン配糖体溶液の経時的な褐変の問題に直面した。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第２００４／８５４２９号公報
【特許文献２】特開２００４−９１３９７号公報
【特許文献３】特開２００６−２６５１８６号公報
【特許文献４】特開２００７−９９６５０号公報
【特許文献５】特開２００６−８９４１８号公報
【特許文献６】特開２００６−２８２５６８号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Kosina P.et al.,Phytother. Res. 16,S33-S39(2002)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、着色安定性に優れたシリビン配糖体溶液を開発することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の主な構成は、次のとおりである。
１．ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−ペンタンジオール、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、１，３−ブタンジオールからなる群から選ばれる１種又は２種以上とシリビン配糖体を含有することを特徴とするシリビン配糖体水溶液。
２．シリビン配糖体を、ポリオキシプロピレン基を有する化合物を含有する水溶液に溶解したことを特徴とするシリビン配糖体水溶液。
３．ポリオキシプロピレン基を有する化合物が、ポリオキシプロピレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリオキシプロピレンメチルグルコシド、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン、ポリオキシプロピレングリセリルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシプロピレンソルビトールからなる群から選ばれる１種又は２種以上であることを特徴とする２．記載のシリビン配糖体水溶液。
４．シリビン配糖体がシリビンマルトシドであることを特徴とする１．〜３．のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液。
５．１．〜４．のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液を含有する皮膚外用剤。
６．１．〜４．のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液を含有するシワ形成抑制剤。
【発明の効果】
【０００８】
ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−ペンタンジオール、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、１，３−ブタンジオールのいずれかを配合することにより、経時的な褐変を抑えることができる安定したシリビン配糖体水溶液を実現することができた。また、ポリオキシプロピレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリオキシプロピレンメチルグルコシド、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン、ポリオキシプロピレングリセリルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシプロピレンソルビトールなどのポリオキシプロピレン基を有する化合物を配合することにより、経時的な褐変を抑えることができる安定したシリビン配糖体水溶液を実現することができた。
安定した長期保存及び透明性に優れたシリビン高濃度水溶液が実現できたので、水溶液を使用した皮膚外用剤や化粧料などの剤型へ、実用的な適用範囲を拡大することができた。
即ち、
１．溶解性の高いシリビン配糖体を用いることにより、シリビンの作用機序を向上させた皮膚外用組成物、シワ形成抑制剤、表皮角化細胞分化抑制剤、老化防止用皮膚外用組成物、Ｉ型コラーゲン産生促進剤、日焼けによる肌荒れ改善剤を提供することが可能となった。特に、水溶解性が高く、安全性、低刺激性、使用範囲が向上する。
２．特に、シリビン配糖体として、化学式（１）に示されるシリビンマルトシドが有効である。
３．本発明で用いるシリビン配糖体は水溶性が高く、水溶液タイプの剤型として利用できる。化粧水、ジェル状美容液、乳液、クリーム、パック等の皮膚外用組成物、メイクアップベースローション、メイクアップクリーム、乳液状又はクリーム状のファンデーションといったメイクアップ皮膚外用組成物、ハンドクリーム、レッグクリーム、ボディローション等の身体用皮膚外用組成物、入浴剤等とすることができる。
４．本発明で用いるシリビン配糖体は、乳液やクリームなどでも、水性部分に高配合することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】実施例１における５０℃５ヶ月保存試験による色変化を示すグラフ。
【図２】実施例２における５０℃保存色変化について３０日間推移を示すグラフ。
【図３】実施例３における５０℃３ヶ月保存試験による色変化を示すグラフ。
【図４】表皮角化細胞増殖維持試験結果を示すグラフ。
【図５】Ｉ型コラーゲン産生促進試験結果を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明のシリビン配糖体水溶液は、ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−ペンタンジオール、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、１，３−ブタンジオールのいずれかを含有する水溶液にシリビン配糖体が溶解しているものである。
また、本発明のシリビン配糖体水溶液は、ポリオキシプロピレン基を有する化合物を含有する水溶液にシリビン配糖体が溶解しているものである。ポリオキシプロピレン基を有する化合物としては、例えば、ポリオキシプロピレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリオキシプロピレンメチルグルコシド、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン、ポリオキシプロピレングリセリルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシプロピレンソルビトールが挙げられる。
シリビン（Ｓｉｌｙｂｉｎ；ＣＡＳ Ｎｏ．２２８８８−７０−６）は、キク科マリアアザミ（学名シリバム・マリアナムＳｉｌｉｂｕｍ ｍａｒｉａｎｕｍ Ｇａｅｒｔｎ、別名オオアザミ、オオヒレアザミ、ミルクアザミ；ＣＡＳ Ｎｏ．８４６０４−２０−６）から抽出されるフラボノリグナンの一種である。マリアアザミから抽出されるフラボノリグナンはシリマリン（Ｓｉｌｙｍａｒｉｎ；ＣＡＳ Ｎｏ．６５６６６−０７−１）の総称で呼ばれ、シリビン以外に、シリジアニン（Ｓｉｌｙｄｉａｎｉｎ；ＣＡＳ Ｎｏ．２９７８２−６８−１）、シリクリスチン（Ｓｉｌｙｃｈｒｉｓｔｉｎ；ＣＡＳ Ｎｏ．３３８８９−６９−９）、イソシリビン（Ｉｓｏｓｉｌｙｂｉｎ；ＣＡＳ Ｎｏ．７２５８１−７１−６）などが含まれている。
シリビンはシリマリンからクロマトグラフィーを用いて単離することが可能であり、また、試薬を購入して入手することが可能である。
【００１１】
本発明に用いるシリビン配糖体は文献（Kren V. et al., J.Chem.Soc.,Perkin Trans 1,2467-2474(1997)）に従って、ルイス酸を触媒として、シリビンにアセチル基で水酸基を保護した糖を結合し、脱アセチル化することにより調製できる。この反応系ではシリマリンの第一級アルコールの水酸基に糖が選択的にグリコシド結合する。
【００１２】
シリビンに、ルイス酸を触媒として、パーアセチルマルトースを反応させてグリコシド結合を生成し、脱アセチル化することにより、式（１）のシリビンマルトシドが得られる。
【００１３】
【化１】
式（１）
【００１４】
具体的には、以下の手順によりシリビンマルトシドを合成できる。
〔シリビンマルトシドの合成〕
Ｈｅｌｆｅｒｉｃｈの方法に従ってシリビンマルトシドを合成した。
シリビン（３．０ｇ、６．２ｍｏｌ）とオクタ−Ｏ−アセチル−Ｄ−マルトース（６．３ｇ、９．２ｍｏｌ）とを１８０ｍｌのジクロロメタン−アセトニトリル（１：１、ｖ／ｖ）の溶媒中で、三フッ化ホウ素ジメチルエーテル錯体（１．１４ｍｌ、１２．４ｍｍｏｌ）を窒素存在下、室温で１９時間攪拌反応させた。反応終了後、氷冷しながら飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、１５０ｍｌジクロロメタンで２回抽出処理し、無水硫酸ナトリウム処理後に抽出溶媒をエバポレーターにて除去した。
トリエチルアミン−メタノール−水（１：８：１）を３５℃３０時間反応させたのち、エバポレーターにより溶媒を除去した。BONDESIL-C18(Varian)を用いて精製を行い、シリビンマルトシド（１．０ｇ, 収率２０％）を得た。得られたシリビンマルトシドをＭＳスペクトルで確認し、［Ｍ＋Ｈ］＋：８０７．５のピークを検出した。
【００１５】
シリビンに、ルイス酸を触媒として、パーアセチルラクトースを反応させてグリコシド結合を生成し、脱アセチル化することにより、式（２）のシリビンラクトシドが得られる。
【００１６】
【化２】
式（２）
【００１７】
具体的には、以下の手順によりシリビンラクトシドを合成できる。
〔シリビンラクトシドの合成〕
Ｈｅｌｆｅｒｉｃｈの方法に従ってシリビンラクトシドを合成した。
シリビン（３．０ｇ、６．２ｍｏｌ）とオクタ−Ｏ−アセチル−Ｄ−ラクトース（６．３ｇ、９．２ｍｏｌ）とを１８０ｍｌのジクロロメタン−アセトニトリル（１：１、ｖ／ｖ）の溶媒中で、三ふっ化ほう素ジメチルエーテル錯体（１．１４ｍｌ、１２．４ｍｍｏｌ）を窒素存在下、室温で１９時間攪拌反応させた。反応終了後、氷冷しながら飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、１５０ｍｌジクロロメタンで２回抽出処理し、無水硫酸ナトリウム処理後に抽出溶媒をエバポレーターにて除去した。
トリエチルアミン−メタノール−水（１：８：１）を３５℃３０時間反応させたのち、エバポレーターにより溶媒を除去した。BONDESIL-C18(Varian)を用いて精製を行い、シリビンラクトシド（１．０ｇ, 収率２０％）を得た。得られたシリビンラクトシドをＭＳスペクトルで確認し、［Ｍ＋Ｈ］＋：８０７．５のピークを検出した。
【００１８】
本発明のシリビン配糖体を有効成分とするシワ形成抑制剤としては、化粧水、乳液、クリーム、パック等のシワ改善用皮膚外用組成物、シワ改善用の医薬部外品、シワ改善用医薬品が挙げられる。乳液やクリームであっても、水性部分にシリビン配糖体を高濃度で配合することができる。
【００１９】
本発明のシリビン配糖体を有効成分とする表皮角化細胞分化抑制剤は、表皮角化細胞の分化を抑制し、増殖を維持し、ターンオーバーの遅延を予防、防止、改善し、加齢や紫外線照射により引き起こされる表皮の偏平化を防ぎ、老化した皮膚を再生する作用を有するので、老化防止用皮膚外用組成物として用いることができる。
本発明の、シリビン配糖体を有効成分とするＩ型コラーゲン産生促進剤は、皮膚のはりや弾力性を向上させ、しわやたるみを予防、防止、改善することが期待できるので、老化防止用皮膚外用組成物として用いることができる。
【００２０】
本発明に用いるポリオキシアルキレンジグリセリルエーテルは、ジグリセリンに酸化アルキレンを付加重合して得られる化合物である。
ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテルとしては、ジグリセリンに酸化プロピレンを付加重合したポリオキシプロピレンジグリセリルエーテル、ジグリセリンに酸化エチレンを付加重合したポリオキシエチレンジグリセリルエーテル等が挙げられる。
ポリオキシプロピレンジグリセリルエーテルは市販品を用いることができる。市販品としては、阪本薬品工業株式会社製ＳＹ−ＤＰ４（表示名称ＰＰＧ−４ジグリセリル：ジグリセリンへの酸化プロピレンの平均付加モル数が４）、ＳＹ−ＤＰ９（表示名称ＰＰＧ−９ジグリセリル：ジグリセリンへの酸化プロピレンの平均付加モル数が９）、ＳＹ−ＤＰ１４Ｔ（表示名称ＰＰＧ−１４ジグリセリル：ジグリセリンへの酸化プロピレンの平均付加モル数が１４）、ＳＣ−Ｐ４００、ＳＣ−Ｐ７５０、ＳＣ−Ｐ１０００、日油株式会社製ユニルーブＤＧＰ−７００（表示名称ＰＰＧ−９ジグリセリル：ジグリセリンへの酸化プロピレンの平均付加モル数が９）、ＤＧＰ−９５０（表示名称ＰＰＧ−１４ジグリセリル：ジグリセリンへの酸化プロピレンの平均付加モル数が１４）等が挙げられる。
ポリオキシエチレンジグリセリルエーテルは市販品を用いることができる。市販品としては、阪本薬品工業株式会社製ＳＣ−Ｅ４５０、ＳＣ−Ｅ７５０、ＳＣ−Ｅ１０００等が挙げられる。
本発明に用いるポリオキシプロピレンメチルグルコシドは、メチルグルコシドのポリプロピレングリコールエーテルであり、ＣＨ３（Ｃ６Ｈ１０Ｏ５）（ＯＣ（ＣＨ３）ＨＣＨ２）ｎＯＨで表される。ポリオキシプロピレンメチルグルコシドは、市販品を用いることができる。例えば日油製マクビオブライドＭＧ−１０Ｐ（ＰＯＰ(１０)メチルグルコシド 表示名称ＰＰＧ−１０メチルグルコース：エーテル結合しているポリプロピレングリコールの鎖長ｎの平均は１０）、マクビオブライドＭＧ−２０Ｐ（ＰＯＰ(２０)メチルグルコシド 表示名称ＰＰＧ−２０メチルグルコース：エーテル結合しているポリプロピレングリコールの鎖長ｎの平均は２０）、ノベオン製ＧＬＵＣＡＭ Ｐ−１０（ＰＯＰ(１０)メチルグルコシド 表示名称ＰＰＧ−１０メチルグルコース）、ＧＬＵＣＡＭ Ｐ−２０（ＰＯＰ(２０)メチルグルコシド 表示名称ＰＰＧ−２０メチルグルコース）が挙げられる。
本発明に用いるポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリンは、グリセリンの全てのヒドロキシ基にエチレンオキシド、プロピレンオキシド、ブチレンオキシドを付加して得られる化合物であり、市販品を用いることができる。例えば日油製ウィルブライドＳ−７５３（表示名称ＰＥＧ／ＰＰＧ／ポリブチレングリコール−８／５／３グリセリン）が挙げられる。
本発明に用いるポリオキシプロピレングリセリルエーテルは、グリセリンのポリプロプレングリコールエーテルであり、Ｃ３Ｈ７Ｏ２（ＯＣ（ＣＨ３）ＨＣＨ２）ｎＯＨで表される。ポリオキシプロピレングリセリルエーテルは、市販品を用いることができる。例えば日油製ユニオールＴＧ−１０００（表示名称ＰＰＧ−１６グリセリル：エーテル結合しているポリプロピレングリコールの鎖長ｎの平均は１６）、ユニオールＳＧＰ−６５（表示名称ＰＰＧ−８グリセリル：エーテル結合しているポリプロピレングリコールの鎖長ｎの平均は８）、ユニオールＴＧ−１５００（表示名称ＰＰＧ−２４グリセリル：エーテル結合しているポリプロピレングリコールの鎖長ｎの平均は２４）等が挙げられる。
本発明に用いるポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテルは、高級アルコールにエチレンオキシドとプロピレンオキシドを付加したエーテルで、Ｒ−（ＯＣ（ＣＨ３）ＣＨ２）Ｘ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ＹＯＨで表される。市販品を用いることができる。例えば日光ケミカルズ社製ＰＥＮ−４６２０（ＰＯＥ(２０)ＰＯＰ(６)デシルテトラデシルエーテル 表示名称ＰＰＧ−６デシルテトラデセス−２０：デシルテトラデカノールに平均６モルのプロピレンオキシドと平均２０モルのエチレンオキシドを付加重合した化合物）、ＰＥＮ−４６１２（ＰＯＥ(１２)ＰＯＰ(６)デシルテトラデシルエーテル 表示名称ＰＰＧ−６デシルテトラデセス−１２：デシルテトラデカノールに平均６モルのプロピレンオキシドと平均１２モルのエチレンオキシドを付加重合した化合物）、ＰＥＮ−４６３０（ＰＯＥ(３０)ＰＯＰ(６)デシルテトラデシルエーテル 表示名称ＰＰＧ−６デシルテトラデセス−３０：デシルテトラデカノールに平均６モルのプロピレンオキシドと平均３０モルのエチレンオキシドを付加重合した化合物）、日油製ユニルーブ５０ＭＴ−２２００Ｂ（ＰＯＥ(２４)ＰＯＰ(１３)デシルテトラデシルエーテル 表示名称ＰＰＧ−１３デシルテトラデセス−２４：デシルテトラデカノールに平均１３モルのプロピレンオキシドと平均２４モルのエチレンオキシドを付加重合した化合物）、ユニルーブ５０ＭＴ−２０００Ｂ（ＰＯＥ(１０)ＰＯＰ(２０)デシルテトラデシルエーテル 表示名称ＰＰＧ−２０デシルテトラデセス−１０：デシルテトラデカノールに平均２０モルのプロピレンオキシドと平均１０モルのエチレンオキシドを付加重合した化合物）等が挙げられる。
本発明に用いるポリオキシプロピレンソルビトールはソルビトールのポリプロピレングリコールエーテルである。市販品を用いることができ、例えば日油製ユニオールＨＳ−１６００Ｄ（ＰＯＰ(２５)ソルビトール 表示名称ＰＰＧ−２５ソルビトール：プロピレンオキシドの平均付加モル数は２５）が挙げられる。
【００２１】
本発明に用いるジプロピレングリコール（ＤＰＧ）、１，２−ヘキサンジオール（１，２−ＨＤ）、１，２−ペンタンジオール（１，２−ＰＤ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ１５４０、ＰＥＧ４０００）、ポリオキシエチレンメチルグルコシド（メチルグルセス−１０）、１，３−ブタンジオールはいずれも化粧品原料として汎用されている。
市販品としては、例えば、１，２−ヘキサンジオールは株式会社感光社製ＫＭＯ−６等を用いることができる。１，２−ペンタンジオールはシムライズ株式会社製ハイドロライト−５等を用いることができる。ポリエチレングリコールは東邦化学工業株式会社製ＰＥＧ１５４０、ＰＥＧ４０００等を用いることができる。ポリオキシエチレンメチルグルコシドは日本ルーブリゾール株式会社製グルカムＥ−１０、日油株式会社製マグビオブライドＭＧ−１０Ｅ等を用いることができる。
【００２２】
本発明のシリビン配糖体水溶液を含有する皮膚外用剤は、化粧料、医薬部外品、医薬品として用いることができる。本発明の皮膚外用剤は、溶液のみならず、乳化組成物であってもよい。乳化組成物は水中油型、油中水型のいずれにも適用できる。具体的には、化粧水、乳液、クリーム、美容液、パック等の剤型とすることができる。
本発明の皮膚外用剤には、油剤、界面活性剤、防腐剤、多価アルコール、エタノール、糖類、金属イオン封鎖剤、水溶性高分子のような高分子、増粘剤、粉体成分、紫外線吸収剤、紫外線遮断剤、保湿剤、香料、ｐＨ調整剤等を含有させることができる。また、ビタミン類、皮膚賦活剤、血行促進剤、常在菌コントロール剤、活性酸素消去剤、抗炎症剤、美白剤、殺菌剤等の他の薬効成分、生理活性成分を含有させることもできる。
【実施例１】
【００２３】
１．０質量％相当量のシリビンマルトシド（岩城製薬社製）を５０質量％相当量の以下の１７種類の親水性溶媒（グリセリン、ジグリセリン、ポリグリセリン４量体、ポリグリセリン１０量体、ポリグリセリン６量体、１，３−プロパンジオール、プロピレングリコール、エタノール、１，３−ブタンジオール、ＰＯＥ(１０)メチルグルコシド（ポリオキシエチレンメチルグルコシド）、ＰＥＧ１５４０（ポリエチレングリコール）、ＰＥＧ４０００（ポリエチレングリコール）、１，２−ペンタンジオール、１，２−ヘキサンジオール、ジプロピレングリコール、ＳＹ−ＤＰ１４Ｔ（ＰＰＧ−１４ジグリセリル：ポリオキシエチレンジグリセリルエーテル ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で１４モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物）、ＳＹ−ＤＰ９（ＰＰＧ−９ジグリセリル：ポリオキシエチレンジグリセリルエーテル ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物））に分散した後、精製水に溶解し、１％ＫＯＨ水溶液にてｐＨを５．５に調整して、１００質量％とした。。
コニカミノルタ製分光測色計ＣＭ−３５００ｄを用いて、厚さ２ｍｍのガラスセル（ＣＭ−Ａ９７）に１７種類のシリビンマルトシド水溶液を入れて、透過法により測色した。
１７種類のシリビンマルトシド水溶液を５０℃で５ヶ月保存し、同様に測色し、５０℃で保存する前との色差を求めた。また、以下の基準により、５０℃５ヶ月保存後の褐変度合を目視評価した。
【００２４】
目視評価の基準
○：ごくわずかに黄変、殆ど変化なし
△：やや黄変
×：褐変
結果を表１に示す。表１の結果を図１にグラフ化した。
【００２５】
【表１】
【実施例２】
【００２６】
１．０質量％相当量のシリビンマルトシド（岩城製薬社製）を５０質量％相当量の以下の５種類の親水性溶媒（ジグリセリン、ＳＹ−ＤＰ４（ＰＰＧ−４ジグリセリル：ジグリセリンのヒドロキシ基に合計４モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物）、ＳＹ−ＤＰ９（ＰＰＧ−９ジグリセリル：ジグリセリンのヒドロキシ基に合計９モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物）、ＳＹ−ＤＰ１４Ｔ（ＰＰＧ−１４ジグリセリル：ジグリセリンのヒドロキシ基に合計１４モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物）、ＳＣ−Ｅ７５０（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計13モルの酸化エチレンが付加重合した化合物）に分散した後、精製水に溶解し、１％ＫＯＨ水溶液にてｐＨを５．５に調整して、１００質量％とした。
コニカミノルタ製分光測色計ＣＭ−３５００ｄを用いて、厚さ２ｍｍのガラスセル（ＣＭ−Ａ９７）に５種類のシリビンマルトシド水溶液を入れて、透過法により測色した。
５種類のシリビンマルトシド水溶液を５０℃に保存し、７日後、１４日後、２８日後に同様に測色し、５０℃で保存する前との色差を求めた。
結果を図２にグラフ化した。
【実施例３】
【００２７】
１．０質量％相当量のシリビンマルトシド（岩城製薬社製）を５０質量％相当量の以下の７種類の親水性溶媒（ＰＯＰ(１０)メチルグルコシド（ポリオキシプロピレンメチルグルコシド日油製マクビオブライドＭＧ−１０Ｐ）、ＰＰＧ−１４ジグリセリル（ポリオキシエチレンジグリセリルエーテル 阪本薬品工業製ＳＹ−ＤＰ１４Ｔジグリセリンのヒドロキシ基に合計で１４モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物）、ＰＥＧ／ＰＰＧ／ポリブチレングリコール−８／５／３グリセリン（ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン 日油製ウィルブライドＳ−７５３）、ＰＰＧ−１６グリセリル（ポリオキシプロピレングリセリルエーテル 日油製ユニオール ＴＧ−１０００）、ＰＰＧ−９ジグリセリル（ポリオキシエチレンジグリセリルエーテル 阪本薬品工業製ＳＹ−ＤＰ９ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加重合した化合物））、ＰＯＥ(２０)ＰＯＰ(１６)デシルテトラデシルエーテル（ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル 日光ケミカルズ製ＰＥＮ−４６２０）、ＰＰＧ−２５ソルビトール（ポリオキシプロピレンソルビトール 日油製ユニオールＨＳ−１６００Ｄ）に分散した後、精製水に溶解し、１％ＫＯＨ水溶液にてｐＨを５．５に調整して、１００質量％とした。
コニカミノルタ製分光測色計ＣＭ−３５００ｄを用いて、厚さ２ｍｍのガラスセル（ＣＭ−Ａ９７）に７種類のシリビンマルトシド水溶液を入れて、透過法により測色した。
７種類のシリビンマルトシド水溶液を５０℃で３ヶ月保存し、同様に測色し、５０℃で保存する前との色差を求めた。また、以下の基準により、５０℃３ヶ月保存後の褐変度合を目視評価した。
【００２８】
目視評価の基準
○：ごくわずかに黄変、殆ど変化なし
△：やや黄変
×：褐変
結果を表５に示す。表５の結果を図３にグラフ化した。
【００２９】
（表５）
【００３０】
実施例１にて、ＰＰＧ−１４ジグリセリルの５０℃保管５ヵ月後の色差は、１０．８であったが、実施例３においては、５０℃保管３ヶ月後の色差が１４．５であった。一方、実施例１にて、ＰＰＧ−９ジグリセリルの５０℃保管５ヵ月後の色差は、９．１であったが、実施例３においては、５０℃保管３ヶ月後の色差が７．３であった。この様な差が生じたのは、別時期に、別ロットのシリビンマルトシドで実験を行ったためである。
実施例１並びに実施例３に示されたように、ＰＰＧ−１４ジグリセリルとＰＰＧ−９ジグリセリルはシリビンマルトシド水溶液の経時的な褐変を抑制する効果に優れるが、同様にポリオキシエチレン基を有するＰＯＰ(１０)メチルグルコシド（ポリオキシプロピレンメチルグルコシド）、ＰＥＧ／ＰＰＧ／ポリブチレングリコール−８／５／３グリセリン（ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン）、ＰＰＧ−１６グリセリルエーテル（ポリオキシプロピレングリセリルエーテル）、ＰＯＥ(２０)ＰＯＰ(１６)デシルテトラデシルエーテル（ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル）、ＰＰＧ−２５ソルビトール（ポリオキシプロピレンソルビトール）についても、シリビンマルトシド水溶液の経時的な褐変を抑制する優れた効果が認められた。
【００３１】
[試験例１]
表皮角化細胞分化抑制試験・増殖維持作用
１．実験材料
１．１ ヒト正常表皮角化細胞
ヒト正常表皮角化細胞NHEK（旭テクノグラス）を表皮角化細胞用培地：ＫＧＭ（旭テクノグラス）で３７℃-５％ ＣＯ２インキュベーターにて培養した。本実験には経代数が３〜５代の細胞を利用した。
１．２ ＫＧＭ（表皮角化細胞用培地）
ＫＧＭは表皮角化細胞基礎培地にヒト上皮細胞増殖因子（０．１ｎｇ／ｍｌ）、インシュリン（５．０μｇ／ｍｌ）、ハイドロコルチゾン（０．５μｇ／ｍｌ）、ゲンタマイシン（５０μｇ／ｍｌ）、アンフォテリシンＢ（５０μｇ／ｍｌ）、牛脳下垂体抽出液（２ｍｌ）を添加したものである。シリビン配糖体をはじめとするサンプルを細胞に添加する場合には、牛脳下垂体抽出液のみを除いた、ＫＧＭ培地を用いて実験を行った。
１．３ 添加サンプル
シリビン（ＳＢ）、シリビンマルトシド（ＳＢＭ）、シリビンラクトシド（ＳＢＬ）をＤＭＳＯ（ジメチルスフフォキシド：和光純薬）に溶解し、各種濃度にて添加した。
【００３２】
２．実験方法
２．１ 表皮角化細胞分化抑制試験
ＮＨＥＫをＫＧＭで５×１０４／ｍｌになるように懸濁し、４ｍｌ／ウエルで６穴プレートに播種し、２４時間培養して、プレートに細胞を接着させた。各化合物を添加した牛脳下垂体抽出液を除いたＫＧＭを４ｍｌ／ウエルで処理し、２日毎に培地交換しながら、８〜１０日間培養した。毎日顕微鏡で形態観察を行い、ＤＭＳＯ処理したコントロール細胞が分化様の形態変化（扁平化）を示した時点で、写真撮影を行い、培養を終了した。
２．２ 表皮角化細胞増殖維持試験
上記実験で得られた細胞をトリプシン処理によりプレートからはがした後に、ＫＧＭ中で２．５×１０４／ｍｌとなるように懸濁した。細胞懸濁液を２ｍｌ／ウエルで２４穴プレートに播種し、２日ごとに培地交換しながら、８日間培養した。培養後、ＮＨＥＫをトリプシン処理によりプレートからはがし、コールカウンター（ベックマン・コールター）により細胞数を測定した。
３．実験結果
３．１ 表皮角化細胞分化抑制試験
ＤＭＳＯを処理した比較対照群であるControl並びにＳＢ ３μＭ（シリビンを３μＭ添加した培地で培養）では、表皮角化細胞は扁平化し、分化様の形態変化を示した。それに対して、ＳＢＭ３μＭ、ＳＢＬ３μＭでは分化様の形態は認められなかった。ＳＢ、ＳＢＬ、ＳＢＭをそれぞれ１０μＭ添加した培地で培養した場合には、全て、表皮角化細胞の分化が抑制された。ＳＢ、ＳＢＬ、ＳＢＭは表皮角化細胞の分化抑制作用を有するが、ＳＢＭ、ＳＢＬはＳＢに比べて表皮角化細胞分化抑制効果に優れている。
【００３３】
３．２ 表皮角化細胞増殖維持試験
上記の表皮角化細胞分化抑制試験において、分化が抑制されていれば細胞は増殖能を維持し、継代作業をすることで順次増殖するはずである。分化誘導された細胞は分化が付加逆的な反応であるため増殖することはできない。
そこで上記試験で得られた細胞を経代し、維持されている増殖能を増殖した細胞の数を測定することで調べた。
【００３４】
その結果を図４に示す。試料濃度３μＭでは、ＳＢを添加したものについて細胞増殖能は殆ど維持されていないが、ＳＢＭは試料無添加と比べて１．８倍、ＳＢＬは試料無添加と比べて１．４倍に細胞数が増加し、細胞増殖能の維持効果が認められた。試料濃度１０μＭでは、ＳＢ、ＳＢＭ、ＳＢＬともに細胞数が増加し、ＳＢは試料無添加と比べて１．５倍、ＳＢＭは試料無添加と比べて２．１倍、ＳＢＬは試料無添加と比べて１．８倍に細胞数が増加し、細胞増殖能の維持効果が認められた。ＳＢと比べて、ＳＢＭ、ＳＢＬの細胞増殖能の維持効果が高いことがわかる。
【００３５】
[試験例２]
Ｉ型コラーゲン産生促進作用
１．実験材料
１．１ ヒト皮膚繊維芽細胞
ヒト皮膚繊維芽細胞ＣＣＤ１０７４ＳＫ（大日本住友製薬）をＤ−ＭＥＭ中で３７℃-５％ ＣＯ２インキュベーターにて培養した。本実験には経代数が１０〜１５代の細胞を利用した。
１．２ Ｄ−ＭＥＭ
Ｄ−ＭＥＭは、Ｄ−ＭＥＭ基礎培地（ＧＩＢＣＯ）に牛胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を１０％になるよう添加して用いた。またサンプルを処理する際には、牛胎児血清を入れないＤ−ＭＥＭを用いて実験を行った。
２．実験方法
ヒト皮膚繊維芽細胞ＣＣＤ１０７４ＳＫを１０％牛胎児血清を含むＤ−ＭＥＭ培地で３×１０５／ｍｌになるように懸濁し、１０ｃｍシャーレに１ｍｌ播種し、２４時間培養し、プレートに細胞を接着させた。培地をＤＭＳＯに溶解させた各サンプルを各濃度で添加した牛胎児血清を入れないＤ−ＭＥＭ培地に交換した。培地交換４８時間後に細胞培養液を回収し、限外ろ過装置を用いて培養液を濃縮した。約５００ｍｌ以下に濃縮後、タンパク質定量を行い、タンパク質量をそろえた後に、細胞培養液濃縮サンプルとしてウエスタンブロティングに使用した。
１レーン当り１０μｇのタンパク質をアプライし、ＳＤＳ-ＰＡＧＥで分離後、ニトロセルロース膜に転写した。転写後のニトロセルロース膜をブロッキング溶液（スキムミルクを５％の濃度になるように０．１％のポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレートを含むＰＢＳで溶解した溶液）に浸し、４℃で一昼夜ブロッキングした。洗浄液｛０．１％のポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレートを含むＰＢＳ｝で洗浄後、一次抗体｛洗浄液で５００ｎｇ／ｍｌに調製したＩ型コラーゲンに対するポリクローナル抗体（ロックランド）｝に浸し、室温で１時間反応させた。洗浄後、二次抗体（洗浄液で２５０ｎｇ／ｍｌに調製したホースラディッシュパーオキシダーゼ標識化抗ウサギイムノグロブリンＧ）に浸し、室温で１時間反応させた。洗浄後、ＥＣＬプラスウエスタンプロッティング検出試薬（アマシャムバイオサイエンス社）を用いて検出した。
【００３６】
実験結果
実験の結果、ＳＢと同様にＳＢＬ、ＳＢＭの両者にもＩ型コラーゲン産生促進作用が認められた。実験結果を図５に示す。
【００３７】
得られたバンドの強度をプログラムソフトＩｍａｇｅ Ｊにより数値化した結果、及びＤＭＳＯ処理時のＩ型コラーゲンの産生量を１とした際の比較産生量を表２に示す
【００３８】
【表２】
【００３９】
ＳＢ、ＳＢＭ、ＳＢＬともにＩ型コラーゲン産生促進作用を示した。ＳＢと比べて、ＳＢＭ、ＳＢＬはＩ型コラーゲン産生促進効果が強い。特に、試料濃度１０μＭでは、ＳＢＭ、ＳＢＬの作用効果が大きく、高濃度での顕著な作用効果が認められる。
【００４０】
[試験例３]
紫外線照射による水分蒸散抑制作用シワ形成抑制作用
１．実験材料・器具
実験動物ヘアレスマウスHos;HR１ ♀ ５週齢 (星野実験材料)
１．２ 紫外線照射装置
紫外線Ａ波（ＦＬ３２ＳＢＬ／ＤＭＲ：（株）クリニカルサプライ製）
紫外線Ｂ波（ＦＬ３２ＳＥ／ＤＭＲ：（株）クリニカルサプライ製）
１．３ 経皮水分蒸散量測定装置
Vapometer（キーサイエンス社製）
１．４ レプリカ採取器具およびレプリカ解析システム
(有)アサヒバイオメッド製の反射型レプリカ採取キット及びレプリカ解析システムASA‐03RXD
【００４１】
２．実験方法
２．１ 飼育環境
２５℃±２℃、湿度５０％±５％、食餌は飼料MR、水道水をそれぞれ自由摂取できるコンベンショナルな飼育環境で飼育した。
一群につき５匹を群分けし同一ケージにて飼育した。
日照は午前７時〜午後７時までの１２時間ごとに昼夜を設定した。
２．２ 紫外線照射
へアレスマウスHos;HR１を１週間馴化したのち紫外線照射を開始した。紫外線照射時は、ヘアレスマウスを専用のケージに移し、１群ずつＵＶＢ２０ｍＪ／ｃｍ２およびＵＶＡ１０Ｊ／ｃｍ２の紫外線を照射した。照射は月、水および金の週３日サイクルで１０週間実施し、合計３０回紫外線を照射した。
【００４２】
２．３ 群設定
紫外線照射後３０分以内にＳＢ、ＳＢＬ、ＳＢＭメタノール溶液又は溶媒（メタノール）をマウス背部皮膚全面に１００μＬ処理した。ＳＢ、ＳＢＬ、ＳＢＭ塗布の濃度設定をそれぞれ１．０％、０．３％、０．１％の３点設定し、これら全群については紫外線照射を行った。溶媒であるメタノールのみを塗布するものについて、紫外線未照射及び紫外線照射の群を設けた。溶媒にメタノールを用いたのはＳＢを溶解するためである。メタノール中において、ＳＢＭ、ＳＢＬは１％濃度においても完全に溶解していたが、ＳＢは０．１％のみが完全に溶解しているが、０．３％は若干析出が認められ、１％においては不溶物が認められた。
ＳＢメタノール溶液に不溶物が認められた場合も、そのまま実験に用いた。
【００４３】
２．４ 経皮水分蒸散量の測定
経皮水分蒸散量の測定は、VapoMeter（キーストン サイエンティフィック社製）を用い、背部の尾付け根より首に向かい２ｃｍ、腰椎から右側に０．５ｃｍ部位を３回測定して平均を求めた。測定端末の開口部はＮａｉｌモード（開口部を狭くすることで、マウス皮膚の狭い範囲に対応した）を用い、１回ごとの測定時間に約１９秒を要した。測定日は、紫外線照射１０週間後に行った。
【００４４】
２．５ レプリカ画像解析
シワの形成を正確に把握するためレプリカを採取した。レプリカ画像解析は反射用レプリカ解析システムＡＳＡ−０３ＲＸＤ（(有)アサヒバイオメッド製）を使用して行った。ＡＳＡ−０３ＲＸＤを用いて、採取したレプリカに角度２７度からの平行光（ＬＥＤ光源）を照射する事により得られるシワの形状に応じた陰影画像をＣＣＤカメラで撮像し、コンピュータに取り込み画像処理することでレプリカ表面のしわ体積率（μｍ３／ｍｍ２／１００）を計測した。
【００４５】
２．６ 統計解析
試験結果は平均値±標準偏差（Ｓ．Ｄ．）で表し、有意差検定は等分散性の検定をバートレット検定により行った。等分散性の仮定が棄却されなかった時はDunnettの多重検定を行い、等分散性の仮定が棄却された時は参考データとしてDunnettの多重検定を行った。
【００４６】
３．試験結果
３．１ 体重変動、外観観察
１０週間照射終了後、各群間で体重変遷に目立った違いは無かった。重篤な病変を示したマウスもいなかった。
マウス皮膚の外観を観察した結果、群２の紫外線照射メタノール処理群ではシワ形成が認められるのに対し、群４の０．３％シリビン塗布群、群６〜群８の全てのＳＢＭ塗布群、群９〜群１１の全てのＳＢＬ塗布群においてシワ抑制作用が認められた。
【００４７】
３．２ 経皮水分蒸散量
肌荒れの指標として、紫外線照射１０週間後にVapoMeterを用いて各群の水分蒸散量を測定した。結果を表３に示す。
群１の紫外線未照射群に比べて群２の紫外線照射群では経皮水分蒸散量が高くなる。群３〜群１１のシリビン（ＳＢ）、シリビン配糖体（ＳＢＭ、ＳＢＬ）塗布群では、危険率１％以下で有意に経皮水分蒸散量の上昇が抑制されていた。
【００４８】
１群（紫外線非照射、メタノール塗布）の水分蒸散量を０％、２群（紫外線照射、メタノール塗布）の水分蒸散量を１００％としたとき、３〜５群（紫外線照射、ＳＢ０．１〜１％塗布）の水分蒸散量は２６〜７６％、６〜８群（紫外線照射、ＳＢＭ０．１〜１％塗布）の水分量は１１〜２１％、９〜１１群（紫外線照射、ＳＢＬ０．１〜１％塗布）の水分量は２４〜２７％となり、ＳＢ、ＳＢＭ、ＳＢＬを添加することにより水分蒸散量の上昇が抑制された。特に、シリビン配糖体であるＳＢＭ、ＳＢＬの水分蒸散量の上昇抑制効果が高い。つまり日焼けによる肌荒れを改善する効果がある。
【００４９】
【表３】
【００５０】
３．３ シワ体積率
１０週間照射終了後、シワの形成を正確に把握するためレプリカを採取し、画像解析によりレプリカ表面のしわ体積率（μｍ３／ｍｍ２／１００）を計測した。結果を表４に示す。
【００５１】
Dunnettの有意差検定を実施した結果、群２（紫外線照射メタノール塗布）に対して、群１（紫外線未照射メタノール塗布）、群４（紫外線照射 ＳＢ０．３％塗布）、群７（紫外線照射 ＳＢＭ０．３％塗布）、群１１（紫外線照射 ＳＢＬ１．０％塗布）は、それぞれ危険率５％以下で有意にシワ体積が抑制された。
【００５２】
【表４】
【００５３】
〔処方例１ 化粧水〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．３
２．ＳＹ−ＤＰ９（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加
重合した化合物） ５．０
３．ジプロピレングリコール ５．０
４．水酸化カリウム 適量
５．クエン酸 適量
６．精製水 残余
（製法）
６に１〜５を溶解した。
【００５４】
〔処方例２ 乳液〕
質量％
１．シリビンマルトシド ３．０
２．水素添加大豆リン脂質 ０．７
３．ステアリン酸デカグリセリル（HLB12） ２．０
４．ＳＹ−ＤＰ９（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加
重合した化合物） ８．０
５．オリーブ油 ８．０
６．ベヘニルアルコール １．０
７．ジプロピレングリコール ８．０
８．カルボキシビニルポリマー ０．１
９．キサンタンガム ０．２
１０．水酸化カリウム 適量
１１．クエン酸 適量
１２．精製水 残余
（製法）
１〜４及び７〜１２を８０℃で加温溶解する。これに、約８０℃に加温した５、６を加え、ホモミキサーで攪拌混合し、３０℃まで冷却し、乳液を得た。
【００５５】
〔処方例３ モイスチャー美容液〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．２
２．水素添加大豆リン脂質 ０．６
３．モノオレイン酸デカグリセリル（HLB12） １．５
４．ジプロピレングリコール ７．０
５．１，３−ブタンジオール ５．０
６．ポリエチレングリコール４０００ ０．１
７．スクワラン ５．０
８．シリコーン ０．５
９．ラウロイルグルタミン酸ジ(フィトステリル/オクチルドデシル)
０．２
１０．キサンタンガム ０．３
１１．水酸化カリウム 適量
１２．クエン酸 適量
１３．精製水 残余
（製法）
１及び１１〜１３を攪拌溶解し、４〜６、１０を添加後約８０℃に加温溶解する。
これに、約８０℃に加温した２、３、７〜９を加え、３０℃まで冷却し、モイスチャー美容液
を得た。
【００５６】
〔処方例４ エモリエントクリーム〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．５
２．ＳＹ−ＤＰ９（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加
重合した化合物） １０．０
３．ジプロピレングリコール ８．０
４．１，２−ペンタンジオール ０．５
５．Ｌ−セリン ０．０１
６．ジステアリン酸デカグリセリル（HLB9.5） ０．５
７．モノミリスチン酸デカグリセリル（HLB14） １．５
８．オリーブ油 １０．０
９．マカデミアナッツ油 １．０
１０．ベヘニルアルコール １．５
１１．シリコーン ２．０
１２．ホホバ油 ３．０
１３．トコフェロール ０．００１
１４．ＳＩＭＵＬＧＥＬ ＮＳ（ＳＥＰＰＩＣ社製） ２．０
１５．キサンタンガム ０．１
１６．水酸化カリウム 適量
１７．クエン酸 適量
１８．精製水 残余
（製法）
１及び１６〜１８を攪拌溶解し、２〜５を添加後約８０℃に加温溶解する。これに、約８０℃に加温した６〜１４を加え、３０℃まで冷却し、エモリエントクリームを得た。
【００５７】
〔処方例５ ボディ用乳液〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．２
２．ＰＥＧ−６０水添ヒマシ油（HLB14） １．５
３．ＳＹ−ＤＰ１４Ｔ（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で１４モルの酸化プロピレン
が付加重合した化合物） ９．０
４．ジプロピレングリコール ７．０
５．ヒアルロン酸Ｎａ ０．００１
６．流動パラフィン １０．０
７．シリコーン ３．０
８．オクチルドデカノール ４．０
９．(アクリル酸/アクリル酸アルキル(C10-30))コポリマー ０．２
１０．水酸化カリウム 適量
１１．クエン酸 適量
１２．精製水 残余
１３. エタノール ２．５
（製法）
１及び１０〜１２を攪拌溶解し、２〜５、９を添加後約８０℃に加温溶解する。これに、約８０℃に加温した６〜８を加え、３０℃まで冷却、１３を添加し、ボディ用乳液を得た。
【００５８】
〔処方例６ マッサージクリーム〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．０５
２．ＳＹ−ＤＰ４（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で４モルの酸化プロピレンが付加
重合した化合物） １０．０
３．ＰＯＥ（１０）メチルグルコシド ２．０
４．ジプロピレングリコール ７．０
５．モノステアリン酸デカグリセリル（HLB12） １．０
６．エチルヘキサン酸セチル １ ２．０
７．ベヘニルアルコール ２．０
８．ステアリン酸 ０．５
９．セピノブ EMT10（ＳＥＰＰＩＣ社製） ０．５
１０．香料 適量
１１．フェノキシエタノール ０．３
１２．水酸化カリウム 適量
１３．クエン酸 適量
１４．精製水 残余
（製法）
１及び１１〜１４を攪拌溶解し、２〜４を添加後約８０℃に加温溶解する。これに、約８０℃に加温した５〜９を加え、３０℃まで冷却、１０を添加し、マッサージクリームを得た。
【００５９】
〔処方例７ 乳化型ファンデーション〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．１
２．ＳＹ−ＤＰ９（ジグリセリンのヒドロキシ基に合計で９モルの酸化プロピレンが付加
重合した化合物） １０．０
３．ジプロピレングリコール ８．０
４．１，２−ペンタンジオール １．０
５．キサンタンガム ０．３
６．トリイソステアリン酸ポリグリセリル-２ １．０
７．シクロメチコン ８．０
８．シリコーン ５．０
９．ネオペンタン酸イソステアリル ５．０
１０．イソステアリン酸 １．５
１１．ベヘニルアルコール ０．５
１２．パルミチン酸デキストリン １．０
１３．タルク ３．０
１４．二酸化チタン ５．０
１５．ベンガラ ０．５
１６．黄酸化鉄 １．４
１７．黒酸化鉄 ０．１
１８．水酸化カリウム 適量
１９．クエン酸 適量
２０．精製水 残余
（製法）
１及び１８〜２０を攪拌溶解し、２〜５を添加後約７０℃に加温溶解する。次に、よく粉砕した１３〜１７を添加し、攪拌混合する。これに、約８０℃に加温した６〜１２を加え、３０℃まで冷却し、乳化型ファンデーションを得た。
〔処方例８ ジェル状美容液〕
質量％
１．シリビンマルトシド １．０
２．ユニルーブ ＤＧＰ−７００ ５．０
３．１，３−ブタンジオール ７．０
４．ベタイン ２．０
５．ヒアルロン酸Ｎａ（１％水溶液） １．０
６．スクレロチウムガム ０．１
７．カルボキシビニルポリマー ０．２
８．水酸化カリウム 適量
９．精製水 残余
（製法）
９に７を溶解させ、１〜６を攪拌溶解する。８を添加しジェル状美容液を得た。
〔処方例９ シート状マスク〕
質量％
１．シリビンマルトシド ０．５
２．ユニルーブ ＤＧＰ−７００ ５．０
３．ジプロピレングリコール ８．０
４．ウィルブライドＳ−７５３ １．０
５．ネオペンタン酸イソステアリル ５．０
６．ビタミンＡ油 ０．００１
７．水素添加大豆リン脂質 １．０
８．ポリソルベート６０ ０．２
９．アルカリゲネス産生多糖体 ０．１
１０．カルボキシビニルポリマー ０．２
１１．水酸化カリウム 適量
１２．精製水 残余
（製法）
５〜８まで８０℃に加温溶解し、１〜４および９、１０、１２を加温溶解したものを添加し、攪拌混合する。
１１を加えて中和した後、３０℃まで冷却する。
その後、不織布に含浸させシート状マスクとする。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−ペンタンジオール、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、１，３−ブタンジオールからなる群から選ばれる１種又は２種以上とシリビン配糖体を含有することを特徴とするシリビン配糖体水溶液。
【請求項２】
シリビン配糖体を、ポリオキシプロピレン基を有する化合物を含有する水溶液に溶解したことを特徴とするシリビン配糖体水溶液。
【請求項３】
ポリオキシプロピレン基を有する化合物が、ポリオキシプロピレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリオキシプロピレンメチルグルコシド、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン、ポリオキシプロピレングリセリルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシプロピレンソルビトールからなる群から選ばれる１種又は２種以上であることを特徴とする請求項２記載のシリビン配糖体水溶液。
【請求項４】
シリビン配糖体がシリビンマルトシドであることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液を含有する皮膚外用剤。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液を含有するシワ形成抑制剤。
【請求項１】
ポリオキシアルキレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−ペンタンジオール、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、１，３−ブタンジオールからなる群から選ばれる１種又は２種以上とシリビン配糖体を含有することを特徴とするシリビン配糖体水溶液。
【請求項２】
シリビン配糖体を、ポリオキシプロピレン基を有する化合物を含有する水溶液に溶解したことを特徴とするシリビン配糖体水溶液。
【請求項３】
ポリオキシプロピレン基を有する化合物が、ポリオキシプロピレンジグリセリルエーテル、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリオキシプロピレンメチルグルコシド、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンポリオキシブチレングリセリン、ポリオキシプロピレングリセリルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシプロピレンソルビトールからなる群から選ばれる１種又は２種以上であることを特徴とする請求項２記載のシリビン配糖体水溶液。
【請求項４】
シリビン配糖体がシリビンマルトシドであることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液を含有する皮膚外用剤。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれかに記載のシリビン配糖体水溶液を含有するシワ形成抑制剤。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【公開番号】特開２０１０−２７０１０５（Ｐ２０１０−２７０１０５Ａ）
【公開日】平成２２年１２月２日（２０１０．１２．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−７７７６１（Ｐ２０１０−７７７６１）
【出願日】平成２２年３月３０日（２０１０．３．３０）
【出願人】（５９３１０６９１８）株式会社ファンケル (310)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１２月２日（２０１０．１２．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年３月３０日（２０１０．３．３０）
【出願人】（５９３１０６９１８）株式会社ファンケル (310)
【Ｆターム（参考）】
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