非ステロイド系抗炎症薬の硫化水素誘導体
【解決手段】 本発明は、炎症、疼痛、発熱の治療に有用な、改良された抗炎症特性を有する非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）の誘導体に関連する。特に、ＮＳＡＩＤｓは硫化水素（Ｈ２Ｓ）放出部分と共に誘導体化され、副作用の少ない新たな抗炎症性化合物を産生する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００５年５月２７日付けで出願されたＰＣＴ／ＣＡ２００５／０００８１９に対して優先権を主張した２００６年３月３１日付けで出願されたＰＣＴ／ＣＡ２００６／０００４８４の一部継続として出願されたものである。本出願はさらに２００６年７月１８日付けで出願された米国特許仮出願第６０／８０７，６３９号および２００７年１月３０日付けで出願された米国特許仮出願第６０／８８７，１８８号に対して優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、炎症、疼痛、発熱の治療に有用な、改良された抗炎症特性を有する非ステロイド系抗炎症薬（ｎｏｎ−ｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇ：ＮＳＡＩＤｓ）の誘導体に関連する。より具体的には、ＮＳＡＩＤｓは硫化水素（Ｈ２Ｓ）放出部分によって誘導体化されており、副作用の少ない新たな抗炎症性化合物を産生するものである。
【背景技術】
【０００３】
非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）は、変形性関節症、関節リウマチ、痛風、強直性脊椎炎など、疼痛、発熱、炎症に関連した様々な病態の治療に広範に用いられている。ＮＳＡＩＤｓはさらに損傷および外科手術（歯科手術を含む）に関連した急性疼痛および頭痛の治療にも広範に用いられている。ＮＳＡＩＤｓの有益な作用は主にシクロオキシゲナーゼ−１（ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−１：ＣＯＸ−１）およびシクロオキシゲナーゼ−（ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２：ＣＯＸ−２）を阻害することによるプロスタグランジン合成抑制能に起因すると考えられている。
【０００４】
しかし、ＮＳＡＩＤｓの長期使用は消化管に重大な損傷を及ぼす可能性があるためにかなり制限されている（Ｗａｌｌａｃｅ，Ｊ．Ｌ．Ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇｓ ａｎｄ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｐａｔｈｙ：ｔｈｅ ｓｅｃｏｎｄ ｈｕｎｄｒｅｄ ｙｅａｒｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．１９９７；１１２：１０００〜１０１６）。選択的ＣＯＸ−２阻害薬は消化管損傷が比較的軽度であると思われたため、従来のＮＳＡＩＤｓの進歩とみられていた。しかし、これらの薬剤およびおそらくは従来のＮＳＡＩＤｓについても、その心臓血管毒性についての懸念が生じている（Ｇｒｏｓｓｅｒら、Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ＣＯＸ−２ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ：ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｃｈａｌｌｅｎｇｅｒｓ ａｎｄ ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．２００６；１１６：４〜１５）。
【０００５】
ＮＳＡＩＤｓが白血球粘着を促進して胃粘膜血流を低下させ、これらの作用がＮＳＡＩＤ誘発性の胃腸障害の発病に対して広範囲にわたり重要な要因であることは周知である（Ｗａｌｌａｃｅ，１９９７）。非選択的Ｎ且つＣＯＸ−２選択的ＮＳＡＩＤｓによる白血球粘着の誘導もまた、これらの薬剤による心臓血管合併症に寄与している可能性がある。
【０００６】
最近、硫化水素（Ｈ２Ｓ）が抗炎症作用および鎮痛作用を及ぼすことが観察された。Ｈ２Ｓは内因性物質であり、多くの組織で産生され、多くの機能に作用を及ぼす（Ｗａｎｇ，Ｔｗｏ‘ｓ ｃｏｍｐａｎｙ，ｔｈｒｅｅ’ｓ ａ ｃｒｏｗｄ：ｃａｎ Ｈ２Ｓ ｂｅ ｔｈｅ ｔｈｉｒｄ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ｇａｓｅｏｕｓ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒ？ＦＡＳＥＢ Ｊ ２００２；１６：１７９２〜１７９８）。またＨ２Ｓは血管拡張剤であることも示されており、血管内皮への白血球粘着を抑制することが出来る（Ｗａｎｇ，２００２；Ｆｉｏｒｕｃｃｉら、Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｓｕｌｆｉｄｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ ｇａｓｔｒｉｃ ｉｎｊｕｒｙ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ ｄｒｕｇｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２００５；１２９；１２１０〜１２２４）。さらに、Ｆｉｏｒｕｃｃｉら（２００５）はラットにおいて、Ｈ２Ｓ供与体による前処置によりＮＳＡＩＤ誘発性胃障害の重症度減弱が可能であることを示した。
【０００７】
驚くべきことに、Ｈ２Ｓ放出部分に共有結合するか或いはＮＳＡＩＤ塩がＨ２Ｓ放出部分と共に形成された場合に、様々なＮＳＡＩＤｓの抗炎症作用が有意に亢進することについて、本発明者らは本出願において示している。さらに、これらのＮＳＡＩＤ誘導体の副作用は比較的軽度であることが示されている。特に、本発明者らは、本発明のＮＳＡＩＤ誘導体が以下の更なる特性、すなわち、（１）従来のＮＳＡＩＤｓよりも胃腸障害が少ないこと、（２）既存の胃潰瘍の治癒を促進すること、および（３）収縮期血圧の上昇が従来のＮＳＡＩＤｓよりも有意に低いこと、の１つ以上を有することを示した。さらに、本発明のＮＳＡＩＤ誘導体は、血管内皮への白血球粘着を低下させ、それによって胃腸および心臓血管系の副作用を低下させる可能性がある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の一態様において、ＮＳＡＩＤと共有結合するか或いはＮＳＡＩＤと共に塩を形成するＨ２Ｓ放出部分を含むＮＳＡＩＤ誘導体が提供される。驚くべきことに、本発明の化合物のは、ラットのカラギーナン誘発性足浮腫モデルにおいて、ＮＳＡＩＤ単独、Ｈ２Ｓ放出成分単独、またはＮＳＡＩＤとＨ２Ｓ放出成分を別々だが併用して投与した場合と比較して、高い抗炎症作用を示した。さらに、本発明のＮＳＡＩＤ誘導体により、血漿Ｈ２Ｓ濃度は一時的にわずかに上昇する。理論に束縛されるものではないが、血漿Ｈ２Ｓ濃度の一時的な上昇は、それが生理学的範囲内であっても抗炎症作用亢進の一因となる可能性がある。
【０００９】
また驚くべきことに、本発明の化合物によるシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）活性および／またはシクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）活性に対する抑制能は、それぞれに対応する非誘導体化ＮＳＡＩＤよりも高い可能性がある。そのようなＣＯＸ−２および／またはＣＯＸ−１の高い抑制能も、観察された抗炎症作用亢進の一因である可能性がある。さらに、ＣＯＸ−１阻害亢進を有する本発明の化合物は血小板における有意なトロンボキサンＢ２産生抑制を示しており、これが低い心臓血管毒性に寄与している可能性がある。
【００１０】
また、本発明の化合物はそれぞれに対応する非誘導体対応物に比べて副作用が少ない。例えば、化合物の中には、胃プロスタグランジン合成の抑制が顕著であるにもかかわらず胃損傷の誘発はＮＳＡＩＤ単独に比べて意外にも有意に少ないものがあった。これらのＨ２Ｓ放出ＮＳＡＩＤ誘導体において胃の安全性が認められる一方、ＮＳＡＩＤおよびＨ２Ｓ放出成分をラットに別々に併用投与した場合には認められない。理論に束縛されるものではないが、本発明の化合物は血管内皮への白血球粘着を低下させることが示されており、これが同化合物の胃安全性に寄与している可能性がある。また、血管内皮への白血球粘着の低下により、ＮＳＡＩＤｓの長期使用で頻繁に見られる心臓血管系副作用が軽減される可能性がある。
【００１１】
さらに、本発明の化合物を高血圧ラットに投与した場合、従来のＮＳＡＩＤｓを投与した場合に比べ、誘発された収縮期血圧の上昇は意外にも有意に小幅であった。血圧上昇傾向が少ないことから、ＮＳＡＩＤｓの長期使用に頻繁に見られる心臓血管系副作用が軽減される可能性がある。
【００１２】
本発明に従って、以下の一般式を有する化合物が提供され、
Ａ−Ｙ−Ｘ（化学式Ｉ）
式中、ＡはＮＳＡＩＤ遊離基であり、Ｙは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、またはゼロから成る群から選択されるものであり、Ｘは、単独で或いはＮＳＡＩＤと結合した場合に硫化水素放出可能な部分（以下Ｈ２Ｓ放出部分と称する）である化合物、またはその薬学的に許容されるその塩であり、Ｙがゼロの場合、前記ＮＳＡＩＤ誘導体はＡおよびＸの塩である可能性がある。
【００１３】
好ましい実施形態において、化学式ＩのＸは以下から成る群から選択されるものである。
【００１４】
【化１】
【００１５】
しかしながら、単独或いはＮＳＡＩＤと結合した場合のいずれにおいても、Ｈ２Ｓを放出することが可能な非毒性有効部分はいずれも、本発明に使用可能であるということは理解されることである。
【００１６】
一実施形態において、本発明の化合物は以下の一般式を有するものであり、
Ｂ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｘ （化学式ＩＩ）
式中、Ｂ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−は遊離型のカルボキシル基を有するＮＳＡＩＤまたはカルボキシ置換ＮＳＡＩＤから誘導されるものであり、ＸはＨ２Ｓ放出部分である化合物、またはその薬学的に許容できる塩である。
【００１７】
一実施形態において、化学式ＩＩのＢ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−は以下から成る群から選択されるものであり、
【００１８】
【化２−１】
【００１９】
【化２−２】
【００２０】
さらに、Ｘは硫化水素（Ｈ２Ｓ）放出部分である。
【００２１】
一実施形態において、化学式ＩＩのＸは以下から成る群から選択されるものである。
【００２２】
【化３】
【００２３】
しかしながら、単独或いはＮＳＡＩＤと結合した場合のいずれにおいても、Ｈ２Ｓを放出することが可能な非毒性有効成分はいずれも本発明に使用可能であることは理解されることである。
【００２４】
本発明の化合物に組み込まれることが考慮されるＮＳＡＩＤｓは、アセチルサリチル酸（ＡＳＡ）、ジクロフェナク、ナプロキセン、インドメタシン、フルルビプロフェン、スリンダク、イブプロフェン、アセクロフェナク、アセメタシン、ベノキサプロフェン、ベンゾフェナク、ブロムフェナク、ブクロキシン酸、ブチブフェン、カルプロフェン、セレコキシブ、シクロプロフェン、シンメタシン、クリダナク、クロピラック、ジフルシナル、エトドラック、エトリコキシブ、フェンブフェン、フェンクロフェナク、フェンクロラク、フェノプロフェン、フェンチアザク、フルノキサプロフェン、フラプロフェン、フロブフェン、フラフェナク、イブフェナク、インドプロフェン、イソキセパク、ケトプロフェン、ケトロラック、ロキソプロフェン、ロナゾラク、ルミラコキシブ、メチアジニク、メフェナム酸、メクロフェナム酸、メロキシカム、ナブメトン、ピロミド酸、サルサレート、ミロプロフェン、オキサプロジン、オキセピナク、パラコキシブ、フェニルブタゾン、ピルプロフェン、ピロキシカム、ピロゾラク、プロチジン酸、ロフェコキシブ、サリチル酸ナトリウム、スプロフェン、チアプロフェン酸、トルメチン、バルデコキシブ、ゾメピラク、などである。
【００２５】
望ましい化合物は以下の化学式を有するものである。
【００２６】
【化４−１】
【００２７】
【化４−２】
【００２８】
【化４−３】
【００２９】
【化４−４】
【００３０】
【化４−５】
【００３１】
【化４−６】
【００３２】
【化４−７】
【００３３】
【化４−８】
【００３４】
【化４−９】
【００３５】
【化４−１０】
【００３６】
【化４−１１】
【００３７】
上述の前駆体ＮＳＡＩＤｓ（Ａ）は従来技術で周知の方法に従って調製される。例えば、この参照により本願明細書に組み込まれるＴｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ 第１３版（２００１）、メルク社、ニュージャージー州Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ Ｓｔａｔｉｏｎを参照。入手可能な場合は、光学異性体を含む対応する異性体を使用することが可能である。
【００３８】
アルカリ金属、アルカリ土類金属、非毒性アミン、及び非毒性アミノ酸との塩など、本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩もまた本発明の一部である。本発明の化合物の望ましい塩はアルギニン塩およびアグマチン塩である。薬学的に許容される酸付加塩もまた含まれる。
【００３９】
好ましい実施形態においては、本発明のＮＳＡＩＤｓはＨ２Ｓ放出部分である４−ヒドロキシチオベンズアミド（本願明細書においてＴＢＺと称する）により誘導体化される。ＴＢＺ誘導体は５−ｐｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（ＡＤＴ−ＯＨ）誘導体に比較した場合、一貫して全体的に抗炎症作用に優れ、副作用は少なかった。意外にも、前記ＴＢＺ誘導体は前記ＡＤＴ−ＯＨ誘導体よりも有意に多くのＨ２Ｓを生成し、そのことが抗炎症作用の亢進と副作用の低下に寄与している可能性がある。
【００４０】
さらに、前記ＴＢＺ誘導体の方がＡＤＴ−ＯＨ誘導体よりもＣＯＸ−１／ＣＯＸ−２阻害能を一貫して保持していた。現に、多くのＴＢＺ誘導体がＣＯＸ−１阻害およびＣＯＸ−２阻害のいずれかまたは両方を実際に亢進させた。その上、化合物ＸＸ（ナプロキセン−ＴＢＺ誘導体）は前記ＡＤＴ−ＯＨ同等物である化合物Ｖ（ナプロキセン−ＡＤＴ−ＯＨ）よりもトロンボキサンＢ２合成阻害において有意に優れ、化合物ＸＩＸ（インドメタシン−ＴＢＺ誘導体）は前記ＡＤＴ−ＯＨ同等物である化合物ＩＶ（インドメタシン−ＡＤＴ−ＯＨ誘導体）よりもトロンボキサンＢ２合成阻害において有意に優れていた。トロンボキサンＢ２阻害の亢進は本誘導体の心臓血管系安全性に寄与している可能性がある。
【００４１】
本発明の化合物は以下の２つのスキームで図示したようにに調製可能である。
【００４２】
スキーム １
４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（化合物ＩＩ）の合成を例として用いて以下にスキーム１を示す。
【００４３】
【化５】
【００４４】
例えばジクロフェナク（１）などの遊離型のカルボキシル基を有するＮＳＡＩＤ（またはカルボキシ置換ＮＳＡＩＤ）を最初にジメチルホルムアミドに溶解させて、次にヒドロキシベンゾトリアゾール（ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｔｒｉａｚｏｌｅ：ＨＯＢｔ）および１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（１，３−ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ：ＤＣＣ）を加える。４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（３）などの発明化合物を形成するのに適した条件下、前記混合物に５−ｐｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（ＡＤＴ−ＯＨ）（２）などの硫化水素放出部分を加える。このスキームでは４−ヒドロキシフェニルイソチオシアナート（本願明細書においてＨＰＩと称する）など他の硫化水素放出部分が使用可能であることが理解される。
【００４５】
スキーム ２
ＮＳＡＩＤ誘導体［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（化合物ＸＶＩＩ）の合成を例に用いて以下にスキーム２を示す。このスキームでは、ＮＳＡＩＤに共有結合した硫化水素放出部分にローソン試薬を用いて硫黄基を加える。
【００４６】
【化６】
【００４７】
例えばジクロフェナク（１）などの遊離型のカルボキシル基を有するＮＳＡＩＤ（またはカルボキシ置換ＮＳＡＩＤ）を最初にジメチルホルムアミドに溶解させて、次にヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）および１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を加える。この混合液に、本発明の化合物の前駆体（４−カルバモイルフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（２）など）、硫黄が不足している前駆体の形成に適した条件下、４−ヒドロキシベンズアミドなどの硫化水素放出前駆体を加える。ローソン試薬など硫黄基を加えることが可能な適切な化合物を加え、本発明の化合物（［２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（３）など）を形成する。
【００４８】
さらなる本発明の態様において、本発明の化合物の薬剤組成物および薬学的に許容できる賦形剤または担体、特に消化管の炎症病態の治療に用いられるものが提供される。
【００４９】
本発明の化合物は、これらに限定されるものではないが、痛みや頭痛の治療における鎮痛剤として、もしくは発熱の治療に対する解熱剤として、患者の炎症および他の炎症関連疾患の治療に有用である。例えば、本発明の化合物は、これらに限定されるものではないが、関節リウマチ、脊椎関節症、痛風性関節炎、変形性関節症、全身性エリテマトーデス、若年性関節炎を含む関節炎の治療に有用である。このような本発明の化合物は、喘息、気管支炎、月経痙攣、腱炎、滑液包炎、皮膚関連の病態（乾癬、湿疹、熱傷、皮膚炎など）、術後炎症（白内障手術、屈折矯正手術などの眼科手術を含む）の治療において有用である。本発明の化合物は、炎症性腸疾患、クローン病、胃炎、過敏性腸症候群、潰瘍性大腸炎などの胃腸病の治療、および結腸直腸癌などの癌の予防もしくは治療にも有用である。本発明の化合物は、血管障害、片頭痛、結節性動脈周囲炎、甲状腺炎、再生不良性貧血、ホジキン病、強皮症、リウマチ熱、１型糖尿病、神経筋接合部疾患（重症筋無力症など）、白質疾患（多発性硬化症）、サルコイドーシス、ネフローゼ症候群、ベーチェット症候群、多発性筋炎、歯肉炎、腎炎、過敏症、損傷後の腫脹、心筋虚血などの疾患における炎症の治療に有用である。前記化合物は、網膜炎、網膜症、ブドウ膜炎、眼球羞明症などの眼科疾患の治療、および眼組織への急性損傷の治療においても有用である。前記化合物はウイルス感染および嚢胞性線維症に関連するような肺炎症の治療にも有用である。前記化合物はアルツハイマー病を含む皮質認知症など特定の中枢神経系疾患の治療にも有用と考えられる。本発明の化合物は関節炎の治療などに対し抗炎症薬として有用であり、副作用が顕著に少ないという付加的利益がある。これらの化合物は、アレルギー性鼻炎、呼吸窮迫症候群、内毒素性ショック症候群、アテローム性動脈硬化症、および脳卒中、虚血、外傷による中枢神経系損傷の治療にも有用である。前記化合物は、歯痛、筋肉痛、癌性疼痛など（これらに限定されない）の治療にも有用である。これらの化合物はヒトの治療に有用であるばかりでなく、ウマ、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ヒツジ、ブタなどの哺乳類の治療にも有用である。
【００５０】
治療される具体的な病態もしくは病状に応じて、当業者が容易に判断可能であるように、本発明の化合物は、適切な治療的有効且つ安全な任意の用量で対象に投与することが可能である。これらの化合物は一日あたり約１〜２０００ｍｇの範囲内で単回投与もしくは分割投与するのが最も望ましいが、治療対象の体重、病態、および投与経路によって必然的に異なるものである。本発明の化合物の形成するために、具体的に使用されるＮＳＡＩＤによって用いられる用量が影響されることが理解される。しかしながら、用量レベルは約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇであり、より好ましくは約５〜９０ｍｇ／ｋｇ、さらにより好ましくは約５〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲である。それでもなお、治療対象の体重、病態、および前記薬剤への個々の反応次第で望ましい用量は異なり、さらに選択された剤形の種類、そのような投与を行う期間や間隔にも影響されることが理解される。ある場合においては、前述の範囲の下限より少ない用量レベルで十分である可能性があり、また別の場合にはさらに多用量であってもいかなる有害な副作用を生じることなく使用可能である。ただし、そのような多用量の場合は、最初に少量ずつに分けて投与する必要がある。
【００５１】
本発明の化合物は、投与経路によって決定されるいかなる製剤処方であっても投与可能である。これらの薬剤組成物は、相性の良い薬学的に許容可能な賦形剤を用いて従来の方法で調製可能である。そのような組成物の例としては、即時溶液、注射可能調製物、直腸内、点鼻、眼内、膣内用としてカプセル、錠剤、経皮パッチ、トローチ、スプレー、シロップ、粉末、顆粒、ゲル、エリキシル、座剤などがあげられる。好ましい投与経路は経口および経直腸である。
【００５２】
経口投与用として、例えば微結晶セルロース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、第二リン酸カルシウム、グリシンなど各種賦形剤に加え、でんぷん（好ましくはコーン、ジャガイモ、またはタピオカ粉）、アルギン酸、特定の複合ケイ酸塩などの各種崩壊剤および、ポリビニルピロリドン、蔗糖、ゼラチン、アカシアなどの造粒結合剤を含有する錠剤を使用することも可能である。さらに錠剤化のためにステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、タルクなどの平滑剤を使用することも可能である。ゼラチンカプセルにおいても同様の種類の固形組成物を充填剤として使用することが可能であり、この場合の好ましい材料としては、高分子量のポリエチレングリコールに加え、ラクトースまたは乳糖が含まれる。経口投与用として水性懸濁液および／またはエリキシル剤が望ましい場合、活性成分に甘味剤または香味剤、着色物質、および必要に応じ乳化剤および／または懸濁化剤に加えて、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、およびそれらの各種組合せを組み合わせることも可能である。
【００５３】
即時放出、制御放出、持続放出、遅延放出、または標的遅延放出用として剤形を設計することが可能である。これらの用語の定義当業者に周知である。また、前記剤形の放出特性は、重合体の混合組成、被覆基質組成、多粒子組成、被覆多粒子組成、イオン交換樹脂ベースの組成、浸透圧ベースの組成、または生分解性重合体組成によって影響を受ける可能性がある。理論に束縛されるものではないが、放出は好ましい拡散、分解、浸食、イオン交換、浸透、またはそれらの組合せをによって影響を受ける可能性があると考えられる。
【００５４】
非経口的投与用として、ごま油またはピーナッツ油のいずれか、または含水プロピレングリコールに入った活性化合物の溶液を使用することも可能である。水溶液は必要に応じ適切に中和する必要があり（８より高いｐＨが望ましい）、必要であれば、液体希釈剤を最初に等張にする。前記水溶液は静脈内注射に適している。無菌状態下におけるこれらの溶液の作成はいずれも当業者に周知の標準的製薬技術により容易に達成される。
【００５５】
以下の実施例では、当業者が本発明を実施及び使用出来るようにさらに詳しく説明する。しかし、当然のことながら、これらの実施形態は本発明を図示するのが目的であり、請求項によって定義される本発明の範囲を限定するものとして解釈されるものではない。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】図１は、賦形剤、ジクロフェナク、および本発明の２つのジクロフェナク誘導体である化合物ＩＩと化合物ＸＶＩＩを投与したラットにおいて測定した胃損傷スコアを示したものである。
【図２】図２は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、化合物ＸＶＩＩを投与したラットにおいて産生された胃プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）の量を示したものである。
【図３】図３は、賦形剤、ナプロキセン、および本発明の２つのナプロキセン誘導体である化合物Ｖと化合物ＸＸを投与したラットにおいて測定した胃損傷スコアを示したものである。
【図４】図４は、図３のラットの血液におけるトロンボキサンＢ２合成量を示したものである。
【図５】図５は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩを投与したラットにおける小腸潰瘍の全長を示したものである。
【図６】訳図６は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩ投与前後のラットにおけるヘマトクリット（％）を示したものである。
【図７】図７は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、化合物ＸＶＩＩを投与したラットの皮下嚢におけるＰＧＥ２浸出量をラット空気嚢アッセイを用いて測定したものである。
【図８】図８は、図７のラットにおける全血トロンボキサンＢ２（ＴＸＢ２）量を示したものである。
【図９】図９は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩを投与したラットにおける足容積増加抑制を示したものである。
【図１０】図１０は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＸＶＩＩを投与したラットにおける足容積増加抑制を示したものである。
【図１１】図１１は、賦形剤、ナプロキセン、化合物Ｖ、化合物ＸＸを投与したラットの皮下嚢におけるＰＧＥ２浸出量をラット空気嚢アッセイを用いて測定したものである。
【図１２】図１２は、インドメタシン、化合物ＩＶ、化合物ＸＩＸの濃度関数としてのヒト血液（生体外）によるトロンボキサン合成量（ｎｇ／ｍＬ）を示したものである。
【図１３】図１３は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＸＶＩＩ、ナプロキセン、化合物ＸＸを毎日１週間投与した後のラットにおける胃潰瘍の表面積（ｍｍ２）を示したものである。
【図１４】図１４は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、ナプロキセン、化合物ＸＸを投与したラットにおける収縮期血圧の上昇（ｍｍ Ｈｇ）を示したものである。
【図１５】図１５は、ラットに化合物ＩＩ ５０μＭ／ｋｇを経口投与した際の血漿硫化水素濃度を示したものである。
【図１６】図１６は、緩衝液中および肝臓ホモジネート中で培養した際に化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩから生成された硫化水素の量を示したものである。
【発明を実施するための形態】
【００５７】
化合物の作成
蛍光指示薬を加えたＭａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅｌシリカゲル５０プレート上で薄層クロマトグラフィを行い、プレートを紫外線（２５４ｎｍ）で視覚化した。カラムクロマトグラフィにはＫｉｅｓｅｌｇｅｌ ６０を用いた。合成試薬はいずれもＡｌｄｒｉｃｈ−Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙから購入し、無精製で用いた。溶媒は分析用試薬を上回る純度であり、供給されたままの状態で使用した。真空下における溶媒除去にはＢｕｃｈｉ Ｒ−１１４ Ｒｏｔａｖａｐｏｒを用いた。構造をプロトン１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲにより分光的に検証した。スペクトルはＶａｒｉａｎ Ｍｅｒｃｕｒｙ Ｐｌｕｓ ４００計器に記録した。化学シフトはＭｅ４Ｓｉを内部基準とした。Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ ＡＰＩ ２０００ 質量分析により前記合成産物の質量スペクトルを計測した。Ｂｕｃｈｉ Ｂ−５４０で融点を測定した。最終化合物の純度をＲＰ−ＨＰＬＣで測定した。カラムをＲｈｅｏｄｙｎｅモデル７７２５インジェクタ、Ｗａｔｅｒｓ ６００ ＨＰＬＣ システム、Ｗａｔｅｒｓ ４８６調節可能吸光度検出器（２１５もしくは２３５ｎｍに設定）、Ｗａｔｅｒ ７４６チャート式記録計に接続した。合成された化合物の元素分析の結果は満足すべきものであった。分析は元素記号のみによって示され、結果は理論値±０．４％以内である。
【実施例１】
【００５８】
［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−（５−チオキソ−５Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル（化合物ＩＩ）の合成
【００５９】
【化７】
【００６０】
スキーム １
５−ｐｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；ＡＤＴ−ＯＨ）の合成
【００６１】
【化８】
【００６２】
アネトール（３１ｇ、０．２１Ｍ）および硫黄（４８ｇ、１．４０Ｍ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２５０ｍＬ）中で８時間加熱した。溶媒除去後、残留物はトルエン中でほぼ完全に可溶であった。前記トルエン溶液を２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で抽出することにより、オレンジ色の固体沈殿物を得た（８．５ｇ；ｍ．ｐ．３００℃以上）。この沈殿物を沸騰水中に溶解し、塩酸を加えた後、オレンジ色の沈殿物として２を得た（６．２ｇ、収率１３％；ｍ．ｐ．１８８〜１８９℃）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ６．８６（ｄ、２Ｈ）、７．６８（ｓ、１Ｈ）、７．７５（ｄ、２Ｈ）、１０．５１（ｓ、−ＯＨ）；ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ ２２５（Ｍ−）。
【００６３】
［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−（５−チオキソ−５Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル（３）の合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５０ｍＬ中に１（ジクロフェナク、８９０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（４４５ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（６８０ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に５−ｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；６８７ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下で蒸発させ、得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解した。有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ （９／１）で溶出し、そこから［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−（５−チオキソ−５Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル（３）を得た（１．１ｇ、収率７４％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ４．１２（ｓ、２Ｈ）、６．２１（ｄ、１Ｈ）、６．８７（ｔ、１Ｈ）、７．１４（ｔ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ）、７．２２（ｔ、１Ｈ）、７．３４（ｄ、２Ｈ）、７．５４（ｄ、２Ｈ）、７．８０（ｓ、１Ｈ）、７．９７（ｄ、２Ｈ）；
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３７．４、１１６．１、１２１．０、１２２．３、１２３．５、１２３．７、１２７．０、１２８．７、１２９．３、１２９．８、１３２．０、１３２．２、１３６．４、１３７．７、１４３．８、１５４．２、１７０．３、１７３．３、２１３．２。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ５０４（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：８３〜８６℃。
【実施例２】
【００６４】
［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（化合物ＸＶＩＩ）の合成
【００６５】
【化９】
【００６６】
スキーム ２
４−カルバモイルフェニル ２−［２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）−フェニル］酢酸（５）の合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５０ｍＬ中に１（ジクロフェナク、８９０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（４４５ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（６８０ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（４、６１６ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ、得られた油性残留物をクロロホルムに溶解した。有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物５をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９／１）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（５）を得た（２１２ｍｇ、収率１７％）。
【００６７】
［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（６）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（５，４８０ｍｇ、１１．４ｍｍｏｌ）およびローソン試薬（４６０ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン２０ｍＬに溶解した。反応液を５０℃まで温め、６時間にわたって撹拌した。減圧下に前記溶媒を除去し、粗残留物をシリカゲル・カラム（ジクロロメタン／メチルアルコール ９．５／０．５）で精製し、当該純粋化合物 ６（４４６ｍｇ、収率９１％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ４．０７（ｓ、２Ｈ）、６．５９（ｄ、１Ｈ）、６．６７（ｓ、１Ｈ）、６．９８（ｔ、１Ｈ）、７．１４（ｔ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ）、７．２８（ｔ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、２Ｈ）、７．６３（ｓ、１Ｈ）、７．９７（ｄ、２Ｈ）；
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３８．８、１１８．８、１２１．８、１２２．６、１２３．７、１２４．４、１２８．７、１２９．１、１３１．２、１３７．２、１３７．８、１４２．９、１５３．５、１７０．５、１９３．２、２０１．７
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ４３１（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１７０〜１７２℃。
【実施例３】
【００６８】
［２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−（５−チオキソ−５Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル（化合物ＩＩＩ）の合成
【００６９】
【化１０】
【００７０】
スキーム １
４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（３）の合成
ジメチルホルムアミド４０ｍＬに１（ルミラコキシブ、６００ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（３０１ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（４５９ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に５−ｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；５０４ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２で溶出し、そこから４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（３）を採取した（２９９ｍｇ、収率３７％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）：δ２．３２（ｓ、３Ｈ）、４．０２（ｓ、２Ｈ）、６．４１（ｓ、１Ｈ）、、６．７１（ｄ、１Ｈ）、６．９３（ｔ、１Ｈ）、６．９５（ｄ、２Ｈ）、７．１４（ｄ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、２Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．６６（ｄ、２Ｈ）；
１Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）：δ２０．８、３８．７、１１５．２、１１９．２、１２２．５、１２３．２、１２４．０、１２６．１、１２７．２、１２９．３、１３０．３、１３１．７、１３２．２、１３３．６、１３６．４、１４０．３、１５３．７、１５４．４、１５６．８、１７０．３、１７１．６、２１５．７
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ５０３（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１３１〜１３３℃。
【実施例４】
【００７１】
４−チオカルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（化合物ＸＶＩＩＩ）の合成
【００７２】
【化１１】
【００７３】
スキーム ２
４−カルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（５）の合成
ジメチルホルムアミド１５ｍＬに１（ルミラコキシブ、２２３ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１１ｍｇ、０．８２５ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１７０ｍｇ、０．８２５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（４、１５４ｍｇ、１．１２５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物をクロロホルムに溶解し、有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物５をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ （９／１）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（５）を採取した（１１１ｍｇ、収率３５％）。
【００７４】
４−チオカルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（６）の合成
４−カルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート、５（１１０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）、ローソン試薬（１０９ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン１５ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、３時間にわたって撹拌した。減圧下に前記溶媒を除去し、得られた粗残留物をシリカゲル・カラム（ジクロロメタン／メチルアルコール ９．５／０．５）で精製し、純粋化合物 ６を得た（５９ｍｇ、収率５１％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．３２（ｓ、３Ｈ）、４．０１（ｓ、２Ｈ）、６．４６（ｓ、１Ｈ）、、６．７０（ｄ、１Ｈ）、６．９２（ｔ、１Ｈ）、７．０１（ｄ、２Ｈ）、７．１１（ｄ、２Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ）、７．６２（ｓ、ＮＨ）、７．８４（ｄ、２Ｈ）；
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２０．８、３０．７、１１５．１、１１９．２，１２２．０、１２２．３、１２４．１、１２４．９、１２６．１、１２８．２、１２９．２，１３２．３、１３４．８、１３８．６、１４０．９、１５３．７、１５４．６、１５６．２、１７０．４、２０１．７
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ４２９（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１２０〜１２２℃。
【実施例５】
【００７５】
４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−アセトキシ安息香酸（化合物Ｉ）の合成
【００７６】
【化１２】
【００７７】
スキーム １
４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−アセトキシ安息香酸（３）の合成
ジメチルホルムアミド４０ｍＬに１（アセチルサリチル酸、４１６ｍｇ、２．３１ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（３４３ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（５２３ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に５−ｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；５７４ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、エチルエステル／石油エーテル（１／１）で溶出し、そこから４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−アセトキシ安息香酸（３）を得た（３５４ｍｇ、収率４０％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．３２（ｓ、３Ｈ）、７．２０（ｄ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、２Ｈ）、７．４０（ｔ、１Ｈ）、７．４１（ｔ、１Ｈ）、７．６７（ｔ、１Ｈ）、７．７３（ｄ、２Ｈ）、８．２１（ｄ、１Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２１．２、１２２．１、１２３．４、１２４．４、１２６．６、１２８．６、１２９．７、１３２．４、１３５．４、１３６．４、１５１．６、１５３．７、１６２．６、１６９．８、１７１．９、２１５．７
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３８９（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１２０〜１２２℃。
【実施例６】
【００７８】
２−アセトキシ−安息香酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（化合物ＸＶＩ）の合成
【００７９】
【化１３】
【００８０】
スキーム ２
４−カルバモイルフェニル ２−アセトキシ安息香酸（５）の合成
ジメチルホルムアミド１５ｍＬに１（アセチルサリチル酸、５００ｍｇ、２．７７ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（４１２ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（６２８ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（４、４１８ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物をクロロホルムに溶解し、有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物５をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９／１）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−アセトキシ安息香酸（５）を採取した（４１０ｍｇ、収率４７％）。
【００８１】
４−チオカルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（６）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−アセトキシ安息香酸、５（４１０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、ローソン試薬（５５４ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン３５ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、３時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去し、得られた粗残留物をシリカゲル・カラム（ジクロロメタン／メチルアルコール ９．５：０．５）で精製し、純粋化合物６ ４７０ｍｇを得た。得られた化合物を２溶媒システムによる分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した：Ａ：０．１％ＴＦＡ中に１００％アセトニトリル、Ｂ：０．１％ＴＦＡ（３５分間に１０％Ａから６０％Ａの直線勾配、２５４ｎｍでＵＶ検出、流速３０ｍＬ／分）に１００％Ｈ２Ｏを加えることにより前記純粋化合物６（３２４ｍｇ、収率７１％）が得られる。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．３０（ｓ、３Ｈ）、７．１７（ｄ、１Ｈ）、７．２１（ｄ、２Ｈ）、７．４０（ｔ、１Ｈ）、７．６６（ｔ、１Ｈ）、７．９４（ｄ、２Ｈ）、８．２（ｄ、１Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２１．２、１２１．９、１２２．４、１２４．３、１２６．４、１２８．７、１３２．４、１３５．１、１３７．３、１５１．５、１５３．７、１６２．７、１６９．８、２０１．８
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３１６（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１５４〜１５６℃
【実施例７】
【００８２】
［１−（４−クロロ−ベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−１−Ｈ−インドール−３−イル］―酢酸 ４−（５−チオキソ−５−Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル（化合物ＩＶ）の合成
【００８３】
【化１４】
【００８４】
スキーム １
４−［４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）］フェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−インドール−３−イル］−アセテート（３）の合成
ジメチルホルムアミド３０ｍＬに１（インドメタシン、７２０ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（３０１ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（４５６ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に５−ｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；５００ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物をシリカゲル・オープンカラムに加え、ジクロロメタン／メチルアルコール（９８／２）で溶出し、そこから４−［４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）］フェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−インドール−３−イル］−アセテート（３）を得た（２５７ｍｇ、収率２３％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．４７（ｓ、３Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ、ＯＣＨ３）、３．９３（ｓ、２Ｈ）、６．７０（ｄ、１Ｈ）、６．８８（ｄ、１Ｈ）、７．０４（ｓ、１Ｈ）、７．２１（ｄ、２Ｈ）、７．３７（ｓ、１Ｈ）、７．４８（ｄ、２Ｈ）、７．６５（ｄ、２Ｈ）、７．６７（ｄ、２Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：Σ１３．６、３０．８、５６．０、１０１．５、１１１．６、１１１．９、１１５．３、１２２．９、１２８．４、１２９．４、１２９．６、１３０．６、１３１．１、１３１．４、１３３．９、１３６．３、１３６．６、１３９．７、１５３．８、１５６．４、１６７．５、１６８．９、１７０．４、２１５．７。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ５６７（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：９０〜９２℃。
【実施例８】
【００８５】
［１−（４−クロロ−ベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−１−Ｈ−インドール−３−イル］―酢酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（化合物ＸＩＸ）の合成
【００８６】
【化１５】
【００８７】
スキーム ２
４−カルバモイルフェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−インドール−３−イル］−酢酸（５）の合成
ジメチルホルムアミド６０ｍＬに１（インドメタシン、３ｇ、８．３８ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．２５ｇ、９．２２ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１．９ｇ、９．２２ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（４、１．７２ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物５をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ （９．５／０．５）で溶出し、４−カルバモイルフェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシー２−メチル−インドール−３−イル］−酢酸（５）を採取した（４７９ｍｇ、収率１２％）。
【００８８】
４−チオカルバモイルフェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−インドール−３−イル］−酢酸（６）の合成
４−カルバモイルフェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−インドール−３−イル］−アセテート、５（３４０ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）、ローソン試薬（２８７ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン１５ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、４時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去し、得られた粗残留物をシリカゲル・カラム（ジクロロメタン／メチルアルコール ９．５：０．５）で精製し、粗化合物６ １７８ｍｇを得た。得られた化合物を２溶媒システムによる分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した：Ａ：０．１％ＴＦＡ中に１００％アセトニトリル、Ｂ：０．１％ＴＦＡ（３０分間に１０％Ａから８０％Ａの直線勾配、２５４ｎｍでＵＶ検出、流速３０ｍＬ／分）中に１００％Ｈ２Ｏを加えることにより純粋化合物６（５６ｍｇ、収率１６％）が得られる。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．４５（ｓ、３Ｈ）、３．８３（ｓ、３Ｈ、ＯＣＨ３）、３．９１（ｓ、２Ｈ）、６．７０（ｄ、１Ｈ）、６．８８（ｄ、１Ｈ）、７．０４（ｓ、１Ｈ）、７．１１（ｄ、２Ｈ）、７．４７（ｄ、２Ｈ）、７．６７（ｄ、２Ｈ）、７．８８（ｄ、２Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１３．６、３０．８、５６．０、１０１．５、１１１．９、１１２．０、１１５．３、１２１．７、１２８．６、１２９．４、１３０．８、１３１．２、１３１．４、１３４．０、１３６．８、１３７．１、１３９．７、１５６．２、１５７．９、１６７．６、１６９．８、２０１．８
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ４９３（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：２２４〜２２６℃。
【実施例９】
【００８９】
２−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−プロピオン酸 ４−（５−チオキソ−５Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル （化合物Ｖ）の合成
【００９０】
【化１６】
【００９１】
スキーム １
４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（３）の合成
ジメチルホルムアミド２０ｍＬに１（ナプロキセン、５９５ｍｇ、２．５８ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（３８８ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（５９３ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に５−ｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；６５０ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物をシリカゲル・オープンカラムに加え、ジクロロメタンで溶出し、そこから４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル−２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（３）を得た（４０６ｍｇ、収率３６％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．５９（ｄ、３Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ、ＯＣＨ３）、４．２４（ｄｄ、１Ｈ）、７．１８（ｄ、１Ｈ）、７．２２（ｄ、２Ｈ）、７．３１（ｓ、１Ｈ）、７．５０（ｄ、１Ｈ）、７．７７（ｓ、１Ｈ）、７．８５（ｄ、１Ｈ）、７．８６（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｄ、１Ｈ）、 ７．９１（ｄ、２Ｈ）
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．１、４５．２、５５．９、１０６．５、１１９．６、１２３．５、１２６．６、１２６．９、１２８．０、１２９．２、１２９．４、１２９．５、１２９．６、１２９．９、１３４．２、１３５．６、１３６．５、１５４．２、１５８．１、１７３．２、２１６．２
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ４３９（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１１１〜１１３℃。
【実施例１０】
【００９２】
２−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−プロピオン酸 ４−チオカルバミル−フェニルエステル（化合物ＸＸ）の合成
【００９３】
【化１７】
【００９４】
スキーム ２
４−カルバモイルフェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（５）の合成
ジメチルホルムアミド８０ｍＬに１（ナプロキセン、４ｇ、１７．４ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．５９ｇ、１９．１４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（２．５９ｇ、１９．１４ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（４、３．５８ｇ、２６．１ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物５をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）−プロパン酸（５）を採取した（１．９１ｇ、収率３２％）。
【００９５】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（６）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）−プロパン酸、５（１．８０ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）およびローソン試薬（１．７５ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン１３０ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、４時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去し、得られた粗残留物をシリカゲル・カラム（ジクロロメタン／メチルアルコール ９．７５：０．２５）で精製し、純粋化合物６ ２．９ｇを得た。得られた化合物をシリカゲル・オープンカラムで精製し、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、純粋化合物 ６を得た（９７０ｍｇ、収率６１％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．５９（ｄ、３Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ、ＯＣＨ３）、４．２４（ｄｄ、１Ｈ）、７．０６（ｄ、２Ｈ）、７．１８（ｄ、１Ｈ）、７．３１（ｓ、１Ｈ）、７．５０（ｄ、１Ｈ）、７．８４（ｓ、１Ｈ）、７．８５（ｄ、１Ｈ）、７．８６（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｄ、２Ｈ）、９．４７ および９．８４（ｓ、２Ｈ、ＮＨ２）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．１、４５．２、５５．９、１０６．５、１１９．６、１２１．６、１２６．６、１２６．９、１２８．０、１２９．４、１２９．９、１３４．２、１３５．６、１３７．８、１５３．４、１５８．１、１７３．３、１９９．７。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３６６（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１９６〜１９８℃。
【実施例１１】
【００９６】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（４−イソブチルフェニル）プロパン酸（化合物ＸＸＩＸ）の合成
【００９７】
【化１８】
【００９８】
ジメチルホルムアミド８０ｍＬに１（イブプロフェン、３．８７ｇ、１８．８ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．８ｇ、２０．７ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（４．２７ｇ、２０．７ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（２、３．９ｇ、２８ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、５％ＮａＨＣＯ３、１０％クエン酸で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−（４−イソブチルフェニル）プロパン酸（３）を得た（２．４８ｇ、収率４０％）。
【００９９】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（４−イソブチルフェニル）プロパン酸（４）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−（４−イソブチルフェニル）プロパン酸、３（２．４８ｇ、７．６２ｍｍｏｌ）およびローソン試薬（３．１ｇ、７．６２ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン１３０ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、４時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去した。得られた化合物をシリカゲル・オープンカラムで精製し、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、純粋化合物 ４を得た（１．４５ｇ、収率５５％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．８４（ｄ、６Ｈ）、１．４８（ｄ、３Ｈ）、１．７９〜１．８２（ｍ、１Ｈ）、２．４２（ｄ、２Ｈ）、４．０５（ｄｄ、１Ｈ）、７．０５（ｄ、２Ｈ）、７．１５（ｄ、２Ｈ）、７．２８（ｄ、２Ｈ）、７．８８（ｄ、２Ｈ）、９．４９および９．８７（ｓ、２Ｈ、ＮＨ２）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．２、２２．９、３０．３、４４．９、１２１．６、１２７．９、１２９．５、１３０．０、１３７．８、１３８．０、１４０．８、１５３．３、１７３．３、１９９．６。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３４１（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１２１〜１２３℃。
【実施例１２】
【０１００】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（４−オキソフェニル）−プロパン酸フェニル（化合物ＸＸＸ）の合成
【０１０１】
【化１９】
【０１０２】
４−カルバモイルフェニル ２−（４−オキソフェニル）−プロパン酸フェニル（３）の合成
ジメチルホルムアミド８０ｍＬ中に１（ケトプロフェン、３ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．７６ｇ、１９．１３ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（２．６８ｇ、１１３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（２、２．４３ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−（４−オキソフェニル）−プロパン酸フェニル（３）を得た（１．８４ｇ、収率４２％）。
【０１０３】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（４−オキソフェニル）−プロパン酸フェニル（４）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−（４−オキソフェニル）−プロパン酸フェニル（３）（１．８４ｇ、４．９３ｍｍｏｌ）およびローソン試薬（２ｇ、４．９３ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン１００ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、４時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去した。得られた化合物をシリカゲル・オープンカラムで精製し、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、純粋化合物 ４を得た（０．４５ｇ、収率２３％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．５３（ｄ、３Ｈ）、４．２５（ｄｄ、１Ｈ）、７．０８（ｄ、２Ｈ）、７．５４〜７．７３（ｍ、９Ｈ）、７．９０（ｄ、２Ｈ）、９．５１および９．８８（ｓ、２Ｈ、ＮＨ２）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．２、４４．９、１２１．６、１２９．３、１２９．５、１２９．８、１３０．３、１３２．６、１３３．５、１３７．６、１３７．９、１３８．１、１４１．２、１５３．３、１５４．５、１５６．１、１６３．８、１７２．９、１９９．６。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３９０（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１１４〜１１６℃。
【実施例１３】
【０１０４】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（３−フルオロ、４−フェニル）プロパン酸フェニル（化合物ＸＸＸＩ）の合成
【０１０５】
【化２０】
【０１０６】
４−カルバモイルフェニル ２−（３−フルオロ、４−フェニル）プロパン酸フェニル（３）の合成
ジメチルホルムアミド８０ｍＬ中に１（フルルビプロフェン、２ｇ、８．２ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．２２ｇ、９．０２ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１．８６ｇ、９．０２ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（２、１．７ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−（３−フルオロ、４−フェニル）プロパン酸フェニル（３）を採取した（１．０９ｇ、収率３７％）。
【０１０７】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（３−フルオロ、４−フェニル）プロパン酸フェニル（４）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−（３−フルオロ、４−フェニル）プロパン酸フェニル、３（１．０９ｇ、３ｍｍｏｌ）およびローソン試薬（１．２１ｇ、１．３ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン７０ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、４時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去した。得られた化合物をシリカゲル・オープンカラムで精製し、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、純粋化合物４を得た（０．３５ｇ、収率３１％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．５５（ｄ、３Ｈ）、４．２１（ｄｄ、１Ｈ）、７．３２〜７．５５（ｍ、８Ｈ）、７．９０（ｄ、２Ｈ）、９．５１および９．８８（ｓ、２Ｈ、ＮＨ２）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．１、４４．７、１１５．９、１１６．２、１２１．７、１２４．８、１２８．６、１２９．３、１２９．４、１２９．５、１３１．７、１３５．８、１３７．７、１４２．６、１５３．７、１５８．３、１６３．５、１７３．１、１９９．６。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３８０（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１４２〜１４４℃。
【実施例１４】
【０１０８】
４−（イソチオシアノ）−フェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（化合物ＸＸＶ）の合成
【０１０９】
【化２１】
【０１１０】
ジメチルホルムアミド２０ｍＬに１（ナプロキセン、６９１ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（４４６ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（６１９ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシフェニルイソチオシアナート（２、５００ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。油性残留物をエチルアセテートに溶解し、沈殿物を除去した。溶媒を蒸発させ、粗生成物をシリカゲル・オープンカラムに加え、ジクロロメタンで溶出し、そこから４−（イソチオシアノ）−フェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（３）を採取した（２３０ｍｇ、収率２１％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：Σ１．５７（ｓ、３Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ、ＯＣＨ３）、４．２０（ｄｄ、１Ｈ）、７．１０（ｄ、２Ｈ）、７．１５（ｄ、１Ｈ）、７．２９（ｓ、１Ｈ）、７．４３（ｄ、２Ｈ）、７．４８（ｄ、１Ｈ）、７．７８（ｄ、１Ｈ）、７．８０（ｓ、１Ｈ）、７．８３（ｄ、１Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：Σ１９．１、４５．２、１０６．５、１１９．６、１２３．８、１２６．６、１２６．９、１２８．０、１２９．２、１２９．９、１３４．２、１３４．６、１３５．７、１５０．２、１５８．１、１７３．２、２１５．１。
ｍ．ｐ．６６〜６８℃；ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３６４（Ｍ＋）。
【実施例１５】
【０１１１】
４−イソチオシアナトフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（化合物ＸＸＩＩ）の合成
【０１１２】
【化２２】
【０１１３】
４−イソチオシアナトフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（３）
ジメチルホルムアミド６０ｍＬに１（ジクロフェナク、１７１７ｍｇ、５．８ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（８６２ｍｇ、６．３８ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１３１６ｍｇ、６．３８ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシフェニルイソチオシアナート（２、９６５ｍｇ、６．３８ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。油性残留物をエチルアセテートに溶解し、沈殿物を除去した。前記溶媒を蒸発させ、粗生成物をシリカゲル・オープンカラムに加え、クロロホルム／ｎ−へキサン（９：１）で溶出し、そこから４−イソチオシアナトフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（３）を得た（５８０ｍｇ、収率２３％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：Σ４．０９（ｓ、２Ｈ）、６．１９（ｄ、１Ｈ）、６．８３（ｔ、１Ｈ）、７．０５（ｔ、１Ｈ）、７．１４（ｂｓ、１Ｈ、ＮＨ）、７．２１（ｄ、２Ｈ）、７．２５（ｄ、２Ｈ）、７．４７〜７．５４（ｍ、３Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３７．４、１１６．１、１２１．０、１２２．７、１２４．０、１２７．１、１２７．８、１２８．３、１２８．７、１２９．８、１３２．０、１３２．２、１３７．７、１４４．０、１５０．３、１７０．５、２１５．１。
ｍ．ｐ．１３２〜１３４℃；ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ４３０（Ｍ＋）。
【実施例１６】
【０１１４】
４−イソチオシアナトフェニル ２−アセトキシ安息香酸（化合物ＸＸＩ）の合成
【０１１５】
【化２３】
【０１１６】
４−イソチオシアナトフェニル ２−アセトキシ安息香酸（３）
ジメチルホルムアミド６０ｍＬに１（アスピリン、１２００ｍｇ、６．６７ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（９９２ｍｇ、７．３４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１５２０ｍｇ、７．３４ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシフェニルイソチオシアナート（２、１１０９ｍｇ、７．３４ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。油性残留物をエチルアセテートに溶解し、沈殿物を除去した。前記溶媒を蒸発させ、粗生成物をシリカゲル・オープンカラムに加え、クロロホルム／ｎ−へキサン（６：４）で溶出し、そこから４−イソチオシアナトフェニル ２−アセトキシ安息香酸（３）を得た（１５０ｍｇ、収率７％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．３１（ｓ、３Ｈ）、７．１７（ｄ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、２Ｈ）、７．２９（ｄ、２Ｈ）、７．３８（ｔ、１Ｈ）、７．６６（ｔ、１Ｈ）、８．２０．２（ｄ、１Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）：δ２１．３、１２２．９、１２３．３、１２４．４、１２６．６、１２７．２、１２９．４、１３２．４、１３５．２、１４９．３、１５１．５、１６３．０、１７０．０、２１５．１。
ｍ．ｐ．８４〜８６℃；ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ２７２（Ｍ＋）。
【実施例１７】
【０１１７】
本発明の化合物の胃腸安全性
ラットにおける胃腸安全性に関し、本発明の２つのジクロフェナク誘導体である化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩの評価を行った。特に、胃損傷、胃ＰＧＥ２合成、小腸潰瘍、ヘマトクリットについて評価した。
【０１１８】
雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（体重１７５〜２００ｇ）を、１％カルボキシメチルセルロース（賦形剤；０．２ｍＬ）単独もしくは次のいずれかをこの賦形剤に溶解したものを経口投与する前１８時間にわたって絶食とした。すなわち、ジクロフェナク（２０ｍｇ／ｋｇ）、化合物ＩＩ（３２ｍｇ／ｋｇ）、ＡＤＴ−ＯＨ（１２ｍｇ／ｋｇ）、ジクロフェナク＋ＡＤＴ−ＯＨ、化合物ＸＶＩＩ（２７．３ｍｇ／ｋｇ）、４−ヒドロキシチオベンズアミド（ＴＢＺ）（７．３ｍｇ／ｋｇ）、化合物ＸＶＩＩ＋硫化水素放出部分、ジクロフェナク＋ＴＢＺ、のいずれかである。化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩの用量はジクロフェナク２０ｍｇ／ｋｇと等モルである。同様に、ＡＤＴ−ＯＨおよびＴＢＺの用量はそれぞれ化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩと等モルである。
【０１１９】
各群ともラット５匹で構成された。前記試験化合物の投与から３時間後にラットを安楽死させ、胃の出血性損傷の範囲を盲検的に測定した（ｍｍ単位）。胃の病変すべての長さを合計することにより「胃損傷スコア」を計算した。まず図１に関連し、「賦形剤」群、「化合物ＩＩ」群、「化合物ＸＶＩＩ」群では胃損傷は認められなかった。化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩによる胃損傷はジクロフェナクによるものよりも有意に少なかった。さらに、ＮＳＡＩＤ成分（ジクロフェナク）および化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩのＨ２Ｓ放出部分（それぞれＡＤＴ−ＯＨおよびＴＢＺ）を別々に（但し同時に）投与した場合、胃温存作用は認められなかった。
【０１２０】
これらの所見は、続いて行った盲検による組織学的評価によって確認された。以前に詳述されているように（Ｗａｌｌａｃｅら、Ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ １ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ｒａｔｓ ａｎｄ ｍｉｃｅ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｏｘｉｃｉｔｙ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９９８；１１５：１０１〜１０９、「参考文献」を参照のこと）、胃組織標本（１００〜２００）を切り出し、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）合成について評価した。つまり、前記組織標本を３０分間剪刀で刻み、それらをリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．４）１ｍＬ中に入れ、それを振盪する温浴（３７℃）中に２０分間置いた。その後直ちに標本を９，０００ｇで１分間遠心分離にかけ、その後の特異的ＥＬＩＳＡ法を用いたＰＧＥ２濃度測定のため、上澄を−８０℃で直ちに冷凍した（Ｗａｌｌａｃｅら、１９９８）。
【０１２１】
図２からはジクロフェナク（ＡＤＴ−ＯＨまたはＴＢＺの併用の有無に関わらず）、化合物ＩＩ、化合物ＸＶＩＩのいずれもが胃ＰＧＥ２合成量を有意に低下させたことが伺え、ＣＯＸ−１および／またはＣＯＸ−２の阻害を示している。ＡＤＴ−ＯＨおよびＴＢＺ単独では、賦形剤に比べ胃ＰＧＥ２合成は低下しなかった。従って、図１に示したような化合物ＩＩまたは化合物ＸＶＩＩを投与したラットにおける胃損傷の欠如は、これらの薬剤による胃プロスタグランジン合成抑制能の変化に起因するものではなかった。胃ＰＧＥ２合成はこれらの薬剤および同モルのジクロフェナクによりほぼ完全に抑制された。
【０１２２】
図３は、本発明の２つのナプロキセン誘導体（化合物ＶおよびＸＸ）による損傷がナプロキセン自体によるものに比べ有意に軽度であることを示している。これらの実験は図１に示したものと全く同じ方法で行われた。ナプロキセン、化合物Ｖ、化合物ＸＸをそれぞれ６０μモル／ｋｇで経口投与し、３時間後に胃損傷を盲検的に評価した。化合物Ｖおよび化合物ＸＸを投与したラットでは胃損傷は認められなかった。各群はラット５匹で構成されていた。これらの所見は、続いて行った盲検による組織学的評価によって確認された。
【０１２３】
ＣＯＸ−１の阻害についても同じラットを用いて評価した。既述のごとく（Ｗａｌｌａｃｅら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９９８）、嚢から滲出液を収集後直ちに各ラットの下大静脈から血液１ｍＬを採取し、ガラス管に入れ、４５分間凝固するにまかせた。次に前記試料を９，０００ｇで３分間遠心分離にかけ、特異的ＥＬＩＳＡ法を用いたその後のトロンボキサンＢ２濃度の測定のため、上澄液を−８０℃で冷凍した。図４に示したように、ナプロキセン、化合物Ｖ、化合物ＸＸは、いずれも賦形剤投与群に比べＣＯＸ−１活性を有意に（＊ｐ<０．０５）阻害した。ＣＯＸ−１阻害の程度は、化合物Ｖではナプロキセンまたは化合物ＸＸよりもいくぶん軽度であった。
【０１２４】
ＮＳＡＩＤも顕著な小腸損傷を引起すことがあり、ジクロフェナクの反復投与が小腸損傷誘発に及ぼす作用を化合物ＩＩと比較した。雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット５匹から成る各群に、ジクロフェナクまたは化合物ＩＩを５０μＭ／ｋｇの用量で０時間、１２時間後、２４時間後に投与した。もう一つのラット群には賦形剤（１％カルボキシメチルセルロース）を投与した。
【０１２５】
赤血球の固まりからなる血液部分であるヘマトクリット（容積百分率で表される）を、実験開始時および薬剤の最終投与から２４時間後に尾静脈から採った血液で測定した。薬剤の最終投与から２４時間後にラットを安楽死させ、開腹を行った。ラットが受けた治療を知らされていない研究者が、小腸における全ての出血性びらん／潰瘍の長さを測定した。各ラットにおけるそれらの病変全ての長さを合計することにより、小腸損傷スコアを算出した。
【０１２６】
図５に示すように、ジクロフェナクを２４時間に３回投与することにより、小腸に多くのびらんおよび潰瘍が発生した。一方、化合物ＩＩを投与したラットにおける損傷の程度はジクロフェナクを投与したラットに比べ９０％以上軽かった。その上、図６に示すように、ジクロフェナク投与によりヘマトクリットは著しく（＊ｐ<０．０５）低下し、小腸出血のためと考えられたが、化合物ＩＩの投与はヘマトクリットに有意な作用を及ぼさなかった。
【実施例１８】
【０１２７】
シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）およびシクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）の阻害
生体内におけるＣＯＸ−２の阻害を、既述モデル（Ｗａｌｌａｃｅら、Ｌｉｍｉｔｅｄ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｃｙｃｌｏ−ｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｉｎ ｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ−ａｉｒｐｏｕｃｈ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ． Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ １９９９：１２６：１２００〜１２０４、「参考文献」参照）の修正版を用いて測定した。つまり、数日間にわたって繰り返し空気を注入することにより皮下「嚢」を作成した。作成後、１％ザイモサン１ｍＬを注入することにより嚢の炎症を誘発できる。これにより嚢内のプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）が顕著に増加し、これはほぼ例外なくＣＯＸ−２に由来することが示されている。カラギーナン注射の３０分前、ラット５匹から成る各群に賦形剤（１％カルボキシメチルセルロース）、ジクロフェナク（３ｍｇ／ｋｇ）、化合物ＩＩ（４．８ｍ／ｋｇ）、化合物ＸＶＩＩ（４．１ｍｇ／ｋｇ）のうちいずれかを投与した。ラット５匹からなるもう一つの群に賦形剤を投与したが、ザイモサンではなく０．９％滅菌生理食塩水を嚢に注入した。
【０１２８】
図７に見られるように、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、または化合物ＸＶＩＩの前投与により、ザイモサン注入への反応として産生される嚢内のＰＧＥ２の濃度が顕著に低下した。＊賦形剤＋ザイモサン投与群に対し、ｐ<０．０５これらの結果から、３種の化合物のいずれもがＣＯＸ−２を有意に阻害したことが示される。その一方、硫化水素放出部分（ＡＤＴ−ＯＨおよびＴＢＺ）はいずれもＣＯＸ−２活性に有意な影響を及ぼさなかった。
【０１２９】
さらに、図４に関し記載されたものと同じ方法により、同じラットを用いてＣＯＸ−１の阻害を評価した。図８に示したように、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、および化合物ＸＶＩＩはＣＯＸ−１を通じた全血トロンボキサン合成を、それぞれ８０％以上阻害した。その一方、硫化水素放出部分（ＡＤＴ−ＯＨおよびＴＢＺ）はいずれもＣＯＸ−１活性に有意な影響を及ぼさなかった。
【実施例１９】
【０１３０】
生体内においてＮＳＡＩＤ誘導体が胃損傷、ＣＯＸ−１活性、ＣＯＸ−２活性に及ぼす作用
多くの化合物の抗炎症作用（ＣＯＸ−２およびＣＯＸ−１阻害）および胃安全性を、上記アッセイを用いて比較した。結果の概要を表１に示す。いずれの親ＮＳＡＩＤも顕著な胃損傷を引起した。しかし、本発明のＨ２Ｓ放出誘導体では、前記親薬剤に比べ胃安全性は改善されていた。さらに表１から、ＴＢＺ誘導体は前記親薬剤に比べ、ＣＯＸ−１および／またはＣＯＸ−２阻害能を維持するか実際に上昇させたことが認められる。
【０１３１】
【表１】
【実施例２０】
【０１３２】
本発明の化合物が炎症に及ぼす作用
化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩの抗炎症作用を、ジクロフェナクの抗炎症作用とともに、Ｗａｌｌａｃｅらが説明したように（Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９９８）カラギーナン後足浮腫モデルを用いて評価した。雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（１７５〜２００ｇ）に、１％ラムダカラギーナン１００μＬを足底部に注射する３０分前に前記試験化合物を経口投与した。足容積を、Ｕｇｏ Ｂａｓｉｌｅ社のｈｙｄｒｏｐｌｅｔｈｙｓｍｏｍｅｔｅｒを用い、カラギーナン注射前および注射後１時間ごと５時間にわたって測定した。それぞれラット５匹からなる各群にジクロフェナク１、３、１０ｍｇ／ｋｇのいずれか、または化合物ＸＶＩＩまたは化合物ＸＶＩＩをジクロフェナク３ｍｇ／ｋｇと等モルの用量で投与した。
【０１３３】
図９に示すように、ジクロフェナクはカラギーナンの足底注射で誘発された足の浮腫を用量依存性に軽減した。ジクロフェナク３ｍｇ／ｋｇと等モル量の化合物ＩＩにより、足の浮腫は大いに改善した。実際、化合物ＩＩが足の浮腫に及ぼす作用はジクロフェナク１０ｍｇ／ｋｇの作用に匹敵した。同様に、図１０に示したように、化合物ＸＶＩＩをやはりジクロフェナク３ｍｇ／ｋｇと等モルで投与したところ、ジクロフェナク１０ｍｇ／ｋｇよりも大幅に足浮腫を軽減した。
【０１３４】
化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩはジクロフェナクと同程度にプロスタグランジン合成を抑制することから、前記足浮腫モデルにおける本発明の新化合物の活性亢進は同化合物の別の特性に関連している可能性が高い。硫化水素供与体がラットのカラギーナン誘発による足浮腫を有意に軽減できることが以前に証明されており（Ｚａｎａｒｄｏら、Ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｓｕｌｐｈｉｄｅ ｉｓ ａｎ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ｍｏｄｕｌａｔｏｒ ｏｆ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．ＦＡＳＥＢ Ｊ ２００６；２０：２１１８〜２１２０、「参考文献」参照）、理論に束縛されるものではないが、化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩからのＨ２Ｓ放出がジクロフェナクに比べた抗炎症作用亢進の説明になるものと思われる。
【０１３５】
理論に束縛されるものではないが、炎症モデルにおける本発明の化合物の付加的活性の中にはＣＯＸ−２活性の阻害亢進が原因であるものがある可能性もある。賦形剤、ナプロキセン、化合物Ｖ、化合物ＸＸの作用をラット空気嚢モデル（図７で説明したように）比較した。各群はラット５匹で構成されていた。ナプロキセン、化合物Ｖ、化合物ＸＸをいずれも６０μモル／ｋｇの用量で投与した。図１１に示したように、３種の薬剤は賦形剤投与群に比べいずれもＣＯＸ−２活性を有意に（＊ｐ<０．０５、＊＊ｐ<０．０１）抑制した。しかし、化合物ＸＸはナプロキセンまたは化合物Ｖよりも有意に大幅にＣＯＸ−２活性を低下させた（ｐ<０．０５）。
【０１３６】
理論に束縛されるものではないが、炎症モデルにおける本発明の化合物の付加的活性の中にはＣＯＸ−１活性の阻害亢進が原因であるものがある可能性もある。生体外において、賦形剤、インドメタシン、および本発明の２つの化合物である化合物ＩＶおよび化合物ＸＩＸがヒト全血トロンボキサンＢ２合成に及ぼす作用を比較した。健康なボランティアの血液（０．５ｍＬ）を、メタノール単独１０μＬ、もしくは最終濃度が０．１、０．３、１、または３μＭになるように作成した前記試験薬剤を入れたガラス管に加えた。管をゆっくりと震盪する水浴（３７℃）中に４５分間置き、その後１０分間遠心分離（１，０００ ｘｇ）にかけた。図４で示した試験におけるごとく、各試料中のトロンボキサンＢ２濃度を特異的ＥＬＩＳＡ法を用いて測定した。図１２に示すように、３種薬剤のいずれもが賦形剤投与群に比べ、ＣＯＸ−１活性を濃度依存性に阻害した。しかし、１μＭおよび３μＭの濃度において、化合物ＸＩＸはインドメタシンよりもＣＯＸ−１活性を有意に（＊ｐ<０．０５）大幅に阻害した。
【実施例２１】
【０１３７】
本発明のＮＳＡＩＤ誘導体における血管内皮への白血球粘着
血管内皮への白血球粘着は炎症反応の早期イベントであり、血栓形成に寄与する。硫化水素供与体はアスピリンまたは炎症促進性トリペプチドｆＭＬＰによって誘発された白血球粘着を低下させることが示されている（Ｚａｎａｒｄｏら、ＦＡＳＥＢ Ｊ ２００６；２０：２１１８〜２１２０）。いくつかの本発明ＮＳＡＩＤ誘導体が白血球付着に及ぼす作用につき、Ｚａｎａｒｄｏら（ＦＡＳＥＢ Ｊ２００６；２０：２１１８〜２１２０）が詳しく説明したように、ラットを対象に生体顕微鏡を用いて評価した。ＦＡＳＥＢ Ｊ ２００６；２０：２１１８−２１２０。
【０１３８】
つまり、麻酔されたラットにおいて後毛細血管腸間膜細静脈を光学顕微鏡で観察した。５分間の基本記録時間後、下の表２に掲げた前記試験化合物の一つを３０μＭ／ｋｇの用量で胃内投与した。ただし、ナプロキセンおよびナプロキセン誘導体（化合物Ｖおよび化合物ＸＸ）は６０μＭ／ｋｇの用量で投与した。試験化合物はすべて１％カルボキシメチルセルロースの賦形剤に入れて作成した。細静脈内での白血球粘着の変化を顕微鏡に取付けられたビデオカメラで録画し、録画された画像により粘着白血球の数を盲検的に数えた。各群とも５匹の雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（体重１５０〜１７５ｋｇ）で構成された。白血球は、３０秒間以上静止状態にあれば「粘着」と見なした（以下の結果は平均アＳＥＭで示す）。実験の最後に胃を開き、解剖顕微鏡により胃損傷の有無を調べた。
【０１３９】
【表２】
【０１４０】
表２から、本発明のアスピリンＴＢＺ誘導体、特に化合物ＸＶＩおよび化合物Ｉがいずれもアスピリン単独に比べ血管長１００μｍ当たりの粘着白血球数を有意に低下させたことが認められる。また、化合物ＸＶＩおよび化合物Ｉのいずれもがアスピリン単独に比べ胃損傷発生率を有意に低下させた。同様に表２はさらに、本発明のジクロフェナク誘導体、特に化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩがジクロフェナク単独に比べ、血管長１００μｍ当たり粘着白血球数および胃損傷発生率をいずれも有意に低下させたことを示している。同様に表２はさらに、本発明のナプロキセン誘導体、特に化合物Ｖおよび化合物ＸＸがナプロキセン単独に比べ、血管長１００μｍ当たり粘着白血球数および胃損傷発生率をいずれも有意に低下させたことを示している。
【０１４１】
興味深いことに、胃への副作用が軽い選択的ＣＯＸ−２阻害薬であるルミラコキシブの誘導体である化合物ＩＩＩおよび化合物ＸＶＩＩＩでは胃損傷の発生はやはり認められなかったが、血管長１００μｍ当たりの粘着白血球数はルミラコキシブ単独に比べ有意に少なかった。従って、硫化水素放出部分をＣＯＸ−２選択的ＮＳＡＩＤに共有結合させることにより、これらＣＯＸ−２阻害薬の心臓血管系副作用も軽減される可能性がある。
【０１４２】
このように、本発明のＮＳＡＩＤ誘導体は、白血球粘着を低下させることによりＮＳＡＩＤの心臓血管系副作用を軽減する可能性がある。
【実施例２２】
【０１４３】
本発明の化合物が胃潰瘍の治癒に及ぼす作用
ＣＯＸ−２に選択的に作用するものを含めたＮＳＡＩＤｓは前から存在する胃潰瘍の治癒を阻害することが多い（Ｓｔａｄｌｅｒら、Ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ ｄｅｌａｙｓ ｈｅａｌｉｎｇ ｏｆ ｇａｓｔｒｏｄｕｏｄｅｎａｌ ｍｕｃｏｓａｌ ｌｅｓｉｏｎｓ．Ｄｏｕｂｌｅ−ｂｌｉｎｇ，ｐｌａｃｅｂｏ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ ｓｔｕｄｙ ｉｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ．Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ Ｄｉｓｅａｓｅｓ ａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １９９１；３６：５９４〜６００）。本発明の２つの化合物（化合物ＸＶＩＩおよび化合物ＸＸ）が潰瘍治癒に及ぼす作用をそれぞれジクロフェナクおよびナプロキセンと比較するため、胃への潰瘍誘発後、ラットにこれらの薬剤を投与した。Ｅｌｌｉｏｔらが記載したように、漿膜に酢酸を塗布することによって胃潰瘍を誘発した（Ａ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ−ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｓ ｇａｓｔｒｉｃ ｕｌｃｅｒ ｈｅａｌｉｎｇ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９９５；１０９：５２４〜５３０）。３日後から、それぞれラット５匹からなる各群に、賦形剤、ジクロフェナク（３０μモル／ｋｇ）、化合物ＸＶＩＩ（３０μモル／ｋｇ）、ナプロキセン（６０μモル／ｋｇ）、化合物ＸＸ（６０μモル／ｋｇ）のいずれかを１日２回経口投与した。４日間そのような治療を行った後、ラットを安楽死させ、胃を開いて切除し、写真に撮った。ラットに施された治療内容を知らない者が潰瘍面積（ｍｍ２）を測定した。胃潰瘍誘発から３日後（すなわち薬剤投与開始前）に安楽死させたラット５匹のサブグループにおいて、潰瘍の平均表面積は２４±２ｍｍ２であった。図１３に示したように、賦形剤、ジクロフェナク、ナプロキセンを投与したラットはいずれも同程度の治癒を示した。しかし、化合物ＸＶＩＩまたは化合物ＸＸを投与したラットの治癒状況は有意に良好であった（＊それぞれジクロフェナクおよびナプロキセンに比べ、ｐ<０．０５）。これら２つの化合物の硫化水素放出部分（ＴＢＺ）の投与では賦形剤群に比べ胃潰瘍の治癒は有意に影響されなかった。
【実施例２３】
【０１４４】
本発明の化合物が血圧に及ぼす作用
ＣＯＸ−２に選択性を示すものを含めたＮＳＡＩＤｓは、前から存在する高血圧を悪化させ、一部の降圧剤の有効性を妨げる可能性がある（Ｗｈｅｌｔｏｎ，Ａ．Ｎｅｐｈｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇｓ：ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ． Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．１９９９；１０６（５Ｂ）：１３Ｓ−２４Ｓ）。本発明の２つの化合物（化合物ＩＩおよび化合物ＸＸ）が血圧に及ぼす作用をそれぞれジクロフェナクおよびナプロキセンと比較するため、最初に高血圧を誘発した上でラットにこれらの薬剤を腹腔内投与した。Ｒｉｂｅｉｒｏらの記述にあるように（Ｃｈｒｏｎｉｃ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ ｎｅｗ ｍｏｄｅｌ ｏｒ ａｒｔｅｒｉａｌ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ １９９２；２０：２９８〜３０３）、前記実験の７日前にＮω−ニトロ−Ｌ−アルギニン・メチルエステル（４００ｍｇ／Ｌ）を補った飲用水をラットに与えた。ラット（群当たり５〜８匹）をハロタンで麻酔し、血圧測定のため頸動脈にカニューレを挿入した。血圧はチャート式記録計で連続的に記録した。安定血圧を少なくとも１５分間測定後、前記薬剤のうち一つ（ナプロキセン、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、または化合物ＸＸ）を腹腔内にボーラス投与した（ジクロフェナクおよび化合物ＩＩは３０μＭ／ｋｇ、ナプロキセンおよび化合物ＸＸは６０μＭ／ｋｇの用量で投与した）。血圧の変化を投与後６０分間にわたって記録した。平均基礎血圧は１５０±６ｍｍＨｇであった。図１４は、ジクロフェナクおよびナプロキセンが収縮期血圧を大幅に上昇させたことを示している。一方、化合物ＩＩおよび化合物ＸＸは賦形剤投与群に比べ収縮期血圧を上昇させることはなく、血圧変化はそれぞれジクロフェナクおよびナプロキセン誘発によるものに比べて有意に小幅であった。
【実施例２４】
【０１４５】
血漿Ｈ２Ｓ濃度の測定
化合物ＩＩからのＨ２Ｓ放出動態を調べるため、ラット５匹から成る各群に化合物ＩＩを５０μＭ／ｋｇの用量で経口投与し、１０、３０、６０、１８０分後に屠殺した。続いて血漿Ｈ２Ｓ濃度の経時曲線を作成した。既述の方法（Ｕｂｕｋａ、Ｔ．Ａｓｓａｙ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｌａｂｉｌｅ ｓｕｌｆｕｒ ｉｎ ａｎｉｍａｌ ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ Ａｎａｌｙｔ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｍｅｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．２００２；７８１：２２７〜２４９およびＺｈａｏ Ｗ，Ｚｈａｎｇ Ｊ，Ｌｕ Ｙ，Ｗａｎｇ Ｒ．Ｔｈｅ ｖａｓｏｒｅｌａｘａｎｔ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｈ２Ｓ ａｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ｇａｓｅｏｕｓ Ｋ（ＡＴＰ）ｃｈａｎｎｅｌ ｏｐｅｎｅｒ．ＥＭＢＯ Ｊ．２００１；２０：６００８〜６０１６、いずれも「参考文献」参照）に変更を加えて血漿Ｈ２Ｓ濃度を測定した。つまり、密閉した３つ口リアクターにおいて、氷冷した０．１Ｎ ＮａＯＨ２５０μＬに血漿２５０μＬを加えた。吹込管により混合液中に窒素流を絶え間なく通過させるようにした。リアクターを３７℃に保持し、１０％トリクロロ酢酸溶液１ｍＬを加えることによってＨ２Ｓ抽出を開始した。窒素流が、冷却コネクターにより別のリアクター中の硫酸を送達させて、更に、２Ｍ ＫＯＨ、１Ｍサリチル酸、０．２２Ｍアスコルビン酸から成るｐＨ１２．８の硫化物抗酸化緩衝液（ｓｕｌｆｉｄｅ ａｎｔｉ−ｏｘｉｄａｎｔ ｂｕｆｆｅｒ：ＳＡＯＢ）２ｍＬ中においてバブリングした。３０分後にＳＡＯＢ溶液を除去し、硫化物濃度を硫化物感受性の電極（モデル９６１６Ｓ２−／Ａｇ＋電極、Ｏｒｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、米国マサチューセッツ州Ｂｅｖｅｒｌｙ）を用いてＨ２Ｓを測定した（Ｕｂｕｋａ、２００２；Ｋｈａｎら、１９８０）。
【０１４６】
化合物ＸＶＩＩおよび化合物ＩＩに誘発されたインビトロにおけるＨ２Ｓ放出をそれぞれ化合物ＸＶＩＩおよび化合物ＩＩのＨ２Ｓ放出部分であるＴＢＺおよびＡＤＴ−ＯＨと比較するため、切離肝臓１００〜１５０ｍｇを氷冷Ｔ−ＰＥＲタンパク・エキストラクター１ｍＬ中でホモジナイズした。Ｈ２Ｓ放出は同じ血漿分析リアクター上で行われた。分析用反応混合液２ｍＬをリアクター中に加えた。混合液には１００ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ＝７．４）にＰＥＧを加えた中に１ｍＭの化合物ＩＩ、１ｍＭｍの化合物ＸＶＩＩ、１ｍＭ ＴＢＺ、１ｍＭ ＡＤＴ−ＯＨのいずれかが溶解されていた。培養は１０％（ｗ／ｖ）肝臓ホモジネートおよび２ｍＭピリドキサル５−リン酸を加えた場合とそうでない場合にわけて行った。‘混合液中を窒素がガス吹込管経由で絶え間なく通過するようにした。ガラス管を氷浴から３７℃の温浴に移すことにより反応を開始させた。既述のように、窒素流がＳＡＯＢ ２ｍＬが入った２番目のリアクター中の硫酸を運んだ。３７℃で９０分間培養後、５０％トリクロロ酢酸液１ｍＬを混合液に加え反応を停止させた。混合液中の残留Ｈ２Ｓは、さらに３０分間３７℃で培養することにより、窒素流によって除去した。ＳＡＯＢ溶液中の塩化物濃度を既述の硫化物感受性電極によって測定した（Ｕｂｕｋａ、２００２；Ｋｈａｎら、１９８０）。
【０１４７】
図１５に示すように、化合物ＩＩの経口投与により血漿Ｈ２Ｓ濃度が有意に（ｐ<０．０５）上昇した。化合物ＩＩの単回投与後の１８０分間、血漿Ｈ２Ｓ濃度のわずかではあるが一貫した上昇が認められた。図１６は、緩衝液中における化合物ＩＩまたは化合物ＸＶＩＩの培養により、それぞれ等量のＡＤＴ−ＯＨまたはＴＢＺに比べ、有意に多くのＨ２Ｓが放出された。同様に、肝臓ホモジネートで培養した場合、化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩの方がＡＤＴ−ＯＨまたはＴＢＺよりも多くのＨ２Ｓ放出が認められた。
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００５年５月２７日付けで出願されたＰＣＴ／ＣＡ２００５／０００８１９に対して優先権を主張した２００６年３月３１日付けで出願されたＰＣＴ／ＣＡ２００６／０００４８４の一部継続として出願されたものである。本出願はさらに２００６年７月１８日付けで出願された米国特許仮出願第６０／８０７，６３９号および２００７年１月３０日付けで出願された米国特許仮出願第６０／８８７，１８８号に対して優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、炎症、疼痛、発熱の治療に有用な、改良された抗炎症特性を有する非ステロイド系抗炎症薬（ｎｏｎ−ｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇ：ＮＳＡＩＤｓ）の誘導体に関連する。より具体的には、ＮＳＡＩＤｓは硫化水素（Ｈ２Ｓ）放出部分によって誘導体化されており、副作用の少ない新たな抗炎症性化合物を産生するものである。
【背景技術】
【０００３】
非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）は、変形性関節症、関節リウマチ、痛風、強直性脊椎炎など、疼痛、発熱、炎症に関連した様々な病態の治療に広範に用いられている。ＮＳＡＩＤｓはさらに損傷および外科手術（歯科手術を含む）に関連した急性疼痛および頭痛の治療にも広範に用いられている。ＮＳＡＩＤｓの有益な作用は主にシクロオキシゲナーゼ−１（ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−１：ＣＯＸ−１）およびシクロオキシゲナーゼ−（ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２：ＣＯＸ−２）を阻害することによるプロスタグランジン合成抑制能に起因すると考えられている。
【０００４】
しかし、ＮＳＡＩＤｓの長期使用は消化管に重大な損傷を及ぼす可能性があるためにかなり制限されている（Ｗａｌｌａｃｅ，Ｊ．Ｌ．Ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇｓ ａｎｄ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｐａｔｈｙ：ｔｈｅ ｓｅｃｏｎｄ ｈｕｎｄｒｅｄ ｙｅａｒｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．１９９７；１１２：１０００〜１０１６）。選択的ＣＯＸ−２阻害薬は消化管損傷が比較的軽度であると思われたため、従来のＮＳＡＩＤｓの進歩とみられていた。しかし、これらの薬剤およびおそらくは従来のＮＳＡＩＤｓについても、その心臓血管毒性についての懸念が生じている（Ｇｒｏｓｓｅｒら、Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ＣＯＸ−２ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ：ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｃｈａｌｌｅｎｇｅｒｓ ａｎｄ ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．２００６；１１６：４〜１５）。
【０００５】
ＮＳＡＩＤｓが白血球粘着を促進して胃粘膜血流を低下させ、これらの作用がＮＳＡＩＤ誘発性の胃腸障害の発病に対して広範囲にわたり重要な要因であることは周知である（Ｗａｌｌａｃｅ，１９９７）。非選択的Ｎ且つＣＯＸ−２選択的ＮＳＡＩＤｓによる白血球粘着の誘導もまた、これらの薬剤による心臓血管合併症に寄与している可能性がある。
【０００６】
最近、硫化水素（Ｈ２Ｓ）が抗炎症作用および鎮痛作用を及ぼすことが観察された。Ｈ２Ｓは内因性物質であり、多くの組織で産生され、多くの機能に作用を及ぼす（Ｗａｎｇ，Ｔｗｏ‘ｓ ｃｏｍｐａｎｙ，ｔｈｒｅｅ’ｓ ａ ｃｒｏｗｄ：ｃａｎ Ｈ２Ｓ ｂｅ ｔｈｅ ｔｈｉｒｄ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ｇａｓｅｏｕｓ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒ？ＦＡＳＥＢ Ｊ ２００２；１６：１７９２〜１７９８）。またＨ２Ｓは血管拡張剤であることも示されており、血管内皮への白血球粘着を抑制することが出来る（Ｗａｎｇ，２００２；Ｆｉｏｒｕｃｃｉら、Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｓｕｌｆｉｄｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ ｇａｓｔｒｉｃ ｉｎｊｕｒｙ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ ｄｒｕｇｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２００５；１２９；１２１０〜１２２４）。さらに、Ｆｉｏｒｕｃｃｉら（２００５）はラットにおいて、Ｈ２Ｓ供与体による前処置によりＮＳＡＩＤ誘発性胃障害の重症度減弱が可能であることを示した。
【０００７】
驚くべきことに、Ｈ２Ｓ放出部分に共有結合するか或いはＮＳＡＩＤ塩がＨ２Ｓ放出部分と共に形成された場合に、様々なＮＳＡＩＤｓの抗炎症作用が有意に亢進することについて、本発明者らは本出願において示している。さらに、これらのＮＳＡＩＤ誘導体の副作用は比較的軽度であることが示されている。特に、本発明者らは、本発明のＮＳＡＩＤ誘導体が以下の更なる特性、すなわち、（１）従来のＮＳＡＩＤｓよりも胃腸障害が少ないこと、（２）既存の胃潰瘍の治癒を促進すること、および（３）収縮期血圧の上昇が従来のＮＳＡＩＤｓよりも有意に低いこと、の１つ以上を有することを示した。さらに、本発明のＮＳＡＩＤ誘導体は、血管内皮への白血球粘着を低下させ、それによって胃腸および心臓血管系の副作用を低下させる可能性がある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の一態様において、ＮＳＡＩＤと共有結合するか或いはＮＳＡＩＤと共に塩を形成するＨ２Ｓ放出部分を含むＮＳＡＩＤ誘導体が提供される。驚くべきことに、本発明の化合物のは、ラットのカラギーナン誘発性足浮腫モデルにおいて、ＮＳＡＩＤ単独、Ｈ２Ｓ放出成分単独、またはＮＳＡＩＤとＨ２Ｓ放出成分を別々だが併用して投与した場合と比較して、高い抗炎症作用を示した。さらに、本発明のＮＳＡＩＤ誘導体により、血漿Ｈ２Ｓ濃度は一時的にわずかに上昇する。理論に束縛されるものではないが、血漿Ｈ２Ｓ濃度の一時的な上昇は、それが生理学的範囲内であっても抗炎症作用亢進の一因となる可能性がある。
【０００９】
また驚くべきことに、本発明の化合物によるシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）活性および／またはシクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）活性に対する抑制能は、それぞれに対応する非誘導体化ＮＳＡＩＤよりも高い可能性がある。そのようなＣＯＸ−２および／またはＣＯＸ−１の高い抑制能も、観察された抗炎症作用亢進の一因である可能性がある。さらに、ＣＯＸ−１阻害亢進を有する本発明の化合物は血小板における有意なトロンボキサンＢ２産生抑制を示しており、これが低い心臓血管毒性に寄与している可能性がある。
【００１０】
また、本発明の化合物はそれぞれに対応する非誘導体対応物に比べて副作用が少ない。例えば、化合物の中には、胃プロスタグランジン合成の抑制が顕著であるにもかかわらず胃損傷の誘発はＮＳＡＩＤ単独に比べて意外にも有意に少ないものがあった。これらのＨ２Ｓ放出ＮＳＡＩＤ誘導体において胃の安全性が認められる一方、ＮＳＡＩＤおよびＨ２Ｓ放出成分をラットに別々に併用投与した場合には認められない。理論に束縛されるものではないが、本発明の化合物は血管内皮への白血球粘着を低下させることが示されており、これが同化合物の胃安全性に寄与している可能性がある。また、血管内皮への白血球粘着の低下により、ＮＳＡＩＤｓの長期使用で頻繁に見られる心臓血管系副作用が軽減される可能性がある。
【００１１】
さらに、本発明の化合物を高血圧ラットに投与した場合、従来のＮＳＡＩＤｓを投与した場合に比べ、誘発された収縮期血圧の上昇は意外にも有意に小幅であった。血圧上昇傾向が少ないことから、ＮＳＡＩＤｓの長期使用に頻繁に見られる心臓血管系副作用が軽減される可能性がある。
【００１２】
本発明に従って、以下の一般式を有する化合物が提供され、
Ａ−Ｙ−Ｘ（化学式Ｉ）
式中、ＡはＮＳＡＩＤ遊離基であり、Ｙは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、またはゼロから成る群から選択されるものであり、Ｘは、単独で或いはＮＳＡＩＤと結合した場合に硫化水素放出可能な部分（以下Ｈ２Ｓ放出部分と称する）である化合物、またはその薬学的に許容されるその塩であり、Ｙがゼロの場合、前記ＮＳＡＩＤ誘導体はＡおよびＸの塩である可能性がある。
【００１３】
好ましい実施形態において、化学式ＩのＸは以下から成る群から選択されるものである。
【００１４】
【化１】
【００１５】
しかしながら、単独或いはＮＳＡＩＤと結合した場合のいずれにおいても、Ｈ２Ｓを放出することが可能な非毒性有効部分はいずれも、本発明に使用可能であるということは理解されることである。
【００１６】
一実施形態において、本発明の化合物は以下の一般式を有するものであり、
Ｂ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｘ （化学式ＩＩ）
式中、Ｂ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−は遊離型のカルボキシル基を有するＮＳＡＩＤまたはカルボキシ置換ＮＳＡＩＤから誘導されるものであり、ＸはＨ２Ｓ放出部分である化合物、またはその薬学的に許容できる塩である。
【００１７】
一実施形態において、化学式ＩＩのＢ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−は以下から成る群から選択されるものであり、
【００１８】
【化２−１】
【００１９】
【化２−２】
【００２０】
さらに、Ｘは硫化水素（Ｈ２Ｓ）放出部分である。
【００２１】
一実施形態において、化学式ＩＩのＸは以下から成る群から選択されるものである。
【００２２】
【化３】
【００２３】
しかしながら、単独或いはＮＳＡＩＤと結合した場合のいずれにおいても、Ｈ２Ｓを放出することが可能な非毒性有効成分はいずれも本発明に使用可能であることは理解されることである。
【００２４】
本発明の化合物に組み込まれることが考慮されるＮＳＡＩＤｓは、アセチルサリチル酸（ＡＳＡ）、ジクロフェナク、ナプロキセン、インドメタシン、フルルビプロフェン、スリンダク、イブプロフェン、アセクロフェナク、アセメタシン、ベノキサプロフェン、ベンゾフェナク、ブロムフェナク、ブクロキシン酸、ブチブフェン、カルプロフェン、セレコキシブ、シクロプロフェン、シンメタシン、クリダナク、クロピラック、ジフルシナル、エトドラック、エトリコキシブ、フェンブフェン、フェンクロフェナク、フェンクロラク、フェノプロフェン、フェンチアザク、フルノキサプロフェン、フラプロフェン、フロブフェン、フラフェナク、イブフェナク、インドプロフェン、イソキセパク、ケトプロフェン、ケトロラック、ロキソプロフェン、ロナゾラク、ルミラコキシブ、メチアジニク、メフェナム酸、メクロフェナム酸、メロキシカム、ナブメトン、ピロミド酸、サルサレート、ミロプロフェン、オキサプロジン、オキセピナク、パラコキシブ、フェニルブタゾン、ピルプロフェン、ピロキシカム、ピロゾラク、プロチジン酸、ロフェコキシブ、サリチル酸ナトリウム、スプロフェン、チアプロフェン酸、トルメチン、バルデコキシブ、ゾメピラク、などである。
【００２５】
望ましい化合物は以下の化学式を有するものである。
【００２６】
【化４−１】
【００２７】
【化４−２】
【００２８】
【化４−３】
【００２９】
【化４−４】
【００３０】
【化４−５】
【００３１】
【化４−６】
【００３２】
【化４−７】
【００３３】
【化４−８】
【００３４】
【化４−９】
【００３５】
【化４−１０】
【００３６】
【化４−１１】
【００３７】
上述の前駆体ＮＳＡＩＤｓ（Ａ）は従来技術で周知の方法に従って調製される。例えば、この参照により本願明細書に組み込まれるＴｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ 第１３版（２００１）、メルク社、ニュージャージー州Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ Ｓｔａｔｉｏｎを参照。入手可能な場合は、光学異性体を含む対応する異性体を使用することが可能である。
【００３８】
アルカリ金属、アルカリ土類金属、非毒性アミン、及び非毒性アミノ酸との塩など、本発明の化合物の薬学的に許容可能な塩もまた本発明の一部である。本発明の化合物の望ましい塩はアルギニン塩およびアグマチン塩である。薬学的に許容される酸付加塩もまた含まれる。
【００３９】
好ましい実施形態においては、本発明のＮＳＡＩＤｓはＨ２Ｓ放出部分である４−ヒドロキシチオベンズアミド（本願明細書においてＴＢＺと称する）により誘導体化される。ＴＢＺ誘導体は５−ｐｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（ＡＤＴ−ＯＨ）誘導体に比較した場合、一貫して全体的に抗炎症作用に優れ、副作用は少なかった。意外にも、前記ＴＢＺ誘導体は前記ＡＤＴ−ＯＨ誘導体よりも有意に多くのＨ２Ｓを生成し、そのことが抗炎症作用の亢進と副作用の低下に寄与している可能性がある。
【００４０】
さらに、前記ＴＢＺ誘導体の方がＡＤＴ−ＯＨ誘導体よりもＣＯＸ−１／ＣＯＸ−２阻害能を一貫して保持していた。現に、多くのＴＢＺ誘導体がＣＯＸ−１阻害およびＣＯＸ−２阻害のいずれかまたは両方を実際に亢進させた。その上、化合物ＸＸ（ナプロキセン−ＴＢＺ誘導体）は前記ＡＤＴ−ＯＨ同等物である化合物Ｖ（ナプロキセン−ＡＤＴ−ＯＨ）よりもトロンボキサンＢ２合成阻害において有意に優れ、化合物ＸＩＸ（インドメタシン−ＴＢＺ誘導体）は前記ＡＤＴ−ＯＨ同等物である化合物ＩＶ（インドメタシン−ＡＤＴ−ＯＨ誘導体）よりもトロンボキサンＢ２合成阻害において有意に優れていた。トロンボキサンＢ２阻害の亢進は本誘導体の心臓血管系安全性に寄与している可能性がある。
【００４１】
本発明の化合物は以下の２つのスキームで図示したようにに調製可能である。
【００４２】
スキーム １
４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（化合物ＩＩ）の合成を例として用いて以下にスキーム１を示す。
【００４３】
【化５】
【００４４】
例えばジクロフェナク（１）などの遊離型のカルボキシル基を有するＮＳＡＩＤ（またはカルボキシ置換ＮＳＡＩＤ）を最初にジメチルホルムアミドに溶解させて、次にヒドロキシベンゾトリアゾール（ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｔｒｉａｚｏｌｅ：ＨＯＢｔ）および１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（１，３−ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ：ＤＣＣ）を加える。４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（３）などの発明化合物を形成するのに適した条件下、前記混合物に５−ｐｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（ＡＤＴ−ＯＨ）（２）などの硫化水素放出部分を加える。このスキームでは４−ヒドロキシフェニルイソチオシアナート（本願明細書においてＨＰＩと称する）など他の硫化水素放出部分が使用可能であることが理解される。
【００４５】
スキーム ２
ＮＳＡＩＤ誘導体［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（化合物ＸＶＩＩ）の合成を例に用いて以下にスキーム２を示す。このスキームでは、ＮＳＡＩＤに共有結合した硫化水素放出部分にローソン試薬を用いて硫黄基を加える。
【００４６】
【化６】
【００４７】
例えばジクロフェナク（１）などの遊離型のカルボキシル基を有するＮＳＡＩＤ（またはカルボキシ置換ＮＳＡＩＤ）を最初にジメチルホルムアミドに溶解させて、次にヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）および１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を加える。この混合液に、本発明の化合物の前駆体（４−カルバモイルフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（２）など）、硫黄が不足している前駆体の形成に適した条件下、４−ヒドロキシベンズアミドなどの硫化水素放出前駆体を加える。ローソン試薬など硫黄基を加えることが可能な適切な化合物を加え、本発明の化合物（［２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（３）など）を形成する。
【００４８】
さらなる本発明の態様において、本発明の化合物の薬剤組成物および薬学的に許容できる賦形剤または担体、特に消化管の炎症病態の治療に用いられるものが提供される。
【００４９】
本発明の化合物は、これらに限定されるものではないが、痛みや頭痛の治療における鎮痛剤として、もしくは発熱の治療に対する解熱剤として、患者の炎症および他の炎症関連疾患の治療に有用である。例えば、本発明の化合物は、これらに限定されるものではないが、関節リウマチ、脊椎関節症、痛風性関節炎、変形性関節症、全身性エリテマトーデス、若年性関節炎を含む関節炎の治療に有用である。このような本発明の化合物は、喘息、気管支炎、月経痙攣、腱炎、滑液包炎、皮膚関連の病態（乾癬、湿疹、熱傷、皮膚炎など）、術後炎症（白内障手術、屈折矯正手術などの眼科手術を含む）の治療において有用である。本発明の化合物は、炎症性腸疾患、クローン病、胃炎、過敏性腸症候群、潰瘍性大腸炎などの胃腸病の治療、および結腸直腸癌などの癌の予防もしくは治療にも有用である。本発明の化合物は、血管障害、片頭痛、結節性動脈周囲炎、甲状腺炎、再生不良性貧血、ホジキン病、強皮症、リウマチ熱、１型糖尿病、神経筋接合部疾患（重症筋無力症など）、白質疾患（多発性硬化症）、サルコイドーシス、ネフローゼ症候群、ベーチェット症候群、多発性筋炎、歯肉炎、腎炎、過敏症、損傷後の腫脹、心筋虚血などの疾患における炎症の治療に有用である。前記化合物は、網膜炎、網膜症、ブドウ膜炎、眼球羞明症などの眼科疾患の治療、および眼組織への急性損傷の治療においても有用である。前記化合物はウイルス感染および嚢胞性線維症に関連するような肺炎症の治療にも有用である。前記化合物はアルツハイマー病を含む皮質認知症など特定の中枢神経系疾患の治療にも有用と考えられる。本発明の化合物は関節炎の治療などに対し抗炎症薬として有用であり、副作用が顕著に少ないという付加的利益がある。これらの化合物は、アレルギー性鼻炎、呼吸窮迫症候群、内毒素性ショック症候群、アテローム性動脈硬化症、および脳卒中、虚血、外傷による中枢神経系損傷の治療にも有用である。前記化合物は、歯痛、筋肉痛、癌性疼痛など（これらに限定されない）の治療にも有用である。これらの化合物はヒトの治療に有用であるばかりでなく、ウマ、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ヒツジ、ブタなどの哺乳類の治療にも有用である。
【００５０】
治療される具体的な病態もしくは病状に応じて、当業者が容易に判断可能であるように、本発明の化合物は、適切な治療的有効且つ安全な任意の用量で対象に投与することが可能である。これらの化合物は一日あたり約１〜２０００ｍｇの範囲内で単回投与もしくは分割投与するのが最も望ましいが、治療対象の体重、病態、および投与経路によって必然的に異なるものである。本発明の化合物の形成するために、具体的に使用されるＮＳＡＩＤによって用いられる用量が影響されることが理解される。しかしながら、用量レベルは約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇであり、より好ましくは約５〜９０ｍｇ／ｋｇ、さらにより好ましくは約５〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲である。それでもなお、治療対象の体重、病態、および前記薬剤への個々の反応次第で望ましい用量は異なり、さらに選択された剤形の種類、そのような投与を行う期間や間隔にも影響されることが理解される。ある場合においては、前述の範囲の下限より少ない用量レベルで十分である可能性があり、また別の場合にはさらに多用量であってもいかなる有害な副作用を生じることなく使用可能である。ただし、そのような多用量の場合は、最初に少量ずつに分けて投与する必要がある。
【００５１】
本発明の化合物は、投与経路によって決定されるいかなる製剤処方であっても投与可能である。これらの薬剤組成物は、相性の良い薬学的に許容可能な賦形剤を用いて従来の方法で調製可能である。そのような組成物の例としては、即時溶液、注射可能調製物、直腸内、点鼻、眼内、膣内用としてカプセル、錠剤、経皮パッチ、トローチ、スプレー、シロップ、粉末、顆粒、ゲル、エリキシル、座剤などがあげられる。好ましい投与経路は経口および経直腸である。
【００５２】
経口投与用として、例えば微結晶セルロース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、第二リン酸カルシウム、グリシンなど各種賦形剤に加え、でんぷん（好ましくはコーン、ジャガイモ、またはタピオカ粉）、アルギン酸、特定の複合ケイ酸塩などの各種崩壊剤および、ポリビニルピロリドン、蔗糖、ゼラチン、アカシアなどの造粒結合剤を含有する錠剤を使用することも可能である。さらに錠剤化のためにステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、タルクなどの平滑剤を使用することも可能である。ゼラチンカプセルにおいても同様の種類の固形組成物を充填剤として使用することが可能であり、この場合の好ましい材料としては、高分子量のポリエチレングリコールに加え、ラクトースまたは乳糖が含まれる。経口投与用として水性懸濁液および／またはエリキシル剤が望ましい場合、活性成分に甘味剤または香味剤、着色物質、および必要に応じ乳化剤および／または懸濁化剤に加えて、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、およびそれらの各種組合せを組み合わせることも可能である。
【００５３】
即時放出、制御放出、持続放出、遅延放出、または標的遅延放出用として剤形を設計することが可能である。これらの用語の定義当業者に周知である。また、前記剤形の放出特性は、重合体の混合組成、被覆基質組成、多粒子組成、被覆多粒子組成、イオン交換樹脂ベースの組成、浸透圧ベースの組成、または生分解性重合体組成によって影響を受ける可能性がある。理論に束縛されるものではないが、放出は好ましい拡散、分解、浸食、イオン交換、浸透、またはそれらの組合せをによって影響を受ける可能性があると考えられる。
【００５４】
非経口的投与用として、ごま油またはピーナッツ油のいずれか、または含水プロピレングリコールに入った活性化合物の溶液を使用することも可能である。水溶液は必要に応じ適切に中和する必要があり（８より高いｐＨが望ましい）、必要であれば、液体希釈剤を最初に等張にする。前記水溶液は静脈内注射に適している。無菌状態下におけるこれらの溶液の作成はいずれも当業者に周知の標準的製薬技術により容易に達成される。
【００５５】
以下の実施例では、当業者が本発明を実施及び使用出来るようにさらに詳しく説明する。しかし、当然のことながら、これらの実施形態は本発明を図示するのが目的であり、請求項によって定義される本発明の範囲を限定するものとして解釈されるものではない。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】図１は、賦形剤、ジクロフェナク、および本発明の２つのジクロフェナク誘導体である化合物ＩＩと化合物ＸＶＩＩを投与したラットにおいて測定した胃損傷スコアを示したものである。
【図２】図２は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、化合物ＸＶＩＩを投与したラットにおいて産生された胃プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）の量を示したものである。
【図３】図３は、賦形剤、ナプロキセン、および本発明の２つのナプロキセン誘導体である化合物Ｖと化合物ＸＸを投与したラットにおいて測定した胃損傷スコアを示したものである。
【図４】図４は、図３のラットの血液におけるトロンボキサンＢ２合成量を示したものである。
【図５】図５は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩを投与したラットにおける小腸潰瘍の全長を示したものである。
【図６】訳図６は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩ投与前後のラットにおけるヘマトクリット（％）を示したものである。
【図７】図７は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、化合物ＸＶＩＩを投与したラットの皮下嚢におけるＰＧＥ２浸出量をラット空気嚢アッセイを用いて測定したものである。
【図８】図８は、図７のラットにおける全血トロンボキサンＢ２（ＴＸＢ２）量を示したものである。
【図９】図９は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩを投与したラットにおける足容積増加抑制を示したものである。
【図１０】図１０は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＸＶＩＩを投与したラットにおける足容積増加抑制を示したものである。
【図１１】図１１は、賦形剤、ナプロキセン、化合物Ｖ、化合物ＸＸを投与したラットの皮下嚢におけるＰＧＥ２浸出量をラット空気嚢アッセイを用いて測定したものである。
【図１２】図１２は、インドメタシン、化合物ＩＶ、化合物ＸＩＸの濃度関数としてのヒト血液（生体外）によるトロンボキサン合成量（ｎｇ／ｍＬ）を示したものである。
【図１３】図１３は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＸＶＩＩ、ナプロキセン、化合物ＸＸを毎日１週間投与した後のラットにおける胃潰瘍の表面積（ｍｍ２）を示したものである。
【図１４】図１４は、賦形剤、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、ナプロキセン、化合物ＸＸを投与したラットにおける収縮期血圧の上昇（ｍｍ Ｈｇ）を示したものである。
【図１５】図１５は、ラットに化合物ＩＩ ５０μＭ／ｋｇを経口投与した際の血漿硫化水素濃度を示したものである。
【図１６】図１６は、緩衝液中および肝臓ホモジネート中で培養した際に化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩから生成された硫化水素の量を示したものである。
【発明を実施するための形態】
【００５７】
化合物の作成
蛍光指示薬を加えたＭａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅｌシリカゲル５０プレート上で薄層クロマトグラフィを行い、プレートを紫外線（２５４ｎｍ）で視覚化した。カラムクロマトグラフィにはＫｉｅｓｅｌｇｅｌ ６０を用いた。合成試薬はいずれもＡｌｄｒｉｃｈ−Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙから購入し、無精製で用いた。溶媒は分析用試薬を上回る純度であり、供給されたままの状態で使用した。真空下における溶媒除去にはＢｕｃｈｉ Ｒ−１１４ Ｒｏｔａｖａｐｏｒを用いた。構造をプロトン１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲにより分光的に検証した。スペクトルはＶａｒｉａｎ Ｍｅｒｃｕｒｙ Ｐｌｕｓ ４００計器に記録した。化学シフトはＭｅ４Ｓｉを内部基準とした。Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ ＡＰＩ ２０００ 質量分析により前記合成産物の質量スペクトルを計測した。Ｂｕｃｈｉ Ｂ−５４０で融点を測定した。最終化合物の純度をＲＰ−ＨＰＬＣで測定した。カラムをＲｈｅｏｄｙｎｅモデル７７２５インジェクタ、Ｗａｔｅｒｓ ６００ ＨＰＬＣ システム、Ｗａｔｅｒｓ ４８６調節可能吸光度検出器（２１５もしくは２３５ｎｍに設定）、Ｗａｔｅｒ ７４６チャート式記録計に接続した。合成された化合物の元素分析の結果は満足すべきものであった。分析は元素記号のみによって示され、結果は理論値±０．４％以内である。
【実施例１】
【００５８】
［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−（５−チオキソ−５Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル（化合物ＩＩ）の合成
【００５９】
【化７】
【００６０】
スキーム １
５−ｐｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；ＡＤＴ−ＯＨ）の合成
【００６１】
【化８】
【００６２】
アネトール（３１ｇ、０．２１Ｍ）および硫黄（４８ｇ、１．４０Ｍ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２５０ｍＬ）中で８時間加熱した。溶媒除去後、残留物はトルエン中でほぼ完全に可溶であった。前記トルエン溶液を２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で抽出することにより、オレンジ色の固体沈殿物を得た（８．５ｇ；ｍ．ｐ．３００℃以上）。この沈殿物を沸騰水中に溶解し、塩酸を加えた後、オレンジ色の沈殿物として２を得た（６．２ｇ、収率１３％；ｍ．ｐ．１８８〜１８９℃）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ６．８６（ｄ、２Ｈ）、７．６８（ｓ、１Ｈ）、７．７５（ｄ、２Ｈ）、１０．５１（ｓ、−ＯＨ）；ＭＳ（ＥＳＩ）、ｍ／ｚ ２２５（Ｍ−）。
【００６３】
［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−（５−チオキソ−５Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル（３）の合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５０ｍＬ中に１（ジクロフェナク、８９０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（４４５ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（６８０ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に５−ｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；６８７ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下で蒸発させ、得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解した。有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ （９／１）で溶出し、そこから［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−（５−チオキソ−５Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル（３）を得た（１．１ｇ、収率７４％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ４．１２（ｓ、２Ｈ）、６．２１（ｄ、１Ｈ）、６．８７（ｔ、１Ｈ）、７．１４（ｔ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ）、７．２２（ｔ、１Ｈ）、７．３４（ｄ、２Ｈ）、７．５４（ｄ、２Ｈ）、７．８０（ｓ、１Ｈ）、７．９７（ｄ、２Ｈ）；
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３７．４、１１６．１、１２１．０、１２２．３、１２３．５、１２３．７、１２７．０、１２８．７、１２９．３、１２９．８、１３２．０、１３２．２、１３６．４、１３７．７、１４３．８、１５４．２、１７０．３、１７３．３、２１３．２。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ５０４（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：８３〜８６℃。
【実施例２】
【００６４】
［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（化合物ＸＶＩＩ）の合成
【００６５】
【化９】
【００６６】
スキーム ２
４−カルバモイルフェニル ２−［２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）−フェニル］酢酸（５）の合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５０ｍＬ中に１（ジクロフェナク、８９０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（４４５ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（６８０ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（４、６１６ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ、得られた油性残留物をクロロホルムに溶解した。有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物５をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９／１）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（５）を得た（２１２ｍｇ、収率１７％）。
【００６７】
［２−（２，６−ジクロロ−フェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（６）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（５，４８０ｍｇ、１１．４ｍｍｏｌ）およびローソン試薬（４６０ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン２０ｍＬに溶解した。反応液を５０℃まで温め、６時間にわたって撹拌した。減圧下に前記溶媒を除去し、粗残留物をシリカゲル・カラム（ジクロロメタン／メチルアルコール ９．５／０．５）で精製し、当該純粋化合物 ６（４４６ｍｇ、収率９１％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ４．０７（ｓ、２Ｈ）、６．５９（ｄ、１Ｈ）、６．６７（ｓ、１Ｈ）、６．９８（ｔ、１Ｈ）、７．１４（ｔ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ）、７．２８（ｔ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、２Ｈ）、７．６３（ｓ、１Ｈ）、７．９７（ｄ、２Ｈ）；
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３８．８、１１８．８、１２１．８、１２２．６、１２３．７、１２４．４、１２８．７、１２９．１、１３１．２、１３７．２、１３７．８、１４２．９、１５３．５、１７０．５、１９３．２、２０１．７
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ４３１（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１７０〜１７２℃。
【実施例３】
【００６８】
［２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−フェニル］−酢酸 ４−（５−チオキソ−５Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル（化合物ＩＩＩ）の合成
【００６９】
【化１０】
【００７０】
スキーム １
４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（３）の合成
ジメチルホルムアミド４０ｍＬに１（ルミラコキシブ、６００ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（３０１ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（４５９ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に５−ｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；５０４ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２で溶出し、そこから４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（３）を採取した（２９９ｍｇ、収率３７％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）：δ２．３２（ｓ、３Ｈ）、４．０２（ｓ、２Ｈ）、６．４１（ｓ、１Ｈ）、、６．７１（ｄ、１Ｈ）、６．９３（ｔ、１Ｈ）、６．９５（ｄ、２Ｈ）、７．１４（ｄ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、２Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．６６（ｄ、２Ｈ）；
１Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）：δ２０．８、３８．７、１１５．２、１１９．２、１２２．５、１２３．２、１２４．０、１２６．１、１２７．２、１２９．３、１３０．３、１３１．７、１３２．２、１３３．６、１３６．４、１４０．３、１５３．７、１５４．４、１５６．８、１７０．３、１７１．６、２１５．７
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ５０３（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１３１〜１３３℃。
【実施例４】
【００７１】
４−チオカルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（化合物ＸＶＩＩＩ）の合成
【００７２】
【化１１】
【００７３】
スキーム ２
４−カルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（５）の合成
ジメチルホルムアミド１５ｍＬに１（ルミラコキシブ、２２３ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１１ｍｇ、０．８２５ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１７０ｍｇ、０．８２５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（４、１５４ｍｇ、１．１２５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物をクロロホルムに溶解し、有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物５をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ （９／１）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（５）を採取した（１１１ｍｇ、収率３５％）。
【００７４】
４−チオカルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（６）の合成
４−カルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート、５（１１０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）、ローソン試薬（１０９ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン１５ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、３時間にわたって撹拌した。減圧下に前記溶媒を除去し、得られた粗残留物をシリカゲル・カラム（ジクロロメタン／メチルアルコール ９．５／０．５）で精製し、純粋化合物 ６を得た（５９ｍｇ、収率５１％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．３２（ｓ、３Ｈ）、４．０１（ｓ、２Ｈ）、６．４６（ｓ、１Ｈ）、、６．７０（ｄ、１Ｈ）、６．９２（ｔ、１Ｈ）、７．０１（ｄ、２Ｈ）、７．１１（ｄ、２Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ）、７．６２（ｓ、ＮＨ）、７．８４（ｄ、２Ｈ）；
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２０．８、３０．７、１１５．１、１１９．２，１２２．０、１２２．３、１２４．１、１２４．９、１２６．１、１２８．２、１２９．２，１３２．３、１３４．８、１３８．６、１４０．９、１５３．７、１５４．６、１５６．２、１７０．４、２０１．７
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ４２９（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１２０〜１２２℃。
【実施例５】
【００７５】
４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−アセトキシ安息香酸（化合物Ｉ）の合成
【００７６】
【化１２】
【００７７】
スキーム １
４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−アセトキシ安息香酸（３）の合成
ジメチルホルムアミド４０ｍＬに１（アセチルサリチル酸、４１６ｍｇ、２．３１ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（３４３ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（５２３ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に５−ｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；５７４ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、エチルエステル／石油エーテル（１／１）で溶出し、そこから４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−アセトキシ安息香酸（３）を得た（３５４ｍｇ、収率４０％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２．３２（ｓ、３Ｈ）、７．２０（ｄ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、２Ｈ）、７．４０（ｔ、１Ｈ）、７．４１（ｔ、１Ｈ）、７．６７（ｔ、１Ｈ）、７．７３（ｄ、２Ｈ）、８．２１（ｄ、１Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２１．２、１２２．１、１２３．４、１２４．４、１２６．６、１２８．６、１２９．７、１３２．４、１３５．４、１３６．４、１５１．６、１５３．７、１６２．６、１６９．８、１７１．９、２１５．７
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３８９（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１２０〜１２２℃。
【実施例６】
【００７８】
２−アセトキシ−安息香酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（化合物ＸＶＩ）の合成
【００７９】
【化１３】
【００８０】
スキーム ２
４−カルバモイルフェニル ２−アセトキシ安息香酸（５）の合成
ジメチルホルムアミド１５ｍＬに１（アセチルサリチル酸、５００ｍｇ、２．７７ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（４１２ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（６２８ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（４、４１８ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で３時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物をクロロホルムに溶解し、有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物５をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９／１）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−アセトキシ安息香酸（５）を採取した（４１０ｍｇ、収率４７％）。
【００８１】
４−チオカルバモイルフェニル−２−（２−（２−クロロ−６−フルオロフェニルアミノ）−５−メチルフェニル）アセテート（６）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−アセトキシ安息香酸、５（４１０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、ローソン試薬（５５４ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン３５ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、３時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去し、得られた粗残留物をシリカゲル・カラム（ジクロロメタン／メチルアルコール ９．５：０．５）で精製し、純粋化合物６ ４７０ｍｇを得た。得られた化合物を２溶媒システムによる分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した：Ａ：０．１％ＴＦＡ中に１００％アセトニトリル、Ｂ：０．１％ＴＦＡ（３５分間に１０％Ａから６０％Ａの直線勾配、２５４ｎｍでＵＶ検出、流速３０ｍＬ／分）に１００％Ｈ２Ｏを加えることにより前記純粋化合物６（３２４ｍｇ、収率７１％）が得られる。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．３０（ｓ、３Ｈ）、７．１７（ｄ、１Ｈ）、７．２１（ｄ、２Ｈ）、７．４０（ｔ、１Ｈ）、７．６６（ｔ、１Ｈ）、７．９４（ｄ、２Ｈ）、８．２（ｄ、１Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ２１．２、１２１．９、１２２．４、１２４．３、１２６．４、１２８．７、１３２．４、１３５．１、１３７．３、１５１．５、１５３．７、１６２．７、１６９．８、２０１．８
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３１６（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１５４〜１５６℃
【実施例７】
【００８２】
［１−（４−クロロ−ベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−１−Ｈ−インドール−３−イル］―酢酸 ４−（５−チオキソ−５−Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル（化合物ＩＶ）の合成
【００８３】
【化１４】
【００８４】
スキーム １
４−［４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）］フェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−インドール−３−イル］−アセテート（３）の合成
ジメチルホルムアミド３０ｍＬに１（インドメタシン、７２０ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（３０１ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（４５６ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に５−ｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；５００ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物をシリカゲル・オープンカラムに加え、ジクロロメタン／メチルアルコール（９８／２）で溶出し、そこから４−［４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）］フェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−インドール−３−イル］−アセテート（３）を得た（２５７ｍｇ、収率２３％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．４７（ｓ、３Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ、ＯＣＨ３）、３．９３（ｓ、２Ｈ）、６．７０（ｄ、１Ｈ）、６．８８（ｄ、１Ｈ）、７．０４（ｓ、１Ｈ）、７．２１（ｄ、２Ｈ）、７．３７（ｓ、１Ｈ）、７．４８（ｄ、２Ｈ）、７．６５（ｄ、２Ｈ）、７．６７（ｄ、２Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：Σ１３．６、３０．８、５６．０、１０１．５、１１１．６、１１１．９、１１５．３、１２２．９、１２８．４、１２９．４、１２９．６、１３０．６、１３１．１、１３１．４、１３３．９、１３６．３、１３６．６、１３９．７、１５３．８、１５６．４、１６７．５、１６８．９、１７０．４、２１５．７。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ５６７（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：９０〜９２℃。
【実施例８】
【００８５】
［１−（４−クロロ−ベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−１−Ｈ−インドール−３−イル］―酢酸 ４−チオカルバモイル−フェニルエステル（化合物ＸＩＸ）の合成
【００８６】
【化１５】
【００８７】
スキーム ２
４−カルバモイルフェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−インドール−３−イル］−酢酸（５）の合成
ジメチルホルムアミド６０ｍＬに１（インドメタシン、３ｇ、８．３８ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．２５ｇ、９．２２ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１．９ｇ、９．２２ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（４、１．７２ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物５をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ （９．５／０．５）で溶出し、４−カルバモイルフェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシー２−メチル−インドール−３−イル］−酢酸（５）を採取した（４７９ｍｇ、収率１２％）。
【００８８】
４−チオカルバモイルフェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−インドール−３−イル］−酢酸（６）の合成
４−カルバモイルフェニル−２−［１−（４−クロロベンゾイル）−５−メトキシ−２−メチル−インドール−３−イル］−アセテート、５（３４０ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）、ローソン試薬（２８７ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン１５ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、４時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去し、得られた粗残留物をシリカゲル・カラム（ジクロロメタン／メチルアルコール ９．５：０．５）で精製し、粗化合物６ １７８ｍｇを得た。得られた化合物を２溶媒システムによる分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した：Ａ：０．１％ＴＦＡ中に１００％アセトニトリル、Ｂ：０．１％ＴＦＡ（３０分間に１０％Ａから８０％Ａの直線勾配、２５４ｎｍでＵＶ検出、流速３０ｍＬ／分）中に１００％Ｈ２Ｏを加えることにより純粋化合物６（５６ｍｇ、収率１６％）が得られる。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．４５（ｓ、３Ｈ）、３．８３（ｓ、３Ｈ、ＯＣＨ３）、３．９１（ｓ、２Ｈ）、６．７０（ｄ、１Ｈ）、６．８８（ｄ、１Ｈ）、７．０４（ｓ、１Ｈ）、７．１１（ｄ、２Ｈ）、７．４７（ｄ、２Ｈ）、７．６７（ｄ、２Ｈ）、７．８８（ｄ、２Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１３．６、３０．８、５６．０、１０１．５、１１１．９、１１２．０、１１５．３、１２１．７、１２８．６、１２９．４、１３０．８、１３１．２、１３１．４、１３４．０、１３６．８、１３７．１、１３９．７、１５６．２、１５７．９、１６７．６、１６９．８、２０１．８
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ４９３（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：２２４〜２２６℃。
【実施例９】
【００８９】
２−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−プロピオン酸 ４−（５−チオキソ−５Ｈ−［１，２］ジチオール−３−イル）−フェニルエステル （化合物Ｖ）の合成
【００９０】
【化１６】
【００９１】
スキーム １
４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（３）の合成
ジメチルホルムアミド２０ｍＬに１（ナプロキセン、５９５ｍｇ、２．５８ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（３８８ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（５９３ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に５−ｐ−ヒドロキシフェニル−１，２−ジチオール−３−チオン（２；６５０ｍｇ、２．８７ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。得られた粗生成物をシリカゲル・オープンカラムに加え、ジクロロメタンで溶出し、そこから４−（５−チオキソ−５Ｈ−１，２−ジチオール−３−イル）フェニル−２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（３）を得た（４０６ｍｇ、収率３６％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．５９（ｄ、３Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ、ＯＣＨ３）、４．２４（ｄｄ、１Ｈ）、７．１８（ｄ、１Ｈ）、７．２２（ｄ、２Ｈ）、７．３１（ｓ、１Ｈ）、７．５０（ｄ、１Ｈ）、７．７７（ｓ、１Ｈ）、７．８５（ｄ、１Ｈ）、７．８６（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｄ、１Ｈ）、 ７．９１（ｄ、２Ｈ）
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．１、４５．２、５５．９、１０６．５、１１９．６、１２３．５、１２６．６、１２６．９、１２８．０、１２９．２、１２９．４、１２９．５、１２９．６、１２９．９、１３４．２、１３５．６、１３６．５、１５４．２、１５８．１、１７３．２、２１６．２
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ４３９（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１１１〜１１３℃。
【実施例１０】
【００９２】
２−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−プロピオン酸 ４−チオカルバミル−フェニルエステル（化合物ＸＸ）の合成
【００９３】
【化１７】
【００９４】
スキーム ２
４−カルバモイルフェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（５）の合成
ジメチルホルムアミド８０ｍＬに１（ナプロキセン、４ｇ、１７．４ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．５９ｇ、１９．１４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（２．５９ｇ、１９．１４ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（４、３．５８ｇ、２６．１ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物５をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）−プロパン酸（５）を採取した（１．９１ｇ、収率３２％）。
【００９５】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（６）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）−プロパン酸、５（１．８０ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）およびローソン試薬（１．７５ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン１３０ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、４時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去し、得られた粗残留物をシリカゲル・カラム（ジクロロメタン／メチルアルコール ９．７５：０．２５）で精製し、純粋化合物６ ２．９ｇを得た。得られた化合物をシリカゲル・オープンカラムで精製し、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、純粋化合物 ６を得た（９７０ｍｇ、収率６１％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．５９（ｄ、３Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ、ＯＣＨ３）、４．２４（ｄｄ、１Ｈ）、７．０６（ｄ、２Ｈ）、７．１８（ｄ、１Ｈ）、７．３１（ｓ、１Ｈ）、７．５０（ｄ、１Ｈ）、７．８４（ｓ、１Ｈ）、７．８５（ｄ、１Ｈ）、７．８６（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｄ、２Ｈ）、９．４７ および９．８４（ｓ、２Ｈ、ＮＨ２）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．１、４５．２、５５．９、１０６．５、１１９．６、１２１．６、１２６．６、１２６．９、１２８．０、１２９．４、１２９．９、１３４．２、１３５．６、１３７．８、１５３．４、１５８．１、１７３．３、１９９．７。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３６６（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１９６〜１９８℃。
【実施例１１】
【００９６】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（４−イソブチルフェニル）プロパン酸（化合物ＸＸＩＸ）の合成
【００９７】
【化１８】
【００９８】
ジメチルホルムアミド８０ｍＬに１（イブプロフェン、３．８７ｇ、１８．８ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．８ｇ、２０．７ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（４．２７ｇ、２０．７ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（２、３．９ｇ、２８ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、５％ＮａＨＣＯ３、１０％クエン酸で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−（４−イソブチルフェニル）プロパン酸（３）を得た（２．４８ｇ、収率４０％）。
【００９９】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（４−イソブチルフェニル）プロパン酸（４）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−（４−イソブチルフェニル）プロパン酸、３（２．４８ｇ、７．６２ｍｍｏｌ）およびローソン試薬（３．１ｇ、７．６２ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン１３０ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、４時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去した。得られた化合物をシリカゲル・オープンカラムで精製し、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、純粋化合物 ４を得た（１．４５ｇ、収率５５％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ０．８４（ｄ、６Ｈ）、１．４８（ｄ、３Ｈ）、１．７９〜１．８２（ｍ、１Ｈ）、２．４２（ｄ、２Ｈ）、４．０５（ｄｄ、１Ｈ）、７．０５（ｄ、２Ｈ）、７．１５（ｄ、２Ｈ）、７．２８（ｄ、２Ｈ）、７．８８（ｄ、２Ｈ）、９．４９および９．８７（ｓ、２Ｈ、ＮＨ２）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．２、２２．９、３０．３、４４．９、１２１．６、１２７．９、１２９．５、１３０．０、１３７．８、１３８．０、１４０．８、１５３．３、１７３．３、１９９．６。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３４１（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１２１〜１２３℃。
【実施例１２】
【０１００】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（４−オキソフェニル）−プロパン酸フェニル（化合物ＸＸＸ）の合成
【０１０１】
【化１９】
【０１０２】
４−カルバモイルフェニル ２−（４−オキソフェニル）−プロパン酸フェニル（３）の合成
ジメチルホルムアミド８０ｍＬ中に１（ケトプロフェン、３ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．７６ｇ、１９．１３ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（２．６８ｇ、１１３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（２、２．４３ｇ、１７．７ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−（４−オキソフェニル）−プロパン酸フェニル（３）を得た（１．８４ｇ、収率４２％）。
【０１０３】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（４−オキソフェニル）−プロパン酸フェニル（４）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−（４−オキソフェニル）−プロパン酸フェニル（３）（１．８４ｇ、４．９３ｍｍｏｌ）およびローソン試薬（２ｇ、４．９３ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン１００ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、４時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去した。得られた化合物をシリカゲル・オープンカラムで精製し、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、純粋化合物 ４を得た（０．４５ｇ、収率２３％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．５３（ｄ、３Ｈ）、４．２５（ｄｄ、１Ｈ）、７．０８（ｄ、２Ｈ）、７．５４〜７．７３（ｍ、９Ｈ）、７．９０（ｄ、２Ｈ）、９．５１および９．８８（ｓ、２Ｈ、ＮＨ２）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．２、４４．９、１２１．６、１２９．３、１２９．５、１２９．８、１３０．３、１３２．６、１３３．５、１３７．６、１３７．９、１３８．１、１４１．２、１５３．３、１５４．５、１５６．１、１６３．８、１７２．９、１９９．６。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３９０（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１１４〜１１６℃。
【実施例１３】
【０１０４】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（３−フルオロ、４−フェニル）プロパン酸フェニル（化合物ＸＸＸＩ）の合成
【０１０５】
【化２０】
【０１０６】
４−カルバモイルフェニル ２−（３−フルオロ、４−フェニル）プロパン酸フェニル（３）の合成
ジメチルホルムアミド８０ｍＬ中に１（フルルビプロフェン、２ｇ、８．２ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．２２ｇ、９．０２ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１．８６ｇ、９．０２ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシベンズアミド（２、１．７ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。このようにして得られた油性残留物を酢酸エチルに溶解し、有機層を塩水、ＮａＨＣＯ３ ５％、クエン酸 １０％で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物３をシリカゲル・オープンカラムに加え、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、そこから４−カルバモイルフェニル ２−（３−フルオロ、４−フェニル）プロパン酸フェニル（３）を採取した（１．０９ｇ、収率３７％）。
【０１０７】
４−チオカルバモイルフェニル ２−（３−フルオロ、４−フェニル）プロパン酸フェニル（４）の合成
４−カルバモイルフェニル ２−（３−フルオロ、４−フェニル）プロパン酸フェニル、３（１．０９ｇ、３ｍｍｏｌ）およびローソン試薬（１．２１ｇ、１．３ｍｍｏｌ）を無水ベンゼン７０ｍＬに溶解した。反応液を６０℃まで温め、４時間にわたって撹拌した。減圧下に溶媒を除去した。得られた化合物をシリカゲル・オープンカラムで精製し、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（９．５／０．５）で溶出し、純粋化合物４を得た（０．３５ｇ、収率３１％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１．５５（ｄ、３Ｈ）、４．２１（ｄｄ、１Ｈ）、７．３２〜７．５５（ｍ、８Ｈ）、７．９０（ｄ、２Ｈ）、９．５１および９．８８（ｓ、２Ｈ、ＮＨ２）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１９．１、４４．７、１１５．９、１１６．２、１２１．７、１２４．８、１２８．６、１２９．３、１２９．４、１２９．５、１３１．７、１３５．８、１３７．７、１４２．６、１５３．７、１５８．３、１６３．５、１７３．１、１９９．６。
ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３８０（Ｍ＋）；
ｍ．ｐ．：１４２〜１４４℃。
【実施例１４】
【０１０８】
４−（イソチオシアノ）−フェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（化合物ＸＸＶ）の合成
【０１０９】
【化２１】
【０１１０】
ジメチルホルムアミド２０ｍＬに１（ナプロキセン、６９１ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（４４６ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（６１９ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシフェニルイソチオシアナート（２、５００ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。油性残留物をエチルアセテートに溶解し、沈殿物を除去した。溶媒を蒸発させ、粗生成物をシリカゲル・オープンカラムに加え、ジクロロメタンで溶出し、そこから４−（イソチオシアノ）−フェニル ２−（２−メトキシナフタレン−６−イル）プロパン酸（３）を採取した（２３０ｍｇ、収率２１％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：Σ１．５７（ｓ、３Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ、ＯＣＨ３）、４．２０（ｄｄ、１Ｈ）、７．１０（ｄ、２Ｈ）、７．１５（ｄ、１Ｈ）、７．２９（ｓ、１Ｈ）、７．４３（ｄ、２Ｈ）、７．４８（ｄ、１Ｈ）、７．７８（ｄ、１Ｈ）、７．８０（ｓ、１Ｈ）、７．８３（ｄ、１Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：Σ１９．１、４５．２、１０６．５、１１９．６、１２３．８、１２６．６、１２６．９、１２８．０、１２９．２、１２９．９、１３４．２、１３４．６、１３５．７、１５０．２、１５８．１、１７３．２、２１５．１。
ｍ．ｐ．６６〜６８℃；ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ３６４（Ｍ＋）。
【実施例１５】
【０１１１】
４−イソチオシアナトフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（化合物ＸＸＩＩ）の合成
【０１１２】
【化２２】
【０１１３】
４−イソチオシアナトフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（３）
ジメチルホルムアミド６０ｍＬに１（ジクロフェナク、１７１７ｍｇ、５．８ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（８６２ｍｇ、６．３８ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１３１６ｍｇ、６．３８ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシフェニルイソチオシアナート（２、９６５ｍｇ、６．３８ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。油性残留物をエチルアセテートに溶解し、沈殿物を除去した。前記溶媒を蒸発させ、粗生成物をシリカゲル・オープンカラムに加え、クロロホルム／ｎ−へキサン（９：１）で溶出し、そこから４−イソチオシアナトフェニル ２−（２−（２，６−ジクロロフェニルアミノ）フェニル）アセテート（３）を得た（５８０ｍｇ、収率２３％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：Σ４．０９（ｓ、２Ｈ）、６．１９（ｄ、１Ｈ）、６．８３（ｔ、１Ｈ）、７．０５（ｔ、１Ｈ）、７．１４（ｂｓ、１Ｈ、ＮＨ）、７．２１（ｄ、２Ｈ）、７．２５（ｄ、２Ｈ）、７．４７〜７．５４（ｍ、３Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ３７．４、１１６．１、１２１．０、１２２．７、１２４．０、１２７．１、１２７．８、１２８．３、１２８．７、１２９．８、１３２．０、１３２．２、１３７．７、１４４．０、１５０．３、１７０．５、２１５．１。
ｍ．ｐ．１３２〜１３４℃；ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ４３０（Ｍ＋）。
【実施例１６】
【０１１４】
４−イソチオシアナトフェニル ２−アセトキシ安息香酸（化合物ＸＸＩ）の合成
【０１１５】
【化２３】
【０１１６】
４−イソチオシアナトフェニル ２−アセトキシ安息香酸（３）
ジメチルホルムアミド６０ｍＬに１（アスピリン、１２００ｍｇ、６．６７ｍｍｏｌ）を加えた溶液中に、ヒドロキシベンゾトリアゾール（９９２ｍｇ、７．３４ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１５２０ｍｇ、７．３４ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。前記反応混合液に４−ヒドロキシフェニルイソチオシアナート（２、１１０９ｍｇ、７．３４ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間、室温で２時間撹拌した。濾過後、濾液を減圧下に蒸発させ溶媒を除去した。油性残留物をエチルアセテートに溶解し、沈殿物を除去した。前記溶媒を蒸発させ、粗生成物をシリカゲル・オープンカラムに加え、クロロホルム／ｎ−へキサン（６：４）で溶出し、そこから４−イソチオシアナトフェニル ２−アセトキシ安息香酸（３）を得た（１５０ｍｇ、収率７％）。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ２．３１（ｓ、３Ｈ）、７．１７（ｄ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、２Ｈ）、７．２９（ｄ、２Ｈ）、７．３８（ｔ、１Ｈ）、７．６６（ｔ、１Ｈ）、８．２０．２（ｄ、１Ｈ）。
１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）：δ２１．３、１２２．９、１２３．３、１２４．４、１２６．６、１２７．２、１２９．４、１３２．４、１３５．２、１４９．３、１５１．５、１６３．０、１７０．０、２１５．１。
ｍ．ｐ．８４〜８６℃；ＭＳ（Ｅｌ）、ｍ／ｅ ２７２（Ｍ＋）。
【実施例１７】
【０１１７】
本発明の化合物の胃腸安全性
ラットにおける胃腸安全性に関し、本発明の２つのジクロフェナク誘導体である化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩの評価を行った。特に、胃損傷、胃ＰＧＥ２合成、小腸潰瘍、ヘマトクリットについて評価した。
【０１１８】
雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（体重１７５〜２００ｇ）を、１％カルボキシメチルセルロース（賦形剤；０．２ｍＬ）単独もしくは次のいずれかをこの賦形剤に溶解したものを経口投与する前１８時間にわたって絶食とした。すなわち、ジクロフェナク（２０ｍｇ／ｋｇ）、化合物ＩＩ（３２ｍｇ／ｋｇ）、ＡＤＴ−ＯＨ（１２ｍｇ／ｋｇ）、ジクロフェナク＋ＡＤＴ−ＯＨ、化合物ＸＶＩＩ（２７．３ｍｇ／ｋｇ）、４−ヒドロキシチオベンズアミド（ＴＢＺ）（７．３ｍｇ／ｋｇ）、化合物ＸＶＩＩ＋硫化水素放出部分、ジクロフェナク＋ＴＢＺ、のいずれかである。化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩの用量はジクロフェナク２０ｍｇ／ｋｇと等モルである。同様に、ＡＤＴ−ＯＨおよびＴＢＺの用量はそれぞれ化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩと等モルである。
【０１１９】
各群ともラット５匹で構成された。前記試験化合物の投与から３時間後にラットを安楽死させ、胃の出血性損傷の範囲を盲検的に測定した（ｍｍ単位）。胃の病変すべての長さを合計することにより「胃損傷スコア」を計算した。まず図１に関連し、「賦形剤」群、「化合物ＩＩ」群、「化合物ＸＶＩＩ」群では胃損傷は認められなかった。化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩによる胃損傷はジクロフェナクによるものよりも有意に少なかった。さらに、ＮＳＡＩＤ成分（ジクロフェナク）および化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩのＨ２Ｓ放出部分（それぞれＡＤＴ−ＯＨおよびＴＢＺ）を別々に（但し同時に）投与した場合、胃温存作用は認められなかった。
【０１２０】
これらの所見は、続いて行った盲検による組織学的評価によって確認された。以前に詳述されているように（Ｗａｌｌａｃｅら、Ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ １ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ｒａｔｓ ａｎｄ ｍｉｃｅ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｏｘｉｃｉｔｙ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９９８；１１５：１０１〜１０９、「参考文献」を参照のこと）、胃組織標本（１００〜２００）を切り出し、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）合成について評価した。つまり、前記組織標本を３０分間剪刀で刻み、それらをリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．４）１ｍＬ中に入れ、それを振盪する温浴（３７℃）中に２０分間置いた。その後直ちに標本を９，０００ｇで１分間遠心分離にかけ、その後の特異的ＥＬＩＳＡ法を用いたＰＧＥ２濃度測定のため、上澄を−８０℃で直ちに冷凍した（Ｗａｌｌａｃｅら、１９９８）。
【０１２１】
図２からはジクロフェナク（ＡＤＴ−ＯＨまたはＴＢＺの併用の有無に関わらず）、化合物ＩＩ、化合物ＸＶＩＩのいずれもが胃ＰＧＥ２合成量を有意に低下させたことが伺え、ＣＯＸ−１および／またはＣＯＸ−２の阻害を示している。ＡＤＴ−ＯＨおよびＴＢＺ単独では、賦形剤に比べ胃ＰＧＥ２合成は低下しなかった。従って、図１に示したような化合物ＩＩまたは化合物ＸＶＩＩを投与したラットにおける胃損傷の欠如は、これらの薬剤による胃プロスタグランジン合成抑制能の変化に起因するものではなかった。胃ＰＧＥ２合成はこれらの薬剤および同モルのジクロフェナクによりほぼ完全に抑制された。
【０１２２】
図３は、本発明の２つのナプロキセン誘導体（化合物ＶおよびＸＸ）による損傷がナプロキセン自体によるものに比べ有意に軽度であることを示している。これらの実験は図１に示したものと全く同じ方法で行われた。ナプロキセン、化合物Ｖ、化合物ＸＸをそれぞれ６０μモル／ｋｇで経口投与し、３時間後に胃損傷を盲検的に評価した。化合物Ｖおよび化合物ＸＸを投与したラットでは胃損傷は認められなかった。各群はラット５匹で構成されていた。これらの所見は、続いて行った盲検による組織学的評価によって確認された。
【０１２３】
ＣＯＸ−１の阻害についても同じラットを用いて評価した。既述のごとく（Ｗａｌｌａｃｅら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９９８）、嚢から滲出液を収集後直ちに各ラットの下大静脈から血液１ｍＬを採取し、ガラス管に入れ、４５分間凝固するにまかせた。次に前記試料を９，０００ｇで３分間遠心分離にかけ、特異的ＥＬＩＳＡ法を用いたその後のトロンボキサンＢ２濃度の測定のため、上澄液を−８０℃で冷凍した。図４に示したように、ナプロキセン、化合物Ｖ、化合物ＸＸは、いずれも賦形剤投与群に比べＣＯＸ−１活性を有意に（＊ｐ<０．０５）阻害した。ＣＯＸ−１阻害の程度は、化合物Ｖではナプロキセンまたは化合物ＸＸよりもいくぶん軽度であった。
【０１２４】
ＮＳＡＩＤも顕著な小腸損傷を引起すことがあり、ジクロフェナクの反復投与が小腸損傷誘発に及ぼす作用を化合物ＩＩと比較した。雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット５匹から成る各群に、ジクロフェナクまたは化合物ＩＩを５０μＭ／ｋｇの用量で０時間、１２時間後、２４時間後に投与した。もう一つのラット群には賦形剤（１％カルボキシメチルセルロース）を投与した。
【０１２５】
赤血球の固まりからなる血液部分であるヘマトクリット（容積百分率で表される）を、実験開始時および薬剤の最終投与から２４時間後に尾静脈から採った血液で測定した。薬剤の最終投与から２４時間後にラットを安楽死させ、開腹を行った。ラットが受けた治療を知らされていない研究者が、小腸における全ての出血性びらん／潰瘍の長さを測定した。各ラットにおけるそれらの病変全ての長さを合計することにより、小腸損傷スコアを算出した。
【０１２６】
図５に示すように、ジクロフェナクを２４時間に３回投与することにより、小腸に多くのびらんおよび潰瘍が発生した。一方、化合物ＩＩを投与したラットにおける損傷の程度はジクロフェナクを投与したラットに比べ９０％以上軽かった。その上、図６に示すように、ジクロフェナク投与によりヘマトクリットは著しく（＊ｐ<０．０５）低下し、小腸出血のためと考えられたが、化合物ＩＩの投与はヘマトクリットに有意な作用を及ぼさなかった。
【実施例１８】
【０１２７】
シクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）およびシクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）の阻害
生体内におけるＣＯＸ−２の阻害を、既述モデル（Ｗａｌｌａｃｅら、Ｌｉｍｉｔｅｄ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｃｙｃｌｏ−ｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｉｎ ｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ−ａｉｒｐｏｕｃｈ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ． Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ １９９９：１２６：１２００〜１２０４、「参考文献」参照）の修正版を用いて測定した。つまり、数日間にわたって繰り返し空気を注入することにより皮下「嚢」を作成した。作成後、１％ザイモサン１ｍＬを注入することにより嚢の炎症を誘発できる。これにより嚢内のプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）が顕著に増加し、これはほぼ例外なくＣＯＸ−２に由来することが示されている。カラギーナン注射の３０分前、ラット５匹から成る各群に賦形剤（１％カルボキシメチルセルロース）、ジクロフェナク（３ｍｇ／ｋｇ）、化合物ＩＩ（４．８ｍ／ｋｇ）、化合物ＸＶＩＩ（４．１ｍｇ／ｋｇ）のうちいずれかを投与した。ラット５匹からなるもう一つの群に賦形剤を投与したが、ザイモサンではなく０．９％滅菌生理食塩水を嚢に注入した。
【０１２８】
図７に見られるように、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、または化合物ＸＶＩＩの前投与により、ザイモサン注入への反応として産生される嚢内のＰＧＥ２の濃度が顕著に低下した。＊賦形剤＋ザイモサン投与群に対し、ｐ<０．０５これらの結果から、３種の化合物のいずれもがＣＯＸ−２を有意に阻害したことが示される。その一方、硫化水素放出部分（ＡＤＴ−ＯＨおよびＴＢＺ）はいずれもＣＯＸ−２活性に有意な影響を及ぼさなかった。
【０１２９】
さらに、図４に関し記載されたものと同じ方法により、同じラットを用いてＣＯＸ−１の阻害を評価した。図８に示したように、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、および化合物ＸＶＩＩはＣＯＸ−１を通じた全血トロンボキサン合成を、それぞれ８０％以上阻害した。その一方、硫化水素放出部分（ＡＤＴ−ＯＨおよびＴＢＺ）はいずれもＣＯＸ−１活性に有意な影響を及ぼさなかった。
【実施例１９】
【０１３０】
生体内においてＮＳＡＩＤ誘導体が胃損傷、ＣＯＸ−１活性、ＣＯＸ−２活性に及ぼす作用
多くの化合物の抗炎症作用（ＣＯＸ−２およびＣＯＸ−１阻害）および胃安全性を、上記アッセイを用いて比較した。結果の概要を表１に示す。いずれの親ＮＳＡＩＤも顕著な胃損傷を引起した。しかし、本発明のＨ２Ｓ放出誘導体では、前記親薬剤に比べ胃安全性は改善されていた。さらに表１から、ＴＢＺ誘導体は前記親薬剤に比べ、ＣＯＸ−１および／またはＣＯＸ−２阻害能を維持するか実際に上昇させたことが認められる。
【０１３１】
【表１】
【実施例２０】
【０１３２】
本発明の化合物が炎症に及ぼす作用
化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩの抗炎症作用を、ジクロフェナクの抗炎症作用とともに、Ｗａｌｌａｃｅらが説明したように（Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９９８）カラギーナン後足浮腫モデルを用いて評価した。雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（１７５〜２００ｇ）に、１％ラムダカラギーナン１００μＬを足底部に注射する３０分前に前記試験化合物を経口投与した。足容積を、Ｕｇｏ Ｂａｓｉｌｅ社のｈｙｄｒｏｐｌｅｔｈｙｓｍｏｍｅｔｅｒを用い、カラギーナン注射前および注射後１時間ごと５時間にわたって測定した。それぞれラット５匹からなる各群にジクロフェナク１、３、１０ｍｇ／ｋｇのいずれか、または化合物ＸＶＩＩまたは化合物ＸＶＩＩをジクロフェナク３ｍｇ／ｋｇと等モルの用量で投与した。
【０１３３】
図９に示すように、ジクロフェナクはカラギーナンの足底注射で誘発された足の浮腫を用量依存性に軽減した。ジクロフェナク３ｍｇ／ｋｇと等モル量の化合物ＩＩにより、足の浮腫は大いに改善した。実際、化合物ＩＩが足の浮腫に及ぼす作用はジクロフェナク１０ｍｇ／ｋｇの作用に匹敵した。同様に、図１０に示したように、化合物ＸＶＩＩをやはりジクロフェナク３ｍｇ／ｋｇと等モルで投与したところ、ジクロフェナク１０ｍｇ／ｋｇよりも大幅に足浮腫を軽減した。
【０１３４】
化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩはジクロフェナクと同程度にプロスタグランジン合成を抑制することから、前記足浮腫モデルにおける本発明の新化合物の活性亢進は同化合物の別の特性に関連している可能性が高い。硫化水素供与体がラットのカラギーナン誘発による足浮腫を有意に軽減できることが以前に証明されており（Ｚａｎａｒｄｏら、Ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｓｕｌｐｈｉｄｅ ｉｓ ａｎ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ｍｏｄｕｌａｔｏｒ ｏｆ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．ＦＡＳＥＢ Ｊ ２００６；２０：２１１８〜２１２０、「参考文献」参照）、理論に束縛されるものではないが、化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩからのＨ２Ｓ放出がジクロフェナクに比べた抗炎症作用亢進の説明になるものと思われる。
【０１３５】
理論に束縛されるものではないが、炎症モデルにおける本発明の化合物の付加的活性の中にはＣＯＸ−２活性の阻害亢進が原因であるものがある可能性もある。賦形剤、ナプロキセン、化合物Ｖ、化合物ＸＸの作用をラット空気嚢モデル（図７で説明したように）比較した。各群はラット５匹で構成されていた。ナプロキセン、化合物Ｖ、化合物ＸＸをいずれも６０μモル／ｋｇの用量で投与した。図１１に示したように、３種の薬剤は賦形剤投与群に比べいずれもＣＯＸ−２活性を有意に（＊ｐ<０．０５、＊＊ｐ<０．０１）抑制した。しかし、化合物ＸＸはナプロキセンまたは化合物Ｖよりも有意に大幅にＣＯＸ−２活性を低下させた（ｐ<０．０５）。
【０１３６】
理論に束縛されるものではないが、炎症モデルにおける本発明の化合物の付加的活性の中にはＣＯＸ−１活性の阻害亢進が原因であるものがある可能性もある。生体外において、賦形剤、インドメタシン、および本発明の２つの化合物である化合物ＩＶおよび化合物ＸＩＸがヒト全血トロンボキサンＢ２合成に及ぼす作用を比較した。健康なボランティアの血液（０．５ｍＬ）を、メタノール単独１０μＬ、もしくは最終濃度が０．１、０．３、１、または３μＭになるように作成した前記試験薬剤を入れたガラス管に加えた。管をゆっくりと震盪する水浴（３７℃）中に４５分間置き、その後１０分間遠心分離（１，０００ ｘｇ）にかけた。図４で示した試験におけるごとく、各試料中のトロンボキサンＢ２濃度を特異的ＥＬＩＳＡ法を用いて測定した。図１２に示すように、３種薬剤のいずれもが賦形剤投与群に比べ、ＣＯＸ−１活性を濃度依存性に阻害した。しかし、１μＭおよび３μＭの濃度において、化合物ＸＩＸはインドメタシンよりもＣＯＸ−１活性を有意に（＊ｐ<０．０５）大幅に阻害した。
【実施例２１】
【０１３７】
本発明のＮＳＡＩＤ誘導体における血管内皮への白血球粘着
血管内皮への白血球粘着は炎症反応の早期イベントであり、血栓形成に寄与する。硫化水素供与体はアスピリンまたは炎症促進性トリペプチドｆＭＬＰによって誘発された白血球粘着を低下させることが示されている（Ｚａｎａｒｄｏら、ＦＡＳＥＢ Ｊ ２００６；２０：２１１８〜２１２０）。いくつかの本発明ＮＳＡＩＤ誘導体が白血球付着に及ぼす作用につき、Ｚａｎａｒｄｏら（ＦＡＳＥＢ Ｊ２００６；２０：２１１８〜２１２０）が詳しく説明したように、ラットを対象に生体顕微鏡を用いて評価した。ＦＡＳＥＢ Ｊ ２００６；２０：２１１８−２１２０。
【０１３８】
つまり、麻酔されたラットにおいて後毛細血管腸間膜細静脈を光学顕微鏡で観察した。５分間の基本記録時間後、下の表２に掲げた前記試験化合物の一つを３０μＭ／ｋｇの用量で胃内投与した。ただし、ナプロキセンおよびナプロキセン誘導体（化合物Ｖおよび化合物ＸＸ）は６０μＭ／ｋｇの用量で投与した。試験化合物はすべて１％カルボキシメチルセルロースの賦形剤に入れて作成した。細静脈内での白血球粘着の変化を顕微鏡に取付けられたビデオカメラで録画し、録画された画像により粘着白血球の数を盲検的に数えた。各群とも５匹の雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（体重１５０〜１７５ｋｇ）で構成された。白血球は、３０秒間以上静止状態にあれば「粘着」と見なした（以下の結果は平均アＳＥＭで示す）。実験の最後に胃を開き、解剖顕微鏡により胃損傷の有無を調べた。
【０１３９】
【表２】
【０１４０】
表２から、本発明のアスピリンＴＢＺ誘導体、特に化合物ＸＶＩおよび化合物Ｉがいずれもアスピリン単独に比べ血管長１００μｍ当たりの粘着白血球数を有意に低下させたことが認められる。また、化合物ＸＶＩおよび化合物Ｉのいずれもがアスピリン単独に比べ胃損傷発生率を有意に低下させた。同様に表２はさらに、本発明のジクロフェナク誘導体、特に化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩがジクロフェナク単独に比べ、血管長１００μｍ当たり粘着白血球数および胃損傷発生率をいずれも有意に低下させたことを示している。同様に表２はさらに、本発明のナプロキセン誘導体、特に化合物Ｖおよび化合物ＸＸがナプロキセン単独に比べ、血管長１００μｍ当たり粘着白血球数および胃損傷発生率をいずれも有意に低下させたことを示している。
【０１４１】
興味深いことに、胃への副作用が軽い選択的ＣＯＸ−２阻害薬であるルミラコキシブの誘導体である化合物ＩＩＩおよび化合物ＸＶＩＩＩでは胃損傷の発生はやはり認められなかったが、血管長１００μｍ当たりの粘着白血球数はルミラコキシブ単独に比べ有意に少なかった。従って、硫化水素放出部分をＣＯＸ−２選択的ＮＳＡＩＤに共有結合させることにより、これらＣＯＸ−２阻害薬の心臓血管系副作用も軽減される可能性がある。
【０１４２】
このように、本発明のＮＳＡＩＤ誘導体は、白血球粘着を低下させることによりＮＳＡＩＤの心臓血管系副作用を軽減する可能性がある。
【実施例２２】
【０１４３】
本発明の化合物が胃潰瘍の治癒に及ぼす作用
ＣＯＸ−２に選択的に作用するものを含めたＮＳＡＩＤｓは前から存在する胃潰瘍の治癒を阻害することが多い（Ｓｔａｄｌｅｒら、Ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ ｄｅｌａｙｓ ｈｅａｌｉｎｇ ｏｆ ｇａｓｔｒｏｄｕｏｄｅｎａｌ ｍｕｃｏｓａｌ ｌｅｓｉｏｎｓ．Ｄｏｕｂｌｅ−ｂｌｉｎｇ，ｐｌａｃｅｂｏ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ ｓｔｕｄｙ ｉｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ．Ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ Ｄｉｓｅａｓｅｓ ａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １９９１；３６：５９４〜６００）。本発明の２つの化合物（化合物ＸＶＩＩおよび化合物ＸＸ）が潰瘍治癒に及ぼす作用をそれぞれジクロフェナクおよびナプロキセンと比較するため、胃への潰瘍誘発後、ラットにこれらの薬剤を投与した。Ｅｌｌｉｏｔらが記載したように、漿膜に酢酸を塗布することによって胃潰瘍を誘発した（Ａ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ−ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｓ ｇａｓｔｒｉｃ ｕｌｃｅｒ ｈｅａｌｉｎｇ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９９５；１０９：５２４〜５３０）。３日後から、それぞれラット５匹からなる各群に、賦形剤、ジクロフェナク（３０μモル／ｋｇ）、化合物ＸＶＩＩ（３０μモル／ｋｇ）、ナプロキセン（６０μモル／ｋｇ）、化合物ＸＸ（６０μモル／ｋｇ）のいずれかを１日２回経口投与した。４日間そのような治療を行った後、ラットを安楽死させ、胃を開いて切除し、写真に撮った。ラットに施された治療内容を知らない者が潰瘍面積（ｍｍ２）を測定した。胃潰瘍誘発から３日後（すなわち薬剤投与開始前）に安楽死させたラット５匹のサブグループにおいて、潰瘍の平均表面積は２４±２ｍｍ２であった。図１３に示したように、賦形剤、ジクロフェナク、ナプロキセンを投与したラットはいずれも同程度の治癒を示した。しかし、化合物ＸＶＩＩまたは化合物ＸＸを投与したラットの治癒状況は有意に良好であった（＊それぞれジクロフェナクおよびナプロキセンに比べ、ｐ<０．０５）。これら２つの化合物の硫化水素放出部分（ＴＢＺ）の投与では賦形剤群に比べ胃潰瘍の治癒は有意に影響されなかった。
【実施例２３】
【０１４４】
本発明の化合物が血圧に及ぼす作用
ＣＯＸ−２に選択性を示すものを含めたＮＳＡＩＤｓは、前から存在する高血圧を悪化させ、一部の降圧剤の有効性を妨げる可能性がある（Ｗｈｅｌｔｏｎ，Ａ．Ｎｅｐｈｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇｓ：ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ． Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．１９９９；１０６（５Ｂ）：１３Ｓ−２４Ｓ）。本発明の２つの化合物（化合物ＩＩおよび化合物ＸＸ）が血圧に及ぼす作用をそれぞれジクロフェナクおよびナプロキセンと比較するため、最初に高血圧を誘発した上でラットにこれらの薬剤を腹腔内投与した。Ｒｉｂｅｉｒｏらの記述にあるように（Ｃｈｒｏｎｉｃ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ ｎｅｗ ｍｏｄｅｌ ｏｒ ａｒｔｅｒｉａｌ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ １９９２；２０：２９８〜３０３）、前記実験の７日前にＮω−ニトロ−Ｌ−アルギニン・メチルエステル（４００ｍｇ／Ｌ）を補った飲用水をラットに与えた。ラット（群当たり５〜８匹）をハロタンで麻酔し、血圧測定のため頸動脈にカニューレを挿入した。血圧はチャート式記録計で連続的に記録した。安定血圧を少なくとも１５分間測定後、前記薬剤のうち一つ（ナプロキセン、ジクロフェナク、化合物ＩＩ、または化合物ＸＸ）を腹腔内にボーラス投与した（ジクロフェナクおよび化合物ＩＩは３０μＭ／ｋｇ、ナプロキセンおよび化合物ＸＸは６０μＭ／ｋｇの用量で投与した）。血圧の変化を投与後６０分間にわたって記録した。平均基礎血圧は１５０±６ｍｍＨｇであった。図１４は、ジクロフェナクおよびナプロキセンが収縮期血圧を大幅に上昇させたことを示している。一方、化合物ＩＩおよび化合物ＸＸは賦形剤投与群に比べ収縮期血圧を上昇させることはなく、血圧変化はそれぞれジクロフェナクおよびナプロキセン誘発によるものに比べて有意に小幅であった。
【実施例２４】
【０１４５】
血漿Ｈ２Ｓ濃度の測定
化合物ＩＩからのＨ２Ｓ放出動態を調べるため、ラット５匹から成る各群に化合物ＩＩを５０μＭ／ｋｇの用量で経口投与し、１０、３０、６０、１８０分後に屠殺した。続いて血漿Ｈ２Ｓ濃度の経時曲線を作成した。既述の方法（Ｕｂｕｋａ、Ｔ．Ａｓｓａｙ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｌａｂｉｌｅ ｓｕｌｆｕｒ ｉｎ ａｎｉｍａｌ ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ Ａｎａｌｙｔ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｍｅｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．２００２；７８１：２２７〜２４９およびＺｈａｏ Ｗ，Ｚｈａｎｇ Ｊ，Ｌｕ Ｙ，Ｗａｎｇ Ｒ．Ｔｈｅ ｖａｓｏｒｅｌａｘａｎｔ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｈ２Ｓ ａｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ｇａｓｅｏｕｓ Ｋ（ＡＴＰ）ｃｈａｎｎｅｌ ｏｐｅｎｅｒ．ＥＭＢＯ Ｊ．２００１；２０：６００８〜６０１６、いずれも「参考文献」参照）に変更を加えて血漿Ｈ２Ｓ濃度を測定した。つまり、密閉した３つ口リアクターにおいて、氷冷した０．１Ｎ ＮａＯＨ２５０μＬに血漿２５０μＬを加えた。吹込管により混合液中に窒素流を絶え間なく通過させるようにした。リアクターを３７℃に保持し、１０％トリクロロ酢酸溶液１ｍＬを加えることによってＨ２Ｓ抽出を開始した。窒素流が、冷却コネクターにより別のリアクター中の硫酸を送達させて、更に、２Ｍ ＫＯＨ、１Ｍサリチル酸、０．２２Ｍアスコルビン酸から成るｐＨ１２．８の硫化物抗酸化緩衝液（ｓｕｌｆｉｄｅ ａｎｔｉ−ｏｘｉｄａｎｔ ｂｕｆｆｅｒ：ＳＡＯＢ）２ｍＬ中においてバブリングした。３０分後にＳＡＯＢ溶液を除去し、硫化物濃度を硫化物感受性の電極（モデル９６１６Ｓ２−／Ａｇ＋電極、Ｏｒｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、米国マサチューセッツ州Ｂｅｖｅｒｌｙ）を用いてＨ２Ｓを測定した（Ｕｂｕｋａ、２００２；Ｋｈａｎら、１９８０）。
【０１４６】
化合物ＸＶＩＩおよび化合物ＩＩに誘発されたインビトロにおけるＨ２Ｓ放出をそれぞれ化合物ＸＶＩＩおよび化合物ＩＩのＨ２Ｓ放出部分であるＴＢＺおよびＡＤＴ−ＯＨと比較するため、切離肝臓１００〜１５０ｍｇを氷冷Ｔ−ＰＥＲタンパク・エキストラクター１ｍＬ中でホモジナイズした。Ｈ２Ｓ放出は同じ血漿分析リアクター上で行われた。分析用反応混合液２ｍＬをリアクター中に加えた。混合液には１００ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ＝７．４）にＰＥＧを加えた中に１ｍＭの化合物ＩＩ、１ｍＭｍの化合物ＸＶＩＩ、１ｍＭ ＴＢＺ、１ｍＭ ＡＤＴ−ＯＨのいずれかが溶解されていた。培養は１０％（ｗ／ｖ）肝臓ホモジネートおよび２ｍＭピリドキサル５−リン酸を加えた場合とそうでない場合にわけて行った。‘混合液中を窒素がガス吹込管経由で絶え間なく通過するようにした。ガラス管を氷浴から３７℃の温浴に移すことにより反応を開始させた。既述のように、窒素流がＳＡＯＢ ２ｍＬが入った２番目のリアクター中の硫酸を運んだ。３７℃で９０分間培養後、５０％トリクロロ酢酸液１ｍＬを混合液に加え反応を停止させた。混合液中の残留Ｈ２Ｓは、さらに３０分間３７℃で培養することにより、窒素流によって除去した。ＳＡＯＢ溶液中の塩化物濃度を既述の硫化物感受性電極によって測定した（Ｕｂｕｋａ、２００２；Ｋｈａｎら、１９８０）。
【０１４７】
図１５に示すように、化合物ＩＩの経口投与により血漿Ｈ２Ｓ濃度が有意に（ｐ<０．０５）上昇した。化合物ＩＩの単回投与後の１８０分間、血漿Ｈ２Ｓ濃度のわずかではあるが一貫した上昇が認められた。図１６は、緩衝液中における化合物ＩＩまたは化合物ＸＶＩＩの培養により、それぞれ等量のＡＤＴ−ＯＨまたはＴＢＺに比べ、有意に多くのＨ２Ｓが放出された。同様に、肝臓ホモジネートで培養した場合、化合物ＩＩおよび化合物ＸＶＩＩの方がＡＤＴ−ＯＨまたはＴＢＺよりも多くのＨ２Ｓ放出が認められた。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式を有する化合物またはその塩であって、
Ａ−Ｙ−Ｘ （化学式Ｉ）
式中、ＡはＮＳＡＩＤ遊離基、Ｙは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、またはゼロから成る群から選択されるものであり、Ｘは単独またはＮＳＡＩＤとの結合により硫化水素を放出することのできる部分であり、Ｙがゼロの場合、前記化合物はＡおよびＸの塩である可能性があるものである、
化合物またはその塩。
【請求項２】
下記一般式の化合物であって、
Ｂ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｘ （化学式ＩＩ）
式中、Ｂ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−は遊離カルボキシル基を有するＮＳＡＩＤまたはカルボキシ置換ＮＳＡＩＤから誘導されるものであり、Ｘは、
【化２４】
から成る群から選択されるものである、
化合物。
【請求項３】
請求項１または２記載の化合物において、前記ＮＳＡＩＤはアセチルサリチル酸（ＡＳＡ）、ジクロフェナク、ナプロキセン、インドメタシン、フルルビプロフェン、スリンダク、イブプロフェン、アセクロフェナク、アセメタシン、ベノキサプロフェン、ベンゾフェナク、ブロムフェナク、ブクロキシン酸、ブチブフェン、カルプロフェン、セレコキシブ、シクロプロフェン、シンメタシン、クリダナク、クロピラック、ジフルシナル、エトドラック、エトリコキシブ、フェンブフェン、フェンクロフェナク、フェンクロラク、フェノプロフェン、フェンチアザク、フルノキサプロフェン、フラプロフェン、フロブフェン、フラフェナク、イブフェナク、インドプロフェン、イソキセパク、ケトプロフェン、ケトロラック、ロキソプロフェン、ロナゾラク、ルミラコキシブ、メチアジニク、メフェナム酸、メクロフェナム酸、メロキシカム、ナブメトン、ピロミド酸、サルサレート、ミロプロフェン、オキサプロジン、オキセピナク、パラコキシブ、フェニルブタゾン、ピルプロフェン、ピロキシカム、ピロゾラク、プロチジン酸、ロフェコキシブ、サリチル酸ナトリウム、スプロフェン、チアプロフェン酸、トルメチン、バルデコキシブ、およびゾメピラクから成る群から選択されるものである。
【請求項４】
請求項１または２記載の化合物において、前記ＮＳＡＩＤはアセチルサリチル酸、ジクロフェナク、インドメタシン、ルミラコキシブ、ナプロキセン、イブプロフェン、ケトプロフェン、およびフルルビプロフェンから成る群から選択されるものである。
【請求項５】
請求項１記載の化合物において、Ｘは、
【化２５】
から成る群から選択されるものである。
【請求項６】
請求項１記載の化合物において、前記ＮＳＡＩＤはアセチルサリチル酸、ジクロフェナク、インドメタシン、ルミラコキシブ、ナプロキセン、イブプロフェン、ケトプロフェン、およびフルルビプロフェンから成る群から選択されるものであり、Ｙは−Ｃ（Ｏ）Ｏであり、Ｘは、
【化２６】
である。
【請求項７】
請求項１記載の化合物において、前記ＮＳＡＩＤはアセチルサリチル酸、ジクロフェナク、インドメタシン、ルミラコキシブ、ナプロキセン、イブプロフェン、ケトプロフェン、およびフルルビプロフェンから成る群から選択されるものであり、Ｙは−Ｃ（Ｏ）Ｏであり、Ｘは、
【化２７】
である。
【請求項８】
請求項１記載の化合物において、前記ＮＳＡＩＤはアセチルサリチル酸、ジクロフェナク、インドメタシン、ルミラコキシブ、ナプロキセン、イブプロフェン、ケトプロフェン、およびフルルビプロフェンから成る群から選択されるものであり、Ｙは−Ｃ（Ｏ）Ｏであり、Ｘは、
【化２８】
である。
【請求項９】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化２９】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１０】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３０】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１１】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３１】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１２】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３２】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１３】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３３】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１４】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３４】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１５】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３５】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１６】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３６】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１７】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３７】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１８】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３８】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１９】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３９】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２０】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化４０】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２１】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化４１】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２２】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化４２】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２３】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化４３】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２４】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化４４】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２５】
請求項１〜２４のいずれかに記載の化合物と、薬学的に許容できる賦形剤または担体とを有する薬学組成物。
【請求項２６】
炎症治療法であって、
そのような治療を必要とする対象において、請求項１〜２４のいずれかに記載の化合物の炎症軽減量を前記対象に投与する工程
を有する方法。
【請求項２７】
疼痛治療法であって、
そのような治療を必要とする対象において、請求項１〜２４のいずれかに記載の化合物の炎症軽減量を前記対象に投与する工程
を有する方法。
【請求項２８】
発熱治療法であって、
その治療を必要とする対象において、請求項１〜２４のいずれかに記載の化合物の炎症軽減量を前記対象に投与する工程
を有する方法。
【請求項１】
下記一般式を有する化合物またはその塩であって、
Ａ−Ｙ−Ｘ （化学式Ｉ）
式中、ＡはＮＳＡＩＤ遊離基、Ｙは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、またはゼロから成る群から選択されるものであり、Ｘは単独またはＮＳＡＩＤとの結合により硫化水素を放出することのできる部分であり、Ｙがゼロの場合、前記化合物はＡおよびＸの塩である可能性があるものである、
化合物またはその塩。
【請求項２】
下記一般式の化合物であって、
Ｂ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｘ （化学式ＩＩ）
式中、Ｂ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−は遊離カルボキシル基を有するＮＳＡＩＤまたはカルボキシ置換ＮＳＡＩＤから誘導されるものであり、Ｘは、
【化２４】
から成る群から選択されるものである、
化合物。
【請求項３】
請求項１または２記載の化合物において、前記ＮＳＡＩＤはアセチルサリチル酸（ＡＳＡ）、ジクロフェナク、ナプロキセン、インドメタシン、フルルビプロフェン、スリンダク、イブプロフェン、アセクロフェナク、アセメタシン、ベノキサプロフェン、ベンゾフェナク、ブロムフェナク、ブクロキシン酸、ブチブフェン、カルプロフェン、セレコキシブ、シクロプロフェン、シンメタシン、クリダナク、クロピラック、ジフルシナル、エトドラック、エトリコキシブ、フェンブフェン、フェンクロフェナク、フェンクロラク、フェノプロフェン、フェンチアザク、フルノキサプロフェン、フラプロフェン、フロブフェン、フラフェナク、イブフェナク、インドプロフェン、イソキセパク、ケトプロフェン、ケトロラック、ロキソプロフェン、ロナゾラク、ルミラコキシブ、メチアジニク、メフェナム酸、メクロフェナム酸、メロキシカム、ナブメトン、ピロミド酸、サルサレート、ミロプロフェン、オキサプロジン、オキセピナク、パラコキシブ、フェニルブタゾン、ピルプロフェン、ピロキシカム、ピロゾラク、プロチジン酸、ロフェコキシブ、サリチル酸ナトリウム、スプロフェン、チアプロフェン酸、トルメチン、バルデコキシブ、およびゾメピラクから成る群から選択されるものである。
【請求項４】
請求項１または２記載の化合物において、前記ＮＳＡＩＤはアセチルサリチル酸、ジクロフェナク、インドメタシン、ルミラコキシブ、ナプロキセン、イブプロフェン、ケトプロフェン、およびフルルビプロフェンから成る群から選択されるものである。
【請求項５】
請求項１記載の化合物において、Ｘは、
【化２５】
から成る群から選択されるものである。
【請求項６】
請求項１記載の化合物において、前記ＮＳＡＩＤはアセチルサリチル酸、ジクロフェナク、インドメタシン、ルミラコキシブ、ナプロキセン、イブプロフェン、ケトプロフェン、およびフルルビプロフェンから成る群から選択されるものであり、Ｙは−Ｃ（Ｏ）Ｏであり、Ｘは、
【化２６】
である。
【請求項７】
請求項１記載の化合物において、前記ＮＳＡＩＤはアセチルサリチル酸、ジクロフェナク、インドメタシン、ルミラコキシブ、ナプロキセン、イブプロフェン、ケトプロフェン、およびフルルビプロフェンから成る群から選択されるものであり、Ｙは−Ｃ（Ｏ）Ｏであり、Ｘは、
【化２７】
である。
【請求項８】
請求項１記載の化合物において、前記ＮＳＡＩＤはアセチルサリチル酸、ジクロフェナク、インドメタシン、ルミラコキシブ、ナプロキセン、イブプロフェン、ケトプロフェン、およびフルルビプロフェンから成る群から選択されるものであり、Ｙは−Ｃ（Ｏ）Ｏであり、Ｘは、
【化２８】
である。
【請求項９】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化２９】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１０】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３０】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１１】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３１】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１２】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３２】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１３】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３３】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１４】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３４】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１５】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３５】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１６】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３６】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１７】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３７】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１８】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３８】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項１９】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化３９】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２０】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化４０】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２１】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化４１】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２２】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化４２】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２３】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化４３】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２４】
請求項１記載の化合物において、前記化合物は以下の化合物、
【化４４】
または薬学的に許容できるその塩である。
【請求項２５】
請求項１〜２４のいずれかに記載の化合物と、薬学的に許容できる賦形剤または担体とを有する薬学組成物。
【請求項２６】
炎症治療法であって、
そのような治療を必要とする対象において、請求項１〜２４のいずれかに記載の化合物の炎症軽減量を前記対象に投与する工程
を有する方法。
【請求項２７】
疼痛治療法であって、
そのような治療を必要とする対象において、請求項１〜２４のいずれかに記載の化合物の炎症軽減量を前記対象に投与する工程
を有する方法。
【請求項２８】
発熱治療法であって、
その治療を必要とする対象において、請求項１〜２４のいずれかに記載の化合物の炎症軽減量を前記対象に投与する工程
を有する方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【公表番号】特表２００９−５４３８１３（Ｐ２００９−５４３８１３Ａ）
【公表日】平成２１年１２月１０日（２００９．１２．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５１９７６９（Ｐ２００９−５１９７６９）
【出願日】平成１９年７月１８日（２００７．７．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００７／００１２８９
【国際公開番号】ＷＯ２００８／００９１２７
【国際公開日】平成２０年１月２４日（２００８．１．２４）
【出願人】（５０７３９１１３３）アンタイブ セラピューティクス インク． (4)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年１２月１０日（２００９．１２．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年７月１８日（２００７．７．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００７／００１２８９
【国際公開番号】ＷＯ２００８／００９１２７
【国際公開日】平成２０年１月２４日（２００８．１．２４）
【出願人】（５０７３９１１３３）アンタイブ セラピューティクス インク． (4)
【Ｆターム（参考）】
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