【課題】効率的かつ安定な導入遺伝子の組込みをもたらす細胞を形質転換する方法および組成物を提供する。
【解決手段】形質転換は、細胞に、細胞のゲノムに組込まれる受容体ベクター、好ましくはレトロウイルスベクターを導入することにより行われる。この受容体ベクターは、２つの不和合性ｌｏｘ配列、Ｌ１およびＬ２を含んで成る。次に同じＬ１およびＬ２配列により挟まれた導入遺伝子を含んで成る供与体ベクターを細胞に導入する。安定な遺伝子導入が、ｌｏｘＬ１およびＬ２配列をＣｒｅ組換え酵素と接触させることにより開始される。 （もっと読む）

マイコトキシン、特にフモニシンを酵素的に分解するための添加物の製造方法において、配列番号１、２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２および２４に対応する遺伝子の、少なくとも１つの核酸配列が準備され、前記の少なくとも１つの核酸配列が原核または真核宿主細胞において発現され、それにより産生された配列番号３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３および２５に対応する酵素または少なくとも１つの完全組換え宿主生物が、必要に応じて補基質と共に、植物原料において使用される。
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【課題】
Ｍ．ｆａｅｒｍｅｎｔａｎｓの膜成分である糖含有グリセロリン脂質（ＧＧＰＬ）を大腸菌で発現させた酵素によって反応させて、製造する。
【解決手段】
Ｍ．ｆａｅｒｍｅｎｔａｎｓのゲノム情報から可能性のある遺伝子ｍｆ１とｍｆ３を選択して、クローニングして、コドンの組み合わせを大腸菌型に変換した。これらの改変遺伝子ををＥ．ｃｏｌｉで発現させ、さらに細胞破砕物を調製して、基質を加えて酵素反応を行い、糖含有グリセロリン脂質を得ることに成功した。
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本発明は、植物におけるフルクタン生合成の修飾に、さらに詳細には、光合成細胞におけるフルクタン生合成を操作するという方法に、そして関連の核酸および構築物に関する。本発明はまた、植物バイオマスを増大すること、そしてさらに詳細には、植物中の苗条および／または根の成長を含めて、バイオマスの収率および／または収率の安定性を増大する方法に、そして関連の核酸および構築物に関する。本発明はまた、生化学的経路の産生を増強する方法、さらに詳細には、植物中の融合タンパク質、ならびに関連の核酸および構築物に関する。 （もっと読む）

【課題】新規な生命形態を生成するための方法を提供する。
【解決手段】本発明は、新規な生命形態を生成するための方法であって、以下のステップ：
ａ）微生物クローンのゲノムの不可逆的な変更；
ｂ）より高く安定な増殖速度を選択することの可能な条件下における数多くの世代の間にステップａ）において得られた変更されたクローンに由来する微生物の大きな集団の培養；
ｃ）ステップｂ）の培養集団内の子孫クローンであって、ステップａ）の変更をまだ行っているものの単離、を含む前記方法に関する。 （もっと読む）

2つのI-CreI単量体の一方が、I-CreIの28位〜40位及び44位〜77位にそれぞれ位置するLAGLIDADGコアドメインの2つの機能的サブドメイン内に1つずつ少なくとも2つの置換を有し、変異型が、グルタミンシンセターゼ遺伝子からのDNA標的配列を切断できるI-CreI変異型。組換えタンパク質の生産のための発現系を改良するための該変異型及び派生生成物の使用。 （もっと読む）

がん、特に、膀胱がん、胃がん、結腸直腸がん、乳がん、食道がん、肺がん、リンパ腫、膵臓がん、および精巣がんを発症する素因を診断するための客観的方法を、本明細書において記載する。一態様において、診断法は、ＰＲＭＴ１遺伝子の発現レベルを決定する工程を含む。本発明は、がん等の、例えば、膀胱がん、胃がん、結腸直腸がん、乳がん、食道がん、肺がん、リンパ腫、膵臓がん、および精巣がん等のＰＲＭＴ１関連疾患の治療において有用な治療剤をスクリーニングする方法をさらに提供する。本発明は、細胞増殖を阻害して、ＰＲＭＴ１関連疾患の症状を治療または軽減する方法をさらに提供する。本発明はまた、二本鎖分子およびそれをコードするベクターを含む生成物、ならびにそれらを含む組成物も特色とする。 （もっと読む）

本発明は、劇的に増強された成長速度、増大した種子および果実／さやの収量、促進され、より生産的な開花、より効率的な窒素利用、塩分環境に対して増強された耐性、ならびに増大されたバイオマス収量を示すトランスジェニック植物に関する。一実施形態では、グルタミンフェニルピルビン酸トランスアミナーゼ（ＧＰＴ）およびグルタミンシンテターゼ（ＧＳ）をともに過剰に発現するように設計されたトランスジェニック植物を提供する。本発明に係るＧＰＴ＋ＧＳの二重トランスジェニック植物は、野生型の相当物よりも５０％から３００％以上のバイオマスの増加を示すＴ０世代系統を含み、増強された成長特性を常に示す。雌雄交雑および／または自家受粉により得られた世代は、典型的により優れた機能を有する（いくつかの二重トランスジェニック植物は、野生型植物よりも驚異的な４倍のバイオマス増加を達成する）。
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【課題】ピレトリンの生合成に関与する酵素のアミノ酸配列、及びその遺伝子の塩基配列を決定し、その遺伝子が組み込まれたベクターや形質転換体を創製するとともに、これらによる創製技術を生育の早い植物に適用することによって、ピレトリンを効率よく生産する方法を提供すること。
【解決手段】ピレトリンを生成し得る植物体内から抽出することができる酵素であって、以下の（ｉ）又は（ii）のタンパク質をコードする遺伝子。
（ｉ）配列番号１に示すアミノ酸配列からなるタンパク質。
（ii）配列番号１に示されるアミノ酸配列に対し、１または複数個のアミノ酸を置換、欠失、挿入、及び／又は付加したアミノ酸配列からなり、かつピレトリン生合成酵素としての活性を示すタンパク質。 （もっと読む）

【課題】甘味度の高い（２Ｒ，４Ｒ）−モナティンの含有率が高いモナティンを効率よく生成できるＤ−アミノトランスフェラーゼを提供する。
【解決手段】特定の配列で示される野生型Ｄ−アミノトランスフェラーゼのアミノ酸配列のうち、（２Ｒ，４Ｒ）−モナティンを効率的に生成するために関与する部位（２４３位、２４４位）の少なくとも一箇所のアミノ酸残基を置換した変異型Ｄ−アミノトランスフェラーゼ；ならびに特定の配列で示される野生型Ｄ−アミノトランスフェラーゼおよび上記変異型Ｄ−アミノトランスフェラーゼを用いたモナティンの製造方法からなる。 （もっと読む）

本発明は、Ｌ−アミノ酸−Ｎ−アシルトランスフェラーゼ酵素活性を有する単離されたポリペプチド、およびこの酵素が過剰発現される改変微生物を提供する。この酵素の基質は主としてメチオニンおよびそれらの誘導体または類似体を含む。硫黄含有アミノ酸生産微生物における過剰発現は、多量のＮ−アシル化硫黄含有アミノ酸の生産を可能とする。発酵培地からのＮ−アシル化硫黄含有アミノ酸の単離も提供される。 （もっと読む）

哺乳動物癌細胞またはウイルス感染細胞を阻害する方法は、トリコモナス・ヴァジナリスのプリンヌクレオシドホスホリラーゼ酵素、またはテール変異プリンヌクレオシドホスホリラーゼ酵素を、前記癌性哺乳動物細胞またはウイルス感染細胞の近隣に提供する工程、ならびに酵素を切断基質に暴露して、細胞毒性プリンアナログを取得する工程を含む。前記方法は、ホスホリラーゼ酵素、またはホスホリラーゼ酵素をコードするDNA配列を細胞に導入する工程、ならびに、有効量の9-(β-D-アラビノフラノシル)-2-フルオロアデニン（F-araA）のような基質を細胞に送達する工程を含む。
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本発明は、葉の中にアミノ酸であるトレオニンを蓄積させる形質転換植物、具体的には、タバコ植物を提供する。トレオニンの産生を引き起こす生合成経路は、厳密に調節されており、トレオニンを過剰産出する形質転換植物を得るという以前の試みは、植物の適応度を損なってしまった。本発明は、この欠点を克服し、かつ、植物の適応度を損なうことなく、対応する野生型の濃度よりも植物の葉の中のトレオニン濃度を上昇させる方法であって、植物代謝を変化させて葉の老化開始後にトレオニンの産出の増加を達成することを含む方法を見出した。本発明は、トレオニン非感受性アスパラギン酸キナーゼ活性を有するポリペプチドをコードするコード配列に作動可能に連結された老化特異的プロモーターを含む遺伝子構築物を含む。
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【課題】複雑な合成方法を経ることなく、簡便かつ高収率で安価にペプチドを製造できる新規酵素を提供すること。
【解決手段】カルボキシ成分とアミン成分とからのペプチド合成反応を触媒する新規酵素、この酵素を生産する微生物、およびこの酵素もしくは微生物を使用する安価なペプチドの製造方法。新たに見出したペドバクター属、タキセオバクター属、サイクロバクテリウム属、またはサイクロセルペンス属に属する細菌からペプチドを効率良く合成する新規酵素を見出し、安価かつ簡便にペプチドを製造する方法を見出した。 （もっと読む）

【課題】タンパク質の糖鎖付加に関わる、鱗翅目及びナス目α１，３−フコシルトランスフェラーゼを単離・同定すること、並びに鱗翅目及びナス目において前記α１，３−フコシルトランスフェラーゼの発現を抑制することによって、本来非ヒト型糖鎖を付加する動植物タンパク質生産系においてヒト型糖鎖を付加したタンパク質を生産する方法を提供する。
【解決手段】 α１，３−フコシルトランスフェラーゼ活性を抑制する方法であって、鱗翅目においてα１，３−フコシルトランスフェラーゼ活性を抑制するＤＮＡを細胞内に導入する工程と、当該細胞内で前記ＤＮＡを発現させる工程とを有する方法。 （もっと読む）

【課題】フラノースやピラノースといった糖の骨格の違い、デオキシ糖といった置換基の有無、あるいは天然型や非天然型といった糖の種類に影響されることの無い、汎用性の高い、アノマー選択的な１−リン酸化糖誘導体ならびにヌクレオシドの製造方法を得ること。
【解決手段】１−リン酸化糖誘導体のアノマー混合物を加リン酸分解および異性化し、一方を結晶化することで平衡を傾け、選択的に望む異性体のみを製造する。さらに、ヌクレオシドホスホリラーゼの作用により、得られた１−リン酸化糖誘導体と塩基より、高い立体選択性と収率でヌクレオシドを製造する。 （もっと読む）

【課題】精子形成中に発現し、新規避妊手段としての使用が予想される、精巣特異的キナーゼのファミリー（tsskファミリー）タンパク質と、それをコードする核酸配列を提供する。
【解決手段】避妊薬として使用するtsskキナーゼインヒビターの同定のためのキナーゼ活性を有し、特定のアミノ酸配列を持つポリペプチド、及び該ポリペプチドをコードする特定の塩基配列を含むポリヌクレオチドと組換え構築物、更に該構築物を含むトランスジェニック細胞。 （もっと読む）

本発明は、細胞の表面に発現される目的の膜貫通タンパク質の内部移行を検出するための方法であって、次の：
ａ）蛍光金属錯体で目的のタンパク質を標識する段階であって、蛍光金属錯体の寿命が０．１ｍｓより長い段階；
ｂ）目的のタンパク質の内部移行を生じることができる組成物を反応媒体に添加する段階；
ｃ）反応媒体に対して以下から選択される調節剤：
ａ．上記蛍光金属錯体と適合する蛍光又は非蛍光のＦＲＥＴアクセプター化合物であって、反応媒体中の最終濃度が１０^−７Ｍより高く、分子量が５０ｋＤ未満である化合物；
ｂ．レドックス電位が＋０．１Ｖ未満、好適には０．２５〜０．７５Ｖである還元剤；
ｃ．非共有結合によって、特異的に蛍光金属錯体と結合する薬剤；
ｄ．非蛍光金属錯体を形成するための、希土類と競合する金属イオン、
を添加する段階；
ｄ）蛍光金属錯体の発光波長、及び／又は調節化合物が蛍光アクセプター化合物の場合に調節化合物の発光波長で反応媒体によって放出される発光を測定する段階；
ｅ）段階ｄ）で測定されるシグナルを、段階ａ）及びｃ）のみに供された細胞上で測定される基準シグナルと比較する段階、
を含んでなる方法である。
本発明はまた、膜タンパク質の内部移行を検出するための方法である。 （もっと読む）

【課題】膜結合性のプレニルトランスフェラーゼのＤＮＡを単離する方法、その単離方法によって得られるＤＮＡ、および膜結合性のプレニルトランスフェラーゼの提供。
【解決手段】膜結合性プレニルトランスフェラーゼにおける、NDxxDxxxD、NQxxDxxxD、NQxxExxxD、DDxxDxxxD、DQxxDxxxD、DQxxExxxD、NExxDxxxD、NExxExxxD及びDExxExxxDからなる群より選択される少なくとも１つの保存モチーフを有し、かつ、ナリンゲニン等のフラボノイド、ゲニステイン等のイソフラボノイドあるいはイソリキリチゲニン等のカルコンを基質としてにプレニル基を導入する酵素活性を示す膜結合性プレニルトランスフェラーゼ。 （もっと読む）

本発明は、キナーゼの活性化ループ中に天然に存在するか、もしくはその中に導入された、遊離チオールもしくはアミノ基を有するアミノ酸部位で、(a)その環境における極性変化に対して感受性であるチオールもしくはアミノ反応性フルオロフォア；または(b)チオール反応性スピン標識、アイソトープもしくはアイソトープ富化されたチオールもしくはアミノ反応性標識で標識されたキナーゼであって、該フルオロフォア、スピン標識、アイソトープもしくはアイソトープ富化された標識が、キナーゼの触媒活性を阻害せず、キナーゼの安定性に干渉しない、前記キナーゼに関する。本発明はさらに、本発明のキナーゼを用いてキナーゼ阻害剤をスクリーニングする方法、キナーゼ阻害剤のリガンド結合の速度および／または解離の速度を決定する方法ならびにキナーゼ阻害剤のスクリーニングにとって好適な突然変異キナーゼを作製する方法に関する。 （もっと読む）