【課題】真核生物細胞における内因性遺伝子または染色体遺伝子座を改変するような、相同性を有する大きな領域を含む標的ベクターの使用を可能にする、迅速かつ簡便な方法を提供する。
【解決手段】本発明は、相同組換えを介して標的化し、任意の望ましい様式において、真核生物細胞における内因性遺伝子および染色体遺伝子座を改変するための、大きなＤＮＡベクターを設計し、利用するための方法である。本発明は、さらに、真核生物細胞を検出する迅速で簡便な方法を提供し、この方法において、ＬＴＶＥＣは、正しく標的化され、そして所望の内因性遺伝子または染色体遺伝子座を改変する。本発明はまた、遺伝的改変を有する生物、生物自体を生成するためのこれらの細胞の使用およびその使用の方法を含む。 （もっと読む）

【課題】本発明の目的は、透過光や励起光の影響を受けない、より定量性の高い発光画像観察を可能にした発光観察方法および発光観察システムを提供することにある。
【解決手段】本発明は、本発明は、発光タンパク質を発現する遺伝子を導入した生物試料に対し、明視野観察用の照明光および／または蛍光観察用の励起光を照射する、明視野観察および／または蛍光観察ステップと、前記明視野観察および／または蛍光観察ステップ後、発光強度を経時的に検出し、得られた発光強度に基づいて、前記照明光および／または励起光由来のノイズを排除するためのインターバルを設定するとともに設定したインターバル条件に基づいて制御する、インターバル制御ステップと、前記インターバル終了後、発光画像を撮像する、発光画像撮像ステップと、を含む、発光観察方法を提供する。 （もっと読む）

【課題】細胞のプロモーター活性に影響されずに、受容体の発現量に関する各細胞からの正確な定量的結果を得ることができ、その結果、個々の細胞において受容体の発現量や分布の変化を再現性良く観察することができる受容体発現量解析方法等を提供することを課題とする。
【解決手段】本実施例において、ルシフェラーゼを含む細胞を作製し、作製した細胞にルシフェリンを添加し、ルシフェリンが添加された後の細胞にドーパミンを添加し、ドーパミンが添加された後の細胞の発光量を測定し、測定した発光量に基づいて細胞内におけるＡＴＰの濃度を解析し、解析したＡＴＰの濃度に基づいてＤ２受容体の発現量を解析する。 （もっと読む）

【課題】難聴や耳鳴りの予防又は治療手段を確立するため、難聴の表現型を示すモデル動物及びその用途を提供することを課題とする。
【解決手段】片方のアレルのRet遺伝子が障害されていることによって加齢性難聴の表現型を示す齧歯類遺伝子改変動物が提供される。また、当該齧歯類遺伝子改変動物を用いて加齢性難聴又は騒音性難聴の予防又は治療に有効な物質をスクリーニングする方法が提供される。一方、両方のアレルのRet遺伝子が障害されていることによって先天性難聴の表現型を示す齧歯類遺伝子改変動物が提供される。また、当該齧歯類遺伝子改変動物を用いて先天性難聴の治療に有効な物質をスクリーニングする方法が提供される。 （もっと読む）

【課題】生体外での部位特異的組換を用いた組換ウイルスの準備方法の提供。
【解決手段】環状ウイルスゲノムＤＮＡを制限酵素で消化し、部位特異的組換部位によって隣接される線状ウイルスゲノムＤＮＡを形成し、生体外において、部位特異的組換部位によって隣接される所望のゲノム材料を用いて部位特異的組換を行う方法。部位特異的組換した混合物を、所望の組換ウイルスゲノムＤＮＡの選出といった更なる工程なくして、宿主に適用することができるので、同時に多数の組換ウイルスをより迅速に得ることが出来る。 （もっと読む）

【解決手段】 本開示は、特定の治療タンパク質において、条件的活性型生物学的タンパク質を野生型タンパク質から生成する方法に関するものであり、当該タンパク質は、野生型正常生理的条件において可逆的または不可逆的に不活性である。例えば、発達したタンパク質は、体温において実質的に不活性であるが、低温においては活性である。
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【課題】核のピクセルイメージングを使用してクロマチン構造変化を定量的に評価する方法を提供する。
【解決手段】核のピクセルイメージングは、核酸染色剤で処理した１つ又は複数の細胞の核の、１つ又は複数の画像をキャプチャし、染色強度は、その強度を定量する。１ピクセル当たりの染色強度の平均及び／又は標準偏差を、クロマチン凝縮レベル又はクロマチン構造変化を判定するために使用する。 （もっと読む）

本発明は、抗がん剤の同定で使用するEMTプロセスのモデルとして使用する腫瘍細胞調製物を提供するが、ここで前記腫瘍細胞調製物は、EMTを誘発する受容体リガンドにより誘導されるか、またはEMTを刺激するタンパク質を誘導的に発現するよう設計された上皮腫瘍細胞株H1650の細胞を含む。本発明は、このような腫瘍細胞調製物を使用して、EMTを阻害するか、METを刺激するか、または間葉様細胞の増殖を阻害する薬剤を同定して、潜在的な抗がん剤を同定する方法も提供する。このような薬剤は、EMTを起こした腫瘍細胞の阻害にあまり効果的ではないと見られる、EGFRおよびIGF-1Rキナーゼ阻害剤などのその他の抗がん薬と併用するときに特に有用なはずである。 （もっと読む）

【課題】機能的に連結された上流および下流のタンパク質の収率を高められるように、完全に自己切断できる改良された２Ａ様配列を同定するシステムを提供すること。
【解決手段】本発明のシステムは、翻訳段階で自己切断活性を有する２Ａ様配列を同定するための昆虫システムであって、プロモーターと、このプロモーターに機能的に連結され且つ分泌型アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）をコードする第一ポリヌクレオチドと、第一ポリヌクレオチドに機能的に連結された候補配列と、この候補配列に機能的に連結され且つ強化緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）をコードする第二ポリヌクレオチドと、を有する組換えベクターに感染した昆虫細胞を備え、昆虫細胞における蛍光分布パターンが、候補配列が２Ａ様配列であるか否かを決定する指標として利用され、蛍光が細胞核を含めて昆虫細胞内に均一に分布する場合には、候補配列が２Ａ様配列である一方、蛍光分布パターンがドーナツ形を有し且つ細胞核外のスペースのみに限られる、または細胞外培地に分泌される場合には、候補配列が２Ａ様配列ではない。 （もっと読む）

【課題】相同核酸を含む核酸を組換える方法を提供することを課題とする。遺伝子シャッフリングオリゴヌクレオチドのファミリーおよび組換え手順でのそれらの使用、ならびにポリメラーゼおよびリガーゼ媒介組換え方法もまた提供することを課題とする。
【解決手段】上記課題は、核酸のオリゴヌクレオチド補助シャッフリングを提供することによって解決された。これらのオリゴヌクレオチド補助アプローチは、ファミリーシャッフリング手順を特に容易にして、実質的に単純化されたシャッフリングプロトコルを提供する。このプロトコルは、全長の相同核酸を単離またはクローニングすることなく、ファミリーシャッフリングされた核酸を生成するために用いられ得る。 （もっと読む）

【課題】クライティン-IIの発光活性を著しく向上させ、細胞内カルシウム流動の検出を顕著に容易なものとすることができる、アポクライティン-IIタンパク質をコードするコドン最適化核酸の提供。
【解決手段】特定のアミノ酸配列を有するアポクライティン-IIタンパク質またはその変異体をコードする、コドン最適化核酸。該コドン最適化核酸を有する組換え宿主細胞。該コドン最適化核酸を用いて発現されたアポクライティン-IIタンパク質。 （もっと読む）

【課題】組換えウイルスベクターおよびこのようなベクターを含む組換えウイルスによる、異種配列の発現の改善のための組成物および方法を提供すること。
【解決手段】異種配列の亢進された発現を可能とする組換えウイルスベクター、特に、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターのようなパルボウイルス、ならびにそれらの構築および使用のための方法を提供する。ベクターは、異種配列における少なくとも１つの領域の鎖内塩基対形成に関する構造を有すか、または、急速にこのような構造をとることが可能である。また、本発明は、鎖内塩基対を形成する領域を含む一本鎖異種ヌクレオチド配列を含み、その結果、ベクター中での目的の配列の発現が、発現を増強するに十分な鎖内塩基対形成を欠くベクターと比較して増強される、組換えウイルスベクターを提供する。 （もっと読む）

ＣＦＴＲを安定的に発現する細胞および細胞株、ならびにそれらの細胞および細胞株の使用法を本明細書で開示する。本発明は、これらの細胞および細胞株を作製するための技術も含む。本発明の細胞および細胞株は、生理的な関連性がある。本発明の細胞および細胞株は高い感受性があり、細胞に基づくアッセイにおいて、一貫性があり信頼できる結果を提供する。 （もっと読む）

本発明は、新規の細胞および細胞株、ならびにそれらを作製および使用するための方法に関する。 （もっと読む）

本発明は、哺乳類細胞発現系から発現されたタンパク質において特定のグリカン構造を検出するための方法および材料に関する。本発明は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞集団を、前記細胞によって産生される末端ガラクトース−α−１，３−ガラクトース残基を含有するグリカンを測定することで、評価するための方法であって、ＣＨＯ細胞が、α−ガラクトシルトランスフェラーゼコード配列を発現するよう遺伝子操作されたものではない、方法を提供するものである。
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【課題】神経堤細胞の異常がなく、かつ神経堤細胞及び動物個体を生かした状態で観察することができる標識タンパク質を、神経堤細胞において特異的に発現し得るトランスジェニック非ヒト動物を提供する。
【解決手段】神経堤細胞において特異的に機能するプロモーターと、このプロモーターの制御下にある標識タンパク質をコードする遺伝子とを含み、かつ前記遺伝子は発現し得る状態で導入されているトランスジェニック非ヒト動物。該トランスジェニック動物は、神経堤細胞の増殖、遊走又は分化の制御物質のスクリーニングに用いることができる。 （もっと読む）

【課題】導入遺伝子発現レベルをさらに最適化すること。
【解決手段】本発明は、種々の組織における作動可能に連結された遺伝子の高レベルの発現を提供する、改善された遺伝子エレメントに関する。特に、２ｋｂ未満のメチル化されていないＣｐＧ島のフラグメントは、増強された導入遺伝子発現を提供し、ベクター構築およびクローニング能に関して利点を有することが示される。本発明は、改善された、より小さな遍在性クロマチンオープニングエレメント（ＵＣＯＥ）を含むポリヌクレオチドに関する。発現可能な核酸配列に作動可能に連結される場合、このエレメントは、高く、かつ再現可能なレベルの遺伝子発現を提供する。 （もっと読む）

【課題】調節配列の体系的な説明及び識別に関連し、他のスクリーニングの間に且つ調節配列が識別されうるところの検出方法を提供する。
【解決手段】遺伝子転写を調節する特性を有するDNA配列を検出し、任意的に選択するための方法であって、転写システムに様々なフラグメント含有ベクターを備えることを含み、前記ベクターは、ｉ）遺伝子転写を抑制する特性を有するエレメント、及びｉｉ）レポーター遺伝子の転写を指示するプロモーターを含む。また、前記方法による、様々な分野たとえば制限されるものではないがタンパク質生産、診断、形質転換植物及び動物、並びに治療分野におけるそれらの使用方法。 （もっと読む）

【課題】タバコ中のＰ４５０酵素およびＰ４５０酵素をコードする核酸配列、ならびに植物表現型を改変するためにそれらの酵素および核酸配列の使用する方法を提供する。
【解決手段】トランスジェニック植物を生成する方法であって、前記核酸分子を前記植物中で機能するプロモータに動作可能に結合して植物形質転換ベクターを生成するステップ、前記植物形質転換ベクターで前記植物を形質転換するステップ、前記形質転換ベクターで形質転換された植物細胞を選択するステップ、および前記植物細胞から植物を再生するステップを含むことを特徴とする方法。 （もっと読む）

【課題】本発明は、細胞内安定性や正常細胞への機能障害などから副作用を避けることができる抗がん剤またはＤＤＳとして使用可能な物質を提供することを課題とする。
【解決手段】本発明者らは、ＥＧＦＲに結合するペプチド配列等の結合ペプチドおよび溶解型ペプチド配列を用いて、ＥＧＦＲ等を過剰に発現するがん細胞を標的とする新規キメラペプチドを開発したことによって、かかる課題を解決した。特に、ＥＧＦ受容体結合ペプチド等と、細胞殺傷性ペプチドとを含むキメラペプチドを用いることによって、この課題を解決した。 （もっと読む）