エラスチン産生促進剤
【課題】 顕著なエラスチン産生促進能を有する有用な新規エラスチン産生促進剤を提供すること。
【解決手段】 本発明は、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）で表されるペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤を提供する。本発明はさらに、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）のアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有し且つ細胞におけるエラスチン産生促進能を有するペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤を提供する。
【解決手段】 本発明は、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）で表されるペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤を提供する。本発明はさらに、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）のアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有し且つ細胞におけるエラスチン産生促進能を有するペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規のエラスチン産生促進剤ならびにそれに関連する発明に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来より、動物の結合組織には、その主要成分として、コラーゲン、ヒアルロン酸、エラスチン、コンドロイチン硫酸、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸、ラミニンなどが含まれていることが分かっている。そしてエラスチンは、結合組織において後述のような重要な役割を果たしている。
【０００３】
エラスチンは、黄色いランダムコイル型の線維状タンパク質から構成され、２倍近く引き伸ばしても緩めると元に戻るという、ゴムのような強力な弾力性を有することで知られている。このエラスチンは、結合組織においてコラーゲン同士を架橋してバネのように支え、伸び縮みの原動力となり、皮膚の弾力やハリなどを保つのに大きな働きをしている。生体内においてエラスチンは、皮膚の真皮、靭帯、腱、血管壁など伸縮性の必要な器官に広く分布しており、これらの器官で弾力性を与えるのに非常に重要な役割を担っている。
【０００４】
しかしエラスチンは、加齢や紫外線、活性酸素、ストレスなどにより徐々にその量が減少してしまうことが知られている。そしてこの減少は、本来あるべき弾力性を徐々に失わせ、皮膚などにおいてシワやたるみを生じさせ、老化の大きな一因となることが分かっている。
また、正常エラスチンの欠乏は動脈硬化などの血管系疾患の一因となり得ることもこれまでに知られている。
【０００５】
これまでにも、エラスチン減少による状態を改善するために、いくつかのエラスチン産生促進剤が提案されている。例えば、ナルコユリ属（Polygonatum）植物の抽出物（特許文献１）や、グミ科ヒッポファエ（Hippophae）属植物の抽出物（特許文献２）などがこれまでにエラスチン産生促進剤として提案されている。
【特許文献１】特表２００１−５１３５０９号公報
【特許文献２】特開２００５−２２９９３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上述のような生体におけるエラスチンの果たす役割の重要度に鑑み、顕著なエラスチン産生促進能を有する更なる有用な新規エラスチン産生促進剤の開発が望まれている。本発明はかかる従来の問題に鑑み、顕著なエラスチン産生促進能を有する有用な新規エラスチン産生促進剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、前記課題を解決するために鋭意検討した結果、特定のアミノ酸配列を有するペプチド類が、顕著に高いエラスチン産生促進能を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
従って、本発明は以下を提供する。
（１）Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）で表されるペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤。
（２）Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）のアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有し且つ細胞におけるエラスチン産生促進能を有するペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤。
（３）前記ペプチドが３〜１０残基のアミノ酸長を有する、項目（２）に記載のエラスチン産生促進剤。
（４）さらにエラスターゼ阻害剤を含有する、項目（１）〜（３）のいずれか一項に記載のエラスチン産生促進剤。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、顕著に高いエラスチン産生促進能を有する有用な新規エラスチン産生促進剤が提供される。本発明のエラスチン産生促進剤は、細胞におけるエラスチン産生を促進させて生体におけるエラスチン量を高めるために有益に使用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下、本発明を詳細に説明する。なお、本明細書中において使用される用語は、特に他に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられていることが理解されるべきである。
【００１１】
本発明は、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）で表されるペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤である。
【００１２】
本発明はまた、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）のアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有し且つ細胞におけるエラスチン産生促進能を有するペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤である。
【００１３】
以下、本発明に用いられるＬｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）で表されるペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種、及びＬｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）のアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有し且つ細胞におけるエラスチン産生促進能を有するペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種〔以下、本明細書においてこれらを総称して「ＬＥＨＡペプチド類」ということがある〕について詳述する。
【００１４】
本明細書中において、「ペプチドの誘導体」とは、例えば、ペプチドをアセチル化、パルミトイル化、ミリスチル化、アミド化、アクリル化、ダンシル化、ビオチン化、リン酸化、サクシニル化、アニリド化、ベンジルオキシカルボニル化、ホルミル化、ニトロ化、スルフォン化、アルデヒド化、環状化、グリコシル化、モノメチル化、ジメチル化、トリメチル化、グアニジル化、アミジン化、マレイル化、トリフルオロアセチル化、カルバミル化、トリニトロフェニル化、ニトロトロポニル化、またはアセトアセチル化したもの等をいう。この中でもパルミトイル化は、細胞への浸透性が高くなることが期待されるので好ましく、またN末端のアセチル化、C末端のアミド化、C末端のメチル化は、末端からペプチドを分解するエキソペプチダーゼに対する抵抗性が付与され、生体中における安定性が高くなることが期待されるので好ましい。
【００１５】
本明細書において、ペプチドまたはその誘導体の塩とは、ペプチドまたはその誘導体の薬理学的に許容される任意の塩（無機塩および有機塩を含む）をいい、例えば、ペプチドまたはその誘導体のナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アンモニウム塩、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、有機酸塩（酢酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、プロピオン酸塩、蟻酸塩、安息香酸塩、ピクリン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩等）等が挙げられ、好ましくは、アンモニウム塩、塩酸塩、硫酸塩および酢酸塩であり、より好ましくはアンモニウム塩および酢酸塩である。
【００１６】
本明細書において用語「アミノ酸の保存的置換」とは、以下の表１の各群内におけるアミノ酸間の置換をいう。
【００１７】
【表１】
【００１８】
この中で、好ましいアミノ酸の保存的置換としては、アスパラギン酸（D）とグルタミン酸（E）との間での置換、アルギニン（R）とリジン（K）とヒスチジン（H）との間での置換、トリプトファン（W）とフェニルアラニン（F）との間での置換、フェニルアラニン（F）とバリン（V）との間での置換、ロイシン（L）とイソロイシン（I）とアラニン（A）との間での置換、グリシン（G）とアラニン（A）との間での置換等が挙げられる。
【００１９】
１個以上のアミノ酸の保存的置換とは、好ましくは１個または数個のアミノ酸の保存的置換をいい、より好ましくは１〜３個、さらに好ましくは１〜２個、さらにより好ましくは１個のアミノ酸の保存的置換をいう。
【００２０】
１個以上のアミノ酸の欠失とは、好ましくは１個のアミノ酸の欠失である。
【００２１】
１個以上のアミノ酸の付加とは、好ましくは１〜６個、より好ましくは１〜４個、さらに好ましくは１〜３個、さらにより好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個のアミノ酸の付加をいう。
【００２２】
Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ(本明細書では、ペプチド配列をアミノ酸の一文字略号により表記する場合があり、例えば本ペプチドをＬＥＨＡという場合がある)において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有するペプチドとしては、例えば、ＬＥＨＡ配列に１個以上のアミノ酸の保存的置換を含むもの(例えば、ＩＥＨＡ、ＬＤＨＡ、ＬＤＫＡ、ＬＥＫＡ、ＬＥＨＷ、ＬＥＨＦ、ＬＥＨＶ、ＬＥＨＬ、ＬＥＨＩ、ＬＥＨＭ、ＬＥＨＧ、ＬＥＨＳ、ＬＥＨＴ等）、ＬＥＨＡ配列に１個以上のアミノ酸の欠失を含むもの(例えば、ＬＥＨ、ＥＨＡ、ＬＨＡ、ＬＥＡ等）、およびＬＥＨＡ配列に１個以上のアミノ酸を付加したもの（例えば、ＬＥＨＡＷ、ＬＥＨＡＦ、ＬＥＨＡＶ、ＬＥＨＡＬ、ＬＥＨＡＩ、ＬＥＨＡＭ、ＬＥＨＡＧ、ＬＥＨＡＳ、ＬＥＨＡＴ、ＡＬＥＨＡ、ＧＬＥＨＡ、ＳＬＥＨＡ、ＭＬＥＨＡ、ＴＬＥＨＡ、ＦＬＥＨＡ、ＳＬＥＨＡＴ、ＧＬＥＨＡＬ、ＤＬＥＨＡＬ、ＱＬＥＨＡＫ、ＳＬＥＨＡＤ、ＱＬＥＨＡＲ、ＥＦＬＥＨＡ、ＬＥＨＡＶＶ、ＤＰＥＬＥＨＡ、ＨＬＥＨＡＡＳ、ＬＥＨＡＳＶＤ等）等が挙げられるが、これらに限定されない。この中で好ましいペプチドとしては、ＩＥＨＡ、ＬＤＨＡ、ＬＤＫＡ、ＬＥＫＡ、ＬＥＨ、ＬＥＨＡＦ、ＦＬＥＨＡ、ＳＬＥＨＡＴ、ＧＬＥＨＡＬ、ＤＬＥＨＡＬ、ＱＬＥＨＡＫ、ＳＬＥＨＡＤ、ＱＬＥＨＡＲ、ＥＦＬＥＨＡ、ＬＥＨＡＶＶ、ＤＰＥＬＥＨＡ、ＨＬＥＨＡＡＳ、ＬＥＨＡＳＶＤ等が挙げられ、より好ましくはＬＥＫＡ、ＬＤＨＡ、ＬＥＨ、ＬＥＨＡＦである。
【００２３】
さらに例えば、ＬＥＨＡペプチドにおいてアミノ酸の保存的置換および欠失を有するペプチドとしては、特に限定されないが、ＩＥＨ、ＬＤＨ、ＬＤＫ、ＬＥＫ等が挙げられる。また例えば、ＬＥＨＡペプチドにおいてアミノ酸の欠失および付加を有するペプチドとしては、特に限定されないが、ＡＬＥＨ、ＧＬＥＨ、ＳＬＥＨ、ＭＬＥＨ、ＴＬＥＨ等が挙げられる。さらに例えば、ＬＥＨＡペプチドにおいてアミノ酸の保存的置換および付加を有するペプチドとしては、特に限定されないが、ＩＥＨＡＦ、ＬＤＨＡＦ、ＬＤＫＡＦ、ＬＥＫＡＦ等が好適な例として挙げられる。
【００２４】
本明細書において用語「細胞におけるエラスチン産生促進能を有する」とは、被験物を細胞に作用させた場合に、当該被験物を細胞に作用させない場合と比較して、細胞におけるエラスチン産生量が増加することを意味する。特定の態様では、当該用語における細胞とは線維芽細胞を意味し、さらに特定の態様では皮膚線維芽細胞を意味する。
【００２５】
本発明に用いられるペプチドは、当該分野で公知の方法により作製され得る。例えば、本発明のペプチドは、化学合成方法（例えば、固相法（例えば、Ｆｍｏｃ法）、液相法等）により合成されてもよく、また遺伝子組換え発現等の方法により作製されてもよい。なお本発明のペプチドを構成するアミノ酸は、Ｌ体であってもＤ体であってもよいが、好ましくはＬ体である。
【００２６】
さらに本発明のペプチドは、目的のアミノ酸配列を含むタンパク質から、目的のアミノ酸配列からなるペプチドをプロテアーゼ処理等の公知の手段によって切り出すことによっても調製され得る。例えば、ＬＥＨＡ配列を含むタンパク質としては、以下の表２に示すようなタンパク質が挙げられる。
【００２７】
【表２】
【００２８】
当業者は、プロテアーゼの配列特異性等を考慮して、目的のアミノ酸配列を含むタンパク質から、目的のアミノ酸配列からなるペプチドを切り出すために適切なプロテアーゼを適宜選択し得る。例えば、上記ニンジン由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、サーモリシン（Bacillus thermoproteolyticus由来）とキモトリプシン（ウシ膵臓由来）とを併用することなどが挙げられる。また、例えば、上記ジャガイモ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、プロテアーゼM「アマノ」G（Aspergillus oryzae 由来：天野エンザイム（株）製）と前記サーモリシンとを併用することなどが挙げられる。また、例えば、上記イネ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、前記プロテアーゼM「アマノ」Gと前記サーモリシンとを併用することなどが挙げられる。また、例えば、上記ダイズ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、前記サーモリシンを使用することなどが挙げられる。また、例えば、上記インゲンマメ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、前記キモトリプシンと前記サーモリシンとを併用することなどが挙げられる。また、例えば、上記キャッサバ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、前記キモトリプシンと前記サーモリシンとを併用することなどが挙げられる。また、例えば、上記カワヤツメ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、トリプシン（ブタ膵臓由来）と前記サーモリシンとを併用することなどが挙げられる。目的のアミノ酸配列を含むタンパク質とプロテアーゼの組合せは、上記の組合せに限定されないが、好ましい組合せとしては、ダイズタンパク質とサーモリシンの組合せが挙げられる。
【００２９】
タンパク質をプロテアーゼで加水分解する場合に用いられる反応条件は、特に制限されず、技術常識に従って当業者により適宜選択され得る。例えば、市販のプロテアーゼを使用する場合には、その使用説明書に従って反応条件を選択することができる。一般的には、３０〜８０℃、好ましくは４０〜７０℃、より好ましくは５０〜６０℃の反応温度が使用され得る。また一般的には、２〜３０時間、好ましくは３〜２４時間、より好ましくは１０〜２０時間、特に好ましくは１２〜１８時間の反応時間が使用され得る。反応ｐＨとしては、使用するプロテアーゼの至適ｐＨ付近であることが好ましい。反応の停止手段についても、特に制限はなく、公知の手段を用いることができる。かかる手段としては、例えば、８５℃で１５分間加熱や１００℃で５分間加熱等の加熱処理等が挙げられる。
【００３０】
プロテアーゼによる加水分解処理後には、当該分野で公知の手段によって精製することにより、目的のペプチドを得ることができる。かかる公知の手段としては、例えば、強酸性イオン交換樹脂やオクタデシルシリカ（ＯＤＳ）樹脂などが利用され得る。例えば、プロテアーゼ処理後のペプチド水溶液をＯＤＳ樹脂に吸着させて任意の濃度の有機溶媒（例えば、アセトニトリル等）で溶出することにより、目的のペプチドを精製することができる。あるいは、例えば、プロテアーゼ処理後のペプチド水溶液を強酸性イオン交換樹脂に吸着させて、約０．１８Ｍ〜０．２５Ｍ塩濃度の溶出液（例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム等）、より好ましくは約０．２０Ｍ〜０．２３Ｍ塩濃度の溶出液で溶出することにより、目的のペプチドを精製することができる。
【００３１】
このように、天然のタンパク質をプロテアーゼで加水分解して得られるペプチドは、化学合成方法で製造する場合よりもコスト面から有利となる。さらに、天然のタンパク質をプロテアーゼで加水分解して得られるペプチドは、生体に対してより安全であると考えられる。従って、このようにして得られたペプチドは、生体への適用に対しより高い安全性が求められる内服剤や食品、敏感肌用化粧料、飼料などに好適に使用され得る。
【００３２】
本発明のペプチドの誘導体は、Ｆｍｏｃ法による固相合成法（L.A.Carpino, G.Y.Han, J.Am.Chem.Soc., 92, 5748 (1970)）等に従って、当該分野で公知の方法により作製され得る。
【００３３】
本発明のペプチドの塩もまた、当該分野で公知の任意の方法により、当業者によって作製され得る。
【００３４】
本発明において、上述のＬＥＨＡペプチド類は、１種単独で使用しても、また２種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。
【００３５】
本発明のエラスチン産生促進剤におけるＬＥＨＡペプチド類の含有量は、本願効果を奏し得る限り特に制限されないが、通常はエラスチン産生促進剤全体に対して０．００００１〜１００重量％程度、好ましくは０．０００１〜７０重量％程度とするのがよい。特に本発明のエラスチン産生促進剤が外用剤の形態をとる場合には、皮膚に対してより直接的に作用できるので上記含有量は少なくてもよく、例えば０．００００１〜５重量％、より好ましくは０．０００１〜１重量％、さらに好ましくは０．０００１〜０．１重量％としても十分な本願効果が得られる。
【００３６】
本発明のエラスチン産生促進剤には、前述したＬＥＨＡペプチド類に加えて、当該ＬＥＨＡペプチド類の作用を増強または補足する目的で、あるいは本発明のエラスチン産生促進剤に他の有用な作用を付加するため、美白成分、抗炎症成分、抗菌成分、細胞賦活化成分、収斂成分、抗酸化成分、ニキビ改善成分、ヒアルロン酸等の生体成分合成促進成分、血行促進成分、保湿成分、老化防止成分等の各種成分を１種または２種以上組み合わせて配合してもよい。好ましくは美白成分、抗炎症成分、抗菌成分、細胞賦活化成分、収斂成分、抗酸化成分、老化防止成分または保湿成分の１種または２種以上の成分が用いられる。これらの各成分としては、医薬品、医薬部外品、食品または化粧品分野などにおいて使用され得るものであれば特に制限されず、任意のものを適宜選択し使用することができる。
【００３７】
例えば、美白成分としては、プラセンタ；アルブチン；コウジ酸；エラグ酸；フィチン酸；ルシノール；カモミラＥＴ；ビタミンＡ又はその誘導体、パントテン酸又はその誘導体等のビタミン類等が挙げられる。このうち、好ましいものとしては、パントテン酸又はその誘導体、エラグ酸、フィチン酸、ビタミンＡ又はその誘導体を挙げることができる。これらの美白成分は１種または２種以上を用いてもよい。
【００３８】
美白作用を有する植物成分を美白成分として用いてもよく、かかる植物成分としては、イリス（アイリス）、アーモンド、アロエ、イチョウ、ウーロン茶、エイジツ、オウゴン、オウレン、オトギリソウ、オドリコソウ、海藻、カッコン、クチナシ、クジン、クロレラ、ゴバイシ、コムギ、コメ、コメハイガ、オリザノール、コメヌカ、サイシン、サンショウ、シソ、シャクヤク、センキュウ、ソウハクヒ、ダイズ、納豆、茶、トウキ、トウキンセンカ、ニンニク、ハマメリス、ベニバナ、ボタンピ、ヨクイニン、トウキ、アメジスト、アセンヤク、アセビワラビ、イヌマキ、エノキ、カキ(Diospyros kaki)、キササゲ、クロマメ、ゲンチアナ、ゲンジン、サルサ、サヤインゲン、ショクマ、ジュウロウ、セージ、ゼンコ、ダイコン、ツツジ、ツクシハギ、トシン、ニガキ、パセリ、ヒイラギ、ホップ、マルバハギ、チョウジ、カンゾウ等の植物に由来する成分が挙げられる。好ましくは、イリス（アイリス）、アロエ、イチョウ、ウーロン茶、エイジツ、オウゴン、オウレン、オトギリソウ、オドリコソウ、海藻、カッコン、クチナシ、クジン、ゴバイシ、コムギ、コメ、コメヌカ、サイシン、サンショウ、シソ、シャクヤク、センキュウ、ソウハクヒ、茶、トウキ、トウキンセンカ、ハマメリス、ベニバナ、ボタンピ、ヨクイニン、アメジスト、アセンヤク、エノキ、カキ(Diospyros kaki)、キササゲ、クロマメ、ゲンチアナ、サルサ、サヤインゲン、ジュウロウ、セージ、ゼンコ、ダイコン、ツツジ、ツクシハギ、トシン、ニガキ、パセリ、ヒイラギ、ホップ、チョウジ、カンゾウ及びトウキの植物由来成分であり、より好ましくは、イリス（アイリス）、アロエ、イチョウ、エイジツ、オウゴン、オウレン、オトギリソウ、クチナシ、クジン、コメ、コメヌカ、サイシン、シャクヤク、センキュウ、ソウハクヒ、茶、トウキ、トウキンセンカ、ハマメリス、ベニバナ、ボタンピ、アメジスト、アセンヤク、エノキ、カキ(Diospyros kaki)、セージ、ダイコン、ツツジ、パセリ、ホップ、カンゾウ及びヨクイニンの植物由来成分が挙げられる。これらの植物成分を本発明のエラスチン産生促進剤に用いる場合、植物成分の形態は特に制限されないが、通常は植物エキス（植物抽出物）や精油などの態様で使用することができる。なお、上記植物成分中に記載の（ ）内は、その植物の学名、別名または生薬名である。
【００３９】
上記美白成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、好ましくは０．０００３〜１０重量％であり、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００４０】
美白成分として美白作用のある植物成分を用いる場合は、目的に応じて１種もしくは２種以上を任意に組み合わせて使用することができる。上記植物成分を美白成分として用いる場合、本願エラスチン産生促進剤への配合割合は、エキスや精油などの抽出物換算で、通常０．００００１〜２０重量％、好ましくは０．０００１〜１５重量％、より好ましくは０．００１〜１０重量％である。
【００４１】
抗炎症成分としては、アラントイン、カラミン、グリチルリチン酸又はその誘導体、グリチルレチン酸又はその誘導体、酸化亜鉛、グアイアズレン、酢酸トコフェロール、塩酸ピリドキシン、メントール、カンフル、テレピン油、インドメタシン、サリチル酸又はその誘導体等が挙げられる。好ましくはアラントイン、グリチルリチン酸又はその誘導体、グリチルレチン酸又はその誘導体、グアイアズレン、メントールである。
【００４２】
上記抗炎症成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、好ましくは０．０００３〜１０重量％であり、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００４３】
抗菌成分としては、クロルヘキシジン、サリチル酸、塩化ベンザルコニウム、アクリノール、エタノール、塩化ベンゼトニウム、クレゾール、グルコン酸及びその誘導体、ポピドンヨード、ヨウ化カリウム、ヨウ素、イソプロピルメチルフェノール、トリクロカルバン、トリクロサン、感光素１０１号、感光素２０１号、パラベン、フェノキシエタノール、１，２-ペンタンジオール、塩酸アルキルジアミノグリシン等が挙げられる。好ましくは、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、グルコン酸及びその誘導体、イソプロピルメチルフェノール、トリクロカルバン、トリクロサン、感光素１０１号、感光素２０１号、パラベン、フェノキシエタノール、１，２-ペンタンジオール、塩酸アルキルジアミノグリシン等が挙げられる。さらに好ましくは、塩化ベンザルコニウム、グルコン酸及びその誘導体、塩化ベンゼトニウム、イソプロピルメチルフェノールである。
【００４４】
上記抗菌成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、好ましくは０．０００３〜１０重量％であり、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００４５】
細胞賦活化成分としては、γ-アミノ酪酸、ε-アミノカプロン酸などのアミノ酸類：レチノール、チアミン、リボフラビン、塩酸ピリドキシン、パントテン酸類などのビタミン類：グリコール酸、乳酸などのα-ヒドロキシ酸類：タンニン、フラボノイド、サポニン、アラントイン、感光素301号などが挙げられる。好ましくは、γ-アミノ酪酸、ε-アミノカプロン酸などのアミノ酸類：レチノール、チアミン、リボフラビン、塩酸ピリドキシン、パントテン酸類などのビタミン類である。
【００４６】
上記細胞賦活化成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、好ましくは０．０００３〜１０重量％であり、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００４７】
収斂成分としては、ミョウバン、クロロヒドロキシアルミニウム、塩化アルミニウム、アラントインアルミニウム塩、硫酸亜鉛、硫酸アルミニウムカリウム等の金属塩；タンニン酸、クエン酸、乳酸、コハク酸などの有機酸を挙げることができる。好ましくは、ミョウバン、クロロヒドロキシアルミニウム、塩化アルミニウム、アラントインアルミニウム塩、硫酸アルミニウムカリウム、タンニン酸である。
【００４８】
収斂成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、通常０.０００３〜１０重量％、好ましくは０．０１〜５重量％、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００４９】
抗酸化成分としては、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルヒドロキシトルエン、亜硫酸水素ナトリウム、エリソルビン酸及びその塩、フラボノイド、グルタチオン、グルタチオンペルオキシダーゼ、グルタチオン-Ｓ-トランスフェラーゼ、カタラーゼ、スーパーオキサイドジスムターゼ、チオレドキシン、タウリン、チオタウリン、ヒポタウリンなどが挙げられる。好ましくは、チオタウリン、ヒポタウリン、チオレドキシン、フラボノイドである。
【００５０】
抗酸化成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、通常０.００００１〜１０重量％、好ましくは０．０００１〜５重量％、より好ましくは０．００１〜５重量％である。
【００５１】
老化防止成分としては、レチノイド（レチノール、レチノイン酸、レチナール等）、パンガミン酸、ウルソール酸、ウコンエキス、スフィンゴシン誘導体、ケイ素、ケイ酸、Ｎ−メチル−Ｌ−セリン、メバロノラクトン等が挙げられる。好ましくは、レチノイド（レチノール、レチノイン酸、レチナール等）である。
【００５２】
上記老化防止成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、好ましくは０．０００３〜１０重量％であり、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００５３】
保湿成分としては、アラニン、セリン、ロイシン、イソロイシン、スレオニン、グリシン、プロリン、ヒドロキシプロリン、グルコサミン、テアニンなどのアミノ酸及びその誘導体；グリセリン、1,3-ブチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどの多価アルコール；ソルビトールなどの糖アルコール；レシチン、水素添加レシチン等のリン脂質；プロピレングリコール、ヘパリン、コンドロイチン、ヒアルロン酸又はその塩（例えば、ヒアルロン酸ナトリウム等）、アセチル化ヒアルロン酸又はその塩（例えば、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム等）等のムコ多糖；乳酸、ピロリドンカルボン酸ナトリウム、尿素などのＮＭＦ由来成分等が挙げられる。好ましいものは、アラニン、セリン、グリシン、プロリン、ヒドロキシプロリン、グルコサミン、テアニン、コラーゲン、コラーゲンペプチド、グリセリン、1,3-ブチレングリコール、水素添加レシチン、プロピレングリコール、ヘパリン、コンドロイチン、ヒアルロン酸又はその塩（例えば、ヒアルロン酸ナトリウム等）、アセチル化ヒアルロン酸又はその塩（例えば、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム等）、乳酸、ピロリドンカルボン酸ナトリウムである。
【００５４】
保湿成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合としては、通常０．１〜１０重量％、好ましくは０．５〜５重量％、より好ましくは０．５〜５重量％を挙げることができる。
【００５５】
またとりわけ本発明のエラスチン産生促進剤に、エラスターゼ阻害剤を組合せて配合することが特に好ましい。本発明のエラスチン産生促進剤に、エラスターゼ阻害剤を組合せて配合することにより、ＬＥＨＡペプチド類によるエラスチン産生促進効果と共に、エラスターゼにより引き起こされるエラスチン分解を抑制する効果も得られるので、両者の効果が相まって、生体におけるエラスチン量を飛躍的に高める製剤とすることができる。
【００５６】
エラスターゼ阻害剤としては、例えば、オトギリソウ抽出物（オトギリソウ科に属するオトギリソウ（Hypericum erectum Thumb）又はセイヨウオトギリソウ（Hypericum perforatum L.）の抽出物）、クロレラ抽出物、ビルベリー葉抽出物、アルゲエキス又は褐藻抽出物、緑藻抽出物、イリス根抽出物、加水分解ペポカボチャ種子油粕、加水分解バレイショタンパク、アセンヤク抽出物、エンドウ抽出物、ヒバマタ抽出物、コンフリー抽出物、トルメンチラ抽出物、フユボダイジュ抽出物などが挙げられるが、これらに限定されない。上記植物の抽出物は、任意の抽出溶媒（例えば、水、エタノール、メタノール、アセトン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、又はこれらの混合物など）を用いて、当該分野で一般的な方法により得ることができる。好ましくは、エラスターゼ阻害剤としては、オトギリソウ抽出物が用いられる。
【００５７】
エラスターゼ阻害剤を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合としては、特に制限されないが、通常０．０００１〜２０重量％、好ましくは０．００１〜１０重量％、より好ましくは０．０１〜５重量％を挙げることができる。
【００５８】
本発明のエラスチン産生促進剤は、上記各成分に加えてエラスチン産生促進剤の用途あるいは剤形に応じて、医薬品、医薬部外品、化粧品または食品などの分野に通常使用される成分を適宜配合しても良い。配合できる成分としては、特に制限されないが、例えば、アミノ酸類、アルコール類、多価アルコール類、糖類、ガム質、多糖類などの高分子化合物、界面活性剤、可溶化成分、油脂類、経皮吸収促進成分、防腐・抗菌・殺菌剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、抗酸化剤、酵素成分、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動化剤、清涼化剤の他、ミネラル類、細胞賦活剤、滋養強壮剤、賦形剤、増粘剤、安定化剤、保存剤、等張化剤、分散剤、吸着剤、崩壊補助剤、湿潤剤または湿潤調節剤、防湿剤、着色料、着香剤または香料、芳香剤、還元剤、可溶化剤、溶解補助剤、発泡剤、粘稠剤または粘稠化剤、溶剤、基剤、乳化剤、可塑剤、緩衝剤、光沢化剤などをあげることができる。特に本発明のエラスチン産生促進剤が外用剤の形態をとる場合には、界面活性剤、可溶化成分または油脂類を配合することによって当該エラスチン産生促進剤の使用感をより向上させることができる。また外用剤の形態をとる場合には、更に経皮吸収促進成分を配合するのがより高い効果を得る観点から好ましい。
【００５９】
ここで用いられる界面活性剤としては、ポリオキシエチレン（以下、ＰＯＥという）−オクチルドデシルアルコールやＰＯＥ−２−デシルテトラデシルアルコール等のＰＯＥ−分岐アルキルエーテル；ＰＯＥ −オレイルアルコールエーテルやＰＯＥ−セチルアルコールエーテル等のＰＯＥ−アルキルエーテル；ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノイソステアレート及びソルビタンモノラウレート等のソルビタンエステル；ＰＯＥ−ソルビタンモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビタンモノイソステアレート、及びＰＯＥ−ソルビタンモノラウレート等のＰＯＥ−ソルビタンエステル；グリセリンモノオレエート、グリセリンモノステアレート、及びグリセリンモノミリステート等のグリセリン脂肪酸エステル；ＰＯＥ−グリセリンモノオレエート、ＰＯＥ−グリセリンモノステアレート、及びＰＯＥ−グリセリンモノミリステート等のＰＯＥ−グリセリン脂肪酸エステル；ＰＯＥ−ジヒドロコレステロールエステル、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油、及びＰＯＥ−硬化ヒマシ油イソステアレート等のＰＯＥ−硬化ヒマシ油脂肪酸エステル；ＰＯＥ−オクチルフェニルエーテル等のＰＯＥ−アルキルアリールエーテル；モノイソステアリルグリセリルエーテルやモノミリスチルグリセリルエーテル等のグリセリンアルキルエーテル；ＰＯＥ−モノステアリルグリセリルエーテル、ＰＯＥ−モノミリスチルグリセリルエーテル等のＰＯＥ−グリセリンアルキルエーテル；ジグリセリルモノステアレート、デカグリセリルデカステアレート、デカグリセリルデカイソステアレート、及びジグリセリルジイソステアレート等のポリグリセリン脂肪酸エステル、等の各種非イオン界面活性剤：あるいはレシチン、水素添加レシチン、サポニン、サーファクチンナトリウム、コレステロール、胆汁酸などの天然由来の界面活性剤等を例示することができる。これらの界面活性剤は、１種単独で使用してもまた２種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。
【００６０】
界面活性剤を使用する場合、本願エラスチン産生促進剤への配合割合としては、本発明の効果を妨げないことを限度として特に制限されず、通常はエラスチン産生促進剤中に０．０１〜３０重量％の割合で含まれるような範囲で適宜選択して使用することができる。エラスチン産生促進剤中における有効成分の安定性等の観点からは、好ましくは０．１〜２０重量％、より好ましくは０．５〜１０重量％の範囲を挙げることができる。
【００６１】
可溶化成分としては、例えば、エタノール等の低級アルコール、グリセリン，エチレングリコール等の多価アルコール、水素添加大豆リン脂質、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンラノリンアルコール、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンステロール、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル等を挙げることができる。好ましくは、エタノール、グリセリン、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、水素添加大豆リン脂質、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンラノリンアルコール、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテルであり、より好ましくは、エタノール、グリセリン、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、水素添加大豆リン脂質である。これらの可溶化成分は、１種単独で使用しても、または２種以上を任意に組み合わせて用いてもよい。
【００６２】
これらの可溶化成分を使用する場合、本願エラスチン産生促進剤への配合割合としては、本発明の効果を妨げないことを限度として特に制限されず、通常はエラスチン産生促進剤中に０．０１〜７０重量％の割合で含まれるような範囲で適宜選択して使用することができる。エラスチン産生促進剤中における有効成分の安定性等の観点からは、好ましくは０．１〜５０重量％、より好ましくは０．１〜３０重量％の範囲を挙げることができる。
【００６３】
油脂類としては、例えば、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の合成油脂；大豆油、米油、菜種油、綿実油、ゴマ油、サフラワー油、ヒマシ油、オリーブ油、カカオ油、椿油、ヒマワリ油、パーム油、アマ油、シソ油、シア油、サル油、ヤシ油、木ロウ、ホホバ油、グレープシード油、及びアボガド油等の植物油脂；ミンク油、卵黄油、牛脂、乳脂、及び豚脂等の動物油脂；ミツロウ、鯨ロウ、ラノリン、カルナウバロウ、キャンデリラロウ等のロウ類；流動パラフィン、スクワレン、スクワラン、マイクロクリスタリンワックス、セレシンワックス、パラフィンワックス、ワセリン等の炭化水素類；ラウリン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、ベヘニン酸等の天然及び合成脂肪酸；セタノール、ステアリルアルコール、ヘキシルデカノール、オクチルデカノール、ラウリルアルコール等の天然及び合成高級アルコール；ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、オレイン酸オクチルドデシル、コレステロールオレート等のエステルやエーテル類；シリコーン油等が挙げられる。これらの油脂類は、１種単独で使用しても、または２種以上を任意に組み合わせて用いてもよい。
【００６４】
これらの油脂類を使用する場合、本願エラスチン産生促進剤への配合割合としては、本発明の効果を妨げないことを限度として特に制限されず、通常はエラスチン産生促進剤中に０．０１〜７０重量％の割合で含まれるような範囲で適宜選択して使用することができる。エラスチン産生促進剤中における有効成分の安定性等の観点からは、好ましくは０．１〜６０重量％、より好ましくは０．１〜５０重量％の範囲を挙げることができる。
【００６５】
本発明のエラスチン産生促進剤は、その用途に応じて、医薬品、医薬部外品、化粧品又は食品などに通常使用される剤形をとることができ、通常、固形剤、半固形剤または液剤である。具体的には、錠剤（口腔内側崩壊錠、咀嚼可能錠、発泡錠、トローチ剤、ゼリー状ドロップ剤などを含む）、丸剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、ドライシロップ剤、液剤（ドリンク剤、懸濁剤、シロップ剤を含む）、ゲル剤、リポソーム剤、エキス剤、チンキ剤、レモネード剤、軟膏剤、ゼリー剤などの公知の形態をとることができる。また、必要に応じてその他の溶媒や通常使用される基剤等を配合することによって、ペースト状、ムース状、ジェル状、液状、乳液状、クリーム状、シート状（基材担持）、エアゾール状、スプレー状などの各種所望の形態に調製することができる。
【００６６】
これらの剤形は当該分野の通常の方法にて製造することができる。例えば、半固形剤であれば、上述のＬＥＨＡペプチド類に加えて必要に応じて上記各任意成分を配合混合し、さらに必要に応じてその他の溶媒や通常使用される基剤等を配合することによって、ペースト状、ムース状、ジェル状、液状、乳液状、クリーム状、シート状（基材担持）、エアゾール状、スプレー状などの各種所望の形態に調製することができる。
【００６７】
本発明のエラスチン産生促進剤は、本発明の効果を奏すれば特に限定されないが、例えば医薬品、医薬部外品、食品［菓子、健康食品、栄養補助食品（バランス栄養食、サプリメントなど）を含む）、栄養機能食品、特定保健用食品を含む］などとすることができ、また化粧品ではファンデーション、口紅、マスカラ、アイシャドウ、アイライナー、眉墨及び美爪料等のメーキャップ化粧料；ローション（化粧水や乳液など）、クリーム、オイル、パック、ゲル剤（ジェル状美容液やジェルクリームなど）などの基礎化粧料；洗顔料やクレンジング、ボディ洗浄料などの洗浄料、入浴剤などとすることができる。
【００６８】
本発明のエラスチン産生促進剤は、任意の用途に用いることができ、内服剤としても外用剤としても用いることができるが、皮膚においてより直接的に高い効果を得るためには、外用剤として使用されることが好ましい。
また、本発明のエラスチン産生促進剤は研究試薬（例えば、in vitroで用いる研究試薬）などとしても好適に用いられ得る。
【００６９】
本発明のエラスチン産生促進剤は、顕著に高いエラスチン産生促進能を有することから、細胞におけるエラスチン産生を促進して生体におけるエラスチン量を高めるために使用され得る。従って本発明のエラスチン産生促進剤は、生体におけるエラスチン量を高めて真皮、靭帯、腱、血管壁、骨、軟骨などの強度や弾力性を高めるために用いることができ、例えば、エラスチン減少に伴う各種障害の治療又は予防のために（例えば、正常エラスチンの欠乏により引き起こされる動脈硬化等の血管系疾患の治療又は予防等のために）、美容上の問題を予防又は治療するために（例えば、加齢や紫外線、活性酸素、ストレス等に因るエラスチン減少により引き起こされる、皮膚のシワもしくはタルミの予防および／または改善のため、或いは皮膚の弾力性もしくはハリの低下に対する予防および／または改善のために）好適に用いられ得る。また本発明のエラスチン産生促進剤は、エラスチン産生に関連する状態を解明するための実験用研究試薬などとしても好適に使用され得る。
【実施例】
【００７０】
以下に、実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
【００７１】
実施例１
ＬＥＨＡペプチドの調製
ペプチドを、ペプチド自動合成装置(島津製作所社製：ＰＳＳＭ８)を用いて、Ｆｍｏｃ法による固相合成法により合成した。次いで、分取ＨＰＬＣで未反応物を除去して精製することにより、ＬＥＨＡペプチドを得た。
【００７２】
得られた精製物を分析用逆相高速液体クロマトグラフィー［カラム：μＢｏｎｄａｓｐｈｅｒｅ ５μ Ｃ１８−１００Å (内径： 3.9mm、長さ： 150mm) 、Ｗａｔｅｒｓ社製、；移動相：溶媒Ａ（0.１％トリフルオロ酢酸）および溶媒Ｂ（0.１％トリフルオロ酢酸、９０％アセトニトリル）のグラジエント（０分（溶媒Ｂ＝１２％）〜２０分（溶媒Ｂ＝１７％））；流速：1 ml／分；検出法：波長 220nmにおける吸光度］に付したところ、12.8分に単一の鋭いピークが示され、純度は99％であった。
【００７３】
実施例２
皮膚線維芽細胞におけるエラスチン産生促進検定
ヒト正常皮膚由来線維芽細胞（ＣＲＬ−１８３６；ＡＴＣＣ）を、６０φシャーレ中で培養した。より詳細には、２５００細胞／１ｃｍ２の密度でシャーレに播種し、３７℃で、５％炭酸ガスおよび９５％空気の環境下で、サブコンフルエントになるまで６日間培養を行った。培養液は、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ）に牛胎仔血清（ＦＢＳ）を１０重量％の濃度で含有した培地を３ｍｌ使用した。次いで、ＦＢＳを添加しない上記培養液（すなわち無血清培地）に交換し、さらに１日間培養した。その後、実施例１で調製したＬＥＨＡペプチドを１０００μｇ／ｍｌ濃度添加した無血清培地３ｍｌに交換して７２時間培養した。一方、ＬＥＨＡペプチドを添加しない無血清培地３ｍｌに交換したものをコントロールとした。
【００７４】
７２時間培養後に、顕微鏡下で、ＬＥＨＡペプチドを添加したシャーレおよびコントロールシャーレ内の細胞の観察を行った。その結果、両シャーレ内の細胞数に際立った差異は認められず、また細胞形の異常なども特に認められなかった。
【００７５】
顕微鏡観察後、それぞれの培養細胞から、市販のＲＮＡ抽出キット（ＱＩＡＧＥＮ製、商品名：Ｒｎｅａｓｙ Ｍｉｎｉ）を用いてトータルＲＮＡを抽出した。得られたトータルＲＮＡから、常法に従ってｃＤＮＡを合成した。
【００７６】
エラスチンをコードする遺伝子の発現量の定量は、エラスチンの遺伝子配列に対するプライマーセットを含むキット（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製、商品名：ＴａｑＭａｎ（登録商標）Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ａｓｓａｙｓ、Ａｓｓａｙ ＩＤ：Ｈｓ００３５５７８３＿ｍ１）を用いて行った。このキットを添付のプロトコールに従って用い、上記で調製した各ｃＤＮＡと共にＡＢＩリアルタイムＰＣＲシステム（機器名：ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ（登録商標）７０００ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｄｅｃｅｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製））にかけ、エラスチンの発現量を定量した。
【００７７】
定量結果をもとに、コントロールにおける発現量を１００％として、ＬＥＨＡペプチドを添加して培養した細胞におけるエラスチン遺伝子の発現量を算出した。その結果、ＬＥＨＡペプチドを添加した培養液で培養することにより、ヒト正常皮膚由来線維芽細胞のエラスチン遺伝子の発現量は４６７％にまで飛躍的に高まることが見出された。従ってこの実験結果から、ＬＥＨＡペプチドが、細胞内におけるエラスチン産生を著しく増強し得るものであることが確認された。
【００７８】
以下に製剤実施例を挙げるが、本発明はこれらの実施例に限られるものではない。
【００７９】
製剤実施例１：乳液
〔成分〕 〔比率〕
ＬＥＨＡペプチド ０．０１
スクワラン ２．０
流動パラフィン ５．０
セタノール ０．５
モノステアリン酸グリセリル ２．０
ＰＯＥ（２５）セチルエーテル ２．０
グリセリン ４．０
１,３-ブチレングリコール ６．０
ｐＨ調整剤 適量
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
１００．０重量％
【００８０】
製剤実施例２：クリーム
〔成分〕 〔比率〕
ＬＥＨＡペプチド ０．０１
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物＊ ０．５
ワセリン １．０
スクワラン ５．０
流動パラフィン １０．０
ステアリン酸 １．５
ステアリルアルコール ２．０
モノステアリン酸グリセリル ２．０
ＰＯＥ（２０）セチルエーテル ３．０
グリセリン ６．０
１,３-ブチレングリコール ８．０
ｐＨ調整剤 適量
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
１００．０重量％
＊ダイズタンパク質をサーモリシン（EC3.4.24.4）で分解した後に得られる多種多様なペプチドを実質的に全て含んだ状態のもの：平均分子量1500（ゲル浸透クロマトグラフィー（GPC）法による測定）。
【００８１】
製剤実施例３：化粧水
〔成分〕 〔比率〕
ＬＥＨＡペプチド ０．００５
ヒアルロン酸ナトリウム ０．１
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノイソステアリン酸エステル ０．３
コハク酸 ０．２
コハク酸ナトリウム ０．５
エデト酸三ナトリウム ０．０５
１,３-ブチレングリコール ６．０
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
１００．０重量％
【００８２】
製剤実施例４：乳液
〔成分〕 〔比率〕
ＬＥＨＡペプチド ０．０１
オトギリソウ抽出物（エラスターゼ阻害剤） １．０
スクワラン ２．０
流動パラフィン ５．０
セタノール ０．５
モノステアリン酸グリセリル ２．０
ＰＯＥ（２５）セチルエーテル ２．０
グリセリン ４．０
１，３−ブチレングリコール ６．０
ｐＨ調整剤 適量
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
１００．０重量％
【００８３】
製剤実施例５：飲料
〔成分〕 〔比率〕
ＬＥＨＡペプチド ０．０１
フィッシュコラーゲンペプチド ０．５
ビタミンＢ２ ０．００５
エリスリトール １０.０
酸味料 １．０
甘味料 １．０
香料 ０．０１
精製水 残量
１００．０重量％
【配列表フリーテキスト】
【００８４】
配列番号１は、本発明に使用され得るペプチドである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規のエラスチン産生促進剤ならびにそれに関連する発明に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来より、動物の結合組織には、その主要成分として、コラーゲン、ヒアルロン酸、エラスチン、コンドロイチン硫酸、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸、ラミニンなどが含まれていることが分かっている。そしてエラスチンは、結合組織において後述のような重要な役割を果たしている。
【０００３】
エラスチンは、黄色いランダムコイル型の線維状タンパク質から構成され、２倍近く引き伸ばしても緩めると元に戻るという、ゴムのような強力な弾力性を有することで知られている。このエラスチンは、結合組織においてコラーゲン同士を架橋してバネのように支え、伸び縮みの原動力となり、皮膚の弾力やハリなどを保つのに大きな働きをしている。生体内においてエラスチンは、皮膚の真皮、靭帯、腱、血管壁など伸縮性の必要な器官に広く分布しており、これらの器官で弾力性を与えるのに非常に重要な役割を担っている。
【０００４】
しかしエラスチンは、加齢や紫外線、活性酸素、ストレスなどにより徐々にその量が減少してしまうことが知られている。そしてこの減少は、本来あるべき弾力性を徐々に失わせ、皮膚などにおいてシワやたるみを生じさせ、老化の大きな一因となることが分かっている。
また、正常エラスチンの欠乏は動脈硬化などの血管系疾患の一因となり得ることもこれまでに知られている。
【０００５】
これまでにも、エラスチン減少による状態を改善するために、いくつかのエラスチン産生促進剤が提案されている。例えば、ナルコユリ属（Polygonatum）植物の抽出物（特許文献１）や、グミ科ヒッポファエ（Hippophae）属植物の抽出物（特許文献２）などがこれまでにエラスチン産生促進剤として提案されている。
【特許文献１】特表２００１−５１３５０９号公報
【特許文献２】特開２００５−２２９９３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上述のような生体におけるエラスチンの果たす役割の重要度に鑑み、顕著なエラスチン産生促進能を有する更なる有用な新規エラスチン産生促進剤の開発が望まれている。本発明はかかる従来の問題に鑑み、顕著なエラスチン産生促進能を有する有用な新規エラスチン産生促進剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、前記課題を解決するために鋭意検討した結果、特定のアミノ酸配列を有するペプチド類が、顕著に高いエラスチン産生促進能を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
従って、本発明は以下を提供する。
（１）Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）で表されるペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤。
（２）Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）のアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有し且つ細胞におけるエラスチン産生促進能を有するペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤。
（３）前記ペプチドが３〜１０残基のアミノ酸長を有する、項目（２）に記載のエラスチン産生促進剤。
（４）さらにエラスターゼ阻害剤を含有する、項目（１）〜（３）のいずれか一項に記載のエラスチン産生促進剤。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、顕著に高いエラスチン産生促進能を有する有用な新規エラスチン産生促進剤が提供される。本発明のエラスチン産生促進剤は、細胞におけるエラスチン産生を促進させて生体におけるエラスチン量を高めるために有益に使用することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下、本発明を詳細に説明する。なお、本明細書中において使用される用語は、特に他に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられていることが理解されるべきである。
【００１１】
本発明は、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）で表されるペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤である。
【００１２】
本発明はまた、Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）のアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有し且つ細胞におけるエラスチン産生促進能を有するペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤である。
【００１３】
以下、本発明に用いられるＬｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）で表されるペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種、及びＬｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）のアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有し且つ細胞におけるエラスチン産生促進能を有するペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種〔以下、本明細書においてこれらを総称して「ＬＥＨＡペプチド類」ということがある〕について詳述する。
【００１４】
本明細書中において、「ペプチドの誘導体」とは、例えば、ペプチドをアセチル化、パルミトイル化、ミリスチル化、アミド化、アクリル化、ダンシル化、ビオチン化、リン酸化、サクシニル化、アニリド化、ベンジルオキシカルボニル化、ホルミル化、ニトロ化、スルフォン化、アルデヒド化、環状化、グリコシル化、モノメチル化、ジメチル化、トリメチル化、グアニジル化、アミジン化、マレイル化、トリフルオロアセチル化、カルバミル化、トリニトロフェニル化、ニトロトロポニル化、またはアセトアセチル化したもの等をいう。この中でもパルミトイル化は、細胞への浸透性が高くなることが期待されるので好ましく、またN末端のアセチル化、C末端のアミド化、C末端のメチル化は、末端からペプチドを分解するエキソペプチダーゼに対する抵抗性が付与され、生体中における安定性が高くなることが期待されるので好ましい。
【００１５】
本明細書において、ペプチドまたはその誘導体の塩とは、ペプチドまたはその誘導体の薬理学的に許容される任意の塩（無機塩および有機塩を含む）をいい、例えば、ペプチドまたはその誘導体のナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アンモニウム塩、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、有機酸塩（酢酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、プロピオン酸塩、蟻酸塩、安息香酸塩、ピクリン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩等）等が挙げられ、好ましくは、アンモニウム塩、塩酸塩、硫酸塩および酢酸塩であり、より好ましくはアンモニウム塩および酢酸塩である。
【００１６】
本明細書において用語「アミノ酸の保存的置換」とは、以下の表１の各群内におけるアミノ酸間の置換をいう。
【００１７】
【表１】
【００１８】
この中で、好ましいアミノ酸の保存的置換としては、アスパラギン酸（D）とグルタミン酸（E）との間での置換、アルギニン（R）とリジン（K）とヒスチジン（H）との間での置換、トリプトファン（W）とフェニルアラニン（F）との間での置換、フェニルアラニン（F）とバリン（V）との間での置換、ロイシン（L）とイソロイシン（I）とアラニン（A）との間での置換、グリシン（G）とアラニン（A）との間での置換等が挙げられる。
【００１９】
１個以上のアミノ酸の保存的置換とは、好ましくは１個または数個のアミノ酸の保存的置換をいい、より好ましくは１〜３個、さらに好ましくは１〜２個、さらにより好ましくは１個のアミノ酸の保存的置換をいう。
【００２０】
１個以上のアミノ酸の欠失とは、好ましくは１個のアミノ酸の欠失である。
【００２１】
１個以上のアミノ酸の付加とは、好ましくは１〜６個、より好ましくは１〜４個、さらに好ましくは１〜３個、さらにより好ましくは１〜２個、さらに好ましくは１個のアミノ酸の付加をいう。
【００２２】
Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ(本明細書では、ペプチド配列をアミノ酸の一文字略号により表記する場合があり、例えば本ペプチドをＬＥＨＡという場合がある)において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有するペプチドとしては、例えば、ＬＥＨＡ配列に１個以上のアミノ酸の保存的置換を含むもの(例えば、ＩＥＨＡ、ＬＤＨＡ、ＬＤＫＡ、ＬＥＫＡ、ＬＥＨＷ、ＬＥＨＦ、ＬＥＨＶ、ＬＥＨＬ、ＬＥＨＩ、ＬＥＨＭ、ＬＥＨＧ、ＬＥＨＳ、ＬＥＨＴ等）、ＬＥＨＡ配列に１個以上のアミノ酸の欠失を含むもの(例えば、ＬＥＨ、ＥＨＡ、ＬＨＡ、ＬＥＡ等）、およびＬＥＨＡ配列に１個以上のアミノ酸を付加したもの（例えば、ＬＥＨＡＷ、ＬＥＨＡＦ、ＬＥＨＡＶ、ＬＥＨＡＬ、ＬＥＨＡＩ、ＬＥＨＡＭ、ＬＥＨＡＧ、ＬＥＨＡＳ、ＬＥＨＡＴ、ＡＬＥＨＡ、ＧＬＥＨＡ、ＳＬＥＨＡ、ＭＬＥＨＡ、ＴＬＥＨＡ、ＦＬＥＨＡ、ＳＬＥＨＡＴ、ＧＬＥＨＡＬ、ＤＬＥＨＡＬ、ＱＬＥＨＡＫ、ＳＬＥＨＡＤ、ＱＬＥＨＡＲ、ＥＦＬＥＨＡ、ＬＥＨＡＶＶ、ＤＰＥＬＥＨＡ、ＨＬＥＨＡＡＳ、ＬＥＨＡＳＶＤ等）等が挙げられるが、これらに限定されない。この中で好ましいペプチドとしては、ＩＥＨＡ、ＬＤＨＡ、ＬＤＫＡ、ＬＥＫＡ、ＬＥＨ、ＬＥＨＡＦ、ＦＬＥＨＡ、ＳＬＥＨＡＴ、ＧＬＥＨＡＬ、ＤＬＥＨＡＬ、ＱＬＥＨＡＫ、ＳＬＥＨＡＤ、ＱＬＥＨＡＲ、ＥＦＬＥＨＡ、ＬＥＨＡＶＶ、ＤＰＥＬＥＨＡ、ＨＬＥＨＡＡＳ、ＬＥＨＡＳＶＤ等が挙げられ、より好ましくはＬＥＫＡ、ＬＤＨＡ、ＬＥＨ、ＬＥＨＡＦである。
【００２３】
さらに例えば、ＬＥＨＡペプチドにおいてアミノ酸の保存的置換および欠失を有するペプチドとしては、特に限定されないが、ＩＥＨ、ＬＤＨ、ＬＤＫ、ＬＥＫ等が挙げられる。また例えば、ＬＥＨＡペプチドにおいてアミノ酸の欠失および付加を有するペプチドとしては、特に限定されないが、ＡＬＥＨ、ＧＬＥＨ、ＳＬＥＨ、ＭＬＥＨ、ＴＬＥＨ等が挙げられる。さらに例えば、ＬＥＨＡペプチドにおいてアミノ酸の保存的置換および付加を有するペプチドとしては、特に限定されないが、ＩＥＨＡＦ、ＬＤＨＡＦ、ＬＤＫＡＦ、ＬＥＫＡＦ等が好適な例として挙げられる。
【００２４】
本明細書において用語「細胞におけるエラスチン産生促進能を有する」とは、被験物を細胞に作用させた場合に、当該被験物を細胞に作用させない場合と比較して、細胞におけるエラスチン産生量が増加することを意味する。特定の態様では、当該用語における細胞とは線維芽細胞を意味し、さらに特定の態様では皮膚線維芽細胞を意味する。
【００２５】
本発明に用いられるペプチドは、当該分野で公知の方法により作製され得る。例えば、本発明のペプチドは、化学合成方法（例えば、固相法（例えば、Ｆｍｏｃ法）、液相法等）により合成されてもよく、また遺伝子組換え発現等の方法により作製されてもよい。なお本発明のペプチドを構成するアミノ酸は、Ｌ体であってもＤ体であってもよいが、好ましくはＬ体である。
【００２６】
さらに本発明のペプチドは、目的のアミノ酸配列を含むタンパク質から、目的のアミノ酸配列からなるペプチドをプロテアーゼ処理等の公知の手段によって切り出すことによっても調製され得る。例えば、ＬＥＨＡ配列を含むタンパク質としては、以下の表２に示すようなタンパク質が挙げられる。
【００２７】
【表２】
【００２８】
当業者は、プロテアーゼの配列特異性等を考慮して、目的のアミノ酸配列を含むタンパク質から、目的のアミノ酸配列からなるペプチドを切り出すために適切なプロテアーゼを適宜選択し得る。例えば、上記ニンジン由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、サーモリシン（Bacillus thermoproteolyticus由来）とキモトリプシン（ウシ膵臓由来）とを併用することなどが挙げられる。また、例えば、上記ジャガイモ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、プロテアーゼM「アマノ」G（Aspergillus oryzae 由来：天野エンザイム（株）製）と前記サーモリシンとを併用することなどが挙げられる。また、例えば、上記イネ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、前記プロテアーゼM「アマノ」Gと前記サーモリシンとを併用することなどが挙げられる。また、例えば、上記ダイズ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、前記サーモリシンを使用することなどが挙げられる。また、例えば、上記インゲンマメ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、前記キモトリプシンと前記サーモリシンとを併用することなどが挙げられる。また、例えば、上記キャッサバ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、前記キモトリプシンと前記サーモリシンとを併用することなどが挙げられる。また、例えば、上記カワヤツメ由来のタンパク質からＬＥＨＡ配列を切り出すためには、トリプシン（ブタ膵臓由来）と前記サーモリシンとを併用することなどが挙げられる。目的のアミノ酸配列を含むタンパク質とプロテアーゼの組合せは、上記の組合せに限定されないが、好ましい組合せとしては、ダイズタンパク質とサーモリシンの組合せが挙げられる。
【００２９】
タンパク質をプロテアーゼで加水分解する場合に用いられる反応条件は、特に制限されず、技術常識に従って当業者により適宜選択され得る。例えば、市販のプロテアーゼを使用する場合には、その使用説明書に従って反応条件を選択することができる。一般的には、３０〜８０℃、好ましくは４０〜７０℃、より好ましくは５０〜６０℃の反応温度が使用され得る。また一般的には、２〜３０時間、好ましくは３〜２４時間、より好ましくは１０〜２０時間、特に好ましくは１２〜１８時間の反応時間が使用され得る。反応ｐＨとしては、使用するプロテアーゼの至適ｐＨ付近であることが好ましい。反応の停止手段についても、特に制限はなく、公知の手段を用いることができる。かかる手段としては、例えば、８５℃で１５分間加熱や１００℃で５分間加熱等の加熱処理等が挙げられる。
【００３０】
プロテアーゼによる加水分解処理後には、当該分野で公知の手段によって精製することにより、目的のペプチドを得ることができる。かかる公知の手段としては、例えば、強酸性イオン交換樹脂やオクタデシルシリカ（ＯＤＳ）樹脂などが利用され得る。例えば、プロテアーゼ処理後のペプチド水溶液をＯＤＳ樹脂に吸着させて任意の濃度の有機溶媒（例えば、アセトニトリル等）で溶出することにより、目的のペプチドを精製することができる。あるいは、例えば、プロテアーゼ処理後のペプチド水溶液を強酸性イオン交換樹脂に吸着させて、約０．１８Ｍ〜０．２５Ｍ塩濃度の溶出液（例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム等）、より好ましくは約０．２０Ｍ〜０．２３Ｍ塩濃度の溶出液で溶出することにより、目的のペプチドを精製することができる。
【００３１】
このように、天然のタンパク質をプロテアーゼで加水分解して得られるペプチドは、化学合成方法で製造する場合よりもコスト面から有利となる。さらに、天然のタンパク質をプロテアーゼで加水分解して得られるペプチドは、生体に対してより安全であると考えられる。従って、このようにして得られたペプチドは、生体への適用に対しより高い安全性が求められる内服剤や食品、敏感肌用化粧料、飼料などに好適に使用され得る。
【００３２】
本発明のペプチドの誘導体は、Ｆｍｏｃ法による固相合成法（L.A.Carpino, G.Y.Han, J.Am.Chem.Soc., 92, 5748 (1970)）等に従って、当該分野で公知の方法により作製され得る。
【００３３】
本発明のペプチドの塩もまた、当該分野で公知の任意の方法により、当業者によって作製され得る。
【００３４】
本発明において、上述のＬＥＨＡペプチド類は、１種単独で使用しても、また２種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。
【００３５】
本発明のエラスチン産生促進剤におけるＬＥＨＡペプチド類の含有量は、本願効果を奏し得る限り特に制限されないが、通常はエラスチン産生促進剤全体に対して０．００００１〜１００重量％程度、好ましくは０．０００１〜７０重量％程度とするのがよい。特に本発明のエラスチン産生促進剤が外用剤の形態をとる場合には、皮膚に対してより直接的に作用できるので上記含有量は少なくてもよく、例えば０．００００１〜５重量％、より好ましくは０．０００１〜１重量％、さらに好ましくは０．０００１〜０．１重量％としても十分な本願効果が得られる。
【００３６】
本発明のエラスチン産生促進剤には、前述したＬＥＨＡペプチド類に加えて、当該ＬＥＨＡペプチド類の作用を増強または補足する目的で、あるいは本発明のエラスチン産生促進剤に他の有用な作用を付加するため、美白成分、抗炎症成分、抗菌成分、細胞賦活化成分、収斂成分、抗酸化成分、ニキビ改善成分、ヒアルロン酸等の生体成分合成促進成分、血行促進成分、保湿成分、老化防止成分等の各種成分を１種または２種以上組み合わせて配合してもよい。好ましくは美白成分、抗炎症成分、抗菌成分、細胞賦活化成分、収斂成分、抗酸化成分、老化防止成分または保湿成分の１種または２種以上の成分が用いられる。これらの各成分としては、医薬品、医薬部外品、食品または化粧品分野などにおいて使用され得るものであれば特に制限されず、任意のものを適宜選択し使用することができる。
【００３７】
例えば、美白成分としては、プラセンタ；アルブチン；コウジ酸；エラグ酸；フィチン酸；ルシノール；カモミラＥＴ；ビタミンＡ又はその誘導体、パントテン酸又はその誘導体等のビタミン類等が挙げられる。このうち、好ましいものとしては、パントテン酸又はその誘導体、エラグ酸、フィチン酸、ビタミンＡ又はその誘導体を挙げることができる。これらの美白成分は１種または２種以上を用いてもよい。
【００３８】
美白作用を有する植物成分を美白成分として用いてもよく、かかる植物成分としては、イリス（アイリス）、アーモンド、アロエ、イチョウ、ウーロン茶、エイジツ、オウゴン、オウレン、オトギリソウ、オドリコソウ、海藻、カッコン、クチナシ、クジン、クロレラ、ゴバイシ、コムギ、コメ、コメハイガ、オリザノール、コメヌカ、サイシン、サンショウ、シソ、シャクヤク、センキュウ、ソウハクヒ、ダイズ、納豆、茶、トウキ、トウキンセンカ、ニンニク、ハマメリス、ベニバナ、ボタンピ、ヨクイニン、トウキ、アメジスト、アセンヤク、アセビワラビ、イヌマキ、エノキ、カキ(Diospyros kaki)、キササゲ、クロマメ、ゲンチアナ、ゲンジン、サルサ、サヤインゲン、ショクマ、ジュウロウ、セージ、ゼンコ、ダイコン、ツツジ、ツクシハギ、トシン、ニガキ、パセリ、ヒイラギ、ホップ、マルバハギ、チョウジ、カンゾウ等の植物に由来する成分が挙げられる。好ましくは、イリス（アイリス）、アロエ、イチョウ、ウーロン茶、エイジツ、オウゴン、オウレン、オトギリソウ、オドリコソウ、海藻、カッコン、クチナシ、クジン、ゴバイシ、コムギ、コメ、コメヌカ、サイシン、サンショウ、シソ、シャクヤク、センキュウ、ソウハクヒ、茶、トウキ、トウキンセンカ、ハマメリス、ベニバナ、ボタンピ、ヨクイニン、アメジスト、アセンヤク、エノキ、カキ(Diospyros kaki)、キササゲ、クロマメ、ゲンチアナ、サルサ、サヤインゲン、ジュウロウ、セージ、ゼンコ、ダイコン、ツツジ、ツクシハギ、トシン、ニガキ、パセリ、ヒイラギ、ホップ、チョウジ、カンゾウ及びトウキの植物由来成分であり、より好ましくは、イリス（アイリス）、アロエ、イチョウ、エイジツ、オウゴン、オウレン、オトギリソウ、クチナシ、クジン、コメ、コメヌカ、サイシン、シャクヤク、センキュウ、ソウハクヒ、茶、トウキ、トウキンセンカ、ハマメリス、ベニバナ、ボタンピ、アメジスト、アセンヤク、エノキ、カキ(Diospyros kaki)、セージ、ダイコン、ツツジ、パセリ、ホップ、カンゾウ及びヨクイニンの植物由来成分が挙げられる。これらの植物成分を本発明のエラスチン産生促進剤に用いる場合、植物成分の形態は特に制限されないが、通常は植物エキス（植物抽出物）や精油などの態様で使用することができる。なお、上記植物成分中に記載の（ ）内は、その植物の学名、別名または生薬名である。
【００３９】
上記美白成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、好ましくは０．０００３〜１０重量％であり、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００４０】
美白成分として美白作用のある植物成分を用いる場合は、目的に応じて１種もしくは２種以上を任意に組み合わせて使用することができる。上記植物成分を美白成分として用いる場合、本願エラスチン産生促進剤への配合割合は、エキスや精油などの抽出物換算で、通常０．００００１〜２０重量％、好ましくは０．０００１〜１５重量％、より好ましくは０．００１〜１０重量％である。
【００４１】
抗炎症成分としては、アラントイン、カラミン、グリチルリチン酸又はその誘導体、グリチルレチン酸又はその誘導体、酸化亜鉛、グアイアズレン、酢酸トコフェロール、塩酸ピリドキシン、メントール、カンフル、テレピン油、インドメタシン、サリチル酸又はその誘導体等が挙げられる。好ましくはアラントイン、グリチルリチン酸又はその誘導体、グリチルレチン酸又はその誘導体、グアイアズレン、メントールである。
【００４２】
上記抗炎症成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、好ましくは０．０００３〜１０重量％であり、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００４３】
抗菌成分としては、クロルヘキシジン、サリチル酸、塩化ベンザルコニウム、アクリノール、エタノール、塩化ベンゼトニウム、クレゾール、グルコン酸及びその誘導体、ポピドンヨード、ヨウ化カリウム、ヨウ素、イソプロピルメチルフェノール、トリクロカルバン、トリクロサン、感光素１０１号、感光素２０１号、パラベン、フェノキシエタノール、１，２-ペンタンジオール、塩酸アルキルジアミノグリシン等が挙げられる。好ましくは、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、グルコン酸及びその誘導体、イソプロピルメチルフェノール、トリクロカルバン、トリクロサン、感光素１０１号、感光素２０１号、パラベン、フェノキシエタノール、１，２-ペンタンジオール、塩酸アルキルジアミノグリシン等が挙げられる。さらに好ましくは、塩化ベンザルコニウム、グルコン酸及びその誘導体、塩化ベンゼトニウム、イソプロピルメチルフェノールである。
【００４４】
上記抗菌成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、好ましくは０．０００３〜１０重量％であり、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００４５】
細胞賦活化成分としては、γ-アミノ酪酸、ε-アミノカプロン酸などのアミノ酸類：レチノール、チアミン、リボフラビン、塩酸ピリドキシン、パントテン酸類などのビタミン類：グリコール酸、乳酸などのα-ヒドロキシ酸類：タンニン、フラボノイド、サポニン、アラントイン、感光素301号などが挙げられる。好ましくは、γ-アミノ酪酸、ε-アミノカプロン酸などのアミノ酸類：レチノール、チアミン、リボフラビン、塩酸ピリドキシン、パントテン酸類などのビタミン類である。
【００４６】
上記細胞賦活化成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、好ましくは０．０００３〜１０重量％であり、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００４７】
収斂成分としては、ミョウバン、クロロヒドロキシアルミニウム、塩化アルミニウム、アラントインアルミニウム塩、硫酸亜鉛、硫酸アルミニウムカリウム等の金属塩；タンニン酸、クエン酸、乳酸、コハク酸などの有機酸を挙げることができる。好ましくは、ミョウバン、クロロヒドロキシアルミニウム、塩化アルミニウム、アラントインアルミニウム塩、硫酸アルミニウムカリウム、タンニン酸である。
【００４８】
収斂成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、通常０.０００３〜１０重量％、好ましくは０．０１〜５重量％、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００４９】
抗酸化成分としては、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルヒドロキシトルエン、亜硫酸水素ナトリウム、エリソルビン酸及びその塩、フラボノイド、グルタチオン、グルタチオンペルオキシダーゼ、グルタチオン-Ｓ-トランスフェラーゼ、カタラーゼ、スーパーオキサイドジスムターゼ、チオレドキシン、タウリン、チオタウリン、ヒポタウリンなどが挙げられる。好ましくは、チオタウリン、ヒポタウリン、チオレドキシン、フラボノイドである。
【００５０】
抗酸化成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、通常０.００００１〜１０重量％、好ましくは０．０００１〜５重量％、より好ましくは０．００１〜５重量％である。
【００５１】
老化防止成分としては、レチノイド（レチノール、レチノイン酸、レチナール等）、パンガミン酸、ウルソール酸、ウコンエキス、スフィンゴシン誘導体、ケイ素、ケイ酸、Ｎ−メチル−Ｌ−セリン、メバロノラクトン等が挙げられる。好ましくは、レチノイド（レチノール、レチノイン酸、レチナール等）である。
【００５２】
上記老化防止成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合は、好ましくは０．０００３〜１０重量％であり、より好ましくは０．０１〜５重量％である。
【００５３】
保湿成分としては、アラニン、セリン、ロイシン、イソロイシン、スレオニン、グリシン、プロリン、ヒドロキシプロリン、グルコサミン、テアニンなどのアミノ酸及びその誘導体；グリセリン、1,3-ブチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどの多価アルコール；ソルビトールなどの糖アルコール；レシチン、水素添加レシチン等のリン脂質；プロピレングリコール、ヘパリン、コンドロイチン、ヒアルロン酸又はその塩（例えば、ヒアルロン酸ナトリウム等）、アセチル化ヒアルロン酸又はその塩（例えば、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム等）等のムコ多糖；乳酸、ピロリドンカルボン酸ナトリウム、尿素などのＮＭＦ由来成分等が挙げられる。好ましいものは、アラニン、セリン、グリシン、プロリン、ヒドロキシプロリン、グルコサミン、テアニン、コラーゲン、コラーゲンペプチド、グリセリン、1,3-ブチレングリコール、水素添加レシチン、プロピレングリコール、ヘパリン、コンドロイチン、ヒアルロン酸又はその塩（例えば、ヒアルロン酸ナトリウム等）、アセチル化ヒアルロン酸又はその塩（例えば、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム等）、乳酸、ピロリドンカルボン酸ナトリウムである。
【００５４】
保湿成分を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合としては、通常０．１〜１０重量％、好ましくは０．５〜５重量％、より好ましくは０．５〜５重量％を挙げることができる。
【００５５】
またとりわけ本発明のエラスチン産生促進剤に、エラスターゼ阻害剤を組合せて配合することが特に好ましい。本発明のエラスチン産生促進剤に、エラスターゼ阻害剤を組合せて配合することにより、ＬＥＨＡペプチド類によるエラスチン産生促進効果と共に、エラスターゼにより引き起こされるエラスチン分解を抑制する効果も得られるので、両者の効果が相まって、生体におけるエラスチン量を飛躍的に高める製剤とすることができる。
【００５６】
エラスターゼ阻害剤としては、例えば、オトギリソウ抽出物（オトギリソウ科に属するオトギリソウ（Hypericum erectum Thumb）又はセイヨウオトギリソウ（Hypericum perforatum L.）の抽出物）、クロレラ抽出物、ビルベリー葉抽出物、アルゲエキス又は褐藻抽出物、緑藻抽出物、イリス根抽出物、加水分解ペポカボチャ種子油粕、加水分解バレイショタンパク、アセンヤク抽出物、エンドウ抽出物、ヒバマタ抽出物、コンフリー抽出物、トルメンチラ抽出物、フユボダイジュ抽出物などが挙げられるが、これらに限定されない。上記植物の抽出物は、任意の抽出溶媒（例えば、水、エタノール、メタノール、アセトン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、又はこれらの混合物など）を用いて、当該分野で一般的な方法により得ることができる。好ましくは、エラスターゼ阻害剤としては、オトギリソウ抽出物が用いられる。
【００５７】
エラスターゼ阻害剤を用いる場合、本願エラスチン産生促進剤に配合する割合としては、特に制限されないが、通常０．０００１〜２０重量％、好ましくは０．００１〜１０重量％、より好ましくは０．０１〜５重量％を挙げることができる。
【００５８】
本発明のエラスチン産生促進剤は、上記各成分に加えてエラスチン産生促進剤の用途あるいは剤形に応じて、医薬品、医薬部外品、化粧品または食品などの分野に通常使用される成分を適宜配合しても良い。配合できる成分としては、特に制限されないが、例えば、アミノ酸類、アルコール類、多価アルコール類、糖類、ガム質、多糖類などの高分子化合物、界面活性剤、可溶化成分、油脂類、経皮吸収促進成分、防腐・抗菌・殺菌剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、抗酸化剤、酵素成分、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動化剤、清涼化剤の他、ミネラル類、細胞賦活剤、滋養強壮剤、賦形剤、増粘剤、安定化剤、保存剤、等張化剤、分散剤、吸着剤、崩壊補助剤、湿潤剤または湿潤調節剤、防湿剤、着色料、着香剤または香料、芳香剤、還元剤、可溶化剤、溶解補助剤、発泡剤、粘稠剤または粘稠化剤、溶剤、基剤、乳化剤、可塑剤、緩衝剤、光沢化剤などをあげることができる。特に本発明のエラスチン産生促進剤が外用剤の形態をとる場合には、界面活性剤、可溶化成分または油脂類を配合することによって当該エラスチン産生促進剤の使用感をより向上させることができる。また外用剤の形態をとる場合には、更に経皮吸収促進成分を配合するのがより高い効果を得る観点から好ましい。
【００５９】
ここで用いられる界面活性剤としては、ポリオキシエチレン（以下、ＰＯＥという）−オクチルドデシルアルコールやＰＯＥ−２−デシルテトラデシルアルコール等のＰＯＥ−分岐アルキルエーテル；ＰＯＥ −オレイルアルコールエーテルやＰＯＥ−セチルアルコールエーテル等のＰＯＥ−アルキルエーテル；ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノイソステアレート及びソルビタンモノラウレート等のソルビタンエステル；ＰＯＥ−ソルビタンモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビタンモノイソステアレート、及びＰＯＥ−ソルビタンモノラウレート等のＰＯＥ−ソルビタンエステル；グリセリンモノオレエート、グリセリンモノステアレート、及びグリセリンモノミリステート等のグリセリン脂肪酸エステル；ＰＯＥ−グリセリンモノオレエート、ＰＯＥ−グリセリンモノステアレート、及びＰＯＥ−グリセリンモノミリステート等のＰＯＥ−グリセリン脂肪酸エステル；ＰＯＥ−ジヒドロコレステロールエステル、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油、及びＰＯＥ−硬化ヒマシ油イソステアレート等のＰＯＥ−硬化ヒマシ油脂肪酸エステル；ＰＯＥ−オクチルフェニルエーテル等のＰＯＥ−アルキルアリールエーテル；モノイソステアリルグリセリルエーテルやモノミリスチルグリセリルエーテル等のグリセリンアルキルエーテル；ＰＯＥ−モノステアリルグリセリルエーテル、ＰＯＥ−モノミリスチルグリセリルエーテル等のＰＯＥ−グリセリンアルキルエーテル；ジグリセリルモノステアレート、デカグリセリルデカステアレート、デカグリセリルデカイソステアレート、及びジグリセリルジイソステアレート等のポリグリセリン脂肪酸エステル、等の各種非イオン界面活性剤：あるいはレシチン、水素添加レシチン、サポニン、サーファクチンナトリウム、コレステロール、胆汁酸などの天然由来の界面活性剤等を例示することができる。これらの界面活性剤は、１種単独で使用してもまた２種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。
【００６０】
界面活性剤を使用する場合、本願エラスチン産生促進剤への配合割合としては、本発明の効果を妨げないことを限度として特に制限されず、通常はエラスチン産生促進剤中に０．０１〜３０重量％の割合で含まれるような範囲で適宜選択して使用することができる。エラスチン産生促進剤中における有効成分の安定性等の観点からは、好ましくは０．１〜２０重量％、より好ましくは０．５〜１０重量％の範囲を挙げることができる。
【００６１】
可溶化成分としては、例えば、エタノール等の低級アルコール、グリセリン，エチレングリコール等の多価アルコール、水素添加大豆リン脂質、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンラノリンアルコール、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンステロール、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル等を挙げることができる。好ましくは、エタノール、グリセリン、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、水素添加大豆リン脂質、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンラノリンアルコール、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテルであり、より好ましくは、エタノール、グリセリン、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、水素添加大豆リン脂質である。これらの可溶化成分は、１種単独で使用しても、または２種以上を任意に組み合わせて用いてもよい。
【００６２】
これらの可溶化成分を使用する場合、本願エラスチン産生促進剤への配合割合としては、本発明の効果を妨げないことを限度として特に制限されず、通常はエラスチン産生促進剤中に０．０１〜７０重量％の割合で含まれるような範囲で適宜選択して使用することができる。エラスチン産生促進剤中における有効成分の安定性等の観点からは、好ましくは０．１〜５０重量％、より好ましくは０．１〜３０重量％の範囲を挙げることができる。
【００６３】
油脂類としては、例えば、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の合成油脂；大豆油、米油、菜種油、綿実油、ゴマ油、サフラワー油、ヒマシ油、オリーブ油、カカオ油、椿油、ヒマワリ油、パーム油、アマ油、シソ油、シア油、サル油、ヤシ油、木ロウ、ホホバ油、グレープシード油、及びアボガド油等の植物油脂；ミンク油、卵黄油、牛脂、乳脂、及び豚脂等の動物油脂；ミツロウ、鯨ロウ、ラノリン、カルナウバロウ、キャンデリラロウ等のロウ類；流動パラフィン、スクワレン、スクワラン、マイクロクリスタリンワックス、セレシンワックス、パラフィンワックス、ワセリン等の炭化水素類；ラウリン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、ベヘニン酸等の天然及び合成脂肪酸；セタノール、ステアリルアルコール、ヘキシルデカノール、オクチルデカノール、ラウリルアルコール等の天然及び合成高級アルコール；ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、オレイン酸オクチルドデシル、コレステロールオレート等のエステルやエーテル類；シリコーン油等が挙げられる。これらの油脂類は、１種単独で使用しても、または２種以上を任意に組み合わせて用いてもよい。
【００６４】
これらの油脂類を使用する場合、本願エラスチン産生促進剤への配合割合としては、本発明の効果を妨げないことを限度として特に制限されず、通常はエラスチン産生促進剤中に０．０１〜７０重量％の割合で含まれるような範囲で適宜選択して使用することができる。エラスチン産生促進剤中における有効成分の安定性等の観点からは、好ましくは０．１〜６０重量％、より好ましくは０．１〜５０重量％の範囲を挙げることができる。
【００６５】
本発明のエラスチン産生促進剤は、その用途に応じて、医薬品、医薬部外品、化粧品又は食品などに通常使用される剤形をとることができ、通常、固形剤、半固形剤または液剤である。具体的には、錠剤（口腔内側崩壊錠、咀嚼可能錠、発泡錠、トローチ剤、ゼリー状ドロップ剤などを含む）、丸剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、ドライシロップ剤、液剤（ドリンク剤、懸濁剤、シロップ剤を含む）、ゲル剤、リポソーム剤、エキス剤、チンキ剤、レモネード剤、軟膏剤、ゼリー剤などの公知の形態をとることができる。また、必要に応じてその他の溶媒や通常使用される基剤等を配合することによって、ペースト状、ムース状、ジェル状、液状、乳液状、クリーム状、シート状（基材担持）、エアゾール状、スプレー状などの各種所望の形態に調製することができる。
【００６６】
これらの剤形は当該分野の通常の方法にて製造することができる。例えば、半固形剤であれば、上述のＬＥＨＡペプチド類に加えて必要に応じて上記各任意成分を配合混合し、さらに必要に応じてその他の溶媒や通常使用される基剤等を配合することによって、ペースト状、ムース状、ジェル状、液状、乳液状、クリーム状、シート状（基材担持）、エアゾール状、スプレー状などの各種所望の形態に調製することができる。
【００６７】
本発明のエラスチン産生促進剤は、本発明の効果を奏すれば特に限定されないが、例えば医薬品、医薬部外品、食品［菓子、健康食品、栄養補助食品（バランス栄養食、サプリメントなど）を含む）、栄養機能食品、特定保健用食品を含む］などとすることができ、また化粧品ではファンデーション、口紅、マスカラ、アイシャドウ、アイライナー、眉墨及び美爪料等のメーキャップ化粧料；ローション（化粧水や乳液など）、クリーム、オイル、パック、ゲル剤（ジェル状美容液やジェルクリームなど）などの基礎化粧料；洗顔料やクレンジング、ボディ洗浄料などの洗浄料、入浴剤などとすることができる。
【００６８】
本発明のエラスチン産生促進剤は、任意の用途に用いることができ、内服剤としても外用剤としても用いることができるが、皮膚においてより直接的に高い効果を得るためには、外用剤として使用されることが好ましい。
また、本発明のエラスチン産生促進剤は研究試薬（例えば、in vitroで用いる研究試薬）などとしても好適に用いられ得る。
【００６９】
本発明のエラスチン産生促進剤は、顕著に高いエラスチン産生促進能を有することから、細胞におけるエラスチン産生を促進して生体におけるエラスチン量を高めるために使用され得る。従って本発明のエラスチン産生促進剤は、生体におけるエラスチン量を高めて真皮、靭帯、腱、血管壁、骨、軟骨などの強度や弾力性を高めるために用いることができ、例えば、エラスチン減少に伴う各種障害の治療又は予防のために（例えば、正常エラスチンの欠乏により引き起こされる動脈硬化等の血管系疾患の治療又は予防等のために）、美容上の問題を予防又は治療するために（例えば、加齢や紫外線、活性酸素、ストレス等に因るエラスチン減少により引き起こされる、皮膚のシワもしくはタルミの予防および／または改善のため、或いは皮膚の弾力性もしくはハリの低下に対する予防および／または改善のために）好適に用いられ得る。また本発明のエラスチン産生促進剤は、エラスチン産生に関連する状態を解明するための実験用研究試薬などとしても好適に使用され得る。
【実施例】
【００７０】
以下に、実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
【００７１】
実施例１
ＬＥＨＡペプチドの調製
ペプチドを、ペプチド自動合成装置(島津製作所社製：ＰＳＳＭ８)を用いて、Ｆｍｏｃ法による固相合成法により合成した。次いで、分取ＨＰＬＣで未反応物を除去して精製することにより、ＬＥＨＡペプチドを得た。
【００７２】
得られた精製物を分析用逆相高速液体クロマトグラフィー［カラム：μＢｏｎｄａｓｐｈｅｒｅ ５μ Ｃ１８−１００Å (内径： 3.9mm、長さ： 150mm) 、Ｗａｔｅｒｓ社製、；移動相：溶媒Ａ（0.１％トリフルオロ酢酸）および溶媒Ｂ（0.１％トリフルオロ酢酸、９０％アセトニトリル）のグラジエント（０分（溶媒Ｂ＝１２％）〜２０分（溶媒Ｂ＝１７％））；流速：1 ml／分；検出法：波長 220nmにおける吸光度］に付したところ、12.8分に単一の鋭いピークが示され、純度は99％であった。
【００７３】
実施例２
皮膚線維芽細胞におけるエラスチン産生促進検定
ヒト正常皮膚由来線維芽細胞（ＣＲＬ−１８３６；ＡＴＣＣ）を、６０φシャーレ中で培養した。より詳細には、２５００細胞／１ｃｍ２の密度でシャーレに播種し、３７℃で、５％炭酸ガスおよび９５％空気の環境下で、サブコンフルエントになるまで６日間培養を行った。培養液は、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ）に牛胎仔血清（ＦＢＳ）を１０重量％の濃度で含有した培地を３ｍｌ使用した。次いで、ＦＢＳを添加しない上記培養液（すなわち無血清培地）に交換し、さらに１日間培養した。その後、実施例１で調製したＬＥＨＡペプチドを１０００μｇ／ｍｌ濃度添加した無血清培地３ｍｌに交換して７２時間培養した。一方、ＬＥＨＡペプチドを添加しない無血清培地３ｍｌに交換したものをコントロールとした。
【００７４】
７２時間培養後に、顕微鏡下で、ＬＥＨＡペプチドを添加したシャーレおよびコントロールシャーレ内の細胞の観察を行った。その結果、両シャーレ内の細胞数に際立った差異は認められず、また細胞形の異常なども特に認められなかった。
【００７５】
顕微鏡観察後、それぞれの培養細胞から、市販のＲＮＡ抽出キット（ＱＩＡＧＥＮ製、商品名：Ｒｎｅａｓｙ Ｍｉｎｉ）を用いてトータルＲＮＡを抽出した。得られたトータルＲＮＡから、常法に従ってｃＤＮＡを合成した。
【００７６】
エラスチンをコードする遺伝子の発現量の定量は、エラスチンの遺伝子配列に対するプライマーセットを含むキット（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製、商品名：ＴａｑＭａｎ（登録商標）Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ａｓｓａｙｓ、Ａｓｓａｙ ＩＤ：Ｈｓ００３５５７８３＿ｍ１）を用いて行った。このキットを添付のプロトコールに従って用い、上記で調製した各ｃＤＮＡと共にＡＢＩリアルタイムＰＣＲシステム（機器名：ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ（登録商標）７０００ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｄｅｃｅｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製））にかけ、エラスチンの発現量を定量した。
【００７７】
定量結果をもとに、コントロールにおける発現量を１００％として、ＬＥＨＡペプチドを添加して培養した細胞におけるエラスチン遺伝子の発現量を算出した。その結果、ＬＥＨＡペプチドを添加した培養液で培養することにより、ヒト正常皮膚由来線維芽細胞のエラスチン遺伝子の発現量は４６７％にまで飛躍的に高まることが見出された。従ってこの実験結果から、ＬＥＨＡペプチドが、細胞内におけるエラスチン産生を著しく増強し得るものであることが確認された。
【００７８】
以下に製剤実施例を挙げるが、本発明はこれらの実施例に限られるものではない。
【００７９】
製剤実施例１：乳液
〔成分〕 〔比率〕
ＬＥＨＡペプチド ０．０１
スクワラン ２．０
流動パラフィン ５．０
セタノール ０．５
モノステアリン酸グリセリル ２．０
ＰＯＥ（２５）セチルエーテル ２．０
グリセリン ４．０
１,３-ブチレングリコール ６．０
ｐＨ調整剤 適量
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
１００．０重量％
【００８０】
製剤実施例２：クリーム
〔成分〕 〔比率〕
ＬＥＨＡペプチド ０．０１
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物＊ ０．５
ワセリン １．０
スクワラン ５．０
流動パラフィン １０．０
ステアリン酸 １．５
ステアリルアルコール ２．０
モノステアリン酸グリセリル ２．０
ＰＯＥ（２０）セチルエーテル ３．０
グリセリン ６．０
１,３-ブチレングリコール ８．０
ｐＨ調整剤 適量
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
１００．０重量％
＊ダイズタンパク質をサーモリシン（EC3.4.24.4）で分解した後に得られる多種多様なペプチドを実質的に全て含んだ状態のもの：平均分子量1500（ゲル浸透クロマトグラフィー（GPC）法による測定）。
【００８１】
製剤実施例３：化粧水
〔成分〕 〔比率〕
ＬＥＨＡペプチド ０．００５
ヒアルロン酸ナトリウム ０．１
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノイソステアリン酸エステル ０．３
コハク酸 ０．２
コハク酸ナトリウム ０．５
エデト酸三ナトリウム ０．０５
１,３-ブチレングリコール ６．０
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
１００．０重量％
【００８２】
製剤実施例４：乳液
〔成分〕 〔比率〕
ＬＥＨＡペプチド ０．０１
オトギリソウ抽出物（エラスターゼ阻害剤） １．０
スクワラン ２．０
流動パラフィン ５．０
セタノール ０．５
モノステアリン酸グリセリル ２．０
ＰＯＥ（２５）セチルエーテル ２．０
グリセリン ４．０
１，３−ブチレングリコール ６．０
ｐＨ調整剤 適量
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
１００．０重量％
【００８３】
製剤実施例５：飲料
〔成分〕 〔比率〕
ＬＥＨＡペプチド ０．０１
フィッシュコラーゲンペプチド ０．５
ビタミンＢ２ ０．００５
エリスリトール １０.０
酸味料 １．０
甘味料 １．０
香料 ０．０１
精製水 残量
１００．０重量％
【配列表フリーテキスト】
【００８４】
配列番号１は、本発明に使用され得るペプチドである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）で表されるペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤。
【請求項２】
Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）のアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有し且つ細胞におけるエラスチン産生促進能を有するペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤。
【請求項３】
前記ペプチドが３〜１０残基のアミノ酸長を有する、請求項２に記載のエラスチン産生促進剤。
【請求項４】
さらにエラスターゼ阻害剤を含有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載のエラスチン産生促進剤。
【請求項１】
Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）で表されるペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤。
【請求項２】
Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ（式Ｉ）のアミノ酸配列において１個以上のアミノ酸の保存的置換、欠失および／または付加を有し且つ細胞におけるエラスチン産生促進能を有するペプチド、その誘導体及びそれらの塩からなる群より選択される少なくとも一種を含有する、エラスチン産生促進剤。
【請求項３】
前記ペプチドが３〜１０残基のアミノ酸長を有する、請求項２に記載のエラスチン産生促進剤。
【請求項４】
さらにエラスターゼ阻害剤を含有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載のエラスチン産生促進剤。
【公開番号】特開２００８−７４７８８（Ｐ２００８−７４７８８Ａ）
【公開日】平成２０年４月３日（２００８．４．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−２５７４４５（Ｐ２００６−２５７４４５）
【出願日】平成１８年９月２２日（２００６．９．２２）
【出願人】（０００１１５９９１）ロート製薬株式会社 (366)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年４月３日（２００８．４．３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年９月２２日（２００６．９．２２）
【出願人】（０００１１５９９１）ロート製薬株式会社 (366)
【Ｆターム（参考）】
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