広域抗菌スペクトルを有する改変ココナッツ油
本発明は、１，３位特異的リパーゼの触媒活性から得られる改変ココナッツ油及びパーム核油の抗菌組成物を開示する。前記改変油組成物は、遊離脂肪酸（＞９．４％）、モノグリセリド（＞１．３％）、ジグリセリド（＞２２．８％）並びにトリグリセリド（＞２５％）（これらはグラム陽性菌（すなわち黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｏｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、化膿連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅ））、グラム陰性菌（すなわちコレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ）、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ））及び酵母（すなわちカンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ））の増殖を阻害する）を含む。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌特性を有する改変油、詳細にはカプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸及びそれらに対応するモノグリセリドなどの８から１２個の炭素原子を有する中鎖脂肪酸の混合物を含有する改変ココナッツ油組成物に関する。前記改変ココナッツ油は、ココナッツ油への１，３位特異的リパーゼの触媒作用から得る。
【背景技術】
【０００２】
中鎖遊離脂肪酸及びこれらに対応するモノグリセリドは、単純ヘルペスウイルス（ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ）（Ｔｈｏｒｍａｒら１９８７；Ｋｒｉｓｔｍｕｎｄｓｄｏｔｔｉｒら１９９９）、淋菌（Ｎｅｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら１９９９）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら、２００１）、トラコーマクラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら、１９９８）、ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら、２００２）及び黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）（Ｋａｂａｒａ １９８４）などのヒトへの病原体を含むエンベロープウイルス及び種々の細菌に対してｉｎ ｖｉｔｒｏで広域な抗菌活性のスペクトルを有することが周知である（Ｋａｂａｒａ，１９７８；Ｓｈｉｂａｓａｋｉ及びＫａｔｏ、１９７８；Ｗｅｌｓｈら１９７９ Ｔｈｏｒｍａｒら、１９８７；Ｉｓａａｃｓら１９９５）。さらにこれらの化合物は、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）（Ｗａｎｇ及びＪｏｈｎｓｏｎ、１９９２）、毒素原性大腸菌（ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）（Ｐｅｔｓｃｈｏｗら１９９８）並びにボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）（Ｇｌａｓｓ及びＪｏｈｎｓｏｎ、２００４）などの食物によって広まる病原体に対する抗菌作用を有することも周知である。これらの脂質が細菌を殺すメカニズムは知られていないが、電子顕微鏡による研究は脂質が細胞膜透過性障壁を崩壊させることを示唆している（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら、１９９８；Ｔｈｏｒｍａｒら１９８７）。
【０００３】
飽和中鎖脂肪酸は、８から１２個の炭素原子（Ｃ６からＣ１２）を有する脂肪酸である。中鎖脂肪酸の内、ラウリン酸及びそれに対応するモノグリセリド、モノラウリンは、食物及び化粧品用の抗菌剤として包括的に研究されてきた（Ｓｈｉｂａｓａｋｉ及びＫａｔｏ、１９７８；Ｋａｂａｒａ、１９８４）。ラウリン酸は母乳中に含まれる疾患と戦う因子である。生体はラウリン酸を、ウイルス、細菌又は原生動物感染から幼児を防御する物質である脂肪酸誘導体（モノラウリン）に転換する。Ｈｉｅｒｈｏｌｚｅｒ及びＫａｂａｒａ（１９８２）は、脂質膜に囲まれているＲＮＡ及びＤＮＡウイルスに対してモノラウリンが殺ウイルス効果を有することを示した。
【０００４】
中鎖脂肪酸及びその対応するモノエステルのいくつかの適用における抗菌性化合物としての使用は特許化されており、すなわちモノラウリンは毛髪及び動物の毛の洗浄及びコンディショニングに使用されている（米国特許第５，３７８，７３１号）。前記抗菌性シャンプー組成物は、ヒト及び動物への使用に安全であるモノラウリンを含有している。モノラウリンは、抗真菌特性を必要とする化粧品類及び家事用品にも広範に使用することができる（米国特許第５，５６９，４６１号及び第５，６５８，５８４号）。さらにそれは、胃炎及び潰瘍を含む種々の胃腸疾患の原因となるヘリコバクター（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）属の細菌感染の治療用のバクテリオシン、すなわちナイシン（ｎｉｓｉｎ）と組み合わせることもできる（米国特許第５，６６０，８４２号：米国特許第５，８０４，５４９号）。これらの脂肪酸及びその誘導体は、ヒトの体重を制御又は減少させる栄養補助食品としても特許請求された（米国特許第６，０５４，４８０号）。追加的にこれらの化合物及びそのモノエステルは加工肉の微生物による汚染を減少させるために使用することができるし、詳細には家禽の死体を殺菌するための製品及び方法に関する。さらに、乳生産動物にいる有害な微生物の殺菌を補助する（米国特許第６，６９９，９０７号）。これらは、皮膚、粘膜及び毛髪の損傷の治療の効果的な方法でもある（米国特許第５，２０８，２５７号）。最近の発明は、これらの脂肪酸がアルツハイマー病並びにパーキンソン病、ハンチントン病及びてんかんを含むニューロンの代謝の減少に関連する他の疾患の治療のための治療用薬剤となることができることを示した（米国特許第６，８３５，７５０号）。
【０００５】
従来の研究は中鎖脂肪酸への感受性が種によって相当に変動することを示しており、特定の微生物が特定の脂肪酸及びモノグリセリドに感受性があった。例えばＢｅｒｇｓｓｏｎら１９９８は、ラウリン酸、カプリン酸及びモノカプリンが感染価を１００００倍を超えて減少させたことを示した。脂肪酸及びモノグリセリドを低濃度及び短い暴露時間でさらに比較した場合、ラウリン酸はカプリン酸及びモノカプリンよりも活性であり、濃度５ｍＭ ５分間でトラコーマクラミジア（Ｃ．ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）の１０００００倍を超える不活性化を生じた。モノカプリンと比較してモノラウリン及びモノカプリリンは濃度１０ｍＭにおいてトラコーマクラミジア（Ｃ．ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）についてごくわずかな効果を有する。Ｂｅｒｇｓｓｏｎら（２００２）が行った他の研究において、中鎖脂肪酸（Ｃ８、Ｃ１０及びＣ１２）及びそのモノグリセリド誘導体はサルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）種及び大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）に対して有意な抗菌活性を示さないことが見出された。しかし、この研究においてモノカプリン及びモノラウリンは濃度１０ｍＭ、３０分間、３７℃でピロリ菌（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）に対して最も活性であることが見出された。自然に汚染したカッテージチーズ中へのモノラウリンの２５０及び５００ｐｐｍでの混合は、シュ−ドモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）種及び大腸菌型の両方の９０％を超える阻害を生じた（Ｂａｕｔｉｓｔａら、１９９３）。カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）の場合、カプリン酸及びラウリン酸はその誘導体であるモノグリセリドと比較して最も急速で最も効果的な殺菌を生じる（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら２００１）。しかし、ミリスチン酸、パルミトレイン酸、オレイン酸及びその誘導体のモノグリセリドは抗菌効果を示さない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
これらの中鎖脂肪酸及びそのモノグリセリドが抗菌剤として作用する能力は変動すると考えられる。これらの化合物の有効性は常にその濃度及び含まれる微生物の種類に依存する。従来は中鎖脂肪酸及びこれらに対応するモノグリセリドの抗菌活性の試験は個別に行われた。試験は、ラウリン酸若しくはカプリン酸若しくはカプリル酸又はこれらに対応するモノグリセリドのいずれかを使用して行った。油培地における中鎖脂肪酸及びそれらそれぞれのモノグリセリド両方の相乗効果が実施及び報告されたことはない。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
したがって、ココナッツ油を１，３−特異的リパーゼで触媒することにより得られる改変ココナッツ油を提供することが本発明の目的であり、前記改変ココナッツ油は中鎖脂肪酸及びこれらに対応するモノグリセリドの有効量を含有し、ここで前記改変油は抗菌特性を有する。前記改変ココナッツ油はカプリル酸（Ｃ８）、カプリン酸（Ｃ１０）及びラウリル酸（Ｃ１２）を含む中鎖脂肪酸を含有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の目的に従って、本研究において、細菌、酵母、真菌及びウイルスに対する抗菌活性を有する中鎖脂肪酸（Ｃ８からＣ１２を特に重点的に）及びそのそれぞれのモノグリセリドを含有する改変ココナッツ油のプロフィールを得るための試みがなされた。ココナッツ油は中鎖脂肪酸の豊富な源であるという性質により選択された。ココナッツ油は飽和脂肪酸を９０％含み、その内４５から４８％はラウリン酸であり、３０から３６％は他の短鎖及び中鎖脂肪酸である。予備的研究は、ココナッツ油自体は抗菌活性を有さないことを示した（７％のジアシルグリセロールを含み、残りはトリグリセリドである）。ＨＰＴＬＣによる分析は、脂肪酸及びモノグリセリドが油組成物中に検出されることを示した。本発明は、抗菌特性を有する油を得るためだけでなく効果的であり強力な抗菌剤を得るために１，３位特異的リパーゼを使用する方法も含む。
【０００９】
本発明により１，３位特異的リパーゼを、細菌及び酵母に対して広域抗菌スペクトルを有する飽和中鎖脂肪酸及びそれらそれぞれのモノグリセリドのプロフィールを得るために特定の反応条件下でココナッツ油を改変するために使用する。改変ココナッツ油混合物は好ましくは、部分加水分解又はグリセロリシス反応から得られる多量の遊離脂肪酸（Ｃ８−Ｃ１２）及びそれらに対応するモノグリセリドを含む。本発明において使用される酵素は、リパーゼなどの酵素であり、好ましくは適切な酵素担体上に固定されている。前記特異的リパーゼは１，３位を有する、すなわちＬｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉ）。改変油を得るための反応は以下の通りであった。
【実施例】
【００１０】
反応１−改変１及び改変２
酵素反応は、１，３−位特異的リパーゼ２．５ｇをココナッツ油２５０ｇ及び蒸留水２．５ｍｌと共に使用して実施した。反応は４５℃、２５０ｒ．ｐ．ｍで実施した。試料を分析のために２４時間反応後（改変１）及び１２０時間反応後（改変２）に回収した。次いで試料から水を除去するために試料を硫酸ナトリウム粉末を含む漏斗に通した。油層を分離するために反応混合物を遠心分離した。高性能薄層クロマトグラフィー技術及びガスクロマトグラフィー技術を各油試料中の脂質のクラス及び脂肪酸組成を決定するために実施した。次いで、改変油を以下の抗菌活性について分析した、試験１：最小ミクロサイダル濃度（ＭＭＣ、＞９０％）及び試験２：時間−殺菌試験。
【００１１】
反応２−改変３
ココナッツ油２０ｍｌをグリセロール８ｇ及び蒸留水１６０μｌが入っている１２５ｍｌフラスコに加えた。反応混合物を３５℃、３００ｒ．ｐ．ｍでインキュベーション温度が３５℃に達するまでインキュベートした。次いで、Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ ２５０ｍｇを反応混合物に加え、３５℃で２４時間インキュベートした。次いで、油試料を２５℃に更に３日間置いた。
【００１２】
反応３−改変４
グリセロール３０．４ｇ、水１．０９ｍｌ、Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ １ｇ及びココナッツ油１００ｇの混合物を調製した。反応混合物をまず３０℃、６時間、８００ｒ．ｐ．ｍ．で一定に撹拌しながらインキュベートした。次いで、混合物を５℃に移し、分析の前に３日間まで置いた。
【００１３】
反応４−改変５
改変４に従って反応混合物を調製した。分析前に、反応を３０℃、８００ｒ．ｐ．ｍ．で１６時間実施した。
【００１４】
反応５−改変６
改変２から油２０ｍｌを、グリセロール８ｇ及び滅菌蒸留水１６０μｌを含む混合物に添加した。反応混合物を３５℃、３００ｒ．ｐ．ｍ．で予備インキュベートした。Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ ２５０ｍｇを混合物に加えることにより反応を開始し、反応は２４時間実施した。次いで、混合物を２５℃で３日間インキュベートした。
【００１５】
試験１：最小ミクロサイダル濃度（ＭＭＣ，＞９０％殺菌）
全てのウェルにブロス１２０μｌを入れた（ＢＨＩ、グラム陽性菌用は０．１％Ｔｗｅｅｎ８０；グラム陰性菌用はＴＢＳ；酵母用はＰＤＢを含む）。抗菌剤１２０μｌを最初のウェルに加えた。最初のウェルから混合物１２０μｌを２番目のウェルに移し、同様に１２番目のウェルまで続けた。１０５から１０６ｃｆｕ／ｍｌに調整した接種物を各ウェルに植え付けた。プレートを、細菌用は３７℃（２日間）、酵母用は３２℃（３日間）インキュベートした。結果を表１にＭＭＣ９０（最小殺菌濃度、＞９０％殺菌）で示した。
【００１６】
試験２：時間−殺菌試験
接種物はフラスコ中のブロス５０ｍｌ（グラム陽性菌用にはＢＨＩ；グラム陰性菌用にはＴＢＳ；酵母用にはＰＤＢ）に、ループを満たす量の細胞を植え付けることにより培養し、最適温度で終夜振盪した。これを、ろ過滅菌処理したＶＣＯを５０％含むＢＨＩ、ＴＳＢ又はＰＤＢブロスに接種するために使用した。開始接種物は１０４から１０６ｃｆｕ／ｍｌに調整した。一定時間ごとに反応混合物１ｍｌ採取し、リンゲル液中で一連の希釈を行った。生存可能なコロニーをプレートカウント寒天培地（ＰＣＡ）上でプレーティング希釈することにより数えた。プレートは、細菌用は３７℃（２日間）、酵母用は３２℃（３日間）インキュベートした。対照実験は５０％滅菌蒸留水の存在下で行った。
【表１】
【表２】
【表３】
【００１７】
以下の改変バージンココナッツ油及びパーム核油のプロフィールはその抗菌活性について試験し、微生物の多くの群に対して活性があることが見出された。
改変１−プロフィール１
【表４】
改変２−プロフィール２
【表５】
改変３−プロフィール３
【表６】
改変４−プロフィール４
【表７】
改変５−プロフィール５
【表８】
改変６−プロフィール６
【表９】
【００１８】
本発明により、例えば中鎖脂肪酸及びその対応するモノエステルを含有する抗菌組成物をココナッツ油の部分加水分解並びにグリセロリシスから得るための方法が提供される。改変油１及び改変油２は、バージンココナッツ油のそれぞれ２４時間及び１２０時間の加水分解反応から得た。ＭＭＣ９０としての抗菌活性（表１）及び時間−殺菌試験（表２）の試験は、改変１と比較して改変２がより強力な抗菌活性を有することを示した。これは、恐らく改変２（プロフィール２）中に含まれる多量の脂肪酸（１４％）によるものである。飽和中鎖脂肪酸、特にカプリル油、カプリン油及びラウリン油の含有量（ｍｇ／ｇ）が増加していた（プロフィール２）。しかし、プロフィール１及びプロフィール２による改変油組成物は大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）及びアクネ菌（Ｐ．ａｃｎｅ）の増殖を停止できないことが示された。時間−殺菌試験から明らかに、カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）の増殖は４８時間のインキュベーション後であっても１００％は阻害されなかった（表２）。改変１及び改変２はグラム陽性菌に対して効果的であり、それぞれ８時間及び２時間インキュベーション後に１００％阻害が認められた。予備的結果は、脂肪酸、すなわちＣ８、Ｃ１０及びＣ１２の含有量がグラム陽性菌の増殖の不活性化において重要な役割を果たしていることを示した。改変３、４、５及び６は改変１及び２とは異なる方法で調製した。これらはグリセロリシス反応から得た。全ての反応においてグリセロール及びＬｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭを添加した。
【００１９】
比較すると、改変３、４、５及び６はカンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉａｎｓ）の殺菌において改変１及び２よりも効果的であった。８時間インキュベーションで１００％阻害が認められた。カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対する最小ミクロバイアル濃度は２．４４ｍｇ／ｍｌと得られ、改変５ではより高濃度の例えば４．８８ｍｇ／ｍｌが必要であった。改変油試料において、改変３及び改変６は強力な抗菌活性を有していた。加えて、改変３、４、５及び６の黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、リステリア菌（Ｌ．ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、化膿連鎖球菌（Ｐ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）などのグラム陽性菌に対するＭＭＣ９０は改変１及び２よりも低かった。最も重要なことは、これらの改変ココナッツ油が、必要なＭＭＣ９０はグラム陽性菌と比較して高いが、グラム陰性菌、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）に対する抗菌活性を有していることである。改変３及び６はグラム陽性菌に対して改変４及び５と比較してより強力であることも示された。改変３、４、５及び６の脂質クラスの詳細な分析は、脂肪酸及びモノグリセリドの含有量が高いことがこれらの改変油の抗菌スペクトルの広域化において重要な役割を演じることを示した。約８％から１４％のモノグリセリドが、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）の増殖の制御及び抑制に並びにカンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）の１００％阻害に必要であった。一方、改変３及び６における高い脂肪酸含有量は改変油をグラム陽性菌に対してより強力にした（プロフィール３及びプロフィール６）。改変３及び６のすべてのグラム陽性菌に対するＭＭＣ９０は、４．８８ｍｇ／ｍｌであり、これは改変４及び５の値の１／１６である。脂肪酸と共にモノグリセリドはカンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）の増殖を１００％阻害する相乗効果を有する。
【００２０】
脂肪酸組成がココナッツ油と類似しているパーム核油も、１，３特異的リパーゼを使用して改変することができる。改変パーム核油も黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）に対する抗菌特性を有することが見出された。黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）の完全な阻害が２４時間暴露の後に認められた。一方、改変パーム核油中の中鎖脂肪酸及びそれに対応する脂肪酸の含有量は大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）及びカンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）の増殖停止又は殺菌に重要でないことが認められた。
【００２１】
本発明における改変油組成物は酸化に対して良い貯蔵安定性を示すことが見出され、人間に影響を及ぼす細菌、酵母及びウイルスと戦うために、食品保存剤、身体用衛生用及び皮膚感染の予防用の製品として安全に使用できる。
【００２２】
前記開示に照らして当業者に明確であるように、多数の変更及び改変が本発明の実施において本発明の範囲から逸脱することなく可能である。したがって、本発明の範囲は特許請求の範囲によって定義される本旨に従って解釈される。
（引用文献）
Ｋａｂａｒａ，Ｊ．Ｊ．（１９７８）「抗菌剤としての脂肪酸及び誘導体（Ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｄｅｒｔｉｖａｔｉｖｅｓ ａｓ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｇｅｎｔｓ）」Ｊ．Ｊ．Ｋａｂａｒａ（ｅｄ）Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｌｉｐｉｄｓ．Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｏｉｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ’Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｃｈａｍｐａｉｇｎ ＩＩＩ，ｐｐ：１−１４．
Ｓｈｉｂａｓａｋｉ，Ｉ．及びＫａｔｏ，Ｎ．（１９７８）「グラム陰性菌に対する脂肪酸及びそのエステルの抗菌活性における併用効果（Ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ａｎｔｉ−ｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｅｓｔｅｒｓ ａｇａｉｎｓｔ ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ）」Ｊ．Ｊ．Ｋａｂａｒａ （ｅｄ）Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｌｉｐｉｄｓ．Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｏｉｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ’Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｃｈａｍｐａｉｇｎ，ＩＬ，ｐｐ：１５−２３．
Ｗｅｌｓｈ，Ｊ．Ｋ．，Ａｒｓｅｎａｋｉｓ，Ｍ．，Ｃｏｅｌｅｎ，Ｒ．Ｊ．及びＭａｙ，Ｊ．Ｔ．（１９７９）「ヒト乳中のウイルスの活性における抗菌脂質、加熱及び凍結の効果（Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｌｉｐｉｄｓ，ｈｅａｔ，ａｎｄ ｆｒｅｅｚｉｎｇ ｏｎ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｖｉｒｕｓｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｍｉｌｋ）」Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ，１４０：３２２−３２８．
Ｔｈｏｒｍａｒ，Ｈ．，Ｉｓａａｃｓ，Ｃ．，Ｂｒｏｗｎ，Ｈ．Ｒ．，Ｂａｒｓｈａｔｚｋｙ，Ｍ．Ｒ．及びＰｅｓｓｏｌａｎｏ，Ｔ．（１９８７）「脂肪酸及びモノグリセリドによるエンベロープウイルスの不活性化及び細胞の殺菌（Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｖｅｌｏｐｅｄ ｖｉｒｕｓｅｓ ａｎｄ ｋｉｌｌｉｎｇ ｏｆ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ）」Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．３１：２７−３１．
Ｉｓａａｃｓ，Ｃ．Ｅ．，Ｌｉｔｏｖ，Ｒ．Ｅ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｈ．（１９９５）「ヒト乳、乳児用調合乳及び牛乳に添加する脂質の抗菌活性（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌｉｐｉｄｓ ａｄｄｅｄ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｍｉｌｋ，ｉｎｆａｎｔ ｆｏｒｍｕｌａ，ａｎｄ ｂｏｖｉｎｅ ｍｉｌｋ）」Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．６：３６２−３６６．
Ｋｒｉｓｔｍｕｎｄｓｄｏｔｔｉｒ，Ｔ．，Ａｒｎａｄｏｔｔｉｒ，Ｓ．，Ｂｅｒｇｓｓｏｎ，Ｇ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｔ．（１９９９）「活性物質としてモノグリセリドを含有する抗菌ハイドロジェルの開発及び評価（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉｃｉｄａｌ ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ ａｓ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ）」Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ．８８：１０１１−１０１５．
Ｂｅｒｇｓｓｏｎ，Ｇ．，Ｓｔｅｉｎｇｒｉｍｓｓｏｎ，Ｏ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｈ．（１９９９）「脂肪酸及びモノグリセリドに対する淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｈｏｅａｅ）のｉｎ ｖｉｔｒｏ感受性（Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｈｏｅａｅ ｔｏ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ）」Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．４３：２７９０−２７９２．
Ｂｅｒｇｓｓｏｎ，Ｇ．，Ａｒｎｆｉｎｎｓｓｏｎ，Ｊ．，Ｓｔｅｉｎｇｒｉｍｓｓｏｎ，Ｏ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｈ．（２００１）「脂肪酸及びモノグリセリドによるカンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）のｉｎ ｖｉｔｒｏ殺菌（Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｋｉｌｌｉｎｇ ｏｆ Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ ｂｙ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ）」Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．４５（１１）：３２０９−３２１２．
Ｂｅｒｇｓｓｏｎ，Ｇ．，Ａｒｎｆｉｎｎｓｓｏｎ，Ｊ．，Ｋａｒｌｓｓｏｎ，Ｓ．Ｍ．，Ｓｔｅｉｎｇｒｉｍｓｓｏｎ，Ｏ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｈ．（１９９８）「脂肪酸及びモノグリセリドによるトラコーマクラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）のｉｎ ｖｉｔｒｏ不活性化（Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ ｂｙ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ）」Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．４２（９）：２２９０−２２９４．
Ｂｅｒｇｓｓｏｎ，Ｇ．，Ｓｔｅｉｎｇｒｉｍｓｓｏｎ，Ｏ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｈ．（２００２）「ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）における脂肪酸及びモノグリセリドの殺菌効果（Ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ ｏｎ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）」Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ．２０：２５８−２６２
Ｋａｂａｒａ，Ｊ．Ｊ．（１９８４）「脂肪酸由来の抗菌剤（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｇｅｎｔｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ）」Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｏｉｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ’Ｓｏｃｉｅｔｙ．６１（２）：３９７−４０３．
Ｗａｎｇ，Ｌ．Ｌ．及びＪｏｈｎｓｏｎ，Ｅ．Ａ．（１９９２）「脂肪酸及びモノグリセリドによるリステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）の阻害（Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ ｂｙ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ）」Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ．５８（２）：６２４−６２９．
Ｐｅｔｓｃｈｏｗ，Ｂ．Ｗ．，Ｂａｔｅｍａ，Ｒ．Ｐ．，Ｔａｌｂｏｔｔ，Ｒ．Ｄ．及びＦｏｒｄ，Ｌ．Ｌ．（１９９８）「コレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ）による腸内での集落形成又は毒素原性大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）における中鎖モノグリセリドの効果（Ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ｍｅｄｉｕｍ−ｃｈａｉｎ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ ｏｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｂｙ Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ ｏｒ ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）」Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ．４７：３８３−３８９．
Ｇｌａｓｓ，Ｋ．Ａ．及びＪｏｈｎｓｏｎ，Ｅ．Ａ．（２００４）「食品保存剤及び脂肪酸の抗ボツリヌス活性における脂質の拮抗作用（Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｆａｔ ｏｎ ｔｈｅ ａｎｔｉｂｏｔｕｌｉｎａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｆｏｏｄ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ ａｎｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ）」Ｆｏｏｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ．２１：６７５−６８２．
Ｈｉｅｒｈｏｌｚｅｒ，Ｊ．Ｃ．及びＫａｂａｒａ，Ｊ．Ｊ（１９８２）「ＲＮＡ及びＤＮＡエンベロープウイルスにおけるモノラウリン化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏ効果（Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｏｎｏｌａｕｒｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｏｎ ｅｎｖｅｌｏｐｅｄ ＲＮＡ ａｎｄ ＤＮＡ ｖｉｒｕｓｅｓ）」Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓａｆｅｔｙ．４：１−１２
Ｂａｕｔｉｓｔａ，Ｄ．Ａ．，Ｄｕｒｉｓｉｎ，Ｍ．Ｄ．，Ｒａｚａｖｉ−Ｒｏｈａｎｉ，Ｓ．Ｍ．，Ｈｉｌｌ，Ａ．Ｒ．及びＧｒｉｆｆｉｔｈｓ，Ｍ．Ｗ．（１９９３）「カッテージチーズのモノラウリンを使用する貯蔵期間の延長（Ｅｘｔｅｎｄｉｎｇ ｔｈｅ ｓｈｅｌｆ−ｌｉｆｅ ｏｆ ｃｏｔｔａｇｅ ｃｈｅｅｓｅ ｕｓｉｎｇ ｍｏｎｏｌａｕｒｉｎ）」Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ．２６：２０３−２０８．
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌特性を有する改変油、詳細にはカプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸及びそれらに対応するモノグリセリドなどの８から１２個の炭素原子を有する中鎖脂肪酸の混合物を含有する改変ココナッツ油組成物に関する。前記改変ココナッツ油は、ココナッツ油への１，３位特異的リパーゼの触媒作用から得る。
【背景技術】
【０００２】
中鎖遊離脂肪酸及びこれらに対応するモノグリセリドは、単純ヘルペスウイルス（ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ）（Ｔｈｏｒｍａｒら１９８７；Ｋｒｉｓｔｍｕｎｄｓｄｏｔｔｉｒら１９９９）、淋菌（Ｎｅｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら１９９９）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら、２００１）、トラコーマクラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら、１９９８）、ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら、２００２）及び黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）（Ｋａｂａｒａ １９８４）などのヒトへの病原体を含むエンベロープウイルス及び種々の細菌に対してｉｎ ｖｉｔｒｏで広域な抗菌活性のスペクトルを有することが周知である（Ｋａｂａｒａ，１９７８；Ｓｈｉｂａｓａｋｉ及びＫａｔｏ、１９７８；Ｗｅｌｓｈら１９７９ Ｔｈｏｒｍａｒら、１９８７；Ｉｓａａｃｓら１９９５）。さらにこれらの化合物は、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）（Ｗａｎｇ及びＪｏｈｎｓｏｎ、１９９２）、毒素原性大腸菌（ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）（Ｐｅｔｓｃｈｏｗら１９９８）並びにボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）（Ｇｌａｓｓ及びＪｏｈｎｓｏｎ、２００４）などの食物によって広まる病原体に対する抗菌作用を有することも周知である。これらの脂質が細菌を殺すメカニズムは知られていないが、電子顕微鏡による研究は脂質が細胞膜透過性障壁を崩壊させることを示唆している（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら、１９９８；Ｔｈｏｒｍａｒら１９８７）。
【０００３】
飽和中鎖脂肪酸は、８から１２個の炭素原子（Ｃ６からＣ１２）を有する脂肪酸である。中鎖脂肪酸の内、ラウリン酸及びそれに対応するモノグリセリド、モノラウリンは、食物及び化粧品用の抗菌剤として包括的に研究されてきた（Ｓｈｉｂａｓａｋｉ及びＫａｔｏ、１９７８；Ｋａｂａｒａ、１９８４）。ラウリン酸は母乳中に含まれる疾患と戦う因子である。生体はラウリン酸を、ウイルス、細菌又は原生動物感染から幼児を防御する物質である脂肪酸誘導体（モノラウリン）に転換する。Ｈｉｅｒｈｏｌｚｅｒ及びＫａｂａｒａ（１９８２）は、脂質膜に囲まれているＲＮＡ及びＤＮＡウイルスに対してモノラウリンが殺ウイルス効果を有することを示した。
【０００４】
中鎖脂肪酸及びその対応するモノエステルのいくつかの適用における抗菌性化合物としての使用は特許化されており、すなわちモノラウリンは毛髪及び動物の毛の洗浄及びコンディショニングに使用されている（米国特許第５，３７８，７３１号）。前記抗菌性シャンプー組成物は、ヒト及び動物への使用に安全であるモノラウリンを含有している。モノラウリンは、抗真菌特性を必要とする化粧品類及び家事用品にも広範に使用することができる（米国特許第５，５６９，４６１号及び第５，６５８，５８４号）。さらにそれは、胃炎及び潰瘍を含む種々の胃腸疾患の原因となるヘリコバクター（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）属の細菌感染の治療用のバクテリオシン、すなわちナイシン（ｎｉｓｉｎ）と組み合わせることもできる（米国特許第５，６６０，８４２号：米国特許第５，８０４，５４９号）。これらの脂肪酸及びその誘導体は、ヒトの体重を制御又は減少させる栄養補助食品としても特許請求された（米国特許第６，０５４，４８０号）。追加的にこれらの化合物及びそのモノエステルは加工肉の微生物による汚染を減少させるために使用することができるし、詳細には家禽の死体を殺菌するための製品及び方法に関する。さらに、乳生産動物にいる有害な微生物の殺菌を補助する（米国特許第６，６９９，９０７号）。これらは、皮膚、粘膜及び毛髪の損傷の治療の効果的な方法でもある（米国特許第５，２０８，２５７号）。最近の発明は、これらの脂肪酸がアルツハイマー病並びにパーキンソン病、ハンチントン病及びてんかんを含むニューロンの代謝の減少に関連する他の疾患の治療のための治療用薬剤となることができることを示した（米国特許第６，８３５，７５０号）。
【０００５】
従来の研究は中鎖脂肪酸への感受性が種によって相当に変動することを示しており、特定の微生物が特定の脂肪酸及びモノグリセリドに感受性があった。例えばＢｅｒｇｓｓｏｎら１９９８は、ラウリン酸、カプリン酸及びモノカプリンが感染価を１００００倍を超えて減少させたことを示した。脂肪酸及びモノグリセリドを低濃度及び短い暴露時間でさらに比較した場合、ラウリン酸はカプリン酸及びモノカプリンよりも活性であり、濃度５ｍＭ ５分間でトラコーマクラミジア（Ｃ．ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）の１０００００倍を超える不活性化を生じた。モノカプリンと比較してモノラウリン及びモノカプリリンは濃度１０ｍＭにおいてトラコーマクラミジア（Ｃ．ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）についてごくわずかな効果を有する。Ｂｅｒｇｓｓｏｎら（２００２）が行った他の研究において、中鎖脂肪酸（Ｃ８、Ｃ１０及びＣ１２）及びそのモノグリセリド誘導体はサルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）種及び大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）に対して有意な抗菌活性を示さないことが見出された。しかし、この研究においてモノカプリン及びモノラウリンは濃度１０ｍＭ、３０分間、３７℃でピロリ菌（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）に対して最も活性であることが見出された。自然に汚染したカッテージチーズ中へのモノラウリンの２５０及び５００ｐｐｍでの混合は、シュ−ドモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）種及び大腸菌型の両方の９０％を超える阻害を生じた（Ｂａｕｔｉｓｔａら、１９９３）。カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）の場合、カプリン酸及びラウリン酸はその誘導体であるモノグリセリドと比較して最も急速で最も効果的な殺菌を生じる（Ｂｅｒｇｓｓｏｎら２００１）。しかし、ミリスチン酸、パルミトレイン酸、オレイン酸及びその誘導体のモノグリセリドは抗菌効果を示さない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
これらの中鎖脂肪酸及びそのモノグリセリドが抗菌剤として作用する能力は変動すると考えられる。これらの化合物の有効性は常にその濃度及び含まれる微生物の種類に依存する。従来は中鎖脂肪酸及びこれらに対応するモノグリセリドの抗菌活性の試験は個別に行われた。試験は、ラウリン酸若しくはカプリン酸若しくはカプリル酸又はこれらに対応するモノグリセリドのいずれかを使用して行った。油培地における中鎖脂肪酸及びそれらそれぞれのモノグリセリド両方の相乗効果が実施及び報告されたことはない。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
したがって、ココナッツ油を１，３−特異的リパーゼで触媒することにより得られる改変ココナッツ油を提供することが本発明の目的であり、前記改変ココナッツ油は中鎖脂肪酸及びこれらに対応するモノグリセリドの有効量を含有し、ここで前記改変油は抗菌特性を有する。前記改変ココナッツ油はカプリル酸（Ｃ８）、カプリン酸（Ｃ１０）及びラウリル酸（Ｃ１２）を含む中鎖脂肪酸を含有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の目的に従って、本研究において、細菌、酵母、真菌及びウイルスに対する抗菌活性を有する中鎖脂肪酸（Ｃ８からＣ１２を特に重点的に）及びそのそれぞれのモノグリセリドを含有する改変ココナッツ油のプロフィールを得るための試みがなされた。ココナッツ油は中鎖脂肪酸の豊富な源であるという性質により選択された。ココナッツ油は飽和脂肪酸を９０％含み、その内４５から４８％はラウリン酸であり、３０から３６％は他の短鎖及び中鎖脂肪酸である。予備的研究は、ココナッツ油自体は抗菌活性を有さないことを示した（７％のジアシルグリセロールを含み、残りはトリグリセリドである）。ＨＰＴＬＣによる分析は、脂肪酸及びモノグリセリドが油組成物中に検出されることを示した。本発明は、抗菌特性を有する油を得るためだけでなく効果的であり強力な抗菌剤を得るために１，３位特異的リパーゼを使用する方法も含む。
【０００９】
本発明により１，３位特異的リパーゼを、細菌及び酵母に対して広域抗菌スペクトルを有する飽和中鎖脂肪酸及びそれらそれぞれのモノグリセリドのプロフィールを得るために特定の反応条件下でココナッツ油を改変するために使用する。改変ココナッツ油混合物は好ましくは、部分加水分解又はグリセロリシス反応から得られる多量の遊離脂肪酸（Ｃ８−Ｃ１２）及びそれらに対応するモノグリセリドを含む。本発明において使用される酵素は、リパーゼなどの酵素であり、好ましくは適切な酵素担体上に固定されている。前記特異的リパーゼは１，３位を有する、すなわちＬｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉ）。改変油を得るための反応は以下の通りであった。
【実施例】
【００１０】
反応１−改変１及び改変２
酵素反応は、１，３−位特異的リパーゼ２．５ｇをココナッツ油２５０ｇ及び蒸留水２．５ｍｌと共に使用して実施した。反応は４５℃、２５０ｒ．ｐ．ｍで実施した。試料を分析のために２４時間反応後（改変１）及び１２０時間反応後（改変２）に回収した。次いで試料から水を除去するために試料を硫酸ナトリウム粉末を含む漏斗に通した。油層を分離するために反応混合物を遠心分離した。高性能薄層クロマトグラフィー技術及びガスクロマトグラフィー技術を各油試料中の脂質のクラス及び脂肪酸組成を決定するために実施した。次いで、改変油を以下の抗菌活性について分析した、試験１：最小ミクロサイダル濃度（ＭＭＣ、＞９０％）及び試験２：時間−殺菌試験。
【００１１】
反応２−改変３
ココナッツ油２０ｍｌをグリセロール８ｇ及び蒸留水１６０μｌが入っている１２５ｍｌフラスコに加えた。反応混合物を３５℃、３００ｒ．ｐ．ｍでインキュベーション温度が３５℃に達するまでインキュベートした。次いで、Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ ２５０ｍｇを反応混合物に加え、３５℃で２４時間インキュベートした。次いで、油試料を２５℃に更に３日間置いた。
【００１２】
反応３−改変４
グリセロール３０．４ｇ、水１．０９ｍｌ、Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ １ｇ及びココナッツ油１００ｇの混合物を調製した。反応混合物をまず３０℃、６時間、８００ｒ．ｐ．ｍ．で一定に撹拌しながらインキュベートした。次いで、混合物を５℃に移し、分析の前に３日間まで置いた。
【００１３】
反応４−改変５
改変４に従って反応混合物を調製した。分析前に、反応を３０℃、８００ｒ．ｐ．ｍ．で１６時間実施した。
【００１４】
反応５−改変６
改変２から油２０ｍｌを、グリセロール８ｇ及び滅菌蒸留水１６０μｌを含む混合物に添加した。反応混合物を３５℃、３００ｒ．ｐ．ｍ．で予備インキュベートした。Ｌｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭ ２５０ｍｇを混合物に加えることにより反応を開始し、反応は２４時間実施した。次いで、混合物を２５℃で３日間インキュベートした。
【００１５】
試験１：最小ミクロサイダル濃度（ＭＭＣ，＞９０％殺菌）
全てのウェルにブロス１２０μｌを入れた（ＢＨＩ、グラム陽性菌用は０．１％Ｔｗｅｅｎ８０；グラム陰性菌用はＴＢＳ；酵母用はＰＤＢを含む）。抗菌剤１２０μｌを最初のウェルに加えた。最初のウェルから混合物１２０μｌを２番目のウェルに移し、同様に１２番目のウェルまで続けた。１０５から１０６ｃｆｕ／ｍｌに調整した接種物を各ウェルに植え付けた。プレートを、細菌用は３７℃（２日間）、酵母用は３２℃（３日間）インキュベートした。結果を表１にＭＭＣ９０（最小殺菌濃度、＞９０％殺菌）で示した。
【００１６】
試験２：時間−殺菌試験
接種物はフラスコ中のブロス５０ｍｌ（グラム陽性菌用にはＢＨＩ；グラム陰性菌用にはＴＢＳ；酵母用にはＰＤＢ）に、ループを満たす量の細胞を植え付けることにより培養し、最適温度で終夜振盪した。これを、ろ過滅菌処理したＶＣＯを５０％含むＢＨＩ、ＴＳＢ又はＰＤＢブロスに接種するために使用した。開始接種物は１０４から１０６ｃｆｕ／ｍｌに調整した。一定時間ごとに反応混合物１ｍｌ採取し、リンゲル液中で一連の希釈を行った。生存可能なコロニーをプレートカウント寒天培地（ＰＣＡ）上でプレーティング希釈することにより数えた。プレートは、細菌用は３７℃（２日間）、酵母用は３２℃（３日間）インキュベートした。対照実験は５０％滅菌蒸留水の存在下で行った。
【表１】
【表２】
【表３】
【００１７】
以下の改変バージンココナッツ油及びパーム核油のプロフィールはその抗菌活性について試験し、微生物の多くの群に対して活性があることが見出された。
改変１−プロフィール１
【表４】
改変２−プロフィール２
【表５】
改変３−プロフィール３
【表６】
改変４−プロフィール４
【表７】
改変５−プロフィール５
【表８】
改変６−プロフィール６
【表９】
【００１８】
本発明により、例えば中鎖脂肪酸及びその対応するモノエステルを含有する抗菌組成物をココナッツ油の部分加水分解並びにグリセロリシスから得るための方法が提供される。改変油１及び改変油２は、バージンココナッツ油のそれぞれ２４時間及び１２０時間の加水分解反応から得た。ＭＭＣ９０としての抗菌活性（表１）及び時間−殺菌試験（表２）の試験は、改変１と比較して改変２がより強力な抗菌活性を有することを示した。これは、恐らく改変２（プロフィール２）中に含まれる多量の脂肪酸（１４％）によるものである。飽和中鎖脂肪酸、特にカプリル油、カプリン油及びラウリン油の含有量（ｍｇ／ｇ）が増加していた（プロフィール２）。しかし、プロフィール１及びプロフィール２による改変油組成物は大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）及びアクネ菌（Ｐ．ａｃｎｅ）の増殖を停止できないことが示された。時間−殺菌試験から明らかに、カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）の増殖は４８時間のインキュベーション後であっても１００％は阻害されなかった（表２）。改変１及び改変２はグラム陽性菌に対して効果的であり、それぞれ８時間及び２時間インキュベーション後に１００％阻害が認められた。予備的結果は、脂肪酸、すなわちＣ８、Ｃ１０及びＣ１２の含有量がグラム陽性菌の増殖の不活性化において重要な役割を果たしていることを示した。改変３、４、５及び６は改変１及び２とは異なる方法で調製した。これらはグリセロリシス反応から得た。全ての反応においてグリセロール及びＬｉｐｏｚｙｍｅ ＴＬ ＩＭを添加した。
【００１９】
比較すると、改変３、４、５及び６はカンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉａｎｓ）の殺菌において改変１及び２よりも効果的であった。８時間インキュベーションで１００％阻害が認められた。カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対する最小ミクロバイアル濃度は２．４４ｍｇ／ｍｌと得られ、改変５ではより高濃度の例えば４．８８ｍｇ／ｍｌが必要であった。改変油試料において、改変３及び改変６は強力な抗菌活性を有していた。加えて、改変３、４、５及び６の黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、リステリア菌（Ｌ．ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、化膿連鎖球菌（Ｐ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）などのグラム陽性菌に対するＭＭＣ９０は改変１及び２よりも低かった。最も重要なことは、これらの改変ココナッツ油が、必要なＭＭＣ９０はグラム陽性菌と比較して高いが、グラム陰性菌、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）に対する抗菌活性を有していることである。改変３及び６はグラム陽性菌に対して改変４及び５と比較してより強力であることも示された。改変３、４、５及び６の脂質クラスの詳細な分析は、脂肪酸及びモノグリセリドの含有量が高いことがこれらの改変油の抗菌スペクトルの広域化において重要な役割を演じることを示した。約８％から１４％のモノグリセリドが、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）の増殖の制御及び抑制に並びにカンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）の１００％阻害に必要であった。一方、改変３及び６における高い脂肪酸含有量は改変油をグラム陽性菌に対してより強力にした（プロフィール３及びプロフィール６）。改変３及び６のすべてのグラム陽性菌に対するＭＭＣ９０は、４．８８ｍｇ／ｍｌであり、これは改変４及び５の値の１／１６である。脂肪酸と共にモノグリセリドはカンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）の増殖を１００％阻害する相乗効果を有する。
【００２０】
脂肪酸組成がココナッツ油と類似しているパーム核油も、１，３特異的リパーゼを使用して改変することができる。改変パーム核油も黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）に対する抗菌特性を有することが見出された。黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）の完全な阻害が２４時間暴露の後に認められた。一方、改変パーム核油中の中鎖脂肪酸及びそれに対応する脂肪酸の含有量は大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）及びカンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）の増殖停止又は殺菌に重要でないことが認められた。
【００２１】
本発明における改変油組成物は酸化に対して良い貯蔵安定性を示すことが見出され、人間に影響を及ぼす細菌、酵母及びウイルスと戦うために、食品保存剤、身体用衛生用及び皮膚感染の予防用の製品として安全に使用できる。
【００２２】
前記開示に照らして当業者に明確であるように、多数の変更及び改変が本発明の実施において本発明の範囲から逸脱することなく可能である。したがって、本発明の範囲は特許請求の範囲によって定義される本旨に従って解釈される。
（引用文献）
Ｋａｂａｒａ，Ｊ．Ｊ．（１９７８）「抗菌剤としての脂肪酸及び誘導体（Ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｄｅｒｔｉｖａｔｉｖｅｓ ａｓ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｇｅｎｔｓ）」Ｊ．Ｊ．Ｋａｂａｒａ（ｅｄ）Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｌｉｐｉｄｓ．Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｏｉｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ’Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｃｈａｍｐａｉｇｎ ＩＩＩ，ｐｐ：１−１４．
Ｓｈｉｂａｓａｋｉ，Ｉ．及びＫａｔｏ，Ｎ．（１９７８）「グラム陰性菌に対する脂肪酸及びそのエステルの抗菌活性における併用効果（Ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ａｎｔｉ−ｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｅｓｔｅｒｓ ａｇａｉｎｓｔ ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ）」Ｊ．Ｊ．Ｋａｂａｒａ （ｅｄ）Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｌｉｐｉｄｓ．Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｏｉｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ’Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｃｈａｍｐａｉｇｎ，ＩＬ，ｐｐ：１５−２３．
Ｗｅｌｓｈ，Ｊ．Ｋ．，Ａｒｓｅｎａｋｉｓ，Ｍ．，Ｃｏｅｌｅｎ，Ｒ．Ｊ．及びＭａｙ，Ｊ．Ｔ．（１９７９）「ヒト乳中のウイルスの活性における抗菌脂質、加熱及び凍結の効果（Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｌｉｐｉｄｓ，ｈｅａｔ，ａｎｄ ｆｒｅｅｚｉｎｇ ｏｎ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｖｉｒｕｓｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｍｉｌｋ）」Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ，１４０：３２２−３２８．
Ｔｈｏｒｍａｒ，Ｈ．，Ｉｓａａｃｓ，Ｃ．，Ｂｒｏｗｎ，Ｈ．Ｒ．，Ｂａｒｓｈａｔｚｋｙ，Ｍ．Ｒ．及びＰｅｓｓｏｌａｎｏ，Ｔ．（１９８７）「脂肪酸及びモノグリセリドによるエンベロープウイルスの不活性化及び細胞の殺菌（Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｖｅｌｏｐｅｄ ｖｉｒｕｓｅｓ ａｎｄ ｋｉｌｌｉｎｇ ｏｆ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ）」Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．３１：２７−３１．
Ｉｓａａｃｓ，Ｃ．Ｅ．，Ｌｉｔｏｖ，Ｒ．Ｅ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｈ．（１９９５）「ヒト乳、乳児用調合乳及び牛乳に添加する脂質の抗菌活性（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌｉｐｉｄｓ ａｄｄｅｄ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｍｉｌｋ，ｉｎｆａｎｔ ｆｏｒｍｕｌａ，ａｎｄ ｂｏｖｉｎｅ ｍｉｌｋ）」Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．６：３６２−３６６．
Ｋｒｉｓｔｍｕｎｄｓｄｏｔｔｉｒ，Ｔ．，Ａｒｎａｄｏｔｔｉｒ，Ｓ．，Ｂｅｒｇｓｓｏｎ，Ｇ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｔ．（１９９９）「活性物質としてモノグリセリドを含有する抗菌ハイドロジェルの開発及び評価（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉｃｒｏｂｉｃｉｄａｌ ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ ａｓ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ）」Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ．８８：１０１１−１０１５．
Ｂｅｒｇｓｓｏｎ，Ｇ．，Ｓｔｅｉｎｇｒｉｍｓｓｏｎ，Ｏ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｈ．（１９９９）「脂肪酸及びモノグリセリドに対する淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｈｏｅａｅ）のｉｎ ｖｉｔｒｏ感受性（Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｈｏｅａｅ ｔｏ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ）」Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．４３：２７９０−２７９２．
Ｂｅｒｇｓｓｏｎ，Ｇ．，Ａｒｎｆｉｎｎｓｓｏｎ，Ｊ．，Ｓｔｅｉｎｇｒｉｍｓｓｏｎ，Ｏ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｈ．（２００１）「脂肪酸及びモノグリセリドによるカンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）のｉｎ ｖｉｔｒｏ殺菌（Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｋｉｌｌｉｎｇ ｏｆ Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ ｂｙ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ）」Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．４５（１１）：３２０９−３２１２．
Ｂｅｒｇｓｓｏｎ，Ｇ．，Ａｒｎｆｉｎｎｓｓｏｎ，Ｊ．，Ｋａｒｌｓｓｏｎ，Ｓ．Ｍ．，Ｓｔｅｉｎｇｒｉｍｓｓｏｎ，Ｏ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｈ．（１９９８）「脂肪酸及びモノグリセリドによるトラコーマクラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）のｉｎ ｖｉｔｒｏ不活性化（Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ ｂｙ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ）」Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．４２（９）：２２９０−２２９４．
Ｂｅｒｇｓｓｏｎ，Ｇ．，Ｓｔｅｉｎｇｒｉｍｓｓｏｎ，Ｏ．及びＴｈｏｒｍａｒ，Ｈ．（２００２）「ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）における脂肪酸及びモノグリセリドの殺菌効果（Ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ ｏｎ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）」Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ．２０：２５８−２６２
Ｋａｂａｒａ，Ｊ．Ｊ．（１９８４）「脂肪酸由来の抗菌剤（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｇｅｎｔｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ）」Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｏｉｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ’Ｓｏｃｉｅｔｙ．６１（２）：３９７−４０３．
Ｗａｎｇ，Ｌ．Ｌ．及びＪｏｈｎｓｏｎ，Ｅ．Ａ．（１９９２）「脂肪酸及びモノグリセリドによるリステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）の阻害（Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ ｂｙ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ａｎｄ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ）」Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ．５８（２）：６２４−６２９．
Ｐｅｔｓｃｈｏｗ，Ｂ．Ｗ．，Ｂａｔｅｍａ，Ｒ．Ｐ．，Ｔａｌｂｏｔｔ，Ｒ．Ｄ．及びＦｏｒｄ，Ｌ．Ｌ．（１９９８）「コレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ）による腸内での集落形成又は毒素原性大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）における中鎖モノグリセリドの効果（Ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ｍｅｄｉｕｍ−ｃｈａｉｎ ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅｓ ｏｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｂｙ Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ ｏｒ ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）」Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ．４７：３８３−３８９．
Ｇｌａｓｓ，Ｋ．Ａ．及びＪｏｈｎｓｏｎ，Ｅ．Ａ．（２００４）「食品保存剤及び脂肪酸の抗ボツリヌス活性における脂質の拮抗作用（Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｆａｔ ｏｎ ｔｈｅ ａｎｔｉｂｏｔｕｌｉｎａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｆｏｏｄ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ ａｎｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ）」Ｆｏｏｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ．２１：６７５−６８２．
Ｈｉｅｒｈｏｌｚｅｒ，Ｊ．Ｃ．及びＫａｂａｒａ，Ｊ．Ｊ（１９８２）「ＲＮＡ及びＤＮＡエンベロープウイルスにおけるモノラウリン化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏ効果（Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｏｎｏｌａｕｒｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｏｎ ｅｎｖｅｌｏｐｅｄ ＲＮＡ ａｎｄ ＤＮＡ ｖｉｒｕｓｅｓ）」Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓａｆｅｔｙ．４：１−１２
Ｂａｕｔｉｓｔａ，Ｄ．Ａ．，Ｄｕｒｉｓｉｎ，Ｍ．Ｄ．，Ｒａｚａｖｉ−Ｒｏｈａｎｉ，Ｓ．Ｍ．，Ｈｉｌｌ，Ａ．Ｒ．及びＧｒｉｆｆｉｔｈｓ，Ｍ．Ｗ．（１９９３）「カッテージチーズのモノラウリンを使用する貯蔵期間の延長（Ｅｘｔｅｎｄｉｎｇ ｔｈｅ ｓｈｅｌｆ−ｌｉｆｅ ｏｆ ｃｏｔｔａｇｅ ｃｈｅｅｓｅ ｕｓｉｎｇ ｍｏｎｏｌａｕｒｉｎ）」Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ．２６：２０３−２０８．
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１，３位特異的リパーゼでココナッツ油を触媒することにより得られる改変ココナッツ油であって、有効量の中鎖脂肪酸及びそれに対応するモノグリセリドを含有し、抗菌特性を有する改変ココナッツ油。
【請求項２】
前記中鎖脂肪酸がカプリル酸（Ｃ８）、カプリン酸（Ｃ１０）及びラウリン酸（Ｃ１２）を含む、請求項１に記載の改変ココナッツ油。
【請求項３】
前記対応するモノグリセリドがモノカプリリン、モノカプリン及びモノラウリンを含む、請求項１に記載の改変ココナッツ油。
【請求項４】
１０％を超える濃度の遊離脂肪酸及び１％を超える濃度のモノグリセリドを含有する、請求項１に記載の改変ココナッツ油。
【請求項５】
前記１，３位特異的リパーゼをＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉから得られる、請求項１又は４に記載の改変ココナッツ油。
【請求項６】
１，３位特異的リパーゼの触媒活性によるココナッツ油の部分加水分解から得られる、請求項１又は４に記載の改変ココナッツ油。
【請求項７】
前記部分加水分解反応の後に、グリセロリシス反応にかける、請求項６に記載の改変ココナッツ油。
【請求項８】
前記ココナッツ油がバージンココナッツ油である、請求項１又は６のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項９】
１０％を超える濃度の遊離脂肪酸及び２％未満の濃度のモノグリセリドを含有する、請求項１又は４に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１０】
１０ｍｇ／ｇを超えるカプリル酸（Ｃ８）、７ｍｇ／ｇを超えるカプリン酸（Ｃ１０）及び５４ｍｇ／ｇを超えるラウリン酸（Ｃ１２）を含む、請求項９に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１１】
前記モノグリセリドが０．６ｍｇ／ｇを超えるモノカプリリン、０．４ｍｇ／ｇを超えるモノカプリン及び２０ｍｇ／ｇを超えるモノラウリンを含む、請求項９に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１２】
黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、リステリア菌（Ｌ．ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｎｅｓ）及び化膿連鎖球菌（Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）などのグラム陽性菌に対抗して効果的である、請求項１、４、９、１０又は１１のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１３】
コレラ菌（Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａｅ）などのグラム陰性菌に対抗して効果的である、請求項１、４、９、１０又は１１のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１４】
カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）などの酵母に対抗して効果的である、請求項１、４、９、１０又は１１のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１５】
１，３位特異的リパーゼの触媒活性によるココナッツ油の部分加水分解反応から得られる、請求項９、１０又は１１のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１６】
前記１，３位特異的リパーゼがＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉから得られる、請求項１５に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１７】
前記ココナッツ油がバージンココナッツ油である、請求項１５のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１８】
１０％を超える濃度の遊離脂肪酸及び８％を超える濃度のモノグリセリドを含有する、請求項１又は４に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１９】
９ｍｇ／ｇを超えるカプリル酸（Ｃ８）、６ｍｇ／ｇを超えるカプリン酸（Ｃ１０）及び６８ｍｇ／ｇを超えるラウリン酸（Ｃ１２）を含む、請求項１８に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２０】
前記モノグリセリドが８ｍｇ／ｇを超えるモノカプリリン、５ｍｇ／ｇを超えるモノカプリン及び４１ｍｇ／ｇを超えるモノラウリンを含む、請求項１８に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２１】
黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、リステリア菌（Ｌ．ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｎｅｓ）及び化膿連鎖球菌（Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）などのグラム陽性菌に対抗してより効果的である、請求項１、４、１８、１９又は２０のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２２】
カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）などの酵母に対抗してより効果的である、請求項１、４、１８、１９又は２０のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２３】
８時間以内のインキュベーションでカンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）を１００％抑制する、請求項２２に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２４】
大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）などのグラム陰性菌の増殖抑制に効果的である、請求項１、４、１８、１９又は２０のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２５】
１，３位特異的リパーゼの触媒活性によるココナッツ油の部分加水分解に続くグリセロリシス反応から得られる、請求項１、４、１８、１９又は２０のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２６】
前記１，３位特異的リパーゼがＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉから得られる、請求項２５に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２７】
前記ココナッツ油がバージンココナッツ油である、請求項２５のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２８】
皮膚疾患の治療及び予防のための、請求項１から２７までのいずれか一項に記載の改変ココナッツ油の使用。
【請求項２９】
食品保存のための、請求項１から２８までのいずれか一項に記載の改変ココナッツ油の使用。
【請求項３０】
身体用衛生製品への処方又は前記身体用衛生製品の処方の一部への混合のための、請求項１から２９までのいずれか一項に記載の改変ココナッツ油の使用。
【請求項３１】
抗菌剤としての、請求項１から３０までのいずれか一項に記載の改変ココナッツ油の使用であって、投与形態はカプセルである使用。
【請求項３２】
動物の疾患を予防するための天然の抗生物質としての、請求項１から３１までのいずれか一項に記載の改変ココナッツ油の使用。
【請求項３３】
１，３位特異的リパーゼでパーム核油を触媒することにより得られる改変パーム核油であって、有効量の中鎖脂肪酸及びそれに対応するモノグリセリドを含有し、抗菌特性を有する改変パーム核油。
【請求項３４】
１０％を超える濃度の遊離脂肪酸及び１％を超える濃度のモノグリセリドを含有する、請求項３３に記載の改変油。
【請求項３５】
前記１，３位特異的リパーゼがＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉから得られる、請求項３３に記載の改変油。
【請求項３６】
皮膚疾患の治療及び予防のための、請求項３３又は３４に記載の改変油の使用。
【請求項３７】
食品保存のための、請求項３３又は３４に記載の改変油の使用。
【請求項３８】
身体用衛生製品への処方又は前記身体用衛生製品の処方の一部への混合のための、請求項３３又は３４に記載の改変油の使用。
【請求項３９】
抗菌剤としての、請求項３３又は３４に記載の改変油の使用であって、投与形態はカプセルである使用。
【請求項４０】
動物の疾患を予防するための天然の抗生物質としての、請求項３３又は３４に記載の改変油の使用。
【請求項１】
１，３位特異的リパーゼでココナッツ油を触媒することにより得られる改変ココナッツ油であって、有効量の中鎖脂肪酸及びそれに対応するモノグリセリドを含有し、抗菌特性を有する改変ココナッツ油。
【請求項２】
前記中鎖脂肪酸がカプリル酸（Ｃ８）、カプリン酸（Ｃ１０）及びラウリン酸（Ｃ１２）を含む、請求項１に記載の改変ココナッツ油。
【請求項３】
前記対応するモノグリセリドがモノカプリリン、モノカプリン及びモノラウリンを含む、請求項１に記載の改変ココナッツ油。
【請求項４】
１０％を超える濃度の遊離脂肪酸及び１％を超える濃度のモノグリセリドを含有する、請求項１に記載の改変ココナッツ油。
【請求項５】
前記１，３位特異的リパーゼをＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉから得られる、請求項１又は４に記載の改変ココナッツ油。
【請求項６】
１，３位特異的リパーゼの触媒活性によるココナッツ油の部分加水分解から得られる、請求項１又は４に記載の改変ココナッツ油。
【請求項７】
前記部分加水分解反応の後に、グリセロリシス反応にかける、請求項６に記載の改変ココナッツ油。
【請求項８】
前記ココナッツ油がバージンココナッツ油である、請求項１又は６のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項９】
１０％を超える濃度の遊離脂肪酸及び２％未満の濃度のモノグリセリドを含有する、請求項１又は４に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１０】
１０ｍｇ／ｇを超えるカプリル酸（Ｃ８）、７ｍｇ／ｇを超えるカプリン酸（Ｃ１０）及び５４ｍｇ／ｇを超えるラウリン酸（Ｃ１２）を含む、請求項９に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１１】
前記モノグリセリドが０．６ｍｇ／ｇを超えるモノカプリリン、０．４ｍｇ／ｇを超えるモノカプリン及び２０ｍｇ／ｇを超えるモノラウリンを含む、請求項９に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１２】
黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、リステリア菌（Ｌ．ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｎｅｓ）及び化膿連鎖球菌（Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）などのグラム陽性菌に対抗して効果的である、請求項１、４、９、１０又は１１のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１３】
コレラ菌（Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａｅ）などのグラム陰性菌に対抗して効果的である、請求項１、４、９、１０又は１１のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１４】
カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）などの酵母に対抗して効果的である、請求項１、４、９、１０又は１１のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１５】
１，３位特異的リパーゼの触媒活性によるココナッツ油の部分加水分解反応から得られる、請求項９、１０又は１１のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１６】
前記１，３位特異的リパーゼがＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉから得られる、請求項１５に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１７】
前記ココナッツ油がバージンココナッツ油である、請求項１５のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１８】
１０％を超える濃度の遊離脂肪酸及び８％を超える濃度のモノグリセリドを含有する、請求項１又は４に記載の改変ココナッツ油。
【請求項１９】
９ｍｇ／ｇを超えるカプリル酸（Ｃ８）、６ｍｇ／ｇを超えるカプリン酸（Ｃ１０）及び６８ｍｇ／ｇを超えるラウリン酸（Ｃ１２）を含む、請求項１８に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２０】
前記モノグリセリドが８ｍｇ／ｇを超えるモノカプリリン、５ｍｇ／ｇを超えるモノカプリン及び４１ｍｇ／ｇを超えるモノラウリンを含む、請求項１８に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２１】
黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、リステリア菌（Ｌ．ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｎｅｓ）及び化膿連鎖球菌（Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）などのグラム陽性菌に対抗してより効果的である、請求項１、４、１８、１９又は２０のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２２】
カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）などの酵母に対抗してより効果的である、請求項１、４、１８、１９又は２０のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２３】
８時間以内のインキュベーションでカンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）を１００％抑制する、請求項２２に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２４】
大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）などのグラム陰性菌の増殖抑制に効果的である、請求項１、４、１８、１９又は２０のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２５】
１，３位特異的リパーゼの触媒活性によるココナッツ油の部分加水分解に続くグリセロリシス反応から得られる、請求項１、４、１８、１９又は２０のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２６】
前記１，３位特異的リパーゼがＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉから得られる、請求項２５に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２７】
前記ココナッツ油がバージンココナッツ油である、請求項２５のいずれか一項に記載の改変ココナッツ油。
【請求項２８】
皮膚疾患の治療及び予防のための、請求項１から２７までのいずれか一項に記載の改変ココナッツ油の使用。
【請求項２９】
食品保存のための、請求項１から２８までのいずれか一項に記載の改変ココナッツ油の使用。
【請求項３０】
身体用衛生製品への処方又は前記身体用衛生製品の処方の一部への混合のための、請求項１から２９までのいずれか一項に記載の改変ココナッツ油の使用。
【請求項３１】
抗菌剤としての、請求項１から３０までのいずれか一項に記載の改変ココナッツ油の使用であって、投与形態はカプセルである使用。
【請求項３２】
動物の疾患を予防するための天然の抗生物質としての、請求項１から３１までのいずれか一項に記載の改変ココナッツ油の使用。
【請求項３３】
１，３位特異的リパーゼでパーム核油を触媒することにより得られる改変パーム核油であって、有効量の中鎖脂肪酸及びそれに対応するモノグリセリドを含有し、抗菌特性を有する改変パーム核油。
【請求項３４】
１０％を超える濃度の遊離脂肪酸及び１％を超える濃度のモノグリセリドを含有する、請求項３３に記載の改変油。
【請求項３５】
前記１，３位特異的リパーゼがＲｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉから得られる、請求項３３に記載の改変油。
【請求項３６】
皮膚疾患の治療及び予防のための、請求項３３又は３４に記載の改変油の使用。
【請求項３７】
食品保存のための、請求項３３又は３４に記載の改変油の使用。
【請求項３８】
身体用衛生製品への処方又は前記身体用衛生製品の処方の一部への混合のための、請求項３３又は３４に記載の改変油の使用。
【請求項３９】
抗菌剤としての、請求項３３又は３４に記載の改変油の使用であって、投与形態はカプセルである使用。
【請求項４０】
動物の疾患を予防するための天然の抗生物質としての、請求項３３又は３４に記載の改変油の使用。
【公表番号】特表２００９−５１８３８９（Ｐ２００９−５１８３８９Ａ）
【公表日】平成２１年５月７日（２００９．５．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５４４２７０（Ｐ２００８−５４４２７０）
【出願日】平成１８年１１月１６日（２００６．１１．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＭＹ２００６／００００２８
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０６７０２８
【国際公開日】平成１９年６月１４日（２００７．６．１４）
【出願人】（５０８０２８３０２）マレーシアン アグリカルチュラル リサーチ アンド ディベロップメント インスティチュート（エムエーアールディーアイ） (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年５月７日（２００９．５．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１１月１６日（２００６．１１．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＭＹ２００６／００００２８
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０６７０２８
【国際公開日】平成１９年６月１４日（２００７．６．１４）
【出願人】（５０８０２８３０２）マレーシアン アグリカルチュラル リサーチ アンド ディベロップメント インスティチュート（エムエーアールディーアイ） (1)
【Ｆターム（参考）】
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