Ｎ−アセチルシステインアミド（ＮＡＣアミド）およびその誘導体を有する方法ならびに組成物を、ヒトおよびヒト以外の哺乳動物の疾患、疾病、病気および病状のための処置および療法において使用する。グルタチオンの新しいソースを提供するためのみならず、細胞および組織における酸化ストレスおよびフリーラジカル酸化物質の形成および過剰生産を抑制、防止、または妨害するために、薬学的または生理学的に許容されるＮＡＣアミドまたはその誘導体の組成物を、単独、または適切な他の薬剤と併用して投与する。

【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は概して、抗酸化物質を用いる、ヒトを含む哺乳類の疾患の処置に関する。より具体的には、本発明は、それを必要とする哺乳類に、単独で、または他の薬剤と併用して、Ｎ−アセチルシステインアミド（ＮＡＣアミド）またはその誘導体の投与を含む、様々な疾患および病気の処置および療法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
酸化ストレスは、タンパク質、ＤＮＡ、および脂質に損傷の原因になる、神経変性および加齢に関連した疾患の進行において重要な役割を果たす。低分子量、疎水性の抗酸化物質化合物は、急性呼吸促迫症候群、筋萎縮性側索硬化症、アテローム硬化性心臓血管疾患、多臓器機能不全のような末梢組織の病気、ならびに中枢神経系神経変性疾病（例えば、パーキンソン病、アルツハイマー病およびクロイツフェルトヤコブ病）の処置において有効である。酸化ストレスは、原因として、他のタイプの疾病と同様に、パーキンソン病、アルツハイマー病およびクロイツフェルトヤコブ病の発症に関係している（Ｄ．Ａｔｌａｓらの特許文献１）。
【０００３】
細胞抗酸化物質の欠乏は、高分子の破壊、脂質過酸化反応、毒素の集溜および最終的には細胞死の原因となる、過度のフリーラジカルを引き起こす可能性がある。この細胞の酸化の防止において抗酸化物質化合物は重要なので、グルタチオン（ＧＳＨ）（γ−グルタミルシステイニルグリシン）などの天然抗酸化物質は、継続的に組織に供給される。ＧＳＨは大部分の細胞によって合成され、また身体内の適当な酸化状態を維持するのに関与する主要な細胞抗酸化物質のうちの１つである。酸化させるとき、ＧＳＨは、グルタチオンレダクターゼを生成する臓器において再循環してもよい二量体、ＧＳＳＧを形成する。成人では、抑制されたＧＳＨは、主に肝臓において、少しばかり、骨格筋ならびに赤血球および白血球によって、ＧＳＳＧから生成され、また血流を通して身体の他の組織に行き渡る。
【０００４】
しかしながら、特定の病気のもとでは、ＧＳＨの正常で生理学的な供給は不十分であり、その行き渡りが不適切であるか、または局所的な酸化要求量が、細胞の酸化を防止するのに高過ぎる。他の状態では、ＧＳＨなどの、細胞抗酸化物質の生成および要求量は不適合であり、従って、身体にこれらの分子の不十分な濃度をもたらす。他の場合では、特定の組織または生物学的な工程は、それらの細胞内濃度が抑圧されるように、抗酸化物質を消費する。どちらの場合も、例えば、グルタチオンなどの抗酸化物質の血清濃度が上昇することにより、細胞に向けることができる抗酸化物質の量が増える。細胞取り込みのための促進輸送系では、取り込みを推進する濃度勾配は増加する。
【０００５】
グルタチオンＮ−アセチルシステインアミド（ＮＡＣアミド）、Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）のアミド形成は、低分子量チオール抗酸化物質およびＣｕ^２＋キレート剤である。ＮＡＣアミドは、細胞損傷に対して保護効果を提供する。ＮＡＣアミドは、赤血球（ＲＢＣ）におけるｔｅｒｔ．−ブチルヒドロキシペルオキシド（ＢｕＯＯＨ）誘発細胞内の酸化を抑制し、ＲＢＣでのＢｕＯＯＨ誘発チオール減少およびヘモグロビン酸化を遅らせることが知られている。この外部から加えられたＮＡＣアミドによるチオール劣化のＲＢＣの回復は、ＮＡＣ使用で見られるより非常に大きくなった。ＮＡＣとは異なって、ＮＡＣアミドは、ヘモグロビンを酸化から保護した。（非特許文献１）。無細胞系では、ＮＡＣアミドは、酸化型グルタチオン（ＧＳＳＧ）と反応して抑制グルタチオン（ＧＳＨ）を生成することが示された。ＮＡＣアミドは、直ちに細胞膜を通過し、細胞内のＧＳＨのに活力を与え、細胞の酸化還元機構に組み入れることにより、細胞を酸化から保護する。中性カルボキシル基のために、ＮＡＣアミドは、脂溶性および細胞透過性の向上した性質を有する。（例えば、Ｄ．Ａｔｌａｓらの特許文献２を参照）。ＮＡＣアミドはまた、血液脳関門のみならず細胞膜も通過する状態では、ＮＡＣおよびＧＳＨより優れている。
【０００６】
ＮＡＣアミドは、タンパク質およびＤＮＡの合成、輸送、酵素活性、代謝、およびフリーラジカルな媒介損傷からの細胞の保護を含む、多くの重要な生物学的現象において、直接的または間接的に作用する可能性がある。ＮＡＣアミドは、身体内の適当な酸化状態を維持するのに関与する強力な細胞抗酸化物質である。ＮＡＣアミドは、酸化生体分子をそれらのもとの活性還元型に再循環させることができ、より有効でない場合、抗酸化物質として、ＧＳＨと同じように、ことによるとそれ以上に有効となる可能性がある。
【０００７】
興奮性アミノ酸の一つであるグルタミン酸、は、中枢神経系（ＣＮＳ）において主要な神経伝達物質のうちの１つである。細胞外グルタミン酸値の上昇は、高血糖症、虚血、低酸素症を含む多くのＣＮＳ疾病（非特許文献２）、ならびにハンチントン病、アルツハイマー病、およびパーキンソン病などの慢性疾病（非特許文献３；ならびに非特許文献４）のみならず急性神経損傷にも関与することが知られている。２つの仕組みが、グルタミン酸の毒性を説明するために提議されている。第１の仕組みは、グルタミン酸の興奮毒性を、３つのタイプの興奮性アミノ酸の受容体を通して媒介されていると説明する（非特許文献５）。受容体媒介のグルタミン酸の興奮毒性に加えて、細胞外グルタミン酸の上昇値は、細胞ＧＳＨ濃度において目立った減少をもたらすシスチンの取り込みを抑制し、酸化ストレスの誘導をもたらすこともまた提議されている（非特許文献６）。
【０００８】
システインは細胞内のＧＳＨ合成のための必須成分である。酸化還元の不安定な性質のために、ほとんど全ての細胞外システインは、その酸化状態である、シスチンの形でで主に存在し、それはシスチン/グルタミン酸トランスポーター、Ｘｃ−系を介して細胞によって取り込まれる。研究は、グルタミン酸およびシスチンは、同じトランスポーターを共有し、従って、細胞外グルタミン酸値の上昇は、細胞内のＧＳＨの減少をもたらすシスチンの輸送を競合的に抑制することを提示している（非特許文献７；ならびに非特許文献８）。抑制グルタチオンの減少は、細胞の抗酸化物質能力の低下、ＲＯＳ（活性酸素種）の蓄積、および最終的にアポトーシス細胞死をもたらす。いくつかの研究は、未熟な皮質ニューロン（非特許文献９；および非特許文献１０）、乏突起膠細胞（非特許文献１１）、培養ラットの星状細胞（非特許文献１２）、神経芽細胞腫細胞（非特許文献１３）、およびＰＣ１２細胞（非特許文献１４）を含み、様々な細胞株において、グルタミン酸による酸化ストレスの誘導を実証してきた。
【０００９】
ＮＡＣ、リポ酸（ＬＡ）、（非特許文献１５）、トコフェロール（非特許文献１６）、およびプロブコール（非特許文献１７）などのある種の抗酸化物質は、ＧＳＨに活力を与えることにより、グルタミン酸の細胞毒性に対して大抵は保護することができる。しかしながら、脳虚血およびパーキンソン病などのある種の神経系疾患では、これらの抗酸化物質の薬剤は、血液脳関門によって妨げられるので、脳の領域における組織のＧＳＨの増進は獲得することはできない（非特許文献１８、および非特許文献１９）。
【００１０】
脳および／または末梢神経組織に影響を及ぼすような神経変性疾病に加えて、ぜんそく、呼吸器関連疾患などの他の疾患、および例えば、急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳまたはルーゲーリック病）、アテローム硬化性心臓血管疾患および多臓器機能不全などの病気は、酸化物質の過剰生産または免疫系の細胞による活性酸素種に関係している。
【００１１】
多くの他の疾患の状態は、ＧＳＨなどの抗酸化物質の濃度の抑制に特に関連づけられている。局所的に特定の臓器または全身性のどちらかにおける抗酸化物質の濃度の低下は、ＨＩＶ／ＡＩＤＳ、糖尿病および黄斑変性を含む臨床的に定義される多くの疾患および疾患状態と関連づけられ、これら全ては、過剰フリーラジカル反応および不十分な抗酸化物質により進行する。他の慢性的な病気はまた、心不全ならびに関連する病気および病状、血管形成術の後の冠動脈再狭窄、真性糖尿病および黄斑変性を含む、抗酸化物質欠乏、酸化ストレスおよびフリーラジカル形成に関連している可能性がある。
【００１２】
臨床および前臨床の研究は、フリーラジカル疾病の範囲と不十分な抗酸化物質の濃度との間の関連を例証してきた。糖尿病性合併症は、細胞性酵素の糖化を促進することによって、抗酸化物質化合物の合成経路を不活性化する、高血糖性の症状の出現の結果であると報告されている。前記結果は、（糖尿病）患者における白内障、高血圧、閉塞性アテローム硬化性心臓血管疾患の有病率、および感染に対する感受性に関連している可能性のある、糖尿病患者における抗酸化物質欠乏である。
【００１３】
高い濃度のＧＳＨなどの抗酸化物質は、血小板、血管内皮細胞、マクロファージ、細胞傷害性Ｔリンパ球および他の免疫系成分の適当な作用に必要となると例証されてきた。近年、ヒト免疫不全ウイルス、ＨＩＶに感染している患者は、血漿、他の体液、マクロファージなどの、特定の細胞型において、低いＧＳＨ濃度を示すことが発見されてきた。これらの低いＧＳＨ濃度は、ＧＳＨ合成における欠陥によるものではないようである。抗酸化物質欠乏は、ＨＩＶを患う患者の低い生存率に関与しているとみられている（１９９７、ＰＮＡＳ ＵＳＡ、第９４巻、ページ１９６７〜１９７２）。これらの疾患の種類における細胞抗酸化物質の低い濃度により、フリーラジカル反応は疾病をますます刺激し悪化させることができるので、細胞において抗酸化物質の濃度を上昇させることは、ＨＩＶ/ＡＩＤＳおよび他の疾病において重要であることが広く認識されている。
【００１４】
ＨＩＶは、細胞器官および高分子の完全な消耗および破壊のみならず、抗酸化物質分子の破壊をもたらす、病理学的フリーラジカル反応を開始することが知られている。哺乳類の細胞では、例えば、抑制抗酸化物質の細胞内の低い濃度およびフリーラジカルの比較的高い濃度の酸化ストレスは、ｍＲＮＡへのＤＮＡの細胞性転写を順に活性化する、ＮＦ−κＢおよびＴＮＦ−αを含む、特定のサイトカインを活性化し、ポリペプチド配列へのｍＲＮＡの翻訳をもたらす。ウイルスに感染した細胞では、ウイルスゲノムは転写され、ＲＮＡウイルスおよびのレトロウイルスのウイルス複製に一般に必要なウイルスのＲＮＡ生成をもたらす。これらの工程は、細胞の比較的酸化した状態、ストレスから生じる病気、抗酸化物質の低い濃度、または抑制細胞産物の生成を必要とする。細胞性転写を活性化する機構は、進化的に高度に保存され、従って、一連の変異はこの工程を避ける、またはこの経路において突然変異酵素および受容体遺伝子産物を有する生命体は、生存者によく適しているという見込みはない。従って、細胞の比較的抑制された状態（酸化還元電位）を維持することによって、後期のウイルス複製におけるステップに必要なウイルス転写を妨げる。
【００１５】
ウイルス複製の酸化的な細胞内の病状の増幅効果は、ＧＳＨなどの抗酸化物質を分解させる、様々なウイルスおよびウイルス産物の作用によって度合いを増す。例えば、非常に多くのジスルフィド結合を有するＨＩＶ表面糖タンパク質であるｇｐｌ２０は通常、感染した細胞の表面上に存在する。ｇｐｌ２０はＧＳＨを酸化させ、細胞内のＧＳＨ濃度の抑制をもたらす。他方では、ＧＳＨは、ｇｐｌ２０のジスルフィド結合を抑制し、従って、ウイルス感染価に必要な、それの生物学的な活性を抑制または除去する。その結果、ＧＳＨなどの抗酸化物質は、かかる酸化タンパク質の生成を抑止し、一旦形成されると、それらを分解する。ウイルス遺伝子産物を活発に複製している細胞では、細胞が低いウイルス活性を有する比較的静止した段階から大量のウイルス複製および細胞死を有する活動期へ移動する可能性がある、事象が次々と起こる可能性がある。これは、酸化還元電位における変化を伴う。抗酸化物質の適正な濃度を維持することによって、この次へのつながりを妨げる可能性がある。
【００１６】
ＨＩＶは、２つの圧倒的に多い経路、すなわち、汚染血液および／または性交によって感染する。小児科の症例では、新生児の約２分の１は胎内で感染し、２分の１は出産時に感染する。まん延の時期が知られているので、この状況は感染の予防の研究を可能にする。最初は、ウイルスの大量の複製を有する、インフルエンザの重症例に似た強烈なウイルス感染がある。数週間以内に、身体が非常にうまく免疫防御を開始するように、この急性期は自然発生的に通過する。それ以来、その個人には、感染表面上の発現はない。しかしながら、ウイルスは、様々な体腔で発見される、例えば、リンパ節、リンパ結節、マクロファージおよび特定の樹枝状多細胞などの免疫系細胞および組織内で複製を継続する。
【００１７】
人目につかず広範囲に及ぶそのような感染は、単にウイルスの問題ではない。複製をすることに加え、ウイルスは、毒性または上昇値において様々なフリーラジカルおよび様々なサイトカインの過剰生成を引き起こす。サイトカインは、多数の反応の徴候となり、また通常極めて低い濃度で存在する、普通に発生する生化学物質である。最終的には、外見的には鎮静期のＨＩＶ感染の平均で７〜１０年後に、腐食性のフリーラジカルおよびサイトカインの毒性の濃度は、感染した個人にさせる表面上の症状を引き起こし始め、免疫系における不全が開始する。１５−ＨＰＥＴＥなどの物質は免疫抑制物質であり、またＴＮＦ−αは他の毒性の因子の中でも筋肉疲労を引き起こす。ウイルス粒子の数は増加し、また患者は、その個人が死亡する前に、２年から４年続く場合がある、後天性免疫不全症候群、ＡＩＤＳを発現する。従って、ＡＩＤＳは、ウイルス感染が、疾患の病因の切っても切れない部分と信じられているが、単にウイルス感染ではない。
【００１８】
さらに、ＨＩＶは突然変異する強力な能力を有する。その能力が、ワクチンを製造する、または長期にわたる抗ウイルス剤の医薬治療を開発することを困難にさせるのである。現在の複雑な投薬計画によってうまく治療できない人が増加するにつれて、耐性ウイルス株の数も増加する。ＨＩＶの耐性株は特に、ウイルスの危険な個体群であり、また無視するこができない健康への害を引き起こす。これらの耐性ＨＩＶの突然変異体はまた、極めて悪性なウイルス型の活性を抑制することができるワクチンの開発に困難性を追加する。さらに、ウイルスと大部分は無関係となる可能性のあるフリーラジカルおよびサイトカインの継続的な生成は、ＡＩＤＳを患う患者の免疫系、消化管、神経系、およびの他の多くの臓器の機能障害を永続させる。刊行されている科学文献は、これらの多様性のある臓器系の機能障害は、ウイルスまたはそのフリーラジカルによって生じる抗酸化物質の化合物の全身欠乏が原因であると指摘している。例えば、ＧＳＨは、抗酸化物質対フリーラジカルの主要な防護手段であるので、ＨＩＶ感染ではそれが消費される。ＧＳＨ濃度の低下のさらなる原因は、ｇｐｌ２０細胞表面タンパク質などの、ＨＩＶタンパク質における多くのジスルフィド結合の存在である。ジスルフィド結合はＧＳＨと反応して、それを酸化させる。従って、他の抗酸化物質は、正常な機能がＨＩＶ感染によって悪影響を及ぼすＧＳＨなどの抗酸化物質を置換するために使用する必要がある。
【００１９】
現在のＨＩＶ／ＡＩＤＳの医薬品は、１つの工程において２つの異なる標的に同時に影響を及ぼす、医薬品相乗作用の概念の良い利点を得ている。効果は追加作用以上のものである。現在使用している薬物は、ウイルス複製の長い経路において２つの非常に異なる点を抑制するために選択された。当業者によって理解されるウイルス複製の経路は、米国特許６，４２０，４２９号に説明されている。新しい抗ＨＩＶ／ＡＩＤＳ療法は、逆転写酵素抑制剤およびプロテアーゼ抑制剤の種類の追加の薬剤を含む。さらに、薬物は、短い長さの線をそれより長い線につなぎ合わせるのと同じように、ＨＩＶのＤＮＡを感染細胞のＤＮＡに溶け込ませる、ウイルスのインテグラーゼ酵素を妨げるよう発達過程にある。ＨＩＶは移動標的であるように思われ、急速に変化するように見えるので、見通しは芳しくないように見えるが、ワクチンの開発はさらに継続する。ワクチンの開発は、ウイルスの免疫細胞の親和性によってもまた阻害される。
【００２０】
ＨＩＶに感染している個人は、血清酸可溶性チオール、および血漿、末梢血単球および肺上皮被覆液中のＧＳＨなどの抗酸化物質の濃度が低くなる。さらに、細胞内のＧＳＨ濃度が高いＣＤ４^＋およびＣＤ８^＋Ｔ細胞は、ＨＩＶ感染が進行するにつれて、選択的に消失することが知られている。炎症性のサイトカインは、抗酸化物質化合物が減少した細胞において、さらに効率良くＨＩＶの複製を刺激するので、特にかかるサイトカインの濃度が高くなった個人において、この欠乏は、ＨＩＶ複製を可能にし、疾患の進行を早める。さらに、ＧＳＨなどの抗酸化物質の減少はまた、アポトーシスまたはプログラム細胞死として知られている過程に関連する。従って、人工的にＧＳＨを減少する細胞間の過程は、たとえその過程自体が死をもたらすものではなくても、細胞死につながる可能性がある。
【００２１】
真性糖尿病（「糖尿病」）は、初期の段階または自己免疫（Ｉ型、ＩＤＤＭ）および晩期発症型または非インスリン依存性（ＩＩ型、ＮＩＤＤＭ）の２つの形態が知られている。Ｉ型は、糖尿病の症例の約３０％を構成している。残りの症例は、ＩＩ型である。一般に、糖尿病の発病は、Ｉ型は突然であり、ＩＩ型は潜行性または慢性である。症状は、Ｉ型に関連して、ゆっくりと着実に体重が減る、多尿、空腹感およびのどの渇きを含む。肥満はしばしばＩＩ型に関連し、感染しやすい個人において原因因子であると考えられてきた。血糖値はしばしば高く、尿に糖が頻繁に混じる。病気を治療しないまま放置すると、被害者は、飲酒している人に似ている悪臭のある息のするケトアシドーシスを発現する可能性がある。未治療の糖尿病の早急な内科的合併症は、神経系症状、さらに糖尿病性昏睡までも含むことができる。
【００２２】
高血糖（血糖値濃度が非常に高い）の継続的で致命的な発生のために、糖化と称する非酵素的化学反応は、細胞内でしばしば発生し、必須酵素の慢性的な非活性化の原因となる。最も重要な酵素のうちの１つであるγ−グルタミル−システイン合成酵素は糖化され、直ちに不活性化する。この酵素は、肝臓内のグルタチオンの生合成における最も重要なステップにおいて関与する。この特定の糖化の最終結果は、糖尿病患者でのＧＳＨの生成における欠乏である。
【００２３】
ＧＳＨは、例えば、ミトコンドリア内のＡＴＰと称される化学的エネルギーを生成するような、多面的な、必須機能のために身体全体にわたり要求度が高い。ＧＳＨの欠乏または欠如のために、脳細胞、心臓細胞、神経細胞、血液細胞および他の多くの細胞型は、正常に機能することができず、また酸化ストレスおよびフリーラジカル形成に関連するアポトーシスを通して破壊され得る。ＧＳＨは、ヒトの身体において主要な抗酸化物質であり、また新規に合成することができる唯一のものである。さらにそれは、植物および動物の両方において、最も一般的な低分子量のチオールである。ＧＳＨがなければ、免疫系は機能することができず、また中枢神経系および末梢神経系は異常となり、ひいては機能が止まる。一酸化窒素の担体としてのＧＳＨに依存しているので、血管緊張、心臓血管系の調整に関与する血管拡張剤は、うまく機能せず、結果的に役に立たなくなる。全ての上皮細胞はＧＳＨを必要とするように見えるので、ＧＳＨなしでは、小腸の上皮細胞もまた正常に機能せず、また価値のある微量栄養素は失われ、栄養素には障害が起き、また細菌は侵入門戸を得て、感染を引き起こす。
【００２４】
糖尿病では、ＧＳＨの前駆体の使用は、糖化による律速酵素の破壊のためにＧＳＨの欠乏の調整に役立つことができない。ＧＳＨの欠乏が深刻になるにつれて、よく知られている糖尿病の続発症がより重篤に進行する。糖尿病患者において利用できるＧＳＨの供給は不十分なであるので、糖尿病患者に発現する合併症は、本質的にどんどん進行するフリーラジカルの損傷によるものである。例えば、ＨＩＶ／ＡＩＤＳの状況と同様に、ＧＳＨ濃度が低下するとき、免疫系は虚脱に近づくので、糖尿病の個人はより感染しやすくなる。さらに、末梢血管系は構成されるようになり、また血管拡張（弛緩）の性質を効率的に発揮するために一酸化窒素を一定に保つのに不十分な量ではＧＳＨは利用できないので、四肢への血液供給は、大幅に減少する。壊疽はよく起こる続発症であり、次に続く切断はしばしば、後年に生じる。末梢神経障害、足および下肢の一般の感覚消失が発現し、しばしば制御できないしゃく熱またはそう痒などの異常な知覚が続く。網膜症および腎症は、例えば、新しい血管壁の脆弱性のためにしばしば出血する、新しい血管および毛細血管の過剰な出芽および増殖である微小血管障害が実質的な原因となる後期の事象である。この出血は、網膜および腎臓に損傷を引き起こし、結果として失明および人工透析を必要とする腎機能停止が生じる。さらに、ＧＳＨ欠乏が深まるにつれて、白内障の発生の頻度が高まる。大動脈および中動脈は、早期の心筋梗塞、およびさらに重度となる重症のアテローム硬化性心臓血管疾患が加速した部位となる。重症なアテローム硬化性心臓血管疾患を治療するのに、冠動脈血管形成術を使用する場合、糖尿病患者は、再狭窄と称する、心臓血管が再び狭くなる傾向が強くなっているようである。
【００２５】
失明の原因としての黄斑変性は、母集団年齢が高まるにつれ、浮上する問題である。加齢に関連した黄斑変性（ＡＲＭＤ）は、遅い（乾燥型）または速い（湿潤型）の破壊の発病および眼斑における桿体および錐体の回復できない消失のどちらかによって特徴付けられる。斑は、網膜のほぼ中心であり、眼の水晶体は最も強い光に集中する。桿体および錐体として知られている視細胞は、中枢神経系の副産物および活動性部分である。それらは、顔および顔の表情などの詳細を見るための細かい視覚的弁別、読書、運転、機械および電気機器の操作、ならびに周囲の一般的認知に関与しており、必要不可欠である。最終的に、桿体および錐体の破壊は、機能的、法的な失明につながる。病気に関連する明らかな痛みがないので、発病の第１の警告は通常、顕著な視力の喪失である。これは、すでに後期の事象を示す場合がある。この病理学的過程では、本当に第１の事象のうちの１つは、黄斑または黄点での網膜の表面上に沈着する黄色い物質の斑または広範性の滴のどちらかとして最初に出現する、「ドルーゼン」と称される物質の形成であると今では考えられている。これは、日光が水晶体によって集中し、眼力のための桿体の最も高い密度を含む網膜の領域である。色を検出する錐体が、この疾患と同様に消失するが、失明を引き起こす桿体の消失であると信じられている。ドルーゼンは、化学的に分析されており、またフリーラジカル反応によって過酸化物にされる脂質の混合物で構成されていることが分かっている。
【００２６】
網膜色素上皮（ＲＰＥ）細胞の消失は、ＡＲＭＤで最初に発生すると信じられている。一旦網膜斑の領域がＲＰＥ細胞を欠くと、桿体の消失、また最終的にはいくつかの錐体の消失が発生する。最後には、毛細血管の出芽が始まり、後期のＡＲＭＤに関連する一般的な細小血管障害が発生する。さらに、ＲＰＥ細胞は、正常に機能するために大量のＧＳＨを必要とすることが知られている。ＧＳＨ濃度がＲＰＥ細胞の培養において非常に低下するとき、ＲＰＥ細胞は死滅を開始する。これらの細胞の培養が培地のＧＳＨによって補足される場合、それらは活況を呈する。細胞培養の研究によって示されるように、疾患の進行の速度は、網膜内、および恐らくこれらの細胞内のＧＳＨにおけるより深刻な欠乏によって決定されるということが明らかになっている。
【００２７】
「近」紫外線（ＵＶＢ）および主に日光からの高輝度の視光は、ＡＲＭＤの強力な要因であると一般に信じられている。淡色の虹彩を有する人々は、戸外で仕事を継続する人々および日光が最も強烈な赤道域にいる人々と同様に、黄斑変性の危険性の高い母集団を構成する。例えば、喫煙などの、フリーラジカルな追加の行動は、発現しているＡＲＭＤの危険性を増加させる。いくつかの取り組みが、化学療法を含め、ＡＲＭＤと闘うための治療が不成功に終わっている。現在、ＡＲＭＤを治療するための有効な療法はない。、新生血管増殖を焼灼することによって、疾患の遅い発病の形態で生成される損傷を遅らせるために広く使用されてきた、レーザー療法が開発されてきた。しかしながら、疾患が進行し始めると、その疾患がもたらす結果が確実となる。
【００２８】
リンパ球の作用へのチオールおよび特にＧＳＨの重要性は、長年にわたり知られてきた。適当な濃度のＧＳＨは、混合リンパ球反応、Ｔ−細胞増殖、Ｔ−およびＢ−細胞分化、細胞傷害性のＴ−細胞活性、およびナチュラルキラー細胞活性のために必要とされる。適当なＧＳＨ濃度は、好中球での微小管重合のために必要であることが分かっている。腹腔内に投与されたＧＳＨは、マウスでの細胞傷害性のＴ−リンパ球の活性化を増大し、食餌療法のＧＳＨは、老齢のマウスにおいてＧＳＨの脾臓の状態を改善し、Ｔ−細胞媒介の免疫応答を向上させることが分かっている。マクロファージの存在は、それらの周辺の活性リンパ球の細胞内ＧＳＨ濃度の大幅な増加をもたらすことができる。マクロファージは、強力な膜輸送系を介してシスチンを摂取し、細胞外空間に放流する、大量のシステインを生成する。マクロファージのＧＳＨ濃度（および、ひいてはシステイン相当物）は、外因性のＧＳＨによって増大することができると例証されてきた。Ｔ−細胞は、自身のシステインを生成することはできず、ＧＳＨの合成の律速前駆体としてＴ−細胞に必要とされる。マイトジェン刺激性のリンパ球における細胞内のＧＳＨ濃度およびＤＮＡ合成の活性は、外因性システインによって激しく増大されるが、シスチンによっては増大されない。Ｔ−細胞では、シスチンのための膜輸送活性は、システインよりも１０倍低い。結果として、Ｔ−細胞は、健康的な生理学上の条件下でさえ、システインのベースライン供給が低い。マクロファージのシステイン供給機能は、Ｔ−細胞が、ＧＳＨの少ない状態からＧＳＨの豊富な状態へ移行することができる機構の重要な部分である。
【００２９】
Ｔ−細胞の活性化のための細胞内のＧＳＨ濃度の重要性は確立している。Ｔ−細胞でのＧＳＨ濃度は、ＧＳＨを使用した治療後に上昇することが報告されており、この上昇は、無傷のＧＳＨの取り込みによるもの、細胞外破壊、破壊産物の輸送、およびそれに続く細胞内のＧＳＨ合成によるものかどうかは不明確である。１０％〜４０％のＧＳＨの減少により、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＴ−細胞活性化を完全に抑制することができる。細胞内のＧＳＨの減少は、反応の初期において、マイトジェン誘発性の細胞核サイズの変態を抑制することが分かっている。システインおよびＧＳＨの減少はまた、同種異系の混合リンパ球培養の後期において、循環Ｔ−細胞クローンなどの活性Ｔ−細胞、および活性細胞傷害性のＴ−リンパ球前駆体細胞の機能に影響を及ぼす。前活性ＣＴＬ前駆体細胞の継続増殖および／または細胞傷害性のエフェクター細胞内のそれらの機能分化のみならず、ＩＬ−２依存性のＴ−細胞クローンにおけるＤＮＡ合成およびタンパク質合成は、ＧＳＨ減少に対して感受性が非常に高い。
【００３０】
グルタチオンの状態は、酸化的な損傷に対する保護の主要な決定因子である。ＧＳＨは、一方で、グルタチオンペルオキシダーゼによって触媒作用を及ぼす反応において過酸化水素および有機ヒドロペルオキシドを減少させることによって、また他方では、酸化物質ストレスを誘導できる求電子性の生体異物の中間体を共役させることによって作用する。疑いなく、腎臓は毒素および老廃物の除去において機能し、尿細管の上皮組織は様々な毒性化合物にさらされるために、尿細管の上皮細胞はＧＳＨの濃度が高い。細胞外培地から細胞に輸送される、ＧＳＨは、腸および肺からの分離細胞を、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド、メナジオンまたはパラコート誘発の毒性から実質上保護する。腎臓分離細胞はまた、酸化物質の損傷から保護するためにＧＳＨの内因性合成を補足することができるＧＳＨを輸送する。肝臓のＧＳＨの含有量はまた、外因性のＧＳＨの存在において増量（すなわち、倍に）することが報告されている。これは、腸および肺胞の細胞のために報告されているように、直接的な輸送によるものか、または細胞外劣化、輸送、および細胞内の再合成によるもののどちらかである可能性がある。
【００３１】
ＧＳＨのシステイン部分の求核硫黄原子は、毒性求電子試薬によって誘発される弊害から細胞を保護する機構として役立つ。グルタチオンＳ−共役の生合成は、薬物および化学解毒の重要な機構であることは確立されている。基質のＧＳＨ共役は一般に、ＧＳＨおよびグルタチオンＳトランスファーゼ活性を必要とする。特定であるが、重複もしている基質を有する複合グルタチオンＳトランスファーゼの存在により、酵素系は多様な化合物に対処できる。いくつかの種類の化合物は、グルタチオン共役形成によって、毒性の代謝産物に変換させると信じられている。例えば、ハロゲン化アルケン、ヒドロキノン、およびキノンは、ＧＳＨとのＳ−共役の形成を介して毒性代謝産物を形成することが分かっている。腎臓は、この経路によって代謝させる化合物のための主要な標的臓器である。腎臓に対する選択的毒性は、近位尿細管細胞におけるＳ−共役の過程によって形成される中間体を蓄積する、およびこれらの中間体を毒性代謝産物に生物的に活性化させる腎臓の能力の結果である。
【００３２】
ラットおよびマウスに対するモルヒネおよび関連化合物の投与は、肝臓のＧＳＨの最大約５０％の消失をもたらす。モルヒネは、モルヒネ６−デヒドロゲナーゼ活性による、皮下注射によるマウスではモルヒネより９倍毒性がある、非常に肝細胞毒の化合物のモルヒノンへ生体輸送されることが知られている。モルヒノンは、グルタチオンＳ−共役の形成を可能する、α、β不飽和ケトンを保有する。この共役の形成は、細胞ＧＳＨの消失と相互に関連がある。この経路は、モルヒネのための主要な解毒過程を表す。ＧＳＨを使用した前治療は、マウスではモルヒネにより誘発される致死性から保護する。
【００３３】
マウスの神経芽細胞腫細胞でのメチル水銀の有害効果は、ＧＳＨの共同投与により大幅に防止される。ＧＳＨは、メチル水銀と複合化し、細胞への輸送を防止し、細胞損傷を防止するために細胞抗酸化物質の可能性を向上させる場合がある。メチル水銀は、チューブリンスルフヒドリル基の酸化により、および過酸化傷害による変化によって細胞微小管にて有害効果を発揮すると信じられている。ＧＳＨはまた、ニッケルおよびカドミウムなどの他の重金属による毒作用から保護する。
【００３４】
腎臓解毒作用およびその毒性における知られている役割のために、ＧＳＨは、全身毒性を抑制するために、シスプラチンなどの腎毒性薬剤とともに癌化学療法を受けている患者のための補助療法として調査されてきた。１つの研究では、進行性の腫瘍性疾患を患う患者に、シクロホスファミド１回分の前後すぐに、２，５００ｍｇ２回の分割量のＧＳＨを静脈内投与した。ＧＳＨは良好な耐容性を示し、予想外の毒性を生成しなかった。顕微鏡的血尿を含む膀胱損傷の不足は、この化合物の保護役を支援する。他の研究は、シスプラチンおよび／またはシクロホスファミドの併用療法とのＧＳＨ静脈内共同投与は、これらの薬物の望ましい細胞傷害性効果を過度に妨害しない一方で、関連する腎臓毒性を抑制することを示している。
【００３５】
ＧＳＨは極端な低毒性を有し、また経口ＬＤ_５０の計量は、どんな毒性効果をも調べるために動物によって摂取されなければならない、ＧＳＨの単なる質量のために、実行が困難である。ＧＳＨは、特にアスコルビン酸欠乏の症例において毒性になることができ、またこれらの効果は、非アスコルビン酸欠乏の動物においては、毒性はこの投与量では見られなかったが、この２倍の投与量では見られた一方で、例えば、３回の分割量で３．７５ｍｍｏｌ／ｋｇ毎日（１，１５２ｍｇ／ｋｇ毎日）を投与したアスコルビン酸欠乏のモルモットにおいて例証される場合がある。
【００３６】
酸化ストレスおよび酸素フリーラジカルの存在ならびに細胞および組織において関連する疾患発症に関係している多くの疾患を処置するために、当該分野において他の化合物および治療上の側面の必要性がある。疾患の発症における酸化高ストレスを克服するために、安全で、さらにもっと強力な、ＧＳＨ以外の抗酸化化合物が必要となる。理想的には、かかる化合物は、血液脳関門を直ちに渡り、細胞膜を容易に通過すべきである。ビタミンＥおよびＣなどの抗酸化物質は、特にビタミンＥについて言えば、抗酸化作用を提供するために、細胞質に達っするよう細胞膜を通って効率的に渡らないので、酸化ストレスを低下させる際に完全に有効ではない。
【特許文献１】米国特許第６，４２０，４２９号
【特許文献２】米国特許第５，８７４，４６８号
【非特許文献１】Ｌ．Ｇｒｉｎｂｅｒｇら、Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ．、２００５ Ｊａｎ １、３８（ｌ）：１３６−４５
【非特許文献２】Ｃｈｏｉ、Ｄ．Ｗ．、Ｎｅｕｒｏｎ、ｌ（８）：６２３−３４、１９８８
【非特許文献３】Ｍｅｌｄｒｕｍ Ｂ．およびＧａｒｔｈｗａｉｔｅ Ｊ．、Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ．、１１（９）：３７９−８７、１９９０
【非特許文献４】Ｃｏｙｌｅ Ｊ．Ｔ．およびＰｕｔｔｆａｒｃｋｅｎ Ｐ．、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２６２（５１３４）：６８９−９５、１９９３
【非特許文献５】Ｍｏｎａｇｈａｎ Ｄ．Ｔ．ら、Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｏｘｉｃｏｌ．、２９：３６５−４０２、１９８９
【非特許文献６】Ｍｕｒｐｈｙ Ｔ．Ｈ．ら、Ｎｅｕｒｏｎ、２（６）：１５４７−５８、１９８９
【非特許文献７】Ｂａｎｎａｉ Ｓ．およびＫｉｔａｍｕｒａ Ｅ．、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２５５（６）：２３７２−６、１９８０
【非特許文献８】Ｂａｎｎａｉ Ｓ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ．、７７９（３）：２８９−３０６，１９８４
【非特許文献９】Ｍｕｒｐｈｙ Ｔ．Ｈ．ら、ＦＡＳＥＢ Ｊ．、４（６）：１６２４−３３、１９９０
【非特許文献１０】Ｓａｇａｒａ Ｊ．ら、Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、６１（５）：１６６７−７１、１９９３
【非特許文献１１】Ｏｋａ Ａ．ら、Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．、１３（４）：１４４１−５３、１９９３
【非特許文献１２】Ｃｈｏ Ｙ．およびＢａｎｎａｉ Ｓ．、Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、５５（６）：２０９１−７、１９９０
【非特許文献１３】Ｍｕｒｐｈｙ Ｔ．Ｈ．ら、Ｎｅｕｒｏｎ．、２（６）：１５４７−５８、１９８９
【非特許文献１４】Ｆｒｏｉｓｓａｒｄ Ｐ．およびＤｕｖａｌ Ｄ．、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ Ｉｎｔ．、２４（５）：４８５−９３、１９９４
【非特許文献１５】Ｈａｎ Ｄ．ら、Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ．、２７３：１７７１−８、１９９７
【非特許文献１６】Ｐｅｒｅｉｒａ Ｃ．Ｍ．およびＯｌｉｖｅｉｒａ Ｃ．Ｒ．、Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ．、２３（４）：６３７−４７、１９９７
【非特許文献１７】Ｎａｉｔｏ Ｍ．ら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｌｅｔｔ．、１８６（２−３）：２１１−３、１９９５
【非特許文献１８】Ｐａｎｉｇｒａｈｉ Ｍ．ら、Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．、７１７（ｌ−２）：１８４−８、１９９６
【非特許文献１９】Ｇｏｔｚ Ｍ．Ｅ．ら、Ｊ Ｎｅｕｒａｌ Ｔｒａｎｓｍ Ｓｕｐｐｌ、２９：２４１−９、１９９０
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００３７】
（発明の要旨）
本発明は、前記身体の細胞、組織および臓器において酸化ストレスの前記副作用および／またはフリーラジカルの前記生成に起因する、または関連する疾病、病気、病状および疾患を処置するための新しい適用における、強力な抗酸化物質Ｎ−アセチルシステインアミド（ＮＡＣアミド）もしくはその誘導体、または、生理学的に許容されるその誘導体、塩、またはエステルの使用を提供する。ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、疾病、病気、病状および疾患などの改善および治療のための方法および組成物の使用のために提供される。
【００３８】
本明細書で使用されるように、本発明の文脈での「被検体」は、限定することなく、哺乳動物（例えば、ヒト、家畜（ｄｏｍｅｓｔｉｃ ａｎｉｍａｌ）および猫、犬、畜牛および馬などを含む家畜（ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ））を網羅する。「それを必要とする被検体」とは、本明細書に開示されるように、ＮＡＣアミドまたはその誘導体の投与または導入が、当業者によって有益であると見なされる、疾病、病気、病状および疾患の１つ以上の発現を有する被検体である。
【００３９】
本発明の側面では、ＮＡＣアミドを含む方法および組成物は、抗酸化物質を細胞および組織に提供し、生命体内の、酸化ストレスおよび細胞の酸化の前記副作用を抑制する。本発明は、酸化ストレスを抑制するのに有効な量のＮＡＣアミドまたはその誘導体の薬学的に許容される処方物を、ヒトまたはヒト以外の哺乳動物に投与することによって、本明細書に説明している前記病気、疾患、病状に関連する酸化ストレスを抑制する方法を提供する。
【００４０】
本発明の他の側面では、ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、前記酸化物質の過剰生産および／またはフリーラジカル酸素種に関連する疾病、病気、病理または疾患を患う生命体を処置するために提供される。本発明に従い、ＮＡＣアミド治療は、予防薬または治療薬となり得る。
【００４１】
「治療上の処置」または「治療上の効果」は、防止（ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）もしくは予防（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）効果、または疾病、病気、病理もしくは疾患またはその続発症の徴候もしくは症状の重篤性の緩和を獲得する工程を含み、他の処置方法（例えば、化学療法および放射線療法）によってもたらされるものを含み、本発明の前記方法によって治療される被検体の前記病気における、身体検査、研究室、または機器による方法で検出でき、当業者によって統計的および／または臨床的に有意であると見なされるどんな改善をも意味する。
【００４２】
「予防薬の処置」または「予防薬の効果」は、他の処置法（例えば、化学療法および放射線療法）によってもたらされるものを含み、身体検査、研究室、または機器による方法で検出でき、当業者によって統計的および／または臨床的に有意であると見なされる疾病、病気、病理、もしくは疾患またはその続発症の徴候および症状の前記重篤性のどんな再燃の防止のみならず、本発明の前記方法によって処置される被検体の前記病気におけるどんな悪化の予防をも意味する。
【００４３】
本発明の他の側面では、ＮＡＣアミドは、局所に適用する場合、皮膚、髪、爪、および粘膜表面の審美的病気および皮膚疾患の処置および／または予防に使用する。本発明に従って、（ａ）ＮＡＣアミド、もしくはその誘導体、またはその適切な塩またはエステル、ＮＡＣアミドもしくはその誘導体を含む、生理学的に許容される組成物、および（ｂ）局所的に許容される媒体または担体を含む、局所性投与のための組成物を提供する。本発明はまた、患者の患部に対するＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミド誘導体を含む組成物の局所性投与を必要とする審美的病気および／または皮膚疾患の前記処置および／または予防のための方法を提供する。
【００４４】
さらに他の側面では、本発明は、ＮＡＣアミドもしくはその誘導体、または薬学的に許容される塩もしくはエステルを使用して、癌および前癌状態の療法のために有効な方法および組成物を提供する。本発明は具体的には、アポトーシスが癌または前癌状態の細胞において、選択的に誘発される、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を含む、方法および組成物に関する。
【００４５】
他の側面では、本発明は、同種移植患者における移植片拒絶の前記抑圧のためのＮＡＣアミドまたはその誘導体を含む組成物および方法を提供する。
【００４６】
他の側面では、本発明は、幹細胞移植ための幹細胞、具体的には、ヒトを含む、受容動物への導入前に、ｉｎ ｖｉｔｒｏで培養された幹細胞の前記増殖を支援または助長するための方法におけるＮＡＣアミドまたはその誘導体を提供する。
【００４７】
他の側面では、本発明は、治療上有効な量のＮＡＣアミドもしくはその誘導体および薬学的に許容されるその組成物の前記投与に関与する、被検体における中枢神経系（ＣＮＳ）の損傷または疾患、外傷性脳損傷、神経毒性または記憶障害の抑制、予防、処置、または予防および処置の両方の方法を提供する。
【００４８】
他の側面では、本発明は、微生物を殺傷またはその前記増殖を抑制するための前記白血球の能力を向上させるために、ＨＩＦ−１またはＨＩＦ−１αの細胞濃度を高めるのに有効な量のＮＡＣアミドを提供することによって、前記微生物を殺傷またはその前記増殖を抑制する方法を提供する。さらに、本発明に従って、例えば、微生物、ウイルス、マイコプラズマなどを殺傷またはその増殖を抑制する際の、また本明細書でさらに説明するように、結果として生じる疾患および病気を処置する際の、生体防御の目的のための対策としてＮＡＣアミドを使用する。
【００４９】
他の側面では、本発明は、正常な細胞に、癌においてのみ以前に発見されてきたＲｈｏ ＧＴＰ加水分解酵素の異型、前記Ｒａｃ１ｂタンパク質を発現させることが分かっている、ＭＭＰ−３などのメタロプロテイナーゼの前記効果によって生じる組織破壊を防止する方法を提供する。Ｒａｃ１ｂは、大量の組織分裂を引き起こす主遺伝子を活性化することにより癌を促進することができる、高度な活性酸素種（ＲＯＳ）の前記生成を刺激する。本発明に従って、ＮＡＣアミドをそれが必要な細胞、組織、および／または被検体の前記身体に投与または導入することによってＲａｃ１ｂを誘発するＲＯＳの生成の前記効果を防ぐために、組織損傷および劣化を引き起こす前記経路での分子を標的にするために、ＮＡＣアミドを使用する。従って、ＭＭＰ−３および逆に作用する機能を抑制するために、前記ＥＭＴを誘発するためにＲＯＳが遺伝子を活性化させる前記工程によって直接または間接的にＲＯＳを標的にするためにＮＡＣアミドを使用することができる。
【００５０】
本発明の他の側面は、前記内因性生成を刺激するための一定期間に、それが必要な細胞、組織、および／または被検体にＮＡＣアミドを投入する工程または導入する工程を含む、サイトカインおよび造血因子の内因性生成を刺激する方法を提供する。前記免疫系を調節する因子であり、またその生物学的な活動は、様々な原因の造血および免疫抑制（例えば、赤血球、脊髄、またはリンパ球の抑圧だが限定されない）に関与するもののみならず、新生物および感染病などの多様なヒトがかかる疾患に関与する、例えば、ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−Ｉ、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−ＩＯ、エリスロポエチン、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ、およびＧＭ−ＣＳＦ、だがこれらに限定されないサイトカインおよび造血因子の生成を刺激するためにＮＡＣアミドを使用することができる。これらのサイトカインおよび造血因子の外因性投与は、許容される製剤の前記不足、それらの法外な費用、生物学的な媒体における短い半減期、用量決定における困難、多くの毒性のアレルギー効果に関連する制限を有するので、ＮＡＣアミドによるこれらのサイトカインおよび造血因子の内因性生成の刺激はとりわけ有利である。
【００５１】
他の実施態様では、本発明は、細胞、組織、および／または被検体において遺伝子発現でのＮＡＣアミドの応答変化を検出するためのＮＡＣアミドを含み、遺伝子発現において変化を誘発するために、一定期間ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を前記細胞、組織、および／または被検体に、投与する工程または導入する工程と、遺伝子発現における前記変化を検出する工程とを含む、方法および組成物を網羅する。ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、数ある中でもアポトーシス、血管形成、走化性に関与する遺伝子などの遺伝子発現において変化を誘発することができる。
【００５２】
他の側面では、本発明は、ＮＡＣアミドの方向をもった送達（ｄｉｒｅｃｔｅｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ）を、葉酸（葉酸塩）またはグルタチオンのための受容体の高い濃度を示す癌細胞などの細胞に提供する。この側面に従って、ＮＡＣアミド（「ＮＡＣＡ」）は共役を形成するために、前記受容体（例えば、葉酸またはグルタチオン）のためのリガンドに結合され、その後このＮＡＣＡ−リガンドの共役は、当業者に知られている手順を利用して、直ちに注入可能なナノ粒子に被覆または吸着する。この側面に従って、ＮＡＣアミド（「ナノＮＡＣＡ粒子」）を含む前記ナノ粒子は、前記ＮＡＣアミドがその望ましい効果を発揮する癌または腫瘍細胞によって選択的に取り込まれることができる。従って、本発明は、リガンドのための表面受容体の高い濃度を発現する宿主細胞に対して、ＮＡＣアミドの方向をもった送達の方法であって、前記方法は、（ａ）ＮＡＣアミドリガンドの共役を形成するために、ＮＡＣアミドを前記表面受容体リガンドに結合させる工程と、（ｂ）前記ＮＡＣアミドリガンドの共役をナノ粒子に吸着させる工程と、（ｃ）（ｂ）の前記ナノ粒子を前記宿主に導入する工程とを含む方法を提供する。本発明は、リガンドのための表面受容体の高い濃度を発現する宿主細胞に対して、ＮＡＣアミドの方向をもった送達の方法であって、前記方法は、（ａ）アセチル化樹枝状ナノポリマーをリガンドに共役させる工程と、（ｂ）ＮＡＣアミドリガンドナノ粒子を形成するために、（ａ）の前記共役リガンドをＮＡＣアミドに結合させる工程と、（ｃ）（ｂ）の前記ナノ粒子を前記宿主に導入する工程とを含む方法をさらに提供する。
【００５３】
本発明の他の側面は、前記式Ｉの化合物を提供する。
【００５４】
【化１３】

式Ｉにおいて、 Ｒ_１はＯＨ、ＳＨ、またはＳ−Ｓ−Ｚ；
ＸはＣまたはＮ；
ＹはＮＨ_２、ＯＨ、ＣＨ_３−Ｃ＝Ｏ、またはＮＨ−ＣＨ_３；
Ｒ_２は存在しない、Ｈ、または＝Ｏ
Ｒ_３は存在しない、または
【００５５】
【化１４】

式Ｉにおいて： Ｒ_４は、ＮＨまたはＯ；
Ｒ_５は、ＣＦ_３、ＮＨ_２、またはＣＨ_３
および式Ｉにおいて： Ｚは、
【００５６】
【化１５】

Ｒ_１がＳ−Ｓ−Ｚなら、ＸおよびＸ’は同一、ＹおよびＹ’は同一、Ｒ_２およびＲ_６は同一、ならびにＲ_３およびＲ_７は同一を条件とする。
【００５７】
本発明は、本明細書に開示する前記化合物を含むＮＡＣアミド化合物およびＮＡＣアミド誘導体をさらに提供する。
【００５８】
他の側面では、本発明の前記化合物のＬ−異性体またはＤ−異性体を調整するための工程を提供し、第１の混合物を生成するために、塩基をＬ−またはＤ−シスチンジアミドジヒドロクロライドに加える工程と、その後、真空下で前記第１の混合物を加熱する工程と；メタノール溶液を前記加熱した第１の混合物に加える工程と；第１の残渣を獲得するために、前記混合物を塩酸アルコールで酸性にする工程と；前記第１の残渣を、アンモニアで飽和したメタノールを有する第１の溶液に溶解させる工程と；第２の混合物を生成するために、第２の溶液を前記溶解した第１の残渣に加える工程と；前記第２の混合物を沈殿させて、洗浄する工程と；第２の残渣を獲得するために、前記第２の混合物をろ過し、乾燥させる工程と；第３の混合物を生成するために、前記第２の残渣と液体アンモニアおよび塩化アンモニウムのエタノール溶液を混合する工程と；前記第３の混合物をろ過し、乾燥させる工程により、前記Ｌ−またはＤ−異性体化合物を調製する工程とを含む。
【００５９】
いくつかの実施態様では、前記工程は、エーテルに前記Ｌ−またはＤ−異性体化合物を溶解させる工程と；第４の混合物を生成するために、水素化アルミニウムリチウム、酢酸エチル、および水のエーテル溶液を前記溶解したＬ−またはＤ−異性体化合物に加える工程と、；前記第４の混合物をろ過し、乾燥させる工程により、前記Ｌ−またはＤ−異性体化合物を調製する工程とをさらに含む。
【００６０】
本発明の別の側面は、本明細書に開示している前記化合物のＬ−異性体またはＤ−異性体を調整する工程を提供し、第１の混合物を生成するために、Ｓ−ベンジル−Ｌ−またはＤ−システインメチルエステル塩酸塩またはＯ−ベンジル−Ｌ−またはＬ−セリンメチルエステル塩酸塩を塩基と混合する工程と；エーテルを前記第１の混合物に加える工程と；前記第１の混合物をろ過し、濃縮する工程と；第１の残渣を獲得するために、工程（ｃ）および（ｄ）を繰り返す工程と；第２の混合物を生成するために、酢酸エチルおよび第１の溶液を前記第１の残渣に加える工程と；第２の残渣を生成するために、前記第２の混合物をろ過し、乾燥させる工程と；第３の混合物を生成するために、前記第２の残渣と液体アンモニア、ナトリウム金属、および塩化アンモニウムのエタノール溶液を混合する工程と；前記第３の混合物をろ過し、乾燥させる工程により、前記Ｌ−またはＤ−異性体化合物を調製する工程とを含む。
【００６１】
本発明のさらに他の側面は、本明細書に開示している化合物を調製するための工程を提供し、第１の混合物を生成するために、シスタミンジヒドロクロライドとアンモニア、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を混合する工程と；沈殿させるために、前記第１の混合物を放置する工程と；第１の残渣を生成するために、前記第１の混合物をろ過し、乾燥させる工程と；第２の混合物を生成するために、前記第２の残渣と液体アンモニア、ナトリウム金属、および塩化アンモニウムのエタノール溶液を混合する工程と；前記第２の混合物をろ過し、乾燥させる工程により、前記化合物を調製する工程とを含む。
【００６２】
本発明は、本明細書に開示しているＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を含む食品添加物をさらに提供する。
【００６３】
本発明によって提供される追加の側面、特長および利点は、後述の詳細な説明および例証から明白となるであろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００６４】
（発明の詳細な説明）
本発明は、酸化ストレスおよび／または、フリーラジカル生成が、体内の細胞と、組織と、臓器とに損傷（頻繁に全身性損傷）を起こす様々な疾病、病気、病状および疾患に使用される有効かつ強力な抗酸化物質、グルタチオンＮ−アセチルシステインアミド（ＮＡＣアミド）、（図１）または生理学的あるいは薬学的に許容されるその誘導体、塩、エステルの使用に関する。本発明は、処置および本発明における治療上の方法に使用されるＮＡＣアミド（例えば、水溶性ＮＡＣアミド）、生理学的に許容されるその誘導体、塩、あるいはエステルを含む薬学的に許容される組成物を包含する。
【００６５】
Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）のアミドの形態であるグルタチオンＮ―アセチルシステインアミド（ＮＡＣアミド）は、新規低分子量チオール抗酸化物質およびＣｕ^２＋キレート剤である。ＮＡＣアミドは、フリーラジカルのスカベンジャーとしての役割上、細胞損傷に対し保護効果がある。哺乳動物の赤血球（ＲＢＣ）において、ＮＡＣアミドは、ｔ−ブチルヒドロキシペルオキシド（ＢｕＯＯＨ）誘発細胞内酸化を阻害し、ＲＢＣ内のＢｕＯＯＨ誘発チオール減少およびヘモグロビン酸化を遅延すると示されている。ＮＡＣアミドを外部に塗布することで、チオールが減少したＲＢＣの回復は、ＮＡＣを使用した時よりも、非常に大きかった。ＮＡＣとは異なって、ＮＡＣアミドは、ヘモグロビンを酸化から保護した。（Ｌ．Ｇｒｉｎｂｅｒｇら、Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ．、２００５年１月１日、３８（ｌ）：１３６−４５）。無細胞系では、還元型グルタチオン（ＧＳＨ）を生成するために、ＮＡＣアミドは酸化型グルタチオン（ＧＳＳＧ）と反応することが知られていた。ＮＡＣアミドは、細胞の酸化還元機構に合併しながら、細胞膜を容易に透過し、細胞内ＧＳＨを補充し、細胞を酸化から保護する。中性カルボキシル基のため、ＮＡＣアミドは、脂溶性および細胞の透過性の向上した性質を有する。（例えば、Ｄ．Ａｔｌａｓらの米国特許５，８７４，４６８号を参照）。ＮＡＣアミドはまた、血液脳関門のみならず細胞膜も通過する状態では、ＮＡＣおよびＧＳＨより優れている。ＮＡＣアミドは、Ｄ・Ａｔｌａｓらへの米国特許６，４２０，４２９号に記載されている通りに調製され、その内容物は、ここに参照することにより組み込まれる。
【００６６】
ＮＡＣアミドは、タンパク質およびＤＮＡの合成、輸送、酵素活性、代謝、およびフリーラジカルな媒介損傷からの細胞の保護を含む多くの重要な生物学的現象において、直接的または間接的に機能する可能性がある。ＮＡＣアミドは、細胞内の適当な酸化状態を維持するのに関与する強力な細胞抗酸化物質である。ＮＡＣアミドは、多くの細胞で合成され、酸化生体分子をそれらのもとの活性還元型に再循環させることができる。抗酸化物質として、ＮＡＣアミドは、ＧＳＨと同じように、ことによるとそれ以上に有効となる可能性がある。
【００６７】
一つの実施形態において、本発明は、特に神経細胞および組織の神経変性疾患におけるグルタミン酸塩誘発細胞毒性の防止、減少、保護、あるいは緩和するためのＮＡＣアミドを含む方法および組成物を包括する（実施例１参照）。本実施形態において、ＮＡＣアミドは、グルタミン酸塩により誘発された酸化毒性の影響から神経組織の細胞を保護する。理論に固着されないように、ＮＡＣアミド処理は、病的細胞内のＧＳＨぺルオキシダーゼ活性の基質として、ＧＳＨを供給するために機能することができる。本発明において、ＮＡＣアミドは、脂質過酸化反応を抑制し、活性酸素種（ＲＯＳ）を清掃し、酸化ストレスに対し、闘い、克服するＧＳＨの細胞内レベルを強化する。さらに、ＮＡＣアミドは鉛をキレートし、鉛誘導性酸化ストレスを予防することができる。ＮＡＣアミドは、脳に侵入し、抗酸化作用を行うために容易に血液脳関門を通過するため、脳およびその関連部に影響する神経障害および疾患に対し、特に有益で有利である。
【００６８】
本実施形態における処置可能な異なる神経変性疾病および疾患は、脳虚血、パーキンソン病を含む。ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストとして作用し、抗アポトーシスタンパクＢｃｌ−２の細胞内レベルを強化し、グルタチオンに対する抗酸化物質を増加することにより、ＮＡＣアミドは、誘導てんかん性発作に対する抵抗性を提供するため、発病中の脳損傷の減少と、ミトコンドリア作用への影響を通し、外傷性脳損傷中の保護目的と、炎症の減少および減衰と、低下したかん流疾患によるかん流の向上と、外傷性脳損傷の減少と、クロイツフェルト・ヤコブ病等のプリオン病および狂牛病の治療とのために使用することが出来る。ＮＡＣアミドは、特に一次知覚神経細胞の死を予防するために、神経系予防と、ミトコンドリア保存と、神経損傷後に見込まれ治療とに使用することが出来る。
【００６９】
その他の実施形態において、本発明は、細胞および組織を放射線誘導性酸化ストレスから保護するためのＮＡＣアミドを含む方法および組成物を含む。本実施形態において、ＮＡＣアミドは、放射線誘導性酸化ストレスから組織を守る上で、ＮＡＣよりも優れている（実施例２）。チェルノブイル事件後の医療危機および、テロリストによる核攻撃の脅威により、高線量の全身被ばくが生じ、高線量の放射線被ばくに起因する３つの可能性のある致死的な脳血管、胃腸および造血の臨床的症候群の誘導により死に至るという関心が高まった。前駆症候群の後の胃腸症候群と、骨髄死の併発は、不可逆性ショックを引き起こす脱水症と貧血と、感染とを誘発する。亜急性の胃腸症候群および造血症候群に対する現在の処置は、脱水症と感染を防止および骨髄再生を促進するための血漿量増大と、血小板と、抗生物質などの支持治療を含む。１０Ｇｙ以上の放射線量へのヒトの全身暴露は、一様に致命的であるとされている。治療処置で、１５Ｇｙまでの全身照射は生存可能であるが、２０Ｇｙを超越した場合の症状は、対処不可能である。
【００７０】
照射後観察された組織損傷は、タンパクと脂質とＤＮＡの酸化に導く組織の微妙な酸化促進剤／抗酸化剤の均衡を崩壊する、活性酸素種（ＲＯＳ）の過剰生産が一因である。例えば、グルコサミンシンテターゼ活性部位スルフヒドリル基の酸化は、胃腸症候群の毒性における鍵となる因子である。ＲＯＳに暴露されたとき、ポリ不飽和脂肪酸は、酸化され、金属存在下で、マロンジアルデヒド（ＭＤＡ）などの炭化水素とアルデヒドに分解するヒドロペルオキシドになることが出来る。この脂質の過酸化は、増加した膜の浸透性および膜タンパクの酸化と通して膜機能の重度の損傷を引き起こす可能性がある。ＤＮＡの酸化は、鎖分解および結果として起こる改変あるいは細胞死につながることがある。ＧＳＨは、ＲＯＳの清掃および、血漿と、脳と、腎臓と、肝臓と、肺などの組織内の酸化均衡の維持に関与する主要な細胞内チオールである。本実施形態において、ＮＡＣアミドは、放射線被ばく後のこれら組織内のＧＳＨレベルを著しく向上する（実施例２）。放射線暴露による脊髄損傷の防止にも、ＮＡＣアミドの使用が包含される。
【００７１】
その他の実施形態において、本発明は、それを必要とする細胞と組織および／またはその被験体に、内因性の産生を刺激する期間、ＮＡＣアミドの投与あるいは導入を含むサイトカインおよび造血因子の内因性の産生を刺激するためのＮＡＣアミドを含む方法および組成物を含む。ＮＡＣアミドは、免疫システムを調整する因子であり、その生物活動は、腫瘍性疾患と、感染症のみならず、様々な原因による造血および免疫機能低下（赤血球、骨髄系、またはリンパ球の抑制など制限無く）など様々なヒトの疾患に関与するＴＮＦ−α、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−Ｉ、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、エリスロポエチン、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦおよびＧＭ−ＣＳＦとを含む（ただし必ずしもこれに限定されない）サイトカインおよび造血因子の産生を刺激するために使用する事が出来る。
【００７２】
ここに記載された通り、「内因性」は細胞、組織、生命体および被験体内に自然に生じることを意味する。
【００７３】
その他の実施形態において、本発明は、細胞、組織および／または被験体内の遺伝子発現におけるＮＡＣアミドの応答変化を検出するためのＮＡＣアミドを含む方法および組成物を包含し、遺伝子発現において変化を誘導する期間、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を細胞、組織、および／または被験体に投与または導入する工程と、遺伝子発現の変化を発見する工程を包含する。細胞とは、内皮細胞、平滑筋細胞、免疫細胞（例えば、赤血球、リンパ球、または骨髄系細胞）と、赤血球、リンパ球、骨髄系細胞の前駆細胞、上皮細胞、線維芽細胞、神経細胞などである。組織とは、髪、肌、または爪の組織、血管組織、脳組織、またその他の多数の組織を含む被験体のいかなる組織である。遺伝子発現の変化は、マイクロアレイ解析によって検出されるのが好ましいが、その他の検出法は、制限無く、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応法（ＰＴ−ＰＣＲ）、ノーザンブロット法、免疫蛍光発光、免疫ブロット法または酵素結合のイムノソルベントアッセイを包含することが出来るという意味であり、これら全ては、これらの当業者によく知られている技法である。
【００７４】
ＮＡＣアミドおよびＮＡＣアミドの誘導体は、例えば、抗血管新生効果を示す内皮細胞内で変化を誘導することができる。ＮＡＣは、培養において内皮細胞の走化性を抑制し、抗酸化作用およびアンギオスタチンの上方制御を介し、血管の増殖および分化に関与する遺伝子の調整を含む抗血管新生効果を生じると言われている（Ｐｆｅｆｆｅｒ、Ｕら、（２００５）Ｍｕｔ．Ｒｅｓ．５９１：１９８−２１１）。したがって、ＮＡＣアミドおよびＮＡＣアミド誘導体は、例えば、腫瘍の成長および転移を阻止または抑制することで、抗がん剤として血管新生を抑制するために使用することが出来る。
【００７５】
細胞、組織、および／あるいは被験体は、ＮＡＣアミドあるいはＮＡＣアミドの誘導体の存在下において、刺激物にさらされることが出来る。例えば、刺激物には、ケモカインＣＸＣＬ１−１６、ＣＣＬ１−２７、ＸＣＬ１、ＸＣＬ２、ＲＡＮＴＥＳ、ＭＩＰ１−５（α、β、γアイソフォーム）、ＭＣＰ−１から５などの走化剤または化学誘引物質剤の存在下で培養された細胞が含まれる。細胞、組織、および被験体は、薬学的薬剤、薬、または処置様式により刺激されることもある。刺激後、ＤＮＡ，ＲＮＡまたはタンパク質は、細胞、組織、および／または被験体から単離され、遺伝子発現の変化が検出できる。例えば、総ＲＮＡは、当該分野において公知の従来技術により、細胞から単離することができ、生じるｃＤＮＡは、合成され続いてマイクロアレイ解析用のシリコンチップなどの固相担体にハイブリダイズされる。刺激に応じた遺伝子発現の発現データおよび変化は、その後、ＧｅｎｅＳｐｒｉｎｇ（Ｓｉｌｉｃｏｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）などのコンピューターソフトウェアプログラムを用いて解析される。
【００７６】
遺伝子発現において変化を示すそのような遺伝子の非制限的な例として、細胞接着、アポトーシスと、ケモカインおよびサイトカイン生合成と、細胞外マトリックス成分の合成と、内皮細胞と、炎症と、ＭＡＰキナーゼと、メタロプロテイナーゼとＮＦ−κＢと、一酸化炭素と、形質転換増殖因子（ＴＧＦ）シグナル伝達と、血管に関わるあるいは付随する遺伝子が挙げられる。Ｐｆｅｆｆｅｒらは、調節された（例えば上方制御あるいは下方制御された）複数のＮＡＣ応答遺伝子として、ＨＳＰ４０（熱ショックタンパク質４０；ＤｎａＪホモログ）と、ＳＥＲＣＡ２（心筋内のＣａ２＋輸送ＡＴＰａｓｅ）と、ＭＫＰ２（ＭＡＰキナーゼホスファターゼ）と、ＴＩＰ３０（ＨＩＶ−１ Ｔａｔ相互作用タンパク質２）と、ＢＴＧ１（Ｂ細胞転座遺伝子１）と、ＴＸＬ（チオレドキシン様）と、ＣＲＡＤＤ（デス（ｄｅａｔｈ）受容体アダプタータンパク質）と、ＷＳＸ１（サイトカイン受容体クラスＩ）と、ＥＭＡＰ２（内皮単球活性タンパク質）と、Ｊａｇｇｅｄ１（ノッチ受容体用リガンド）と、ＭＥＡ５（ヒアルロノグルコサミニダーゼ）と、ＶＲＮＡ（インテグリンαＶ）と、ＣＯＬ４Ａ１（コラーゲンαｌタイプＩＶ）と、ｕＰＡ（ウロキナーゼ・プラスミノーゲン活性化因子）と、ＣＰＥ（カルボキシペプチダーゼＥ）と、ＴＳＰＡＮ−６（膜貫通４スーパーファミリーメンバー６）と、ＦＧＦＢ（塩基性線維芽細胞増殖因子）と、Ｉ−ＴＲＡＦ（ＴＲＡＦ相互作用因子）と、ＣＤＨＨ（カドへリン１３）と、ＩＬ１０ＲＢ（インターロイキンー１０受容体β）と、ＭＡＰ−１（アポトーシス１のモジュレータ）と、ｈＣＯＸ−２（シクロオキシゲナーゼー２）と、ＣＡＳ−Ｌ（Ｃａｓのようなドッキングタンパク質）、ＣＥＤ−６（ＣＥＤ−６タンパク質）と、ＣＸ３７（ギャップ結合タンパク質α４）と、ＡＢＣＧ１（ＡＴＰ結合カセットタンパク質、サブファミリーＧ）、ＴＲＡＩＬ（ＴＮＦリガンドスーパーファミリーメンバー１０）と、ＥＳＥＬ（内皮接着分子１、セレクチンＥ）と、ＣＨＯＰ（ＤＮＡ−損傷−誘導型転写３）と、ＰＩＭ２（ｐｉｍ−２癌遺伝子）と、ＭＩＦ−Ｉ（ホモシステイン−誘導タンパク質）と、ＰＩＧ−Ａ（ホスファチジルイノシトールグリカン、クラスＡ）と、ＫＩＡＡ００６２と、ＨＫ２（ヘキソキナーゼ２）と、ＵＤＰＧＤＨ（ＵＤＰ−グルコースデヒドロゲナーゼ）と、ＥＲＦ２（ジンク・フィンガータンパク質３６、Ｃ３Ｈ２型様）と、ＲＡＭＰ（ジンク・フィンガータンパク質１９８）と、Ｄｏｃｌ（卵巣癌１に下方制御された）と、ＧＢＰ−Ｉ（グアニル酸結合タンパク質１、インターフェロン誘導性）と、ＧＲ（グルココルチコイド受容体）と、ＥＮＨ（ＬＩＭタンパク質−エニグマホモログ）と、Ｉｄ−２Ｈ（ＤＮＡ結合２の阻害物質）と、ＢＰＧＭ（２，３−ビスホスホグリセリン酸ムターゼ）と、ＨＯＸＡ４（ホメオボックスＡ１０）と、ＥＦＮＢ２（ｅｐｈｒｉｎ−Ｂ２）と、ＡＲＴ４（Ｄｏｍｂｒｏｃｋ ｂｌｏｏｄ群）と、ＫＩＡＡ０７４０（タンパク質１を含むＲｈｏ−関連ＢＴＢドメイン）が含まれると報告した。
【００７７】
その他の実施形態において、本発明は、感染性薬剤および他の異物を食菌し、微生物を排除するために、活性酸素種およびタンパク質分解酵素により媒介されて、マクロファージおよび好中球を刺激するためのＮＡＣアミドを含む方法および組成物を含む。ＮＡＣアミドは、グルタチオンの効用を上げ、マクロファージ機能を向上するために使用することができる。グルタチオン効用を上げることは、次に胎児性アルコール症候群の肺胞機能を向上させ、未熟な肺胞マクロファージ機能を強化するになる。
【００７８】
その他実施形態において、本発明は、不可逆的鎌状細胞赤血球の形成を妨げる細胞内還元型グルタチオンレベルを上げるためのＮＡＣアミドを含む方法および組成物を含む。鎌状細胞貧血症およびサラセミアの防止および処置するためのＮＡＣアミドの投与に関する方法が提供される。
【００７９】
その他の実施形態において、本発明は、持続した高頻度インターフェロンγおよび細胞を生産する腫瘍壊死因子αにより示される通り、サイトカインパターンが調整される組織病理学的調整の機構を介し、リーシュマニアを処理するためのＮＡＣアミドを含む方法および組成物を含む。ＮＡＣアミドは、２つのグルタチオンとともに、動物におけるエフェクター反応の調整に使用される。
【００８０】
実施一形態において、ＮＡＣアミドは、サイトカイン合成と、活性化と、下流のプロセスの下方制御するため、および／または、炎症誘発性シグナルにおいて拮抗作用を与えるために使用される。そのような効果は、サイトカインが疾患の病態生理学に関与する多くの疾患の処置において、効果的である。例えば、酸化ストレスのメディエーターであるサイトカインは、ＧＳＨ／酸化型グルタチオンジスルフィド（ＧＳＳＧ）輸送および再循環に作用することにより酸化還元平衡を修正することができる。（サイトカインのグルタチオン媒介制御および抗酸化物質の役割に関する総説については、ＪＪ．Ｈａｄｄａｄ，２００５，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４２（９）：９８７−１０１４、および ＪＪ．Ｈａｄｄａｄ，２００２，Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ，１４（１１）：８７９−８９７を参照）。その上、ある薬物の投与に関連した肝臓損傷は、炎症誘発性のサイトカインまたは成長因子（例えば、インターフェロンγ）の無調節な生成を刺激する炎症状態により開始あるいは増大される、薬物代謝および薬物消失に関与する酵素およびタンパク質の下方制御につながる。したがって、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、炎症誘発性サイトカインレベルを減少することができる薬剤として、薬物誘発肝臓細胞毒性（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｏｘｉｃｉｔｙ）毒性の抑制および／または取り扱いに有効である。
【００８１】
その他の実施形態において、本発明は、化学療法後あるいは途中の骨髄毒性に対するグルタチオン減少の有無に関わらないアルキル化剤を含む癌防御物質として使用するＮＡＣアミドおよびその誘導体を含む方法および組成物を含む。
【００８２】
その他の実施形態において、本発明は、敗血症、とくにバクテリア敗血症および、グラム陰性敗血性ショック含む敗血性ショックの様々な面を処置するためのＮＡＣアミドあるいはその誘導体を含む方法あるいは組成物を含む。ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、発熱性サイトカインの刺激、合成、または放出を妨げるため、また、炎症誘発性サイトカインをコードする遺伝子の調節を通して炎症の起因元を抑制するために、ヒトの末梢血単核球を通して作用することにより、ヒトブドウ球菌エンテロトキシンＡ（ＳＣＣ）熱を防止する核因子ＮＦ−κＢのインヒビターとして作用する。本実施形態において、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、脂質過酸化反応を抑制するため、および急性化膿性髄膜炎および脳炎の子供の疾患状態を改善するために使用される。ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、百日咳菌による百日咳毒素分泌物を抑制するためおよび、炎症を制限し強力宿主防衛を高めることによる致死的な敗血症の処置のために使用される。低下した細菌コロニーが生存を高めるため、好中球の感染部位および遠位部位への移動は、上方制御され、また最適なＧＳＨレベルは、敗血症に効果的に対応するために重要である。その上、免疫細胞により放出されたＲＯＳは、敗血症および敗血症ショックにおける重要なメディエーターである。正常な免疫応答中、抗酸化物質は、主に炎症誘発性メディエーターの調節を介し、進行中の免疫応答を下方制御する働きをする。
【００８３】
他の実施形態において、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を含む方法および組成物は、微生物など（例えば、バクテリアと、寄生虫と、線虫と、酵母菌と、真菌と、変形体と、マイコプラズマと、胞子）が原因でおこる感染および疾患（例えば、マラリア感染と、結核とリケッチア感染）の処置に使用することができる。関連側面において、ヒトに疾患をもたらす連鎖球菌、ブドウ球菌、サルモネラ菌、バチルス（結核菌）等などの多種のバクテリアによる感染は、低酸素症誘発転写因子１またはＨＩＦ−１のレベルを上げるための体内の白血球（すなわち白血球細胞）による直接反応を誘発することが最近発見された。ＨＩＦ−１タンパク質は、細胞ＤＮＡに結合し、低酸素環境において細胞機能の手助けをするために特異遺伝子を活性化する。代わりに、ＨＩＦ−１は、バクテリアを殺傷するために協力しあう、低分子タンパク質と、酵素と、酸化窒素などの抗菌性化合物を生成および放出するために、白血球細胞を刺激する。その上、感染部位に生じる低酸素レベルは、基本的に侵入した微生物を摂取および破壊するマクロファージおよび好中球のＨＩＦ−１を活性化することが発見された。白血球細胞内のＨＩＦ−１レベルが上がるほど、抗バクテリアの活性も上がる。本発明の本側面および白血球細胞の死滅機能を制御する場合におけるＨＩＦ−１の影響を考慮して、バクテリア等の直接死滅に対する代替法とは、バクテリア死滅能力をブースト（ｂｏｏｓｔ）するために白血球細胞内のＨＩＦ−１の活性を促進する小分子などの薬剤を使用し、その結果、免疫系の自然防御機構の作用を通し、感染に対する解決を促進する。その薬剤の一つが、ＮＡＣアミドであり、これはＨＩＦ−１、すなわちＨＩＦ−１αの細胞レベルを増加させ、その結果、微生物を死滅するためにマクロファージなどの白血球細胞の能力を強化し微生物の増殖を死滅あるいは阻害する方法に用いることができる。ＮＡＣアミドの脂溶性および細胞透過性の強力な特質を有しないＮ−アセチル−Ｌ−システイン、ＮＡＣ、グルタチオン（ＧＳＨ）前駆体およびＲＯＳスカベンジャーでは、上皮細胞内においてＨＩＦ−１αを誘発することが示されているので（ＪＪ．Ｅ．Ｈａｄｄａｄら、２０００、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７５：２１１３０−２１１３９）、これらの細胞の殺菌潜在能力を活性化させるために白血球細胞内のＨＩＦ−１α生成を調整するＮＡＣアミドの使用は、本発明によって提供される改善された抗酸化物質処置として受け入れられている。本発明は、さらに、バクテリア感染、とくに抗生物質耐性または、結核を引き起こす微生物などの多抗生物質耐性における処置として使用される場合の静菌性薬剤として、ＮＡＣアミドまたはその誘導体の使用法を目的としている。
【００８４】
関連形態において、本発明は、感染または汚染微生物の死滅を誘発するための生態防御薬としてのＮＡＣアミドまたはその誘導体の使用を目的としている。これらの種類の微生物は、一般に広りそして／または抗生物質耐性となるように遺伝子的に修正された場合、健康への深刻な害を及ぼすことがある。以下の一覧は、ＮＡＣアミドおよびその誘導体が適切な対応策として提供され、罹患生命体および／またはその細胞を処置するために単独あるいは他の活性化合物、薬剤、物質と併用して使用される微生物、ウイルス、疾患および薬剤の種類を説明する。
【００８５】
伝染性疾患：アフラトキシン、アルファウイルス東部ウマ脳炎ウイルス、アルファウイルスベネズエラウマ脳炎ウイルス、抗生物質耐性マイコバクテリア結核、アレナウイルスフニンウイルス、アレナウイルスラッサ熱ウイルス、回虫（線虫）、鳥インフルエンザ、炭疽菌（炭疽菌）、ボレリア菌、ブルセラ菌、セパシア菌槌骨（鼻疽）、オウム病クラミジア（オウム病）、クラミジアトラコマチル（トラコーマ）、ボツリヌス菌（ボツリヌス中毒症）、ウェルシュ菌（ガス壊疽）、コクシジオイデス・イミティス、コクシエラ・バーネッティ（Ｑ熱リケッチア）、クリプトスポリジウム・パルバム、渦鞭毛藻神経毒素（麻痺性貝毒）、メジナ虫（糸状虫）、エボラウイルス、赤痢アメーバ（アメーバ症）、ウェルシュ菌のイプシロン毒素、大腸菌、フラビ・ウイルス属黄熱病ウイルス（ウエスト・ナイル・ウイルス、デング熱など）、野兎病菌（野兎病菌）、ランブル鞭毛虫（ランブル鞭毛虫症）、ハンタウイルス、ヘニパウィルス、ウイルス属ニパウイルス（ニパ脳炎）、ＨＩＶおよびＡＩＤＳ、インフルエンザ、ドノバン・リーシュマニア、マールブルグ・ウイルス、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、ライ菌（ハンセン病）、マイコバクテリウム・ウルセランス（ブルーリ腫瘍）、ナイロウイルスクリミア・コンゴ出血熱、アメリカ鉤虫／ズビニ鉤虫（鉤虫）、回旋糸状虫（糸状虫症）、オルトポックスウイルス、原病性ヘモフィルス、原病性サルモネラ菌、原病性赤痢菌、原病性連鎖球菌、静脈ウイルスリフトバレー熱ウイルス、熱帯熱マラリア原虫、卵形マラリア原虫、三日熱マラリア原虫、四日熱マラリア原虫（マラリア）、リシン毒素（トウゴマ油）、リケッチア・リケッチイ（ロッキー山紅斑熱）、リケッチア・チフィ（発疹チフス）、サルモネラ・チフィ（腸チフス）、マンソン住血吸虫、Ｓ．住血吸虫、Ｓ．日本住血吸虫、シゲラ・ディゼンテリエ、天然痘、ブドウ球菌腸毒素Ｂ、ダニ媒介脳炎ウイルス、ダニ媒介出血熱ウイルス、トキソプラズマ原虫、トレポネーマ、トリコテセン系マイコトキシン、ヒト鞭虫（鞭虫）、トリパノソーマ・ブルーセイ、ガンビアトリパノソーマおよびローデシアトリパノソーマ、ビブリオ種（コレラ）、バンクロフト糸状虫およびマレー糸状虫、ペスト菌（黒死病）。
【００８６】
その他の害：ルイサイトと、窒素と、硫黄マスタードとを含むびらん剤、水素シアン化合物とシアン塩化物とを含む血液剤、ハイブリッド生命体と、遺伝子組み換え生命体と、抗生物誘発毒素と、自己免疫ペプチドと、免疫模倣剤と、両生物兵器と、ステルスウイルスと、生体調節因子および生物モジュレータとを含む外来剤、ヒ素と、鉛と、水銀とを含む重金属、ＢＺを含む無能力化剤、タブンと、サリンと、ソマンと、ＧＦと，ＶＸと，Ｖ−ガスと、第三世代神経ガスと、有機リン農薬と、カルバメイト系殺虫剤とを含む神経ガス、ホスゲンおよび塩素塩化ビニルを含む肺薬剤である核物質および放射線物質、ベンジンと、クロロホルムと、トリハロメタンとを含む揮発性剤。本発明において、ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、バイオテロに関連した、および／またはバイオテロにより生じた、既知および新興の自然伝染性疾患と、外傷（例えば過剰出血）と、その他の事象に対する刷新的な処置としての役目を果たすことが出来る。
【００８７】
実例的に、発疹チフスおよび斑点熱リケッチア症の発症の原因となるリケッチアは、血管内皮細胞内に侵入後、特に脳および肺において、深刻な有害な血管症状および出血症状（例えば、血管の浸透性および浮腫の増大）を引き起こす。Ｒ．リケッチア感染した内皮細胞は、細胞膜に過酸化的損傷を引き起こすＲＯＳを生成する。（ＤＪ・Ｓｉｌｖｅｒｍａｎら、１９９０、Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ，５９０：１１１−１１７；Ｄ．Ｈ．Ｗａｌｋｅｒら、２００３、Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９９０：１−１１）．Ｒ．リケッチア感染した内皮細胞に対する酸化ストレス媒介損傷が、ＧＳＨなどの宿主成分の減少および、ＲＯＳ誘発損傷に対する宿主防衛として働くカタラーゼのレベルに関連しているため、過酸化水素およびＲＯＳの濃度は、細胞内で増加しＲＯＳ誘発細胞損傷を引き起こす。同じように、マイコプラズマ（例えばマイコプラズマニューモニエ）に感染した細胞（例えば線維芽細胞）もまた、過酸化水素の細胞内濃度増加およびカタラーゼ濃度減少を生じ、それにより、感染細胞の死につながる酸化ストレスをもたらす。（Ｍ．Ａｌｍａｇｏｒら、１９８６、Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．，５２（１）：２４０−２４４）。リケッチアや、マイコプラズなどの微生物を感染により細胞内に誘発された酸化ストレスの改善効果を提供するために、ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、治療上の抗酸化物質として感染宿主に提供される。本発明による、細胞および／または生命体（例えば感染した宿主哺乳動物）への、単独あるいは、他の薬剤および／または抗酸化物質と併用したＮＡＣアミドの投与により、微生物の感染により誘発された酸化的損傷の量および範囲が制限できる。
【００８８】
別の実施形態では、本発明は、脳室周囲白質軟化症（ＰＶＬ）の防止に使用するためのＮＡＣアミドまたはその誘導体を備える方法および組成物を含む。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、神経保護を提供し、また発達中の脳の白質損傷におけるＬＰＳ誘発炎症反応に対するＯＰＣの変性を減衰し得る。さらに、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、ＰＶＬおよび脳性麻痺（ＣＰ）のリスクを最小限にする手段としての胎盤感染の処置として使用してよい。
【００８９】
別の実施形態では、本発明は、骨粗しょう症処置のためのＮＡＣアミドまたはその誘導体を備える方法および組成物を含む。腫瘍壊死因子のメンバーであるＲＡＮＫＬは、その関連受容体であるＲＡＮＫの結合を通して、破骨細胞の分化、活性化、および生存を規制する。ＲＡＮＫは、いくつかのＴＮＦ受容体関連因子（ＴＲＡＦ）と相互に作用し、Ａｋｔ、ＮＦ−κＢ、およびＭＡＰＫを含む信号伝達分子を活性化させることができる。受容体活性化による活性酸素種の一時的上昇は、細胞の二次情報伝達物質としての機能を果たすことが示されてきたが、ＲＡＮＫ信号経路におけるＲＯＳの関与は、特徴が明らかにされていない。ＲＡＮＫＬは、ＲＯＳ生成および破骨細胞を刺激することができる。この実施形態によると、ＮＡＣアミドを使用して破骨細胞を前処置あるいは処置し、ＲＡＮＫＬ誘発Ａｋｔ、ＮＦ−κＢ、およびＥＲＫの活性化低下を達成することができる。ＮＡＣアミドによるＮＦ−κＢ活性の低下は、ＩＫＫ活性およびＩκＢαリン酸化反応の減少と関連付けてよい。ＮＡＣアミドまたはその誘導体による前処置は、骨再吸収活性および破骨細胞生存に要求される、ＲＡＮＫＬ誘発アクチン環形成を低下させるために使用することができる。ＮＡＣアミドまたはその誘導体を備える方法および組成物は、破骨細胞の妨害および干渉により、骨粗しょう症を改善するために使用され、またＲＡＮＫＬ誘発細胞機能を低下させることにより、反応性酸化ストレスレベルを下げ、骨量の減少を防止する有益な効果を有することができる。
【００９０】
関連する実施形態では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、反応性酸化種（ＲＯＳ）による破骨細胞刺激を媒介するチオールチオレドキシン−１を妨害することにより、また、特にエストロゲンが欠乏している状況で骨量の減少の原因となるＴＮＦ−αを妨害することにより、骨粗しょう症処置に使用される。
【００９１】
別の実施形態では、本発明は、多嚢胞性卵巣症候群の処置に使用されるＮＡＣアミドまたはその誘導体を備える方法および組成物を含む。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、ＰＣＯＳ多嚢胞性卵巣症候群におけるホモシステインおよび脂質状態を回復させるための処置上の薬剤として使用してもよい。
【００９２】
別の実施形態では、本発明は、例えば硫黄マスタード（ＨＤ誘発肺損傷）などの毒物暴露、およびそれに関わる病気の処置および療法におけるＮＡＣアミドまたはその誘導体の使用を包含する。毒素に暴露されてきたあるいは毒物暴露を患う個人に対する、ＮＡＣアミドまたはその誘導体による処置は、炎症反応の低下を実現するために、好中球数を減少させてよい。ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、硫黄マスタード蒸気暴露に誘発された肺損傷を有する患者に対する処置化合物として有効であってよい。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、経口あるいは気管支肺胞洗浄としてのいずれかで投与することができる。抗グルタミン酸毒素活性を有する薬剤として、ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、ＣＷ、発疱剤、硫黄マスタード、ナイトロジェンマスタード、クロロエチルアミン、ルイサイト、神経ガスＯ−エチルＳ−（２−［ジ−イソプロピルアミノ］エチル）メチルホスホロチオエート（ＶＸ）、タブン（ＧＡ）およびサリン（ＧＢ）、およびソマンＤＧ、および血液剤クアノゲンクロライドを含む人工的な軍事用薬剤における脳および／または肺損傷、および認知機能障害を妨げるための方法および組成物において有効であり、また有機リンに誘発される痙攣および神経病理学的損傷の防止に有効である。
【００９３】
別の実施形態では、本発明は、熱傷の処置における使用のためのＮＡＣアミドを備える方法および組成物を含む。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、ＮＦ−κＢを妨げることができ、火傷および火傷敗血症を減少させることが示されてきた。ＮＡＣアミドまたはその誘導体を使用して、微小血管循環を保護し、組織脂質過酸化反応を減少させ、心拍出量を向上させ、要求される急速輸液の量を減少させることができる。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、火傷に関連する心臓のＮＦ−κＢ核移動の防止およびＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、およびＩＬ−６の心筋細胞分泌の向上に、また心臓の機能不全を改善するために使用することができる。細胞酸化ストレスと火傷媒介損傷との関連は、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を、熱傷患者の組織および臓器を保護するために、フリーラジカル形成を阻害する、および／またはフリーラジカルを除去することができる抗酸化物質として処方するための手段を提供する。
【００９４】
別の実施形態では、本発明は、大気汚染およびディーゼル排気微粒子の悪影響による肺損傷の防止に使用するためのＮＡＣアミドあるいはＮＡＣアミドの誘導体を備える方法および組成物を含む。
【００９５】
別の実施形態では、本発明は、循環器疾患および病気の処置および療法に使用されるＮＡＣアミドまたはその誘導体を備える方法および組成物を含む。ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、アンジオテンシン変換酵素の遮断薬として使用することができる。急性心筋梗塞では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、酸化ストレスを減少させるために使用することができ、またより速いかん流、左室のより優れた維持、梗塞面積の減少、広範囲および局所的左室機能のより優れた維持、およびＱＳＲ複合体形態とＥＣＧの修正のために使用することができる。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、実験的脳梗塞における脳の保護および炎症の低減を有し、局所性脳虚血の処置に使用することもできる。ＮＡＣアミドは、再かん流傷害、また心筋内皮細胞および間質組織のアポトーシスの処置に使用することができる。栄養補助食品として、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、酸化窒素レベルの上昇を援助し、循環器疾患の管理に重要な役割を果たし、循環器疾患における慢性炎症を低減し、冠状動脈および頸動脈に設置された心血管ステントの再狭窄を防止してよい。ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、酸化ストレスの防止および左室リモデリング改善により、ＭＩおよび心筋症後の心不全の防止に使用することができる。この能力でのＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体の使用は、酸化ストレスの心筋血管の機能不全および高血圧への関与に対応し、心筋微小血管系を保護するための抗酸化物質戦略の役割を提供する。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、筋肉中の酸化タンパク質の防止に使用することもできる。
【００９６】
本発明の別の実施形態では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を備える方法および組成物は、動脈硬化の処置、および冠動脈狭窄の記録を有する高脂血および正常脂血の個人における、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）コレステロールの血中濃度の増加のために使用することができる。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、冠動脈およびアルファ−ベータストレスを低減し、さらに心筋梗塞を防止し、体脂肪を減少させることにより、特に過体重あるいは肥満の個人において、耐糖能を向上させるためにも使用することができる。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、高齢者において、筋肉機能を向上させ、腫瘍壊死因子のレベルを下げるために使用することができる。
【００９７】
他の実施形態では、本発明は、血小板における酸化ストレスの改善による、サラセミア血液の処置での、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を備える方法および組成物の使用を対象としている。血小板の活性化は、血栓塞栓の結果につながり、凝固能亢進状態を引き起こすが、これは抗酸化ＮＡＣアミドまたはその誘導体による処置に適している。一つの実施形態では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、好中球機能を促進させる創傷被覆材として有効である。一つの実施形態では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、糖尿病患者における心臓血管系危険因子であるレプチンの効果を妨げるために使用される。一つの実施形態では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、高い尿中排せつ量を有する総血漿ホモシステインおよびシステイン値の処置、また高ホモシステイン血症の病状の処置に使用され、酸化ストレスを改善する。ホモシステイン値の上昇は、アテローム硬化性心臓血管疾患、静脈血栓症、心臓発作、および卒中、さらに神経管欠損、および新生組織形成などの血管疾患の著しい危険をもたらす。ホモシステインは、フリーラジカル反応を促進する。ホモシステイン代謝障害を有する患者では、比較的高い値のホモシステインが血中に存在する。そのため、本発明に従って、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、高濃度のホモシステインを有する患者に投与される。一つの実施形態では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、アルキル化剤などの化学療法のあとまたは最中に、グルタチオン枯渇を付随して、あるいは付随せずに、骨髄毒性に対する癌防御物質として使用される。一つの実施形態では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、リチウム誘発腎不全の処置に使用される。一つの実施形態では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、前立腺癌の発癌および炎症となる可能性がある前立腺炎症の処置に使用される。
【００９８】
別の実施形態では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、肺疾患薬、特に酸素媒介の肺疾患に使用される。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、冠動脈手術中に心肺バイパスの酸素化を改善することが可能で、慢性閉塞性肺疾患および肺高血圧の処置に有効である。一つの実施形態では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、抗酸化物質の減少を誘発する可能性がある高エネルギーインパルス音放出による、肺損傷の処置に使用される。したがって、ＮＡＣアミドあるいはその誘導体の投与は、有益な抗酸化物質源を供給する。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、音放出への暴露の前に栄養補助食品として供給されると、特に有効である。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、酸化ストレスの上昇を伴うぜんそくの処置に有効である。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、成人呼吸窮迫症候群の処置、肺線維症、特発性肺線維症、およびアスベスト暴露の処置、および慢性肺拒絶反応の処置に有効である。さらに、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、職業性イソシアネート暴露、およびイソシアネート−タンパク質共役と気道上皮細胞毒性との２つの過程により発現すると考えられているイソシアネートアレルギーの発現のための使用を意図している。さらに具体的には、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、ヘキサメチレンジイソシアネート（ＨＤＩ）の細胞タンパク質との共役を防ぎ、イソシアネート暴露後のヒトの気道上皮細胞に対するＨＤＩ毒性を減少させる役割を果たすことができる。したがって、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、この労働災害に関連するアレルギー感作およびぜんそくの発現を防止する役に立つ。
【００９９】
別の実施形態では、本発明は、慢性的あるいは急性的に感染した細胞におけるＨＩＶ複製を阻害するための、ＮＡＣアミドまたはその誘導体の使用を包含する。ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、統合ＨＩＶゲノムの発現を妨害し、それによりＡＺＴ、ｄｄＩ、ｄｄＣ、Ｄ４Ｔなどの現在採用される抗レトロウイルス薬とは違う方式でウイルスを攻撃するため、ＮＡＣアミドはＧＳＨ代償療法に使用することができる。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、１）ＨＩＶ感染におけるＢ−リンパ球によるＴＮＦ−αの分泌過多、および２）ＨＩＶのｇｐ１２０タンパク質によるアラキドン酸代謝の触媒作用に起因するであろう、ＨＩＶ感染における過剰なフリーラジカル反応に対抗する際にも有益である。免疫系の主要な細胞型による抗酸化物質に対する生理学的要件、およびマクロファージの細胞内抗酸化物質を取り込む能力、また代謝的にＴ−リンパ球と相互に作用して間接的に抗酸化物質の濃度を上昇させる能力は、ＮＡＣアミドまたはその誘導体が、ＨＩＶ／ＡＩＤＳ患者における抗酸化物質欠乏を補正するのに有効であるさらなる理由を提供する。ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、ゲル誘発チオールの膣内挿入による使用で、膣組織において、ウイルスおよびバクテリア種の抑制剤としての役割を果たす。
【０１００】
ＨＩＶは、抗酸化分子の破壊だけでなく、ＧＳＨ枯渇や細胞器官および高分子の破壊にも繋がる病的フリーラジカル反応を開始させることで知られているため、ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、それを必要とする哺乳動物における抗酸化物質の濃度を回復させ、固有点でウイルスの複製を拘束し、有毒なフリーラジカル、プロスタグランジン、ＴＮＦ−α、インターロイキン、および免疫抑制性であり、筋肉の消耗および神経症状の原因となる酸化脂質およびタンパク質のスペクトルの生成を特異的に防止するために使用することができる。抗酸化物質の濃度を元に戻すためのＮＡＣアミドまたはその誘導体の投与は、安全かつ経済的に、疾患の進行を遅延させ、あるいは停止させることができる。
【０１０１】
ＨＩＶによる感染など、一定のウイルス感染は、抗酸化物質の濃度の減少に関連しているため、本発明の一つの側面は、ＡＤ３の導入あるいは投与によって、ＨＩＶの複製を妨げ、ＨＩＶ感染に関連する事象のカスケードを防止、遅延、減少、あるいは緩和することにより、感染細胞における抗酸化物質の細胞内濃度を増加させ、また細胞外の抗酸化物質を増加させるためのものである。ＡＩＤＳもＧＳＳＧ濃度の低下に関連する可能性があるため、ある量のＮＡＣアミドを、それを必要とする細胞および／または個人に提供することにより、ＧＳＨなどの抗酸化物質の新規合成への妨害、またＨＩＶ感染細胞で発生する可能性がある既存のＧＳＨの酸化を克服することができる。本発明に従うと、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、サイトカイン刺激性のＨＩＶ発現、および急性的に感染した細胞、慢性的に感染した細胞、および正常な末梢血単核細胞における複製を阻害するために使用される。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、慢性的に感染した細胞におけるＴＮＦ−αまたはＩＬ−６により誘発されるＨＩＶ発現の濃度依存性阻害を達成するために使用することができる。ＮＡＣアミドの細胞膜を通過する優れた能力と高度な親油性により、ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、ＮＡＣあるいはＧＳＨと比較して、２倍、５倍、１０倍９、１００倍、１，０００倍、１０，０００倍あるいはそれ以下など、より低い濃度で使用することができる。
【０１０２】
さらに、感染細胞におけるＨＩＶによる抗酸化物質の減少は、アポトーシスとして知られる過程あるいはプログラム細胞死に関連する。ＮＡＣアミドまたはその誘導体をＨＩＶに感染した個人および／または細胞に提供することにより、ＧＳＨを人工的に激減させ、また細胞死に繋がってよい細胞内過程は、防止、妨害、減少させることができる。同様に、ＮＡＣアミドチオールは、ウエスト・ナイル・ウイルスからの生物複製の遮断薬、またウエスト・ナイル・ウイルス感染、また他のＲＮＡおよびＤＮＡウィルス感染後の細胞変性効果から細胞を保護するものとして使用される。
【０１０３】
本発明に従うと、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、処置あるいは療法の方法に適した、当業者には当然であるいくつかの経路により投与してよい。ＮＡＣアミドおよびその誘導体投与の経路および形態の例としては、皮下、静脈、筋肉内、および胸骨内を含む、注射による非経口経路が挙げられるが、これに限定されない。その他の投与形態には、経口、吸入、外用、経鼻、髄腔内、皮内、点眼、膣内、直腸内、経皮、腸内、注入カニューレ、持続放出、および舌下経路が含まれるが、これに限定されない。ＮＡＣアミドおよびその誘導体の投与は、持続注入によっておこなってもよい。本発明の一実施形態では、ＮＡＣアミドおよびその誘導体の投与は、内視鏡手術により媒介されてよい。脳を冒すさまざまな神経系疾患あるいは障害の処置のために、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、脳室の内側を覆う組織に導入することができる。脳のほぼ全領域の脳室系は、疾患あるいは障害に冒された脳のさまざまな部分に容易に到達することを可能とする。例えば、処置のために、カニューレや浸透圧ポンプなどの機器を埋め込み、ＮＡＣアミドあるいは薬学的に許容される組成物の要素としてのその誘導体などの処置化合物を投与することができる。ＮＡＣアミドおよびその誘導体の直接注入も包含される。例えば、脳室と多くの脳の領域との近接性は、ＮＡＣアミドによる処置部位あるいはその周辺に分泌あるいは導入された神経物質の拡散を助長する。
【０１０４】
受容者への投与、例えば注入投与では、水溶性ＮＡＣアミドまたはその誘導体を含有するよう処方された組成物あるいは調製液は、通常滅菌溶液あるいは懸濁液中に加えられる。あるいは、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、防腐剤、安定剤、および溶液または懸濁液を受容者の体液（血液など）と等張にする物質を含有してよい、薬学的および生理学的に許容される水性または油性媒体に再懸濁することができる。使用に適切な賦形剤の例としては、水、リン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）、０．１５Ｍ水性塩化ナトリウム溶液、デキストロース、グリセロール、希エタノールなど、およびその混合物が挙げられるが、これらに限定されない。例となる安定剤は、ポリエチレングリコール、タンパク質、サッカリド、アミノ酸、無機酸、および有機酸であり、これらは単体で使用しても、混合物としてもよい。
【０１０５】
外用投与のためのＮＡＣアミドまたはその誘導体を含有する製剤は、ローション、軟膏、ゲル、クリーム、坐薬、滴剤、液体、スプレー、および粉剤を含んでよいが、これらに限定されない。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、パッドあるいはスポンジに吸収された液体、ゲル、クリーム、およびゼリーの形状で粘膜に投与してよい。従来の薬剤担体、水性、粉末、または油性基剤、増粘剤などは、必要あるいは望ましくてよい。経口投与のためのＮＡＣアミドまたはその誘導体を含有する組成物には、粉剤または顆粒、水あるいは非水性媒体を用いた懸濁液あるいは溶液、サッシェ、カプセル、または錠剤が含まれる。増粘剤、希釈剤、香料、分散補助剤、乳化剤、または結合剤は、望ましくてよい。非経口的投与のための製剤には、緩衝剤、希釈剤、およびその他の適切な添加剤も含んでよい滅菌溶液が含まれるが、これに限定されない。
【０１０６】
本発明は、好ましくはヒトである哺乳動物による消費用のＮＡＣアミドまたはその誘導体を含有する食品添加物も提供する。ＮＡＣアミドおよびその他のシステイン誘導体は、ニンニク、胡椒、ターメリック、アスパラガス、およびタマネギを含むがこれに限定されない、さまざまな食品で検出されている。例としては、Ｈｓｕ，Ｃ．Ｃ．らによる、Ｊ．Ｎｕｔｒ．１３４：１４９−１５２（２００４）、およびＤｅｍｉｒｋｏｌ，Ｏ．らによる、Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．５２（２００４）を参照されたい。食品添加物は、食材に添加することが意図される液体あるいは固体材料に、ＮＡＣアミドあるいはその誘導体を備えることができる。食品添加物は、特に飲食によるヒトの消費を意図し、ミネラル、炭水化物（糖を含む）、タンパク質、および／または脂肪の形状で栄養素または刺激物を含有してよい、未加工、調理済み、加工済みのあらゆる製品を含む「食品成分」に添加することができるが、これら食品成分はここに提供されるＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を備える食品添加物を組み込むことで加工されてきた。この加工食品成分は、「機能性食材または食品成分」と特徴付けることもできる。「食材」は、純粋な飲料水を意味するとも理解することができる。
【０１０７】
「食品添加物」と言う用語は、食材に添加することを意図されたあらゆる液体または固体材料を意味すると理解される。この材料は、例えば、塩または味あるいは風味を増強または修正するその他あらゆるものなど、明確な味および／または風味を有することができる。ただし、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミド誘導体を備える食品添加物は、必ずしも明確な味および／または風味を有する薬剤でなくてもよいことに留意されたい。
【０１０８】
ＮＡＣアミド、またはＮＡＣアミドの食品添加剤と併用して添加することができる他の食品添加物には、風味を「はっきり」させために添加され、また防腐剤および抗酸化物質としての役割も果たす、酢、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、フマル酸、乳酸などの酸、酸性度調節剤、固化防止剤、消泡剤、ビタミンＣおよびビタミンＥなどのトコフェロールなどの抗酸化物質、スターチなどの充填剤、食品着色料、保色剤、乳化剤風味、調味料、保湿剤、防腐剤、高圧ガス、安定剤、寒天やペクチンなどの増粘剤およびゲル化剤、および甘味料が含まれるが、これに限定されない。
【０１０９】
ＮＡＣアミドまたはその誘導体の用量、量、または分量、また使用される投与経路は、個別基準で決定され、当業者に既知の、同種の用途あるいは適応症で使用される量に相当する。当業者には当然なように、投薬は、処置される病気の重症度および反応性によるが、通常は１日１回以上であり、処置過程は数日から数ヶ月、あるいは治癒がもたらされるまで、または病状の減退が達成されるまで継続される。当業者は、最適な用量、投薬法、繰り返し率を容易に判断することができる。例えば、経口投与の投与形態のための製剤処方は、ＮＡＣアミド、または薬学的に許容される塩、エステル、またはその誘導体を、１用量当り少なくとも２５〜５００ｍｇに相当する量、あるいは１用量当り少なくとも５０〜３５０ｍｇに相当する量、あるいは１用量当り少なくとも５０〜１５０ｍｇに相当する量、あるいは１用量当り少なくとも２５〜２５０ｍｇに相当する量、あるいは１用量当り少なくとも５０ｍｇに相当する量で含有することができる。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、ヒトにもヒト以外の哺乳動物にも投与することができる。したがって、ヒトおよび動物医学双方での用途を有する。
【０１１０】
ＮＡＣアミドの適切なエステルの例には、メチルエステル、エチルエステル、ヒドロキシエチルエステル、ｔ−ブチルエステル、コレステリルエステル、イソプロピルエステル、およびグリセリルエステルから選択されるアルキルおよびアリールエステルが含まれる。
【０１１１】
ここに記載されるように、ＡＩＤＳ、糖尿病、黄斑変性、うっ血性心不全、循環器疾患および冠動脈再狭窄、肺疾患、ぜんそく、中毒性および伝染性肝炎などのウィルス感染、狂犬病、ＨＩＶ、敗血症、骨粗しょう症、毒物暴露、放射線被ばく、熱傷、プリオン病、神経系疾患、血液疾患、動脈疾患、筋肉疾患、腫瘍および癌を含む、多数の病気、疾患、および病状は、細胞内抗酸化物質の濃度の低下に関連すると考えられる。これらの疾患および病気の多くは、不十分なグルタチオン濃度による可能性がある。さらに、毒素、放射能、薬物療法などへの暴露は、各種癌化学療法を含み、フリーラジカル反応を引き起こす可能性がある。したがって、本発明は、特に経口投与に便利かつ有効な処方で、これらの疾患および病気を処置することができる薬剤としてＮＡＣアミドまたはその誘導体を提供する。外因性のＮＡＣアミドまたはその誘導体の投与は、栄養補助食品として使用でき、肝臓のＧＳＨ産出量を補完あるいは補充し、生物内の減弱した状態の管理を支援することができる。フリーラジカル反応を緩和できないと、重篤な高分子の損傷だけでなく、脂質過酸化反応および毒性化合物の生成をも引き起こす可能性のある望ましくない連鎖の発生を許す。十分な濃度のＧＳＨを維持することは、これらのフリーラジカル反応を妨げるために必要である。天然ＧＳＨ濃度が弱体化あるいは脅かされる場合に、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、効率的で有効な改善措置を提供することができる。
【０１１２】
ＮＡＣアミドは、銅および鉛を有するキレート化錯体を形成することができる。ＮＡＣアミドは、血漿中に銅を有する循環錯体を形成することもできる。したがって、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、金属毒性を処置するために投与することができる。ＮＡＣアミド金属錯体は排泄されるため、金属負荷を低減する。したがって、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、例えば鉄、銅、ニッケル、鉛、カドミウム、水銀、バナジウム、マンガン、コバルト、プルトニウム、ウラン、ポロニウムなどの超ウラン金属などのさまざまな金属に関連する毒性の処置のために投与してよい。ＮＡＣアミドのキレート化特性は、抗酸化特性とは独立していることを留意されたい。しかしながら、例えば鉄など、金属毒性のいくつかは、フリーラジカル媒介であるため、ＮＡＣアミド投与は、かかる状況では特に有利であってよい。
【０１１３】
高いバイオアベイラビリティを提供するために、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、経口投与の場合、比較的高濃度で、例えば十二指腸など粘膜の近接に提供されてよい。したがって、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、空腹時に単回のボーラスとして投与することができる。好ましい用量は、約１００〜１０，０００ｍｇのＮＡＣアミド、あるいは約２５０〜３，０００ｍｇのＮＡＣアミドである。さらに、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミド誘導体製剤は、アスコルビン酸などの還元剤によって安定化し、保存中および吸収前の消化管での酸化を抑えてよい。アスコルビン酸結晶の使用は、高度なカプセル封入を提供し、封入装置の潤滑剤としての役割を果たすという付加利益を有する。２分割ゼラチンカプセルなどのカプセルは、ＮＡＣアミドを大気や湿気から保護しつつ、胃中で素早く溶解させる剤形である。カプセルは、多くの供給元から入手してよい００サイズの標準２分割ハードゼラチンカプセルであることが望ましい。充填後、カプセルは、保存中の酸化を抑えるために、窒素下で保存されることが望ましい。カプセルは、参照することによって全体として本書に組み込まれる、米国特許第５，２０４，１１４号の方法に従って、帯電防止剤および安定剤としてのアスコルビン酸結晶を使用して、充填されることが望ましい。さらに、各カプセルは、５００ｍｇのＮＡＣアミドと２５０ｍｇのアスコルビン酸結晶を含有することが望ましい。望ましい組成物には、他の賦形剤または充填剤が含まれないが、その他の適合する充填剤または賦形剤が添加されてもよい。異なる量および比率のＮＡＣアミドおよび安定剤が使用されてもよいが、標準００カプセルを充填し、有効な安定性と高用量を提供することから、これらの量が望ましい。さらに、炭酸カルシウムは不純物を含有し、また胃酸を中性化する塩基としての作用により、小腸内でのＮＡＣアミドの劣化を促進する可能性があるため、炭酸カルシウムの添加は避けられる。
【０１１４】
ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、長期間にわたり有利に投与される。したがって、有効な組み合わせは、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミド誘導体と、慢性症状の処置を意図する薬物とを含む。かかる薬物は、空腹時に吸収がよく、有害な相互作用あるいは結合吸収の低下または変動を有さない。ある特定の薬物の分類には、中枢および末梢のアドレナリンまたはカテコール系（ｃａｔｅｃｈｏｌｅｎｅｒｇｉｃ）作動薬、あるいは再取り込み遮断薬が含まれるが、これらは神経毒性、心筋症、およびその他の臓器損傷を含む多数の毒性効果を発生する可能性がある。これらの薬物は、例えば、心臓、循環器官、肺の薬物療法、麻酔薬、および向精神／抗精神病薬剤として使用される。これらの薬物のうちいくつかは、興奮剤、幻覚剤、および他の種類の精神作用として、乱用の可能性も有する。フリーラジカル開始に関連するその他の薬物には、ソラジン、三環系抗うつ剤、キノロン系抗生物質、ベンゾジアゼピン系薬、アセトアミノフェン、およびアルコールが含まれる。そのため、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、哺乳動物においてフリーラジカル反応を開始することができる有効な薬品量に従って、約５０〜１０，０００ｍｇでの経口製剤処方で、有利に提供することができる。この薬品は、例えばアドレナリン、ドーパミン、セロトニン、ヒスタミン、コリン、ＧＡＢＡ、精神作用、キノン、キノロン、三環系、および／またはステロイド薬剤である。
【０１１５】
以下の本発明の側面では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体の製剤は、有利なＧＳＨ投与の代替物を提供する。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、脂溶性および細胞透過性という有益な特性を備え、それによりＧＳＨ、ＮＡＣ、または他の化合物よりも素早く細胞に侵入し、素早く血液脳関門に浸潤することができる。ＮＡＣアミドまたはその誘導体のこの特性は、投与後のバイオアベイラビリティを向上させ、ここに述べられるさまざまな疾患、障害、病状、および病気に対し、より高度な処置を提供してよい。
【０１１６】
肝臓グルタチオンは、アミノグリコシド系抗生物質、アセトミノフェン、モルヒネ、および他のアヘン剤を含む多数の薬剤の代謝、異化、および／または排出において消費される。肝臓グルタチオンの減少は、肝臓の損傷あるいは中毒性肝炎を引き起こす可能性がある。高コレステロール血症の処置に使用される高用量のナイアシンもまた、中毒性肝炎に関連付けられてきた。したがって本発明は、保有する肝臓グルタチオンを消費する有効な薬品量と連動して投与される、約５０〜１０，０００ｍｇの量での、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を備える経口製剤処方を包含する。
【０１１７】
多くの病態は、肝臓の損傷をもたらす。この損傷は、次いで、肝臓のグルタチオン保有量を減少させ、肝臓が酸化型グルタチオンをその還元型に変換する能力を低下させる。他の病態は、グルタチオン代謝の低下に関連する。これらの病気には、伝染性および中毒性肝炎、肝硬変、肝臓の原発性および転移性癌、外傷性および医原性肝臓損傷あるいは切除が含まれる。本発明は、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体、および抗ウイルスまたは抗新生物薬剤を備える製剤処方を包含する。抗ウイルスまたは抗新生物薬剤は、例えばヌクレオシド類似体である。
【０１１８】
グルタチオンが分解され、尿中にシステインが排出される可能性がある。そのため非常に高い用量のグルタチオンは、システイン尿をもたらし、これはシステイン結石をもたらす可能性がある。その他の長期毒性または有害作用がもたらされる可能性もある。そのため、長期間にわたる約１０ｇｍを超える量の日常摂取は、医学的に監視されるべきである。一方、１回の用量が約５０ｍｇを下回る場合、十二指腸内腔の濃度を、高レベルの吸収を実現するための高濃度にまで上昇させ、臨床的有益性を提供するには不十分である。したがって、本発明による製剤は、５０ｍｇを超えるＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミド誘導体含有量を有し、合計が１日最高約１０，０００ｍｇとなる１回以上の投薬により提供される。
【０１１９】
ＨＩＶ感染の処置では、空腹時の比較的高い容量、つまり１日１〜３グラムのグルタチオンのボーラスは、２つの有益な効果を有すると考えられている。まず、ＨＩＶ感染は、ＰＢＭ、肺、およびその他の組織における細胞内グルタチオン濃度の減少に関連がある。さらに、細胞内グルタチオン濃度を上昇させることにより、これらの細胞の機能は正常に戻る可能性があると考えられている。したがって、本発明によるＮＡＣアミドまたはその誘導体の投与は、ＨＩＶ感染の影響を処置する。ＮＡＣアミドまたはその誘導体の経口投与は、任意でアスコルビン酸および／または抗レトロウイルス薬剤と併用される。レトロウイルス感染に伴う転写機構と制御は、異なるウイルス型間で比較的保存されていると考えられていることを留意されたい。したがって、後期レトロウイルス抑制は、さまざまな型のヒトレトロウイルスおよび類似動物レトロウイルスに対し期待される。生体外試験では、感染単球において、グルタチオンの細胞内濃度を正常範囲の最高値まで上昇させることにより、これらの細胞からのＨＩＶの生成は、約３５日間抑制される可能性があることがわかっている。これは、ＮＦ−κＢおよびＴＮＦ−αを含むサイトカインの細胞転写の活性化の妨害に関連すると考えられる。そのため、ＨＩＶ感染者の伝染力は低下され、伝染を防止する役に立つ可能性がある。このウイルス量の減少は、体内の非感染であるが感染しやすい細胞が存在しつづけることを可能とする。
【０１２０】
本方法に従って投与されるＮＡＣアミドまたはその誘導体は、うっ血性心不全（ＣＨＦ）の治療に使用することができる。ＣＨＦには、２つの欠陥があると考えられる。まず、心筋が弱くなり、心臓肥大を引き起こす。次に、末梢血管痙攣が存在し、末梢抵抗の増加を引き起こすと考えられる。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、酸化窒素の効果を促進するのに有効となることが可能で、したがって血管収縮および末梢血管抵抗を減少させ、同時に組織への血流を増加させることにより、これらの患者に有益となることが可能である。そのため本発明は、例えば、ジギタリス配糖体、ドーパミン、メチルドーパ、フェノキシベンザミン、ドブタミン、テルブタリン、アムリノン、イソプロテレノール、ベータ遮断薬、ベラパミル、プロプラノロール、ナドロール、チモロール、ピンドロール、アルプレノロール、オクスプレノロール、ソタロール、メトプロロール、アテノロール、アセブトロール、ベバントロール、トラモロール、ラベタロール、ジルチアゼム、ジピリダモール、ブレチリウム、フェニトイン、キニジン、クロニジン、プロカインアミド、アセカイニド、アミオダロン、ジソピラミド、エンカイニド、フレカニド、ロルカイニド、メキシレチン、トカイニド、カプトプリル、ミノキシジル、ニフェジピン、アルブテロール、パーギリンなどのカルシウムチャンネル遮断薬、ニトロプルシド、ニトログリセリン、フェントラミン、フェノキシベンザミン、ヒドラジド、プラゾシン、トリマゾシン、トラゾリン、トリマゾシンを含む血管拡張剤、硝酸イソソルビド、四硝酸エリトリチル、アスピリン、パパベリン、シクランデレート、イソクスプリン、ナイアシン、ニコチニルアルコール、ナイリドリン、フロセミド、エタクリン酸、スピロノラクトン、トリアムテリン、アミロリド、チアジド、ブメタニド、カフェイン、テオフィリン、ニコチン、カプトプリル、サララシン、およびカリウム塩を含む利尿薬などのうっ血性心不全薬物処置と併用しての、ＮＡＣアミドまたはその誘導体の経口投与を包含する。
【０１２１】
他のその実施形態において、本発明は、経口投与による様々な肝炎の処置のためのＮＡＣアミドおよびその誘導体を包含する。例えば、アルコールおよびアセトアミノフェンは、肝細胞毒であり、肝細胞グルタチオンのレベルの低下をもたらす。したがって、これらの毒性は、ＮＡＣアミドおよびその誘導体の使用した本発明にしたがって処理される。ＮＡＣアミドおよびその誘導体は、細胞または臓器の他の種類への、細胞あるいは還元型グルタチオンレベルにおけるフリーラジカルの損傷をもたらす毒性の処置においても有効である。
【０１２２】
糖尿病、特にコントロール不良の糖尿病は、機能または調整を損なう様々な酵素およびタンパク質の糖化を生じる。特に、還元型グルタチオン（例えばグルタチオンレダクターゼ）を生成する酵素は、グリコシル化され機能不能になる。したがって、糖尿病は、還元型グルタチオンのレベルと関係し、実際、糖尿病の二次的症状の多くは、グルタチオンの代謝異常に起因すると考えられる。本発明において、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、主要な第二症状を抑制するために糖尿病患者を補うために使用することが出来る。本発明は、ＮＡＣアミドおよび抗高血糖性薬を含む経口製剤処方も包含する。
【０１２３】
グルタチオンの高い正常レベルは、鎮静の受容体を無活性化する。したがって、ＮＡＣアミドまたはその誘導体の使用は、肥満および／または摂食障害と、タバコ（ニコチン）およびアヘン耽溺を含む他の嗜癖障害または脅迫障害の処置に効果的である。本発明は、ニコチンに関連したＮＡＣアミドおよびその誘導体の投与も包含する。ニコチンの生理学的効果は、周知である。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、血管拡張を生じ、脳血流を向上させ、それにより大脳機能の強化効果を生じる。
【０１２４】
哺乳動物において、血漿内のグルタチオンのレベルは、ミクロモル範囲と比較的低いが、一方、細胞内レベルでは、ミリモル範囲が一般的である。したがって、細胞内サイトゾルタンパク質は、細胞外タンパク質よりも、グルタチオンの高濃縮の影響を非常に受けやすい。細胞器官である小胞体は、細胞から輸送するためにタンパク質の工程に関連する。小胞体は、シトソルに比べ、比較的酸化状態を有し、それにより、正常活性に頻繁に必要なタンパク質のジスルフィド結合の形成を行う別の細胞内コンパートメントをシトソルから形成することが発見された。いくつかの病理状態において、細胞は、細胞から輸送するためのタンパク質を生成するように誘発され、これらのタンパク質の生成および輸送の妨害により病状の進行が妨げられる。例えば、多くのウイルス性の感染は、感染力のためのウイルス性タンパク質の細胞生成に頼っている。これらのタンパク質生成の妨害は、感染力を妨げる。同様に、特定の病状は、存在し、機能する特定の細胞表面受容体に関する。いずれにしても、これらのタンパク質を生成するために誘導された細胞は、小胞体内の還元型グルタチオンを激減する。グルタチオンを搾取する細胞は、血漿からグルタチオンを吸収する傾向があり、存在量により制限出来ることが知られている。したがって、一時的でも、血漿グルタチオンレベルを増加することにより、小胞体内の還元性条件は、妨害され、タンパク質生成を妨げる。正常な細胞もまた、ある妨害の影響を受けやすい。しかしながら、ウイルス感染細胞または異常刺激された細胞において、正常な調節機構は、損なわれる可能性があり、小胞体内の酸化還元状況は細胞外グルタチオンの効用で制御されない。ＮＡＣアミドおよびその誘導体の投与は、ＧＳＨおよびＧＳＨの効果に活力を与える役割を果たし、そのような状態に対し目覚しい効果を与える。
【０１２５】
ＤＮＡウイルスであるヘルペスウイルスの再生は、細胞外グルタチオンの投与により、細胞培養内で抑制あるいは低減される。ＤＮＡウイルスの例は、単純ヘルペスウイルスＩ型と、単純ヘルペスウイルスＩＩ型と、帯状疱疹と、サイトメガロウイルスと、エプスタイン・バーウイルスなどが含まれる。したがって、本発明において、ＤＮＡウイルスおよびヘルペスウィルス感染は、ＮＡＣアミドおよびその誘導体の投与によって処置される。さらに、ＲＮＡウイルスである狂犬病ウイルスによる感染は、グルタチオンの投与により処置される。標準的処置が可能であり、時宜に投与された時点でまさに有効であるが、グルタチオンは、ある特定の状況において有効である。したがって、狂犬病ウイルス感染は、少なくとも一部において、本発明におけるＮＡＣアミドおよびその誘導体の投与により処置される。狂犬病において可能な一つの処置は、免疫血清である。本発明は、単独あるいは、一つ以上の免疫グロブリンと併用したＮＡＣアミドおよびその誘導体の非経口投与を包含する。
【０１２６】
冠状動脈性心臓病のリスクは、高脂肪の食事の消費により増加し、フラボノイド類に加えてビタミンＥ、Ｃなどの抗酸化ビタミンの摂取によって減少する。高脂肪食は、酸化ストレスを通じて内皮機能を低下させ、一酸化窒素の可用性の低下をもたらす。ビタミンＣとＥは、高脂肪食の後の内皮細胞の一酸化窒素産生によって起こる血管収縮を回復することが分かっている。本発明によると、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は血管疾患に取り組むために、予防的に投与されるかもしれない。
【０１２７】
いくつかの種類のフリーラジカルの中には、質的な違いがあることが分かっている。従って、それらの形成率は、同時に制御されなければならないかもしれない異なる種類の誘発物質と同様に異なる。例えば、黄斑変性を持つ人々にとっては、強い直射日光や煙草の煙への連続的で無防備な目の曝露は、この疾患の制御のための治療薬として使用される抗酸化物質からもたらされる利点を制限するものである。従って、本発明の一態様は、酸化作用、フリーラジカル産生作用、およびイオン化作用を低下させるだけでなく、全身的または特定の臓器における抗酸化物質濃度を上昇させることにより相乗的な治療を患者に提供する。この場合、ＮＡＣアミド治療は、必要に応じて紫外線遮断サングラスと喫煙休止計画によって補完されるものである。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、必要ならばα−コハク酸トコフェロールとの組み合わせで使用することができる。フリーラジカルは異なる誘発物質と共に組織や細胞の様々な部位または下位部位に発生する。例えば、脳または脊髄の外傷において、有害なフリーラジカルは神経線維を隔離する脂肪の（脂質の）鞘、すなわち髄鞘の中にある。極めて高用量の合成副腎皮質ステロイドである、５〜１０ｇのコハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム（ＭＰＳＳ）の２４時間投与すると、脳と脊髄に急速に到達して急速にミエリンの中に拡散し、外傷誘発性のラジカルを中和する。従って本発明は、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミド誘導体と糖質コルチコイド剤の組み合わせで構成される薬剤合成物を提供する。
【０１２８】
本発明によると、経口投与されたＮＡＣアミドまたはその誘導体は、グルタチオンの細胞濃度を上昇させ、多くの病理学的過程を阻害することができる。例えばＮＡＣアミドは、主としてＡＩＤＳの徴候や症状に関与する腐食性のフリーラジカルと毒性のサイトカインを産生する、ほぼ自己永続的で強力な生化学的サイクルの抑制に使用できる。これらの生化学的サイクルは、相当な量のグルタチオンを破壊するが、それらは最終的には十分な継続するＮＡＣアミド治療を用いて制御され、正常化される。典型例は、活性化マクロファージからの１５ＨＰＥＴＥ（１５−ヒドロペルオキシエイコサテトラエン酸）という物質の過剰産生である。１５ＨＰＥＴＥは破壊的な免疫抑制物質であり、非破壊的な良性分子への変換のためにグルタチオンを必要とする。問題は、ひとたびマクロファージが活性化されると正常化するのが難しいとうことである。細胞内では、ＮＦ−κＢの活性化の阻害、ウィルス複製を促進するＨＩＶのＴＡＴ遺伝子産物の抑制、ウィルス外皮のｇｐ１２０蛋白の分解などによるウィルスＤＮＡの活性化の阻止によって、ＧＳＨはフリーラジカルやサイトカインの産生を抑制し、リンパ球やマクロファージの機能障害を修正し、肺やその他の臓器中の防御細胞を増強し、ならびに全ての主要感染細胞種におけるＡＩＤＳウィルスの複製を停止させる。ＮＡＣアミドはｇｐ１２０蛋白を崩壊させるために提供されることができ、それにより患者内部の他の細胞だけでなく、ことによると他の人々へのウィルスの伝播を防止する潜在的な形態を提供する。
【０１２９】
古典的な抗ウィルス剤または抗レトロウィルス剤（逆転写酵素阻害薬、プロテアーゼ阻害剤）に加えて、その他の多くの治療法がＡＩＤＳ患者に有効である可能性があり、また本発明はＮＡＣアミドまたはその誘導体と次の薬剤の組み合わせを提供する。シクロポリンＡ、サリドマイド、ペントキシフィリン、セレン、デスフェロキサミン、２Ｌ−オキソチアゾリジン、２Ｌオキソチアゾリジン−４−カルボン酸塩、ジエチルジチオカルバミン酸塩（ＤＤＴＣ）、ＢＨＡ、ノルジヒドログアイアレチン酸（ＮＤＧＡ）、グルカ酸、ＥＤＴＡ、Ｒ−ＰＩＡ、α−リポ酸、ケルセチン、タンニン酸、２’−ヒドロキシカルコン、２−ヒドロキシカルコン、フラボン、α−アンゲリカラクトン、フラキセチン、クルクミン、プロブコール、ビンロウジュ。
【０１３０】
炎症反応には大きな酸化的破壊が伴い、大量のフリーラジカルをもたらす。従って、ＮＡＣアミドとその誘導体は炎症性疾患の処置に適用されるかもしれない。ＮＡＣアミドまたはその誘導体は一次損傷と共に、二次反応の好ましくない特徴も有利に減少させるかもしれない。本発明によると、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は各種の関節炎、炎症性大腸炎などの炎症性疾患に苦しむ患者に投与されるかもしれない。本発明はまた、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミド誘導体と鎮痛剤または抗炎症剤、例えば、麻薬性麻酔剤、メペリジン、プロポキシフェン、ナルブフィン、ペンタゾシン、ブプレノルフィン、アスピリン、インドメタシン、ジフルニサル、アセトアミノフェン、イブプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、ピロキシカム、スリンダク、トルメチン、クロフェナム酸塩、ゾメピラク、ペニシラミン、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、アザチオプリン、シクロホスファミド、レバミゾール、プレドニゾン、プレドニゾロン、β−メタゾン、トリアムシノロン、およびメチルプレドニゾロンなどを含む、麻薬性作動薬、糖質コルチコイド、または非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ）などの複合薬剤療法を提供する。ＮＡＣアミドとその誘導体はまた、耳下腺炎、子宮頸部異形成、アルツハイマー病、パーキンソン病、アミノキノリン中毒、ゲンタマイシン中毒、ピューロマイシン中毒、アミノグリコシド腎臓毒性、パラセタモール、アセトアミノフェン、ならびにフェナセチン中毒の処置に有益であるかもしれない。
【０１３１】
ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、ウィルス汚染性の液体または汚染された可能性がある液体に、ウィルスを不活化するために添加されるかもしれない。例えばこれは、発症作用のあるウィルス蛋白の減少により起こる。一つの実施形態によると、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は輸血の前に血液または血液成分に添加される。添加されたＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体は、約１００μＭから、約５００ｍＭまたは溶解限度のいずれか低い方までの範囲の濃度、より好ましくは約１０〜５０ｍＭの濃度で加えられる。加えて、全血、濃縮赤血球、またはその他の血液成分（白血球、血小板）へのＮＡＣアミドまたはその誘導体の添加は、細胞または構成成分の貯蔵寿命および／または品質の向上のために使用されるかもしれない。
【０１３２】
別の実施形態では、局所に適用される場合、本発明は、皮膚、髪、爪、および粘膜面の審美的状態や皮膚科的疾患の処置および／または予防におけるＮＡＣアミドまたはその誘導体、薬学的に許容される塩またはそのエステルの使用を含む。本発明に従って、（ａ）ＮＡＣアミドまたはその誘導体、適切な塩またはそのエステル、またはＮＡＣアミドを含む薬学的に許容される合成物、（ｂ）局所的に許容される賦形剤または担体を含む局所性投与用の合成物が提供される。本発明はまた、患者の病変部へのＮＡＣアミド含有合成物、またはＮＡＣアミド誘導体含有合成物の局所性投与を必要とする、審美的状態および／または皮膚科的疾患の処置および／または予防のための手法を提供する。そのような合成物や手法は、特に目や口の周りのしわ、顔のラインやくぼみ、皮膚のしわ、しみや褪色、および同類のものの処置同様に、老化防止処置や療法に有用である。
【０１３３】
別の実施形態では、本発明は、ＮＡＣアミドまたはその誘導体、またはその薬学的に許容される塩またはエステルを活用する癌治療や前癌治療に有用である手法や合成物を提供する。本発明は特に、癌や前癌病変の細胞にアポトーシスが選択的に誘発される、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を含む合成物や手法に関連する。また別の実施形態では、本発明は効果的な量のＮＡＣアミドまたはその誘導体を被験体に投与することによって、前癌状態の細胞のアポトーシスを選択的に誘発する手法に関連する。この実施形態において、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を被験体に局所的に投与できる。別の実施形態では、本発明は効果的な量のＮＡＣアミドまたはその誘導体を被験体に投与することによって、癌細胞内に選択的にアポトーシス誘発する手法に関連する。この実施形態においてＮＡＣアミドまたはその誘導体を被験体に局所的に投与できる。選択的アポトーシスとは、対応する正常な非形質転換細胞がＮＡＣアミド誘導性の細胞死を経験しない状態をいう。さらに別の実施形態では、本発明は、患者の非癌細胞に比べて癌細胞のアポトーシスへの感受性が増強されるように、化学療法または放射線療法の補助としてＮＡＣアミドまたはその誘導体を患者に投与することにより、患者の体内に存在する癌細胞の数を減少させることからなる手法に関連する。さらに進めた実施形態では、本発明は、効果的な量のＮＡＣアミドまたはその誘導体を、ｐ５３遺伝子療法を含むｐ５３療法の補助として投与することからなる手法に関連する。通常、アポトーシスが誘発される癌細胞または前癌状態の細胞は、少なくとも一つの機能性ｐ５３対立遺伝子を示すものである。ある例では、ＮＡＣアミドの投与は、変異ｐ５３蛋白の形態および／または活性の、機能状態への回復をもたらす。内因性の機能性ｐ５３対立遺伝子は、ｐ５３遺伝子療法を含むｐ５３療法からなる手法に必要でないことを理解されるものである。
【０１３４】
本発明の別の実施形態では、過剰増殖性疾患または良性の非増殖性疾患で発生する細胞を選択的に誘発するためのＮＡＣアミドまたはその誘導体の投与からなる手法が提供される。本発明の別の実施形態は、細胞とある量のＮＡＣアミドまたはその誘導体を接触させて細胞周期の特定の段階において選択的に細胞を停止させることからなる、選択的な細胞周期停止の手法におけるＮＡＣアミドまたはその誘導体の使用を含む。例えば、ＮＡＣアミドの投与は、Ｇ１期の長引く移行につながるかもしれない。この細胞周期停止は、ｐ２１の発現の増加の影響を受けるかもしれない。本発明の手法はまた、腫瘍の血管新生の緩和または抑制に、または癌細胞の分化の誘発に活用できる。
【０１３５】
別のその側面において、本発明は癌に侵された臓器における組織の構成の損傷や個々の癌細胞のゲノム安定性の消失につながる、微小環境からの不全シグナルによって誘発される可能性がある癌や腫瘍の処置のための、ＮＡＣアミドまたはその誘導体の使用を目的としている。組織構造の損傷は特定の癌につながる可能性がある。この過程に関与するのは、マトリクス・メタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）であり、これは生物の発達の最中や障害治癒の最中だけでなく、腫瘍形成または発癌の進展にも重要な酵素である。タンパク質分解酵素は基底膜や細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の構造要素を分解し、上皮細胞をシート束ねる接点を分解することにより腫瘍細胞や転移の浸潤を可能にするため、特にＭＭＰは微小環境シグナルに著しく寄与する。ＭＭＰはまた細胞結合した不活性前駆体型の増殖因子の放出、細胞‐細胞や細胞‐ＥＣＭ接着分子の分解、前駆体チモーゲン型のその他のＭＭＰの活性化、ならびにＭＭＰやその他のプロテアーゼの阻害剤の不活化などを行える。さらにこれらの酵素は、上皮細胞が隣接する細胞から分離して自由になり、体内を動き回る能力を獲得することを引き起こす一つの細胞状態から別の状態への移行、すなわち上皮から間葉への移行（ＥＭＴ）を誘発する。この過程が胚や、乳癌などの癌の通常の進展に必須である一方で、ＥＭＴは腫瘍細胞に可動性を与え、腫瘍細胞がリンパ管壁または血管壁などの障害物を通過するのを助け、ひいては転移を促進する。
【０１３６】
ＭＭＰ−３は、培養下およびトランスジェニックマウスの乳房上皮細胞で、形質転換を誘発するために観察される特定の種類のメタロプロテイナーゼである。ＭＭＰ−３は正常細胞にＲａｃ１ｂ蛋白という、以前は癌にのみ認められていたＲｈｏ ＧＴＰ加水分解酵素の異型を発現させることが分かっている。Ｒａｃ１ｂは細胞骨格を劇的に変化させ、これは上皮細胞の周囲の細胞からの分離と移動を促進する（Ｄ．Ｃ．Ｒａｄｉｓｋｙら、２００５、Ｎａｔｕｒｅ、４３６：１２３−１２７）。Ｒａｃ１ｂによって誘発された細胞骨格の変化は活性酸素種（ＲＯＳ）と呼ばれる極めて反応性に富む酸素分子の産生を刺激し、これは組織の崩壊を導きゲノムＤＮＡを傷害することにより癌を進展させることができる。Ｒａｃ１ｂによって誘発されたＲＯＳの増加はＥＭＴを制御する主要遺伝子を活性化し、これはその後次々とつながる大規模な組織崩壊を開始し、ＤＮＡの広範な部位の欠失または重複を引き起こすなど、ゲノムＤＮＡに直接作用することによって癌の進展を促進する。組織構造を変化させることによって、ＭＭＰはまた腫瘍遺伝子を活性化し、生物のゲノム内にあるＤＮＡの完全性を構成することができる。
【０１３７】
乳癌などの癌、特に異常な細胞構造や機能や組織の完全性の損失を導く前述したメカニズムと関係しているものの処置については、本発明に従ったＮＡＣアミドをＲＯＳの効果の阻害に使用できる。これは例えば、上皮から間葉への変化に至る経路に存在する分子に作用するためまたは目標を定めるために、必要としている被験体の細胞、組織および／または体へＮＡＣアミドまたはその誘導体を投与または導入することにより達成される。それに応じて、ＭＭＰ−３とその機能、例えばＭＭＰ３誘導性の細胞運動性、浸潤、および形態学的変化と同様に、ＭＭＰ−３誘導性の上皮型サイトケラチンの下方制御や間葉系のビメンチンの上方制御を抑制するのにＮＡＣアミドまたはその誘導体を使用できる。ＮＡＣアミドまたはその誘導体はまた、間接的または直接的にＲＯＳを目標とするために、ならびに／またはＲＯＳがそれによってＥＭＴを誘発する遺伝子を活性化する過程を目標とするために使用できる。
【０１３８】
別の実施形態では、本発明は同種移植患者における移植片拒絶の抑制のためのＮＡＣアミドまたはその誘導体から構成される合成物と手法を含む。
【０１３９】
別の実施形態では、本発明は幹細胞移植のための幹細胞、特に人間を含む移植を受ける動物への導入に先立って生体外で培養される幹細胞の成長を支援または助成する手法におけるＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を提供する。
【０１４０】
別の実施形態では、本発明は患者の中枢神経系（ＣＮＳ）障害または疾患、神経毒性、記憶障害の抑制、防止、処置、または防止と処置の両方の手法を提供し、これには治療効果のある量のＮＡＣアミドまたはその誘導体またはその薬学的に許容される合成物の投与が関係する。中枢神経系傷害または疾患の例には、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、外傷後てんかん（ＰＴＥ）、脳卒中、脳虚血、パーキンソン病、拳闘家認知症、ハンチントン病、アルツハイマー病などの脳の神経変性疾患、放射線、電離プラズマまたは鉄プラズマへの曝露、神経性ガス、シアン化物、毒性濃度の酸素により誘発される発作に続発する脳損傷、中枢神経系マラリアまたは抗マラリア薬の処置による神経毒性、ならびにその他の中枢神経系外傷が含まれる。他の関連する実施形態では、本発明は治療効果のある量のＮＡＣアミドまたはその誘導体を含む合成物の被験体への投与からなる、中枢神経系傷害または疾患に苦しむ被験体の処置の手法を含む。別の実施形態では、本発明は治療効果のある量のＮＡＣアミドまたはその誘導体を含む合成物の被験体への投与からなる被験体の中枢神経系傷害または疾患を防止または抑制する手法に関連する。他の実施形態では、本発明は治療効果のある量のＮＡＣアミドまたはその誘導体を含む配合の被験体への投与からなる患者の神経毒性または記憶障害を防止、抑制、または処置する手法を含む。うつ病や統合失調症などの病気や疾患のための電気ショック療法によって記憶障害が誘発される可能性がある場合は、記憶障害を軽減するために合成物は電気ショック療法の前に投与されるかもしれない。関連する実施形態では、中枢神経系傷害または疾患は外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、外傷後てんかん（ＰＴＥ）、脳卒中、脳虚血、または神経変性疾患であるかもしれない。関連する実施形態では、中枢神経系傷害は、フルードパーカッション（ｆｌｕｉｄ ｐｅｒｃｕｓｓｉｏｎ）、被験体の頭部などに鈍器によりもたらされる外傷、被験体の頭部を貫通する物体によってもたらされる外傷、放射線、電離プラズマまたは鉄プラズマへ、神経性ガス、シアン化物、毒性濃度の酸素、中枢神経系マラリアまたは抗マラリア薬への曝露によって誘発されるかもしれない。本発明の実施形態では、患者に投与される治療効果のある量のＮＡＣアミドまたはその誘導体は、適切な治療効果を得るために必要な量で、例えば、被験体の体重１ｋｇにつき約０．００１ｍｇ〜約２０ｍｇ、好ましくは被験体の体重１ｋｇにつき約１ｍｇ〜約１０ｍｇ、より好ましくは被験体の体重１ｋｇにつき約３ｍｇ〜約１０ｍｇである。追加的な実施形態では、被験体に投与される１日のＮＡＣアミドまたはその誘導体の総量は、約５０ｍｇ〜約１２００ｍｇ、または約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、または約２００ｍｇ〜約８００ｍｇ、または約３００ｍｇ〜約６００ｍｇである。
【０１４１】
他の実施形態では、本発明は、被験体が中枢神経系傷害または疾患のリスクにさらされる、もしくはさらされそうになる前に、または被験体が神経毒性または記憶障害または両方を引き起こす可能性のある条件にさらされる前に、中枢神経系傷害または疾患などのリスクに被験体がさらされる前の期間においてＮＡＣアミドまたはその誘導体を被験体に投与することにより被験体（例えば人間を含む動物）を処置する手法を含む。実例として、中枢神経系傷害または疾患、神経毒性または記憶障害の原因となる可能性のある条件には、電気ショック療法、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、外傷後てんかん（ＰＴＥ）、脳卒中、脳虚血、神経変性疾患、ｆｌｕｉｄ ｐｅｒｃｕｓｓｉｏｎ、被験体の頭部に衝撃を与える鈍器、被験体の頭部を貫通する物体、放射線、電離プラズマまたは鉄プラズマ、神経性ガス、シアン化物、毒性濃度の酸素、中枢神経系マラリア、および抗マラリア薬が含まれる。中枢神経系傷害または疾患、神経毒性または記憶障害の原因となる可能性のあるその他の条件には、中枢神経系の虚血、低酸素症、または塞栓症のリスクに関連する特定の医学的手技または条件、例えば脳腫瘍、脳外科手術、その他の脳関連疾患、心臓切開手術、頸動脈血管内膜切除術、大動脈瘤根治術、心房細動、心停止、心臓またはその他のカテーテル、静脈炎、血栓症、長期のベッド休養、長期のうっ血（例えば航空機、鉄道、車またはその他の輸送手段による宇宙旅行または長期旅行）、空気／ガス塞栓症または減圧症に続発する中枢神経系の外傷など含まれるがこれに限定されるものではない。その期間は、予想される曝露の時間の約７２時間前、または予想される曝露の時間の約４８時間前、または予想される曝露の時間の約１２時間前、または予想される曝露の時間の約４時間前、または予想される曝露の時間の約３０分〜２時間前であるかもしれない。ＮＡＣアミドの投与は、処置の最初から処置の最後まで続くかもしれない。例えば、経皮貼布または徐放製剤がＮＡＣアミドまたはその誘導体を所定の時間の間被験体に連続的に投与するために使用されるかもしれない。もう一つの方法として、ＮＡＣアミドまたはその誘導体が被験体に一定期間ごとに投与されるかもしれない。例えば、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は予想される曝露の時間の約２４時間前に最初に投与され、それ以後約２時間ごとに投与されるかもしれない。これら本発明の実施形態については、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミド誘導体含有合成物はさらに薬学的に許容される賦形剤を含むかもしれず、合成物は静脈内的、皮内的、皮下的、経口的、経皮的、経粘膜的、直腸投与で投与されるかもしれない。
【０１４２】
他の実施形態では、本発明は治療効果のある量のＮＡＣアミドまたはその誘導体と薬学的に許容される賦形剤で構成される、被験体の中枢神経系傷害、疾患、または神経毒性の処置または予防のための薬剤合成物を含む。さらなる実施形態では、本発明は治療効果のある量のＮＡＣアミドまたはその誘導体からなる合成物で構成されるキットを含む。そのキットは、使用説明書だけでなく、注射針、吸入器、経皮貼布剤などの合成物を被験体に投与する器具をさらに含むかもしれない。
【０１４３】
本発明の別の実施形態では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を含む抗癌処置は明確に癌や腫瘍細胞を目標とするようにデザインされている。この実施形態はＮＡＣアミドまたはその誘導体の癌や腫瘍細胞への、生体内、生体外での投与のためのナノサイズ粒子の使用を目標としている。この実施形態によると、癌細胞はビタミン葉酸（すなわち葉酸塩）に対する受容体をより多く発現し、正常で健康な細胞より多くの葉酸を吸収し、選択的に目標とされることができる。そのために、コア型またはシェル型ナノゲルまたはナノ粒子は、ＮＡＣアミドまたはその誘導体に共役、または結合している葉酸または葉酸塩で、その細胞受容体と部位を結び付けている葉酸を分離または崩壊させることなく官能化される。そのような官能化されたナノ粒子は、被験体、特に上皮性腫瘍などの癌を持ち葉酸塩が不足している被験体で、選択的に葉酸−ＮＡＣアミド（または葉酸−ＮＡＣアミド誘導体）ナノ粒子を結合し、それらを取り込む葉酸受容体を、癌細胞が過剰に持つ被験体に導入が可能である。癌細胞の内部では、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は、癌細胞の発現、刺激、および／または維持する役割を担うＲＯＳおよび／またはその他の標的分子を抑制すること、ならびに／または最終的に癌細胞を破壊することによりその治療効果を発揮する。
【０１４４】
実例としては、Ｊ．Ｆ．Ｋｕｋｏｗｓｋａ−Ｌａｔａｌｌｏら、２００５、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、Ｊｕｎ １５；６５（１２）：５３１７−２４に記載されているように、葉酸受容体発現（過剰発現）腫瘍や癌細胞を標的とするために、直径が５ｎｍより小さいＰＡＭＡＭデンドリティックポリマーがＮＡＣアミドの担体として使用される。アセチル化デンドリマーは標的因子として葉酸に共役され、その後ＮＡＣアミドまたはその誘導体およびフルオレセインまたは６−カルボキシテトラメチルローダミンのいずれかに結合される。もう一つの方法として、ＮＡＣアミドまたはその誘導体は抱合体を形成するために葉酸に結合され、その抱合体はナノ粒子に結合される。これらの抱合体は、静脈注射によって癌、特に葉酸受容体を過剰発現している腫瘍を持つ患者または哺乳動物に注入される。葉酸結合ナノ粒子はその結果、投与後腫瘍と組織内に集まり、そこではＮＡＣアミドまたはＮＡＣ誘導体が細胞内でＲＯＳと相互に作用でき、ならびに／または腫瘍細胞を殺すために他の分子を標的にできる。葉酸を標的としたポリマーの腫瘍組織の局在性は遊離葉酸の事前の静脈内注入により、減弱されるかもしれない。
【０１４５】
同様の実施形態では、ポリマーまたはナノ粒子は、グルタチオン−ＮＡＣアミドまたはグルタチオン−ＮＡＣアミド誘導体抱合体を発現するために官能化され、これはその後その細胞表面に増加したグルタチオン受容体を発現する癌細胞に、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を届けるために利用される。ＮＡＣアミド−グルタチオンナノ粒子はその後、グルタチオン受容体を持つそれらの癌細胞を標的とし、細胞に選択的に取り込まれる。これらの実施形態では、本発明は葉酸（葉酸塩）またはグルタチオンに対する高濃度の受容体を発現する癌細胞などの細胞へのＮＡＣアミドまたはその誘導体の指定送達を提供する。これらの実施形態に従って、ＮＡＣアミド（「ＮＡＣＡ」）またはその誘導体は、抱合体を形成するために細胞表面の受容体（例えば葉酸またはグルタチオン）のためのリガンドに結合される。このＮＡＣＡ−リガンド結合体を当業者に既知の手順を用いて、注入可能なナノ粒子の表面にかぶせるまたは吸着させる。それにしたがって、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を含むこのナノ粒子（「ナノ−ＮＡＣＡ粒子」）はＮＡＣアミドがその望ましい効果を発揮する癌または腫瘍細胞に選択的に取り込まれるかもしれない。
【０１４６】
ある実施形態では、本発明はリガンドに対する高濃度の表面受容体を発現する宿主細胞へのＮＡＣアミドまたはその誘導体の指定送達の方法を導き、これはａ）リガンドへアセチル化デンドリティックナノポリマーを結合させる、ｂ）手順（ａ）の結合リガンドを、ＮＡＣアミド−リガンドナノ粒子を形成するためにＮＡＣアミドまたはその誘導体に結合させる、ならびにｃ）宿主に（ｂ）のナノ粒子を注入することから構成される。別の実施形態では、本発明はリガンドに対する高濃度の表面受容体を発現する宿主細胞へのＮＡＣアミドまたはその誘導体の指定送達の方法を導き、これはａ）ＮＡＣアミド−リガンド結合体を形成するために、ＮＡＣアミドまたはその誘導体を表面受容体リガンドへ結合させる、ｂ）ＮＡＣアミド−リガンド結合体をナノ粒子表面に吸着させる、そしてｃ）（ｂ）のナノ粒子を宿主へ注入することからなる。
【０１４７】
本発明の別の実施形態は式Ｉ
【０１４８】
【化１６】

の化合物を提供し、
ここで、Ｒ_１はＯＨ、ＳＨ、またはＳ−Ｓ−Ｚであり、
ＸはＣまたはＮであり、
ＹはＮＨ_２、ＯＨ、ＣＨ_３−Ｃ＝Ｏ、またはＮＨ−ＣＨ_３であり、
Ｒ_２は存在しないか、Ｈ、または＝Ｏであり、
Ｒ_３は存在しないかまたは、
【０１４９】
【化１７】

ここで、Ｒ_４はＮＨまたはＯであり、
Ｒ_５はＣＦ_３、ＮＨ_２、またはＣＨ_３であり、
またここでＺは
【０１５０】
【化１８】

であり、もしＲ_１がＳ−Ｓ−Ｚならば、ＸとＸ’が同じ、ＹとＹ’が同じ、Ｒ_２とＲ_６が同じ、そしてＲ_３とＲ_７が同じである。
【０１５１】
一つの実施形態では、Ｒ_１はＳ、ＸはＣ、ＹはＮＨ−ＣＨ_３、Ｒ_２はＨ、Ｒ_３は、
【０１５２】
【化１９】

Ｒ_４はＯ、そしてＲ_５はＣＨ_３である。別の実施形態では、Ｒ_１はＳ、ＸはＮ、ＹはＣＨ_３−Ｃ＝Ｏ、Ｒ_２はＨ、そしてＲ_３は存在しない。
【０１５３】
本発明はまた、上記式Ｉの化合物を提供し、ここでＲ_１はＳ、ＸはＣ、ＹはＮＨ_２、Ｒ_２は＝Ｏ、Ｒ_３は
【０１５４】
【化２０】

Ｒ_４はＯ、そしてＲ_５はＣＦ_３である。本発明の化合物にはまた、式Ｉの化合物が含まれ、ここでＲ_１はＯ、ＸはＣ、ＹはＮＨ_２、Ｒ_２
は＝Ｏ、Ｒ_３は
【０１５５】
【化２１】

Ｒ_４はＯ、そしてＲ_５はＣＨ_３である。式Ｉの化合物がまた本発明により提供され、ここでＲ_１はＳ、ＸはＣ、ＹはＯＨ、Ｒ_２は存在せず、Ｒ_３は
【０１５６】
【化２２】

Ｒ_４はＯ、そしてＲ_５はＣＨ_３、またはここでＲ_１はＳ、ＸはＣ、ＹはＮＨ_２、Ｒ_２は＝Ｏ、Ｒ_３は
【０１５７】
【化２３】

Ｒ_４はＮＨ、そしてＲ_５はＮＨ_２である。本発明の別の実施形態は、式Ｉの化合物を提供し、ここでＲ_１はＯ、ＸはＣ、ＹはＯＨ、Ｒ_２は存在せず、Ｒ_３は
【０１５８】
【化２４】

Ｒ_４はＯ、そしてＲ_５はＣＨ_３であり、あるいはここでＲ_１はＳ、ＸはＣ、ＹはＮＨ_２、Ｒ_２は＝Ｏ、Ｒ_３は
【０１５９】
【化２５】

Ｒ_４はＯ、そしてＲ_５はＣＨ_３である。さらなる実施形態では、本発明は式Ｉの化合物を提供し、ここでＲ_１はＳ−Ｓ−Ｚ、ＸはＣ、ＹはＮＨ_２、Ｒ_２は＝Ｏ、Ｒ_３は
【０１６０】
【化２６】

Ｒ_４はＯ、そしてＲ_５はＣＨ_３である。
【０１６１】
ここで開示される化合物はキラルな、すなわちＬ−異性体、Ｄ−異性体などの光学異性体であってよく、またはＤ−異性体、Ｌ−異性体のラセミ混合物であってもよい。好ましい化合物には以下が含まれるが、これに限定されるものではない。
【０１６２】
【化２７】

一つの実施形態では、化合物ＩからＸＶＩＩＩはＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミド誘導体を含む。
【０１６３】
別の実施形態では、本発明の化合物のＬ−異性体またはＤ−異性体を調製するためのプロセスが提供され、これは、一次混合物を形成するためにＬ−シスチンジアミドジヒドロクロライドまたはＤ−シスチンジアミドジヒドロクロライドに基剤を添加し、続いて一次混合物を真空下で加熱すること、メタノール溶液を加熱した一次混合物に添加すること、一次残渣を得るためにこの混合物を塩酸アルコールを用いて酸性にすること、アンモニアで飽和したメタノールからなる一次溶液に一次残渣を溶解すること、二次混合物を作成するために溶解した一次残渣に二次溶液を添加すること、二次混合物を沈殿させ、洗浄すること、二次残渣を得るためにこの二次混合物をろ過し乾燥させること、三次混合物を作成するために二次残渣を液体アンモニア、そして塩化アンモニウムのエタノール溶液と混合すること、そして三次混合物をろ過し乾燥させ、これによりＬ−異性体化合物またはＤ−異性体化合物を調製することから構成される。
【０１６４】
基剤は液体アンモニアまたはメチルアミンを含んでもよい。二次溶液は水、酢酸塩、無水物を含み、ここで酢酸塩は酢酸ナトリウムまたはトリフルオロ酢酸ナトリウムを含んでもよく、無水物は無水酢酸または無水トリフルオロ酢酸を含んでもよい。もう一つの方法として、二次溶液は、ジクロロメタン、トリエチルアミン、およびｌ，３−ビス（ベンジルオキシカルボニル）−２−メチル−２−プソイドウレアを含んでもよい。液体アンモニアと塩化アンモニウムのエタノール溶液に加えて、二次残渣はさらにナトリウム金属と混合されてもよい。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、このプロセスはさらに、Ｌ−異性体またはＤ−異性体化合物をエーテルに溶解させること、四次混合物を作成するために水素化アルミニウムリチウムのエーテル溶液、酢酸エチル、水を溶解したＬ−異性体またはＤ−異性体化合物に添加すること、四次混合物をろ過して乾燥させ、これによりＬ−異性体またはＤ−異性体化合物を調製することから構成される。
【０１６６】
式ＩＩとＩＩＩの化合物は、Ｌ−シスチンジアミドジヒドロクロライドまたはＤ−シスチンジアミドジヒドロクロライドを液体アンモニアと混合すること、揮発性物質を除去するために混合物を温めること、混合物を真空で５０℃に温めること、温かいメタノール溶液を添加すること、溶液をろ過すること、一次残渣を得るためにろ過したものを塩酸アルコールを用いて酸性にし、一次残渣をアンモニアで飽和したメタノール溶液に溶解すること、濃縮乾固させること、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を添加すること、５０℃に温度を上昇させること、混合物を沈殿させて混合物を水で洗浄すること、粗固形物をろ過すること、二次残渣を得るために混合物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合させること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから三次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１６７】
式ＩＶとＶの化合物はＬ−シスチンジアミドジヒドロクロライドまたはＤ−シスチンジアミドジヒドロクロライドをメチルアミンと混合すること、揮発性物質を除去するために混合物を温めること、混合物を真空で５０℃に温めること、温かいメタノール溶液を添加すること、溶液をろ過すること、一次残渣を得るためにろ過物を塩酸アルコールを用いて酸性にすること、アンモニアで飽和したメタノール溶液に一次残渣を溶解すること、濃縮乾固させること、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を添加すること、温度を５０℃に上昇させること、混合物を沈殿させて混合物を水で洗浄すること、粗固形物をろ過すること、二次残渣を得るために混合物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合させること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから三次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１６８】
式ＶＩＩとＶＩＩＩの化合物はＬ−シスチンジアミドジヒドロクロライドまたはＤ−シスチンジアミドジヒドロクロライドをアンモニアと混合すること、揮発性物質を除去するために混合物を温めること、混合物を真空で５０℃に温めること、温かいメタノール溶液を添加すること、溶液をろ過すること、一次残渣を得るためにろ過物を塩酸アルコールを用いて酸性にすること、アンモニアで飽和したメタノール溶液に一次残渣を溶解すること、濃縮乾固させること、水、トリフルオロ酢酸ナトリウム、および無水トリフルオロ酢酸を添加すること、温度を５０℃に上昇させること、混合物を沈殿させて混合物を水で洗浄すること、粗固形物をろ過すること、二次残渣を得るために混合物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合させること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから三次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１６９】
式ＸＩＩＩとＸＩＶの化合物は、Ｌ−シスチンジアミドジヒドロクロライドまたはＤ−シスチンジアミドジヒドロクロライドをアンモニアと混合すること、揮発性物質を除去するために混合物を温めること、混合物を真空で５０℃に温めること、温かいメタノール溶液を添加すること、溶液をろ過すること、一次残渣を得るためにろ過物を塩酸アルコールを用いて酸性にすること、アンモニアで飽和したメタノール溶液に一次残渣を溶解すること、濃縮乾固させること、ジクロロメタン、トリエチルアミン、およびｌ，３−ビス（ベンジルオキシカルボニル）−２−メチル−２−プソイドウレアを添加すること、温度を０℃に低下させること、混合物を沈殿させて混合物を水で洗浄すること、粗固形物をろ過すること、二次残渣を得るために混合物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合させること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから三次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１７０】
式ＸＩとＸＩＩの化合物はＬ−またはＤ−シスチンジアミドジヒドロクロライドを液体アンモニアと混合すること、揮発性物質を除去するために混合物を温めること、混合物を真空で５０℃に温めること、温かいメタノール溶液を添加すること、溶液をろ過すること、一次残渣を得るためにろ過物を塩酸アルコールを用いて酸性にすること、アンモニアで飽和したメタノール溶液に一次残渣を溶解すること、濃縮乾固させること、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を添加すること、温度を５０℃に上昇させること、混合物を沈殿させること、混合物を水で洗浄すること、粗固形物をろ過すること、二次残渣を得るために混合物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合させること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、三次残渣をエーテルに溶解すること、水素化アルミニウムリチウムのエーテル溶液をゆっくりと添加すること、酢酸エチルをゆっくりと添加すること、水をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、四次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから四次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１７１】
式ＸＶＩＩとＸＶＩＩＩの化合物は、Ｌ−シスチンジアミドジヒドロクロライドまたはＤ−シスチンジアミドジヒドロクロライドを液体アンモニアと混合すること、揮発性物質を除去するために混合物を温めること、混合物を真空で５０℃に温めること、温かいメタノール溶液を添加すること、溶液をろ過すること、一次残渣を得るためにろ過物を塩酸アルコールを用いて酸性にすること、アンモニアで飽和したメタノール溶液に一次残渣を溶解すること、濃縮乾固させること、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を添加すること、温度を５０℃に上昇させること、混合物を沈殿させること、混合物を水で洗浄すること、粗固形物をろ過すること、二次残渣を得るために混合物を乾燥させること、ならびにイソプロパノールから二次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１７２】
本発明の別の実施形態は、ここで開示される化合物のＬ−異性体またはＤ−異性体を調製するためのプロセスを提供し、これはＳ−ベンジル−Ｌ−システインメチルエステル塩酸塩またはＤ−システインメチルエステル塩酸塩、またはＯ−ベンジル−Ｌ−セリンメチルエステル塩酸塩またはＤ−セリンメチルエステル塩酸塩を基剤と混合して一次混合物を作成すること、一次混合物にエーテルを添加すること、一次混合物をろ過して濃縮すること、（ｃ）と（ｄ）の工程を繰り返し一次残渣を得ること、酢酸エチルと一次溶液を一次残渣に添加して二次混合物を作成すること、二次混合物をろ過して乾燥させて二次残渣を作成すること、二次残渣を液体アンモニア、ナトリウム金属、および塩化アンモニウムのエタノール溶液と混合して三次混合物を作成すること、三次混合物をろ過して乾燥させ、これによりＬ−異性体またはＤ−異性体化合物を調製することから構成される。
【０１７３】
基剤は液体アンモニアまたはメチルアミンを含んでもよい。二次溶液は水、酢酸塩、無水物を含み、ここで酢酸塩は酢酸ナトリウムまたはトリフルオロ酢酸ナトリウムを含んでもよく、無水物は無水酢酸または無水トリフルオロ酢酸を含んでもよい。もう一つの方法として、二次溶液は、ジクロロメタン、トリエチルアミン、およびｌ，３−ビス（ベンジルオキシカルボニル）−２−メチル−２−プソイドウレアを含んでもよい。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、このプロセスはさらに、Ｌ−異性体またはＤ−異性体化合物をエーテルに溶解させること、四次混合物を作成するために水素化アルミニウムリチウムのエーテル溶液、酢酸エチル、水を、溶解したＬ−異性体またはＤ−異性体化合物に添加すること、四次混合物をろ過して乾燥させ、これによりＬ−異性体またはＤ−異性体化合物を調製することから構成される。
【０１７５】
式ＩＩとＩＩＩの化合物はＳ−ベンジル−Ｌ−システインメチルエステル塩酸塩またはＤ−システインメチルエステル塩酸塩を冷たいアンモニアのメタノール溶液と混合すること、アンモニアの気流を混合物上に通すこと、フラスコをしっかりと密封すること、混合物を濃縮させること、エーテルを添加すること、溶液をろ過すること、ろ過物を濃縮すること、エーテルを添加しもう一度ろ過して残渣を得ること、残渣を酢酸エチルで懸濁すること、無水酢酸をこの懸濁液に添加すること、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を添加すること、温度を６５℃に上昇させること、混合物を冷却すること、粗固形物をろ過すること、酢酸エチルで洗浄すること、二次残渣を得るために沈殿物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合すること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから三次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１７６】
式ＩＶとＶの化合物は、Ｓ−ベンジル−Ｌ−システインメチルエステル塩酸塩またはＤ−システインメチルエステル塩酸塩を冷たいメチルアミンのメタノール溶液と混合すること、メチルアミンの気流を混合物上に通すこと、フラスコをしっかりと密封すること、混合物を濃縮させること、エーテルを添加すること、溶液をろ過すること、ろ過物を濃縮すること、エーテルを添加しもう一度ろ過して残渣を得ること、残渣を酢酸エチルで懸濁すること、無水酢酸をこの懸濁液に添加すること、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を添加すること、温度を６５℃に上昇させること、混合物を冷却すること、粗固形物をろ過すること、酢酸エチルで洗浄すること、二次残渣を得るために沈殿物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合すること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから三次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１７７】
式ＶＩＩとＶＩＩＩの化合物は、Ｓ−ベンジル−Ｌ−システインメチルエステル塩酸塩またはＤ−システインメチルエステル塩酸塩を冷たいアンモニアのメタノール溶液と混合すること、メチルアミンの気流を混合物上に通すこと、フラスコをしっかりと密封すること、混合物を濃縮させること、エーテルを添加すること、溶液をろ過すること、ろ過物を濃縮すること、エーテルを添加しもう一度ろ過して残渣を得ること、残渣を酢酸エチルで懸濁すること、無水トリフルオロ酢酸をこの懸濁液に添加すること、水、トリフルオロ酢酸ナトリウム、および無水トリフルオロ酢酸を添加すること、温度を６５℃に上昇させること、混合物を冷却すること、粗固形物をろ過すること、酢酸エチルで洗浄すること、二次残渣を得るために沈殿物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合すること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから三次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１７８】
式ＩＸとＸの化合物は、Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリンメチルエステル塩酸塩またはＤ−セリンメチルエステル塩酸塩を冷たいアンモニアのメタノール溶液と混合すること、メチルアミンの気流を混合物上に通すこと、フラスコをしっかりと密封すること、混合物を濃縮させること、エーテルを添加すること、溶液をろ過すること、ろ過物を濃縮すること、エーテルを添加しもう一度ろ過して残渣を得ること、残渣を酢酸エチルで懸濁すること、無水酢酸をこの懸濁液に添加すること、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を添加すること、温度を６５℃に上昇させること、混合物を冷却すること、粗固形物をろ過すること、酢酸エチルで洗浄すること、二次残渣を得るために沈殿物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合すること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから三次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１７９】
式ＸＩＩＩとＸＩＶの化合物は、Ｓ−ベンジル−Ｌ−システインメチルエステル塩酸塩またはＤ−システインメチルエステル塩酸塩を冷たいアンモニアのメタノール溶液と混合すること、アンモニアの気流を混合物上に通すこと、フラスコをしっかりと密封すること、混合物を濃縮させること、エーテルを添加すること、溶液をろ過すること、ろ過物を濃縮すること、エーテルを添加しもう一度ろ過して残渣を得ること、残渣を酢酸エチルで懸濁すること、無水酢酸をこの懸濁液に添加すること、ジクロロメタン、トリエチルアミン、およびｌ，３−ビス（ベンジルオキシカルボニル）−２−メチル−２−プソイドウレアを添加すること、温度を０℃に下げること、混合物を沈殿させること、混合物を水で洗浄すること、粗固形物をろ過すること、二次残渣を得るために混合物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合すること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから三次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１８０】
式ＸＩとＸＩＩの化合物は、（ａ）Ｓ−ベンジル−Ｌ−システインメチルエステル塩酸塩またはＤ−システインメチルエステル塩酸塩を冷たいアンモニアのメタノール溶液と混合すること、アンモニアの気流を混合物上に通すこと、フラスコをしっかりと密封すること、混合物を濃縮させること、エーテルを添加すること、溶液をろ過すること、ろ過物を濃縮すること、エーテルを添加しもう一度ろ過して残渣を得ること、残渣を酢酸エチルで懸濁すること、無水酢酸をこの懸濁液に添加すること、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を添加すること、温度を６５℃に上昇させること、混合物を冷却すること、粗固形物をろ過すること、酢酸エチルで洗浄すること、二次残渣を得るために沈殿物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合すること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、三次残渣をエーテルに溶解すること、水素化アルミニウムリチウムのエーテル溶液をゆっくりと添加すること、酢酸エチルをゆっくりと添加すること、水をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、四次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから四次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１８１】
式ＸＶとＸＶＩの化合物は、（ａ）Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリンメチルエステル塩酸塩またはＤ−セリンメチルエステル塩酸塩を冷たいアンモニアのメタノール溶液と混合すること、アンモニアの気流を混合物上に通すこと、フラスコをしっかりと密封すること、混合物を濃縮させること、エーテルを添加すること、溶液をろ過すること、ろ過物を濃縮すること、エーテルを添加しもう一度ろ過して残渣を得ること、残渣を酢酸エチルで懸濁すること、無水酢酸をこの懸濁液に添加すること、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を添加すること、温度を６５℃に上昇させること、混合物を冷却すること、粗固形物をろ過すること、酢酸エチルで洗浄すること、二次残渣を得るために沈殿物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合すること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、三次残渣をエーテルに溶解すること、水素化アルミニウムリチウムのエーテル溶液をゆっくりと添加すること、酢酸エチルをゆっくりと添加すること、水をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、四次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから四次残渣を晶出させることによって調製される。
【０１８２】
本発明のさらに別の実施形態は、ここで開示される化合物を調製するためのプロセスを提供し、シスタミン二塩酸塩とアンモニア、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を混合して一次混合物を生成すること、一次混合物を沈殿させること、一次混合物をろ過して乾燥させて一次残渣を生成すること、二次残渣を液体アンモニア、ナトリウム金属、および塩化アンモニウムのエタノール溶液と混合して二次混合物を生成すること、二次混合物をろ過して乾燥させ、これにより化合物を調製することから構成される。
【０１８３】
式ＶＩの化合物は、シスタミン二塩酸塩をアンモニアと混合すること、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を添加すること、温度を５０℃に上昇させること、混合物を沈殿させること、混合物を水で洗浄すること、粗固形物をろ過すること、二次残渣を得るために混合物を乾燥させること、二次残渣を液体アンモニアと混合すること、ナトリウム金属をゆっくりと添加すること、溶媒を除去すること、塩化アンモニウムのエタノール溶液をゆっくりと添加すること、無機塩類をろ過し分離すること、三次残渣を得るためにろ過物を濃縮して冷却すること、ならびにイソプロパノールから三次残渣を晶出させることによって調製される。
【実施例】
【０１８４】
（実施例１）
本実施例ではＮＡＣアミドを、ＰＣ１２細胞のグルタミン酸によって誘発される酸化毒性に対する保護作用について評価した。
【０１８５】
材料と方法：Ｎ−（１−ピレニル）−マレイミド（ＮＰＭ）をＡｌｄｒｉｃｈ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、ＷＩ、米国）より購入した。Ｎ−アセチルシステインアミドはＮｏｖｉａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（イスラエル）より得た。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）グレード溶剤はＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ （Ｆａｉｒ Ｌａｗｎ、ＮＪ）より購入した。その他の全ての試薬はＳｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、米国）より購入した。
【０１８６】
細胞培養と毒性試験：ＰＣ１２細胞の保存培養液はＡＴＣＣより購入し、７５ｃｍ^２の組織培養フラスコで、ＲＰＭＩ １６４０で培養し、１０％（ｖ／ｖ）熱不活性化ウマ血清と５％（ｖ／ｖ）ウシ胎仔血清を補充し、１％（ｖ／ｖ）ペニシリンとストレプトマイシンを添加した。培養液は５％ＣＯ_２を含む湿潤環境で３７℃に維持した。細胞を週に２回継代した。特記しないかぎり、全ての実験はＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ）を分化培地として用いて行い、０．５％（ｖ／ｖ）ウシ胎仔血清、１％（ｖ／ｖ）ペニシリンおよびストレプトマイシンを補充した。形態学的評価のため、ＰＣ１２細胞を２５ｘ１０^３細胞／ウェル濃度で２４穴のコラーゲンコートプレートに接種した。プレートを３つずつ５つのグループに分けた。１）対照：グルタミン酸なし、ＮＡＣアミドなし、２）神経成長因子（ＮＧＦ）対照：ＮＧＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）、グルタミン酸なし、ＮＡＣアミドなし、３）ＮＡＣアミドのみ：ＮＧＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）、グルタミン酸なし、ＮＡＣアミド（７５０μＭ）、４）グルタミン酸のみ：ＮＧＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）、グルタミン酸（１０ｍＭ）、ＮＡＣアミドなし、および５）グルタミン酸＋ＮＡＣアミド：ＮＧＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）、グルタミン酸（１０ｍＭ）、ＮＡＣアミド（７５０μＭ）である。グループＩを除いて、全てのウェルに１００ｎｇ／ｍｌのＮＧＦを一日おきに加えた。１週間後、細胞を１０ｍＭのグルタミン酸と、ＮＡＣアミドを用いてまたは用いずに２４時間処理した（対照は除く）。２４時間後、細胞を０．５％（ｖ／ｖ）グルタルアルデヒド／ＰＢＳで固定し、顕微鏡写真を撮影した。
【０１８７】
ＬＤＨアッセイ：乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）アッセイについては、細胞を２．５ｘ１０^５細胞／ウェル濃度で２４穴コラーゲンコート培養プレートに接種し、２４時間後、培地を所望濃度のグルタミン酸とＮＡＣアミドを含む新しいＤＭＥＭ培地と交換した。所望する培養時間の後、放出されるＬＤＨ活性を以下に記載のようなキットを用いて測定した。ＭＴＳアッセイについて、細胞を１０^５細胞／ウェル濃度で２４穴コラーゲンコートプレートに接種した。実験の最後に、記述したように細胞生存率を、キットを用いてアッセイした。ＬＤＨ活性アッセイをＣｙｔｏＴｏｘ９６（登録商標）Ｎｏｎ−Ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａｓｓａｙ ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ、米国）を用いて行い、細胞溶解の際に放出される安定した細胞質内酵素であるＬＤＨの活性を定量的に測定した［Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ Ｎｏ．１６３，Ｐｒｏｍｅｇａ］。培養上清中のＬＤＨを３０分の結合酵素アッセイ（ｃｏｕｐｌｅｄ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ａｓｓａｙ）で測定すると、テトラゾリウム塩の赤色ホルマザン産物への転換がもたらされた。形成された着色の量は細胞膜の損傷の度合いに比例した。吸光度データをＢＭＧマイクロプレートリーダー（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｄｕｒｈａｍ、ＮＣ、米国）を用いて４９０ｎｍにて収集した。ＬＤＨ漏出量はグルタミン酸のみ（１００％）で処理された細胞における最大ＬＤＨ放出量の割合（％）で、以下の式に従って表された。
【０１８８】
【化２８】

ＭＴＳアッセイ：ＭＴＳアッセイ（Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ９６（登録商標）Ａｑｕｅｏｕｓ Ｏｎｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ，Ｐｒｏｍｅｇａ）は、投与した（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム分子内塩（ＭＴＳ）［２１］が生存細胞によって培地に溶解する着色ホルマザン産物に生体還元される細胞増殖アッセイである。４９０ｎｍの吸光度は培養液中の生存細胞の数に比例する。
【０１８９】
ＧＳＨ測定：ＧＳＨの細胞濃度はＷｉｎｔｅｒｓ Ｒ．Ａ．ら、Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２２７（１）：１４−２１，１９９５で記述される方法を用いて測定した。ＧＳＨ測定のために、細胞は８０，０００細胞／ｃｍ^２の濃度でポリ−Ｄ−リジンコート（０．０５ｍｇ／ｍｌ）７５ｃｍ^２フラスコ（５ｍｌ／フラスコ）に接種した。２４時間後、フラスコをグルタミン酸（１０ｍＭ）、またはＢＳＯ（０．２ｍＭ）またはグルタミン酸＋ＢＳＯ＋ＮＡＣアミド（７５０μＭ）を含む新鮮培地を用いて３７０℃にてまた２４時間培養した。培養の後、細胞を培養液から取り出し、セリンホウ酸塩緩衝液（１００ｍＭのトリス塩酸、１０ｍＭのホウ酸、５ｍＭのＬ−セリン、１ｍＭのＤＥＴＡＰＡＣ、ｐＨ７．４）内でホモジナイズした。２０μｌの希釈細胞ホモジネートを２３０μｌのセリンホウ酸塩緩衝液と７５０μｌのＮＰＭ（１ｍＭ／アセトニトリル）に加えた。得られる溶液を室温で５分間培養した。反応を５μｌの２Ｎ塩酸を加えて停止させた。試料はその後０．２μｍのＡｃｒｏｄｉｓｃフィルターでろ過し、ＨＰＬＣシステムに注入した。
【０１９０】
ＭＤＡ測定：溶液を調製するために、３５０μｌの未加工細胞ホモジネート、１００μｌの５００ｐｐｍＢＨＴ（ブチル化ヒドロキシトルエン）、および５５０μｌの１０％ＴＣＡ（トリクロロ酢酸）を混合し、３０分間煮沸した。試験管を氷上で冷却し、２５００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。５００μｌの上清を取り、５００μｌのＴＢＡ（チオバルビツール酸）を加えた。試験管を再び３０分間煮沸し、その後氷上で冷却した。この溶液から、５００μｌを取り１．０ｍｌのｎ−ブタノールに加えボルテックス後、相分離を促進するために６０ｇで５分間遠心分離した。その後最上層を０．４５μｍのフィルターでろ過し、逆相ＨＰＬＣシステムの５μｍのＣ１８カラム（２５０ｘ４．６ｍｍ）に注入した。移動相は５ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ＝７．０）が６９．４％、アセトニトリルが３０％、およびＴＨＦ（テトラヒドロフラン）が０．６％で構成されている。励起波長は５１５ｎｍで発光波長は５５０ｎｍとした（Ｄｒａｐｅｒ Ｈ．Ｈ．ら、Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ．、１５（４）：３５３−６３，１９９３）。
【０１９１】
タンパク質定量と統計分析：タンパク質濃度を、クマシー・ブルー（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を用いたＢｒａｄｆｏｒｄ法により定量した（Ｂｒａｄｆｏｒｄ Ｍ．Ｍ．、Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ．、７２：２４８−５４，１９７６）。データは平均値±ＳＤで表した。対照と実験グループ間の有意差の分析に一元配置分散分析試験を用いた。
【０１９２】
本実施例はＮＡＣアミドがグルタミン酸毒性に対して細胞を保護することを示す。グルタミン酸毒性は１）グルタミン酸存在下でのＰＣ１２細胞の形態学的評価、２）グルタミン酸への曝露から２４時間後の培地内に放出されるＬＤＨ量の測定、および３）ＭＴＳアッセイを用いた細胞生存率の測定によって評価した。図２Ａ〜Ｄに示すとおり、細胞は対照細胞に比べて、１０ｍＭグルタミン酸の存在下でその神経突起の正常形態を完全に失っていた。ＮＡＣアミドがグルタミン酸毒性から細胞を保護できるかどうかを決定するために、ＰＣ１２細胞を７５０μＭのＮＡＣアミドの存在下で１０ｍＭグルタミン酸に２４時間曝露し、光学顕微鏡で細胞生存率を試験した。ＮＡＣアミドの添加は、神経突起のブレブ形成をわずかに低下させることによりＰＣ１２細胞をグルタミン酸毒性から保護した。
【０１９３】
ＮＡＣアミドによりもたらされる保護を定量化するために、ＰＣ１２細胞をＮＡＣアミドの存在下で１０ｍＭグルタミン酸に２４時間曝露し、その後放出されたＬＤＨ量を、ＬＤＨアッセイを用いて測定した。図３に示すように、アッセイにおいて７５０μＭのＮＡＣアミドの含有は、１０ｍＭグルタミン酸の存在下においてもなお、細胞傷害から細胞を完全に保護した（放出されたＬＤＨの％は２８．９±３．７％）。細胞をＮＡＣアミドの存在下で１０ｍＭグルタミン酸に２４時間曝露すると同様の結果が得られ、細胞生存率をＭＴＳアッセイによって評価した。
【０１９４】
例１の結果はＮＡＣアミド処置が有意にＰＣ１２細胞のＧＳＨ濃度を上昇させることを示している。細胞を１０ｍＭのグルタミン酸に曝露すると、ＧＳＨ濃度の有意な低下が認められた（表１）。
表１：ＮＡＣアミドの、ＢＳＯとグルタミン酸の存在下での細胞内ＧＳＨ濃度への影響
【０１９５】
【表１】

ＰＣ１２細胞を接種し２４時間培養した後、それらをＧＬＵ（１０ｍＭ）、ＮＡＣアミド（７５０μＭ）、ＧＬＵ（１０ｍＭ）＋ＮＡＣアミド（７５０μＭ）、ＧＬＵ（１０ｍＭ）＋ＢＳＯ（０．２ｍＭ）＋ＮＡＣアミド（７５０μＭ）、またはＢＳＯ（０．２ｍＭ）のいずれかで処理した。２０時間後、細胞を取り出し、本文中に記述するようにＧＳＨ濃度を分析した。数値は、平均値±ＳＤを示す。対照と比較して統計的な差の値を^＊Ｐ＜０．０５と決定した。グルタミン酸処置グループと比較して^＊＊Ｐ＜０．００１。グルタミン酸処置グループと比較して^＊＊＊Ｐ＜０．０５。７５０μＭの濃度と２４時間の処置時間にて、ＮＡＣアミドは対照グループに比べてＰＣ１２細胞のＧＳＨ濃度を２倍上昇させた。興味深いことに、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞をＮＡＣアミドとともに培養すると、同様の結果が得られた（データ示さず）。
【０１９６】
ＧＳＨの細胞内濃度を１０ｍＭグルタミン酸とともに２４時間培養したＰＣ１２細胞で測定し、ＮＡＣアミドの影響を分析した。ＮＡＣアミドを用いた細胞の処理は、グルタミン酸処理後に通常発生する細胞ＧＳＨ濃度の著しい減少を防いだ（表１）。ブチオニンスルホキシイミン（ＢＳＯ）がγ−ＧＣＳ活性を抑制し、これにより細胞内ＧＳＨの減少の原因となる一方で、グルタミン酸はシスチンの取り込みを抑制し、細胞ＧＳＨの損失をもたらす。ＮＡＣアミドによる細胞内ＧＳＨの上昇がγ−ＧＣＳ依存性かどうかを決定するため、細胞を０．２ｍＭＢＳＯで処理した。グルタミン酸とＢＳＯの同時処理は細胞ＧＳＨをほぼ検出不能な濃度にまで減少させた（表１）。興味深いことに、ＧＳＨ合成停止細胞においては、ＮＡＣアミド処理は効果的であり、細胞のＧＳＨ濃度の５６％を維持した。ＮＡＣアミドはさらに細胞内過酸化物蓄積から細胞を保護した。マロンジアルデヒド（ＭＤＡ）は、脂質に対するフリーラジカルの攻撃の副産物である。ＭＤＡ濃度の著しい上昇が、対応する対照細胞と比べてグルタミン酸曝露細胞に認められた（表２）。ＮＡＣアミドでの処理はＭＤＡ濃度を低下させることにより、グルタミン酸毒性から細胞を完全に保護した。
【０１９７】
表２：グルタミン酸曝露ＰＣ１２細胞のＭＤＡ濃度に対するＮＡＣアミドの効果
【０１９８】
【表２】

細胞を接種し２４時間培養した後、それらをＮＡＣアミド（７５０μＭ）の存在下、または非存在下でグルタミン酸（１０ｍＭ）に曝露した。２４時間後、細胞を採取し、マロンジアルデヒド濃度を測定した。数値は平均値±ＳＤを示す。対照と比べて統計的な差の値を^＊Ｐ＜０．００２と^＊＊Ｐ＜０．０５と決定した。グルタミン酸処置グループと比較して^＊＊＊Ｐ＜０．０５。
【０１９９】
本実施例では、細胞内ＧＳＨ濃度、ＭＤＡ濃度、ＬＤＨ活性における各種の潜在的な有害な変化によって、高濃度のグルタミン酸誘発酸化毒性が特徴付けられ、ＰＣ１２細胞生存率の低下をもたらすことが見出された。ＮＡＣアミドでの処理は細胞内ＧＳＨを上昇させ、ＭＤＡ濃度を低下させ、これによりグルタミン酸誘発細胞毒性を軽減した。ＬＤＨおよびＭＴＳアッセイにより評価を行った。グルタミン酸細胞毒性は、グルタミン酸受容体の活性化を通じた興奮作用か、ＧＳＨ濃度の減少につながるシスチンの取り込みの抑制のいずれかに起因するとされてきた。ＰＣ１２細胞はＮＭＤＡ受容体を発現するが、ＮＭＤＡがＰＣ１２細胞死に影響を与えないことから、グルタミン酸によって示される毒性は単にこれらの受容体の存在に関わっているわけではない。高濃度のグルタミン酸による細胞内酸化還元ホメオスタシスの崩壊は、ｉｎ ｖｉｖｏでの細胞傷害の原因となる主要メカニズムであると考えられている。例えば脳虚血などの条件下では、細胞外グルタミン酸濃度は対照に比べて８００％上昇し、これはシスチンの取り込みを阻害することにより脳ＧＳＨ濃度を低下させる。ＧＳＨは抗酸化物質防御と酸化還元調節に重要な役割を果たす。ＧＳＨの欠乏は、各種の神経変性疾患に関連付けられている。細胞内ＧＳＨ濃度をＸｃシステムおよびＡＳＣシステムによって測定した。ＡＳＣシステムがシスチンの細胞輸送を仲介するＮａ＋依存性中性アミノ酸トランスポーターであるのに対して、Ｘｃシステムは細胞内でグルタミン酸と交換にシスチンを輸送する。続く取り込みでは、細胞内グルタチオン合成のためにシスチンはシステインに還元される。しかし、グルタミン酸濃度の上昇はシスチンの取り込みを阻害し、結果として細胞が利用できるシステインを制限し、ＧＳＨ減少に導く。
【０２００】
本実施例では、ＰＣ１２細胞のグルタミン酸との培養は、対照グループと比べて、ＧＳＨの減少（表１）とシステイン濃度の減少（図４）をもたらした。システイン濃度の減少は、過剰なグルタミン酸の存在がシスチンの取り込みを抑制し、これがＧＳＨ濃度の減少を導いたことを示す。ＮＡＣアミド処理は、対照グループに比べてＧＳＨ（表１）およびシステイン濃度（図５）を上昇することができ、グルタミン酸の抑制作用を効果的に逆転させた。ＧＳＨおよびシステイン濃度の上昇は、ＮＡＣアミドがマウスに投与された３０分後にも認められた。ＮＡＣアミドがシステインの供給を促進することに関する考えられるメカニズムは、細胞内部に容易に到達することと、システインを形成するために脱アセチル化物になることによるかもしれない。ＮＡＣアミドがＧＳＨ合成停止細胞内のＧＳＨ濃度を回復することができるかどうかを理解するために、ＰＣ１２細胞をＮＡＣアミド（７５０μＭ）の存在下でグルタミン酸（１０ｍＭ）に加えてＢＳＯ（０．２ｍＭ）とともに培養した。結果はＢＳＯの存在下でＮＡＣアミドが細胞内ＧＳＨ濃度を上昇させたことを示し、効果がγ−ＧＣＳ依存性であることを示唆していた。従って、ＮＡＣアミド自体はＧＳＨ合成のためのスルフヒドリル基供与体として働くかもしれない。
【０２０１】
要約すると、実施例１はＮＡＣアミドがグルタミン酸誘発性の細胞ＧＳＨの損失の阻止と過酸化脂質の抑制によって、ＰＣ１２細胞をグルタミン酸誘発細胞毒性から保護することを示す。これらの研究はまた、ＧＳＨ合成停止細胞におけるＮＡＣアミドによるＧＳＨ合成の回復がγ−ＧＣＳ依存性であることを示す。理論に縛られることを願うことなく、ＮＡＣアミドがＧＳＨを増加することができる、考えられるメカニズムは１）律速基質システインを細胞に供給することと、２）非酵素的チオール・ジスルフィド交換によってＧＳＳＧをＧＳＨに還元することである。酸化ストレスが関与していると思われるグルタミン酸誘発細胞毒性に対するＮＡＣアミドの保護作用を考慮すると、ＮＡＣアミドは脳の特定の部位においてＧＳＨ濃度が減少している脳虚血やパーキンソン病などの神経変性障害の処置において役割を果たすことができる。
【０２０２】
（実施例２）
本実施例はＮＡＣアミドの放射線防護効果を試験する。放射線暴露に対するＮＡＣアミドの保護作用を評価するために、ＧＳＨ濃度の上昇と酸化ストレスパラメータのそれらの対照値への回復に関してＮＡＣアミドの放射線防護作用をＮＡＣのそれと比較した。
【０２０３】
動物試験： ラットの放射線照射をＲｏｌｌａ、ＭｉｓｓｏｕｒｉにあるＰｈｅｌｐｓ Ｃｏｕｎｔｙ Ｒｅｇｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ ＣｅｎｔｅｒのＲａｄｉａｔｉｏｎ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔにてＶａｒｉａｎ ｌｉｎｅａｒ ａｃｃｅｌｅｒａｔｏｒ、Ｃｌｉｎａｃ１８００モデルにより生成した１６ＭｅＶビームを用いて人道的動物実験プロトコルの基準に従って行った。２０ｘ２０または２５ｘ２５ｃｍ域を使用し、出力率は週に一度チェックした。１２匹の動物を、１グループ３匹ずつの４グループに分けた（対照、ＸＲＴ、ＮＡＣアミド＋ＸＲＴおよびＮＡＣ＋ＸＲＴ）。放射線（ＸＲＴ）対照には１６ＭｅＶ電子の６Ｇｙによって全身照射を行った。ＮＡＣアミド＋ＸＲＴグループには、５００ｍｇ／ｋｇ／日のＮＡＣアミドを照射の直前と殺処分までの照射後３日間与えた。ラットは麻酔し、ヘパリン添加血液を心臓穿刺術を通じて採取した。殺処分に続いて、肝臓、肺、脳、および脾臓を摘出し、ホモジナイズまで−７０℃で保存した。
【０２０４】
全ての実験は、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｃ．（Ｐｏｒｔａｇｅ、ＭＩ）より購入した体重約２５０ｇアルビノＳＡＳＣＯ Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙの成体雌ラットを用いて行った。１２匹のラットは紙箱に入れて輸送された（各箱に４匹ずつ）。ラットは血清学的、細菌学的、病理学的、寄生虫学的情報を含む証明書とともに届けられた。ラットは４つのケージに分けられ（各ケージに３匹ずつ）、１２時間の明暗サイクルを維持するように装備された恒温室（２０℃）に入れられた。標準ラット食（Ｐｕｒｉｎａ ｒａｔ ｃｈｏｗ）と水道水を個々のガラス瓶に供給し、無制限に与えた。水は毎日交換した。動物の体重はＮＡＣアミド処置溶液を与える前に量り、ＮＡＣアミドは経口的に与えたが飲料水または餌の中には入れなかったため、摂取した餌の量と消費した水は測定しなかった。
【０２０５】
ＮＡＣアミドは、分析証明書とＭＳＤＳ（ロット番号４０２３３−６４）を含めてＮｏｖｅｔｉｄｅ Ｌｔｄ（Ｈａｉｆａ Ｂａｙ、イスラエル）から提供された。ＮＡＣアミド給餌溶液は、１．２５ｇのＮＡＣアミド固体試料を秤量し、（ＨＲ−１２０型電子てんびん、Ａ＆Ｄ Ｃｏｍｐａｎｙ ｌｉｍｉｔｅｄ、日本。Ｓ／Ｎ：１２２０２４６４）、１０ｍｌ ＰＢＳ溶液に添加して投与の直前に毎日に新しく調製し、氷上に静置した。この溶液の１ｍｌを動物給餌用医用針と３ｍｌ ＢＤ Ｌｕｅｒ−Ｌｏｋ Ｔｉｐシリンジを用いてラットごとに経口的に投与（胃管栄養）した。ラットには全身単回６Ｇｙ／１６ＭｅＶのＸ線照射を行い、各グループ３匹のラットを蓋付きのバケツに入れて同時に放射線を照射した。毎日同じ時間に体重１ｋｇあたり５００ｍｇのＮＡＣアミドを動物に投与した。
【０２０６】
すべての結果は全ての組織サンプルについて、タンパク質含有量の単位（ｍｇ）あたりの値に正規化された。
【０２０７】
代表的標準曲線：
−ＧＳＨ：ｙ＝８．５７５４４ｘ−４２５．０９２、Ｒ２＝０．９９９７
−ＣＹＳ：ｙ＝７．５３２９４ｘ＋１８４．３５、Ｒ２＝０．９９９５
ＧＳＨおよびＣＹＳ濃度については、２５０μＬの組織ホモジネートを７５０μＬのＮＰＭ溶液と反応させるために使用したため、全量は１０００μＬであった。
【０２０８】
一例として：
サンプルにおけるＧＳＨのピーク面積は９０８６０．２５である。ＧＳＨ濃度（ｎＭ）は標準曲線から計算される。サンプルのタンパク質含有量（ｍｇ／ｍｌ）、例えば１６．５ｍｇ／ｍｌを測定した後の、計算は以下の通りである。
［（９０８６０．２５＋４２５．０９２）／８．５７５４４ｎｍｏｌ／Ｌ］＊［１Ｌ／１０００ｍＬ］＊［１０００μＬ／２５０μＬ］／（１６．５ｍｇ／ｍｌ）＝２．５８ｎｍｏｌ ＧＳＨ／ｍｇタンパク質
−ＭＤＡ：ｙ＝２６．６８６９ｘ＋３７０．４８８、Ｒ２＝０．９９９０
ＭＤＡ濃度については、３５０μＬの組織ホモジネートを１００μＬの５００ｐｐｍ ＢＨＴ溶液と５５０μＬの１０％ＴＣＡ溶液と反応させるために使用したため、ここでの全量は１０００μＬであった。溶液全量を煮沸した後、５００μＬを取って５００μＬ ＴＢＡと反応させたので、ここでの全量もまた１０００μＬであった。
【０２０９】
一例として：
サンプルにおけるＭＤＡのピーク面積は６５２８９．２３である。ＭＤＡ濃度（ｎＭ）は標準曲線から計算される。サンプルのタンパク質含有量（ｍｇ／ｍｌ）、例えば１６．５ｍｇ／ｍｌを測定した後の、得られる計算は以下の通りである。
［（６５２８９．２３−３７０．４８８）／２６．６８６９ｎｍｏｌ／Ｌ］＊［１Ｌ／１０００ｍＬ］＊［１０００μＬ／３５０μＬ］＊［１０００μＬ／５００μＬ］／（１６．５ｍｇ／ｍｌ）＊１００＝８４．３ｎｍｏｌ ＭＤＡ／１００ｍｇタンパク質
−カタラーゼ：
比活性のための計算：
アッセイ溶液において、
ｋ（酵素活性）＝１／６０＊ｌｎ（Ａ０／Ａ６０）＊（反応液の全量／サンプルの量）
Ａ０−０秒における吸光度
Ａ６０−６０秒における吸光度
サンプル中、Ｋ（比活性）＝ｋ／タンパク質濃度である。
【０２１０】
動物における酸化ストレスパラメータ：血液サンプルを採取した後、動物を冷えた抗酸化物質緩衝液でまず灌流し、その後肝臓、脳、および腎臓試料を無菌的に採取し、氷冷生理食塩水ですすぎ、氷上に保ったシャーレの中に置いた。ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、およびＭＤＡ測定のために−７０℃に保たれた組織試料を作成した。
【０２１１】
グルタチオン（ＧＳＨ）およびグルタチオンジスルフィド（ＧＳＳＧ）測定：細胞または組織サンプルを氷上でホモジナイズし、Ｎ−（ｌ−ピレニル）−マレイミド（ＮＰＭ）で誘導体化した。誘導体化したサンプルを１ｍＬ／Ｌの酢酸およびｏ−リン酸を含む水３５％、アセトニトリル６５％の移動相を持つ逆相ＨＰＬＣシステム３μｍのＣ１８カラム（Ｃｏｌｕｍｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）に注入した（Ｒ．Ｗｉｎｔｅｒｓら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、２２７：１４−２１（１９９５）およびＨ．Ｈ．Ｄｒａｐｅｒら、Ｆｒｅｅ Ｒａｄ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．、１５：３５３−３６３（１９９３））。マロンジアルデヒド（ＭＤＡ）測定をＪ．Ｇｕｔｔｅｒｉｄｇｅ、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、６９：５１８−５２６（１９７５）に記述されるように行った。
【０２１２】
酵素活性アッセイ：カタラーゼ（ＣＡＴ）活性を分光光度法で測定し、Ｍ．Ｂｒａｄｆｏｒｄ、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、７２：２４８−２５６（１９７６）で記述されるようにκ単位／ｍｇタンパク質とκ単位／１０^６細胞で表した。
【０２１３】
統計学的分析：集計した値は平均値±標準偏差を示す。実験グループおよび対照グループから得られるデータの分析のため、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ製のＩｎＳｔａｔ（登録商標）は一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）、Ｓｔｕｄｅｎｔ−Ｎｅｗｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ Ｔｅｓｔを用いる。ｐ値＜０．０５は有意と考える。
【０２１４】
本実施例において記載される試験の結果を、以下の表に提供する。これらの表では、ＡＤ４はＮＡＣアミドと同義である。
【０２１５】
表３ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の脳内ＧＳＨおよびＣＹＳ濃度
【０２１６】
【表３】

表４ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の肝臓内ＧＳＨおよびＣＹＳ濃度
【０２１７】
【表４】

表５ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の腎臓内ＧＳＨおよびＣＹＳ濃度
【０２１８】
【表５】

表６ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の肺内ＧＳＨおよびＣＹＳ濃度
【０２１９】
【表６】

表７ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の血漿ＧＳＨおよびＣＹＳ濃度
【０２２０】
【表７】

＊ＣＴＲグループと比較してＰ＜０．０５、＊＊ＸＲＴ単独グループと比較してＰ＜０．００５、＊＊＊ＸＲＴ＋ＡＤ４処置グループと比較してＰ＜０．０５。
【０２２１】
表８ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の脳内ＭＤＡ濃度
【０２２２】
【表８】

表９ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の肝臓内ＭＤＡ濃度
【０２２３】
【表９】

表１０ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の腎臓内ＭＤＡ濃度
【０２２４】
【表１０】

表１１ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の肺内ＭＤＡ濃度
【０２２５】
【表１１】

＊ＣＴＲグループと比較してＰ＜０．０５
＊＊ＸＲＴ単独グループと比較してＰ＜０．００５
＊＊＊ＸＲＴ＋ＡＤ４処置グループと比較してＰ＜０．０５。
【０２２６】
表１２ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の腎臓内カタラーゼ活性：
【０２２７】
【表１２】

表１３ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の肺内カタラーゼ活性：
【０２２８】
【表１３】

表１４ ＡＤ４またはＮＡＣ投与（５００ｍｇ／ｋｇ経口投与）とともに６Ｇｙ全身Ｘ線照射をした後の肝臓内カタラーゼ活性。
【０２２９】
【表１４】

＊ＣＴＲグループと比較してＰ＜０．０５、＊＊ＸＲＴ単独グループと比較してＰ＜０．０５
＊＊＊ＸＲＴ＋ＡＤ４処置グループと比較してＰ＜０．０５。
【０２３０】
提示されたデータは、放射線誘発酸化ストレスにおいてＮＡＣアミドが強力なチオール抗酸化物質として働くという知見を裏付けるものである。恐らくはＮＡＣが細胞膜を越えないために、ＮＡＣは組織内ＧＳＨ濃度を上昇させない。血漿Ｃｙｓ濃度が有意に上昇したが、これは肝臓には反映されなかった。ＮＡＣは通常、ＧＳＨプールへの要求が増加した間だけＧＳＨを提供する。
【０２３１】
照射に際して、酸素が電子を受け入れるのを通じて活性酸素種が形成され、これはフリーラジカル連鎖反応に関与し、細胞の酸化促進／抗酸化バランスの崩壊を通じて細胞に対して高度な傷害を与える。正常細胞の傷害は放射線量と放射線治療の処置容積を制限する。チオールによる正常組織の放射線防護は放射線量を増加できる１つの方法を提示する。本実施例の焦点は、全ての動物で致死的な胃腸症候群および造血症状が進展することを保証するのに十分な６Ｇｙの全身放射線量を用いて、ＮＡＣアミドの放射線防護作用を検討することである。分析のために選択された時点である４日間は、動物が胃腸症候群のために死に始めるが、造血症状には初期変化のみを示すことが予想されるであろう時間に近似する。
【０２３２】
ＧＳＨはγ−グルタミル−システイニル−グリシンからなるトリペプチドであり、主要な水溶性細胞内遊離チオールであって、放射線防護物質として働く。ＧＳＨによる放射線防護のいくつかの明確なメカニズムは識別でき、これにはラジカル消去、傷害された分子への水素供与、過酸化物の低減、およびタンパク質チオール酸化状態の保護が含まれる。ＧＳＨは照射後の組織において減少することが示されている。ＧＳＨは内因性の放射線保護物質であるため、ＧＳＨ濃度の変更は放射線保護として有用かもしれない。γ−グルタミル−システイン合成に対するその明確なＫｍ値がアミノ酸の細胞内濃度に近いことから、システインはＧＳＨ合成において律速段階を提供する。しかし、システインの投与は、それが急速に自動的に酸化しヒドロキシルラジカルやチイル（ｔｈｉｙｌ）ラジカルの産生につながる可能性があるため、細胞内ＧＳＨを上昇させるのに望ましい方法ではない。
【０２３３】
ＮＡＣは粘液溶解薬でパラセタモール中毒の処置物質であるシステインアナログであり、肝臓ＧＳＨ合成を促進する。これは細胞膜を通り抜け、ＧＳＳＧ還元酵素を刺激しながらも急速に脱アセチル化されＬ−システインとなる。ＮＡＣは肝臓ＧＳＨ濃度を急速に上昇させることができ、これら濃度を少なくとも６時間維持する（Ｂ．Ｗｏｎｇら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、７５：８７８−８８０（１９８６））。ＮＡＣはまたチャイニーズハムスター卵巣細胞をＧＳＨ補充による細胞の酸化状態の回復を通じて鉛毒性およびδ−アミノレブリン酸誘発毒性から保護することが示されてきた。ＮＡＣがＣ５７ＢＬ／６マウスの肝臓と脳を鉛中毒の結果としてＧＳＨ減少から保護することが示されてきた。インドメタシン、ＷＲ−２７２１、システアミン、およびジエチルジチオカルバミン酸塩などの選ばれたチオール類は、高濃度において細胞毒性を誘発するが、その放射線保護作用が報告されている。ヒト顆粒球−マクロファージコロニー形成細胞においてＮＡＣの放射線防護作用が示されてきた。しかし、より放射線耐性のＳＷ−１５７３ヒト肺扁平上皮癌の細胞株が、ＮＡＣによるＸ線誘発性の細胞死から保護されないことも示されてきた。ＮＡＣアミドはより脂肪親和性でＮＡＣよりも容易に細胞膜を通り抜けることができる。本実施例では、ＮＡＣアミドの放射線防護機能を、ＧＳＨ濃度の上昇と酸化ストレスパラメータの対照値への回復という点からＮＡＣのそれと比較した。
【０２３４】
ヒドロキシルラジカルなどの活性酸素種への膜脂質の曝露は、多価不飽和脂肪酸部分で連鎖反応を先導する可能性があり、これは過酸化をもたらし膜機能の低下の原因となる。ＭＤＡは極めて不安定な過酸化脂質の分解産物である。本実施例で認められたように、Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットへの照射は、肝臓および肺内のＭＤＡ濃度の上昇をもたらした。ＮＡＣを用いた処理では、ＭＤＡ濃度に有意な変化がなかったのに対して、照射と共にＮＡＣアミドを用いた処理では、肺ＭＤＡ濃度は有意に減少した。
【０２３５】
複合生物体においては核酸に対してだけでなく膜脂質およびタンパク質において、いくらか潜在的に重要なＲＯＳの効果が存在することが明らかとなったが、放射線生物学の分野では放射線被ばくによる個々の細胞殺傷のメカニズムが、直接的または間接的な、特に細胞核内のＤＮＡに対するイオン化効果によるものであることが一般的に認められている。さらに、いわゆる「胃腸症候群」をモデル化した条件下における無傷動物への急激な全身照射は、消化管とは別の種々の組織における変化の原因となり、これらの作用のいくつかはＮＡＣアミドの使用により改善される。「胃腸症候群」などの特定の症候群は、複数の組織や臓器における複合的な変化を実際に伴う可能性がある。放射線肺炎は、肺癌を持つ患者への治療照射において重大な危険となりうる。ＮＡＣアミドはそのような合併症から保護するためのチオール放射線防護物質としての使用を考慮されるかもしれない。従って、本発明に基づき、ＮＡＣアミドは血漿および肝臓内のチオール濃度を有意に上昇させ、ＮＡＣよりも放射線防護剤としてより良く機能する。
【０２３６】
（実施例３）
本実施例では、ヒトに適した処置レジメンを記述する。ＮＡＣアミドを、一日に１〜３ｇの間の量を２回に分けて、食間に（空腹時に）投与する。カプセル化されたＮＡＣアミド（５００ｍｇのＮＡＣアミドと、必要に応じて２５０ｍｇのＵＳＰグレード結晶アスコルビン酸、０．９ｍｇを超えないステアリン酸マグネシウム、ＮＦグレードをＯＯ型ゼラチンカプセルに含有するＮＡＣアミド処方物）が投与に適している。外因性ＮＡＣアミドの投与は、人体における多量のグルタチオンの産生にも関わらず、用量反応効果を患者にもたらすことが予想される。
【０２３７】
（実施例４）
本実施例では、代謝の間に肝臓でグルタチオンを消費し、また過剰用量では、酸化的損傷による肝臓障害の原因となる薬剤である、アセトアミノフェンの有害な作用を改善するための組合せ薬学的組成物について記述する。この組成物は、５００ｍｇのＮＡＣアミド、２５０ｍｇの結晶アスコルビン酸、および３５０ｍｇのアセトアミノフェンを含有する。
【０２３８】
（実施例５）
本実施例では、過剰なフリーラジカル反応に関連している可能性がある遅発性ジスキネジーなどの副作用の原因となるフェノチアジン系薬剤である、クロルプロマジンの有害な作用を改善するための組合せ薬学的組成物について記述する。この組成物は、５００ｍｇのＮＡＣアミド、２５０ｍｇの結晶アスコルビン酸、および２００ｍｇのクロルプロマジンを含有する。
【０２３９】
（実施例６）
本実施例では、各種の毒性に関連があるかもしれない薬剤クラスであるアミノグリコシド系薬剤（抗生物質）の有害な作用を改善するための組合せ薬学的組成物について記述し、これらの例としてはネオマイシン、カナマイシン、アミカシン、ストレプトマイシン、ゲンタマイシン、シソミシン、ネチルミシン、およびトブラマイシンなどを含むがこれに限定されるものではない。この傷害は酸化的損傷または代謝中のグルタチオンの消費に関連があるかもしれない。本発明に基づく組成物は、静脈内処方物であり、有効量のアミノグリコシドや約１０−２０ｍｇ／ｋｇ量のＮＡＣアミドが含まれる。５−１０ｍｇ／ｋｇ量のアスコルビン酸が安定剤として添加されるかもしれない。
【０２４０】
（実施例７）
本実施例では、ＮＡＣアミドを含む尿道挿入を記述する。単位用量につき２００ｍｇのＮＡＣアミド、５０ｍｇのアスコルビン酸を含む組成物を、カラゲナンおよび／またはアガロースと水と急速ゲル化組成物にて混合し、直径約３ｍｍ、長さ約３０ｍｍの円筒状型にゲル化させる。組成物を、０．１〜１０％の間のＮＡＣアミドをニトロソＮＡＣアミドに変換するために、一酸化窒素に曝露する。その後ゲル化したアガロースを、縮小を可能にする条件下で凍結乾燥する。凍結乾燥したゲルを、ホイルパウチまたはホイルの「気泡パック（ｂｕｂｂｌｅ−ｐａｃｋ）」などの気体遮断パッケージに詰める。その後、凍結乾燥したゲルは、経粘膜的投与のためのニトロソＮＡＣアミドの供給源として用いられるかもしれない。円筒型の凍結乾燥されたゲルは、性不能症の処置のために男性の尿道に挿入されるか、または全身性の血管拡張のために舌下に投与されるかもしれない。
【０２４１】
（実施例８）
本実施例では、例えば４０歳を越えた男性における血管疾患の予防のための経口処方物を記述する。この組成物は、５００ｍｇのＮＡＣアミド、２５０ｍｇのＵＳＰグレード結晶アスコルビン酸、および５０ｍｇのＵＳＰグレードアセチルサリチル酸（アスピリン）をＯＯ型ゼラチンカプセルに含有する。典型的な投与は、一日２回である。アセチルサリチル酸は、放出を遅らせるために、カプセルに入った腸溶性放出ペレット剤で提供されるかもしれない。
【０２４２】
（実施例９）
本実施例は、血管疾患の予防のための経口処方物を記述する。この組成物は、５００ｍｇのＮＡＣアミド、２００ｍｇのＵＳＰグレード結晶アスコルビン酸、および２００ｍｇのアルギニンをＯＯ型ゼラチンカプセルに含有する。アルギニンは、一酸化窒素産生の通常の開始物質である。アルギニンは、通常限られた供給状態にあるため、アルギニンの相対的な欠乏は、血管内皮機能の障害をもたらすかもしれない。
【０２４３】
（実施例１０）
本実施例は、血管疾患の予防のための経口処方物を記述する。この組成物は、５００ｍｇのＮＡＣアミド、２００ｍｇのＵＳＰグレード結晶アスコルビン酸、および２００ｍｇのビタミンＥコハク酸塩をＯＯ型ゼラチンカプセルに含有する。ビタミンＥの消費は、心臓発作やその他の血管疾患のリスクを低下させる。ビタミンＥコハク酸塩（α−コハク酸トコフェロール）は乾燥粉末である。
【０２４４】
（実施例１１）
本実施例は、血管疾患の予防のための経口処方物を記述する。広範な基質特異性を持つ非特異性エステラーゼが血漿中に存在する。本発明に従って、エステルは、効率的な投与、高いバイオアベイラビリティ、薬学的な安定性を提供するのに有用な併用療法である薬剤の間で形成される。好ましいエステル類には、α−トコフェロール−アスコルビン酸塩、α−トコフェロール−サリチル酸塩、およびアスコルビル酸−サリチル酸塩が含まれる。トコフェロールエステルは、分子を還元状態に保ち、エステル開裂後の最大の抗酸化能を可能にする。これらのエステルは単独で投与されるか、またはＮＡＣアミドなどの他の薬剤との組み合わせで投与されるかもしれない。代表的に、炎症性疾患の予防に対しては一日につき１００ｍｇ相当、または処置に対しては１用量あたり７５０〜１０００ｍｇ相当の有効量のサリチル酸塩を送達するためにエステル類が投与される。トコフェロールは、１００〜５００ＩＵ相当の量で投与される。アスコルビン酸塩は、１０００ｍｇ相当までの量で投与される。アベイラビリティを高めるために、非特異性エステラーゼはカプセルの溶解後にエステルを開裂するための処方物で提供されるかもしれない。従って、細菌酵素またはサッカロミセス（酵母）酵素、または濃縮酵素製剤などの非特異性エステラーゼは、カプセルに入った粉末剤またはペレット剤として処方物に含有されるかもしれない。
【０２４５】
（実施例１２）
本実施例は、血管疾患の予防のための経口処方物を記述する。この組成物は、５００ｍｇの還元型ＮＡＣアミド、２００ｍｇのＵＳＰグレード結晶アスコルビン酸、および１００ｍｇのノルジヒドログアイアレチン酸をＯＯ型ゼラチンカプセルに含有する。典型的な投与は一日２回である。ノルジヒドログアイアレチン酸は良く知られたリポキシゲナーゼ阻害剤である。従って、この組成物は、炎症過程の処置、または血管疾患の予防に用いられるかもしれない。
【０２４６】
（実施例１３）
本実施例では、ＮＡＣまたはＮＡＣアミド（ＴＯＶＡ）の存在下または非存在下でＸ線の全身単回照射（ＸＲＴ）を受けたラットの生存率を観察する試験について記述する。この実験では、体重約１５０〜２００ｇの範囲の３９匹の雌Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを全身単回Ｘ線照射（９Ｇｙ、１６Ｍｅｖ）に曝露した。同グループはＮＡＣまたはＴＯＶＡのいずれかを受けるように指定された。前処理グループ（各グループｎ＝６）については、ＮＡＣまたはＴＯＶＡの最初の処置を照射の３０分から１時間前に施した。後処理グループ（各グループｎ＝６）については、ＮＡＣまたはＴＯＶＡの最初の処置を照射の３０分から１時間後に施した。ＮＡＣまたはＴＯＶＡを投与されるグループについては、同量（５００ｍｇ／ｋｇのＮＡＣまたはＴＯＶＡを毎日）を４または５日連続で施した。
【０２４７】
グループ１は、対照グループ（ｎ＝３）であり、ここではＸＲＴなしでラットに毎日同量の生理食塩水を５日連続で与えた。グループ２のラット（ｎ＝３）には、ＸＲＴなしで毎日５００ｍｇ／ｋｇ体重のＮＡＣ量で、ＮＡＣのみを５日連続で与えた。グループ３のラット（ｎ＝３）には、ＸＲＴなしで毎日５００ｍｇ／ｋｇ体重のＴＯＶＡ量で、ＴＯＶＡのみを５日連続で与えた。グループ４のラット（ｎ＝６）には放射線（ＸＲＴ）のみ与え、全身単回ＸＲＴ照射の後に毎日同量の生理食塩水を５日連続で与えた。
【０２４８】
グループ５のラットには、ＸＲＴの前に、５００ｍｇ／ｋｇ体重のＮＡＣ処置を一度与え（ＸＲＴ＋ＮＡＣ前処理）、その後ＸＲＴ後に毎日５００ｍｇ／ｋｇ体重のＮＡＣを４日連続投与した。グループ６のラットには、ＸＲＴを与え、その後ＸＲＴ後に１日量５００ｍｇ／ｋｇ体重のＮＡＣを５日連続投与した（ＸＲＴ＋ＮＡＣ後処理）。グループ７のラットには、ＸＲＴの前に５００ｍｇ／ｋｇ体重のＮＡＣ処置を一度与え（ＸＲＴ＋ＴＯＶＡ前処理）、その後ＸＲＴ後に毎日５００ｍｇ／ｋｇ体重のＴＯＶＡを４日連続投与した。グループ８のラットにはＸＲＴを与え、その後ＸＲＴ後に１日量５００ｍｇ／ｋｇ体重のＴＯＶＡを５日連続投与した（ＸＲＴ＋ＴＯＶＡ後処理）。その後全てのラットに、処置後、通常給餌を与えた。
【０２４９】
ラットを一日に２回観察し、各グループ内のラットの生存状況を記録する。実験の最後に平均生存日数を各グループについて計算し、３グループのラットの生存率の差異と比較した。その後、以下の表に示すように、照射を受けたラットの生存率に関するＮＡＣおよびＴＯＶＡ処置の放射線防護作用を評価した。
【０２５０】
表１５は、ＮＡＣまたはＴＯＶＡをＸＲＴ処置の前後に投与した条件下で生存した動物の数を示す。
【０２５１】
【表１５】

表１６ ＸＲＴ処置前後にＮＡＣまたはＴＯＶＡを受けたラットの生存率（％）を示す。
【０２５２】
【表１６】

図６は、表１６に示される生存率（％）を比較するグラフ表示である。これらの結果は、ＸＲＴ前にＮＡＣまたはＴＯＶＡで前処理を受けたラットが、ＸＲＴを単独で受けたラットよりも高い生存率を持つことを示す。
【０２５３】
本明細書に引用する全ての特許出願、公開された出願、特許、文章、参考文献は、参照としてその全体が本明細書に援用される。
【０２５４】
記載した本発明の精神と範囲から逸脱することなく、上記の方法や組成物において各種の変更が行えるように、上記の説明に含まれる、添付図面に示される、または添付の請求項で定義される全ての対象物が限定的な意義ではなく実例として解釈されることを意図するものである。
【図面の簡単な説明】
【０２５５】
【図１】図１Ａは、Nアセチルシステインの構造を示す図である。図１Ｂは、アセチルシステインアミド（ＮＡＣアミド）の構造を示す図である。
【図２】図２Ａ〜２Ｄは、グルタミン酸に対するＰＣ１２細胞の細胞傷害反応およびＮＡＣアミドによる保護を示す図である。ＰＣ１２細胞を、２４穴のウエルプレートに２５×１０^３細胞／ウェル濃度でプレート固定し、培地で２４時間培養した。実施例１に記載の通り、ＮＡＣアミド有りまたは無しで、１０ｍＭ Ｇｌｕにより処理あるいは処理されなかった（対照）。２４時間後、細胞は、分析され、撮影された。図２Ａは対照、図２ＢはＮＡＣアミドのみ（ＮＡＣＡ）、図２Ｃは、グルタミン酸のみ、図２Ｄはグルタミン酸およびＮＡＣＡの図である。
【図３】図３は、グルタミン酸細胞毒性に対するＮＡＣアミドの保護効果を示す図である。細胞をプレート固定し、培地で２４時間培養した。その後ＮＡＣアミド有りまたは無しで、１０ｍＭ Ｇｌｕにより処理あるいは処理されなかった（対照）。２４時間後、ＬＤＨ放出％は、ＬＤＨ分析を用いて決定された。数値は平均値±ＳＤを示す。対照と比較して統計的な差の値を^＊Ｐ＜０．０００１および^＊＊Ｐ＜０．０５と決定した。グルタミン酸処理群と比較して^＊＊＊Ｐ＜０．０００１と決定した。
【図４】図４は、グルタミン酸誘発細胞毒性に対するＮＡＣアミドの効果を示す図である。細胞を、２４時間、ＮＡＣアミド有りまたは無しで、１０ｍＭ ＧＩｕに暴露し、効果を対照と比較した。細胞生存率は、ＭＴＳアッセイにより定量された。数値は平均値±ＳＤを示す。対照と比較して統計的な差の値を^＊Ｐ＜０．０００５および^＊＊Ｐ＜０．０５と決定した。グルタミン酸処理群と比較して^＊＊＊Ｐ＜０．０５と決定した。
【図５】図５は、ＰＣ１２細胞内のシステインに対するＮＡＣアミド（ＮＡＣアミド）の効果を示す図である。細胞をプレート固定し、２４時間培養し、ＮＡＣアミド（７５０μＭ）が存在下または非存在下で、グルタミン酸（１０ｍＭ）に暴露した。２４時間後、細胞は採取され、システインレベルが測定された。数値は平均値±ＳＤを示す。対照と比較して統計的な差の値を^＊Ｐ＜０．００５と^＊＊Ｐ＜０．０５と決定した。グルタミン酸処理群と比較して^＊＊＊Ｐ＜０．０５と決定した。
【図６】図６は、処置前または処置後でＮＡＣあるいはＮＡＣアミド（ＴＯＶＡ）と組合わせるＸ線照射処置後のＳＤラットの生存率の比較を示すグラフである。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞および組織において酸化物質の過剰生産を抑制するために、グルタチオン濃度を増やすための薬学的組成物であって、Ｎ−アセチルシステインアミド（ＮＡＣアミド）、またはその薬学的に許容される塩、エステル、または誘導体を含む、薬学的組成物。
【請求項２】
生命体の細胞および組織において抗酸化物質の濃度を増やすための方法であって、抗酸化物質の濃度を増やすのに有効な量のＮＡＣアミドを前記生命体に投与する工程を含む、方法。
【請求項３】
前記生命体は、酸化物質の過剰生産に関連する病状、疾患、疾病、または病変を患うヒトである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記病状、疾患、疾病または病変は、ＡＩＤＳ、糖尿病、黄斑変性、うっ血性心不全、循環器疾患、冠動脈再狭窄、肺疾患、炎症性疾患、喘息、ＲＮＡウイルス感染、ＤＮＡウイルス感染、敗血症、敗血症、骨粗しょう症、骨疾患、微生物による感染、毒物暴露、放射線被ばく、熱傷、プリオン病、神経系疾患、血液疾患、血液細胞疾患、動脈疾患および筋肉疾患で構成される群から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記病状、疾患、疾病、または病変はマラリアである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記病状、疾患、疾病、または病変は結核である、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記血液疾患は鎌状赤血球貧血である、請求項４に記載の方法。
【請求項８】
生命体を放射線誘発性の酸化ストレスから保護する方法であって、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体の放射線防護のための量を前記生命体に投与する工程を含む方法。
【請求項９】
５００ｍｇ／ｋｇの量のＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を経口投与する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
生命体でのチオール抗酸化物質の濃度を増やす方法であって、チオール抗酸化物質の濃度を増やすために有効な量のＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を前記生命体に投与する工程を含む方法。
【請求項１１】
前記チオール抗酸化物質は、グルタチオンまたはシステインである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記チオール抗酸化物質の濃度は、肝臓および血漿で増える、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
５００ｍｇ／ｋｇの量でＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を経口投与する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
感染宿主の細胞でのバクテリアを殺傷またはその増殖を抑制する方法であって、
前記宿主の白血球でのＨＩＦ−１またはＨＩＦ−１αの生成を誘発するのに有効な量のＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を提供し、それにより前記微生物を殺傷またはその増殖を抑制するために前記白血球の能力を向上させる工程を含む、方法。
【請求項１５】
メタロプロテイナーゼ活性に関連するＲａｃ１ｂ−誘発性ＲＯＳ生成の効果を妨げる方法であって、
ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を、それを必要とする細胞、組織、および／または被検体に投与または導入し、それにより組織損傷および劣化を引き起こす前記経路での分子を標的にする工程を含む、方法。
【請求項１６】
Ｒａｃ１ｂ−誘発性ＲＯＳ生成でのＭＭＰ−３メタロプロテイナーゼの効果を妨げる、または抑制する方法であって、
組織損傷および劣化を引き起こすＭＭＰ−３の前記活性を妨げるまたは抑制するために、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を、それを必要とする細胞、組織、および／または被検体に投与または導入する工程を含む、方法。
【請求項１７】
サイトカインおよび造血因子の内因性生成を刺激する方法であって、
所定の望ましい治療上の効果を得るよう、前記内因性生成を刺激するために、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を、それを必要とする細胞、組織、および／または被検体に一定期間投与または導入する工程を含む、方法。
【請求項１８】
細胞、組織、および／また被検体での遺伝子発現におけるＮＡＣアミド応答変化を検出する方法であって、
遺伝子発現における変化を誘発するために、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を、細胞、組織、および／または被検体に一定期間投与または導入する工程と、遺伝子発現における変化を検出する工程を含む、方法。
【請求項１９】
前記細胞は内皮細胞である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記組織は血管組織である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
遺伝子発現における前記変化は、マイクロアレイ解析、ＲＴ−ＰＣＲ、ノーザンブロット法、免疫蛍光測定法、免疫ブロット法、または酸素免疫測定法によって検出される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
ナノ粒子に結合されるＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を投与または提供する工程を含む、請求項２、１０、１４、１５、１６、１７、または１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
リガンドのための高濃度の表面受容体を発現する宿主細胞に対する、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体の方向をもった送達の方法であって、
ａ）ＮＡＣアミドリガンド結合体を形成するために、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体を前記表面受容体リガンドに結合させる工程と、
ｂ）前記ＮＡＣアミドリガンド結合体をナノ粒子に吸着させる工程と、
ｃ）工程（ｂ）の前記ナノ粒子を前記宿主に導入する工程と、
を含む方法。
【請求項２４】
リガンドのための高濃度の表面受容体を発現する宿主細胞に対する、ＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体の方向をもった送達の方法であって、
ａ）アセチル化樹枝状ナノポリマーをリガンドに結合体化させる工程と、
ｂ）ＮＡＣアミドリガンドナノ粒子を形成するために、工程（ａ）の前記結合体化リガンドをＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミドの誘導体に結合させる工程と、
ｃ）工程（ｂ）の前記ナノ粒子を前記宿主に導入する工程を含む、方法。
【請求項２５】
前記リガンドは葉酸またはグルタチオンである、請求項２３または請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記ナノ粒子はＰＡＭＡＭ樹枝状ポリマーである、請求項２３または請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
式Ｉ
【化１】

の化合物であって、
式中、Ｒ_１はＯＨ、ＳＨ、またはＳ−Ｓ−Ｚ；
ＸはＣまたはＮ；
ＹはＮＨ_２、ＯＨ、ＣＨ_３−Ｃ＝Ｏ、またはＮＨ−ＣＨ_３；
Ｒ_２は存在しないか、Ｈ、または＝Ｏ
Ｒ_３は存在しないか、または
【化２】

であり、
ここで、Ｒ_４はＮＨまたはＯ；
Ｒ_５は、ＣＦ_３、ＮＨ_２、またはＣＨ_３であり
そして、Ｚは
【化３】

であり、
ただしＲ_１がＳ−Ｓ−Ｚの場合は、ＸおよびＸ’は同一、ＹおよびＹ’は同一、Ｒ_２およびＲ_６は同一、ならびにＲ_３およびＲ_７は同一である、化合物。
【請求項２８】
Ｒ_１はＳ、ＸはＣ、ＹはＮＨ_２、Ｒ_２は＝Ｏ、Ｒ_３は
【化４】

Ｒ_４はＯ、およびＲ_５はＣＨ_３である、請求項２７に記載の化合物。
【請求項２９】
前記化合物はキラルであり、またＤ−異性体、Ｌ−異性体、ならびにＤ−およびＬ−異性体のラセミ混合物で構成される群から選択される、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３０】
Ｒ_１はＳ、ＸはＣ、ＹはＮＨ−ＣＨ_３、Ｒ_２はＨ、Ｒ_３は
【化５】

Ｒ_４はＯ、およびＲ_５はＣＨ_３である、請求項２７に記載の化合物。
【請求項３１】
前記化合物はキラルであり、そしてＤ−異性体、Ｌ−異性体、ならびにＤ−およびＬ−異性体のラセミ混合物で構成される群から選択される、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｒ_１はＳ、ＸはＮ、ＹはＣＨ_３−Ｃ＝Ｏ、Ｒ_２はＨ、およびＲ_３は存在しない、請求項２７に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｒ_１はＳ、ＸはＣ、ＹはＮＨ_２、Ｒ_２は＝Ｏ、Ｒ_３は
【化６】

Ｒ_４はＯ、およびＲ_５はＣＦ_３である、請求項２７に記載の化合物。
【請求項３４】
前記化合物はキラルであり、そしてＤ−異性体、Ｌ−異性体、ならびにＤ−およびＬ−異性体のラセミ混合物で構成される群から選択される、請求項３３に記載の化合物。
【請求項３５】
Ｒ_１はＯ、ＸはＣ、ＹはＮＨ_２、Ｒ_２は＝Ｏ、Ｒ_３は
【化７】

Ｒ_４はＯ、およびＲ_５はＣＨ_３である、請求項２７に記載の化合物。
【請求項３６】
前記化合物はキラルであり、そしてＤ−異性体、Ｌ−異性体、ならびにＤ−およびＬ−異性体のラセミ混合物で構成される群から選択される、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
Ｒ_１はＳ、ＸはＣ、ＹはＯＨ、Ｒ_２は存在しない、Ｒ_３は
【化８】

Ｒ_４はＯ、およびＲ_５はＣＨ_３である、請求項２７に記載の化合物。
【請求項３８】
前記化合物はキラルであり、そしてＤ−異性体、Ｌ−異性体、ならびにＤ−およびＬ−異性体のラセミ混合物で構成される群から選択される、請求項３７に記載の化合物。
【請求項３９】
Ｒ_１はＳ、ＸはＣ、ＹはＮＨ_２、Ｒ_２は＝Ｏ、Ｒ_３は
【化９】

Ｒ_４はＮＨ、およびＲ_５はＮＨ_２である、請求項２７に記載の化合物。
【請求項４０】
前記化合物はキラルであり、そしてＤ−異性体、Ｌ−異性体、ならびにＤ−およびＬ−異性体のラセミ混合物で構成される群から選択される、請求項３９に記載の化合物。
【請求項４１】
Ｒ_１はＯ、ＸはＣ、ＹはＯＨ、Ｒ_２は存在しない、Ｒ_３は
【化１０】

Ｒ_４はＯ、およびＲ_５はＣＨ_３である、請求項２７に記載の化合物。
【請求項４２】
前記化合物はキラルであり、そしてＤ−異性体、Ｌ−異性体、ならびにＤ−およびＬ−異性体のラセミ混合物で構成される群から選択される、請求項４１に記載の化合物。
【請求項４３】
Ｒ_１はＳ−Ｓ−Ｚ、ＸはＣ、ＹはＮＨ_２、Ｒ_２は＝Ｏ、Ｒ_３は
【化１１】

Ｒ_４はＯ、およびＲ_５はＣＨ_３である、請求項２７に記載の化合物。
【請求項４４】
前記化合物はキラルであり、そしてＤ−異性体、Ｌ−異性体、ならびにＤ−およびＬ−異性体のラセミ混合物で構成される群から選択される、請求項４３に記載の化合物。
【請求項４５】
（ａ）第１の混合物を生成するために、塩基をＬ−シスチンジアミドジヒドロクロライドに加え、その後真空下で前記第１の混合物を加熱する工程；
（ｂ）メタノール溶液を前記加熱した第１の混合物に加える工程；
（ｃ）第１の残渣を得るために、前記混合物を塩酸アルコールで酸性にする工程；
（ｄ）前記第１の残渣を、アンモニアで飽和したメタノールを含む第１の溶液に溶解させる工程；
（ｅ）第２の混合物を生成するために、第２の溶液を前記溶解した第１の残渣に加える工程；
（ｆ）前記第２の混合物を沈殿させて、洗浄する工程；
（ｇ）第２の残渣を得るために、前記第２の混合物をろ過し、乾燥させる工程と；
（ｈ）第３の混合物を生成するために、前記第２の残渣と液体アンモニアおよび塩化アンモニウムのエタノール溶液を混合する工程；および
（ｉ）前記第３の混合物をろ過し、乾燥させ、それにより前記Ｌ−異性体化合物を調製する工程を含む、請求項２７の前記化合物のＬ−異性体を調製するプロセス。
【請求項４６】
前記塩基は、液体アンモニアまたはメチルアミンを含む、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項４７】
前記第２の溶液は、水、酢酸塩、および無水物を含む、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項４８】
前記酢酸塩は、酢酸ナトリウムまたはトリフルオロ酢酸ナトリウムを含む、請求項４７に記載のプロセス。
【請求項４９】
前記無水物は、無水酢酸または無水トリフルオロ酢酸を含む、請求項４７に記載のプロセス。
【請求項５０】
前記第２の溶液は、ジクロロメタン、トリエチルアミン、および１，３−ビス（ベンジルオキシカルボニル）−２−メチル−２−チオプソイドウレアを含む、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項５１】
工程（ｈ）は、ナトリウム金属の存在下で、前記第２の残渣を混合する工程をさらに含む、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項５２】
（ｊ）エーテルに前記Ｌ−異性体化合物を溶解させる工程；
（ｋ）第４の混合物を生成するために、水素化アルミニウムリチウム、酢酸エチル、および水のエーテル溶液を前記溶解したＬ−異性体化合物に加える工程；および
（ｌ）前記第４の混合物をろ過し、乾燥させ、それにより前記Ｌ−異性体化合物を調製する工程をさらに含む、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項５３】
（ａ）第１の混合物を生成するために、塩基をＤ−シスチンジアミドジヒドロクロライドに加え、その後真空下で前記第１の混合物を加熱する工程；
（ｂ）メタノール溶液を前記加熱した第１の混合物に加える工程；
（ｃ）第１の残渣を得るために、前記混合物を塩酸アルコールで酸性にする工程；
（ｄ）前記第１の残渣を、アンモニアで飽和したメタノールを含む第１の溶液に溶解させる工程；
（ｅ）第２の混合物を生成するために、第２の溶液を前記溶解した第１の残渣に加える工程；
（ｆ）前記第２の混合物を沈殿させて、洗浄する工程；
（ｇ）第２の残渣を得るために、前記第２の混合物をろ過し、乾燥させる工程；
（ｈ）第３の混合物を生成するために、前記第２の残渣と液体アンモニア、ナトリウム金属、および塩化アンモニウムのエタノール溶液を混合する工程；および
（ｉ）前記第３の混合物をろ過し、乾燥させ、それにより前記Ｌ−異性体化合物を調製する工程を含む、請求項２７に記載の前記化合物のＤ−異性体を調製するプロセス。
【請求項５４】
前記塩基は、液体アンモニアまたはメチルアミンを含む、請求項５３に記載のプロセス。
【請求項５５】
前記第２の溶液は、水、酢酸塩、および無水物を含む、請求項５３に記載のプロセス。
【請求項５６】
前記酢酸塩は、酢酸ナトリウムまたはトリフルオロ酢酸ナトリウムを含む、請求項５５に記載のプロセス。
【請求項５７】
前記無水物は、無水酢酸または無水トリフルオロ酢酸を含む、請求項５５に記載のプロセス。
【請求項５８】
前記第２の溶液は、ジクロロメタン、トリエチルアミン、および１，３−ビス（ベンジルオキシカルボニル）−２−メチル−２−チオプソイドウレアを含む、請求項５３に記載のプロセス。
【請求項５９】
工程（ｈ）は、ナトリウム金属の存在下で、前記第２の残渣を混合する工程をさらに含む、請求項５３に記載のプロセス。
【請求項６０】
（ｊ）エーテルに前記Ｄ−異性体化合物を溶解させる工程；
（ｋ）第４の混合物を生成するために、水素化アルミニウムリチウム、酢酸エチル、および水のエーテル溶液を前記溶解したＤ−異性体化合物に加える工程と；および
（ｌ）前記第４の混合物をろ過し、乾燥させ、それにより前記Ｄ−異性体化合物を調製する工程をさらに含む、請求項５３に記載のプロセス。
【請求項６１】
（ａ）第１の混合物を生成するために、Ｓ−ベンジル−Ｌ−システインメチルエステル塩酸塩またはＯ−ベンジル−Ｌ−セリンメチルエステル塩酸塩を塩基と混合する工程；
（ｂ）エーテルを前記第１の混合物に加える工程；
（ｃ）前記第１の混合物をろ過し、濃縮する工程；
（ｄ）第１の残渣を得るために、工程（ｃ）および（ｄ）を繰り返す工程；
（ｅ）第２の混合物を生成するために、酢酸エチルおよび第１の溶液を前記第１の残渣に加える工程；
（ｆ）第２の残渣を生成するために、前記第２の混合物をろ過し、乾燥させる工程；
（ｇ）第３の混合物を生成するために、前記第２の残渣と液体アンモニア、ナトリウム金属、および塩化アンモニウムのエタノール溶液を混合する工程；および
（ｈ）前記第３の混合物をろ過し、乾燥させ、それにより前記Ｌ−異性体化合物を調製する工程を含む、請求項２７に記載の前記化合物のＬ−異性体を調製するプロセス。
【請求項６２】
前記塩基は、アンモニアまたはメチルアミンのメタノール溶液を含む、請求項６１に記載のプロセス。
【請求項６３】
前記第２の溶液は、水、酢酸塩、および無水物を含む、請求項６１に記載のプロセス。
【請求項６４】
前記酢酸塩は、酢酸ナトリウムまたはトリフルオロ酢酸ナトリウムを含む、請求項６３に記載のプロセス。
【請求項６５】
前記無水物は、無水酢酸または無水トリフルオロ酢酸を含む、請求項６３に記載のプロセス。
【請求項６６】
前記第２の溶液は、ジクロロメタン、トリエチルアミン、および１，３−ビス（ベンジルオキシカルボニル）−２−メチル−２−チオプソイドウレアを含む、請求項６１に記載のプロセス。
【請求項６７】
（ｊ）エーテルに前記Ｌ−異性体化合物を溶解させる工程；
（ｋ）第４の混合物を生成するために、水素化アルミニウムリチウム、酢酸エチル、および水のエーテル溶液を前記溶解したＬ−異性体化合物に加える工程と；および
（ｌ）前記第４の混合物をろ過し、乾燥させ、それにより前記Ｌ−異性体化合物を調製する工程をさらに含む、請求項６１に記載のプロセス。
【請求項６８】
（ａ）第１の混合物を生成するために、Ｓ−ベンジル−Ｄ−システインメチルエステル塩酸塩またはＯ−ベンジル−Ｄ−セリンメチルエステル塩酸塩を塩基と混合する工程；
（ｂ）エーテルを前記第１の混合物に加える工程；
（ｃ）前記第１の混合物をろ過し、濃縮する工程；
（ｄ）第１の残渣を得るために、工程（ｃ）および（ｄ）を繰り返す工程；
（ｅ）第２の混合物を生成するために、酢酸エチルおよび第１の溶液を前記第１の残渣に加える工程；
（ｆ）第２の残渣を生成するために、前記第２の混合物をろ過し、乾燥させる工程と；
（ｇ）第３の混合物を生成するために、前記第２の残渣と液体アンモニア、ナトリウム金属、および塩化アンモニウムのエタノール溶液を混合する工程と；および
（ｈ）前記第３の混合物をろ過し、乾燥させ、それにより前記Ｄ−異性体化合物を調製する工程を含む、請求項２７に記載の前記化合物のＤ−異性体を調製するプロセス。
【請求項６９】
前記塩基は、アンモニアまたはメチルアミンのメタノール溶液を含む、請求項６８に記載のプロセス。
【請求項７０】
前記第２の溶液は、水、酢酸塩、および無水物を含む、請求項６８に記載のプロセス。
【請求項７１】
前記酢酸塩は、酢酸ナトリウムまたはトリフルオロ酢酸ナトリウムを含む、請求項７０に記載のプロセス。
【請求項７２】
前記無水物は、無水酢酸または無水トリフルオロ酢酸を含む、請求項７０に記載のプロセス。
【請求項７３】
前記第２の溶液は、ジクロロメタン、トリエチルアミン、および１，３−ビス（ベンジルオキシカルボニル）−２−メチル−２−チオプソイドウレアを含む、請求項６８に記載のプロセス。
【請求項７４】
（ｊ）エーテルに前記Ｄ−異性体化合物を溶解させる工程；
（ｋ）第４の混合物を生成するために、水素化アルミニウムリチウム、酢酸エチル、および水のエーテル溶液を前記溶解したＤ−異性体化合物に加える工程；および
（ｌ）前記第４の混合物をろ過し、乾燥させ、それにより前記Ｄ−異性体化合物を調製する工程をさらに含む、請求項６８に記載のプロセス。
【請求項７５】
（ａ）第１の混合物を生成するために、シスタミンジヒドロクロライドとアンモニア、水、酢酸ナトリウム、および無水酢酸を混合する工程；
（ｂ）沈殿させるために、前記第１の混合物を放置する工程；
（ｃ）第１の残渣を生成するために、前記第１の混合物をろ過し、乾燥させる工程と；
（ｄ）第２の混合物を生成するために、前記第２の残渣と液体アンモニア、ナトリウム金属、および塩化アンモニウムのエタノール溶液を混合する工程；および
（ｅ）前記第２の混合物をろ過し、乾燥させ、それにより前記化合物を調製する工程を含む、請求項２７に記載の化合物を調製するプロセス。
【請求項７６】
【化１２】

で構成される群から選択されるＮＡＣアミド化合物または誘導体。
【請求項７７】
請求項７６に記載のＮＡＣアミドまたはＮＡＣアミド誘導体を含む、食品添加物。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【公表番号】特表２００８−５３８５８６（Ｐ２００８−５３８５８６Ａ）
【公表日】平成２０年１０月３０日（２００８．１０．３０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５０７９９２（Ｐ２００８−５０７９９２）
【出願日】平成１８年４月２１日（２００６．４．２１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０１５５４８
【国際公開番号】ＷＯ２００６／１１６３５３
【国際公開日】平成１８年１１月２日（２００６．１１．２）
【出願人】（５０７３４８０３４）
【Ｆターム（参考）】