鎮痛活性および／または免疫賦活活性を有する３−ヘテロ環−３−ヒドロキシ−２−アミノプロピオン酸アミドおよび関連化合物
それらの構造式が明細書中に示される化合物は哺乳類において鎮痛活性および／または免疫賦活活性を有する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
優先権主張：本出願は、２００５年１月２６日に出願した米国仮出願第６０／６４７２７１号の優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、鎮痛活性およびある場合には免疫賦活活性を有する化合物に関する。
【０００３】
また、本発明は、哺乳動物において疼痛を緩和もしくは除去するかつ／または哺乳動物において免疫系を賦活する活性成分として、これらの化合物を含有する医薬組成物、ならびに当該医薬組成物を鎮痛薬および／または免疫賦活薬として使用する方法にも関するものである。
【背景技術】
【０００４】
「３−アリール−３−ヒドロキシ−２−アミノ−プロピオン酸アミドの誘導体、３−ヘテロアリール−３−ヒドロキシ−２−アミノ−プロピオン酸アミドの誘導体、１−アリール−１−ヒドロキシ−２，３−ジアミノ−プロピルアミンの誘導体、１−ヘテロアリール−１−ヒドロキシ−２，３−ジアミノ−プロピルアミン」としての一般的な定義の１種または複数に属するいくつかの化合物が、特許および科学文献で知られている。
【０００５】
例えば、米国特許出願第２００３／０１５３７６８号；第２００３／００５０２９９号は、上記の既知の化合物のいくつかの例を開示している。これらの参考文献のＮ−アシル化合物は、Ｎ−アシルスフィンゴシングルコシルトランスフェラーゼ阻害剤として有用であるといわれ、それらのアミドおよび還元化合物がそれらの調製における中間体として記載されている。これらの参考文献の化合物の例示的な特定の例を以下に示す。
【化１】
【０００６】
出版物、Shinら, Tetrahedron Asymmetry, 2000, 11, 3293-3301は、以下の化合物を開示している。
【化２】
【０００７】
本発明の方法で使用するＬ−トレオ−ＰＤＭＰおよびいくつかのその他の既知の化合物は、純粋な鏡像異性体およびラセミ体で適用可能に、Matreya, LLC(Pleasant Gap、ペンシルベニア州）から市販されている。
【化３】
【０００８】
米国特許第５９４５４４２号、第５９５２３７０号、第６０３０９９５号および第６０５１５９８号は、同一または関連の開示にも基づいていることから、いずれも相互に関連しているが、これらは、上記で示した既知の化合物に構造が類似している化合物を開示している。これらの米国特許の参考文献の化合物は、グルコシルセラミド（ＧｌｃＣｅｒ）合成酵素の阻害剤であるといわれている。
【０００９】
出版物、Journal of Labelled Compounds & Radiopharmaceuticals(1996), 38(3), 285-97は、以下の式の化合物を開示している。
【化４】
【００１０】
公開されているＰＣＴ出願第ＷＯ０１／３８２２８号は、クロマトグラフィーの方法に関連して
【化５】
を開示している。
【００１１】
Latvijas PSR Zinatnu Akademijas Vestis, Kimijas Serija(1965)(4), 474-7において、Kastronらは、以下の化合物を開示している。
【化６】
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
重要なことには、本発明の発明者らの知る限りにおいては、従来技術の化合物のいずれもが、従来技術においては、鎮痛薬または免疫賦活薬としては開示されていない。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、次式
【化７】
（Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキル）；
【化８】
【化９】
（Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキル）；
【化１０】
（Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキル）；
【化１１】
（式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキル）；
【化１２】
（式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキル）
で表される化合物および該化合物の全ての製薬的に許容される塩に関する。
【００１４】
また、本発明の対象は、上記の新規な化合物を含有する、哺乳動物において鎮痛薬および／または免疫賦活薬として使用する医薬組成物、ならびに当該医薬組成物を鎮痛薬または免疫賦活薬として使用する方法である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明の化合物の一般的な説明は、本特許出願の課題を解決するための手段で述べられている。本発明のいくつかの化合物は、１個または複数の不斉中心を含有し、そのため、そのような化合物には、鏡像異性体およびジアステレオ異性体が存在することができる。事実上、ほとんどの本発明の化合物は、互いに隣接する２個の不斉炭素を有し、したがって、エリトロ形またはトレオ形として存在することができ、これらの２種の形のそれぞれが、右旋性（Ｄ）または左旋性（Ｌ）の鏡像異性体を有する。本発明によれば、通常、鎮痛活性を得るには、トレオ形が好ましいが、特に別途述べない限り、本発明の範囲には、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、およびジアステレオ異性混合物またはラセミ混合物の全てを含む。上記に照らして、本出願においては、「ＤＬ」または「（＋／−）」または「（±）」が指定されている場合には、純粋な右旋性鏡像異性体、純粋な左旋性鏡像異性体、および２種の鏡像異性体が均等または不均等な割合で存在する混合物を含む、全てのラセミ混合物を含むことを明確に理解されたい。さらに、簡素化のために、下記の例においてなど、構造式の多くにおいて、鏡像異性体の１種のみが実際に示されているが、「ＤＬ」または「（＋／−）」または「（±）」が指定されている場合には、当該式で実際に示されている構造の鏡像異性体（鏡映像）も含まれる。
【００１６】
例えば、
【化１３】
である。
【００１７】
したがって、上記の例では、鏡像異性体の１種のみが示されているが、「ＤＬ」（または「（＋／−）」または「（±）」）が、式の下に指定されているので、その光学異性体
【化１４】
および２種の光学異性体のラセミ混合物の全ても含まれる。
【００１８】
本発明のいくつかの化合物の場合には、トレオ形、およびエリトロ形の一部において、一方の鏡像異性体が、同一の対の他方の鏡像異性体よりも、鎮痛薬として顕著に活性が高いことがある。このため、他方より顕著に活性が高い、単離された鏡像異性体を、たとえ同一の化合物のラセミ混合物または単一な１つの鏡像異性体が従来技術にすでに記載されている場合であっても、新規な発明組成物と見なすものとする。
【００１９】
本発明の新規な化合物のいくつかは、３個以上の不斉中心を含有していてもよい。
【００２０】
広い意味では、異性体、鏡像異性体およびラセミ混合物の全てが、本発明の範囲に属するが、読者である当業者には、上記の例を記憶にとどめれば、個々の記載されている例の範囲が容易に理解されるであろう。
【００２１】
化合物の一般的な説明および定義における「アルキル」という用語には、直鎖および分枝鎖のアルキル基が含まれる。
【００２２】
一般に、本発明の化合物は、薬学的に許容される酸または塩基と塩を形成することができ、化合物の薬学的に許容される塩も、本発明の範囲に属する。
【００２３】
さて、本発明の新規な化合物について述べると、上でおよび特許請求の範囲に示したＲ4基は好ましくはＨである。
【００２４】
本明細書中、本発明の最も好ましい新規な化合物を以下の表中の構造式および／または例示的な化合物の、鎮痛薬として作用する能力に関する活性を示す説明を付けて開示する。
【００２５】
生物学的活性、投与形態
本発明の新規な化合物は、哺乳動物において、鎮痛活性および／または免疫賦活活性を有する。背景技術に記載した化合物のいくつかは、当技術分野においては、それ自体が既知であるが、本発明の発明者らによって、哺乳動物において鎮痛効果も示すことが発見された。本発明の発明者らの知る限りにおいては、これらの既知の化合物の鎮痛活性または免疫賦活性の生物学的活性は、今回発見されるまでは知られていなかった。
【００２６】
慢性の疼痛（特に、末梢性神経障害）における化合物の鎮痛効果の測定に用いる、当技術分野で認められているモデルまたはアッセイは、ＫｉｍおよびＣｈｕｎｇ １９９２、Ｐａｉｎ １５０、ｐｐ ３５５−３６３（Ｃｈｕｎｇモデル）として知られるモデルである。このモデルでは、実験動物の片側のＬ５（および所望によりＬ６）脊髄神経を外科的に結紮することになる。ラットは、手術から回復するにつれ、体重が増加し、正常なラットに類似する通常の活動のレベルを示す。しかし、これらのラットは、足においては異常を示すようになり、後足が中等度に裏返り、つま先が一緒になって離れなくなる。より重要な点は、手術を受けた側の後足では、機械的刺激に対する感受性の閾値が低下し、かすかな接触感の代わりに疼痛を感じるようになることである。正常であれば無痛性の接触に対するこのような感受性は、「接触性アロディニア」と呼ばれ、手術後１週間以内に発生し、少なくとも２ヶ月は持続する。アロディニア応答には、刺激から逃れるために手術を受けた後足を持ち上げること、足をなめること、および足を何秒間も空中に保つことが含まれる。これらの応答はいずれも、対照群では、通常認められない。
【００２７】
接触性アロディニアを発生させるために、ラットに手術前に麻酔をかける。術部を剪毛し、ベタダインまたはノボケインのいずれかを用いて手術に備える。第８胸椎から仙骨に向かって下方に切開する。Ｌ４〜Ｓ２のレベルにおいて、脊椎（左側）から筋肉組織を分離させる。Ｌ６椎の位置を決定し、横突起を小型の骨鉗子を用いて注意深く取り除いて、Ｌ４〜Ｌ６脊髄神経を露出させる。Ｌ５およびＬ６脊髄神経を単離し、６−０絹糸を用いて、しっかりと結紮する。対照として、同一の処置を右側に施すが、脊髄神経の結紮は行なわない。
【００２８】
止血が完全であることを確認した後、創部を縫合する。少量の抗生物質の軟膏を切開部に施用し、調節されている熱−温度ランプ下にある回復用のプラスチック製ケージに、ラットを移す。
【００２９】
手術後少なくとも７日後である実験日には、通常、６匹のラットを各試験群に用い、試験薬剤を腹腔内注射（ｉ．ｐ．）または経口胃管栄養法（ｐ．ｏ．）によって投与する。ｉ．ｐ．投与では、化合物を水中で調製し、１ｍｌ／ｋｇ体重の容量で腹腔内に注射することによって投与する。ｐ．ｏ．投与では、化合物を水中で調製し、１ｍｌ／ｋｇ体重の容量で、食道を介して胃内にゆっくり挿入する１８ゲージの、３インチ胃管栄養針を使用して投与する。
【００３０】
接触性アロディニアをフォンフレイの触毛を介して評価する。これは、一連の硬度が少しずつ異なる細い毛である。金網製の底を有するプラスチック製のケージにラットを入れ、約３０分かけて順応させる。投与前のベースラインを確立するために、フォンフレイの触毛をラットの後足の足底の中央部分に、わずかなバックリングに十分な力で、網を介して垂直に接触させ、６〜８秒間保持する。接触させる力は、０．４１〜１５．１グラムの範囲であるように計算されている。足が素早く引っ込む場合には、陽性の反応と見なされる。正常な動物は、この範囲の刺激には応答しないが、外科的に結紮した足は、１〜２グラムの毛に応答して引っ込む。足の引っ込め５０％閾値を本明細書に参照によって組み入れられているDixon, W.J.,Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.20:441-462(1980)の方法を用いて求める。投与前と投与１５、３０および６０分後に、接触性アロディニアを測定する。投与後の閾値を投与前の閾値と比較し、１５．１グラムの正常閾値に基づいて、接触感受性の低下率を計算する。
【００３１】
以下の表１に、Ｃｈｕｎｇモデルにおいて、本発明の例示的な化合物を用いて得られた疼痛の低下の程度を示す。化合物の腹腔内（ｉ．ｐ．）および／または静脈内（ｉｖ）投与の用量は、術後、１μｇ／ｋｇ〜３００μｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇの範囲であり、アロディニアの低下率のピークを投与１５、３０または６０分後に測定し、表に示した。ラットのＣｈｕｎｇモデルにおいては、アロディニアの低下は、最低でも２０％とし、データは、（投与後１５分、３０分または６０分の３時点のいずれかにおける）アロディニアの低下率の最大値として表した。群間（投薬処置群対食塩水処置群）の比較を両側独立２標本ｔ検定を用いて行なった。３００μｇ／ｋｇを腹腔内投与した後、鎮痛性を統計的に示さなかった化合物は、示されていないが、これらにも鎮痛性がある場合がある。１００ｍｇ／ｋｇで有意な鎮痛性を示さない化合物は、鎮痛性があるとは見なさない。
【表１】
【００３２】
免疫の賦活の測定に用いる、当技術分野で認められている方法は、化合物の全身投与を含み、恐らく血液リンパ細網系の上方制御によって、免疫系を賦活する能力を試験する。この上方制御によって、Ｔ細胞およびＢ細胞の両方の系列のリンパ球の数を増加させることが可能であると思われる。出願人は、免疫賦活のこの生物学的理論に縛られるつもりはないが、実験用のラットに試験化合物を投与し、それに応答する脾臓の大きさを試験することによって、化合物の実際の免疫賦活効力をｉｎ ｖｉｖｏにおいて実証することができる。このように、脾臓サイズの増大から、化合物が免疫賦活薬として有望であることが示される。一般に、２００ｍｇ／ｋｇまたはそれ以下の投与により脾臓を拡大させる化合物はいずれも、免疫賦活薬と見なすことができる。
【００３３】
投与形態：
本発明の化合物を薬学的有効量で投与することができる。通常、そのような投与量は、所望の治療効果を達成するために必要とする最少の用量である。慢性疼痛の治療においては、この量は、およそ、疼痛によって生じる不快感を低減させるのに必要とする量であろう。一般に、ヒト成人では、そのような用量は、０．１〜５０００ｍｇ／日の範囲であり、より好ましくは、１〜３０００ｍｇ／日の範囲であり、さらにより好ましくは、１０〜１０００ｍｇ／日の範囲である。しかし、所与の症例において投与する化合物の実際の量は、疼痛の重症度、患者の年齢および体重、患者の全身状態、疼痛の原因、ならびに投与経路など、関連する状況を考慮して医師が決定するものとする。
【００３４】
本化合物は、哺乳動物、特に、ヒトにおいて、疼痛の治療に有用である。好ましくは、本化合物は、錠剤、液剤、カプセル剤、散剤など、いずれかの許容される剤型で、経口的に患者に投与される。しかし、その他の経路が望ましい場合または必要である場合があり、特に、患者が悪心を訴える場合がそうである。そのようなその他の経路として、例外なしに、経皮、腹腔内、非経口、皮下、鼻腔内、くも膜下腔内、筋肉内、静脈内および直腸内による送達の形態があげられる。本発明の別の態様では、本発明の新規な化合物と、これらの化合物の薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される賦形剤とを含む治療用組成物を対象とする。そのような賦形剤は、担体または希釈剤となることができる。多くの場合、これを活性のある化合物と混合する、またはこれで活性のある化合物を希釈もしくは封入する。希釈剤の場合、この担体は、活性のある化合物に対して、賦形剤またはビヒクルとして作用する固体、半固体、または液体の材料であることができる。処方は、湿潤剤、乳化剤、保存剤、甘味剤、および／または嬌味剤も含むことができる。眼科用または注入用の場合、多くの場合、処方の浸透圧を変化させるために、処方は、１種または複数の塩を含有するであろう。
【００３５】
本発明の別の態様では、本発明の対象は、疼痛、特に、慢性疼痛を１種または複数の、本発明の新規な、もしくはそうでなければ既知の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩をそれを必要とする哺乳動物に投与することによって治療する方法である。上記で示したように、多くの場合、本化合物は、所望の送達形態に合致した剤型に製剤化される。
【００３６】
免疫賦活薬である本発明の化合物は、鎮痛活性を有する化合物と同一の原理に基づいて、症例毎および／または種毎に、ヒトの場合には、時に、患者毎に、最適な用量で投与される。一般に、有効量は、１０μｇ／ｋｇ〜２００ｍｇ／ｋｇの範囲であろう。
【００３７】
本発明の化合物を得るための合成方法
本発明の化合物を以下の実験例に記載する合成方法、または本開示に照らせば当業者には容易に明らかになるであろう、以下に記載する実験的方法の変法を利用して合成することができる。より具体的には、本発明の各化合物の合成は、Ｒ4がＨである具体的な化合物について記載する。当業者は、Ｒ4が、１〜６炭素のアルキルであるかまたはＲ5が１〜６炭素のアルキルであるＣＯ−Ｒ5である化合物が、それぞれアルキル化またはアシル化等の当分野に周知の製造方法によって容易に製造することができることを容易に理解する。また、当業者は、ヒドロキシ基のアルキル化またはアシル化を実施するにあたり、アミノ基等の他の基が保護に必要であり得ること、この保護基を後に当分野で周知の方法によって脱離することができることを容易に理解する。ある場合においては、ヒドロキシ基のアルキル化またはアシル化を、本発明の化合物に導く合成の過程における中間体に対して行うことができる。
【００３８】
一般論
Ａｄｖａｎｃｅ ３００分光計（Ｂｒｕｋｅｒ製）を用いて、室温で1Ｈ ＮＭＲスペクトルを記録した。Ｗａｔｅｒｓ ２５２５ポンプ、Ｗａｔｅｒｓ ２６９６フォトダイオードアレイ検出器およびＸＴｅｒｒａカラム（特許第１８６０００４８２号、５μｍ、Ｃ１８、４．５×５０ｍｍ）を備えるＷａｔｅｒｓ Ａｕｔｏｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍを使用して、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって、化合物を分析した。使用したＨＰＬＣ法では、７分間で、溶媒Ｂの濃度を５％から１００％に変化させた。溶媒Ａは、０．０５％ＴＦＡを有する水であり、溶媒Ｂは、０．０５％ＴＦＡを有するＣＨ3ＣＮであった（方法Ａ）。
Ｂｕｃｈｉ Ｂ−５４５型融点測定装置を用いて、融点を測定したが、補正はしなかった。反応生成物を単離するために、回転式真空蒸発器を使用して溶媒を蒸発させて除去した。水浴の温度は、４０℃以下とした。
【００３９】
一般的な合成経路
本発明の化合物を一般的な意味では直下に、さらにより詳細には本出願の実験例の項に記載する合成法を利用することによって、または本開示に照らせば当業者には容易に明らかになるであろう、以下に記載する一般的なおよび実験例の方法の変法によって合成することができる。
【００４０】
好ましい化合物の合成に関する詳細な説明（実験例）
化合物１９の調製
２−イソシアノ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン、ＢＬＥ ０４０９８
イソシアノ酢酸メチル（９６％、工業用グレード、５．０ｇ、４７．８mmol）に、冷却（０℃）および撹拌しながら、ピロリジン（６．５ｍＬ、７８mmol）をゆっくり添加した。混合物を引き続き冷却しながら、１．５時間撹拌し、次いで、濃縮した。得られた油をＣＨ2Ｃｌ2：ヘキサンから、２回にわたり共蒸発させて、残留しているピロリジンを除去した。２−イソシアノ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン、ＢＬＥ ０４０９８を黄色の固体（６．８５ｇ、収率９８％）として得た後、精製せずに、次の工程で使用した。
【化１５】
分子量：１３８．１７；収率：９８％；黄色の固体；融点（℃）＝７３．９
1H-NMR (CDCl3,δ): 1.81-2.08 (m, 4H, 2xCH2), 3.35-3.45 (m, 2H, -NCH2), 3.50-3.60 (m, 2H, -NCH2), 4.23 (s, 2H, CH2CO).
【００４１】
一般的方法Ｂ：トランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、ＢＬＥ ０４１１０Ｂの調製による例示
メタノール（１０ｍＬ）中に水酸化カリウム（０．５５ｇ、９．８０mmol）を含む溶液に、冷却（０℃）および撹拌しながら、３−ピリジンカルボキサルデヒド（１．０３ｍＬ、１０．８４mmol）および２−イソシアノ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン、ＢＬＥ ０４０９８（１．５０ｇ、１０．８６mmol）の混合物を添加した。溶液を０℃で３時間撹拌し、次いで、濃縮した。残滓を酢酸エチル（１００ｍＬ）と水とに分配した。有機層を２回のさらなる酢酸エチル抽出液（１００ｍＬ、２回）と合わせ、塩化ナトリウム水溶液で洗浄、ＭｇＳＯ4上で乾燥、ろ過後、蒸発させた。濃縮により粗生成物を得、これをシリカ上のカラムクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ＝９８：２）によって精製して、トランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、ＢＬＥ ０４１１０Ｂを淡黄色の固体（０．９５ｇ、収率３９％）として得た。
【化１６】
分子量：２４５．２８；収率：３９％；淡黄色の固体；融点（℃）：１０７．０
1H-NMR (CDCl3,δ): 1.78-2.10 (m, 4H, 2xCH2), 3.40-3.61 (m, 3H, CH2N), 3.90-4.04 (m, 1H, CH2N), 4.59 (dd, 1H, J=7.7 Hz, J=2.2 Hz, CH-N), 6.21 (d, 1H, J=7.7 Hz, CH-O), 7.04 (d, 1H, J=2.2 Hz, O-CH=N), 7.33 (m, 1H, ArH), 7.64 (m, 1H, ArH), 8.59 (d, 2H, J=2.8 Hz, ArH).
13C-NMR (CDCl3,δ): 24.2, 26.0, 46.4, 46.6, 75.7, 79.3, 123.7, 133.5, 135.3, 147.6, 149.9, 155.2, 166.2.
【００４２】
トランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−４−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、化合物１９
化合物１９をピリジン−４−カルバルデヒド（１．８８ｍＬ、１９．７６mmol）、メタノール（１８ｍＬ）中のＫＯＨ（１．０１ｇ、１８mmol）および２−イソシアノ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン、ＢＬＥ ０４０９８（２．７３ｇ、１９．７６mmol）を用いて、方法Ｂにしたがって調製した。残滓を酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（１５０ｍＬ）とに分配した。有機層をさらなる酢酸エチル抽出液（１５０ｍＬ、２回）と合わせ、塩化ナトリウム水溶液で洗浄（１５０ｍＬ、２回）、ＭｇＳＯ4上で乾燥、ろ過後、蒸発させた。トランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−４−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、化合物１９を白色の固体（４．３２ｇ、収率９８％）として得た。
【化１７】
分子量：２４５．２８；収率：９８％；白色の固体；融点（℃）＝６９．２
Ｒf：０．６５（ＭｅＯＨ：ＣＨ2Ｃｌ2＝１０：９０）
1H-NMR (CDCl3,δ): 1.78-2.06 (m, 4H, 2xCH2), 3.44-3.60 (m, 3H, CH2N), 3.90-4.01 (m, 1H, CH2N), 4.52 (dd, 1H, J=7.9 Hz, J=2.2 Hz, CH-N), 6.19 (d, J=7.9 Hz, 1H, CH-O), 7.03 (d, 1H, J=2.2 Hz, N=CH-O), 7.24 (dd, 2H, J=4.5 Hz, J=1.5 Hz, ArH), 8.61 (dd, 2H, J=4.5 Hz, J=1.5 Hz, ArH).
【００４３】
化合物５０の製造
一般的方法Ｃ：ＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−３−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩、化合物２０の調製による例示
メタノール（１０ｍＬ）中のトランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、ＢＬＥ ０４１１０Ｂ（０．９３２ｇ、３．８０mmol）に、３７％塩酸（１．２ｍＬ）を添加した。混合物を２．２５時間加熱（５０℃）した後、反応混合物を濃縮し、粗生成物を酢酸エチルと共に、２回にわたり共蒸発させた。酢酸エチルと共に粉砕し、ろ過および乾燥後、ＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−３−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩、化合物２０を白色の固体（１．１０ｇ、収率９４％）として得た。
【化１８】
分子量：３０８．２；収率：９４％；白色の固体；融点（℃）：１２３．４
1H-NMR (CD3OD,δ): 1.65-2.00 (m, 4H, 2xCH2), 2.82-3.11 (m, 1H, -CH2N), 3.30-3.57 (m, 2H, CH2N), 3.57-3.77 (m, 1H, CH2N), 4.54 (d, 1H, J=5.3 Hz, CH-N), 5.38 (d, 1H, J=5.3 Hz, CH-O), 8.15 (dd, 1H, J=7.6 Hz, J=5.0 Hz, ArH), 8.68 (d, 1H, J=7.6 Hz, ArH), 8.89 (d, 1H, J=7.6 Hz, ArH), 8.96 (s, 1H, ArH).
13C-NMR (CD3OD,δ): 24.9, 26.9, 47.7, 48.2, 58.1, 69.6, 128.7, 141.5, 141.6, 143.1, 146.5, 165.4.
【００４４】
ＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩、化合物２２
化合物２２をトランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−４−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、化合物１９（０．７５０ｇ、３．０７mmol）、３７％塩酸（１．０ｍＬ）およびメタノール（１０ｍＬ）を用いて、方法Ｅにしたがって調製した。５０℃で３．０時間加熱した後、精査して、ＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩、化合物２２を白色の固体（０．９３５ｇ、収率９９％）として得た。
【化１９】
分子量：３０８．２８；収率：９９％；白色の固体；融点（℃）：１１７．０
1H-NMR (CD3OD,δ): 1.75-2.03 (m, 4H, 2xCH2), 2.93-3.08 (m, 1H, CHN), 3.32-3.75 (m, 3H, 2xCH2), 4.54 (d, 1H, J=5.9 Hz, CH-N), 5.40 (d, 1H, J=5.9 Hz, CH-O), 8.21 (d, 2H, J=5.8 Hz, ArH), 8.94 (d, 2H, J=5.8 Hz, ArH).
ＭＳ−ＥＳＩ ｍ／ｚ（％ｒｅｌ．ｉｎｔ．）：２３６．１（［ＭＨ］+，１７）、２１９（２５）、１４８（１００）
ＨＰＬＣ：方法Ａ、検出ＵＶ ２５４ｎｍ、化合物２２ ＲＴ＝０．８分、ピーク面積 ９６．３％
【００４５】
ｔｅｒｔ−ブチル５−（ＤＬ−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメート、ＥＢＥ０６１０２
ＣＨ2Ｃｌ2（１２ｍＬ）中のＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩（化合物２２）（０．６０ｇ，１．７７mmol）の懸濁液に、ＴＥＡ（０．７３９ｍＬ,５．３２mmol）を加え、反応混合物を１０分間攪拌し、氷浴中攪拌を続けながら冷却した。Ｂｏｃ−アミノヘキサン酸（０．４５１ｇ，１．９５１mmol）およびＢＯＰ（１．０５ｇ，１．９５mmol）の溶液をＣＨ2Ｃｌ2中で予め調製し、５分間かけて滴加した。０℃にて反応混合物を２時間、室温で１６時間攪拌した。揮発性成分を蒸発させた後,残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＨ2ＰＯ4（ｐＨ７．２）、飽和ＮａＨＣＯ3で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。得られた白色の固体をＥｔＯＡｃ中１０％ＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製してｔｅｒｔ−ブチル５−（ＤＬ−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメートＥＢＥ０６１０２（０．４１ｇ，５２％の収率）を白色の固体として得た。
【化２０】
分子量：４４８．５６；収率：５２．０％；白色の固体
Ｒf：０．１０（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝９０：１０）．
1Ｈ−ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ3，δ）：１．１０−１．１２（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．３５−１．５５（ｍ,１１Ｈ,（ＣＨ3）3＆ＣＨ2）,１．７２−１．９２（ｍ,４Ｈ,ＣＨ2）,２．０５−２．２２（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,２．４０（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝９．３Ｈｚ,ＣＨ2）,３．０５（ｑ,２Ｈ,Ｊ＝６．６Ｈｚ,ＣＨ2）,３．２０−３．２８（ｍ,１Ｈ,ＮＣＨ2）,３．３２−３．５０（ｍ,２Ｈ,ＮＣＨ2）,３．６２−３．７２（ｍ,１Ｈ,ＮＣＨ2）,４．７９（ｂｓ,１Ｈ,ＮＨ）,４．９７（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝８．７,４．１Ｈｚ,ＮＣＨ）,５．０７（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝４．１Ｈｚ,ＯＣＨ）,５．４０（ｂｓ,１Ｈ,ＮＨ）,６．７４（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝８．４Ｈｚ,ＯＨ）,７．３５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝６．０Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．５６（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝６．０Ｈｚ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，δ）：２４．０,２５．０,２６．１,２８．４,２９．６,３５．９,３６．９,４０．３,４６．１,４６．９,５４．９,７２．９,７９．０,１２１．３,１４８．８,１４９．６,１５６．１,１６９．０,１７３．２．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：４４９．１（［ＭＨ］+,２０）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,ＥＢＥ０６１０２ＲＴ＝４．１ｍｉｎ,ピーク面積９９．９％．
【００４６】
６−（５−（（３ａＲ,６Ｓ,６ａＳ）−ヘキサヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−チエノ［３,４−ｄ］イミダゾール−６−イル）ペンタンアミド）−Ｎ−（（１Ｒ,２Ｓ）−＆（１Ｓ,２Ｒ）−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド、化合物５０
ＭｅＯＨ（１ｍＬ）中の５−（ＤＬ−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメートＥＢＥ０６１０２（０．３７０ｇ，０．８２４mmol）の溶液に、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）中のＨＣｌ（４．２Ｍ）の溶液を加えた。反応混合物を室温で２に時間攪拌し、揮発性成分を蒸発させて粗製の褐色の油状物ＥＢＥ０６１０４（０．２２１ｇ，６３％粗製収率）を得、これを精製せずに次の工程で用いた。ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＥＢＥ０６１０４（０．２２１ｇ，０．５２２mmol）の懸濁液に、トリエチルアミン（０．２１７ｍＬ,１．５７mmol）を加え、反応混合物を１０分間攪拌し、攪拌を続けながら氷浴中で冷却した。ビオチン（０．１４ｇ，０．５７４mmol）およびＢＯＰ（０．３０９ｇ，０．５７４mmol）の溶液をＣＨ2Ｃｌ2（１ｍＬ）中で予め調製し、５分間かけて滴加した。混合物を０℃で２時間、室温で１６時間攪拌した。反応混合物を蒸発乾燥し、ＮａＨ2ＰＯ4とｎ−ブタノールの間に分離した。ｎ−ブタノール相を飽和Ｎａ2ＣＯ3で洗浄し、蒸発乾燥した。所望の生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ：ＮＨ4ＯＨ＝７０：２８：２）を用いて精製し、化合物５０（１：１の比率のジアステレオ異性体の混合物,０．１６０ｇ，５３％の収率）を白色の固体として得た。
【化２１】
分子量：５７４．７４；収率：５３％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：６４．３．
Ｒf：０．２（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ：ＮＨ4ＯＨ＝７０：２８：２）．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，δ）：１．１７−１．３２（ｍ,２Ｈ）,１．４０−１．６０（ｍ,４Ｈ）,１．６０−１．９０（ｍ,６Ｈ）,１．９０−２．１０（ｍ,４Ｈ）,２．１５−２．３０（ｍ,４Ｈ）,２．７４（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝１２．６Ｈｚ）,２．９１（ｄｄ,Ｊ＝４．８Ｈｚ,１２．８Ｈｚ）,２．９５−３．１０（ｍ,１Ｈ）,３．１０−３．４５（ｍ,４Ｈ）,３．６０−３．７２（ｍ,１Ｈ）,４．３４（ｄｄ,１ＨＪ＝４．４ＨｚＪ＝７．５Ｈｚ）,４．５０−４．５８（ｍ,１Ｈ）,４．８５−４．９５（ｍ,１Ｈ）,５．０２−５．０８（ｍ,１Ｈ）,６．１２（ｓ,１Ｈ）,６．５０−６．１５（ｍ,１Ｈ）,６．６８（ｓ,１Ｈ）,７．３６（ｍ,２Ｈ）,７．６７（ｑ,１Ｈ,Ｊ＝８．１２Ｈｚ）,８．５５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝５．８Ｈｚ）．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：５７５．３（［ＭＨ］+,７０）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,化合物５０ＲＴ＝３．６１ｍｉｎ,ピーク面積９７．２％．
【００４７】
化合物４９の製造
トランス−（４,５−ジヒドロ−５−（２−メトキシピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、ＢＡＬ０１０１４
ＢＡＬ０１０１４は、方法Ｄにしたがい、２−メトキシ−３−ピリジンカルボキシアルデヒド（０．６４ｍｌ,５．４３mmol）、メタノール（５ｍＬ）中のＫＯＨ（０．３０５ｍｇ，５．４３mmol）および２−イソシアノ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノンＢＬＥ０４０９８（０．７５ｇ，５．４３mmol）を用いて製造した。処理の後、トランス−（４,５−ジヒドロ−５−（２−メトキシピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノンＢＡＬ０１０１４（０．７４ｍｇ，５０％の収率）を白色の固体として得た。
【化２２】
分子量：２７５．３０；収率：５０％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：１１０．１．
Ｒｆ：０．２５（ＥｔＯＡｃ）．
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3,δ）：１．８２−２．１０（ｍ,４Ｈ,２ｘＣＨ2）,３．４０−３．６２（ｍ,３Ｈ,ＣＨ2Ｎ）,３．８０−３．９０（ｍ,３Ｈ,ＣＨ2Ｎ）,３．９３（ｓ,３Ｈ,ＯＭｅ）,４．６１（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝７Ｈｚ,Ｊ＝２Ｈｚ,ＣＨ−Ｎ）,６．１４（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝７Ｈｚ,ＣＨ−Ｏ）,６．９０（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,Ｊ＝５Ｈｚ,ＡｒＨ）,７．０２（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝２Ｈｚ,ＯＣＨ＝Ｎ）,７．６０（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,Ｊ＝１．７Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．１３（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝５Ｈｚ,Ｊ＝１．８Ｈｚ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3,δ）：２４．３,２６．１,４６．３,４６．６,５３．５,７３．５,７８．１,１１６．８,１２２．２,１３５．２,１４６．５,１５５．３,１６０．５および１６７．４．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：２７６．１（［ＭＨ］+,４２）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,ＢＡＬ０１０１４ＲＴ＝３．６３ｍｉｎ,ピーク面積９７．２％．
【００４８】
３−（ＤＬ−トレオ−２−アミノ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イル−プロピル）−１Ｈ−ピリジン−２−オン塩酸塩、化合物４９
トランス−（４，５−ジヒドロ−５−（２−メトキシピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、ＢＡＬ ０１０１４（０．６８４ｇ、２．４８７mmol）をメタノール（１０ｍＬ）に溶解した。塩酸溶液（３７％、０．６ｍＬ）を室温で注射器を介して添加した。混合物を還流しながら、２２時間撹拌した。残滓を濃縮した後、ＥｔＯＡｃと共に粉砕し、ろ過して、淡黄色の固体である、３−（ＤＬ−トレオ−２−アミノ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イル−プロピル）−１Ｈ−ピリジン−２−オン塩酸塩、化合物４９を得た（１３６ｍｇ、収率１９．０％）。
【化２３】
分子量：２８７．７４；収率：１９．０％；淡黄色の固体；融点（℃）：１８０
1H NMR (CD3OD,δ): 1.82-2.09 (m, 4H, 2xCH2), 3.35-3.80 (m, 4H, 2xCH2N), 4.63 (s, 1H, CH-N), 5.17 (s, 1H, CH-O), 6.56 (t, 1H, ArH) ), 7.5 (d, 1H, J=6.1 Hz, ArH), 7.86 (d, 1H, J=6.5 Hz, ArH).
13C-NMR (CD3OD,δ): 24.2, 26.0, 46.6, 46.6, 75.8, 79.7, 127.3, 127.5, 127.9, 129.4, 130.0, 132.3, 133.2, 148.1, 148.4, 155.3, 166.2.
ＭＳ−ＥＳＩ ｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：２５２．１（［ＭＨ］+，１８）、１６３．０（１００）
ＨＰＬＣ：方法Ａ、検出ＵＶ ２５４ｎｍ、化合物４９ ＲＴ＝１．１３分、ピーク面積 ８４．０％
【００４９】
化合物３００の製造
（±）−トレオ−２−フタルイミド−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン塩酸塩、化合物３００
（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩化合物２２（０．５１ｇ，１．６４mmol）をＫ2ＣＯ3の１Ｎ水溶液２０ｍＬにより処理し、ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ＝９０：１０の混合物で抽出した（５ｘ４０ｍＬ）。溶液ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、蒸発させて化合物２２の遊離塩基（０．３２３ｇ，８２．５％の収率）を白色の固体として得た。
１０ｍＬ容の丸底フラスコ中、無水フタル酸（０．２０３ｍｇ，１．３７３mmol）を化合物２２の遊離塩基（０．３２３ｇ，１．３７mmol）に加え、混合物を６５℃から１４５℃に加熱し、１４５℃で５分間攪拌した。冷却後、イエローブラックのゴム状物質を粗製物として得た。この粗製物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2,ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝１００：０〜９０：：１０）により精製した。溶媒を留去した後、白色の固体（±）−トレオ−２−フタルイミド−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オンＢＬＥ０４１５６Ａ（０．１５ｇ，３０％の収率）を白色の固体として得た。（±）−トレオ−２−フタルイミド−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オンＢＬＥ０４１５６Ａ（０．１３５ｇ，０．３７mmol）に、イソプロパノール（１０ｍＬ）中のＨＣｌの０．１Ｎ溶液を加え、混合物を２８℃でロータリーエバポレーター、次いで高真空ポンプにて蒸発乾燥させた。（±）−トレオ−２−フタルイミド−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン塩酸塩化合物３００（０．１４７ｇ，２４．５％の収率）を白色の固体として得た。
【化２４】
分子量：４０１．８４；収率：２４．５％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：２０１．８
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：１．６０−１．９０（ｍ,４Ｈ,２ｘＣＨ2）,２．９５−３．０９（ｍ,１Ｈ,ＣＨ2Ｎ）,３．３０−３．４７（ｍ,３Ｈ,ＣＨ2Ｎ）,５．３０（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝７．９Ｈｚ,ＣＨ）,５．８２（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝７．９Ｈｚ,ＣＨ）,７．８０（ｍ,４Ｈ,ＡｒＨ）,８．２５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝５．４Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．８１（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝５．２Ｈｚ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：２４．７,２７．１,４７．７,４７．８,５８．０,７０．６,１２４．８（２ｘＣ）,１２７．５（２ｘＣ）,１３２．６（２ｘＣ）,１３６．１（２ｘＣ）,１４２．５（２ｘＣ）,１６４．９,１６６．５,１６８．８．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：３６６．０（［ＭＨ］+,２２）,２１９．１（１００）,１４８．０（４７）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,ＲＴ＝３．８８ｍｉｎ,ピーク面積９８．７％．
【００５０】
化合物３０１の調製
ｔｅｒｔ−ブチル５−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメート、化合物２３７
Ｎ−Ｂｏｃ−アミノヘキサン酸（３４２ｍｇ，１．４８mmol）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液にｎ−メチルモルホリン（１６３μＬ,１．４８mmol）を加えた。溶液を５分間攪拌し、−１５℃に冷却し、イソブチルクロロホルメート（２１１μＬ,１．４８mmol）を滴加することにより処理した。この溶液をステンレススチールカニューレを用いて−１５℃のＴＨＦ（１０ｍＬ）中の（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩化合物２２（５００ｍｇ，１．４８mmol）およびＮ−メチル−モルホリン（４８９ｍｇ，１．４７mmol）の溶液に加えた。反応混合物を−１５℃に０．５時間保った後、２５℃にて２時間攪拌した。溶媒を蒸発させた後、残留物をＥｔＯＡｃとＨ2Ｏの間に分配し、ＮａＨ2ＰＯ4、ＮａＨＣＯ3飽和水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、０％〜１０％［ｖ／ｖ］ＭｅＯＨ（ＥｔＯＡｃ中）のグラジェントを用いるカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2）により精製してｔｅｒｔ−ブチル５−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメート化合物２３７（４５５ｍｇ，６９％の収率）を白色の固体として得た。
【化２５】
分子量：４４８．６；収率：６９％；白色の固体．
Ｒf：０．２０（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝９０：１０）．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ，δ）：１．０５−１．１５（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．３５−１．５５（ｍ,１３Ｈ,２×ＣＨ2+Ｃ（ＣＨ3）3）,１．７５−１．９５（ｍ,４Ｈ,２×ＣＨ2）,２．００−２．２０（ｍ,２Ｈ,Ｏ＝ＣＣＨ2）,３．０５（ｑ,２Ｈ,Ｊ＝６．７Ｈｚ,ｎ−ＣＨ2）,３．２０−３．３５（ｍ,１Ｈ,ｎ−ＣＨ）,３．３８−３．５０（ｍ,２Ｈ,ｎ−ＣＨ2）,３．６５−３．７５（ｍ,１Ｈ,ｎ−ＣＨ）,４．７２（ｂｓ,１Ｈ,ＮＨ）,４．９８（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝８．８Ｈｚ,Ｊ＝３．６Ｈｚ）,５．０８（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝３．３Ｈｚ,ＯＣＨ）,５．２３（ｂｓ,１Ｈ,ＯＨ）,６．５０（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝８．７Ｈｚ,ＮＨ）,７．３５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝６．０Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．５８（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝４．６Ｈｚ,Ｊ＝１．４Ｈｚ,ＡｒＨ）．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：４４９．２（［ＭＨ］+,３０）,３４９．２（１００）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出（２５４ｎｍ）,ＲＴ＝４．０３ｍｉｎ,ピーク面積９９．９％
【００５１】
６−アミノ−Ｎ−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド、化合物２３８
ｔｅｒｔ−ブチル５−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメート化合物２３７（８１ｍｇ，０．１８１mmol）のＣＨ2Ｃｌ2（８ｍＬ）溶液に０℃のＴＦＡ（２ｍＬ）を加え、０℃で２時間攪拌した。揮発性成分を蒸発させ残留物をＭｅＯＨ中のAmberlite−４００（ＯＨ-）懸濁液で処理した。濾過後、濾液を蒸発させて生成物をＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＨ4ＯＨ＝１０：５：０．４を用いるカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2）により単離して６−アミノ−Ｎ−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド化合物２３８（４０ｍｇ，６４％の収率）を白色の固体として得た。
【化２６】
分子量：４４８．６；収率：６４％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：１３４．４
Ｒf：０．３０（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＨ4ＯＨ＝１０：５：０．４）．
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3,δ）：１．１２−１．３０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．３０−１．５０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．５０−１．６５（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．６５−１．９５（ｍ,４Ｈ,ＣＨ2）,２．１０−２．３０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,２．５５−２．７０（ｔ,２Ｈ,Ｊ＝６．９Ｈｚ,ＣＨ2）,３．１０−３．２０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,３．２８−３．５０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,３．６０−３．７０（ｍ,１Ｈ,ＣＨ）,４．９５（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝５．１Ｈｚ,Ｊ＝８．４Ｈｚ,Ｏ−ＣＨ）,５．０２（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝５．０Ｈｚ,ＯＨ）,７．１１Ｈｚ（ｄ,Ｊ＝８．４８Ｈｚ,１Ｈ,ＡｒＨ）,７．３５（ｄｄ,２Ｈ,Ｊ＝４．４Ｈｚ,Ｊ＝１．５Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．５５（ｄｄ,Ｊ＝１．５Ｈｚ,Ｊ＝４．６Ｈｚ,２Ｈ,ＡｒＨ）．
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3,δ）：２４．０,２５．１,２５．８,２５．９,３２．５,３５．８,４１．７,４６．０,４６．９,５５．６,７２．６,１２１．３（２×Ｃ）,１４９．２,１４９．５（２×Ｃ）,１６８．９,１７３．７
【００５２】
（±）−トレオ−｛３−［３−（３−｛５−［１−（ヒドロキシ−ピリジン−４−イル−メチル）−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イル−エチルカルバモイル］−ペンチルカルバモイル｝−プロピルカルバモイル）−プロピルカルバモイル］−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ＴＴＡ０８１５６
Ｂｏｃ−ＧＡＢＡ−ＧＡＢＡ−ＧＡＢＡ−ＯＨ（３５４ｍｇ，０．９５mmol）をＣＨＣｌ3（４０ｍＬ）中、Ｅｔ3Ｎ（０．３ｍＬ,２．１mmol）およびＨＯＢＴ（１４５ｍｇ，１．０５mmol）と共に窒素下で４℃にて５分間攪拌した。ＥＤＣ（２０５ｍｇ，１．０５mmol）を加え、混合物を４℃にて１５分間攪拌した。６−アミノ−Ｎ−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（３３３ｍｇ，０．９５mmol）のＣＨＣｌ3（２０ｍＬ）溶液を滴加し、混合物を窒素下、４℃にて２時間および室温で１５時間攪拌した。ブライン（３０ｍＬ）を加え、生成物をＣＨ2Ｃｌ2（２００ｍＬ）により抽出した。有機層を２Ｎ ＮａＯＨの溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。濾過後、溶液を蒸発させ、乾燥させて粗製の黄色の油（４２０ｍｇ）を得た。カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2,ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ＝８５：１５）による精製後、（±）−トレオ−｛３−［３−（３−｛５−［１−（ヒドロキシ−ピリジン−４−イル−メチル）−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イル−エチルカルバモイル］−ペンチルカルバモイル｝−プロピルカルバモイル）−プロピルカルバモイル］−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルＴＴＡ０８１５６（２６０ｍｇ，３９％の収率）を淡黄色の油状物として得た。
【化２７】
分子量：７０３．８７；収率：３９％；淡黄色の油．
Ｒf：０．２０（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ＝９：１）．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3,δ）：１．１７−１．２５（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．４０−１．５６（ｍ,１３Ｈ,２ｘＣＨ2,３ｘＣＨ3）１．７３−１．８５（ｍ,１０Ｈ,５ｘＣＨ2）,２．１３−２．２９（ｍ,８Ｈ,４ｘＣＨ2ＣＯ）,２．４０（ｓ,１Ｈ,ＯＨ）,３．０９−３．６７（ｍ,１２Ｈ,６ｘＣＨ2−Ｎ）,４．９１（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝４．９Ｈｚ,Ｊ＝８．５Ｈｚ,ＣＨ−Ｎ）,５．０５（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝５．１Ｈｚ,ＣＨ−Ｏ）,５．１５（ｔ,１Ｈ,Ｊ＝５．８Ｈｚ,ＮＨ）,７．０１−７．０４（ｍ,１Ｈ,ＮＨ）,７．１４（ｔ,１Ｈ,Ｊ＝５．６Ｈｚ,ＮＨ）,７．３３（ｔ,１Ｈ,Ｊ＝５．６Ｈｚ,ＮＨ）,７．３７（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝６．０Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．５５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝６．０Ｈｚ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ, δ）：２４．０,２４．９,２５．６,２５．８,２６．１,２６．５,２８．４（３ｘＣ）,２９．０,３３．５,３３．７,３５．８,３８．６,３８．８,３９．１,３９．６,４６．１,４６．８,５５．６,７２．７,７９．５,１２１．５（ｘ２）,１４９．１,１４９．５（ｘ２）,１５６．７,１６８．８,１７３．１,１７３．３,１７３．４,１７３．５．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：７０４．３（［ＭＨ］+,１００）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,ＴＴＡ０８１５６ＲＴ＝３．９０ｍｉｎ,ピーク面積９９．０％．
【００５３】
６−（５−（（３ａＲ,６Ｓ,６ａＳ）−ヘキサヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−チエノ［３,４−ｄ］イミダゾール−６−イル）−ペンタノイルアミノ）−ブチリルアミノ−ブチリルアミノ−ブチリルアミノ−Ｎ−（（１Ｒ,２Ｓ）−＆（１Ｓ,２Ｒ）−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド、化合物３０１
（±）−トレオ−｛３−［３−（３−｛５−［１−（ヒドロキシ−ピリジン−４−イル−メチル）−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イル−エチルカルバモイル］−ペンチルカルバモイル｝−プロピルカルバモイル）−プロピルカルバモイル］−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルＴＴＡ０８１５６（２６０ｍｇ，０．３７mmol）をＭｅＯＨ（５ｍＬ）中、３７％ＨＣｌ（０．３ｍＬ,３．７０mmol）と共に４０℃にて１５分間攪拌した。ＭｅＯＨを蒸発させ残留物を真空乾燥させた。AmberliteＩＲＡ−４００（Ｃｌ-）（６ｍＬ、８．４mmol）を水（２ｘ１０ｍＬ）、０．５Ｎ ＮａＯＨ（３ｘ２０ｍＬ）、水（２ｘ１０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（３ｘ１０ｍＬ）で順次洗浄した。前に得られた残留物と洗浄したAmberliteをＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中室温で５分間攪拌した。濾過後、ＭｅＯＨを蒸発させてアミンを遊離塩基の形態で得た（２１０ｍｇ、９４％の収率）。ビオチン（９５ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌｅ）をＣＨＣｌ3／ＤＭＦ（４０ｍＬ／１０ｍＬ）およびＥｔ3Ｎ（０．１１ｍＬ、０．７７mmol）、ＨＯＢＴ（５３ｍｇ、０．３８mmol）の混合物に溶解し、ＥＤＣ（７５ｍｇ、０．３８mmol）を加え、溶液を窒素下、室温で２時間攪拌した。ＣＨＣｌ3（１０ｍＬ）中の前に得られたアミン（２１０ｍｇ，０．３５mmol）を滴加し、混合物を窒素下室温で２４時間攪拌した。ブライン（４０ｍＬ）、２ＮＮａＯＨ（１０ｍＬ）、ＣＨＣｌ3（５０ｍＬ）を加え、生成物をＣＨＣｌ3／ＤＭＦ（５０ｍＬ／１０ｍＬ）でさらに３回抽出することにより抽出した。集めた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、留去して粗製の黄色の油（１６０ｍｇ，５２％の収率）を得た。粗製の油をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2,ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＨ3＝９５：５：０．１〜８５：１５：０．３）により精製し、留去後６−（５−（（３ａＲ,６Ｓ,６ａＳ）−ヘキサヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−チエノ［３,４−ｄ］イミダゾール−６−イル）−ペンタノイルアミノ）−ブチリルアミノ−ブチリルアミノ−ブチリルアミノ−Ｎ−（（１Ｒ,２Ｓ）−＆（１Ｓ,２Ｒ）−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（ジアステレオ異性体混合物比１：１）を淡黄色の油状物として得た（４５ｍｇ，１５％の収率）．
【化２８】
分子量：８３０．０５；収率：１５％；淡黄色の油．
Ｒf：０．３０（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＨ3＝８５：１５：０．３）．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：１．２６−１．８２（ｍ,２２Ｈ,１１ｘＣＨ2）,２．１８−２．２５（ｍ,１０Ｈ,５ｘＣＨ2ＣＯ）,２．７０（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝１２．７Ｈｚ,ＣＨ2−Ｓ）,２．９２（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝４．８Ｈｚ,Ｊ＝１２．７Ｈｚ,ＣＨ2Ｓ）,３．０６−３．８０（ｍ,１３Ｈ,６ｘＣＨ2−Ｎ,ＣＨ−Ｓ）,４．２９（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝４．４Ｈｚ,Ｊ＝７．８Ｈｚ,ＣＨ−Ｎ）,４．４８（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝４．９Ｈｚ,Ｊ＝７．８Ｈｚ,ＣＨ−Ｎ）,４．８２（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝６．４Ｈｚ,ＣＨ−Ｎ）,５．０１（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝６．４Ｈｚ,ＣＨ−Ｏ）,７．４９（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝５．５Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝４．６Ｈｚ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：２５．０,２６．５,２６．８,（２ｘＣ）,２６．９（２ｘＣ）,２７．５,２９．５,２９．８,３０．１,３４．３,３４．４（２ｘＣ）,３６．４,３６．８,３９．８,３９．９,４０．１,４１．１,４７．２,４７．３,５７．１,５８．３,６１．６,６３．４,７３．１,７４．２,１２３．５（２ｘＣ）,１４９．９（２ｘＣ）,１５２．８,１６６．１,１７０．０,１７５．３,１７５．４（２ｘＣ）,１７６．０,１７６．１．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：８３０．２．（［ＭＨ］+,８５）,２１９．１（１００）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,ＲＴ＝３．７０ｍｉｎ,ピーク面積９９．８％．
【００５４】
化合物３０２の調製
（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩、化合物３０２
（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩化合物２２（５００ｍｇ，１．６１mmol）を、水素雰囲気下、ＰｔＯ2水和物（Ｐｔ含量７９−８４％,１００ｍｇ）と共にＡｃＯＨ（１０ｍＬ）中、室温にて２４時間攪拌した。セライト（登録商標）５４５にて濾過後、濾液を蒸発させ残留物を減圧下で乾燥させてベージュ色の固体（４５０ｍｇ，８８．２％の収率）を得た。粗製物をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中Amberlite（Ｃｌ−）ＩＲＡ−４００（９ｍＬ,１２．７ｍｍｏｌ、予め０．５ＮＮａＯＨ次いで水およびＭｅＯＨで洗浄）と共に室温にて１５分間攪拌した。混合物を濾過し、濾液を蒸発させ、遊離塩基の形態をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2,ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：２０％ＮＨ3（Ｈ2Ｏ中）＝７０：３０：８）により精製して（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オンＴＴＡ０８１４４Ａ（２２６ｍｇ，５８％収率）を得た。ＭｅＯＨ中ＨＣｌ処理して（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩化合物３０２（１９０ｍｇ，２８％の収率）を白色の固体として得た。
【化２９】
分子量：３１４．２５；収率：２８．０％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：１９７．５
Ｒf：０．２０（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：２０％ＮＨ3（Ｈ2Ｏ中）＝７０：３０：８,遊離塩基）．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：１．５７−２．００（ｍ,９Ｈ,４ｘＣＨ2＆ＣＨ）,２．９４−３．０８（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2−Ｎ）,３．４６−３．７７（ｍ,７Ｈ,３ｘＣＨ2−Ｎ,ＣＨ−Ｎ）,４．３３（ｓ,１Ｈ,ＣＨ−Ｏ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ, δ）：２２．５,２３．４,２４．１,２４．７,３５．２,４２．２,４２．５,４５．４,４５．５,５２．０,６９．８,１６４．６．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：２４２．２（［ＭＨ］+,４５）,１２９．１（１００）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２１４ｎｍ,ＲＴ＝０．７０ｍｉｎ,ピーク面積９８．０％．
【００５５】
化合物７０の調製
方法Ｄ（ＣＨ2Ｃｌ2中）：
＋４℃の１０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中のＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩化合物２２（０．１５ｇ，０．４９mmol）の攪拌した溶液にトリエチルアミン（２００μL,１．４５mmol）を加え、ＣＨ2Ｃｌ2３ｍＬ中の酸クロリドをゆっくりと加えた。混合物を窒素下、室温にて一晩攪拌した後、ＣＨ2Ｃｌ2と１Ｎ炭酸ナトリウム水溶液との間に分配した。有機層を蒸発させ、得られた残留物をシリカのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝９５：５）により精製した。０℃のＭｅＯＨ中、ジエチルエーテル中の０．３ＭＨＣｌを加え、溶媒を留去し、アシル化化合物を乾燥して塩酸塩を得た。
【００５６】
ＤＬ−トレオ−３−ヒドロキシ−１−オキソ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバミン酸ベンジル塩酸塩、化合物５８
化合物をベンジルクロロホルマート（９１ｍｇ、０．５３mmol）を用いて、方法Ｇにしたがって調製した。精査して、ＤＬ−トレオ−３−ヒドロキシ−１−オキソ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバミン酸ベンジル塩酸塩、化合物５８を白色の固体（９０ｍｇ、収率４６％）として得た。
【化３０】
分子量：４０５．９；収率：４６．０％；白色の固体；融点（℃）：１８５．３
Ｒf：０．３８（ＭｅＯＨ：ＥｔＯＡｃ＝１０：９０）、遊離の塩基
1H-NMR (CD3OD,δ): 1.87-2.03 (m, 4H, 2xCH2), 3.40-3.48 (m, 2H, CH2N), 3.56-3.62 (m, 2H, CH2N), 4.85-5.04 (m, 3H, CH2O, CHO), 5.39 (d, 1H, J=2.8 Hz, NH), 7.26-7.36 (m, 5H, ArH), 8.12 (d, 2H, J=6.0 Hz, ArH), 8.69 (d, 2H, J=6.0 Hz, ArH).
13C-NMR (CD3OD,δ): 25.0, 27.0, 47.5, 48.0, 58.8, 67.9, 72.7, 126.6 (2xC), 129.1, 129.2, 129.5, 138.1, 141.9 (2xC), 158.1, 164.4, 169.2.
ＭＳ−ＥＳＩ ｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：３７０．１（［ＭＨ］+，１５）、２１９．０（１００）
ＨＰＬＣ：方法Ａ、検出ＵＶ ２５４ｎｍ、化合物５８ ＲＴ＝４．１０分、ピーク面積 ９９．８％
【００５７】
トランス−３−メチル−５−ピリジン−４−イル−４−（ピロリジン−１−カルボニル）−オキサゾリジン−２−オン塩酸塩化合物７０
６℃のＤＭＳＯ：ＤＭＦ（２ｍＬ：０．２ｍＬ）混合物中のＤＬ−トレオ−３−ヒドロキシ−１−オキソ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバメート化合物５８遊離塩基（０．１０ｇ，０．２７mmol）の攪拌した溶液に、ｔｅｒｔ−ＢｕＯＫ（３８ｍｇ，０．３３mmol）および硫酸ジメチル（２６μＬ,０．２７mmol）をゆっくりと加えた。窒素下、室温で１５時間混合物を攪拌し、氷水（５ｍＬ）、１Ｍ Ｎａ2ＣＯ3（２ｍＬ）および酢酸エチル（１００ｍＬ）の間に分配した。有機相をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。酢酸エチルを留去した後、粗製物を乾燥して粗製の遊離塩基を油として得た。０℃のＭｅＯＨ中、ジエチルエーテル中０．３ＭＨＣｌ溶液を用いて塩酸塩を得た。ジエチルエーテル中で沈殿させて、トランス−３−メチル−５−ピリジン−４−イル−４−（ピロリジン−１−カルボニル）−オキサゾリジン−２−オン塩酸塩を淡黄色の固体（８０ｍｇ，９５％の収率）として得た。ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ（１０：１）中でさらに結晶化させて化合物７０を白色の固体（１６ｍｇ，２０％の収率）として得た。
【化３１】
分子量：３１１．７６；収率：２０％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：１６８．６．
Ｒf：０．１５（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝９５：５）,遊離塩基．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：１．９０−２．１０（ｍ,４Ｈ,２ｘＣＨ2）,２．８４（ｓ,３Ｈ,ＣＨ3）,３．４７−３．７０（ｍ,４Ｈ,ＣＨ2Ｎ）,４．８２（ｍ,１Ｈ,ＣＨ）,５．８９（ｍ,１Ｈ,ＣＨ）,８．１７（ｍ,２Ｈ,ＡｒＨ）,８．９７（ｍ,２Ｈ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ, δ）：２４．９,２７．１,３０．２,４８．１,６４．９,７６．３,１２５．６（２ｘＣ）,１４３．８（２ｘＣ）,１５９．１,１６０．１,１６７．３．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：２７６．１（［ＭＨ］+,２５）,１７７．１（１００）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,化合物７０ＲＴ＝２．００ｍｉｎ,ピーク面積９７．０％．
【技術分野】
【０００１】
優先権主張：本出願は、２００５年１月２６日に出願した米国仮出願第６０／６４７２７１号の優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、鎮痛活性およびある場合には免疫賦活活性を有する化合物に関する。
【０００３】
また、本発明は、哺乳動物において疼痛を緩和もしくは除去するかつ／または哺乳動物において免疫系を賦活する活性成分として、これらの化合物を含有する医薬組成物、ならびに当該医薬組成物を鎮痛薬および／または免疫賦活薬として使用する方法にも関するものである。
【背景技術】
【０００４】
「３−アリール−３−ヒドロキシ−２−アミノ−プロピオン酸アミドの誘導体、３−ヘテロアリール−３−ヒドロキシ−２−アミノ−プロピオン酸アミドの誘導体、１−アリール−１−ヒドロキシ−２，３−ジアミノ−プロピルアミンの誘導体、１−ヘテロアリール−１−ヒドロキシ−２，３−ジアミノ−プロピルアミン」としての一般的な定義の１種または複数に属するいくつかの化合物が、特許および科学文献で知られている。
【０００５】
例えば、米国特許出願第２００３／０１５３７６８号；第２００３／００５０２９９号は、上記の既知の化合物のいくつかの例を開示している。これらの参考文献のＮ−アシル化合物は、Ｎ−アシルスフィンゴシングルコシルトランスフェラーゼ阻害剤として有用であるといわれ、それらのアミドおよび還元化合物がそれらの調製における中間体として記載されている。これらの参考文献の化合物の例示的な特定の例を以下に示す。
【化１】
【０００６】
出版物、Shinら, Tetrahedron Asymmetry, 2000, 11, 3293-3301は、以下の化合物を開示している。
【化２】
【０００７】
本発明の方法で使用するＬ−トレオ−ＰＤＭＰおよびいくつかのその他の既知の化合物は、純粋な鏡像異性体およびラセミ体で適用可能に、Matreya, LLC(Pleasant Gap、ペンシルベニア州）から市販されている。
【化３】
【０００８】
米国特許第５９４５４４２号、第５９５２３７０号、第６０３０９９５号および第６０５１５９８号は、同一または関連の開示にも基づいていることから、いずれも相互に関連しているが、これらは、上記で示した既知の化合物に構造が類似している化合物を開示している。これらの米国特許の参考文献の化合物は、グルコシルセラミド（ＧｌｃＣｅｒ）合成酵素の阻害剤であるといわれている。
【０００９】
出版物、Journal of Labelled Compounds & Radiopharmaceuticals(1996), 38(3), 285-97は、以下の式の化合物を開示している。
【化４】
【００１０】
公開されているＰＣＴ出願第ＷＯ０１／３８２２８号は、クロマトグラフィーの方法に関連して
【化５】
を開示している。
【００１１】
Latvijas PSR Zinatnu Akademijas Vestis, Kimijas Serija(1965)(4), 474-7において、Kastronらは、以下の化合物を開示している。
【化６】
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
重要なことには、本発明の発明者らの知る限りにおいては、従来技術の化合物のいずれもが、従来技術においては、鎮痛薬または免疫賦活薬としては開示されていない。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、次式
【化７】
（Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキル）；
【化８】
【化９】
（Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキル）；
【化１０】
（Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキル）；
【化１１】
（式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキル）；
【化１２】
（式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキル）
で表される化合物および該化合物の全ての製薬的に許容される塩に関する。
【００１４】
また、本発明の対象は、上記の新規な化合物を含有する、哺乳動物において鎮痛薬および／または免疫賦活薬として使用する医薬組成物、ならびに当該医薬組成物を鎮痛薬または免疫賦活薬として使用する方法である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明の化合物の一般的な説明は、本特許出願の課題を解決するための手段で述べられている。本発明のいくつかの化合物は、１個または複数の不斉中心を含有し、そのため、そのような化合物には、鏡像異性体およびジアステレオ異性体が存在することができる。事実上、ほとんどの本発明の化合物は、互いに隣接する２個の不斉炭素を有し、したがって、エリトロ形またはトレオ形として存在することができ、これらの２種の形のそれぞれが、右旋性（Ｄ）または左旋性（Ｌ）の鏡像異性体を有する。本発明によれば、通常、鎮痛活性を得るには、トレオ形が好ましいが、特に別途述べない限り、本発明の範囲には、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、およびジアステレオ異性混合物またはラセミ混合物の全てを含む。上記に照らして、本出願においては、「ＤＬ」または「（＋／−）」または「（±）」が指定されている場合には、純粋な右旋性鏡像異性体、純粋な左旋性鏡像異性体、および２種の鏡像異性体が均等または不均等な割合で存在する混合物を含む、全てのラセミ混合物を含むことを明確に理解されたい。さらに、簡素化のために、下記の例においてなど、構造式の多くにおいて、鏡像異性体の１種のみが実際に示されているが、「ＤＬ」または「（＋／−）」または「（±）」が指定されている場合には、当該式で実際に示されている構造の鏡像異性体（鏡映像）も含まれる。
【００１６】
例えば、
【化１３】
である。
【００１７】
したがって、上記の例では、鏡像異性体の１種のみが示されているが、「ＤＬ」（または「（＋／−）」または「（±）」）が、式の下に指定されているので、その光学異性体
【化１４】
および２種の光学異性体のラセミ混合物の全ても含まれる。
【００１８】
本発明のいくつかの化合物の場合には、トレオ形、およびエリトロ形の一部において、一方の鏡像異性体が、同一の対の他方の鏡像異性体よりも、鎮痛薬として顕著に活性が高いことがある。このため、他方より顕著に活性が高い、単離された鏡像異性体を、たとえ同一の化合物のラセミ混合物または単一な１つの鏡像異性体が従来技術にすでに記載されている場合であっても、新規な発明組成物と見なすものとする。
【００１９】
本発明の新規な化合物のいくつかは、３個以上の不斉中心を含有していてもよい。
【００２０】
広い意味では、異性体、鏡像異性体およびラセミ混合物の全てが、本発明の範囲に属するが、読者である当業者には、上記の例を記憶にとどめれば、個々の記載されている例の範囲が容易に理解されるであろう。
【００２１】
化合物の一般的な説明および定義における「アルキル」という用語には、直鎖および分枝鎖のアルキル基が含まれる。
【００２２】
一般に、本発明の化合物は、薬学的に許容される酸または塩基と塩を形成することができ、化合物の薬学的に許容される塩も、本発明の範囲に属する。
【００２３】
さて、本発明の新規な化合物について述べると、上でおよび特許請求の範囲に示したＲ4基は好ましくはＨである。
【００２４】
本明細書中、本発明の最も好ましい新規な化合物を以下の表中の構造式および／または例示的な化合物の、鎮痛薬として作用する能力に関する活性を示す説明を付けて開示する。
【００２５】
生物学的活性、投与形態
本発明の新規な化合物は、哺乳動物において、鎮痛活性および／または免疫賦活活性を有する。背景技術に記載した化合物のいくつかは、当技術分野においては、それ自体が既知であるが、本発明の発明者らによって、哺乳動物において鎮痛効果も示すことが発見された。本発明の発明者らの知る限りにおいては、これらの既知の化合物の鎮痛活性または免疫賦活性の生物学的活性は、今回発見されるまでは知られていなかった。
【００２６】
慢性の疼痛（特に、末梢性神経障害）における化合物の鎮痛効果の測定に用いる、当技術分野で認められているモデルまたはアッセイは、ＫｉｍおよびＣｈｕｎｇ １９９２、Ｐａｉｎ １５０、ｐｐ ３５５−３６３（Ｃｈｕｎｇモデル）として知られるモデルである。このモデルでは、実験動物の片側のＬ５（および所望によりＬ６）脊髄神経を外科的に結紮することになる。ラットは、手術から回復するにつれ、体重が増加し、正常なラットに類似する通常の活動のレベルを示す。しかし、これらのラットは、足においては異常を示すようになり、後足が中等度に裏返り、つま先が一緒になって離れなくなる。より重要な点は、手術を受けた側の後足では、機械的刺激に対する感受性の閾値が低下し、かすかな接触感の代わりに疼痛を感じるようになることである。正常であれば無痛性の接触に対するこのような感受性は、「接触性アロディニア」と呼ばれ、手術後１週間以内に発生し、少なくとも２ヶ月は持続する。アロディニア応答には、刺激から逃れるために手術を受けた後足を持ち上げること、足をなめること、および足を何秒間も空中に保つことが含まれる。これらの応答はいずれも、対照群では、通常認められない。
【００２７】
接触性アロディニアを発生させるために、ラットに手術前に麻酔をかける。術部を剪毛し、ベタダインまたはノボケインのいずれかを用いて手術に備える。第８胸椎から仙骨に向かって下方に切開する。Ｌ４〜Ｓ２のレベルにおいて、脊椎（左側）から筋肉組織を分離させる。Ｌ６椎の位置を決定し、横突起を小型の骨鉗子を用いて注意深く取り除いて、Ｌ４〜Ｌ６脊髄神経を露出させる。Ｌ５およびＬ６脊髄神経を単離し、６−０絹糸を用いて、しっかりと結紮する。対照として、同一の処置を右側に施すが、脊髄神経の結紮は行なわない。
【００２８】
止血が完全であることを確認した後、創部を縫合する。少量の抗生物質の軟膏を切開部に施用し、調節されている熱−温度ランプ下にある回復用のプラスチック製ケージに、ラットを移す。
【００２９】
手術後少なくとも７日後である実験日には、通常、６匹のラットを各試験群に用い、試験薬剤を腹腔内注射（ｉ．ｐ．）または経口胃管栄養法（ｐ．ｏ．）によって投与する。ｉ．ｐ．投与では、化合物を水中で調製し、１ｍｌ／ｋｇ体重の容量で腹腔内に注射することによって投与する。ｐ．ｏ．投与では、化合物を水中で調製し、１ｍｌ／ｋｇ体重の容量で、食道を介して胃内にゆっくり挿入する１８ゲージの、３インチ胃管栄養針を使用して投与する。
【００３０】
接触性アロディニアをフォンフレイの触毛を介して評価する。これは、一連の硬度が少しずつ異なる細い毛である。金網製の底を有するプラスチック製のケージにラットを入れ、約３０分かけて順応させる。投与前のベースラインを確立するために、フォンフレイの触毛をラットの後足の足底の中央部分に、わずかなバックリングに十分な力で、網を介して垂直に接触させ、６〜８秒間保持する。接触させる力は、０．４１〜１５．１グラムの範囲であるように計算されている。足が素早く引っ込む場合には、陽性の反応と見なされる。正常な動物は、この範囲の刺激には応答しないが、外科的に結紮した足は、１〜２グラムの毛に応答して引っ込む。足の引っ込め５０％閾値を本明細書に参照によって組み入れられているDixon, W.J.,Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.20:441-462(1980)の方法を用いて求める。投与前と投与１５、３０および６０分後に、接触性アロディニアを測定する。投与後の閾値を投与前の閾値と比較し、１５．１グラムの正常閾値に基づいて、接触感受性の低下率を計算する。
【００３１】
以下の表１に、Ｃｈｕｎｇモデルにおいて、本発明の例示的な化合物を用いて得られた疼痛の低下の程度を示す。化合物の腹腔内（ｉ．ｐ．）および／または静脈内（ｉｖ）投与の用量は、術後、１μｇ／ｋｇ〜３００μｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇの範囲であり、アロディニアの低下率のピークを投与１５、３０または６０分後に測定し、表に示した。ラットのＣｈｕｎｇモデルにおいては、アロディニアの低下は、最低でも２０％とし、データは、（投与後１５分、３０分または６０分の３時点のいずれかにおける）アロディニアの低下率の最大値として表した。群間（投薬処置群対食塩水処置群）の比較を両側独立２標本ｔ検定を用いて行なった。３００μｇ／ｋｇを腹腔内投与した後、鎮痛性を統計的に示さなかった化合物は、示されていないが、これらにも鎮痛性がある場合がある。１００ｍｇ／ｋｇで有意な鎮痛性を示さない化合物は、鎮痛性があるとは見なさない。
【表１】
【００３２】
免疫の賦活の測定に用いる、当技術分野で認められている方法は、化合物の全身投与を含み、恐らく血液リンパ細網系の上方制御によって、免疫系を賦活する能力を試験する。この上方制御によって、Ｔ細胞およびＢ細胞の両方の系列のリンパ球の数を増加させることが可能であると思われる。出願人は、免疫賦活のこの生物学的理論に縛られるつもりはないが、実験用のラットに試験化合物を投与し、それに応答する脾臓の大きさを試験することによって、化合物の実際の免疫賦活効力をｉｎ ｖｉｖｏにおいて実証することができる。このように、脾臓サイズの増大から、化合物が免疫賦活薬として有望であることが示される。一般に、２００ｍｇ／ｋｇまたはそれ以下の投与により脾臓を拡大させる化合物はいずれも、免疫賦活薬と見なすことができる。
【００３３】
投与形態：
本発明の化合物を薬学的有効量で投与することができる。通常、そのような投与量は、所望の治療効果を達成するために必要とする最少の用量である。慢性疼痛の治療においては、この量は、およそ、疼痛によって生じる不快感を低減させるのに必要とする量であろう。一般に、ヒト成人では、そのような用量は、０．１〜５０００ｍｇ／日の範囲であり、より好ましくは、１〜３０００ｍｇ／日の範囲であり、さらにより好ましくは、１０〜１０００ｍｇ／日の範囲である。しかし、所与の症例において投与する化合物の実際の量は、疼痛の重症度、患者の年齢および体重、患者の全身状態、疼痛の原因、ならびに投与経路など、関連する状況を考慮して医師が決定するものとする。
【００３４】
本化合物は、哺乳動物、特に、ヒトにおいて、疼痛の治療に有用である。好ましくは、本化合物は、錠剤、液剤、カプセル剤、散剤など、いずれかの許容される剤型で、経口的に患者に投与される。しかし、その他の経路が望ましい場合または必要である場合があり、特に、患者が悪心を訴える場合がそうである。そのようなその他の経路として、例外なしに、経皮、腹腔内、非経口、皮下、鼻腔内、くも膜下腔内、筋肉内、静脈内および直腸内による送達の形態があげられる。本発明の別の態様では、本発明の新規な化合物と、これらの化合物の薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される賦形剤とを含む治療用組成物を対象とする。そのような賦形剤は、担体または希釈剤となることができる。多くの場合、これを活性のある化合物と混合する、またはこれで活性のある化合物を希釈もしくは封入する。希釈剤の場合、この担体は、活性のある化合物に対して、賦形剤またはビヒクルとして作用する固体、半固体、または液体の材料であることができる。処方は、湿潤剤、乳化剤、保存剤、甘味剤、および／または嬌味剤も含むことができる。眼科用または注入用の場合、多くの場合、処方の浸透圧を変化させるために、処方は、１種または複数の塩を含有するであろう。
【００３５】
本発明の別の態様では、本発明の対象は、疼痛、特に、慢性疼痛を１種または複数の、本発明の新規な、もしくはそうでなければ既知の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩をそれを必要とする哺乳動物に投与することによって治療する方法である。上記で示したように、多くの場合、本化合物は、所望の送達形態に合致した剤型に製剤化される。
【００３６】
免疫賦活薬である本発明の化合物は、鎮痛活性を有する化合物と同一の原理に基づいて、症例毎および／または種毎に、ヒトの場合には、時に、患者毎に、最適な用量で投与される。一般に、有効量は、１０μｇ／ｋｇ〜２００ｍｇ／ｋｇの範囲であろう。
【００３７】
本発明の化合物を得るための合成方法
本発明の化合物を以下の実験例に記載する合成方法、または本開示に照らせば当業者には容易に明らかになるであろう、以下に記載する実験的方法の変法を利用して合成することができる。より具体的には、本発明の各化合物の合成は、Ｒ4がＨである具体的な化合物について記載する。当業者は、Ｒ4が、１〜６炭素のアルキルであるかまたはＲ5が１〜６炭素のアルキルであるＣＯ−Ｒ5である化合物が、それぞれアルキル化またはアシル化等の当分野に周知の製造方法によって容易に製造することができることを容易に理解する。また、当業者は、ヒドロキシ基のアルキル化またはアシル化を実施するにあたり、アミノ基等の他の基が保護に必要であり得ること、この保護基を後に当分野で周知の方法によって脱離することができることを容易に理解する。ある場合においては、ヒドロキシ基のアルキル化またはアシル化を、本発明の化合物に導く合成の過程における中間体に対して行うことができる。
【００３８】
一般論
Ａｄｖａｎｃｅ ３００分光計（Ｂｒｕｋｅｒ製）を用いて、室温で1Ｈ ＮＭＲスペクトルを記録した。Ｗａｔｅｒｓ ２５２５ポンプ、Ｗａｔｅｒｓ ２６９６フォトダイオードアレイ検出器およびＸＴｅｒｒａカラム（特許第１８６０００４８２号、５μｍ、Ｃ１８、４．５×５０ｍｍ）を備えるＷａｔｅｒｓ Ａｕｔｏｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍを使用して、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって、化合物を分析した。使用したＨＰＬＣ法では、７分間で、溶媒Ｂの濃度を５％から１００％に変化させた。溶媒Ａは、０．０５％ＴＦＡを有する水であり、溶媒Ｂは、０．０５％ＴＦＡを有するＣＨ3ＣＮであった（方法Ａ）。
Ｂｕｃｈｉ Ｂ−５４５型融点測定装置を用いて、融点を測定したが、補正はしなかった。反応生成物を単離するために、回転式真空蒸発器を使用して溶媒を蒸発させて除去した。水浴の温度は、４０℃以下とした。
【００３９】
一般的な合成経路
本発明の化合物を一般的な意味では直下に、さらにより詳細には本出願の実験例の項に記載する合成法を利用することによって、または本開示に照らせば当業者には容易に明らかになるであろう、以下に記載する一般的なおよび実験例の方法の変法によって合成することができる。
【００４０】
好ましい化合物の合成に関する詳細な説明（実験例）
化合物１９の調製
２−イソシアノ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン、ＢＬＥ ０４０９８
イソシアノ酢酸メチル（９６％、工業用グレード、５．０ｇ、４７．８mmol）に、冷却（０℃）および撹拌しながら、ピロリジン（６．５ｍＬ、７８mmol）をゆっくり添加した。混合物を引き続き冷却しながら、１．５時間撹拌し、次いで、濃縮した。得られた油をＣＨ2Ｃｌ2：ヘキサンから、２回にわたり共蒸発させて、残留しているピロリジンを除去した。２−イソシアノ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン、ＢＬＥ ０４０９８を黄色の固体（６．８５ｇ、収率９８％）として得た後、精製せずに、次の工程で使用した。
【化１５】
分子量：１３８．１７；収率：９８％；黄色の固体；融点（℃）＝７３．９
1H-NMR (CDCl3,δ): 1.81-2.08 (m, 4H, 2xCH2), 3.35-3.45 (m, 2H, -NCH2), 3.50-3.60 (m, 2H, -NCH2), 4.23 (s, 2H, CH2CO).
【００４１】
一般的方法Ｂ：トランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、ＢＬＥ ０４１１０Ｂの調製による例示
メタノール（１０ｍＬ）中に水酸化カリウム（０．５５ｇ、９．８０mmol）を含む溶液に、冷却（０℃）および撹拌しながら、３−ピリジンカルボキサルデヒド（１．０３ｍＬ、１０．８４mmol）および２−イソシアノ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン、ＢＬＥ ０４０９８（１．５０ｇ、１０．８６mmol）の混合物を添加した。溶液を０℃で３時間撹拌し、次いで、濃縮した。残滓を酢酸エチル（１００ｍＬ）と水とに分配した。有機層を２回のさらなる酢酸エチル抽出液（１００ｍＬ、２回）と合わせ、塩化ナトリウム水溶液で洗浄、ＭｇＳＯ4上で乾燥、ろ過後、蒸発させた。濃縮により粗生成物を得、これをシリカ上のカラムクロマトグラフィー（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ＝９８：２）によって精製して、トランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、ＢＬＥ ０４１１０Ｂを淡黄色の固体（０．９５ｇ、収率３９％）として得た。
【化１６】
分子量：２４５．２８；収率：３９％；淡黄色の固体；融点（℃）：１０７．０
1H-NMR (CDCl3,δ): 1.78-2.10 (m, 4H, 2xCH2), 3.40-3.61 (m, 3H, CH2N), 3.90-4.04 (m, 1H, CH2N), 4.59 (dd, 1H, J=7.7 Hz, J=2.2 Hz, CH-N), 6.21 (d, 1H, J=7.7 Hz, CH-O), 7.04 (d, 1H, J=2.2 Hz, O-CH=N), 7.33 (m, 1H, ArH), 7.64 (m, 1H, ArH), 8.59 (d, 2H, J=2.8 Hz, ArH).
13C-NMR (CDCl3,δ): 24.2, 26.0, 46.4, 46.6, 75.7, 79.3, 123.7, 133.5, 135.3, 147.6, 149.9, 155.2, 166.2.
【００４２】
トランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−４−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、化合物１９
化合物１９をピリジン−４−カルバルデヒド（１．８８ｍＬ、１９．７６mmol）、メタノール（１８ｍＬ）中のＫＯＨ（１．０１ｇ、１８mmol）および２−イソシアノ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン、ＢＬＥ ０４０９８（２．７３ｇ、１９．７６mmol）を用いて、方法Ｂにしたがって調製した。残滓を酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（１５０ｍＬ）とに分配した。有機層をさらなる酢酸エチル抽出液（１５０ｍＬ、２回）と合わせ、塩化ナトリウム水溶液で洗浄（１５０ｍＬ、２回）、ＭｇＳＯ4上で乾燥、ろ過後、蒸発させた。トランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−４−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、化合物１９を白色の固体（４．３２ｇ、収率９８％）として得た。
【化１７】
分子量：２４５．２８；収率：９８％；白色の固体；融点（℃）＝６９．２
Ｒf：０．６５（ＭｅＯＨ：ＣＨ2Ｃｌ2＝１０：９０）
1H-NMR (CDCl3,δ): 1.78-2.06 (m, 4H, 2xCH2), 3.44-3.60 (m, 3H, CH2N), 3.90-4.01 (m, 1H, CH2N), 4.52 (dd, 1H, J=7.9 Hz, J=2.2 Hz, CH-N), 6.19 (d, J=7.9 Hz, 1H, CH-O), 7.03 (d, 1H, J=2.2 Hz, N=CH-O), 7.24 (dd, 2H, J=4.5 Hz, J=1.5 Hz, ArH), 8.61 (dd, 2H, J=4.5 Hz, J=1.5 Hz, ArH).
【００４３】
化合物５０の製造
一般的方法Ｃ：ＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−３−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩、化合物２０の調製による例示
メタノール（１０ｍＬ）中のトランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、ＢＬＥ ０４１１０Ｂ（０．９３２ｇ、３．８０mmol）に、３７％塩酸（１．２ｍＬ）を添加した。混合物を２．２５時間加熱（５０℃）した後、反応混合物を濃縮し、粗生成物を酢酸エチルと共に、２回にわたり共蒸発させた。酢酸エチルと共に粉砕し、ろ過および乾燥後、ＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−３−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩、化合物２０を白色の固体（１．１０ｇ、収率９４％）として得た。
【化１８】
分子量：３０８．２；収率：９４％；白色の固体；融点（℃）：１２３．４
1H-NMR (CD3OD,δ): 1.65-2.00 (m, 4H, 2xCH2), 2.82-3.11 (m, 1H, -CH2N), 3.30-3.57 (m, 2H, CH2N), 3.57-3.77 (m, 1H, CH2N), 4.54 (d, 1H, J=5.3 Hz, CH-N), 5.38 (d, 1H, J=5.3 Hz, CH-O), 8.15 (dd, 1H, J=7.6 Hz, J=5.0 Hz, ArH), 8.68 (d, 1H, J=7.6 Hz, ArH), 8.89 (d, 1H, J=7.6 Hz, ArH), 8.96 (s, 1H, ArH).
13C-NMR (CD3OD,δ): 24.9, 26.9, 47.7, 48.2, 58.1, 69.6, 128.7, 141.5, 141.6, 143.1, 146.5, 165.4.
【００４４】
ＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩、化合物２２
化合物２２をトランス−（４，５−ジヒドロ−５−（ピリジン−４−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、化合物１９（０．７５０ｇ、３．０７mmol）、３７％塩酸（１．０ｍＬ）およびメタノール（１０ｍＬ）を用いて、方法Ｅにしたがって調製した。５０℃で３．０時間加熱した後、精査して、ＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩、化合物２２を白色の固体（０．９３５ｇ、収率９９％）として得た。
【化１９】
分子量：３０８．２８；収率：９９％；白色の固体；融点（℃）：１１７．０
1H-NMR (CD3OD,δ): 1.75-2.03 (m, 4H, 2xCH2), 2.93-3.08 (m, 1H, CHN), 3.32-3.75 (m, 3H, 2xCH2), 4.54 (d, 1H, J=5.9 Hz, CH-N), 5.40 (d, 1H, J=5.9 Hz, CH-O), 8.21 (d, 2H, J=5.8 Hz, ArH), 8.94 (d, 2H, J=5.8 Hz, ArH).
ＭＳ−ＥＳＩ ｍ／ｚ（％ｒｅｌ．ｉｎｔ．）：２３６．１（［ＭＨ］+，１７）、２１９（２５）、１４８（１００）
ＨＰＬＣ：方法Ａ、検出ＵＶ ２５４ｎｍ、化合物２２ ＲＴ＝０．８分、ピーク面積 ９６．３％
【００４５】
ｔｅｒｔ−ブチル５−（ＤＬ−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメート、ＥＢＥ０６１０２
ＣＨ2Ｃｌ2（１２ｍＬ）中のＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩（化合物２２）（０．６０ｇ，１．７７mmol）の懸濁液に、ＴＥＡ（０．７３９ｍＬ,５．３２mmol）を加え、反応混合物を１０分間攪拌し、氷浴中攪拌を続けながら冷却した。Ｂｏｃ−アミノヘキサン酸（０．４５１ｇ，１．９５１mmol）およびＢＯＰ（１．０５ｇ，１．９５mmol）の溶液をＣＨ2Ｃｌ2中で予め調製し、５分間かけて滴加した。０℃にて反応混合物を２時間、室温で１６時間攪拌した。揮発性成分を蒸発させた後,残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＨ2ＰＯ4（ｐＨ７．２）、飽和ＮａＨＣＯ3で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させた。得られた白色の固体をＥｔＯＡｃ中１０％ＥｔＯＡｃを用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製してｔｅｒｔ−ブチル５−（ＤＬ−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメートＥＢＥ０６１０２（０．４１ｇ，５２％の収率）を白色の固体として得た。
【化２０】
分子量：４４８．５６；収率：５２．０％；白色の固体
Ｒf：０．１０（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝９０：１０）．
1Ｈ−ＮＭＲ：（ＣＤＣｌ3，δ）：１．１０−１．１２（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．３５−１．５５（ｍ,１１Ｈ,（ＣＨ3）3＆ＣＨ2）,１．７２−１．９２（ｍ,４Ｈ,ＣＨ2）,２．０５−２．２２（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,２．４０（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝９．３Ｈｚ,ＣＨ2）,３．０５（ｑ,２Ｈ,Ｊ＝６．６Ｈｚ,ＣＨ2）,３．２０−３．２８（ｍ,１Ｈ,ＮＣＨ2）,３．３２−３．５０（ｍ,２Ｈ,ＮＣＨ2）,３．６２−３．７２（ｍ,１Ｈ,ＮＣＨ2）,４．７９（ｂｓ,１Ｈ,ＮＨ）,４．９７（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝８．７,４．１Ｈｚ,ＮＣＨ）,５．０７（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝４．１Ｈｚ,ＯＣＨ）,５．４０（ｂｓ,１Ｈ,ＮＨ）,６．７４（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝８．４Ｈｚ,ＯＨ）,７．３５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝６．０Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．５６（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝６．０Ｈｚ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，δ）：２４．０,２５．０,２６．１,２８．４,２９．６,３５．９,３６．９,４０．３,４６．１,４６．９,５４．９,７２．９,７９．０,１２１．３,１４８．８,１４９．６,１５６．１,１６９．０,１７３．２．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：４４９．１（［ＭＨ］+,２０）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,ＥＢＥ０６１０２ＲＴ＝４．１ｍｉｎ,ピーク面積９９．９％．
【００４６】
６−（５−（（３ａＲ,６Ｓ,６ａＳ）−ヘキサヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−チエノ［３,４−ｄ］イミダゾール−６−イル）ペンタンアミド）−Ｎ−（（１Ｒ,２Ｓ）−＆（１Ｓ,２Ｒ）−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド、化合物５０
ＭｅＯＨ（１ｍＬ）中の５−（ＤＬ−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメートＥＢＥ０６１０２（０．３７０ｇ，０．８２４mmol）の溶液に、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）中のＨＣｌ（４．２Ｍ）の溶液を加えた。反応混合物を室温で２に時間攪拌し、揮発性成分を蒸発させて粗製の褐色の油状物ＥＢＥ０６１０４（０．２２１ｇ，６３％粗製収率）を得、これを精製せずに次の工程で用いた。ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＥＢＥ０６１０４（０．２２１ｇ，０．５２２mmol）の懸濁液に、トリエチルアミン（０．２１７ｍＬ,１．５７mmol）を加え、反応混合物を１０分間攪拌し、攪拌を続けながら氷浴中で冷却した。ビオチン（０．１４ｇ，０．５７４mmol）およびＢＯＰ（０．３０９ｇ，０．５７４mmol）の溶液をＣＨ2Ｃｌ2（１ｍＬ）中で予め調製し、５分間かけて滴加した。混合物を０℃で２時間、室温で１６時間攪拌した。反応混合物を蒸発乾燥し、ＮａＨ2ＰＯ4とｎ−ブタノールの間に分離した。ｎ−ブタノール相を飽和Ｎａ2ＣＯ3で洗浄し、蒸発乾燥した。所望の生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ：ＮＨ4ＯＨ＝７０：２８：２）を用いて精製し、化合物５０（１：１の比率のジアステレオ異性体の混合物,０．１６０ｇ，５３％の収率）を白色の固体として得た。
【化２１】
分子量：５７４．７４；収率：５３％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：６４．３．
Ｒf：０．２（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ：ＮＨ4ＯＨ＝７０：２８：２）．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，δ）：１．１７−１．３２（ｍ,２Ｈ）,１．４０−１．６０（ｍ,４Ｈ）,１．６０−１．９０（ｍ,６Ｈ）,１．９０−２．１０（ｍ,４Ｈ）,２．１５−２．３０（ｍ,４Ｈ）,２．７４（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝１２．６Ｈｚ）,２．９１（ｄｄ,Ｊ＝４．８Ｈｚ,１２．８Ｈｚ）,２．９５−３．１０（ｍ,１Ｈ）,３．１０−３．４５（ｍ,４Ｈ）,３．６０−３．７２（ｍ,１Ｈ）,４．３４（ｄｄ,１ＨＪ＝４．４ＨｚＪ＝７．５Ｈｚ）,４．５０−４．５８（ｍ,１Ｈ）,４．８５−４．９５（ｍ,１Ｈ）,５．０２−５．０８（ｍ,１Ｈ）,６．１２（ｓ,１Ｈ）,６．５０−６．１５（ｍ,１Ｈ）,６．６８（ｓ,１Ｈ）,７．３６（ｍ,２Ｈ）,７．６７（ｑ,１Ｈ,Ｊ＝８．１２Ｈｚ）,８．５５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝５．８Ｈｚ）．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：５７５．３（［ＭＨ］+,７０）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,化合物５０ＲＴ＝３．６１ｍｉｎ,ピーク面積９７．２％．
【００４７】
化合物４９の製造
トランス−（４,５−ジヒドロ−５−（２−メトキシピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、ＢＡＬ０１０１４
ＢＡＬ０１０１４は、方法Ｄにしたがい、２−メトキシ−３−ピリジンカルボキシアルデヒド（０．６４ｍｌ,５．４３mmol）、メタノール（５ｍＬ）中のＫＯＨ（０．３０５ｍｇ，５．４３mmol）および２−イソシアノ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノンＢＬＥ０４０９８（０．７５ｇ，５．４３mmol）を用いて製造した。処理の後、トランス−（４,５−ジヒドロ−５−（２−メトキシピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノンＢＡＬ０１０１４（０．７４ｍｇ，５０％の収率）を白色の固体として得た。
【化２２】
分子量：２７５．３０；収率：５０％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：１１０．１．
Ｒｆ：０．２５（ＥｔＯＡｃ）．
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3,δ）：１．８２−２．１０（ｍ,４Ｈ,２ｘＣＨ2）,３．４０−３．６２（ｍ,３Ｈ,ＣＨ2Ｎ）,３．８０−３．９０（ｍ,３Ｈ,ＣＨ2Ｎ）,３．９３（ｓ,３Ｈ,ＯＭｅ）,４．６１（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝７Ｈｚ,Ｊ＝２Ｈｚ,ＣＨ−Ｎ）,６．１４（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝７Ｈｚ,ＣＨ−Ｏ）,６．９０（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,Ｊ＝５Ｈｚ,ＡｒＨ）,７．０２（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝２Ｈｚ,ＯＣＨ＝Ｎ）,７．６０（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝７．３Ｈｚ,Ｊ＝１．７Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．１３（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝５Ｈｚ,Ｊ＝１．８Ｈｚ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3,δ）：２４．３,２６．１,４６．３,４６．６,５３．５,７３．５,７８．１,１１６．８,１２２．２,１３５．２,１４６．５,１５５．３,１６０．５および１６７．４．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：２７６．１（［ＭＨ］+,４２）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,ＢＡＬ０１０１４ＲＴ＝３．６３ｍｉｎ,ピーク面積９７．２％．
【００４８】
３−（ＤＬ−トレオ−２−アミノ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イル−プロピル）−１Ｈ−ピリジン−２−オン塩酸塩、化合物４９
トランス−（４，５−ジヒドロ−５−（２−メトキシピリジン−３−イル）オキサゾール−４−イル）（ピロリジン−１−イル）メタノン、ＢＡＬ ０１０１４（０．６８４ｇ、２．４８７mmol）をメタノール（１０ｍＬ）に溶解した。塩酸溶液（３７％、０．６ｍＬ）を室温で注射器を介して添加した。混合物を還流しながら、２２時間撹拌した。残滓を濃縮した後、ＥｔＯＡｃと共に粉砕し、ろ過して、淡黄色の固体である、３−（ＤＬ−トレオ−２−アミノ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−３−ピロリジン−１−イル−プロピル）−１Ｈ−ピリジン−２−オン塩酸塩、化合物４９を得た（１３６ｍｇ、収率１９．０％）。
【化２３】
分子量：２８７．７４；収率：１９．０％；淡黄色の固体；融点（℃）：１８０
1H NMR (CD3OD,δ): 1.82-2.09 (m, 4H, 2xCH2), 3.35-3.80 (m, 4H, 2xCH2N), 4.63 (s, 1H, CH-N), 5.17 (s, 1H, CH-O), 6.56 (t, 1H, ArH) ), 7.5 (d, 1H, J=6.1 Hz, ArH), 7.86 (d, 1H, J=6.5 Hz, ArH).
13C-NMR (CD3OD,δ): 24.2, 26.0, 46.6, 46.6, 75.8, 79.7, 127.3, 127.5, 127.9, 129.4, 130.0, 132.3, 133.2, 148.1, 148.4, 155.3, 166.2.
ＭＳ−ＥＳＩ ｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：２５２．１（［ＭＨ］+，１８）、１６３．０（１００）
ＨＰＬＣ：方法Ａ、検出ＵＶ ２５４ｎｍ、化合物４９ ＲＴ＝１．１３分、ピーク面積 ８４．０％
【００４９】
化合物３００の製造
（±）−トレオ−２−フタルイミド−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン塩酸塩、化合物３００
（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩化合物２２（０．５１ｇ，１．６４mmol）をＫ2ＣＯ3の１Ｎ水溶液２０ｍＬにより処理し、ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ＝９０：１０の混合物で抽出した（５ｘ４０ｍＬ）。溶液ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、蒸発させて化合物２２の遊離塩基（０．３２３ｇ，８２．５％の収率）を白色の固体として得た。
１０ｍＬ容の丸底フラスコ中、無水フタル酸（０．２０３ｍｇ，１．３７３mmol）を化合物２２の遊離塩基（０．３２３ｇ，１．３７mmol）に加え、混合物を６５℃から１４５℃に加熱し、１４５℃で５分間攪拌した。冷却後、イエローブラックのゴム状物質を粗製物として得た。この粗製物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2,ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝１００：０〜９０：：１０）により精製した。溶媒を留去した後、白色の固体（±）−トレオ−２−フタルイミド−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オンＢＬＥ０４１５６Ａ（０．１５ｇ，３０％の収率）を白色の固体として得た。（±）−トレオ−２−フタルイミド−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オンＢＬＥ０４１５６Ａ（０．１３５ｇ，０．３７mmol）に、イソプロパノール（１０ｍＬ）中のＨＣｌの０．１Ｎ溶液を加え、混合物を２８℃でロータリーエバポレーター、次いで高真空ポンプにて蒸発乾燥させた。（±）−トレオ−２−フタルイミド−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン塩酸塩化合物３００（０．１４７ｇ，２４．５％の収率）を白色の固体として得た。
【化２４】
分子量：４０１．８４；収率：２４．５％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：２０１．８
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：１．６０−１．９０（ｍ,４Ｈ,２ｘＣＨ2）,２．９５−３．０９（ｍ,１Ｈ,ＣＨ2Ｎ）,３．３０−３．４７（ｍ,３Ｈ,ＣＨ2Ｎ）,５．３０（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝７．９Ｈｚ,ＣＨ）,５．８２（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝７．９Ｈｚ,ＣＨ）,７．８０（ｍ,４Ｈ,ＡｒＨ）,８．２５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝５．４Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．８１（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝５．２Ｈｚ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：２４．７,２７．１,４７．７,４７．８,５８．０,７０．６,１２４．８（２ｘＣ）,１２７．５（２ｘＣ）,１３２．６（２ｘＣ）,１３６．１（２ｘＣ）,１４２．５（２ｘＣ）,１６４．９,１６６．５,１６８．８．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：３６６．０（［ＭＨ］+,２２）,２１９．１（１００）,１４８．０（４７）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,ＲＴ＝３．８８ｍｉｎ,ピーク面積９８．７％．
【００５０】
化合物３０１の調製
ｔｅｒｔ−ブチル５−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメート、化合物２３７
Ｎ−Ｂｏｃ−アミノヘキサン酸（３４２ｍｇ，１．４８mmol）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液にｎ−メチルモルホリン（１６３μＬ,１．４８mmol）を加えた。溶液を５分間攪拌し、−１５℃に冷却し、イソブチルクロロホルメート（２１１μＬ,１．４８mmol）を滴加することにより処理した。この溶液をステンレススチールカニューレを用いて−１５℃のＴＨＦ（１０ｍＬ）中の（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩化合物２２（５００ｍｇ，１．４８mmol）およびＮ−メチル−モルホリン（４８９ｍｇ，１．４７mmol）の溶液に加えた。反応混合物を−１５℃に０．５時間保った後、２５℃にて２時間攪拌した。溶媒を蒸発させた後、残留物をＥｔＯＡｃとＨ2Ｏの間に分配し、ＮａＨ2ＰＯ4、ＮａＨＣＯ3飽和水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、０％〜１０％［ｖ／ｖ］ＭｅＯＨ（ＥｔＯＡｃ中）のグラジェントを用いるカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2）により精製してｔｅｒｔ−ブチル５−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメート化合物２３７（４５５ｍｇ，６９％の収率）を白色の固体として得た。
【化２５】
分子量：４４８．６；収率：６９％；白色の固体．
Ｒf：０．２０（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝９０：１０）．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ，δ）：１．０５−１．１５（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．３５−１．５５（ｍ,１３Ｈ,２×ＣＨ2+Ｃ（ＣＨ3）3）,１．７５−１．９５（ｍ,４Ｈ,２×ＣＨ2）,２．００−２．２０（ｍ,２Ｈ,Ｏ＝ＣＣＨ2）,３．０５（ｑ,２Ｈ,Ｊ＝６．７Ｈｚ,ｎ−ＣＨ2）,３．２０−３．３５（ｍ,１Ｈ,ｎ−ＣＨ）,３．３８−３．５０（ｍ,２Ｈ,ｎ−ＣＨ2）,３．６５−３．７５（ｍ,１Ｈ,ｎ−ＣＨ）,４．７２（ｂｓ,１Ｈ,ＮＨ）,４．９８（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝８．８Ｈｚ,Ｊ＝３．６Ｈｚ）,５．０８（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝３．３Ｈｚ,ＯＣＨ）,５．２３（ｂｓ,１Ｈ,ＯＨ）,６．５０（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝８．７Ｈｚ,ＮＨ）,７．３５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝６．０Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．５８（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝４．６Ｈｚ,Ｊ＝１．４Ｈｚ,ＡｒＨ）．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：４４９．２（［ＭＨ］+,３０）,３４９．２（１００）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出（２５４ｎｍ）,ＲＴ＝４．０３ｍｉｎ,ピーク面積９９．９％
【００５１】
６−アミノ−Ｎ−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド、化合物２３８
ｔｅｒｔ−ブチル５−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバモイル）ペンチルカルバメート化合物２３７（８１ｍｇ，０．１８１mmol）のＣＨ2Ｃｌ2（８ｍＬ）溶液に０℃のＴＦＡ（２ｍＬ）を加え、０℃で２時間攪拌した。揮発性成分を蒸発させ残留物をＭｅＯＨ中のAmberlite−４００（ＯＨ-）懸濁液で処理した。濾過後、濾液を蒸発させて生成物をＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＨ4ＯＨ＝１０：５：０．４を用いるカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2）により単離して６−アミノ−Ｎ−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド化合物２３８（４０ｍｇ，６４％の収率）を白色の固体として得た。
【化２６】
分子量：４４８．６；収率：６４％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：１３４．４
Ｒf：０．３０（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＨ4ＯＨ＝１０：５：０．４）．
1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3,δ）：１．１２−１．３０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．３０−１．５０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．５０−１．６５（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．６５−１．９５（ｍ,４Ｈ,ＣＨ2）,２．１０−２．３０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,２．５５−２．７０（ｔ,２Ｈ,Ｊ＝６．９Ｈｚ,ＣＨ2）,３．１０−３．２０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,３．２８−３．５０（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,３．６０−３．７０（ｍ,１Ｈ,ＣＨ）,４．９５（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝５．１Ｈｚ,Ｊ＝８．４Ｈｚ,Ｏ−ＣＨ）,５．０２（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝５．０Ｈｚ,ＯＨ）,７．１１Ｈｚ（ｄ,Ｊ＝８．４８Ｈｚ,１Ｈ,ＡｒＨ）,７．３５（ｄｄ,２Ｈ,Ｊ＝４．４Ｈｚ,Ｊ＝１．５Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．５５（ｄｄ,Ｊ＝１．５Ｈｚ,Ｊ＝４．６Ｈｚ,２Ｈ,ＡｒＨ）．
13Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3,δ）：２４．０,２５．１,２５．８,２５．９,３２．５,３５．８,４１．７,４６．０,４６．９,５５．６,７２．６,１２１．３（２×Ｃ）,１４９．２,１４９．５（２×Ｃ）,１６８．９,１７３．７
【００５２】
（±）−トレオ−｛３−［３−（３−｛５−［１−（ヒドロキシ−ピリジン−４−イル−メチル）−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イル−エチルカルバモイル］−ペンチルカルバモイル｝−プロピルカルバモイル）−プロピルカルバモイル］−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ＴＴＡ０８１５６
Ｂｏｃ−ＧＡＢＡ−ＧＡＢＡ−ＧＡＢＡ−ＯＨ（３５４ｍｇ，０．９５mmol）をＣＨＣｌ3（４０ｍＬ）中、Ｅｔ3Ｎ（０．３ｍＬ,２．１mmol）およびＨＯＢＴ（１４５ｍｇ，１．０５mmol）と共に窒素下で４℃にて５分間攪拌した。ＥＤＣ（２０５ｍｇ，１．０５mmol）を加え、混合物を４℃にて１５分間攪拌した。６−アミノ−Ｎ−（（±）−トレオ−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（３３３ｍｇ，０．９５mmol）のＣＨＣｌ3（２０ｍＬ）溶液を滴加し、混合物を窒素下、４℃にて２時間および室温で１５時間攪拌した。ブライン（３０ｍＬ）を加え、生成物をＣＨ2Ｃｌ2（２００ｍＬ）により抽出した。有機層を２Ｎ ＮａＯＨの溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。濾過後、溶液を蒸発させ、乾燥させて粗製の黄色の油（４２０ｍｇ）を得た。カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2,ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ＝８５：１５）による精製後、（±）−トレオ−｛３−［３−（３−｛５−［１−（ヒドロキシ−ピリジン−４−イル−メチル）−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イル−エチルカルバモイル］−ペンチルカルバモイル｝−プロピルカルバモイル）−プロピルカルバモイル］−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルＴＴＡ０８１５６（２６０ｍｇ，３９％の収率）を淡黄色の油状物として得た。
【化２７】
分子量：７０３．８７；収率：３９％；淡黄色の油．
Ｒf：０．２０（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ＝９：１）．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3,δ）：１．１７−１．２５（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2）,１．４０−１．５６（ｍ,１３Ｈ,２ｘＣＨ2,３ｘＣＨ3）１．７３−１．８５（ｍ,１０Ｈ,５ｘＣＨ2）,２．１３−２．２９（ｍ,８Ｈ,４ｘＣＨ2ＣＯ）,２．４０（ｓ,１Ｈ,ＯＨ）,３．０９−３．６７（ｍ,１２Ｈ,６ｘＣＨ2−Ｎ）,４．９１（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝４．９Ｈｚ,Ｊ＝８．５Ｈｚ,ＣＨ−Ｎ）,５．０５（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝５．１Ｈｚ,ＣＨ−Ｏ）,５．１５（ｔ,１Ｈ,Ｊ＝５．８Ｈｚ,ＮＨ）,７．０１−７．０４（ｍ,１Ｈ,ＮＨ）,７．１４（ｔ,１Ｈ,Ｊ＝５．６Ｈｚ,ＮＨ）,７．３３（ｔ,１Ｈ,Ｊ＝５．６Ｈｚ,ＮＨ）,７．３７（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝６．０Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．５５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝６．０Ｈｚ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ, δ）：２４．０,２４．９,２５．６,２５．８,２６．１,２６．５,２８．４（３ｘＣ）,２９．０,３３．５,３３．７,３５．８,３８．６,３８．８,３９．１,３９．６,４６．１,４６．８,５５．６,７２．７,７９．５,１２１．５（ｘ２）,１４９．１,１４９．５（ｘ２）,１５６．７,１６８．８,１７３．１,１７３．３,１７３．４,１７３．５．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：７０４．３（［ＭＨ］+,１００）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,ＴＴＡ０８１５６ＲＴ＝３．９０ｍｉｎ,ピーク面積９９．０％．
【００５３】
６−（５−（（３ａＲ,６Ｓ,６ａＳ）−ヘキサヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−チエノ［３,４−ｄ］イミダゾール−６−イル）−ペンタノイルアミノ）−ブチリルアミノ−ブチリルアミノ−ブチリルアミノ−Ｎ−（（１Ｒ,２Ｓ）−＆（１Ｓ,２Ｒ）−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド、化合物３０１
（±）−トレオ−｛３−［３−（３−｛５−［１−（ヒドロキシ−ピリジン−４−イル−メチル）−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イル−エチルカルバモイル］−ペンチルカルバモイル｝−プロピルカルバモイル）−プロピルカルバモイル］−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルＴＴＡ０８１５６（２６０ｍｇ，０．３７mmol）をＭｅＯＨ（５ｍＬ）中、３７％ＨＣｌ（０．３ｍＬ,３．７０mmol）と共に４０℃にて１５分間攪拌した。ＭｅＯＨを蒸発させ残留物を真空乾燥させた。AmberliteＩＲＡ−４００（Ｃｌ-）（６ｍＬ、８．４mmol）を水（２ｘ１０ｍＬ）、０．５Ｎ ＮａＯＨ（３ｘ２０ｍＬ）、水（２ｘ１０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（３ｘ１０ｍＬ）で順次洗浄した。前に得られた残留物と洗浄したAmberliteをＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中室温で５分間攪拌した。濾過後、ＭｅＯＨを蒸発させてアミンを遊離塩基の形態で得た（２１０ｍｇ、９４％の収率）。ビオチン（９５ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌｅ）をＣＨＣｌ3／ＤＭＦ（４０ｍＬ／１０ｍＬ）およびＥｔ3Ｎ（０．１１ｍＬ、０．７７mmol）、ＨＯＢＴ（５３ｍｇ、０．３８mmol）の混合物に溶解し、ＥＤＣ（７５ｍｇ、０．３８mmol）を加え、溶液を窒素下、室温で２時間攪拌した。ＣＨＣｌ3（１０ｍＬ）中の前に得られたアミン（２１０ｍｇ，０．３５mmol）を滴加し、混合物を窒素下室温で２４時間攪拌した。ブライン（４０ｍＬ）、２ＮＮａＯＨ（１０ｍＬ）、ＣＨＣｌ3（５０ｍＬ）を加え、生成物をＣＨＣｌ3／ＤＭＦ（５０ｍＬ／１０ｍＬ）でさらに３回抽出することにより抽出した。集めた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、留去して粗製の黄色の油（１６０ｍｇ，５２％の収率）を得た。粗製の油をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2,ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＨ3＝９５：５：０．１〜８５：１５：０．３）により精製し、留去後６−（５−（（３ａＲ,６Ｓ,６ａＳ）−ヘキサヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−チエノ［３,４−ｄ］イミダゾール−６−イル）−ペンタノイルアミノ）−ブチリルアミノ−ブチリルアミノ−ブチリルアミノ−Ｎ−（（１Ｒ,２Ｓ）−＆（１Ｓ,２Ｒ）−１−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（ピリジン−４−イル）−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（ジアステレオ異性体混合物比１：１）を淡黄色の油状物として得た（４５ｍｇ，１５％の収率）．
【化２８】
分子量：８３０．０５；収率：１５％；淡黄色の油．
Ｒf：０．３０（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：ＮＨ3＝８５：１５：０．３）．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：１．２６−１．８２（ｍ,２２Ｈ,１１ｘＣＨ2）,２．１８−２．２５（ｍ,１０Ｈ,５ｘＣＨ2ＣＯ）,２．７０（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝１２．７Ｈｚ,ＣＨ2−Ｓ）,２．９２（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝４．８Ｈｚ,Ｊ＝１２．７Ｈｚ,ＣＨ2Ｓ）,３．０６−３．８０（ｍ,１３Ｈ,６ｘＣＨ2−Ｎ,ＣＨ−Ｓ）,４．２９（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝４．４Ｈｚ,Ｊ＝７．８Ｈｚ,ＣＨ−Ｎ）,４．４８（ｄｄ,１Ｈ,Ｊ＝４．９Ｈｚ,Ｊ＝７．８Ｈｚ,ＣＨ−Ｎ）,４．８２（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝６．４Ｈｚ,ＣＨ−Ｎ）,５．０１（ｄ,１Ｈ,Ｊ＝６．４Ｈｚ,ＣＨ−Ｏ）,７．４９（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝５．５Ｈｚ,ＡｒＨ）,８．５（ｄ,２Ｈ,Ｊ＝４．６Ｈｚ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：２５．０,２６．５,２６．８,（２ｘＣ）,２６．９（２ｘＣ）,２７．５,２９．５,２９．８,３０．１,３４．３,３４．４（２ｘＣ）,３６．４,３６．８,３９．８,３９．９,４０．１,４１．１,４７．２,４７．３,５７．１,５８．３,６１．６,６３．４,７３．１,７４．２,１２３．５（２ｘＣ）,１４９．９（２ｘＣ）,１５２．８,１６６．１,１７０．０,１７５．３,１７５．４（２ｘＣ）,１７６．０,１７６．１．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：８３０．２．（［ＭＨ］+,８５）,２１９．１（１００）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,ＲＴ＝３．７０ｍｉｎ,ピーク面積９９．８％．
【００５４】
化合物３０２の調製
（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩、化合物３０２
（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩化合物２２（５００ｍｇ，１．６１mmol）を、水素雰囲気下、ＰｔＯ2水和物（Ｐｔ含量７９−８４％,１００ｍｇ）と共にＡｃＯＨ（１０ｍＬ）中、室温にて２４時間攪拌した。セライト（登録商標）５４５にて濾過後、濾液を蒸発させ残留物を減圧下で乾燥させてベージュ色の固体（４５０ｍｇ，８８．２％の収率）を得た。粗製物をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中Amberlite（Ｃｌ−）ＩＲＡ−４００（９ｍＬ,１２．７ｍｍｏｌ、予め０．５ＮＮａＯＨ次いで水およびＭｅＯＨで洗浄）と共に室温にて１５分間攪拌した。混合物を濾過し、濾液を蒸発させ、遊離塩基の形態をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2,ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：２０％ＮＨ3（Ｈ2Ｏ中）＝７０：３０：８）により精製して（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オンＴＴＡ０８１４４Ａ（２２６ｍｇ，５８％収率）を得た。ＭｅＯＨ中ＨＣｌ処理して（±）−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピペリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩化合物３０２（１９０ｍｇ，２８％の収率）を白色の固体として得た。
【化２９】
分子量：３１４．２５；収率：２８．０％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：１９７．５
Ｒf：０．２０（ＣＨ2Ｃｌ2：ＭｅＯＨ：２０％ＮＨ3（Ｈ2Ｏ中）＝７０：３０：８,遊離塩基）．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：１．５７−２．００（ｍ,９Ｈ,４ｘＣＨ2＆ＣＨ）,２．９４−３．０８（ｍ,２Ｈ,ＣＨ2−Ｎ）,３．４６−３．７７（ｍ,７Ｈ,３ｘＣＨ2−Ｎ,ＣＨ−Ｎ）,４．３３（ｓ,１Ｈ,ＣＨ−Ｏ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ, δ）：２２．５,２３．４,２４．１,２４．７,３５．２,４２．２,４２．５,４５．４,４５．５,５２．０,６９．８,１６４．６．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：２４２．２（［ＭＨ］+,４５）,１２９．１（１００）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２１４ｎｍ,ＲＴ＝０．７０ｍｉｎ,ピーク面積９８．０％．
【００５５】
化合物７０の調製
方法Ｄ（ＣＨ2Ｃｌ2中）：
＋４℃の１０ｍＬのＣＨ2Ｃｌ2中のＤＬ−トレオ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１−オン二塩酸塩化合物２２（０．１５ｇ，０．４９mmol）の攪拌した溶液にトリエチルアミン（２００μL,１．４５mmol）を加え、ＣＨ2Ｃｌ2３ｍＬ中の酸クロリドをゆっくりと加えた。混合物を窒素下、室温にて一晩攪拌した後、ＣＨ2Ｃｌ2と１Ｎ炭酸ナトリウム水溶液との間に分配した。有機層を蒸発させ、得られた残留物をシリカのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝９５：５）により精製した。０℃のＭｅＯＨ中、ジエチルエーテル中の０．３ＭＨＣｌを加え、溶媒を留去し、アシル化化合物を乾燥して塩酸塩を得た。
【００５６】
ＤＬ−トレオ−３−ヒドロキシ−１−オキソ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバミン酸ベンジル塩酸塩、化合物５８
化合物をベンジルクロロホルマート（９１ｍｇ、０．５３mmol）を用いて、方法Ｇにしたがって調製した。精査して、ＤＬ−トレオ−３−ヒドロキシ−１−オキソ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバミン酸ベンジル塩酸塩、化合物５８を白色の固体（９０ｍｇ、収率４６％）として得た。
【化３０】
分子量：４０５．９；収率：４６．０％；白色の固体；融点（℃）：１８５．３
Ｒf：０．３８（ＭｅＯＨ：ＥｔＯＡｃ＝１０：９０）、遊離の塩基
1H-NMR (CD3OD,δ): 1.87-2.03 (m, 4H, 2xCH2), 3.40-3.48 (m, 2H, CH2N), 3.56-3.62 (m, 2H, CH2N), 4.85-5.04 (m, 3H, CH2O, CHO), 5.39 (d, 1H, J=2.8 Hz, NH), 7.26-7.36 (m, 5H, ArH), 8.12 (d, 2H, J=6.0 Hz, ArH), 8.69 (d, 2H, J=6.0 Hz, ArH).
13C-NMR (CD3OD,δ): 25.0, 27.0, 47.5, 48.0, 58.8, 67.9, 72.7, 126.6 (2xC), 129.1, 129.2, 129.5, 138.1, 141.9 (2xC), 158.1, 164.4, 169.2.
ＭＳ−ＥＳＩ ｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：３７０．１（［ＭＨ］+，１５）、２１９．０（１００）
ＨＰＬＣ：方法Ａ、検出ＵＶ ２５４ｎｍ、化合物５８ ＲＴ＝４．１０分、ピーク面積 ９９．８％
【００５７】
トランス−３−メチル−５−ピリジン−４−イル−４−（ピロリジン−１−カルボニル）−オキサゾリジン−２−オン塩酸塩化合物７０
６℃のＤＭＳＯ：ＤＭＦ（２ｍＬ：０．２ｍＬ）混合物中のＤＬ−トレオ−３−ヒドロキシ−１−オキソ−３−（ピリジン−４−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）プロパン−２−イルカルバメート化合物５８遊離塩基（０．１０ｇ，０．２７mmol）の攪拌した溶液に、ｔｅｒｔ−ＢｕＯＫ（３８ｍｇ，０．３３mmol）および硫酸ジメチル（２６μＬ,０．２７mmol）をゆっくりと加えた。窒素下、室温で１５時間混合物を攪拌し、氷水（５ｍＬ）、１Ｍ Ｎａ2ＣＯ3（２ｍＬ）および酢酸エチル（１００ｍＬ）の間に分配した。有機相をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。酢酸エチルを留去した後、粗製物を乾燥して粗製の遊離塩基を油として得た。０℃のＭｅＯＨ中、ジエチルエーテル中０．３ＭＨＣｌ溶液を用いて塩酸塩を得た。ジエチルエーテル中で沈殿させて、トランス−３−メチル−５−ピリジン−４−イル−４−（ピロリジン−１−カルボニル）−オキサゾリジン−２−オン塩酸塩を淡黄色の固体（８０ｍｇ，９５％の収率）として得た。ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ（１０：１）中でさらに結晶化させて化合物７０を白色の固体（１６ｍｇ，２０％の収率）として得た。
【化３１】
分子量：３１１．７６；収率：２０％；白色の固体；Ｍｐ（℃）：１６８．６．
Ｒf：０．１５（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ＝９５：５）,遊離塩基．
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ,δ）：１．９０−２．１０（ｍ,４Ｈ,２ｘＣＨ2）,２．８４（ｓ,３Ｈ,ＣＨ3）,３．４７−３．７０（ｍ,４Ｈ,ＣＨ2Ｎ）,４．８２（ｍ,１Ｈ,ＣＨ）,５．８９（ｍ,１Ｈ,ＣＨ）,８．１７（ｍ,２Ｈ,ＡｒＨ）,８．９７（ｍ,２Ｈ,ＡｒＨ）．
13Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ, δ）：２４．９,２７．１,３０．２,４８．１,６４．９,７６．３,１２５．６（２ｘＣ）,１４３．８（２ｘＣ）,１５９．１,１６０．１,１６７．３．
ＭＳ−ＥＳＩｍ／ｚ（％ｒｅｌ．Ｉｎｔ．）：２７６．１（［ＭＨ］+,２５）,１７７．１（１００）．
ＨＰＬＣ：方法Ａ,検出ＵＶ２５４ｎｍ,化合物７０ＲＴ＝２．００ｍｉｎ,ピーク面積９７．０％．
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式
【化１】
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項２】
式（ｉ）または（ｉｉ）
【化２】
［式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキルである］
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ4がＨである請求項２記載の化合物。
【請求項４】
次式
【化３】
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項５】
次式
【化４】
［式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキルである］
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ4がＨである請求項５記載の化合物。
【請求項７】
次式
【化５】
［式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキルである］
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項８】
Ｒ4がＨである請求項７記載の化合物。
【請求項９】
式（ｉ）または（ｉｉ）
【化６】
［式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキルである］
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項１０】
Ｒ4がＨである請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
次式
【化７】
［式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキルである］
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項１２】
Ｒ4がＨである請求項１１記載の化合物。
【請求項１３】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項１記載の化合物を含有する方法。
【請求項１４】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項２記載の化合物を含有する方法。
【請求項１５】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項４記載の化合物を含有する方法。
【請求項１６】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項５記載の化合物を含有する方法。
【請求項１７】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項７記載の化合物を含有する方法。
【請求項１８】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項９記載の化合物を含有する方法。
【請求項１９】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項１１記載の化合物を含有する方法。
【請求項１】
次式
【化１】
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項２】
式（ｉ）または（ｉｉ）
【化２】
［式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキルである］
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ4がＨである請求項２記載の化合物。
【請求項４】
次式
【化３】
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項５】
次式
【化４】
［式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキルである］
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ4がＨである請求項５記載の化合物。
【請求項７】
次式
【化５】
［式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキルである］
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項８】
Ｒ4がＨである請求項７記載の化合物。
【請求項９】
式（ｉ）または（ｉｉ）
【化６】
［式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキルである］
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項１０】
Ｒ4がＨである請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
次式
【化７】
［式中、Ｒ4はＨ、１〜６炭素のアルキルまたはＣＯ−Ｒ5であり、Ｒ5は１〜６炭素のアルキルである］
で示される化合物または該化合物の製薬的に許容される塩。
【請求項１２】
Ｒ4がＨである請求項１１記載の化合物。
【請求項１３】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項１記載の化合物を含有する方法。
【請求項１４】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項２記載の化合物を含有する方法。
【請求項１５】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項４記載の化合物を含有する方法。
【請求項１６】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項５記載の化合物を含有する方法。
【請求項１７】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項７記載の化合物を含有する方法。
【請求項１８】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項９記載の化合物を含有する方法。
【請求項１９】
鎮痛効果を有する医薬組成物を用いてそのような処置を必要とする哺乳類を処置する方法であって、該組成物が請求項１１記載の化合物を含有する方法。
【公表番号】特表２００８−５２８６０２（Ｐ２００８−５２８６０２Ａ）
【公表日】平成２０年７月３１日（２００８．７．３１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５５３１９３（Ｐ２００７−５５３１９３）
【出願日】平成１８年１月２５日（２００６．１．２５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００２５８０
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０８１２８０
【国際公開日】平成１８年８月３日（２００６．８．３）
【出願人】（５９１０１８２６８）アラーガン、インコーポレイテッド (293)
【氏名又は名称原語表記】ＡＬＬＥＲＧＡＮ，ＩＮＣＯＲＰＯＲＡＴＥＤ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年７月３１日（２００８．７．３１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１月２５日（２００６．１．２５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００２５８０
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０８１２８０
【国際公開日】平成１８年８月３日（２００６．８．３）
【出願人】（５９１０１８２６８）アラーガン、インコーポレイテッド (293)
【氏名又は名称原語表記】ＡＬＬＥＲＧＡＮ，ＩＮＣＯＲＰＯＲＡＴＥＤ
【Ｆターム（参考）】
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